JP2014207889A - 不均一ながん幹細胞及びその用途 - Google Patents
不均一ながん幹細胞及びその用途 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2014207889A JP2014207889A JP2014042544A JP2014042544A JP2014207889A JP 2014207889 A JP2014207889 A JP 2014207889A JP 2014042544 A JP2014042544 A JP 2014042544A JP 2014042544 A JP2014042544 A JP 2014042544A JP 2014207889 A JP2014207889 A JP 2014207889A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cancer
- cells
- cancer stem
- stem cells
- cell
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/15—Medicinal preparations ; Physical properties thereof, e.g. dissolubility
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pathology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
【解決手段】以下の工程を含むことを特徴とする、がん治療薬のスクリーニング方法:
工程1:iPS細胞をがん細胞の培地に含まれる培養成分の存在下に培養して、不均一ながん幹細胞を含む細胞集団を誘導する工程、
工程2:不均一ながん幹細胞を含む細胞集団にがん治療薬の候補物質を作用させて、がん幹細胞に有効ながん治療薬をスクリーニングする工程
【選択図】図16
Description
項1. 以下の工程を含むことを特徴とする、がん治療薬のスクリーニング方法:
工程1:iPS細胞をがん細胞の培地に含まれる培養成分の存在下に培養して、不均一ながん幹細胞を含む細胞集団を誘導する工程、
工程2:不均一ながん幹細胞を含む細胞集団にがん治療薬の候補物質を作用させて、がん幹細胞に有効ながん治療薬をスクリーニングする工程
項2. 工程1において、異なる表現型を有する複数のがん細胞の各培地に含まれる培養成分の存在下にiPS細胞を各々培養して、異なる表現型を有する不均一ながん幹細胞を含む複数の細胞集団を誘導し、かつ、工程2において、前記候補物質は異なる表現型を有する不均一ながん幹細胞を含む複数の細胞集団に対する有効性を試験することを特徴とする、項1に記載のがん治療薬のスクリーニング方法。
項3. iPS細胞とがん細胞の間に存在する様々な分化の程度を有する不均一ながん幹細胞を含む細胞集団。
項4. 不均一ながん幹細胞とともにがん細胞を含む、項3に記載の細胞集団。
項5. iPS細胞を様々な種類のがん細胞の各培地に含まれる培養成分の存在下に各々培養して異なる表現型を有する不均一ながん幹細胞を含む複数の細胞集団を誘導して得られる、不均一ながん幹細胞を含む複数の細胞集団のコンビネーション。
項6. 表現型の異なる複数のがん幹細胞を含む細胞集団に有効ながん治療薬。
項7. 異なる表現型を有する複数のがん細胞の各培地に含まれる培養成分の存在下にiPS細胞を各々培養して、異なる表現型を有するがん幹細胞を含む複数の細胞集団を誘導することを特徴とする、異なる表現型を有するがん細胞の複数の細胞集団を調製する方法。
項8. iPS細胞製造用の遺伝子、マーカー遺伝子及び薬剤耐性遺伝子からなる群から選ばれる少なくとも1種の外来遺伝子を含むがん幹細胞。
図5に示されるiPS細胞(GFP+)を用いて調製したがん幹細胞を用いて腫瘍を形成した。具体的には、本発明で作製した、がん幹細胞をヌードマウスの皮下に移植し生成された腫瘍を、抗GFP抗体、抗サイトケラチン抗体で染色した。その結果、本腫瘍はGFPのみ発現している細胞(GFP+ CK-)、サイトケラチンのみ発現している細胞(GFP- CK+)、及び両者の発現が見られない細胞(GFP- CK-)からなっていることが見いだされた(図9) 。GFP+細胞は、未だ未分化な状態である細胞を示しており、CK+細胞は上皮系細胞へ分化した細胞を示す。両者が陰性の細胞は、サイトケラチンを発現するに至っていない上皮系分化の途中の細胞、或いは、上皮系以外(少なくともサイトケラチンを発現しない)細胞へ分化していることを示している。このことは、腫瘍は様々な細胞からなる不均一な集団であることを示している。
miPS-CSC細胞の培養、GFP陽性がん幹細胞の濃縮
マウスiPS細胞(図5)より誘導した種々のがん幹細胞は、15% FBS、2mM L-Glutamine、0.1mM Non-essential amino acids、0.1mM 2-mercaptoethanol、50μg/mlペニシリン/ストレプトマイシンを含むDMEM培地を用い、37℃、5%CO2条件下で培養した。なお、培養ディッシュは0.1%のゼラチン溶液を用いてゼラチンコートしたものを使用した。マウスiPS細胞の培養には、上記培地に1000U/ml LIFを添加している。
Microarrayを用いた遺伝子発現解析
