JP2013056040A - 蛍光観察装置 - Google Patents

Abstract

【課題】補正誤差を低減して被写体の定量的な情報を取得する。
【解決手段】光源１０と、励起光が照射された被写体Ｆの蛍光画像Ｇ１を取得する蛍光画像生成部４１と、照明光が照射された被写体Ｆの白色光画像Ｇ２を取得する白色光画像生成部４２と、これらの画像Ｇ１，Ｇ２により補正蛍光画像Ｇ３を生成する画像補正部４３と、画像Ｇ３全体の階調値の平均値およびその第１係数と、画像Ｇ３の階調値の標準偏差およびその第２係数に基づいて閾値を設定する閾値設定部４５と、その閾値を超える階調値を有する画像Ｇ３上の領域を注目領域と判定して抽出する抽出部４７と、その注目領域と画像Ｇ２とを対応づけて表示するモニタ５０と、抽出部４７による判定の正否を観察者に入力させる入力部５３とを備え、閾値設定部４５が、入力部５３により入力された入力結果を反映させるように第１係数および第２係数の少なくとも一方を設定する蛍光観察装置１００を提供する。
【選択図】図１

Description

本発明は、蛍光観察装置に関するものである。

従来、観察対象の反射光画像と蛍光画像とを取得し、反射光画像により蛍光画像を除算することで、観察距離や観察角度による蛍光画像の明るさの変動を補正する蛍光観察装置が知られている（例えば、特許文献１、特許文献２および特許文献３参照。）。

特開昭６２−２４７３３２号公報 特公平３−５８７２９号公報 特開２００６−１７５０５２号公報

しかしながら、蛍光と反射光とでは、撮像される明るさにおける観察距離に対する依存性や観察角度に対する依存性が異なるため、従来のように、蛍光画像を反射光画像で除算をしただけでは、観察距離と観察角度の影響を補正しきれず、一定の誤差が生じてしまうという問題がある。そして、癌と正常部とを区別する閾値を設定したとしても、観察条件が変化するとその閾値が適切ではなくなり、癌の部分が表示されなかったり正常部が明るく表示されてしまったりすることも起こりうるという不都合がある。

本発明は、このような事情に鑑みてなされたものであって、観察距離と観察角度の影響に対する補正誤差を低減し、被写体の定量的な情報を取得することができる蛍光観察装置を提供することを目的としている。

上記課題を解決するために、本発明は以下の手段を採用する。
本発明は、被写体に励起光および参照光を照射する照明部と、該照明部からの前記励起光の照射により前記被写体において発生した蛍光を撮影し蛍光画像を取得する蛍光画像取得部と、前記照明部からの前記参照光の照射により前記被写体から戻る戻り光を撮影し参照画像を取得する参照画像取得部と、該参照画像取得部により取得された前記参照画像を用いて、前記蛍光画像取得部により取得された前記蛍光画像を補正し補正蛍光画像を生成する補正蛍光画像生成部と、該補正蛍光画像生成部により生成された前記補正蛍光画像全体の階調値の平均値、該階調値の標準偏差、前記補正蛍光画像全体の階調値の平均値の重み付けに係る第１係数、および、前記階調値の標準偏差の重み付けに係る第２係数に基づいて階調値閾値を設定する閾値設定部と、該閾値設定部により設定された前記階調値閾値を超える階調値を有する前記補正蛍光画像上の領域を注目領域と判定して抽出する抽出部と、該抽出部により抽出された前記注目領域と前記参照画像とを対応づけて表示する表示部と、該表示部に表示された前記注目領域に対する前記抽出部による前記判定の正否について観察者に入力させる正否入力部とを備え、前記閾値設定部が、前記正否入力部により入力された入力結果を反映させるように前記第１係数および前記第２係数の少なくとも一方を設定する蛍光観察装置を提供する。

本発明によれば、照明部から発せられた励起光が被写体に照射されると、蛍光画像取得部により被写体において発生した蛍光の蛍光画像が取得される。また、照明部から励起光とともに発せられた参照光が被写体に照射されると、参照画像取得部によりその戻り光の参照画像が取得される。そして、補正蛍光画像生成部において、同一の被写体に対する蛍光画像が参照画像で補正されることにより、観察距離や観察角度に依存する蛍光強度変化を軽減した補正蛍光画像が生成される。

生成された補正蛍光画像の内、抽出部により注目領域と判定されて抽出された階調値閾値を超える階調値を有する領域が、表示部により参照画像と対応づけられて表示されることにより、観察者は蛍光の強い領域と対応づけて被写体の形状を観察することができる。

この状態で、表示された画像を見た観察者が、抽出部による注目領域の判定が正しいか否かの入力を正否入力部により入力すると、閾値設定部により、その入力結果が反映されるように設定された第１係数および第２係数の少なくとも一方が設定される。そして、補正蛍光画像全体の階調値の平均値とその階調値の標準偏差、設定した第１係数および第２係数の少なくとも一方に基づいて新たな階調値閾値が設定される。これにより、観察者の判定結果を利用して、注目領域を抽出するための階調値閾値を補正蛍光画像ごとに設定し、観察距離と観察角度の影響に対する補正誤差を低減した被写体の定量的な情報を取得することができる。

上記発明においては、前記補正蛍光画像生成部が、前記蛍光画像を前記参照画像で除算することとしてもよい。
このように構成することで、簡易な演算処理により定量性の高い補正蛍光画像を生成することができる。

また、上記発明においては、前記閾値設定部が、前記正否入力部により前記判定が正しいと入力されたときは、前記第１係数または前記第２係数の一方を固定値とし、他方を維持するかまたは小さくすることとしてもよい。

抽出部による注目領域の判定が正しいと観察者により入力された場合において、注目領域の階調値と階調値閾値との差が十分に大きいときは、その階調値閾値が適当である。したがって、この場合は第１係数および第２係数の一方を固定するとともに他方も維持する、すなわち、階調値閾値を維持することで、次の注目領域の抽出時にも必要な注目領域が見落とされることなく抽出される可能性が高い。

一方、注目領域の階調値と階調値閾値との差が僅かなときは、その階調値閾値よりも低い階調値を有する領域についても、以降の抽出においては注目領域として抽出されるべきであるとする可能性がある。したがって、この場合は第１係数および第２係数の一方を固定し他方を小さくして階調値閾値を下げることで、次の注目領域の抽出時には、現在の階調値閾値よりも低い階調値を有する領域も注目領域として抽出し、必要な注目領域が見落されてしまうのを防止することができる。

また、上記発明においては、前記閾値設定部は、前記注目領域の階調値が、前記階調値閾値よりも所定の割合だけ高い上位階調値閾値を上回っているときは前記他方を維持し、該上位階調値閾値を下回っているときは前記他方を小さくすることとしてもよい。

