JP2011523934A - 骨関節疾患の治療又は予防において使用するための医薬組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
− 場合により適当な医薬担体又は希釈剤;
− ポリサッカリド及び/又はグリコサミノグリカン、好ましくはグリコサミノグリカン(プロテオグリカンを含む);
− 幹細胞(分化しているか又はしていない)(ただし、当該幹細胞はヒト胚性幹細胞ではなく、潜在的に抗炎症特性を有する);並びに
− 十分な量の抗炎症剤(化合物)
を含む、組成物に関する。
− 当該医薬組成物を貯蔵するための容器手段、
− 当該医薬組成物を投薬するための容器の縦軸に沿って可動のピストン手段、及び
− 哺乳動物の対象の末梢神経に当該医薬組成物を送達するための前記容器手段に取り付けられた中空針
を有する装置を含む、キットオブパーツに関する。
培養を終える前の24時間にわたって、1μCi/mLの3H−チミジンと培養物をインキュベートし、増殖を測定した。次いで、細胞を氷冷PBSで二回洗浄し、氷冷5%トリクロロ酢酸(TCA)で二回洗浄した。最後に、細胞を0.1N NaOH−0.1% Triton−X100で可溶化した。上清を回収して、シンチレーション液の存在下でβカウンターで分析した。結果は、cpm(「カウント/分」=一分の一連の連続カウントで観察された放射活性成分の崩壊回数)で得た。IL−1β(ベータ)検出(ELISAによる)。PBMC又は培養物上清からのIL−1βのレベルを、Quantikine ELISA kit(R&D Systems Inc,Mineapolis,USA)によって測定した。IL−1βの最小の検出可能な濃度は、1.0pg/mLであると見積もられた。
PBMC増殖及びIL−1β分泌に対するMSCの効果を試験して、基本(未刺激の)状態を超える刺激効果が認められた。驚くべきことに、増殖効果は、刺激条件(例えば、PHAの存在)に維持されたが、IL−1β分泌に対する炎症効果の代わりに、強力な阻害効果が認められた(−62%)。
MSCは、7、14、及び21日間にわたって軟骨形成培地で培養し、4つの条件:
− 対照
− A2A:5μMアミノクロニジン
− HA:200μg/mlのヒアルロン酸
− HA+A2A:200μg/mlのヒアルロン酸及び5μMアミノクロニジン
で試験した。
異なる条件に由来するペレットは同様のサイズであったが(平均0.7mm、0.9から0.4mmの範囲)、アルシアンブルー染色は、ペレットの細胞質が、条件の変化に顕著に影響を受けたことを明らかにする。例えば、ヒアルロン酸の添加は、ペレットの細胞質を多く低減する。同時に、マトリックス(すなわち、ムコポリサッカリド及びグリコサミノグリカン)含量は、青色染色が存在しないことによって図2に示されるように対照及びA2A単独ではほぼ0であったが、ヒアルロン酸及びヒアルロン酸/クロニジン条件下では、スライドは一様に青色に染色され、重要なマトリックス生産を示した。HA/A2Aの併用条件は、さらに、HA単独条件を超えてマトリックス生産を増大させる。
− 間葉系間質細胞の存在は、軟骨マトリックスの新たな生産に必要とされる;
− この生産は、ヒアルロン酸によって顕著に増大(及び加速)されるが、ヒアルロン酸の添加は炎症誘発効果がある;
− このヒアルロン酸の強力な炎症誘発効果は、α2アドレナリンアゴニストの添加によって完全に中和される;
− α2アドレナリンアゴニスト剤の添加は、細胞集団の細胞質及びマトリックス生産を増大させることによって、間葉系間質細胞及びヒアルロン酸の組み合わせの再生効果を支援する。
[参考文献]
Claims (14)
- 好ましくは関節内注射によって、急性及び/又は慢性の骨関節疾患及び/又は症状の治療及び/又は予防に使用するための医薬組成物であって、
− 場合により適当な医薬担体又は希釈剤、
− ポリサッカリド及び/又はグリコサミノグリカン、
− 有効量の抗炎症化合物、及び
− 有効量の幹細胞(ただし、前記幹細胞はヒト胚性幹細胞ではない)
