JP2010537624A - 骨髄または臍帯血から回収した幹細胞と前駆細胞の組成物、それらを用意するためのシステムおよび方法 - Google Patents
骨髄または臍帯血から回収した幹細胞と前駆細胞の組成物、それらを用意するためのシステムおよび方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2010537624A JP2010537624A JP2010500890A JP2010500890A JP2010537624A JP 2010537624 A JP2010537624 A JP 2010537624A JP 2010500890 A JP2010500890 A JP 2010500890A JP 2010500890 A JP2010500890 A JP 2010500890A JP 2010537624 A JP2010537624 A JP 2010537624A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- bag
- cells
- composition
- stem cell
- cell
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
- A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
- A61M1/02—Blood transfusion apparatus
- A61M1/0209—Multiple bag systems for separating or storing blood components
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0647—Haematopoietic stem cells; Uncommitted or multipotent progenitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
- A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
- A61M1/02—Blood transfusion apparatus
- A61M1/0209—Multiple bag systems for separating or storing blood components
- A61M1/0236—Multiple bag systems for separating or storing blood components with sampling means, e.g. sample bag or sampling port
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
- A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
- A61M1/36—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits
- A61M1/3693—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits using separation based on different densities of components, e.g. centrifuging
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
- C12N5/0663—Bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSC)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
- C12N5/0665—Blood-borne mesenchymal stem cells, e.g. from umbilical cord blood
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K2035/124—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells the cells being hematopoietic, bone marrow derived or blood cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
- A61M2202/00—Special media to be introduced, removed or treated
- A61M2202/04—Liquids
- A61M2202/0413—Blood
- A61M2202/0429—Red blood cells; Erythrocytes
- A61M2202/0437—Blood stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
- A61M2205/00—General characteristics of the apparatus
- A61M2205/33—Controlling, regulating or measuring
- A61M2205/3306—Optical measuring means
- A61M2205/331—Optical measuring means used as turbidity change detectors, e.g. for priming-blood or plasma-hemoglubine-interface detection