このように構成することで、上位階調値閾値により、階調値閾値の所定の割合の範囲で他方の係数を維持するか小さくするかを場合分けすることができる。したがって、階調値閾値の所定の割合を適当に選ぶことで、観察することが必要な注目領域の見落としを防止しつつ、効率的に注目領域を抽出することができる。

また、上記発明においては、前記閾値設定部が、前記正否入力部により前記判定が誤りであると入力されたときは、前記第１係数および前記第２係数の一方を固定値とし、他方を大きくすることとしてもよい。

抽出部による注目領域の判定が間違っていると観察者により入力されたときは、その注目領域を抽出した階調値閾値以下の階調値を有する領域については、以降の抽出においても注目領域として抽出されるべきであるとする可能性が低い。この場合は、第１係数および第２係数の一方を固定し他方を大きくして階調値閾値を上げることで、観察する必要のない領域が注目領域として誤って抽出されてしまうのを抑制し、正しい注目領域を効率よく抽出することができる。

また、上記発明においては、前記閾値設定部が、下式によって前記階調値閾値を算出することとしてもよい。
Ｓ０＝ａ×ｍ＋ｂ×σ
ここで、
Ｓ０：階調値閾値
ａ：第１係数
ｂ：第２係数
ｍ：補正蛍光画像全体の階調値の平均値
σ：補正蛍光画像全体の階調値の標準偏差
である。

また、上記発明においては、前記抽出部が前記抽出領域の階調値の平均値を算出するとともに、前記閾値設定部が前記抽出領域の階調値の平均値に基づいて第３係数を算出し、前記抽出部により前記注目領域が抽出され、前記入力部によりその注目領域に対する観察者の判定が入力されたときに、その判定結果と前記第３係数とを対応づけて記憶する記憶部を備え、前記閾値設定部が、新たな注目領域に対して前記正否入力部により前記判定が正しいと入力されたときに、入力された判定結果に対応して前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の平均値よりも所定の割合だけ低い下位係数と、現在の前記第１係数との低い方を新たな第１係数とすることとしてもよい。

このように構成することで、最新の判定結果のみならず、過去における判定結果をも反映した第１係数により新たな階調値閾値を設定することができる。この場合において、抽出領域の階調値の平均値に基づいて算出された過去の第３係数の平均値よりも所定の割合だけ低い下位係数と現在の第１係数との低い方を新たな第１係数とすることにより、病変の疑いがある領域をより精度よく抽出することができる。

また、上記発明においては、前記抽出部が前記抽出領域の階調値の平均値を算出するとともに、前記閾値設定部が前記抽出領域の階調値の平均値に基づいて第３係数を算出し、前記抽出部により前記注目領域が抽出され、前記入力部によりその注目領域に対する観察者の判定が入力されたときに、その判定結果と前記第３係数とを対応づけて記憶する記憶部を備え、前記閾値設定部が、新たな注目領域に対して前記正否入力部により前記判定が正しいと入力されたときに、入力された判定結果に対応して前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の平均値よりも所定の割合だけ低い下位係数と、現在の前記第２係数との低い方を新たな第２係数とすることとしてもよい。
このように構成することで、過去における判定結果をも反映した第２係数により新たな階調値閾値を設定し、病変の疑いがある領域をより精度よく抽出することができる。

また、上記発明においては、前記抽出部が前記抽出領域の階調値の平均値を算出するとともに、前記閾値設定部が前記抽出領域の階調値の平均値に基づいて第３係数を算出し、前記抽出部により前記注目領域が抽出され、前記入力部によりその注目領域に対する観察者の判定が入力されたときに、その判定結果と前記第３係数とを対応づけて記憶する記憶部を備え、前記閾値設定部が、新たな注目領域に対して前記正否入力部により前記判定が正しいと入力されたときに、入力された判定結果に対応して前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の標準偏差を算出するとともに、算出した前記第３係数の標準偏差を前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の平均値から減算した下位係数と、現在の第１係数の低い方を新たな第１係数とすることとしてもよい。

このように構成することで、被験者間のバラツキ、同一被験者における経過時間的なバラツキ、観察者による判定入力のバラツキを加味して第１係数を更新し、より適切に階調値閾値を設定することができる。

また、上記発明においては、前記抽出部が前記抽出領域の階調値の平均値を算出するとともに、前記閾値設定部が前記抽出領域の階調値の平均値に基づいて第３係数を算出し、前記抽出部により前記注目領域が抽出され、前記入力部によりその注目領域に対する観察者の判定が入力されたときに、その判定結果と前記第３係数とを対応づけて記憶する記憶部を備え、前記閾値設定部が、新たな注目領域に対して前記正否入力部により前記判定が正しいと入力されたときに、入力された判定結果に対応して前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の標準偏差を算出するとともに、算出した前記第３係数の標準偏差を前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の平均値から減算した下位係数と、現在の前記第２係数との低い方を新たな第２係数とすることとしてもよい。
このように構成することで、被験者間のバラツキ、同一被験者における経過時間的なバラツキ、観察者による判定入力のバラツキを加味して第２係数を更新することができる。

また、上記発明においては、前記閾値設定部が、前記正否入力部により前記抽出部による前記判定が誤りであると入力されたときは、その入力された判定結果に対応して前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の平均値を新たな第１係数とすることとしてもよい。

このように構成することで、抽出部による判定が誤りであったときは、過去に誤りであると判定された際の第３係数の平均値により決まる第１係数により新たな階調値閾値が設定される。したがって、観察する必要のない領域が注目領域として抽出されてしまう無駄を防止し、効率的に注目領域を抽出することができる。

また、上記発明においては、前記閾値設定部が、前記正否入力部により前記抽出部による前記判定が誤りであると入力されたときは、その入力された判定結果に対応して前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の平均値を新たな第２係数とすることとしてもよい。
このように構成することで、抽出部による判定が誤りであったときに、過去に誤りであると判定された際の第３係数の平均値により決まる第２係数により新たな階調値閾値を設定し、効率的に注目領域を抽出することができる。

また、上記発明においては、前記閾値設定部が、下式によって前記第３係数を算出することとしてもよい。
ａ０＝（ｍ０−ｂ×σ）／ｍ
ここで、
ａ０：第３係数
ｍ０：抽出領域の階調値の平均値
ｂ：第２係数
σ：補正蛍光画像全体の階調値の標準偏差
ｍ：補正蛍光画像全体の階調値の平均値
である。

また、上記発明においては、前記閾値設定部が、下式によって前記第３係数を算出することとしてもよい。
ｂ０＝（ｍ０−ａ×ｍ）／σ
ここで、
ｂ０：第３係数
ｍ０：抽出領域の階調値の平均値
ａ：第１係数
ｍ：補正蛍光画像全体の階調値の平均値
σ：補正蛍光画像全体の階調値の標準偏差
である。

