JP2014218493A

JP2014218493A - 組成物及び食品

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Publication number: JP2014218493A
Application number: JP2014043822A
Authority: JP
Inventors: 森　大輔; Daisuke Mori; 大輔森; 雄輝木村; Yuki Kimura; 建▲華▼ 戚; Jianhua Qi; ランコウ; Lan Xiang
Original assignee: GIFU SERATSUKU SEIZOSHO KK; HANGZHOU NAIQIRUI BIOMEDICAL TECHNOLOGY CO Ltd
Current assignee: GIFU SERATSUKU SEIZOSHO KK; HANGZHOU NAIQIRUI BIOMEDICAL TECHNOLOGY CO Ltd
Priority date: 2013-05-02
Filing date: 2014-03-06
Publication date: 2014-11-20
Also published as: CN103877144B; CN103877144A

Abstract

【課題】神経退行性疾患の予防又は治療に用いることができる組成物及び食品を提供すること。【解決手段】プロアントシアニジンと、オメガ３脂肪酸と、を含むことを特徴とする第１の組成物。第１の組成物において、例えば、プロアントシアニジン１００重量部に対するオメガ３脂肪酸の配合量を、４０〜２００重量部とすることができる。ピーナッツ薄皮抽出物と、オメガ３脂肪酸と、を含むことを特徴とする第２の組成物。第２の組成物において、例えば、ピーナッツ薄皮抽出物１００重量部に対するオメガ３脂肪酸の配合量を、２０〜１００重量部とすることができる。【選択図】図３

Description

本発明は、例えば、神経退行性疾患の予防又は治療に用いることができる組成物及び食品に関する。

世界人口の増加に伴って社会の高齢化が進み、神経退行性疾患の１種である老人性痴呆症の患者数は増える一方ある。現在、全世界で老人性痴呆症の患者数は１７００万人と推定され、老人性痴呆症による死亡者数は、死因順位において、心臓・脳血管、ガン、脳卒中に次ぎ４位である。

老人性痴呆症には、アルツハイマー型（AD，Alzheimer's Dementia）、血管型（Vascular dementia）、混合型（mixed dementia）等がある。アルツハイマー型の病理的特徴は患者の脳内に大量の澱粉状老人斑（SP）、神経原線維（NFT）が凝集すること、及び選択性ニューロンとシナプスの不足で神経伝達物質、特にアセチルコリンが著しく減少することである。

それに応じて、βアミロイド（Aβ）、タウ(tau)蛋白、ニューロン減退の三大原理について研究がなされている。昨今、ADの神経生理、生化学、薬理等の研究が進むにつれ、ADの治療薬の研究開発が急速に進展している。

老人性痴呆症に対する現段階の薬物治療法は、コリンエステラーゼ抑制剤を使用し、アセチルコリンエステラーゼ（AChE）を抑制することにより、患者体内のアセチルコリンを増やす方法である（特許文献１参照）。

コリンエステラーゼ抑制剤としては、タクリン（tacrine）、ドネペジル（donepezil）、リバスチブミン（Rivastigmine）、ガランタミン（Galantamine）の４種類が知られている。これらの薬は、臨床でAD治療に最初に使われ、最も定着している薬であって、症状が軽度、中度レベルのAD患者の治療に使われ、アメリカFDA認証が取れている。

他の治療薬として、β、γ分泌酵素抑制剤、ビンカミン（Vincamine）、ニモジピン（Nimodipine）等の脳代謝調節剤や、セレギリン（Selegiline）、ビタミンE等のフリーラジカルの代謝に影響を及ぼす薬がある。

特表２００１−５０４１０４号公報

現在、AD治療薬の種類は多く、作用機序は様々である。これらのAD治療薬は、老人性痴呆症の進行を遅らせる効果はある。しかし、市販されているAD治療薬も、開発中のAD治療薬も、毒性副作用があるため、現段階ではADを根治することはできない。ＡＤの病因を突き止め、有効な治療薬と治療法とを開発することは、現在、多くの研究者が取り組んでいる研究テーマである。

本発明は以上の点に鑑みなされたものであり、神経退行性疾患の予防又は治療に用いることができる組成物及び食品を提供することを目的とする。

本発明の第１の組成物は、プロアントシアニジンと、オメガ３脂肪酸と、を含むことを特徴とする。本発明の第１の組成物は、神経退行性疾患（例えば、老人性痴呆症（例えば、ＡＤ））を予防又は治療する効果を奏する。また、本発明の第１の組成物は、それを摂取した人の記憶力を改善（向上）できる。

