JP2014206551A - データ表示方法、プログラム、データ解析装置及び微小粒子分析システム - Google Patents
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Abstract
Description
前記複数の微小粒子は、2以上の色素で修飾された微小粒子又はそれぞれ異なる色素で修飾された2種以上の微小粒子とすることもできる。
また、前記検出データは、複数の微小粒子を連続して検出することにより取得されたものとすることもできる。
更に、前記検出データを一旦保存し、前記保存されたデータを読み出して積算又は平均化することもできる。
更にまた、前記蛍光スペクトルの表示形態は、例えば、密度プロット、ドットプロット又は等高線プロットとすることもできる。
また、この表示方法では、前記検出データの積算数に応じて色を変えて表示することもできる。
更に、前記蛍光スペクトルから選択された特定領域のデータのみを抽出して表示してもよい。
その場合、抽出されたデータを、例えば二次元プロット表示することもできる。
更にまた、前記検出データは、電圧パルスの高さ、幅及び面積のうち少なくとも1種とすることもできる。
本発明に係るデータ解析装置は、流路を通流する微小粒子から発せられた蛍光を、複数の波長領域で同時に検出して得た検出データを、複数の微小粒子分積算又は平均して得た蛍光スペクトルを、表示装置に表示させる。
本発明に係る微小粒子分析システムは、流路を通流する微小粒子に励起光を照射する光照射部、前記微小粒子から発せられた蛍光を、複数の波長領域で同時に検出する検出部、を備える測定装置と、前記測定装置で検出した各波長領域の光を電圧パルスに変換する変換部、前記変換部で変換された電圧パルスを定量化して検出データとする解析部、を備える解析装置と、各波長領域における検出データをスペクトル表示する表示装置と、を有し、前記流路に2以上の微小粒子を通流させ、複数の微小粒子の検出データを積算又は平均して得た蛍光スペクトルを前記表示装置に表示する。
1.第1の実施の形態
(スペクトル表示の方法の例)
2.第2の実施の形態
(スペクトル表示する微小粒子分析装置の例)
[全体構成]
先ず、本発明の第1の実施形態のデータ表示方法について説明する。本実施形態のデータ表示方法においては、細胞やマイクロビーズなどの微小粒子から発せられた蛍光を、複数の波長領域で同時に検出し、波長領域毎の検出データをスペクトル表示する。
本実施形態のデータ表示方法では、光検出器により検出された光を、波長領域毎に電圧パルス(電気的信号)に変換し、定量化して検出データとする。具体的には、電圧パルスの高さ、幅又は面積を求めて、検出データとする。
本実施形態のデータ表示方法では、前述した方法で求めた波長領域毎の検出データを、スペクトル表示する。その表示方法は、特に限定されるものではないが、例えば、密度プロット、ドットプロット又は等高線などが挙げられる。また、表示されているスペクトルから特定領域のデータのみを抽出し、そのスペクトラムチャートを拡大表示したり、ヒストグラムや二次元プロットを表示したりすることもできる。
[装置の全体構成]
次に、本発明の第2の実施形態に係る微小粒子分析装置について説明する。図1は本実施形態の微小粒子分析装置の構成を示す図であり、図2はその測定結果の表示例を示す図である。図1に示すように、本実施形態の微小粒子分析装置1には、少なくとも、検出部2と、変換部3と、解析部4と、表示部5が設けられている。
検出部2は、分析対象の微小粒子から発せられた蛍光を、複数の波長領域で同時に検出可能な構成であればよい。具体的には、波長領域毎にその波長領域を検出可能なセンサを配置した構成や、多チャンネル光電子倍増管(Photo-Multiplier Tube:PMT)などのように複数の光を同時に検出可能な検出器を備えた構成とすることができる。この検出部2で検出する波長領域の数、即ち、検出部2に配設される検出器のチャンネル数又はセンサ数などは、使用する色素の数以上であればよいが、現在のマルチカラー分析では6〜8色が一般的で、最大でも10〜12色であることから、12以上であることが好ましい。