実施例1の条件で培養した細胞についてRNeasy kit (50) (QIAGEN)を用いた方法、もしくはTRIzol (Invitorogen)を用いた方法でRNAを抽出した。その後、50μg以下のRNAに対してDNase I処理を行い、再度RNeasy kit (50) (QIAGEN) にて精製を行った。
Microarrayで検出したCy3の蛍光強度から、miPS細胞の各遺伝子発現量を基準とし、各々の細胞内での発現量を相対的な数値として球面自己組織化マップ上でクラスタリングし、miPS細胞と比較して変化率の高い遺伝子を視覚化した(図1)。
Microarrayで検出したCy3の蛍光強度を正規化し、比較を行う細胞の値の対数をプロットした散布図を作成、遺伝子の発現様式を比較した (図2)。
1)概略
ヒトグリオーマ由来U251MG細胞を用いて実験を行った。
ヒトグリオーマ由来U251MG細胞、U251MG-P1細胞をそれぞれ非接着ディッシュ上でHAを添加した培地(100 μg/ml ヒアルロン酸ナトリウム(和光純薬社製 ヒアルロン酸ナトリウム,鶏冠製)、10% FBS、50 U/ml ペニシリン、および 50 μg/ml ストレプトマイシンを含むDMEM)上と添加していない通常の培地(10% FBS、50 U/ml ペニシリン、および 50 μg/ml ストレプトマイシンを含むDMEM)上で2〜5日間培養した。HAを添加しない場合には殆ど細胞が増殖しなかったが、HAを添加した場合には細胞の密度が濃い部分が形成され、一部では細胞塊(スフェロイド)が形成された(図3)。
HA添加無血清培地(インスリン-トランスフェリン-亜セレン酸ナトリウム 培地サプリメント(Sigma-Aldrich社製)、100 μg/ml ヒアルロン酸ナトリウム、50 U/ml ペニシリン、および 50 μg/ml ストレプトマイシンを含むDMEM) で2週間、非接着系ディッシュ(直径10 mm, 培地量10 ml)でスフェロイド培養したU251MG細胞をヌードマウスBalb/c-nu/nu、メス、4週齢に移植して4週間観察した(図4)。2枚のディッシュから集めた細胞をそれぞれマウスの左腹部に移植した。右腹部には通常培養したU251MG細胞を107個、それぞれ移植した。ディッシュ2枚以上から集めた細胞の移植によって担がんが形成された。
・患者等のがん組織から、がん幹細胞を単離精製して、その性状や機能を解析する試みは、多く報告されているが、再現性や量的な確保などの困難さから、充分な研究を進めることができない。
・がん幹細胞を実験室で調製することから、全てのがん細胞、がん幹細胞を誘導させ、分析研究することが出来る。これは、患者等の組織から、単離精製する方法に比べ、「本来生成するはず」のがん細胞及びがん幹細胞あるいはこれらの集団を、もれなく、網羅的かつ体系的に、解析し研究を進めることが出来る。iPS細胞からがん細胞、がん幹細胞を網羅的かつ体系的に作製してがん治療薬をスクリーニングすることで、がん治療薬の作用・効果を検証することができ、目的の効果を示すがん治療薬を得ることができる。また、がん細胞、がん幹細胞に対する効果を確認できるので、がん細胞とがん幹細胞に同時に有効ながん治療薬及び複数のがん治療薬の組み合わせを評価することができる。
・これらの優位性から、真の意味での「がん幹細胞説」を、検証し、その効果、限界等、科学的な検証を進めることが出来る。
・がん細胞の培養上清に含まれるiPS細胞からがん幹細胞 (iPS-CSC)が誘導される「条件因子」を特定することで、多種類のがん幹細胞を容易に作成することができる。また、これらの因子はそのまま、がん治療の標的物質となり得る。
・ヒトiPS細胞を含めたiPS細胞から誘導されるがん幹細胞(iPS-CSC)について、記載した遺伝子発現からパターン解析する技術手法を用いることができる。
・培養環境及び培養条件について研究し、培養上清に含まれるがん化を促す「条件因子」について研究し、その単離構造解析を行うための研究計画とロードマップを作成する。
・ヒトiPS細胞を含めたiPS細胞から誘導されるがん幹細胞(iPS-CSC)について、記載した遺伝子発現に限らず、タンパク質や細胞内代謝産物などついて、少量で済むと考えられるイメージング手法との組み合わせを含む網羅的解析を進める。
・これら手法を組み合わせ、個々のがん幹細胞(iPS-CSC)を含めた細胞の機能、性質等の特徴を集積し分類、体系化しデータベースとして構築化していく。
・個々の細胞に特異的ながん治療薬のスクリーニングを行い、効果的ながん治療薬はデータベースの項目として含める。
・データベースが構築されることで、手術等で得られる患者「生体試料」に含まれるがん幹細胞との比較対照から、患者のがん細胞に含まれるがん幹細胞とデータベース上のがん幹細胞(iPS-CSC)の類型比定を行うことができる。
・この比較から、治療効果が期待されるがん治療薬の選択を行うことができる。
Claims (8)
- 以下の工程を含むことを特徴とする、がん治療薬のスクリーニング方法:
工程1:iPS細胞をがん細胞の培地に含まれる培養成分の存在下に培養して、不均一ながん幹細胞を含む細胞集団を誘導する工程、
工程2:不均一ながん幹細胞を含む細胞集団にがん治療薬の候補物質を作用させて、がん幹細胞に有効ながん治療薬をスクリーニングする工程 - 工程1において、異なる表現型を有する複数のがん細胞の各培地に含まれる培養成分の存在下にiPS細胞を各々培養して、異なる表現型を有する不均一ながん幹細胞を含む複数の細胞集団を誘導し、かつ、工程2において、前記候補物質は異なる表現型を有する不均一ながん幹細胞を含む複数の細胞集団に対する有効性を試験することを特徴とする、請求項1に記載のがん治療薬のスクリーニング方法。
