JP2014090703A - 細胞培養担体とその製造方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】培養凹部7を有する細胞培養担体6である。細胞培養担体6に複数の培養凹部7を設けた。培養凹部の底面から下方向に向かう個別流入路21、複数の個別流入路21と導通する幹線流入路22、培養凹部の上面から横方向に向かう溢流路24を設けた。複数の培養凹部は溢流路を介在して導通している。個別流入路はその断面の面積が19.5μm2以上1970μm2以下である。細胞培養担体6は可視光透明であって、不透水の性質を有する。
【選択図】図1
Description
(1)従来型容器も改良型担体もスフェロイドは壁面に接着するので、スフェロイドの取出しに剥離処理が必要となる。改良型担体は2段構造になっていて、上部材を取外すことによりスフェロイド取出しを容易化する工夫はあるが、依然として剥離処理は必要である。
(2)改良型担体は下部材に多孔質材料を用いて、スフェロイドへの栄養と老廃物の出入りが出来るようになっている。その反面、多孔質材料は可視光不透明であり、顕微鏡による細胞培養担体内のスフェロイド成長の経過観察ができない。
(3)スフェロイド内を低酸素状態にすると、スフェロイドの長期保存に有効である。スフェロイド内を低酸素状態にするためには大きなスフェロイドが必要となるが、従来型容器や改良型担体で大きなスフェロイドまで培養するとスフェロイドは自重により球形が保てなくなる。
細胞培養担体(6)に複数の培養凹部(7)を設け、
前記培養凹部の底面から下方向に向かう個別流入路(21)、複数の前記個別流入路と導通する幹線流入路(22)、前記培養凹部の上面から横方向に向かう溢流路(24)を設け、前記複数の培養凹部は前記溢流路を介在して導通していて、
前記個別流入路はその断面の面積が19.5μm2以上1970μm2以下であり、
前記細胞培養担体は可視光透明であって、不透水の性質を有する。
0.4Dop≦H≦0.6Dop 式(1)
前記細胞培養担体は、下層板の上に中層板を積層し、前記中層板の上に上層板を積層したものであって、
前記幹線流入路は前記下層板に形成され、
前記個別流入路は前記中層板に形成され、
前記培養凹部と前記溢流路は前記上層板に形成され、
前記下層板と前記上層板は原型の形状を転写して作成された合成樹脂板であり、
前記中層板は露光操作と現像操作によって所望の形状を作成したフォトレジスト膜であってもよい。
ポンプの送液出口である送液口と幹線流入路の入口である幹線流入路入口を接続し、前記溢流路の一部分を廃液口とし、
前記ポンプから培養液を前記培養凹部に送り、廃液口から廃棄する。
本発明にかかる細胞培養担体の製造方法であって、
下層板の上に中層板を積層し、前記中層板の上に上層板を積層して製造するものであって、
前記幹線流入路は前記下層板に形成され、
前記個別流入路は前記中層板に形成され、
前記培養凹部と前記溢流路は前記上層板に形成され、
前記下層板と前記上層板は原型の形状を転写して作成した合成樹脂板であり、
前記中層板はフォトレジストを膜状にしてフォトレジスト膜を形成し、前記フォトレジスト膜を露光して露光フォトレジスト膜を作成し、前記露光フォトレジスト膜を現像して所望の形状の前記中層板としたものである。
0.4Dop≦H≦0.6Dop 式(1)
この比率範囲にあれば凹部である培養凹部の加工が容易だからである。
6 第一の細胞培養担体
7 第一の培養凹部
8 培養凹部列
9 切断面
16 第二の細胞培養担体
17 第二の培養凹部
18 培養凹部列
19 切断面
21 個別流入路
22 幹線流入路
23 幹線流入路入口
24 溢流路
25 廃液口
51 下層板
52 中層板
53 上層板
61 台
62 薄層状のフォトレジスト
63 フォトマスク
64 フォトレジスト型
65 PDMS
H 培養凹部の高さ
Dop 円形状である培養凹部上端面の直径
Claims (6)
- 培養凹部を有する細胞培養担体において、
細胞培養担体に複数の培養凹部を設け、
前記培養凹部の底面から下方向に向かう個別流入路、複数の前記個別流入路と導通する幹線流入路、前記培養凹部の上面から横方向に向かう溢流路を設け、前記複数の培養凹部は前記溢流路を介在して導通していて、
前記個別流入路はその断面の面積が19.5μm2以上1970μm2以下であり、
前記細胞培養担体は可視光透明であって、不透水の性質を有する細胞培養担体。 - 前記培養凹部の上端面の形状が円であり、その直径(Dop)が50μm以上2000μm以下である請求項1に記載した細胞培養担体。
- 前記培養凹部の上端面の形状が円であり、その直径をDopとし、前記培養凹部についてその高さをHとしたとき、下式(1)を満たす請求項1又は2いずれかに記載した細胞培養担体。
0.4Dop≦H≦0.6Dop 式(1) - 前記細胞培養担体は、下層板の上に中層板を積層し、前記中層板の上に上層板を積層したものであって、
前記幹線流入路は前記下層板に形成され、
前記個別流入路は前記中層板に形成され、
前記培養凹部と前記溢流路は前記上層板に形成され、
前記下層板と前記上層板は原型の形状を転写して作成された合成樹脂板であり、
前記中層板は露光操作と現像操作によって所望の形状を作成したフォトレジスト膜である請求項1から3いずれかに記載した細胞培養担体。 - 請求項1から4いずれかに記載した細胞培養担体とポンプからなり、
ポンプの送液出口である送液口と幹線流入路の入口である幹線流入路入口を接続し、前記溢流路の一部分を廃液口とし、
前記ポンプから培養液を前記培養凹部に送り、廃液口から廃棄する細胞培養装置。 - 請求項1に記載した細胞培養担体の製造方法において、
下層板の上に中層板を積層し、前記中層板の上に上層板を積層して製造するものであって、
前記幹線流入路は前記下層板に形成され、
前記個別流入路は前記中層板に形成され、
前記培養凹部と前記溢流路は前記上層板に形成され、
前記下層板と前記上層板は原型の形状を転写して作成した合成樹脂板であり、
前記中層板はフォトレジストを膜状にしてフォトレジスト膜を形成し、前記フォトレジスト膜を露光して露光フォトレジスト膜を作成し、前記露光フォトレジスト膜を現像して所望の形状の前記中層板としたものである、細胞培養担体の製造方法。
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JP2020094044A (ja) * | 2018-12-12 | 2020-06-18 | 株式会社日本触媒 | ヒアルロン酸含有スフェロイド及びその作製方法 |
JPWO2020013207A1 (ja) * | 2018-07-10 | 2021-06-24 | 株式会社日本触媒 | 細胞培養用シート |
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JP2007504816A (ja) * | 2003-09-10 | 2007-03-08 | オバチュアー リサーチ インコーポレイティド | 細胞、胚または、卵母細胞を取り扱う装置と方法 |
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JPN6014043633; 化学工学 Vol.55, No.2 P:121-122, 1991 * |
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