JP2012531594A - 加熱処理したリムルスアメーバ様細胞溶解物 - Google Patents
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Abstract
Description
この出願は、2009年6月26日に出願された米国仮出願第61/220,785号(この完全な内容は、参考として本明細書に援用される)の利益を主張する。
アメリカカブトガニの血球に由来するリムルスアメーバ様細胞溶解物(Limulus amebocyte lysate)(LAL)は、内毒素(非特許文献1)、または(1→3)−β−D−グルカン(非特許文献2;非特許文献3)と反応してゲルを形成する。内毒素およびβ−グルカンは2つの個別のLAL経路を起動し、これらの何れかの活性化はゲル化を生じる(非特許文献4)。内毒素はグラム陰性菌の細胞壁成分であり、発熱性、分裂促進性、および潜在的に致命的毒性である。したがって、内毒素の正確で信頼性の高い検出は、非経口薬物の安全性を確認する上で重要である。LALアッセイは、内毒素検出において標準と認められているものである(たとえば、米国薬局方「細菌内毒素試験」参照)。
アジアカブトガニ(Tachypleus tridentatus)からの溶解物を急速に40℃を超える温度まで加熱すると、β−グルカン−感受性因子(「因子G」)が不活性化したと報告されている(Muta等(1995年)J.Biol,Chem.270:892−897)。現在、アメリカカブトガニ、Limulus polyphemusから収集した溶解物の場合は同じことが当てはまらないことが発見されている。むしろ、Limulus因子Gは、比較的熱安定性であると思われる。特に、LALが約40℃を超える温度まで加熱されると、内毒素に対するLALの感受性は、β−グルカンに対するLALの感受性より急速に失われる。LALにおける内毒素とβ−グルカンの経路の熱感受性の差を利用すると、内毒素に対する反応性を減少させる一方、(1→3)−β−D−グルカンに対する反応性を維持した状態で溶解物を調製することを可能にする。
LALは、一般に、汚染のリスクを最小限にするために、密封容器(たとえば密封管または瓶)内にある時に加熱される。熱は、温度制御水槽または加熱ブロック中に浸漬するなど、何らかの制御された方法で加えることができる。より短い加熱時間のために、加熱条件は、たとえば、より薄いか、および/またはより熱伝導性の壁を有する密封容器を使用し、LALの容積を減少させることにより、または表面積/単位容積の比率がより大きい容器(たとえば、より平坦な容器、コイル状の容器など)を使用することにより、環境の温度とLALの温度との間の差異を最小限にするように選択することができる。
加熱処理したLALは、多様なエンドポイントアッセイまたは動力学アッセイの何れかを用いてβ−グルカンを検出するために使用することができる。例示的なエンドポイントアッセイとしては、エンドポイント色素生成性アッセイまたはエンドポイント濁度測定アッセイが挙げられる。例示的な動力学アッセイとしては、動力学的濁度測定アッセイ(kinetic turbidimetric assay)、1ステップ動力学アッセイ、またはマルチステップ動力学アッセイが挙げられる。各々のアッセイについて、以下でさらに詳細に説明する。さらにアッセイは、特定のアッセイの形式、たとえばカートリッジ内、または96ウェルプレートなどのプレートのウェル内で実施するように修正してよいものと理解される。
例示的な動力学アッセイとしては、マルチステップ動力学アッセイ、1ステップ動力学アッセイ、および動力学的濁度測定アッセイが挙げられる。
マルチステップ動力学アッセイ(たとえば、米国特許第7,329,538号に記載されているアッセイ)は、被試験サンプルとある量の加熱処理したLALとを結合してサンプル−LAL混合物を生成することによって開始する。この混合物は次に、予め決められた期間でインキュベートする。この混合物は次に、色素生成性基質または蛍光発生性基質などの基質と接触させて、サンプル−LAL−基質混合物を生成する。その後、光学特性の予め選択した変化(たとえば吸光度値の特定の変化、または透過値の特定の変化)が生じる時間を測定する。
1ステップ動力学アッセイ、たとえば1ステップ−色素生成性アッセイは、米国特許第5,310,657号に記載されている。簡潔に述べると、動力学的色素生成性アッセイは、(i)加熱処理したLALを被分析サンプルおよび色素生成性基質などの基質と同時に可溶化するステップ、(ii)結果として得られる混合物を約0℃〜約40℃、好ましくは約25℃〜約40℃の温度で、予め決められた時間範囲にわたりインキュベートするステップ、および(iii)従来の分光光度計を使用して、比色測定の変化(calorimetric change)が予め選択した値に達するのに必要な時間、または比色測定読み出しの変化を測定するステップを含む。
