JP2012518630A - 挫瘡およびその他の状態を治療するためのビスファチン治療薬 - Google Patents
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Abstract
Description
のプラグ(sebaceous plug)の形成である。典型的には、皮脂腺性のプラグは極めて小さく、裸眼では視認できない。皮脂腺性のプラグは、皮膚の上角化層由来の死滅ケラチン生成細胞と皮脂の組み合わせがこれらの皮孔の開口部を遮断する場合に形成されることがある。次に細菌、例えば、Propionibacterium acnes(P. acnes)は、皮脂腺性のプラグによって占有された皮孔内で増殖する可能性がある。それと同時に、結果として生じる細胞および皮脂のプラグは皮孔の壁に付着し得、これは孔内でのいっそう大きなプラグの形成およびその後の孔の拡大をもたらす可能性がある。これらの拡大したプラグは、面皰(comedones)と呼ばれるが、一般には「ブラックヘッド」または「ホワイトヘッド」と呼ばれる。最終的には、この拡大は孔壁の破裂および炎症反応を引き起こす可能性がある。そのような破裂がいったん発生すると、身体は皮膚を修復し、表皮からの細胞鞘の成長を刺激することによって炎症反応の部位を被包しようとする。しかし、結果として生じる被包は不完全であることが多く、作り出されている病変のさらなる破裂を代りに誘発することがある。これは順に、多チャンネル管の形成ならびに炎症性丘疹および炎症性小嚢胞の形成を導く可能性がある。これらの炎症性丘疹および炎症性小嚢胞は、一般に「吹き出物」と呼ばれる。
パラフィン包埋皮膚切片の調製:実験用マウスにおいて皮膚生検を実施した。皮膚生検サンプルを4%パラホルムアルデヒド中で固定し、次にエタノールの濃度を増加させながら(50〜100%)脱水した。脱水生検サンプルをキシレン中に2回浸漬し、次にパラフィンおよびキシレンの1:1溶液中に1回、そして最後に60℃の温度で純溶融パラフィン中に3回浸漬した。次にパラフィンブロックからマイクロトームを用いて薄片を調製し、得られた切片をスライド上に載荷した。
ビスファチンは、皮膚の皮脂腺中で発現する。図1を参照されたい。皮膚内でのビスファチン発現を、組織学検査を使用して試験した。上述した材料および方法を使用して組織学検査のためにBalbCマウス(Mus musculus)由来の皮膚生検サンプルを調製した。ビスファチン免疫組織化学検査もまた上述したように実施した。
ビスファチンは、皮脂腺の内部に存在する皮脂蓄積細胞中で高度に発現する。図2を参照されたい。BalbCマウス由来の皮膚生検サンプルは、上述した材料および方法を使用して組織学検査のために調製した。ビスファチンの免疫組織化学検査およびオイルレッドO染色もまた上述のように実施した。
ビスファチンの局所投与および皮内投与は、皮脂腺の内側に局在する脂腺細胞の数を増加させる。図3を参照されたい。
ビスファチン処置は、コントロールに比して皮脂腺内の脂質蓄積を増加させる。図4を参照されたい。ビスファチン処置は、皮膚内の皮脂腺の成熟、およびコントロールに比したこれらの成熟皮脂腺による皮脂の生成もまた誘導する。図4を参照されたい。
ビスファチンアンタゴニストを用いた処置は、皮脂腺内での皮脂産生を阻害する。図5および図6を参照されたい。
ビスファチンを含む組成物は中等度から重度の乾燥皮膚を効果的に治療する。表1を参照されたい。
図1
図1は、ビスファチンの発現が皮脂腺に制限されることを示している。
2月齢のBalbCマウス由来の皮膚の組織切片を調製した。皮膚サンプルは、4%パラホルムアルデヒド中で固定し、パラフィン包埋した。皮膚切片について、抗ビスファチン抗体を用いてビスファチンを染色した(褐色)。HF(毛包)、SG(皮脂腺)、PC(末梢細胞)、CC(中心細胞)。倍率:10×および40×。顕微鏡:Nikon Eclipse 50i。
図2は、ビスファチンが皮脂腺の皮脂蓄積細胞内で発現することを示している。
凍結切片は、材料および方法に記載したように2月齢のBalCマウスの皮膚から調製し、4%パラホルムアルデヒド中で固定し、ビスファチン(褐色)およびオイルレッドO(赤色)染色にかけた。倍率:10×および40×。顕微鏡:Nikon Eclipse 50i。
