JP2011172572A - 合成ケモカイン受容体リガンドおよびその使用方法 - Google Patents

Abstract

【課題】共通ＣＸＣＲ３リガンドおよびハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドを含む合成ＣＸＣＲ３リガンド、ならびにこれらのリガンドを含んでなる組成物を提供する。
【解決手段】ＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣおよびＭｉｇから選択される種々の天然のＣＸＣＲ３リガンドのサブ配列を順に含む共通ＣＸＣＲ３リガンドおよびハイブリッド型合成ＣＸＣＲ３リガンド、ならび前記リガンドを含んでなる組成物。また、前記合成ＣＸＣＲ３リガンドをコードするポリヌクレオチド、このポリヌクレオチドを含んでなる発現ベクター、およびこのポリヌクレオチドを含んでなる宿主細胞。また、有効量の前記合成ＣＸＣＲ３リガンドを投与することを含む線維性疾患を治療する方法、血管原性疾患を治療する方法、癌を治療する方法、および細菌感染症を治療する方法。
【選択図】図３

Description

（相互参照）
本願は２００３年５月１６日に出願された米国仮出願第６０／４７１，４０４号の利益を主張し、その全体を参照により本明細書に組み込む。

本発明はケモカイン受容体のリガンドの分野に、および線維性疾患、血管原性の疾患、癌および細菌感染症の治療にある。

ケモカインは、炎症で産生され、白血球動員を調節する小さなサイトカインの一ファミリーを構成する。ケモカインは血液の有形成分（赤血球細胞以外）、例えば、好中球、単球、マクロファージ、好酸球、好塩基球、肥満細胞などの白血球、ならびにＴ細胞およびＢ細胞などのリンパ球の走化性を選択的に誘導することができる。ケモカインは、応答性細胞において、走化性を刺激するだけでなく、細胞の形の変化、細胞内遊離カルシウムイオン濃度の一過性の上昇、顆粒の開口分泌、インテグリンのアップレギュレーション、生理活性脂質(例えば、ロイコトリエン)の形成および白血球活性化に伴う呼吸性バーストをはじめ、その他の変化も選択的に誘導することができる。したがって、ケモカインは炎症応答の初期のトリガーであり、炎症メディエータの放出、感染または炎症部位への走化作用および血管外遊走を引き起こす。

４つのファミリーのケモカインが同定されており、保存されたアミノ末端システインモチーフ；Ｃ、ＣＣ、ＣＸＣおよびＣＸ₃Ｃ（式中、「Ｘ」は保存されていないアミノ酸残
基である）の数および配列にしたがって分類されている。ＣＸＣケモカインとしては、ＩＬ−８、ＩＰ−１０、Ｍｉｇ、ＰＦ４、ＥＮＡ−７８、ＧＣＰ−２、ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ、ＮＡＰ−２、ＮＡＰ−４’が挙げられる。多数のＣＸＣケモカインが好中球白血球を誘引する。例えば、ＣＸＣケモカイン、インターロイキン８（ＩＬ−８）、血小板因子４（ＰＦ４）、および好中球活性化ペプチド２（ＮＡＰ−２）は、強力な化学誘引物質であり、好中球のアクチベーターである。Ｍｉｇ（γインターフェロンによって誘導されるモノカイン）と呼ばれるＣＸＣケモカインおよびＩＰ−１０（インターフェロン−γが誘導可能な１０ｋＤａのタンパク質）は、活性化された末梢血リンパ球の走化性の誘導において活性である。

ＣＣおよびＣＸＣケモカインは、７回膜貫通型Ｇ−タンパク質共役受容体のスーパーファミリーに属する受容体を通じて作用する。Ｇタンパク質共役（セルペンチン）受容体のこのファミリーは、内在性膜タンパク質の大きなグループを含んでなり、７回膜貫通領域を含む。この受容体はＧタンパク質と共役しており、これは、ＧＴＰと結合して、例えば、細胞内メディエータの産生によって共役した受容体からのシグナル伝達を媒介することができるヘテロ三量体調節タンパク質である。

ＣＸＣケモカイン受容体１〜４（ＣＸＣＲ１〜４）は、ＣＸＣケモカインと結合する。ＣＸＣＲ３（ＣＤ１８３）は、ＩＰ１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣの受容体である。ＣＸＣＲ３によるシグナル伝達は、炎症関連エフェクターＴ細胞の走化性遊走を誘導する。

本分野には、癌、線維性疾患および細菌感染症などの疾患の治療を改善する必要がある。本発明はこの必要性に対応するものである。

米国特許第６，１８４，３５８号、同６，４９１，９０６号；同５，８７１，７２３号；Ｃｏｌｅら（２００１）ジャーナル・オブ・イミュノロジー(Journal of Immunology)１６７：６２３〜６２７頁。

本発明は共通ＣＸＣＲ３リガンドおよびハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドを含む合成ＣＸＣＲ３リガンド、ならびにこれらのリガンドを含んでなる組成物を提供する。本発明は合成ＣＸＣＲ３リガンドをコードするポリヌクレオチド、このポリヌクレオチドを含んでなる発現ベクター、およびこのポリヌクレオチドを含んでなる宿主細胞を提供する。本発明は線維性疾患を治療する方法、血管原性疾患を治療する方法、癌を治療する方法、および細菌感染症を治療する方法を提供する。本方法は、概して、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを、それを必要とする個体に投与することを含む。

例示的ＣＸＣＲ３共通リガンド「ＩＰ−１０共通配列」（配列番号：０１）、「Ｉ−ＴＡＣ共通配列」（配列番号：０２）、「Ｍｉｇ共通配列」（配列番号：０３）および「大多数」配列（配列番号：１１）のアミノ酸配列を提供する図である。 ＩＰ-１０（配列番号：１２）；ｉＴＡＣ（配列番号：１３）；およびＭＩＧ（配列番号：１４）のアミノ酸配列のアラインメントを提供する図である。 例示的ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンド（配列番号：１５）のアミノ酸配列を提供する図である。 例示的ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンド（配列番号：１６）のアミノ酸配列を提供する図である。 例示的ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンド（配列番号：１７）のアミノ酸配列を提供する図である。 例示的ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンド（配列番号：１８）のアミノ酸配列を提供する図である。 例示的ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンド（配列番号：１９）のアミノ酸配列を提供する図である。 例示的ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンド（配列番号：２０）のアミノ酸配列を提供する図である。

定義
用語「ポリペプチド」とは、アミノ酸の重合体を指すものであって、具体的な長さの産物を指すものではない。したがって、ポリペプチドの定義内にペプチド、オリゴペプチド、およびタンパク質が含まれる。この用語はまた、ポリペプチドの翻訳後修飾、例えば、グリコシル化、アセチル化、リン酸化などは指さないが、これらを除外しない。用語「ポリペプチド」内には、天然および非天然双方の、例えば、１個以上のアミノ酸の類似体（例えば、非天然アミノ酸、コードされないアミノ酸などを含む）を含むポリペプチド、結合の置換された、当技術分野で公知のその他の修飾がなされたポリペプチドが含まれる。用語「ポリペプチド」は、それだけには限らないが、Ｎ末端メチオニン残基を含むか含まない、異種アミノ酸配列との融合タンパク質、異種および相同リーダー配列との融合を含む融合タンパク質、免疫学的にタグをつけたタンパク質など含む。

用語「ポリヌクレオチド」および「核酸分子」は、本明細書では同義的に用い、あらゆる長さのヌクレオチドの重合体型を指す。ポリヌクレオチドとは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、および／またはその類似体を含み得る。ヌクレオチドはいずれの三次元構造もとることができ、既知または未知の何らかの機能を遂行できる。用語「ポリヌクレオチド」とは、一本鎖、二本鎖および三重らせん体分子を含む。「オリゴヌクレオチド」とは、一般には、約５ヌクレオチドと約１００ヌクレオチドの間の一本鎖または二本鎖ＤＮＡからなるポリヌクレオチドを指す。しかし、この開示の目的では、オリゴヌクレオチドの長さに上限はない。オリゴヌクレオチドはまた、オリゴマーまたはオリゴとしても知られており、遺伝子から単離することができ、また、当技術分野で公知の方法によって化学合成できる。用語「ポリヌクレオチド」は、特に直鎖ＤＮＡ分子（例えば、制限断片）、ウイルス、プラスミドおよび染色体中に見られる二本鎖ＤＮＡを含む。

以下はポリヌクレオチドの限定されない実施形態である：遺伝子または遺伝子断片、エキソン、イントロン、ｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｒＲＮＡ、リボザイム、ｃＤＮＡ、組換えポリヌクレオチド、分枝ポリヌクレオチド、プラスミド、ベクター、いずれかの配列の単離ＤＮＡ、いずれかの配列の単離ＲＮＡ、核酸プローブおよびプライマー。核酸分子はまた、修飾された核酸分子、例えば、メチル化された核酸分子および核酸分子類似体を含んでなる。プリンおよびピリミジンの類似体は当技術分野で公知である。核酸は天然、例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡであっても、または当技術分野で知られているような、合成類似体であってもよい。かかる類似体は、アッセイ条件下での優れた安定性のためにプローブとして使用するのに好ましい場合がある。天然構造の修飾、例えば、主鎖、糖または複素環塩基の変更により細胞内安定性および結合親和性が高まることがわかっている。主鎖化学の有用な変化の中にはホスホロチオエート、ホスホロジチオエートがあり、これでは双方
とも架橋していない酸素が硫黄、ホスホロアミダイト、アルキルホスホトリエステルおよびボラノホスフェートで置換されている。アキラルなリン酸誘導体としては、３’−Ｏ’−５’−Ｓ−ホスホロチオエート、３’−Ｓ−５’−Ｏ−ホスホロチオエート、３’−ＣＨ₂−５’−Ｏ−ホスホネートおよび３’−ＮＨ−５’−Ｏ−ホスホロアミダイトが挙げ
られる。ペプチド核酸は全リボースホスホジエステル主鎖をペプチド結合で置換したものである。

ポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、別のポリヌクレオチドまたはポリペプチドとあるパーセントの「配列同一性」を有し、これは、２種の配列を比較した場合に、アラインすると、そのパーセンテージの塩基またはアミノ酸が同一であることを意味する。配列類似性はいくつかの異なった方法で決定することができる。配列同一性を決定するには、ワールドワイドウェブｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ＢＬＡＳＴで入手可能なＢＬＡＳＴをはじめとする方法およびコンピュータプログラムを用いて配列をアラインすることができる。例えば、アルトシュル(Altschul)ら（１９９０）、ジャーナル・オブ・モレキュラー・バイオロジー(Journal of Molecular Biology)２１５：４０３〜１０頁参照。別のアラインメントアルゴリズムとしては、米国、ウィスコンシン州、マディソン、オックスフォード・モレキュラー・グループ社(Oxford Molecular Group, Inc)の完全所有子
会社製の、ジェネティクス・コンピューティング・グループ(Genetics Computing Group)（ＧＣＧ）パッケージ中で入手可能なＦＡＳＴＡがある。アラインメントのためのその他の技術は、メソッズ・イン・エンジモロジー(Methods in Enzymology)２６６巻、高分子
配列解析のためのコンピュータ法(Computer Methods for Macromolecular Sequence Analysis)（１９９６）、ドゥーリトル(Doolittle)編、アカデミックプレス社(Academic Press, Inc.)、ハーコート・ブレイス社(Harcourt Brace & Co.)の事業部、米国、カリフォルニア州、サン・ディエゴに記載されている。配列中にギャップを認めるアラインメントプログラムが特に興味深い。スミス−ウォーターマン(Smith-Waterman)が、配列アラインメント中にギャップを認めるアルゴリズムの１つのタイプである。メソッズ・イン・モレキュラー・バイオロジー(Methods in Molecular Biology)７０：１７３〜１８７頁（１９９７）参照。また、ニードルマン(Needleman)およびブンシュ(Wunsch)のアラインメント法
を用いるＧＡＰプログラムを使用して配列をアラインすることもできる。ジャーナル・オブ・モレキュラー・バイオロジー(Journal of Molecular Biology)４８：４４３〜４５３頁（１９７０）参照。

用語「宿主細胞」とは、本発明のいずれかの組換えベクターまたは単離ポリヌクレオチドのレシピエントであり得る、ないしレシピエントであった個別の細胞または細胞培養物を含む。宿主細胞は単一の宿主細胞の子孫を含むが、子孫は、自然な、偶発的な、もしくは計画的な変異および／または変更によって、最初の親細胞と必ずしも完全に同一でない場合もある（形態において、または全ＤＮＡ相補体において）。宿主細胞は、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏで本発明の組換えベクターまたはポリヌクレオチドでトランスフェクトされたまたはこれに感染した細胞を含む。本発明の組換えベクターを含んでなる宿主細胞は「組換え宿主細胞」とする。

本明細書において同義的に用いる、用語「ＤＮＡ調節配列」および「調節エレメント」とは、転写および翻訳制御配列、例えば、プロモーター、エンハンサー、ポリアデニル化シグナル、ターミネーター、タンパク質分解シグナルなどを指し、これらは宿主細胞中でのコード配列の発現および／またはコードされたポリペプチドの産生を提供および／または調節する。

用語「形質転換」は、「遺伝子修飾」と同義的に用い、新規ＤＮＡ（すなわち、細胞にとって外来のＤＮＡ）の導入に続く細胞に誘導された永久のまたは一過性の遺伝子変化を指す。遺伝子変化（「修飾」）は、宿主細胞のゲノムへの新規ＤＮＡの組み入れによって
、あるいは新規ＤＮＡをエピソームのエレメントとして一過性にまたは安定に維持することによってのいずれかで達成できる。細胞が哺乳類細胞である場合には、通常、永久遺伝子変化はＤＮＡを細胞のゲノムに導入することによって達成する。

「機能しうる形で連結された」とは、このように記載された構成成分が、その意図された方法で機能するのを可能にする関係にある近位を指す。例えば、プロモーターは、プロモーターがその転写または発現を達成する場合にコード配列と機能しうる形で連結されている。

「構築物」とは、具体的なヌクレオチド配列を発現させる目的で作製された、またはその他の組換えヌクレオチド配列の構築に用いられる、組換え核酸、通常、組換えＤＮＡを意味する。

抗体結合の関連において用語「特異的に結合する」とは、特異的ポリペプチド、すなわち、ポリペプチドのエピトープ、例えば、合成ＣＸＣＲ３リガンド（例えば、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドまたは共通ＣＸＣＲ３リガンド）との抗体の高結合力および／または高親和性結合を指す。例えば、特異的合成ＣＸＣＲ３リガンドポリペプチドまたはその断片上のエピトープとの抗体結合は、他のどのエピトープとの、特に、注目する特異的ポリペプチドと同一サンプルに関連する分子中に、または同一サンプル中の分子中に存在し得るものとの同一の抗体の結合よりも強力であり、例えば、種々の合成ＣＸＣＲ３リガンド（例えば、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドまたは共通ＣＸＣＲ３リガンド）エピトープとよりも特異的合成ＣＸＣＲ３リガンド（例えば、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドまたは共通ＣＸＣＲ３リガンド）とより強力に結合するので、結合条件を調節することによって、抗体はほぼ例外なく特異的合成ＣＸＣＲ３リガンド（例えば、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドまたは共通ＣＸＣＲ３リガンド）エピトープと結合し、他のどの合成ＣＸＣＲ３リガンド（例えば、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドまたは共通ＣＸＣＲ３リガンド）エピトープとも、他のどんな合成ＣＸＣＲ３リガンド（例えば、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドまたは共通ＣＸＣＲ３リガンド）ポリペプチド（または断片）とも、エピトープを含んでいない他のどんなポリペプチドとも結合しない。ポリペプチドと特異的に結合する抗体は、他のポリペプチドとも弱いが検出可能なレベルで結合できる場合がある（例えば、注目するポリペプチドに対して見られる結合の１０％以下）。かかる弱い結合またはバックグラウンド結合は、例えば、適当な対照を使用することによって、主題ポリペプチドとの特異的抗体結合と容易に識別できる。一般に、特異的抗体は、所与のポリペプチドと１０^-7Ｍ以上、例えば、１０^-8Ｍ以上（例えば、１０^-9Ｍ、１０^-10Ｍ
、１０^-11Ｍなど）の結合親和性で結合する。一般に、１０^-6Ｍ以下の結合親和性の抗体
は、現在用いられる従来手順を用いては抗原と検出可能なレベルで結合しないという点で有用でない。

本明細書において、用語「治療」、「治療する」などは、所望の薬理学的および／または生理学的効果を得ることを指す。効果は、疾病もしくはその症状を完全にもしくは部分的に防ぐという意味で予防的なものである場合もあるし、ならびに／または疾病および／もしくは疾病に起因し得る悪影響の部分的もしくは完全な治癒という意味で治療的なものである場合もある。本明細書において「治療」とは、哺乳類における、特に、ヒトにおける疾病のあらゆる治療に及び、（ａ）生存時間を延長すること、（ｂ）疾病による死亡リスクを低減すること、（ｃ）疾病の素因を有し得るが、まだそれを有するとは診断されていない被験体に疾病が現れるの防ぐこと、（ｄ）疾病を阻害すること、すなわち、その進行を阻むこと（例えば、疾病進行速度を低下させること）、および(ｅ)疾病を軽減すること、すなわち、疾病の退縮を引き起こすことが含まれる。

本明細書において同義的に用いる用語「個体」、「宿主」、「被験体」および「患者」
とは、哺乳類、例えば、ヒトを指す。

用語「治療上有効量」とは、所望の治療効果を促進するのに有効な、治療薬の量、または治療薬の送達速度を意味する。詳細な所望の治療効果は、治療される症状、投与される製剤、および当業者に認識される種々のその他の因子に従って変わる。

「線維性の症状」、「線維性疾病」および「線維性疾患」は、同義的に用い、抗線維性活性を有する化合物の投与による治療を受け入れられる、症状、疾病または疾患を指す。線維性疾患としては、それだけには限らないが、肺線維症、例えば、特発性肺線維症（ＩＰＦ）および既知の病因による肺線維症、肝線維症、および腎線維症が挙げられる。その他の例示的線維性症状としては、筋骨格の線維症、心臓線維症、術後癒着、強皮症、緑内障、およびケロイドなどの皮膚病変が挙げられる。

本明細書では用語「癌」、「新生物」および「腫瘍」は同義的に用い、比較的自律的な増殖を示し、その結果、細胞増殖の制御が大きく失われることを特徴とする異常な増殖表現型を示す細胞を指す。癌性細胞は良性である場合も、悪性である場合もある。

本明細書において用語「投薬事象」とは、抗ウイルス薬の、それを必要とする患者への投与を指し、この事象は薬剤分配装置からの抗ウイルス薬の１以上の放出を包含し得る。したがって、本明細書において用語「投薬事象」は、それだけには限らないが、持続的送達装置の設置（例えば、ポンプまたはその他の制御された放出性注射用システム)、およ
び単回皮下注射とそれに続く連続送達システムの設置を含む。

薬剤送達との関係で用いる「パターン化」または「時間的」とは、予め選択した期間（例えば、ボーラス注射と関連のある期間以外など）にかけてパターン、一般に、実質的に規則正しいパターンでの薬剤の送達を意味する。「パターン化」または「時間的」薬剤送達とは、漸増する、漸減する、実質的に一定な、または拍動性の、割合または割合の範囲（例えば、単位時間当たりの薬剤量、または単位時間のための製剤容量）での薬剤の送達、および連続的なまたは実質的に連続的な、または慢性的な送達をさらに包含するものとする。

用語「制御された薬剤送達装置］とは、含まれる薬剤または他の所望の物質の放出が（例えば、放出の割合、時間的調節）、装置自体によって制御されるか、決定され、かつ、実質的に使用環境に左右されない装置、または使用環境内で再現可能なある割合で放出する装置であればいずれも包含するものとする。

例えば、「実質的に持続的な注入」または「実質的に持続的な送達」という関係で用いる「実質的に持続的な」とは、予め選択した薬剤送達期間の間、実質的に途切れない方法での薬剤の送達を指すものとし、これでは、予め選択した期間中の任意の８時間間隔の間に患者に受容される薬剤の量はゼロにはならないものとする。さらに、「実質的に持続的な」薬剤送達はまた、予め選択した薬剤送達期間の間、実質的に途切れない、実質的に一定の、予め選択した割合または割合の範囲（例えば、単位時間当たりの薬剤量、または単位時間のための製剤容量）での薬剤の送達を包含し得る。

「特定のパーフェニドン類似体」およびそのすべての文法上の変形は、表１に示されるあらゆるパーフェニドン類似体を指し、それに限定される。

用語「化学療法薬(chemotherapeutic agent)」または「化学療法薬(chemotherapeutic)」（または化学療法薬での治療の場合には「化学療法」）とは、癌の治療において有用ないずれかの非タンパク質性（すなわち、非ペプチド性）の化学化合物を包含するものとす
る。化学療法薬の例としては、アルキル化剤類、例えば、チオテパおよびシクロホスファミド（シトキサン（商標））；スルホン酸アルキル類、例えば、ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファン(piposulfan)；アジリジン類、例えば、ベンゾドーパ(benzodopa)、カルボコン、メツレドーパ(meturedopa)およびウレドーパ(uredopa)；エチレニミン類およびメチラメラミン(methylamelamine)類、例えば、アルトレタミン、トリエ
チレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミドおよびトリメチロロメラミン(trimethylolomelamine)；アセトゲニン類（特に、ブラタシンおよびブラタシノン(bullatacinone));カンプトテシン(例えば、合成類似体トポテカン)；ブ
リオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（例えば、そのアドゼレシン、カルゼレシン(carzelesin)およびビゼレシン合成類似体）；クリプトフィシン(cryptophycins)類（
特に、クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン;デュオカルマイ
シン(例えば、合成類似体、ＫＷ−２１８９およびＣＢＩ−ＴＭＩ）；エレウテロビン(eleutherobin);パンクラチスタチン；サルコディクチン；スポンジスタチン;ナイトロジェ
ンマスタード類、例えば、クロラムブシル、クロルナファジン、コロホスファミド(cholophosphamide)、エストラムスチン、イホスファミド、メクロルエタミン(mechlorethamine)、メクロルエタミンオキシドヒドロクロリド(mechlorethamine oxide hydrochloride)、メルファラン、ノベムビチン(novembichin)、フェネステリン(phenesterine)、プレドニ
ムスチン(prednimustine)、トロホスファミド(trofosfamide)、ウラシルマスタード;ニトロソ尿素類、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォレムスチン(foremustine)、
ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン；抗生物質類、例えば、エネジイン抗生物質類（例えば、カリケアマイシン、特に、カリケアマイシンγ１IおよびカリケアマイシンφI１、例えば、Ａｇｎｅｗ， Ｃｈｅｍ． Ｉｎｔｌ． Ｅｄ． Ｅｎｇｌ．、３３：１８３〜１８６頁（１９９４）参照；ダインマイシン(dynemicin)、例えば、ダインマイシンＡ
；ビスホスホネート類、例えば、クロドロネート；エスペラミシン、ならびにネオカルジノスタチン・クロモフォアおよび関連色素タンパク質エネジイン抗生物質クロモモフォア(chromomophores)）、アクラシノマイシン類、アクチノマイシン、オースラマイシン(authramycin)、アザセリン、ブレオマイシン類、カクチノマイシン(cactinomycin)、カラビ
シン(carabicin)、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン類、ダクチノ
マイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン(アドラマイシン(商標))(例えば、モルホリノ−ドキソルビシン、シア
ノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ-ドキソルビシンおよびデオキシドキソル
ビシン）、エピルビシン、エソルビシン(esorubicin)、イダルビシン、マルセロマイシン(marcellomycin)、マイトマイシン類、例えば、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、
ノガラマイシン、オリボマイシン類、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン(potfiromycin)、プロマイシン、ケラマイシン(quelamycin)、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン(tubercidin)、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン(zorubicin)；代謝拮抗剤、例えば、メトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（
５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デモプテリン(demopterin)、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート;プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプ
トプリン、チアミプリン(thiamiprine)、チオグアニン;ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン;アンドロゲン類、例えば
、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎類、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン;
葉酸補充薬、例えば、フロリン酸；アセグラトン;アルドホスファミドグリコシド;アミノレブリン酸；エニルラシル(eniluracil)；アムサクリン；ベストラブシル(bestrabucil)
、ビサントレン；エダトラキサート(edatraxate)；デフォファミン(defofamine)；デメコルシン；ジアジコン；エルフォルニチン(elfornithine)；エリプチニウムアセテート(elliptinium acetate);エポチロン;エトグルシド;硝酸ガリウム;ヒドロキシウレア；レンチ
ナン;ロニダミン;マイタンシノイド(maytansinoid)類、例えば、マイタンシンおよびアン
サマイトンシン類；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモル(mopidamol);ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット(phenamet)；ピラルビシン；ロソキサントロン(losoxantrone);ポドフィリニン酸(podophyllinic acid)；２−エチルヒドラジド；プロカル
バジン;ＰＳＫ（登録商標）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニ
ウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン(triaziquone)；２，２’，２’’−トリクロロト
リエチルアミン；トリコテセン類（特に、Ｔ−２トキシン、ベラクリン(verracurin)Ａ、ロリジンＡおよびアングイジン(anguidine)）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン;マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール;ピポブロマン；ガシトシン(gacytosine)；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオペタ(thiopeta);タキソイド類；例えば、パクリタキセル（タキソール（登録商標）、ブリストル・マイヤーズ・スクイブ・オンコロジー(Bristol Meyers Squibb Oncology)、ニュージャージー州、プリンストン）およびドセタキセル（タキソテール（登録商標）、ローヌプーラン・ロア(Rhone-poulenc Rorer、フランス、アントニー)；クロラムブシル；ゲムシタビン（ジェム
ザール(商標)）；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；プラチナム類似体、例えば、シスプラチンおよびカルボプラチン；ビンブラスチン；プラチナム；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトロキサントロン；バンクリスチン(vancristine);ビノレルビン（ナベルビン（商標））；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン;アミノプテリン;キセオロダ(xeoloda)；イバンドロネート；Ｃ
ＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイド類、例えば、レチノイン酸；カペシタビン；ならびに前記のいずれかの製薬上許容される塩、酸、または誘導体が挙げられる。「化学療法薬」の定義には、腫瘍に対するホルモン作用を調節または阻害するよう作用する抗ホルモン剤、例えば、抗エストロゲンおよび選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）も含まれ、これには、例えば、タモキシフェン（例えば、ノルバデックス（商標））、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン(trioxifene)、ケオキシフェン(keoxifene)、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、トレミフェン(ファレストン(商標)）；副腎におけるエストロゲン産生を調節する、酵素アロマターゼの阻害剤、例えば、４（５）−イミダゾール類、アミノグルテチミド、酢酸メゲストロール（メガス(Megace)（商標））、エキセメスタン、ホルメスタン、ファドロゾール、ボロゾール（リビソル(商標)）、レトロゾール（フェマラ(商標)）、およびアナストロゾール（アリミデックス（商標））など；および抗アンドロゲン類、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、およびゴセレリン；ならびに前記のいずれかの製薬上許容される塩、酸または誘導体がある。

用語「抗悪性腫瘍」薬、薬剤または化合物とは、いずれかの化学療法薬、生物学的応答調節物質（それだけには限らないが、（ｉ）生物学的応答を産生または変更できる、タンパク質性、すなわち、ペプチド性分子および（ｉｉ）生物学的応答を産生または変更できる、非タンパク質性、すなわち、非ペプチド性分子を含む）、悪性腫瘍細胞の増殖を低下させる、細胞傷害性薬または細胞分裂停止薬をはじめとするいずれかの薬剤を指すものとする。

用語「生物学的応答調節物質」とは、癌の治療に関連する生物学的応答を産生または変更できる、いずれかのタンパク質性（すなわち、ペプチド性）分子またはいずれかの非タンパク質性（すなわち、非ペプチド性）分子を指す。生物学的応答調節物質の例としては、腫瘍関連抗原のアンタゴニスト、例えば、抗腫瘍抗原抗体、細胞増殖を誘導できる細胞受容体のアンタゴニスト、アポトーシスを誘導できる細胞受容体のアゴニスト、例えば、Ａｐｏ−２リガンド、インターフェロン−α分子およびインターフェロン−β分子などのＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、インターフェロン−γ分子などのＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＬ−２８Ａ、ＩＬ−２８ＢおよびＩＬ−２９などのＩＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、炎症性サイトカインのアンタゴニスト、例えば
、抗ＴＮＦ抗体（例えば、レミケード（商標）抗ＴＮＦモノクローナル抗体）および可溶性ＴＮＦ受容体（例えば、エンブレル（商標）ＴＮＦ受容体−Ｉｇイムノアドヘシン）などの腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アンタゴニスト、エリスロポエチン、例えば、エポゲン（商標）エポエチン−αをはじめとする造血性サイトカインなどの増殖因子サイトカイン、顆粒コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、例えば、ニューポゲン（商標）フィルグラスチム、顆粒−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、およびトロンボポエチン、リンパ球増殖因子サイトカイン、例えば、インターロイキン−２、ならびに血管新生因子のアンタゴニスト、例えば、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）アンタゴニスト、アバスチン（商標）ベバシズマブ（抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体）などをはじめとする増殖因子サイトカインのアンタゴニストが挙げられる。

本明細書において、用語「Ｉ型インターフェロン受容体アゴニスト」とは、ヒトＩ型インターフェロン受容体の天然または非天然のリガンドのいずれかを指し、これは受容体と結合し、これを介したシグナル伝達を引き起こす。Ｉ型インターフェロン受容体アゴニストとしては、インターフェロン、例えば、天然インターフェロン、改変されたインターフェロン、合成インターフェロン、ポリエチレングリコール修飾されたインターフェロン、インターフェロンと異種タンパク質とを含んでなる融合タンパク質、組み替えられたインターフェロン、インターフェロン受容体に特異的な抗体、非ペプチド化学アゴニストなどが挙げられる。

本明細書において、用語「ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト」とは、ヒトＩＩ型インターフェロン受容体の天然または非天然のリガンドのいずれかを指し、これは受容体と結合し、これを介したシグナル伝達を引き起こす。ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストとしては、インターフェロン、例えば、天然インターフェロン、改変されたインターフェロン、合成インターフェロン、ポリエチレングリコール修飾されたインターフェロン、インターフェロンと異種タンパク質とを含んでなる融合タンパク質、組み替えられたインターフェロン、インターフェロン受容体に特異的な抗体、非ペプチド化学アゴニストなどが挙げられる。

本明細書において、用語「ＩＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト」とは、ヒトＩＬ−２８受容体αの天然または非天然リガンド（「ＩＬ２８Ｒ」）のいずれかを指し、このアミノ酸配列はシェパードら、下記によって記載されており、これは受容体と結合し、これを介したシグナル伝達を引き起こす。

本発明をさらに記載するに先立って、当然のことながら、本発明は記載した個々の実施形態に限定されるものではなく、そのようなものとしてもちろん変わり得る。また、当然のことながら、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるため、本明細書に用いた専門用語は、単に個々の実施形態を記載するためのものであって限定しようとするものではない。

値の範囲が提供される場合には、当然のことながら、その範囲の上限と下限の間の、文脈上明確に特に別に指定されない限りは下限の構成単位の十分の一までの各中間の値、およびその記載した範囲内の他の記載した値または中間の値はいずれも本発明に包含される。こういったより小さな範囲の上限および下限は、独立に、より小さな範囲内に含まれ、これも本発明に包含され、記載した範囲内の何らかの具体的に排除される限界の対象となる。記載した範囲が限界の一方または双方を含む場合には、そのような含まれる限界のいずれかまたは双方を排除する範囲も本発明に含まれる。

特に断りのない限り、本明細書に用いたすべての技術および科学用語は、本発明の属する技術分野の当業者に一般に理解されるものと同一の意味を有する。本明細書に記載され
たものと類似または同等の方法および材料はいずれも、本発明の実施または試験に使用できるが、好ましい方法および材料は以下に記載する。本明細書に記載されたすべての出版物は、その出版物が引用されたものに関連して方法および／または材料を開示および説明するために、参照により本明細書に組み込まれる。

注目すべきは、本明細書においておよび添付の特許請求の範囲において、単数形の「一」、「および」および「その」は、文脈上明確に特に別に指定されない限り複数形の指示対象を含むということである。したがって、例えば、「一合成ＣＸＣＲ３リガンド」でかかるリガンドの複数形を含み、また、「その製剤」で１種以上の製剤および当業者に公知のその同等物その他を含む。

本明細書で議論した出版物は、単にそれが本願の出願日以前に開示されたために提供されるものである。本明細書において、先行発明という理由で本発明がかかる出版物に先行する資格がないという承認として解釈されるべきものは全くない。さらに、提供した出版物の日付は実際の刊行日とは異なる場合もあり、これは独立に確認する必要があり得る。

本発明は合成ＣＸＣＲ３ポリペプチドリガンド、例えば、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３ポリペプチドリガンドおよび共通ＣＸＣＲ３ポリペプチドリガンド、ならびに合成ＣＸＣＲ３ポリペプチドリガンドを含んでなる組成物および製剤を提供する。主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、以下に議論するように種々の疾患の治療にとって有用である。

合成ＣＸＣＲ３リガンド
本発明は合成ＣＸＣＲ３ポリペプチドリガンドを提供する。いくつかの実施形態では、合成ＣＸＣＲ３リガンドは共通ＣＸＣＲ３リガンドである。その他の実施形態では、合成ＣＸＣＲ３リガンドはハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドである。したがって、本明細書において、用語「合成ＣＸＣＲ３リガンド」とは、「共通ＣＸＣＲ３リガンド」および「ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンド」を含む。本発明はさらに、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを含んでなる組成物、例えば、薬剤組成物を提供する。主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、本明細書に記載したように種々の疾患の治療において、および以下にさらに十分に記載するように実験的適用において有用である。

共通ＣＸＣＲ３リガンドおよびハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの長さは、約７０アミノ酸〜約１２５アミノ酸、例えば、約７０アミノ酸〜約７３アミノ酸、約７３アミノ酸〜約７５アミノ酸、約７５アミノ酸〜約７７アミノ酸、約７７アミノ酸〜約８０アミノ酸、約８０アミノ酸〜約９０アミノ酸、約９０アミノ酸〜約１００アミノ酸、約１００アミノ酸〜約１０２アミノ酸、約１０２アミノ酸〜約１０５アミノ酸、約１０５アミノ酸〜約１１０アミノ酸、約１１０アミノ酸〜約１１５アミノ酸、約１１５アミノ酸〜約１２０アミノ酸、または約１２０アミノ酸〜約１２５アミノ酸である。いくつかの実施形態では、例えば、主題ＣＸＣＲ３リガンドが融合タンパク質である場合には、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは１２５個より多くのアミノ酸を含んでなる。

いくつかの実施形態では、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドはシグナル配列を含む。その他の実施形態では、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドはシグナル配列を欠いている。

共通ＣＸＣＲ３リガンドおよびハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、細胞表面でＣＸＣＲ３受容体と結合する。通常、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドはＣＸＣＲ３アゴニストである。いくつかの実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは以下の活性のうち１種以上を有する：抗増殖活性、抗菌活性、抗血管新生活性、および抗線維化活性。主題合成ＣＸＣＲ３リガンドがＣＸＣＲ３アゴニスト
として機能するかどうかは、既知のアッセイを用いて容易に決定される。例えば、ＣＸＣＲ３アゴニスト活性のアッセイは、米国特許第６，１８４，３５８号、および同６，４９１，９０６号に議論されている。

ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンド
本発明は、約７０〜約１２５アミノ酸のポリペプチドを含んでなり、通常Ｎ末端の第１のアミノ酸と結合しているさらなるメチオニンを場合によって含み、ポリペプチドのアミノ酸配列が、アミノ酸同一性および数において、種々の天然のＣＸＣＲ３リガンド（例えば、ＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣおよびＭｉｇ）のサブ配列に対応する別個のサブ配列を順に含んでなり、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３ポリペプチドのアミノ酸配列が天然のＣＸＣＲ３リガンド（例えば、ＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣおよびＭｉｇ）のアミノ酸配列と異なる、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドを提供する。

主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、アミノ酸同一性および数において、種々の天然のＣＸＣＲ３リガンド（例えば、ＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣおよびＭｉｇ）のサブ配列に対応する２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個またはそれより多くの別個のサブ配列を含んでなる。いくつかの実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、アミノ酸同一性および数において、天然のＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣおよびＭｉｇのサブ配列に対応する２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個またはそれより多くの別個のサブ配列を含んでなる。別個のサブ配列とは、天然のＣＸＣＲ３リガンドの約２〜約９０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、約６５〜約７０個、約７５〜約８０個、約８０〜約８５個、または約８５〜約９０個の連続するアミノ酸である。いくつかの実施形態では、別個のサブ配列は図２に表されるアミノ酸配列から選択される。

いくつかの実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむけて順に、天然のＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣ、およびＭｉｇから選択される第１のＣＸＣＲ３結合ケモカインの約２〜約９０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、約６５〜約７０個、約７５〜約８０個、約８０〜約８５個、または約８５〜約９０個の連続するアミノ酸と、天然のＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣ、およびＭｉｇから選択される第２のＣＸＣＲ３結合ケモカインの（ここで、第１と第２のケモカインは異なる）約２〜約９０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、約６５〜約７０個、約７５〜約８０個、約８０〜約８５個、または約８５〜約９０個の連続するアミノ酸とを含んでなる。

いくつかの実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、天然のＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣ、およびＭｉｇから選択される第３のＣＸＣＲ３結合ケモカインの（ここで、第３のケモカインは第２のケモカインとは異なり、また、いくつかの実施形態では、第１および第２のケモカインと異なる）約２〜約９０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、約６５〜約７０個、約７５〜約８０個、約８０〜約８５個、または約８５〜約９０個の連続するアミノ酸をさ
らに含んでなる。

いくつかの実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、天然のＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣ、およびＭｉｇから選択される第４のＣＸＣＲ３結合ケモカインの（ここで、第４のケモカインは第３のケモカインとは異なる）約２〜約９０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、約６５〜約７０個、約７５〜約８０個、約８０〜約８５個、または約８５〜約９０個の連続するアミノ酸をさらに含んでなる。

いくつかの実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、天然のＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣ、およびＭｉｇから選択される第５のＣＸＣＲ３結合ケモカインの（ここで、第５のケモカインは第４のケモカインとは異なる）約２〜約９０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、約６５〜約７０個、約７５〜約８０個、約８０〜約８５個、または約８５〜約９０個の連続するアミノ酸をさらに含んでなる。

以下は限定するものではない実施例である。

いくつかの実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、ＩＰ−１０の約２〜約７０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、または約６５〜約７０個の連続するアミノ酸と、Ｉ−ＴＡＣの約２〜約７０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、または約６５〜約７０個の連続するアミノ酸とを含んでなる。

いくつかの実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、Ｉ−ＴＡＣの約２〜約７０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、または約６５〜約７０個の連続するアミノ酸と、ＩＰ−１０の約２〜約７０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、または約６５〜約７０個の連続するアミノ酸とを含んでなる。

いくつかの実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、ＩＰ−１０の約２〜約７０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜
約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、または約６５〜約７０個の連続するアミノ酸と、Ｍｉｇの約２〜約９０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、約６５〜約７０個、約７０〜約７５個、約７５〜約８０個、または約８０〜約９０個の連続するアミノ酸とを含んでなる。

いくつかの実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、Ｍｉｇの約２〜約９０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、約６５〜約７０個、約７０〜約７５個、約７５〜約８０個、または約８０〜約９０個の連続するアミノ酸と、ＩＰ−１０の約２〜約７０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、または約６５〜約７０個の連続するアミノ酸とを含んでなる。

いくつかの実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、Ｍｉｇの約２〜約９０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、約６５〜約７０個、約７０〜約７５個、約７５〜約８０個、または約８０〜約９０個の連続するアミノ酸と、Ｉ−ＴＡＣの約２〜約７０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、または約６５〜約７０個の連続するアミノ酸とを含んでなる。

いくつかの実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、Ｉ−ＴＡＣの約２〜約７０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、または約６５〜約７０個の連続するアミノ酸と、Ｍｉｇの約２〜約９０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、約６５〜約７０個、約７０〜約７５個、約７５〜約８０個、または約８０〜約９０個の連続するアミノ酸とを含んでなる。

いくつかの実施形態では、実施例１〜６のうちの１つのポリペプチドは、さらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

いくつかの実施形態では、実施例１〜６のうちの１つのポリペプチドは、Ｎ末端に、またはＣ末端に、Ｉ−ＴＡＣまたはＩＰ−１０の約２〜約７０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、または約６５〜約７０個の連続するアミノ酸、あるいはＭｉｇの約２〜約９０個、例えば、約２〜約５個、約５〜約７個、約７〜約１０個、約１０〜約１５個、約１５〜約２０個、約２０〜約２５個、約２５〜約３０個、約３０〜約３５個、約３５〜約４０個、約４０〜約４５個、約４５〜約５０個、約５０〜約５５個、約５５〜約６０個、約６０〜約６５個、約６５〜約７０個、約７０〜約７５個、約７５〜約８０個、または約８０〜約９０個の連続するアミノ酸をさらに含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニンをさらに含んでなる。

ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドの以下の実施例は、単に例示のために提供するものであって、限定的なものを意味するものではない。