動力学的濁度測定β−グルカンアッセイは、(i)加熱処理したLALを被分析サンプルとともに可溶化するステップ、(ii)結果として得られる混合物を約0℃〜約40℃、好ましくは約25℃〜約40℃の温度で、予め決められた時間範囲にわたりインキュベートするステップ、および(iii)従来の凝固計(coagulometer)、比濁計(nepherometer)または分光光度計を使用して、凝固によって生じる濁度の変化が予め選択した値に達するのに要する時間、または濁度の変化率のいずれかを測定するステップを含む。
例示的なエンドポイントアッセイとしては、エンドポイント色素生成性アッセイまたはエンドポイント蛍光発生性アッセイおよびエンドポイント濁度測定アッセイが挙げられる。
エンドポイント色素生成性または蛍光発生性β−グルカンアッセイは、(i)加熱処理したLALを被分析サンプルとともに可溶化するステップ、(ii)結果として得られる混合物を約0℃〜約40℃、好ましくは約25℃〜約40℃の温度で、予め決められた時間インキュベートするステップ、(iii)色素生成性基質または蛍光発生性基質などの基質と、インキュベートしたサンプル−LAL混合物とを接触させるステップ、(iv)任意に酢酸などの反応阻害剤を添加する、および(v)たとえば比色測定の変化により、酵素活性により基質から生成される物質を測定するステップを含むことができる。
エンドポイント濁度測定β−グルカンアッセイは、(i)加熱処理したLALを被分析サンプルとともに可溶化するステップ、(ii)結果として得られる混合物を約0℃〜約40℃、好ましくは約25℃〜約40℃の温度で、予め決められた時間インキュベートするステップ、(iii)任意に、酢酸などの反応阻害剤を添加するステップ、および(iv)凝固の結果として濁度が増加した場合、従来の凝固計、比濁計または分光光度計を使用して濁度の増加を測定するステップを含むことができる。
溶解物の熱処理は、内毒素およびβ−グルカンに対する溶解物の差異的な感受性を減少させるために実施することもできる。こうして、内毒素およびβ−グルカンに対する溶解物の相対的反応性を滴定して、二重−特異性検出試薬を提供することができる。
一般に、被試験サンプルを収集、保管、またはさもなければ接触させるために使用される材料および試験試薬は、細菌による汚染がなく、たとえばパイロジェンを含まないべきである。材料は、たとえば250℃で30分間加熱することによってパイロジェンを含まないようにすることができる。脱パイロジェン化された(depyrogenated)物質をその後の環境汚染から守るため、適切な対策を取らなければならない。
粗製LALは、血液リンパ液をアメリカカブトガニ(Limulus polyphemus)から収集して調製した。結果として得られる血液リンパ液は150Gで15分間遠心分離して、アメーバ様細胞を収集した。アメーバ様細胞は、3%塩化ナトリウムですすいで、150Gで15分間にわたって再度遠心分離した。3%塩化ナトリウムで2回目の洗浄を行い、150Gで15分間遠心分離した後、結果として得られるアメーバ様細胞は、注射用水を添加して浸透圧衝撃により溶解させ、結果として得られる粗製LALは、その後使用するまで2〜8℃で保管した。
実施例1に記載されているように調製した粗製LAL各1mLは、脱パイロジェン化した13mmのガラス管内に分配した。これらのガラス管は、40℃〜50℃の温度のアルミニウムブロック加熱器上でインキュベートした。ガラス管は、予定されたインキュベーション時間でサンプル抽出し、冷蔵庫内に保管した。このガラス管は、冷蔵遠心器を使って170Gで20分間遠心分離した。ガラス管内の上清は、加熱処理した粗製LALとして使用した。
実施例1に記載されているように調製した各5mLの粗製LALを、脱パイロジェン化した10mLのガラス瓶に分配した。このガラス瓶は、アルミニウムブロック加熱器上で47℃でインキュベートした。ガラス瓶は、予定されたインキュベーション時間にサンプル抽出し、冷凍庫に保管した。瓶内の粗製LALはポリプロピレン遠心分離管に移動させて、冷蔵遠心器を使って遠心分離管を2500Gで20分間にわたって遠心分離した。遠心分離管中の上清は、加熱処理した粗製LALとして使用した。
実施例1に記載したように調製した各3mLの粗製LALを、10個の脱パイロジェン化した13mmガラス管内に分配した。ガラス管は、アルミニウムブロック加熱器上で、47℃で15分間インキュベートした。加熱した粗製LALはポリプロピレン遠心分離管内に収集し、冷蔵遠心器を使って遠心分離管を170Gで20分間遠心分離した。遠心分離管中の上清は、加熱処理した粗製LALとして使用した。
実施例1に記載したように調製した各3mLの粗製LALを、10個の脱パイロジェン化した13mmガラス管内に分配した。ガラス管は、アルミニウムブロック加熱器上で、47℃で20分間インキュベートした。加熱した粗製LALはポリプロピレン遠心分離管内に収集し、冷蔵遠心器を使って遠心分離管を170Gで20分間遠心分離した。遠心分離管中の上清は、加熱処理した粗製LALとして使用した。