図3は、ビスファチンが皮脂腺内の気泡形の脂腺細胞の数を増加させることを示している。
成体BalbCマウスを4日間にわたりビスファチン(0.01μg/mL)を用いて皮内または局所的に処置した。4日後、処置された領域の皮膚切片を採取し、4%パラホルムアルデヒド中で固定し、パラフィン包埋し、皮膚切片をH&E染色した。倍率:40×。顕微鏡:Nikon Eclipse 50i。図3Aは、皮膚生検サンプルの顕微鏡写真を示している。図3Bは、皮脂腺の中心に所在する気泡形の脂腺細胞を計数し、処置の各1つについて皮脂腺中に存在する全細胞に比してそのような脂腺細胞のパーセンテージを算出することによって入手したデータを示している。
図4は、ビスファチンを用いた局所的処置が皮脂腺内での成熟および脂質蓄積を誘発することを示している。
新生仔BalbCマウスを3日間にわたりビスファチンを用いて局所的に処置した。皮膚生検は、指示した時点に採取した。図4Aでは、凍結皮膚切片を調製し、オイルレッドOを用いて染色し、ヘマトキシリンで対染色した。黒色矢印は、皮脂含有腺を示している。図4Bでは、パラフィン切片を調製し、H&E染色を行った。赤色矢印は、皮脂腺を示している。倍率:20×。顕微鏡:Nikon Eclipse 50i。
図5は、ビスファチンアンタゴニストsiRNAを用いた局所的処置が皮脂腺内での皮脂産生を抑制することを示している。
新生仔BalbCマウスは、5日間にわたりカチオン性親油性MPDYペプチドを備える3nMの結合siRNA濃度でビスファチンアンタゴニストsiRNA1およびsiRNA2の両方を用いて局所的に処置した。皮膚生検は、指示した時点に採取した。パラフィン切片を調製し、図5Aでは、ビスファチン阻害を例証するためにビスファチンについて免疫染色した。黄色矢印は、ビスファチン染色を示している。図5Bでは、凍結皮膚切片を調製し、オイルレッドOを用いて染色し、ヘマトキシリンで対染色した。黒色矢印は、皮脂含有腺を示している。図5Cでは、生検サンプルのH&E染色を実施した。赤色矢印は、成熟皮脂腺を示している。
図6は、ビスファチンアンタゴニストsiRNAを用いた局所的処置が皮脂腺内での皮脂産生を抑制することを示している。
新生仔BalbCマウスを5日間にわたりカチオン性親油性MPDYペプチドを備える(図6B)、またはこのペプチドを備えない(図6A)1nM、または3nMの結合siRNA濃度でビスファチンアンタゴニストsiRNA1およびsiRNA2を用いて局所的に処置した。皮膚生検は、指示した時点に採取した。凍結切片を調製し、材料および方法において記載したようにオイルレッドOを用いて染色した。皮脂含有腺を計数し、結果は図6のグラフに要約した。
Claims (55)
- ビスファチン活性剤および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
- 送達ペプチドをさらに含む、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記ビスファチン活性剤は、ビスファチンアゴニストである請求項1に記載の医薬組成物。
- ビスファチンアゴニストを約0.001〜約10重量%含む請求項3に記載の医薬組成物。
- 約1重量%のビスファチンアゴニスト、約95重量%の水、約0.2重量%のモンタンロウ、約0.2重量%のミツロウ、約0.2重量%のソルビトール、約0.2重量%のシアバター、約1重量%のボリジオイル、約1重量%のカレンジュラ油 、約0.2重量%のハマメリス (Hamamelis)抽出物および約0.1重量%のヒマシ油を含む請求項4に記載の医薬組成物。
- 前記ビスファチンアゴニストは、配列番号2、配列番号4、配列番号6および配列番号8からなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸配列を含む請求項5に記載の医薬組成物。
- 前記ビスファチンアゴニストは、配列番号2のアミノ酸配列を含む請求項6に記載の医薬組成物。
- クリーム剤である請求項7に記載の医薬組成物。
- 前記ビスファチン活性剤はビスファチンアンタゴニストであり、前記送達ペプチドは配列番号27に示したアミノ酸配列を有するアミノ末端ミリストイル化ペプチドである請求項2に記載の医薬組成物。