一例示的実施形態では、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、ＩＰ−１０のアミノ酸１〜２５と、Ｉ−ＴＡＣのアミノ酸３６〜７３とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの例示的実施形態では、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、Ｉ−ＴＡＣのアミノ酸１〜３５とＩＰ−１０のアミノ酸３６〜７７とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの例示的実施形態では、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、ＩＰ−１０のアミノ酸１〜３５と、Ｍｉｇのアミノ酸３６〜１０２とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの例示的実施形態では、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、Ｍｉｇのアミノ酸１〜３５と、ＩＰ−１０のアミノ酸３６〜７７とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの例示的実施形態では、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、Ｉ−ＴＡＣのアミノ酸１〜３５と、Ｍｉｇのアミノ酸３６〜１０２とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの例示的実施形態では、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、Ｍｉｇのアミノ酸１〜３５と、Ｉ−ＴＡＣのアミノ酸３６〜７３とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの例示的実施形態では、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、ＩＰ−１０のアミノ酸１〜２０と、Ｉ−ＴＡＣのアミノ酸２１〜６０と、Ｍｉｇのアミノ酸６１〜１０２とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポ
リペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの例示的実施形態では、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、Ｉ−ＴＡＣのアミノ酸１〜２０と、ＩＰ−１０のアミノ酸２１〜６０と、Ｍｉｇのアミノ酸６１〜１０２とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの例示的実施形態では、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、ＩＰ−１０のアミノ酸１〜２０と、Ｍｉｇのアミノ酸２１〜６０と、Ｉ−ＴＡＣのアミノ酸６１〜７３とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの例示的実施形態では、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、Ｍｉｇのアミノ酸１〜２０と、ＩＰ−１０のアミノ酸２１〜６０と、Ｉ−ＴＡＣのアミノ酸６１〜７３とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの例示的実施形態では、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、Ｍｉｇのアミノ酸１〜２０と、Ｉ-ＴＡＣのアミノ酸２１〜６０と
、ＩＰ−１０のアミノ酸６１〜７７とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの例示的実施形態では、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、Ｉ−ＴＡＣのアミノ酸１〜２０と、Ｍｉｇのアミノ酸２１〜６０と、ＩＰ−１０のアミノ酸６１〜７７とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

特定の実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、図３に表され、配列番号１５に記載されるアミノ酸配列を含んでなる。この実施形態では、主題ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、ＭＩＧのアミノ酸１〜２０と、ｉＴＡＣのアミノ酸２１〜３８と、ＩＰ１０のアミノ酸３９〜５９と、ＭＩＧのアミノ酸６１〜７９と、ｉＴＡＣのアミノ酸８０〜８８と、ＩＰ１０のアミノ酸８９〜９８とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの特定の実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、図４に表され、配列番号１６に記載されるアミノ酸配列を含んでなる。この実施形態では、主題ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、ＩＰ１０のアミノ酸１〜３０と、ｉＴＡＣのアミノ酸３２〜６１と、ＭＩＧのアミノ酸６３〜１２５とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの特定の実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、図５に表され、配列番号１７に記載されるアミノ酸配列を含んでなる。この実施形態では、主題ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、ＩＰ１０のアミノ酸１〜１４と、ｉＴＡＣのアミノ酸１５〜７９と、ＭＩＧのアミノ酸８０〜１２５とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの特定の実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、図６に表
され、配列番号１８に記載されるアミノ酸配列を含んでなる。この実施形態では、主題ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、ＩＰ１０のアミノ酸１〜３８と、ｉＴＡＣのアミノ酸３９〜８８と、ＭＩＧのアミノ酸９０〜１２５とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの特定の実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、図７に表され、配列番号１９に記載されるアミノ酸配列を含んでなる。この実施形態では、主題ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、ＩＰ１０のアミノ酸１〜２１と、ｉＴＡＣのアミノ酸２２〜３０と、ＭＩＧのアミノ酸３２〜４９と、ＩＰ１０のアミノ酸４９〜５９と、ｉＴＡＣのアミノ酸６０〜８８と、ＭＩＧのアミノ酸９０〜１２５とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

もう一つの特定の実施形態では、主題ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンドは、図８に表され、配列番号２０に記載されるアミノ酸配列を含んでなる。この実施形態では、主題ＣＸＣＲ３リガンドは、Ｎ末端からＣ末端にむかって順に、ｉＴＡＣのアミノ酸１〜１８と、ＩＰ１０のアミノ酸１９〜３８と、ＭＩＧのアミノ酸４０〜６０と、ＩＰ１０のアミノ酸６０〜８０と、ｉＴＡＣのアミノ酸８１〜８８と、ＩＰ１０のアミノ酸８９〜９８とを含んでなる。いくつかの実施形態では、このポリペプチドはさらなるＮ末端メチオニン残基をさらに含んでなる。

共通ＣＸＣＲ３リガンド
本発明は、共通ＣＸＣＲ３リガンドポリペプチド、およびこのポリペプチドを含んでなる組成物を提供する。本明細書において、用語「共通ＣＸＣＲ３リガンド」とは、通常、長さがアミノ酸約７０個〜アミノ酸約１２５個であり、通常Ｎ末端の第１のアミノ酸と結合しているさらなるメチオニンを場合によって含む、非天然ポリペプチドを指し、これはＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸残基を主に含み、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がない位置の１以上に、その位置に主に現れるアミノ酸を含み、天然ＩＰ−１０、ＭｉｇまたはＩ−ＴＡＣアミノ酸配列のうちの少なくとも１種のその位置に存在しないアミノ酸残基はいかなる場合も含まない。

いくつかの実施形態では、共通ＣＸＣＲ３リガンドはＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸残基を主に含み、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がないが、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣのうちの２種に共通するアミノ酸がある位置の１以上に、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣのうちの２種に共通する残基を含む。

いくつかの実施形態では、主題共通ＣＸＣＲ３リガンドはＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸残基を主に含み、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がない位置の１以上に、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がない２〜３０、例えば、約２〜約５、約５〜約７、約７〜約１０、約１０〜約１５、約１５〜約１８、約１８〜約２０、約２０〜約２２、約２２〜約２５、約２５〜約２７、または約２７〜約３０の連続する位置中のその位置でＩＰ−１０において見られる残基を含む。

いくつかの実施形態では、主題共通ＣＸＣＲ３リガンドはＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸残基を主に含み、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がない位置の１以上に、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がない２〜３０、例えば、約２〜約５、約５〜約７、約７〜約１０、約１０〜約
１５、約１５〜約１８、約１８〜約２０、約２０〜約２２、約２２〜約２５、約２５〜約２７、または約２７〜約３０の連続する位置中のその位置でＩ−ＴＡＣにおいて見られる残基を含む。

いくつかの実施形態では、主題共通ＣＸＣＲ３リガンドはＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸残基を主に含み、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がない位置の１以上に、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がない２〜３０、例えば、約２〜約５、約５〜約７、約７〜約１０、約１０〜約１５、約１５〜約１８、約１８〜約２０、約２０〜約２２、約２２〜約２５、約２５〜約２７、または約２７〜約３０の連続する位置中のその位置でＭｉｇにおいて見られる残基を含む。

いくつかの実施形態では、共通ＣＸＣＲ３リガンドはＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸残基を主に含み、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がない位置の１以上に、ＩＰ−１０に現れるアミノ酸を含む。これらの実施形態の中には、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がないすべての残基について、ＩＰ−１０に見られる残基を共通配列中に用いるものもある。ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がないすべての残基について、ＩＰ−１０に見られる残基を共通配列中に用いる場合には、このタンパク質を「共通１」と呼ぶ。いくつかの実施形態では、共通１ポリペプチドは、図１に示され、「ＩＰ−１０共通配列」（配列番号１）と名づけられたアミノ酸配列を含んでなる。

いくつかの実施形態では、共通ＣＸＣＲ３リガンドはＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸残基を主に含み、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がない位置の１以上に、Ｉ−ＴＡＣに現れるアミノ酸を含む。これらの実施形態の中には、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がないすべての残基について、Ｉ−ＴＡＣに見られる残基を共通配列中に用いるものもある。ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がないすべての残基について、Ｉ−ＴＡＣに見られる残基を共通配列中に用いる場合には、このタンパク質を「共通２」と呼ぶ。いくつかの実施形態では、共通２ポリペプチドは、図１に示され、「Ｉ−ＴＡＣ共通配列」（配列番号２）と名づけられたアミノ酸配列を含んでなる。

いくつかの実施形態では、共通ＣＸＣＲ３リガンドはＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸残基を主に含み、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がない位置の１以上に、Ｍｉｇに現れるアミノ酸を含む。これらの実施形態の中には、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がないすべての残基について、Ｍｉｇに見られる残基を共通配列中に用いるものもある。これらの実施形態では、ギャップが「大多数」配列に存在する場合には、Ｍｉｇに見られるアミノ酸を用いる。ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がないすべての残基について、Ｍｉｇに見られる残基を共通配列中に用いる場合には、このタンパク質を「共通３」と呼ぶ。いくつかの実施形態では、共通３ポリペプチドは、図１に示され、「Ｍｉｇ共通配列」（配列番号３）と名づけられたアミノ酸配列を含んでなる。

ヒトＩＰ−１０のアミノ酸配列はジェンバンク受託番号Ｐ０２７７８、ＮＰ＿００１５５６、および１３１２３５６Ａに見出せる。アミノ酸１〜２１はシグナル配列であり、成熟ＩＰ−１０はジェンバンク受託番号Ｐ０２７７８、ＮＰ＿００１５５６、および１３１２３５６Ａで見出せる配列のアミノ酸２２〜９８である。

ヒトＭｉｇのアミノ酸配列はジェンバンク受託番号ＮＰ＿００２４０７およびＱ０７３２５に見出せる。アミノ酸１〜２２はシグナル配列であり、成熟Ｍｉｇはジェンバンク受
託番号ＮＰ＿００２４０７およびＱ０７３２５で見出せる配列のアミノ酸２３〜１２５である。

ヒトＩ−ＴＡＣのアミノ酸配列はジェンバンク受託番号Ｑ１４６２５およびＡＡＤ３８８６７に見出せる。アミノ酸１〜２１はシグナル配列であり、成熟Ｉ−ＴＡＣはアミノ酸２２〜９４である。

特定の実施形態では、主題共通ＣＸＣＲ３リガンドは図１に記載されたアミノ酸配列のうちの１つを有する。

修飾
いくつかの実施形態では、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド（例えば、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンド、共通ＣＸＣＲ３リガンド）は、１以上の修飾を含む。注目する修飾としては、一次アミノ酸配列を変更する場合も変更しない場合もあるが、ポリペプチドの化学的誘導体化、例えば、アセチル化、またはカルボキシル化、グリコシル化部位を導入するか除去するアミノ酸配列の変更、タンパク質をＰＥＧ化を受けやすくするアミノ酸配列の変更（ポリエチレングリコール部分の付加）などが挙げられる。一実施形態では、本発明は、血清クリアランスの低い、グリコシル誘導体化および／またはＰＥＧ誘導体化されたポリペプチドを提供するよう設計された、１以上の非天然グリコシル化および／またはポリエチレングリコール修飾部位を含む合成ＣＸＣＲ３リガンド変異体の使用を意図する。したがって、本発明はＰＥＧ化合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む。また、グリコシル化の修飾、例えば、ポリペプチドの合成およびプロセシングの際に、またはさらなるプロセシングステップにおいて、例えば、ポリペプチドをグリコシル化に影響を及ぼす酵素、例えば、哺乳類グリコシル化または脱グリコシル化酵素に曝露することによって、そのグリコシル化パターンを修飾することによってなされるものも含まれる。また、リン酸化アミノ酸残基、例えば、ホスホチロシン、ホスホセリンまたはホスホスレオニンを含む配列も包含される。いくつかの実施形態では、例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの産生に用いる宿主細胞が細菌宿主細胞である場合には、合成ＣＸＣＲ３リガンドはＮ末端メチオニンを含むよう修飾されている。

いくつかの実施形態では、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドポリペプチドは、合成ＣＸＣＲ３リガンドポリペプチドと異種ポリペプチド（例えば、融合パートナー）とを含んでなる融合タンパク質である。適した融合パートナーとしては、ｉｎ ｖｉｖｏでの安定性の増強（例えば、血清半減期の延長）を付与するペプチドおよびポリペプチド、精製の容易さを提供するペプチドおよびポリペプチド、例えば、（Ｈｉｓ）_n、例えば、６Ｈｉｓなど
、融合タンパク質の細胞からの分泌を提供するペプチドおよびポリペプチド、エピトープタグ、例えば、ＧＳＴ、赤血球凝集素（ＨＡ、例えば、ＣＹＰＹＤＶＰＤＹＡ；配列番号４）、ＦＬＡＧ(例えば、ＤＹＫＤＤＤＤＫ；配列番号５)、ｃ−ｍｙｃ(例えば、ＣＥＱ
ＫＬＩＳＥＥＤＬ；配列番号６)などを提供するペプチドおよびポリペプチド、検出可能
なシグナルを提供するペプチドおよびポリペプチド、例えば、検出可能な産物を生じる酵素(例えば、β-ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ)、またはそれ自体が検出可能である
タンパク質、例えば、緑色蛍光タンパク質など、多量体化を提供するペプチドおよびポリペプチド、例えば、免疫グロブリンのＦｃ部分などの多量体化ドメインなどが挙げられる。

融合タンパク質は、細胞からの融合タンパク質の分泌を提供するアミノ酸配列を含んでなる場合もある。当業者ならば、かかる分泌シグナル配列を承知している。細菌における使用に適した分泌シグナルとしては、それだけには限らないが、大腸菌(E.coli)、Ｓ．マルセッセンス(marcescens)、Ｅ．アミロソラ(amylosora)、Ｍ．モルガニー(morganii)お
よびＰ．ミラビリス(mirabilis)のブラウンのリポタンパク質、大腸菌およびサルモネラ
菌のＴｒａＴタンパク質、Ｂ．リケニホルミス(licheniformis)およびセレウス菌および
黄色ブドウ球菌のペニシリナーゼ（ＰｅｎＰ）タンパク質、肺炎桿菌およびクレブシエラ・アエロゲネセ(klebsiella aerogenese)のプルラナーゼタンパク質、大腸菌リポタンパ
ク質ｌｐｐ−２８、Ｐａｌ、ＲｐｌＡ、ＲｐｌＢ、ＯｓｍＢ、ＮＩｐＢ、およびＯｒｌｌ７、Ｖ．ハルセイ(harseyi)のチトビアーゼ(chitobiase)タンパク質、シュードモナス・
ソラナセアルム(Pseudomonas solanacearum)のβ−１，４−エンドグルカナーゼタンパク質、インフルエンザ菌のＰａｌおよびＰｃｐタンパク質、緑膿菌のＯｐｒＩタンパク質、肺炎球菌のＭａｌＸおよびＡｍｉＡタンパク質、梅毒トレポネーマの３４ｋｄａ抗原およびＴｐｍＡタンパク質、マイコプラズマ・ヒオリニス(Mycoplasma hyorhinis)のＰ３７タンパク質、バシラス・アミロリケファシエンス(Bassilus amyloliquefaciens)の中性プロテアーゼ、およびロッキー山紅斑熱リケッチアの１７ｋｄａ抗原の分泌シグナルが挙げられる。酵母における使用に適した分泌シグナル配列は当技術分野では公知であり、使用できる。例えば、米国特許第５，７１２，１１３号参照。

いくつかの実施形態では、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、主題合成ＣＸＣＲ３ポリペプチドと、融合パートナーとを含んでなる融合ポリペプチドであり、これでは、プロテアーゼ切断部位は、合成ＣＸＣＲ３ポリペプチドと融合パートナーの間に位置する。

タンパク質分解性切断部位は当業者には公知であり、多種多様なものが知られており、文献に十分に記載されている。例えば、ハンドブック・オブ・プロテオリティック・エンザイム(Handbook of Proteolytic Enzymes)（１９９８）ＡＪ バレット(Barret)、ＮＤ
ローリングス(Rawlings)およびＪＦ ウェスナー(Woessner)編、アカデミック・プレス(Academic Press)が挙げられる。タンパク質分解性切断部位としては、それだけには限らないが、エンテロキナーゼ切断部位：（Ａｓｐ）₄Ｌｙｓ（配列番号０７）、因子Ｘａ切
断部位：Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（配列番号０８）、トロンビン切断部位、例えば、Ｌｅｕ-Ｖａｌ-Ｐｒｏ-Ａｒｇ-Ｇｌｙ-Ｓｅｒ（配列番号０９）、レニン切断部位、
例えば、Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ-Ｈｉｓ-Ｌｅｕ-Ｖａｌ-Ｉｌｅ-Ｈｉｓ（配列番号１０
）、コラゲナーゼ切断部位、例えば、Ｘ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ（ここで、Ｘはいずれかのアミノ酸である）、トリプシン切断部位、例えば、Ａｒｇ−Ｌｙｓ、ウイルス２Ａまたは３Ｃプロテアーゼ切断部位などのウイルスプロテアーゼ切断部位、例えば、それだけには限らないが、ピコルナウイルス由来のプロテアーゼ２Ａ切断部位（例えば、ソマーグリューバー(sommergruber)ら（１９９４）ヴィロロジー(Virology)１９８：７４１〜７４５参照）、Ａ型肝炎ウイルス３Ｃ切断部位（例えば、シュルセイス(Schultheiss)ら（１９５５）
ジャーナル・オブ・ヴィロロジー(Journal of virology)６９：１７２７〜１７３３頁参
照）、ヒトライノウイルス２Ａプロテアーゼ切断部位（例えば、ワング(Wang)ら（１９９７）バイオケミカル・アンド・バイオフィジカル・リサーチ・コミュニケーションズ(Biochemical and Biophysical Research Communications)２３５：５６２〜５６６頁参照）
、およびピコルナウイルス３プロテアーゼ切断部位（例えば、ウォーカー(Walker)ら（１９９４）バイオテクノロジー(Biotechnology)１２：６０１〜６０５参照）が挙げられる
。

主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの調製
主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、化学合成法、標準組換え技術による製造、およびその組合せをはじめとする何らかの既知の方法を用いて調製するのが好都合である。例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは自動化固相ｔ−ブチロキシカルボニルおよびベンジル保護ストラテジーを用いて合成できる。主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは自然な化学的結合によって合成できる。例えば、長さが約１５〜約４０アミノ酸の断片（例えば、長さが約１５〜約２０、約２０〜約２５、約２５〜約３０、約３０〜約３５、または約３５〜約４０アミノ酸の断片）は、標準的な化学合成法を用いて合成でき、その断片をドーソン(Dawson)ら（１９９４）サイエンス(Science)２６６：７７６〜７７９頁に記載された方法を用い
て結合させる。合成したポリペプチドの純度は、逆相ＨＰＬＣおよび等電点電気誘導によって評価することができる。リガンドの一次構造は、エドマン配列決定法によって確認することができる。

多数の実施形態では、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドをコードするヌクレオチド配列を含んでなる発現ベクターを従来法を用いて調製し、宿主細胞に導入する。発現ベクターは宿主細胞中で主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの産生を提供する。

したがって、本発明は合成ＣＸＣＲ３リガンドの製造方法を提供し、この方法は主題ＣＸＣＲ３リガンドをコードするヌクレオチド配列を含む発現ベクターを含んでなる宿主細胞を、宿主細胞による合成ＣＸＣＲ３リガンドの産生に有利な条件下で培養すること、および培養物から(例えば、宿主細胞溶解物からおよび／または培養培地から)合成ＣＸＣＲ３リガンドを単離することを含んでなる。この方法は真核細胞を用いてもまたは原核細胞を用いても実施できる。

ポリペプチドは、発現目的によって、従来法にしたがって原核細胞で発現させても真核細胞で発現させてもよい。タンパク質の大規模製造には、単細胞生物、例えば、大腸菌、枯草菌、出芽酵母、バキュロウイルスベクターと組合せた昆虫細胞、または高等生物、例えば、脊椎動物、特に哺乳類の細胞、例えば、ＣＯＳ７細胞、ＣＨＯ細胞、ＨＥＫ２９３細胞なども発現宿主細胞として使用できる。タンパク質が自然な折り畳みおよび翻訳後修飾によって恩恵を受ける場合には、真核細胞中で遺伝子を発現させることが望ましい状況もある。次いで前記のように、ポリペプチドを細胞培養上清からまたは細胞溶解物からアフィニティークロマトグラフィー法または陰イオン交換／サイズ排除クロマトグラフィー法を用いて単離することができる。

発現宿主を使用することによって多量のタンパク質またはその断片を利用できるためには、従来法にしたがってタンパク質を単離および精製すればよい。発現宿主の溶解物を調製し、この溶解物を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、排除クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、アフィニティークロマトグラフィー、またはその他の精製技術を用いて精製することできる。

主題合成ＣＸＣＲ３リガンドはまた、組換え合成の従来法にしたがって単離および精製できる。発現宿主の溶解物を調製し、この溶解物をＨＰＬＣ、排除クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、アフィニティークロマトグラフィー、またはその他の精製技術を用いて精製することができる。用いる組成物は、産物の調製法およびその精製に関連する混入物の関連で、所望の産物を少なくとも２０重量％含んでなり、より通常には、少なくとも約７５重量％含んでなり、少なくとも約９５重量％含んでなることが好ましく、治療目的には、通常、少なくとも約９９．５重量％含んでなる。通常、パーセンテージは全タンパク質に基づくものとする。

本発明は主題ＣＸＣＲ３リガンドを含んでなる組成物を提供する。ＣＸＣＲ３リガンドは、多数の実施形態では、純粋、例えば、少なくとも約９０％純粋（非ＣＸＣＲ３ポリペプチドおよび／またはその他の高分子を含まない）、少なくとも約９５％純粋、少なくとも約９８％純粋、または少なくとも９９％純粋、または９９％よりも高度に純粋である。

主題ＣＸＣＲ３リガンド組成物は、ＣＸＣＲ３リガンドの他に、１以上のバッファー、塩、ｐＨ調整剤、可溶化剤、キレート化剤、界面活性剤、非イオン性界面活性剤、プロテアーゼ阻害剤、アジュバントなどを含んでなる。

いくつかの実施形態では、主題組成物は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと、製薬上許容さ
れる賦形剤(類)とを含んでなる。当技術分野では多種多様な製薬上許容される賦形剤が知られており、本明細書で詳細に論じる必要はない。製薬上許容される賦形剤は、例えば、Ａ．ジェンナーロ(Gennaro)（２０００）「レミングトン(Remington)：ザ・サイエンス・アンド・プラクチス・オブ・ファーマシー(The Science and Practice of Pharmacy)」、第２０版、リッピンコット(Lippincott)、ウィリアムス(Williams)、＆ウィルキンス(Wilkins)、ファーマシューティカル・ドサージ・フォームズ・アンド・ドラッグ・デリバリ
ー・システムス(Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems)（１９９９
）Ｈ．Ｃ．アンセル(Ansel)ら、第７版、リッピンコット、ウィリアムス、＆ウィルキン
ス、およびハンドブック・オブ・ファーマシューティカル・エクシピエンツ(Handbook of
Pharmaceutical Excipients)（２０００）Ａ．Ｈ．キッブ(Kibbe)ら、第３版、アメリカン・ファーマシューティカル・アソシエーション(American Pharmaceutical Association)をはじめ種々の出版物に十分に記載されている。

ポリヌクレオチド、ベクター、および宿主細胞
本発明は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドをコードするヌクレオチド配列を含んでなるポリヌクレオチド、主題ポリヌクレオチドを含んでなるベクター、および主題ポリヌクレオチドまたはベクターを含んでなる宿主細胞をさらに提供する。主題ポリヌクレオチドは、主題リガンドを作製するのに有用である、主題発現ベクターおよび遺伝的に修飾された宿主細胞を作製するのに有用である。本発明は主題ポリヌクレオチドを含んでなる組成物をさらに提供する。

主題発明は主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、ならびにかかる核酸の相補体をコードする核酸組成物を提供する。核酸組成物とは、主題発明の合成ＣＸＣＲ３リガンドをコードするオープンリーディングフレームを有し、適当な条件下で、発現され、その結果、合成ＣＸＣＲ３リガンドが産生され得る核酸分子の配列を含んでなる組成物を意味する。また、この用語には主題合成ＣＸＣＲ３リガンドをコードする核酸と相同な、または実質的に類似の、または同一の核酸も包含される。

したがって、主題発明は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドをコードするヌクレオチド配列を含んでなる核酸、およびかかる核酸に対して実質的ヌクレオチド配列同一性を有する（例えば、相同な）核酸を提供する。多数の実施形態では、主題核酸は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドをコードするヌクレオチド配列、および主題合成ＣＸＣＲ３リガンドをコードするヌクレオチド配列と（例えば、ＣＸＣＲ３コード配列と）少なくとも約７５％の、少なくとも約８０％の、少なくとも約８５％の、少なくとも約９０％の、少なくとも約９５％の、少なくとも約９８％の、または少なくとも約９９％の、またはそれより高いヌクレオチド配列同一性を有するヌクレオチド配列、またはその相補配列を含んでなる。

配列類似性は参照配列をベースに算出するが、これは大きな配列のサブセット、例えば、保存されたモチーフ、コード領域、フランキング領域などであり得る。参照配列は、通常少なくとも約１８ｎｔの長さ、大抵の場合少なくとも約３０ｎｔの長さとし、比較されている完全な配列まで広げてもよい。配列解析のアルゴリズムは当技術分野では公知であり、例えば、ＢＬＡＳＴがアルトシュル(Altschul)ら（１９９０）、ジャーナル・オブ・モレキュラー・バイオロジー(Journal of Molecular Biology)２１５：４０３〜１０頁（デフォルト設定、すなわち、パラメータｗ＝４およびＴ=１７を用いて）に記載されてい
る。

ストリンジェントな条件下で前記の核酸とハイブリダイズする核酸もまた提供する。ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件の一例としては、５０℃以上、０．ｌ×ＳＳＣ（１５ｍＭ塩化ナトリウム／１．５ｍＭクエン酸ナトリウム）でのハイブリダイゼーションがある。ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件のもう一つの例として、
溶液:５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ（１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１５ｍＭクエン酸三ナ
トリウム）、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ７．６）、５×デンハート液、１０％硫酸デキストラン、および２０μｇ／ｍｌ変性剪断サケ精子ＤＮＡ中４２℃で一晩のインキュベーションと、それに続く約６５℃で０．１×ＳＳＣ中でのフィルターの洗浄がある。ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件とは、前記の代表的な条件と少なくとも同程度ストリンジェントであるハイブリダイゼーション条件である。その他のストリンジェントなハイブリダイゼーション条件は当技術分野では公知であり、これを使用して本発明のこの特定の実施形態の核酸を同定することもできる。

本明細書において、用語「ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件」とは、ＤＮＡまたはＤＮＡとＲＮＡの相補部分間に少なくとも９０％の配列同一性を達成するために当業者によって通常用いられるものである。いくつかの実施形態では、本発明の核酸分子は、核酸を含むフィルターの６５℃、６×単一強度クエン酸（ＳＳＣ）（１×ＳＳＣとは０．１５Ｍ ＮａＣｌ、０．０１５Ｍクエン酸Ｎａ；ｐＨ７．０である)、５×デンハ
ート液、０．０５％ピロリン酸ナトリウムおよび１００μｇ／ｍｌニシン精子ＤＮＡを含んでなる溶液中での８時間〜一晩のプレハイブリダイゼーション、６５℃、６×ＳＳＣ、１×デンハート液、１００μｇ／ｍｌ酵母ｔＲＮＡおよび０．０５％ピロリン酸ナトリウムを含有する溶液中での１８〜２０時間のハイブリダイゼーション、および６５℃、０．２×ＳＳＣおよび０．１％ＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウム）を含有する溶液中での１時間のフィルターの洗浄を含んでなるストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下で、配列番号０１、０２、０３、１５、１６、１７、１８、１９、および２０のうちのいずれか１つに記載されるＣＸＣＲ３リガンドをコードするヌクレオチド配列を含んでなる核酸分子のＣＸＣＲ３コード配列またはかかる核酸配列のコード領域の相補体とハイブリダイズできる。

特定の実施形態では、主題核酸は配列番号０１、０２、０３、１５、１６、１７、１８、１９、および２０のうちのいずれかに記載されるアミノ酸配列を含んでなるＣＸＣＲ３リガンドをコードするヌクレオチド配列、またはかかる核酸の相補体を含んでなる。

主題発明のタンパク質およびポリペプチドをコードする核酸は、多数の実施形態では、ｃＤＮＡを含むＤＮＡである。本明細書において、用語「合成ＣＸＣＲ３リガンド核酸」、「ハイブリッド型ＣＸＣＲ３リガンド核酸」および「共通ＣＸＣＲ３リガンド核酸」とは、具体的な主題合成ＣＸＣＲ３タンパク質およびポリペプチド、ハイブリッド型ＣＸＣＲ３タンパク質およびポリペプチド、共通ＣＸＣＲ３タンパク質およびポリペプチドをコードするオープンリーディングフレーム、ならびに、例えば、いずれかの方向にコード領域を超えて約１００ｂｐ〜２０ｋｂの（場合によってはさらに）発現の調節に関与する、隣接する５’および３’非コードヌクレオチド配列を指す。核酸は、以下の詳述するように、染色体外維持のためにまたは宿主ゲノムへの組み込みのために適当なベクターに導入することができる。

主題発明の核酸組成物は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドのすべてをコードする場合も一部をコードする場合もある。二本鎖または一本鎖断片は、ＤＮＡ配列から、従来法に従ってオリゴヌクレオチドを化学合成することによって、制限酵素消化によって、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）増幅によってなどで得ることができる。

主題核酸分子は、通常、この分子をベクター中におくことによって増殖させる。プラスミドをはじめとする、ウイルスおよび非ウイルスベクターを用いる。プラスミドの選択は、それでの増殖が望まれる細胞の種類および増殖目的に応じて変わる。ある種のベクターが多量の所望のＤＮＡ配列を増幅および作製するのに有用である。

本発明は主題ポリヌクレオチドを含んでなる組換えベクター（「構築物」）をさらに提供する。組換えベクターは、本発明のポリヌクレオチドの増殖に用いるベクター、および発現ベクターを含む。組換えベクターは主題ポリヌクレオチドの増殖に有用である（クローニングベクター）。主題組換え発現ベクターは、細胞において主題ポリヌクレオチドの発現を達成するために、例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの産生に有用である。適当なベクターの選択は十分に当業者の範囲内にある。多数のかかるベクターは市販されている。

発現ベクターは培養細胞における発現に適している。これらのベクターは、通常、主題ポリヌクレオチドの発現を達成するのに必要な、それに機能しうる形で連結されている調節配列（「制御配列」または「制御領域」）を含む。さらにその他のベクターは生物またはヒト全体中の細胞における転移および発現に適している。

発現ベクターは、通常、プロモーター配列の近傍に位置する好都合な制限部位を含み、異種タンパク質をコードする核酸配列の挿入をもたらす。発現宿主中で機能しうる選択マーカーが存在する場合もある。発現ベクターは融合タンパク質の産生に使用でき、これでは外来融合ペプチドがさらなる機能、すなわち、タンパク質合成の増加、安定性の増加、規定の抗血清、酵素マーカー、例えば、β−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、西洋わさびペルオキシダーゼなどとの反応性の増加を提供する。

転写開始領域と、プロモーター領域と、主題ポリヌクレオチドと、転写終結領域とを含んでなる発現カセットを調製できる。ＤＮＡを導入した後、構築物を含む細胞を選択マーカーによって選択し、細胞を増やし、次いで、発現に用いることができる。

発現カセットは種々のベクター、例えば、プラスミド、ＢＡＣ、ＨＡＣ、ＹＡＣ、バクテリオファージ、例えば、λ、Ｐ１、Ｍ１３など、動物または植物ウイルスなどに導入でき、通常、ベクターは発現ベクターを含んでなる細胞の選択をもたらす能力を特徴とする。ベクターは、特に、プラスミドまたはウイルスとしての染色体外維持、または宿主染色体への組み込みを提供することができる。染色体外維持を望む場合には、最初の配列はプラスミドの複製に提供するが、これは低コピー数であっても高コピー数であってもよい。選択には多種多様なマーカーが利用できるが、特には、毒素から保護するものであり、より特には抗生物質から保護するものである。選択する特定のマーカーは宿主の性質にしたがって選択するが、栄養要求性宿主との補完を用いることができる場合もある。宿主細胞へのＤＮＡ構築物の導入にはどんな従来法も使用できる、例えば、結合、細菌の形質転換、カルシウム沈殿させたＤＮＡ、エレクトロポレーション、融合、トランスフェクション、ウイルスベクターの感染、遺伝子銃など。

本発明は、主題ポリヌクレオチド、またはいくつかの実施形態では、主題発現ベクターを含んでなる、単離された宿主細胞であってもよい、遺伝子改変された宿主細胞をさらに提供する。適した宿主細胞としては、大腸菌、枯草菌などの原核生物、バキュロウイルスベクターと組合せた昆虫細胞、出芽酵母などの酵母細胞、または両生類を含む脊椎動物などの高等生物の細胞(例えば、アフリカツメガエル卵母細胞)、および動物、特に哺乳類の細胞、例えば、ＣＯＳ細胞、ＣＨＯ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＭＡ−１０細胞などをはじめとする真核生物が挙げられ、発現宿主細胞として使用できる。宿主細胞は合成ＣＸＣＲ３リガンドポリペプチドを産生するために主題ポリヌクレオチドを増殖させる目的で使用できる。

抗体組成物
また、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドポリペプチドと特異的に結合する抗体も提供する。適した抗体は宿主動物を、主題タンパク質のすべてまたは一部を含んでなるペプチドで免
疫することによって得られる。適した宿主動物としては、マウス、ラット、ヒツジ、ヤギ、ハムスター、ウサギなどが挙げられる。多数の実施形態では、主題抗体を単離し、多数の実施形態では、主題抗体を精製する。

また、主題抗体を含んでなる組成物も提供する。主題抗体組成物は、主題抗体のほかに、バッファー、塩、ｐＨ調整剤、可溶化剤、キレート化剤、界面活性剤、非イオン性界面活性剤、プロテアーゼ阻害剤などのうち１種以上を含んでなる。

免疫原は完全タンパク質を含んでなってもよいし、その断片および誘導体を含んでなっていてもよい。典型的な免疫原はタンパク質のすべてまたは一部を含んでなり、これらの残基は天然の標的タンパク質で見られる翻訳後修飾を含む。免疫原は当技術分野で公知の種々の方法、例えば、従来の組換え法を用いるクローニングされた遺伝子の発現、合成ＣＸＣＲ３リガンドポリペプチドの化学合成などで作製する。

ポリクローナル抗体の調製のためには、第１のステップは宿主動物の標的タンパク質での免疫化であり、ここで、標的タンパク質は約１％より少ない混入物しか含まない実質的に純粋な形であることが好ましい。免疫原は完全標的タンパク質を含んでなってもよいし、その断片または誘導体を含んでなってもよい。宿主動物の免疫応答を増加するために、標的タンパク質をアジュバントと組み合わせてもよいが、適したアジュバントとしては、ミョウバン、デキストラン、硫酸塩、高分子アニオン、オイルと水のエマルション、例えば、フロイントのアジュバント、フロイントの完全アジュバントなどが挙げられる。標的タンパク質はまた、合成担体タンパク質または合成抗原とコンジュゲートさせてもよい。種々の宿主を免疫化してポリクローナル抗体を作製することができる。かかる宿主としては、ウサギ、モルモット、齧歯類、例えば、マウス、ラット、ヒツジ、ヤギなどが挙げられる。標的タンパク質は、通常、初回投与量、続いて、１回以上、通常、少なくとも２回のさらなる追加免疫投与量で宿主に皮内投与する。免疫化後、宿主から血液を採取し、続いて、血液細胞から血清を分離する。得られた抗血清中に存在するＩｇは、アンモニウム塩分画、ＤＥＡＥクロマトグラフィーなどといった既知の方法を用いてさらに分画できる。

モノクローナル抗体は従来技術によって製造する。一般に、免疫化した宿主動物の脾臓および／またはリンパ節から形質細胞の供給源が得られる。形質細胞をミエローマ細胞と融合してハイブリドーマ細胞を作製することによって不死化する。個々のハイブリドーマから得た培養上清を、標準技術を用いてスクリーニングして所望の特異性を有する抗体を産生するものを同定する。ヒトタンパク質に対するモノクローナル抗体の作製に適した動物としては、マウス、ラット、ハムスターなどが挙げられる。マウスタンパク質に対する抗体を作製するには、通常、動物はハムスター、モルモット、ウサギなどである。抗体はハイブリドーマ細胞上清または腹水から従来技術、例えば、不溶性支持体と結合しているタンパク質、プロテインＡセファロースを用いるアフィニティークロマトグラフィーなどによって精製できる。

抗体は、普通の多量体構造ではなく、単鎖としても作製できる。単鎖抗体は、ジョスト(Jost)ら（１９９４）ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー(Journal of Biological Chemistry)２６９：２６２６７〜７３頁他に記載されている。重鎖の可変領域
および軽鎖の可変領域をコードするＤＮＡ配列を、少なくとも約４個の小さな中性アミノ酸のアミノ酸、例えば、グリシンおよび／またはセリンをコードするスペーサーに連結する。この融合によって、コードされるタンパク質による、最初の抗体の特異性および親和性を保持する機能的可変領域の構築が可能となる。

特定の実施形態では、ヒト化抗体も注目される。抗体をヒト化する方法は当技術分野で
は公知である。ヒト化抗体はトランスジェニックヒト免疫グロブリン定常領域遺伝子を有する動物からの産物であり得る（例えば、国際特許出願ＷＯ９０／１００７７およびＷＯ９０／０４０３６参照）。あるいは、注目する抗体はＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ヒンジドメイン、および／またはフレームワークドメインを対応するヒト配列と置換する組換えＤＮＡ技術によって設計することができる（ＷＯ９２／０２１９０参照）。

キメラ免疫グロブリン遺伝子を構築するためのＩｇ ｃＤＮＡの使用が当技術分野では知られている(リュー(Liu)ら（１９８７）プロシーディングス・オブ・ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ・オブ・ジ・ユナイテッド・ステイツ・オブ・アメリカ(Prociidings of the National Academy of Sciences of the United States of America)８４：３４３９頁および(１９８７)ジャーナル・オブ・イミュノロジー(Journal of Immunology)１３９：３５２１頁)。ｍＲＮＡを抗体を産生するハイブリドーマまたはその他
の細胞から単離し、これを用いてｃＤＮＡを作製する。注目するｃＤＮＡは特異的プライマーを用いるポリメラーゼ連鎖反応によって増幅できる（米国特許第４，６８３，１９５号および同４，６８３，２０２号）。あるいは、ライブラリーを作製し、スクリーニングして注目する配列を単離する。次いで、抗体の可変領域をコードするＤＮＡ配列を、ヒト定常領域配列と融合する。ヒト定常領域遺伝子の配列は、カバット(kabat)ら（１９９１
）シークエンシズ・オブ・プロテインズ・オブ・イミュノロジカル・インテレスト(Sequencis of Proteins of Immuological Interest)Ｎ．Ｉ．Ｈ出版９１号３２４２頁に見出すことができる。ヒトＣ領域遺伝子は公知のクローンから容易に入手できる。アイソタイプの選択は所望のエフェクター機能、例えば、補体結合、または抗体依存性の細胞の細胞傷害性の活性度によって導かれる。好ましいアイソタイプはＩｇＧｌ、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４である。ヒト軽鎖定常領域、κまたはλのいずれかを使用できる。次いで、従来法によって、キメラ、ヒト化抗体を発現させる。

Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）₂およびＦａｂなどの抗体断片は、無傷のタンパク質を、例えばプ
ロテアーゼによってまたは化学的切断によって切断することによって調製できる。あるいは、末端切断型遺伝子を設計する。例えば、Ｆ（ａｂ’）₂断片部分をコードするキメラ
遺伝子には、末端切断型分子が得られるようにＨ鎖のＣＨ１ドメインとヒンジ領域、続いて、翻訳停止コドンとをコードするＤＮＡ配列を含める。

ＨとＬＪ領域の共通配列を用いて、プライマーとして使用するオリゴヌクレオチドを設計し、続くＶ領域セグメントのヒトＣ領域セグメントとの結合のために有用な制限部位をＪ領域に導入できる。Ｃ領域ｃＤＮＡを部位特異的突然変異誘発によって改変し、制限部位をヒト配列中の類似位置に置くことができる。

発現ベクターとしては、プラスミド、レトロウイルス、ＹＡＣ、ＥＢＶ由来エピソームなどが挙げられる。好都合なベクターとして、機能上完全なヒトＣＨまたはＣＬ免疫グロブリン配列を、いずれかのＶＨまたはＶＬ配列を容易に挿入し発現させられるように設計された適当な制限部位とともにコードするものがある。かかるベクターでは、スプライシングは、通常、挿入されたＪ領域中のスプライスドナー部位とヒトＣ領域の前のスプライスアクセプター部位の間、およびヒトＣＨエキソン内に現れるスプライス領域で起こる。ポリアデニル化および転写終結は、コード領域の下流の天然の染色体部位で起こる。得られたキメラ抗体は、レトロウイルスＬＴＲ、例えば、ＳＶ−４０初期プロモーター（オカヤマら（１９８３）モレキュラー・アンド・セルラー・バイオロジー(Moleculler and Cellular Biology)３：２８０頁）、ラウス肉腫ウイルスＬＴＲ（ゴーマン(Gorman)ら（１
９８２）プロシーディングス・オブ・ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ・オブ・ジ・ユナイテッド・ステイツ・オブ・アメリカ７９：６７７７頁）およびモロニーマウス白血病ウイルスＬＴＲ（グロッシェル(Grosschedl)ら（１９８５）セル(cell)４１：８８５頁）、天然Ｉｇプロモーターなどをはじめとするいずれかの強力なプロモータ
ーとつなぐことができる。

線維性疾患の治療法
本発明は線維性疾患を患う個体における線維性疾患の治療法を提供する。本方法は、通常、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを投与することを含む。本方法は肺に影響を及ぼすもの、例えば、特発性肺線維症、既知の病因による肺線維症、肝線維症または肝硬変、心臓線維症および腎線維症をはじめとする線維性疾病の治療を提供する。病因は、何らかの急性または慢性侵襲、例えば、毒物、代謝性薬剤、遺伝因子および感染性因子によるものであり得る。

