JP2014500717A5 - - Google Patents

Claims (18)

1. 個体において記憶想起または記憶形成に可逆的に影響を及ぼす方法に使用するための、光活性化タンパク質をコードするポリヌクレオチドであって、
   このとき前記方法が、
   光活性化タンパク質をコードするポリヌクレオチドを、個体の海馬の背側ＣＡ１野、前帯状皮質または扁桃体基底外側部に投与することであって、このとき前記光活性化タンパク質が、個体の海馬の背側ＣＡ１野、前帯状皮質または扁桃体基底外側部の興奮性ニューロンの細胞膜上に発現され、前記タンパク質が光に応答性であり、前記ニューロンが光で照明されると、前記ニューロンの脱分極を抑制することができること、および、
   個体において事象の記憶想起または記憶形成に可逆的に影響を及ぼすために、前記タンパク質を前記光により活性化すること
   を含むものである、ポリヌクレオチド。
2. 前記タンパク質が、ＮｐＨＲ（配列番号３）と９０％を超えて同一であるか、またはＢＲ（配列番号７）と９０％を超えて同一であるか、またはＧｔＲ３（配列番号１）と９０％を超えて同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリヌクレオチド。
3. 前記タンパク質が、配列番号３に示される配列と少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項２に記載のポリヌクレオチド。
4. 前記タンパク質が、小胞体（ＥＲ）輸出シグナルおよび／または膜輸送シグナルをさらに含む、請求項３に記載のポリヌクレオチド。
5. 前記アミノ酸配列が、リンカーを通して前記ＥＲ輸出シグナルに連結される、請求項４に記載のポリヌクレオチド。
6. 前記ＥＲ輸出シグナルがアミノ酸配列ＦＣＹＥＮＥＶを含むか、前記膜輸送シグナルがアミノ酸配列ＫＳＲＩＴＳＥＧＥＹＩＰＬＤＱＩＤＩＮＶを含む、請求項４に記載のポリヌクレオチド。
7. 前記タンパク質が、配列番号５または配列番号６に示されるアミノ酸配列を含む、請求項６に記載のポリヌクレオチド。
8. 前記ポリヌクレオチドが、ベクターである、請求項１から７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
9. 前記ベクターが、ＡＡＶベクター、レトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、ＨＳＶベクター、およびレンチウイルスベクターからなる群から選択されるウイルスベクターである、請求項８に記載のポリヌクレオチド。
10. 前記事象が恐怖事象である、請求項１から９のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
11. 前記個体が心的外傷後ストレス障害を有している、請求項１から１０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
12. 前記個体がヒトまたは非ヒト動物である、請求項１から１１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
13. 記憶想起または記憶形成に影響を及ぼす薬剤をスクリーニングする方法であって、
    ａ）事象の記憶想起または記憶形成の間に、マウスの海馬の背側ＣＡ１野、前帯状皮質または扁桃体基底外側部内の興奮性ニューロンを薬剤と接触させることであって、このとき前記マウスが、その海馬の背側ＣＡ１野、前帯状皮質または扁桃体基底外側部内の興奮性ニューロンの細胞膜上に発現された光活性化タンパク質を含み、前記タンパク質が光に応答性であり、前記ニューロンが光で照明されると、前記ニューロンの脱分極を抑制することができることと、
    ｂ）事象の記憶想起または記憶形成の間に、前記海馬の背側ＣＡ１野内で、前記興奮性ニューロンの脱分極を抑制することと、
    ｃ）光の存在下または非存在下で、前記薬剤が記憶想起または記憶形成に影響を及ぼすか否かを決定する、方法。
14. 前記タンパク質が、ＮｐＨＲ（配列番号３）と９０％を超えて同一であるか、またはＢＲ（配列番号７）と９０％を超えて同一であるか、またはＧｔＲ３（配列番号１）と９０％を超えて同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載の方法。
15. 前記タンパク質が、配列番号３に示される配列と少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１４に記載の方法。
16. 前記タンパク質が、小胞体（ＥＲ）輸出シグナルおよび／または膜輸送シグナルをさらに含む、請求項１４または１５に記載の方法。
17. 前記アミノ酸配列が、リンカーを通して前記ＥＲ輸出シグナルに連結される、請求項１６に記載の方法。
18. 前記ＥＲ輸出シグナルがアミノ酸配列ＦＣＹＥＮＥＶを含むか、前記膜輸送シグナルがアミノ酸配列ＫＳＲＩＴＳＥＧＥＹＩＰＬＤＱＩＤＩＮＶを含む、請求項１６または１７に記載の方法。