JP2011520900A - てんかんの治療 - Google Patents
てんかんの治療 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2011520900A JP2011520900A JP2011509662A JP2011509662A JP2011520900A JP 2011520900 A JP2011520900 A JP 2011520900A JP 2011509662 A JP2011509662 A JP 2011509662A JP 2011509662 A JP2011509662 A JP 2011509662A JP 2011520900 A JP2011520900 A JP 2011520900A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- epilepsy
- seizures
- episode
- administered
- peptide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- A61K38/1787—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for neuromediators, e.g. serotonin receptor, dopamine receptor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/10—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a tag for extracellular membrane crossing, e.g. TAT or VP22
Abstract
【選択図】図4A
Description
「キメラポリペプチド」とは、複合ポリペプチド、即ち、単一の連続アミノ酸配列であり、2つ (又はそれ以上) の異なった、異種ポリペプチドから構成され、通常、単一のアミノ酸配列として融合されないポリペプチドを言う。
I. 概要
1以上のPLにPDZタンパク質が結合することを阻害する阻害剤が、てんかん対して治療効果があることは、驚くべき発見である。例えば、そのような阻害剤は、てんかんにより引き起こされる神経損傷を低減することができる。上記阻害剤は、PLに結合するPSD-95の阻害剤である。ある態様において、上記阻害剤は、てんかんのエピソード (例:発作) 後に起きる神経細胞死を低減する効果がある。
薬剤には、少なくとも2つの要素を有するキメラペプチド及びペプチドミミックを含む。第一の成分は、活性ペプチドであって、任意にNMDA受容体のPLモチーフ (即ち、PLペプチド) 又はPSD-95のPDZドメインを含む又はこれに基づくアミノ酸配列を有する。本発明において有益な活性ペプチドは、シナプス後肥厚部タンパク質 95 (PSD-95) のPDZドメイン1及び2 (Stathakismによって提供されたヒトアミノ酸配列、Genomics 44(1):71-82 (1997) ) と神経N-メチル-D-アスパラギン酸受容体のNR2Bサブユニットを含んでいる1以上のNMDA受容体2サブユニットのC末端PL配列 (Mandich et al., Genomics 22, 216-8 (1994) ) との相互作用を阻害する。NMDAR2Bは、GenBank ID 4099612、C末端20アミノ酸FNGSSNGHVYEKLSSIESDV (配列番号:12) 及びPLモチーフESDV (配列番号:1) を有する。しかし、阻害は、上記タンパク質の種変異からも示される。使用可能なNMDA及びグルタミン酸受容体のリストを下記に示す。
(R1、R2、R3、R4、及び R5 の1つは、 -COOHであって、R1、R2、R3、R4、及び R5 の残りは、F、H、OCH3 及び CH3からなる群から選択される。X は、 -A-B-C-D-Eであって、A、B、C、D 及び E は、単結合で接続される。Aは、C=O、NH、SO2 及び (CH2)m (m = 0、1、2、3、4、は 5) からなる群より選択される。B は、-OCH2-、C=O、
(R6-R10の1つは-C-D-Eと結合し、残りのR6-R10は、H、OH、F、Cl、Br、I、CH3、CH2CH3及びOCH3からなる群より選択され、n = 0又は1) 、飽和又は不飽和シクロアルキル又は複素環からなる群より選択される環系、又は
(o及びp = 0又は1、q = 0、1、2、3又は4、そしてR11は、置換又は非置換低級アルキル、アミド、チオエーテル、フェニル、フェノール、インドール、イミダゾール、NH(NH2)(N(+)H2) 、COOH、SH、OH、又はHからなる群より選択される) である。
Cは、-O-、C=O、NH、CONH、S、フタルアミド、CH3、H、SO2及び (CH2)r (r = 0、1、2、3、4、又は5) からなる群より選択される。Dは任意であるが、Cが末端でない場合、Dは、-CN-、C=O、NH、S、O、SO2、(CH2)s (s = 0、1、2、3、4、又は5) 、 (CH2)t-OH (t = 0、1、2、3、4又は5)、及び
からなる群より選択される。Eは任意であるが、Dが末端でない場合、Eは、低級アルキル、低級アルコキシ、ケトン、OH、COOH、ニトロソ、N-置換インドリン、又は細胞膜移行ペプチドのいずれかで置換されたシクロヘキシル又はフェニル;又は - (CH2)u-(CHR12R13) ( u = 0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、又は 17)であって、R12 及びR13 は、H、OH、シクロヘキサン、シクロペンタン、フェニル、置換フェニル、シクロペンタジエンからなる群より独立して選択される; 又はイソプロピル、イソブチル、1-イソプロピル-2-メチル-ブチル、1-エチル-プロピルを含む分岐低級アルキル;又は -NH-COR14であって、R14 は (CR15R16)vH ( v = 0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、又は17) であり、R15 及び R16 はH、シクロヘキサン、フェニル、及び細胞膜移行ペプチドからなる群より独立して選択される。) である。
(t = 0、1又は2であり、R1、R2、R3、R4、R5又はR6のいずれかは、COOHであって、R1、R2、R3、R4、R5及びR6の残りは、H、CH3、F、及びOCH3からなる群より選択される。またXは、-A-B-C-D-Eであって、A、B、C、D及びEは、単結合で接続される。そしてAは、C=O、SO2、NH、及び (CH2)m (m = 0、1、2、3、4、又は5) からなる群より選択される。Bは、-OCH2-、C=O、又は
(R5-R9 の1つは、-C-D-Eに結合し、残りのR5-R9 はH、OH、F、Cl、Br、I、CH3、CH2CH3 及び OCH3からなる群より選択され、そしてn = 0 又は 1) 、飽和又は不飽和シクロアルキル又は複素環からなる群より選択される環系、又は