一般に、線維症は、コラーゲン性結合組織の病的蓄積または過剰蓄積を特徴とする。線維性疾患としては、それだけには限らないが、膠原病、間質性肺炎、ヒト線維性肺病(例
えば、閉塞性細気管支炎、特発性肺線維症、既知の病因による肺線維症、肺病における腫瘍間質、肺に影響を及ぼす全身性強皮症、ハーマンスキー・パドラック症候群、炭鉱作業員塵肺症、石綿沈着症、珪肺症、慢性肺高血圧症、ＡＩＤＳ関連肺高血圧症、サルコイドーシスなど)、線維性血管疾患、動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症、静脈瘤、心筋梗
塞、脳梗塞、心筋線維症、筋骨格線維症、術後癒着、ヒト腎臓病（例えば、腎炎症候群、アルポート症候群、ＨＩＶ関連腎症、多発性嚢胞腎、ファブリー病、糖尿病性ネフロパシー、慢性糸球体腎炎、全身性エリテマトーデスを伴う腎炎など)、皮膚ケロイド形成、汎
発性強皮症（ＰＳＳ）、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、肝線維症、肝硬変、腎線維症、肺線維症、嚢胞性繊維症、慢性移植片対宿主病、強皮症（局所性および全身性）、グレーブス病性眼疾患、糖尿病性網膜症、緑内障、ペイロニー病、陰茎線維症、膀胱鏡試験使用後の尿道狭窄症、術後の内部癒着、瘢痕、骨髄線維症、特発性後腹膜線維症、既知の病因による腹膜線維症、薬物誘導性エルゴチン中毒、良性または悪性の癌から起こる線維症、微生物感染（例えば、ウイルス、細菌、寄生虫、真菌など）から起こる線維症、アルツハイマー病、炎症性腸疾患から起こる線維症（クローン病および微視的大腸炎における狭窄形成を含む）、化学または環境障害（例えば、癌化学療法、殺虫剤、放射線照射（例えば、癌放射線治療）など）によって誘導される線維症などが挙げられる。

いくつかの実施形態では、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドとは、線維性疾患を患う個体に投与すると、治療前の個体における線維症の程度と比較して、または合成ＣＸＣＲ３リガンドでの治療を受けていない患者によって経験される線維症の進行速度と比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、または少なくとも約５０％、またはそれよりも大幅に、線維症を軽減するのに、または線維症の進行速度を低下させるのに有効である量である。

いくつかの実施形態では、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドとは、線維性疾患を患う個体に投与すると、治療前の個体における器官機能の基礎レベルと比較して、または合成ＣＸＣＲ３リガンドでの治療を受けていない個体によって経験される器官機能の悪化速度と比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、または少なくとも約５０％、またはそれよりも大幅に、線維症に冒された器官（例えば、肺、肝臓、腎臓など）の少なくとも一機能の悪化速度を上昇させるか低下させるのに有効である量である。

所与の器官における線維症の程度の測定方法およびいずれかの所与の器官の機能の測定方法は当技術分野では公知である。

併用療法
いくつかの実施形態では、本発明は線維性疾患の治療のための併用療法を提供する。したがって、本発明は、通常、併用療法で主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを、第２の治療薬とともに投与することを含む、線維性疾患の治療方法を提供する。適した第２の治療薬としては、それだけには限らないが、Ｉ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体、ＴＮＦアンタゴニスト、ＴＧＦ−βアンタゴニスト、エンドセリン受容体アンタゴニスト、ストレス活性化タンパク質キナーゼ阻害剤などが挙げられる。

その他の実施形態では、本発明は、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との相乗的組合せを投与することを含む、線維性疾患の治療方法を提供する。本明細書において、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬の「相乗的組み合わせ」とは、線維性疾患の治療的または予防的治療において、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの治療的または予防的利点と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、第２の治療薬の治療的または予防的利点との単なる付加的組合せから予測できるまたは期待できる治療結果の漸進的な改善よりも有効な組合せた投与量である。

いくつかの実施形態では、本発明は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体との相乗的組合せを投与することを含む方法を提供する。本明細書において、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体との「相乗的組合せ」とは、線維性疾患の治療的または予防的治療において、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの治療的または予防的利点と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、パーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の治療的または予防的利点との単なる付加的組合せから予測できるまたは期待できる治療結果の漸進的な改善よりもより有効な組合せた投与量である。

特発性肺線維症の治療方法
本発明は特発性肺線維症（ＩＰＦ）の治療方法を提供する。通常、本方法はＩＰＦを患う個体に有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを投与することを含む。

いくつかの実施形態では、ＩＰＦの診断は外科生検によって得た肺組織の組織病理学的評価で通常型間質性肺炎（ＵＩＰ）を見出すことによって確認される。ＩＰＦの診断基準は公知である。リュー(Ryu)ら（１９９８）メイヨ・クリニック・プロシーディングス(Mayo Clinic Proceedings)７３：１０８５〜１１０１頁。

その他の実施形態では、ＩＰＦの診断は高分解能コンピュータ断層撮影（ＨＲＣＴ）によってなされる明確なＩＰＦまたは推定ＩＰＦとなる。ＨＲＣＴによる診断では、以下の特徴の存在に注目する：（１）基底および末梢で優勢な網状異常および／または牽引性気管支拡張の存在、（２）基底および末梢で優勢な蜂巣化の存在、および（３）微小結節、気管支周囲血管の結節、硬化、孤立した(蜂巣でない)嚢胞、すりガラス状衰弱（すなわち、あるとすれば、網状混濁よりも広範囲でない）、および縦隔アデノパシー（すなわち、あるとすれば、胸部Ｘ線で明らかであるほど広範囲ではない）などの否定形的特徴の不在。明確なＩＰＦという診断は、特徴（１）、（２）および（３）を満たす場合に行われる。推定ＩＰＦという診断は、特徴（１）および（３）を満たす場合に行われる。

いくつかの実施形態では、「有効量」の合成ＣＸＣＲ３リガンドとは、プラセボ対照または未処理対照と比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４
０％、少なくとも約４５％、または少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、またはそれよりも大幅に、病状悪化を減少させるのに有効である投与量である。

病状悪化とは、以下のうちの１以上の出現とする：（１）予測ＦＶＣの１０％以上の減少、（２）Ａ−ａ勾配の５ｍｍＨｇ以上の増加、（３）１回呼吸ＤＬ_COの１５％以上の減少。病状悪化が起こっているかどうかは、４〜１４週離れた２回の連続する機会でこれらのパラメータのうち１以上を測定し、値をベースラインに対して比較することによって決定する。

したがって、例えば、未処理またはプラセボ処理個体が一定期間にわたってＦＶＣの５０％の減少を示す場合、有効量の主題ＣＸＣＲ３リガンドを投与された個体は同一期間にわたって、ＦＶＣの４５％、約４２％、約４０％、約３７％、約３５％、約３２％、約３０％、またはそれよりも少なく減少を示す。

いくつかの実施形態では、「有効量」の合成ＣＸＣＲ３リガンドとは、無増悪生存期間、例えば、ベースライン（例えば、治療開始１日〜２８日前の時点）から死または病状悪化に至るまでの時間を増加するのに有効な投与量であり、プラセボ処理または未処理対照個体と比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、またはそれより大幅に増加する。したがって、例えば、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドが無増悪生存期間を、プラセボ処理対照または未処理対照と比較して、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、少なくとも約４週間、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１２ヶ月、少なくとも約１８ヶ月、少なくとも約２年、少なくとも約３年、またはそれよりも長く増加するのに有効な投与量である実施形態もある。

いくつかの実施形態では、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドは、肺機能の少なくとも１つのパラメータを上昇させるのに有効な投与量である。例えば、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドは、肺機能の少なくとも１つのパラメータを、未処理個体またはプラセボ処理対照個体と比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、またはそれより大幅に上昇させる。いくつかのこれらの実施形態では、肺機能のパラメータが上昇しているかどうかの決定は、ベースラインの値を治療開始後いずれかの時点、例えば、治療開始後４８週間後の値と比較することによって、または例えば、治療開始後の、約４〜約１４週離れた２つの時点間を比較することによって行う。

いくつかの実施形態では、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドとは、ＦＶＣを、４〜１４週離れた２回の連続する機会でベースラインを比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、またはそれよりも大幅に増加するのに有効な投与量である。

いくつかのこれらの実施形態では、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドは、肺胞−動脈（Ａ−ａ）勾配を、ベースラインと比較して、少なくとも約５ｍｍＨｇ、少なくとも約７ｍ
ｍＨｇ、少なくとも約１０ｍｍＨｇ、少なくとも約１２ｍｍＨｇ、少なくとも約１５ｍｍＨｇ、またはそれよりも大幅に低下させる投与量である。

いくつかのこれらの実施形態では、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドは、１回呼吸ＤＬ_COを、ベースラインと比較して、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、またはそれよりも大幅に増加させる投与量である。ＤＬ_COは肺の一酸化炭素拡散能であり、ｍＬ ＣＯ／ｍｍＨｇ／秒として表される。

肺機能のパラメータとしては、それだけには限らないが、強制肺活量（ＦＶＣ)、努力
呼気肺活量(ＦＥＶ₁)、全肺気量、安静時動脈酸素分圧、最大運動時動脈酸素分圧が挙げ
られる。

肺機能は、それだけには限らないが、肺活量測定をはじめとするいずれかの既知の方法を用いて測定できる。

併用療法
いくつかの実施形態では、本発明はＩＰＦ治療のための併用療法を提供する。したがって、本発明は、通常、併用療法で主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを第２の治療薬とともに投与することを含むＩＰＦの治療法を提供する。適した第２の治療薬としては、それだけには限らないが、Ｉ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体、ＴＮＦアンタゴニスト、ＴＧＦ−βアンタゴニスト、エンドテリン受容体アンタゴニスト、ストレス活性化タンパク質キナーゼ阻害剤などが挙げられる。

その他の実施形態では、本発明は、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との相乗的組合せを投与することを含むＩＰＦの治療方法を提供する。本明細書において、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬の「相乗的組み合わせ」とは、ＩＰＦの治療的または予防的治療において、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの治療的または予防的利点と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、第２の治療薬の治療的または予防的利点との単なる付加的組合せから予測できるまたは期待できる治療結果の漸進的な改善よりもより有効な組合せた投与量である。

いくつかの実施形態では、本発明は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体との相乗的組合せを投与することを含む方法を提供する。本明細書において、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体との「相乗的組合せ」とは、ＩＰＦの治療的または予防的治療において、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの治療的または予防的利点と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、パーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の治療的または予防的利点との単なる付加的組合せから予測できるまたは期待できる治療結果の漸進的な改善よりもより有効な組合せた投与量である。

肝線維症の治療方法
本発明は臨床的肝線維症を減少させること、肝線維症が起こる可能性を低下させること、および肝線維症に関連するパラメータを低下させることを含む肝線維症の治療方法を提供する。本方法は、通常、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの組合せをそれを必要と
する個体に投与することを含む。多数の実施形態では、ヒトの治療が特に注目される。

肝線維症は、門脈圧亢進症、進行性肝不全、および肝細胞癌など、肝硬変に伴う合併症の前駆体である。したがって、肝線維症における低下とは、かかる合併症の発生率を低下させるものとする。したがって、本発明は個体が肝硬変に伴う合併症を発症する可能性を低下させる方法をさらに提供する。

本方法は、通常、治療上有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを投与することを含む。本明細書において、「有効量」の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとは、肝線維症を減少させるのに、または肝線維症の進行速度を低下させるのに有効である、かつ／または個体が肝線維症を発症する可能性を低下させるのに有効である、かつ／または肝線維症と関連するパラメータを低下させるのに有効である、かつ／または肝硬変に伴う疾患を減少させるのに有効である量とする。

本発明はまた、個体において肝線維症の予防または治療に有効である、例えば、個体において生存率を高める、死亡リスクを低下させる、疾病の苦しみを和らげる、または疾病の進行を遅延させる量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドをその個体に投与することを含んでなる、個体における肝線維症の治療方法を提供する。

主題合成ＣＸＣＲ３リガンドでの治療が、肝線維症の減少に有効であるかどうかは、肝線維症および肝機能を測定するためのいくつかの確立された技術のいずれかによって決定する。肝線維症が減少したかどうかは、肝生検サンプルを解析することによって決定する。肝生検の解析は、２つの主構成要素：重篤度および進行中の疾病活動性の尺度として「段階」によって評価される壊死炎症と、長期の病状悪化を反映するものとして「ステージ」によって評価される線維症および実質または血管リモデリングの病変との評価を含んでなる。例えば、ブラント(Brunt)（２０００）ヘパトロジー(Hepatology)３１：２４１〜
２４６頁、およびメタヴィル(METAVIR)（１９９４）ヘパトロジー２０：１５〜２０頁参
照。肝生検の解析に基づいて、スコアを割り当てる。線維症の程度および重篤度の量的評価を行う、いくつかの標準評価システムが存在する。これらとして、ＭＥＴＡＶＩＲ、ノーデル(Knodell)、ショイアー(Scheuer)、ルートビッヒ(Ludwig)およびイサーク(Ishak)
評価システムが挙げられる。

ＭＥＴＡＶＩＲ評価システムは、肝生検の種々の特徴、例えば、線維症(門脈線維症、
小葉中心性線維症、および肝硬変)、壊死(ピースミールおよび小葉壊死、好酸球性退縮、および球状変性)、炎症（門脈路炎症、門脈リンパ球凝集、および門脈炎症の分布）、胆
管変化、およびノーデル指数(門脈周囲壊死、小葉壊死、門脈炎症、線維症および全体的
な疾病活動度のスコア)の解析に基づいている。ＭＥＴＡＶＩＲシステムにおける各ステ
ージの定義は以下のとおりである：スコア０、線維症なし;スコア１、中隔形成を伴わな
い門脈路の星状拡大;スコア２、まれに中隔形成を伴う門脈路の拡大;スコア３、肝硬変を伴わない多数の中隔；およびスコア４、肝硬変。

肝炎活動度指数とも呼ばれるノーデルの評価システムは、検体を４つのカテゴリーの組織学的特徴のスコアに基づいて分類する：Ｉ．門脈周囲および／または架橋壊死、ＩＩ.
小葉内変性および巣状壊死；ＩＩＩ．門脈炎症、およびＩＶ．線維症。ノーデルステージングシステムでは、スコアは以下のとおりである：スコア０、線維症なし；スコア１、軽度の線維症（線維性門脈拡大）；スコア２、中程度の線維症；スコア３、重篤線維症（架橋線維症）；およびスコア４、肝硬変。スコアが高いほど、肝組織の損傷はより重篤である。ノーデル（１９８１）ヘパトロジー１：４３１頁。

ショイアー評価システムでは、スコアは以下のとおりである：スコア０、線維症なし；
スコア１、拡大した、線維性門脈路;スコア２、構造が原型を保ってはいる門脈周囲また
は門脈間中隔；スコア３、明らかな肝硬変はない、構造が変形した線維症；スコア４、推定または明確な肝硬変。ショイアー（１９９１）ジャーナル・オブ・ヘパトロジー(Journal of Hepatology)１３：３７２頁。

イサーク評価システムは、イサーク（１９９５）ジャーナル・オブ・ヘパトロジー２２：６９６〜６９９頁に記載されている。ステージ０、線維症なし;ステージ１、短い線維
性中隔を含むか含まない門脈領域の一部の線維性拡大；ステージ２、短い線維性中隔を含むか含まない門脈領域のほとんどの線維性拡大；ステージ３、時折、門脈間（Ｐ−Ｐ）架橋を含む門脈領域のほとんどの線維性拡大；ステージ４、著しい（Ｐ−Ｐ）ならびに門脈−中心（Ｐ−Ｃ）架橋を含む門脈領域の線維性拡大；ステージ５、時折、小結節を含む著しい架橋（Ｐ−Ｐおよび／またはＰ−Ｃ）（不完全な肝硬変）；ステージ６、推定または明確な肝硬変。抗線維性治療の利点はまた、チャイルド・ピュー評価システムを用いて測定および評価できるが、これは血清ビリルビンレベル、血清アルブミンレベル、プロトロンビン時間の異常、腹水の存在および重篤度、ならびに脳症の存在および重篤度に基づく多成分ポイントシステムを含んでなる。これらのパラメータの異常の存在および重篤度に基づいて、患者を、重篤度の高くなる臨床疾患の３つのカテゴリー：Ａ、ＢまたはＣのうちの１つに位置づけることができる。

いくつかの実施形態では、治療上有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、治療前後の肝生検に基づいて繊維症ステージの１単位以上の変化を達成する量である。特定の実施形態では、治療上有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは肝線維症を、ＭＥＴＡＶＩＲ、ノーデル、ショイアー、ルートビッヒ、またはイサーク評価システムにおいて少なくとも１単位低下させる。

肝機能の二次的、または間接的指標を用いて主題合成ＣＸＣＲ３リガンドでの治療の効力を評価することもできる。肝線維症のコラーゲンおよび／または血清マーカーの特異的染色に基づく、肝線維症の量的程度の形態計測コンピュータ半自動評価も、主題治療法の効力を示すものとして測定できる。肝機能の二次的指数としては、それだけには限らないが、血清トランスアミナーゼレベル、プロトロンビン時間、ビリルビン、血小板数、門脈圧、アルブミンレベル、およびチャイルド・ピュースコアの評価が挙げられる。

もう一つの実施形態では、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、肝機能の指数を、未処理個体における、またはプラセボ処理個体における肝機能の指数と比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、または少なくとも約８０％、またはそれよりも大幅に上げるのに有効である量である。当業者ならば、かかる肝機能の指数は標準アッセイ法を用いて容易に測定でき、その多くは市販されており、臨床設定で日常的に用いられている。

肝線維症の血清マーカーを、主題治療法の効力を示すものとして測定することもできる。肝線維症の血清マーカーとしては、それだけには限らないが、ヒアルロン酸、Ｎ末端プロコラーゲンＩＩＩペプチド、ＩＶ型コラーゲンの７Ｓドメイン、Ｃ末端プロコラーゲンＩペプチド、およびラミニンが挙げられる。肝線維症のさらなる生化学的マーカーとしては、α−２−マクログロブリン、ハプトグロビン、γグロブリン、アポリポタンパク質Ａ、およびγグルタミルトランスペプチダーゼが挙げられる。

もう一つの実施形態では、治療上有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、肝線維症のマーカーの血清レベルを、未処理個体における、またはプラセボ処理個体におけるマーカ
ーのレベルと比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、または少なくとも約８０％、またはそれよりも大幅に低下させるのに有効な量である。当業者ならば、かかる肝線維症の血清マーカーは標準アッセイ法を用いて容易に測定でき、その多くは市販されており、臨床設定で日常的に用いられている。血清マーカーの測定法としては、免疫学に基づく方法、例えば、所与の血清マーカーに特異的な抗体を用いる、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイなどが挙げられる。

肝予備機能の量的試験を用いて、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドでの治療の効力を評価することもできる。これらとしては、インドシアニングリーンクリアランス（ＩＣＧ）、ガラクトース排出能（ＧＥＣ）、アミノピリン呼気試験（ＡＢＴ）、アンチピリンクリアランス、モノエチルグリシン−キシリジド（ＭＥＧ−Ｘ）クリアランス、およびカフェインクリアランスが挙げられる。

本明細書において、「肝硬変に伴う合併症」とは、非代償性肝疾病の続発症である、すなわち、肝線維症の発症に続いて、かつ、その結果として起こる疾患を指し、これとしては、それだけには限らないが、腹水の発生、静脈瘤出血、門脈圧亢進症、黄疸、進行性肝不全、脳症、肝細胞癌、肝移植を必要とする肝不全、および肝関連死亡が挙げられる。

もう一つの実施形態では、治療上有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、肝硬変に伴う疾患の発生率（例えば、個体が発症する可能性）を、未処理個体またはプラセボ処理個体と比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、または少なくとも約８０％、またはそれよりも大幅に低下させるのに有効な量である。

主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとの併用治療が肝硬変に伴う疾患の発生率を低下させるのに有効であるかどうかは、当業者ならば容易に決定することができる。

肝線維症の減少は肝機能を高める。したがって、本発明は、通常、治療上有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを投与することを含む肝機能を高める方法を提供する。肝機能としては、それだけには限らないが、血清タンパク質（例えば、アルブミン、凝固因子、アルカリホスファターゼ、アミノトランスフェラーゼ（例えば、アラニントランスアミナーゼ、アスパラギン酸トランスアミナーゼ）、５’−ヌクレオシダーゼ、γ−グルタミニルトランスペプチダーゼなど）といったタンパク質の合成、ビリルビンの合成、コレステロールの合成、および胆汁酸の合成；それだけには限らないが、炭水化物代謝、アミノ酸およびアンモニア代謝、ホルモン代謝、および脂質代謝をはじめとする肝代謝機能；外来薬物の解毒；内蔵および門脈血行力学をはじめとする血行力学的機能などが挙げられる。

肝機能が高められるかどうかは、当業者ならば、肝機能の確立された試験を用いて容易に確認できる。したがって、アルブミン、アルカリホスファターゼ、アラニントランスアミナーゼ、アスパラギン酸トランスアミナーゼ、ビリルビンなどの肝機能のマーカーの合成は、血清中のこれらのマーカーのレベルを、標準的な免疫学的および酵素的アッセイを用いて測定することによって評価できる。内臓循環および門脈血行力学も、標準法を用いて、門脈楔入圧および／または抵抗によって測定できる。代謝機能は血清中のアンモニアレベルを測定することによって測定できる。

通常、肝臓によって分泌される血清タンパク質が正常範囲にあるかどうかは、標準的な免疫学的および酵素的アッセイを用いてかかるタンパク質レベルを測定することによって決定することができる。当業者にはかかる血清タンパク質の正常範囲は公知である。以下は限定されない例である。アラニントランスアミナーゼの正常範囲は血清１リットル当たり約７〜約５６ユニットである。アスパラギン酸トランスアミナーゼの正常範囲は血清１リットル当たり約５〜約４０ユニットである。ビリルビンは標準的なアッセイを用いて測定する。正常ビリルビンレベルは、通常、約１．２ｍｇ／ｄＬ未満である。血清アルブミンレベルは標準的なアッセイを用いて測定する。血清アルブミンの正常レベルは約３５〜約５５ｇ／Ｌの範囲である。プロトロンビン時間の延長は標準的なアッセイを用いて測定する。正常プロトロンビン時間は対照よりも約４秒未満長いものである。

もう一つの実施形態では、治療上有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、肝機能を、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、またはそれよりも大幅に高めるのに有効な量である。例えば、治療上有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、上昇した肝機能の血清マーカーのレベルを、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、またはそれよりも大幅に低下させるのに、あるいは肝機能の血清マーカーのレベルを正常範囲内に低下させるのに有効な量である。また、治療上有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとは、低下した肝機能の血清マーカーのレベルを、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、またはそれよりも大幅に上昇させるのに、あるいは肝機能の血清マーカーのレベルを正常範囲内に上昇させるのに有効な量である。

併用療法
いくつかの実施形態では、本発明は肝線維症の治療のための併用療法を提供する。したがって、本発明は、通常、併用療法において主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを第２の治療薬とともに投与することを含む肝線維症の治療法を提供する。適した第２の治療薬としては、それだけには限らないが、Ｉ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体、ＴＮＦアンタゴニスト、ＴＧＦ−βアンタゴニスト、エンドセリン受容体アンタゴニスト、ストレス活性化タンパク質キナーゼ阻害剤などが挙げられる。

その他の実施形態では、本発明は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との相乗的組合せを投与することを含む肝線維症の治療法を提供する。本明細書において、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との「相乗的組合せ」とは、肝線維症の治療的または予防的治療において、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの治療的または予防的利点と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、第２の治療薬の治療的または予防的利点との単なる付加的組合せから予測できるまたは期待できる治療結果の漸進的な改善よりもより有効な組合せた投与量である。

いくつかの実施形態では、本発明は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体との相乗的組合せを投与することを含む方法を提供する。本明細書において、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体との「相乗的組合せ」とは、肝線維症の治療的または予防的治療において、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの治療的または予防的利点と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、パーフェ
ニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の治療的または予防的利点との単なる付加的組合せから予測できるまたは期待できる治療結果の漸進的な改善よりもより有効な組合せた投与量である。

腎線維症の治療方法
腎線維症は細胞外マトリックス（ＥＣＭ）成分の過剰蓄積を特徴とする。トランスフォーミング成長因子−β（ＴＧＦ−β）の過剰産生が、ＥＣＭの過剰沈着によって引き起こされる組織線維症の根底にあり、疾病を引き起こすと考えられている。ＴＧＦ−βの繊維形成作用は、マトリックスタンパク質合成と、マトリックス分解の阻害とＥＣＭ構築を促進するインテグリン発現の増強との同時刺激に起因する。

本発明は腎線維症の治療方法を提供する。本方法は、通常、腎線維症を患う個体に有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを投与することを含む。本明細書において、「有効量」の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとは、腎線維症を減少させるのに有効なもの、および／または個体が腎線維症を発症する可能性を低下させるのに有効なもの、および／または腎線維症と関連するパラメータを低下させるのに有効なもの、および／または腎臓の線維症に伴う疾患を減少させるのに有効なものである。

一実施形態では、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、腎線維症を、治療前の個体における腎線維症の程度と比較して、または治療を受けていない患者によって経験された腎線維症の進行速度と比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％減少させるのに、または腎線維症の進行速度を低下させるのに十分な量である。

腎臓において線維症が減少しているかどうかは、いずれかの公知の方法を用いて決定する。例えば、ＥＣＭ沈着および／または線維症の範囲について、腎生検サンプルの組織化学的解析を実施する。当技術分野では、その他の方法も知られている。例えば、マッセロリ(Masseroli)ら（１９９８）ラボラトリー・インベスティゲーション(Laboratory Investigation)７８：５１１〜５２２頁；米国特許第６，２１４，５４２号参照。

いくつかの実施形態では、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、腎機能を、治療前の個体における腎機能の基礎レベルと比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％高めるのに有効な量である。

いくつかの実施形態では、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、腎機能の低下を、治療しない場合に起こる腎機能の低下と比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％遅らせるのに有効な量である。

腎機能は、それだけには限らないが、血漿クレアチニンレベル（正常レベルは一般に、約０．６〜約１．２ｍｇ／ｄＬの範囲にある）、クレアチニンクリアランス（クレアチニンクリアランスの正常範囲は、男性で約９７〜約１３７ｍＬ／分、女性では約８８〜約１２８ｍＬ／分）、糸球体濾過速度（イヌリンクリアランスまたはその他の方法から算出されるか得られるのいずれか）、血中尿素窒素（正常範囲は約７〜約２０ｍｇ／ｄＬ）および尿蛋白レベルをはじめとするいずれかの公知のアッセイを用いて測定できる。

その他の実施形態では、本発明は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との相乗的組合せを投与することを含む方法を提供する。本明細書において、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との「相乗的組合せ」とは、腎線維症の治療的または予防的治療において、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの治療的または予防的利点と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、第２の治療薬の治療的または予防的利点との単なる付加的組合せから予測できるまたは期待できる治療結果の漸進的な改善よりもより有効な組合せた投与量である。

本発明はまた、個体における腎線維症の予防または治療に有効な、例えば、個体において血清クレアチニンレベルを倍加する時間を延長する、腎代償療法（例えば、透析または移植）を必要とする末期の腎臓病に至るまでの時間を延長する、生存率を高める、死亡リスクを低下させる、疾病の苦しみを和らげる、または疾病の進行を遅らせる量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを個体に投与することを含んでなる、個体における腎線維症の治療方法を提供する。

併用療法
いくつかの実施形態では、本発明は腎線維症を治療するための併用療法を提供する。したがって、本発明は、通常、併用療法において主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを第２の治療薬とともに投与することを含む肝線維症の治療方法を提供する。適した第２の治療薬としては、それだけには限らないが、Ｉ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、パーフェニドン、またはパーフェニドン類似体、ＴＮＦアンタゴニスト、ＴＧＦ−βアンタゴニスト、エンドセリン受容体アンタゴニスト、ストレス活性化タンパク質キナーゼ阻害剤などが挙げられる。

その他の実施形態では、本発明は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との相乗的組合せを投与することを含む腎線維症の治療方法を提供する。本明細書において、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との「相乗的組合せ」とは、腎線維症の治療的または予防的治療において、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの治療的または予防的利点と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、第２の治療薬の治療的または予防的利点との単なる付加的組合せから予測できるまたは期待できる治療結果の漸進的な改善よりもより有効な組合せた投与量である。

いくつかの実施形態では、本発明は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体との相乗的組合せを投与することを含む方法を提供する。本明細書において、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体との「相乗的組合せ」とは、腎線維症の治療的または予防的治療において、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの治療的または予防的利点と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、パーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の治療的または予防的利点との単なる付加的組合せから予測できるまたは期待できる治療結果の漸進的な改善よりもより有効な組合せた投与量である。

癌の治療方法
本発明は癌の治療方法を提供する。本方法は、通常、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドをそれを必要とする個体に投与することを含む。

本方法は腫瘍負荷を、適した対照と比較して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約５０％、少なくとも約７５％
、少なくとも約８５％、または少なくとも約９０％、腫瘍の完全な根絶まで軽減するのに有効である。したがって、これらの実施形態では、「有効量」の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、腫瘍負荷を、適した対照と比較して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約５０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８５％、または少なくとも約９０％、腫瘍の完全な根絶まで軽減するのに十分な量である。一実験動物系では、適した対照は、合成ＣＸＣＲ３リガンドで処理していない遺伝的に同一な動物であり得る。非実験系では、適した対照は、合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与前に存在する腫瘍負荷であり得る。その他の適した対照としてはプラセボ対照もあり得る。

腫瘍負荷が軽減されているかどうかは、それだけには限らないが、充実腫瘍量の測定；細胞学的アッセイを用いる腫瘍細胞数の計数；所与の腫瘍抗原を保持する細胞数を調べるための蛍光活性化セルソーティング（例えば、腫瘍関連抗原に特異的な抗体を用いる）、腫瘍の大きさを推定および／またはモニターするための、腫瘍のコンピュータ断層撮影、核磁気共鳴影像法、および／またはＸ線映像；血液などの生体サンプル中の腫瘍関連抗原量の測定をはじめとするいずれかの公知の方法を用いて決定できる。

本方法は腫瘍の増殖速度を、適した対照と比較して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約５０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８５％、または少なくとも約９０％、腫瘍の増殖を完全に阻害するまで低下させるのに有効である。したがって、これらの実施形態では、「有効量」の合成ＣＸＣＲ３リガンドは、腫瘍増殖速度を、適した対照と比較して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約５０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８５％、または少なくとも約９０％、腫瘍増殖の完全に阻害するまで低下させるのに十分な量である。一実験動物系では、適した対照は、合成ＣＸＣＲ３リガンドで処理していない遺伝的に同一な動物であり得る。非実験系では、適した対照は、合成ＣＸＣＲ３リガンド投与前に存在する腫瘍負荷であり得る。その他の適した対照としてプラセボ対照があり得る。

腫瘍の増殖が阻害されているかどうかは、それだけには限らないが、ｉｎ ｖｉｔｒｏ増殖アッセイ、³Ｈ−チミジン取り込みアッセイなどをはじめとするいずれかの公知の方
法を用いて決定できる。

本方法は、癌腫、肉腫、白血病、およびリンパ腫をはじめとする多種多様な癌の治療に有用である。

主題方法を用いて治療できる癌腫としては、それだけには限らないが、食道癌、肝細胞癌、基底細胞癌（皮膚癌の一形式)、扁平上皮癌(種々の組織)、移行上皮癌（膀胱の悪性
新生物)を含む膀胱癌、気管支癌、結腸癌、結腸直腸癌、胃癌、肺の小細胞癌および非小
細胞癌を含む肺癌、副腎皮質癌、甲状腺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、腎細胞癌、非浸潤性乳管癌または胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、子宮癌、睾丸癌、骨原性癌、上皮性癌、および鼻咽頭癌などが挙げられる。

主題方法を用いて治療できる肉腫としては、それだけには限らないが、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、脊索腫、骨原性肉腫、骨肉腫、血管肉腫、内皮肉腫(endotheliosarcoma)、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫(lymphangioendotheliosarcoma)、滑液腫瘍、中皮腫、ユーイング肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、およびその他の軟部組織の肉腫が挙げられる。

主題方法を用いて治療できるその他の充実腫瘍としては、それだけには限らないが、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫(menangioma)、メラノーマ、神経芽細胞腫、および網膜芽腫が挙げられる。

主題方法を用いて治療できる白血病としては、それだけには限らないが、ａ）慢性骨髄増殖性症候群(多分化能造血幹細胞の腫瘍性疾患)、ｂ)急性骨髄性白血病(多分化能造血幹細胞または系統能力が限定された造血細胞の悪性形質転換)、ｃ）慢性リンパ性白血病（
ＣＬＬ、免疫学的に未熟で、かつ、機能的に不完全な小さなリンパ球のクローン増殖)、
例えば、Ｂ細胞ＣＬＬ、Ｔ細胞ＣＬＬ前リンパ球性白血病、およびヘアリー細胞白血病、ならびにｄ)急性リンパ芽球性白血病(リンパ芽球の蓄積を特徴とする)が挙げられる。主
題方法を用いて治療できるリンパ腫としては、それだけには限らないが、Ｂ細胞リンパ腫（例えば、バーキットリンパ腫）、ホジキンリンパ腫などが挙げられる。

併用療法
いくつかの実施形態では、本発明は癌の治療のための併用療法を提供する。したがって、本発明は、通常、併用療法において主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを少なくとも第２の治療薬とともに投与することを含む癌の治療方法を提供する。適した第２の治療薬としては、それだけには限らないが、Ｉ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体、およびアルキル化剤、ニトロソ尿素、代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、ステロイドホルモン、ビンカアルキロイド、生物学的応答調節物質、およびタキサンから選択される抗増殖剤が挙げられる。

その他の実施形態では、本発明は、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との相乗的組合せを投与することを含む癌の治療方法を提供する。本明細書において、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬の「相乗的組み合わせ」とは、癌の治療的または予防的治療において、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの治療的または予防的利点と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、第２の治療薬の治療的または予防的利点との単なる付加的組合せから予測できるまたは期待できる治療結果の漸進的な改善よりも有効な組合せた投与量である。

いくつかの実施形態では、合成ＣＸＣＲ３リガンドを、標準的な癌治療のアジュバント療法として投与する。標準的な癌治療としては、手術（例えば、癌組織の手術による除去）、放射線治療、骨髄移植、化学療法、生物学的応答調節剤治療、および前記の特定の組合せが挙げられる。

放射線治療としては、それだけには限らないが、ビームなどの外部印加供給源か、小型放射線源の埋め込みによってのいずれかから送達されるＸ線またはγ線が挙げられる。

化学療法薬とは癌細胞の増殖を低下させる非ペプチド（すなわち、非タンパク質性）化合物であり、細胞傷害性薬および細胞分裂停止薬を包含する。化学療法薬の限定しない例として、アルキル化剤、ニトロソ尿素、代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物（ビンカ）アルカロイド、およびステロイドホルモンが挙げられる。

細胞増殖を低下させるよう作用する薬剤は、当技術分野では公知であり、広く用いられている。かかる薬剤としては、アルキル化剤、例えば、ナイトロジェン・マスタード、ニトロソ尿素、エチレンイミン誘導体、アルキルスルホネート、およびそれだけには限らないが、メクロレタミン、シクロホスファミド（シトキサン（商標））、メルファラン（Ｌ−サルコリシン）、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、セムスチン（
メチル−ＣＣＮＵ）、ストレプトゾシン、クロロゾトシン、ウラシル・マスタード、クロルメチン、イフォスファミド、クロラムブシル、ピポブロマン、トリエチレンメラミン、トリエチレンチオホスホラミン、ブスルファン、ダカルバジン、およびテモゾロミドをはじめとするトリアゼンが挙げられる。

代謝拮抗剤としては、葉酸類似体、ピリミジン類似体、プリン類似体、およびそれだけには限らないが、シタラビン（ＣＹＴＯＳＡＲ−Ｕ）、シトシンアラビノシド、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、フロクスウリジン（ＦｕｄＲ）、６−チオグアニン、６−メルカプトプリン（６−ＭＰ）、ペントスタチン、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、メトトレキサート、１０−プロパルギル−５，８−ジデアザホレート（ＰＤＤＦ、ＣＢ３７１７）、５,８-ジデアザテトラヒドロホリックアシッド（ＤＤＡＴＨＦ）、ロイコボリン、フルダラビンホスフェート、ペントスタチンおよびゲムシタビンをはじめとするアデノシンデアミナーゼ阻害剤が挙げられる。

適した天然物およびその誘導体（例えば、ビンカアルカロイド、抗腫瘍性抗生物質、酵素、リンホカイン、およびエピポドフィロトキシン）としては、それだけには限らないが、Ａｒａ−Ｃ、パクリタキセル（タキソール（登録商標））、ドセタキセル（タキソテール（登録商標））、デオキシコホルマイシン、マイトマイシン−Ｃ、Ｌ−アスパラギナーゼ、アザチオプリン、ブレキナール、アルカロイド、例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシンなど；ポドフィロトキシン、例えば、エトポシド、テニポシドなど；抗生物質、例えば、アントラシクリン、塩酸ダウノルビシン(ダウノマイ
シン、ルビドマイシン、セルビジン)、イダルビシン、ドキソルビシン、エピルビシンお
よびモルホリノ誘導体など；フェノキシゾンビスシクロペプチド、例えば、ダクチノマイシン；塩基性グリコペプチド、例えば、ブレオマイシン；アントラキノングリコシド、例えば、プリカマイシン（ミトラマイシン）；アントラセネジオン、例えば、ミトキサントロン；アジリノピロロインドールジオン、例えば、マイトマイシン；大環状免疫抑制剤、例えば、シクロスポリン、ＦＫ−５０６（タクロリムス、プログラフ）、ラパマイシンなど、その他が挙げられる。

その他の抗増殖性細胞傷害剤としてナベルベン(navelbene)、ＣＰＴ−１１、アナスト
ラゾール、レトラゾール(letrazole)、カペシタビン、レロキサフィン(reloxafine)、シ
クロホスファミド、イフォサミド(ifosamide)およびドロロキサフィン(droloxafine)がある。

抗増殖活性を有する微小管作用薬もまた使用に適しており、これとしては、それだけには限らないが、アロコルヒチン(allocolchicine)（ＮＳＣ４０６０４２）、ハリコンドリンＢ（ＮＳＣ６０９３９５）、コルヒチン（ＮＳＣ７５７）、コルヒチン誘導体（例えば、ＮＳＣ３３４１０）、ドルスタチン(dolstatin)１０（ＮＳＣ３７６１２８）、マイタ
ンシン（ＮＳＣ１５３８５８）、リゾキシン（ＮＳＣ３３２５９８）、パクリタキセル（タキソール（登録商標））、タキソール（登録商標）誘導体、ドセタキセル（タキソテール（登録商標））、チオコルヒチン（ＮＳＣ３６１７９２）、トリチルシステリン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、それだけには限らないが、エポチロンＡ、エポチロンＢ、ジスコデルモリド(discodermolide)をはじめとする天然および合成エポチロン；エストラムスチン、ノコダゾールなどが挙げられる。

使用に適したホルモン調節物質およびステロイド（合成類似体を含む）としては、それだけには限らないが、副腎皮質ステロイド、例えば、プレドニソン、デキサメタソンなど；エストロゲンおよびプレゲスチン(pregestins)、例えば、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、エストラジオール、クロミフェン、タモキシフェンなど；および副腎皮質抑制薬、例えば、アミノグルテチミド
；１７α−エチニルエストラジオール；ジエチルスチルベストロール、テストステロン、フルオキシメステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、テストラクトン、メチルプレドニソロン、メチル−テストステロン、プレドニソロン、トリアムシノロン、クロロトリアニセン、ヒドロキシプロゲステロン、アミノグルテチミド、エストラムスチン、酢酸メドロキシプロゲステロン、ロイプロリド、フルタミド（ドロゲニル(Drogenil)）、トレミフェン（フェアストン）、およびゾラデックス（登録商標）が挙げられる。エストロゲンは増殖および分化を刺激し、したがって、エストロゲン受容体と結合する化合物を用いてこの活性をブロックする。コルチコステロイドはＴ細胞増殖を阻害し得る。

その他の化学療法薬としては、金属錯体、例えば、シスプラチン（シス−ＤＤＰ）、カルボプラチンなど；尿素、例えば、ヒドロキシ尿素；およびヒドラジン、例えば、Ｎ−メチルヒドラジン；エピドフィロトキシン(epidophyllotoxin)；トポイソメラーゼ阻害剤；プロカルバジン；ミトキサントロン；ロイコボリン；テガフールなどがある。注目するその他の抗増殖剤としては、免疫抑制薬、例えば、ミコフェノール酸、サリドマイド、デスオキシスペルグアリン(desoxyspergualin)、アザスポリン(azasporine)、レフルノミド、ミゾリビン、アザスピラン(azaspirane)（ＳＫＦ１０５６８５）；イレッサ(登録商標)（ＺＤ１８３９、４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−メトキシ−６−（３−（４−モルホリニル）プロポキシ）キナゾリン）などがある。

「タキサン」としては、パクリタキセル、ならびにいずれかの活性なタキサン誘導体またはプロドラッグが挙げられる。「パクリタキセル」（本明細書では類似体、製剤および誘導体、例えば、ドセタキセル、タキソール（登録商標）、タキソテール（登録商標）（ドセタキセルの製剤）、パクリタキセルの１０−デサセチル類似体、およびパクリタキセルの３’Ｎ−デスベンゾイル−３’Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル類似体などを含むと理解される）は、当業者に公知の技術を利用して容易に調製でき（ＷＯ９４／０７８８２、ＷＯ９４／０７８８１、ＷＯ９４／０７８８０、ＷＯ９４／０７８７６、ＷＯ９３／２３５５５、ＷＯ９３／１００７６、米国特許第５，２９４，６３７号、同５，２８３，２５３号、同５，２７９，９４９号、同５，２７４，１３７号、同５，２０２，４４８号、同５，２００，５３４号、同５，２２９，５２９号、およびＥＰ５９０，２６７参照）、または例えば、シグマケミカル社(Sigma Chemical Co.)、ミズーリ州、セントルイス（タクスス・ブレビフォリア(Taxus brevifolia)由来のＴ７４０２、またはタクスス・ヤンナネンシス(Taxus yannanensis)由来のＴ−１９１２）をはじめとする種々の商業的供給源から
入手できる。

パクリタキセルとは、普通の化学的に入手できる形のパクリタキセルのみを指すものではなく、類似体および誘導体（例えば、前記の、タキソテール（登録商標）、ドセタキセル）およびパクリタキセルコンジュゲート（例えば、パクリタキセル−ＰＥＧ、パクリタキセル−デキストラン、またはパクリタキセル−キシロース）も指すと理解されるべきである。