また、上記発明においては、前記表示部が、前記注目領域と前記参照光画像とを重畳させて表示することとしてもよい。
このように構成することで、注目領域と参照光画像との対応関係を観察者が一目で把握し、注目領域のみならず、その周辺も観察することができる。したがって、観察者がより詳細な情報を得ることができ、抽出部による判定結果の正否をより正確に判定することができる。

上記発明においては、前記抽出部が、前記閾値を越える階調値を有する領域のうち、該領域の画素数が画素数閾値を超える範囲を前記注目領域として抽出することとしてもよい。
このようにすることで、階調値は高いが面積は小さい領域（ノイズ等）が注目領域として抽出されてしまうことを防止することができる。これにより、ノイズによる誤抽出を抑制し、注目領域を効率よく抽出することができる。

また、上記発明においては、前記注目領域の階調値と過去の判定結果に関する情報とを対応づけて保存する保存部を備え、前記表示部が、前記注目領域ごとに、その注目領域の階調値に対応する過去の判定結果に関する情報を前記保存部から読み出して表示することとしてもよい。

このようにすることで、注目領域が抽出されたときは、過去の判定結果に関する情報が表示部に表示されるので、観察者が抽出部による判定結果の正否を判定するときに、表示された過去の判定結果を参考にすることができる。その結果、観察者により正確な判定を行うことができる。

本発明によれば、観察距離と観察角度の影響に対する補正誤差を低減し、被写体の定量的な情報を取得することができるという効果を奏する。

本発明の第１実施形態に係る蛍光観察装置の概略構成図である。 閾値の設定について示すフローチャートである。 標準偏差の係数の設定について示すフローチャートである。 図１の蛍光観察装置のモニタに表示される重畳画像と抽出部による抽出の正否を促す選択の一例を示す図である。 本発明の第１実施形態の変形例に係る蛍光観察装置における標準偏差の係数の設定について示すフローチャートである。 本発明の第２実施形態に係る蛍光観察装置の概略構成図である。 図６の蛍光観察装置の保存部に記憶されるデータを説明する図である。 本発明の第２実施形態に係る蛍光観察装置により設定される係数の変化を示す図である。

〔第１実施形態〕
以下、本発明の第１実施形態に係る蛍光観察装置について、図面を参照して説明する。
本実施形態に係る蛍光観察装置１００は、図１に示すように、体内に挿入される細長い挿入部２と、励起光および照明光を発する光源（照明部）１０と、光源１０からの励起光および照明光を挿入部２の先端２ａから被写体Ｆに向けて照射する照明ユニット（照明部）２０と、挿入部２の先端部に配置され、被写体Ｆである生体組織の画像情報を取得する撮像ユニット３０と、撮像ユニット３０により取得された画像情報を処理する画像処理部４０と、画像処理部４０により処理された画像等を表示するモニタ（表示部）５０と、観察者が入力を行う入力部（正否入力部）５３とを備えている。

光源１０は、照明光を発するキセノンランプ１１と、キセノンランプ１１から発せられた光から励起光および白色光（参照光）を切り出す励起光フィルタ１３と、励起光フィルタ１３により切り出された励起光および白色光を集光するカップリングレンズ１５とを備えている。励起光フィルタ１３は、例えば、波長帯域が４００〜７４０ｎｍの励起光および白色光を切り出すようになっている。

照明ユニット２０は、挿入部２の長手方向のほぼ全長にわたって配置されたライトガイドファイバ２１と、挿入部２の先端２ａに配置された照明光学系２３とを備えている。
ライトガイドファイバ２１は、カップリングレンズ１５によって集光された励起光および白色光を挿入部２の先端２ａに導光するようになっている。
照明光学系２３は、ライトガイドファイバ２１により導光されてきた励起光および白色光を拡散させて被写体Ｆに照射するようになっている。

撮像ユニット３０は、照明ユニット２０により励起光および白色光が照射された被写体Ｆから戻る戻り光を集光する対物レンズ３１と、対物レンズ３１により集光された戻り光を波長ごとに分岐するダイクロイックミラー３３とを備えている。
対物レンズ３１は、挿入部２の先端２ａに照明光学系２３と並列して配置されている。
ダイクロイックミラー３３は、戻り光のうち、励起波長以上の光（励起光および蛍光）を反射し、励起波長より短い波長の白色光（戻り光）を透過するようになっている。

また、この撮像ユニット３０には、ダイクロイックミラー３３により反射された励起光および蛍光のうち、励起光を遮断し蛍光（例えば、近赤外蛍光）のみを透過させる励起光カットフィルタ３５と、励起光カットフィルタ３５を透過した蛍光を集光する集光レンズ３７Ａと、集光レンズ３７Ａにより集光された蛍光を撮影する蛍光撮影部３８と、ダイクロイックミラー３３を透過した白色光を集光する集光レンズ３７Ｂと、集光レンズ３７Ｂにより集光された白色光を撮影する白色光撮影部３９とが備えられている。

励起光カットフィルタ３５は、例えば、波長帯域７６０〜８５０ｎｍの蛍光のみを透過するようになっている。
蛍光撮影部３８は、例えば、蛍光用の高感度モノクロＣＣＤである。この蛍光撮影部３８は、蛍光を撮影することにより蛍光画像情報を取得するようになっている。
白色光撮影部３９は、例えば、白色光用のカラーＣＣＤであり、モザイクフィルタ（図示略）を備えている。この白色光撮影部３９は、白色光を撮影することにより白色光画像情報を取得するようになっている。

画像処理部４０は、蛍光撮影部３８により取得された蛍光画像情報から蛍光画像Ｇ１を生成する蛍光画像生成部（蛍光画像取得部）４１と、白色光撮影部３９により取得された白色光画像情報から白色光画像Ｇ２を生成する白色光画像生成部（参照画像取得部）４２と、蛍光画像Ｇ１を白色光画像Ｇ２により補正し補正蛍光画像Ｇ３を生成する画像補正部（補正蛍光画像生成部）４３と、補正蛍光画像Ｇ３における階調値の閾値（階調値閾値）Ｓ０を設定する閾値設定部４５と、補正蛍光画像Ｇ３から閾値設定部４５により設定された閾値Ｓ０以上の階調値を有する領域を注目領域として抽出する抽出部４７と、抽出部４７により抽出された注目領域と白色光画像Ｇ２を重畳させた重畳画像Ｇ４を生成する画像合成部４９とを備えている。

画像補正部４３は、同一の被写体Ｆの蛍光画像Ｇ１を白色光画像Ｇ２で除算することにより蛍光画像Ｇ１を補正するようになっている。これにより、蛍光画像Ｇ１における観察距離や観察角度等に依存する蛍光強度変化を軽減した補正蛍光画像Ｇ３が生成される。また、画像補正部４３は、生成した補正蛍光画像Ｇ３を抽出部４７および閾値設定部４５に送るとともに、白色光画像Ｇ２および補正蛍光画像Ｇ３を抽出部４７を介して画像合成部４９に送るようになっている。