(o及びp = 0又は1、そしてR10は、置換又は非置換アルキル、アミド、チオエーテル、フェニル、フェノール、インドール、イミダゾール、NH(NH2)(N(+)H2) 、COOH、SH、OH、又はHからなる群より選択される) である。Cは、C=O、NH、S、フタルアミド、-O-、CH3、H、SO2、及び (CH2)r (r = 0、1、2、3、4、又は5) からなる群より選択される。Dは任意であるが、Cが末端ではない場合、Dは、C=O、-CN-、NH、S、O、SO2、(CH2)s (s = 0、1、2、3、4、又は5) 、及び
からなる群より選択される。そして、Eは、低級アルキル、低級アルコキシ、ケトン、OH、COOH、ニトロソ、N-置換インドリンのいずれかで置換されたフェニル又はシクロヘキシル;又は-(CHR11R12)u (u = 0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、又は17)であって、R11 及び R12 は、H、OH、シクロヘキサン、シクロペンタン、フェニル、置換フェニル、シクロペンタジエンからなる群より選択される; 又はイソプロピル、イソブチル、1-イソプロピル-2-メチル-ブチル、1-エチル-プロピルを含む分岐低級アルキル;又は-NH-COR11であって、R11 は(CHR12R13)s (s = 0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、又は17) であり、R12 及び R13 は、H、シクロヘキサン、フェニル、及び細胞膜移行ペプチドからなる群より独立して選択される。) である。
(R1 は、0-4 R7で置換したシクロヘキシル、0-4 R7で置換したフェニル、- (CH2)u-(CHR8R9)、分岐C1-6 アルキル (イソプロピル、イソブチル、1-イソプロピル-2-メチル-ブチル、1-エチル-プロピル) 及び -NH-C(O)-(CR10R11)vHからなる群より選択されるメンバーであって、各R7 は、C1-6 アルキル、C1-6 アルコキシ、-C(O)R12、OH、COOH、-NO、N-置換インドリン及び細胞膜移行ペプチドからなる群より選択される、独立したメンバーであり、各R8 及び R9 は、H、OH、シクロヘキサン、シクロペンタン、フェニル、置換フェニル (例えば、ハロ、アルキル 及び/又はヒドロキシル基で置換) 及びシクロペンタジエンからなる群より独立して選択され、各R10 及び R11 は、H、シクロヘキサン、フェニル及び細胞膜移行ペプチドからなる群より独立して選択され、R12 は、C1-6 アルキル及びアリールからなる群より選択されるメンバーである。そして、u 及び vは、それぞれ独立して0から20までである。R2、R3、R4、R5 及び R6 の1つは、-COOHであって、残りのR2、R3、R4、R5 及び R6 は、F、H、OCH3 及び CH3からなる群より、それぞれ独立して選択される。) を有する。
てんかんは、脳におけるコントロールできない電気活動に関する、反復性で理由が不明なイベントによって特徴付けられるCNS疾患であって、一般的には過剰な及び/又は同期した神経活動の形である。てんかんは、脳の一時的で異常な電気活動に関係している全ての症候群のグループである。反復性てんかん性エピソードは、非常に希に起きる場合 (例:何年もの間起きていない) から度々起きる場合 (例:1日に何度も起きる) まである。多くの個人は、エピソードとエピソードの間で無症状である。一般的に言えば、多くのてんかん性発作は、特発性 (要因又は原因不明で起きる) 、突発性 (事前の徴候がなく起きる) 、短期間 (数秒又は数分続く) 、及び自己限定性 (医療の手助けなく、停止すること) である。
繰り返し起きる挙動のほとんどのタイプは、けいれん、筋肉のけいれん、意識消失、奇妙な感覚、情動及び/又は挙動を含んでいるてんかん性発作を示すだろう。次の症状のいずれか1以上は、てんかんを示す可能性がある。目まい;失神;錯乱;記憶喪失;頭痛;気分又はエネルギーのレベルの変動;発熱を伴う又は伴わないけいれん;記憶の喪失又は混乱の期間;膀胱又は腸の制御が消失し、続く疲労による偶発的な発作;ぼんやりとするエピソード;質問又は指示に無反応な短い期間;ハッキリとした理由がない突然の硬直又は転倒;不適当な時期のまばたき又は咀嚼のエピソード;放心状態;会話又はコミュニケーションが短期間できなくなる;場違いに又は不自然に見える繰り返し運動;理由のない突然の恐怖、怒り、パニック;物事の見え方、聞こえ方、匂い方又は感じ方の奇妙な変化;腕、足又は体の筋肉のひきつり;及び/又は体中の素早い痙動クラスター。
てんかんは、数多くの種々の基準によって分類することが可能であり、この基準は、(1) 第一原因 (又は病因) 、(2) セミオロジーとして知られる、発作の観察可能な症状、(3) 発作の起源となる脳の場所、(4) 別々の部位として、同定可能な医学的症候群、及び (5) もしあれば、発作を引き起こすイベントを含んでいる。国際抗てんかん連盟 (ILAE) による1981年の分類体系は、一般的に使用されているものであり、基本的な病理学又は解剖学よりもむしろ観察 (臨床上の及び電気生理学的なデータに基づくもの) に基づく。1989年に、ILAEは、1つの軸を原因とし、もう1つの軸を脳内における局在範囲とする2軸のスキームによる、てんかんとてんかん性症候群の分類体系を提案した。1997年以来、ILAEは、5軸 (発作の現象、発作のタイプ、症候群、病因及び障害) を有する新規のスキームで活動している。当然、てんかんの多くのケースは、「不明」グループのままであるが、これらの症状は、いずれの単一分類にも当てはまらないためである。
てんかん性発作は、脳におけるニューロンのてんかん性活動 (典型的には、過剰な及び/又は過同期性、及び通常の自己限定性活動) に関する。てんかん性発作の国際分類は、てんかん性発作を焦点 (また、部分とも呼ばれる) 及び全般てんかん性発作に大まかに分けている。部分発作は、典型的には、初期セミオロジーが、大脳半球のほんの一部の初期活動を示す、又はこの初期活性に一致する発作である。全般発作は、典型的には、初期セミオロジーが、両方の大脳半球に対する少なからずの関与を示す、又はこの初期活性に一致する発作である。部分発作は、脳内に広がる、二次性全般化として知られるプロセスであろう。
てんかん性発作は、特徴的な動きのイベントが伴う可能性があり、これには、動きをもたらす筋収縮の増加 (陽性) 又は減少 (陰性) が含まれる。てんかん性発作は、運動徴候を付随する期間によって、以下の通り分類される。
1) 強直性:数秒から数分間の筋収縮が持続して増大すること。
2) てんかん性けいれん:主に近位筋肉及び体幹筋肉の、突然の屈曲、拡張又は混ざった拡張-屈曲であって、通常、ミオクローヌス性の動きよりも持続するが、強直性発作よりは持続しない (即ち、約1秒) 。限られた形として起きることもある (顔を歪めることや、頭を縦に振ること) 。てんかん性けいれんは、たびたびまとまって起きる。
