JP2010532790A - 抗体処方 - Google Patents

Abstract

本発明は、標準処方（３０ｍＭクエン酸塩、１００ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ６．５など）に比べてより安定であるせん断および温度安定性抗体処方に関する。本発明のせん断および温度安定性抗体処方は、応力条件に曝される場合に沈殿の減少を示すが、標準処方は、凝集していた。そのＤＳＣ（示差走査熱量計）プロファイルに見られるように、熱力学的に２種の処方は類似しているので、この結果は予測不可能であった。

Description

本発明は、せん断および温度安定性抗体処方に関する。

タンパク質は、従来の有機および無機薬剤より大きく複雑であり（すなわち、複雑な三次元構造に加えて多数の官能基を有し）、かかるタンパク質の処方は、特有の問題をもたらす。生物学的に活性な状態を維持するタンパク質について、処方は、少なくともタンパク質のアミノ酸のコア配列の完全な立体配座の統一性を保持すると同時に、分解からタンパク質の多数の官能基を保護しなければならない。タンパク質の分解経路は、化学的不安定性（すなわち、新規化学物質をもたらす開裂の結合形成によりタンパク質の修飾が関与する任意の処理）または物理的不安定性（すなわち、タンパク質の高次構造の変化）が関与しうる。化学的不安定性は、アミド分解、ラセミ化、加水分解、酸化、β脱離またはジスルフィド交換をもたらしうる。物理的不安定性は、例えば、変性、凝集、沈殿または吸着をもたらしうる。３つの最も一般的なタンパク質分解経路は、タンパク質凝集、アミド分解および酸化である。Ｃｌｅｌａｎｄら．Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ １０（４）：３０７−３７７（１９９３）。

治療的使用に適当であるタンパク質を含むせん断および温度安定性医薬処方を処方する必要がある。１の実施態様において、タンパク質は抗体でありうる。別の実施態様において、タンパク質はＩｇＧ抗体でありうる。さらに別の実施態様において、タンパク質はＩｇＧ１抗体でありうる。別の実施態様において、タンパク質はモノクローナル抗体でありうる。別の実施態様において、タンパク質は、限定されるものではないが、ＷＯ２００５／０９５４５７において重鎖が配列番号：３５および軽鎖が配列番号：３８で開示かつ記載された抗ＯＳＭ抗体を含む、抗オンコスタチンＭ（抗ＯＳＭ）抗体でありうる。別の実施態様において、タンパク質は、限定されるものではないが、ＷＯ２００４／０１４９５３において機能しないＩｇＧ１定常領域を有する重鎖が配列番号：３０および軽鎖が配列番号：３１で開示かつ記載された抗ＭＡＧ抗体を含む、抗ミエリン関連糖タンパク質（抗ＭＡＧ）抗体でありうる。別の実施態様において、抗体は、限定されるものではないが、オファツムマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、オクレリズマブ（２Ｈ７．ｖ１６）、１１Ｂ８または７Ｄ８（ＷＯ２００４／０３５６０７に開示）、ＷＯ２００５／１０３０８１に開示の抗ＣＤ２０抗体、例えば、Ｃ６、ＷＯ２００３／６８８２１に開示の抗ＣＤ抗体、例えば、ＩＭＭＵ−１０６（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓから）、ＷＯ２００４／１０３４０４に開示の抗ＣＤ２０抗体、例えば、ＡＭＥ−１３３（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ／Ｌｉｌｌｙから）、およびＵＳ２００３／０１１８５９２に開示の抗ＣＤ２０抗体、例えば、ＴＲＵ−０１５（Ｔｒｕｂｉｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃから）を含む、抗ＣＤ２０抗体でありうる。

ＷＯ２００４／０３５６０７において２Ｆ２抗体として記載の、ＨｕＭａｘ−ＣＤ２０（商標）（オファツムマブ）は、Ｂ細胞の細胞膜中のＣＤ２０分子を標的とした完全ヒトＩｇＧ１、κ高親和性抗体である。ＨｕＭａｘ−ＣＤ２０（商標）は、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、および関節リウマチ（ＲＡ）の治療のために臨床開発中である。Ｔｅｅｌｉｎｇら，Ｂｌｏｏｄ，１０４，ｐｐ １７９３（２００４）；およびＴｅｅｌｉｎｇら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１７７，ｐｐ ３６２−３７１（２００７）も参照。