実施例1に記載したように調製した各5mLの粗製LALを、脱パイロジェン化した10mLのガラス瓶に分配した。このガラス瓶は、アルミニウムブロック加熱器上で、47℃で60分間インキュベートした。瓶内の粗製LALを、ポリプロピレン遠心分離管に移動させて、遠心分離管は、冷蔵遠心器を使って2500Gで20分間遠心分離した。遠心分離管中の上清は、加熱処理した粗製LALとして使用した。
血液培養物が陽性である患者に由来する血清サンプルを、注射用蒸留水で10倍に希釈し、希釈した血清サンプルは80℃で10分間インキュベートした。前処理したサンプルは、動力学的色素生成法によって、凍結乾燥した加熱処理したLALにより測定した。凍結乾燥した加熱処理したLALは、実施例5に記載されているLALから調製した。CM−パキマンを、β−グルカン標準として使用した。健康な被験体に由来する血清サンプルも、同じ方法で前処理して測定した。
実施例2に記載されている実験の分析で、加熱温度の関数としての内毒素およびβ−グルカン反応性の不活性化の速度が、アレニウスプロットを使用して表すことができる指数関数的関係を有することが明らかになった。表1および2に示すオンセット時間対加熱時間の対数を比較すると、表5および6に示す回帰パラメータが得られた。傾きおよび温度を使用して、内毒素反応性およびβ−グルカン反応性に関するアレニウスプロットは、傾きの対数と温度との相関関係を実証した。図8に示すように、試験した各々の温度について、表5(「ln(Etx)」)または表6(「ln(BG)」)の傾きの自然対数を1000/絶対温度(ケルビン)でプロットして、内毒素反応性の不活性化の速度およびβ−グルカン反応性の不活性化の速度の両方の相関関係が得られた。
tA1=0.825*2.718(56340/(Τ+273))/(9.54*1076)(時間)。
tA2=1.65*2.718(56340/(Τ+273))/(9.54*1076)(時間)。
tB1=1.059*2.718(76510/(Τ+273))/(2.20*10103)(時間)。
本発明は、本発明の精神または本質的な特徴から逸脱することなく、他の特定の形式で具現することができる。したがって、上記の実施態様は、本明細書に記載されている発明を制限するのではなく、あらゆる点で具体的に説明するものであると考えられる。したがって、本発明の範囲は、上記の説明ではなく、添付の請求の範囲により示され、請求の範囲に等価な意味および範囲内のすべての変更は本明細書に包含することを意図する。
本明細書で引用するすべての文献および特許文献は、個々の文献または特許文献の全体の内容が本明細に包含されたのと同様に、引用することにより全体的にあらゆる目的で本願に援用する。
Claims (40)
- (1→3)−β−D−グルカンに対する特異性が増大したリムルスアメーバ様細胞溶解物を調製する方法であって、内毒素に対する反応性を減少させるために、40℃を超える温度まで前記リムルスアメーバ様細胞溶解物を加熱するステップを含む、方法。
- 内毒素に対する感受性が低下したリムルスアメーバ様細胞溶解物を調製する方法であって、(1→3)−β−D−グルカンに対する反応性を維持する一方、前記リムルスアメーバ様細胞溶解物中の因子Cの活性を低下させるために、前記リムルスアメーバ様細胞溶解物を加熱するステップを含む、方法。
- 前記リムルスアメーバ様細胞溶解物が、100ng/mLのカルボキシメチル化パキマンに対する感受性を維持する、請求項1または2に記載の方法。
- 前記リムルスアメーバ様細胞溶解物が、1ng/mLのカルボキシメチル化パキマンに対する感受性を維持する、請求項3に記載の方法。
- 前記リムルスアメーバ様細胞溶解物が、1pg/mLのカルボキシメチル化パキマンに対する感受性を維持する、請求項4に記載の方法。
- 前記リムルスアメーバ様細胞溶解物が、0.1pg/mLのカルボキシメチル化パキマンに対する感受性を維持する、請求項5に記載の方法。
- 結果として得られた前記リムルスアメーバ様細胞溶解物が、(1→3)−β−D−グルカンに特異的な溶解物である、前記請求項の何れか1項に記載の方法。
- 前記(1→3)−β−D−グルカンの反応性が10分の1を超えて低下しない、前記請求項の何れか1項に記載の方法。
- 前記内毒素の反応性が、多くとも100分の1に低下する、前記請求項の何れか1項に記載の方法。
- 前記内毒素の反応性が、多くとも1,000分の1に低下する、前記請求項の何れか1項に記載の方法。
- 前記内毒素反応性が、多くとも106分の1に低下する、前記請求項の何れか1項に記載の方法。
- 前記リムルスアメーバ様細胞溶解物が40℃〜80℃まで加熱される、前記請求項の何れか1項に記載の方法。
- (i)前記温度が45℃以下である場合、前記加熱時間が40分を超え、
(ii)前記温度が55℃を超える場合、前記加熱時間が1分未満である、
前記請求項の何れか1項に記載の方法。 - 前記温度が45℃以下である、請求項13に記載の方法。