本発明の第１の組成物において、例えば、プロアントシアニジン１００重量部に対するオメガ３脂肪酸の配合量を、４０〜２００重量部とすることができる。この場合、神経退行性疾患を予防又は治療し、記憶力を改善する効果が一層高い。

本発明の第２の組成物は、ピーナッツ薄皮抽出物と、オメガ３脂肪酸と、を含むことを特徴とする。本発明の第２の組成物は、神経退行性疾患（例えば、老人性痴呆症（例えば、ＡＤ））を予防又は治療する効果を奏する。また、本発明の第２の組成物は、それを摂取した人の記憶力を改善（向上）できる。

また、本発明の第２の組成物は、食べられるピーナッツ薄皮から抽出したピーナッツ薄皮抽出物を成分とするため、製品安全性が高く、人体に毒性の副作用を生じ難い。さらに、ピーナッツ薄皮のコストが低く、ピーナッツ薄皮抽出物の抽出が容易であるため、第２の組成物の製造コストが低く、製造が容易である。

本発明の第２の組成物において、例えば、ピーナッツ薄皮抽出物１００重量部に対するオメガ３脂肪酸の配合量を、２０〜１００重量部とすることができる。この場合、神経退行性疾患を予防又は治療し、記憶力を改善する効果が一層高い。

前記ピーナッツ薄皮抽出物は、例えば、ピーナッツ薄皮から、エタノール水溶液（エタノールと水との混合液）を用いて抽出することができる。この場合、神経退行性疾患を予防又は治療する効果が一層高い。

前記オメガ３脂肪酸は、例えば、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、エイコサペンタエン酸、アラキドン酸、テトラコサペンタエン酸、ニシン酸、オクタデカテトラエン酸、及びリノレン酸から成る群から選択された１種以上を含むことができる。この場合、神経退行性疾患を予防又は治療する効果が一層高い。

本発明の第１又は第２の組成物は、例えば、神経退行性疾患（例えば、老人性痴呆症（例えば、ＡＤ））の予防又は治療を用途とする医薬組成物とすることができる。本発明の医薬組成物は、神経退行性疾患を予防又は治療する効果を奏する。また、本発明の医薬組成物は、それを摂取した人の記憶力を改善できる。また、本発明の第１又は第２の組成物は、例えば、記憶力向上を用途とする医薬組成物とすることができる。

本発明の食品は、第１の組成物又は第２の組成物を含むことを特徴とする。本発明の食品は、神経退行性疾患を予防又は治療する効果を奏する。また、本発明の食品は、それを摂取した人の記憶力を改善（向上）できる。

水迷路試験に用いるプール１及びプラットフォーム３の構成を表す平面図である。水迷路試験に用いるプール１及びプラットフォーム３の構成を表す側面図である。水迷路試験の結果を表すグラフである。

本発明の実施形態を説明する。本発明におけるピーナッツ（ＡｒａｃｈｉｓｈｙｐｏｇａｅａＬＩＮＮＥ）は、マメ科ラッカセイ属に属する植物であり、南京豆や落花生、唐人豆とも呼ばれる。ピーナッツ薄皮は渋皮、甘皮とも呼ばれるものである。本発明におけるピーナッツの種類は特に限定されないが、一般に広く食用に供されているピーナッツ（Ａ．ｈｙｐｏｇａｅａ）が、原料入手が容易である点から好ましい。

プロアントシアニジン及びピーナッツ薄皮抽出物は、例えば、以下の方法で取得できる。まず、乾燥したピーナッツ薄皮を、エタノール水溶液（以下、抽出用水溶液とする）に浸漬し、抽出を行う。次に、抽出後の抽出用水溶液を、スチレン−ジビニルベンゼン系合成吸着剤（三菱化学製、商品名：ダイヤイオンＨＰ２０）を充填したカラムに導入する。

次に、スチレン−ジビニルベンゼン系合成吸着剤を水洗した後、エタノール水溶液（以下、溶離液とする）で洗脱し、その溶離液を容積が１／５０となるまで濃縮し、乾燥させることで、ピーナッツ薄皮抽出物を得る。このピーナッツ薄皮抽出物は、プロアントシアニジンを５０重量％以上の重量比で含む。