- 前記ビスファチンアンタゴニストは、配列番号2、配列番号4、配列番号6および配列番号8からなる群から選択される配列を含むタンパク質をコードする核酸を標的とする少なくとも1つのsiRNAである請求項9に記載の医薬組成物。
- 第1siRNA、第2siRNA、第3siRNAおよび第4siRNAからなる群から選択される少なくとも1つのsiRNAを含み、ここで、前記第1siRNAは配列番号19および配列番号20に示した配列を含む二本鎖核酸であり、前記第2siRNAは配列番号21および配列番号22に示した配列を含む二本鎖核酸であり、前記第3siRNAは配列番号23および配列番号24に示した配列を含む二本鎖核酸であり、および前記第4siRNAは配列番号25および26に示した配列を含む二本鎖核酸である請求項10に記載の医薬組成物。
- 第1siRNA、第2siRNAおよび第3siRNAからなる群から選択される少なくとも1つのsiRNAを含み、ここで、前記第1siRNAは配列番号9および配列番号10に示した配列を含む二本鎖核酸であり、前記第2siRNAは配列番号13および配列番号14に示した配列を含む二本鎖核酸であり、および前記第3siRNAは配列番号17および配列番号18に示した配列を含む二本鎖核酸である請求項10に記載の医薬組成物。
- 水溶性担体およびDMSOを含む請求項9〜12のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 被験者における皮脂過剰生成状態を治療する方法であって、治療有効量のビスファチンアンタゴニストまたはビスファチンアンタゴニストを含有する医薬組成物を皮脂過剰生成状態を患う被験者に投与する工程を含み、それにより前記皮脂過剰生成状態が治療される方法。
- 前記皮脂過剰生成状態は、挫瘡、脂漏症、脂漏性皮膚炎、皮脂嚢胞および皮脂腺過形成 からなる群から選択される請求項14に記載の方法。
- 前記ビスファチンアンタゴニストは、配列番号2、配列番号4、配列番号6および配列番号8からなる群から選択される配列を含むタンパク質をコードする核酸を標的とする少なくとも1つのsiRNAを含む請求項15に記載の方法。
- 前記siRNAは、第1siRNA、第2siRNA、第3siRNAおよび第4siRNAからなる群から選択される少なくとも1つであって、ここで、前記第1siRNAは配列番号19および配列番号20に示した配列を含む二本鎖核酸であり、前記第2siRNAは配列番号21および配列番号22に示した配列を含む二本鎖核酸であり、前記第3siRNAは配列番号23および配列番号24に示した配列を含む二本鎖核酸であり、および前記第4siRNAは配列番号25および26に示した配列を含む二本鎖核酸である、請求項16に記載の方法。
- 前記siRNA1は、第1siRNA、第2siRNAおよび第3siRNAからなる群から選択される少なくとも1つであって、ここで、前記第1siRNAは配列番号9および配列番号10に示した配列を含む二本鎖核酸であり、前記第2siRNAは配列番号13および配列番号14に示した配列を含む二本鎖核酸であり、および前記第3siRNAは配列番号17および配列番号18に示した配列を含む二本鎖核酸である請求項16に記載の方法。
- 前記ビスファチンアンタゴニストは、FK−866およびAPO866からなる群から選択される少なくとも1つの化合物を含む請求項15に記載の方法。
- 被験者における尋常性挫瘡を治療する方法であって、治療有効量のビスファチンアンタゴニスト、またはビスファチンアンタゴニストを含有する医薬組成物を尋常性挫瘡を備える被験者に投与する工程を含み、それにより前記尋常性挫瘡が治療される方法。
- 前記ビスファチンアンタゴニストは、配列番号2、配列番号4、配列番号6および配列番号8からなる群から選択される配列を含むタンパク質をコードする核酸を標的とする少なくとも1つのsiRNAを含む請求項20に記載の方法。
- 前記siRNAは、第1siRNA、第2siRNA、第3siRNAおよび第4siRNAからなる群から選択される少なくとも1つであって、ここで、前記第1siRNAは配列番号19および配列番号20に示した配列を含む二本鎖核酸であり、前記第2siRNAは配列番号21および配列番号22に示した配列を含む二本鎖核酸であり、前記第3siRNAは配列番号23および配列番号24に示した配列を含む二本鎖核酸であり、および前記第4siRNAは配列番号25および26に示した配列を含む二本鎖核酸である請求項21に記載の方法。
- 前記siRNA1は、第1siRNA、第2siRNAおよび第3siRNAからなる群から選択される少なくとも1つであって、ここで、前記第1siRNAは配列番号9および配列番号10に示した配列を含む二本鎖核酸であり、前記第2siRNAは配列番号13および配列番号14に示した配列を含む二本鎖核酸であり、および第3siRNAは配列番号17および配列番号18に示した配列を含む二本鎖核酸である請求項21に記載の方法。
- ビスファチンアンタゴニストを含有する前記医薬組成物は、請求項9〜12のいずれか一項に記載の医薬組成物である請求項20に記載の方法。
- 被験者における皮脂産生欠乏症状態を治療する方法であって、治療有効量のビスファチンアゴニスト、またはビスファチンアゴニストを含有する医薬組成物を、皮脂過剰生成状態を患う被験者に投与する工程を含み、それにより前記皮脂産生欠乏症状態が治療される方法。
- 前記皮脂産生欠乏症状態は、あかぎれ、皮膚炎、乾癬、糖尿病、腎不全、腎移植、血液透析、ビタミンA欠乏症および口角炎からなる群から選択される少なくとも1つと関連する乾燥症状態である請求項25に記載の方法。
- 前記ビスファチンアゴニストは、配列番号2、配列番号4、配列番号6および配列番号8からなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸配列を含む請求項25に記載の方法。
- 前記ビスファチンアゴニストは、配列番号2に示した酸配列を含む請求項27に記載の方法。
- ビスファチンアゴニストを含有する前記医薬組成物は、請求項3〜8のいずれか一項に記載の医薬組成物である請求項25に記載の方法。
- 被験者の皮脂産生を増加させる方法であって、治療有効量のビスファチンアゴニスト、またはビスファチンアゴニストを含有する医薬組成物を前記被験者の皮膚に投与する工程を含み、それにより前記被験者の皮脂産生が増加させられる方法。
- 前記ビスファチンアゴニストは、局所投与または皮内投与される請求項30に記載の方法。
- 前記ビスファチンアゴニストは、配列番号2、配列番号4、配列番号6および配列番号8からなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸配列を含む請求項31に記載の方法。
- 前記ビスファチンアゴニストは、配列番号2のアミノ酸配列を含む請求項32に記載の方法。
- ビスファチンアゴニストを含有する前記医薬組成物は、請求項3〜8に記載の医薬組成物である請求項30に記載の方法。
- 被験者の皮脂産生を減少させる方法であって、治療有効量のビスファチンアンタゴニスト、またはビスファチンアンタゴニストを含有する医薬組成物を前記被験者の皮膚に投与する工程を含み、それにより前記被験者の皮脂産生が減少させられる方法。
- 前記ビスファチンアンタゴニストは、局所投与または皮内投与される請求項35に記載の方法。
- 前記ビスファチンアンタゴニストは、配列番号2、配列番号4、配列番号6および配列番号8からなる群から選択される配列を含むタンパク質をコードする核酸を標的とする少なくとも1つのsiRNAを含む請求項36に記載の方法。
- 前記siRNAは、第1siRNA、第2siRNA、第3siRNAおよび第4siRNAからなる群から選択される少なくとも1つであって、ここで、前記第1siRNAは配列番号19および配列番号20に示した配列を含む二本鎖核酸であり、前記第2siRNAは配列番号21および配列番号22に示した配列を含む二本鎖核酸であり、前記第3siRNAは配列番号23および配列番号24に示した配列を含む二本鎖核酸であり、および前記第4siRNAは配列番号25および26に示した配列を含む二本鎖核酸である請求項37に記載の方法。
- 前記siRNAは、第1siRNA、第2siRNAおよび第3siRNAからなる群から選択される少なくとも1つであって、ここで、前記第1siRNAは配列番号9および配列番号10に示した配列を含む二本鎖核酸であり、前記第2siRNAは配列番号13および配列番号14に示した配列を含む二本鎖核酸であり、および前記第3siRNAは配列番号17および配列番号18に示した配列を含む二本鎖核酸である請求項37に記載の方法。