3) 筋緊張異常性:アテトーゼ又はねじれ運動をもたらしている主動筋と拮抗筋の両方の持続的な収縮であって、これが続くと、姿勢異常をもたらす可能性がある。
4) ミオクローヌス性:変り易い局所分布 (軸上の、近位肢、遠位) における筋肉 (又は複数の筋肉) 又は筋肉群の、突然であり、短い時間 (<100ミリ秒) の不随意性単一収縮又は複数収縮。
5) 陰性ミオクローヌス性:先のミオクローニアの所見を除く、<500ミリ秒の強直性筋肉活動の中断。
6) 間代性:定期的な反復性があり、同じ筋肉群に関与し、約2-3 c/秒の頻度であって、且つ長く続くミオクローヌスである。
7) 強直間代性:強直性からなるシーケンスに続く間代性の段階。間代性-強直性-間代性のような異型が、見られることもある。
8) 全般強直間代性発作 (両側性強直間代性発作とも呼ばれ、以前は「大発作」とも呼ばれた):体性筋の両側対称的な強直性収縮の後に続く両側性間代性収縮であって、通常、自律神経の現象と関連する。
9) 無緊張性:1〜2秒以上続く、明らかに進行しているミオクローヌス性又は強直性のイベントを除いた、筋緊張の突然の消失又は減少。
根本原因に基づくと、てんかんは、特発性タイプ (即ち、根本原因が明らかでないもの) 、症候性タイプ及び原因不明タイプに分けることができる。原因不明てんかんは、特定の根本原因が疑われるてんかんであり、その原因まだ確認されていないてんかんである。症候性てんかんは、脳における既知の構造異常又は損傷によって、又は基礎的な疾病 (例:先天性脳奇形、損傷又は外傷 (出生時又はその後) ) 、損傷が引き起こしている脳に対する酸素の欠乏、永続的な損傷での感染、腫瘍、血管のもつれ、脳卒中及び/又は代謝異常) によって引き起こされる。
多くのてんかん性発作は、不定期で、短い期間 (例:数分未満) であるが、ある症例における個人は、てんかん重積状態 (てんかん性発作の一般的な持続よりも長く持続 (少なくとも約5、10、又は30分) する持続性の発作によって特徴づけられるもの) に苦しむ可能性がある。てんかん重積状態は、個人の意識がベースラインまで戻らない間に2以上の反復性発作の形で起きる可能性がある。上記発作は、全般及び/又はけいれん性であって、意識障害を伴う長期に渡るけいれんが、全般けいれん性SE (GCSE) を構成する。けいれん患者は、容易に認識できるが、GCSEの一部の患者は、最小運動活動がある又はあきらかな運動活動はないが、脳波計 (EEG) 上で発作を示して、進行するだろう。非けいれん性SE (NCSE) を患う個人は、多種多様な臨床症状であって、昏睡、混乱、傾眠、情動変化、遁走状態、失語症、異常な自律神経 (autonomic) /自律神経 (vegetative) の症状、妄想、幻覚及び偏執病を含むものを示す可能性がある。NCSEは、全般 (欠神) 、焦点 (複雑部分) 、又はその他のいずれかに分けることが可能である。「てんかんのもうろう状態」は、その状態の間に注意障害を有する完全な覚醒があり、この状態は、全般NCSE及び焦点NCSEとの間に臨床的共通部分を示すことができる。単純部分SEは、典型的には、完全に意識がある、長期にわたる焦点発作 (例:局限性の手のけいれん) によって示される。
一部のより一般的なてんかん疾患及びそれに関連した状態であって、本願明細書において記載されている薬剤と方法によって治療されるものは、以下の1以上を含む:良性家族性新生児発作、早期ミオクローヌス脳症、大田原症候群、幼児期の移動性部分発作、ウェスト症候群、幼児期の良性ミオクローヌスてんかん、良性家族性及び非家族性小児発作、Dravet症候群、HH症候群、非進行性脳症のミオクローヌス状態、中心側頭スパイクを伴う良性小児てんかん、早発性良性の小児後頭葉てんかん (Panayiotopoulosタイプ) 、遅発性小児後頭葉てんかん (Gastautタイプ) 、ミオクローヌス欠神てんかん、ミオクローヌス失立発作を伴うてんかん、レノックス・ガストー症候群、ランドー・クレフナー症候群、徐波睡眠 (LKS以外の) 中の連続スパイク徐波を伴うてんかん、小児期欠神てんかん、進行性のミオクローヌスてんかん、変り易い表現型を伴う特発性全般てんかん (例:若年性欠神てんかん又は若年性ミオクローヌスてんかん又は全般性強直間代性発作だけを伴うてんかん) 、反射てんかん、特発性光過敏性後頭葉てんかん、他の視覚感受性てんかん、原発性読書てんかん、驚愕てんかん、常染色体優性夜間前頭葉てんかん、家族性側頭葉てんかん、熱性発作プラスを伴う全般てんかん、病巣が変り易い家族性焦点てんかん、症候性 (又はおそらく症候性) 焦点てんかん、辺縁系てんかん、海馬硬化症を伴う近心側頭葉てんかん、特定の病因により定義される近心側頭葉てんかん、位置及び病因により定義される他のタイプ、新皮質てんかん、及び/又はラスムッセン症候群。
観察可能症状の徴候の他に、てんかんは、様々な手順を用いることで検出及び/又は診断できる。これらは、脳波のような (EEG) 、ビデオEEG、コンピュータ断層撮影 (CT) スキャン、磁気共鳴映像法 (MRI) 、ポジトロン放出断層撮影 (PET) 及び/又は単光子放出コンピュータ断層撮影法 (SPECT) を含むことができる。
治療を受ける患者は、上述したものを含むてんかんの内、1以上の症状又は疾患を患っているヒトを含む。
本発明の薬剤は、てんかん性疾患 (上述したものを含む) に苦しむ患者、又はその症状が進行するリスクがある患者を治療する目的で使用される。
本発明のペプチド及びペプチドミミックは、医薬組成物の形で投与できる。医薬組成物は、GMP条件で製造される。医薬組成物は、後述する任意の投与量を含んでいる単位用量の形態 (即ち、1回分の投与量) で提供することができる。医薬組成物は、従来の混合、溶解、造粒、糖衣化、すりつぶし、乳化、カプセル化、封入又は凍結乾燥工程の方法により製造することができる。特に、本発明の凍結乾燥したペプチド又はペプチドミミックは、後述する製剤及び組成物で用いることができる。
本発明は、てんかんを治療することに役立つ活性を有するペプチド、ペプチドミミック及び他の化合物をスクリーニングする方法を更に提供する。化合物は、てんかんの動物モデルに投与される。様々な動物モデルは、後述する。
多数の種々のてんかん状態の動物モデルは、よく特徴付けられている。例えば、 Models of Seizures and Epilepsy : Asla Pitkanen, Philip A. Schwartzkroin and Solomon L. Mosheにより編集, ISBN: 978-0-12-088554-1; Elsevier Inc., Copyright (C) 2006を参照し、この全体を参照することで組み込まれる。動物は、ショウジョウバエから霊長類まで変更することが可能であり、これらの動物において、てんかんは、化学物質を投与すること、又は発作及び/又はてんかんが特発的に進行する検体を対象とした遺伝的スクリーニングすることを含む様々な方法で引き起こされる。動物モデルの例は、熱性けいれんに似た症状を呈する、異常高熱により誘導される発作を起こすラット、マウスの変異体 (例:トッテラー (totterer) 、スターゲイザー (stargazer) 、レサージック (lethargic)) 及びのようなヒト欠神てんかん (例:短期間の行動停止 (即ち、ジロジロ見ること又は凝視すること) ) に類似する特徴が共通するスローウェーブてんかん (SWE) マウスを含む。