- 前記温度が45℃を超え、55℃未満である、請求項13に記載の方法。
- 前記温度が45℃を超え、52℃未満である、請求項15に記載の方法。
- 前記温度が45℃を超え、50℃未満である、請求項16に記載の方法。
- 前記加熱時間がtA1時間を超え、ここでtA1=0.825*2.718(56340/(Τ+273))/(9.54*1076)であり、ここでTは℃での温度である、前記請求項の何れか1項に記載の方法。
- 前記加熱時間がtA2時間を超え、ここでtA2=1.65*2.718(56340(Τ+273))/(9.54*1076)であり、ここでΤは℃での温度である、請求項18に記載の方法。
- 前記加熱時間がtB1時間以下であり、ここでtB1=0.353*2.718(76510/(Τ+273))/(2.20*10103)であり、ここでΤは℃での温度である、前記請求項の何れか1項に記載の方法。
- 前記リムルスアメーバ様細胞溶解物が少なくとも5分間加熱される、前記請求項の何れか1項に記載の方法。
- 前記リムルスアメーバ様細胞溶解物が少なくとも20分間加熱される、請求項21に記載の方法。
- 前記リムルスアメーバ様細胞溶解物が2時間以下加熱される、前記請求項の何れか1項に記載の方法。
- 沈着物を前記リムルスアメーバ様細胞溶解物から除去する追加のステップを含む、前記請求項の何れか1項に記載の方法。
- 前記リムルスアメーバ様細胞溶解物を凍結乾燥するステップをさらに含む、前記請求項の何れか1項に記載の方法。
- (1→3)−β−D−グルカンに対して感受性のあるLimulus因子Gを含み、未処理リムルスアメーバ様細胞溶解物の前記内毒素反応性の0.1%未満の内毒素反応性を有する加熱処理したリムルスアメーバ様細胞溶解物。
- 前記リムルスアメーバ様細胞溶解物が凍結乾燥される、請求項26に記載のリムルスアメーバ様細胞溶解物。
- 前記リムルスアメーバ様細胞溶解物が、1pg/mLのカルボキシメチル化パキマンに対する感受性を維持する、請求項26または27に記載のリムルスアメーバ様細胞溶解物。
- 前記リムルスアメーバ様細胞溶解物が0.1pg/mLのカルボキシメチル化パキマンに対する感受性を維持する、請求項28に記載のリムルスアメーバ様細胞溶解物。
- 前記溶解物が、200EU/mLの内毒素標準品に対して非感受性である、請求項26〜29の何れか1項に記載のリムルスアメーバ様細胞溶解物。
- 前記溶解物が0.01mcg/mLのLPSに対して非感受性である、請求項26〜30の何れか1項に記載のリムルスアメーバ様細胞溶解物。
- 前記溶解物が0.1mcg/mLのLPSに対して非感受性である、請求項31に記載のリムルスアメーバ様細胞溶解物。
- 前記溶解物が1mcg/mLのLPSに対して非感受性である、請求項32に記載のリムルスアメーバ様細胞溶解物。
- 前記溶解物が10mcg/mLのLPSに対して非感受性である、請求項33に記載のリムルスアメーバ様細胞溶解物。
- 加熱処理したリムルスアメーバ様細胞溶解物および基質を含む組成物。
- 前記基質が色素生成性である、請求項35に記載の組成物。
- 前記基質が蛍光発生性である、請求項35に記載の組成物。
- 前記組成物が凍結乾燥される、請求項35、36または37に記載の組成物。
- サンプル中の(1→3)−β−D−グルカンを検出する方法であって、前記方法は、請求項26〜34の何れか1項に従って、前記サンプルとリムルスアメーバ様細胞溶解物とを結合するステップ、および前記サンプルの光学特性における変化を検出するステップを包含する、方法。
- 前記サンプルの前記光学特性における前記変化を検出する前に、前記サンプルと基質とを結合するステップをさらに包含する、請求項39に記載の方法。
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Cited By (1)
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---|---|---|---|---|
JP2016528490A (ja) * | 2013-07-15 | 2016-09-15 | ユニバーシティ オブ プリマスUniversity Of Plymouth | 水の試験 |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2446018B1 (en) | 2009-06-26 | 2017-01-18 | Charles River Laboratories, Inc. | Heat-treated limulus amebocyte lysates |
CA2886462C (en) | 2012-10-08 | 2021-06-15 | General Electric Company | Microfluidic lal-reactive substances testing method and apparatus |