変換部3は、検出部2で検出した各波長領域の光を、それぞれ電圧パルス(電気的信号)に変換するものであり、例えばADコンバータなどを使用することができる。
解析部4では、電子計算機などを用いて変換部3で変換された電圧パルスを処理して定量化し、検出データとする。具体的には、電圧パルスの高さ(peak)、幅(width)又は面積(integral)を求め、これらを検出データとして使用する。そして、その結果は、波長領域毎に関連付けられ、記憶部(図示せず)などに保存される。
表示部5は、解析部4での処理で得た検出データ、即ち、本実施形態の微小粒子分析装置1の測定結果を表示するものである。具体的には、表示部5には、例えば、図2に示すように、横軸に検出部のチャンネル番号をとり、縦軸に強度をとって、チャンネル毎の蛍光強度を示した「密度プロット」などが表示される。このとき、チャンネル番号が大きくなるに従い、検出波長が高くなるようにすると、検出光(蛍光)のスペクトラム情報が得られる。
次に、本実施形態の微小粒子分析装置1の動作について説明する。本実施形態の微小粒子分析装置1で分析とする微小粒子は、特に限定されるものではないが、例えば細胞やマイクロビーズなどが挙げられる。また、これら微小粒子を修飾する蛍光色素の種類及び数も、特に限定されるものではなくFITC(fluorescein isothiocyanete:C21H11NO5S)、PE(phycoerythrin)、PerCP(periidinin chlorophyll protein)、PE−Cy5及びPE−Cy7などの公知の色素を、必要に応じて適宜選択して使用することができる。更に、各微小粒子が複数の蛍光色素で修飾されていてもよい。
2 検出部
3 変換部
4 解析部
5 表示部
Claims (12)
- 流路を通流する微小粒子から発せられた蛍光を、複数の波長領域で同時に検出して得た検出データを、複数の微小粒子分積算又は平均して得た蛍光スペクトルを表示するデータ表示方法。
- 前記複数の微小粒子は、2以上の色素で修飾された微小粒子又はそれぞれ異なる色素で修飾された2種以上の微小粒子である請求項1に記載のデータ表示方法。
- 前記検出データは、複数の微小粒子を連続して検出することにより取得されたものである請求項1又は2に記載のデータ表示方法。
- 前記検出データを一旦保存し、前記保存されたデータを読み出して積算又は平均化する請求項1又は2に記載のデータ表示方法。
- 前記蛍光スペクトルの表示形態が、密度プロット、ドットプロット又は等高線プロットである請求項1〜4のいずれか1項に記載のデータ表示方法。
- 前記検出データの積算数に応じて色を変えて表示する請求項5に記載のデータ表示方法。
- 更に、前記蛍光スペクトルから選択された特定領域のデータのみを抽出して表示する請求項1〜6のいずれか1項に記載のデータ表示方法。
- 抽出されたデータを二次元プロット表示する請求項7に記載のデータ表示方法。
- 前記検出データは、電圧パルスの高さ、幅及び面積のうち少なくとも1種である請求項1〜8のいずれか1項に記載のデータ表示方法。
- 解析部で、流路を通流する微小粒子から発せられた蛍光を、複数の波長領域で同時に検して得た検出データを、複数の微小粒子分積算又は平均する演算機能と、
表示部に、前記演算機能により得た蛍光スペクトルを表示させる機能を、
コンピュータに実行させるプログラム。 - 流路を通流する微小粒子から発せられた蛍光を、複数の波長領域で同時に検出して得た検出データを、複数の微小粒子分積算又は平均して得た蛍光スペクトルを、表示装置に表示させるデータ解析装置。
- 流路を通流する微小粒子に励起光を照射する光照射部、
前記微小粒子から発せられた蛍光を、複数の波長領域で同時に検出する検出部、
を備える測定装置と、
前記測定装置で検出した各波長領域の光を電圧パルスに変換する変換部、
前記変換部で変換された電圧パルスを定量化して検出データとする解析部、
を備える解析装置と、
各波長領域における検出データをスペクトル表示する表示装置と、
を有し、
前記流路に2以上の微小粒子を通流させ、
複数の微小粒子の検出データを積算又は平均して得た蛍光スペクトルを前記表示装置に表示する微小粒子分析システム。
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