JP2012126657A - ウシの乳房炎の予防・治療用組成物及びウシの乳房炎の予防・治療方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】ウシの乳房炎の予防・治療用組成物の有効成分として、アウレオバシジウム属(Aureobasidium sp.)に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を含有せしめる。また、ウシの乳房炎の予防・治療方法として、アウレオバシジウム属(Aureobasidium sp.)に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を摂取させる。
【選択図】 なし
Description
[1]アウレオバシジウム属(Aureobasidium sp.)に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を有効成分として含有することを特徴とするウシの乳房炎の予防・治療用組成物。
[2]前記培養物は、前記微生物を培養する培地に乳酸菌もしくは死菌化された微生物を添加して前記微生物の栄養成分として資化されるように培養して得られた培養物である、上記[1]記載のウシの乳房炎の予防・治療用組成物。
[3]ウシの飼料に添加して使用される、上記[1]又は[2]記載のウシの乳房炎の予防・治療用組成物。
[4]アウレオバシジウム属(Aureobasidium sp.)に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を摂取させることを特徴とするウシの乳房炎の予防・治療方法。
[5]前記培養物は、前記微生物を培養する培地に乳酸菌もしくは死菌化された微生物を添加して前記微生物の栄養成分として資化されるように培養して得られた培養物である、上記[4]記載のウシの乳房炎の予防・治療方法。
[6]アウレオバシジウム属(Aureobasidium sp.)に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を添加した飼料を摂取させる、上記[4]又は[5]記載のウシの乳房炎の予防・治療方法。
数式1:β−グルカン(g/100g)=ブドウ糖(g/100g)×0.9
下記のようにしてアウレオバシジウム プルランス M-2(Aureobasidium pullulans M-2)(FERM BP-10014)の培養液を調製した。
前培養液を、ショ糖1%、アスコルビン酸0.1%、米糠0.1%を含む液体培地(pH5.3)に適量接種して、25℃、72〜96時間(製造バッチによって異なる)、通気撹拌培養を行った。培養終了後、この培養液を121℃、15分間殺菌した。得られた殺菌後の培養液は、固形分およそ1.2質量%を含み、該固形分100g中のβ−グルカン含量は32.5gであった。また、培養液そのものの質量100g中に含まれる含有量に換算して、0.39g/100g含有するものであった。この培養液を以下の試験に用いた。
乳汁中の白血球および脱落した乳腺上皮細胞を総称して体細胞というが、乳房炎の病原菌に侵されると体細胞数が増加する。通常、個体の体細胞数の目標値は30万個/mL以下、正常値は10万個/mL以下とされており、30万個/mL以上の場合には乳房炎に感染している可能性が高い。そこで、乳房炎のウシの体細胞数の数字が低くなると細菌汚染の状況が改善され乳房炎の症状が改善されたとみることができるので、アウレオバシジウム培養液の経口投与が、乳房炎のウシ乳汁中の体細胞数の改善に有効かどうかを調べた。
尚、図3に示されるように、投与群において投与開始時と3ヶ月後の体細胞数をT検定にかけるとP<0.05の棄権率で有意差が認められた。すなわち、投与群では、体細胞数の減少が、有意差をもって認められた。(図2)
これにより、農場ではバルク乳の体細胞数の平均値が30万個/mLの値を超え、ペナルティを毎月30万円程度支払っていたが、ペナルティの支払いがなくなった。
乳房炎を発症していない健康なホルスタイン種泌乳牛の乳汁中の体細胞数の変動を、アウレオバシジウム培養液を与えない供試牛13頭について(非投与群1−13)、実施例1と同様にして調べた。
図4では、非投与群1−13の体細胞数の変動の結果を統計処理して比較した結果を示す。図5では、投与群1−6と非投与群1−13の体細胞数を、それぞれ試験開始時の値を1とした時の増減値を統計処理して比較した結果を示す図表である。