<てんかんのピロカルピンラットモデル>
A. 大腿静脈の挿管
動物を、3%のイソフルランの連続供給下でおよそ40分間麻酔し、手術の間、加温パッドの上に横臥位で置いた。手術部位は、ベタジン (Betadine) 石鹸で清潔にし、剃毛した。3 cmの腹部皮膚の切開を、腹部の右下部位から、右大腿部に沿い、大腿静脈、大腿動脈及び座骨神経の位置を示す識別可能なしわの隣に作成した。内転筋の最小解離を、血管の束を視覚化するために実行し、大腿静脈、大腿動脈及び座骨神経を慎重に分離した。小さい切れ目を大腿静脈に作成し、P10ポリエチレンカニューレ (ヘパリン (1 mLのヘパリン/1 L PBS) を含んでいる生理食塩水を予め充填している) を4〜5 cm挿入した。複数の4.0絹縫合糸で、カニューレを固定するために、大腿静脈、大腿動脈、座骨神経周辺で結紮した。動物を横臥位で置き、0.5 cmの背側正中皮膚切開を肩甲骨の間で作成した。端が尖った長さ15 cmの金属管を、背側正中切開から挿入し、腹側の大腿切開まで皮下にトンネルを作成した。カニューレの自由末端が、金属管で供給され、そして背側正中切開から押し出された。金属管を取り除き、そして、腹側の皮膚切開を閉じた。カニューレを、形成外科的ボタンを介して織ることで固定し、ヘパリン含有生理食塩水で洗浄し、23-ゲージピンで封止した。背側の切開を閉じ、形成外科的ボタンは肩甲骨 (続く5日間の回復期間の間、動物が届かない重要な領域) の間に4.0絹縫合糸で植え付けた。
350〜400グラムの間の雄のウィスターラットを、化学けいれん薬ピロカルピンの全身注入の前17〜24時間に、塩化リチウムで前処理 (ip; 3 mEq/kg) した。ピロカルピン (ip; 10 mg/kg) を、てんかん重積状態 (SE) の発症までの30分ごとに投与した。これを、意識消失及び連続する明白な発作活動として定義した。低用量ピロカルピン (LDP) 法において、LEH又はウィスターラットは、ピロカルピン (30 mg/kg, i.p.) の最初の注入を施した。SEが60分以内に発達しない場合、2回目のピロカルピン注入 (15 mg/kg) を施した。第2の手順である、繰り返し低用量ピロカルピン (RLDP) 法において、ピロカルピン (10 mg/kg, i.p.) を、30分ごとにLEH又はウィスターラットに投与 (Glien et al, Epilepsy Res. 2001 Aug ;46 (2):111-9に記述) し、ラットが、全般、クラス4/5発作を経験するまで投与した。ラットは、大体、その後まもなくSEに進行した。最初のクラス4/5発作の30分以内でSEに進行しなかった動物は、最高6回の注入を30分間隔で追加のピロカルピン注射を受けた。SEは、ジアゼパム (ip; 4 mg/kg) によるSEの発症後、1、3及び5時間で終了した。SE中に発生した明白な発作活動は、以下の通り、修正ラシーンスケール (Racine, 1972) を用いたステージに記録した。1) 口の動き、2) 口の動き及び点頭、3)前肢クローヌス、4) 前肢クローヌス及び立ち上がり、5) 前肢クローヌス、立ち上がり及び一度の転倒、6) 前肢クローヌス、立ち上がり及び複数回の転倒、7) 走ること及び跳ぶこと。我々の修正ラシーンスケールは、オリジナルのクラス5から3つのステージに分割し、複数回の転倒に関する発作活動 (6) と走ること及び跳ぶこと (7) を更に加えた。
動物をケタミン及びロンプタム (romptum) により麻酔し、SE誘導後2週目に、パラホルムアルデヒド (4% PFA;0.1Mリン酸緩衝液、pH 7.4) で経心的にかん流した。脳を取り出し、PFAで終夜固定した後、30%スクロース含有PBSで平衡化した。脳を-35℃のメチルブタンで凍結し、凍結乾燥を防ぐ目的で凍結した30%スクロース含有PBSを含むシンチレーションバイアル中にて-70℃で、更に使用するまで保存した。脳は、凍結ミクロトームを使用して40 μmの冠状に切片し、不凍液 (15%グルコース、30%エチレングリコール、50 mMolリン酸緩衝液、pH 7.4) を含む24穴プレートで-20℃にて保存した。
<ラットモデルにおける脳のてんかん性発作の効果>
てんかん重積状態を、実施例1で説明したように、雄のウィスターラットで誘導した。これらのラットの脳におけるてんかん性発作の影響を、以下で特徴付けた。
神経変性は、光学分析法と神経を定量するためのNeuN染色で立体的分析を用いて評価した。動物あたり3つの冠状切片を分析し、60-100のニューロンをナイーブ動物の脳切片あたりで計数した。細胞計数を実行した (SEの終了後、3時間、6時間、12時間、24時間、3日、7日、14日及び3ヵ月経過後) 。すべての動物は、3週から8週の間でSRSが進展した。少なくとも4匹の動物は、すべての群に含まれていた。現在まで、以下の脳領域:海馬亜領域の腹側CA1、CA2、CA3、CA4、後背側CA1及び後腹側CA1 (D&V) 、扁桃体外側基底核 (BLN) 、側部後視床核 (LPTN) 及び梨状皮質の錐体細胞層を分析した。
<TAT-NR2B9Cは、てんかん性発作に続く背側CA1領域におけるニューロン消失を救済する>
てんかん重積状態を、実施例1で説明したように、雄のウィスターラットで誘導した。Tat-NR2B9c (生理食塩水中に3 nmol/gm) は、1分あたり60 μmの定率で、SE終了後3時間経過後に大腿静脈を経て投与された。ラットは、SE後14日間回復し、そして分析された。
< TAT-NR2B9Cによる、てんかん性発作に続く神経保護作用の組織化学的可視化>
発作は、雄のウィスターラットにおいて誘導し、実施例1及び2で説明したように、Tat-NR2B9cを、発作の後3時間経過後に投与した。脳を固定し、切片とし、上述の通り、NeuNで免疫染色した。背側海馬の冠状切片は、2.5xの顕微鏡下で視覚化され、代表的な画像が下で示される。図8の左パネルは、Tat-NR2B9c投与の結果として増加したNeuN免疫染色であって、より高い量のTat-NR2B9cで得られた最善の結果 (非SEコントロールに最も近い) で示している。
< TAT-NR2B9Cは、SEに続く側脳室のサイズを著しく救済する>
ピロカルピン及びTat-NR2B9c投与、及び脳切片の固定後に、上述の通り、切片を6枚目ごとに、クレシルバイオレットによるニッスル染色のために用いた。切片をマウントし、ゼラチンを被覆スライドで空気乾燥をした。切片を、100%、95%、70%及び50%のアルコールシリーズで、それぞれ5分間再水和した。切片を、水で洗浄 (30秒×2) し、50%で5分間 (又は5分未満) 、70%で5分間 (又は5分未満) 、95%で5分間 (又は5分未満) 、100%で5分間 (又は5分未満) 及び100%で5分間 (又は5分未満) のアルコールシリーズで脱水した。差異は、50%及び70%のアルコール勾配で最大限に発生する。切片を、5分間のキシレンできれいにし、パーマウントで覆い、例えば、40X倍率で見た。