上記の方法において、抽出用水溶液は、エタノールと水との体積比が４０：６０〜８０：２０の範囲内であるエタノール水溶液が好ましく、エタノールと水との体積比が６０：４０であるエタノール水溶液が一層好ましい。

また、抽出には、他の溶媒を用いてもよい。例えば、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、ブタノール、イソブタノール等、ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、アセトン、ジエチルエーテル、酢酸エチル等の群から選ばれる単独の溶媒、または２種類以上の溶媒の任意の混合溶媒を用いることができる。

また、抽出用水溶液の体積（単位はリットル）と、それに浸漬するピーナッツ薄皮の重量（単位はグラム）との比率（Ｖ：Ｗ）は、２：１〜１０００：１の範囲が好ましく、５：１〜１０００：１の範囲がさらに好ましく、１６：１が特に好ましい。

抽出時における抽出用水溶液の温度は、２０〜５０℃の範囲が好ましく、３５〜４５℃の範囲がさらに好ましく、４０℃が特に好ましい。これらの温度範囲内である場合、ピーナッツ薄皮抽出物の溶解と拡散を促進できる。ピーナッツ薄皮を抽出用水溶液に浸漬する時間（抽出時間）は、０．５〜４８時間が好ましく、１〜１２時間がさらに好ましい。この範囲内であることにより、ピーナッツ薄皮からの不純物の溶出を抑制できる。

同じピーナッツ薄皮からの抽出回数は、１〜５回が好ましく、２回がさらに好ましい。２回の場合、例えば、１回目の抽出における抽出用水溶液の体積（単位はリットル）と、それに浸漬するピーナッツ薄皮の重量（単位はグラム）との比率（Ｖ：Ｗ）を、１６：１とし、抽出時間を１時間とすることができる。また、２回目の抽出における抽出時間を、０．５時間とすることができる。

溶離液は、エタノールと水との体積比が８０：２０〜２０：８０の範囲内であるエタノール水溶液が好ましく、エタノールと水との体積比が４０：６０であるエタノール水溶液が一層好ましい。

カラムに導入する抽出用水溶液の体積と、カラムに充填されたスチレン−ジビニルベンゼン系合成吸着剤との体積比は、１：１〜１０：１の範囲が好ましく、２：１〜５：１の範囲がさらに好ましく、２：１が特に好ましい。

洗脱後の溶離液を濃縮する方法としては、周知の方法を用いることができる。濃縮終了後の溶離液における水分含量は、５重量％以下であることが好ましい。
前記神経退行性疾患としては、例えば、老人痴呆症等が挙げられる。老人痴呆症としては、例えば、アルツハイマー型（AD，Alzheimer's Dementia）、血管型（Vascular dementia）、混合型（mixed dementia）等が挙げられる。

前記食品としては、例えば、一般的な食品分野に属するものが挙げられる。食品としては、例えば、デンプン、蔗糖、微結晶性セルロース等の充填剤、デンプンペースト、ヒドロキシプロピルセルロース、ゼラチン、ポリエチレングリコール結合剤、ステアリン酸マグネシウム、シリコーン粉末、ポリエチレングリコールのような湿潤剤、ポリソルベート、レシチン、ソルビタン脂肪酸エステル等の界面活性剤、甘味料、他の補助剤等を含むものが挙げられる。

本発明の組成物（第１の組成物、第２の組成物、医薬組成物）は、例えば、単位投与量で人又は人以外の生物に投与することができる。投与経路は、例えば、腸又は腸以外とすることができる。組成物の剤型は、固形、液状、半固形のいずれであってもよい。組成物は、既知の製造方法によって製造することができる。

オメガ３脂肪酸（オメガ−３系不飽和脂肪酸）としては、例えば、ドコサヘキサエン酸(DHA)、ドコサペンタエン酸(DPA)、エイコサペンタエン酸(EPA)、アラキドン酸、テトラコサペンタエン酸（all-cis-9,12,15,18,21-docosahexaenoic acid）、ニシン酸（all-cis-6,9,12,15,18,21-tetracosenoic acid）、オクタデカテトラエン酸(octadecatetraenoic acid)、リノレン酸等が挙げられる。本発明の組成物及び食品は、これらのオメガ３脂肪酸のうちの１種を含んでいてもよいし、２種以上を含んでいてもよい。
（実施例）
１．ピーナッツ薄皮抽出物の製造
乾燥済みのピーナッツ薄皮１０００ｇを、１６Ｌの抽出用水溶液に浸漬し、１回目の抽出を行った。抽出用水溶液は、エタノールと水との体積比が６０：４０であるエタノール水溶液である。また、抽出時における抽出用水溶液の温度は４０℃とした。１時間の抽出後、抽出用水溶液を濾過し、１回目の濾過液を得た。