- iPS細胞とがん細胞の間に存在する様々な分化の程度を有する不均一ながん幹細胞を含む細胞集団。
- 不均一ながん幹細胞とともにがん細胞を含む、請求項3に記載の細胞集団。
- iPS細胞を様々な種類のがん細胞の各培地に含まれる培養成分の存在下に各々培養して異なる表現型を有する不均一ながん幹細胞を含む複数の細胞集団を誘導して得られる、不均一ながん幹細胞を含む複数の細胞集団のコンビネーション。
- 表現型の異なる複数のがん幹細胞を含む細胞集団に有効ながん治療薬。
- 異なる表現型を有する複数のがん細胞の各培地に含まれる培養成分の存在下にiPS細胞を各々培養して、異なる表現型を有するがん幹細胞を含む複数の細胞集団を誘導することを特徴とする、異なる表現型を有するがん細胞の複数の細胞集団を調製する方法。
- iPS細胞製造用の遺伝子、マーカー遺伝子及び薬剤耐性遺伝子からなる群から選ばれる少なくとも1種の外来遺伝子を含むがん幹細胞。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2014042544A JP2014207889A (ja) | 2013-03-27 | 2014-03-05 | 不均一ながん幹細胞及びその用途 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2013067058 | 2013-03-27 | ||
JP2013067058 | 2013-03-27 | ||
JP2014042544A JP2014207889A (ja) | 2013-03-27 | 2014-03-05 | 不均一ながん幹細胞及びその用途 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2014207889A true JP2014207889A (ja) | 2014-11-06 |
Family
ID=51902638
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014014778A Withdrawn JP2014207883A (ja) | 2013-03-27 | 2014-01-29 | がん幹細胞及びその用途 |
JP2014042544A Pending JP2014207889A (ja) | 2013-03-27 | 2014-03-05 | 不均一ながん幹細胞及びその用途 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014014778A Withdrawn JP2014207883A (ja) | 2013-03-27 | 2014-01-29 | がん幹細胞及びその用途 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (2) | JP2014207883A (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016106617A (ja) * | 2014-12-05 | 2016-06-20 | 国立大学法人 岡山大学 | 被検物質のがん幹細胞誘導性評価技術 |
WO2016170938A1 (ja) * | 2015-04-20 | 2016-10-27 | 国立大学法人岡山大学 | がんの非ヒトモデル動物及びその作製方法、がん幹細胞及びその製造方法 |
KR20220061140A (ko) | 2019-09-09 | 2022-05-12 | 토모이케 바이오 리미티드 | 암 예방 및/또는 치료용 조성물 |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014207883A (ja) * | 2013-03-27 | 2014-11-06 | 国立大学法人岡山大学 | がん幹細胞及びその用途 |
TW201636422A (zh) * | 2015-02-06 | 2016-10-16 | 日產化學工業股份有限公司 | 荷癌哺乳動物模式的製作方法 |
WO2019050482A1 (en) * | 2017-09-08 | 2019-03-14 | Agency For Science, Technology And Research | REPROGRAMMING A DIFFERENTIATED CELL TO AN INDIFFERENCED CELL USING AN EXOSOME |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014207883A (ja) * | 2013-03-27 | 2014-11-06 | 国立大学法人岡山大学 | がん幹細胞及びその用途 |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ATE496142T1 (de) * | 2004-03-23 | 2011-02-15 | Oncotherapy Science Inc | Verfahren zur diagnose von nicht-kleinzelligem lungenkrebs |
