JP2013542998A

JP2013542998A - 安全な化学的ミトコンドリア脱共役剤を用いたｉｉ型糖尿病及び糖尿病関連疾患の治療

Info

Publication number: JP2013542998A
Application number: JP2013539980A
Authority: JP
Inventors: ジン，シェンカン
Original assignee: University of Medicine and Dentistry of New Jersey
Current assignee: University of Medicine and Dentistry of New Jersey
Priority date: 2010-11-16
Filing date: 2011-11-16
Publication date: 2013-11-28
Anticipated expiration: 2031-11-16
Also published as: US20130231312A1; CA2846227A1; EP2640373A4; WO2012068274A8; WO2012068274A9; EP2640373A1; JP5770304B2; CN103415287A; WO2012068274A1

Abstract

本願は、ＩＩ型糖尿病、及び糖尿病関連障害又は合併症の症状を治療、予防及び／又は軽減する方法を開示する。本発明は、ほとんど副作用がないこと、及び低毒性により特徴付けられる、血漿グルコース濃度の上昇及びインスリン抵抗性に関連する障害及び症状を治療及び管理する新規アプローチを提供する。特に、本発明は、血漿グルコース濃度及び細胞のエネルギー効率を低減することにより、血液グルコースをコントロールし、インスリン感受性を増大することができる、２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物及び誘導体、及びその組成物を提供する。

Description

関連出願の相互参照
本出願は、米国特許法第１１９（ｅ）条の下、米国仮特許出願シリアル番号第６１／４１４，０３０号（２０１０年１１月１６日出願）（全体として参照により本明細書に組み込まれる）に対する優先権を主張する。

発明の分野
本発明は、ミトコンドリアの脱共役を介して、ＩＩ型糖尿病、並びに関連障害及び合併症を治療及び／又は予防するための、化合物、組成物、及び新規方法に関する。

連邦政府資金による研究の記載
本明細書に記載の発明は、全体又は一部、米国立衛生研究所からの助成金（助成金番号１Ｒ０１ＣＡ１１６０８８及び１Ｒ０１ＡＧ０３００８１）によりサポートされた。アメリカ合衆国政府は、本発明においてある種の権利を有する。

発明の背景
ＩＩ型糖尿病は、血漿グルコース濃度の上昇、及び末梢組織のインスリン抵抗性により特徴付けられる成人発症代謝疾患である。ＩＩ型糖尿病は、アメリカ合衆国単独でも約２０００万人を苦しめている。ＩＩ型糖尿病患者における高血糖状態が、集中的に薬物コントロールされないと、重篤かつ時に致命的な合併症（例えば、心血管疾患、心臓発作、腎不全、胃腸疾患、壊疽、及び失明）が、患者において急に発症し得る。肥満は、ＩＩ型糖尿病の発症リスクを増加するが、ＩＩ型糖尿病を引き起こすのに十分ではなく、また、ＩＩ型糖尿病の発症に必要ではない。肥満個体の大部分は糖尿病を発症しておらず、かつＩＩ型糖尿病患者は必ずしも肥満とは限らない。ＩＩ型糖尿病調査における最近の研究により、ＩＩ型糖尿病を引き起こすのは肥満自体ではないことが示された。むしろ、インスリン抵抗性、及びそれ故ＩＩ型糖尿病の発症の原因となるのは、肝臓及び骨格筋における脂質の異常蓄積である(Samuel V.T., et al., Lancet, 2010, 375:2267-77)。

不幸なことに、現在、ＩＩ型糖尿病の治療法は存在しない。ＩＩ型糖尿病患者は、余生を、高血糖症状を制御するための薬物療法に頼っている。現在、多数の薬物が、血糖コントロールに関与する種々の過程を標的にするのに利用可能であり、メトホルミン（肝臓のグルコース新生を阻害する）、スルホニル尿素（インスリン分泌を増加する）、チアゾリジンジオン（脂肪の脂質代謝を改善する）、グルコシダーゼ阻害剤（グルコース吸収を低減する）、ＧＬＰ−１類似体、アミリン類似体、ＤＰＰ−４阻害剤（全てが満腹感を増加させ、グルカゴンを低減する）、及びインスリン補充を含む。これらの薬物は、単独療法として、又は併用して用いられる。しかしながら、これらの治療に対する耐性又は抵抗性が、結局、患者において発生する。それ故、単独療法として用いるか、及び／又は既存の療法と併用して用いて、疾患の進行を遅らせることができる、新たな作用機序を有する新規抗糖尿病薬の開発が、糖尿病療法の改善における研究の優先事項である。

発明の概要
本発明は、ＩＩ型糖尿病及び肥満を治療及び予防するための組成物及び方法を提供することにより、糖尿病療法を改善するよう設計されている。本発明は、現在の治療方法の副作用及び欠点のない、化合物２’，５−ジクロロ−４’−ニトロサリチルアニリド及び関連化合物（血漿グルコース濃度を有効に低減し、インスリン感受性を増加し、そして細胞のエネルギー効率を低減するためにミトコンドリア脱共役活性を有する）を使用することによる、血液グルコースコントロールの新規臨床手段を提供する。

２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物のファミリー（そのうちいくつかは、以前、駆虫剤として用いられていた）は、マウスに投与したとき、ＩＩ型糖尿病の治療及び予防に有効であることが示された。これらの化合物の急性投与は、血漿グルコース濃度を有効に低減する。長期経口投与は、インスリン感受性を増加させ、空腹時グルコース及びインスリンレベルを低減する。これらの結果は、ミトコンドリア脱共役及びミトコンドリアのエネルギーサイクルの崩壊に起因する。単離ミトコンドリア、又は培養細胞で分析したとき、インビボにおける血漿濃度に相当する濃度でこれらの化合物は、ＡＴＰを産生することなく、ミトコンドリアを脱共役し、ミトコンドリア燃料の酸化を刺激する。これらの化合物のミトコンドリア脱共役活性を無効にする化学修飾はまた、抗糖尿病効果も無効にする。げっ歯動物及びヒトにおけるこの化合物ファミリーのいくつかのメンバーの安全性は、十分に確立されている。

従って、１つの態様において、本発明は、ＩＩ型糖尿病、及び関連障害又は合併症の治療及び予防における２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物、ベンゾイミダゾール、Ｎ−フェニルアントラニル酸塩、フェニルヒドラゾン、サリチル酸、アシルジチオカルバジン酸塩、クマリン、及びミトコンドリア脱共役活性を有する芳香族アミンを含むが、これらに限定されない化合物類に由来する、化合物ファミリーの使用を提供する。

別の態様において、本発明は、２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物又は他のミトコンドリア脱共役剤のファミリーを用いた、ＩＩ型糖尿病及びその症状の治療方法を提供する。特に、本発明の使用に適した２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物は、式（Ｉ）：

（式中、
Ｒ^１及びＲ^１１は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、又はインビボで加水分解されて、水素となる保護基であり；
Ｒ^２〜Ｒ^１０は、水素、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−ＯＲ^２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^２１、及び−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^２２からそれぞれ独立して選択され（式中、Ｒ^２０、Ｒ^２１、及びＲ^２２は、それぞれ独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、又はＣ_１−Ｃ_６アルケニルであり、かつそれぞれのアルキル、アルケニル、アルキニル、又はハロアルキルは、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、−ＣＮ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、及びオキソ（＝Ｏ）から独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基で場合により置換されている）；
Ｒ^ａ及びＲ^ｂは、それぞれ独立して水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；
ここで、Ｒ^２〜Ｒ^５の少なくとも１つは、水素ではなく、Ｒ^６〜Ｒ^１０の少なくとも１つは、水素ではない）
の化合物、又はその医薬的に許容される塩、溶媒和物、又はプロドラッグを含む。

別の態様において、本発明は、前ＩＩ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、肥満、及び肥満関連障害及び合併症を含むが、これらに限定されない代謝及び代謝関連疾患又は障害を予防する方法を提供する。

別の態様において、本発明は、ＩＩ型糖尿病を含むが、これに限定されない、肥満、その症状及び関連する状態を治療するためにこれらの化合物を使用する方法を提供する。

別の態様において、本発明は、血漿グルコースを低減することによる、長期慢性疾患管理に対する新規アプローチを提供する。

別の態様において、本発明は、式（Ｉ）：

（式中、
Ｒ^１及びＲ^１１は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、又はインビボで加水分解されて水素となる保護基であり；
Ｒ^２〜Ｒ^５は、独立して、少なくとも１つは、−ＯＨ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、及びトリハロ−メチルからなる群より選択され；残りは、−Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルケニル、Ｃ_１−６アルキニル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６ハロアルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、及びフェニルから選択され（ここで、ヘテロアリール又はフェニルは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＦ_３、及びメトキシから独立して選択される１〜５個の置換基で場合により置換されている）；
Ｒ^６〜Ｒ^１０は、独立して、少なくとも１つは、−ＯＨ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、及びトリハロ−メチルからなる群より選択され；残りは、−Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルケニル、Ｃ_１−６アルキニル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６ハロアルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、及びフェニルから選択され（ここで、ヘテロアリール又はフェニルは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＦ_３、及びメトキシから独立して選択される１〜５個の置換基で場合により置換されている）
の化合物、又はその医薬的に許容される塩、溶媒和物、又はプロドラッグを提供する。

別の態様において、本発明は、上述の化合物のいずれかを含有する組成物を提供する。

別の態様において、本発明は、糖尿病、特に、ＩＩ型糖尿病、及び糖尿病関連疾患又は合併症の治療又は予防における、上で定義された化合物の使用を提供する。

別の態様において、本発明は、糖尿病、及び関連疾患又は合併症の長期管理のための、上で定義された化合物又は組成物の使用を提供する。

本発明は、いずれの動作理論にも制限されないが、ＩＩ型糖尿病は、末梢組織におけるインスリン抵抗性により引き起こされ、高血糖により特徴付けられると信じられており、血液グルコースの低減は、ＩＩ型糖尿病を治療する最も重要な治療ゴールである。ミトコンドリアは、グルコース及び脂質代謝の重要な小器官である。

別の具体的な態様において、本発明は、糖尿病状態の治療のため、５−クロロ−サリチル−（２−クロロ−４−ニトロ）アニリド２−アミノエタノール塩（ＣＳＡＡ）を、ミトコンドリア脱共役剤として用いる。ｄｂ／ｄｂ糖尿病マウス又は高脂肪食餌誘導性前糖尿病マウスへのＣＳＡＡの腹腔内（Ｉ．Ｐ．）注射は、血漿グルコースレベルの効果的な減少を導く。このことは、肝臓、骨格筋、及び他の組織における増加したＡＭＰＫ（５'アデノシン１リン酸−活性化タンパク質キナーゼ）活性及び増加したグルコース取り込みと関連する。

別の態様において、本発明は、長期疾患管理の方法を提供する。ＣＳＡＡを食餌に加えることによる慢性経口治療は、ｄｂ／ｄｂ糖尿病マウスにおける空腹時血液グルコースレベルを劇的に低減する。同様に、ＣＳＡＡと共に、高脂肪食餌誘導性前糖尿病マウスに慢性的に給餌することは、空腹時血液グルコース及びインスリンレベルを多いに低減し、インスリン感受性を増大する。ＣＳＡＡが培養細胞においてミトコンドリアを脱共役する濃度は、経口投与後、文書化された血漿ＣＳＡＡの範囲内にある。重要なことに、ミトコンドリアの脱共役活性に必須である２−ＯＨ基を２−Ｏ−ＳＯ_２Ｈに変えることにより、血漿グルコース濃度の低減におけるＣＳＡＡの有効性が完全に無効になる。インスリン感受性を増大することに対するＣＳＡＡの慢性効果は、肝臓又は筋肉における脂質負荷の低減に起因し得る。

