KR20220061140A - 암 예방 및/또는 치료용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 암 줄기 세포를 억제하는 기술을 제공하는 것을 과제로 하고, 프테로스틸벤 및 그 배당체로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1 종을 함유하는 조성물을 제공한다.

Description

암 예방 및/또는 치료용 조성물

본 발명은 암을 예방 및 / 또는 치료하는데 사용되는 조성물에 관한 것이다.

최근의 암 연구에 있어서, 암 조직은, 균일한 성질 등을 갖는 세포의 집합체는 아니고, 불균일한 성질 등을 갖는 세포의 집합체인 것이 분명해지고 있다. 또한, 암 조직에 암 줄기 세포가 함유되고, 이 암 줄기 세포로부터 암 세포가 분화됨과 함께, 암 줄기 세포 그 자체도 증식하는 것도 알려져 있다.

인공 다능성 줄기 세포(iPS 세포)를 암 유래 세포주의 배양액을 사용하여 배양함으로써 암 줄기 세포를 유도할 수 있다. 이와 같이 유도되어 제작된 암 줄기 세포를 이용하여, 암 치료를 위한 유효 성분을 스크리닝하는 기술이 알려져 있다(특허문헌 1, 2). 또한, 배아 줄기 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도 방법은 상기 한 iPS 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도 방법과 동일한 것이 비 특허 문헌 1에 개시되어있다.

스틸벤(stilbene) 화합물은, 동물이 가식 경험이 있는 포도 등의 식물체에 함유되는 화합물이며, 예를 들면, 레스베라트롤(resveratrol), 프테로스틸벤(pterostilbene) 등과 같은 항산화 기능을 발휘하는 화합물이 알려져 있다. 프테로스틸벤 또는 그 배당체는 항산화 기능뿐만 아니라 미백 효과 (특허 문헌 3, 4) 및 육모 효과 (특허 문헌 5)를 발휘하는 것이 알려져있다.

어느 화합물에 수용성을 부여하는 등을 목적으로 한 배당화 기술이 개발되고 있고, 예를 들면, 스틸벤 화합물에 당을 부여하는 기술이 개발되어 있다(특허문헌 6). 그러나, 어느 화합물을 배당화함으로써, 배당화 전의 화합물이 갖는 생리 활성이 상실되어 버리는 것도 알려져 있다(비특허문헌 2). 따라서, 수용성의 부여 등을 요망하여 화합물을 배당화에 제공해도, 그 메리트를 즐길 수 있는 것은, 극히 적은 것으로 이해되고 있다.

[특허문헌 1] 국제 공개 2014/148562 [특허문헌 2] 일본 공개 특허 공보 2014-207889 [특허문헌 3] 특허 제6173543호 [특허문헌 4] 특허 제6233826호 [특허문헌 5] 특허 제6364143호 [특허문헌 6] 특허 제6467762호

[비특허문헌 1] Ａ．ＳＥＮＯ　ｅｔ　ａｌ．，ＯＮＣＯＬＯＧＹ　ＬＥＴＴＥＲＳ　１８：２７５６－２７６２，２０１９ [비특허문헌 2] Ｄ．Ｕｅｓｕｇｉ　ｅｔ　ａｌ．，Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｒｏｇｙ，ａｎｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｙ，２０１７，Ｖｏｌ．８１、Ｎｏ．２，２２６－２３０

기존의 암치료제를 투여해도 '5년 생존율'과 같이 치료효과가 표현되는 것에서도 알 수 있듯이 현실적으로 암의 근본적인 치료는 곤란하다는 것이 일반적이다. 분자 표적 치료제를 포함한 기존의 암 치료제가 암 조직에 함유된 세포 집단 내의 특정 암 세포에만 효과를 나타내고, 불균일성을 나타내는 나머지 암 세포나 암 줄기 세포에는 약효를 표시하지 않기 위해 암이 근본적으로 치료될 가능성이 적다고 추측된다. 암을 근본적으로 치료할 수 없는 것은 암을 앓고있는 환자뿐만 아니라 그 치료 기간의 장기화 등에 의해 환자의 가족 또는 의료 기관 등에도 심각한 문제를 미친다. 이러한 사정을 감안하여, 본 발명은 암 줄기 세포를 억제하는 기술을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 과제를 검토하기 위해, 본 발명자들이 예의 검토를 거듭한 결과, 포도 등에 함유되는 프테로스틸벤(pterostilbene) 및/또는 그 배당체(glycoside)가, iPS 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도를 억제하는 것을 발견했다.

본 발명은 이러한 지견에 기초하여 완성된 것으로, 이하에 나타내는 양태의 발명을 널리 포함한다.

I. 조성물

I-1 프테로스틸벤 및 그 배당체로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1 종을 함유하는, 줄기 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도를 억제하기 위해 사용되는 조성물.

I-2 상기 프테로스틸벤 배당체가 프테로스틸벤에 당이 글리코시드 결합(glycosidic bond)된 화학 구조를 갖는 상기 I-1에 기재된 조성물.

I-3 상기 글리코시드 결합이 O-글리코시드 결합인 상기 I-2에 기재된 조성물.

I-4 상기 O- 글리코시드 결합이 (1-4)-O-글리코시드 결합인 상기 I-3에 기재된 조성물.

I-5 상기 O-글리코시드 결합이 β-O- 글리코시드 결합인 상기 I-3 또는 I-4에 기재된 조성물.

I-6 당이 단당 또는 다당인 상기 I-2 내지 I-5 중 어느 하나에 기재된 조성물.

I-7 상기 단당류가, 오시키로스환, 옥세토스환, 피라노스환, 푸라노스환, 셉타노스환, 또는 옥타노스환 구조 중 어느 하나의 구조를 취할 수 있고, 알도스, 케토스, 또는 이들 산화물 또는 환원화물로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 일종의 단당류인 상기 I-6에 기재된 조성물.

