JP2014511863A - 増殖分化因子15(gdf−15)を使用して代謝障害を治療または改善する方法 - Google Patents
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Abstract
Description
I. 一般定義
アルゴリズム:Needleman et al.,1970,J.Mol.Biol.48:443−453、
比較行列:Henikoff et al.,1992、上記によるBLOSUM62、
ギャップペナルティ:12(しかし、末端ギャップに対するペナルティは含まない)
ギャップ長ペナルティ:4
類似性の閾値:0
II. GDF15ポリペプチドおよび核酸
II.A. 天然および変異体GDF15ポリペプチド配列およびポリヌクレオチド配列
全長ヒトGDF15の308個アミノ酸配列は(括弧内に任意のN末端メチオニンコドンとともに示され)、
(M)PGQELRTVNGSQMLLVLLVLSWLPHGGALSLAEASRASFPGPSELHSEDSRFRELRKRYEDLLTRLRANQSWEDSNTDLVPAPAVRILTPEVRLGSGGHLHLRISRAALPEGLPEASRLHRALFRLSPTASRSWDVTRPLRRQLSLARPQAPALHLRLSPPPSQSDQLLAESSSARPQLELHLRPQAARGRRRARARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI(配列番号2)
であり、(括弧内に任意のN末端メチオニンコドン、および任意のストップコドンとともに示される)DNA配列によりコードされる:
(ATG)CCCGGGCAAGAACTCAGGACGGTGAATGGCTCTCAGATGCTCCTGGTGTTGCTGGTGCTCTCGTGGCTGCCGCATGGGGGCGCCCTGTCTCTGGCCGAGGCGAGCCGCGCAAGTTTCCCGGGACCCTCAGAGTTGCACTCCGAAGACTCCAGATTCCGAGAGTTGCGGAAACGCTACGAGGACCTGCTAACCAGGCTGCGGGCCAACCAGAGCTGGGAAGATTCGAACACCGACCTCGTCCCGGCCCCTGCAGTCCGGATACTCACGCCAGAAGTGCGGCTGGGATCCGGCGGCCACCTGCACCTGCGTATCTCTCGGGCCGCCCTTCCCGAGGGGCTCCCCGAGGCCTCCCGCCTTCACCGGGCTCTGTTCCGGCTGTCCCCGACGGCGTCAAGGTCGTGGGACGTGACACGACCGCTGCGGCGTCAGCTCAGCCTTGCAAGACCCCAGGCGCCCGCGCTGCACCTGCGACTGTCGCCGCCGCCGTCGCAGTCGGACCAACTGCTGGCAGAATCTTCGTCCGCACGGCCCCAGCTGGAGTTGCACTTGCGGCCGCAAGCCGCCAGGGGGCGCCGCAGAGCGCGTGCGCGCAACGGGGACCACTGTCCGCTCGGGCCCGGGCGTTGCTGCCGTCTGCACACGGTCCGCGCGTCGCTGGAAGACCTGGGCTGGGCCGATTGGGTGCTGTCGCCACGGGAGGTGCAAGTGACCATGTGCATCGGCGCGTGCCCGAGCCAGTTCCGGGCGGCAAACATGCACGCGCAGATCAAGACGAGCCTGCACCGCCTGAAGCCCGACACGGTGCCAGCGCCCTGCTGCGTGCCCGCCAGCTACAATCCCATGGTGCTCATTCAAAAGACCGACACCGGGGTGTCGCTCCAGACCTATGATGACTTGTTAGCCAAAGACTGCCACTGCATATGA
(配列番号1)。
全長マウスGDF15の303個のアミノ酸配列は(括弧内に任意のN末端メチオニンコドンとともに示され)、
(M)APPALQAQPPGGSQLRFLLFLLLLLLLLSWPSQGDALAMPEQRPSGPESQLNADELRGRFQDLLSRLHANQSREDSNSEPSPDPAVRILSPEVRLGSHGQLLLRVNRASLSQGLPEAYRVHRALLLLTPTARPWDITRPLKRALSLRGPRAPALRLRLTPPPDLAMLPSGGTQLELRLRVAAGRGRRSAHAHPRDSCPLGPGRCCHLETVQATLEDLGWSDWVLSPRQLQLSMCVGECPHLYRSANTHAQIKARLHGLQPDKVPAPCCVPSSYTPVVLMHRTDSGVSLQTYDDLVARGCHCA(配列番号4)