CA2741117A1 (en) * | 2008-10-30 | 2010-05-06 | Centre De Recherche Public De La Sante | Biomarkers for heart failure |
JPWO2011027875A1 (ja) * | 2009-09-03 | 2013-02-04 | 独立行政法人理化学研究所 | 腸管バリア機能改善剤 |
US20130236891A1 (en) * | 2010-08-20 | 2013-09-12 | 3-D Matrix, Ltd. | Method and composition for the treatment, prevention, and diagnosis of cancer containing or derived from cancer stem cells |
WO2012132369A1 (ja) * | 2011-03-25 | 2012-10-04 | 国立大学法人鹿児島大学 | 癌幹細胞を標的とするウイルスベクター |
-
2014
- 2014-01-29 JP JP2014014778A patent/JP2014207883A/ja not_active Withdrawn
- 2014-03-05 JP JP2014042544A patent/JP2014207889A/ja active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014207883A (ja) * | 2013-03-27 | 2014-11-06 | 国立大学法人岡山大学 | がん幹細胞及びその用途 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
CHEN LING, ET AL., A MODEL OF CANCER STEM CELLS DERIVED FROM MOUSE INDUCED PLURIPOTENT STEM CELLS,, JPN6014025170 * |
笠井智成, 他: "マウスiPS細胞から作るがん幹細胞モデル", 細胞工学, vol. Vol. 32, No. 3, JPN6014025169, 22 February 2013 (2013-02-22), pages p. 330-337 * |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016106617A (ja) * | 2014-12-05 | 2016-06-20 | 国立大学法人 岡山大学 | 被検物質のがん幹細胞誘導性評価技術 |
WO2016170938A1 (ja) * | 2015-04-20 | 2016-10-27 | 国立大学法人岡山大学 | がんの非ヒトモデル動物及びその作製方法、がん幹細胞及びその製造方法 |
JPWO2016170938A1 (ja) * | 2015-04-20 | 2017-04-27 | 国立大学法人 岡山大学 | がんの非ヒトモデル動物及びその作製方法、がん幹細胞及びその製造方法 |
JP2017086091A (ja) * | 2015-04-20 | 2017-05-25 | 国立大学法人 岡山大学 | がんの非ヒトモデル動物及びその作製方法、がん幹細胞及びその製造方法 |
KR20220061140A (ko) | 2019-09-09 | 2022-05-12 | 토모이케 바이오 리미티드 | 암 예방 및/또는 치료용 조성물 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2014207883A (ja) | 2014-11-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Dong et al. | Single-cell characterization of malignant phenotypes and developmental trajectories of adrenal neuroblastoma | |
Zeng et al. | Tracing the first hematopoietic stem cell generation in human embryo by single-cell RNA sequencing | |
Zhang et al. | Breast cancer stem cells: biomarkers, identification and isolation methods, regulating mechanisms, cellular origin, and beyond | |
Kouros-Mehr et al. | GATA-3 links tumor differentiation and dissemination in a luminal breast cancer model | |
Tanaka et al. | Ewing’s sarcoma precursors are highly enriched in embryonic osteochondrogenic progenitors | |
Teuwen et al. | Tumor vessel co-option probed by single-cell analysis | |