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Anesthesiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
Abstract
Description
35U.S.C.§120の規定により、本願は、2002年4月8日に出願された同時係属の米国特許出願第10/118,291号を優先権主張し且つその一部係属出願であり、この米国特許出願の全ての開示は参照されて本明細書中に組み込まれる。35U.S.C.§120の規定により、本願はまた、2007年3月28日に出願された同時係属の米国特許出願第11/664,212号を優先権主張し且つその一部係属出願であり、この米国特許出願は、米国を指定国とし且つPCT第21(2)条に基づいて国際公開番号WO 2006/038993 A2として2006年4月13日に英語で公開された国際出願第PCT/US2005/029288号を優先権とし、35U.S.C.§371に基づく国内段階出願であり、およびこの米国特許出願は一方では2004年9月30日に出願され2007年5月1日に米国特許第7,211,191号として発行された米国特許出願第10/957,095号において優先権主張されたものであり、これらの全ての開示は参照されて本明細書中にそのまま組み込まれる。
「自家使用」とは、人の細胞または組織をこれら細胞や組織が回収された個体に戻すための内移植、移植、注入または移動を意味する。
「晶質」とは、食塩水、乳酸リンゲル液、あるいは5%ブドウ糖液のような、電解質の置換または血管内容量を増大するために使用される等張塩および/またはブドウ糖溶液(等張の塩および/またはブドウ糖の溶液)を意味する。
「造血幹細胞」は、赤血球(RBC)、白血球(Leukocytes)、白血球(WBC)、および血小板を含む多種の血球を生じさせる多能性幹細胞である。
「白血球」は、造血系の細胞であり、主に単球、リンパ球、および好中球を含み、細胞表面抗原CD45(CD45+細胞)を発現ないし呈する。
「リンパ球」は、リンパ系の細胞(リンパ球系細胞)であり、Sysmex(シスメックス)XE−2100で測定され、成熟リンパ球(T細胞、B細胞、NK細胞)およびリンパ芽球のような未熟ないし成熟中のリンパ球を含む。
「最低限の処理がされた骨髄または臍帯血」とは、幹細胞および前駆細胞のための(例えばヘパリンあるいはシトラート(クエン酸塩)で抗凝固つまり抗血液凝固処理された骨髄や臍帯血であって、化学物質の追加物がなく(水、晶質、あるいは減菌剤(消毒剤)、保存剤、保管剤を除く)、関連する生物学的な性質を変容されていないものを意味する。
「単球」は、骨髄系の細胞であり、Sysmex XE−2100で測定され、成熟単球、および単芽球のような熟成中の単球を含む。
「単核細胞(単核球)」(MNC)は、造血系の細胞であり、単球やリンパ球を含む。
「好中球」は、骨髄形の細胞であり、Sysmex XE−2100で測定され、多形核球、および桿状核、後骨髄球、骨髄球、骨髄芽球などの熟成中の好中球を含む。
「血小板」は、巨核球系の細胞であり、Sysmex XE−2100で測定され、成熟した血小板を含む。
「前駆細胞」は、幹細胞の直接的な子孫であり、一連の細胞分裂により直接的な細胞系統を生じさせる。
「赤血球」は、赤血球の系統の細胞であり、Sysmex XE−2100で測定され、成熟RBCを含むが有核赤血球は含まない。
「幹細胞」は、多機能性細胞であり、3つの一般的性質である(1)長期間にわたってそれ自体で分裂および複製できること、(2)未分化であること、(3)種々の分化ないし特殊化された細胞型を生じさせることが可能であること、を有している。幹細胞の細胞表面の抗原マーカーはCD34であり、細胞内酵素のアルデヒドデヒドロゲナーゼ(アルデヒド脱水素酵素)の高濃度のものである。
「ストークスの法則」は、重力加速度の間における粘稠液(粘性液体)中での粒子の沈殿ないし沈降速度を表した、数式(Vg=d2(P1−P2)/18μ×G)であり、Vg=沈殿速度、d=粒径(粒子の直径)、P1=粒子の密度(濃度)、P2=液体の濃度ないし密度、G=重力加速度、およびμ=液体の粘度ないし粘性である。
「Sysmex XE−2100」は、日本国、神戸のシスメックス株式会社により製造された自動式の血液・細胞分析装置で、フローサイトメトリーにより造血細胞を識別および定量化するものであり、半導体レーザビームを放射し、3つの光学信号である前方散乱光、側方散乱光、および側方蛍光強度を検知する。
「総有核細胞」(TNC)は、WBCと有核RBCである。
「生体異物添加剤」と「生体異物剤」は、添加がない場合には生じない細胞分裂プロセス性能特性の変化を起こす目的で、採取された骨髄または臍帯血に意図的に加えられた人体の天然要素ではない化学物質を意味する。
生体異物添加剤の例としては、
1.沈殿(沈降)剤(例えば、ヒドロキシエチルスターチ(ヒドキシエチルデンプン)、デキストラン、あるいはゼラチン)
2.密度勾配担体(例えば、Ficoll(登録商標)、Percoll(登録商標))、および
3.細胞表面の巨大分子細胞のための親和性分子(例えば、モノクローナル抗体、常磁性粒子に結合するモノクローナル抗体)
1.臨床試験(治験)により幹細胞治療の効率性および安全性を実証すること、
2.国の保健機関による監督官庁、特に米国の食品医薬品局(FDA)、細胞、組織および遺伝子治療局(OCTGT)の認可を得なければならないこと、および
3.過剰の血漿、赤血球、および顆粒球を取り除くための生体異物添加剤の使用によらない、最低限の処理がされた骨髄または臍帯血から生存幹細胞および前駆細胞を迅速且つ容易に回収するための実用的な方法を開発する必要があること。
1. 幹細胞を高率で回収する。
2. 余分ないし過剰の血漿、RBC、血小板、好中球を取り除くことで、骨髄または臍帯血のサンプルの元の体積ないし量を減じる。
3. 幹細胞の回収を行うために生体異物添加剤を必要としない一方、生成物ないし製品の安全性プロフィールを高め、細胞洗浄の必要性をなくし、コストを最小限とする。