国際公開第２００５／０９５４５７号パンフレット 国際公開第２００４／０１４９５３号パンフレット 国際公開第２００４／０３５６０７号パンフレット 国際公開第２００５／１０３０８１号パンフレット 国際公開第２００３／６８８２１号パンフレット 国際公開第２００４／１０３４０４号パンフレット 米国特許出願公開第２００３／０１１８５９２号明細書

Ｃｌｅｌａｎｄら．Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ １０（４）：３０７−３７７（１９９３） Ｔｅｅｌｉｎｇら，Ｂｌｏｏｄ，１０４，ｐｐ１７９３（２００４） Ｔｅｅｌｉｎｇら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１７７，ｐｐ３６２−３７１（２００７）

治療的使用に適当であるタンパク質を含むせん断および温度安定性医薬処方を処方する必要がある。かかる処方の実施態様は本明細書に開示されている。

本発明は、せん断および温度安定性水性抗体処方に関する。

本発明は、本明細書に記載の具体的な実施態様によって範囲を限定されるものではない。実際には、本明細書に記載の発明に加えて発明の種々の修正は、前述から当業者に明らかになるであろう。かかる修正は、添付の特許請求の範囲の範囲に含まれることを意図とする。

１の実施態様は全長モノクローナル抗体処方に適しているが、他の種類の抗体、例えば、ポリクローナル抗体、またはモノクローナル抗体もしくはポリクローナル抗体の断片の処方にも用いられうる。

１の実施態様において、本発明は、治療上有効な量のタンパク質を含むタンパク質処方に関し、ここで、該処方は、１０〜１００ｍＭ酢酸ナトリウム、２５〜１００ｍＭ塩化ナトリウム、０．５〜５％アルギニン遊離塩基、０．０２〜０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０１〜０．２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．０〜７．０に調整した。

別の実施態様において、本発明は、２０〜３００ｍｇ／ｍＬの濃度範囲のタンパク質を含むタンパク質処方に関し、ここで、該処方は、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、５１ｍＭ塩化ナトリウム、１％アルギニン遊離塩基、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．５に調整した。別の実施態様において、タンパク質は、タンパク質断片、抗体、ＩｇＧ抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体断片、ポリクローナル抗体断片、モノクローナル抗ＣＤ２０抗体断片、全長抗ＣＤ２０抗体、モノクローナル抗ＯＳＭ抗体断片、全長抗ＯＳＭ抗体、モノクローナル抗ＭＡＧ抗体断片、および全長抗ＭＡＧ抗体である。好ましい抗ＣＤ２０抗体はオファツムマブである。

別の実施態様において、本発明は、２０〜３００ｍｇ／ｍＬの濃度範囲の抗ＣＤ２０抗体などのタンパク質を含む、抗ＣＤ２０抗体などのタンパク質処方に関し、ここで、該処方は、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、５１ｍＭ塩化ナトリウム、１％アルギニン遊離塩基、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．５に調整した。別の実施態様において、タンパク質は、別の抗タンパク質、例えば、限定されるものではないが、全長または断片の抗タンパク質抗体、抗ＯＳＭ抗体、抗ＭＡＧ抗体、または抗ＣＤ２０抗体である。好ましい抗ＣＤ２０抗体は、オファツムマブである。

さらに別の実施態様において、本発明は、少なくとも２年間安定であるタンパク質処方に関する。別の実施態様において、本発明は、少なくとも５５℃までの温度にて安定であるタンパク質処方に関する。別の実施態様において、本発明は、約５℃の温度にて少なくとも２年間安定であるタンパク質処方に関する。別の実施態様において、本発明は、約２５℃の温度にて少なくとも３ヵ月間安定であるタンパク質処方に関する。別の実施態様において、本発明は、約４０℃の温度にて少なくとも１ヵ月間安定であるタンパク質処方である。別の実施態様において、本発明は、約５５℃の温度にて少なくとも１日間安定であるタンパク質処方に関する。別の実施態様において、本発明は、振盪させながら約５〜５５℃の温度範囲にて少なくとも１日間安定であるタンパク質処方である。別の実施態様において、本発明は、振盪させながら約５〜２５℃、５〜３５℃、５〜４５℃、１０〜２５℃、１０〜３５℃、１０〜４５℃、１０〜５５℃、２０〜３５℃、２０〜４５℃、または２０〜５５℃の温度範囲にて少なくとも１日間安定であるタンパク質処方に関する。