用語「タキサン」には、種々の公知の誘導体、例えば、親水性誘導体と疎水性誘導体の双方も含まれる。タキサン誘導体としては、それだけには限らないが、国際特許出願ＷＯ９９／１８１１３に記載されたガラクトースおよびマンノース誘導体；ＷＯ９９／１４２０９に記載されたピペラジノおよびその他の誘導体；ＷＯ９９／０９０２１、ＷＯ９８／２２４５１および米国特許第５，８６９，６８０号に記載されたタキサン誘導体；ＷＯ９８／２８２８８に記載された６−チオ誘導体；米国特許第５，８２１，２６３号に記載されたスルフェンアミド誘導体；および米国特許第５，４１５，８６９号に記載されたタキソール誘導体が挙げられる。さらに、パクリタキセルのプロドラッグ、例えば、それだけには限らないが、ＷＯ９８／５８９２７、ＷＯ９８／１３０５９、および米国特許第５，８２４，７０１号に記載されたものも含まれる。

本発明の方法に関連して使用するのに適した生物学的応答調節物質としては、それだけには限らないが、（１）チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）活性の阻害剤、（２）セリン／スレオニンキナーゼ活性の阻害剤、（３）腫瘍関連抗原アンタゴニスト、例えば、腫瘍抗原と特異的に結合する抗体、（４）アポトーシス受容体アゴニスト、（５）インターロイキン−２、（６）ＩＦＮ−α、（７）ＩＦＮ−γ、（８）コロニー刺激因子、（９）血管形成の阻害剤、および（１０）腫瘍壊死因子のアンタゴニストが挙げられる。

血管原性疾患の治療方法
本発明は血管原性疾患の治療方法を提供する。本方法は、通常、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドをそれを必要とする個体に投与することを含む。

血管原性疾患の主題治療方法では、「有効量」の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとは、血管形成を抑制する量、例えば、血管形成を、合成ＣＸＣＲ３リガンドでの治療を受けていない場合の血管形成レベルと比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、または少なくとも約９０％、またはそれよりも大幅に減少させる量である。

血管形成を評価するためには多数のシステムが利用できる。例えば、血管形成は充実腫瘍増殖に必要とされるので、動物モデルにおける腫瘍増殖の阻害を血管形成阻害指数として用いることができる。血管形成はまた、創治癒モデルで、皮膚または器官の創傷修復において、および慢性炎症において、例えば、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化症および特発性肺線維症（ＩＰＦ）などの疾病において評価することもできる。例えば、マーカー分子、例えば、ＣＤ３Ｈ、因子ＶＩＩＩまたはＰＥＣＡＭ−１を染色した後に組織切片中の血管を計数することによっても評価できる。

血管形成が減少しているかどうかは、例えば、リラキシンを含浸させた移植片への新血管新生の刺激、角膜または眼房前部における血管成長の刺激、内皮細胞増殖の刺激、ｉｎ
ｖｉｔｒｏでの遊走または管形成、およびニワトリ絨毛尿膜アッセイ、ハムスター頬袋アッセイ、ポリビニルアルコールスポンジディスクアッセイをはじめ当技術分野で公知のいずれかの方法を用いて決定することができる。かかるアッセイは当技術分野では十分に知られており、例えば、アウアーバッハ(Auerbach)ら（（１９９１）ファルマコロジー・アンド・セラピューティクス(Pharmacology and Therapeutics)５１：１〜１１頁）およ
びそれに引用された参照文献をはじめとする多数の出版物に記載されている。

血管形成を評価するために広く用いられているシステムとして、ラット角膜を用いて実施できるような、新血管新生の角膜マイクロポケットアッセイがある。このｉｎ ｖｉｖｏモデルは、臨床有用性を概ね予測するものとして広く受け入れられている。例えば、オーライリ(O'Reilly)ら（１９９４）セル７９：３１５〜３２８頁、リー(Li)ら（１９９１)インベスティゲイティブ・オフタルモロジー・アンド・ビジュアル・サイエンス(Investigative ophthalmology and Visual Science)３２（１１）：２８９８〜９０５頁、およ
びミラー(Miller)ら（１９９４）アメリカン・ジャーナル・オブ・パソロジー(American Journal of Pathology)１４５（３）：５７４〜８４頁参照。

主題方法は血管原性疾患、例えば、病的新血管新生を特徴とする何らかの疾病の治療に有用である。かかる疾患としては、それだけには限らないが、充実腫瘍、血管腫、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化症および特発性肺線維症(ＩＰＦ)が挙げられ、さらに、ＢＰＨ、血管狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、糖尿病性網膜症をはじめとする網膜症、髄膜腫、血管腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、新生血管緑内障、角膜損傷に伴う新血
管新生、角膜移植に伴う新血管新生、角膜移植片に関連する新血管新生、乾癬、血管線維腫、血友病性関節、肥厚性瘢痕、オスラー-ウェーバー症候群、加齢に関連した黄斑変性
、化膿性肉芽腫水晶体後線維増殖症、強皮症、トラコーマ、血管癒着、滑膜炎、皮膚炎、および子宮内膜症も含まれる。

併用療法
いくつかの実施形態では、本発明は血管原性疾患の治療のための併用療法を提供する。したがって、本発明は、通常、併用療法において主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを少なくとも第２の治療薬とともに投与することを含む、血管原性疾患の治療方法を提供する。適した第２の治療薬としては、それだけには限らないが、Ｉ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、およびパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体が挙げられる。

その他の実施形態では、本発明は、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との相乗的組合せを投与することを含む、血管原性疾患の治療方法を提供する。本明細書において、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との「相乗的組合せ」とは、血管原性疾患の治療的または予防的治療において、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの治療的または予防的利点と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、第２の治療薬の治療的または予防的利点との単なる付加的組合せから予測できるまたは期待できる治療結果の漸進的な改善よりもより有効な組合せた投与量である。

細菌感染症の治療方法
本発明は細菌感染症の治療方法を提供する。本方法は、通常、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドをそれを必要とする個体に投与することを含む。それを必要とする個体とは、細菌感染症、例えば、病的細菌による感染症（日和見感染を含む）を患っていると診断された個体を含む。

本発明の方法を用いて治療できる細菌感染症としては、それだけには限らないが、ブドウ球菌、乳酸桿菌、連鎖球菌、サルシナ属、エシェリキア属、エンテロバクター属、クレブシエラ属、シュードモナス属、アシネトバクター属、プロテウス属、カンピロバクター属、シトロバクター属、ナイセリア(Nisseria)属、バシラス属、バクテロイデス属、ペプトコッカス属、クロストリジウム属、サルモネラ属、シゲラ属、セラチア属、ヘモフィルス属、ブルセラ属およびその他の生物をはじめとするグラム陽性菌およびグラム陰性菌、好気性および嫌気性生物による感染症が挙げられる。

それだけには限らないが、大腸菌が特に注目される、すべての臨床上重要なエシェリキア属の株；肺炎桿菌が特に注目される、すべての臨床上重要なクレブシエラ属の株；志賀赤痢菌が特に注目される、すべての臨床上重要なシゲラ族の株；Ｓ・アボルツス−エキ(S.abortus-eqi)、チフス菌、ネズミチフス菌、Ｓ．ニューポート(newport)、パラチフスＡ菌、パラチフスＢ菌、Ｓ．ポツダム(potsdam)、およびＳ．ポルラム(poppurum)を含むす
べての臨床上重要なサルモネラ族の株；最も目立ったものとしてＳ．マルセッセンスがある、すべての臨床上重要なセラチア属の株；最も目立ったものとしてペスト菌がある、すべての臨床上重要なエルシニア属の株；最も目立ったものとしてＥ．クロアカ(E. cloacae)がある、すべての臨床上重要なエンテロバクター属の株；最も目立ったものとしてＥ．フェカリス(faecalis)およびＥ．フェシウム(faecium)がある、すべての臨床上重要なエ
ンテロコッカス属；最も目立ったものとしてインフルエンザ菌がある、すべての臨床上重要なヘモフィルス属の株；最も目立ったものとして結核菌、Ｍ．アビウム−イントラセルラレ(avium-intracellulare)、Ｍ．ボビス(bovis)、およびＭ．レプラエ(leprae)がある
、すべての臨床上重要な放線菌；淋菌および髄膜炎菌；緑膿菌が特に注目される、すべて
の臨床上重要なシュードモナス属；黄色ブドウ球菌および表皮ブドウ球菌が特に注目される、すべての臨床上重要なスタフィロコッカス属；肺炎連鎖球菌が特に注目される、すべての臨床上重要なストレプトコッカス属；およびコレラ菌をはじめとする腸内細菌科のすべての臨床上重要なメンバーがある。

細菌感染症の主題治療方法は、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを投与することを含む。有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、１以上の投与量で、細菌感染症に関連した症状またはパラメータを、合成ＣＸＣＲ３リガンドでの治療を全く受けていないものと比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、またはそれよりも大幅に減少させるのに有効な量である。

細菌感染症に関連したパラメータとして、感染個体中または感染個体の特定の組織、液体、もしくは器官中の細菌数が挙げられる。したがって、いくつかの実施形態では、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとは、１以上の投与量で投与した場合に、個体または個体の組織、液体もしくは器官中の細菌数を、合成ＣＸＣＲ３リガンドでの治療を全く受けていないものと比較して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、またはそれよりも大幅に減少させるのに有効である量である。

細菌感染症に関連した症状としては、それだけには限らないが、悪寒、発熱、嘔吐、白血球数の増加などが挙げられる。投与される化合物の実際量および投与経路は、個々の疾病または細菌ならびに治療を受けている個体の大きさ、年齢、健康状態、および性別といったその他の因子に応じて変わり、これは日常的な分析によって決定される。

主題治療法が細菌感染症に関連したパラメータまたは症状の減少に有効であるかどうかは、いずれかの公知の方法を用いて決定することができる。例えば、細菌数は標準的なアッセイを用いて調べる。例えば、個体由来の生体サンプル中の細菌数は、サンプルを所与の病原性細菌の増殖を可能にするよう設計した培地で培養し、一定期間の間増殖を可能にさせた後、細菌数を計数することによって調べる。液体サンプル中の細菌数は、顕微鏡下で可視化した細菌数を計数することによって調べることができる。

併用療法
いくつかの実施形態では、本発明は細菌感染症の治療のための併用療法を提供する。したがって、本発明は、通常、併用療法において主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを少なくとも第２の治療薬とともに投与することを含む、細菌感染症の治療方法を提供する。適した第２の治療薬としては、それだけには限らないが、II型インターフェロン受容体アンタゴニスト、および標準的な抗生物質剤、例えば、β−ラクタム、マクロライド、リンコサミド、アミノグリコシド、テトラサイクリン、ポリペプチド抗生物質、スルホンアミド、およびグリコペプチド、例えば、バンコマイシン、ダプトマイシン、テイコプラニンおよびオリタバンシンが挙げられる。

その他の実施形態では、本発明は、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との相乗的組合せを投与することを含む、細菌感染症の治療方法を提供する。本明細書において、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと第２の治療薬との「相乗的組合せ」とは、細菌感染症の治療的または予防的治療において、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの治療的または予防的利点と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与した場合の、第２の治療薬の治療的または予防的利点との単なる付加的組合
せから予測できるまたは期待できる治療結果の漸進的な改善よりもより有効な組合せた投与量である。

実験的使用
主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、ＣＸＣＲ３の生物学を研究するための、ならびにＣＸＣＲ３アゴニストおよびアンタゴニストの作用を解析するためのｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏモデル系において試薬として有用である。

腫瘍形成の動物モデル
いくつかの実施形態では、合成ＣＸＣＲ３リガンドを腫瘍形成の非ヒト動物モデルにおける腫瘍増殖を阻害するために利用する。腫瘍形成の非ヒト動物モデルはいずれも使用に適している。例示的モデルは、米国特許第６，４９１，９０６号に論じられている。このモデルにより、腫瘍形成、自然転移および実験的肺コロニー形成についての評価が得られる。ヒト非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）細胞株を用いる。無傷のＮＳＣＬＣ腫瘍または細胞株のいずれかを用いることもできる。腫瘍増殖は腫瘍の大きさおよび質量によって評価し、他方、自然転移および肺コロニー形成（実験的転移）は肺の組織病理学的解析によって決定する。この系では、合成ＣＸＣＲ３リガンドを、腫瘍増殖阻害活性の正の対照として使用できる。さらに、この系を用いて、合成ＣＸＣＲ３リガンド活性のアゴニストまたはアンタゴニストをスクリーニングすることができる。

ヒトＮＳＣＬＣ／ＳＣＩＤマウスモデルは、詳しくは、４〜６週齢の間のＳＣＩＤマウスの使用を含む。血清Ｉｇが＜１μｇ／ｍｌであるＳＣＩＤマウスのみを使用することとする。ヒトＮＳＣＬＣ／ＳＣＩＤマウスキメラに、腫瘍移植の２４時間前に、２０μｌの抗アシアロＧＭ１（ａＡＳＧＭ１；ワコーケミカルズ、テキサス州ダラス）を尾静脈に与える。この治療により宿主由来ＮＫ細胞を除去する。

無傷のヒトＮＳＣＬＣ、１ｍｍ³の試料（肉眼でみて壊死を含まず、計量したもの）を
用いてＳＣＩＤマウスのコホート群の両側の側腹領域の皮下に入れる。ＮＳＣＬＣ細胞株（Ｃａｌｕ−６、Ａ５４９、Ｃａｌｕ−ｌ、およびＣａｌｕ−３）を用いて、セミコンフルエントに増殖した腫瘍細胞を回収し、ＳＣＩＤのコホート群に、１００μｌのＰＢＳ中、１０⁶個細胞および５×１０⁵個細胞を、両側の側腹領域および尾静脈にそれぞれ注入して与える。少なくとも１群のＳＣＩＤマウスを処理群とし、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを投与する。すべてのマウスを、疾病の証拠およびデジタル技術者用ノギスによる腫瘍の大きさの測定値の双方について毎日モニターする。

動物を週１回の頻度で１６週間屠殺し、または腫瘍の大きさが３ｃｍに達するか、動物が病気だと思われる場合にはより早く屠殺する。病気だと思われる動物は屠殺し、剖検を実施し、その病気が腫瘍負担以外の理由による場合には研究から除外する。屠殺時に、皮下位置の腫瘍を測定し、計量する。次いで、実験的肺腫瘍コロニー形成または自発的肺転移を調べる。

主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与は、ＳＣＩＤマウス内の腫瘍増殖に対して有意な減弱作用を有する。したがって、合成ＣＸＣＲ３リガンドの腫瘍増殖阻害活性を、候補抗癌化合物の腫瘍増殖阻害活性と比較するための正の対照として使用できる。あるいは、この系を用いて、合成ＣＸＣＲ３リガンドの腫瘍増殖阻害活性の候補アゴニストまたはアンタゴニストの活性を評価できる。

内皮細胞走化性アッセイ
主題合成ＣＸＣＲ３リガンドはまた、候補薬剤の、内皮細胞走化性活性についての評価に使用できる。内皮細胞走化性アッセイは４８ウェル、ブラインドウェル走化性チャンバ
ー（ヌクレオポア(Nucleopore)社、メリーランド）で実施する。ヌクレオポア走化性メンブレン(孔の大きさ５ミクロン)は、３％酢酸中で一晩、および０．１ｍｇ／ｍｌゼラチン中で２時間、逐次浸漬処理することによって準備する。メンブレンを滅菌水中でリンスし、滅菌空気下で乾燥させ、１ヶ月まで室温で保存する。ゼラチンコートしたフラスコで、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥ中で維持されたウシ副腎毛細血管内皮細胞（ＢＣＥ）を標的細胞として用いる。ＢＣＥは使用する２４時間前に、０．１％ＢＳＡを含むＤＭＥ中で飢餓状態にする。０．１％ＢＳＡを含むＤＭＥ１ｍｌ当たり１×１０⁶個細胞の濃度で懸濁し
た２５マイクロリットルの細胞を、下側のウェルの各々に分配する。走化性メンブレンを下側のウェルの上に置き、チャンバーを密閉し、反転させ、２時間インキュベートして細胞をメンブレンに接着させる。次いで、チャンバーを再度反転させ、５０ｍｌの試験培地を上側のウェルに分配し、さらに２時間再インキュベートする。次いで、メンブレンを固定し、ディフ−クイック染色キット（アメリカン・サイテンティフィックの製品）で染色してメンブレンに結合している細胞を数え上げ、メンブレンを通って反対側の表面に遊走した細胞を計数する。

主題合成ＣＸＣＲ３リガンドが試験培地中に存在することで、チャンバーメンブレンを越える細胞遊走が誘導される。したがって、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、この系における正の対照として使用できる。あるいは、この系を用いて合成ＣＸＣＲ３リガンドの走化性活性の候補アゴニストまたはアンタゴニストを評価できる。

ｉｎ ｖｉｖｏ血管形成アッセイ
さらに、合成ＣＸＣＲ３リガンドは、血管形成のｉｎ ｖｉｖｏモデルでの候補薬剤の抗血管形成活性の評価に使用できる。十分に特性決定された、ラットでの角膜マイクロポケットモデルが使用に適している。例えば、５ｍｇ全タンパク質の試験サンプルを等容量の滅菌ヒドロン(Hydron)キャスティング液と合わせ、５ｍｌのアリコートをピペットで、ガラス製ペトリ皿の表面に糊付けされている１ｍｍテフロンロッドの表面に分注する。ペレットを層流フード中で風乾し（１時間）、一晩冷蔵する。移植の前にペレットを１滴の乳酸加リンガー液で再水和する。

メトファン(metofane)で動物に麻酔を施し、ペントバルビタールナトリウムを腹腔内に注射する。０．１mlの２％リドカインを救護注射し、その後、ヒドロンペレットを、角膜輪部から約１．５ｍｍの外科的に作製した角膜内ポケット中に角膜内移植する。この動物を立体顕微鏡で毎日検査する。移植の７日後、動物に再度麻酔を施し、乳酸加リンガー液、次いで、コロイド状炭素で逐次灌流する。角膜を回収し、平らにし、撮影する。

移植変に向かう、持続した方向性の毛細血管の芽の内部成長およびヘアピン・ループが観察される場合にのみ正の新血管新生応答を記録する。成長が全く観察されなかった場合や、持続性の成長という証拠を全く示さない、所々の芽やヘアピン・ループしか検出されない場合のいずれかでは負の応答を記録する。

合成ＣＸＣＲ３リガンドが存在することによって、試験サンプル中の血管形成薬の活性が阻害される。したがって、この系において、合成ＣＸＣＲ３リガンドを候補血管形成阻害剤の評価について正の対照として使用できる。あるいは、この系を用いて合成ＣＸＣＲ３リガンドの抗血管形成活性の候補アゴニストまたはアンタゴニストの活性を評価できる。

I型インターフェロン受容体アゴニスト
前記のように、いくつかの実施形態では、併用療法において、Ｉ型インターフェロン受容体アゴニストを合成ＣＸＣＲ３リガンドとともに投与する。Ｉ型インターフェロン受容体アゴニストとしては、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−τ、ＩＦＮ−ω、Ｉ型インタ
ーフェロン受容体に特異的な抗体アゴニスト、および他のいずれかのＩ型インターフェロン受容体のアゴニスト、例えば、非ポリペプチドアゴニストが挙げられる。

インターフェロンα（ＩＦＮ−α）
本明細書において用語「インターフェロン−α」とは、ウイルス複製および細胞増殖を阻害し、免疫応答を調節する関連ポリペプチドのファミリーを指す。用語「ＩＦＮ−α」は、天然のＩＦＮ−αポリペプチド、非天然のＩＦＮ−αポリペプチド、および親の天然または非天然ＩＦＮ−αの抗ウイルス活性を保持する天然または非天然ＩＦＮ−αの類似体を含む。

適したαインターフェロンとしては、それだけには限らないが、天然ＩＦＮ−α（それだけには限らないが、天然ＩＦＮ−α２ａ、ＩＦＮ−α２ｂを含む）、組換えインターフェロンα−２ｂ、例えば、シェリングコーポレーション(Schering Corporation)、ニュージャージー州、ケニルワースから入手できるイントロン（登録商標）Ａインターフェロン、組換えインターフェロンα−２ａ、例えば、ホフマン・ラ・ロシュ、ニュージャージー州、ナットレーから入手できるロフェロン（登録商標）インターフェロン、組換えインターフェロンα−２Ｃ、例えば、ベーリンガー・インゲルハイム・ファーマシューティカル社、コネチカット州、リッジフィールドから入手できるベロフォア(Berofor)（登録商標
）α２インターフェロン、インターフェロンα−ｎ１、天然αインターフェロンの精製混合物、例えば、スミトモ、日本から入手できるスミフェロン、またはグラクソ−ウェルカム社、ロンドン、英国からウェルフェロン（登録商標）インターフェロンα−ｎ１（ＩＮＳ）として入手できるもの、およびインターフェロン・サイエンシズによって製造され、パーデュ・フレデリック社、コネチカット州、ノーウォークからアルフェロン(Alferon)
（登録商標）登録商標の下で入手できる天然αインターフェロンの混合物インターフェロンα−ｎ３が挙げられる。

本明細書において用語「ＩＦＮ−α」はまた、ハイブリッド型ＩＦＮ−αも包含する。本明細書において用語「ハイブリッド型ＩＦＮ−α」とは、すべての天然ヒト白血球ＩＦＮ−αサブタイプ配列に共通しているアミノ酸残基を含み、かつ、すべてのサブタイプに共通するアミノ酸がない位置の１以上に、その位置に主に現れるアミノ酸を含むが、すべてのサブタイプに共通するアミノ酸がない位置のいずれかで、ポリペプチドが少なくとも１種の天然サブタイプにも存在しないアミノ酸残基はいずれも含まない、非天然ポリペプチドを指す。すべての天然ヒト白血球ＩＦＮ−αサブタイプ配列に共通するアミノ酸残基（「共通アミノ酸残基」）および非共通残基で主に現れるアミノ酸残基（「ハイブリッドアミノ酸残基」）は当技術分野では公知である。

用語「ＩＦＮ−α」はまた、ハイブリッド型ＩＦＮ−αも包含する。ハイブリッド型ＩＦＮ−α（「ＣＩＦＮ」および「ＩＦＮ−ｃｏｎ」および「ハイブリッド型インターフェロン」とも呼ばれる）は、それだけには限らないが、米国特許第４，６９５，６２３号および同４，８９６，４７１号に開示されている、ＩＦＮ−ｃｏｎ₁、ＩＦＮ−ｃｏｎ₂およびＩＦＮ−ｃｏｎ₃と名づけられたアミノ酸配列、および天然インターフェロンαのハイ
ブリッド配列の決定によって定義されるハイブリッド型インターフェロン（例えば、インファーゲン（登録商標）、インターミューン社、カリフォルニア州、ブリスベン）を包含する。ＩＦＮ−ｃｏｎ₁は、インファーゲン（登録商標）アルファコン−１製剤中のハイ
ブリッド型インターフェロン剤である。インファーゲン（登録商標）ハイブリッド型インターフェロン製剤は、本明細書ではそのブランド名（インファーゲン（登録商標））またはその一般名（インターフェロンアルファコン−１）で呼ぶ。ＩＦＮ−ｃｏｎをコードするＤＮＡ配列は、前記の特許またはその他の標準法に記載されたように合成できる。ＣＩＦＮの使用が特に注目される。

また、本発明における使用に適したものとして、ＩＦＮ−αと異種ポリペプチドとを含んでなる融合ポリペプチドも挙げられる。適したＩＦＮ−α融合ポリペプチドとしては、それだけには限らないが、アルブフェロン−α（商標）（ヒトアルブミンとＩＦＮ−αとの融合産物、ヒューマン・ゲノム・サイエンシズ、例えば、オスボン(Osbon)ら(２００２)ジャーナル・オブ・ファーマコロジー・アンド・エクスペリメンタル・セラピューティ
クス(Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics)３０３：５４０〜５４
８頁参照)が挙げられる。また、本発明における使用に適したものとして、ＩＦＮ−αの
遺伝子組み替え型もある。例えば、マシ(masci)ら（２００３）カレント・オンコロジー
・レポーツ(Current Oncology Reports)５：１０８〜１１３頁参照。

ＩＦＮ−αポリペプチドはいずれかの公知の方法によって製造できる。ＩＦＮ−ｃｏｎをコードするＤＮＡ配列は、前記の特許またはその他の標準法に記載されたように合成できる。多数の実施形態では、ＩＦＮ−αポリペプチドは、細菌宿主、例えば、大腸菌に、または真核宿主細胞（例えば、酵母、ＣＨＯ細胞などの哺乳類細胞など）に形質転換またはトランスフェクトされた、製作したＤＮＡ配列の発現産物である。これらの実施形態では、ＩＦＮ−αは「組換えＩＦＮ−α」である。宿主細胞が細菌宿主細胞である場合には、ＩＦＮ−αはＮ末端メチオニンを含むよう修飾される。通常、大腸菌で産生されたＩＦＮ-αは、当業者に公知であり、クレイン(Klein)ら（（１９８８）ジャーナル・オブ・クロマトグラフィー(Journal of Chromatography)４５４：２０５〜２１５頁に、ＩＦＮ−
ｃｏｎ₁について概説される手順によって精製する。

細菌によって産生されたＩＦＮ−αは、Ｎ末端アミノ酸残基に関してイソ型の混合物を含んでなる場合がある。例えば、精製ＩＦＮ−ｃｏｎはＮ末端メチオニン状態に関してイソ型の混合物を含んでなる場合がある。例えば、いくつかの実施形態では、ＩＦＮ-ｃｏ
ｎはＮ末端メチオニルＩＦＮ-ｃｏｎと、Ｎ末端がブロックされていないデスメチオニル
ＩＦＮ−ｃｏｎと、Ｎ末端がブロックされているデスメチオニルＩＦＮ−ｃｏｎの混合物を含んでなる。限定するものではないが一実施例として、精製ＩＦＮ−ｃｏｎ₁は、メチ
オニルＩＦＮ−ｃｏｎ₁とデスメチオニルＩＦＮ−ｃｏｎ₁とＮ末端がブロックされているデスメチオニルＩＦＮ−ｃｏｎ₁の混合物を含んでなる。クレインら（（１９９０）アー
カイブス・オブ・バイオケミストリー・アンド・バイオフィジックス(Archives of Biochemistry and Biophysics)２７６：５３１〜５３７頁）。あるいは、ＩＦＮ-ｃｏｎは、特定の単離されたイソ型を含んでなる場合もある。ＩＦＮ−ｃｏｎのイソ型は、当業者に公知の等電点電気泳動法などの技術によって互いに分離される。

当然のことながら、本明細書に記載されるＩＦＮ−αは１以上の修飾されたアミノ酸残基、例えば、グリコシル化、化学修飾などを含み得る。

ＰＥＧ化ＩＦＮ−α
用語「ＩＦＮ−α」はまた、血清半減期などの特定の特性を変更するよう誘導体化された（例えば、化学修飾された）ＩＦＮ−αの誘導体も包含する。そのようなものとして、用語「ＩＦＮ−α」は、グリコシル化ＩＦＮ−α、ポリエチレングリコールで誘導体化されたＩＦＮ−α（「ＰＥＧ化ＩＦＮ−α」）などを含む。ＰＥＧ化ＩＦＮ−αおよびその製造方法は、例えば、米国特許第５，３８２，６５７号、同５，９８１，７０９号および同５，９５１，９７４号に論じられている。ＰＥＧ化ＩＦＮ−αはＰＥＧと前記のＩＦＮ−α分子のいずれかとのコンジュゲート、例えば、それだけには限らないが、インターフェロンα−２ａ（ロフェロン、ホフマン・ラ・ロシュ、ニュージャージー州、ナットレー）、インターフェロンα２ａ（イントロン、シェリング−プラウ、ニュージャージー州、マディソン）、インターフェロンα−２c（ベロフォアアルファ、ベーリンガー・インゲ
ルハイム、ドイツ、インゲルハイム）および天然インターフェロンαのハイブリッド配列の決定によって定義されるハイブリッド型インターフェロン(インフェルゲン（登録商標
）、インターミューン社、カリフォルニア州、ブリスベン)とのＰＥＧコンジュゲートを
包含する。

前記のＩＦＮ−αポリペプチドのいずれも、１以上のポリエチレングリコール部分を用いて修飾できる、すなわち、ＰＥＧ化できる。ＰＥＧ化ＩＦＮ−αポリペプチドのＰＥＧ分子は、ＩＦＮ−αポリペプチドの１以上のアミノ酸鎖とコンジュゲートしている。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ化ＩＦＮ−αは、ただ１個のアミノ酸上にＰＥＧ部分を含む。その他の実施形態では、ＰＥＧ化ＩＦＮ−αはＰＥＧ部分を、２以上のアミノ酸上に含む。例えば、ＩＦＮ−αは、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個の異なるアミノ酸残基と結合しているＰＥＧ部分を含む。

ＩＦＮ−αはアミノ基、スルフィドリル基、ヒドロキシル基、またはカルボキシル基を介してＰＥＧと直接(すなわち、結合基なしで)カップリングさせることができる。

いくつかの実施形態では、ＰＥＧ化ＩＦＮ−αは、ＩＦＮ−αポリペプチドのアミノ末端（Ｎ末端）で、またはその近傍でＰＥＧ化されている。例えば、ＰＥＧ部分は、アミノ酸１〜アミノ酸４の、またはアミノ酸５〜約１０の１以上のアミノ酸残基でＩＦＮ−αポリペプチドとコンジュゲートしている。

その他の実施形態では、ＰＥＧ化ＩＦＮ−αは、約１０〜約２８の１以上のアミノ酸残基でＰＥＧ化されている。

その他の実施形態では、ＰＥＧ化ＩＦＮ−αは、ＩＦＮ−αポリペプチドのカルボキシル末端（Ｃ末端）で、またはその近傍で、例えば、アミノ酸１５６〜１６６の、またはアミノ酸１５０〜１５５の１以上の残基でＰＥＧ化されている。

その他の実施形態では、ＰＥＧ化ＩＦＮ−αは、アミノ酸１００〜１１４の１以上の残基の１以上のアミノ酸残基でＰＥＧ化されている。

ポリエチレングリコールのＩＦＮ−αへの付着部位の選択は、当業者には公知であろうが、タンパク質の受容体結合および／または活性部位ドメイン内の部位の各々の役割によって決まる。一般に、ＰＥＧ化を避けるべきアミノ酸として、アミノ酸３０またはアミノ酸４０からのアミノ酸残基、およびアミノ酸１１３〜アミノ酸１４９までのアミノ酸残基が挙げられる。

いくつかの実施形態では、ＰＥＧを結合基を介してＩＦＮ−αに付着させる。結合基はいずれかの生体適合性結合基であり、ここで、「生体適合性」は、化合物または基が非毒性であり、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで傷害、病気、疾病または死亡を引き起こすことなく利用できることを示す。ＰＥＧは、例えば、エーテル結合、エステル結合、チオール結合またはアミド結合によって結合基と結合できる。適した生体適合性結合基としては、それだけには限らないが、エステル基、アミド基、イミド基、カルバメート基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、炭水化物、スクシンイミド基（例えば、スクシンイミジルスクシネート（ＳＳ）、プロピオン酸スクシンイミジル（ＳＰＡ）、スクシンイミジルカルボキシメチレート（ＳＣＭ）、スクシンイミジルスクシンアミド（ＳＳＡ）またはＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）を含む）、エポキシド基、オキシカルボニルイミダゾール基（例えば、カルボニルジミダゾール(ＣＤＩ)を含む）、ニトロフェニル基、（例えば、ニトロフェニルカルボネート（ＮＰＣ）またはトリクロロフェニルカルボネート（ＴＰＣ）を含む）、トリシレート基、アルデヒド基、イソシアネート基、ビニルスルホン基、チロシン基、システイン基、ヒスチジン基または第一アミンが挙げられる。

プロピオン酸スクシンイミジル（ＳＰＡ）およびスクシンイミジルブタノエート（ＳＢＡ）エステル活性化ＰＥＧの製造方法は、米国特許第５，６７２，６６２号（ハリス(Harris)ら）およびＷＯ９７／０３１０６に記載されている。

ＰＥＧのＩＦＮ−αポリペプチドへの付着方法は、当技術分野では公知であり、いずれの公知の方法も使用できる。例えば、パーク(Park)らによるアンチキャンサー・リサーチ(Anticancer Research)１：３７３〜３７６頁（１９８１）、ザプリプスキー(Zaplipsky)およびリー(Lee)、ポリエチレングリコール・ケミストリー(Polyethylene Glycol Chemistry)：バイオテクニカル・アンド・バイオメディカル・アプリケーションズ(Biotechnical and Biomedical Applications)、Ｊ．Ｍ．ハリス(Harris)編、プレナムプレス(Plenum Press)、ＮＹ、２１章（１９９２）、および米国特許第５，９８５，２６５号、同５，６７２，６６２号（ハリスら）、およびＷＯ９７／０３１０６参照。

ポリエチレングリコール修飾されたＩＦＮ−α、およびその製造方法は、例えば、米国特許第５，３８２，６５７号、同５，９８１，７０９号、同５，９８５，２６５号および同５，９５１，９７４号に論じられている。ポリエチレングリコール修飾されたＩＦＮ−αは、ＰＥＧと前記のいずれかのＩＦＮ−α分子とのコンジュゲート、例えば、それだけには限らないが、ＰＥＧがインターフェロンα−２ａ（ロフェロン、ホフマン・ラ・ロシュ、ニュージャージー州、ナットレー）とコンジュゲートしたもの（ＰＥＧ化ロフェロンはペガシス（登録商標）（ホフマン・ラ・ロシュ）として知られている）、インターフェロンα２ｂ（イントロン、シェリング・プラウ、ニュージャージー州、マディソン）とコンジュゲートしたもの（ＰＥＧ化イントロンはペグ−イントロン（登録商標）（シェリング・プラウ）として知られている）、インターフェロンα−２ｃ（ベロフォア・アルファ、ベーリンガー・インゲルハイム、ドイツ、インゲルハイム）とコンジュゲートしたもの、および天然インターフェロンαのハイブリッド配列の決定によって定義されるハイブリッド型インターフェロン（ＣＩＦＮ）（インファーゲン、アムゲン、カリフォルニア州、サウザンドオークス）とコンジュゲートしたもの（ＰＥＧ化インファーゲンはペグ−インファーゲン（登録商標）と呼ばれる）を包含する。

通常、ＰＥＧ部分は表面に露出したリジン（「ｌｙｓ」）残基と結合している。リジンが表面に露出しているかどうかはいずれかの公知の方法を用いて調べることができる。通常、当業者に周知の適当なコンピュータプログラムを用いて、親水性の解析（例えば、カイト(kyte)−ドゥーリトル(Doolitle)およびホッペ(Hoppe)−ウッズ(Woods)解析）および／または予想される表面形成領域の解析（例えば、エミニ(Emini)表面形成可能性の解析
）を実施する。適したコンピュータプログラムとしては、ペプチドストラクチャー(PeptideStructure)などが挙げられる。あるいは、ＮＭＲ研究によって、スペクトルにおける具体的な官能基の水素イオンのケミカルシフトに基づいて表面に到達できる残基を同定することができる。その他の場合では、蛍光によって、残基の溶媒または環境への近づきにくさまたは近づきやすさを評価できる。さらにその他の場合では、近づきやすいリジンの表面露出を、水溶性試薬、例えば、トリニトロベンゼンスルホネートまたはＴＮＢＳとの化学反応性、および同様の測定結果によって確認することができる。

多数の実施形態では、ＰＥＧは、ＩＦＮ−αポリペプチド上の第一アミン基と反応するモノメトキシＰＥＧ分子である。還元的アルキル化によってモノメトキシＰＥＧでポリペプチドを修飾する方法が当技術分野で知られている。例えば、チャモウ(Chamow)ら（１９９４）バイオコンジュゲート・ケミストリー(Bioconjugate Chemistry)５：１３３〜１４０頁参照。

多数の実施形態では、ＰＥＧは、ＩＦＮ−αポリペプチド上の第一アミン基と反応するモノメトキシＰＥＧ分子である。還元的アルキル化によってモノメトキシＰＥＧでポリペ
プチドを修飾する方法が当技術分野で知られている。例えば、チャモウ(Chamow)ら（１９９４）バイオコンジュゲート・ケミストリー(Bioconjugate Chemistry)５：１３３〜１４０頁参照。

限定するものではないが一実施例では、ＰＥＧはＳＰＡ結合基を介してＩＦＮ−αと結合している。ＰＥＧのＳＰＡエステルおよびその製造方法は米国特許第５，６７２，６６２号に記載されている。ＳＰＡ結合はＩＦＮ−αポリペプチド上の遊離アミン基との結合を提供する。

例えば、ＰＥＧ分子はＰＥＧ部分のプロピオニル基とＩＦＮ−αポリペプチド中の表面に露出したリジン残基のεアミノ基間のアミド結合を含んでなる結合を介して共有結合している。かかる結合は、例えば、ＰＥＧのα-メトキシ、ωプロパノン酸活性化エステル
（ｍＰＥＧｓｐａ）の縮合によって形成できる。

いくつかの実施形態では、ＰＥＧ化ＩＦＮ−αはモノＰＥＧ化ＩＦＮ−αである。その他の実施形態では、モノＰＥＧ化ＩＦＮ−αは、ＩＦＮ−αポリペプチドのリジン残基またはＮ末端アミノ酸残基を介して単一のＰＥＧ部分と共有結合しているＩＦＮ−αポリペプチドである。その他の実施形態では、モノＰＥＧ化ＩＦＮ−αは、ＩＦＮ−αポリペプチドのリジン残基のε−アミノ基かα−アミノ基のいずれかとＰＥＧ部分の活性化カルボキシル基との間のアミド結合を介して単一のＰＥＧ部分と共有結合しているＩＦＮ−αポリペプチドである。その他の実施形態では、モノＰＥＧ化ＩＦＮ-αは、単一の直鎖ＰＥ
Ｇ部分と共有結合しているＩＦＮ-αポリペプチドである。その他の実施形態では、モノ
ＰＥＧ化ＩＦＮ−αは、単一の直鎖３０ｋＤａのＰＥＧ部分と共有結合しているＩＦＮ−αポリペプチドである。その他の実施形態では、モノＰＥＧ化ＩＦＮ−αは、ＩＦＮ−αポリペプチドのリジン残基のε−アミノ基またはα-アミノ基とＰＥＧ部分の活性化カル
ボキシル基との間のアミド結合を介して単一の直鎖３０ｋＤａのＰＥＧ部分と共有結合しているＩＦＮ-αポリペプチドである。その他の実施形態では、モノＰＥＧ化ＩＦＮ−α
は、ＩＦＮ−αポリペプチドのリジン残基のε−アミノ基またはα-アミノ基とＰＥＧ部
分の活性化プロピオニル基との間のアミド結合を介して単一の直鎖３０ｋＤａのＰＥＧと共有結合しているＩＦＮ−αポリペプチドである。その他の実施形態では、モノＰＥＧ化ＩＦＮ−αは、単一の直鎖モノメトキシ−ＰＥＧ（ｍＰＥＧ）と共有結合しているＩＦＮ−αポリペプチドである。その他の実施形態では、モノＰＥＧ化ＩＦＮ−αは、ＩＦＮ−αポリペプチドと直鎖プロピオン酸スクシンイミジルエステル活性化３０ｋＤのｍＰＥＧとの間の縮合反応の産物である。ＰＥＧ化ＩＦＮ−αを用いる前記の方法のいずれにおいても、ＩＦＮ−αポリペプチドはハイブリッド型インターフェロン（ＣＩＦＮ）ポリペプチドであり得る。ＰＥＧ化ＩＦＮ−αを用いる前記の方法のいずれにおいても、ＩＦＮ−αポリペプチドは、インターフェロンアルファコン−１であるＣＩＦＮポリペプチドであり得る。

いくつかの実施形態では、ＰＥＧ化ＩＦＮ−αはリジン残基のεアミノ基でのＣＩＦＮ
ＰＥＧ化を含んでなる。

限定するものではないが一実施例として、本明細書における使用に好ましい一モノポリエチレングリコール修飾ＣＩＦＮコンジュゲートは、共有結合を介してＣＩＦＮポリペプチドに付着している約３０ｋＤの直鎖ＰＥＧ部分を含み、ここで、共有結合はＰＥＧ部分のプロピオニル基とＣＩＦＮポリペプチド中の表面に露出したリジン残基のεアミノ基との間のアミド結合であり、表面に露出したリジン残基はｌｙｓ³¹、ｌｙｓ⁵⁰、ｌｙｓ⁷¹、ｌｙｓ⁸⁴、ｌｙｓ¹²¹、ｌｙｓ¹²²、ｌｙｓ¹³⁴、ｌｙｓ¹³⁵、およびｌｙｓ¹⁶⁵から選択さ
れ、アミド結合はＰＥＧのα−メトキシ、ωプロパノン酸活性化エステルの縮合によって形成される。

ポリエチレングリコール
ＩＦＮ−αポリペプチドへのコンジュゲーションに適したポリエチレングリコールは、室温で水溶性であり、一般式Ｒ（Ｏ−ＣＨ₂−ＣＨ₂）_nＯ−Ｒ（式中、Ｒは水素または保
護基、例えば、アルキルまたはアルカノール基であり、ｎは１〜１０００の整数である）を有する。Ｒは保護基であり、通常、１〜８個の炭素を含む。

多数の実施形態では、ＰＥＧは少なくとも１個のヒドロキシル基、例えば、末端ヒドロキシル基を含み、このヒドロキシル基を修飾して、アミノ基、例えば、リジン残基のεアミノ基、ポリペプチドのＮ末端の遊離アミノ基、または他のいずれかのアミノ基、例えば、アスパラギン、グルタミン、アルギニンまたはヒスチジンのアミノ基と反応性である官能基を作製する。

その他の実施形態では、ＰＥＧを、ＩＦＮ−αポリペプチド中の遊離カルボキシル基、例えば、ＩＦＮ−αポリペプチドのカルボキシル末端の遊離カルボキシル基と反応性であるよう誘導体化する。ＩＦＮ−αのカルボキシ末端の遊離カルボキシル基と反応性であるＰＥＧの適した誘導体としては、それだけには限らないが、ＰＥＧ−アミン、およびＰＥＧのヒドラジン誘導体（例えば、ＰＥＧ−ＮＨ−ＮＨ₂）が挙げられる。