図１は、５−クロロ−サリチル−（２−クロロ−４−ニトロ）アニリド２−アミノエタノール塩（ＣＳＡＡ）での急性治療が、糖尿病ｄｂ／ｄｂマウス及び高脂肪食餌誘導性前糖尿病マウスにおいて、血液グルコースレベルを効果的に低減することを説明する。（Ａ）ＣＳＡＡの構造。図１は、５−クロロ−サリチル−（２−クロロ−４−ニトロ）アニリド２−アミノエタノール塩（ＣＳＡＡ）での急性治療が、糖尿病ｄｂ／ｄｂマウス及び高脂肪食餌誘導性前糖尿病マウスにおいて、血液グルコースレベルを効果的に低減することを説明する。ＣＳＡＡ治療の際の（Ｂ）ｄｂ／ｄｂマウスにおける血液グルコース濃度。６週齢のｄｂ／ｄｂマウスを、用量１００μｇ／マウスで、Ｉ．Ｐ．経路を介してＣＳＡＡで治療した。マウスを、ＣＳＡＡ注射に先立ち５時間絶食状態に置いた。血液グルコース濃度を、注射後示した時間ポイントで測定し、時間０（無治療）（１００％と設定した）での濃度に対して正規化した。ＵＴ，無治療；ＣＳＡＡ，ＣＳＡＡ治療；＊，Ｐ＜０．０５；＊＊，Ｐ＜０．０１；＊＊＊，Ｐ＜０．００１；各実験セットにおいてｎ＝６対。図１は、５−クロロ−サリチル−（２−クロロ−４−ニトロ）アニリド２−アミノエタノール塩（ＣＳＡＡ）での急性治療が、糖尿病ｄｂ／ｄｂマウス及び高脂肪食餌誘導性前糖尿病マウスにおいて、血液グルコースレベルを効果的に低減することを説明する。ＣＳＡＡ治療の際の（Ｃ）Ｃ５７／Ｂｌ６マウスにおける血液グルコース濃度。６週齢の高脂肪食餌（６０％脂肪カロリー）を１０週間与えたＣ５７／Ｂｌ６野生型マウス（開始時５週齢）を、用量１００μｇ／マウスで、Ｉ．Ｐ．経路を介してＣＳＡＡで治療した。マウスを、ＣＳＡＡ注射に先立ち５時間絶食状態に置いた。血液グルコース濃度を、注射後示した時間ポイントで測定し、時間０（無治療）（１００％と設定した）での濃度に対して正規化した。ＵＴ，無治療；ＣＳＡＡ，ＣＳＡＡ治療；＊，Ｐ＜０．０５；＊＊，Ｐ＜０．０１；＊＊＊，Ｐ＜０．００１；各実験セットにおいてｎ＝６対。図２は、ＡＭＰＫを活性化し、グルコース取り込みを増大するＣＳＡＡ塩での急性治療を説明する。（Ａ）ＣＳＡＡ治療の際の肝臓及び筋肉組織におけるリン酸化ＡＭＰＫのレベル。Ｃ５７／Ｂｌ６マウスを、食塩水又はＣＳＡＡ含有食塩水のいずれかで、Ｉ．Ｐ．用量１００μｇ／マウスで治療した。０、２、又は４時間後、マウスを屠殺し、肝臓可溶化物を、免疫ブロットにより分析し、リン酸化ＡＭＰＫのレベルを検出した。未リン酸化ＡＭＰＫ及びＲＡＮのレベルも対照として測定した。図２は、ＡＭＰＫを活性化し、グルコース取り込みを増大するＣＳＡＡ塩での急性治療を説明する。（Ｂ）ＣＳＡＡ治療後の種々の組織におけるグルコース取り込み率。Ｃ５７／Ｂｌ６マウスを３時間絶食状態にし、続いて食塩水、又はＣＳＡＡ含有食塩水で、Ｉ．Ｐ．用量１００μg/マウスで治療した。１．５時間後、^３Ｈ−２−デオキシグルコース（０．５μCi/g体重）をＩ．Ｐ．注射した。３０分後、マウスを、麻酔で治療し、ＰＢＳで灌流した。次に、マウスを屠殺し、^３Ｈ−２−デオキシグルコース蓄積の測定のため、組織を抽出した（組織量に対して正規化した）。ＵＴ，無治療；ＣＳＡＡ，ＣＳＡＡ治療；＊，Ｐ＜０．０５；＊＊，Ｐ＜０．０１。データは、２回の独立した実験の代表的な結果である。図３は、２週間の経口ＣＳＡＡ治療が、ｄｂ／ｄｂマウスにおける空腹時血液グルコース濃度をほぼ正常レベルまで低減することを説明する。ｄｂ／ｄｂマウスにおける、（Ａ）空腹時グルコース濃度。６週齢のｄｂ／ｄｂマウスに、通常のＡＩＮ−９３Ｍ食餌又は１５００ｐｐｍＣＳＡＡ塩含有ＡＩＮ−９３Ｍのいずれかを２週間与えた。マウスの空腹時血液グルコースレベルを測定した（体重ｇに対して正規化）。ＵＴ，無治療（ｎ＝６）；ＣＳＡＡ，ＣＳＡＡ治療（ｎ＝３），＊＊＊Ｐ＜０．００１。図３は、２週間の経口ＣＳＡＡ治療が、ｄｂ／ｄｂマウスにおける空腹時血液グルコース濃度をほぼ正常レベルまで低減することを説明する。ｄｂ／ｄｂマウスにおける、（Ｂ）食餌取り込み。６週齢のｄｂ／ｄｂマウスに、通常のＡＩＮ−９３Ｍ食餌又は１５００ｐｐｍＣＳＡＡ塩含有ＡＩＮ−９３Ｍのいずれかを２週間与えた。マウスの食餌取り込みを測定した（体重ｇに対して正規化）。ＵＴ，無治療（ｎ＝６）；ＣＳＡＡ，ＣＳＡＡ治療（ｎ＝３），＊＊＊Ｐ＜０．００１。図４は、長期経口ＣＳＡＡ治療が高脂肪食餌誘導性前糖尿病マウスにおいて、血液グルコース及びインスリンレベルを低減することを説明する。正常Ｃ５７／Ｂｌ６マウスに、高脂肪食餌（６０％脂肪カロリー）又は１５００ｐｐｍＣＳＡＡ含有高脂肪食餌を８週間与えた（開始時５週齢）。（Ａ）空腹時血液グルコース濃度を測定した。ＵＴ：無治療；ＣＳＡＡ，ＣＳＡＡ治療；ｎ＝８対，＊＊＊Ｐ＜０．００１。図４は、長期経口ＣＳＡＡ治療が高脂肪食餌誘導性前糖尿病マウスにおいて、血液グルコース及びインスリンレベルを低減することを説明する。正常Ｃ５７／Ｂｌ６マウスに、高脂肪食餌（６０％脂肪カロリー）又は１５００ｐｐｍＣＳＡＡ含有高脂肪食餌を８週間与えた（開始時５週齢）。（Ｂ）インスリン濃度を測定した。ＵＴ：無治療；ＣＳＡＡ，ＣＳＡＡ治療；ｎ＝８対，＊＊＊Ｐ＜０．００１。図４は、長期経口ＣＳＡＡ治療が高脂肪食餌誘導性前糖尿病マウスにおいて、血液グルコース及びインスリンレベルを低減することを説明する。正常Ｃ５７／Ｂｌ６マウスに、高脂肪食餌（６０％脂肪カロリー）又は１５００ｐｐｍＣＳＡＡ含有高脂肪食餌を８週間与えた（開始時５週齢）。（Ｃ）一日食餌取り込み（高脂肪食餌を与えている７〜８週の間，体重ｇに対して正規化）を測定した。ＵＴ：無治療；ＣＳＡＡ，ＣＳＡＡ治療；ｎ＝８対，＊＊＊Ｐ＜０．００１。図５は、長期経口ＣＳＡＡ治療がインスリン感受性を増加することを説明する。正常Ｃ５７／Ｂｌ６マウスに、高脂肪食餌（６０％脂肪カロリー）、又は１５００ｐｐｍＣＳＡＡ含有高脂肪食餌を９週間与えた（開始時５週齢）。インスリン感受性を、（Ａ）耐糖能アッセイにより測定した。ＵＴ，無治療；ＣＳＡＡ，ＣＳＡＡ治療；＊，Ｐ＜０．０５；＊＊，Ｐ＜０．０１；＊＊＊，Ｐ＜０．００１；ｎ＝７対。図５は、長期経口ＣＳＡＡ治療がインスリン感受性を増加することを説明する。正常Ｃ５７／Ｂｌ６マウスに、高脂肪食餌（６０％脂肪カロリー）、又は１５００ｐｐｍＣＳＡＡ含有高脂肪食餌を９週間与えた（開始時５週齢）。インスリン感受性を、（Ｂ）インスリン抵抗性アッセイにより測定した。ＵＴ，無治療；ＣＳＡＡ，ＣＳＡＡ治療；＊，Ｐ＜０．０５；＊＊，Ｐ＜０．０１；＊＊＊，Ｐ＜０．００１；ｎ＝７対。図６は、慢性経口ＣＳＡＡ治療が、ＡＭＰＫ活性を増大し、肝臓の脂質負荷を低減することを説明する。（Ａ）経口ＣＳＡＡ治療前又は後のマウスの肝臓組織におけるリン酸化ＡＭＰＫレベル、未リン酸化ＡＭＰＫ及びＲＡＮのレベルも対照として測定した。図６は、慢性経口ＣＳＡＡ治療が、ＡＭＰＫ活性を増大し、肝臓の脂質負荷を低減することを説明する。（Ｂ）高脂肪食餌単独（ＵＴ）、又は１５００ｐｐｍＣＳＡＡ含有高脂肪食餌（ＣＳＡＡ）のいずれかを１０週間与えたマウス由来の肝臓組織のＨ＆Ｅ染色の代表的な写真。肝細胞中の白色領域が、高脂質含有量の細胞である。図７Ａ及び７Ｂは、ＣＳＡＡの慢性Ｉ．Ｐ．注射の、食餌取り込みの低減なしに、高脂肪食餌により誘導されたときの体重増加を低減する効果を示す。８ヶ月の２４匹の正常マウスに、高脂肪食餌を与えた。半数（１２匹のマウス）に、Ｉ．Ｐ．経路で、用量１００μｇ／マウス（ＰＢＳ５００μｌ中）でＣＳＡＡを毎日注射した。他の１２匹のマウスに、ビークルのみ（ＰＢＳ）を注射した。食餌取り込み（Ａ）を測定した。図７Ａ及び７Ｂは、ＣＳＡＡの慢性Ｉ．Ｐ．注射の、食餌取り込みの低減なしに、高脂肪食餌により誘導されたときの体重増加を低減する効果を示す。８ヶ月の２４匹の正常マウスに、高脂肪食餌を与えた。半数（１２匹のマウス）に、Ｉ．Ｐ．経路で、用量１００μｇ／マウス（ＰＢＳ５００μｌ中）でＣＳＡＡを毎日注射した。他の１２匹のマウスに、ビークルのみ（ＰＢＳ）を注射した。体重（Ｂ）を測定した。＊Ｐ＜０．０５，ｎ＝１２対。図８は、ＣＳＡＡのミトコンドリア脱共役活性を説明し、これは、単離哺乳動物ミトコンドリア（Ａ）を用いて示される。（Ａ）マウス肝臓から単離されたミトコンドリアの酸素消費チャート。ミトコンドリア、ミトコンドリア酸化リン酸化基質、示した阻害剤、及びＣＳＡＡを、呼吸チャンバーに示した順で加えた。酸素消費を、ＯｘｙｇｒａｐｈＳｙｓｔｅｍを用いて測定した。図８は、ＣＳＡＡのミトコンドリア脱共役活性を説明し、これは、培養哺乳類細胞（Ｂ）及び（Ｃ）を用いて示される。（Ｂ）及び（Ｃ）ＣＳＡＡは、哺乳動物細胞においてミトコンドリア膜ポテンシャルを低減した。ＮＩＨ−３Ｔ３細胞（〜９０％コンフルエンス）を、（Ｂ）示した終濃度で２時間、又は（Ｃ）２μＭの濃度で示した時間、ＣＳＡＡで治療した。次に、細胞を、ＴＭＲＥ（１００ｎＭ）で１５分間染色し、ミトコンドリア膜ポテンシャルを検出した。ＰＢＳで２回洗浄後、細胞を顕微鏡下で分析した。図８は、ＣＳＡＡのミトコンドリア脱共役活性を説明し、これは、培養哺乳類細胞（Ｂ）及び（Ｃ）を用いて示される。（Ｂ）及び（Ｃ）ＣＳＡＡは、哺乳動物細胞においてミトコンドリア膜ポテンシャルを低減した。ＮＩＨ−３Ｔ３細胞（〜９０％コンフルエンス）を、（Ｂ）示した終濃度で２時間、又は（Ｃ）２μＭの濃度で示した時間、ＣＳＡＡで治療した。次に、細胞を、ＴＭＲＥ（１００ｎＭ）で１５分間染色し、ミトコンドリア膜ポテンシャルを検出した。ＰＢＳで２回洗浄後、細胞を顕微鏡下で分析した。図９は、ＣＳＡＡが、オリゴマイシンの存在下で細胞の酸素消費量を増大し、細胞のＡＴＰレベルを増大しないことを説明する。（Ａ）細胞の酸素消費量を、ＤＭＳＯ（対照）、ＣＳＡＡ（１μM）、オリゴマイシン（５μg/ml）、ＣＳＡＡ及びオリゴマイシンで治療した際の細胞において、１２０分間連続して測定した。ＣＳＡＡは、オリゴマイシンの存在下でさえ、細胞の酸素消費量を劇的に増大し、これにより、そのミトコンドリア脱共役活性が示された。（Ｂ）ＡＴＰ濃度を、ＣＳＡＡ（１μM）で、示した時間治療した細胞において測定した。各条件下で計２０，０００細胞を播種し、分析した。図１０は、２−ＯＨを２−Ｏ−ＳＯ_２Ｈに変換した後のＣＳＡＡの損なわれた低血糖効果を説明する。（Ａ）５−クロロ−サリチル−（２−クロロ−４−ニトロ）アニリドの亜硫酸塩誘導体の構造。図１０は、２−ＯＨを２−Ｏ−ＳＯ_２Ｈに変換した後のＣＳＡＡの損なわれた低血糖効果を説明する。（Ｂ）血液グルコースに対する亜硫酸塩誘導体の効果。前糖尿病マウスを５時間絶食状態におき、続いて、食塩水、又はＣＳＡＡ亜硫酸塩誘導体含有食塩水（１００μg/マウス）をＩ．Ｐ．注射した。血液グルコース濃度を、示した時間ポイントで測定し、注射前の濃度（１００％と規定した）に対して正規化した。ＵＴ，無治療；ＣＳＡＡ，ＣＳＡＡ治療；ｎ＝６対。