WO2018156888A1 (en) | 2017-02-24 | 2018-08-30 | Biothera Pharmaceuticals, Inc. | Beta glucan immunopharmacodynamics |
CN111077307B (zh) * | 2018-10-21 | 2022-08-23 | 厦门鲎试剂生物科技股份有限公司 | 一种用革兰氏阴性细菌感染快速检测脓毒病的新方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH02141666A (ja) * | 1988-11-24 | 1990-05-31 | Wako Pure Chem Ind Ltd | エンドトキシンの不活化方法 |
JPH03500369A (ja) * | 1988-07-15 | 1991-01-31 | ザ・トラステイーズ・オブ・コロンビア・ユニヴアーシテイ・イン・ザ・シテイ・オブ・ニユー・ヨーク | 内毒素及び炎症物質を監視することによる歯周病監視方法 |
JP2004109147A (ja) * | 1992-05-08 | 2004-04-08 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | 前処理剤、前処理方法、前処理された試料による測定法、測定用キット及び試料の判定方法 |
Family Cites Families (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4067776A (en) * | 1975-11-25 | 1978-01-10 | Research Foundation Of Children's Hospital | Method for differential diagnosis of meningitis with a limulus lysate test |
ATE148230T1 (de) | 1989-10-30 | 1997-02-15 | Biowhittaker Inc | Kinetische bestimmungsmethode für endotoxin unter verwendung von limulus-amoebocyten-lysat und chromogenem substrat |
JP2944709B2 (ja) * | 1990-06-21 | 1999-09-06 | 生化学工業株式会社 | (1→3)―β―D―グルカンの測定剤 |
US5681710A (en) * | 1991-03-14 | 1997-10-28 | Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Reagent for determining (1→3)-β-D-glucan |
EP0549102B1 (en) * | 1991-12-25 | 1996-07-03 | Maruha Corporation | Beta-glucans detection reagents and methods of detecting beta-glucans |
JP3524120B2 (ja) | 1992-05-08 | 2004-05-10 | 生化学工業株式会社 | 前処理剤、前処理方法、前処理された試料による測定法、測定用キット及び試料の判定方法 |
CA2112776C (en) * | 1993-01-21 | 2002-11-12 | Masakazu Tsuchiya | Process for inhibiting activity of endotoxin |
US5716834A (en) * | 1994-08-19 | 1998-02-10 | National University Of Singapore | Cloned factor C cDNA of the Singapore horseshoe crab, Carcinoscorpius rotundicauda and purification of factor C proenzyme |
US6110692A (en) * | 1996-05-01 | 2000-08-29 | The Collaborative Group, Ltd. | Receptor for underivatized aqueous soluble β(1-3)-glucan |
US6084092A (en) * | 1997-01-31 | 2000-07-04 | The Collaborative Group, Ltd. | β(1-3)-glucan diagnostic assays |
US6413715B2 (en) * | 1997-01-31 | 2002-07-02 | The Collaborative Group | β(1-3)-glucan diagnostic assays |
