CN117229780A - 一种金属增强量子点荧光纳米球及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种金属增强量子点荧光纳米球及其制备方法，主要由量子点、金属纳米颗粒和聚合物制备而成，量子点和金属纳米颗粒包裹在聚合物内部。制备方法包括如下步骤：将量子点、金属纳米颗粒、聚合物溶于有机溶剂中，形成油相；将表面活性剂溶于水中形成水相；混合油相水相，搅拌，乳化得到微乳液；去除有机溶剂固化微乳液液滴，得到金属增强量子点荧光纳米球。该金属增强量子点荧光纳米球比量子点荧光纳米球具有更高的发光效率，能够提高量子点荧光免疫层析检测的灵敏度和信噪比。
Description
技术领域
本发明属于荧光微球制备技术领域，具体涉及一种金属增强量子点荧光纳米球及其制备方法。
背景技术
量子点作为一种新型荧光纳米晶，具有荧光发射波长可调控、抗光漂白、发光量子效率高等优点，广泛应用于照明、显示器件和生物标记等领域。目前高质量的量子点主要采用高温热分解法合成制备得到，并通过包覆ZnS、Al2O3等壳层材料，来提高量子点的发光效率和光学稳定性。但采用该方法得到的量子点表面包覆有油酸、油胺或三辛基氧化膦等有机配体，只能分散于氯仿、甲苯等有机溶剂中，需要通过表面配体交换或聚合物包裹等手段转移至水相，才能用于生物标记。
量子点荧光纳米球(量子点微球)是指将量子点荧光材料包裹在聚合物或二氧化硅材料内部，通过微球包埋的手段一方面可将量子点转移至水相；另一方面量子点微球内可以包裹大量的量子点，起到荧光信号放大的作用；同时在微球表面修饰官能团，可将生物活性配体偶联在微球表面。量子点微球的制备方法包括乳液溶剂挥发法、直接聚合法、种子溶胀聚合法等。量子点微球目前已经广泛应用于荧光免疫层析的标记材料中，用于制备高灵敏的量子点免疫层析试纸。
金属纳米颗粒表面具有等离子体效应，与其表面附近的荧光分子相互作用，可提高荧光分子的荧光信号强度。专利文献CN106770135A具体公开了在磁编码载体微球外面包覆金属纳米结构，采用原位合成的方法，在编码微球表面修饰金属纳米颗粒，这些金属纳米结构能够产生局域表面等离子体，并使局域表面等离子体共振吸收峰的位置与待检测荧光染料的发射光谱的位置重叠，从而增强荧光的信号，提高检测灵敏度。2023年SrikanthSingamaneni等人报道(Srikanth Singamaneni.Ultrasensitive lateral-flow assaysvia plasmonically active antibody-conjugated fluorescent nanoparticles[J].Nature Biomedical Engineering,2023.)在金纳米棒周围包裹花菁素染料(Cy5)修饰的牛血清蛋白，可以显著提高Cy5染料的发光效率，并应用于荧光免疫层析检测，提高检测灵敏度。但上述金属增强荧光颗粒的制备方法比较复杂，需要额外的壳层包裹或者原位合成步骤；此外，在表面包裹牛血清蛋白修饰的荧光分子，蛋白基质易于降解，不适于长期保存。
发明内容
鉴于现有技术的上述缺陷，本发明采用的具体技术方案如下：
在本发明的第一方面，提供一种金属增强量子点荧光纳米球，其特征在于，主要由量子点、金属纳米颗粒和聚合物制备而成，所述量子点和所述金属纳米颗粒包裹在所述聚合物内部。
在一些具体实施方案中，所述量子点包括ZnSe、CdSe、CdTe、CdS、InP、CuInSe、CuInS中的至少一种，和或具有核/壳结构的量子点ZnSe/ZnS、CdSe/ZnS、CdS/ZnS、CdTe/ZnS、InP/ZnS、CdSe/ZnSe、CdSe/ZnSe、CdS/ZnSe、CdTe/ZnSe、InP/ZnSe、CdSe/CdS、CdTe/CdS、InP/CdS、CuInSe/ZnS、CuInS/ZnS、ZnSe/ZnXCd1-XS、CdSe/ZnXCd1-XS、CdS/ZnXCd1-XS、CdTe/ZnXCd1-XS、InP/ZnSeXS1-X、ZnSe/ZnSeXS1-X、CdSe/ZnSeXS1-X、CdS/ZnSeXS1-X、CdTe/ZnSeXS1-X、InP/ZnSeXS1-X中的至少一种，其中0<X<1；