- 前記ビスファチンアンタゴニストは、FK−866およびAPO866からなる群から選択される少なくとも1つの化合物を含む請求項36に記載の方法。
- ビスファチンアンタゴニストを含有する前記医薬組成物は、請求項9〜12に記載の医薬組成物である請求項35に記載の方法。
- 皮脂過剰生成状態を治療するための医薬品の製造における配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号25、配列番号26、配列番号9、配列番号10、配列番号13、配列番号14、配列番号17および配列番号18からなる群から選択される核酸配列を含むsiRNAの使用。
- 挫瘡、脂漏症、脂漏性皮膚炎、皮脂嚢胞および皮脂腺過形成 からなる群から選択される状態を治療するための医薬品の製造における配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号25、配列番号26、配列番号9、配列番号10、配列番号13、配列番号14、配列番号17および配列番号18からなる群から選択される核酸配列を含むsiRNAの使用。
- 皮脂過剰生成状態を治療するための医薬品の製造におけるFK−866の使用。
- 挫瘡、脂漏症、脂漏性皮膚炎、皮脂嚢胞および皮脂腺過形成 からなる群から選択される状態を治療するための医薬品の製造におけるFK−866の使用。
- 皮脂過剰生成状態を治療するための医薬品の製造におけるAPO866の使用。
- 挫瘡、脂漏症、脂漏性皮膚炎、皮脂嚢胞および皮脂腺過形成 からなる群から選択される状態を治療するための医薬品の製造におけるAPO866の使用。
- 尋常性挫瘡を治療するための医薬品の製造における配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号25、配列番号26、配列番号9、配列番号10、配列番号13、配列番号14、配列番号17および配列番号18からなる群から選択される核酸配列を含むsiRNAの使用。
- 皮脂産生欠乏症状態を治療するための医薬品の製造における配列番号2、配列番号4、配列番号6および配列番号8からなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸配列を含むビスファチンアゴニストの使用。
- あかぎれ、皮膚炎、乾癬、糖尿病、腎不全、腎移植、血液透析、ビタミンA欠乏症および口角炎からなる群から選択される少なくとも1つと関連する乾燥症状態を治療するための医薬品の製造における配列番号2、配列番号4、配列番号6および配列番号8からなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸配列を含むビスファチンアゴニストの使用。
- 被験者における皮脂過剰生成状態を治療するために適した医薬組成物であって、治療有効量のビスファチンアンタゴニストを皮脂過剰生成状態を患う被験者に投与する工程を含み、それにより前記皮脂過剰生成状態が治療される医薬組成物。
- 被験者における尋常性挫瘡を治療するために適した医薬組成物であって、治療有効量のビスファチンアンタゴニストを尋常性挫瘡を備える被験者に投与する工程を含み、それにより前記尋常性挫瘡が治療される医薬組成物。
- 被験者における皮脂産生欠乏症状態を治療するために適した医薬組成物であって、治療有効量のビスファチンアゴニストを皮脂産生欠乏症状態を患う被験者に投与する工程を含み、それにより前記皮脂産生欠乏症状態が治療される医薬組成物。
- 被験者の皮脂産生を増加させるために適した医薬組成物であって、治療有効量のビスファチンアゴニストを前記被験者の皮膚に投与する工程を含み、それにより前記被験者の皮脂産生が増加させられる医薬組成物。
- 被験者の皮脂産生を減少させるために適した医薬組成物であって、治療有効量のビスファチンアンタゴニストを被験者の皮膚に投与する工程を含み、それにより前記被験者の皮脂産生が減少させられる医薬組成物。
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