抽出部４７は、抽出した領域の面積（画素数）Ｐを測定し、面積Ｐが一定の大きさ以上ある場合、すなわち、予め設定してある画素数閾値Ｐ０よりも面積Ｐが大きい場合にその領域を注目領域と判定するようになっている。閾値Ｓ０以上の階調値を有し、かつ、その画素数が画素数閾値Ｐ０を越える注目領域の抽出は、最初に階調値によって抽出された領域の中から画素数の多い領域を抽出してもよいし、最初に画素数によって抽出された領域の中から階調値の高い領域を抽出してもよい。

抽出部４７は、抽出した注目領域の情報を、閾値設定部４５および画像合成部４９に送るようになっている。また、抽出部４７は、抽出した注目領域内の各画素の階調値の平均値（以下、「注目領域の平均階調値」という。）ｍ０を算出し、閾値設定部４５に入力するようになっている。

画像合成部４９は、画像補正部４３により生成された補正蛍光画像Ｇ３の内、抽出部４７により抽出された注目領域以外のバックグラウンドを除去したものを白色光画像Ｇ２と重畳することにより、重畳画像Ｇ４を生成するようになっている。画像合成部４９は、生成した重畳画像Ｇ４をモニタ５０に送るようになっている。

モニタ５０は、画像合成部４９により生成された重畳画像Ｇ４を表示するようになっている。また、モニタ５０には、表示した重畳画像Ｇ４の内の抽出部４７により抽出された注目領域が、病変の疑いのある領域として正しいか否かの判定の入力を医師等の観察者に促す選択が表示されるようになっている。入力を促す選択の表示としては、例えば、「注目領域は病変の疑いがあるか（Ｙ／Ｎ）？」等が挙げられる。

観察者は、モニタ７に表示された重畳画像Ｇ４を目視確認して、補正蛍光画像Ｇ３に表示された観察部位の形状や色等の形態的特徴、あるいは、注目領域の大きさや明るさ等から、注目領域が病変の疑いのある領域であるか否かを判定し、入力部５３により判定結果を入力するようになっている。

入力部５３は、例えば、キーボードやマウス等の任意の入力装置である。
入力部５３により入力された観察者による判定結果は、閾値設定部４５に入力されるようになっている。

閾値設定部４５は、以下の式（１），（２）により、補正蛍光画像Ｇ３における各画素の階調値の平均値（補正蛍光画像Ｇ３全体の階調値の平均。以下、「補正蛍光画像Ｇ３全体の平均階調値」という。）ｍと、補正蛍光画像Ｇ３における各画素の階調値の標準偏差（補正蛍光画像Ｇ３全体の階調値の標準偏差。以下、「補正蛍光画像Ｇ３全体の標準偏差」という。）σとを算出するようになっている。

また、閾値設定部４５は、以下の式（３）に示されるように、補正蛍光画像Ｇ３全体の平均階調値ｍと標準偏差σとの和に基づいて、閾値Ｓ０を設定するようになっている。
Ｓ０＝ａ×ｍ＋ｂ×σ・・・（３）
式（３）において、
ａ：係数（第１係数）
ｂ：係数（第２係数）
である。

また、閾値設定部４５は、入力部５３により入力された入力結果を反映させるように係数（第１係数）ａおよび係数（第２係数）ｂを設定し、新たな閾値Ｓ０として設定するようになっている。
具体的には、観察者により、「注目領域は病変の疑いがある（Ｙ）。」、すなわち、「抽出部４７により注目領域を抽出するための閾値は正しい。」と判定された場合（以下、「Ｙ判定」とする。）は、閾値設定部４５は、抽出部４７から入力された注目領域の平均階調値ｍ０が、閾値Ｓ０よりも所定の割合だけ高い上位閾値（上位階調値閾値）を下回っているか否かを判定するようになっている。

そして、閾値設定部４５は、注目領域の平均階調値ｍ０が上位閾値を下回っているときは係数ａ，ｂの値を小さくし、注目領域の平均階調値ｍ０が上位閾値を上回っているときは係数ａ，ｂの値を維持するようになっている。
以下、本実施形態においては、係数ａ＝１に固定し、係数ｂを随時更新していくこととする。

例えば、上位閾値を１．１×Ｓ０とする。
ｍ０＜１．１×Ｓ０のときは、係数ｂを０．９×ｂに更新するようになっている。
また、ｍ０≧１．１×Ｓ０のときは、係数ｂの値を維持するようになっている。

一方、観察者により、「注目領域は病変の疑いがない（Ｎ）。」、すなわち、「抽出部２３による注目領域を抽出するための閾値Ｓ０は誤りである。」と判定された場合（以下、「Ｎ判定」とする。）は、閾値設定部４５は、係数ｂの値を大きくするようになっている。
例えば、係数ｂを１．１×ｂに更新するようになっている。

閾値設定部４５により設定された閾値Ｓ０は抽出部４７に入力され、抽出部４７に新たな閾値Ｓ０として設定されるようになっている。これにより、新たな補正蛍光画像Ｇ３が生成されると、新たな閾値Ｓ０により注目領域が抽出されるようになっている。また、同様の手順を繰り返し、閾値設定部４５により、補正蛍光画像Ｇ３ごとに閾値Ｓ０が設定されるようになっている。

このように構成された本実施形態に係る蛍光観察装置１００の作用について説明する。
本実施形態に係る蛍光観察装置１００を用いて、被写体Ｆである患者の体内の生体組織を観察するには、患者の体内に挿入部２を挿入し、その先端２ａを被写体Ｆに対向させる。そして、光源１０を作動させて励起光および照明光を発生させ、カップリングレンズ１５によりライトガイドファイバ２１に入射させる。ライトガイドファイバ２１により導光されて挿入部２の先端２ａに達した励起光および照明光は、照明光学系２３により拡散されて被写体Ｆに照射される。

被写体Ｆにおいては、内部に含まれている蛍光物質が励起光により励起されることにより蛍光が発せられるとともに、被写体Ｆの表面において励起光の一部および白色光が反射させられる。これら蛍光、白色光および励起光は、被写体Ｆから挿入部２の先端２ａに戻り、その一部が対物レンズ３１により集光される。

対物レンズ３１により集光された蛍光、白色光および励起光、ダイクロイックミラー３３により波長ごとに分岐される。すなわち、ダイクロイックミラー３３において、励起波長以上の光である励起光および蛍光が反射され、励起波長より短い波長の白色光が透過する。

ダイクロイックミラー３３により反射された励起光および蛍光の内、励起光カットフィルタ３５により励起光は除去され、蛍光のみが集光レンズ３７Ａにより集光されて蛍光撮影部３８により撮影される。これにより、蛍光撮影部３８において被写体Ｆの蛍光画像情報が取得される。

また、ダイクロイックミラー３３を透過した白色光は、集光レンズ３７Ｂによって集光され、白色光撮影部３９により撮影される。これにより、白色光撮影部３９において被写体Ｆの白色光画像情報が取得される。
なお、蛍光画像情報と白色光画像情報は、どちらを先に取得してもよいし同時に取得してもよい。

