JP2014530626A5 - - Google Patents
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Claims (10)
- DGA1遺伝子産物の発現を増大する遺伝子改変を含み、任意に
（ａ）ACC1遺伝子産物、および／または、
（ｂ）SCD遺伝子産物、および／または、
（ｃ）ACL遺伝子産物
の発現を増大する遺伝子改変をさらに含む、単離された含油性細胞。 - 遺伝子改変が、遺伝子産物の発現を増大する核酸コンストラクトを含み、該核酸コンストラクトが、
（ａ）好適な同種プロモーターもしくは異種プロモーターの制御下において、前記遺伝子産物をコードする核酸配列を含む発現カセット、および／または
（ｂ）含油性細胞のゲノム中に挿入された場合に、前記遺伝子産物の発現のレベルを調節する核酸配列
を含み、任意にプロモーターが、
（Ａ）誘導性プロモーターまたは構成的プロモーター、および／または、
（Ｂ）TEFプロモーター
である、請求項１に記載の単離された含油性細胞。 - 発現コンストラクトが、さらにイントロンを含み、任意に
（ａ）イントロンが、転写開始部位の下流にあるか、および／または、
（ｂ）イントロンが、遺伝子産物をコードする核酸配列内にある、
請求項２に記載の単離された含油性細胞。 - 核酸コンストラクトが、遺伝子産物をコードするネイティブな遺伝子の天然の調節を阻害または破壊して、前記ネイティブな遺伝子の過剰発現をもたらし、任意に、ネイティブな遺伝子の天然の調節の阻害または破壊が、調節領域もしくは前記遺伝子の発現を調節する調節領域の一部の欠失、破壊、突然変異および／または置換により媒介される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の単離された含油性細胞。
- 遺伝子産物が、転写物またはタンパク質である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の単離された含油性細胞。
- 核酸コンストラクトが、含油性細胞のゲノム中に挿入される、請求項２〜５のいずれか一項に記載の単離された含油性細胞。
- 遺伝子産物の増大した発現が、脂肪酸、脂肪酸誘導体および／またはトリアシルグリセロール（TAG）への炭素源の転換についての有益な表現型を、含油性細胞に付与し、任意に、有益な表現型が、改変された脂肪酸プロフィール、改変されたTAGプロフィール、増大した脂肪酸および／またはトリアシルグリセロールの合成速度、増大した転換収率、含油性細胞における増大したトリアシルグリセロール蓄積、ならびに／あるいは、含油性細胞の脂肪体における増大したトリアシルグリセロール蓄積を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の単離された含油性細胞。
- 含油性細胞が、約０．０２５ｇ／ｇ〜約０．３２ｇ／ｇ（生成されたTAGのｇ／消費されたグルコースのｇ）の範囲内、少なくとも約０．１１ｇ／ｇ、少なくとも約０．１９５ｇ／ｇ、少なくとも約０．２４ｇ／ｇまたは少なくとも約０．２７ｇ／ｇの転換率において、炭素源を脂肪酸またはTAGに転換する、請求項７に記載の単離された含油性細胞。
- 含油性細胞が、
（ａ）脂肪体または液胞を含むか、および／または、
（ｂ）細菌細胞、藻類細胞、真菌細胞または酵母細胞であるか、および／または、
（ｃ）含油性酵母細胞であるか、および／または、
（ｄ）Y. lipolytica細胞である、
請求項１〜８のいずれか一項に記載の単離された含油性細胞。 - 炭素源を、請求項１〜９のいずれか一項に記載の単離された含油性細胞またはその培養物と接触させることであって、前記細胞が、DGA1遺伝子産物の発現を増大させる遺伝子改変を含む；および
前記細胞による、脂肪酸またはトリアシルグリセロールへの前記炭素源の少なくとも部分的な転換に好適な条件下において、前記細胞と接触させた前記炭素源をインキュベートすること
を含み、炭素源が、任意に
（ａ）発酵性の糖、および／または、
（ｂ）グルコース、および／または、
（ｃ）アセタート、ここで任意に、アセタートが、少なくとも１％ｖｏｌ／ｖｏｌ、少なくとも２％ｖｏｌ／ｖｏｌ、少なくとも３％ｖｏｌ／ｖｏｌ、少なくとも４％ｖｏｌ／ｖｏｌまたは少なくとも５％ｖｏｌ／ｖｏｌの濃度である、および／または、
（ｄ）酢酸、ここで任意に、酢酸が、少なくとも５％ｖｏｌ／ｖｏｌ、少なくとも１０％ｖｏｌ／ｖｏｌ、少なくとも１５％ｖｏｌ／ｖｏｌ、少なくとも２０％ｖｏｌ／ｖｏｌ、少なくとも２５％ｖｏｌ／ｖｏｌまたは少なくとも３０％ｖｏｌ／ｖｏｌの濃度である、
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