発明の詳細な説明
本発明は、ＩＩ型糖尿病、及び糖尿病関連障害及び合併症の症状を治療、予防、及び軽減する新規方法に関する。２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物及び誘導体のファミリーは、血漿グルコース濃度及び細胞のエネルギー効率を低減することによる、血液グルコース及び体重のコントロールの手段として投与することができる。

１つの態様において、本発明は、対象に治療上有効量のミトコンドリア脱共役剤を投与することを含む、対象の代謝疾患又は障害を治療又は予防する方法を提供する。

この態様の１つの実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物、ベンゾイミダゾール、Ｎ−フェニルアントラニル酸塩、フェニルヒドラゾン、サリチル酸、アシルジチオカルバジン酸塩、クマリン、及びミトコンドリア脱共役活性を有する芳香族アミン、又はその医薬的に許容される塩、溶媒和物、又はプロドラッグからなる群より選択される。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、式（Ｉ）：

（式中：
Ｒ^１及びＲ^１１は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、又はインビボで加水分解されて、水素となる保護基であり；
Ｒ^２〜Ｒ^１０は、水素、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−ＯＲ^２０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^２１、及び−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^２２からそれぞれ独立して選択され（式中、Ｒ^２０、Ｒ^２１、及びＲ^２２は、それぞれ独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、又はＣ_１−Ｃ_６アルケニルであり、かつそれぞれのアルキル、アルケニル、アルキニル、又はハロアルキルは、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、−ＣＮ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、及びオキソ（＝Ｏ）から独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基で場合により置換されている）；
Ｒ^ａ及びＲ^ｂは、それぞれ独立して水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；
ここで、Ｒ^２〜Ｒ^５の少なくとも１つは、水素ではなく、Ｒ^６〜Ｒ^１０の少なくとも１つは、水素ではない）
の２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物、又はその医薬的に許容される塩、溶媒和物、又はプロドラッグである。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、式（Ｉ）（式中、Ｒ^１及びＲ^１１は、それぞれ独立して、水素、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^１２、又は−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１３）Ｒ^１４であり
（式中：
Ｒ^１２は、水素、−ＯＲ^１５、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_６−Ｃ_１０アリール、又は５〜１０員のヘテロアリールであり；
Ｒ^１４は、−ＯＲ^１５、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_６−Ｃ_１０アリール、又は５〜１０員のヘテロアリールであり；
それぞれの存在のＲ^１３及びＲ^１５は、独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_６−Ｃ_１０アリール、又はベンジルであり；
Ｒ^ａ及びＲ^ｂは、それぞれ独立して水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり、
ここで、任意のアルキル又はアルケニルは、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ_１−_４アルコキシ、及び−ＣＯ_２Ｒ^１６から独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基により場合により置換されており；
ここで、ベンジルの任意のアリール、ヘテロアリール、及びフェニル部分は、Ｃ_１−４アルキル、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ_１−４アルコキシ、及び−ＣＯ_２Ｒ^１６から独立して選択される１〜５個の置換基により場合により置換されている；
Ｒ^１６は、水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルである）
の２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物である。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、式（Ｉ）
（式中：
Ｒ^１１は、水素であり；
Ｒ^１は、水素又は−Ｃ（Ｏ）Ｒ^１２であり、ここで：
Ｒ^１２は、水素、−ＯＲ^１５、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１−Ｃ_８アルキル、Ｃ_２−Ｃ_８アルケニル、又はフェニルであり；
Ｒ^１５は、水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；
Ｒ^ａ及びＲ^ｂは、それぞれ独立して水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルである）
の２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物である。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、式（Ｉ）（式中、Ｒ^１は、水素、Ｒ^ａＲ^ｂＮ−Ｃ（Ｏ）−、又は：

（式中、ｍは、０、１、２、３、４、又は５であり；
ｎは、１〜２００の整数であり；
各存在のＲ^ｘは、独立して、水素又はＣ_１−Ｃ_８アルキルであり；
各存在のＲ^ｙは、独立して、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、−ＮＯ_２、−ＣＮ、又は−ＣＯ_２Ｒ^ｘである）
から選択されるアシル基である）
の２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物である。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、式（Ｉ）（式中、Ｒ^２〜Ｒ^５は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルコキシ、及びＣ_１−Ｃ_６アシルオキシである）の２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物である。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、式（Ｉ）（式中、Ｒ^１は、水素又はアセチルであり；Ｒ^１１は、水素であり；Ｒ^２〜Ｒ^１０は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロ、ニトロ、及びメチルからなる群より選択される）の２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物である。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、式（Ｉ）（式中、Ｒ^１は、水素又はアセチルであり；Ｒ^１１は、水素であり；Ｒ^２は、水素又はメチルであり；Ｒ^３は、水素であり；Ｒ^４は、Ｃｌ又はＢｒであり；Ｒ^５は、水素であり；Ｒ^６は、水素、−Ｃｌ、−ＣＨ_３、又は−ＮＯ_２であり；Ｒ^７は、水素又はＣｌであり；Ｒ^８は、−Ｈ、−Ｃｌ、又は−ＮＯ_２であり；Ｒ^９は、Ｈ、Ｃｌ、又はＢｒであり；Ｒ^１０は、Ｈ又はＣｌである）の２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物である。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、式（Ｉ）の２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物であり、ここで、化合物は、２’，５−ジクロロ−４’−ニトロサリチルアニリド、又はその医薬的に許容される塩である。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、式（Ｉ）の２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物であり、ここで、化合物は、２’，５−ジクロロ−４’−ニトロサリチルアニリド２−アミノエタノール塩（ＣＳＳＡ）である。

この態様の別の実施態様において、代謝疾患又は障害は、体重コントロールに関連する。

この態様の別の実施態様において、代謝疾患又は障害は、肥満、肥満関連合併症、高血圧、心血管疾患、ネフロパシー、神経障害から選択される。

この態様の別の実施態様において、代謝疾患又は障害は、血漿グルコース濃度の上昇に関連する。

この態様の別の実施態様において、代謝疾患又は障害は、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、又は高血糖又はインスリン抵抗性を引き起こす関連疾患である。

この態様の別の実施態様において、代謝疾患又は障害は、ＩＩ型糖尿病又は前ＩＩ型糖尿病である。

この態様の別の実施態様において、代謝疾患又は障害は、Ｉ型糖尿病である。

この態様の別の実施態様において、糖尿病関連疾患又は障害は、心血管疾患、神経変性障害、アテローム性動脈硬化症、高血圧、冠動脈心疾患、癌、アルコール性及び非アルコール性脂肪肝疾患、異常脂質血症、ネフロパシー、網膜症、神経障害、糖尿病性心不全、及び癌から選択される。

この態様の別の実施態様において、糖尿病関連疾患は、神経変性疾患である。

この態様の別の実施態様において、神経変性疾患は、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、又はアルツハイマー病である。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、獣医用薬物（veterinarian drug）として用いられて、糖尿病又は糖尿病関連疾患を治療し、対象は、哺乳動物である。

この態様の別の実施態様において、対象はヒトである。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、第２の抗糖尿病剤と併用して投与される。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、第２の抗糖尿病剤の投与に先立って投与される。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、第２の抗糖尿病剤の投与と併用して投与される。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、第２の抗糖尿病剤の投与に続いて投与される。

この態様の別の実施態様において、第２の抗糖尿病剤は、インスリン、インスリン類似体、スルホニル尿素、ビグアナイド、メグリチニド、チアゾリジンジオン、αグルコシダーゼ阻害剤、ＧＬＰ−１アゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤から選択される。