蛍光撮影部３８により取得された蛍光画像情報および白色光撮影部３９により取得された白色光画像情報は、それぞれ画像処理部４０に送られる。画像処理部４０においては、蛍光画像情報が蛍光画像生成部４１に入力されて蛍光画像Ｇ１が生成され、白色光画像情報が白色光画像生成部４２に入力されて白色光画像Ｇ２が生成される。

光画像生成部４１により生成された蛍光画像Ｇ１および白色光画像生成部４２により生成された白色光画像Ｇ２は画像補正部４３に送られ、蛍光画像Ｇ１が白色光画像Ｇ２で除算されることにより補正蛍光画像Ｇ３が生成される。生成された補正蛍光画像Ｇ３は、画像補正部４３から抽出部４７および閾値設定部４５に送られる。また、白色光画像Ｇ２および補正蛍光画像Ｇ３が画像補正部４３から抽出部４７を介して画像合成部４９に送られる。

以下、閾値設定部４５による閾値の設定について、図２に示すフローチャートを参照して説明する。
閾値設定部４５は、画像補正部４３から送られてきた補正蛍光画像Ｇ３を取得すると（ステップＳＡ１）、補正蛍光画像Ｇ３全体の平均階調値ｍと標準偏差σを算出する（ステップＳＡ２）。

そして、閾値設定部４５により、算出された補正蛍光画像Ｇ３全体の平均階調値ｍと標準偏差σとが用いられ、式（３）により閾値Ｓ０が算出されて設定される（ステップＳＡ３）。設定された閾値Ｓ０は、抽出部４７に入力される。

本実施形態においては、上述した式（３）の係数ａがａ＝１に予め設定されている。また、１枚目の補正蛍光画像Ｇ３における式（３）の係数ｂはｂ＝１とし、２枚目以降の補正蛍光画像Ｇ３における式（３）の係数ｂが図３のフローチャートに示されるようにして随時更新される。

まず、抽出部４７により、補正蛍光画像Ｇ３における最初の閾値Ｓ０以上の階調値を持つ領域が抽出される（ステップＳＢ１)。
また、抽出部４７により、抽出した領域の面積（画素数）Ｐが測定され（ステップＳＢ２)、面積Ｐが閾値Ｐ０よりも大きいか否かが判定される（ステップＳＢ３)。

面積Ｐが閾値Ｐ０よりも小さいときは（ステップＳＢ３「ＮＯ」）、ステップＳＢ１に戻る。これにより、階調値は高いが面積は小さい領域（ノイズ等）が注目領域として抽出されてしまうことを防止することができる。したがって、ノイズによる誤抽出を抑制し、注目領域を効率よく抽出することができる。

一方、面積Ｐが閾値Ｐ０よりも大きいときは（ステップＳＢ３「ＹＥＳ」）、抽出部４７により、抽出した領域が注目領域として判定され、閾値設定部４５および画像合成部４９に注目領域の情報が送られる。また、抽出部４７により、注目領域の平均階調値ｍ０が算出され、閾値設定部４５に送られる（ステップＳＢ４）。

次いで、画像合成部４９により、補正蛍光画像Ｇ３の内、注目領域以外のバックグラウンドを除去したものが白色光画像Ｇ２と重畳され（ステップＳＢ５）、重畳画像Ｇ４が生成される。そして、重畳画像Ｇ４がモニタ５０に送られ、図４に示すように、重畳画像Ｇ４と観察者による入力を促す選択がモニタ５０に同時に表示される。

注目領域と白色光画像Ｇ２とを重畳させてモニタ５０により表示することで、注目領域と白色光画像Ｇ２との対応関係を観察者が一目で把握し、注目領域のみならず、その周辺も観察することができる。したがって、観察者がより詳細な情報を得ることができ、抽出部４７による判定結果の正否をより正確に判定することができる。

観察者は、モニタ５０に表示された重畳画像Ｇ４を観察しながら、表示された注目領域が病変の疑いがあるか否かを判定し、判定結果を入力部５３に入力する（ステップＳＢ６）。つまり、抽出部４７により抽出された注目領域の判定が正しかったのか否かが、観察者による入力によって確認される。そして、入力部５３により入力された判定結果は閾値設定部４５に入力される。

観察者による判定結果が入力部５３により入力されると、閾値設定部４５は、その入力結果を反映させるように係数ｂを更新する。
具体的には、入力部５３に入力された判定がＹ判定である場合は（ステップＳＢ７「ＹＥＳ」）、閾値設定部４５により、注目領域の平均階調値ｍ０と、現在の閾値Ｓ０よりも所定の割合だけ高い上位閾値（１．１×Ｓ０）とが用いられて、ｍ０＜１．１×Ｓ０を満たすか否かが判定される（ステップＳＢ８）。

ｍ０＜１．１×Ｓ０を満たすときは、閾値設定部４５において、係数ｂが０．９×ｂに更新され（ステップＳＢ９)、新たな係数ｂとして設定される（ステップＳＢ１１）。
注目領域の平均階調値ｍ０と閾値Ｓ０との差が僅かなときは、その閾値Ｓ０よりも低い階調値を有する領域についても、以降の抽出においては注目領域として抽出されるべきであるとする可能性がある。したがって、ｍ０＜１．１×Ｓ０を満たすときは係数ｂを小さくして閾値Ｓ０を下げることで、次の注目領域の抽出時には、現在の閾値Ｓ０よりも低い階調値を有する領域も注目領域として抽出し、必要な注目領域が見落されてしまうのを防止することができる。

つまり、更新前の高い閾値Ｓ０で抽出された注目領域に病変の疑いが有るため、閾値Ｓ０を下げることで、抽出部４７による次回の抽出において、さらに低い階調値の病変の疑いのある領域を抽出することができ、見落しを防止して診断の精度を向上することができる。

また、ｍ０≧１．１×Ｓ０のときは、閾値設定部４５において、係数ｂの値がそのまま維持される（ステップＳＢ１１）。
注目領域の平均階調値ｍ０と閾値Ｓ０との差が十分に大きいときは、その閾値Ｓ０が適当であり、次の注目領域の抽出時にも必要な注目領域が見落とされることなく抽出される可能性が高い。

このように、上位閾値（本実施形態においては、１．１×Ｓ０。）を設定することで、閾値Ｓ０の所定の割合（本実施形態においては、０．１。）の範囲で係数ｂを維持するか小さくするかを場合分けすることができる。したがって、上位閾値を設定する閾値Ｓ０の所定の割合を適当に選ぶことで、観察することが必要な注目領域の見落としを防止しつつ、効率的に注目領域を抽出することができる。

一方、入力部５３に入力された判定がＮ判定である場合は（ステップＳＢ７「ＮＯ」）、係数ｂが１．１×ｂに更新され（ステップＳＢ１０）、新たな係数ｂとして設定される（ステップＳＢ１１）。