を含む、医薬組成物。 - 前記グリコサミノグリカンが、プロテオグリカン、コンドロイチンスルフェート、ケラチンスルフェート、又はヒアルロン酸、その誘導体、キトサン、キトサン誘導体、又はキチン誘導体からなる群から選択される、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記抗炎症化合物が、ステロイド化合物、非ステロイド抗炎症化合物、疾患修飾性抗リウマチ薬、α2アドレナリン作動性受容体アゴニスト、抗CD20剤、抗サイトカイン剤、抗TNF剤、又はそれらの混合物からなる群から選択される、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記抗炎症化合物がα2アドレナリン作動性受容体アゴニストである、請求項3に記載の医薬組成物。
- 前記アゴニストが、クロニジン、p−アミノクリオニジン、チアメニジン、5−ブロモ−6−(2−イミダゾリジン−2−イルアミノ)キノキサリン、デキスメデトミジン、デトミジン、メデトミジン、αメチルドーパ、オキシメタゾンリン、ブリモニジン、チザニジン、ミバゼロール、ロフェキシジン、キシラジン、クアナベンズ、クアンファシン、クアンクロフィン、クアノキサベンズ、又はそれらの誘導体若しくは構造類似体、α−メチノレフェリン、アゼペキソール、インドラミン、6−アリル−2−アミノ−5,6,7,8−テトラヒドロ4H−チアゾロ[4,5−d]アゼピン2HClからなる群から選択される、請求項4に記載の医薬組成物。
- 前記幹細胞が、骨髄濃縮物、造血幹細胞及び間葉系幹細胞の混合物(拡大しているか又はしていない)、間葉系幹細胞、骨芽細胞、軟骨細胞、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項1に記載の医薬組成物。
- 体重に対して0.1から100mg/kgのポリサッカリド又はグリコサミノグリカンを含む、請求項1から6のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 体重に対して0.1から100mg/kgの抗炎症化合物を含む、請求項1から7のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 前記幹細胞が、成人の間葉系幹細胞又は(非ヒト)胚性間葉系幹細胞である、請求項1から8のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 注射可能な溶液である、請求項1から8のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 前記注射可能な溶液の注射が、週二回、好ましくは週一回、より好ましくは二週又は三週に一回実施される、請求項10に記載の医薬組成物。
- 前記急性又は慢性の骨関節の症状が、痛み、可動性、及び/又は機能からなる群から選択される、請求項1から11のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 前記骨関節疾患が、変形性関節症、変性性関節炎、変形性膝関節炎、変形性股関節症、関節に関わる他の炎症性の一般的な疾患又は症状、例えば、全身性エリテマトーデス(SLE)、脊椎関節症、リウマチ性多発筋痛、強直性脊椎炎、ライター症候群、乾癬性関節症、腸疾患性関節炎(炎症性腸疾患、例えば、出血性大腸炎及びクローン病に関連する)、関節リウマチ、神経障害性関節症、急性リウマチ熱、痛風、軟骨石灰化症、カルシウムヒドロアパタイト結晶沈着症、及びライム病からなる群から選択される、請求項1から12のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- − 請求項1から13のいずれか一項に記載の組成物を有するバイアル、
− 哺乳動物の対象の炎症を起こした関節に前記組成物を送達するための装置であって
・前記組成物を貯蔵するための容器手段、
・前記医薬組成物を投薬するための容器の縦軸に沿って可動のピストン手段、及び
・哺乳動物の対象の末梢神経に前記医薬組成物を送達するための前記容器手段に取り付けられた中空針
を備える装置
を含む、キットオブパーツ。
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