JP2013521231A - ミトコンドリア標的化抗酸化剤は機械的人工呼吸誘発性横隔膜機能障害および骨格筋萎縮を防止する - Google Patents
ミトコンドリア標的化抗酸化剤は機械的人工呼吸誘発性横隔膜機能障害および骨格筋萎縮を防止する Download PDFInfo
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Abstract
【選択図】なし
Description
本発明は、米国立衛生研究所によるグラントR01HL08783の元で連邦政府の支援を受けて行われた。米国政府は、本発明に一定の権利を有する。
本願は、米国仮出願第61/308,508号(出願日:2010年2月26日、参照によりその全体が本願に組み込まれる)に基づく優先権を主張する。
少なくとも1つの正味の正電荷;
最低4つのアミノ酸;
最大約20のアミノ酸;
正味の正電荷の最小数(pm)とアミノ酸残基の総数(r)との関係であって、3pmがr+1以下の最大数である関係;および
芳香族基の最小数(a)と正味の正電荷の総数(pt)との関係であって、2aがpt+1以下の最大数であり、ただし、aが1であるとき、ptは1であることもできる関係;
を含むペプチドである。いくつかの実施形態において、哺乳動物被験者はヒトである。
(i)水素;
(ii)直鎖または分枝鎖C1-C6アルキル;
(iii)
(iv)
R3およびR4は、それぞれ独立して
(i)水素;
(ii)直鎖または分枝鎖C1-C6アルキル;
(iii)C1-C6アルコキシ;
(iv)アミノ;
(v)C1-C4アルキルアミノ;
(vi)C1-C4ジアルキルアミノ;
(vii)ニトロ;
(viii)ヒドロキシル;
(ix)ハロゲン(ここで、"ハロゲン"はクロロ、フルオロ、ブロモおよびヨードを含む);
から選択され、
R5、R6、R7、R8およびR9は、それぞれ独立して
(i)水素;
(ii)直鎖または分枝鎖C1-C6アルキル;
(iii)C1-C6アルコキシ;
(iv)アミノ;
(v)C1-C4アルキルアミノ;
(vi)C1-C4ジアルキルアミノ;
(vii)ニトロ;
(viii)ヒドロキシル;
(ix)ハロゲン(ここで、"ハロゲン"はクロロ、フルオロ、ブロモおよびヨードを含む);
から選択され、nは1〜5の整数である。
(i)水素;
(ii)直鎖または分枝鎖C1-C6アルキル;
(iii)
(iv)
R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11およびR12は、それぞれ独立して
(i)水素;
(ii)直鎖または分枝鎖C1-C6アルキル;
(iii)C1-C6アルコキシ;
(iv)アミノ;
(v)C1-C4アルキルアミノ;
(vi)C1-C4ジアルキルアミノ;
(vii)ニトロ;
(viii)ヒドロキシル;
(ix)ハロゲン(ここで、"ハロゲン"はクロロ、フルオロ、ブロモおよびヨードを含む);
から選択され、nは1〜5の整数である。
当然のことながら、本発明の特定の側面、方法、実施形態、変形および特徴は、本発明の実質的理解を提供するために、種々のレベルで以下に詳細に説明されている。本明細書で用いられる特定の用語の定義を以下に示す。特記しない限り、本明細書で用いられるすべての学術用語は、一般に、当業者によって通常理解される意味と同じ意味を有する。
一側面において、骨格筋疾患(例えば筋力低下、萎縮、機能障害など)の治療または予防のための組成物および方法が提供される。いくつかの実施形態において、組成物および方法は特定の芳香族カチオン性ペプチドまたはその薬学的に許容される塩、例えば酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩の投与を含む。芳香族カチオン性ペプチドは水溶性でありかつ高極性である。これらの特性にもかかわらず、このペプチドは容易に細胞膜を通過することができる。芳香族カチオン性ペプチドは、一般的には、ペプチド結合で共有結合された最低3つのアミノ酸または最低4つのアミノ酸を含む。芳香族カチオン性ペプチドに存在するアミノ酸の最大数はペプチド結合で共有結合された約20のアミノ酸である。適切には、アミノ酸の最大数は約12であり、より好ましくは約9つであり、最も好ましくは約6つである。
Lys-D-Arg-Tyr-NH2
Phe-D-Arg-His
D-Tyr-Trp-Lys-NH2
Trp-D-Lys-Tyr-Arg-NH2
Tyr-His-D-Gly-Met
Phe-Arg-D-His-Asp
Tyr-D-Arg-Phe-Lys-Glu-NH2
Met-Tyr-D-Lys-Phe-Arg
D-His-Glu-Lys-Tyr-D-Phe-Arg
Lys-D-Gln-Tyr-Arg-D-Phe-Trp-NH2
Phe-D-Arg-Lys-Trp-Tyr-D-Arg-His
Gly-D-Phe-Lys-Tyr-His-D-Arg-Tyr-NH2
Val-D-Lys-His-Tyr-D-Phe-Ser-Tyr-Arg-NH2
Trp-Lys-Phe-D-Asp-Arg-Tyr-D-His-Lys
Lys-Trp-D-Tyr-Arg-Asn-Phe-Tyr-D-His-NH2
Thr-Gly-Tyr-Arg-D-His-Phe-Trp-D-His-Lys
Asp-D-Trp-Lys-Tyr-D-His-Phe-Arg-D-Gly-Lys-NH2
D-His-Lys-Tyr-D-Phe-Glu-D-Asp-D-His-D-Lys-Arg-Trp-NH2
Ala-D-Phe-D-Arg-Tyr-Lys-D-Trp-His-D-Tyr-Gly-Phe
Tyr-D-His-Phe-D-Arg-Asp-Lys-D-Arg-His-Trp-D-His-Phe
Phe-Phe-D-Tyr-Arg-Glu-Asp-D-Lys-Arg-D-Arg-His-Phe-NH2
Phe-Try-Lys-D-Arg-Trp-His-D-Lys-D-Lys-Glu-Arg-D-Tyr-Thr
Tyr-Asp-D-Lys-Tyr-Phe-D-Lys-D-Arg-Phe-Pro-D-Tyr-His-Lys
Glu-Arg-D-Lys-Tyr-D-Val-Phe-D-His-Trp-Arg-D-Gly-Tyr-Arg-D-Met-NH2
Arg-D-Leu-D-Tyr-Phe-Lys-Glu-D-Lys-Arg-D-Trp-Lys-D-Phe-Tyr-D-Arg-Gly
D-Glu-Asp-Lys-D-Arg-D-His-Phe-Phe-D-Val-Tyr-Arg-Tyr-D-Tyr-Arg-His-Phe-NH2
Asp-Arg-D-Phe-Cys-Phe-D-Arg-D-Lys-Tyr-Arg-D-Tyr-Trp-D-His-Tyr-D-Phe-Lys-Phe
His-Tyr-D-Arg-Trp-Lys-Phe-D-Asp-Ala-Arg-Cys-D-Tyr-His-Phe-D-Lys-Tyr-His-Ser-NH2
Gly-Ala-Lys-Phe-D-Lys-Glu-Arg-Tyr-His-D-Arg-D-Arg-Asp-Tyr-Trp-D-His-Trp-His-D-Lys-Asp
Thr-Tyr-Arg-D-Lys-Trp-Tyr-Glu-Asp-D-Lys-D-Arg-His-Phe-D-Tyr-Gly-Val-Ile-D-His-Arg-Tyr-Lys-NH2
(a)非極性アミノ酸:Ala(A) Ser(S) Thr(T) Pro(P) Gly(G) Cys(C);
(b)酸性アミノ酸:Asn(N) Asp(D) Glu(E) Gln(Q);
(c)塩基性アミノ酸:His(H) Arg(R) Lys(K);
(d)疎水性アミノ酸:Met(M) Leu(L) Ile(I) Val(V);および
(e)芳香族アミノ酸:Phe(F) Tyr(Y) Trp(W) His(H)。
表5.μオピオイド活性を有するペプチドアナログ
Cha=シクロヘキシルアラニン
Dab=ジアミノ酪酸
Dap=ジアミノプロピオン酸
Dmt=ジメチルチロシン
Mmt=2'-メチルチロシン
Tmt=N,2',6'-トリメチルチロシン
Hmt=2'-ヒドロキシ,6'-メチルチロシン
dnsDap=β-ダンシル-L-α,β-ジアミノプロピオン酸
atnDap=β-アントラニロイル-L-α,β-ジアミノプロピオン酸
Bio=ビオチン
ROS放出の増加は、酸化ストレスおよび、それに付随するMV誘発性および不使用誘発性骨格筋筋力低下における筋肉疾患(例えば筋力低下、萎縮、機能障害)の原因因子であることが示されている。ROSは、主に筋細胞におけるミトコンドリアによって生成されると考えられ、以下の実験例(Experimental Example)に示されるように、ミトコンドリアからのROS放出は、骨格筋(例えば横隔膜、ヒラメ筋および足底筋)疾患をもたらすMV誘発性および不使用誘発性酸化ストレスに関与する。NADPH活性化およびキサンチンオキシダーゼの活性化もまたROSの生成に関与するが、NADPH活性はわずか(すなわち5%)であり、キサンチンオキシダーゼ活性の阻害は、骨格筋不使用誘発性またはMV誘発性酸化ストレスの効果およびそれに付随する萎縮および筋力低下を完全には防止しない。さらに、ミトコンドリアからのROS放出は、横隔膜および他の骨格筋におけるプロテアーゼ、例えばカルパイン、カスパーゼ-3および/またはカスパーゼ-12のMVまたは不使用誘発性活性化の上流シグナルである。
細胞、器官または組織とペプチドとを接触させるための、当業者に公知の任意の方法を用いることができる。適切な方法は、in vitro法、ex vivo法またはin vivo法を含む。in vivo法は、一般的には、芳香族カチオン性ペプチド、例えば前述の芳香族カチオン性ペプチドの哺乳動物、適切にはヒトへの投与を含む。in vivoで治療に用いる場合、芳香族カチオン性ペプチドまたはその薬学的に許容される塩、例えば酢酸塩またはトリフルオロ酢酸塩は有効量(すなわち、所望の治療効果を得る量)で被験者に投与される。1回量および用法・用量は、被験者における筋肉疾患の程度、用いられる特定の芳香族カチオン性ペプチドの特徴(例えばその治療係数)、被験者および被験者の病歴によって左右される。
A.実験計画
本実験の目的は、ミトコンドリアからのROS放出がMV誘発性横隔膜筋力低下において果たす役割を明らかにし、さらにラットのミトコンドリア機能および横隔膜筋に対するミトコンドリア標的化抗酸化剤ペプチド(SS-31)の効果を明らかにすることであった。ラットの2つの異なる群(1および2)を以下のように処置した。
覚醒時自発的呼吸下ラットにおける横隔膜収縮機能、線維断面積(CSA)およびミトコンドリア機能に対するミトコンドリア標的化抗酸化剤(SS-31)の効果を測定するために、動物を次のとおりに処置した。動物(n=6/群)を2つの実験群:(1)対照群-3時間毎に12時間生理食塩水(i.p.)を注入;および(2)ミトコンドリア抗酸化剤群-3時間毎に12時間SS-31を注入(i.p.)、の1つに無作為に割り付けた。12時間の処置時間の完了時に、横隔膜収縮機能、線維CSA、ミトコンドリアROS放出およびミトコンドリア呼吸機能を測定した。
MV誘発性横隔膜酸化ストレス後のミトコンドリアからのROS放出および筋力低下を分析するために、ラットを3つの実験群(n=12/群):(1)急性麻酔対照群;(2)12時間のMV群(MV);および3)ミトコンドリア標的化抗酸化剤SS-31で処置した12時間のMV群(MVSS)、の1つに無作為に割り付けた。我々の多数の依存する測定値のために多量の組織を必要とするため、各実験群から6匹の動物をミトコンドリア測定のために用い、各群における残りの6匹の動物はすべての他の生化学的アッセイに用いた。
ミトコンドリア標的化抗酸化剤-化学的詳細および実験的送達。本実験に使用するために、"SS-31"で表わされるミトコンドリア標的化抗酸化剤を選択した。この分子は、交互芳香族カチオン性モチーフを含み、ミトコンドリアを選択的に標的とする小さな水溶性ペプチドのファミリーに属する。例えば、Zhao et al., Cell-permeable peptide antioxidants targeted to inner mitochondrial membrane inhibit mitochondrial swelling, oxidative cell death, and reperfusion injury. The Journal of biological chemistry. Vol., 279(33): 34682-34690 (2004)を参照のこと。
1.自発的呼吸下動物において、SS-31は横隔膜線維のCSAまたは機能に影響しない
覚醒時自発的呼吸下ラットにおけるミトコンドリア抗酸化剤SS-31の横隔膜収縮機能、線維断面積(CSA)およびミトコンドリア機能に対する影響を測定するために、12時間のMV期間中に機械的人工呼吸を行った動物に投与したのと同じレベルのSS-31で動物を12時間処置した。下記の表7A〜7Cに示す結果は、無処置対照動物と比較して、SS-31による動物の処置は、横隔膜ミトコンドリアからのROS放出および横隔膜ミトコンドリアの呼吸比に影響しないことを示している。さらにまた、対照と比較して、SS-31による動物の処置は横隔膜収縮機能および線維CSAを変化させなかったことをこの結果は示している。
ホメオスタシスを維持するためのMVプロトコルの有効性を評価するために、すべての動物において、実験の最初およびMV中の種々の時間間隔で、動脈圧、動脈血PC02、動脈血P02および動脈血pHを測定した。経時的に動脈圧、血液ガスおよびpHの小さな変化が存在したが、動脈圧および血液ガス/pHの恒常性はよく維持されていたことを我々の結果は示している(表8)。
表9.
ミトコンドリアからのROS放出が横隔膜におけるMV誘発性酸化ストレスに必要かどうかを決定するために、酸化障害の2つのバイオマーカーを測定した。すなわち横隔膜の4-HNE付加細胞質ゾルタンパク質レベルおよび筋線維タンパク質のタンパク質カルボニルレベルである。その結果、SS-31による動物の処置が、通常は長期のMVと関連するタンパク質カルボニルおよび4-HNE付加タンパク質の両方のROS誘発性増加に対して横隔膜を保護したことが明らかとなった。図2を参照のこと。この点に関して、対照ラット(CON)、機械的人工呼吸を行ったラット(MV)およびミトコンドリア標的化抗酸化剤SS-31で処置した機械的人工呼吸を行ったラット(MVSS)の横隔膜における酸化修飾タンパク質レベルを測定した。
ミトコンドリアからのROS放出がMV誘発性横隔膜収縮機能障害に果たす役割を評価するために、対照、MVおよびSS-31で処置したMV動物から得られた横隔膜筋のストリップを用いてin vitroで横隔膜収縮性能を測定した。SS-31を用いるミトコンドリアからのROS放出の予防により、長期のMVと関連する横隔膜収縮機能障害の防止に成功した。図3を参照のこと。図3に示すように、対照およびミトコンドリア標的化抗酸化剤のありなしで機械的人工呼吸を行ったラットにおいて、長期のMVは横隔膜の力-頻度応答(in vitro)に変化をもたらす。しかしながら、任意の刺激頻度において、CON群とMVSS群との間に横隔膜力発生における有意差は認められなかった。数値は平均値±SEMである。SEMバーの一部はサイズが小さいため非表示であることに注意されたい。* = CONおよびMVSS(n=6/群)の両方との有意差が認められた(p<0.05)。図3を参照のこと。
タンパク質分解のユビキチン-プロテアソーム系は、長期のMV中に横隔膜において活性化され、従ってMV誘発性横隔膜タンパク質分解に寄与すると考えられる。タンパク質分解のユビキチン-プロテアソーム系に対するミトコンドリアからのROS放出の効果を測定するために、横隔膜における2つの重要な筋肉特異的E3リガーゼ(すなわち、アトロギン-1/MAFbxおよびMuRF-1)のmRNAおよびタンパク質レベルに加えて20Sプロテアソーム活性を測定した。SS-31によるミトコンドリアからのMV誘発性ROS放出の予防は、横隔膜におけるMV誘発性20Sプロテアソーム活性増加を防止したことをこの結果は示している。図5Aを参照のこと。さらにまた、長期のMVは両方のMV群の横隔膜におけるアトロギン-1/MAFbx mRNAレベルの有意な増加をもたらしたことをこの結果を示している。しかしながら、SS-31による動物の処置は、横隔膜におけるアトロギン-1/MAFbxタンパク質レベルのMV誘発性増加を有意に鈍化させた。図5Bを参照のこと。
ミトコンドリアからのMV誘発性ROS放出の増加の予防はプロテアーゼ活性化に対して横隔膜を保護すること明らかにした後、不使用誘発性筋肉タンパク質分解のマーカーとして横隔膜におけるサルコメアタンパク質アクチンの相対存在量を測定した。アクチンは不使用による筋萎縮中に優先的に分解されるので、アクチンタンパク質レベルの評価はタンパク質分解の指標を提供する。Li et al, Interleukin-1 stimulates catabolism in C2C12 myotubes. American Journal of Physiology., Vol., 297(3):C706-714 (2009) を参照のこと。対照動物およびMVSS動物の両方からの横隔膜筋と比較して、ミトコンドリアによる抗酸化剤なしで長期のMVに暴露された動物の横隔膜筋においてアクチン存在量は著しく低下していたことをこの結果は示している。図8を参照のこと。従って、ミトコンドリアからのMV誘発性ROS放出の予防は、プロテアーゼ活性化を防止したばかりでなく、この処置は、MV誘発性横隔膜タンパク質分解を防止した。
A.実験計画および方法:
本実施例の目的は、ミトコンドリアでのMV誘発性酸化は不使用誘発性骨格筋筋力低下に一般化できることを明らかにすることであった。2つの異なるマウス群(1および2)を次のとおりに処置した。
正常な可動マウスを、マウス1群あたり8匹を有する2つの群、AおよびBに無作為に割り付けた。群Aのマウスには滅菌生理食塩水の注射を行い、群Bのマウスにはミトコンドリア標的化ペプチドSS-31の注射を行った。
マウスの後肢をギプス固定によって14日間固定し、それによって後肢の筋萎縮を誘発した。ギプス固定を行ったマウスには、滅菌生理食塩水(0.3ml)の注射またはペプチドSS-31(0.3ml)を含む注射を行った。未処置マウスの対照群もまた本実験に用いた。
動物
本実験に72匹の成体オスC57B16マウス(21〜28週齢、体重26.44±0.54g)を用いた。動物を12:12時間の明暗サイクルで維持し、実験期間を通じて食物(AIN93diet)および水を自由に与えた。University of Floridaの研究機関の動物管理使用委員会はこれらの実験を承認した。
ミトコンドリアからのROS生成が固定誘発性骨格筋萎縮に役割を果たしているという仮説を試験するために、3つの実験群(n=24/群):1)無治療(対照)群;2)14日間の後肢固定群(ギプス);および3)ミトコンドリア標的化抗酸化剤SS-31で処置した14日間の後肢固定群(ギプス+SS)、の1つにマウスを無作為に割り付けた。14日間の後肢固定群(ギプス)には生理食塩水注入を行ったのに対し、この群の動物は固定期間中、ミトコンドリア標的化抗酸化剤SS-31で処置したことに注意されたい。
固定。マウスをイソフルランガス(3%で導入、0.5〜2.5%で維持)で麻酔した。麻酔した動物を、ヒラメ筋および足底筋の最大萎縮を誘導するために、足底屈位置で肢関節で左右相称にギプス固定した。後肢および尾部の身体の4分の1を共に焼き石膏のギプス固定によって包んだ。擦傷を防止するために、ギプスの下に薄層の詰め物を置いた。さらに、動物がギプスを噛むのを防ぐために、ファイバーグラス材料のストリップの1つを焼き石膏上に使用した。噛まれた焼き石膏、擦傷、静脈閉塞および歩行障害に関してマウスを毎日モニターした。
透過化筋線維の調製。この技術は従来の方法を変更して用いた(Korshunov SS, et al., High protonic potential actuates a mechanism of production of reactive oxygen species in mito- chondria. FEBS Lett 416: 15-18, 1997; Tonkonogi M, et al, Reduced oxidative power but unchanged antioxidative capacity in skeletal muscle from aged humans. Pfliigers Arch 446: 261-269, 2003)。簡潔に言えば、ヒラメ筋および足底筋の小部分(〜25mg)を切除し、氷冷した緩衝液X(60mM K-MES、35mM KCl、7.23mM K2EGTA、2.77mM CaK2EGTA、20mMイミダゾール、0.5mM DTT、20mMタウリン、5.7mM ATP、15mM PCrおよび6.56mM MgCl2、pH7.1)を含むプラスチックペトリ皿に乗せた。筋肉から結合組織を切り取り、線維束(湿重量4〜8mg)に切り分けた。顕微鏡下で一対の特に鋭いピンセットを用いて、線維束の表面積を最大化するように、氷冷した緩衝液Xに筋線維を穏やかに切り離して入れた。筋線維を透過化するために、回転装置上4℃で30間、50μg/mlのサポニンを含む氷冷した緩衝液X中で各線維束をインキュベートした。次いで、氷冷した緩衝液Z(110mM K-MES、35mM KCl、1mM EGTA、5mM K2HP04および3mM MgCl2、0.005mMグルタミン酸塩および0.02mMリンゴ酸塩ならびに0.5mg/ml BSA、pH7.1)中で透過化束を洗浄した。
筋線維の断面積。凍結したヒラメ筋および足底筋試料(OCT中に包埋)からの断片をクリオトーム(Shandon社、ピッツバーグ、ペンシルベニア州)を用いて10ミクロンに切断し、前述の線維断面積分析(CSA)のためにジストロフィン、ミオシンH鎖(MHC)IおよびMHCタイプIIaタンパク質を染色した(McClung JM, et al, Antioxidant administration attenuates mechanical ventilation-induced rat diaphragm muscle atrophy independent of protein kinase b (pkb akt) signalling. J Physiol 2007;585:203-215)。Scionソフトウェア(NIH)を用いてCSAを測定した。
一元配置分散分析(ANOVA)を用いて各従属変数に関して群間の比較を行い、適切な場合には、事後検定でTukey HSD(honestly significant difference)検定を行った。p<0.05で有意性を判定した。データは平均値±SEMで示す。
図9〜18に示すように、SS-31は正常な骨格筋サイズまたはミトコンドリア機能に効果を示さなかった。しかしながら、SS-31は、後肢固定から生じる酸化障害および関連する筋力低下(例えば、萎縮、収縮機能障害など)を防止することができた。
図9A〜Dに示すように、可動マウスにおいて、SS-31は、ヒラメ筋重量、呼吸共役比(RCR)、ミトコンドリア状態3呼吸またはミトコンドリア状態4呼吸にそれぞれ効果を示さなかった。RCRは、酸素消費によって測定される、状態3呼吸の状態4呼吸に対する呼吸指数比である。同様に、図10A〜Cは、SS-31が、正常なヒラメ筋における異なるサイズの筋線維に変動する効果を何も示さなかったことを示す。さらにまた、図11A〜Dに示すように、SS-31は、足底筋重量、呼吸共役比(RCR)、ミトコンドリア状態3呼吸、またはミトコンドリア状態4呼吸にそれぞれ効果を示さなかった。同様に、SS-31は正常な足底筋線維組織における異なるサイズの筋線維に変動する効果をなんら付与しなかったことを図12A〜Bは示している。