< Tat-NR2B9cが、てんかん性発作により引き起こされる認識機能障害を改善する>
我々は、RLDP手順により誘導した60分間のSEに対する有力な行動効果を調査した。視空間記憶を、SE後8週経過後にモーリス水迷路 (MWM) を用いて調査し、慢性認識機能障害を検出した。MWMは治療薬に関する研究で特に有用で、その理由は、前CA1領域の神経変性の重症度は、成績 (逃避潜時) と強く相関しているためである (Clasussen et al, 2005) 。4つのグループの動物を、本分析で比較した。:1) ピロカルピンの代わりに生理食塩水を与え、SEに入らなかったコントロール、2) 低用量のピロカルピンを最高6回与えたが、SEに入らなかった非SEグループ、3) RLDP手順による誘導でSEに入ったSEグループ、そして4) RLDP手順による誘導でSEに入り、大腿静脈カニュレーション (Tat-NR2B9cで得られた結果は、セクション4) で述べるだろう) を介してSE後3時間経過後にTat-NR2B9c薬を投与したTat-NR2B9cグループ) 。すべてのグループにおいて、少なくとも6匹の動物が含まれていた。
i) 高架式十字迷路:
ii)モーリス水迷路:
Claims (14)
- てんかんの治療においてPSD-95のPDZドメインへのPDZ結合リガンドの結合を阻害するPSD-95阻害剤の使用。
- 前記PSD-95のPDZドメインが、PSD-95 PDZドメイン2である、請求項1の使用。
- 前記てんかんのエピソードは、約20分を超えて持続している持続性てんかん性発作を含む、又は2つの発作の間で意識が戻ることがない、少なくとも2つのてんかん性発作を含む、請求項1又は2に記載の使用。
- 前記てんかんは、側頭葉てんかんを含む、請求項1から3のいずれかに記載の使用。
- てんかん活動が、脳のCA1領域において観察される、請求項1から4のいずれかに記載の使用。
- 前記てんかんのエピソードは、約10分未満の持続を有する、請求項1から5のいずれかに記載の使用。
- 前記てんかんのエピソードの持続は、脳波を用いて判定される、請求項1から6のいずれかに記載の使用。
- 前記阻害剤は、てんかんのエピソード終了後、少なくとも約1時間経過後に投与される、請求項1から7のいずれかに記載の使用。
- 前記阻害剤は、てんかんのエピソード終了後、少なくとも約3時間経過後に投与される、請求項1から8のいずれかに記載の使用。
- 前記阻害剤は、てんかんのエピソード終了後、約1週以内に投与される、請求項1から9のいずれかに記載の使用。
- 前記阻害剤は、てんかんのエピソード終了後、約1日以内に投与される、請求項1から10のいずれかに記載の使用。
- 前記阻害剤が、Tat-NR2B9cである、請求項1から11のいずれかに記載の使用。
- 前記阻害剤が、F-Tat-NR2B9cである、請求項1から12のいずれかに記載の使用。
- 前記阻害剤が、0625-0057である、請求項1から13のいずれかに記載の使用。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US5410908P | 2008-05-16 | 2008-05-16 | |
US61/054,109 | 2008-05-16 | ||
PCT/US2009/043831 WO2009140416A2 (en) | 2008-05-16 | 2009-05-13 | Treatment for epilepsy |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016109744A Division JP2016199553A (ja) | 2008-05-16 | 2016-06-01 | てんかんの治療 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2011520900A true JP2011520900A (ja) | 2011-07-21 |
JP2011520900A5 JP2011520900A5 (ja) | 2012-06-14 |
JP6005357B2 JP6005357B2 (ja) | 2016-10-12 |
Family
ID=41319319
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011509662A Active JP6005357B2 (ja) | 2008-05-16 | 2009-05-13 | てんかんの治療 |
JP2016109744A Pending JP2016199553A (ja) | 2008-05-16 | 2016-06-01 | てんかんの治療 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016109744A Pending JP2016199553A (ja) | 2008-05-16 | 2016-06-01 | てんかんの治療 |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9161965B2 (ja) |
EP (1) | EP2307035B1 (ja) |
JP (2) | JP6005357B2 (ja) |
CN (1) | CN102088990A (ja) |
AU (1) | AU2009246316B2 (ja) |
CA (1) | CA2724483C (ja) |
DK (1) | DK2307035T3 (ja) |
ES (1) | ES2446306T3 (ja) |
WO (1) | WO2009140416A2 (ja) |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016199553A (ja) * | 2008-05-16 | 2016-12-01 | ノノ インコーポレイテッド | てんかんの治療 |
JP2019521177A (ja) * | 2016-04-27 | 2019-07-25 | ▲拝▼西欧斯(北京)生物技▲術▼有限公司 | 興奮性神経毒性に関連した損傷の治療用ペプチド |
JP2019522675A (ja) * | 2016-04-27 | 2019-08-15 | ▲拝▼西欧斯(北京)生物技▲術▼有限公司 | 興奮製神経毒性に関連した損傷の治療方法 |
JP2020525552A (ja) * | 2017-07-05 | 2020-08-27 | 拜西欧斯(北京)生物技術有限公司 | ポリペプチドの薬学的に許容される塩およびその使用 |
JP2020536065A (ja) * | 2017-09-30 | 2020-12-10 | ▲拝▼西欧斯(北京)生物技▲術▼有限公司 | 興奮性神経毒性に関連した損傷の治療用ペプチド組成物 |