この態様の別の実施態様において、第２の抗糖尿病剤は、メトホルミンである。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、経口、静脈内、又は腹腔内投与される。

別の態様において、本発明は、代謝疾患又は障害の長期疾患管理方法であって、かかる長期管理の必要な対象に、有効量の、２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物、ベンゾイミダゾール、Ｎ−フェニルアントラニル酸塩、フェニルヒドラゾン、サリチル酸、アシルジチオカルバジン酸塩、クマリン、及びミトコンドリア脱共役活性を有する芳香族アミン、又はその医薬的に許容される塩、溶媒和物、又はプロドラッグから選択されるミトコンドリア脱共役剤を投与することを含む方法を提供する。

この態様の別の実施態様において、代謝疾患又は障害は、肥満、肥満関連合併症である。

この態様の別の実施態様において、代謝疾患又は障害は、ＩＩ型糖尿病、又は糖尿病関連合併症である。

別の態様において、本発明は、ＩＩ型糖尿病、肥満、又は関連障害又は合併症の治療又は予防用医薬の製造におけるミトコンドリア脱共役剤の使用を提供する。

別の態様において、本発明は、式（Ｉ）：

（式中、
Ｒ^１及びＲ^１１は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、又はインビボで加水分解されて、水素となる保護基であり；
Ｒ^２〜Ｒ^５は、独立して、少なくとも１つは、−ＯＨ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、及びトリハロ−メチルからなる群より選択され；残りは、−Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルケニル、Ｃ_１−６アルキニル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６ハロアルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、及びフェニルから選択され、（ここで、ヘテロアリール又はフェニルは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＦ_３、及びメトキシから独立して選択される１〜５個の置換基で場合により置換されている）；
Ｒ^６〜Ｒ^１０は、独立して、少なくとも１つは、−ＯＨ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、及びトリハロ−メチルからなる群より選択され；残りは、−Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルケニル、Ｃ_１−６アルキニル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６ハロアルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、及びフェニルから選択され（ここで、ヘテロアリール又はフェニルは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＦ_３、及びメトキシから独立して選択される１〜５個の置換基で場合により置換されている）
の化合物、又はその医薬的に許容される塩、溶媒和物、又はプロドラッグを提供する。

この態様の１つの実施態様において、Ｒ^１及びＲ^１１は、それぞれ独立して、水素、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ^ａＲ^ｂ、又は：

（式中、ｍは、０、１、２、３、４、又は５であり；
ｎは、１〜２００の整数であり；
各存在のＲ^ｘは、独立して、水素又はＣ_１−Ｃ_８アルキルであり；
各存在のＲ^ｙは、独立して、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、−ＮＯ_２、−ＣＮ、又は−ＣＯ_２Ｒ^ｘである）
からなる群より独立して選択されるアシル基である。１つの具体的な実施態様において、Ｒ^ｘは水素であり；別の具体的な実施態様において、ｍは０であり；なお別の具体的な実施態様において、Ｒ^ｙは、−ＯＨであり、ｍは３である。それ故、クエン酸、コハク酸、フマル酸、シュウ酸、没食子酸、安息香酸のアシル基が、保護基として包含される。

この態様の別の実施態様において、Ｒ^１は水素又はアセチルであり；Ｒ^１１は水素であり；Ｒ^２は水素又はメチルであり、Ｒ^３は水素であり、Ｒ^４はＣｌ又はＢｒであり、Ｒ^５は水素であり、Ｒ^６は水素、−Ｃｌ、−ＣＨ_３、又は−ＮＯ_２であり、Ｒ^７は水素又はＣｌであり、Ｒ^８は−Ｈ、−Ｃｌ、−ＮＯ_２であり、Ｒ^９はＨ、Ｃｌ、又はＢｒであり、Ｒ^１０はＨ又はＣｌである。

別の態様において、本発明は、式（Ｉ）（式中、
Ｒ^１及びＲ^１１は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、又はインビボで加水分解されて、水素となり得る保護基であり；
Ｒ^２〜Ｒ^５は、独立して、少なくとも１つは、−ＯＨ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、及びトリハロ−メチルからなる群より選択され；残りは、−Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルケニル、Ｃ_１−６アルキニル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６ハロアルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、及びフェニルから選択され（ここで、ヘテロアリール又はフェニルは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＦ_３、及びメトキシから独立して選択される１〜５個の置換基で場合により置換されている）；
Ｒ^６〜Ｒ^１０は、独立して、少なくとも１つは、−ＯＨ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、及びトリハロ−メチルからなる群より選択され；残りは、−Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルケニル、Ｃ_１−６アルキニル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６ハロアルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、及びフェニルから選択され（ここで、ヘテロアリール又はフェニルは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＦ_３、及びメトキシから独立して選択される１〜５個の置換基で場合により置換されている））
の化合物、又はその医薬的に許容される塩、溶媒和物、又はプロドラッグを含む、ＩＩ型糖尿病、肥満、関連障害及び合併症の治療又は予防用組成物を提供する。

この態様の別の実施態様において、組成物は、２’，５−ジクロロ−４’−ニトロサリチルアニリド２−アミノエタノール塩（ＣＳＳＡ）を含有する。

この態様の別の実施態様において、組成物は、医薬的に許容される担体をさらに含有する。

別の態様において、本発明は、対象に治療上有効量のミトコンドリア脱共役剤又は上述の組成物を投与することを含む、対象における代謝疾患又は障害を治療又は予防する方法を提供する。

この態様の別の実施態様において、請求項３７の方法、ここで、代謝疾患又は障害は、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、又は高血糖又はインスリン抵抗性を引き起こす関連疾患である。

この態様の別の実施態様において、代謝疾患又は障害は、ＩＩ型糖尿病である。

この態様の別の実施態様において、対象は、哺乳動物である。

この態様の別の実施態様において、対象はヒトである。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、第２の抗糖尿病薬剤の投与に先立って投与される。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、第２の抗糖尿病薬剤の投与と併用して投与される。

この態様の別の実施態様において、ミトコンドリア脱共役剤は、第２の抗糖尿病薬剤の投与に続いて投与される。

この態様の別の実施態様において、第２の抗糖尿病剤は、インスリン、インスリン類似体、スルホニル尿素、ビグアナイド、メグリチニド、チアゾリジンジオン、αグルコシダーゼ阻害剤、ＧＬＰ−１アゴニスト、及びＤＰＰ−４阻害剤から選択される。

別の態様において、本発明は、糖尿病、肥満、又は関連障害又は合併症の治療用医薬の製造における、上述の式（Ｉ）の化合物のミトコンドリア脱共役剤としての使用を提供する。

従って、本発明は、特に、前ＩＩ型糖尿病(血液グルコースレベルの上昇により特徴付けられる)の症状、及び高血圧、心血管疾患、ネフロパシー、及び神経障害を含むが、これらに限定されない、肥満又は糖尿病関連代謝障害の合併症を治療及び軽減する方法を提供する。これらの疾患又は障害は、食事、環境、医学及び／又は遺伝的因子により引き起こされ得る。本発明の方法はまた、リスク因子（肥満、食事、及び遺伝的素因を含むが、これらに限定されない）を有する対象のため、前ＩＩ型糖尿病及びＩＩ型糖尿病の予防、及び肥満になることから、及び／又は肥満関連合併症を有するリスクのある患者の予防のため、用いることができる。さらに、本発明は、血中のグルコースレベルを低減することによる、長期慢性疾患管理及び寿命管理のための新規アプローチを提供する。

特に、本発明は、２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物、及び誘導体又は関連化合物のファミリーを用いた、ＩＩ型糖尿病の症状を治療又は軽減する方法を提供する。２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物の代表的な例を、表１に説明する。

ミトコンドリアは、グルコース及び脂肪酸代謝経路の中心にある、細胞内の小器官である。これは、遊離脂肪酸のβ酸化、クエン酸回路、及び酸化的リン酸化が生じる場所である。β酸化、クエン酸回路、酸化的リン酸化の正味の効果は、二酸化炭素、水、及びミトコンドリアの内膜を横切るプロトン勾配の生成用の化学エネルギーを生み出すためのピルビン酸塩（グルコースの解糖から）及び脂肪酸の酸化である。次に、ミトコンドリア膜Ｆ_０−Ｆ_１−ＡＴＰａｓｅを横切ったプロトンの流入は、ＡＴＰ分子の形成をもたらす。ミトコンドリア膜を横切ったプロトン勾配は消失することがあり（ミトコンドリアの脱共役と呼ばれる工程）、そしてそれは、ＡＴＰを生成することなく、脂質又はピルビン酸塩（グルコースから）の酸化の無益サイクルを生じる。

ミトコンドリアの脱共役は、化学脱共役剤（例えば、２，４−ジニトロフェノール（ＤＮＰ））により誘導されることができ、そしてそれは、より高用量での様々な主要な副作用（高熱を生じることを含む）を有する。ＤＮＰで治療された最初の１００，０００人のうち、高熱に起因して２人の死亡者が生じ；それ故、ＤＮＰは市場から回収された。

化学的ミトコンドリア脱共役剤を用いた全身治療が、血液グルコースレベルを低減するか、又はインスリン感受性を増大することができるかどうか、或は化学的ミトコンドリア脱共役剤を用いてＩＩ型糖尿病を治療することができるかどうかは、本発明まで、はっきりしないままである。さらに、高用量で２，４−ジニトロフェノールから観察される比較的重篤な副作用により、糖尿病又は糖尿病と関連する疾患の予防及び治療の目的のため、２，４−ジニトロフェノール又は任意の他のミトコンドリア脱共役剤を用いることの試みが妨げられている。

それゆえ、本発明は、安全な化学的ミトコンドリア脱共役剤を探し、ＩＩ型糖尿病の治療における有効性を評価するように計画された。本発明者らは、ＦＤＡに認められた駆虫薬の塩形態である５−クロロ−サリチル−（２−クロロ−４−ニトロ）アニリド２−アミノエタノール塩（ＣＳＡＡ）（作用機序は、寄生生物においてミトコンドリアを脱共役することである）が、空腹時血液グルコース及びインスリン濃度の低減、グルコース取り込みの増加、インスリン感受性の増加、及び肝臓の脂質負荷の低減において非常に有効であることを見出した。その制限された溶解度により、多用量でＤＮＰで観察される副作用が妨げられるか、又は排除されるであろう。制限された溶解度を有するこの化合物の誘導体、そのプロドラッグ、又は他のミトコンドリア脱共役剤は、同様の有効性及び安全特性を有するであろう。

本発明において、本発明者らは、ＣＳＡＡを用いた急性及び慢性治療は、糖尿病マウスモデルにおいて血漿グルコース濃度を低減する際に有効であることを示した。さらに、本発明者らは、ＣＳＡＡを用いた慢性治療は、高脂肪食餌誘導性高血糖状態を防ぎ、空腹時インスリンレベルを低減し、そしてインスリン感受性を増大することができることを示した。本発明者らの結果は、ＣＳＡＡの低血糖効果の下にある機序が、ミトコンドリアの脱共役活性により仲介されることを支持している。ＣＳＡＡは、ＡＭＰＫ活性を増加させ、肝臓、筋肉、及び他の組織におけるグルコース取り込みを増加させる。インビトロアッセイにより、ＣＳＡＡが培養細胞においてミトコンドリアを脱共役する濃度は、経口投与の際の血漿ＣＳＡＡレベルの範囲内であることが示されている。重要なことに、ミトコンドリアの脱共役に必須なＣＳＡＡ分子の官能基の変化は、インビボでの血糖低下作用を全体的に無効にする。付随して、本発明者らの研究は、ＩＩ型糖尿病において高血糖を予防又は防ぐための可能性のある新規アプローチを立証する強力なデータを提供するだけでなく、新規抗糖尿病薬のさらなる開発のために用いられ得る、優れた安全特性を有する優良な候補分子を提供さえする。