であり、(括弧内に任意のN末端メチオニンコドン、および任意のストップコドンとともに示される)DNA配列によりコードされる:
(ATG)GCCCCGCCCGCGCTCCAGGCCCAGCCTCCAGGCGGCTCTCAACTGAGGTTCCTGCTGTTCCTGCTGCTGTTGCTGCTGCTGCTGTCATGGCCATCGCAGGGGGACGCCCTGGCAATGCCTGAACAGCGACCCTCCGGCCCTGAGTCCCAACTCAACGCCGACGAGCTACGGGGTCGCTTCCAGGACCTGCTGAGCCGGCTGCATGCCAACCAGAGCCGAGAGGACTCGAACTCAGAACCAAGTCCTGACCCAGCTGTCCGGATACTCAGTCCAGAGGTGAGATTGGGGTCCCACGGCCAGCTGCTACTCCGCGTCAACCGGGCGTCGCTGAGTCAGGGTCTCCCCGAAGCCTACCGCGTGCACCGAGCGCTGCTCCTGCTGACGCCGACGGCCCGCCCCTGGGACATCACTAGGCCCCTGAAGCGTGCGCTCAGCCTCCGGGGACCCCGTGCTCCCGCATTACGCCTGCGCCTGACGCCGCCTCCGGACCTGGCTATGCTGCCCTCTGGCGGCACGCAGCTGGAACTGCGCTTACGGGTAGCCGCCGGCAGGGGGCGCCGAAGCGCGCATGCGCACCCAAGAGACTCGTGCCCACTGGGTCCGGGGCGCTGCTGTCACTTGGAGACTGTGCAGGCAACTCTTGAAGACTTGGGCTGGAGCGACTGGGTGCTGTCCCCGCGCCAGCTGCAGCTGAGCATGTGCGTGGGCGAGTGTCCCCACCTGTATCGCTCCGCGAACACGCATGCGCAGATCAAAGCACGCCTGCATGGCCTGCAGCCTGACAAGGTGCCTGCCCCGTGCTGTGTCCCCTCCAGCTACACCCCGGTGGTTCTTATGCACAGGACAGACAGTGGTGTGTCACTGCAGACTTATGATGACCTGGTGGCCCGGGGCTGCCACTGCGCTTGA
(配列番号3)。
29個の残基シグナル配列の切断後のヒトGDF15のアミノ酸配列は(括弧内に任意のN末端メチオニンコドンとともに示され):
(M)LSLAEASRASFPGPSELHSEDSRFRELRKRYEDLLTRLRANQSWEDSNTDLVPAPAVRILTPEVRLGSGGHLHLRISRAALPEGLPEASRLHRALFRLSPTASRSWDVTRPLRRQLSLARPQAPALHLRLSPPPSQSDQLLAESSSARPQLELHLRPQAARGRRRARARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI(配列番号6)
であり、(括弧内に任意のN末端メチオニンコドン、および任意のストップコドンとともに示される)DNA配列によりコードされる:
(ATG)CTGTCTCTGGCCGAGGCGAGCCGCGCAAGTTTCCCGGGACCCTCAGAGTTGCACTCCGAAGACTCCAGATTCCGAGAGTTGCGGAAACGCTACGAGGACCTGCTAACCAGGCTGCGGGCCAACCAGAGCTGGGAAGATTCGAACACCGACCTCGTCCCGGCCCCTGCAGTCCGGATACTCACGCCAGAAGTGCGGCTGGGATCCGGCGGCCACCTGCACCTGCGTATCTCTCGGGCCGCCCTTCCCGAGGGGCTCCCCGAGGCCTCCCGCCTTCACCGGGCTCTGTTCCGGCTGTCCCCGACGGCGTCAAGGTCGTGGGACGTGACACGACCGCTGCGGCGTCAGCTCAGCCTTGCAAGACCCCAGGCGCCCGCGCTGCACCTGCGACTGTCGCCGCCGCCGTCGCAGTCGGACCAACTGCTGGCAGAATCTTCGTCCGCACGGCCCCAGCTGGAGTTGCACTTGCGGCCGCAAGCCGCCAGGGGGCGCCGCAGAGCGCGTGCGCGCAACGGGGACCACTGTCCGCTCGGGCCCGGGCGTTGCTGCCGTCTGCACACGGTCCGCGCGTCGCTGGAAGACCTGGGCTGGGCCGATTGGGTGCTGTCGCCACGGGAGGTGCAAGTGACCATGTGCATCGGCGCGTGCCCGAGCCAGTTCCGGGCGGCAAACATGCACGCGCAGATCAAGACGAGCCTGCACCGCCTGAAGCCCGACACGGTGCCAGCGCCCTGCTGCGTGCCCGCCAGCTACAATCCCATGGTGCTCATTCAAAAGACCGACACCGGGGTGTCGCTCCAGACCTATGATGACTTGTTAGCCAAAGACTGCCACTGCATATGA