4. 幹細胞を生存状態で維持する。
5. 迅速に完了できる(90分未満)。
6. 幹細胞の分離ステップおよび獲得ステップが自動的に行われるので労働集約型ではない。
7. 一貫した方法で行われ、必要とするオペレータの訓練および専門知識が最小限で良い。
8. 自己(自家)使用のために手術室の内部ないし隣接させて使用でき、あるいは同種使用のために細胞処理研究所の内部ないし隣接させて使用できる。
9. 生成物の微生物汚染の危険性を減らすために無菌の、機能的に閉じたシステム内で幹細胞または前駆細胞を分離および隔離できる。
10. 組織再生のために使用されるあらゆる種類の骨髄および臍帯血を処理することができる。
このシステムは、バッグセット100と処理装置200を含んでいる。
図1および図2にバッグセット100の実施例を示した。バッグセット100は、有効に閉じられており、また好ましくは使い捨て式のものである。バッグセット100は、ラインや配管などにより絞り弁に連結ないし接続された3つ以上のバッグを含んでおり、入力ライン、クランプ、フィルタ、およびサンプリングサイト(サンプリングを行う場所)を備えている。バッグセット100は好ましくは3つのバッグ、つまり処理バッグ102、赤血球(RBC)濃縮バッグ104、および幹細胞バッグ106を含んでいる。
この方法は、骨髄または臍帯血を細胞密度および大きさ(寸法)により階層化および分離する、遠心分離を含んでいる。処理される骨髄または臍帯血は、CD34+およびALDHBr+幹細胞マーカーの存在により示されるように、血漿、RBC、WBC、および幹細胞を含んでいる。得られた幹細胞生成物は、幹細胞と前駆細胞の組成物であり、また少しのWBCと、著しく減じられたRBCおよび血漿を含んでいる。この方法は、上記したシステムを使用して、無菌の機能的に閉じられた様々な体積ないし量の骨髄または臍帯血を処理すると共にユーザにより事前に選択される体積ないし量の最終生成物を産出することができるシステム内で実施される。この方法は、過剰ないし余分なRBCと血漿、および臨床的に好ましい場合は好中球と血小板を取り除くことで骨髄の体積を著しく減じ、これにより、最終的な幹細胞組成内における幹細胞を濃縮する。この方法では生体異物添加剤は必要とせず、骨髄または臍帯血から高率で幹細胞および前駆細胞を回収する。
骨髄または臍帯血は、バッグ、注射器、あるいは他の容器のような採取(収集)容器内に採取され、へパリンやCPDのような抗凝固剤つまり抗血液凝固剤と共に保存され、および処理バッグ102内に移動される。この移動は、スパイク124を採取バッグ内に挿入し、雌型ルアーを注射器に取り付け、あるいは無菌接続装置を使用して採取バッグの配管を処理バッグに無菌結合することで行われる。ラインクランプ130が開かれる。骨髄あるいは臍帯血は次いで、採取容器から処理バッグ102に重力流れで入力ライン118を介して移動する。骨髄または臍帯血は、凝血塊および骨片のフィルタ128を通過し、処理バッグ102に到達する前にこのフィルタにより凝血塊(血栓、脂肪球、骨片など)が骨髄または臍帯血から取り除かれる。骨髄または臍帯血が移動した後は、入力ライン118が上記のサンプリングサイト132において熱シールされ、採取容器、凝固塊および骨片フィルタ128およびライン118の残りが取り除かれる。
各バッグ、各ラインおよび絞り弁を含む、バッグセット100が上記のように処理装置200内に配置される。
図16および17に示されるように、冷却する構成とすることもできる処理装置200はバッグセット100と共に、遠心分離器の遠心分離バケット228内に配置される。遠心分離器は、他の処理装置200あるいは適当な釣り合い重りによりバランスがとられる。
前のステップにおいて処理バッグ102内で各細胞が階層化した後、処理バッグ102からRBC濃縮バッグ104内にRBCの大部分を分離させ移動させるのに十分な時間だけ予め定められた小さいg力で、バッグセット100は処理装置200内で遠心分離される。このg力は、RBC層が制御下で細胞損傷の危険性を最小限にした状態で処理バッグ102から絞り弁138を通り、供給ライン142を通ってRBC濃縮バッグ104内に流れるため、上記のステップ3で使用されたg力よりも小さい。例えば、遠心分離は約80×gで約10分間だけ行われる。この遠心分離ステップは、先のステップのg力を予め設定したより低いg力に自動的に減じることで先の階層化ステップの遠心分離と連続的に行われるか、あるいは先の遠心分離ステップが完了し停止した後に開始して行われる。
これは随意的ないし任意的なステップである。このステップが実行されない場合、本方法は次のステップに進む。
前の随意的な再階層化ステップの後、あるいはこの再階層化ステップが行われない場合には先の分離ステップの後に、処理装置200内のバッグセット100はこのステップおよびステップ7と8を完了するのに十分な予め定められたg力および予め定められた時間間隔で遠心分離される。例えば、この遠心分離は、ステップ4で使用されたのと同じg力である約80×gで、約5から15分の間だけ行われる。
前のステップにおいて絞り弁138が閉じられた後は、遠心分離はステップ6で設定されたg力と時間で継続される。加速度計291が設定されたg力を確認すると、この時点でロードセル272とマイクロコントローラ290は協力して、空の幹細胞バッグ106の重さをゼロに風袋する。