I-8 상기 단당류가 글루코오스 인 상기 I-6에 기재된 조성물.

I-9 상기 다당류가 오시키로스환, 옥세토스환, 피라노스환, 푸라노스환, 셉타노스환, 또는 옥타노스환 구조 중 어느 하나의 구조를 취할 수 있고, 알도스, 케토스, 데옥시당, 또는 이들의 산화물 혹은 환원화물로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 2종 이상의 단당류가, 서로 글리코시드 결합한 구조를 갖는 다당류인, 상기 I-6 내지 1-8 중 어느 하나에 기재된 조성물.

I-10 상기 다당류를 구성하는 단당류가 모두 포도당 인 상기 I-9에 기재된 조성물.

I-11 상기 프테로스틸벤 배당체가 하기 식 (1) 또는 (2)로 표시되는 화합물인 상기 I-1 내지 I-10 중 어느 하나에 기재된 조성물.

(식 중, 포도당과 스틸벤 골격의 O-글리코시드 결합은 β 결합이다.).

(식 중, 포도당과 스틸벤 골격의 O-글리코시드 결합은 β 결합이고, 포도당 사이의 O-글리코시드 결합은 모두 α 결합이고, n은 0 내지 8의 정수이다.).

I-12 줄기 세포가 iPS 세포, 배아 줄기 세포 또는 성체 줄기 세포 중 어느 하나 인 상기 I-1 내지 I-11에 기재된 조성물.

II. 음식품 조성물

II-1 상기 I-1 내지 I-12 중 어느 하나에 기재된 조성물을 함유하는 음식품 조성물.

II-2 암의 예방 및 / 또는 치료에 사용되는 상기 II-1에 기재된 음식품 조성물.

III. 의약 조성물

III-1 상기 I-1 내지 I-12 중 어느 하나에 기재된 조성물을 함유하는 의약 조성물.

III-2 암의 예방 및 / 또는 치료에 사용되는 상기 III-1에 기재된 의약 조성물.

IV. 줄기세포용 배지 조성물

IV-1 상기 I-1 내지 I-12 중 어느 하나에 기재된 조성물을 함유하는, 암 줄기 세포의 유도를 저해하기 위해서 사용되는 줄기세포용 배지 조성물.

IV-2 상기 줄기 세포가, iPS 세포, 배성 줄기 세포, 또는 성체 줄기 세포 중 어느 하나인, 상기 IV-1에 기재된 줄기세포용 배지 조성물.

V. 예방 및/또는 치료 방법

V-1 암의 이환에 대한 예방을 원하는 생체에 프테로스틸벤 및 그 배당체로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1 종을 함유하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 암의 예방 방법.

V-2 암을 앓고있는 생체에 프테로스틸벤 및 그 배당체로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1 종을 함유하는 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 암의 치료 방법.

본 발명의 조성물은 프테로스틸벤 및/또는 그 배당체를 함유하고 있고, iPS 세포, 체성 줄기 세포, 또는 배성 줄기 세포 등으로 대표되는 줄기 세포로부터, 암 줄기 세포로의 유도를 억제하는 효과를 발휘한다.

암 세포는 암 줄기 세포로부터 분화되기 때문에, 줄기 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도를 저해하는 효과를 발휘하는 본 발명의 조성물은 암을 치료하는 효과를 발휘한다. 이러한 효과는, 암세포를 분화시키는 베이스가 되는 암 줄기세포로의 유도를 저해함으로써 얻어지는 효과이기 때문에, 암의 근치도 기대할 수 있는 효과라고 할 수 있다. 또한, 이러한 메카니즘을 감안하면, 본 발명의 조성물은 암 세포를 발생시키지 않는 효과, 즉 암의 예방 효과를 발휘한다. 이러한 효과를 기대하여, 본 발명의 조성물은 식품 또는 의약 분야에 채용 될 수 있다.

본 발명의 조성물은 프테로스틸벤 및/또는 그 배당체를 유효 성분으로 한다. 프테로스틸벤 및 / 또는 그 배당체는 포도 등의 식물체에 함유되는 성분이기 때문에, 생체가 섭식 경험이있는 성분이라고 할 수있다. 따라서 줄기세포에서 암 줄기세포로의 유도 억제를 목적으로 이를 섭식한 생체가 그 생명의 위기에 노출되는 정도의 부작용을 일으킬 가능성은 매우 낮다.

iPS 세포로 대표되는 줄기세포는 재생의료 분야에서 사용되는 각종 장기를 제조하기 위한 원료로서 매우 우수한 소재이지만, 줄기세포로부터 제조된 장기는 암화하기 쉽다고 지적될 수 있다. 본 발명의 조성물은 줄기세포를 원료로 제조되는 각종 장기의 암화를 억제하기 위해서도 사용할 수 있다. 따라서이 관점에서 재생 의료 분야에도 사용할 수 있다.

도 1은 실시예 1의 암 줄기 세포 유도 억제 시험 결과를 나타낸다. (A)는 프테로스틸벤(아글리콘(aglycone)), (B)는 프테로스틸벤 알파(α)-모노글루코시드, (C)는 프테로스틸벤 베타(β)-모노글루코시드, (D)는 프테로스틸벤 디글루코시드, (E)는 프테로스틸벤 트리글루코시드, (F)는 프테로스틸벤 배당체의 혼합물, (G)는 PD0325901(암 줄기세포 유도 촉진제), (H)는 ATRA (All-trance retinoic acid; 암 줄기 세포 유도 억제제)를 샘플로 한 결과이다. 각 그래프의 종축은 GFP의 상대 강도(%)이고, 횡축은 상기 각 샘플의 농도(㎍/㎖)이다.
도 2는 실시예 2의 MTT 분석 결과를 나타낸다. 각 그래프의 (A) ~ (H)는 각각도 1과 동일한 샘플이다. 각 그래프의 종축은 세포의 생존율(%)이고, 횡축은 상기 각 샘플의 농도(㎍/㎖)이다.