その他の実施形態では、ＰＥＧを、アミノ基と選択的に反応してアミド誘導体を生じる末端チオカルボン酸基、−ＣＯＳＨを含んでなるよう誘導体化する。チオ酸の反応性のために、特定のアミノ基の他のものを超える選択性が達成される。例えば、−ＳＨは適当なｐＨ条件でのＮ末端アミノ基との反応において十分な脱離基能を示し、その結果、リジン残基中のε-アミノ基がプロトン化され非求核性のままとなる。他方、適したｐＨ条件下
での反応により、到達可能なリジン残基の一部を選択的に反応させることもできる。

その他の実施形態では、ＰＥＧはＰＥＧ鎖の末端に反応性エステル、例えば、Ｎ-ヒド
ロキシスクシンイミデートを含んでなる。かかるＮ−ヒドロキシスクシンイミデート含有ＰＥＧ分子は、特定のｐＨ条件、例えば、中性の６．５〜７．５で、選択されたアミノ基と反応する。例えば、中性のｐＨ条件下ではＮ末端アミノ基が選択的に修飾される。しかし、試薬の反応性が極端な場合には、リジンの到達可能なＮＨ₂基も反応する場合がある
。

ＰＥＧはＩＦＮ−αポリペプチドと直接コンジュゲートさせてもよいし、リンカーを介してもよい。いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−αポリペプチドにリンカーを加え、リンカー修飾されたＩＦＮ−αポリペプチドを形成する。かかるリンカーは、ＰＥＧ試薬をリンカー修飾されたＩＦＮ−αポリペプチドへカップリングさせるための種々の官能性、例えば、スルフィドリル、アミノ、またはカルボキシル基といった反応基を提供する。

いくつかの実施形態では、ＩＦＮ−αポリペプチドにコンジュゲートされたＰＥＧは直鎖である。その他の実施形態では、ＩＦＮ−αポリペプチドにコンジュゲートされたＰＥＧは分岐している。米国特許第５，６４３，５７５号に記載されたものなどの分岐ＰＥＧ誘導体、「スターＰＥＧ類」およびシェアウォーター・ポリマー(Shearwater Polymer)社カタログ「ポリエチレングリコール誘導体１９９７〜１９９８」に記載されたものなどのマルチアームＰＥＧ類。スターＰＥＧ類は当技術分野では、例えば、米国特許第６，０４６，３０５号に記載されている。

通常、分子量が約２ｋＤａ〜約１００ｋＤａの範囲のＰＥＧを用い、ここで、用語「約」はＰＥＧの関連では、ポリエチレングリコールの調製では、いくらかの分子は規定の分子量よりも重く、いくらかは軽くなることを示す。例えば、ＩＦＮ−αへのコンジュゲー
ションに適したＰＥＧの分子量は、約２ｋＤａ〜約５ｋＤａ、約５ｋＤａ〜約１０ｋＤａ、約１０ｋＤａ〜約１５ｋＤａ、約１５ｋＤａ〜約２０ｋＤａ、約２０ｋＤａ〜約２５ｋＤａ、約２５ｋＤａ〜約３０ｋＤａ、約３０ｋＤａ〜約４０ｋＤａ、約４０ｋＤａ〜約５０ｋＤａ、約５０ｋＤａ〜約６０ｋＤａ、約６０ｋＤａ〜約７０ｋＤａ、約７０Ｄａ〜約８０ｋＤａ、約８０ｋＤａ〜約９０ｋＤａ、または約９０ｋＤａ〜約１００ｋＤａである。

ＰＥＧ−ＩＦＮ−αコンジュゲートの調製
前記で論じたように、ＰＥＧ部分は、ＩＦＮ−αポリペプチドのＮ末端のもしくはその近傍の、内部の、またはＣ末端のもしくはその近傍のアミノ酸残基に直接付着させてもよいし、リンカーを介してもよい。コンジュゲーションは溶液中で、または固相で実施できる。

Ｎ末端結合
ＰＥＧ部分の、ＩＦＮ−αポリペプチドのＮ末端のまたはその近傍のアミノ酸残基への付着方法は当技術分野では公知である。例えば、米国特許第５，９８５，２６５号参照。

いくつかの実施形態では、Ｎ末端で化学修飾されたＩＦＮ−αを選択的に獲得するための公知の方法を用いている。例えば、特定のタンパク質における誘導体化のために利用できる、種々の種類の第一アミノ基の反応性差異（リジン対Ｎ末端）を活用する還元的アルキル化によるタンパク質修飾法を使用できる。適当な反応条件下で、タンパク質のＮ末端での、カルボニル基含有ポリマーでの実質的に選択的な誘導体化が達成される。この反応は、タンパク質のリジン残基のε−アミノ基とＮ末端残基のα−アミノ基のそれとの間のｐＫａの差を利用できるｐＨで実施する。かかる選択的誘導体化によって、ＰＥＧ部分のＩＦＮ−αへの付着を制御する。ポリマーを用いるコンジュゲーションは、大部分ＩＦＮ−αのＮ末端で起こり、他の反応基、例えば、リジン側鎖アミノ基の有意な修飾は全く起こらない。

Ｃ末端結合
米国特許第５，９８５，２６５号に記載されたものなどのＮ末端特異的カップリング手順により、主にモノＰＥＧ化産物が得られる。しかし、過剰の試薬および微量の複数ＰＥＧ化産物の除去を目的とした精製手順により、Ｎ末端がブロックされたポリペプチドが除去される。治療において、かかる方法は製造コストの有意な増加をもたらす。例えば、十分に特性決定されたインファーゲン（登録商標）アルファコン−１ＣＩＦＮポリペプチドアミノ酸配列の構造を調べると、短縮形はカルボキシル末端で約５％であり、したがって、１つの主要なＣ末端配列しかないとわかる。したがって、いくつかの実施形態では、Ｎ末端ＰＥＧ化ＩＦＮ−αを用いず、代わりに、ＩＦＮ−αポリペプチドをＣ末端ＰＥＧ化する。

したがって、モノＰＥＧ化インファーゲン製品を得るための有効な合成ならびに治療アプローチは、以下のように想定される。

Ｃ末端に選択的であるＰＥＧ試薬は、スペーサーを含めて調製しても含めなくともよい。例えば、一方の末端でメチルエーテルのように修飾され、もう一方の末端でアミノ官能基を有するポリエチレングリコールを出発材料として使用できる。

縮合剤としての水溶性カルボジイミドの調製または獲得を実施できる。ＩＦＮ−α（例えば、インファーゲン（登録商標）アルファコン−１ＣＩＦＮまたはハイブリッド型インターフェロン）の、縮合試薬としての水溶性カルボジイミドとのカップリングは、通常、適したバッファー系を用いて、最適ｐＨで水性媒質中で実施し、アミド結合を達成する。
高分子量ＰＥＧを、共有結合によってタンパク質に付加し、分子量を高めることもできる。

選択される試薬は、プロセス最適化研究に応じて変わる。限定されるものではないが適した試薬の一実施例として、ＥＤＡＣまたは１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドがある。ＥＤＡＣの水溶性により、先に有機溶媒に溶解する必要がなく、反応物に直接加えることができる。過剰の試薬および架橋反応の副産物として形成されるイソ尿素は双方とも水溶性であり、透析またはゲル濾過によって容易に除去できる。ＥＤＡＣの濃縮水溶液を調製することで反応物への少ないモル量の添加が容易になる。保存溶液を調製し、試薬の水に不安定な性質を考慮して直ちに使用する。文献の合成プロトコールのほとんどは最適反応媒質のｐＨ範囲は４．７〜６．０の間であると示唆している。しかし、縮合反応はｐＨ７．５までは収量の有意な損失なしでは進行する。水を溶媒として使用できる。インファーゲンの使用を考慮すると、媒質は予めｐＨ４．７〜６．０の間に滴定した２-(Ｎ-モルホリノ）エタンスルホン酸バッファーとすることが好ましい
。しかし、生成物が同バッファー中にあるという事実を考慮すると、ｐＨ７〜７．５で０．１Ｍリン酸を使用してもよい。ＰＥＧアミンとＩＦＮ−α分子の比は、Ｃ末端カルボキシル残基が選択的にＰＥＧ化されてモノＰＥＧ化誘導体が得られるように最適化する。

前記で、名称または構造によってＰＥＧアミンの使用について言及したが、かかる誘導体は単に例示的なものであって、ＰＥＧ−ＮＨ−ＮＨ₂におけるヒドラジン誘導体などの
、同様にＩＦＮ−αタンパク質のカルボキシル基と縮合する他の基も使用できる。反応は、水相の他、固相でも実施できる。ポリエチレングリコールは分子量が３００〜４０００の範囲の化合物の一覧から選択できる。種々のポリエチレングリコールの選択はまた、カップリング効率および精製された誘導体のｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏでの生物学的性能、すなわち、循環時間、抗ウイルス活性などによって決定される。

さらに、適したスペーサーをタンパク質のＣ末端に付加してもよい。スペーサーはＳＨ、ＮＨ₂またはＣＯＯＨなどの反応基を含み、適当なＰＥＧ試薬とカップリングして高分
子量ＩＦＮ−α誘導体を提供できる。Ｃ末端ポリエチレングリコール修飾されたインターフェロンの調製のために、組合せた固相／溶相法を考案することができる。例えば、ＩＦＮ−αのＣ末端をＧｌｙ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−ＮＨ₂スペーサーを用いて固相で延長し、次
いで、溶液中で適当な分子量の活性化ジチオピリジル−ＰＥＧ試薬を用いてモノポリエチレングリコール修飾する。Ｃ末端でのカップリングはＮ末端のブロッキングとは独立しているので、想定したプロセスおよび生成物は費用に関して有益であり（Ｎ末端ＰＥＧ化法におけるようにタンパク質の３分の１が無駄にならない）、慢性Ｃ型肝炎感染、肝線維症などを治療する治療の経済に貢献する。

分子中の他の場所に、より反応性であるアミノ酸残基のカルボキシル基があり、ＰＥＧ試薬と反応してその部位でモノＰＥＧ化をもたらしたり、ＩＦＮ−αのＣ末端の−ＣＯＯＨ基の他に複数ＰＥＧ化をもたらす場合がある。これらの反応は、分子のＣ末端での立体的自由ならびに分岐鎖分子におけるようなカルボジイミドおよびＰＥＧ試薬によって強いられる立体障害により可能な限り最小となると考えられる。したがって、天然、または宿主系で発現され、さまざまな程度にＮ末端がブロックされていることもある、インファーゲンおよびかかるタンパク質の類似物に対するＰＥＧ修飾の好ましい様式は、効率を改良し、かつ、高いｉｎ ｖｉｖｏ生物活性を維持することである。

Ｃ末端ＰＥＧ化を達成するもう一つの方法は以下のとおりである。Ｃ末端ＰＥＧ化の選択性は、ＩＦＮ−αのらせん体または内部のいずれかに埋まったカルボキシル残基での反応を排除する立体障害試薬を用いて達成される。例えば、このような試薬の一種は分子量〜４０ｋｄの分岐鎖ＰＥＧであり得、この薬剤は以下のように合成できる。

ＯＨ₃Ｃ−（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_n−ＣＨ₂ＣＨ₂ＮＨ₂＋グルタミン酸、すなわち、ＨＯＣＯ
−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ（ＮＨ₂）−ＣＯＯＨを適した薬剤、例えば、ジシクロヘキシルカルボ
ジイミドまたは水溶性ＥＤＣを用いて縮合して分岐鎖ＰＥＧ剤ＯＨ₃Ｃ−（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ
）_n−ＣＨ₂ＣＨ₂ＮＨＣＯＣＨ（ＮＨ₂）ＣＨ₂ＯＣＨ₃−（ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）_n−ＣＨ₂ＣＨ₂
ＮＨＣＯＣＨ₂を得る。

この試薬を過剰に用いてアミノ基をＩＦＮ−αの遊離およびフレキシブルなカルボキシル基とカップリングしてペプチド結合を形成できる。

必要に応じて、それだけには限らないが、イオン交換クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、およびその組合せをはじめとするいずれかの公知の方法用いてＰＥＧ化ＩＦＮ−αを、非ＰＥＧ化ＩＦＮ−αと分離する。例えば、ＰＥＧ−ＩＦＮ−αコンジュゲートがモノＰＥＧ化ＩＦＮ−αである場合には、生成物をまず、イオン交換クロマトグラフィーによって分離してモノＰＥＧ化物質の電荷特性を有する物質を得（同一の見かけの電荷を有する他の複数ＰＥＧ化物質が存在する場合もある）、次いで、モノＰＥＧ化物質をサイズ排除クロマトグラフィーを用いて分離する。

ＩＦＮ−αの混合集団
いくつかの実施形態では、投与するＩＦＮ−αは、ＰＥＧ化ＩＦＮ−αポリペプチドと非ＰＥＧ化ＩＦＮ−αポリペプチドとを含んでなるＩＦＮ−αポリペプチドの集団である。通常、ＰＥＧ化ＩＦＮ−α種が、集団中のＩＦＮαポリペプチド分子の全集団の約０．５％〜約９９．５％に相当する。例えば、所与のＰＥｇ化ＩＦＮ−α種が集団中のＩＦＮ−αポリペプチド分子の全集団の約０．５％、約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％、または約９９．５％に相当する。

ＩＦＮ−β
用語インターフェロン−β（「ＩＦＮ-β」）は、天然、非天然ＩＦＮ−βポリペプチ
ドであるＩＦＮ−βポリペプチド、ならびに親の天然または非天然ＩＦＮ−βの抗ウイルス活性を保持する天然または非天然ＩＦＮ−βの類似体および変異体を含む。

種々のβインターフェロンのいずれも主題併用療法に使用できる。適したβインターフ
ェロンとしては、それだけには限らないが、天然ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−β１ａ、例えば、アボネックス（登録商標）（バイオジェン社）およびレビフ（登録商標）（セロノ社）、ＩＦＮ−β１ｂ（ベタセロン（登録商標）；ベルレックス）などが挙げられる。

ＩＦＮ−β製剤は、Ｎ末端アミノ酸がアシル基、例えば、ホルミル基、アセチル基、マロニル基などでアシル化されているＮブロック種を含む場合もある。また、ハイブリッドＩＦＮ−βの使用も適している。

ＩＦＮ−βポリペプチドは公知の方法であればいずれで製造してもい。ＩＦＮ−βをコードするＤＮＡ配列は標準法を用いて合成できる。多数の実施形態では、ＩＦＮ−βポリペプチドは、細菌宿主、例えば、大腸菌に、または真核宿主細胞（例えば、酵母、ＣＨＯ細胞などの哺乳類細胞など）に形質転換またはトランスフェクトされた、製作したＤＮＡ配列の発現産物である。これらの実施形態では、ＩＦＮ−βは「組換えＩＦＮ−β」である。宿主細胞が細菌宿主である場合には、ＩＦＮ−βはＮ末端メチオニンを含んでなるよう修飾される。

当然のことながら、本明細書に記載されるＩＦＮ−βは１以上の修飾されたアミノ酸残基、例えば、グリコシル化、化学修飾などを含み得る。

ＩＦＮ−τ
用語インターフェロン−τは、天然、非天然ＩＦＮ−τポリペプチドであるＩＦＮ−τポリペプチド、ならびに親の天然または非天然ＩＦＮ−τの抗ウイルス活性を保持する天然または非天然ＩＦＮ−τの類似体および変異体を含む。

適したτインターフェロンとしては、それだけには限らないが、天然ＩＦＮ−τ；タウフェロン(Tauferon)（登録商標）（ペプジェン(Pepgen)社）などが挙げられる。

ＩＦＮ-τは、ジェンバンク受託番号Ｐ１５６９６、Ｐ５６８２８、Ｐ５６８３２、Ｐ
５６８２９、Ｐ５６８３１、Ｑ２９４２９、Ｑ２８５９５、Ｑ２８５９４、Ｓ０８０７２、Ｑ０８０７１、Ｑ０８０７０、Ｑ０８０５３、Ｐ５６８３０、Ｐ２８１６９、Ｐ２８１７２、およびＰ２８１７１のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含んでなる場合もある。いずれかの公知のＩＦＮ−τポリペプチドの配列を、当技術分野で公知の種々の方法で変更して、配列中に目標とされた変化を作製してもよい。通常、変異体ポリペプチドは本明細書に提供された配列と実質的に同様である。すなわち、少なくとも１個のアミノ酸で異なる。また少なくとも２個であるが多くとも約１０個のアミノ酸で異なる場合もある。配列変化は置換、挿入または欠失であり得る。通常、保存的アミノ酸置換としては、以下の基内での置換が挙げられる（グリシン、アラニン）、（バリン、イソロイシン、ロイシン）、（アスパラギン酸、グルタミン酸）、（アスパラギン、グルタミン）、（セリン、スレオニン）、(リジン、アルギニン)、または(フェニルアラニン、チロシン)。

注目する修飾としては、一次アミノ酸配列を変更する場合もしない場合もあるが、ポリペプチドの化学誘導体化、例えば、アセチル化、またはカルボキシル化；グリコシル化部位を導入するか除去するアミノ酸配列の変更；タンパク質をＰＥＧ化を受けやすくするアミノ酸配列の変更などが挙げられる。また、グリコシル化の修飾、例えば、ポリペプチドの合成およびプロセシングの際に、またはさらなるプロセシングステップにおいて、例えば、ポリペプチドをグリコシル化に影響を及ぼす酵素、例えば、哺乳類グリコシル化または脱グリコシル化酵素に曝露することによって、そのグリコシル化パターンを修飾することによってなされるものも含まれる。また、リン酸化アミノ酸残基、例えば、ホスホチロシン、ホスホセリンまたはホスホスレオニンを含む配列も包含される。

ＩＦＮ−τ製剤は、Ｎ末端アミノ酸がアシル基、例えば、ホルミル基、アセチル基、マロニル基などでアシル化されているＮブロック種を含む場合もある。また、ハイブリッドＩＦＮ−τの使用も適している。

ＩＦＮ−τポリペプチドは公知の方法であればいずれで製造してもい。ＩＦＮ−τをコードするＤＮＡ配列は標準法を用いて合成できる。多数の実施形態では、ＩＦＮ−τポリペプチドは、細菌宿主、例えば、大腸菌に、または真核宿主細胞（例えば、酵母、ＣＨＯ細胞などの哺乳類細胞など）に形質転換またはトランスフェクトされた、製作したＤＮＡ配列の発現産物である。これらの実施形態では、ＩＦＮ−τは「組換えＩＦＮ−τ」である。宿主細胞が細菌宿主である場合には、ＩＦＮ−τはＮ末端メチオニンを含んでなるよう修飾される。

当然のことながら、本明細書に記載されるＩＦＮ−τは１以上の修飾されたアミノ酸残基、例えば、グリコシル化、化学修飾などを含み得る。

ＩＦＮ−ω
用語インターフェロン−ω（「ＩＦＮ-ω」）は、天然、非天然ＩＦＮ−ωポリペプチ
ドであるＩＦＮ−ωポリペプチド、ならびに親の天然または非天然ＩＦＮ−ωの抗ウイルス活性を保持する天然または非天然ＩＦＮ−ωの類似体および変異体を含む。

公知のωインターフェロンのいずれも主題併用療法に使用できる。適したＩＦＮ−ωとしては、それだけには限らないが、天然ＩＦＮ−ω、組換えＩＦＮ−ω、例えば、バイオメッド(Biomed)５１０（バイオメディシン）などが挙げられる。

ＩＦＮ−ωは、ジェンバンク受託番号ＮＰ＿００２１６８、またはＡＡＡ７００９に記載されるアミノ酸配列を含んでなる場合もある。いずれかの公知のＩＦＮ−ωポリペプチドの配列を、当技術分野で公知の種々の方法で変更して、配列中に目標とされた変化を作製してもよい。通常、変異体ポリペプチドは本明細書に提供された配列と実質的に同様である。すなわち、少なくとも１個のアミノ酸で異なる。また少なくとも２個であるが多くとも約１０個のアミノ酸で異なる場合もある。配列変化は置換、挿入または欠失であり得る。通常、保存的アミノ酸置換としては、以下の基内での置換が挙げられる（グリシン、アラニン）、（バリン、イソロイシン、ロイシン）、（アスパラギン酸、グルタミン酸）、（アスパラギン、グルタミン）、（セリン、スレオニン)、(リジン、アルギニン)、ま
たは(フェニルアラニン、チロシン)。

注目する修飾としては、一次アミノ酸配列を変更する場合もしない場合もあるが、ポリペプチドの化学誘導体化、例えば、アセチル化、またはカルボキシル化；グリコシル化部位を導入するか除去するアミノ酸配列の変更；タンパク質をＰＥＧ化を受けやすくするアミノ酸配列の変更などが挙げられる。また、グリコシル化の修飾、例えば、ポリペプチドの合成およびプロセシングの際に、またはさらなるプロセシングステップにおいて、例えば、ポリペプチドをグリコシル化に影響を及ぼす酵素、例えば、哺乳類グリコシル化または脱グリコシル化酵素に曝露することによって、そのグリコシル化パターンを修飾することによってなされるものも含まれる。また、リン酸化アミノ酸残基、例えば、ホスホチロシン、ホスホセリンまたはホスホスレオニンを含む配列も包含される。

ＩＦＮ−ω製剤は、Ｎ末端アミノ酸がアシル基、例えば、ホルミル基、アセチル基、マロニル基などでアシル化されているＮブロック種を含む場合もある。また、ハイブリッドＩＦＮ−ωの使用も適している。

ＩＦＮ−ωポリペプチドは公知の方法であればいずれで製造してもい。ＩＦＮ−ωをコ
ードするＤＮＡ配列は標準法を用いて合成できる。多数の実施形態では、ＩＦＮ−ωポリペプチドは、細菌宿主、例えば、大腸菌に、または真核宿主細胞（例えば、酵母、ＣＨＯ細胞などの哺乳類細胞など）に形質転換またはトランスフェクトされた、製作したＤＮＡ配列の発現産物である。これらの実施形態では、ＩＦＮ−ωは「組換えＩＦＮ−ω」である。宿主細胞が細菌宿主である場合には、ＩＦＮ−ωはＮ末端メチオニンを含んでなるよう修飾される。

当然のことながら、本明細書に記載されるＩＦＮ−ωは１以上の修飾されたアミノ酸残基、例えば、グリコシル化、化学修飾などを含み得る。

ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト
ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストとしては、ヒトＩＩ型インターフェロン受容体の天然または非天然リガンドが挙げられ、これは受容体と結合し、これを介したシグナル伝達を引き起こす。ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストとしては、天然インターフェロン、修飾インターフェロン、合成インターフェロン、ポリエチレングリコール修飾されたインターフェロンをはじめとするインターフェロン、インターフェロンと異種タンパク質とを含んでなる融合タンパク質、組み替えインターフェロン；インターフェロン受容体に特異的な抗体；非ペプチド化学アゴニスト；などが挙げられる。

ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストの具体例としては、ＩＦＮ−γおよびその変異体がある。本発明はＩＦＮ−γポリペプチドの使用を例示するが、どのＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストも主題方法に使用できることは明らかである。

インターフェロン−γ
ＩＦＮ−γポリペプチドをコードする核酸配列は、公共のデータベース、例えば、ジェンバンク、学術誌などから入手できる。種々の哺乳類ＩＦＮ−γポリペプチドが注目されるが、ヒト疾患の治療には、一般にヒトタンパク質を用いる。ヒトＩＦＮ−γコード配列は、ジェンバンク、受託番号Ｘ１３２７４、Ｖ００５４３、およびＮＭ＿０００６１９に見出せる。対応するゲノム配列は、ジェンバンク、受託番号Ｊ００２１９、Ｍ３７２６５、およびＶ００５３６に見出せる。例えば、グレイ(gray)ら（１９８２）ネイチャー(Nature)２９５：５０１頁（ジェンバンクＸ１３２７４）、およびリンダークネヒト（Rinderknecht）ら（１９８４）ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー(Journal of Biological Chemistry)２５９：６７９０頁参照。

ＩＦＮ−γ１ｂ（アクティミューン（登録商標）、ヒトインターフェロン）は１４０個のアミノ酸からなる単鎖ポリペプチドである。これは大腸菌で組換え作出され、非グリコシル化されたものである。リンダークネヒトら（１９８４）ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー２５９：６７９０〜６７９７頁。米国特許第６，４９７，８７１号に議論されるように組換えＩＦＮ−γもまた本明細書における使用に適している。

本発明の方法に用いるＩＦＮ−γは、それらがＩＦＮ−γ活性、特にヒトＩＦＮ−γ活性を有する限り、天然ＩＦＮ−γ、組換えＩＦＮ−γおよびその誘導体のいずれであってもよい。ヒトＩＦＮ−γは、インターフェロンの特徴である抗ウイルスおよび抗増殖特性、ならびに当技術分野で公知のいくつかのその他の免疫調節活性を示す。ＩＦＮ−γは前記の配列に基づいているが、タンパク質の製造およびタンパク質分解プロセシングは、そのプロセシング変異体をもたらし得る。グレイら（上記）提供のプロセシングされていない配列は１６６個のアミノ酸（ａａ）からなる。大腸菌で産生された組換えＩＦＮ−γははじめ１４６個アミノ酸（アミノ酸２０で開始する）であると考えられていたが、その後、天然ヒトＩＦＮ−γが残基２３の後で切断されて、１４３個ａａタンパク質を、または細菌での発現に必要な末端メチオニンが存在する場合は１４４個ａａを産生することが見
出された。精製中、成熟タンパク質は残基１６２の後のＣ末端でさらに切断され（グレイら、配列参照）、１３９個アミノ酸、または開始メチオニンが存在する場合は、例えば、細菌の発現に必要であれば、１４０個アミノ酸のタンパク質となり得る。Ｎ末端メチオニンは、大腸菌発現という特定の場合にはプロセシングによって取り除かれない、ｍＲＮＡ翻訳「開始」シグナルＡＵＧによってコードされる人為的産物である。その他の微生物系または真核生物発現系では、メチオニンは除去され得る。

主題方法での使用には、天然ＩＦＮ−γペプチド、その修飾形および変異体、または１以上のペプチドの組合せのいずれも使用できる。注目するＩＦＮ−γペプチドとして断片が挙げられ、これは完全な配列と比較してカルボキシル末端で様々に末端切断されたものであり得る。かかる断片は、アミノ酸２４〜約１４９（プロセシングされていないポリペプチドの残基から番号付けして）が存在する限りヒトγインターフェロンの特徴的性質を示し続ける。外来の配列は、アミノ酸１５５の次のアミノ酸配列と、活性を損なわずに置換することができる。例えば、米国特許第５，６９０，９２５号参照。天然ＩＦＮ−γ部分は、アミノ酸残基２４〜１５０、２４〜１５１、２４〜１５２、２４〜１５３、２４〜１５５および２４〜１５７と様々に広がる分子を含む。これらの変異体、および当技術分野で公知でありＩＦＮ−γ活性を有するその他の変異体はいずれも本方法で使用できる。

ＩＦＮ−γポリペプチドの配列を、当技術分野で公知の種々の方法で変更して、配列中に目標とされた変化を作製してもよい。通常、変異体ポリペプチドは本明細書に提供された配列と実質的に同様である。すなわち、少なくとも１個のアミノ酸で異なる。また少なくとも２個であるが多くとも約１０個のアミノ酸で異なる場合もある。配列変化は置換、挿入または欠失であり得る。アラニン、またはその他の残基を系統的に導入するスキャニング変異を用いて重要なアミノ酸を決定することができる。注目する具体的なアミノ酸置換には、保存的および非保存的変更が含まれる。通常、保存的アミノ酸置換としては、以下の基内での置換が挙げられる（グリシン、アラニン）、（バリン、イソロイシン、ロイシン）、（アスパラギン酸、グルタミン酸）、（アスパラギン、グルタミン）、（セリン、スレオニン)、(リジン、アルギニン)、または(フェニルアラニン、チロシン)。

注目する修飾としては、一次アミノ酸配列を変更する場合もしない場合もあるが、ポリペプチドの化学誘導体化、例えば、アセチル化、またはカルボキシル化；グリコシル化部位を導入するか除去するアミノ酸配列の変更；タンパク質をＰＥＧ化を受けやすくするアミノ酸配列の変更などが挙げられる。一実施形態では、本発明は、国際特許公報ＷＯ０１／３６００１号およびＷＯ０２／０８１５０７に記載されたＩＦＮ−γポリペプチド変異体など、血清クリアランスの低い、グリコシル誘導体化および／またはＰＥＧ誘導体化されたポリペプチドを提供するよう設計された、１以上の非天然グリコシル化および／またはポリエチレングリコール修飾部位を含むＩＦＮ−γ変異体の使用を意図する。また、グリコシル化の修飾、例えば、ポリペプチドの合成およびプロセシングの際に、またはさらなるプロセシングステップにおいて、例えば、ポリペプチドをグリコシル化に影響を及ぼす酵素、例えば、哺乳類グリコシル化または脱グリコシル化酵素に曝露することによって、そのグリコシル化パターンを修飾することによってなされるものも含まれる。また、リン酸化アミノ酸残基、例えば、ホスホチロシン、ホスホセリンまたはホスホスレオニンを含む配列も包含される。

主題発明での使用には、タンパク質分解に対する抵抗性を向上させ、溶解性を最適化し、またはそれらを治療薬としてより適したものにするように通常の化学的技術を用いて修飾されているＩＦＮ−ポリペプチドが含まれる。例えば、ペプチドの主鎖を環化して安定性を向上させることができる（フリードラー(Friedler)ら（２０００）ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー２７５：２３７８３〜２３７８９頁参照）。天然Ｌ−アミノ酸、例えば、Ｄ−アミノ酸または非天然合成アミノ酸以外の残基を含む類似体も使用
できる。タンパク質をポリエチレングリコール修飾して安定性を増強することもできる。

ポリペプチドは、当技術分野で公知の従来法を用いるｉｎ ｖｉｔｒｏ合成によって組換え法によって調製することもできるし、または導入された細胞もしくは天然にタンパク質を産生する細胞から単離することもできる。個々の配列および調製方法は、簡便性、経済性、求められる純度などによって決まる。必要に応じて、その他の分子または表面との結合を可能にする種々の基を、合成中または発現中にポリペプチドの中に導入できる。したがって、チオエーテルを作製するためのシステイン、金属イオン錯体と結合するためのヒスチジン、アミドまたはエステルを形成するためのカルボキシル基、アミドを形成するためのアミノ基などを用いることができる。

ポリペプチドはまた、組換え合成の従来法にしたがって単離および精製できる。発現宿主の溶解物を調製し、この溶解物をＨＰＬＣ、排除クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、アフィニティークロマトグラフィー、またはその他の精製技術を用いて精製することができる。用いる組成物は、産物の調製法およびその精製に関連する混入物の関連で、所望の産物を通例少なくとも２０重量％含んでなり、より通常には、少なくとも約７５重量％含んでなり、少なくとも約９５重量％含んでなることが好ましく、治療目的には、通常、少なくとも約９９．５重量％含んでなる。通常、パーセンテージは全タンパク質に基づくものとする。

ＩＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト
上記のどのような方法においても、インターフェロン受容体アゴニストは、いくつかの実施形態ではＩＩＩ型インターフェロン受容体のアゴニスト（例えば、「ＩＩＩ型インターフェロンアゴニスト」）である。ＩＩＩ型インターフェロンアゴニストとしては、ＩＬ−２８ｂポリペプチド、およびＩＬ−２８ａポリペプチド、およびＩＬ−２９ポリペプチド、ＩＩＩ型インターフェロン受容体に特異的な抗体、ならびに非ポリペプチドアゴニストをはじめとするＩＩＩ型インターフェロン受容体のその他のアゴニストが挙げられる。

ＩＬ−２８Ａ、ＩＬ−２８Ｂ、およびＩＬ−２９（本明細書では集合的に「ＩＩＩ型インターフェロン」または「ＩＩＩ型ＩＦＮ」と呼ぶ）は、シェパード(Sheppard)ら（２００３）ネイチャー４：６３〜６８頁に記載されている。各ポリペプチドはＩＬ−１０受容体β鎖とＩＬ−２８受容体αとからなるヘテロ二量体受容体と結合する。シェパードら（２００３）、上記。ＩＬ−２８Ａ、ＩＬ−２８Ｂ、およびＩＬ−２９のアミノ酸配列はそれぞれジェンバンク受託番号ＮＰ＿７４２１５０、ＮＰ＿７４２１５１、およびＮＰ＿７４２１５２に見出される。

ＩＩＩ型ＩＦＮポリペプチドのアミノ酸配列を、当技術分野で公知の種々の方法で変更して、配列中に目標とされた変化を作製してもよい。通常、変異体ポリペプチドは本明細書に提供された配列と実質的に同様である。すなわち、少なくとも１個のアミノ酸で異なる。また少なくとも２個であるが多くとも約１０個のアミノ酸で異なる場合もある。配列変化は置換、挿入または欠失であり得る。アラニン、またはその他の残基を系統的に導入するスキャニング変異を用いて重要なアミノ酸を決定することができる。注目する具体的なアミノ酸置換には、保存的および非保存的変更が含まれる。通常、保存的アミノ酸置換としては、以下の基内での置換が挙げられる（グリシン、アラニン）、（バリン、イソロイシン、ロイシン）、（アスパラギン酸、グルタミン酸）、（アスパラギン、グルタミン）、（セリン、スレオニン)、(リジン、アルギニン)、または(フェニルアラニン、チロシン)。

注目する修飾としては、一次アミノ酸配列を変更する場合もしない場合もあるが、ポリペプチドの化学誘導体化、例えば、アセチル化、またはカルボキシル化、グリコシル化部
位を導入するか除去するアミノ酸配列の変更；タンパク質をＰＥＧ化を受けやすくするアミノ酸配列の変更などが挙げられる。また、グリコシル化の修飾、例えば、ポリペプチドの合成およびプロセシングの際に、またはさらなるプロセシングステップにおいて、例えば、ポリペプチドをグリコシル化に影響を及ぼす酵素、例えば、哺乳類グリコシル化または脱グリコシル化酵素に曝露することによって、そのグリコシル化パターンを修飾することによってなされるものも含まれる。また、リン酸化アミノ酸残基、例えば、ホスホチロシン、ホスホセリンまたはホスホスレオニンを含む配列も包含される。

主題発明での使用には、タンパク質分解に対する抵抗性を向上させ、溶解性を最適化し、またはそれらを治療薬としてより適したものにするように通常の化学的技術を用いて修飾されているポリペプチドが含まれる。例えば、ペプチドの主鎖を環化して安定性を向上させることができる（フリードラー(Friedler)ら（２０００）ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー２７５：２３７８３〜２３７８９頁参照）。天然Ｌ−アミノ酸、例えば、Ｄ−アミノ酸または非天然合成アミノ酸以外の残基を含む類似体も使用できる。タンパク質をポリエチレングリコール修飾して安定性を増強することもできる。ポリペプチドをアルブミンと融合させてもよい。

ポリペプチドは、当技術分野で公知の従来法を用いるｉｎ ｖｉｔｒｏ合成によって組換え法によって調製することもできるし、または導入された細胞もしくは天然にタンパク質を産生する細胞から単離することもできる。個々の配列および調製方法は、簡便性、経済性、求められる純度などによって決まる。必要に応じて、その他の分子または表面との結合を可能にする種々の基を、合成中または発現中にポリペプチドの中に導入できる。したがって、チオエーテルを作製するためのシステイン、金属イオン錯体と結合するためのヒスチジン、アミドまたはエステルを形成するためのカルボキシル基、アミドを形成するためのアミノ基などを用いることができる。

パーフェニドンおよびその類似体
いくつかの実施形態では、パーフェニドン（５−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）−ピリドン）および特定のパーフェニドン類似体を主題併用療法に用いる。

置換基Ｒ₁、Ｒ₂、Ｘの説明
Ｒ₁：炭素環（飽和および不飽和）、複素環（飽和または不飽和）、アルキル（飽和お
よび不飽和）。例としては、フェニル、ベンジル、ピリミジル、ナフチル、インドリル、ピロリル、フリル、チエニル、イミダゾリル、シクロヘキシル、ピペリジル、ピロリジル、モルホリニル、シクロヘキセニル、ブタジエニルなどが挙げられる。

Ｒ₁は炭素環または複素環部分上にハロゲン、ニトロ、アミノ、ヒドロキシル、アルコ
キシ、カルボキシル、シアノ、チオ、アルキル、アリール、ヘテロアルキル、ヘテロアリールおよびその組合せ、例えば、４−ニトロフェニル、３−クロロフェニル、２，５−ジニトロフェニル、４−メトキシフェニル、５−メチル−ピロリル、２，５−ジクロロシクロヘキシル、グアニジニル−シクロヘキセニルなどの置換基での置換をさらに含み得る。

Ｒ₂：アルキル、炭素環、アリール、複素環。例としては、メチル、エチル、プロピル
、イソプロピル、フェニル、４−ニトロフェニル、チエニルなどが挙げられる。

Ｘ：炭素環または複素環上のいくつか（１〜３）の置換基であり得る。この置換基は同じである場合も異なる場合もある。置換基としては、水素、アルキル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロ、ニトロ、カルボキシル、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、チオ、アルキルアミノ、ハロアリールなどが挙げられる。

置換基は、アルキル、アリール、ニトロ、アルコキシ、ヒドロキシルおよびハロ基からなる群からの１〜３個の置換基で場合によってさらに置換していてもよい。例としては、メチル、２，３−ジメチル、フェニル、ｐ−トリル、４−クロロフェニル、４−ニトロフェニル、２，５−ジクロロフェニル、フリル、チエニルなどが挙げられる。

具体的な例として表１に示したものが挙げられる：

米国特許第３，９７４，２８１号、同３，８３９，３４６号、同４，０４２，６９９号、同４，０５２，５０９号、同５，３１０，５６２号、同５，５１８，７２９号、同５，７１６，６３２号、および同６，０９０，８２２号は、本発明の方法での使用に適した薬剤組成物中のパーフェニドンおよび特定のパーフェニドン類似体の合成方法および製剤方法を記載している。

ＴＮＦアンタゴニスト
いくつかの実施形態では、主題方法は主題合成ＣＸＣＲ３リガンドおよびＴＮＦアンタゴニストを投与することを含む。本明細書での使用に適したＴＮＦ−αアンタゴニストとしては、ＴＮＦ−α合成レベルを低下させる薬剤、ＴＮＦ−αとＴＮＦ−α受容体（ＴＮＦＲ）の結合をブロックまたは阻害する薬剤、およびＴＮＦＲが媒介するシグナル伝達を
ブロックまたは阻害する薬剤が挙げられる。特に明記のない限り、「ＴＮＦ−αアンタゴニスト」または「ＴＮＦアンタゴニスト」への言及はどれも本明細書では（ｉ）パーフェニドンおよびパーフェニドン類似体ならびに（ｉｉ）ＳＡＰＫ阻害剤以外のＴＮＦ−αアンタゴニストを意味するものとする。

本明細書において、用語「ＴＮＦ受容体ポリペプチド」および「ＴＮＦＲポリペプチド」とは、（いずれかの種由来の）ＴＮＦと結合可能なＴＮＦＲ由来ポリペプチドを指す。２種類の別個の細胞−表面ＴＮＦＲ：ＩＩ型ＴＮＦＲ（すなわちｐ７５ ＴＮＦＲまたはＴＮＦＲＩＩ）およびＩ型ＴＮＦＲ（すなわちｐ５５ ＴＮＦＲまたはＴＮＦＲＩ）が記載されている。成熟全長ヒトｐ７５ ＴＮＦＲは、分子量約７５〜８０キロダルトン（ｋＤ）の糖タンパク質である。成熟全長ヒトｐ５５ ＴＮＦＲは、分子量約５５〜６０ｋＤの糖タンパク質である。例示的ＴＮＦＲポリペプチドとしては、ＴＮＦＲＩ型および／またはＴＮＦＲＩＩ型由来のものがある。可溶性ＴＮＦＲとしては、ｐ７５ ＴＮＦＲポリペプチド；ｐ７５ ＴＮＦＲと、異種融合パートナー、例えば、免疫グロブリンのＦｃ部分との融合体が挙げられる。

ＴＮＦＲポリペプチドは、無傷のＴＮＦＲまたはＴＮＦＲの適した断片であり得る。米国特許第５，６０５，６９０号は、本発明での使用に適当な可溶性ＴＮＦＲポリペプチドをはじめとするＴＮＦＲポリペプチドの例を提供している。多くの実施形態では、ＴＮＦＲポリペプチドはＴＮＦＲの細胞外ドメインを含んでなる。いくつかの実施形態では、ＴＮＦＲポリペプチドは、免疫グロブリン分子の定常ドメインと結合したＴＮＦＲの細胞外ドメインを含んでなる融合ポリペプチドである。その他の実施形態では、ＴＮＦＲポリペプチドは、ＩｇＧ１分子の定常ドメインと結合したｐ７５ ＴＮＦＲの細胞外ドメインを含んでなる融合ポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ヒトへの投与を意図する場合、融合タンパク質に用いるＩｇはヒトのもの、例えばヒトＩｇＧ１である。

一価または多価形態のＴＮＦＲポリペプチドも本発明に使用できる。多価形態のＴＮＦＲポリペプチドは、２以上のＴＮＦ結合部位を有する。いくつかの実施形態では、ＴＮＦＲは二価、または二量体の形態のＴＮＦＲである。例えば、米国特許第５，６０５，６９０号およびモーラ(Mohler)ら、１９９３、ジャーナル・オブ・イムノロジー(Journal of Immunology)１５１：１５４８〜１５６１頁中に記載されるように、免疫グロブリンの重
鎖もしくは軽鎖のいずれか、または双方の可変ドメインと置換したＴＮＦＲ細胞外ドメインを有するキメラ抗体ポリペプチドは、本発明のＴＮＦＲポリペプチドを提供する。一般に、このようなキメラＴＮＦＲ：抗体ポリペプチドが細胞によって産生される場合、免疫グロブリンドメイン間のジスルフィド結合により二価の分子が形成される。このようなキメラＴＮＦＲ：抗体ポリペプチドをＴＮＦＲ：Ｆｃと呼ぶ。