処理バッグ102内でのバッグセット100の遠心分離は、ステップ6において設定されたg力および時間で継続される。マイクロコントローラ290は、空の幹細胞バッグ106の重さがゼロに風袋されたことをロードセル272からの入力として受信したならばサーボモータ248に次の指示を行う。即ち、弁アクチュエータカフ246が絞り弁138を開いて処理バッグ102から供給ライン156と幹細胞バッグ入力ライン152を通り幹細胞バッグ106への流体経路が生成される位置にすると共に、次いで閉じるようにし、この開と閉を予め定められたサイクル数で予め定められた間隔で予め定められた期間だけ連続的に繰り返され、幹細胞バッグがその予め定められた重さに到達するまで充填されるのに十分な個別の時間の量だけ、処理バッグ102から幹細胞バッグ106へのアクセスが繰り返される。例えば、絞り弁138は約0.1から0.2秒の期間だけ開き、約10秒の間だけ閉じ、このサイクルを多数回繰り返すように設定される。絞り弁138が開いたり閉じたりする際に、処理バッグ102内の血漿のいくらかは幹細胞バッグ106内に流れ込む。このステップにおいて小さいg力とした目的は、大きなg力では発生する細胞損傷の危険性を最小限にする制御された方法で、これらの細胞を処理バッグ102から幹細胞バッグ106内に導くことである。
予め定められた遠心分離期間が終わると、遠心分離は停止し、処理装置200は遠心分離器から取り外される。全てのバッグ、絞り弁138、および各ラインを含む、バッグセット100は、処理ユニット200から取り出される。
公認ないし認定を受けたベンダー(売り主、業者)から、人の血漿が5ユニットと、臍帯血が6ユニットだけ1から3日以内に収集ないし採取された。以下の表は、本発明の方法により処理された骨髄および臍帯血から得られたデータを示したものである。骨髄はヘパリンにより、また臍帯血はCPDによりそれぞれ抗凝固処理された。処理装置を含む寸法の卓上型の遠心分離器は遠心力場を提供する。この実験では沈殿補助のための生体外異物添加剤は使用していない。以下の表1には、骨髄および臍帯血の実験のために利用される本発明の各ステップの要約が示されている。
表2は、処理前の5つの試験における骨髄の体積および細胞計数を示したものである。各ユニットにおけるRBC、血小板、TNC、好中球、リンパ球、単球、MNC、CD34+細胞、およびALDH Br+細胞の全数が示されている。NDの項目はデータが「未定である」ことを意味する。
表8は、処理前の6つの臍帯血ユニットの体積および細胞計数を示した。各ユニットにおけるRBC、血小板、TNC、好中球、リンパ球、単球、MNC、およびCD34+細胞の全数が示されている。
表13は、Stem-Kitを使用して計測した、臍帯血中のCD45+の細胞生存性(生存率)の結果の分析を含んでいる。CD45+細胞の生存性における大きな変化はなく、処理後の臍帯血生成品における幹細胞の生存性の維持を例証しており、代理として認められるものである。
上記した本発明の方法は、幹細胞、血漿、RBC、および赤血球を含む骨髄または臍帯血から派生し、生体異物添加剤のない幹細胞の組成物を生じる。血漿に由来する幹細胞組成は、CD34+細胞またはALDH Br+細胞により測定されるように、各TNCに対してRBCが約5、各好中球に対してRBCが約10、各MNCに対してRBCが約18、および各幹細胞に対してRBCが約400から500の割合を有している(表6)。臍帯血に由来する幹細胞組成は、CD34+細胞により測定されるように、各TNCに対してRBCが約11、各好中球に対してRBCが約24、各MNCに対してRBCが約23、および各幹細胞に対してRBCが約5,000の割合を有している(表12)。
Claims (21)
- 抗凝固処理された骨髄から用意された幹細胞組成物であり、
血漿、
RBC、
WBC、および
生存幹細胞を有してなり、
前記組成物が生体異物添加剤を含んでおらず、
前記幹細胞がCD34+細胞を含んでおり、および
前記組成物中での前記RBCの前記CD34+に対する割合が約2000対1より小さい、幹細胞組成物。 - 抗凝固処理された骨髄から用意された幹細胞組成物であり、
血漿、
RBC、
WBC、および
生存幹細胞を有してなり、
前記組成物が生体異物添加剤を含んでおらず、
前記幹細胞がALDH Br+細胞を含んでおり、および
前記組成物中での前記RBCの前記ALDH Br+に対する割合が約2000対1より小さい、幹細胞組成物。 - 抗凝固処理された臍帯血から用意された幹細胞組成物であり、
血漿、
RBC、
WBC、および
生存幹細胞を有してなり、
前記組成物が生体異物添加剤を含んでおらず、
前記幹細胞がCD34+細胞を含んでおり、および
前記組成物中での前記RBCの前記CD34+に対する割合が約15,000対1より小さい、幹細胞組成物。 - 抗凝固処理された骨髄から用意された幹細胞組成物であり、
血漿、
RBC、
WBC、および
生存幹細胞を有してなり、
前記組成物が、血漿と、RBCと、WBCと、生存CD34+細胞を含む幹細胞とを有してなる採取され抗凝固処理された骨髄から用意されたものであり、
前記組成物が、前記採取された骨髄のCD34+細胞を少なくとも約80%および前記採取された骨髄のRBCを約10%未満だけ含み、および
前記組成物が生体異物添加剤を含んでいない、幹細胞組成物。 - 前記組成物の体積が、前記採取された骨髄の体積の約25%未満である、請求項4記載の組成物。
- 前記組成物の体積が予め選択される、請求項5記載の組成物。
- 前記採取された骨髄の前記生存CD34+細胞の90%以上が前記組成物中に生存している、請求項4記載の組成物。
- 抗凝固処理された臍帯血から用意された幹細胞組成物であり、
血漿、
RBC、
WBC、および
生存幹細胞を有してなり、
前記組成物が、血漿と、RBCと、WBCと、生存CD34+細胞を含む幹細胞とを有してなる採取され抗凝固処理された臍帯血から用意されたものであり、
前記組成物が、前記採取された臍帯血のCD34+細胞を少なくとも約80%および前記採取された臍帯血のRBCを約10%未満だけ含み、および
前記組成物が生体異物添加剤を含んでいない、幹細胞組成物。 - 前記組成物の体積が、前記採取された臍帯血の体積の約25%未満である、請求項8記載の組成物。
- 前記組成物の体積が予め選択される、請求項9記載の組成物。
- 前記採取された臍帯血の前記生存CD34+細胞の90%以上が前記組成物中に生存している、請求項4記載の組成物。
- 骨髄から用意された幹細胞組成物であり、