所述金属纳米颗粒包括金、银、铜、铂、铱、钯中的至少一种；
所述聚合物包括聚苯乙烯-丙烯酸共聚物、聚苯乙烯-马来酸酐共聚物、聚甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸共聚物中的至少一种。
在一些具体实施方案中，金属增强量子点荧光纳米球表面具有羧基官能团，粒径为50～500nm；量子点表面包覆油胺或油酸配体，粒径为1～15nm；金属纳米颗粒表面包覆油胺或油酸配体，粒径为1～15nm。
在一些具体实施方案中，所述金属纳米颗粒形貌是球形、棒状、星型、立方体中的至少一种。
在一些具体实施方案中，量子点与金属纳米颗粒的数量比为100:1～100:20；量子点与聚合物的数量比为1:0.5～1:8。
在本发明的第二方面，提供一种金属增强量子点荧光纳米球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(一)将量子点、金属纳米颗粒、聚合物溶于有机溶剂中，形成油相；(二)将表面活性剂溶于水中形成水相；(三)混合油相水相，搅拌，乳化得到微乳液；(四)去除有机溶剂固化微乳液液滴，得到所述金属增强量子点荧光纳米球。
所述有机溶剂选自氯仿、甲苯、正己烷、二氯甲烷、二甲基甲酰胺中的一种或几种；所述表面活性剂为聚乙烯醇和十二烷基磺酸钠。
油相中量子点的浓度为1～50mg/mL，金属纳米颗粒的浓度为0.1～5mg/mL，聚合物的浓度为1～100mg/mL；表面活性剂溶于水中形成的水相，包括0.5～2.5％聚乙烯醇和0.1～1％十二烷基磺酸钠；油相与水相混合体积比例为1:2～1:6。
在一些具体实施方案中，一种金属增强量子点荧光纳米球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(一)将量子点、金属纳米颗粒、聚合物溶于氯仿，形成油相，包括1～50mg/mL的量子点、0.1～5mg/mL的金属纳米颗粒、1～100mg/mL的聚合物；(二)将表面活性剂溶于水中形成水相，包括质量浓度为0.5～2.5％的聚乙烯醇和0.1～0.5％的十二烷基磺酸钠；(三)油相与水相以1:2～1:6的体积比例混合，磁力搅拌，超声波探头乳化得到微乳液；(四)去除氯仿固化微乳液液滴，得到所述金属增强量子点荧光纳米球。
与现有技术相比，本发明在量子点纳米球内部掺杂少量金属纳米颗粒，由于金属增强荧光效应，在不显著增加量子点纳米球体积的情况下，提高量子点纳米球的发光效率，从而提高量子点荧光免疫层析检测的灵敏度和信噪比。
具体而言，本发明具备如下有益效果：
1、与现有的量子点荧光纳米球相比，相同粒径的纳米球，金属增强量子点荧光纳米球具有更高的荧光信号强度。
2、与现有的量子点荧光纳米球相比，金属增强量子点荧光纳米球用于荧光免疫层析检测，具有更高的检测灵敏度和更低的背景信号。
3、本发明采用乳液溶剂挥发法制备金属增强量子点荧光纳米球，设备和工艺简单，制备得到的纳米球条件可控、重复性好，颗粒中量子点和金属纳米颗粒浓度易于控制。
以下将结合附图对本发明的构思、具体结构及产生的技术效果作进一步说明，以充分地了解本发明的目的、特征和效果。
附图说明
图1是实施例1条件下制备的金属增强量子点荧光纳米球的透射电镜图。
图2是金属增强量子点荧光纳米球(实施例1)与普通量子点纳米球(对比例1)的荧光斑点信号的对比图。
图3是荧光免疫层析检测的荧光照片和荧光定量结果。其中，图3(a)是分别以金属增强量子点荧光纳米球(平均粒径115nm)与普通量子点纳米球(平均粒径115nm)为标记物，荧光免疫层析检测白介素6的荧光照片；图3(b)是对应的荧光定量结果比较。
图4是荧光免疫层析检测的荧光照片和荧光定量结果。其中图4(a)是分别以金属增强量子点荧光纳米球(平均粒径115nm)与普通量子点纳米球(平均粒径160nm)为标记物，荧光免疫层析检测白介素6的荧光照片；图4(b)是对应的荧光定量结果比较。
具体实施方式
为了使发明实现的技术手段、创造特征、达成目的和功效易于明白了解，下结合具体图示，进一步阐述本发明。但本发明不仅限于以下实施的案例。
须知，本说明书所附图式所绘示的结构、比例、大小等，均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解与阅读，并非用以限定本发明可实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整，在不影响本发明所能产生的功效及所能达成的目的下，均应仍落在本发明所揭示的技术内容得能涵盖的范围内。
实施例中所涉及的各类试剂，以下若未列出的，均可采用商业化产品。
(1)CdSe/ZnS量子点，购自苏州星烁纳米科技有限公司；
(2)聚苯乙烯-马来酸酐共聚物(分子量1900)，购自Sigma Aldrich；
(3)聚乙烯醇(分子量10000)，购自Sigma Aldrich；
(3)白介素6抗体，购自上海海肽生物科技有限公司；
(4)DNP抗体，购自南京拂晓生物科技有限公司。
实施例1：胶体金增强量子点纳米球的制备
表面包裹油胺的CdSe/ZnS量子点(粒径约15nm)和油胺包裹的胶体金(粒径约15nm)分别由苏州星烁纳米科技有限公司和上海昆道生物技术有限公司提供。
将上述5mL量子点的甲苯溶液(10mg/mL)与5mL的甲醇混合，然后10000转/分钟离心10分钟，去上清后待用；将上述1mL的胶体金正己烷溶液(10mg/mL)与0.5mL的乙醇混合，然后8000转/分钟离心处理10分钟，去上清待用。
配制油相组分：将处理后的胶体金、CdSe/ZnS和聚苯乙烯-马来酸酐共聚物分散在5mL的氯仿溶液中，胶体金的浓度为1mg/mL，量子点的浓度为10mg/mL，聚合物的浓度为10mg/mL；
配制水相组分：将聚乙烯醇和十二烷基磺酸钠配制成水溶液，聚乙烯醇的浓度为0.5％，十二烷基磺酸钠的浓度为0.1％；
将油相加入水相溶液中，油相与水相比例为1:6，磁力搅拌至均匀，然后使用超声波破碎仪将混合液进行超声处理2分钟，即可得到均匀稳定的微乳液；
室温下，将微乳液置于敞口容器，磁力搅拌下，使溶剂逐渐挥发，挥发时间为16小时，离心后弃上清，得到金属增强量子点荧光纳米球，平均粒径为115nm，电镜图如图1所示。
实施例2：胶体银增强量子点纳米球的制备
表面包裹油胺的InP/ZnS量子点(粒径约5nm)和油酸包裹的胶体银(粒径约1nm)分别由苏州星烁纳米科技有限公司和上海昆道生物技术有限公司提供。将上述5mL量子点的甲苯溶液(1mg/mL)与5mL的甲醇混合，然后10000转/分钟离心10分钟，去上清后待用；将上述0.5mL的胶体银正己烷溶液(1mg/mL)与0.5mL的乙醇混合，然后8000转/分钟离心处理10分钟，弃上清待用。
配制油相组分：将处理后的胶体银、InP/ZnS和聚苯乙烯-丙烯酸共聚物分散在5mL的氯仿溶液中，胶体银的浓度为0.1mg/mL，量子点的浓度为1mg/mL，聚合物的浓度为1mg/mL；
配制水相组分：将聚乙烯醇和十二烷基磺酸钠配制成水溶液，聚乙烯醇的浓度为2.5％，十二烷基磺酸钠的浓度为1％；
将油相加入水相溶液中，油相与水相比例为1:2，磁力搅拌至均匀，然后使用超声波破碎仪将混合液进行超声处理2分钟，即可得到均匀稳定的微乳液；
室温下，将微乳液置于敞口容器，磁力搅拌下，使溶剂逐渐挥发，挥发时间为16小时，离心后弃上清，得到金属增强量子点荧光纳米球，平均粒径约为80nm。
实施例3：胶体铜增强量子点纳米球的制备
表面包裹油胺的CdS量子点(粒径约1nm)和油酸包裹的胶体铜(粒径约1nm)分别由苏州星烁纳米科技有限公司和上海昆道生物技术有限公司提供。将上述5mL量子点的甲苯溶液(50mg/mL)与5mL的甲醇混合，然后10000转/分钟离心10分钟，去上清后待用；将上述0.5mL的胶体铜正己烷溶液(5mg/mL)与0.5mL的乙醇混合，然后8000转/分钟离心处理10分钟，去上清待用。
配制油相组分：将处理后的胶体铜、CdS和聚甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸共聚物分散在5mL的氯仿溶液中，胶体铜的浓度为0.5mg/mL，量子点的浓度为50mg/mL，聚合物的浓度为100mg/mL；
配制水相组分：将聚乙烯醇和十二烷基磺酸钠配制成水溶液，聚乙烯醇的浓度为0.5％，十二烷基磺酸钠的浓度为0.5％；
将油相加入水相溶液中，油相与水相比例为1:4，磁力搅拌至均匀，然后使用超声波破碎仪将混合液进行超声处理2分钟，即可得到均匀稳定的微乳液；
室温下，将微乳液置于敞口容器，磁力搅拌下，使溶剂逐渐挥发，挥发时间为16小时，离心后弃上清，得到金属增强量子点荧光纳米球，平均粒径约为150nm。对比例1：平均粒径115nm的量子点纳米球的制备
配制油相组分：将包裹油胺的CdSe/ZnS量子点和聚苯乙烯-马来酸酐共聚物分散在氯仿溶液中，量子点的浓度为10mg/mL，聚合物的浓度为10mg/mL；
配制水相组分：将聚乙烯醇和十二烷基磺酸钠配制成水溶液，聚乙烯醇的浓度为0.5％，十二烷基磺酸钠的浓度为0.1％；
将油相加入水相溶液中，油相与水相比例为1:3，磁力搅拌至均匀，然后使用超声波破碎仪将混合液进行超声处理2分钟，即可得到均匀稳定的微乳液；
室温下，将微乳液置于敞口容器，磁力搅拌下，使溶剂逐渐挥发，挥发时间为16小时，离心后取上清，得到量子点荧光纳米球，平均粒径约为115nm。
对比例2：平均粒径160nm的量子点纳米球的制备
配制油相组分：将包裹油胺的CdSe/ZnS量子点和聚苯乙烯-马来酸酐共聚物分散在氯仿溶液中，量子点的浓度为50mg/mL，聚合物的浓度为50mg/mL；
配制水相组分：将聚乙烯醇和十二烷基磺酸钠配制成水溶液，聚乙烯醇的浓度为0.5％，十二烷基磺酸钠的浓度为0.1％；
将油相加入水相溶液中，油相与水相比例为1:3，磁力搅拌至均匀，然后使用超声波破碎仪将混合液进行超声处理2分钟，即可得到均匀稳定的微乳液；
室温下，将微乳液置于敞口容器，磁力搅拌下，使溶剂逐渐挥发，挥发时间为16小时，离心后取上清，得到量子点荧光纳米球，平均粒径为160nm。
实施例4：荧光斑点比较量子点荧光纳米球的信号强度
聚偏二氟乙烯膜(PVDF)用甲醇浸润10秒后，用去离子水漂洗膜4次，在摇床上洗涤，每次持续5分钟。将PVDF膜平铺在润湿的吸水纸上，将实施例1和对比例1制得的量子点悬浮液用纯水梯度稀释，用移液器取0.5μL，然后滴在PVDF膜上，形成荧光斑点；在ChemiDoc凝胶成像仪上，用365nm紫外光激发，620nm滤光片通道，拍照记录PVDF膜的荧光斑点信号。用ImageLab软件分析荧光斑点的荧光信号强度。实验结果如图2所示。
由实验结果可知，在相当的颗粒数和粒径下，金属增强量子点荧光纳米球的荧光强度明显大于普通量子点荧光纳米球的荧光强度；在相当的荧光强度下，后者的颗粒数是前者的数倍或以上。
实施例5：荧光免疫层析检测白介素6
(一)标记白介素6抗体的方法
A、活化乳胶表面羧基：将金属增强量子点纳米球分散在pH＝7.0的磷酸盐缓冲液中，颗粒浓度25mg/mL，然后加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)，浓度1.0mmol/L，室温下孵育30分钟；
B、孵育结束后离心去上清，沉淀加入磷酸盐缓冲液分散，然后将白介素6抗体加入到磷酸盐缓冲液中，白介素6抗体浓度为6.6mg/mL，接着将金属增强量子点纳米球溶液加入到白介素6抗体溶液中，金属增强量子点纳米球溶液与白介素6抗体溶液比例为1:2，室温下孵育30分钟；
C、孵育后离心去除多余抗体，加入2倍体积的1％ BSA超声分散，室温下封闭(孵育)2小时以上；
D、封闭后加入保存液，即得到偶联了白介素6抗体的金属增强量子点纳米球。
(二)标记DNP抗体的方法
A、活化乳胶表面羧基：将量子点纳米球分散在pH＝7.0的磷酸盐缓冲液中，颗粒浓度25mg/mL，然后加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)，浓度1.0mmol/L，室温下孵育30分钟；
B、孵育结束后离心去上清，沉淀加入磷酸盐缓冲液分散，然后DNP抗体加入到磷酸盐缓冲液中，DNP抗体浓度为5.0mg/mL，接着将量子点纳米球溶液加入到DNP抗体溶液中，室温下孵育30分钟；
C、孵育后离心去除多余抗体，加入酪蛋白超声分散，浓度为5mg/mL，室温下封闭(孵育)2小时以上；
D、封闭后加入保存液，即得到偶联了DNP抗体的量子点纳米球。
(三)白介素6样本的检测
用实施例1中的金属增强量子点纳米球标记白介素6抗体(即金属增强量子点纳米球-白介素6抗体复合物)和对比例1、对比例2中标记了DNP抗体的量子点纳米球(即量子点纳米球-DNP抗体复合物)制备得到高灵敏度的白介素6荧光量子点免疫层析试纸，试纸制作步骤如下：
将金属增强量子点纳米球-白介素6抗体复合物和量子点纳米球-DNP抗体复合物涂覆在偶联垫上备用；用磷酸盐缓冲盐溶液(PBS)分别调节白介素6抗原、DNP(BSA)抗体浓度为1.0mg/mL；
将白介素6捕获抗体喷涂于硝酸纤维素膜下部作为检测线(T线)，将DNP-BSA半抗原喷涂于上部作为质控线(C线)，划膜速度1μL/cm，然后37℃烘干处理备用；
最后在底板上搭接样本垫、偶联垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，用刀切成合适宽度后得到白介素6荧光量子点免疫层析试纸。
检测原理及过程如下：
检测原理：双抗体夹心法主要用于大分子量的蛋白(抗原)的检测。要求两株抗体针对一个抗原的不同位点，这两株抗体一株和标记物偶联，一株作为检测线(T线)固定在硝酸纤维素膜上，当样品为阳性时，T线抗体和待测抗原以及标记物上的抗体形成夹心结构，因此T线有颜色且颜色深浅和样品中待测抗原浓度成正比，阴性样本T线没有颜色
检测过程如下：取100μL白介素6蛋白质控品滴加到试纸条的样本垫上，等待10～15分钟，荧光灯下观察试纸条的结果(图4)。
结果中上面一条线为质控线(C线)，下面一条线为检测线(T线)。由于白介素6蛋白属于大分子抗原，采用的是双抗夹心法检测，所以随着检测浓度提高T线颜色越来越深。而C线固定的是DNP(BSA)抗体，即标记物偶联抗体的抗体。
由图3可知，与相同粒径的量子点纳米球相比较，采用胶体金增强的量子点荧光纳米球，构建IL-6免疫层析检测试纸，相同条件下可提高灵敏度约5倍，高值信号可提高约7倍。
由图4可知，与粒径约160nm的量子点纳米球相比较，采用胶体金增强的量子点荧光纳米球(粒径115nm)，构建IL-6免疫层析检测试纸，相同条件抗体偶联条件下，灵敏度接近，且具有较低值的背景荧光信号。
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。
Claims (9)
1.一种金属增强量子点荧光纳米球，其特征在于，主要由量子点、金属纳米颗粒和聚合物制备而成，所述量子点和所述金属纳米颗粒包裹在所述聚合物内部。
2.根据权利要求1所述的金属增强量子点荧光纳米球，其特征在于，所述量子点包括ZnSe、CdSe、CdTe、CdS、InP、CuInSe、CuInS中的至少一种，和或具有核/壳结构的量子点ZnSe/ZnS、CdSe/ZnS、CdS/ZnS、CdTe/ZnS、InP/ZnS、CdSe/ZnSe、CdSe/ZnSe、CdS/ZnSe、CdTe/ZnSe、InP/ZnSe、CdSe/CdS、CdTe/CdS、InP/CdS、CuInSe/ZnS、CuInS/ZnS、ZnSe/ZnXCd1-XS、CdSe/ZnXCd1-XS、CdS/ZnXCd1-XS、CdTe/ZnXCd1-XS、InP/ZnCdXS1-X、ZnSe/ZnSeXS1-X、CdSe/ZnSeXS1-X、CdS/ZnSeXS1-X、CdTe/ZnSeXS1-X、InP/ZnSeXS1-X中的至少一种，其中0<X<1；所述金属纳米颗粒包括金、银、铜、铂、铱、钯中的至少一种；所述聚合物包括聚苯乙烯-丙烯酸共聚物、聚苯乙烯-马来酸酐共聚物、聚甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸共聚物中的至少一种。
3.根据权利要求1或2任一项所述的金属增强量子点荧光纳米球，其特征在于，所述金属增强量子点荧光纳米球表面具有羧基官能团，粒径为50～500nm；所述量子点表面包覆油胺或油酸配体，粒径为1～15nm；所述金属纳米颗粒表面包覆油胺或油酸配体，粒径为1～15nm。
4.根据权利要求1或2任一项所述的金属增强量子点荧光纳米球，其特征在于，所述金属纳米颗粒形貌是球形、棒状、星型、立方体中的至少一种。
5.根据权利要求1或2任一项所述的金属增强量子点荧光纳米球，其特征在于，所述量子点与所述金属纳米颗粒的数量比为100:1～100:20；所述量子点与所述聚合物的质量比为1:0.5～1:8。
6.一种金属增强量子点荧光纳米球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(一)将量子点、金属纳米颗粒、聚合物溶于有机溶剂中，形成油相；
(二)将表面活性剂溶于水中形成水相；
(三)混合油相水相，搅拌，乳化得到微乳液；
(四)去除有机溶剂固化微乳液液滴，得到所述金属增强量子点荧光纳米球。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂选自氯仿、甲苯、正己烷、二氯甲烷、二甲基甲酰胺中的一种或几种；所述表面活性剂为聚乙烯醇和十二烷基磺酸钠。
8.根据权利要求6或7任一项所述的制备方法，其特征在于，所述油相中所述量子点的浓度为1～50mg/mL，所述金属纳米颗粒的浓度为0.1～5mg/mL，所述聚合物的浓度为1～100mg/mL；所述表面活性剂溶于水中形成的水相，包括0.5～2.5％聚乙烯醇和0.1～1％十二烷基磺酸钠；油相与水相混合体积比例为1:2～1:6。
9.根据权利要求6或7任一项所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(一)将量子点、金属纳米颗粒、聚合物溶于氯仿，形成油相，包括1～50mg/mL的量子点、0.1～5mg/mL的金属纳米颗粒、1～100mg/mL的聚合物；
(二)将表面活性剂溶于水中形成水相，包括质量浓度为0.5～2.5％的聚乙烯醇和0.1～1％的十二烷基磺酸钠；
(三)油相与水相以1:2～1:6的体积比例混合，磁力搅拌，超声波探头乳化得到微乳液；
(四)去除氯仿固化微乳液液滴，得到所述金属增强量子点荧光纳米球。
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