また、図4に示されるように、非投与群において試験開始時と3ヶ月後の試験終了時の体細胞数をT検定にかけるとP<0.01の棄権率で有意差が認められた。すなわち、非投与群では、体細胞数の増加が有意差を持って認められた。(図4)
図5では、投与群1−6と非投与群1−13の体細胞数について、それぞれ試験開始時の値を1とした時の増減値を、マンホイットニーのU検定を用いて、投与群と非投与群を比較している。その結果、P<0.05の棄権率で有意差が認められた。すなわち、非投与群の体細胞数の増加は、投与群と比較して有意に高いことがわかった。(図5)
一般的に、夏から秋にかけての環境の要因は、自然に改善され、体細胞数の改善がみられるが、ここではほぼ全てのウシで悪化する傾向にあり、当該比較例の試験期間の環境要因が非常に厳しいものであったことが推察された。
上記実施例1の投与群1−6について、投与開始前と投与3ヶ月後に、乳汁中の大腸菌数を食品衛生法指針に基づきEC培地発酵管法で測定した。その結果を、表3及び図6に示す。また、図7に投与群1−6の乳中大腸菌数の変動の結果を、統計処理を用いて比較した。
また、T検定の結果、投与群の投与3ヶ月後の大腸菌数は、開始時の大腸菌数と比較して、P<0.05の棄権率で有意差が認められた。すなわち、投与群において、大腸菌数は有意差をもって減少していた。(図7)
上記実施例1の投与群1−6について、投与開始前と投与3ヶ月後に、乳汁中の一般生菌数を食品衛生法指針に基づき標準寒天平板培養法で測定した。その結果を、表4及び図8に示す。また、図9に投与群1−6の乳中一般生菌数の変動の結果を、統計処理を用いて比較した。
また、T検定の結果、投与群の11月の一般生菌数は、8月の一般生菌数と比較して、P<0.05の棄権率で有意差が認められた。すなわち、投与群において、一般生菌数は有意差をもって減少していた。(図9)
上記実施例1の投与群1−6についてその試験期間中の1ヶ月ごとに、白血球数と、白血球のうち、炎症により数値が上昇するといわれている血中の桿状型好中球(St)を測定した。白血球数は、DC検出法にて測定した。その結果を表5と図10に示す。桿状型好中球(St)は、自動血球分類装置及び鏡検法により調べた。その結果を表6と図11に示す。
また、図12には、投与群1−6の血中の桿状型好中球(St)数の変動を統計処理して比較した結果を示す。
表6、図11に示されるように、炎症により数値が上昇するといわれている桿状型好中球(St)数は、投与開始時には、平均値558×103個/μLであったが、投与3ヶ月後には、平均値289×103個/mLに下がっていた。(表6)
また、T検定の結果、投与群の投与3ヶ月後での桿状型好中球(St)数は、投与開始時の値と比較して、P<0.05の棄権率で有意差が認められた。すなわち、投与群において、桿状型好中球(St)数は有意差をもって減少していた。(図12)
尚、図10に示されているように、白血球総数の減少は見られず、白血球の中でも、炎症の影響で数値が上昇する桿状型好中球(St)数が減少していた。(図10、図11)
上記実施例1の投与群1−6について、副作用の有無を確認するため、その試験期間中の1ヶ月ごとに、血液中の生化学検査項目について調べた。アルブミンはBCG法で測定した。γGTP、AST/GOT、ALT/GPTはJCCLS-SOP法で測定した。クレアチニンはJaffe変法及び酵素法で測定した。赤血球は電気抵抗検出法で測定した。ヘモグロビンはSLS−Hb法で測定した。好酸球はDC法で測定した。血糖価(グルコース量)は酵素法で測定した。総コレステロール、LDLコレステロールは酵素法で測定した。その結果を図13〜21に示す。各測定値の正常範囲は、「家畜共済における臨床病理検査要領」(農林水産省経営局)での値を参考にした。
表8、図14は、投与群1−6のγGTPの値を示している。γGTPの正常値は、6.1〜17.4U/Lである。投与群1−6の平均値は、投与開始時は31.2IU/Lであり、投与1ヶ月後は27.7IU/L、投与2ヶ月後は27.0IU/L、投与3ヶ月後は29.0IU/Lであった。(表8)
表9、図15は、投与群1−6AST/GOTの値を示している。AST/GOTは、78〜132U/Lが正常範囲とされており、投与開始時には投与群6以外は正常範囲を下回わった。この時の投与群1−6の平均値は65.0IU/Lであった。また、投与1ヶ月後の平均値は67.3IU/L、投与2ヶ月後の平均値は69.8IU/L、投与3ヶ月後の平均値は68.3IU/Lであった。投与3ヶ月後の時点では、投与群4が正常範囲であった。(表9)