一実施形態では、主題方法は、有効量の可溶性ＴＮＦＲエンブレル（登録商標）エタネルセプトの投与を含む。エンブレル（登録商標）は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ部分と結合しているヒトの７５キロダルトン（ｐ７５）ＴＮＦＲの細胞外リガンド結合部分からなる二量体融合タンパク質である。エンブレル（登録商標）のＦｃ成分は、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメインおよびヒンジ領域を含むが、ＩｇＧ１のＣＨ１ドメインは含まない。エンブレル（登録商標）はチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）哺乳類細胞発現系で産生される。９３４個のアミノ酸からなり、見かけの分子量は約１５０キロダルトンである。スミス(Smith)ら（１９９０）サイエンス(Science)２４８：１０１９〜１０２３頁、モーラら（１９９３）ジャーナル・オブ・イムノロジー１５１：１５４８〜１５６１頁、米国特許第５，３９５，７６０号、および同５，６０５，６９０号。

また、ＴＮＦ−αと結合するモノクローナル抗体も使用に適している。モノクローナル抗体としては、「ヒト化」マウスモノクローナル抗体、キメラ抗体、アミノ酸配列中少な
くとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または１００％ヒトであるモノクローナル抗体などが挙げられる。例えば、ＷＯ９０／１００７７、ＷＯ９０／０４０３６、およびＷＯ９２／０２１９０参照。適したモノクローナル抗体としては、Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）₂およびＦａｂなどの抗体断片、合成抗体、人工抗体、ファージディスプレ
イ抗体などが挙げられる。

適したモノクローナル抗体の例としては、インフリキシマブ（レミケード（登録商標）、セントコア(Centocor)）、およびアダリムマブ（ヒューミラ（商標）、アボット）が挙げられる。レミケード（登録商標）は、キメラモノクローナル抗ＴＮＦ−α抗体であり、約２５％のマウスアミノ酸配列と約７５％のヒトアミノ酸配列とを含む。レミケード（登録商標）は、ヒトＩｇＧ１の定常領域と融合したマウスモノクローナル抗ＴＮＦ−α抗体の可変領域を含む。エリオット(Elliott)ら（１９９３）アースライティス・リューマチ
ズム(Arthritis Rheum.)３６：１６８１〜１６９０頁、エリオットら（１９９４）ランセット(Lancet)３４４：１１０５〜１１１０頁、バート(Baert)ら（１９９９）ガストロエ
ンテロロジー(Gastroenterology)１１６：２２〜２８頁。ヒューミラ（商標）はヒト全長ＩｇＧ１モノクローナル抗体であり、ファージディスプレイ技術を用いて同定された。ピアシーク(Piascik)（２００３）ジャーナル・オブ・アメリカン・ファーマシューティカ
ル・アソシエーション(Journal of American Pharmaceutical Association)４３：３２７〜３２８頁。

ＴＮＦアンタゴニスト活性を評価するための方法は当技術分野で公知であり、本明細書中に例示されている。例えば、ＴＮＦアンタゴニスト活性は細胞ベースの競合結合アッセイで評価できる。このようなアッセイでは、放射標識したＴＮＦを、系列希釈したＴＮＦアンタゴニストおよび細胞膜結合ＴＮＦＲ発現細胞と混合する。懸濁液の一部を遠心分離して遊離ＴＮＦと結合ＴＮＦとに分離し、遊離画分および結合画分中の放射能量を測定する。ＴＮＦアンタゴニスト活性は、そのＴＮＦアンタゴニストの存在下での細胞へのＴＮＦ結合の阻害によって評価する。

もう一つの例として、ＴＮＦアンタゴニストは、ＴＮＦの細胞傷害活性に感受性のある細胞を標的細胞として用いるバイオアッセイにおいて、ｉｎ ｖｉｔｒｏでＴＮＦ活性を中和する能力について分析することができる。このようなアッセイでは、ＴＮＦと共に培養した標的細胞を、種々の量のＴＮＦアンタゴニストで処理し、その後細胞溶解について調べる。ＴＮＦアンタゴニスト活性は、そのＴＮＦアンタゴニストの存在下でのＴＮＦ誘導性標的細胞溶解の減少によって評価する。

ＴＧＦ−βアンタゴニスト
いくつかの実施形態では、主題方法は、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとＴＧＦ−βアンタゴニストとを投与することを含む。主題治療方法での使用に適したＴＧＦ−βアンタゴニストとしては、ＴＧＦ−β合成レベルを低下させる薬剤、ＴＧＦ−βとＴＧＦ−β受容体との結合をブロックまたは阻害する薬剤、およびＴＧＦ−β受容体が媒介するシグナル伝達をブロックまたは阻害する薬剤が挙げられる。本明細書において、用語「ＴＧＦ−β」とは、ＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、およびＴＧＦ−β３をはじめ、あらゆるＴＧＦ−βサブタイプを含む。適したＴＧＦ−βアンタゴニストとしては、それだけには限らないが、ＴＧＦ−βに特異的な抗体（例えば、特定のＴＧＦ−βサブタイプに特異的な抗体、および２種以上のＴＧＦ−βサブタイプと交差反応性である抗体など）、ＴＧＦ−β受容体に対する抗体、可溶性ＴＧＦ−β受容体、デコリン、ならびにＴＧＦ−βシグナル伝達を阻害する薬剤が挙げられる。

適したＴＧＦ−βアンタゴニストとしては、ＴＧＦ−βに特異的な抗体が挙げられる。ＴＧＦ−βに特異的な抗体は当技術分野で公知である。例えば、米国特許第５，７８３，
１８５号、同５，７７２，９９８号、同５，６７４，８４３号、同５，５７１，７１４号、同５，４６２，９２５号、および同５，４２６，０９８号、ＷＯ９７／１３８４４、ならびに米国特許公報２００３００６４０６９および２００３００９１５６６参照。適した抗ＴＧＦ−β抗体の限定されない例としては、ＣＡＴ−１５２（レルデリブマブ(lerdelibumab)、トラビオ（商標）；ケンブリッジ・アンティボディ・テクノロジー(Cambridge Antibody Technology)、ヒト抗ＴＧＦ−β２モノクローナル抗体、ＣＡＴ−１９２（メテ
リムマブ(metelimumab)、ケンブリッジ・アンティボディ・テクノロジー）、ヒト抗ＴＧ
Ｆ−β１モノクローナル抗体、ならびにＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、およびＴＧＦ−β３に対する汎−スペシフィックヒトモノクローナル抗体であるＧＣ−１００８（ジェンザイム社(Genzyme Corp.)）が挙げられる。

適したＴＧＦ−βアンタゴニストとしては、可溶性ＴＧＦ−β受容体が挙げられる。可溶性ＴＧＦ−β受容体は、通常、タンパク質が膜結合しないように天然のＴＧＦ−β受容体の膜貫通部分の大部分または全部を欠くが、ＴＧＦ−β結合は保持する。可溶性ＴＧＦ−β受容体としては、異種（非ＴＧＦ−β受容体）タンパク質（「融合パートナー」）とインフレームで融合したＴＧＦ−β受容体の一部分を含んでなる可溶性融合タンパク質が挙げられる。融合パートナーの限定されない例としては、免疫グロブリンＦｃ、ポリヒスチジンなどがある。可溶性ＴＧＦ−β受容体は、当技術分野で既に記載されている。例えば、ワン(Wang)ら（１９９９）ソラックス(Thorax)５４：８０５〜８１２頁；ジョージ(George)ら（１９９９）プロシーディングス・オブ・ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ・オブ・ジ・ユナイテッド・ステイツ・オブ・アメリカ９６：１２７１９〜１２７２４頁；ムラオカら（２００２）ジャーナル・オブ・クリニカル・インベスティゲーション(Jornal of Clinical Investigation)１０９：１５５１〜１５５９頁、およびヤタら（２００２）ヘパトロジー３５：１０２２〜１０３０頁参照。

ＴＧＦ−βアンタゴニストとしては、グリベック（商標）が挙げられる。グリベック（商標）（ＳＴＩ−５７１、またはＣＧＰ５７１４８Ｂとしても知られる）は、化学名４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）メチル］−Ｎ−［４−メチル−３−［［４−（３−ピリジニル）−２−ピリミジニル］アミノ−フェニル］ベンザミドメタンスルホネートであり、イマチニブメシレートとしてよく知られ、グリベック（商標）の商標で販売されている。グリベック（商標）は、Ｂｃｒ−ＡｂｌチロシンキナーゼのキナーゼドメインのＡＴＰ−結合部位を標的とする２−フェニルアミノピリミジンである（例えば、ドラッカー(Druker)ら（１９９６）ネイチャー・メディシン(Nature of Medicine)２，５６１、およびブッフドゥンガー(Buchdunger)ら（１９９３）プロシーディングス・オブ・ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシズ・オブ・ジ・ユナイテッド・ステイツ・オブ・アメリカ９２：２５５８〜２５６２頁参照）。

いくつかの実施形態では、この薬剤は、その開示内容が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，５２１，１８４号に記載されたピリミジン誘導体である。これらの実施形態では、式（Ｉ）で示されるＮ−フェニル−２−ピリミジン−アミン誘導体が注目される：

式中、

Ｒ₁’は４−ピラジニル、１−メチル−１Ｈ−ピロリル、アミノ−またはアミノ低級ア
ルキル置換されたフェニルであり、ここで、アミノ基はどの場合でも、遊離、アルキル化もしくはアシル化されたまたは５員環炭素原子で結合している、１Ｈ−インドリルもしくは１Ｈ−イミダゾリルであるか、または非置換であるか、もしくは環炭素原子に結合して、低級アルキル置換されており、かつ、窒素原子の位置で非置換であるか、もしくは酸素で置換されているピリジルであり、
Ｒ₂’およびＲ₃’は各々他とは独立に水素または低級アルキルであり、
ラジカルＲ４’、Ｒ５’、Ｒ６’、Ｒ７’およびＲ８’のうちの１つまたは２つは各々ニトロ、フルオロ置換低級アルコシキまたは次式（ＩＩ）のラジカルであり：

−Ｎ（Ｒ₉’）−Ｃ（＝Ｘ）−（Ｙ）_k−Ｒ₁₀ （ＩＩ）

式中、

Ｒ₉’は水素または低級アルキルであり、

Ｘはオキソ、チオ、イミノ、Ｎ−低級アルキル−イミノ、ヒドロキシイミノまたはＯ−低級アルキル−ヒドロキシイミノであり、

Ｙは酸素または基ＮＨであり、

ｋは０または１であり、

Ｒ₁₀は少なくとも５個の炭素原子を含む脂肪族ラジカル、または芳香族、芳香族−脂肪族、脂環式、脂環式−脂肪族、複素環式または複素環式−脂肪族ラジカルであり、

残りのラジカルＲ₄’、Ｒ₅’、Ｒ₆’、Ｒ₇’およびＲ₈’は各々他とは独立に、水素、
非置換であるか、あるいは遊離もしくはアルキル化アミノ、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジニルで、またはモルホリニルで、または低級アルカノイル、トリフルオロメチル、遊離、エーテル化もしくはエステル化ヒドロキシ、遊離、アルキル化もしくはアシル化アミノまたは遊離もしくはエステル化カルボキシで置換された低級アルキルである、

ならびに少なくとも１つの塩形成基を含むかかる化合物の塩である。

これらの実施形態では：

１−メチル−１Ｈ−ピロリルは１−メチル−１Ｈ−ピロリル−２−イルまたは１−メチル−１Ｈ−ピロリル−３−イルであることが好ましい。

アミノ−またはアミノ−低級アルキル置換フェニルＲ₁（式中アミノ基はどの場合も遊
離、アルキル化もしくはアシル化されている）はいずれかの所望の位置（オルト、メタまたはパラ）で置換されているフェニルであり、アルキル化アミノ基はモノまたはジ低級アルキルアミノ、例えばジメチルアミノであることが好ましく、アミノ−低級アルキルの低級アルキル部分は直鎖Ｃ₁〜Ｃ₃アルキル、例えば特にメチルまたはエチルであることが好ましい。

５員環の炭素原子で結合している１Ｈ−インドリルとしては１Ｈ−２−イルまたは１Ｈ−３−イルがある。

非置換、または環炭素原子に結合しているた低級アルキル置換ピリジルとしては、低級アルキル置換または好ましくは非置換２−、もしくは好ましくは３−もしくは４−ピリジル、例えば、３−ピリジル、２−メチル−３−ピリジル、４−メチル−３−ピリジルまたは４−ピリジルがある。窒素原子が酸素で置換されたピリジルはピリジンＮ−オキシド、すなわちＮ−オキシド−ピリジル、例えば、Ｎ−オキシド−４−ピリジルに由来するラジカルである。

フルオロ置換低級アルコキシとしては、少なくとも１つの、だが好ましくは数個のフルオロ置換基、特にトリフルオロメトキシまたは好ましくは１，１，２，２，−テトラフルオロ−エトキシを有する低級アルコキシがある。

Ｘがオキソ、チオ、イミノ、Ｎ−低級アルキル−イミノ、ヒドロキシイミノまたはＯ−低級アルキルヒドロキシイミノである場合、基Ｃ＝Ｘは、それぞれ、前記の順に、ラジカルＣ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、Ｃ＝Ｎ−Ｈ、Ｃ＝Ｎ−低級アルキル、Ｃ＝Ｎ−ＯＨまたはＣＮ−Ｏ−低級アルキルである。Ｘはオキソであるのが好ましい。

ｋは０であるのが好ましい、すなわち、基Ｙは存在しない。

Ｙは、もし存在すれば、基ＮＨが好ましい。

用語「低級」とは、本明細書の範囲内では７個以下、好ましくは４個以下の炭素原子を含むラジカルを意味する。

低級アルキルＲ１’、Ｒ２’、Ｒ３’およびＲ９’はメチルまたはエチルであるのが好ましい。

少なくとも５個の炭素原子を含む脂肪族ラジカルＲ₁₀は、多くて２２個の炭素原子を含むことが好ましく、通常、多くて１０個の炭素原子を含み、置換または好ましくは非置換の脂肪族炭化水素ラジカル、つまり置換または好ましくは非置換のアルキニル、アルケニルまたは好ましくはアルキルラジカル、例えばＣ₅〜Ｃ₇アルキル、例えば、ｎ−ペンチルのようなものである。芳香族ラジカルＲ₁₀は最大２０個の炭素原子を含み、非置換または置換、例えば、いずれの場合にも非置換または置換ナフチル、特に、２−ナフチル、または好ましくはフェニルなどであり、置換基はシアノ、非置換またはヒドロキシ−、アミノ−または４−メチル−ピペラジニル置換低級アルキル、例えば、特にメチル、トリフルオロメチル、遊離、エーテル化もしくはエステル化ヒドロキシ、遊離、アルキル化もしくはアシル化アミノおよび遊離もしくはエステル化カルボキシから選択されることが好ましい。芳香族−脂肪族ラジカルＲ₁₀では、芳香族部分は前記定義の通りであり、脂肪族部分は置換または好ましくは非置換の低級アルキル、例えば、特にＣ₁〜Ｃ₂アルキルが好ましく、例えばベンジルがある。脂環式ラジカルＲ₁₀は特に最大３０個、より特には最大２０個
、そして最も特には最大１０個の炭素原子を含み、単環式または多環式であり、置換または好ましくは非置換であり、例えば、シクロアルキルラジカル、特に５または６員のシクロアルキルラジカルのようなもの、例えばシクロヘキシルが好ましい。脂環式−脂肪族ラジカルＲ₁₀では、脂環式部分は前記定義の通りであり、脂肪族部分は置換または好ましくは非置換の低級アルキル、例えば、特にＣ₁〜Ｃ₂アルキルが好ましい。複素環ラジカルＲ₁₀は特に最大２０個の炭素原子を含み、５または６員であり、窒素、酸素、および硫黄から選択されることが好ましい、１〜３個のへテロ原子を含む飽和または不飽和単環ラジカルであることが好ましく、特に、例えば、チエニルまたは２−、３−もしくは４−ピリジル、または二もしくは三環式ラジカルであり、ここで、例えば、１または２個のベンゼンラジカルが前記単環式ラジカルとアネレートする（融合する）。複素環−脂肪族ラジカルＲ₁₀では、複素環部分は前記定義の通りであり、脂肪族部分は置換または好ましくは非置換の低級アルキル、例えば、特にＣ₁〜Ｃ₂アルキルが好ましい。

エーテル化ヒドロキシは、低級アルコキシであるのが好ましい。エステル化ヒドロキシは、低級アルカン酸などの有機カルボン酸、またはハロゲン化水素酸などの無機酸、例えば、低級アルカノイルオキシもしくは特にハロゲン、例えばヨウ素、臭素または特にフッ素もしくは塩素によりエステル化されたヒドロキシが好ましい。

アルキル化アミノとしては、例えば、メチルアミノなどの低級アルキルアミノ、またはジメチルアミノなどのジ低級アルキルアミノがある。アシル化アミノとしては、例えば、低級アルカノイルアミノまたはベンゾイルアミノがある。

エステル化カルボキシとしては、例えば、メトキシカルボニルなどの低級アルコキシカルボニルがある。

置換フェニルラジカルは最大５個の置換基、例えばフッ素を含み得るが、特に比較的大きい置換基の場合には、通常、１〜３個の置換基でしか置換されない。特に言及できる置換フェニルの例としては、４−クロロ−フェニル、ペンタフルオロ−フェニル、２−カルボキシ−フェニル、２−メトキシ−フェニル、４−フルオロフェニル、４−シアノ−フェニルおよび４−メチル−フェニルがある。

式（Ｉ）で示される化合物中の塩形成基は、塩基性または酸性の特性を有する基またはラジカルである。少なくとも１つの塩基性基または少なくとも１つの塩基性ラジカルを含む化合物、例えば、遊離アミノ基、ピラジニルラジカルまたはピリジルラジカルは、例えば、塩酸、硫酸もしくはリン酸などの無機酸を用いて、あるいは、適した有機カルボキシル酸またはスルホン酸を用いて、例えば、トリフルオロ酢酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、ヒドロキシマレイン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸もしくはシュウ酸などの脂肪族モノもしくはジカルボン酸、または、アルギニンもしくはリジンなどのアミノ酸、安息香酸、２−フェノキシ−安息香酸、２−アセトキシ安息香酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸などの芳香族カルボン酸、マンデル酸もしくは桂皮酸などの芳香族−脂肪族カルボン酸、ニコチン酸もしくはイソニコチン酸などのヘテロ芳香族カルボン酸、メタン−、エタン−もしくは２−ヒドロキシエタン−スルホン酸などの脂肪族スルホン酸、または、芳香族スルホン酸、例えば、ベンゼン−、ｐ−トルエン−もしくはナフタレン−２−スルホン酸を用いて、酸付加塩を形成することができる。数個の塩基性基が存在する場合には、モノ−またはポリ−酸付加塩が形成され得る。

ラジカルＲ₁₀中に酸性基、例えば、遊離カルボキシ基を含む式（Ｉ）の化合物は、金属またはアンモニウム塩、例えば、アルカリ金属もしくはアルカリ土類金属塩、例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウムもしくはカルシウム塩、またはアンモニアもしくは第三モノアミン、例えば、トリエチルアミンもしくはトリ−（２−ヒドロキシエチル）−ア
ミンなどの適した有機アミン、または複素環塩基、例えば、Ｎ−エチルピペリジンもしくはＮ，Ｎ’−ジメチル−ピペラジンを含むアンモニウム塩を形成できる。酸性と塩基性基の双方を含む式（Ｉ）の化合物は内部塩を形成できる。

これらの実施形態で特に注目されるのは、Ｒ₁’が３−ピリジルであり、Ｒ₂’、Ｒ₃’
、Ｒ₅’、Ｒ₆’、およびＲ₈’が各々水素であり、Ｒ₄’がメチルであり、Ｒ₇’が式（Ｉ
Ｉ）で示される基であって、式中のＲ_9'が水素であり、Ｘがオキソであり、ｋが０であり、Ｒ₁₀が４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）メチル］フェニルである、ピリミジン誘導体である。この化合物のメシレート塩は化学名が４−［（４−メチル−１−ピペラジニル）メチル］−Ｎ−［４−メチル−３−［［４−（３−ピリジニル）−２−ピリミジニル］アミノ−フェニル］ベンザミドメタンスルホネートで、現在イマチニブメシレートとして一般に知られており、グリベック（商標）という商標で販売されている。

エンドセリン受容体アンタゴニスト
いくつかの実施形態では、主題方法は、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドおよびエンドセリン受容体アンタゴニストを投与することを含む。本発明での使用に適したエンドセリン受容体アンタゴニストとしては、エンドセリン合成レベルを低下させる薬剤、エンドセリンとエンドセリン受容体との結合をブロックまたは阻害する薬剤、およびエンドセリン受容体が媒介するシグナル伝達をブロックまたは阻害する薬剤が挙げられる。本明細書において、用語「エンドセリンアンタゴニスト」または「エンドセリン受容体アンタゴニスト」とは、エンドセリン合成レベルを低下させるいずれかの薬剤、エンドセリンとエンドセリン受容体との結合をブロックまたは阻害するいずれかの薬剤、およびエンドセリン受容体が媒介するシグナル伝達をブロックまたは阻害するいずれかの薬剤を指す。

いくつかの実施形態では、エンドセリン受容体アンタゴニストは、エンドセリンＡ（ＥＴＡ）受容体に選択的である。いくつかの実施形態では、エンドセリン受容体アンタゴニストはエンドセリンＢ（ＥＴＢ）受容体に選択的である。別の実施形態では、エンドセリン受容体アンタゴニストはＥＴＡおよびＥＴＢ受容体の双方のアンタゴニストである。

本発明に有用なエンドセリンアンタゴニストの具体的な例としては、それだけには限らないが、アトラセンタン（ＡＢＴ−６２７；アボット・ラボラトリーズ(Abbott Laboratories)、ヴェレトリ(Veletri)（商標）（テゾセンタン；アクテリオン・ファーマシューティカルズ社(Actelion Pharmaceuticals, Ltd.)、シタキセンタン（アイコス−テキサスバイオテクノロジー(ICOS-Texas Biotechnology)）、エンラセンタン（グラクソスミスクライン(GlaxoSmithKline)）、ダルセンタン（ＬＵ１３５２５２；マイオジェン(Myogen)）
ＢＭＳ−２０７９４０（ブリストル・マイヤーズ・スクイブ(Bristol-Myers Squibb)）、ＢＭＳ−１９３８８４（ブリストル・マイヤーズ・スクイブ）、ＢＭＳ−１８２８７４（ブリストル・マイヤーズ・スクイブ）、Ｊ−１０４１３２（万有製薬）、ＶＭＬ５８８／Ｒｏ６１−１７９０（バンガード・メディカ(Vanguard Medica)、Ｔ−０１１５（田辺製
薬）、ＴＡＫ−０４４（武田）、ＢＱ−７８８（万有製薬）、ＢＱ１２３、ＹＭ−５９８’（山之内製薬）、ＰＤ１４５０６５（パークデービス(Parke-Davis)）、Ａ−１２７
７２２（アボット・ラボラトリーズ）、Ａ−１９２６２１（アボット・ラボラトリーズ）、Ａ−１８２０８６（アボット・ラボラトリーズ）、ＴＢＣ３７１１（アイコス−テキサスバイオテクノロジー）、ＢＳＦ２０８０７５（マイオジェン）、Ｓ−０１３９（シオノギ(Shionogi)）、ＴＢＣ２５７６（テキサスバイオテクノロジー(Texas Biotechnology)
）、ＴＢＣ３２１４（テキサスバイオテクノロジー）、ＰＤ１５６７０７（パークデービス）、ＰＤ１８０９８８（パークデービス）、ＡＢＴ−５４６（アボット・ラボラトリーズ）、ＡＢＴ−６２７（アボット・ラボラトリーズ）、ＳＢ２４７０８３（グラクソスミスクライン）、ＳＢ２０９６７０（グラクソスミスクライン）、ならびに当技術分野で議論されたエンドセリン受容体アンタゴニスト、例えば、ダベンポート(Davenport)および
バッティスティーニ(Battistini)（２００２）クリニカル・サイエンス(Clinical Science)１０３：１５〜３５頁、ウー・ワン(Wu-Wong)ら（２００２）クリニカル・サイエンス
１０３：１０７５〜１１１５頁、およびレシャー(Luescher）およびバートン(Barton)（
２０００）サーキュレーション(Circulation)１０２：２４３４〜２４４０頁が挙げられ
る。

適したエンドセリン受容体アンタゴニストとしては、トラクリア（商標）（ボセンタン；アクテリオン・ファーマシューティカルズ社製）がある。トラクリア（商標）は経口で活性なデュアルエンドセリン受容体アンタゴニストであり、エンドセリンとその受容体であるエンドセリン受容体Ａおよびエンドセリン受容体Ｂの双方との結合をブロックする。

トラクリア（商標）は高度に置換されたピリミジン誘導体のクラスに属し、キラル中心はない。それは化学的には、４−ｔ−ブチル−Ｎ−［６−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−５−（２−メトキシ−フェノキシ）−［２，２’］−ビピリミジン−４−イル］−ベンゼンスルホンアミド一水和物と名づけられ、以下の構造式を有する：

トラクリア（商標）治療は、いくつかの実施形態では、用量６２．５ｍｇで１日２回４週間経口投与し、その後維持用量の１２５ｍｇを１日２回経口投与する。

ＳＡＰＫ阻害剤
主題併用療法での使用に適したストレス活性化タンパク質キナーゼ（ＳＡＰＫ）阻害剤は、パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体以外の薬剤である。本明細書での使用に適したＳＡＰＫ阻害剤は、ＳＡＰＫ阻害剤の不在下でのＳＡＰＫの酵素活性と比較した場合に、ＳＡＰＫの酵素活性を少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、もしくは少なくとも約９０％、またはそれよりも大幅に阻害する薬剤である。

主題併用療法での使用に適したストレス活性化タンパク質キナーゼ阻害剤としては、それだけには限らないが、米国特許第６，５４８，５２０号に開示される２−アルキルイミダゾール、米国特許第６，４８９，３２５号に開示される１，４，５−置換イミダゾール化合物のいずれか、米国特許第６，５６９，８７１号に開示される１，４，５−置換イミダゾール化合物、米国特許出願第２００３／００７３８３２号に開示されるヘテロアリールアミノフェニルケトン化合物、米国特許第６，２８８，０８９号に開示されるピリジルイミダゾール化合物、および米国特許第６，４３２，９６２号に開示されるヘテロアリールアミノベンゾフェノンが挙げられる。また、米国特許第６，２１４，８５４号に開示される化合物も使用に適している。また、ＷＯ９９／６１４２６で議論された複素環化合物、および米国特許出願第２００３０１４９０４１号で議論されたＳＡＰＫ阻害剤化合物も使用に適している。さらに適したＳＡＰＫ阻害剤としてはＢＩＲＢ７９６（１−（５−ｔ−ブチル−２−ｐ−トリル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−３−［４−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−ナフタレン−１−イル］−尿素）がある；米国特許第６，３１９，９２１号参照。もう一つの適したＳＡＰＫ阻害剤としては、２（１Ｈ）−キナゾリ
ノンがある。また、製薬上有効な誘導体、類似体、エステル、プロドラッグ、および前述のＳＡＰＫ阻害剤のいずれかの塩も使用に適している。

ＳＡＰＫ活性を測定する方法は当技術分野で公知である。ＳＡＰＫの酵素活性を測定するアッセイの限定されない一例は次の通りである。最終反応量２５μｌ中で、ＳＡＰＫ２ａ（ｐ３８α；５〜１０ｍＵ）を２５ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．５、０．０２ｍＭ ＥＧＴＡ、０．３３ｍｇ／ｍｌミエリン塩基性タンパク質、１０ｍＭ酢酸マグネシウムおよび［γ−³³Ｐ−ＡＴＰ］（特異的活性約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要に応じた濃度）とともにインキュベートする。反応はＭｇ／ＡＴＰ混合物を添加して開始する。室温で４０分間インキュベーションした後、５μｌの３％リン酸溶液を添加して反応を停止させる。次いで、１０μｌの反応液をＰ３０フィルターマットの上にスポットし、７５ｍＭリン酸中で５分間３回洗浄し、メタノール中でもう１度洗浄し、次いで、乾燥およびシンチレーション計数する。

Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）
Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）は含硫アミノ酸Ｌ−システインの安定形である。ＮＡＣはＨ₂Ｏ₂およびその他のラジカルを除去する抗酸化物質である。グルタチオン（主要抗酸化物質）の前駆体で、グルタチオン合成のためにシステイン基質を提供する。ＮＡＣは店頭で栄養補助剤または栄養補助食品として市販されている。本明細書での使用に適したＮＡＣ製品としては、ソースナチュラルズ(Source Naturals)製（１０００ｍｇ錠）、
バイオケム(Biochem）製（７５０ｍｇ錠）、ツインラボ(Twinlab)製（６００ｍｇ錠）、
ニュートリコロジー／アレルギーリサーチグループ(Nutricology/Allergy Research Group)製（５００ｍｇ錠）ＮＡＣ栄養補助製品などが挙げられる。かかる製品は最小の費用で健康食品店およびジェネラル・ニュートリション・センター(General Nutrition Center)（ＧＮＣ）などの栄養補助剤販売店から購入できる。

用量、製剤、および投与経路
有効な薬剤（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド；少なくとも１つの第二の治療薬、例えばＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、Ｉ型インターフェロン受容体アゴニスト、パーフェニドンもしくはパーフェニドン類似体、ＴＮＦアンタゴニスト、ＴＧＦ−βアンタゴニスト、エンドセリン受容体アゴニスト、ＳＡＰＫ阻害剤など）を、それを必要とする個体へ製薬上許容される賦形剤を含む製剤（例えば、別個の製剤で）で投与する。当技術分野では多種多様な製薬上許容される賦形剤が公知であり、本明細書中で詳細に論じる必要はない。製薬上許容される賦形剤は、例えば、Ａ．ジェンナーロ(A. Gennaro)（２０００）「レミントン：ザ・サイエンス・アンド・プラクティス・オブ・ファーマシー」(“Remington: The Science and Practice of Pharmacy”)第２０版、リッピンコッ
ト・ウィリアムズ＆ウィルキンス(Lippincott， Williams, & Wilkins)；ファーマシューティカル・ドサージ・フォームス・アンド・ドラッグ・デリバリー・システムス(Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems)（１９９９）Ｈ．Ｃ．アンセル(H. C. Ansel)ら編：第７版、リッピンコット・ウィリアムズ＆ウィルキンス；ならびにハンドブック・オブ・ファーマシューティカル・エクシピエンツ(Handbook of Pharmaceutical Excipients)（２０００）Ａ．Ｈ．キビー(A. H. Kibbe)ら編：第３版、アメリカン・ファーマシューティカル・アソシエーション(American Pharmaceutical Association)をはじ
めとする種々の出版物に十分に記載されている。

主題の方法では、結果的に所望の治療効果をもたらすことのできる便宜な手段であれば、いずれを用いて有効薬剤を宿主へ投与してもよい。したがって、薬剤を治療的投与のために種々の製剤中へ組み込んでもよい。より詳しくは、本発明の薬剤は、適当な、製薬上許容される担体または希釈剤と組み合わせることによって、薬剤組成物へ製剤することができ、固体、半固体、液体またはガス形態の調製物、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、
顆粒、軟膏、溶液、坐剤、注射剤、吸入剤およびエアロゾルへ製剤できる。

したがって、薬剤の投与は、経口、舌下、直腸、非経口、腹腔内、皮内、静脈内、皮下、筋肉内、腫瘍内、経皮、気管内投与などをはじめ種々の方法で達成できる。いくつかの実施形態では２つの異なる投与経路を用いる。例えば、いくつかの実施形態では、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを筋肉内、皮下、または静脈内などの経路で投与し、パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体を経口投与する。

有効薬剤の皮下投与（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、さらなる治療薬、その他）は、標準法および装置、例えば、針と注射器、皮下注入ポート送達システムなどを用いて達成する。例えば、米国特許第３，５４７，１１９号、同４，７５５，１７３号、同４，５３１，９３７号、同４，３１１，１３７号、および同６，０１７，３２８号参照。ポートを介して有効薬剤（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、さらなる治療薬、その他）を患者へ投与するための、皮下注入ポートと装置の組合せは、本明細書中では「皮下注入ポート送達システム」と呼ぶ。いくつかの実施形態では、皮下投与は、装置の組合せ、例えば、針と注射器によるボーラス送達と、それに続く連続送達システムを用いる送達によって達成する。

いくつかの実施形態では、有効薬剤（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、さらなる治療薬、その他）を連続送達システムによって送達する。用語「連続送達システム」は、本明細書では「制御された送達システム」と同義的に用い、カテーテル、注射器具など当技術分野で公知の多種多様なものと組合せた、連続的な（例えば、制御された）送達装置（例えば、ポンプ）を包含する。

機械的または電気機械的薬剤注入ポンプもまた、本発明での使用に適し得る。かかる装置の例としては、例えば、米国特許第４，６９２，１４７号、同４，３６０，０１９号、４，４８７，６０３号、４，３６０，０１９号、４，７２５，８５２号、５，８２０，５８９号、５，６４３，２０７号、６，１９８，９６６号などに記載のものが挙げられる。概して、本薬剤送達方法は種々の詰め替え式のポンプシステムのいずれかを用いて達成することができる。ポンプにより、一貫した制御された放出が経時的に提供される。通常、薬剤（例えば、インターフェロン受容体アゴニスト）は、薬剤不浸透性のリザーバ中の液体製剤に含め、連続的な方法で個体へ送達する。

一実施形態では、この薬剤送達システムは少なくとも一部分が埋め込み型の装置である。埋め込み型の装置は、当技術分野で周知の方法および装置を用いていずれかの適した埋め込み部位に埋め込むことができる。埋め込み部位とは、薬剤送達装置を導入して位置づける、被験体身体内の部位である。埋め込み部位としては、必ずしもそれだけには限らないが、真皮下、皮下、筋肉内、またはその他の被験体身体内の適した部位が挙げられる。一般に、薬剤送達装置の埋め込みおよび取り出しの利便性から皮下の埋め込み部位が好ましい。

本発明での使用に適した薬剤放出装置は、種々の作動方法のうちのいずれかに基づくものであり得る。例えば、薬剤放出装置は拡散システム、対流システム、または腐食システム（例えば、腐食に基づくシステム）に基づくものであり得る。例えば、薬剤放出装置は、電気化学ポンプ、浸透圧ポンプ、電気浸透ポンプ、蒸気圧ポンプ、または例えば、薬剤を高分子に組み込み、その高分子を薬剤を含浸させた高分子物質（例えば、生分解性の、薬剤を含浸させた高分子物質）の分解と同時に薬剤製剤の放出をもたらす浸透圧性破裂マトリックスであってよい。その他の実施形態では、薬剤放出装置は、電気拡散システム、電解質ポンプ、起沸ポンプ、圧電ポンプ、加水分解システムなどに基づく。

機械的または電気機械的な注入ポンプに基づく薬剤放出装置もまた、本発明での使用に適し得る。かかる装置の例としては、例えば、米国特許第４，６９２，１４７号、同４，３６０，０１９号、同４，４８７，６０３号、同４，３６０，０１９号、同４，７２５，８５２号などに記載のものが挙げられる。概して、本薬剤送達方法は種々の詰め替え式の交換不可能なポンプシステムのいずれかを用いて達成できる。通常、ポンプおよびその他の対流システムが、通常、より一貫したその制御された経時的放出のために好ましい。浸透圧ポンプは、より一貫したその制御された放出と比較的小型であること（例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ９７／２７８４０ならびに米国特許第５，９８５，３０５号および同５，７２８，３９６号）参照）を合わせた利点のために特に好ましい。本発明での使用に適した例示的浸透圧稼動装置としては、必ずしもそれだけには限らないが、米国特許第３，７６０，９８４号、同３，８４５，７７０号、同３，９１６，８９９号、同３，９２３，４２６号、同３，９８７，７９０号、３，９９５，６３１号、同３，９１６，８９９号、同４，０１６，８８０号、同４，０３６，２２８号、同４，１１１，２０２号、同４，１１１，２０３号、同４，２０３，４４０号、同４，２０３，４４２号、同４，２１０，１３９号、同４，３２７，７２５号、同４，６２７，８５０号、同４，８６５，８４５号、同５，０５７，３１８号、同５，０５９，４２３号、同５，１１２，６１４号、同５，１３７，７２７号、同５，２３４，６９２号、同５，２３４，６９３号、同５，７２８，３９６号などに記載のものが挙げられる。

いくつかの実施形態では、薬剤送達装置は埋め込み型の装置である。薬剤送達装置は、当技術分野で周知の方法および装置を用いていずれかの適した埋め込み部位に埋め込むことができる。後述するように、埋め込み部位とは、被験体身体内の部位で、そこに薬剤送達装置を導入し位置づける。埋め込み部位としては、必ずしもそれだけには限らないが、真皮下、皮下、筋肉内、またはその他の被験体身体内の適した部位が挙げられる。

いくつかの実施形態では、有効薬剤（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、さらなる治療薬、その他）を、埋め込み型薬剤送達システム、例えば、有効薬剤（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、さらなる治療薬、その他）の投与を提供するためにプログラム可能なシステムを用いて送達する。例示的なプログラム可能埋め込み型システムとしては、埋め込み型薬剤注入ポンプが挙げられる。例示的な埋め込み型薬剤注入ポンプ、またはかかるポンプと関連して有用な装置は、例えば、米国特許第４，３５０，１５５号、同５，４４３，４５０号、同５，８１４，０１９号、同５，９７６，１０９号、同６，０１７，３２８号、同６，１７１，２７６号、同６，２４１，７０４号、同６，４６４，６８７号、同６，４７５，１８０号、同および同６，５１２，９５４号に記載されている。本発明に適合し得るさらなる例示的装置としては、シンクロメッド(Synchromed)薬剤注入ポンプ（メドトロニック(Medtronic)）がある。

薬剤投与形では、有効薬剤（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、さらなる治療薬、その他）をその製薬上許容される塩の形態で投与してよく、あるいは単独で、またはその他の製薬上有効な化合物と適切に関連して、また組合せて用いることもできる。以下の方法および賦形剤は単なる例であって限定するものではない。

経口用製剤には、有効薬剤（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、さらなる治療薬、その他）を単独でまたは適当な添加剤、例えば、従来の添加剤、例えばラクトース、マンニトール、コーンスターチまたはジャガイモデンプンと；結合剤、例えば、結晶セルロース、セルロース誘導体、アラビアゴム、コーンスターチまたはゼラチンと；崩壊剤、例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプンまたはナトリウムカルボキシメチルセルロースと；滑沢剤、例えば、タルクまたはステアリン酸マグネシウムと；ならびに必要に応じて、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、防腐剤および矯味剤と組み合わせて用いて、錠剤、散剤、顆粒またはカプセル剤を製造することができる。

有効薬剤（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、さらなる治療薬、その他）は、水性または非水溶媒、例えば、植物油もしくはその他類似油、合成脂肪酸グリコシド、高脂肪酸もしくはプロピレングリコールのエステルの中でそれらを溶解、懸濁、または乳化することによって、また必要に応じて、従来の添加剤、例えば、可溶化剤、等張剤、沈殿防止剤、乳化剤、安定剤および防腐剤とともに、注入用製剤へ製剤できる。

さらに、有効薬剤（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、さらなる治療薬、その他）を、乳化基剤または水溶性基剤などの種々の基剤とともに混合することにより坐剤を作製することができる。有効薬剤（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、さらなる治療薬、その他）を、坐剤によって直腸に投与することができる。坐剤には、体温で融けるが、室温では凝固するココアバター、カーボワックスおよびポリエチレングリコールなどのビヒクルを含めることができる。

シロップ剤、エリキシル剤、および懸濁液などの経口投与または直腸投与のための単位投与形は、各投与単位、例えば、小さじ１杯、大さじ１杯、錠剤または坐剤が、１以上の有効な薬剤を含む組成物を所定量含むように提供することができる。同様に、注射用または静脈投与用の単位投与形は、滅菌水、通常の生理食塩水またはその他の製薬上許容される担体中の溶液のような組成物中に有効薬剤を含むことができる。

本明細書で用いる用語「単位投与形」とは、ヒトおよび動物被験体に対する単位投与量として適した物理的に別個の単位を指し、各単位は、製薬上許容される希釈剤、担体またはビヒクルと関連して所望の効果を生むのに十分な量と算出された、所定量の有効薬剤（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、さらなる治療薬、その他）を含む。有効薬剤（例えば、主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、さらなる治療薬、その他）の指定は、用いる特定の化合物および達成しようとする効果、ならびに宿主中での各化合物に関連する薬力学に応じて変わる。

製薬上許容される賦形剤、例えば、ビヒクル、アジュバント、担体または希釈剤は、一般大衆に容易に入手可能である。さらに、製薬上許容される補助物質、例えばｐＨ調整剤および緩衝剤、張性調整剤、安定剤、湿潤剤なども、一般大衆に容易に入手可能である。

投与する薬剤が主題合成ＣＸＣＲ３リガンドポリペプチドである場合、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドをコードするポリヌクレオチドは、ウイルス感染，マイクロインジェクション、または小胞の融合をはじめとする多数の経路によって組織または宿主細胞へ導入できる。ファース(Furth)ら（１９９２）、アナリティカル・バイオケミストリー(Analitical
Biochemistry)２０５：３６５〜３６８頁に記載されるように、ジェット式注射を筋肉内投与に用いることもできる。ＤＮＡを金微粒子上にコーティングし、微粒子銃装置、または文献中に記載されている「遺伝子銃」（例えば、タン(Tang)ら（１９９２）、ネイチャー３５６：１５２〜１５４頁参照）によって皮内に送達することもでき、この場合、金微粒子銃は治療用ＤＮＡでコーティングし、その後皮膚細胞の中へ入れる。

いくつかの実施形態では、第２の治療薬を合成ＣＸＣＲ３リガンド治療の全過程の間に投与する。例示的な第２の治療薬としては、１種以上のパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体、Ｉ型インターフェロン受容体アゴニスト、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、１種以上の抗腫瘍薬、ＴＮＦアンタゴニスト、ＴＧＦ−βアンタゴニスト、エンドセリン受容体アンタゴニスト、およびＳＡＰＫ阻害剤が挙げられる。その他の実施形態では、第２の治療薬を合成ＣＸＣＲ３リガンド治療の投与期間と重なる一定期間投与する。例えば、第２の治療薬治療を、合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を開始する前に開始して合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を終了する前に終了してもよいし、第２の治療薬治療を、合
成ＣＸＣＲ３リガンド治療を開始した後に開始して合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を終了した後に終了してもよいし、第２の治療薬治療を、合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を開始した後に開始して合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を終了する前に終了してもよいし、または第２の治療薬治療を、合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を開始する前に開始して合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を終了した後に終了してもよい。