JP2021185148A (ja) * | 2015-02-25 | 2021-12-09 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニアThe Regents Of The University Of California | 障害を治療するための5ht作動薬 |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7595297B2 (en) * | 1999-06-02 | 2009-09-29 | Michael Tymianski | Method of reducing injury to mammalian cells |
US20080216828A1 (en) | 2007-03-09 | 2008-09-11 | Alexza Pharmaceuticals, Inc. | Heating unit for use in a drug delivery device |
WO2010028089A2 (en) | 2008-09-03 | 2010-03-11 | Arbor Vita Corporation | Agents and methods for treatment of pain |
US20140323924A1 (en) * | 2013-04-26 | 2014-10-30 | David J. Mishelevich | Targeted optogenetic neuromodulation for treatment of clinical conditions |
CA2903953C (en) * | 2013-01-31 | 2021-10-05 | The Regents Of The University Of California | System and method for modeling brain dynamics in normal and diseased states |
EP3383429B1 (en) | 2015-11-30 | 2020-10-14 | INSERM - Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale | Nmdar antagonists for the treatment of tumor angiogenesis |
CN110267662A (zh) * | 2016-12-09 | 2019-09-20 | 艾利斯达医药品公司 | 治疗癫痫的方法 |
WO2019118779A2 (en) | 2017-12-13 | 2019-06-20 | The Research Foundation For The State University Of New York | Peptides and other agents for treating pain and increasing pain sensitivity |
AU2019351017A1 (en) * | 2018-09-27 | 2021-04-29 | Finch Therapeutics Holdings Llc. | Compositions and methods for treating epilepsy and related disorders |
US20210137853A1 (en) * | 2019-09-17 | 2021-05-13 | Zogenix International Limited | Methods of treating epileptic patients with fenfluramine |
CN110627877A (zh) * | 2019-09-25 | 2019-12-31 | 成都奥达生物科技有限公司 | 一种psd-95抑制剂 |
CN111285923B (zh) * | 2020-03-05 | 2023-02-03 | 成都奥达生物科技有限公司 | 一种psd-95抑制剂 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20060148711A1 (en) * | 1999-05-14 | 2006-07-06 | Arbor Vita Corporation | Molecular interactions in neurons |
US20070020717A1 (en) * | 2005-06-23 | 2007-01-25 | Arbor Vita Corporation | Methods and compositions for modulating cox |
WO2008014917A1 (en) * | 2006-07-31 | 2008-02-07 | Xigen S.A. | Fusion peptide for inhibiting interaction of neuronal nmda receptor (nmdar) and nmdar interacting proteins |
JP2010520209A (ja) * | 2007-03-02 | 2010-06-10 | アルボー ビータ コーポレーション | N型カルシウムチャネルを阻害せずに卒中および他の疾患を治療する方法 |
JP2010532761A (ja) * | 2007-07-03 | 2010-10-14 | ノノ インコーポレイテッド | 不安に対する治療法 |
JP2011506328A (ja) * | 2007-12-05 | 2011-03-03 | ノノ インコーポレイテッド | 内在化ペプチドに連結された薬剤と抗炎症剤との共投与 |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20050019841A1 (en) * | 1999-05-14 | 2005-01-27 | Arbor Vita Corporation | Modulation of signaling pathways |
US7595297B2 (en) * | 1999-06-02 | 2009-09-29 | Michael Tymianski | Method of reducing injury to mammalian cells |
US20050282743A1 (en) * | 2001-08-03 | 2005-12-22 | Arbor Vita Corporation | Molecular interactions in cells |
US20090075377A1 (en) * | 2001-08-03 | 2009-03-19 | Arbor Vita Corporation | Molecular interactions in cells |