(配列番号5)。
32個の残基シグナル配列の切断後のマウスGDF15のアミノ酸配列は(括弧内に任意のN末端メチオニンコドンとともに示され):
(M)SQGDALAMPEQRPSGPESQLNADELRGRFQDLLSRLHANQSREDSNSEPSPDPAVRILSPEVRLGSHGQLLLRVNRASLSQGLPEAYRVHRALLLLTPTARPWDITRPLKRALSLRGPRAPALRLRLTPPPDLAMLPSGGTQLELRLRVAAGRGRRSAHAHPRDSCPLGPGRCCHLETVQATLEDLGWSDWVLSPRQLQLSMCVGECPHLYRSANTHAQIKARLHGLQPDKVPAPCCVPSSYTPVVLMHRTDSGVSLQTYDDLVARGCHCA(配列番号8)
であり、(括弧内に任意のN末端メチオニンコドン、および任意のストップコドンとともに示される)DNA配列によりコードされる:
(ATG)TCGCAGGGGGACGCCCTGGCAATGCCTGAACAGCGACCCTCCGGCCCTGAGTCCCAACTCAACGCCGACGAGCTACGGGGTCGCTTCCAGGACCTGCTGAGCCGGCTGCATGCCAACCAGAGCCGAGAGGACTCGAACTCAGAACCAAGTCCTGACCCAGCTGTCCGGATACTCAGTCCAGAGGTGAGATTGGGGTCCCACGGCCAGCTGCTACTCCGCGTCAACCGGGCGTCGCTGAGTCAGGGTCTCCCCGAAGCCTACCGCGTGCACCGAGCGCTGCTCCTGCTGACGCCGACGGCCCGCCCCTGGGACATCACTAGGCCCCTGAAGCGTGCGCTCAGCCTCCGGGGACCCCGTGCTCCCGCATTACGCCTGCGCCTGACGCCGCCTCCGGACCTGGCTATGCTGCCCTCTGGCGGCACGCAGCTGGAACTGCGCTTACGGGTAGCCGCCGGCAGGGGGCGCCGAAGCGCGCATGCGCACCCAAGAGACTCGTGCCCACTGGGTCCGGGGCGCTGCTGTCACTTGGAGACTGTGCAGGCAACTCTTGAAGACTTGGGCTGGAGCGACTGGGTGCTGTCCCCGCGCCAGCTGCAGCTGAGCATGTGCGTGGGCGAGTGTCCCCACCTGTATCGCTCCGCGAACACGCATGCGCAGATCAAAGCACGCCTGCATGGCCTGCAGCCTGACAAGGTGCCTGCCCCGTGCTGTGTCCCCTCCAGCTACACCCCGGTGGTTCTTATGCACAGGACAGACAGTGGTGTGTCACTGCAGACTTATGATGACCTGGTGGCCCGGGGCTGCCACTGCGCTTGA
(配列番号7)。
(M)ARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI(配列番号10)
であり、(括弧内に任意のN末端メチオニンコドン、および任意のストップコドンとともに示される)DNA配列によりコードされる:
(ATG)GCGCGCAACGGGGACCACTGTCCGCTCGGGCCCGGGCGTTGCTGCCGTCTGCACACGGTCCGCGCGTCGCTGGAAGACCTGGGCTGGGCCGATTGGGTGCTGTCGCCACGGGAGGTGCAAGTGACCATGTGCATCGGCGCGTGCCCGAGCCAGTTCCGGGCGGCAAACATGCACGCGCAGATCAAGACGAGCCTGCACCGCCTGAAGCCCGACACGGTGCCAGCGCCCTGCTGCGTGCCCGCCAGCTACAATCCCATGGTGCTCATTCAAAAGACCGACACCGGGGTGTCGCTCCAGACCTATGATGACTTGTTAGCCAAAGACTGCCACTGCATATAA
(配列番号9)。
(M)SAHAHPRDSCPLGPGRCCHLETVQATLEDLGWSDWVLSPRQLQLSMCVGECPHLYRSANTHAQIKARLHGLQPDKVPAPCCVPSSYTPVVLMHRTDSGVSLQTYDDLVARGCHCA(配列番号12)
であり、(括弧内に任意のN末端メチオニンコドン、および任意のストップコドンとともに示される)DNA配列によりコードされる:
(ATG)AGCGCGCATGCGCACCCAAGAGACTCGTGCCCACTGGGTCCGGGGCGCTGCTGTCACCTGGAGACTGTGCAGGCAACTCTTGAAGACTTGGGCTGGAGCGACTGGGTGTTGTCCCCGCGCCAGCTGCAGCTGAGCATGTGCGTGGGCGAGTGTCCCCACCTGTATCGCTCCGCGAACACGCATGCGCAGATCAAAGCACGCCTGCATGGCCTGCAGCCTGACAAGGTGCCTGCCCCGTGCTGTGTCCCCTCCAGCTACACCCCGGTGGTTCTTATGCACAGGACAGACAGTGGTGTGTCACTGCAGACTTATGATGACCTGGTGGCCCGGGGCTGCCACTGCGCTTGA(配列番号11)。
(1) 疎水性:ノルロイシン、Met、Ala、Val、Leu、Ile、
(2) 中性親水性:Cys、Ser、Thr、
(3) 酸性:Asp、Glu、
(4) 塩基性:Asn、Gln、His、Lys、Arg、
(5) 鎖配向に影響する残基:Gly、Pro、および
(6) 芳香族:Trp、Tyr、Phe。
II.B. GDF15ベクター
II.C. 宿主細胞
II.D. GDF15ポリペプチドの単離
III. GDF15ポリペプチドを含む薬学的組成物
V. GDF15タンパク質および核酸の治療による使用
VI. キット
実施例
実施例1
GDF15ポリペプチドの調製
実施例2
肝臓および精巣上体組織におけるマウスGDF15の制御
実施例3
PPARアゴニストによるGDF15の導入
実施例4
マウスGDF15は、Ob/Obマウスの食餌摂取量、体重増加、血中インスリン値、血糖値、および血中脂質値を低下させる
実施例5
マウスGDF15が食餌摂取量の低下および体重の増加なしとは無関係にOb/Obマウスの高血糖症を改良する
実施例6
マウスGDF15の効果は、通常の飼料摂取モデルにおいてより、高脂肪食誘発性肥満(DIO)モデルにおいて、より強固なものである
実施例7
マウスGDF15は、DIOマウスのインスリン感受性およびブドウ糖耐性を改良する
実施例8
ヒトGDF15はDIOマウスにおけるブドウ糖耐性を改良する
実施例9
ヒトGDF15はKK−Ayマウスにおけるインスリン感受性およびブドウ糖耐性の悪化を防ぐ
実施例10
ヒトGDF15はKKAyマウスの糖尿およびタンパク尿を改良する
実施例11
マウスGDF15は、DIOモデルの脂肪質量および脂肪質量/総体脂肪量の比を低下させる
実施例12
ヒトGDF15は、DIOモデルの脂肪量および脂肪量/総体重の比を低下させる
実施例13
組み換えマウスGDF15タンパク質はレプチン欠損Ob/Obマウスの高血糖症および過食症を改良する
実施例14
組み換えヒトGDF15タンパク質は、レプチン欠損Ob/Obマウスの高血糖症および過食症を改良する
実施例15
組み換えヒトGDF15タンパク質はDIOマウスのブドウ糖耐性を改良する
実施例16
組み換えヒトGDF15は脂質耐性を改良する
実施例17
マウスGDF15はDIOモデルのインスリンおよび脂質特性を改良する
Claims (13)
- 代謝障害を治療する方法であって、それを必要とする対象に治療有効量の単離されたヒトGDF15ポリペプチドを投与することを含む、方法。
- 前記代謝障害が2型糖尿病である、請求項1に記載の方法。
- 前記代謝障害が脂質異常症である、請求項1に記載の方法。
- 前記代謝障害が肥満である、請求項1に記載の方法。
- 前記代謝障害が糖尿病性腎症である、請求項1に記載の方法。
- 前記代謝障害は、前記対象が100mg/dL以上の空腹時血糖値を有する状態を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記対象が哺乳類動物である、請求項1に記載の方法。
- 前記哺乳類動物がヒトである、請求項7に記載の方法。
- 前記GDF15タンパク質が配列番号2、6、および10のうちの1つを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記GDF15ポリペプチドが配列番号1、5、および9のうちの1つによりコードされる、請求項1に記載の方法。
- 前記GDF15ポリペプチドが、薬学的に許容される担体と混合した前記GDF15ポリペプチドを含む薬学的組成物の形態で投与される、請求項1に記載の方法。
- 前記対象の血糖値を前記投与後の時点で決定するステップをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 前記対象の血清インスリン値を前記投与後の時点で決定するステップをさらに含む、請求項1に記載の方法。
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