例えば、いくつかの実施形態では、第２の治療薬を合成ＣＸＣＲ３リガンド治療の全過程の間に投与する。その他の実施形態では、パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体を合成ＣＸＣＲ３リガンド治療の投与期間と重なる一定期間投与する。例えば、パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体治療を、合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を開始する前に開始して合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を終了する前に終了してもよいし、パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体治療を、合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を開始した後に開始して合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を終了した後に終了してもよいし、パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体治療を、合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を開始した後に開始して合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を終了する前に終了してもよいし、あるいはパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体治療を、合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を開始する前に開始して合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を終了した後に終了してもよい。

主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの有効量は一用量あたり０．１μｇ〜１０００μｇの範囲、例えば、一用量あたり約０．１μｇ〜約０．５μｇ、一用量あたり約０．５μｇ〜約１．０μｇ、一用量あたり約１．０μｇ〜一用量あたり約５．０μｇ、一用量あたり約５．０μｇ〜約１０μｇ、一用量あたり約１０μｇ〜約２０μｇ、一用量あたり約２０μｇ〜一用量あたり約３０μｇ、一用量あたり約３０μｇ〜一用量あたり約４０μｇ、一用量あたり約４０μｇ〜一用量あたり約５０μｇ、一用量あたり約５０μｇ〜一用量あたり約６０μｇ、一用量あたり約６０μｇ〜一用量あたり約７０μｇ、一用量あたり約７０μｇ〜約８０μｇ、一用量あたり約８０μｇ〜一用量あたり約１００μｇ、一用量あたり約１００μｇ〜約１５０μｇ、一用量あたり約１５０μｇ〜約２００μｇ、一用量あたり約２００μｇ〜一用量あたり約２５０μｇ、一用量あたり約２５０μｇ〜約３００μｇ、一用量あたり約３００μｇ〜約４００μｇ、一用量あたり約４００μｇ〜約５００μｇ、一用量あたり約５００μｇ〜約６００μｇ、一用量あたり約６００μｇ〜約７００μｇ、一用量あたり約７００μｇ〜約８００μｇ、一用量あたり約８００μｇ〜約９００μｇ、または一用量あたり約９００μｇ〜約１０００μｇである。

いくつかの実施形態では、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドはｍｇ／体重１ｋｇで表される。これらの実施形態では、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、約０．１ｍｇ／体重１ｋｇ〜約１０ｍｇ／体重１ｋｇであり、例えば約０．１ｍｇ／体重１ｋｇ〜約０．５ｍｇ／体重１ｋｇ、約０．５ｍｇ／体重１ｋｇ〜約１．０ｍｇ／体重１ｋｇ、約１．０ｍｇ／体重１ｋｇ〜約２．５ｍｇ／体重１ｋｇ、約２．５ｍｇ／体重１ｋｇ〜約５．０ｍｇ／体重１ｋｇ、約５．０ｍｇ／体重１ｋｇ〜約７．５ｍｇ／体重１ｋｇ、または約７．５ｍｇ／体重１ｋｇ〜約１０ｍｇ／体重１ｋｇである。

多くの実施形態では、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドは、約１日〜約７日間、または約１週〜約２週間、または約２週〜約３週間、または約３週〜約４週間、または約１ヶ月〜約２ヶ月、または約３ヶ月〜約４ヶ月、または約４ヶ月〜約６ヶ月、または約６ヶ月〜約８ヶ月、または約８ヶ月〜約１２ヶ月、または少なくとも１年の一定期間投与する。またそれより長い期間投与してもよい。インターフェロン受容体アゴニストは、１日３回、１日２回、１日１回、２日に１回、週２回、週３回、週１回、２週に１回、月３回、月１回、実質的に連続的に、あるいは連続的に投与できる。

多くの実施形態では、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの複数回用量を投与する。例えば、
インターフェロン受容体アゴニストを月に１回、月に２回、月３回、２週に１回、（ｑｏｗ）、週１回（ｑｗ）、週２回（ｂｉｗ）、週３回（ｔｉｗ）、週４回、週５回、週６回、２日に１回（ｑｏｄ）、毎日（ｑｄ）、１日２回（ｑｉｄ）または１日３回（ｔｉｄ）、実質的に連続的に、あるいは連続的に、約１日〜約１週間、約２週〜約４週間、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年もしくはそれ以上の期間にわたって投与する。

パーフェニドンを用いる併用療法における合成ＣＸＣＲ３リガンド
いくつかの実施形態では、癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療を目的として、パーフェニドンを用いる併用療法において主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを投与する。この方法は、通常、それを必要とする個体へ有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドと有効量のパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体とを投与することを含む。

通常、パーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の有効投与量は、約０．５ｍｇ／ｋｇ／日〜約２００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であるか、または約４００ｍｇ〜約３６００ｍｇ／日、もしくは約５０ｍｇ〜約５，０００ｍｇ／日、もしくは約１００ｍｇ〜約１，０００ｍｇ／日の固定された投与量で、場合によって１日あたり２回以上の分割用量で経口投与する。癌の治療のための、主題の方法での使用に適したパーフェニドンおよびパーフェニドン類似体のその他の用量および製剤は、米国特許第３，９７４，２８１号、同３，８３９，３４６号、同４，０４２，６９９号、同４，０５２，５０９号、同５，３１０，５６２号、同５，５１８，７２９号、同５，７１６，６３２号、および同６，０９０，８２２号に記載されている。

パーフェニドンおよびパーフェニドン類似体の用量レベルが、特定の化合物の機能、症状の重篤度および被験体の副作用への感受性に応じて変化し得ることは、当業者であれば容易に理解する。所与の化合物の好ましい投与量は、当業者であれば種々の手段で容易に決定できる。

パーフェニドン（またはパーフェニドン類似体）は毎日、１日２回、もしくは１日３回、または１日２〜５回の範囲の分割日用量で、約１日〜約１週間、約２週間〜約４週間、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年もしくはそれ以上の期間にわたって投与することができる。

主題合成ＣＸＣＲ３リガンドおよびパーフェニドン（またはパーフェニドン類似体）は、通常、別個の製剤で投与する。主題合成ＣＸＣＲ３リガンドおよびパーフェニドン（またはパーフェニドン類似体）は、互いに実質的に同時に、あるいは約３０分、約１時間、約２時間、約４時間、約８時間、約１６時間、約２４時間、約３６時間、約７２時間、約４日間、約７日間、または約２週間以内に投与することができる。

一実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これは主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、パーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の一用量あたり約１００ｍｇ〜約１，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

一実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これは合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、一用量あたり約１００ｍｇ〜約１，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

一実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これは合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、筋肉内に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、一用量あたり約１００ｍｇ〜約１，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

一実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これは合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、一用量あたり約５０ｍｇ〜約５，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

一実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これは合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、筋肉内に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、一用量あたり約５０ｍｇ〜約５，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

一実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これは合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約５０μｇの薬剤量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、一用量あたり約５００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

一実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これは合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約５０μｇの薬剤量を含み、筋肉内に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、一用量あたり約５００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

合成ＣＸＣＲ３リガンドおよびＩ型インターフェロン受容体アゴニスト併用療法
いくつかの実施形態では、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを、癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療のためにＩ型インターフェロン受容体アゴニストとともに併用療法で投与する。この方法は、通常、それを必要とする個体に有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと有効量のＩ型インターフェロン受容体アゴニストとを投与することを含む。いくつかの実施形態では、Ｉ型インターフェロン受容体アゴニストはＩＦＮ−αである。

有効量のＩＦＮ−αは０．３μｇ〜１００μｇの範囲であり得る。有効量のインファゲン(Infergen)（登録商標）コンセンサスＩＦＮ−αは、一用量あたり約３μｇ、約９μｇ、約１５μｇ、約１８μｇ、または約２７μｇ量の薬剤を含む。有効投与量のＩＦＮ−α２ａおよびＩＦＮ−α２ｂは一用量あたり約３００万ユニット（ＭＵ）〜約１０ＭＵ量の薬剤を含む。有効投与量のペガシス（登録商標）ＰＥＧ化ＩＦＮ−α２ａは、一用量あたり約９０μｇ〜約１８０μｇ、または約１３５μｇ量の薬剤を含む。有効投与量のＰＥＧイントロン（登録商標）ＰＥＧ化ＩＦＮ−α２ｂは、一用量あたり体重１ｋｇあたり約０．５μｇ〜約１．５μｇ量の薬剤を含む。有効投与量のＰＥＧ化ハイブリッド型インターフェロン（ＰＥＧ−ＣＩＦＮ）は、ＰＥＧ−ＣＩＦＮの一用量あたり約１８μｇ〜約９０μｇ、または約２７μｇ〜約６０μｇ、または約４５μｇ量のＣＩＦＮアミノ酸重量を含む。有効投与量のモノＰＥＧ（３０ｋＤ、直鎖）化ＣＩＦＮは一用量あたり約３μｇ〜約３００μｇ、または約９μｇ〜約９０μｇ、または約２７μｇ量の薬剤を含み得る。

ＩＦＮ−αは通常皮下に投与する。例えば、ＩＦＮ−αは１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続して、約２週間〜約５２週間、約５２週間〜約２年、またはそれ以上の期間にわたって皮下投与することができる。

一実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量のインファゲン(登録商標)コンセンサスＩＦＮ−αと、合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これはインファゲン（登録商標）の一用量あたり約１μｇ〜約３０μｇの薬剤量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してというインファゲン（登録商標）の投与量と、一用量あたり約５０ｍｇ〜約５，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量と、合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、筋肉内にまたは皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

もう一つの実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量のインファゲン(登録商標)コンセンサスＩＦＮ−αと、合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を
提供し、これはインファゲン（登録商標）の一用量あたり約１μｇ〜約９μｇの薬剤量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してというインファゲン（登録商標）の投与量と、一用量あたり１００ｍｇ〜１，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量と、合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、筋肉内にまたは皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

もう一つの実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量のインファゲン(登録商標)コンセンサスＩＦＮ−αと、合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これはインファゲン（登録商標）の一用量あたり約９μｇの薬剤量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してというインファゲン（登録商標）の投与量と、一用量あたり約５００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量と、合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、筋肉内にまたは皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

もう一つの実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量のインファゲン(登録商標)コンセンサスＩＦＮ−αと、合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これはインファゲン（登録商標）の一用量あたり約３０μｇの薬剤量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してというインファゲン（登録商標）の投与量と、一用量あたり約１，０００ｍｇ〜約２，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量と、合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、筋肉内にまたは皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

もう一つの実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量のコンセンサスＩＦＮ−αと、合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これはＰＥＧ−ＣＩＦＮの一用量あたり約１０μｇ〜約１５０μｇの量のＣＩＦＮアミノ酸重量を含み、皮下に週１回、２週に１回、月３回、または月１回というＰＥＧ化コンセンサスＩＦＮ−α（ＰＥＧ−ＣＩＦＮ）の投与量と、一用量あたり約５０ｍｇ〜約５，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量と、合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、筋肉内にまたは皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

もう一つの実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾
患の治療において、有効量のコンセンサスＩＦＮ−αと、合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これは一用量あたり約３μｇ〜約３００μｇの薬剤量を含み、皮下に週１回、２週に１回、月３回、または月１回というモノＰＥＧ（３０ｋＤ、直鎖）化コンセンサスＩＦＮ−αの投与量と、一用量あたり約５０ｍｇ〜約５，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量と、合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、筋肉内にまたは皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

もう一つの実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量のインファゲン(登録商標)コンセンサスＩＦＮ−αと、合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これはインファゲン（登録商標）の一用量あたり約５μｇ〜約１５０μｇの薬剤量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してというインファゲン（登録商標）の投与量と、一用量あたり約１，０００ｍｇ〜約１０，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量と、合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、筋肉内にまたは皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

もう一つの実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量のインファゲン(登録商標)コンセンサスＩＦＮ−αと、合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これはインファゲン（登録商標）の一用量あたり約５μｇ〜約４５μｇの薬剤量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してというインファゲン（登録商標）の投与量と、一用量あたり約１，０００ｍｇ〜約３，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量と、合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、筋肉内にまたは皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

もう一つの実施形態では、本発明は、患者における癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療において、有効量のインファゲン(登録商標)コンセンサスＩＦＮ−αと、合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供し、これはインファゲン（登録商標）の一用量あたり約４５μｇの薬剤量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してというインファゲン（登録商標）の投与量を、一用量あたり約１，０００ｍｇ〜約２，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量と、合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの薬剤量を含み、筋肉内にまたは皮下に１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量とを組合せて、所望の治療期間の間、患者に投与することを含む。

合成ＣＸＣＲ３リガンドおよびＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト併用療法
もう一つの態様では、本発明は、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストとを患者へ同時投与することを含んでなる、癌、線維性疾患、血管原性疾患、または細菌感染症の治療のための併用療法を提供する。いくつかの実施形態では、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストはＩＦＮ−γである。

主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの有効投与量は、前記で議論したものである。

ＩＦＮ−γの有効投与量は、患者の大きさにもよるが、約０．５μｇ／ｍ²〜約５００
μｇ／ｍ²、通常約１．５μｇ／ｍ²〜２００μｇ／ｍ²の範囲である。この活性は、タン
パク質５０μｇあたり１０⁶国際単位（Ｕ）に基づいている。ＩＦＮ−γは、毎日、１日
おき、週３回、週２回、または実質的に連続してまたは連続して、約２週〜約５２週、約５２週〜約２年、またはそれ以上の期間投与することができる。

特定の実施形態では、ＩＦＮ−γは約２５μｇ〜約５００μｇ、約５０μｇ〜約４００μｇ、または約１００μｇ〜約３００μｇの単位投与形で個体へ投与する。特に注目する特定の実施形態では、用量は約２００μｇＩＦＮ−γである。多くの注目される実施形態では、ＩＦＮ−γ１ｂを投与する。

投与量が一用量あたり２００μｇＩＦＮ−γである場合、体重あたり（体重の範囲を約４５ｋｇ〜約１３５ｋｇと想定）のＩＦＮ−γの量は、体重１ｋｇあたり約４．４μｇＩＦＮ−γ〜体重１ｋｇあたり約１．４８μｇＩＦＮ−γの範囲内である。

対象個体の体表面積は、通常、約１．３３ｍ²〜約２．５０ｍ²の範囲である。したがって、多くの実施形態では、ＩＦＮ−γ投与量は約１５０μｇ／ｍ²〜約２０μｇ／ｍ²の範囲である。例えば、ＩＦＮ−γの投与量は、約２０μｇ／ｍ²〜約３０μｇ／ｍ²、約３０μｇ／ｍ²〜約４０μｇ／ｍ²、約４０μｇ／ｍ²〜約５０μｇ／ｍ²、約５０μｇ／ｍ²〜
約６０μｇ／ｍ²、約６０μｇ／ｍ²〜約７０μｇ／ｍ²、約７０μｇ／ｍ²〜約８０μｇ／ｍ²、約８０μｇ／ｍ²〜約９０μｇ／ｍ²、約９０μｇ／ｍ²〜約１００μｇ／ｍ²、約１
００μｇ／ｍ²〜約１１０μｇ／ｍ²、約１１０μｇ／ｍ²〜約１２０μｇ／ｍ²、約１２０μｇ／ｍ²〜約１３０μｇ／ｍ²、約１３０μｇ／ｍ²〜約１４０μｇ／ｍ²、または約１４０μｇ／ｍ²〜約１５０μｇ／ｍ²の範囲である。いくつかの実施形態では、投与量群は約２５μｇ／ｍ²〜約１００μｇ／ｍ²の範囲である。別の実施形態では、投与量群は約２５μｇ／ｍ²〜約５０μｇ／ｍ²の範囲である。

さらなる併用療法
本発明は、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３と、有効量のＩ型インターフェロン受容体アゴニスト（例えば、ＩＦＮ−α）と、有効量のパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体とを投与することを含む、癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療のための併用療法をさらに意図する。有効量は前記で議論したものである。

本発明は、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドと、有効量のＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト（例えば、ＩＦＮ−γ）と、有効量のパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体とを投与することを含む、癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療のための併用療法をさらに意図する。有効量は前記で議論したものである。

本発明は、有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドと、有効量のＩ型インターフェロン受容体アゴニスト（例えば、ＩＦＮ−γ）と、有効量のＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト（例えば、ＩＦＮ−α）と、有効量のパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体とを投与することを含む、癌、線維性疾患、または血管原性疾患の治療のための併用療法をさ
らに意図する。有効量は前記で議論したものである。

癌のアジュバント療法としての合成ＣＸＣＲ３リガンド併用療法
いくつかの実施形態では、本発明は、標準的な癌治療のアジュバント療法として合成ＣＸＣＲ３リガンド治療を用いる併用療法のための方法を提供する。標準的な癌治療としては、手術（例えば癌組織の外科的切除）、放射線治療、骨髄移植、化学療法、生物学的応答調節剤治療、および前記の特定の組合せが挙げられる。

放射線治療としては、それだけには限らないが、ビームなど外部印加供給源、または小型放射線源の埋め込みによってのいずれかから送達されるＸ線またはγ線が挙げられる。

化学療法薬とは、癌細胞の増殖を低下させる非ペプチド性（つまり、非タンパク質性の）化合物であり、細胞傷害性薬および細胞分裂停止薬を包含する。化学療法薬の限定されない例としては、アルキル化剤、ニトロソ尿素、代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物（ビンカ）アルカロイド、およびステロイドホルモンが挙げられる。

細胞増殖を低下させるよう作用する薬剤は、当技術分野では公知であり、広く用いられている。かかる薬剤としては、アルキル化剤、例えば、ナイトロジェンマスタード、ニトロソ尿素、エチレンイミン誘導体、スルホン酸アルキル、ならびに、それだけには限らないが、メクロレタミン、シクロホスファミド（シトキサン（商標））、メルファラン（Ｌ−サルコリシン）、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、セムスチン（メチル−ＣＣＮＵ）、ストレプトゾシン、クロロゾトシン、ウラシル・マスタード、クロルメチン、イフォスファミド、クロラムブシル、ピポブロマン、トリエチレンメラミン、トリエチレンチオホスホラミン、ブスルファン、デカルバジン、およびテモゾロミドをはじめとするトリアゼンが挙げられる。

代謝拮抗剤としては、葉酸類似体、ピリミジン類似体、プリン類似体、ならびに、それだけには限らないが、シタラビン（ＣＹＴＯＳＡＲ−Ｕ）、シトシンアラビノシド、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、フロクスウリジン（ＦｕｄＲ）、６−チオグアニン、６−メルカプトプリン（６−ＭＰ）、ペントスタチン、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、メトトレキサート、１０−プロパルギル−５，８−ジデアザホレート（ＰＤＤＦ、ＣＢ３７１７）、５，８−ジデアザテトラヒドロホリックアシッド（ＤＤＡＴＨＦ）、ロイコボリン、リン酸フルダラビン、ペントスタチン、およびゲムシタビンをはじめとするアデノシンデアミナーゼ阻害剤が挙げられる。

適した天然産物およびその誘導体（例えば、ビンカアルカロイド、抗腫瘍性抗生物質、酵素、リンホカイン、およびエピポドフィロトキシン）としては、それだけには限らないが、Ａｒａ−Ｃ、パクリタキセル（タキソール（登録商標））、ドセタキセル（タキソテール（登録商標））、デオキシコホルマイシン、マイトマイシンＣ、Ｌ−アスパラギナーゼ、アザチオプリン；ブレキナール；アルカロイド、例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシンなど；ポドフィロトキシン、例えば、エトポシド、テニポシドなど；抗生物質、例えば、アントラサイクリン、塩酸ダウノルビシン（ダウノマイシン、ルビドマイシン、セルビジン）、イダルビシン、ドキソルビシン、エピルビシンおよびモルホリノ誘導体など；フェノキシゾンビスシクロペプチド、例えば、ダクチノマイシン；塩基性グリコペプチド、例えば、ブレオマイシン；アントラキノングリコシド、例えば、プリカマイシン（ミトラマイシン）；アントラセンジオン、例えば、ミトキサントロン；アジリノピロロインドールジオン、例えば、マイトマイシン；大環状免疫抑制剤、例えば、シクロスポリン、ＦＫ−５０６（タクロリムス、プログラフ）、ラパマイシンなど、他が挙げられる。

その他の抗増殖性細胞傷害剤としては、ナベルビン、ＣＰＴ−１１、アナストラゾール、レトラゾール、カペシタビン、レロキサフィン、シクロホスファミド、イフォサミドおよびドロロキサフィンがある。

抗増殖活性を有する微小管作用薬もまた使用に適しており、これとしては、それだけには限らないが、アロコルヒシン（ＮＳＣ４０６０４２）、ハリコンドリンＢ（ＮＳＣ６０９３９５）、コルヒチン（ＮＳＣ７５７）、コルヒチン誘導体（例えば、ＮＳＣ３３４１０）、ドルスタチン１０（ＮＳＣ３７６１２８）、マイタンシン（ＮＳＣ１５３８５８）、リゾキシン（ＮＳＣ３３２５９８）、パクリタキセル（タキソール（登録商標））、タキソール（登録商標）誘導体、ドセタキセル（タキソテール（登録商標））、チオコルヒチン（ＮＳＣ３６１７９２）、トリチルシステリン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、それだけには限らないが、エポチロンＡ、エポチロンＢ、ジスコデルモリドをはじめとする天然および合成エポシロン；エストラムスチン、ノコダゾールなどが挙げられる。

使用に適したホルモン調節物質およびステロイド（合成類似体を含む）としては、それだけには限らないが、副腎皮質ステロイド、例えば、プレドニゾン、デキサメタゾンなど；エストロゲンおよびプレゲスチン、例えば、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、エストラジオール、クロミフェン、タモキシフェンなど；および副腎皮質抑制薬、例えば、アミノグルテチミド、１７−αエチニルエストラジオール；ジエチルスチルベストロール、テストステロン、フルオキシメステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、テストラクトン、メチルプレドニソロン、メチルテストステロン、プレドニソロン、トリアムシノロン、クロロトリアニセン、ヒドロキシプロゲステロン、アミノグルテチミド、エストラムスチン、酢酸メドロキシプロゲステロン、ロイプロリド、フルタミド（ドロゲニル）、トレミフェン（フェアストン）、およびゾラデックス(登録商標)が挙げられる。エストロゲンは増殖および分化を刺激し、したがってエストロゲン受容体と結合する化合物を用いてこの活性を阻害する。コルチコステロイドはＴ細胞の増殖を阻害し得る。

その他の化学療法薬としては、金属錯体、例えば、シスプラチン（シス−ＤＤＰ）、カルボプラチンなど；尿素、例えば、ヒドロキシ尿素；およびヒドラジン、例えば、Ｎ−メチルヒドラジン；エピドフィロトキシン；トポイソメラーゼ阻害剤；プロカルバジン；ミトキサントロン；ロイコボリン；テガフールなどが挙げられる。注目するその他の抗増殖剤としては、免疫抑制剤、例えば、ミコフェノール酸、サリドマイド、デソキシスペルグアリン、アザスポリン、レフルノミド、ミゾリビン、アザスピラン（ＳＫＦ１０５６８５）；イレッサ（登録商標）（ＺＤ１８３９、４−（３−クロロ−４−フルオロフェニルアミノ）−７−メトキシ−６−（３−（４−モルホリニル）プロポキシ）キナゾリン）などが挙げられる。

「タキサン」としては、パクリタキセル、ならびにいずれかの活性なタキサン誘導体またはプロドラッグが挙げられる。「パクリタキセル」（本明細書では類似体、製剤ならびに誘導体、例えば、ドセタキセル、タキソール（商標）、タキソテール（商標）（ドセタキセル製剤）、パクリタキセルの１０−デスアセチル類似体、およびパクリタキセルの３’Ｎ−デスベンゾイル−３’Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル類似体を含むと理解される）は、当業者に公知の技術を利用して容易に調製でき（ＷＯ９４／０７８８２、ＷＯ９４／０７８８１、ＷＯ９４／０７８８０、ＷＯ９４／０７８７６、ＷＯ９３／２３５５５、ＷＯ９３／１００７６、米国特許第５，２９４，６３７号、同５，２８３，２５３号、同５，２７９，９４９号、同５，２７４，１３７号、同５，２０２，４４８号、同５，２００，５３４号、同５，２２９，５２９号、およびＥＰ５９０，２６７も参照）、または例えばシグマケミカル社、ミズーリ州セントルイス(Sigma Chemical CO., St. Lous, Mo.)（タ
ククス・ブレビフォリア由来のＴ７４０２；またはタクスス・ヤンナネンシス由来のＴ−１９１２）をはじめとする種々の商業的供給源から入手できる。

パクリタキセルとは、普通の化学的に入手できる形のパクリタキセルのみを指すものではなく、類似体および誘導体（例えば、前記のタキソテール（商標）ドセタキセル）ならびにパクリタキセルコンジュゲート（例えば、パクリタキセル−ＰＥＧ、パクリタキセル−デキストラン、またはパクリタキセル−キシロース）も指すと理解されるべきである。

用語「タキサン」には、種々の公知の誘導体、例えば、親水性誘導体と疎水性誘導体の双方も含まれる。タキサン誘導体としては、それだけには限らないが、国際特許出願ＷＯ９９／１８１１３に記載されたガラクトースおよびマンノース誘導体、ＷＯ９９／１４２０９に記載されたピペラジノおよびその他の誘導体、ＷＯ９９／０９０２１、ＷＯ９８／２２４５１、および米国特許第５，８６９，６８０号に記載されたタキサン誘導体、ＷＯ９８／２８２８８に記載された６−チオ誘導体、米国特許第５，８２１，２６３号に記載されたスルフェンアミド誘導体、ならびに米国特許第５，４１５，８６９号に記載されたタキソール誘導体が挙げられる。さらに、それだけには限らないが、ＷＯ９８／５８９２７、ＷＯ９８／１３０５９、および米国特許第５，８２４，７０１号に記載されたものをはじめとするパクリタキセルのプロドラッグも挙げられる。

本発明の方法に関連して使用するのに適した生物学的応答調節物質としては、それだけには限らないが、（１）チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）活性の阻害剤、（２）セリン／スレオニンキナーゼ活性の阻害剤、（３）腫瘍関連抗原アンタゴニスト、例えば、腫瘍抗原と特異的に結合する抗体、（４）アポトーシス受容体アゴニスト、（５）インターロイキン−２、（６）ＩＦＮ−α、（７）ＩＦＮ−γ（８）コロニー刺激因子、（９）血管形成阻害剤、および（１０）腫瘍壊死因子のアンタゴニストが挙げられる。

一態様では、本発明は、癌患者が最低１種類の追加の抗腫瘍薬を用いる治療を受けるいずれかの治療法の補助として合成ＣＸＣＲ３リガンド療法を意図し、この場合の追加の薬剤はチロシンキナーゼ阻害剤である。いくつかの実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤、例えば、Ｉ型受容体チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、上皮増殖因子受容体の阻害剤）、ＩＩ型受容体チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、インスリン受容体の阻害剤）、ＩＩＩ型受容体チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、血小板由来増殖因子受容体の阻害剤）、およびＩＶ型受容体チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、繊維芽細胞増殖因子受容体）である。その他の実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、非受容体チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、ｓｒｃキナーゼまたはヤヌスキナーゼの阻害剤である。

もう一つの態様では、本発明は、癌患者が最低１種類の追加の抗腫瘍薬を用いる治療を受けるいずれかの治療法の補助として合成ＣＸＣＲ３リガンド療法を意図し、この場合の追加の薬剤は増殖因子シグナル経路に関与する受容体チロシンキナーゼの阻害剤である。いくつかの実施形態では、この阻害剤はゲニステインである。その他の実施形態では、この阻害剤はＥＧＦＲチロシンキナーゼ特異的アンタゴニスト、例えば、イレッサ（商標）ゲフィチニブ（ＺＤ１８３９８；ノバルティス）、タルセバ（商標）エルロチニブ（ＯＳＩ−７７４；ロシュ；ジェネンテック；ＯＳＩファーマシューティカルズ）、またはチルホスチンＡＧ１４７８（４−（３−クロロアニリノ）−６，７−ジメトキシキナゾリンである。さらにその他の実施形態では、この阻害剤は、米国特許公報２００２／０１８３３６４Ａ１に記載された、Ｆｌｋ−１／ＫＤＲ（ＶＥＧＦ−Ｒ２）チロシンキナーゼ活性のインドリノンアンタゴニストのいずれか、例えば、その４〜５頁の表１に開示されるＦｌｋ−１／ＫＤＲ（ＶＥＧＦ−Ｒ２）チロシンキナーゼ活性のインドリノンアンタゴニストである。さらなる実施形態では、この阻害剤は、サン・Ｌ．ら、ジャーナル・オブ・メデ
ィカル・ケミストリー(Journal of Medical Chemistry)４３（１４）：２６５５〜２６６３頁（２０００）に開示されたＦｌｋ−１／ＫＤＲ（ＶＥＧＦ−Ｒ２）、ＦＧＦ−Ｒ１またはＰＤＧＦ−Ｒチロシンキナーゼ活性の置換３−［（４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インドール−２−イル）メチレン］−１，３−ジヒドロインドール−２−オン アンタゴニストのいずれかである。さらなる実施形態では、この阻害剤は、サン・Ｌ．ら、ジャーナル・オブ・メディカル・ケミストリー４２（２５）：５１２０〜５１３０頁（１９９９）に開示されたＦｌｔ−１（ＶＥＧＦ−Ｒ１）、Ｆｌｋ−１／ＫＤＲ（ＶＥＧＦ−Ｒ２）、ＦＧＦ−Ｒ１またはＰＤＧＦ−Ｒチロシンキナーゼ活性の置換３−［（３−または４−カルボキシエチルピロール−２−イル）メチリデニル］インドリン−２−オン アンタゴニストのいずれかである。

もう一つの態様では、本発明は、癌患者が最低１種類の追加の抗腫瘍薬を用いる治療を受けるいずれかの治療法の補助として合成ＣＸＣＲ３リガンド療法を意図し、この場合の追加の薬剤は増殖因子シグナル経路に関与する非受容体チロシンキナーゼの阻害剤である。いくつかの実施形態では、この阻害剤はＪＡＫ２チロシンキナーゼ活性のアンタゴニスト、例えば、チルホスチンＡＧ４９０（２−シアノ−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−Ｎ−（ベンジル）−２−プロペンアミド）である。その他の実施形態では、この阻害剤はｂｃｒ−ａｂｌチロシンキナーゼ活性のアンタゴニスト、例えばグリベック（商標）イマチニブメシレート（ＳＴＩ−５７１；ノバルティス）である。

もう一つの態様では、本発明は、癌患者が最低１種類の追加の抗腫瘍薬を用いる治療を受けるいずれかの治療法の補助として合成ＣＸＣＲ３リガンド療法を意図し、この場合の追加の薬剤はセリン／スレオニンキナーゼ阻害剤である。いくつかの実施形態では、セリン／スレオニンキナーゼ阻害剤は受容体セリン／スレオニンキナーゼ阻害剤、例えば、ＴＧＦ−β受容体セリン／スレオニンキナーゼ活性のアンタゴニストである。その他の実施形態では、セリン／スレオニンキナーゼ阻害剤は非受容体セリン／スレオニンキナーゼ阻害剤、例えば、ＭＡＰキナーゼ、タンパク質キナーゼＣ（ＰＫＣ）、タンパク質キナーゼＡ（ＰＫＡ）、またはサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）のセリン／スレオニンキナーゼ活性のアンタゴニストである。

もう一つの態様では、本発明は、癌患者が最低１種類の追加の抗腫瘍薬を用いる治療を受けるいずれかの治療法の補助として、合成ＣＸＣＲ３リガンド療法の組合せを意図し、この場合の追加の薬剤は細胞周期調節に関与する１以上のキナーゼの阻害剤である。いくつかの実施形態では、この阻害剤はＣＤＫ２活性化のアンタゴニスト、例えば、チルホスチンＡＧ４９０（２−シアノ−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−Ｎ−（ベンジル）−２−プロペンアミド）である。その他の実施形態では、この阻害剤はＣＤＫ１／サイクリンＢ活性のアンタゴニスト、例えば、アルスターパウロン(alsterpaullone)である。さらに別の実施形態では、この阻害剤はＣＤＫ２キナーゼ活性のアンタゴニスト、例えば、インディルビン−３’−モノオキシムである。さらなる実施形態では、この阻害剤はＡＴＰプールアンタゴニスト、例えば、ロメトレキソール（米国特許公報第２００２／０１５６０２３Ａ１に記載）である。

もう一つの態様では、本発明は、癌患者が最低１種類の追加の抗腫瘍薬を用いる治療を受ける治療法の補助として、合成ＣＸＣＲ３リガンド療法の組合せを意図し、この場合の追加の薬剤は腫瘍関連抗原アンタゴニスト、例えば抗体アンタゴニストである。ＨＥＲ２−発現性腫瘍の治療に関するいくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原アンタゴニストは抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体、例えば、ハーセプチン（商標）トラスツズマブである。Ｂ細胞リンパ腫などのＣＤ２０−発現性腫瘍の治療に関するいくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原アンタゴニストは抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、例えばリツキサン（商標）リツキシマブである。

もう一つの態様では、本発明は、癌患者が最低１種類の追加の抗腫瘍薬を用いる治療を受ける治療法の補助として、合成ＣＸＣＲ３リガンド療法の組合せを意図し、この場合の追加の薬剤は、腫瘍増殖因子アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、腫瘍増殖因子アンタゴニストは上皮増殖因子（ＥＧＦ）のアンタゴニスト、例えば、抗ＥＧＦモノクローナル抗体である。その他の実施形態では、腫瘍増殖因子アンタゴニストは上皮増殖因子受容体ｅｒｂＢＩ（ＥＧＦＲ）のアンタゴニスト、例えば、ＥＧＦＲ活性化またはシグナル伝達の抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体阻害剤である。

もう一つの態様では、本発明は、癌患者が最低１種類の追加の抗腫瘍薬を用いる治療を受ける治療法の補助として、合成ＣＸＣＲ３リガンド療法の組合せを意図し、この場合の追加の薬剤は、Ａｐｏ−２リガンドアゴニストである。いくつかの実施形態では、Ａｐｏ−２リガンドアゴニストはＷＯ９７／２５４２８に記載されたＡｐｏ−２リガンドポリペプチドのいずれかである。

もう一つの態様では、本発明は、癌患者が最低１種類の追加の抗腫瘍薬を用いる治療を受ける治療法の補助として、合成ＣＸＣＲ３リガンド療法の組合せを意図し、この場合の追加の薬剤は、抗血管形成薬である。いくつかの実施形態では、抗血管形成薬は血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）アンタゴニスト、例えば、抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体、例えば、アバスチン（商標）ベバシズマブ（ジェネンテック）である。その他の実施形態では、抗血管形成薬はレチノイン酸受容体（ＲＸＲ）リガンド、例えば、米国特許公報第２００１／００３６９５５Ａ１または米国特許第５，８２４，６８５号、同５，７８０，６７６号、同５，３９９，５８６号、同５，４６６，８６１号、同４，８１０，８０４号、同５，７７０，３７８号、同５，７７０，３８３号、もしくは同５，７７０，３８２号のいずれかに記載されたＲＸＲリガンドのいずれかである。さらに別の実施形態では、抗血管形成薬はペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）γリガンド、例えば米国特許公報第２００１／００３６９５５Ａ１に記載されたＰＰＡＲγリガンドのいずれかである。

放射線、主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを用いる治療、または化学療法薬と主題合成ＣＸＣＲ３リガンドを用いる治療を含む併用療法の、例示的な、限定されない組合せは下記の通りである。

１）一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量、および約５ｍｇ／ｍ²〜約１５０ｍｇ／ｍ²の投与量範囲のシスプラチン、

２）一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量、約５ｍｇ／ｍ²〜約１０００ｍｇ／ｍ²の投与量範囲のカルボプラチン、

３）一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量、および約２００ｃＧｙ〜約８０００ｃＧｙの投与量範囲の放射線、

４）一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量、および約４０ｍｇ／ｍ²〜約２５０ｍｇ／ｍ²の投与量範囲のパクリタキセル、

５）一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題
合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量、約４０ｍｇ／ｍ²〜約２５０ｍｇ／ｍ²の投与量範囲のパクリタキセル、および約５ｍｇ／ｍ²〜約１０００ｍｇ／ｍ²の投与範囲のカルボプラチン、

６）一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量、約５ｍｇ／ｍ²〜約５０００ｍｇ／ｍ²の投与量範囲の５ＦＵ、および約５ｍｇ／ｍ²〜約１０００ｍｇ／ｍ²の投与量範囲のロイコボリン、

７）一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量、ならびに初回負荷量４ｍｇ／ｋｇおよび毎週の維持量２ｍｇ／ｋｇのトラスツズマブ、

８）一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量、初回負荷量４ｍｇ／ｋｇおよび毎週の維持量２ｍｇ／ｋｇのトラスツズマブ、ならびに約４０ｍｇ／ｍ²〜約２５０ｍｇ／ｍ²の投与範囲のパクリタキセル、

９）一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量、約４０ｍｇ／ｍ²〜約２５０ｍｇ／ｍ²の投与量範囲のパクリタキセル、および約５ｍｇ／ｍ²〜約１０００ｍｇ／ｍ²の投与範囲のリン酸エストラムスチン（エムサイト(Emcyte)（登録商標））、

１０）一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量、約５ｍｇ／ｍ²〜約１５０ｍｇ／ｍ²の投与量範囲のシスプラチン、ならびに約５ｍｇ／ｍ²〜約５０００ｍｇ／ｍ²の投与範囲の５ＦＵ、

１１）一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量、約５ｍｇ／ｍ²〜約５０００ｍｇ／ｍ²の投与範囲の５ＦＵ、ならびに約２００ｃＧｙ〜約８０００ｃＧｙの投与範囲の放射線、

１２）一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの合成ＣＸＣＲ３リガンドを含む主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量、約５ｍｇ／ｍ²〜約５０００ｍｇ／ｍ²の投与量範囲の５ＦＵ、ならびに約４０ｍｇ／ｍ²〜約２５０ｍｇ／ｍ²の投与量範囲のパクリタキセル。

いくつかの実施形態では、前記の投与計画（例えば、投与計画１〜１２）のいずれかは、一用量あたり約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇの薬剤量を含むパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量を投与することをさらに包含する。

線維性疾患の治療のための合成ＣＸＣＲ３リガンド併用療法
本発明は、通常、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと少なくとも第２の治療薬とを投与することを含む、線維性疾患を治療するための併用療法を提供する。有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体とを投与することを含む線維性疾患のための併用療法は前に述べている。有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとＩ型インターフェロン受容体アゴニスト（例えば、ＩＦＮ−α）とを投与することを含む線維性疾患のための併用療法は、前に述べている。有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト（例えば、ＩＦＮ−γ）とを投与することを含む線維性疾患のための併用療法は前に述べている。

いくつかの実施形態では、本発明は、通常、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドおよ
びＴＮＦアンタゴニスト、ＴＧＦ−βアンタゴニスト、およびエンドセリン受容体アンタゴニストから選択される第２の治療薬を投与することを含む、線維性疾患を治療するための併用療法を提供する。これらの実施形態の中には、これらの併用療法方法のいずれかが、パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニスト、Ｉ型インターフェロン受容体アゴニスト、およびＳＡＰＫ阻害剤（パーフェニドン以外）のうちの１種類以上を投与することを含むよう改変されているものもある。

線維性疾患を治療するためのＴＮＦアンタゴニストを用いる併用療法における合成ＣＸＣＲ３リガンド
いくつかの実施形態では、線維性疾患を治療するための主題治療計画は、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとＴＮＦアンタゴニストとを投与することを含む。有効投与量のＴＮＦ−αアンタゴニストは、一用量あたり０．１μｇ〜４０ｍｇの範囲、例えば、一用量あたり約０．１μｇ〜約０．５μｇ、一用量あたり約０．５μｇ〜約１．０μｇ、一用量あたり約１．０μｇ〜一用量あたり約５．０μｇ、一用量あたり約５．０μｇ〜約１０μｇ、一用量あたり約１０μｇ〜約２０μｇ、一用量あたり約２０μｇ〜一用量あたり約３０μｇ、一用量あたり約３０μｇ〜一用量あたり約４０μｇ、一用量あたり約４０μｇ〜一用量あたり約５０μｇ、一用量あたり約５０μｇ〜一用量あたり約６０μｇ、一用量あたり約６０μｇ〜一用量あたり約７０μｇ、一用量あたり約７０μｇ〜約８０μｇ、一用量あたり約８０μｇ〜一用量あたり約１００μｇ、一用量あたり約１００μｇ〜約１５０μｇ、一用量あたり約１５０μｇ〜約２００μｇ、一用量あたり約２００μｇ〜一用量あたり約２５０μｇ、一用量あたり約２５０μｇ〜約３００μｇ、一用量あたり約３００μｇ〜約４００μｇ、一用量あたり約４００μｇ〜約５００μｇ、一用量あたり約５００μｇ〜約６００μｇ、一用量あたり約６００μｇ〜約７００μｇ、一用量あたり約７００μｇ〜約８００μｇ、一用量あたり約８００μｇ〜約９００μｇ、一用量あたり約９００μｇ〜約１０００μｇ、一用量あたり約１ｍｇ〜約１０ｍｇ、一用量あたり約１０ｍｇ〜約１５ｍｇ、一用量あたり約１５ｍｇ〜約２０ｍｇ、一用量あたり約２０ｍｇ〜約２５ｍｇ、一用量あたり約２５ｍｇ〜約３０ｍｇ、一用量あたり約３０ｍｇ〜約３５ｍｇ、または一用量あたり約３５ｍｇ〜約４０ｍｇの範囲である。

いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−αアンタゴニストは、エンブレル（登録商標）エタネルセプトである。有効投与量のエタネルセプトは、一用量あたり０．１μｇ〜４０ｍｇ、一用量あたり約０．１μｇ〜約１μｇ、一用量あたり約１μｇ〜約１０μｇ、一用量あたり約１０μｇ〜一用量あたり約１００μｇ、一用量あたり約１００μｇ〜約１ｍｇ、一用量あたり約１ｍｇ〜約５ｍｇ、一用量あたり約５ｍｇ〜約１０ｍｇ、一用量あたり約１０ｍｇ〜約１５ｍｇ、一用量あたり約１５ｍｇ〜約２０ｍｇ、一用量あたり約２０ｍｇ〜約２５ｍｇ、一用量あたり約２５ｍｇ〜約３０ｍｇ、一用量あたり約３０ｍｇ〜約３５ｍｇ、または一用量あたり約３５ｍｇ〜約４０ｍｇの範囲である。

いくつかの実施形態では、有効投与量のＴＮＦ−αアンタゴニストはｍｇ／体重１ｋｇとして表される。これらの実施形態では、有効投与量のＴＮＦ−αアンタゴニストは、約０．１ｍｇ／体重１ｋｇ〜約１０ｍｇ／体重１ｋｇ、例えば、約０．１ｍｇ／体重１ｋｇ〜約０．５ｍｇ／体重１ｋｇ、約０．５ｍｇ／体重１ｋｇ〜約１．０ｍｇ／体重１ｋｇ、約１．０ｍｇ／体重１ｋｇ〜約２．５ｍｇ／体重１ｋｇ、約２．５ｍｇ／体重１ｋｇ〜約５．０ｍｇ／体重１ｋｇ、約５．０ｍｇ／体重１ｋｇ〜約７．５ｍｇ／体重１ｋｇ、または約７．５ｍｇ／体重１ｋｇ〜約１０ｍｇ／体重１ｋｇである。

いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−αアンタゴニストはレミケード（登録商標）インフリキシマブである。有効投与量のレミケード（登録商標）は一用量あたり約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約１．０ｍｇ／ｋｇ、約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約１．５ｍｇ／ｋｇ、約１．５ｍｇ／ｋ
ｇ〜約２．０ｍｇ／ｋｇ、約２．０ｍｇ／ｋｇ〜約２．５ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ〜約３．０ｍｇ／ｋｇ、約３．０ｍｇ／ｋｇ〜約３．５ｍｇ／ｋｇ、約３．５ｍｇ／ｋｇ〜約４．０ｍｇ／ｋｇ、約４．０ｍｇ／ｋｇ〜約４．５ｍｇ／ｋｇ、約４．５ｍｇ／ｋｇ〜約５．０ｍｇ／ｋｇ、約５．０ｍｇ／ｋｇ〜約７．５ｍｇ／ｋｇ、または約７．５ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。

いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−αアンタゴニストはヒューミラ（商標）アダリムマブである。有効投与量のヒューミラ（商標）は、一用量あたり約０．１μｇ〜約３５ｍｇ、約０．１μｇ〜約１μｇ、約１μｇ〜約１０μｇ、約１０μｇ〜約１００μｇ、約１００μｇ〜約１ｍｇ、約１ｍｇ〜約５ｍｇ、約５ｍｇ〜約１０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１５ｍｇ、約１５ｍｇ〜約２０ｍｇ、約２０ｍｇ〜約２５ｍｇ、約２５ｍｇ〜約３０ｍｇ、約３０ｍｇ〜約３５ｍｇ、または約３５ｍｇ〜約４０ｍｇの範囲である。

多くの実施形態では、ＴＮＦ−αアンタゴニストを約１日〜約７日間、または約１週〜約２週間、または約２週〜約３週間、または約３週〜約４週間、または約１ヶ月〜約２ヶ月、または約３ヶ月〜約４ヶ月、または約４ヶ月〜約６ヶ月、または約６ヶ月〜約８ヶ月、または約８ヶ月〜約１２ヶ月、または少なくとも１年の一定期間投与し、またそれより長い期間投与してよい。ＴＮＦ−αアンタゴニストは、１日３回、１日２回、１日１回、２日に１回、週２回、週３回、週１回、２週に１回、月３回、月１回、実質的に連続的に、あるいは連続的に投与できる。

多くの実施形態では、ＴＮＦ−αアンタゴニストの複数回用量を投与する。例えば、ＴＮＦ−αアンタゴニストは、月１回、月２回、月３回、２週に１回（ｑｏｗ）、週１回（ｑｗ）、週２回（ｂｉｗ）、週３回（ｔｉｗ）、週４回、週５回、週６回、２日に１回（ｑｏｄ）、１日１回（ｑｄ）、１日２回（ｂｉｄ）、または１日３回（ｔｉｄ）、実質的に連続して、または連続して、約１日〜約１週間、約２週〜約４週間、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年、あるいはそれより長い期間にわたって投与する。

用量レベルが、特定の化合物の機能、症状の重篤度および被験体の副作用への感受性に応じて変化し得ることは、当業者であれば容易に理解される。所与の化合物の好ましい投与量は、当業者であれば種々の手段で容易に決定できる。好ましい手段とは、所与の化合物の生理学的効力を測定することである。

主題合成ＣＸＣＲ３リガンドおよびＴＮＦアンタゴニストは、通常、別個の製剤で投与する。主題合成ＣＸＣＲ３リガンドおよびＴＮＦアンタゴニストは、互いに実質的に同時に、あるいは約３０分、約１時間、約２時間、約４時間、約８時間、約１６時間、約２４時間、約３６時間、約７２時間、約４日、約７日、または約２週以内に投与できる。

一実施形態では、本発明は、ａ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇ量を含み、筋肉内または皮下に１日１回、２日に１回、週３回または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、ｂ）約０．１μｇ〜４０ｍｇ量を含み、１日３回、１日２回、１日１回、２日に１回、週２回、週３回、週１回、２週に１回、月３回、月１回皮下に投与するＴＮＦアンタゴニストの投与量とを、所望の治療期間の間、線維性疾患を治療するために患者へ投与することを含んでなる、患者における線維性疾患の治療において有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドおよびＴＮＦアンタゴニストを用いる方法を提供する。

一実施形態では、本発明は、ａ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１
μｇ〜約１０００μｇ量を含み、筋肉内または皮下に１日１回、２日に１回、週３回または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、ｂ）（ｉ）約２５ｍｇの薬剤量で皮下に週２回のエンブレル（登録商標）（ｉｉ）約３ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの薬剤量で静脈内に週１回、２週に１回、月３回、月１回、６週に１回、または８週に１回のレミケード（登録商標）あるいは（ｉｉｉ）約４０ｍｇの薬剤量で皮下に週１回、２週に１回、月３回、月１回、６週に１回、または８週に１回のヒューミラ（商標）からなる群から選択されるＴＮＦ−αアンタゴニスト投与量とを、所望の治療期間の間、線維性疾患を治療するために患者へ投与することを含んでなる、患者における線維性疾患の治療において有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドおよびＴＮＦアンタゴニストを用いる方法を提供する。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドおよびＴＮＦアンタゴニストを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体をさらに投与することを含む。パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体の有効量は前記で議論されている。

一実施形態では、本発明は、ａ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇ量を含み、筋肉内または皮下に１日１回、２日に１回、週３回または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、ｂ）（ｉ）約２５ｍｇの薬剤量で皮下に週２回のエンブレル（登録商標）（ｉｉ）約３ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの薬剤量で静脈内に週１回、２週に１回、月３回、月１回、６週に１回、または８週に１回のレミケード（登録商標）、あるいは（ｉｉｉ）約４０ｍｇの薬剤量で皮下に週１回、２週に１回、月３回、月１回、６週に１回、または８週に１回のヒューミラ（商標）からなる群から選択されるＴＮＦ−αアンタゴニストの投与量とを、所望の治療期間の間、ならびにｃ）パーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の一用量あたり約１００ｍｇ〜約１，０００ｍｇの薬剤量を含み、経口的に１日１回、場合によって１日あたり２回以上の分割用量でというパーフェニドンまたは特定のパーフェニドン類似体の投与量を含むパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体の投与量とを、所望の治療期間の間、線維性疾患を治療するために患者へ投与することを含んでなる、患者における線維性疾患の治療において有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと、ＴＮＦアンタゴニストとパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体とを用いる方法を提供する。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドおよびＴＮＦアンタゴニストを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストをさらに投与することを含む。ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストの有効量は前記で議論されている。

一実施形態では、本発明はａ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇ量を含み、筋肉内または皮下に１日１回、２日に１回、週３回または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、ｂ）（ｉ）約２５ｍｇの薬剤量で皮下に週２回のエンブレル（登録商標）（ｉｉ）約３ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの薬剤量で静脈内に週１回、２週に１回、月３回、月１回、６週に１回、または８週に１回のレミケード（登録商標）、あるいは（ｉｉｉ）約４０ｍｇの薬剤量で皮下に週１回、２週に１回、月３回、月１回、６週に１回、または８週に１回のヒューミラ（商標）からなる群から選択されるＴＮＦ−αアンタゴニストの投与量を所望の治療期間の間、ならびにｃ）約２５μｇ、５０μｇ、１００μｇ、１５０μｇ、または２００μｇ量を含み、皮下に週３回投与されるアクティミュー
ン（登録商標）ＩＦＮ−γ１ｂの投与量を所望の治療期間の間、線維性疾患を治療するために患者へ投与することを含んでなる、患者における線維性疾患の治療において有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンド、ＴＮＦアンタゴニストおよびＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストを用いる方法を提供する。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとＴＮＦアンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＩ型インターフェロン受容体アゴニストをさらに投与することを含む。Ｉ型インターフェロン受容体アゴニストの有効量は前記で議論されている。

一実施形態では、本発明は、ａ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇ量を含み、筋肉内または皮下に１日１回、２日に１回、週３回または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、ｂ）（ｉ）約２５ｍｇの薬剤量で皮下に週２回のエンブレル（登録商標）（ｉｉ）約３ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの薬剤量で静脈内に週１回、２週に１回、月３回、月１回、６週に１回、または８週に１回のレミケード（登録商標）、あるいは（ｉｉｉ）約４０ｍｇの薬剤量で皮下に週１回、２週に１回、月３回、月１回、６週に１回、または８週に１回のヒューミラ（商標）からなる群から選択されるＴＮＦ−αアンタゴニストの投与量を所望の治療期間の間、ならびにｃ）（ｉ）インファゲン（登録商標）の一用量あたり約１μｇ〜約３０μｇの薬剤量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、週２回、週１回、２週に１回、月３回、月１回、あるいは１日あたり連続してまたは実質的に連続してというインファゲン（登録商標）（ｉｉ）ＰＥＧ−ＣＩＦＮの一用量あたり約１０μｇ〜約１００μｇ、または約４５μｇ〜約６０μｇのＣＩＦＮアミノ酸重量を含み、皮下に週１回、２週に１回、月３回、または月１回というＰＥＧ化コンセンサスＩＦＮ−α（ＰＥＧ−ＣＩＦＮ）（ｉｉｉ）ＩＦＮ−α２ａ、２ｂまたは２ｃの一用量あたり約３ＭＵ〜約１０ＭＵの薬剤量を含み、皮下に１日１回、２日に１回、週３回、週２回、あるいは１日あたり連続してまたは実質的に連続的してというＩＦＮ−α２ａ、２ｂまたは２ｃ（ｉｖ）ペガシス（登録商標）の一用量あたり約９０μｇ〜約３６０μｇ、または約１８０μｇの薬剤量を含み、皮下に週１回、２週に１回、月３回、または月１回というペガシス（登録商標）（ｖ）ＰＥＧ−イントロン（登録商標）の一用量あたり体重１キログラムあたり約０．７５μｇ〜約３．０μｇ、または約１．０μｇ〜約１．５μｇの薬剤量を含み、皮下に週２回、週１回、２週に１回、月３回、または月１回というＰＥＧ−イントロン（登録商標）、あるいは（ｖｉ）モノＰＥＧ（３０ｋＤ、直鎖）化コンセンサスＩＦＮ−αの一用量あたり約１００μｇ〜約２００μｇ、または約１５０μｇの薬剤量を含み、皮下に週１回、２週に１回、８日に１回〜１４日に１回、月３回、または月１回というモノＰＥＧ（３０ｋＤ、直鎖）化コンセンサスＩＦＮ−αから選択されるＩＦＮ−αの投与量を所望の治療期間の間、線維性疾患を治療するために患者へ投与することを含んでなる、患者における線維性疾患の治療において有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと、ＴＮＦアンタゴニストとＩ型インターフェロン受容体アゴニストとを用いる方法を提供する。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとＴＮＦアンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＳＡＰＫ阻害剤をさらに投与することを含む。

有効量のＳＡＰＫ阻害剤は、約５μｇ〜約３，０００ｍｇ、例えば、約５μｇ〜約１０μｇ、約１０μｇ〜約２５μｇ、約２５μｇ〜約５０μｇ、約５０μｇ〜約１００μｇ、約１００μｇ〜約２５０μｇ、約２５０μｇ〜約５００μｇ、約５００μｇ〜約７５０μ
ｇ、約７５０μｇ〜約１ｍｇ、約１ｍｇ〜約５ｍｇ、約５ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１０００ｍｇ〜約１５００ｍｇ、約１５００ｍｇ〜約２０００ｍｇ、約２０００ｍｇ〜約２５００ｍｇ、または約２５００ｍｇ〜約３０００ｍｇの範囲である。

ＳＡＰＫ阻害剤は、月１回、月２回、月３回、週１回、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回、２日に１回、１日１回、１日２回、または１日１回〜５回の範囲の分割日用量で投与できる。

ＳＡＰＫ阻害剤はどのような頻度でも、また約１日〜約１週、約２週〜約４週、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年、もしくはそれ以上の期間にわたって投与することができる。

一実施形態では、本発明はａ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇ量を含み、筋肉内または皮下に１日１回、２日に１回、週３回または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量を、所望の治療期間の間、ｂ）（ｉ）約２５ｍｇの薬剤量で皮下に週２回のエンブレル（登録商標）（ｉｉ）約３ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの薬剤量で静脈内に週１回、２週に１回、月３回、月１回、６週に１回、または８週に１回のレミケード（登録商標）、あるいは（ｉｉｉ）約４０ｍｇの薬剤量で皮下に週１回、２週に１回、月３回、月１回、６週に１回、または８週に１回のヒューミラ（商標）からなる群から選択されるＴＮＦ−αアンタゴニストの投与量を所望の治療期間の間、ならびにｃ）ＳＡＰＫ阻害剤の投与量を約１０μｇ／ｋｇ／日〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の重量ベースの投与量で、あるいは１日あたり約１００μｇ〜約１０００ｍｇ、または１日あたり約１００μｇ〜約１ｍｇ、または１日あたり約１ｍｇ〜約１０ｍｇ、または１日あたり約１０ｍｇ〜約１００ｍｇ、または１日あたり約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇの固定投与量で、所望の治療期間の間、線維性疾患を治療するために経口的に投与することを含んでなる、患者における線維性疾患の治療において有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドと、ＴＮＦアンタゴニストおよびＳＡＰＫ阻害剤とを用いる方法を提供する。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとＴＮＦアンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＴＧＦ−βアンタゴニストをさらに投与することを含む。ＴＧＦ−βアンタゴニストの有効量は前記で論じている。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとＴＮＦアンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のエンドセリン受容体アンタゴニストをさらに投与することを含む。エンドセリン受容体アンタゴニストの有効量は下記で論じている。

線維性疾患を治療するためのＴＧＦ−βアンタゴニストを用いる併用療法における合成ＣＸＣＲ３リガンド
いくつかの実施形態では、線維性疾患を治療するための主題治療投与計画は、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとＴＧＦ−βアンタゴニストとを投与することを含む。有効量のＴＧＦ−βアンタゴニストは、約０．２５ｍｇ／ｋｇ／日〜約２５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の重量ベースの投与量、または１日あたり約２５μｇ〜約１０００ｍｇ（例えば、１日あたり約２５μｇ〜約５０μｇ、約５０μｇ〜約７５μｇ、約７５μｇ〜約１００μｇ、約１００μｇ〜約２００μｇ、約２００μｇ〜約５００μｇ、約５００μｇ〜約１ｍｇ
、約１ｍｇ〜約１０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２５ｍｇ、約２５ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約３００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、または約７５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ）の固定投与量を含み、経口、皮下、静脈内、または筋肉内投与する。投与量は、幾分かは、投与する具体的なＴＧＦ−βアンタゴニストに応じて変わる。

いくつかの実施形態では、ＴＧＦ−βアンタゴニストはグリベック（商標）である。グリベック（商標）の適した投与量としては、例えば、１日約２５ｍｇ〜約１０００ｍｇ、例えば１日２５ｍｇ〜５０ｍｇ、５０ｍｇ〜１００ｍｇ、１００ｍｇ〜２００ｍｇ、２００ｍｇ〜３００ｍｇ、３００ｍｇ〜４００ｍｇ、４００ｍｇ〜５００ｍｇ、５００ｍｇ〜６００ｍｇ、６００ｍｇ〜７００ｍｇ、７００ｍｇ〜８００ｍｇ、８００ｍｇ〜９００ｍｇ、または９００ｍｇ〜１０００ｍｇのグリベック（商標）が挙げられる。特定の実施形態では、１日の合計日用量を、２５ｍｇ〜５０ｍｇ、５０ｍｇ〜１００ｍｇ、１００ｍｇ〜２００ｍｇ、２００ｍｇ〜３００ｍｇ、３００ｍｇ〜４００ｍｇ、４００ｍｇ〜５００ｍｇの２回の日用量として被験体へ投与する。特定の実施形態では、グリベック（商標）を４００ｍｇグリベック（商標）という量で毎日経口投与する。もう一つの特定の実施形態では、グリベック（商標）を６００ｍｇグリベック（商標）という量で毎日経口投与する。

ＴＧＦ−βアンタゴニストは、月１回、月２回、月３回、週１回、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回、毎日、または１日１回〜５回の範囲の分割日用量で、約１日〜約１週、約２週〜約４週、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年、あるいはそれ以上の範囲の期間にわたって投与する。

ＴＧＦ−βアンタゴニストの複数回用量を投与できる。例えば、ＴＧＦ−βアンタゴニストを月１回、月２回、月３回、週１回、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回、または毎日、約１日〜約１週、約２週〜約４週、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年、あるいはそれ以上の範囲の期間にわたって投与できる。

いくつかの実施形態では、本発明は患者における線維性疾患の治療において、有効量のｉ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとｉｉ）ＴＧＦ−βアンタゴニストとを組合せて用いる併用療法の方法を提供し、この方法はａ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇ量を含み、所望の治療期間の間、筋肉内または皮下に１日１回、２日に１回、週３回または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、ｂ）一日あたり約２５μｇ〜約１０００ｍｇの量を含み、所望の治療期間の間、１日３回、１日２回、１日１回、２日に１回、週３回、または週２回、週１回、２週に１回、月３回、月１回経口、皮下、静脈内または筋肉内に投与されるＴＧＦ−βアンタゴニストの投与量とを、線維性疾患を治療するために患者へ同時に投与することを含んでなる。

いくつかの実施形態では、本発明は患者における線維性疾患の治療において、有効量のｉ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとｉｉ）ＴＧＦ−βアンタゴニストとを組合せて用いる併用療法の方法を提供し、この方法はａ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇ量を含み、所望の治療期間の間、筋肉内または皮下に１日１回、２日に１回、週３回または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、ｂ）一日あたり約４００ｍｇ〜約６００ｍｇの量を含み、所望の治療期間の間、１日１回経口投与されるグリベック（商標）
の投与量とを、、線維性疾患を治療するために患者へ同時に投与することを含んでなる。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとＴＧＦ−βアンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体をさらに投与することを含む。パーフェニドンまたはパーフェニドン類似体の有効量は前記で論じている。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとＴＧＦ−βアンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストをさらに投与することを含む。ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストの有効量は前記で論じている。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとＴＧＦ−βアンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＩ型インターフェロン受容体アゴニストをさらに投与することを含む。Ｉ型インターフェロン受容体アゴニストの有効量は前記で論じている。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとＴＧＦ−βアンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＳＡＰＫ阻害剤をさらに投与することを含む。ＳＡＰＫ阻害剤の有効量は前記で論じている。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとＴＧＦ−βアンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＴＮＦアンタゴニストをさらに投与することを含む。ＴＮＦアンタゴニストの有効量は前記で論じている。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとＴＧＦ−βアンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のエンドセリン受容体アンタゴニストをさらに投与することを含む。エンドセリン受容体アンタゴニストの有効量は前記で論じている。

線維性疾患を治療するためのエンドセリン受容体アンタゴニストを用いる併用療法における合成ＣＸＣＲ３リガンド
いくつかの実施形態では、線維性疾患を治療するための主題治療投与計画は有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとエンドセリン受容体アンタゴニストとを投与することを含む。有効な投与量のエンドセリン受容体アンタゴニストとしては、約０．２５ｍｇ／ｋｇ／日〜約２５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の重量ベースの投与量、あるいは１日あたり約２５μｇ〜約１０００ｍｇ（例えば、１日あたり約２５μｇ〜約５０μｇ、約５０μｇ〜約７５μｇ、約７５μｇ〜約１００μｇ、約１００μｇ〜約２００μｇ、約２００μｇ〜約５００μｇ、約５００μｇ〜約１ｍｇ、約１ｍｇ〜約１０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２５ｍｇ、約２５ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約３００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ）の固定投与量が挙げられる。この投与量は、幾分かは、投与する具体的なエンドセリン受容体アンタゴニストに応じて変わる。エンドセリン受容体アンタゴニストは、通常、経口、皮下、静脈内、または筋
肉内投与するが、その他の投与経路も可能である。

いくつかの実施形態では、エンドセリン受容体アンタゴニストはトラクリア（商標）である。トラクリア（商標）の適した投与量としては、例えば、１日１回または２回の約２５ｍｇ〜約１５０ｍ、例えば、１日１回または２回の約２５ｍｇ〜約３０ｍｇ、約３０ｍｇ〜約４０ｍｇ、約４０ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約６０ｍｇ、約６０ｍｇ〜約７０ｍｇ、約７０ｍｇ〜約８０ｍｇ、約８０ｍｇ〜約９０ｍｇ、約９０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約１２５ｍｇ、または約１２５ｍｇ〜約１５０ｍｇのトラクリア（商標）が挙げられる。いくつかの実施形態では、トラクリア（商標）を６２．５ｍｇトラクリア（商標）という量で１日２回４週間経口投与し、その後１２５ｍｇという量のトラクリア（商標）を１日２回所望の治療期間経口投与する。

エンドセリン受容体アンタゴニストは、月１回、月２回、月３回、週１回、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回、毎日、または日用量を１日１回〜５回の範囲の分割日用量で、約１日〜約１週、約２週〜約４週、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年、あるいはそれ以上の範囲の期間にわたって投与する。

エンドセリン受容体アンタゴニストの複数回用量を投与してもよい。例えば、エンドセリン受容体アンタゴニストは月１回、月２回、月３回、２週に１回（ｑｏｗ）、週１回（ｑｗ）、週２回（ｂｉｗ）、週３回（ｔｉｗ）、週４回、週５回、週６回、２日に１回（ｑｏｄ）、１日１回（ｑｄ）、１日２回（ｂｉｄ）、または１日３回（ｔｉｄ）、約１日〜約１週、約２週〜約４週、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年、あるいはそれ以上の範囲の期間にわたって投与できる。

いくつかの実施形態では、本発明は、患者における線維性疾患の治療において有効量のｉ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとｉｉ）エンドセリン受容体アンタゴニストとを組合せて用いる方法を提供し、この方法は、ａ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの量を含み、所望の治療期間の間、筋肉内または皮下に１日１回、２日に１回、週３回または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、ｂ）１日あたり約２５μｇ〜１０００ｍｇ量を含み、所望の治療期間の間、１日３回、１日２回、１日１回、２日に１回、週２回、週３回、週１回、２週に１回、月３回、または月１回、経口、皮下、静脈内、または筋肉内に投与される、エンドセリン受容体アンタゴニストの投与量とを、線維性疾患を治療するために患者へ同時投与することを含む。

いくつかの実施形態では、本発明は、患者における線維性疾患の治療において有効量のｉ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとｉｉ）エンドセリン受容体アンタゴニストとを組合せて用いる方法を提供し、この方法は、ａ）主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの一用量あたり約０．１μｇ〜約１０００μｇの量を含み、所望の治療期間の間、筋肉内または皮下に１日１回、２日に１回、週３回または週２回、あるいは１日あたり実質的に連続してまたは連続してという主題合成ＣＸＣＲ３リガンドの投与量と、ｂ）６２．５ｍｇまたは１２５ｍｇ量を含み、所望の治療期間の間、１日２回経口投与されるトラクリア（商標）の投与量とを、線維性疾患を治療するために患者へ同時投与することを含む。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとエンドセリン受容体アンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のパーフェニドンまたはパーフェニドン類似体をさらに投与することを含む。パーフェニドンまたはパーフェ
ニドン類似体の有効量は前記で論じている。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドおよびエンドセリン受容体を投与することを特徴とする上記の治療投与計画のうちのいずれかの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストをさらに投与することを含む。ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストの有効量は前記で論じている。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとエンドセリン受容体とを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＩ型インターフェロン受容体アゴニストをさらに投与することを含む。Ｉ型インターフェロン受容体アゴニストの有効量は前記で論じている。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとエンドセリン受容体アンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＳＡＰＫ阻害剤をさらに投与することを含む。ＳＡＰＫ阻害剤の有効量は前記で論じている。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとエンドセリン受容体アンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＴＮＦアンタゴニストをさらに投与することを含む。ＴＮＦアンタゴニストの有効量は前記で論じている。

いくつかの実施形態では、本発明は、主題ＣＸＣＲ３リガンドとエンドセリン受容体アンタゴニストとを投与することを特徴とする前記の治療投与計画のうちのいずれか１つの改変を含む、併用療法の方法を提供し、この場合の改変とは、有効量のＴＧＦ−βアンタゴニストをさらに投与することを含む。ＴＧＦ−βアンタゴニストの有効量は前記で論じている。

線維性疾患を治療するためのＮ−アセチルシステインを用いる併用療法における合成ＣＸＣＲ３リガンド
いくつかの実施形態では、線維性疾患を治療する主題方法は、有効量の主題合成ＣＸＣＲ３リガンドとＮ−アセチルシステインとを投与することを含む。さらに、線維性疾患を治療するための前記の治療投与計画のうちのいずれかを改変して、有効量のＮ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）の投与を含めることができる。

有効量のＮＡＣは、１日あたり約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、または１日あたり約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ、または１日あたり約５００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、または１日あたり約７５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、または１日あたり約４００ｍｇ〜約３６００ｍｇ、または１日あたり約８００ｍｇ〜約２４００ｍｇ、または１日あたり約１０００ｍｇ〜約１８００ｍｇ、または１日あたり約１２００ｍｇ〜約１６００ｍｇの範囲であり得る。

ＮＡＣは、月１回、月２回、月３回、週１回、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回、２日に１回、１日１回、１日２回、１日３回、または１日２回〜５回の範囲の分割日用量で投与することができる。

ＮＡＣはどのような頻度でも、また約１日〜約１週、約２週〜約４週、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年、もしくはそれ以上の期間にわたって投与す
ることができる。

いくつかの実施形態では、ＮＡＣは、主題併用療法の全過程にわたって投与する。その他の実施形態では、ＮＡＣは、併用療法の全過程より短い期間、例えば、併用療法の第１相の間のみ、併用療法の第２相の間のみ、または併用療法の治療投与計画の何らかのその他の部分で投与する。

いくつかの実施形態では、ＮＡＣは、１日あたり約５００ｍｇ〜約３０００ｍｇの量のＮＡＣを含むＮＡＣの投与量で、場合によって１日あたり２回以上の分割用量で、所望の治療期間経口投与する。

いくつかの実施形態では、ＮＡＣは、一用量あたり５００ｍｇの薬剤の投与量で、１日１回、１日２回または１日３回、所望の治療期間経口投与する。

その他の実施形態では、ＮＡＣは、一用量あたり６００ｍｇの薬剤の投与量で、１日１回、１日２回または１日３回、所望の治療期間経口投与する。

その他の実施形態では、ＮＡＣは、一用量あたり７５０ｍｇの薬剤の投与量で、１日１回、１日２回または１日３回、所望の治療期間経口投与する。

その他の実施形態では、ＮＡＣは、一用量あたり１０００ｍｇの薬剤の投与量で、１日１回、１日２回または１日３回、所望の治療期間経口投与する。

さらなる組合せ
限定されない例として、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストの投与計画を特徴とする前記の治療方法のうちのいずれかを改変して、主題ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストの投与計画を、一用量あたり２５μｇの薬剤量を含むＩＦＮ−γの投与量を所望の治療期間週３回皮下投与することを含んでなるＩＦＮ−γの投与計画に置き換えることができる。

限定されない例として、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストの投与計画を特徴とする前記の治療方法のうちのいずれかを改変して、主題ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストの投与計画を一用量あたり５０μｇの薬剤量を含むＩＦＮ−γの投与量を所望の治療期間週３回皮下投与することを含んでなるＩＦＮ−γの投与計画に置き換えることができる。

限定されない例として、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストの投与計画を特徴とする前記の治療方法のうちのいずれかを改変して、主題ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストの投与計画を、一用量あたり１００μｇの薬剤量を含むＩＦＮ−γの投与量を所望の治療期間週３回皮下投与することを含んでなるＩＦＮ−γの投与計画に置き換えることができる。

限定されない例として、ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストの投与計画を特徴とする前記の治療方法のうちのいずれかを改変して、主題ＩＩ型インターフェロン受容体アゴニストの投与計画を、一用量あたり２００μｇの薬剤量を含むＩＦＮ−γの投与量を所望の治療期間週３回皮下投与することを含んでなるＩＦＮ−γの投与計画に置き換えることができる。

限定されない例として、ＴＧＦ−βアンタゴニストの投与計画を特徴とする前記の治療方法のうちのいずれかを改変して、主題ＴＧＦ−βアゴニストの投与計画を、１日あたり
４００ｍｇ〜８００ｍｇ、または６００ｍｇの薬剤量を含むグリベック（商標）の投与量を、場合によって１日あたり２回以上の分割日用量で所望の治療期間経口投与することを含んでなるグリベック（商標）の投与計画に置き換えることができる。

限定されない例として、エンドセリン受容体アンタゴニストの投与計画を特徴とする前記の治療方法のうちのいずれかを改変して、主題エンドセリン受容体アンタゴニストの投与計画を、治療の最初の４週間は６２．５ｍｇの薬剤量を含むトラクリア（商標）の投与量を経口的に１日２回、次いで、治療の残りの期間は１２５ｍｇの薬剤量を含むトラクリア（商標）の投与量を経口的に１日２回、所望の治療期間投与することを含んでなるエンドセリン受容体アンタゴニストの投与計画に置き換えることができる。

限定されない例として、ＴＮＦアンタゴニストの投与計画を特徴とする前記の治療方法のうちのいずれかを改変して、主題ＴＮＦアンタゴニストの投与計画を、（ｉ）一用量あたり２５ｍｇの薬剤量で皮下に週２回のエタネルセプト（ｉｉ）一用量あたり体重１キログラムあたり３ｍｇの薬剤量で静脈内に０週、２週および６週に、ならびにその後は８週おきのインフリキシマブ、あるいは（ｉｉｉ）一用量あたり４０ｍｇの薬剤量で皮下に週１回または２週に１回のアダリムマブからなる群から選択されるＴＮＦアンタゴニストの投与量を所望の治療期間投与することを含んでなるＴＮＦアンタゴニストの投与計画に置き換えることができる。

本発明は、有効量の副作用対応薬（「緩和薬」）を所望の治療期間投与することを含むよう改変された、前記の治療方法のうちのいずれかを提供する。多くの実施形態では、副作用対応薬は、１以上のアセトアミノフェン、イブプロフェン、およびその他のＮＳＡＩＤ、Ｈ２ブロッカー、ならびに制酸剤から選択される。例えば、主題併用療法における第２の治療薬がＩＦＮ−αまたはＩＦＮ−γである場合、副作用対応薬を投与してもよい。

適したＮＳＡＩＤとしては、それだけには限らないが、１）オキシカム系、例えばピロキシカム、イソキシカム、テノキシカムおよびスドキシカム；２）サリチル酸類、例えばアスピリン、ジサルシッド(disalcid)、ベノリレート(benorylate)、トリリセート(trilisate)、サファプリン(safapryn)、ソルプリン(solprin)、ジフルニサル、およびフェンドサル(fendosal)；３）酢酸誘導体、例えば、ジクロフェナク、フェンクロフェナク、インドメタシン、スリンダック、トルメチン、イソキセパク、フロフェナク、チオピナク、ジドメタシン、アセマタシン(acematacin)、フェンチアザク、ゾメピラクト(zomepiract)、クリダナク、オキセピナク、およびフェルビナク；４）フェナマート類、例えばメフェナム酸、メクロフェナム酸、フルフェナム酸、ニフルム酸、およびトルフェナム酸；５）プロピオン酸誘導体、例えば、イブプロフェン、ナプロキセン、ベノキサプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、フェノプロフェン、フェンブフェン、インドプロフェン、ピルプロフェン、カルプロフェン、オキサプロジン、プラノプロフェン、ミロプロフェン、チオキサプロフェン、スプロフェン、アルミノプロフェン、およびチアプロフェニック(tiaprofenic)、ならびに６）ピラゾール類、例えば、フェニルブタゾン、オキシフ
ェンブタゾン、フェプラゾン、アザプロパゾン、およびトリメタゾンが挙げられ、これらの非ステロイド系抗炎症薬の混合物、ならびにこれらの薬剤の製薬上許容される塩およびエステルも使用できる。

主題治療法において緩和薬として使用するのに適している適したＨ２ブロッカー（ヒスタミン２型受容体アンタゴニスト）としては、それだけには限らないが、シメチジン（例えば、タガメット、ペプトール(Peptol)、ニューシメット(Nu-cimet)、アポ−シメチジン(apo-cimetidine)、非シメチジン(non-cimetidine)）、ラニチジン（例えば、ザンタック、ニューラニット(Nu-ranit)、ノボランジン(Novo-randine)、およびアポラニチジン(apo-ranitidine)）；ならびにファモチジン（ペプシド、アポ−ファモチジン、およびノボ−
ファモチジン）が挙げられる。

治療に適した被験体
主題方法は線維性疾患を治療する主題方法を用いる治療に適しており、ＩＰＦ、肝線維症または腎線維症などの線維性疾患であると診断された個体を含む。主題の方法は、線維性疾病を発症するリスクのある個体の治療にも適している。

本発明の癌治療の方法を用いる治療に適した被験体としては、いずれかの種類の癌を患う個体が挙げられる。特定の実施形態では、適した被験体は、合成ＣＸＣＲ３リガンド療法を用いる治療に感受性のある癌を患うものである。

本発明の方法に従う治療に適した肝線維症の個体としては、肝線維症であると臨床的に診断されている個体、ならびに臨床的な肝線維症はまだ発症していないが、肝線維症を発症するリスクがあると考えられる個体が挙げられる。かかる個体としては、それだけには限らないが、ＨＣＶに感染している個体；ＨＢＶに感染している個体；マンソン住血吸虫に感染している個体；肝線維症を招くことが知られている化学薬品に暴露したことがある個体；ウィルソン病と診断されている個体；血色素症と診断された個体；およびアルコール性肝疾患を患う個体；非アルコール性脂肪性肝炎を患う個体；自己免疫性肝炎を患う個体；原発性硬化性胆管炎、原発性胆汁性肝硬変、またはα−１−抗トリプシン欠損症を患う個体が挙げられる。

ＨＣＶに感染していると臨床的に診断されている個体は、多くの実施形態で特に注目される。ＨＣＶに感染している個体は、その血液中にＨＣＶ ＲＮＡを有し、および／またはその血清中に抗ＨＣＶ抗体を有することで同定される。多くの実施形態において注目する個体としては、重篤な線維症または初期の肝硬変（非代償不全性、チャイルド・ピュークラスＡまたはそれ以下）、あるいは慢性ＨＣＶ感染症によってさらに進行した肝硬変（代償不全性、チャイルド・ピュークラスＢまたはＣ）を示す個体、およびＩＦＮ−αに基づく療法を用いる事前の抗ウイルス治療にもかかわらずウイルス血症の個体またはＩＦＮ−αに基づく療法を許容できない個体、あるいはかかる療法に対する禁忌を有する個体が挙げられる。注目する特定の実施形態では、ＭＥＴＡＶＩＲ評価システムに従ってステージ３または４の肝線維症を患うＨＣＶ陽性の個体が、本発明の方法を用いる治療に適している。その他の実施形態では、本発明の方法を用いる治療に適した個体は、臨床症状のある代償不全性肝硬変の患者、例えば、高度に進行した肝硬変患者、例えば肝移植を待っている患者である。さらに別の実施形態では、本発明の方法を用いる治療に適した個体としては、軽度の線維症を患う患者、例えば初期の線維症を患う患者（ＭＥＴＡＶＩＲ、ルートビッヒ、およびショイアーの評価システムでステージ１および２、あるいはイサーク評価システムでステージ１、２、または３）が挙げられる。

主題方法は、ＩＰＦを患うと診断された個体の治療に適している。本方法はまた、２４ヶ月以内にコルチコステロイドを用いる医療を既に受け、かつコルチコステロイドを用いるそれまでの治療に対して応答しなかった、ＩＰＦを患う個体の治療に適している。予測ＦＶＣの少なくとも５５％である治療開始時ＦＶＣを有する被験体も挙げられる。このパーセント予測ＦＶＣ値は、当技術分野で公知の正常値に基づいている。例えば、クラポ(Crapo)ら（１９８１）アメリカン・レヴュー・オブ・レスピラトリー・ディジーズ(American Review Respiratory Disease)１２３：６５９〜６６４頁参照。ＦＶＣはスパイロメトリの標準法を用いて測定する。

本発明をその具体的な実施形態を参照して記載したが、当業者には、本発明の真の趣旨および範囲から逸脱することなく、種々の変更を加えることができ、また同等物を代用することができることが理解されるはずである。さらに、特定の状況、材料、組成物、プロ
セス、プロセスステップまたはステップを本発明の目的、趣旨および範囲へ適合させるため、多くの改変を行うことができる。かかる改変はすべて本明細書に添付の特許請求の範囲内にあるものとする。

Claims (20)

1. 合成ＣＸＣＲ３ポリペプチドリガンドであって、長さが約７０〜約１２５アミノ酸であるポリペプチドを含んでなり、通常Ｎ末端の第１のアミノ酸と結合しているさらなるメチオニンを場合によってさらに含み、ポリペプチドのアミノ酸配列が、アミノ酸同一性および数において、ＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣおよびＭｉｇから選択される種々の天然のＣＸＣＲ３リガンドのサブ配列に対応する、別個のサブ配列を順に含んでなり、合成ＣＸＣＲ３ポリペプチドのアミノ酸配列が天然のＣＸＣＲ３リガンドＩＰ−１０、Ｉ−ＴＡＣおよびＭｉｇのアミノ酸配列と異なる、合成ＣＸＣＲ３ポリペプチドリガンド。
2. ＣＸＣＲ３リガンドが配列番号１５〜２０のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含んでなる、請求項１に記載の合成ＣＸＣＲ３ポリペプチドリガンド。
3. 長さが約７０〜約１２５アミノ酸であるポリペプチドを含んでなり、通常Ｎ末端の第１のアミノ酸と結合しているさらなるメチオニンを場合によってさらに含み、ポリペプチドのアミノ酸配列がＩＰ−１０、ＭｉｇおよびI−ＴＡＣに共通するアミノ酸残基を含んで
   なり、ＩＰ−１０、ＭｉｇおよびＩ−ＴＡＣに共通するアミノ酸がない位置の１以上に、その位置に主に現れるあるアミノ酸を含んでなる、合成ＣＸＣＲ３リガンド。
4. ＣＸＣＲ３リガンドが配列番号０１、０２および０３のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含んでなる、請求項３に記載の合成ＣＸＣＲ３ポリペプチドリガンド。
5. 請求項１から４のいずれか一項に記載の合成ＣＸＣＲ３リガンドを含んでなる組成物。
6. 請求項１から４のいずれか一項に記載の合成ＣＸＣＲ３リガンドをコードするヌクレオチド配列を含んでなるポリヌクレオチド。
7. 前記合成ＣＸＣＲ３リガンドが配列番号０１、０２、０３、１５、１６、１７、１８、１９および２０のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列を含んでなる、請求項６に記載のポリヌクレオチド。
8. プロモーターに機能しうる形で連結された請求項６に記載のポリヌクレオチドを含んでなる発現ベクター。
9. 請求項６に記載のポリヌクレオチドを含んでなる宿主細胞。
10. 請求項８に記載の発現ベクターを含んでなる宿主細胞。
11. 合成ＣＸＣＲ３リガンドの製造方法であって、請求項１０に記載の宿主細胞を、合成ＣＸＣＲ３リガンドの製造に適した条件下で培養すること、および
    培養物から合成ＣＸＣＲ３リガンドを単離することを含んでなる、方法。
12. 請求項１から４のいずれか一項に記載の合成ＣＸＣＲ３リガンドと特異的に結合する抗体。
13. 個体において線維性疾患を治療する方法であって、線維性疾患を患う個体に、個体における線維性疾患の治療または予防において有効である量の合成ＣＸＣＲ３リガンドを投与することを含んでなる方法。
14. 線維性疾患が肺線維症である、請求項１３に記載の方法。
15. 肺線維症が特発性肺線維症である、請求項１３に記載の方法。
16. 肺線維症が既知の病因によるものである、請求項１３に記載の方法。
17. 線維性疾患が肝線維症、腎線維症、心臓線維症および強皮症から選択される、請求項１３に記載の方法。
18. 腫瘍を有する個体において腫瘍増殖を減少させる方法であって、個体に有効量の合成ＣＸＣＲ３リガンドを投与することを含んでなる方法。
19. アルキル化剤、ニトロソ尿素、代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物（ビンカ）アルカロイド、タキサン、およびステロイドホルモンから選択される、有効量の抗腫瘍薬を投与することをさらに含んでなる、請求項１８に記載の方法。
20. 個体がヒトである、請求項１３から１９のいずれか一項に記載の方法。

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