事実、ＤＮＰは、最小モル濃度で機能する有効なミトコンドリア脱共役剤ではない。ＤＮＰは、高用量で脱共役活性と関連する副作用（例えば、高熱）ばかりでなく、ＤＮＰに特異的な副作用を有する。幸運なことに、ミトコンドリアの脱共役活性は、重篤な副作用と本質的に関連しないことが分かっている。本発明は、ＣＳＡＡが、ずっとより有効なミトコンドリア脱共役剤であることを示している。それは、高ナノモル濃度から低マイクロモル濃度で機能する。ＣＳＡＡがＤＮＰと実に違うところは、ＣＳＡＡが水溶液中で非常に制限された溶解度を有することである。このことが恐らく、ＣＳＡＡの遊離塩基及びＣＳＡＡのミトコンドリア脱共役活性のファルマコフォアであるニクロサミドが、良好な安全特性を有し、かつＦＤＡが認めた駆虫薬である理由である。薬力学的特性と薬物動態学的特性の特有の組み合わせに起因して、ＣＳＡＡファミリー化合物は、経口抗糖尿病薬としてさらに発展する良好な見込みを有する。

ミトコンドリア膜ポテンシャルが高いほど、ミトコンドリア反応酸素種（ＲＯＳ）の産生の増加と関連する。ミトコンドリアＲＯＳは、加齢、癌、及び神経変性疾患を含む他の病的状態に重要な病因因子である。ＣＳＡＡ及びその誘導体は、ミトコンドリアＲＯＳの低減において有効であり、それらの疾患を予防又は治療するのに有用であり得ると予想される。

定義
本明細書で用いられる用語「アルキル」は、所定数の炭素原子を有する、分岐と直鎖両方の飽和脂肪族炭化水素基を含むことが意図されている。例えば、「Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル」又は「Ｃ_１−１０アルキル」（又はアルキレン）は、Ｃ_１、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、Ｃ_６、Ｃ_７、Ｃ_８、Ｃ_９、及びＣ_１０アルキル基を含むことが意図されている。さらに、例えば、「Ｃ_１−Ｃ_６アルキル」又は「Ｃ_１−６アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有するアルキルを指す。アルキル基は、非置換であるか、又は別の化学基により置換されている少なくとも１個の水素で置換されることができる。アルキル基の例は、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（例えば、ｎ−プロピル及びイソプロピル）、ブチル（例えば、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル）、及びペンチル（例えば、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル）を含むが、これらに限定されない。

「アルケニル」は、所定数の炭素原子、及び鎖に沿って任意の安定な点に生じ得る、１個又は複数、好ましくは、１〜３個の炭素と炭素の二重結合を有する直鎖又は分岐のいずれかの構造の炭化水素鎖を含むことが意図されている。例えば、「Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル」又は「Ｃ_２−６アルケニル」（又はアルケニレン）は、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、及びＣ_６アルケニル基を含むことが意図されている。アルケニルの例は、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−ブテニル、３−ブテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、４−ヘキセニル、５−ヘキセニル、２−メチル−２−プロペニル、及び４−メチル−３−ペンテニルを含むが、これらに限定されない。

「アルキニル」は、１個又は複数、好ましくは１〜３個の、鎖に沿って任意の安定な点で生じ得る炭素と炭素の３重結合を有する直鎖又は分岐のいずれかの構造の炭化水素鎖を含むことが意図されている。例えば、「Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル」は、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、及びＣ_６アルキニル基（例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、及びヘキシニル）を含むことが意図されている。

用語「アルコキシ」又は「アルキルオキシ」は、−Ｏ−アルキル基に言及する。「Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ」又は「Ｃ_１−６アルコキシ」（又はアルキルオキシ）は、Ｃ_１、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、及びＣ_６アルコキシ基を含むことが意図されている。アルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ（例えば、ｎ−プロポキシ及びイソプロポキシ）、及びｔ−ブトキシを含むが、これらに限定されない。

用語「ハロ」又は「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨードに言及する。「ハロアルキル」は、１個又は複数のハロゲンで置換されている、所定数の炭素原子を有する分岐と直鎖両方の飽和脂肪族炭化水素基を含むことが意図されている。ハロアルキルの例は、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、及びトリクロロメチルを含むが、これらに限定されない。

「ハロアルコキシ」又は「ハロアルキルオキシ」は、酸素架橋を介して結合した所定数の炭素原子を有する、上で定義されたハロアルキル基を表す。例えば、「Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルコキシ」又は「Ｃ_１−６ハロアルコキシ」は、Ｃ_１、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、及びＣ_６ハロアルコキシ基を含むことが意図されている。ハロアルコキシの例は、トリフルオロメトキシ、トリクロロメトキシ、及び２，２，２−トリフルオロエトキシを含むが、これらに限定されない。

「アリール」基は、例えば、フェニル、及びナフチルを含む、単環式又は多環式芳香族炭化水素に言及する。「Ｃ_６−Ｃ_１０アリール」又は「Ｃ_６−１０アリール」は、フェニル及びナフチルに言及する。特に特定されていない限り、「アリール」、「Ｃ_６−Ｃ_１０アリール」、「Ｃ_６−１０アリール」、又は「芳香族残基」は、非置換であるか、又は−ＯＨ、−ＯＣＨ_３、−Ｃｌ、−Ｆ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＮＨ_２、−ＮＨ（ＣＨ_３）、−Ｎ（ＣＨ_３）_２、−ＣＦ_３、−ＯＣＦ_３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、−ＳＣＨ_３、−Ｓ（Ｏ）ＣＨ_３、−Ｓ（Ｏ）_２ＣＨ_３、−ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＯ_２Ｈ、及び−ＣＯ_２ＣＨ_３から選択される１〜５個の基で置換されていてもよい。

本明細書において用いられる用語「ベンジル」は、メチル基上で、水素原子の１つがフェニル基により置換されている、メチル基に言及する（ここで、フェニル基は、メチル、トリフルオロメチル（−ＣＦ_３）、ヒドロキシル（−ＯＨ）、メトキシ（−ＯＣＨ_３）、ハロゲン、シアノ（−ＣＮ）、ニトロ（−ＮＯ_２）、−ＣＯ_２Ｍｅ、−ＣＯ_２Ｅｔ、及び−ＣＯ_２Ｈから独立して選択される、１〜５個、好ましくは１〜３個の置換基により場合により置換されていてもよい）。ベンジル基の代表的な例は、ＰｈＣＨ_２−、４−ＭｅＯ−Ｃ_６Ｈ_４ＣＨ_２−、２，４，６−トリ−メチル−Ｃ_６Ｈ_２ＣＨ_２−、及び３，４−ジ−Ｃｌ−Ｃ_６Ｈ_３ＣＨ_２−を含むが、これらに限定されない。

本明細書において用いられる用語「ヘテロアリール」は、少なくとも１個のヘテロ原子環員、例えば、硫黄、酸素、又は窒素を含む安定な単環式及び多環式芳香族炭化水素を意味することが意図されている。ヘテロアリール基は、限定されることなく、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、フリル、キノリル、イソキノリル、チエニル、イミダゾリル、チアゾリル、インドリル、ピロイル（pyrroyl）、オキサゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンゾチアゾリル、イソオキサゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、インダゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、イソチアゾリル、プリニル、カルバゾリル、ベンゾイミダゾリル、インドリニル、ベンゾジオキソラニル、及びベンゾジオキサンを含む。ヘテロアリール基は、置換されているか、又は非置換である。窒素原子は、置換されているか、又は非置換である（すなわち、所望なら、Ｎ又はＮＲ（式中、Ｒは、Ｈ又は別の置換基である））。窒素及び硫黄ヘテロ原子は、場合により酸化されていてもよい（すなわち、Ｎ→Ｏ及びＳ（Ｏ）_ｐ（式中、ｐは、０、１又は２である））。

語句「医薬的に許容される」は、妥当な利益対リスク比に見合った、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、及び／又は他の問題又は合併症なく、正当な医学的判断の範囲内で、ヒト及び動物の組織と接触して用いるのに適している化合物、材料、組成物、及び／又は投与形態に言及するために本明細書において利用される。

本明細書において用いられる「医薬的に許容される塩」は、開示された化合物の誘導体（ここで、親化合物が、その酸性又は塩基性塩を作ることにより修飾されている）に言及する。医薬的に許容される塩の例は、塩基性基（例えば、アミン）の無機又は有機酸塩；及び酸性基（例えば、カルボン酸）のアルカリ又は有機塩を含むが、これに限定されない。医薬的に許容される塩は、非毒性無機又は有機酸から形成される、親化合物の通常の非毒性塩又は第４級アンモニウム塩を含む。例えば、かかる通常の非毒性塩は、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、及び硝酸から誘導されるもの；及び有機酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、及びイセチオン酸から調製される塩を含む。

本発明の医薬的に許容される塩は、通常の化学的方法により、塩基又は酸部分を含有する親化合物から合成することができる。一般的に、かかる塩は、これらの化合物の遊離酸又は塩基形態を当量の適当な塩基又は酸と、水中又は有機溶媒中、又はこれらの２つの混合物中（一般的に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、又はアセトニトリルのような非水性媒体が好ましい）で反応させることにより、調製することができる。適当な塩のリストは、Remington's Pharmaceutical Sciences, 18^th Edition, Mack Publishing Company, Easton, PA, 1990（その開示は、参考により本明細書に取り込まれる）に見られる。

加えて、式（Ｉ）の化合物は、プロドラッグ形態を有してもよい。インビボで変換されて、生物活性剤（すなわち、式（Ｉ）の化合物）をもたらす任意の化合物が、本発明の範囲及び精神内のプロドラッグである。種々の形態のプロドラッグが、当該技術分野において周知である。かかるプロドラッグ誘導体の例については、以下を参照：
a)Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard (Elsevier, 1985), and Methods in Enzymology, Vol. 112, at pp. 309-396, edited by K. Widder et al. (Academic Press, 1985);
b)A Textbook of Drug Design and Development, edited by Krosgaard-Larsen and H. Bundgaard, Chapter 5, "Design and Application of Prodrugs," by H. Bundgaard, at pp. 113−191 (1991)。

プロドラッグの調製は、当該技術分野において周知であり、例えば、Medicinal Chemistry: Principles and Practice, F.D. King, ed., The Royal Society of Chemistry, Cambridge, UK, 1994; ヒドロlysis in Drug and Prodrug Metabolism. Chemistry, Biochemistry and Enzymology, B. Testa, J. M. Mayer, VCHA and Wiley-VCH, Zurich, Switzerland, 2003; The Practice of Medicinal Chemistry, C. G. Wermuth, ed., Academic Press, San Diego, CA, 1999に記載されている。