이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 다음 설명에서 사용되는 용어 "포함하는" 또는 "함유하는"은 "본질적으로 이루어진" 및 "로 구성된다"는 의미를 포함한다. 또한, 용어 "질량"은 "중량"으로 읽을 수 있다.

1. 조성물

본 발명의 조성물은 프테로스틸벤 및 그 배당체로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1 종을 함유한다. 또한, 본 발명의 조성물은 줄기 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도를 억제하기 위해 사용될 수 있다.

프테로스틸벤이란, 트랜스-1-(3,5-디메톡시페닐)-2-(4-히드록시페닐)에틸렌 또는 4'-히드록시-3,5-디메톡시-트랜스-스틸벤이라고도 불리는 스틸벤 화합물이다. 프테로스틸벤은 스틸벤 골격을 갖는 폴리페놀이며, 포도 등에 함유되어있다.

본 발명의 조성물에 함유되는 프테로스틸벤의 배당체는, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 프테로스틸벤과 당이 글리코시드 결합된 화합물을 들 수 있다. 이러한 배당체는 생체 적합성을 갖는 링커 등을 통해 글리코시드 결합된 것도 포함한다.

상기 글리코시드 결합은, O-글리코시드 결합에 한정되지 않고, C-글리코시드 결합, N-글리코시드 결합, 또는 S-글리코시드 결합 등을 들 수 있다. 상기한 당이 입수하기 쉬운 것 또는 프테로스틸벤을 비교적 간편하게 배당화할 수 있는 것 등을 이유로, 상기한 글리코시드 결합은 O-글리코시드 결합인 것이 바람직하다. 즉, 프테로스틸벤이 갖는 수산기를 통한 글리코시드 결합인 것이 바람직하다.

상기 프테로스틸벤의 배당체에 있어서, 당과 프테로스틸벤의 글리코시드 결합에 있어서의 아노머(anomer)의 결합 양태는, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에 있어서, 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, α-글리코시드 결합일 수도 있고, β-글리코시드 결합일 수도 있다. 본 발명의 효과를 보다 발휘할 수 있는 관점에서, 상기한 아노머의 결합 양태는 β-글리코시드 결합인 것이 바람직하다.

상기 프테로스틸벤의 배당체에 있어서, 프테로스틸벤에 결합하는 당은, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에 있어서, 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 단당 또는 다당일 수 있다.

상기 단당류는 본 발명의 효과를 나타내는 범위에서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 오시키로스환, 옥세토스환, 피라노스환, 푸라노스환, 셉타노스환, 또는 옥타노스환 구조를 취할 수 있는 알도스 또는 케토스 등을 들 수 있다. 이러한 단당류로서는, 구체적으로는 글루코오스, 말토오스, 갈락토오스 등을 들 수 있고, 글루코오스가 바람직하다. 또한, 상기한 알도스 또는 케토스의 산화체인 우론산, 알돈산, 혹은 알달산, 또는 환원화체인 알디톨 혹은 당 알코올 등도, 상기한 단당류에 포함할 수 있다.

상기 단당류의 입체 구조는 특별히 한정되지 않고, 예를 들면 D체, L체, 또는 라세미체로 할 수도 있다. 상기한 당이 입수하기 쉬운 것 또는 프테로스틸벤을 비교적 간편하게 배당화할 수 있는 것 등을 이유로, 상기 단당류의 입체 구조는 D 체인 것이 바람직하다.

상기한 다당류는, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에 있어서, 특별히 한정되지 않는다. 예를 들면, 오시키로스환, 옥세토스환, 피라노스환, 푸라노스환, 셉타노스환, 또는 옥타노스환 구조를 취할 수 있는, 알도스 또는 케토스로부터 선택되는 적어도 2개 이상의 단당류는 서로 글리코시드 결합된 구조를 갖는 다당류를 들 수 있다. 이러한 다당류를 구성하는 단당류는 모두 동일하거나 각각 다를 수있다. 상기 프테로스틸벤을 비교적 간편하게 배당화 할 수 있기 때문에, 다당류를 구성하는 단당류는 모두 동일한 것이 바람직하다.

상기한 다당류를 구성하는 단당류는, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에 있어서, 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 상기 프테로스틸벤의 배당체에 있어서, 프테로스틸벤에 결합하는 단당과 동일한 단당을 들 수 있다.

상기한 다당류에 있어서, 2개 이상의 단당 사이의 글리코시드 결합의 양태는, O-글리코시드 결합에 한정되지 않고, C-글리코시드 결합, N-글리코시드 결합, 또는 S-글리코시드 결합을 들 수 있다. 기한 당이 입수하기 쉽거나 프테로스틸벤을 비교적 간편하게 배당화할 수 있는 것 등을 이유로, 2개 이상의 단당 사이의 글리코시드 결합의 양태는 O-글리코시드 결합인 것이 바람직하다.또한, 이들 글리코시드 결합의 양태는, 모두가 동일할 필요는 없고, 각각 다른 양태여도 된다. 상기한 프테로스틸벤을 비교적 간편하게 배당화할 수 있는 것 등을 이유로, 상기 하는 2개 이상의 단당 사이의 글리코시드 결합의 양태는 모두 동일한 것이 바람직하다.