図13A〜Dに示すように、7日間のギプス固定は、ヒラメ筋重量(図13A)、RCR(図13B)およびミトコンドリア状態3呼吸(図13C)に有意な減少をもたらしたが、それらはすべて、SS-31の投与によって覆された。ギプス固定は、状態4呼吸に有意な効果を示さなかった。同様に、7日間のギプス固定は、ヒラメ筋から単離されたミトコンドリアによるH2O2生成を有意に増加させたが、これもまた同様にSS-31によって防止された。図14A〜Bを参照のこと。図14Bに示すように、ヒラメ筋における3つのタイプの線維(タイプI、IIaおよびIIb/x)の断面積減少をSS-31は防止した。
Claims (19)
- 哺乳動物被験者における骨格筋疾患の治療または予防方法であって、ペプチドD-Arg-2',6'Dmt-Lys-Phe-NH2またはその薬学的に許容される塩の治療的有効量を哺乳動物被験者に投与することを含む前記方法。
- 前記骨格筋が横隔膜筋を含む、請求項1記載の方法。
- 前記骨格筋疾患が機械的人工呼吸(MV)に起因する、請求項1記載の方法。
- 前記MVの期間が少なくとも10時間である、請求項3記載の方法。
- 前記ペプチドがMV前、MV中またはその両方において被験者に投与される、請求項3記載の方法。
- 前記ペプチドが経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内または筋肉内投与される、請求項1記載の方法。
- 哺乳動物被験者におけるMV誘発性横隔膜機能障害の治療または予防方法であって、ペプチドD-Arg-2',6'Dmt-Lys-Phe-NH2またはその薬学的に許容される塩の治療的有効量を哺乳動物被験者に投与することを含む前記方法。
- 前記ペプチドがMV前、MV中またはその両方において被験者に投与される、請求項7記載の方法。
- 前記MVが少なくとも10時間である、請求項7記載の方法。
- 前記ペプチドが経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内または筋肉内投与される、請求項7記載の方法。
- 哺乳動物被験者における不使用誘発性骨格筋萎縮の治療または予防方法であって、ペプチドD-Arg-2',6'Dmt-Lys-Phe-NH2またはその薬学的に許容される塩の治療的有効量を哺乳動物被験者に投与することを含む前記方法。
- 前記骨格筋がヒラメ筋もしくは足底筋、またはヒラメ筋および足底筋の両方を含む、請求項11記載の方法。
- 前記ペプチドが不使用前または不使用中に被験者に投与される、請求項11記載の方法。
- 前記ペプチドが経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内または筋肉内投与される、請求項11記載の方法。
- 治療を必要とする哺乳動物被験者の骨格筋における酸化障害亢進を特徴とする疾患または状態の治療方法であって、D-Arg-2',6'Dmt-Lys-Phe-NH2またはその薬学的に許容される塩の有効量を被験者に投与することを含む前記方法において、前記酸化障害が、対照レベルと比較しての、カルパイン、カスパーゼ-3、カスパーゼ12、20Sプロテアソーム、E3リガーゼ、アトロギン-1/MAFbx、MuRF-1、αII-スペクトリン、サルコメアタンパク質、4-HNE付加細胞質ゾルタンパク質および、筋線維タンパク質におけるタンパク質カルボニルからなる群から選択される1以上のバイオマーカーの遺伝子発現レベル、タンパク質レベル、活性または分解の変化と関連する前記方法。
- 前記酸化障害亢進を特徴とする疾患または状態が、不使用誘発性骨格筋萎縮またはMV誘発性横隔膜機能障害を含む、請求項15記載の方法。
- 前記対照レベルが、不使用誘発性骨格筋萎縮またはMV誘発性横隔膜機能障害に苦しんでいない健常者からの1以上のバイオマーカーレベルである、請求項15記載の方法。
- ペプチドが酸化障害亢進の前またはその間に被験者に投与される、請求項15記載の方法。
- ペプチドが経口、局所、全身、静脈内、皮下、腹腔内または筋肉内投与される、請求項15記載の方法。
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