CA2551190A1 (en) * | 2003-12-23 | 2005-07-07 | Nono Inc. | Polypeptides for modulating binding of trp channel proteins and trp-associated proteins. |
WO2005097090A2 (en) * | 2004-04-05 | 2005-10-20 | Icos Corporation | AGENTS THAT DISRUPT PSD95 - nNOS INTERACTION, COMPOSITIONS CONTAINING THE SAME, AND THERAPEUTIC USES THEREOF |
US20070021501A1 (en) * | 2005-07-12 | 2007-01-25 | Twyman Roy E | Methods of treating epileptogenesis |
US8633160B2 (en) * | 2005-12-30 | 2014-01-21 | Nono Inc. | Small molecule inhibitors of PDZ interactions |
RU2008131330A (ru) * | 2005-12-30 | 2010-02-10 | Арбор Вита Корпорейшн (Us) | Низкомолекулярные ингибиторы взаимодействия pdz |
ES2446306T3 (es) * | 2008-05-16 | 2014-03-07 | Nono Inc. | Uso de un inhibidor de psd-95 tratamiento para la epilepsia |
WO2010028089A2 (en) * | 2008-09-03 | 2010-03-11 | Arbor Vita Corporation | Agents and methods for treatment of pain |
-
2009
- 2009-05-13 ES ES09747499.3T patent/ES2446306T3/es active Active
- 2009-05-13 JP JP2011509662A patent/JP6005357B2/ja active Active
- 2009-05-13 WO PCT/US2009/043831 patent/WO2009140416A2/en active Application Filing
- 2009-05-13 EP EP09747499.3A patent/EP2307035B1/en active Active
- 2009-05-13 DK DK09747499.3T patent/DK2307035T3/da active
- 2009-05-13 CA CA2724483A patent/CA2724483C/en active Active
- 2009-05-13 AU AU2009246316A patent/AU2009246316B2/en active Active
- 2009-05-13 CN CN2009801274025A patent/CN102088990A/zh active Pending
- 2009-05-14 US US12/466,208 patent/US9161965B2/en active Active
-
2016
- 2016-06-01 JP JP2016109744A patent/JP2016199553A/ja active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20060148711A1 (en) * | 1999-05-14 | 2006-07-06 | Arbor Vita Corporation | Molecular interactions in neurons |
US20070020717A1 (en) * | 2005-06-23 | 2007-01-25 | Arbor Vita Corporation | Methods and compositions for modulating cox |
WO2008014917A1 (en) * | 2006-07-31 | 2008-02-07 | Xigen S.A. | Fusion peptide for inhibiting interaction of neuronal nmda receptor (nmdar) and nmdar interacting proteins |
JP2010520209A (ja) * | 2007-03-02 | 2010-06-10 | アルボー ビータ コーポレーション | N型カルシウムチャネルを阻害せずに卒中および他の疾患を治療する方法 |
JP2010532761A (ja) * | 2007-07-03 | 2010-10-14 | ノノ インコーポレイテッド | 不安に対する治療法 |
JP2011506328A (ja) * | 2007-12-05 | 2011-03-03 | ノノ インコーポレイテッド | 内在化ペプチドに連結された薬剤と抗炎症剤との共投与 |
Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016199553A (ja) * | 2008-05-16 | 2016-12-01 | ノノ インコーポレイテッド | てんかんの治療 |
JP2021185148A (ja) * | 2015-02-25 | 2021-12-09 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニアThe Regents Of The University Of California | 障害を治療するための5ht作動薬 |
US11648237B2 (en) | 2015-02-25 | 2023-05-16 | The Regents Of The University Of California | 5HT agonists for treating disorders |
JP2019521177A (ja) * | 2016-04-27 | 2019-07-25 | ▲拝▼西欧斯(北京)生物技▲術▼有限公司 | 興奮性神経毒性に関連した損傷の治療用ペプチド |
JP2019522675A (ja) * | 2016-04-27 | 2019-08-15 | ▲拝▼西欧斯(北京)生物技▲術▼有限公司 | 興奮製神経毒性に関連した損傷の治療方法 |
JP2020525552A (ja) * | 2017-07-05 | 2020-08-27 | 拜西欧斯(北京)生物技術有限公司 | ポリペプチドの薬学的に許容される塩およびその使用 |
JP7002788B2 (ja) | 2017-07-05 | 2022-03-03 | 拜西欧斯(北京)生物技術有限公司 | ポリペプチドの薬学的に許容される塩およびその使用 |