血漿、
RBC、
WBC、および
生存幹細胞を有してなり、
前記幹細胞がCD34+細胞を含んでおり、
RBCのCD34+細胞に対する割合が約500対1であり、
前記組成物が生体異物添加剤を含んでおらず、および
前記組成物が、周囲環境から機能的に閉じた容器内で用意される、組成物。 - 臍帯血から用意された幹細胞組成物であり、
血漿、
RBC、
WBC、および
生存幹細胞を有してなり、
前記幹細胞がCD34+細胞を含んでおり、
RBCのCD34+細胞に対する割合が約5000対1であり、
前記組成物が生体異物添加剤を含んでおらず、および
前記組成物が、周囲環境から機能的に閉じた容器内で用意される、組成物。 - 骨髄または臍帯血から幹細胞組成物を用意するための方法であって、
(a) 処理バッグ内に採取した骨髄または臍帯血を配置するステップを有してなり、前記処理バッグはバッグセットの一部であり、前記バッグセットは赤血球濃縮バッグ、幹細胞バッグ、および絞り弁をさらに含んでおり、前記絞り弁は前記処理バッグ、前記赤血球濃縮バッグ、および前記幹細胞バッグに接続されており、
(b) 前記バッグセットを処理装置に設置するステップを有してなり、前記処理装置はマイクロコントローラ、サーボモータ、光学センサ、LED、ロードセル、および加速度計を含み、前記サーボモータは前記バッグセットが前記処理装置に収納されたときに動作するように前記絞り弁に接続されており、
(c) 前記バッグセットを収納した前記処理バッグを、g力で、前記処理バッグ内の前記骨髄または前記臍帯血の細胞が赤血球の層、WBC/幹細胞および前駆細胞の層、および血漿の層に階層化するのに十分な時間だけ遠心分離するステップを有してなり、前記絞り弁は閉じられており、
(d) 前記遠心分離するステップで使用されたg力よりも低いg力で、前記赤血球の大部分が前記処理バッグから前記赤血球濃縮バッグに分離されるのに十分な時間だけ、前記バッグセットを収納した前記処理装置を遠心分離するステップを有してなり、前記絞り弁は前記処理バッグから前記赤血球濃縮バッグに開いており、
(e) 前記光学センサが前記LEDから予め設定した体積の光透過率を検知したことに応答して、前記絞り弁を閉じるステップを有してなり、
(f) 前記バッグセットを収納した前記処理装置を、g力で、前記赤血球のより多くのものが前記処理バッグから前記赤血球濃縮バッグに分離されるのに十分な時間だけ、遠心分離するステップを有してなり、前記絞り弁は開と閉を多数回繰り返し、
(g) 前記光学センサが予め設定した割合の光透過率の変化を検知したことに応答して、前記絞り弁を閉じるステップを有してなり、
(h) 前記ロードセルからのデータを使用して、前記幹細胞バッグを風袋するステップを有してなり、前記風袋は前記ロードセルからのデータを使用して行われ、
(i) 前記バッグセットを収納した前記処理装置を、g力で、前記赤血球の残りのもの、前記WBC/幹細胞および前駆細胞の層、および前記プラズマの一部が前記処理バッグから前記幹細胞バッグに分離されるのに十分な時間だけ遠心分離するステップを有してなり、前記絞り弁は開と閉を多数回繰り返し、
(j) 前記ロードセルが前記幹細胞バッグの予め設定した重量を測定したことに応答して、前記絞り弁を閉じるステップを有してなり、
(k) 前記バッグセットを前記処理装置から取り外すステップを有してなり、および
(l) 前記幹細胞組成物を含む前記幹細胞バッグを前記バッグセットから取り外すステップを有してなる、方法。 - ステップ(e)と(f)の間に、前記バッグセットを収納した前記処理装置を、g力で、前記処理バッグ内の前記骨髄または臍帯血の細胞が前記処理バッグ内に赤血球の層、WBC/幹細胞および前駆細胞の層、および血漿の層に再び階層化するのに十分な時間だけ遠心分離するステップをさらに有してなり、前記絞り弁は閉じている、請求項14記載の方法。
- 予め前記幹細胞組成物の体積を選択するステップをさらに有してなる、請求項14記載の方法。
- 前記選択された体積が、前記幹細胞バッグ内の前記幹細胞組成物の体積を選択することで決定される、請求項16記載の方法。
- 前記選択された骨髄の体積が約40mLから約240mLである、請求項14記載の方法。
- 骨髄やまたは臍帯血から幹細胞生成物を用意するためのシステムであって、
(a) 採取した骨髄または臍帯血を保持するための処理バッグ、赤血球濃縮バッグ、幹細胞バッグ、および絞り弁を含むバッグセットを有してなり、前記絞り弁が前記処理バッグ、前記赤血球濃縮バッグ、および前記幹細胞バッグに接続されており、
(b) 内部に前記バッグセットが納められると共に、マイクロコントローラ、サーボモータ、光学センサ、LED、ロードセル、および加速度計を含む処理装置を有してなり、前記サーボモータは前記バッグセットが前記処理装置内に収納されたときに動作するように前記絞り弁に接続されており、および
(c) 前記バッグセットと前記処理装置が、g力で、前記採取された骨髄または臍帯血から幹細胞生成物を分離し濃縮するために十分な時間だけの遠心分離に耐えることができるものである、システム。 - 前記マイクロコントローラは、前記加速度計、前記光センサ、および前記ロードセルからの入力を受領および分析すると共に、前記各入力に応答して前記絞り弁を開または閉にする、請求項19記載のシステム。
- 前記光センサが、前記処理装置内で前記光センサのレベルと前記絞り弁のレベルの間の前記処理バッグ内の体積が約2mLであるように配置されている、請求項19記載のシステム。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US66421207A | 2007-03-28 | 2007-03-28 | |