本発明の化合物は、当業者に用いられる関連の公開文献の手法に記載の典型的なプロセスにより調製されてもよい。

実施例
本発明を、次の非限定的な実施例により、より十分に記載する。これらの実施例の修飾は、当業者にとって明らかであろう。

材料及び方法
マウス及び治療
５週齢のｄｂ／ｄｂマウス及びＣ５７／Ｂｌ６マウスを、Jackson Laboratoryから購入し、動物施設ＵＭＤＮＪ−ＲＷＪＭＳにて飼育した。６週齢で開始し、ｄｂ／ｄｂマウスに、正常ＡＩＮ−９３Ｍ（Research Diet）、又は１５００ppm ＣＳＡＡを含有するＡＩＮ−９３Ｍ食餌のいずれかを与えた。Ｃ５７／Ｂｌ６マウスについては、５週齢で、マウスに、高脂肪食餌（６０％脂肪カロリー, Research Diet）、又は１５００ppm ＣＳＡＡを含有する高脂肪食餌のいずれかを与えた。急性Ｉ．Ｐ．注射のため、マウスを５時間飢餓状態にし、ＣＳＡＡ又は亜硫酸塩結合ＣＳＡＡ（Provid Inc.による注文合成）を、食塩水又は１０％ＤＭＳＯ含有食塩水に溶解した。総容量１００μlの溶液（ＣＳＡＡ又はその誘導体１００μgと併用又は併用なし）を、各マウスに注射した。食餌摂取実験のため、１組のマウスを、食餌及び水に自由にアクセスできる代謝ケージ（Nalgene）に個々に飼育した。食餌のカップ及びカップへの通路に散乱した食餌を毎日計測し、食餌摂取量を決定した。マウス組織研究のため、マウスを断頭により屠殺し、興味のある組織を得た。

血液グルコース及びインスリンの測定
血液グルコースを、ＯｎｅＴｏｕｃｈＵｌｔｒａＳｍａｒｔ血液グルコースモニタリングシステム（Lifescan）を用いて測定し、インスリンレベルを、超高感度マウスインスリンＥＬＩＳＡキット（Crystal Chem Inc.）により、製造元の指示に従い測定した。

耐糖能アッセイ及びインスリン抵抗性アッセイ
耐糖能試験のため、マウスを一晩絶食状態にし、２０％グルコースを、用量２g/kg体重でＩ．Ｐ．注射した。グルコース測定のため、０、１５、３０、６０、９０、及び１２０分の時点で、血液を尾から採取した。インスリン抵抗性試験のため、マウスを５時間絶食状態にし、０．７５U/kg体重の組み換えヒトインスリン（Eli Lilly）をＩ．Ｐ．注射した。グルコース測定のため、０、１５、３０、６０、９０、及び１２０分の時点で、血液を尾から採取した。

免疫ブロットアッセイ及びマウス肝臓の組織学的分析
免疫ブロットアッセイを、標準的プロトコールに従い行った。抗体の供給源は：ＡＭＰＫ抗体（Cell Signaling Technology）、Ｔｈｒ−１７２−リン酸化ＡＭＰＫ抗体（Cell Signaling Technology）、Ｒａｎ抗体（C-20, Santa Cruz）であった。

マウスの肝臓の組織学的研究のため、マウスを断頭により屠殺した。肝臓の切片を、緩衝ホルマリン（Surgipath Medical Industries, Inc.）で固定し、パラフィンに包埋した。組織試料中の脂質滴を検出するため、組織スライドをヘマトキシリン及びエオジン（Ｈ＆Ｅ）で染色した。ＵｎｉｖｅｒｓａｌＭｉｃｒｏｓｃｏｐｅＡｘｉｏｐｌａｎ２画像システム（Carl Zeiss）、位相差顕微鏡対物レンズを用いて、写真を撮影した。

^３Ｈ２−デオキシグルコースを用いたグルコース取り込みアッセイ
マウスを３時間絶食状態にし、続いて、用量１００μg/マウスでＩ．Ｐ．注射を介して、食塩水又はＣＳＡＡ含有食塩水で治療した。１．５時間後、^３Ｈ−２−デオキシグルコース（０．５μCi/g体重）をＩ．Ｐ．経路を介して注射した。３０分後、マウスを麻酔薬で治療し、ＰＢＳで灌流した。次に、マウスを屠殺し、^３Ｈ−２−デオキシグルコース蓄積の測定（組織量に対して正規化）のため、組織を抽出した。

ミトコンドリア脱共役活性アッセイ
単離ミトコンドリアを用いたミトコンドリア脱共役アッセイのため、マウスの肝臓からミトコンドリアを単離した。ミトコンドリア基質並びに種々の阻害剤の存在下、ＯｘｙｇｒａｐｈＳｙｓｔｅｍ（Hansatech Instrument, Norfolk, UK）を用いて、酸素消費量について、容量０．９mlの呼吸バッファー中のミトコンドリア１．０mgを分析した。呼吸バッファーに添加した種々の化学物質の終濃度は、以下のとおりであった：コハク酸エステル，５mM；ＡＤＰ，１２５μM；オリゴマイシン，５μg/ml；ＫＣＮ，２mM。

培養細胞を用いたミトコンドリアの脱共役活性分析のため、ＮＩＨ−３Ｔ３を９０％コンフルエンスまで培養した。次に、種々の濃度、種々の時間、ＣＳＡＡで細胞を治療した。次に、細胞を、ＴＭＲＥ（テトラメチルローダミンエチルエステルペルクロラート）で終濃度１００ｎＭまで処理し、１５分間インキュベーションした。次に、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、顕微鏡下で写真を撮影した。

ＢＤ（商標）ＯｘｙｇｅｎＢｉｏｓｅｎｓｏｒＳｙｓｔｅｍを用いて、細胞の酸素消費量を測定した。ＮＩＨ−３Ｔ３細胞を対数期まで一晩培養し、次に、酸素バイオセンサー９６ウェルプレートに、ＤＭＥＭ培地中１ウェル当たり２００００細胞の密度で播種した。表示の薬物ＣＳＡＡ（１μM）又はオリゴマイシン（５μg/ml）、又は両方を培地中に加えることにより、処理を開始した。酸素消費量（酸素濃度の減少）を、酸素により最初にクエンチされた蛍光シグナルの生成により示した。細胞のＡＴＰ濃度を、ＥＮＬＩＴＥＮ（登録商標）ＡＴＰＡｓｓａｙＳｙｓｔｅｍを用いて測定し、細胞数に対して正規化した。

実施例１
５−クロロ−サリチル−（２−クロロ−４−ニトロ）アニリド２−アミノエタノール塩（ＣＳＡＡ）を用いた急性治療は、糖尿病及び前糖尿病マウスにおいて血液グルコースを効果的に低減した。ＣＳＡＡの構造を図１Ａに示す。血液グルコース対照に対するＣＳＡＡの効果を評価するために、糖尿病ｄｂ／ｄｂマウス、又は高脂肪食餌を１０週間与えた前糖尿病Ｃ５７／Ｂｌ６マウスのいずれかに、食塩水含有ＣＳＡＡを注射した。図１に示すとおり、ＣＳＡＡでの治療により、治療後１時間まで血液グルコース濃度が低減し、約４時間有効なままであった。血液グルコース濃度の劇的な減少を、両方のマウス系統において観察した。これは、ｄｂ／ｄｂマウスにおいて特に有意であり、対照に比べ、血液グルコースにおいて３０％の低減を示した。これらの結果は、ＣＳＡＡが、糖尿病及び前糖尿病マウスモデルにおいて血液グルコース濃度を低減する際に急性効果を有することを示している。

実施例２
血液グルコースを低減する際のＣＳＡＡの急性効果は、組織におけるＡＭＰ活性化キナーゼ（ＡＭＰＫ）の活性化及びグルコース取り込みの増大と関連する。ミトコンドリアの脱共役剤は、ＡＴＰ産生の効率を低減し、順に、グルコース取り込みの代償的アップレギュレーションを誘導するかもしれない。この見解を試験するため、ＣＳＡＡ注射後のマウスの肝臓において、リン酸化ＡＭＰＫレベル（ＡＭＰＫの活性を反映する）を測定した。ＡＭＰＫは、ＡＴＰ減少の結果として、ＡＭＰ（アデノシン１リン酸）の増大に応答して、活性化された。図２Ａに示すとおり、確かに、ＣＳＡＡを用いた急性治療は、リン酸化ＡＭＰＫのレベルを劇的に増大した。さらに、ＣＳＡＡで急性治療したマウスの種々の組織におけるグルコース取り込み率を直接測定した。図２Ｂに示すとおり、グルコース取り込み率は、肝臓、筋肉、腎臓、及び肺において有意に増大しているが、脳又は白色脂肪組織（ＷＡＴ）においては増大しなかった。総合すると、これらの結果は、血液グルコースを低減する際のＣＳＡＡの急性効果は、恐らく、エネルギー効率の低減、及び結果として生じるグルコース取り込みの代償的アップレギュレーションにおける活性により仲介されることを示している。

実施例３
ＣＳＡＡでの慢性経口治療は、ｄｂ／ｄｂ糖尿病マウスにおいて空腹時血液グルコース濃度を低減する。さらに、ＣＳＡＡでの慢性経口治療が、ｄｂ／ｄｂ糖尿病マウスにおいて血液グルコース濃度を低減する際に有益な効果を有するかどうかを決定した。図３Ａに示されるとおり、６週齢で開始し、ＣＳＡＡでの２週間の経口治療（マウスにＣＳＡＡを含有する食餌を与えることによる）により、ｄｂ／ｄｂマウスの空腹時血液グルコースをほぼ正常レベルまで低減した。２群（通常の食餌又はＣＳＡＡ含有食餌を与えたマウス）間の食餌の取り込み率は、有意には異ならず（図３Ｂ）、これにより、ＣＳＡＡが、食欲及び食餌取り込みに影響し、これにより低血糖効果を引き起こすかもしれないという可能性が排除された。時が経つにつれ、ＣＳＡＡ治療マウスの空腹時血液グルコースレベルは上昇した。しかしながら、それは、非ＣＳＡＡ治療マウスにおけるものより、有意に低いままであった（データは示していない）。重要なことに、ＣＳＡＡ治療ｄｂ／ｄｂマウスの体重及び肥満症は、対照マウスと異なっておらず（データは示していない）、これにより、ＣＳＡＡの抗糖尿病効果が、肥満の程度の低減を介して仲介されないことが示された。この結果により、糖尿病マウスモデルにおいて血糖コントロールの改善における長期経口ＣＳＡＡ治療の優れた有効性が示された。

実施例４
ＣＳＡＡでの長期経口治療により、高脂肪食餌誘導前糖尿病マウスにおいて、空腹時血液グルコース及びインスリン濃度が低減された。次に、高脂肪食餌誘導前糖尿病マウスにおいて、ＣＳＡＡでの慢性経口治療の効果を評価した。図４に示すとおり、Ｃ５７／Ｂｌ６マウスに高脂肪食餌を８週間与え、空腹時血液グルコース濃度を劇的に増大させることにより、前糖尿病状態が誘導され；一方、ＣＳＡＡを含有する高脂肪食餌を与えると、空腹時血液グルコースの増大は完璧に阻止された（図４Ａ）。より良好な血糖コントロールと一致して、ＣＳＡＡ治療群における空腹時インスリン濃度は、対照群のものより有意に低かった（図４Ｂ）。また、ＣＳＡＡは、マウスにおいて食餌取り込みにおける効果を有しなかった（図４Ｃ）。さらに、ＣＳＡＡ治療マウスの体重及び肥満症は、対照マウスと異なっておらず（データは示していない）、ＣＳＡＡの抗糖尿病効果が肥満の程度の低減を介して仲介されないことが、再度示された。総合すると、これらの結果により、ＣＳＡＡが、高脂肪食餌により誘導される糖尿病状態を阻止する際に非常に有効であり得ることが示された。

実施例５
慢性経口ＣＳＡＡ治療により、インスリン感受性が増大する。高脂肪食餌単独、又はＣＳＡＡと混合した高脂肪食餌のいずれかを与えたＣ５７／Ｂｌ６マウスを、インスリン抵抗性に関して分析した。図５に示すとおり、ＣＳＡＡを与えたマウスは、有意に増大したインスリン感受性を示した（耐糖能アッセイ又はインスリン抵抗性アッセイのいずれかにより測定した）。これらの結果により、長期ＣＳＡＡ治療が、インスリン感受性を増大し得ることが示された。この効果は、図４において観察した、空腹時グルコース及びインスリンレベルの劇的な低減の一因となり得る。

実施例６
慢性経口ＣＳＡＡ治療により、組織ＡＭＰＫ活性が増大し、肝臓の脂質負荷が低減した。ＣＳＡＡが空腹時グルコース濃度を低減し、インスリン感受性を改善する機序を理解するために、高脂肪食餌下のマウスにおいて、肝臓のＡＭＰＫ活性化及び肝臓の脂質蓄積における慢性経口ＣＳＡＡ治療の効果を測定した。図６Ａに示すとおり、経口ＣＳＡＡ治療は、肝臓においてＡＭＰＫ活性を慢性的に上昇させた。さらに、経口ＣＳＡＡは、肝細胞における脂質負荷を劇的に低減した（図６Ｂ）。これらの結果は、ＣＳＡＡの低血糖効果が、細胞のＡＴＰレベルを低減し、従って、グルコース取り込みを増大する際の急性効果、並びに抹消器官（例えば、肝臓）における脂質蓄積を低減する（そして、インスリン感受性を増大する）際の長期効果に関与し得るとの見解と一致した。

実施例７
Ｉ．Ｐ．注射を介した慢性ＣＳＡＡ治療により、高脂肪誘導体重増加が低減された。図２〜図６に記載のとおり、慢性経口投与を介してＣＳＡＡで治療したマウスは、有意に改善された血糖コントロールを示したが、体重及び肥満症に関して、無治療の対照マウスと異なってはいなかった。これらの結果により、これらのマウスにおけるＣＳＡＡの抗糖尿病効果が、肥満レベルを低減することにより仲介されないことが示された。ＣＳＡＡ治療が、肥満症に対して影響力を有し得るかどうかという別の疑問を抱いた。ＣＳＡＡのバイオアベイラビリティを増大させるために、Ｉ．Ｐ．注射を介した慢性ＣＳＡＡ治療を行い、高脂肪食餌誘導体重増加に対するＣＳＡＡの効果を調べた。８ヶ月の２４匹の正常マウスに高脂肪食餌を与えた。半数（１２匹のマウス）を、Ｉ．Ｐ．経路を介して、用量１００μg/マウス（ＰＢＳ５００μl中）にてＣＳＡＡ注射で毎日治療した。他方の１２匹に、毎日ビークルのみ（ＰＢＳ）を注射した。体重を１週間に２回測定し、それぞれのマウスについて正味の体重増加を決定した。実験期間に渡る各群の平均体重増加をプロットした。図７Ｂに示すとおり、ＣＳＡＡは、高脂肪食餌により誘導される体重増加を低減した。ＣＳＡＡが、食欲を低減することにより、体重増加に作用する可能性を排除するために、各マウスの食餌取り込みも測定した。食餌取り込みレベルを、１５〜２９日目に代謝ケージを用いて毎日測定し、各群の平均一日食餌取り込みを計算した。図７Ａに示すとおり、ＣＳＡＡ治療群は、実際に、より高い食餌取り込み率を有していた。これらの結果により、ＣＳＡＡ治療が、より高用量で、及び／又は異なりかつより効果的な投与経路を介して投与されたなら、肥満症に対して影響を有し得ることが示された。

実施例８
ＣＳＡＡは、培養哺乳動物細胞において、高ナノモル濃度でミトコンドリアの脱共役を引き起こした。ＣＳＡＡの遊離塩基であるニクロスアミドは、ＦＤＡが認可した駆虫薬である。ニクロスアミドの作用機序は、腸の回虫及び他の寄生虫においてミトコンドリアを脱共役することである。ニクロスアミドは、水性溶液において極度の不溶性であり、そしてそれが、恐らく、低い全身のバイオアベイラビリティ及び優れた安全特性の一因である。ＣＳＡＡの水溶解性は、ニクロスアミド遊離塩基より約３０〜５０倍高く、経口投与後約０．７５〜２．０μM（０．２５〜０．６０mg/L）の最大血漿濃度を有する（Chemical Safety Information from Intergovernmental Organizations, WHO/VBC/DS/8863: WORLD HEALTH ORGANIZATION FOOD AND AGRICULTURE ORGANIZATION, 1988. http://www.inchem.org/documents/pds/pds/pest63_e.htm）。次に、培養マウス線維芽細胞を用いて、ＣＳＡＡがミトコンドリア脱共役活性を示す濃度を決定した。図８Ａに示すとおり、まず、マウスの肝臓から単離した哺乳動物ミトコンドリアに対してミトコンドリア脱共役活性を有することを確かめた。Ｆ_ｏＦ_１−ＡＴＰａｓｅを阻害するオリゴマイシンの存在下で、ＣＳＡＡは、ミトコンドリアの脱共役剤に固有の特徴である、ミトコンドリアの酸素消費を効果的になお促進した。未変性の細胞を用いて分析すると、図８Ｂに示すとおり、ＣＳＡＡは、ミトコンドリア膜ポテンシャルを低減する際の活性を示し、これは、５００nMの濃度で始まった。ミトコンドリアの完全な脱共役は、約５μMの濃度で見ることができた。さらに、ミトコンドリア膜ポテンシャルの消費におけるＣＳＡＡの効果は、迅速であり、ＣＳＡＡ適用の５分後の早さで観察できた（図８Ｃ）。このことは、脱共役活性が、恐らく、ＣＳＡＡの直接及び１次効果であることを示唆している。総合すると、結果により、ＣＳＡＡが、培養細胞において、高nM〜低μMの濃度（経口投与の際の文書化されたＣＳＡＡの血漿濃度の範囲内である）でミトコンドリアを脱共役できることが示された。

実施例９
ＣＳＡＡは、オリゴマイシンの併用治療あり又はなしで、細胞の酸素消費を刺激し、細胞における定常状態解析ＡＴＰ濃度に作用しなかった。ＣＳＡＡが、生きた細胞において低μMの濃度でミトコンドリアを脱共役することをさらに示し、図８にて観察したミトコンドリア膜ポテンシャルの低減が、ミトコンドリアの完全性の喪失に起因する可能性を排除するために、オリゴマイシンの存在又は不存下で、ＣＳＡＡで治療した際の未変性の細胞の酸素消費を測定した。図９Ａに示すとおり、ＣＳＡＡは、細胞の酸素消費を劇的に刺激し、これにより、ミトコンドリア電子伝達鎖の機能が正常であり、ＣＳＡＡにより活性化されることが示された。さらに、Ｆ_ｏＦ_１ＡＴＰａｓｅの阻害剤であるオリゴマイシンとの併用治療は、ＣＳＡＡ刺激酸素消費に有意に影響しなかった。このことは、ＣＳＡＡが、この濃度（１μM）で生きた細胞においてミトコンドリアを脱共役する際に有効であることを直接的に示している。酸素消費により示したミトコンドリアの酸化率の劇的な増大にも関わらず、細胞のＡＴＰ濃度は増大しなかった（図９Ｂ）。ＡＴＰ濃度は、ＣＳＡＡ治療に際して有意に低減もしなかった。同様に、いくつかの代償的応答（例えば、グルコース取り込みの増大及び解糖率の上昇）は、ＣＳＡＡの存在下で、比較的安定な細胞内ＡＴＰ濃度に寄与し得る。

実施例１０
ミトコンドリアの脱共役活性に必須であるＣＳＡＡの官能基を変えることで、低血糖効果は無効になる。上記セクションで示した種々の研究により、ＣＳＡＡの脱共役活性が、抗糖尿病効果を仲介していることが強く示唆されている。ＣＳＡＡの低血糖効果が、ミトコンドリアの脱共役に関連することをさらに示すために、２−ＯＨ基を２−Ｏ−ＳＯ_２Ｈ基に変えたＣＳＡＡの誘導体を合成した（図１０Ａ）。既に十分に確立されたとおり、ミトコンドリアの脱共役活性は、分子を非常に親油性の弱酸（プロトンをミトコンドリア内膜を横切ってシャッフルする）にするのに必須である、２−ＯＨ基を完全に必要とする（Terada, H., Environ. Health Perspect. 1990, 87:213-218）。この構造の極性亜硫酸塩基への変更は、この特性を破壊し、ミトコンドリア脱共役活性を無効にし得る。次に、ＣＳＡＡの亜硫酸塩誘導体が、血液グルコースを低減する際に有効であるかを試験した。図１０Ｂに示すとおり、２−ＯＨ官能基におけるかかる変更は、ＣＳＡＡの低血糖降下を全て無効にする。この結果により、確かに、ＣＳＡＡのミトコンドリアの脱共役活性は、本研究で観察した抗糖尿病効果を担っていることがさらに示された。

前述の実施例及び好ましい実施態様の記載は、請求項により定義される本発明を制限するより、説明として解釈されるべきである。上記特徴の全てのバリエーション及び組み合わせは、以下の請求項の範囲内であることが意図される。

Claims

対象に治療上有効量のミトコンドリア脱共役剤を投与することを含む、対象の代謝疾患又は障害の治療又は予防方法。
ミトコンドリア脱共役剤が、２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物、ベンゾイミダゾール、Ｎ−フェニルアントラニル酸塩、フェニルヒドラゾン、サリチル酸、アシルジチオカルバジン酸塩、クマリン、及びミトコンドリア脱共役活性を有する芳香族アミン、又はその医薬的に許容される塩、溶媒和物、又はプロドラッグから選択される、請求項１記載の方法。
剤が、式（Ｉ）：

（式中、
Ｒ^１及びＲ^１１は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、又はインビボで加水分解されて、水素となる保護基であり；
Ｒ^２〜Ｒ^１０は、水素、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−ＯＲ^２０、Ｃ（Ｏ）Ｒ^２１、及びＯＣ（Ｏ）Ｒ^２２からそれぞれ独立して選択され（ここで、Ｒ^２０、Ｒ^２１、及びＲ^２２は、それぞれ独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、又はＣ_１−Ｃ_６アルケニルであり、かつそれぞれのアルキル、アルケニル、アルキニル、又はハロアルキルは、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、−ＣＮ、−ＮＨ_２、−ＮＯ_２、及びオキソ（＝Ｏ）から独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基で場合により置換されている）；
Ｒ^ａ及びＲ^ｂは、それぞれ独立して水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；
ここで、Ｒ^２〜Ｒ^５の少なくとも１つは、水素ではなく、Ｒ^６〜Ｒ^１０の少なくとも１つは、水素ではない）
の２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物、又はその医薬的に許容される塩、溶媒和物、又はプロドラッグである、請求項１記載の方法。
Ｒ^１及びＲ^１１が、それぞれ独立して、水素、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^１２、又は−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ^１３）Ｒ^１４であり（式中：
Ｒ^１２が、水素、−ＯＲ^１５、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_６−Ｃ_１０アリール、又は５〜１０員のヘテロアリールであり；
Ｒ^１４が、−ＯＲ^１５、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２−Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_６−Ｃ_１０アリール、又は５〜１０員のヘテロアリールであり；
それぞれの存在のＲ^１３及びＲ^１５が、独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_６−Ｃ_１０アリール、又はベンジルであり；
Ｒ^ａ及びＲ^ｂが、それぞれ独立して、水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり、
ここで、任意のアルキル又はアルケニルが、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ_１−_４アルコキシ、及び−ＣＯ_２Ｒ^１６から独立して選択される１個、２個、又は３個の置換基により場合により置換されており；
ここで、ベンジルの任意のアリール、ヘテロアリール、及びフェニル部分が、Ｃ_１−４アルキル、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ_１−４アルコキシ、及び−ＣＯ_２Ｒ^１６から独立して選択される１〜５個の置換基により場合により置換されており；
Ｒ^１６が、水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルである、請求項３記載の方法。
Ｒ^１１が、水素であり；
Ｒ^１が、水素又は−Ｃ（Ｏ）Ｒ^１２であり、ここで：
Ｒ^１２が、水素、−ＯＲ^１５、−ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１−Ｃ_８アルキル、Ｃ_２−Ｃ_８アルケニル、又はフェニルであり；
Ｒ^１５が、水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；
Ｒ^ａ及びＲ^ｂが、それぞれ独立して水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルである、
請求項４記載の方法。
Ｒ^１が、水素、Ｒ^ａＲ^ｂＮ−Ｃ（Ｏ）−、又は：

（式中、ｍは、０、１、２、３、４、又は５であり；
ｎは、１〜２００の整数であり；
各存在のＲ^ｘは、独立して、水素又はＣ_１−Ｃ_８アルキルであり；
各存在のＲ^ｙは、独立して、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、−ＮＯ_２、−ＣＮ、又は−ＣＯ_２Ｒ^ｘである）
からなる群より選択されるアシル基である、請求項４記載の方法。
Ｒ^２〜Ｒ^５が、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルコキシ、及びＣ_１−Ｃ_６アシルオキシである、請求項３記載の方法。
Ｒ^１が、水素又はアセチルであり；Ｒ^１１は、水素であり；Ｒ^２〜Ｒ^１０は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロ、ニトロ、及びメチルからなる群より選択される、請求項３記載の方法。
Ｒ^１が、水素又はアセチルであり；Ｒ^１１が、水素であり；Ｒ^２が、水素又はメチルであり；Ｒ^３が、水素であり；Ｒ^４が、Ｃｌ又はＢｒであり；Ｒ^５が、水素であり；Ｒ^６が、水素、−Ｃｌ、−ＣＨ_３、又は−ＮＯ_２であり；Ｒ^７が、水素又はＣｌであり；Ｒ^８が、−Ｈ、−Ｃｌ、又は−ＮＯ_２であり；Ｒ^９が、Ｈ、Ｃｌ、又はＢｒであり；Ｒ^１０が、Ｈ又はＣｌである、請求項７記載の方法。
化合物が、２’，５−ジクロロ−４’−ニトロサリチルアニリド、又はその医薬的に許容される塩である、請求項３記載の方法。
化合物が、２’，５−ジクロロ−４’−ニトロサリチルアニリド２−アミノエタノール塩（ＣＳＳＡ）である、請求項３記載の方法。
代謝疾患又は障害が、体重のコントロールに関係する、請求項２〜１１のいずれか記載の方法。
代謝疾患又は障害が、肥満、肥満関連合併症、高血圧、心血管疾患、ネフロパシー、及び神経障害から選択される、請求項２〜１１のいずれか記載の方法。
代謝疾患又は障害が、血漿グルコース濃度の上昇に関係する、請求項１〜１１のいずれか記載の方法。
代謝疾患又は障害が、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、又は高血糖又はインスリン抵抗性を引き起こす関連疾患である、請求項１〜１１のいずれか記載の方法。
代謝疾患又は障害が、ＩＩ型糖尿病又は前ＩＩ型糖尿病である、請求項１〜１１のいずれか記載の方法。
代謝疾患又は障害がＩ型糖尿病である、請求項１〜１１のいずれか記載の方法。
糖尿病関連疾患又は障害が、心血管疾患、神経変性障害、アテローム性動脈硬化症、高血圧、冠動脈心疾患、癌、アルコール性及び非アルコール性脂肪肝疾患、異常脂質血症、ネフロパシー、網膜症、神経障害、糖尿病性心不全、及び癌から選択される、請求項１〜１１のいずれか記載の方法。
糖尿病関連疾患が神経変性疾患である、請求項１〜１１のいずれか記載の方法。
神経変性疾患が、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、又はアルツハイマー病である、請求項１９記載の方法。
ミトコンドリア脱共役剤が、獣医用薬物として用いられて、糖尿病又は糖尿病関連疾患が治療され、対象が哺乳動物である、請求項１〜１１のいずれか記載の方法。
対象がヒトである、請求項１〜１１のいずれか記載の方法。
ミトコンドリア脱共役剤が、第２の抗糖尿病剤と併用して投与される、請求項１〜１１のいずれか記載の方法。
ミトコンドリア脱共役剤が、第２の抗糖尿病剤の投与に先立って、併用して、又は連続して投与される、請求項２３記載の方法。
第２の抗糖尿病剤が、インスリン、インスリン類似体、スルホニル尿素、ビグアナイド、メグリチニド、チアゾリジンジオン、αグルコシダーゼ阻害剤、ＧＬＰ−１アゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤から選択される、請求項２３記載の方法。
第２の抗糖尿病剤がメトホルミンである、請求項２３記載の方法。
ミトコンドリア脱共役剤が、経口、静脈内、又は腹腔内投与される、請求項１〜１１のいずれか記載の方法。
長期管理の必要な対象に、有効量の、２−ヒドロキシ−安息香酸アニリド化合物、ベンゾイミダゾール、Ｎ−フェニルアントラニル酸塩、フェニルヒドラゾン、サリチル酸、アシルジチオカルバジン酸塩、クマリン、及びミトコンドリア脱共役活性を有する芳香族アミン、又はその医薬的に許容される塩、溶媒和物、又はプロドラッグから選択されるミトコンドリア脱共役剤を投与することを含む、代謝疾患又は障害の長期疾患管理方法。
代謝疾患又は障害が、肥満、肥満関連合併症、又はＩＩ型糖尿病である、請求項２８に記載の方法。
ＩＩ型糖尿病、又は関連疾患又は合併症の治療又は予防用医薬の製造における、ミトコンドリア脱共役剤の使用。
式（Ｉ）：

（式中、
Ｒ^１及びＲ^１１は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、又はインビボで加水分解されて、水素となる保護基であり；
Ｒ^２〜Ｒ^５は、独立して、少なくとも１つは、−ＯＨ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、及びトリハロ−メチルからなる群より選択され；残りは、−Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルケニル、Ｃ_１−６アルキニル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６ハロアルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、及びフェニルから選択され（ここで、ヘテロアリール又はフェニルは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＦ_３、及びメトキシから独立して選択される１〜５個の置換基で場合により置換されている）；
Ｒ^６〜Ｒ^１０は、独立して、少なくとも１つは、−ＯＨ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、及びトリハロ−メチルからなる群より選択され；残りは、−Ｈ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルケニル、Ｃ_１−６アルキニル、Ｃ_１−６アルコキシ、Ｃ_１−６ハロアルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、ヘテロアリール、及びフェニルから選択され（ここで、ヘテロアリール又はフェニルは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＦ_３、及びメトキシから独立して選択される１〜５個の置換基で場合により置換されている））
の化合物、又はその医薬的に許容される塩、溶媒和物、又はプロドラッグ。
Ｒ^１及びＲ^１１が、それぞれ独立して、水素、Ｒ^ａＲ^ｂＮ−Ｃ（Ｏ）−、又は：

（式中、ｍは、０、１、２、３、４、又は５であり；
ｎは、１〜２００の整数であり；
各存在のＲ^ｘは、独立して、水素又はＣ_１−Ｃ_８アルキルであり；
各存在のＲ^ｙは、独立して、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、−ＮＯ_２、−ＣＮ、又は−ＣＯ_２Ｒ^ｘである）
からなる群より独立して選択されるアシル基である、請求項３１記載の化合物。
Ｒ^１が、水素又はアセチルであり；Ｒ^１１が、水素であり；Ｒ^２が、水素又はメチルであり、Ｒ^３が、水素であり、Ｒ^４が、Ｃｌ又はＢｒであり、Ｒ^５が、水素であり、Ｒ^６が水素、−Ｃｌ、−ＣＨ_３、又は−ＮＯ_２であり、Ｒ^７が、水素又はＣｌであり、Ｒ^８が、−Ｈ、−Ｃｌ、−ＮＯ_２であり、Ｒ^９が、Ｈ、Ｃｌ、又はＢｒであり、Ｒ^１０が、Ｈ又はＣｌである、請求項３１記載の化合物。
請求項３１〜３３のいずれか記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩を含む、ＩＩ型糖尿病、肥満、関連障害及び合併症の治療又は予防用組成物。
化合物が、２’，５−ジクロロ−４’−ニトロサリチルアニリド２−アミノエタノール塩（ＣＳＳＡ）である、請求項３４記載の組成物。
医薬的に許容される担体をさらに含む、請求項３４記載の組成物。
対象に治療上有効量の、請求項３１〜３３のいずれか記載のミトコンドリア脱共役剤、又は請求項３４〜３６のいずれか記載の組成物を投与することを含む、対象の代謝疾患又は障害の治療又は予防方法。
代謝疾患又は障害が、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、又は高血糖又はインスリン抵抗性を引き起こす関連疾患である、請求項３７記載の方法。
代謝疾患又は障害がＩＩ型糖尿病である、請求項３７記載の方法。
糖尿病関連疾患又は障害が、心血管疾患、神経変性障害、アテローム性動脈硬化症、高血圧、冠動脈心疾患、癌、アルコール性及び非アルコール性脂肪肝疾患、異常脂質血症、ネフロパシー、網膜症、神経障害、糖尿病性心不全、及び癌から選択される、請求項３７記載の方法。
糖尿病関連疾患が神経変性疾患である、請求項３７記載の方法。
神経変性疾患が、筋萎縮性側索硬化症、パーキンソン病、又はアルツハイマー病である、請求項４１記載の方法。
対象が哺乳動物である、請求項３７記載の方法。
対象がヒトである、請求項３７記載の方法。
ミトコンドリア脱共役剤が、第２の抗糖尿病剤と併用して投与される、請求項３７記載の方法。
ミトコンドリア脱共役剤が、第２の抗糖尿病薬剤の投与に先立って、併用して、又は連続して投与される、請求項４５記載の方法。
第２の抗糖尿病剤が、インスリン、インスリン類似体、スルホニル尿素、ビグアナイド、メグリチニド、チアゾリジンジオン、αグルコシダーゼ阻害剤、ＧＬＰ−１アゴニスト、及びＤＰＰ−４阻害剤から選択される、請求項４５記載の方法。
第２の抗糖尿病剤がメトホルミンである、請求項４５記載の方法。
ミトコンドリア脱共役剤が、経口、静脈内、又は腹腔内投与される、請求項３７記載の方法。
糖尿病、肥満、又は関連障害又は合併症の治療用医薬の製造における、請求項３１〜３３のいずれか記載の化合物のミトコンドリア脱共役剤としての使用。