注目領域を抽出した閾値Ｓ０以下の階調値を有する領域については、以降の抽出においても注目領域として抽出されるべきであるとする可能性が低い。つまり、更新前の低い閾値Ｓ０で抽出された領域は病変の疑いが無いため、閾値Ｓ０を上げることで、抽出部２３による次回の抽出において、病変の疑いのない領域が注目領域として誤って抽出されてしまう無駄を省いて、効率的に診断することができる。

以上説明したように、本実施形態に係る蛍光観察装置１００によれば、観察者の判定結果を利用して、注目領域を抽出するための閾値Ｓ０を決める標準偏差σの係数ｂを補正蛍光画像Ｇ３ごとに更新し、補正蛍光画像Ｇ３ごとに閾値Ｓ０が設定される。これにより、観察距離と観察角度の影響に対する補正誤差を低減した被写体の定量的な情報を取得することができる。

ここで、注目領域の平均階調値ｍ０が、以下の式（４）により算出されるとする。
ｍ０＝ａ×ｍ＋ｂ０×σ・・・（４）
式（４）において、
ｂ０：係数（第３係数）
である。
また、式（４）により、係数ｂ０は以下の式（５）によって算出される。
ｂ０＝（ｍ０−ａ×ｍ）／σ・・・（５）

そこで、本実施形態においては、入力部５３により入力された判定結果がＹ判定である場合に、ｍ０＜１．１×Ｓ０が満たされると係数ｂを０．９×ｂに更新することとしたが、これに代えて、ｍ０＜１．１×Ｓ０が満たされると、以下の式（６）を用いて係数ｂを更新することとしてもよい。すなわち、図５に示されるフローチャートのステップＳＣ８のように、０．９×ｂ０とｂとを比較し、小さい方の値を新たな係数として設定することとしてもよい。
ＭＩＮ（０．９×ｂ０、ｂ）・・・（６）

また、本実施形態においては、係数ａ＝１を例示して説明したが、観察状況に応じて係数ａの値を変更すればよい。また、本実施形態においては、係数ａの値を固定し係数ｂの値を更新することとしたが、同様の方法により、係数ａの値を更新し係数ｂの値を固定にすることとしてもよいし、係数ａの値と係数ｂの値の両方を更新することとしてもよい。さらに、本実施形態においては、補正蛍光画像Ｇ３全体の平均階調値ｍと標準偏差σとの和に基づいて閾値Ｓ０を設定することとしたが、補正蛍光画像Ｇ３全体の平均階調値ｍと標準偏差σのいずれか一方を用いて閾値Ｓ０を設定することとしてもよい。

〔第２実施形態〕
次に、本発明の第２実施形態に係る蛍光観察装置について説明する。
本実施形態に係る蛍光観察装置２００は、図６に示すように、画像処理部４０が記憶部５５を備え、過去の係数ａ，ｂの平均値とそのときの判定入力結果とに応じて閾値Ｓ０を設定する点で第１実施形態と異なる。
以下、第１実施形態に係る蛍光観察装置１００と構成を共通する箇所には、同一符号を付して説明を省略する。

以下、本実施形態においては、係数ａ＝１に固定し、係数ｂを随時更新していくこととする。
記憶部５５は、抽出部４７により注目領域が抽出され、入力部５３によりその注目領域に対する観察者の判定が入力されたときに、注目領域の平均階調値ｍ０、閾値Ｓ０、補正蛍光画像Ｇ３の平均階調値ｍと標準偏差σ、係数ａ，ｂ、および、係数ｂ０をセットにして、その判定結果と対応づけて記憶するようになっている。例えば、記憶部５５には、これらの値が図７に示すようなデータとして記憶されていることとする。

閾値設定部４５は、新たな注目領域に対する観察者による判定が入力されたときは、その入力された判定結果に対応して記憶部５５に記憶されている過去の係数ｂ０を全て読み出し、以下のように係数ｂを更新するようになっている。

例えば、観察者により、Ｙ判定が入力された場合は、閾値設定部４５は、記憶部５５から読み出した過去の全てのＹ判定時における係数ｂ０の平均値ＡＶＥ＿Ｙ（ｂ０）を算出し、平均値ＡＶＥ＿Ｙ（ｂ０）に対して、式（７）を用いて係数ｂを更新するようになっている。

具体的には、閾値設定部４５は、算出した係数ｂ０の平均値ＡＶＥ＿Ｙ（ｂ０）よりも所定の割合だけ低い下位係数である０．９×ＡＶＥ＿Ｙ（ｂ０）の値と、現在の係数ｂの値とを比較し、小さい方の値を新たな係数ｂとして設定するようになっている。

ＭＩＮ（０．９×ＡＶＥ＿Ｙ（ｂ０）、ｂ）・・・（７）
式（７）において
ＡＶＥ＿Ｙ（ｂ０）：過去のＹ判定時の係数ｂ０の平均値
である。

一方、観察者により、Ｎ判定が入力された場合は、閾値設定部４５は、記憶部５５から読み出した過去の全てのＮ判定時における係数ｂ０の平均値ＡＶＥ＿Ｎ（ｂ０）を算出し、平均値ＡＶＥ＿Ｎ（ｂ０）の値を新たな係数ｂとして設定するようになっている。
これにより、閾値Ｓ０は図８に示されるように変化する。

本実施形態に係る蛍光観察装置２００によれば、最新の判定結果のみならず、過去における判定結果をも反映した係数ｂにより新たな閾値Ｓ０を設定することができる。この場合において、記憶部５５に記憶されている過去の係数ｂ０の平均値ＡＶＥ＿Ｙ（ｂ０）よりも所定の割合だけ低い下位係数０．９×ＡＶＥ＿Ｙ（ｂ０）の値と現在の係数ｂの値の低い方を新たな係数ｂとすることにより、病変の疑いがある領域をより精度よく抽出することができる。

また、抽出部４７による判定が誤りであったときは、過去に誤りであると判定された際の係数ｂ０の平均値ＡＶＥ＿Ｎ（ｂ０）により新たな閾値Ｓ０を設定することで、観察する必要のない領域が注目領域として抽出されてしまう無駄を防止し、効率的に注目領域を抽出することができる。

本実施形態は以下のように変形することができる。
例えば、第１変形例としては、閾値設定部４５が、入力された判定結果に対応して記憶部５５に記憶されている過去のすべてのＹ判定時における係数ｂ０の標準偏差ＳＤ（ｂ０）を算出することとしてもよい。そして、算出した過去の係数ｂ０の標準偏差ＳＤ（ｂ０）を、過去のすべてのＹ判定時における係数ｂ０の平均値ＡＶＥ＿Ｙ（ｂ０）から減算し、その減算後の下位係数であるＡＶＥ＿Ｙ（ｂ０）−ＳＤ（ｂ０）の値と現在の係数ｂの値の低い方を新たな係数ｂとすることしてもよい。