US11767344B2 (en) | 2017-07-05 | 2023-09-26 | Biocells (Beijing) Biotech Co., Ltd. | Pharmaceutically acceptable salts of polypeptides and methods of inhibiting the interaction between psd-95 and n-methyl-d-aspartic acid receptor (nmdar) |
JP2020536065A (ja) * | 2017-09-30 | 2020-12-10 | ▲拝▼西欧斯(北京)生物技▲術▼有限公司 | 興奮性神経毒性に関連した損傷の治療用ペプチド組成物 |
JP7073486B2 (ja) | 2017-09-30 | 2022-05-23 | ▲拝▼西欧斯(北京)生物技▲術▼有限公司 | 興奮性神経毒性に関連した損傷の治療用ペプチド組成物 |
US11541098B2 (en) | 2017-09-30 | 2023-01-03 | Biocells (Beijing) Biotech Co., Ltd. | Peptide composition for treating excitatory neurotoxicity related injuries |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DK2307035T3 (da) | 2014-01-20 |
CA2724483A1 (en) | 2009-11-19 |
US20100160240A1 (en) | 2010-06-24 |
EP2307035B1 (en) | 2013-12-04 |
ES2446306T3 (es) | 2014-03-07 |
EP2307035A4 (en) | 2012-04-11 |
WO2009140416A3 (en) | 2010-01-14 |
WO2009140416A2 (en) | 2009-11-19 |
CA2724483C (en) | 2018-01-02 |
CN102088990A (zh) | 2011-06-08 |
AU2009246316A1 (en) | 2009-11-19 |
JP2016199553A (ja) | 2016-12-01 |
AU2009246316B2 (en) | 2014-06-19 |
US9161965B2 (en) | 2015-10-20 |
EP2307035A2 (en) | 2011-04-13 |
JP6005357B2 (ja) | 2016-10-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6005357B2 (ja) | てんかんの治療 | |
KR101604428B1 (ko) | 불안증 치료제 | |
Jacquin et al. | Reorganization of pontine rhythmogenic neuronal networks in Krox-20 knockout mice | |
Profyris et al. | Degenerative and regenerative mechanisms governing spinal cord injury | |
EP2229185A2 (en) | Co-administration of an agent linked to an internalization peptide with an anti-inflammatory | |
CN104837997A (zh) | 用于肌强直性营养不良治疗的肽连接吗啉代反义寡核苷酸 | |
JP2010536852A (ja) | シナプス形成の調節 | |
RU2607033C2 (ru) | Пептиды nd2 и способы лечения неврологического заболевания | |
US10011638B2 (en) | PTEN antagonist peptides and methods of using the same |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110201 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120424 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20120424 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20130329 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20131015 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20140114 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140115 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20140121 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20140118 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20140617 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20141015 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20141024 |
|
A912 | Re-examination (zenchi) completed and case transferred to appeal board |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A912 Effective date: 20141114 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20160226 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20160401 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20160429 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160601 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20160907 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6005357 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |