JP2014534436A - 血液または他の媒質からの粒子の濾過 - Google Patents
血液または他の媒質からの粒子の濾過 Download PDFInfo
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Abstract
Description
a)媒質の粒子が開口の中に保持されるように、媒質を、フィルタ・エレメントの少なくとも1つの開口に流れ方向に通すステップ。
b)調製用の媒質を少なくとも1つの開口に通して、保持された粒子を処理するステップ。この処理は例えば、保持された細胞の染色または溶解を含んでもよい。
c)任意選択のステップとして、処理された粒子を(それらの粒子が位置する開口内の位置で)画像化してもよく、かつ/または処理された粒子をさらなる分析のために別個の区画に移動させてもよい。
− 明確に画定された細孔径を有するフィルタのスループットは限定的である。
− EPCAMを発現しない細胞は失われる。
− フィルタ構造が光学画像化を妨害する。
− 捕捉後の細胞を個々に分析することができない。
− さらなる同定/分析のために捕捉後に細胞を操作する必要がある。
− 圧力勾配により細胞が損傷/破裂する。
図4に従って、(図1および図2に示したフィルタ・エレメントと同様の設計を有するが、2つの段階322、323だけを有する)階段状フィルタ・エレメント300内で、試験用媒質を濾過した。PBS(リン酸緩衝生理食塩水)1mlあたり1.6・105ビーズの濃度の15μmポリスチレン・ビーズ(Phosphorex)と、PBS1mlあたり1.2・106細胞の濃度のTHP1細胞とを混合した。その結果得られた媒質は、PBS1mlあたり8・104個のビーズおよび6・105個のTHP1細胞を含んでいた。この媒質を、0.2ml/分の流量で階段状フィルタに通した。
国際公開第97/00121号には、非常に小さくて媒質の粒子が通過できないバリア・チャネルに対して接線方向の供給流路を通って媒質が流れるマイクロフィルタが開示されている。したがって、バリア・チャネルの後ろの濾液回収チャネルには、粒子が入らず、供給流路を通る媒質の連続流によってバリア・チャネルの詰まりが防止される。
米国特許出願公開第2009/010673A1号には、2本の平行流路が、流路の深さを低減させるバンク部分によって分離された類似のフィルタ構造体が提供されている。
米国特許出願公開第2002/0137052A1号には、装置が開示され、ここでは、流れ室の内側の平面アレイ内に微小粒子が固定されており、ここで一連の処理試薬を微小粒子に送達することによって分析プロセスの諸ステップが実行される。
国際公開第2011/081530A1号は、カートリッジに作用している遠心力が変化するにつれて、第1のキャビティ内の試料が、第1のキャビティから、第1のキャビティよりも浅い第2のキャビティに移動する試料処理カートリッジに関する。
欧州特許出願第1459773A1号には、赤血球から血漿を分離するデバイスが開示されている。輸送チャネルを通って流れている全血の一部が、大きな粒子が入ることができない分離エリアに入り、ここでは、より小さな粒子の輸送は、柱、段などの微小構造体によって遅延する。
Claims (16)
- 少なくとも1つの開口を通して流れ方向に流れる媒質の成分を保持するためのフィルタ・エレメントであって、
前記開口が、流れ方向に縮小する細長い横断面を有し、前記開口が透明な壁によって境界が作られるフィルタ・エレメント。 - 少なくとも1つの開口を通して流れ方向に流れる媒質の粒子を保持するためのフィルタ・エレメントであって、
前記開口が細長い横断面を有し、前記横断面の最大直径と最小直径の比が2:1よりも大きく、好ましくは10:1よりも大きく、最も好ましくは100:1よりも大きいフィルタ・エレメント。 - 少なくとも1つの開口を通って流れ方向に流れる媒質の粒子を保持するためのフィルタ・エレメント、特に請求項1または2に記載のフィルタ・エレメントであって、
前記開口が、流れ方向に約20%より大きく、好ましくは50%より大きく縮小する最小直径を有する横断面を有するフィルタ・エレメント。 - 媒質が流れ方向に通過する少なくとも1つの開口の中に粒子を保持することにより、前記媒質から前記粒子を濾過するための方法であって、
前記粒子が、前記粒子の特性に対応する流れ方向の異なる位置に保持される方法。 - 少なくとも1つの開口を通って流れ方向に流れる媒質の粒子を保持するためのフィルタ・エレメント、特に請求項1、2または3に記載のフィルタ・エレメントであって、
前記開口が、少なくとも1つの透明な壁によって境界が作られるフィルタ・エレメント。 - 媒質が流れ方向に通過する少なくとも1つの開口の中に粒子を保持することにより、前記媒質から前記粒子を濾過するための方法、特に請求項4に記載の方法であって、
前記開口が、前記媒質の前記流れ方向に対して実質的に垂直な方向から光学的に検査される方法。 - 少なくとも2つ、好ましくは少なくとも10個の細長い開口が並列に配置されており、好ましくは大きい方の寸法が実質的に共通の平面内にあることを特徴とする、請求項1、2、3または5に記載のフィルタ・エレメントあるいは請求項4または6に記載の方法。
- 前記開口の前記横断面の最小直径が少なくとも1つの段階で縮小することを特徴とする、請求項1、2、3または5に記載のフィルタ・エレメントあるいは請求項4または6に記載の方法。
- 前記開口を出た前記媒質を異なる送給先に選択的に送給する少なくとも1つの弁が設けられていることを特徴とする、請求項1、2、3または5に記載のフィルタ・エレメントあるいは請求項4または6に記載の方法。
- 前記媒質と混ざり合う、かつ/または保持された粒子のさらなる処理、特に洗浄、固定および/もしくは染色手順に必要である試薬を供給する流体システムが設けられていることを特徴とする、請求項1、2、3または5に記載のフィルタ・エレメントあるいは請求項4または6に記載の方法。
- 前記フィルタ・エレメントの前記開口に隣接して対物レンズおよび/またはイメージ・センサが設けられていることを特徴とする、請求項1、2、3または5に記載のフィルタ・エレメントを備えるフィルタ・システムあるいは請求項4または6に記載の方法。
- 前記媒質の磁性粒子を前記フィルタ・エレメント内で作動させる磁石が設けられていることを特徴とする、請求項1、2、3または5に記載のフィルタ・エレメントを備えるフィルタ・システムあるいは請求項4または6に記載の方法。
- 前記媒質の磁性粒子を前記開口の壁に少なくとも一時的に引きつけるために磁石が使用されることを特徴とする、請求項12に記載のフィルタ・システムまたは方法。
- 前記開口もしくはその部分、または関連する流路内の部分、または前記媒質の少なくとも1つの磁性粒子が、前記媒質の成分に対する特異的な結合部位を含むことを特徴とする、請求項1、2、3または5に記載のフィルタ・エレメントあるいは請求項4または6に記載の方法。
- 請求項1、2、3または5に記載のフィルタ・エレメント内で媒質を濾過するための方法であって、
a)前記媒質の粒子が前記開口の中に保持されるように、前記媒質を、前記少なくとも1つの開口に流れ方向に通し、
b)調製用の媒質を前記少なくとも1つの開口に通して、前記保持された粒子を処理し、
c)好ましくは前記処理された粒子を画像化し、かつ/または好ましくは前記処理された粒子をさらなる分析のために別個の区画に移動させることを特徴とする方法。 - 細胞ベースの診断および/または細胞の分離、最も好ましくは希少細胞の分離のための、請求項1、2、3、5または7ないし14に記載のフィルタ・エレメントの使用。
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