次に、１回目の抽出後のピーナッツ薄皮を、２Ｌの抽出用水溶液に浸漬し、２回目の抽出を行った。抽出用水溶液の組成、及び抽出時における抽出用水溶液の温度は１回目の抽出時と同じとした。３０分間の抽出後、抽出用水溶液を濾過し、２回目の濾過液を得た。

１回目の濾過液と２回目の濾過液とを合わせ、４０℃、減圧の下で体積が１／５０になるまで濃縮してから、スチレン−ジビニルベンゼン系合成吸着剤（三菱化学製、商品名：ダイヤイオンHP２０）を５Ｌ充填したカラムに導入した。

次に、カラムに１５Ｌの水を導入した。このとき、糖分等の不要な物質がスチレン−ジビニルベンゼン系合成吸着剤から除去される。次に、１０Ｌの溶離液をカラムに導入し、スチレン−ジビニルベンゼン系合成吸着剤に吸着されていたピーナッツ薄皮抽出物を溶出させた。溶離液は、エタノールと水との体積比が４０：６０であるエタノール水溶液である。

溶離液を４０℃の下で減圧し、体積が１／５０になるまで濃縮した。最後に、水分含量が５重量％となるまで凍結乾燥し、ピーナッツ薄皮抽出物を得た。
２．ピーナッツ薄皮抽出物中のプロアントシアニジンの含有量測定
上記の方法で得られたピーナッツ薄皮抽出物中に含まれるプロアントシアニジの含有量を、以下に示すように、バニリン−塩酸法を用いて測定した。

（１）標準曲線の作成
蓋付褐色試験管に、１ｍＬのカテキン標準溶液と、９ｍＬの２％バニリン/塩酸-メタノール溶液とを入れ、混合して希釈標準液を調製した。ここで、カテキン標準溶液はカテキンの濃度が既知の溶液であり、カテキン濃度が０．１ｍｇ／ｍＬのものと、０．２ｍｇ／ｍＬのものと、０．３ｍｇ／ｍＬのものとの３種類がある。よって、希釈標準液には、調製に用いたカテキン標準溶液の濃度の違いにより、３種類が存在する。

また、２％バニリン/塩酸-メタノール溶液は、２ｇのバニリンを１００ｍｌの塩酸−メタノール混合液（塩酸とメタノールとの体積比は１：２）に溶解したものである。
希釈標準液を１８〜２２℃の下で２０分間インキュベーションした後、５００ｎｍでの吸光度を測定した。また、ブランク（水）についても、同様に吸光度を測定した。３種類の希釈標準液のそれぞれについて、希釈標準液の吸光度から、ブランクの吸光度を差し引いた値（以下、補正済み吸光度とする）を算出した。そして、横軸に希釈標準液におけるカテキン濃度をとり、縦軸に補正済み吸光度をとったグラフ（カテキン濃度と吸光度との関係を表す標準曲線）を作成した。

（２）ピーナッツ薄皮抽出物中のプロアントシアニジン量の測定
蓋付褐色試験管に、１ｍＬの試験溶液(４０ｍｇのピーナッツ薄皮抽出物を１００ｍＬの水に溶かしたもの) と、９ｍＬの２％バニリン/塩酸-メタノール溶液とを入れ、混合した。この混合液を１８〜２２℃の下で２０分間インキュベーションし、５００ｎｍでの吸光度を測定した。その測定結果を上記（１）で作成した標準曲線に当てはめ、ピーナッツ薄皮抽出物中に含まれるプロアントシアニジン量を測定した。その結果、ピーナッツ薄皮抽出物におけるプロアントシアニジン含有量は５６重量％であった。

３．組成物が奏する効果を確かめるための試験
（１）マウスへの組成物の投与
組成物を投与する対象となるＩＣＲマウス(８週齢、オス浙江省医科院動物センターから購入)を用意した。このマウスを、各１０匹ずつ、４つの群Ａ〜Ｄに分けた。Ａ群は対象群であって、この群の各マウスには、グリセリン及びグリセリン脂肪酸エステルを水に溶解して成る水溶液（以下、投与用水溶液とする）を投与した。この投与用水溶液におけるグリセリンの濃度は４０重量％であり、グリセリン脂肪酸エステルの濃度は６重量％である。投与量水溶液の１回当りの投与量は１００μＬであり、２４時間ごとに７回投与した。