PCT/US2007/015560 WO2008121120A1 (en) | 2007-03-28 | 2007-07-06 | Stem and progenitor cell compositions recovered from bone marrow or cord blood; system and method for preparation thereof |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014112675A Division JP5832591B2 (ja) | 2007-03-28 | 2014-05-30 | 骨髄または臍帯血から回収した幹細胞と前駆細胞の組成物、それらを用意するためのシステムおよび方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2010537624A true JP2010537624A (ja) | 2010-12-09 |
JP2010537624A5 JP2010537624A5 (ja) | 2013-06-20 |
Family
ID=39808561
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010500890A Pending JP2010537624A (ja) | 2007-03-28 | 2007-07-06 | 骨髄または臍帯血から回収した幹細胞と前駆細胞の組成物、それらを用意するためのシステムおよび方法 |
JP2014112675A Active JP5832591B2 (ja) | 2007-03-28 | 2014-05-30 | 骨髄または臍帯血から回収した幹細胞と前駆細胞の組成物、それらを用意するためのシステムおよび方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014112675A Active JP5832591B2 (ja) | 2007-03-28 | 2014-05-30 | 骨髄または臍帯血から回収した幹細胞と前駆細胞の組成物、それらを用意するためのシステムおよび方法 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP2126044A4 (ja) |
JP (2) | JP2010537624A (ja) |
CN (2) | CN103555559B (ja) |
HK (1) | HK1193428A1 (ja) |
WO (1) | WO2008121120A1 (ja) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011095964A1 (en) * | 2010-02-03 | 2011-08-11 | Fuil Technologies Limited | A method and apparatus for separating a liquid component from a liquid medium |
KR101946441B1 (ko) * | 2010-03-18 | 2019-04-22 | 세스카 쎄라퓨틱스 인코포레이티드 | 특정 세포 군집 이외의 것을 고갈시켜 혈액 또는 골수 중의 특정 세포 군집을 정제하기 위한 시스템 |
CN102618438A (zh) * | 2012-04-11 | 2012-08-01 | 章毅 | 用于脐带血干细胞的检测和筛查系统 |
WO2015149098A1 (de) * | 2014-03-31 | 2015-10-08 | Liporegena Gmbh | Vorrichtung zur entnahme und portionierung von fettgewebe |
EP2987515A1 (en) * | 2014-08-19 | 2016-02-24 | Reapplix APS | Centrifuge and method of centrifuging a blood sample |
JP6976864B2 (ja) * | 2015-12-29 | 2021-12-08 | サーモゲネシス コーポレーション | 細胞分離装置、システム、及び方法 |
WO2018129467A1 (en) * | 2017-01-08 | 2018-07-12 | Cesca Therapeutics, Inc. | Devices and methods for bio-processing cellular samples |
US20190336541A1 (en) * | 2017-01-11 | 2019-11-07 | Sungkwang Medical Foundation | Pcnt as a target protein for treatment or diagnosis of brain-nervous system diseases |
JP7261791B2 (ja) | 2017-09-28 | 2023-04-20 | テルモ株式会社 | 生体成分採取用デバイス、生体成分採取システム、及び生体成分採取システムの動作方法 |
EP3687593B1 (en) | 2017-09-28 | 2023-04-05 | Terumo Kabushiki Kaisha | Biological component collection system and circuit internal pressure acquisition method |
EP3873558B1 (en) | 2018-11-01 | 2023-03-08 | TERUMO Kabushiki Kaisha | Biological component collection system and circuit internal pressure acquisition method |
US11697799B2 (en) * | 2019-04-15 | 2023-07-11 | Ossium Health, Inc. | System and method for extraction and cryopreservation of bone marrow |