このようにすることで、被験者間のバラツキ、同一被験者における経過時間的なバラツキ、観察者による判定入力のバラツキを加味して係数ｂを更新し、より適切に閾値Ｓ０を設定することができる。

また、例えば、感度（病変を見落とさないこと）を重視する場合は、Ｙ判定時の新しい閾値Ｓ０をＭＩＮ（ＡＶＥ＿Ｙ（ｂ０）−３×ＳＤ（ｂ０）、ｂ）として設定することとしてもよい。また、特異度（病変以外の部分を抽出しないこと）を重視する場合は、Ｙ判定時の新しい閾値Ｓ０をＭＩＮ（ＡＶＥ＿Ｙ（ｂ０）−１×ＳＤ（ｂ０）、ｂ）として設定してもよい。
このように、ＳＤ（ｂ０）の係数（本変形例においては係数３、係数１。）は任意に変更することにより、検査の目的に応じた適切な閾値Ｓ０を設定することができるという利点がある。

また、第２変形例としては、画像処理部４０が、抽出部４７により算出された注目領域の平均階調値ｍ０と、入力部８により入力された過去の判定結果に関する情報とを受け取り、これらを対応づけて保存する保存部（図示略）を備えることとしてもよい。また、モニタ５０が、注目領域ごとに、その平均階調値ｍ０に対応する過去の判定結果に関する情報を保存部から読み出して表示することとしてもよい。

このようにすることで、観察者が抽出部による判定結果の正否を判定するときに、モニタ５０により表示された過去の判定結果を参考にすることができる。その結果、観察者により正確な判定を行うことができる。

上記実施形態においては、係数ａ＝１を例示して説明したが、観察状況に応じて係数ａの値を変更すればよい。この場合は、第３係数として、係数ｂ０に代えて、式（８）に基づいて係数ａ０を算出し係数ａの値を変更すればよい。
ａ０＝（ｍ０−ｂ×σ）／ｍ・・・(８）
式(８）において、
ａ０：係数（第３係数）
である。

また、上記実施形態においては、係数ａの値を固定し係数ｂの値を更新することとしたが、同様の方法により、係数ａの値を更新し係数ｂの値を固定にすることとしてもよいし、係数ａの値と係数ｂの値の両方を更新することとしてもよい。また、過去のすべてのＹ判定時における係数ａ０の標準偏差ＳＤ（ａ０）を算出し、下位係数であるＡＶＥ＿Ｙ（ａ０）−ＳＤ（ａ０）の値と現在の係数ａの値の低い方を新たな係数ａとしてもよい。さらに、補正蛍光画像Ｇ３全体の平均階調値ｍと標準偏差σのいずれか一方を用いて閾値Ｓ０を設定することとしてもよい。

以上、本発明の実施形態について図面を参照して詳述してきたが、具体的な構成はこの実施形態に限られるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲の設計変更等も含まれる。例えば、本発明を上記各実施形態および変形例に適用したものに限定されることなく、これらの実施形態および変形例を適宜組み合わせた実施形態に適用してもよく、特に限定されるものではない。

また、上記各実施形態においては、画像合成部４９によって補正蛍光画像Ｇ３の注目領域と白色光画像Ｇ２とを重畳してモニタ５０に表示させることとしたが、補正蛍光画像Ｇ３と白色光画像Ｇ２とを並列にモニタ５０に表示させてもよい。このとき、注目領域を輪郭表示するなどして補正蛍光画像Ｇ３上に表示することとしてもよい。このようにすることで、閾値Ｓ０によって切り取られた注目領域のみを表示することに比べ、より詳細な情報を観察者に提供することができ、より正確に判定させることができる。

また、上記各実施形態においては、抽出部４７が、異なる２以上の閾値以上となる領域をそれぞれ抽出し、表示方法を異ならせてモニタ５０に表示してもよい。例えば、抽出部４７は、注目領域の平均階調値ｍ０が閾値Ｓ０を超える領域と、例えば、閾値Ｓ０の８０％の値を超える領域とを抽出してもよい。

また、上記各実施形態においては、抽出部４７において注目領域の平均階調値ｍ０を算出することとしたが、他の値を求めることにしてもよい。例えば、注目領域内で最も階調値が低い最低階調値を用いてもよいし、注目領域内で最も高い最高階調値を求めることにしてもよい。

また、抽出部４７により抽出された注目領域が同一画面上に複数存在する場合には、画像合成部４９において、どの注目領域に対して正否判定を入力させるのかが観察者にわかるように、判定させようとする注目領域の表示のみを他の注目領域とは異ならせた重畳画像Ｇ４を生成することとしてもよい。他の注目領域と区別するためには、例えば、判定させようとする注目領域の表示のみを点滅させ、他の注目領域を点灯させるような重畳画像Ｇ４を生成することとしてもよい。

また、この場合に、複数の注目領域について、その判定の順序を決定して、決定された順序に従って、判定させようとする注目領域の表示のみを点滅させていくこととしてもよい。また、一旦判定が入力された注目領域については、重複した判定入力を防止するために、判定済みであることがわかるような表示、例えば、色を変えることなどにより表示することとしてもよい。

１０ 光源（照明部）
２０ 照明ユニット（照明部）
４１ 蛍光画像生成部（蛍光画像取得部）
４２ 白色光画像生成部（参照画像取得部）
４３ 画像補正部（補正蛍光画像生成部）
４５ 閾値設定部
４７ 抽出部
５０ モニタ（表示部）
５３ 入力部（正否入力部）
５５ 記憶部
１００，２００ 蛍光観察装置
ａ 係数（第１係数）
ｂ 係数（第１係数）
ｂ０ 係数（第３係数）
ｍ０ 抽出領域の階調値の平均値
Ｓ０ 閾値（階調値閾値）

Claims (17)