Xia et al. | Identification of a cell-of-origin for fibroblasts comprising the fibrotic reticulum in idiopathic pulmonary fibrosis | |
Debeb et al. | Characterizing cancer cells with cancer stem cell-like features in 293T human embryonic kidney cells | |
JP2014207889A (ja) | 不均一ながん幹細胞及びその用途 | |
Okabe et al. | CD44s signals the acquisition of the mesenchymal phenotype required for anchorage-independent cell survival in hepatocellular carcinoma | |
JP5920725B2 (ja) | 生体外で自己複製可能な誘導前がん幹細胞又は誘導悪性幹細胞、これらの製造方法、及び、これらの細胞の応用 | |
CN103842508B (zh) | 白蛋白产生和细胞增殖 | |
WO2014148562A1 (ja) | がん幹細胞を含む細胞集団を得る方法 | |
JP2021500929A (ja) | 組成物および方法 | |
Moreno-EstellÉs et al. | Symmetric expansion of neural stem cells from the adult olfactory bulb is driven by astrocytes via WNT7A | |
Goksel et al. | WNT1 gene expression alters in heterogeneous population of prostate cancer cells; decreased expression pattern observed in CD133+/CD44+ prostate cancer stem cell spheroids | |
Fujiwara et al. | Overcoming therapeutic resistance of bone sarcomas: overview of the molecular mechanisms and therapeutic targets for bone sarcoma stem cells | |
Lee et al. | Expression of miR-206 during the initiation of mammary gland development | |
Walter et al. | Plasticity in colorectal cancer: Why cancer cells differentiate | |
Liu et al. | A patient tumor-derived orthotopic xenograft mouse model replicating the group 3 supratentorial primitive neuroectodermal tumor in children | |
Jain et al. | Identification of cancer-associated fibroblasts in glioblastoma and defining their pro-tumoral effects | |
Johnstone et al. | Annexin A1 is required for efficient tumor initiation and cancer stem cell maintenance in a model of human breast cancer | |
Finotto et al. | Single‐cell profiling and zebrafish avatars reveal LGALS1 as immunomodulating target in glioblastoma | |
Nakano et al. | RHAMM marks proliferative subpopulation of human colorectal cancer stem cells | |
Skrzypek et al. | Progression and Differentiation of Alveolar Rhabdomyosarcoma Is Regulated by PAX7 Transcription Factor—Significance of Tumor Subclones |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20170130 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20171220 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20180214 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180405 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20180807 |