상기한 다당류에 있어서의, 2개 이상의 단당 사이의 글리코시드 결합의 아노머 결합 양태는, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에 있어서, 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, α-글리코시드 결합일 수도 있고, β-글리코시드 결합일 수도 있다. 상기한 프테로스틸벤을 비교적 간편하게 배당화할 수 있는 것 등을 이유로, 2개 이상의 단당간의 글리코시드 결합의 아노머 결합 양태는 α-글리코시드 결합인 것이 바람직하다. 또한, 이들 아노머 결합 양태는, 모두가 동일할 필요는 없고, 각각 상이한 아노머 결합 태양이어도 된다. 상기한 프테로스틸벤을 비교적 간편하게 배당화할 수 있는 것 등을 이유로, 상기한 다당류에 있어서, 2개 이상의 단당간의 글리코시드 결합의 아노머 결합 양태는, 모두 동일한 것이 바람직하다.

상기한 다당류에 있어서의, 2개 이상의 단당 사이의 글리코시드 결합에 있어서의 단당의 탄소 번호간의 결합 형태는, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에 있어서, 특별히 한정되지 않는다. 예를 들면, (1-1) 글리코시드 결합, (1-2) 글리코시드 결합, (1-3) 글리코시드 결합, (1-4) 글리코시드 결합, 또는 (1-6) 글리코시드 결합을 들 수 있다. 상기한 당이 입수하기 쉽거나 프테로스틸벤을 비교적 간편하게 배당화할 수 있는 등을 이유로, (1-4) 글리코시드 결합인 것이 바람직하다. 또한, 이들의 결합 양태는 모두 동일할 필요는 없고, 각각 다른 단당의 탄소 번호간의 결합 형태로 할 수도 있다. 상기한 프테로스틸벤을 간편하게 배당화하는 것을 감안하여, 2개 이상의 단당간의 글리코시드 결합에 있어서의 단당의 탄소 번호간의 결합 양태는, 모두 동일한 것이 바람직하다.

상기 프테로스틸벤의 바람직한 양태로서, 예를 들면, 하기 식 (1) 또는 (2)에 나타내는 화합물을 들 수 있다.

[화학식 1]

(식 중, 포도당과 스틸벤 골격의 O-글리코시드 결합은 α 결합 또는 β 결합이다.)

[화학식 2]

(식 중, 글루코오스와 스틸벤 골격의 O-글리코시드 결합은 α 결합 또는 β 결합이고, 글루코오스 간의 O-글리코시드 결합은 모두 α 결합이고, n은 0 내지 8의 정수이다.)

식 (1)로 표시되는 화합물로서, O- 글리코시드 결합은 β 결합 인 것이 더욱 바람직하다.

또한, 본 발명의 조성물에 화학식 (2)로 표시되는 화합물이 함유되는 경우, n은 상이한 정수의 화합물로 구성되는 혼합물로서 함유될 수도 있다. 이러한 혼합물을 구성하는 식 (2)로 표시되는 화합물의 함유 비율은 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, n이 큰 정수의 화합물이 됨에 따라, 그 함유 비율이 적어지는 경향으로 할 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물에 상기한 혼합물이 함유되는 경우, 식 (1)로 표시되는 화합물도 함유할 수도 있다.

이러한 프테로스틸벤의 배당체는, 시장으로부터 입수할 수도 있고, 특허문헌 1 내지 4 등에 기재된 방법을 채용하여 작성할 수도 있다.

본 발명의 프테로스틸벤 및/또는 그 배당체를 함유하는 조성물에 의해 암 줄기 세포로의 유도를 억제하는 대상이 되는 줄기 세포는, 특별히 한정되는 것은 아니다. 이러한 줄기 세포로서 생체 (특히 포유류)에 유지되는 줄기 세포 인 것이 바람직하다. 구체적으로는 배아 줄기 세포, 성체 줄기 세포 등을 들 수 있다. 이러한 성체 줄기 세포는 체성 줄기 세포 또는 조직 줄기 세포라고도 불리며, 암 줄기 세포에 대한 유도 능력을 갖는 것으로 알려진 줄기 세포 인 한 특별히 제한되지 않는다. 구체적으로는, 조혈 줄기 세포, 위성 세포, 장관 줄기 세포, 모포 줄기 세포, 유선 줄기 세포, 간엽계 줄기 세포, 뉴로스페어, 내피 줄기 세포, 후각 점막 줄기 세포, 신경관 줄기 세포, 및 고환 세포 등을 들 수 있다.

본 발명의 조성물에 함유되는 프테로스틸벤 및/또는 그 배당체의 양은, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에 있어서, 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로, 100질량%의 조성물에 대한 프테로스틸벤 및/또는 그 배당체의 함유량을, 0.001 내지 100질량% 정도로 할 수 있다.

본 발명의 조성물에 함유되는 프테로스틸벤 및 그 배당체는, iPS 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도를 저해하는 효과를 발휘한다. 암 세포는 암 줄기 세포로부터 분화되기 때문에, 본 발명의 조성물은 암의 예방 및 / 또는 치료 효과를 발휘한다. 이러한 효과를 발휘할 것을 기대하여, 본 발명의 조성물을, 예를 들면, 음식품 또는 의약의 분야에서 사용할 수 있다.

iPS 세포로 대표되는 줄기 세포를 원료로 재생 의료용의 세포, 조직, 및 장기 등을 제조할 때에, 이들 세포 등의 암화가 문제가 되고 있다. 이러한 문제를 해결하기 위해, 본 발명의 조성물은 줄기 세포를 세포, 조직, 또는 장기 등으로 유도할 때의 암화를 억제하기 위해서도 사용할 수 있다. 보다 구체적으로는, 예를 들어, 줄기 세포를 원료로 재생 의료용의 세포 등을 제조할 때 사용하는 배지에, 예를 들어, 완충액 등의 형태로 첨가할 수 있다.