CN110093253A (zh) * | 2019-06-04 | 2019-08-06 | 河南省人民医院 | 一次性使用去红细胞骨髓采集袋及方法 |
CN113980894B (zh) * | 2021-12-27 | 2022-03-15 | 深圳博雅感知医疗科技有限公司 | 制备骨髓浓缩细胞的方法及其用于治疗卵巢早衰的用途 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH1084950A (ja) * | 1996-09-13 | 1998-04-07 | Asahi Medical Co Ltd | 造血幹細胞の採取方法、採取器および採取装置 |
JPH10201470A (ja) * | 1997-01-24 | 1998-08-04 | Asahi Medical Co Ltd | 細胞分離方法及び細胞浮遊液 |
JPH119270A (ja) * | 1997-06-26 | 1999-01-19 | Asahi Medical Co Ltd | 有核細胞分離回収方法および有核細胞分離回収器 |
WO2006130812A2 (en) * | 2005-06-02 | 2006-12-07 | Stemcyte, Inc. | Plasma-depleted, non-red blood cell-depleted cord blood compositions and methods of use |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6103522A (en) * | 1994-07-20 | 2000-08-15 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Human marrow stromal cell lines which sustain hematopoiesis |
CA2278208C (en) * | 1997-01-24 | 2011-09-20 | Asahi Medical Co., Ltd. | Cell separation method |
US20020051762A1 (en) * | 1998-01-23 | 2002-05-02 | Shahin Rafii | Purified populations of endothelial progenitor cells |
US7241281B2 (en) * | 2002-04-08 | 2007-07-10 | Thermogenesis Corporation | Blood component separation method and apparatus |
ITMI20030897A1 (it) * | 2003-04-30 | 2004-11-01 | Crb Nederland B V | Procedimento e apparecchiatura per frazionare sangue. |
-
2007
- 2007-07-06 CN CN201310484895.6A patent/CN103555559B/zh active Active
- 2007-07-06 JP JP2010500890A patent/JP2010537624A/ja active Pending
- 2007-07-06 WO PCT/US2007/015560 patent/WO2008121120A1/en active Application Filing
- 2007-07-06 CN CN200780053147A patent/CN101707891A/zh active Pending
- 2007-07-06 EP EP07796720A patent/EP2126044A4/en not_active Withdrawn
-
2014
- 2014-05-30 JP JP2014112675A patent/JP5832591B2/ja active Active
- 2014-07-08 HK HK14106878.8A patent/HK1193428A1/xx unknown
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH1084950A (ja) * | 1996-09-13 | 1998-04-07 | Asahi Medical Co Ltd | 造血幹細胞の採取方法、採取器および採取装置 |
JPH10201470A (ja) * | 1997-01-24 | 1998-08-04 | Asahi Medical Co Ltd | 細胞分離方法及び細胞浮遊液 |
JPH119270A (ja) * | 1997-06-26 | 1999-01-19 | Asahi Medical Co Ltd | 有核細胞分離回収方法および有核細胞分離回収器 |
WO2006130812A2 (en) * | 2005-06-02 | 2006-12-07 | Stemcyte, Inc. | Plasma-depleted, non-red blood cell-depleted cord blood compositions and methods of use |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JPN6012057582; J.Clin.Rehabilitative.Tissue Eng.Res. Vol.11, No.3, 200701, p.579-582 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN103555559B (zh) | 2015-04-22 |
HK1193428A1 (en) | 2014-09-19 |