Ｂ群の各マウスには、投与用水溶液にドコサヘキサエン酸（DHA）を混合したものを投与した。１回当りの投与量は１００μＬであり、２４時間ごとに７回投与した。７回の投与により、各マウスに投与されたＤＨＡの量は、合計５ｍｇ／Ｋｇとなった。

Ｃ群の各マウスには、投与用水溶液に、ビーナッツ薄皮抽出物を混合したものを投与した。１回当りの投与量は１００μＬであり、２４時間ごとに７回投与した。７回の投与により、各マウスに投与されたビーナッツ薄皮抽出物の量は、合計１０ｍｇ／Ｋｇとなった。また、各マウスに投与されたプロアントシアニジンの量は、合計５．６ｍｇ／Ｋｇとなった。

Ｄ群の各マウスには、投与用水溶液に、ＤＨＡ及びビーナッツ薄皮抽出物を混合したものを投与した。１回当りの投与量は１００μＬであり、２４時間ごとに７回投与した。７回の投与により、各マウスに投与されたＤＨＡの量は、合計５ｍｇ／Ｋｇとなり、各マウスに投与されたビーナッツ薄皮抽出物の量は、合計１０ｍｇ／Ｋｇとなった。また、各マウスに投与されたプロアントシアニジンの量は、合計５．６ｍｇ／Ｋｇとなった。

（２）水迷路試験
Ａ〜Ｄ群のマウスについて、水迷路試験を行った。水迷路試験とは、１９８２年にPichard G. Morrisらによって開発された記憶学習力のテスト法であって、以下の手順で行う。まず、図１、図２に示すように、円形のプール１に水を張る。また、プール１内にプラットフォーム３を設置する。プラットフォーム３の上端面３Ａは、プール１内に張られた水の水面５より１０〜１５ｍｍ下である。プール１を４つの区画に分割し、任意の区画からマウスを水面に放す。放されたマウスは泳いでプラットフォーム３を探索する。なお、プラットフォーム３の上端面３Ａは水面５の下であるので、泳いでいるマウスはプラットフォーム３を見ることができない。上記のように、マウスを水面に放し、プラットフォーム３を探索させる訓練を４日間行う。

５日目に、プール１からプラットフォーム３を取り去り、１〜４日目と同様にマウスをプール１の水面に放す。プラットフォーム３が元あった場所へマウスが侵入した回数を計測する。この回数が多いほど、マウスの記憶学習力が向上、改善されたと評価できる。

（３）試験結果
水迷路試験の結果を図３に示す。図３に示すように、Ｄ群のマウスは、他の群のマウスに比べ、プラットフォーム３が元あった場所へ侵入した回数が顕著に多かった。この試験結果は、ＤＨＡ及びビーナッツ薄皮抽出物の投与により、マウスの記憶学習力が顕著に向上したことを示している。

１・・・プール、３・・・プラットフォーム、３Ａ・・・上端面、５・・・水面

Claims

プロアントシアニジンと、オメガ３脂肪酸と、を含むことを特徴とする組成物。
プロアントシアニジン１００重量部に対するオメガ３脂肪酸の配合量が４０〜２００重量部であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
ピーナッツ薄皮抽出物と、オメガ３脂肪酸と、を含むことを特徴とする組成物。
ピーナッツ薄皮抽出物１００重量部に対するオメガ３脂肪酸の配合量が２０〜１００重量部であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
前記ピーナッツ薄皮抽出物は、ピーナッツ薄皮から、エタノール水溶液を用いて抽出された抽出物であることを特徴とする請求項３又は４に記載の組成物。
前記オメガ３脂肪酸が、ドコサヘキサエン酸、ドコサペンタエン酸、エイコサペンタエン酸、アラキドン酸、テトラコサペンタエン酸、ニシン酸、オクタデカテトラエン酸、及びリノレン酸から成る群から選択された１種以上を含むことを特徴とする請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
神経退行性疾患の予防又は治療を用途とする医薬組成物であることを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
記憶力向上を用途とする医薬組成物であることを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物を含むことを特徴とする食品。