表10、図16では、ALT/GPTの値を示している。ALT/GPTは、正常範囲が14〜38IU/Lである。(図16)投与群1−6のALT/GPTの平均値は、投与開始時26.8IU/L、投与1ヶ月後は23.7IU/L、投与2ヶ月は22.2IU/L、投与3ヶ月後には、25.8IU/Lであり、開始から投与開始後のいずれも正常範囲であった。(表10)
表11、図17では、腎機能を反映しているクレアチニン値の変動を示している。表11、図17に示されるように、投与群1−6のクレアチニンの平均値は、投与開始時は0.88mg/dL、投与1ヶ月後は0.93mg/dL、投与2カ月後は0.93mg/dL、投与3ヵ月後は0.92mg/dLであった。(表11)
表13、図19では、投与群1-6のヘモグロビン量が示されている。ヘモグロビンの正常値は、8.0〜12.6g/dLである。投与群1-6のヘモグロビンの平均値は、投与開始時が9.1g/dL、投与1ヶ月後に9.3g/dL、投与2ヵ月後には9.4g/dL、投与3ヵ月後には9.5g/dLと正常範囲内を推移した。(表13)
表14、図20には、投与群1-6の好酸球数が示されている。好酸球数は、正常範囲が0〜2,400個/μLである。投与群1−6の好酸球数の平均値は、投与開始時には、1,000個/μLであり、投与1ヶ月後には、760個/μL、投与2ヶ月後には、608個/μL、投与3ヶ月後には538個/μLであった。いずれも正常範囲内で減少していた。(表14)
表17、図23では、投与群1−6の血中LDL-コレステロール値の変動を示している。LDL-コレステロールは、泌乳後期で高くなる傾向がある。投与開始時の投与群1−6の平均値は8.8mg/dLであった。投与1ヶ月後には7.5mg/dL、投与2ヶ月後には8.8mg/dL、投与3ヶ月後には9.7mg/dLであった。(表17)
上記の試験環境をとりまく状況をいえば、試験期間である2010年の夏は猛暑であり、環境的にも厳しい状況であった。2010年9月3日に農林水産省がまとめた猛暑による全国の畜産被害状況(2010年7月〜8月)でも、熱中症で死亡、廃棄した家畜は乳牛で959頭に上る。同じ牛舎内では、体細胞数が正常範囲で推移していたにも関わらず、熱中症で倒れ、そのまま廃牛になったウシも1頭いた。また、廃牛にならないまでも、抗生剤治療を施す必要が出たウシもいた。このような環境の影響で、上記比較例1のように、乳房炎を発症していない健康なホルスタイン種泌乳牛の乳汁中の体細胞数が増加する傾向を示したものと考えられた。即ち、乳房炎に影響を与える環境要因が、季節の推移により改善されていないことが示唆された。
Claims (6)
- アウレオバシジウム属(Aureobasidium sp.)に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を有効成分として含有することを特徴とするウシの乳房炎の予防・治療用組成物。
- 前記培養物は、前記微生物を培養する培地に乳酸菌もしくは死菌化された微生物を添加して前記微生物の栄養成分として資化されるように培養して得られた培養物である、請求項1記載のウシの乳房炎の予防・治療用組成物。
- ウシの飼料に添加して使用される、請求項1又は2記載のウシの乳房炎の予防・治療用組成物。
- アウレオバシジウム属(Aureobasidium sp.)に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を摂取させることを特徴とするウシの乳房炎の予防・治療方法。
- 前記培養物は、前記微生物を培養する培地に乳酸菌もしくは死菌化された微生物を添加して前記微生物の栄養成分として資化されるように培養して得られた培養物である、請求項4記載のウシの乳房炎の予防・治療方法。
- アウレオバシジウム属(Aureobasidium sp.)に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を添加した飼料を摂取させる、請求項4又は5記載のウシの乳房炎の予防・治療方法。
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