2. 음식품 조성물

본 발명의 음식품 조성물에 함유되는 유효 성분은, 상기한 본 발명의 조성물에 함유되는 프테로스틸벤 및/또는 그 배당체이다. 프테로스틸벤 및/또는 그 배당체는, 줄기 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도를 저해하는 효과를 발휘하기 때문에, 본 발명의 음식품 조성물은, 암 줄기 세포를 생산하지 않는 효과를 발휘하는 음식품 조성물로 할 수 있다. 암 세포는 암 줄기 세포로부터 분화되기 때문에, 본 발명의 음식품 조성물은 암의 예방 및 / 또는 치료, 바람직하게는 암의 예방에 사용될 수 있다.

본 발명의 음식품 조성물에 함유되는 유효 성분의 양은, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에서 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로, 100질량%의 음식품 조성물에 대한 유효 성분의 함유량을, 0.001 내지 100질량% 정도로 할 수 있다.

본 발명의 음식품 조성물에는, 특정 보건용 식품, 기능성 표시 식품, 및 영양 기능 식품 등의 보건 기능 식품(음료를 포함한다); 영양 보조 식품, 건강 보조 식품, 및 영양 조정 식품 등; 또한 일반 식품 (음료 포함)이 모두 포함될 수 있다. 또한, 본 발명의 음식품 조성물에는, 가축용 사료, 양어용 사료, 및 애완동물 먹이 등의 애완 동물용 사료 등의 사료도 포함할 수 있다. 이들 음식품 조성물은 통상적인 음식물의 형상을 가지고 있으면 되고, 예를 들면, 일반 식품, 음료의 형태(분명 식품) 외에, 줄기 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도를 억제하는 효과를 발휘하는 것을, 음식품의 기능으로서 구할 수 있는 특정 보건용 식품, 또는 기능성 표시 식품으로 할 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 음식품 조성물은, 건강 유지, 건강하게 되는, 매일을 건강하게 보낼 수 있는, 나쁜 산소를 끄는 파워, 암이 신경이 쓰이는 분 등이 구할 수 있다.

본 발명의 음식품 조성물의 형상은, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들면, 청량음료, 탄산음료, 영양음료, 과실음료, 젖산음료 등의 음료; 아이스크림, 빙수 등의 냉과; 껌, 초콜릿, 사탕, 정제, 스낵 과자, 젤리, 잼, 크림, 구미 등의 과자; 메밀, 우동, 즉석면, 중화면 등의 면; 어묵, 햄, 소시지 등의 수산 또는 축산 가공 식품; 가공유, 발효유 등의 유제품; 샐러드유, 마요네즈, 휘핑크림, 드레싱 등의 유지, 또는 유지 가공 식품; 소스, 양념 등의 조미료; 수프, 샐러드, 반찬, 절임, 빵, 또는 시리얼 등을 들 수 있다.

본 발명의 음식품 조성물은, 예를 들어, 분말, 과립, 캡슐, 트로키, 또는 정제(태블릿)와 같은 고형 제제; 시럽 또는 음료 등의 액체 제제 등, 일반적으로 보충제로 제공되는 제형 형태 일 수도 있다.

본 발명의 음식품 조성물의 섭취시키는 대상은, 암 줄기세포로 유도할 수 있는 줄기세포를 유지하는 생체로서, 줄기 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도를 억제하고자 하는 생체인 한, 특별히 한정되지 않는다.

예를 들면, 인간 외, 소, 돼지, 멧돼지, 양, 말, 염소, 당나귀, 곰, 순록, 토끼, 순록, 개구리 등의 가축; 닭, 오리, 거위, 칠면조, 바리켄, 메추라기, 타조, 비둘기, 꿩, 오리 및 우 등의 가금류; 어류, 갑각류, 연체 동물 등의 양식 해산물; 벌, 누에 등의 사육 곤충; 개, 고양이, 설치류, 토끼, 원숭이, 돼지 등, 앵무새, 잉꼬, 뱀, 악어, 거북이, 도롱뇽, 관상어 (금붕어 및 열대어 등), 딱정벌레, 사슴벌레, 거미, 전갈 등의 애완 동물을 꼽는다 수 있습니다.

본 발명의 음식품 조성물의 섭취량은, 적용 대상의 성별, 연령, 당해 식품 식품 조성물의 적용 형태, 원하는 효과의 정도 등에 기초하여 적절히 설정할 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 체중 50g의 마우스라면, 본 발명의 음식품 조성물의 유효 성분을 하루에 0.1mg 내지 1000mg 정도가 되는 양으로 섭취시킬 수 있다. 또한, 마우스 이외의 대상에 대한 섭취량은, 상기한 수치 범위에 기초하여, 그 대상의 체중 등을 감안하여, 적절히 설정할 수 있다.

본 발명의 음식품 조성물을 섭취시키는 간격도, 적용 대상의 성별, 연령, 당해 식품 조성물의 적용 형태, 원하는 효과의 정도 등에 기초하여 적절히 설정할 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 예를 들면, 상기한 본 발명의 음식품 조성물을, 하루에 1회로 섭취시켜도 되고, 2~3회의 복수회의 간격으로 나누어 섭취시켜도 된다. 또한 며칠 내지 몇 주에 한 번의 간격으로 섭취시킬 수도 있다.

3. 의약 조성물

본 발명의 의약 조성물에 함유되는 유효 성분은, 상기 한 본 발명의 조성물에 함유되는 프테로스틸벤 및 / 또는 그 배당체이다. 프테로스틸벤 및/또는 그 배당체는, 줄기 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도를 저해하는 효과를 발휘하기 때문에, 본 발명의 의약 조성물은, 암 줄기 세포를 생산하지 않는 효과를 발휘하는 의약 조성물로 하는 것 수 있습니다. 암 세포는 암 줄기 세포로부터 분화되기 때문에, 본 발명의 약제 학적 조성물은 암의 예방 및 / 또는 치료, 바람직하게는 암의 예방에 사용될 수있다.

본 발명의 의약 조성물에 함유되는 유효 성분의 양은, 본 발명의 효과를 나타내는 범위에서, 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로, 100질량%의 의약 조성물에 대한 유효 성분의 함유량을, 0.001 내지 100질량% 정도로 할 수 있다.

본 발명의 의약 조성물은, 상기 유효 성분과 약학 분야의 조성물을 제조하는데 사용되는 약학 적으로 허용 가능한 공지 된 담체 또는 첨가제를 배합함으로써 제조 될 수있다. 이러한 담체 또는 첨가물은 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에서 특별히 한정되지 않는다. 예를 들어, 임의의 담체, 희석제, 부형제, 현탁제, 윤활제, 보조제, 매질, 전달 시스템, 유화제, 정제 분해 물질, 흡수제, 보존제, 계면활성제, 착색제, 향료 또는 단맛 요금 등을 들 수 있다.

본 발명의 의약 조성물은, 상기한 담체 또는 첨가물을 적절히 조합한, 다양한 제형으로 할 수 있다. 따라서, 본 발명의 의약 조성물의 투여 형태는 본 발명의 효과를 나타내는 범위에서 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로는, 수액제, 매립 주사제, 마이크로니들, 또는 지속성 주사제 등의 주사제; 복막 투석용제 또는 혈액 투석용제 등의 투석용제; 구강내 붕괴정, 씹을 수 있는 정제, 발포정, 분산정, 또는 용해정 등의 정제; 경 캡슐정 또는 연 캡슐정 등의 캡슐제; 발포 과립제, 서방성 과립제, 또는 장용성 과립제 등을 함유하는 과립제; 산제, 엘릭시르제, 현탁제, 유제, 또는 리모나데제 등의 경구액제; 시럽제, 경구 젤리제, 트로키제, 설하정, 박칼정, 부착정, 또는 검제 등의 구강용 정제; 구강용 스프레이제, 구강용 반고형제, 함유제, 흡입 분말제, 흡입액제, 또는 흡입 에어로졸제 등의 흡입제; 안연고제 등의 점안제; 점이제; 점비분말제 또는 점비액제 등의 점비제; 좌제, 직장용 반고형제, 주장제, 질정, 질용 좌제, 또는 외용 산제 등의 외용 고형제; 리니멘트제 또는 로션제 등의 외용액제; 외용 에어로졸제 또는 펌프 스프레이제 등의 스프레이제; 연고제, 크림제, 겔제, 테이프제, 또는 팝제 등의 첩부제 등을 들 수 있다.

본 발명의 의약 조성물의 투여 방법은 상기 각 투약 형태에 최적화되는 공지의 투여 방법인 한 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로는, 경구 투여, 근육내 투여, 정맥내 투여, 동맥내 투여, 거미막하강내 투여, 피내 투여, 복강내 투여, 비강내 투여, 폐내 투여, 안내 투여, 질내 투여 , 경부 내 투여, 직장 내 투여, 또는 피하 투여 등을 들 수 있다.

또한, 본 발명의 의약 조성물의 투여 대상은, 암 줄기 세포로 유도할 수 있는 줄기 세포를 유지하는 생체(암에 걸릴 가능성이 있는 생체)로서, 줄기 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도를 억제하는 것 을 원하는 생체(암의 예방 및/또는 치료되는 것을 원하는 생체)인 한, 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로는, 상기한 음식품 조성물을 섭취시키는 대상과 동일하게 할 수 있다.

본 발명의 의약 조성물의 투여량은, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에 있어서, 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로는, 적용 대상의 성별이나 연령, 당해 의약 조성물의 적용 형태, 원하는 효과의 정도 등에 기초하여, 적절히 설정할 수 있다. 예를 들면, 체중 50g의 마우스이면, 본 발명의 의약 조성물의 유효 성분을, 하루에, 0.1mg 내지 1000mg 정도가 되는 양으로 투여할 수 있다. 또한, 마우스 이외의 대상에 대한 투여량은, 상기한 수치 범위에 기초하여, 그 대상의 체중 등을 감안하여, 적절히 설정할 수 있다.

본 발명의 음식품 조성물의 투여 간격도, 적용 대상의 성별, 연령, 당해 식품 식품 조성물의 적용 형태, 원하는 효과의 정도 등에 기초하여 적절히 설정할 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 예를 들면, 상기한 본 발명의 음식품 조성물은, 1일 1회의 투여로서도 좋고, 2 내지 3회의 복수회의 간격으로 나누어 투여해도 된다. 또한, 수일 내지 수주에 1회의 간격의 투여로 할 수도 있다.

4. 줄기세포용 배지 조성물

본 발명의 줄기세포용 배지 조성물에 함유되는 유효 성분은, 상기한 본 발명의 조성물에 함유되는 프테로스틸벤 및/또는 그 배당체이다. 프테로스틸벤 및/또는 그 배당체는, 줄기세포에서 암 줄기세포로의 유도를 저해하는 효과를 발휘하므로, 본 발명의 줄기세포용 배지 조성물은, 암 줄기세포를 생산하지 않는 효과를 발휘하는 줄기세포용 배지 조성물로 할 수 있다. 암 세포는 암 줄기 세포로부터 분화되기 때문에, 본 발명의 줄기세포용 배지 조성물은, 줄기 세포를 원료로 제조되는 각종 세포, 조직, 또는 장기 등의 암화를 예방하기 위해서 사용할 수 있다.

상기한 줄기세포란, 특별히 한정되지 않는다. 예를 들면, iPS 세포, 배성 줄기 세포, 또는 성체 줄기 세포 등을 들 수 있다. 성체 줄기 세포는 상기 1. 조성물의 기재를 참고할 수 있다.

본 발명의 줄기세포용 배지 조성물에 함유되는 유효 성분의 양은, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에 있어서, 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로, 100질량%의 줄기세포용 배지 첨가제에 대한 유효성분의 함유량을, 0.001 내지 100질량% 정도로 할 수 있다.

본 발명의 줄기세포용 배지 조성물에는, 재생의료 분야에서 줄기 세포를 원료로 각종 장기를 배양하여 얻기 위해 통상 사용되는 분화용 또는 증식용 배지에 함유되는 성분을, 상기 유효 성분 이외에 함유시킬 수 있다. 이러한 분화용 또는 증식용 배지에 함유되는 성분은 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로는, 어떠한 세포, 조직, 또는 장기를 분화시킬 목적의 배양이거나, 또는 배양 대상으로 하는 줄기 세포의 종류 등을 감안하여, 적절히 결정할 수 있다.

본 발명의 줄기세포용 배지 조성물의 형상은, 본 발명의 효과를 발휘하는 범위에 있어서, 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로는, 액체 배지, 고체 배지, 고형 배지, 반고체 배지, 반고형 배지, 2층 배지 등을 들 수 있다.

5. 예방 및/또는 치료 방법

본 발명의 예방 방법은, 암 이환에 대한 예방을 원하는 생체에 프테로스틸벤 및 그 배당체로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1 종을 함유하는 조성물을 접촉시키는 단계를 포함하는 암의 예방 방법이다.

본 발명의 치료 방법은, 암에 걸린 생체에, 프테로스틸벤 및 그 배당체로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 1종을 함유하는 조성물을 접촉시키는 공정을 포함하는, 암의 치료 방법이다.

프테로스틸벤 및 그 배당체로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1 종을 함유하는 조성물은 상기 1. 조성물의 기재를 참고할 수 있다.

본 발명의 구체적인 예방 및 치료 방법은 상기 1. 조성물, 2. 음식품 조성물 및 3. 의약 조성물의 기재를 참고할 수 있다.

[실시예]

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 실시예를 나타낸다.

또한, 본 발명이 이하의 실시예에 기재하는 발명에 한정되지 않는 것은 말할 필요도 없다.

본 실시예에서 샘플로서 사용한 프테로스틸벤 또는 그 배당체는, 이하에 나타내는 6종류의 화합물이다. 이들 화합물의 입수처는 모두 마이스터 바이오사이다.

1. 프테로스틸벤(아글리콘)

2. 프테로스틸벤 α-모노글루코시드

3. 프테로스틸벤 베타-모노글루코시드

4. 하기 식 (2)로 표시되는 프테로스틸벤디글루코시드(n=0)

5. 하기 식 (2)로 표시되는 프테로스틸벤트리글루코시드(n=1)

6. 하기 식 (1)로 표시되는 프테로스틸벤 β-모노글루코시드와 하기 식 (2)로 표시되는 프테로스틸벤폴리글루코시드(n=0~8)의 혼합물

[화학식 2]

(식 중, 글루코오스와 스틸벤 골격의 O-글리코시드 결합은 β결합이며, 글루코오스간의 O-글리코시드 결합은 모두 α결합이다.)

피더리스 배양으로 순화한 마우스 iPS 세포(iPS-MEF-NG-20D-17; 이화학 연구소 BRC)를 암 줄기 세포 유도 배지에 현탁하고, 96 웰 플레이트에, 웰당 1000 세포의 양으로 파종하였다. 암 줄기 세포 유도 배지는 루이스 폐암 세포주 (JCRB 세포 뱅크)의 배양 상등액과 LIF를 함유하지 않는 마우스 iPS 세포용 배지(DMEM High glucose (와코 순약), 15% FBS, 0.1mM NEAA, 2mM L-Glutamine, 50U/ml Pen/Strep, 0.1mM 2-mercaptoethanol)의 혼합 배지이다.

50㎍/㎖의 각 샘플을 함유하는 간 줄기 세포 유도 배지를 조제한 후에 2배의 계열 희석을 행하고, 이들을 각각 웰에 파종한 세포에 노출시켰다. 그 다음날부터 6일째까지, 동일한 샘플 농도를 함유하는 배지를 사용하여, 각 웰의 배양 상등액의 하프 체인지를 행하였다.

컨트롤 실험으로서, 상기 암 줄기 세포 유도 배지에 0.05%의 DMSO를 첨가한 실험을 행하였다. 또한, 상기의 암 줄기 세포 유도 배지로 하는 효과를 발휘하는 0.8~50㎍/㎖의 PD0325901(암 줄기 세포 유도 촉진제; 스템젠트) 및 0.8~50㎍/㎖의 올트랜스레티노산(ATRA:암 줄기 세포) 유도 억제제; Stemgent)를 첨가한 배지를 사용하고, 각각 상기 샘플과 마찬가지로, 첨가하는 최종 농도를 희석하여 사용한 실험도 행하였다.

(실시예 1) 형광 강도의 측정에 의한 암 줄기 세포 유도 억제의 평가

마우스 iPS 세포(iPS-MEF-Ng-20D-17)는, Nanog 유전자의 프로모터 하류에, GFP 유전자가 마련된 핵산을 발현하는 세포이기 때문에, 세포가 미분화된 상태이면 GFP 형광이 강하게 검출된다. 이것을 이용하여, 이 세포에 각 샘플을 노출한 후의 7일째에, 1.0%의 Tween20을 첨가하여 각 세포를 용해하여, 각각의 웰 내의 상대 GFP 형광 강도를 측정하고, 각 세포가 어느 정도의 줄기세포성을 나타내는지를 평가하였다.

마우스 iPS 세포를 암 줄기 세포 유도 배지에서 배양을 계속하면, 암 줄기 세포가 유도된다. 암 줄기 세포는 미분화 세포이기 때문에, 세포 내 Nanog 유전자의 발현에 따라 상대 GFP 형광이 유지되고, 첫날부터 비교하는 7일째까지는 측정되는 GFP 형광 강도가 강해지는 경향을 나타낸다. 각 샘플에서의 상대 GFP 형광 강도를 도 1에 나타낸다.

도 1에 나타내는 그래프는, 상기 샘플의 각 농도에서 얻어진 상대 GFP 형광 강도를, 대조군인 DMSO를 첨가했을 때 얻어지는 상대 GFP 형광 강도에 대하여 산출한 수치이다.

암 줄기 세포의 유도를 촉진하는 PD0325901은, 미분화된 암 줄기 세포의 상태를 유지하기 위해, 19.4㎍/㎖ 이하의 첨가량이어도, 상대 GFP 형광 강도를 100% 이상으로 증강하였다. 또한, 그보다 소량의 0.8㎍/㎖의 첨가량이라도, 상대 GFP 형광 강도는, 70%를 초과하고 있었다. 한편, 간 줄기 세포의 유도를 저해하는 ATRA는, 0.8㎍/㎖의 저농도의 첨가량이어도, 그 상대 GFP 형광 강도는, 100%를 초과하지 않고, 고농도의 첨가량 이에 따라 줄기 세포성을 유지하고 있음을 나타내는 상대 GFP 형광 강도가 떨어지는 경향이되었다. 그러나, 그 강도는 50%를 초과하지 않기 때문에, 사멸한 세포는 거의 없다고 생각된다.

표 1의 그래프에 나타내는 결과로부터, 100%의 상대 GFP 형광 강도를 나타내는 농도(100%점)와 50%의 상대 GFP 형광 강도를 나타내는 농도(50%점)를, 각 샘플마다 산출한 결과를 하기 표 1에 나타낸다.

ug/ml	1	2	3	4	5	6	PD0325901	ATRA
100%점	<1.6	<1.6	<1.6	10.5	5.6	26.6	19.4	<0.8
50%점	5.3	17.6	6.1	20.2	10.4	44.5	>50	48.8

표 1에 나타내는 결과로부터, 각 샘플의 프테로스틸벤 및 그 배당체는 일반적으로 iPS 세포에서 암 줄기 세포로의 유도를 억제하는 것으로 밝혀졌다. 그 중에서도, 프테로스틸벤의 아글리콘(샘플 1), 프테로스틸벤 α-모노글루코시드(샘플 2), 프테로스틸벤 β-모노글루코시드(샘플 3), 프테로스틸벤디글루코시드(샘플 4), 및 프테로스틸벤트리글루코시드(샘플 5)에 의한 효과가 더 우수하다는 것이 밝혀졌다.

(실시예 2) 증식 억제 측정에 의한 암 줄기 세포 유도 억제의 평가

실시예 1과 동일한 조건으로 7일간 배양한 마우스 iPS 세포를, MTT 검정에 제공하였다. 그 결과를 도 2에 나타내고, 이 결과로부터 산출한 IC₅₀값을 표 2에 나타낸다.

ug/ml	1	2	3	4	5	6	PD0325901	ATRA
IC50값	22.2	40.3	16.3	28.0	32.9	-	22.5	9.3

실시예 1에 나타내는 실험 결과로부터, 상기 모든 샘플은 ATAR과 유사하게 분화 유도 능력을 나타내며, 그리고 iPS 세포의 사멸하는 경향이 보이지 않았던 것을 감안하면, MTT 분석 결과는 세포 분화에 의한 증식 억제 정도를 나타내는 것으로 해석될 수 있다. 구체적으로는, IC50값이 낮은 쪽이, 마우스 iPS 세포의 증식이 억제되는 것, 즉 암 줄기 세포로의 유도를 억제하는 효과가 높다고 판단할 수 있다.

그렇다면, 각 샘플의 프테로스틸벤 및 그 배당체는 일반적으로 iPS 세포에서 암 줄기 세포로의 유도를 억제하는 효과를 발휘하는 것이 분명해졌다. 그 중에서도, 프테로스틸벤의 아글리콘(샘플 1), 프테로스틸벤 β-모노글루코시드(샘플 3), 및 프테로스틸벤디글루코시드(샘플 4)에 의한 효과가 보다 우수하다는 것이 판명되었다.

Claims (7)

1. 프테로스틸벤(pterostilbene) 및 그 배당체로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 1 종을 함유하는 줄기 세포로부터 암 줄기 세포로의 유도를 억제하기 위해 사용되는 암 예방 조성물.
   
2. 프테로스틸벤 배당체를 함유하는,줄기세포에서 암 줄기세포로의 유도를 억제하기 위해 사용되는 암 예방 조성물.
   
3. 제2항에 있어서,
   상기 프테로스틸벤 배당체가, 프테로스틸벤과 당이 O-글리코시드 결합 구조를 갖는, 암 예방 조성물.
   
4. 제3항에 있어서,
   상기 O-글리코시드 결합이, β-글리코시드 결합인, 암 예방 조성물.
   
5. 제 2 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 프테로스틸벤 배당체가, 하기 식 (1) 또는 (2)로 표시되는, 암 예방 조성물.
   [화학식 1]
   

   

   
   (식 중, 포도당과 스틸벤 골격의 O-글리코시드 결합은 β 결합이다.)
   [화학식 2]
   

   

   
   (식 중, 포도당과 스틸벤 골격의 O-글리코시드 결합은 β 결합이고, 포도당 사이의 O-글리코시드 결합은 모두 α 결합이고, n은 0 내지 8의 정수이다.)
   
6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서
   상기 줄기세포가, iPS 세포, 배아 줄기 세포, 또는 성체 줄기 세포인, 암 예방 조성물.
   
7. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서
   의약 조성물 또는 음식품 조성물인, 암 예방 조성물.
   

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