EP2126044A4 (en) | 2010-04-07 |
CN103555559A (zh) | 2014-02-05 |
WO2008121120A1 (en) | 2008-10-09 |
JP5832591B2 (ja) | 2015-12-16 |
CN101707891A (zh) | 2010-05-12 |
EP2126044A1 (en) | 2009-12-02 |
JP2014176389A (ja) | 2014-09-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5832591B2 (ja) | 骨髄または臍帯血から回収した幹細胞と前駆細胞の組成物、それらを用意するためのシステムおよび方法 | |
US9050422B2 (en) | Stem and progenitor cell compositions recovered from bone marrow or cord blood; system and method for preparation thereof | |
RU2410125C2 (ru) | Комплексная система для сбора, обработки и трансплантации клеточных субпопуляций, включая зрелые стволовые клетки, для регенеративной медицины | |
AU2011227203B2 (en) | System for purifying certain cell populations in blood or bone marrow by depleting others | |
KR101712569B1 (ko) | 혈액 처리 | |
US9480786B2 (en) | Component preparation system | |
US20200002673A1 (en) | Method for Preparing a Leukocyte Preparation and Leukocyte Preparation | |
JP2014510549A (ja) | 血小板を収集し、かつ血漿の返血を予測するためのシステムおよび方法 | |
JP2018502634A (ja) | 生物学的液体の連続処理 | |
Zingsem et al. | Cord blood processing with an automated and functionally closed system | |
WO2015148390A1 (en) | Automated cell washing system and related method | |
Cullis et al. | Nucleated Cell Separation Using the Fenwal CS3000™ | |
KR102196527B1 (ko) | 적혈구계 세포 배양 중 적혈구를 수거하기 위한 시스템 및 방법 | |
Remley et al. | Optimizing a fully automated and closed system process for red blood cell reduction of human bone marrow products | |
Svensson et al. | Monocyte enriched apheresis for preparation of dendritic cells (DC) to be used in cellular therapy | |
Janetzko et al. | The flow rate significantly influences the leukocyte depletion rate during prestorage in-line filtration of platelet concentrates | |
Norol et al. | Apheresis experience with a continuous flow cell separator | |
McKenna Jr et al. | Haemopoietic stem cell processing and storage |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20121106 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130131 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130207 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130228 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130307 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130403 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130410 |
|
A524 | Written submission of copy of amendment under section 19 (pct) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A524 Effective date: 20130502 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20130507 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20140204 |