1. 被写体に励起光および参照光を照射する照明部と、
   該照明部からの前記励起光の照射により前記被写体において発生した蛍光を撮影し蛍光画像を取得する蛍光画像取得部と、
   前記照明部からの前記参照光の照射により前記被写体から戻る戻り光を撮影し参照画像を取得する参照画像取得部と、
   該参照画像取得部により取得された前記参照画像を用いて、前記蛍光画像取得部により取得された前記蛍光画像を補正し補正蛍光画像を生成する補正蛍光画像生成部と、
   該補正蛍光画像生成部により生成された前記補正蛍光画像全体の階調値の平均値、該階調値の標準偏差、前記補正蛍光画像全体の階調値の平均値の重み付けに係る第１係数、および、前記階調値の標準偏差の重み付けに係る第２係数に基づいて階調値閾値を設定する閾値設定部と、
   該閾値設定部により設定された前記階調値閾値を超える階調値を有する前記補正蛍光画像上の領域を注目領域と判定して抽出する抽出部と、
   該抽出部により抽出された前記注目領域と前記参照画像とを対応づけて表示する表示部と、
   該表示部に表示された前記注目領域に対する前記抽出部による前記判定の正否について観察者に入力させる正否入力部とを備え、
   前記閾値設定部が、前記正否入力部により入力された入力結果を反映させるように前記第１係数および前記第２係数の少なくとも一方を設定する蛍光観察装置。
2. 前記補正蛍光画像生成部が、前記蛍光画像を前記参照画像で除算する請求項１に記載の蛍光観察装置。
3. 前記閾値設定部が、前記正否入力部により前記判定が正しいと入力されたときは、前記第１係数または前記第２係数の一方を固定値とし、他方を維持するかまたは小さくする請求項１または請求項２に記載の蛍光観察装置。
4. 前記閾値設定部は、前記注目領域の階調値が、前記階調値閾値よりも所定の割合だけ高い上位階調値閾値を上回っているときは前記他方を維持し、該上位階調値閾値を下回っているときは前記他方を小さくする請求項３に記載の蛍光観察装置。
5. 前記閾値設定部が、前記正否入力部により前記判定が誤りであると入力されたときは、前記第１係数および前記第２係数の一方を固定値とし、他方を大きくする請求項１から請求項４のいずれかに記載の蛍光観察装置。
6. 前記閾値設定部が、下式によって前記階調値閾値を算出する請求項１から請求項５のいずれかに記載の蛍光観察装置。
   Ｓ０＝ａ×ｍ＋ｂ×σ
   ここで、
   Ｓ０：階調値閾値
   ａ：第１係数
   ｂ：第２係数
   ｍ：補正蛍光画像全体の階調値の平均値
   σ：補正蛍光画像全体の階調値の標準偏差
   である。
7. 前記抽出部が前記抽出領域の階調値の平均値を算出するとともに、前記閾値設定部が前記抽出領域の階調値の平均値に基づいて第３係数を算出し、
   前記抽出部により前記注目領域が抽出され、前記入力部によりその注目領域に対する観察者の判定が入力されたときに、その判定結果と前記第３係数とを対応づけて記憶する記憶部を備え、
   前記閾値設定部が、新たな注目領域に対して前記正否入力部により前記判定が正しいと入力されたときに、入力された判定結果に対応して前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の平均値よりも所定の割合だけ低い下位係数と、現在の前記第１係数との低い方を新たな第１係数とする請求項１から請求項６のいずれかに記載の蛍光観察装置。
8. 前記抽出部が前記抽出領域の階調値の平均値を算出するとともに、前記閾値設定部が前記抽出領域の階調値の平均値に基づいて第３係数を算出し、
   前記抽出部により前記注目領域が抽出され、前記入力部によりその注目領域に対する観察者の判定が入力されたときに、その判定結果と前記第３係数とを対応づけて記憶する記憶部を備え、
   前記閾値設定部が、新たな注目領域に対して前記正否入力部により前記判定が正しいと入力されたときに、入力された判定結果に対応して前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の平均値よりも所定の割合だけ低い下位係数と、現在の前記第２係数との低い方を新たな第２係数とする請求項１から請求項６のいずれかに記載の蛍光観察装置。
9. 前記抽出部が前記抽出領域の階調値の平均値を算出するとともに、前記閾値設定部が前記抽出領域の階調値の平均値に基づいて第３係数を算出し、
   前記抽出部により前記注目領域が抽出され、前記入力部によりその注目領域に対する観察者の判定が入力されたときに、その判定結果と前記第３係数とを対応づけて記憶する記憶部を備え、
   前記閾値設定部が、新たな注目領域に対して前記正否入力部により前記判定が正しいと入力されたときに、入力された判定結果に対応して前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の標準偏差を算出するとともに、算出した前記第３係数の標準偏差を前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の平均値から減算した下位係数と、現在の第１係数の低い方を新たな第１係数とする請求項１から請求項６のいずれかに記載の蛍光観察装置。
10. 前記抽出部が前記抽出領域の階調値の平均値を算出するとともに、前記閾値設定部が前記抽出領域の階調値の平均値に基づいて第３係数を算出し、
    前記抽出部により前記注目領域が抽出され、前記入力部によりその注目領域に対する観察者の判定が入力されたときに、その判定結果と前記第３係数とを対応づけて記憶する記憶部を備え、
    前記閾値設定部が、新たな注目領域に対して前記正否入力部により前記判定が正しいと入力されたときに、入力された判定結果に対応して前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の標準偏差を算出するとともに、算出した前記第３係数の標準偏差を前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の平均値から減算した下位係数と、現在の前記第２係数との低い方を新たな第２係数とする請求項１から請求項６のいずれかに記載の蛍光観察装置。
11. 前記閾値設定部が、前記正否入力部により前記抽出部による前記判定が誤りであると入力されたときは、その入力された判定結果に対応して前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の平均値を新たな第１係数とする請求項７または請求項９に記載の蛍光観察装置。
12. 前記閾値設定部が、前記正否入力部により前記抽出部による前記判定が誤りであると入力されたときは、その入力された判定結果に対応して前記記憶部に記憶されている過去の前記第３係数の平均値を新たな第２係数とする請求項８または請求項１０に記載の蛍光観察装置。
13. 前記閾値設定部が、下式によって前記第３係数を算出する請求項７、請求項９および請求項１１のいずれかに記載の蛍光観察装置。
    ａ０＝（ｍ０−ｂ×σ）／ｍ
    ここで、
    ａ０：第３係数
    ｍ０：抽出領域の階調値の平均値
    ｂ：第２係数
    σ：補正蛍光画像全体の階調値の標準偏差
    ｍ：補正蛍光画像全体の階調値の平均値
    である。
14. 前記閾値設定部が、下式によって前記第３係数を算出する請求項８、請求項１０および請求項１２のいずれかに記載の蛍光観察装置。
    ｂ０＝（ｍ０−ａ×ｍ）／σ
    ここで、
    ｂ０：第３係数
    ｍ０：抽出領域の階調値の平均値
    ａ：第１係数
    ｍ：補正蛍光画像全体の階調値の平均値
    σ：補正蛍光画像全体の階調値の標準偏差
    である。
15. 前記表示部が、前記注目領域と前記参照光画像とを重畳させて表示する請求項１から請求項１４のいずれかに記載の蛍光観察装置。
16. 前記抽出部が、前記階調値閾値を越える階調値を有する領域のうち、該領域の画素数が画素数閾値を超える範囲を前記注目領域として抽出する請求項１から請求項１５のいずれかに記載の蛍光観察装置。
17. 前記注目領域の階調値と過去の判定結果に関する情報とを対応づけて保存する保存部を備え、
    前記表示部が、前記注目領域ごとに、その注目領域の階調値に対応する過去の判定結果に関する情報を前記保存部から読み出して表示する請求項１から請求項１６のいずれかに記載の蛍光観察装置。
    

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