US6645724B1 (en) * | 1997-09-19 | 2003-11-11 | National University Of Singapore | Assays for endotoxin |
US5965374A (en) * | 1997-10-16 | 1999-10-12 | Biowhittaker Technologies, Inc. | Glucan-specific assay |
US6733997B1 (en) * | 1998-10-30 | 2004-05-11 | National University Of Singapore | Isolated nucleic acids encoding a secretory signal for expression and secretion of heterologous recombinant proteins |
US6719973B1 (en) * | 1998-12-24 | 2004-04-13 | National University Of Singapore | Recombinant proteins and peptides for endotoxin biosensors, endotoxin removal, and anti-microbial and anti-endotoxin therapeutics |
US20040235080A1 (en) * | 2001-06-28 | 2004-11-25 | Lin Chen | Methods and reagents for detecting endotoxin |
JP4346844B2 (ja) * | 2001-11-16 | 2009-10-21 | 生化学工業株式会社 | (1→3)−β−D−グルカン結合ドメインタンパク質、該物質を使用した測定法及び測定キット |
DE602004024769D1 (de) * | 2003-03-17 | 2010-02-04 | Charles River Lab Inc | Methoden und zusammensetzungen für den nachweis mikrobieller verunreinigungen |
JP2007240397A (ja) | 2006-03-10 | 2007-09-20 | Wako Pure Chem Ind Ltd | (1→3)−β−D−グルカンの測定方法 |
JP5437660B2 (ja) | 2009-02-19 | 2014-03-12 | 興和株式会社 | コアギュロゲン原料及びその製造方法、それを用いた生物由来の生理活性物質の測定方法及び測定装置 |
EP2446018B1 (en) | 2009-06-26 | 2017-01-18 | Charles River Laboratories, Inc. | Heat-treated limulus amebocyte lysates |
-
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-
2019
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH03500369A (ja) * | 1988-07-15 | 1991-01-31 | ザ・トラステイーズ・オブ・コロンビア・ユニヴアーシテイ・イン・ザ・シテイ・オブ・ニユー・ヨーク | 内毒素及び炎症物質を監視することによる歯周病監視方法 |
JPH02141666A (ja) * | 1988-11-24 | 1990-05-31 | Wako Pure Chem Ind Ltd | エンドトキシンの不活化方法 |
JP2004109147A (ja) * | 1992-05-08 | 2004-04-08 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | 前処理剤、前処理方法、前処理された試料による測定法、測定用キット及び試料の判定方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JPN7014000534; Nachum R, Siegel SE, Sullivan JD Jr, Watson SW.: 'Inactivation of endotoxin by Limulus amoebocyte lysate.' J Invertebr Pathol. Vol.32,No.1, 197807, Page.51-58 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016528490A (ja) * | 2013-07-15 | 2016-09-15 | ユニバーシティ オブ プリマスUniversity Of Plymouth | 水の試験 |
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