別の実施態様において、本発明は、抗体が約２０〜３００ｍｇ／ｍＬ、５０〜３００ｍｇ／ｍＬ、１００〜３００ｍｇ／ｍＬ、１５０〜３００ｍｇ／ｍＬ、２００〜３００ｍｇ／ｍＬ、または２５０〜３００ｍｇ／ｍＬの量で存在するタンパク質処方に関する。

別の実施態様において、本発明は、酢酸ナトリウムが約５０ｍＭ、４０ｍＭ、４５ｍＭ、５５ｍＭ、または６０ｍＭの量で存在するタンパク質処方に関する。他の実施態様において、酢酸ナトリウムは、１０〜１００ｍＭ、２０〜１００ｍＭ、３０〜１００ｍＭ、４０〜１００ｍＭ、５０〜１００ｍＭ、６０〜１００ｍＭ、７０〜１００ｍＭ、２５〜８０ｍＭ、または３０〜７０ｍＭの量で存在していてもよい。

さらに別の実施態様において、本発明は、約ｐＨ５．５に調整するために酢酸が（約１００ｍＭ酢酸）で存在するタンパク質処方に関する。他の実施態様において、ｐＨは、ｐＨ５．０、５．５、６．０、６．５または７．０に調整されてもよい。本発明のさらに他の実施態様において、ＮａＯＨまたはＨＣｌは、ｐＨを５．０、５．５、６．０、６．５または７．０に調整するために用いられる。

さらに別の実施態様において、本発明は、塩化ナトリウムが約５１ｍＭ、４５ｍＭ、４６ｍＭ、４７ｍＭ、４８ｍＭ、４９ｍＭ、５０ｍＭ、５２ｍＭ、５３ｍＭ、５４ｍＭ、５５ｍＭの量で存在するタンパク質処方に関する。他の実施態様において、塩化ナトリウムは、２５〜１００ｍＭ、３５〜９０ｍＭ、４５〜８０ｍＭ、２５〜７０ｍＭ、または４５〜７０ｍＭの量で存在していてもよい。

別の実施態様において、本発明は、アルギニン遊離塩基が約１％、０．７％、１．３％、または２．０％の量で存在するタンパク質処方に関する。他の実施態様において、アルギニン遊離塩基は、０．５〜５．０％、０．５〜２．０％、０．５〜２．５％、０．５〜３．０％、０．５〜３．５％、０．５〜４．０％、または０．５〜４．５％であってもよい。

別の実施態様において、本発明は、ＥＤＴＡが約０．０５ｍＭ、０．０３ｍＭ、０．０４ｍＭ、または０．０６ｍＭの量で存在するタンパク質処方に関する。他の実施態様において、ＥＤＴＡは、０．０２ｍＭ〜０．２ｍＭ、０．０２ｍＭ〜０．１ｍＭ、０．０２ｍＭ〜０．１５ｍＭ、０．０４ｍＭ〜０．１ｍＭ、０．０３ｍＭ〜０．１５ｍＭ、または０．０３ｍＭ〜０．２ｍＭの量で存在していてもよい。

別の実施態様において、本発明は、ポリソルベート８０が約０．０２％、０．０１５％、または０．０２５％の量で存在するタンパク質処方に関する。他の実施態様において、ポリソルベート８０は、０．０１〜０．１％、０．０１〜０．１５％、０．０２〜０．２％、０．０２〜０．１５％、０．０１〜０．２５％、または０．０１〜０．０５％の量で存在していてもよい。

別の実施態様において、本発明は、治療上有効な量の抗タンパク質抗体を含む本発明の抗タンパク質抗体処方を哺乳動物に投与することによってタンパク質を発現する細胞が関与する疾患を治療する方法に関し、ここで、該処方は、１０〜１００ｍＭ酢酸ナトリウム、２５〜１００ｍＭ塩化ナトリウム、０．５〜５％アルギニン遊離塩基、０．０２〜０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０１〜０．２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．０〜７．０に調整した。治療（例えば、改善）または予防されうる「ＣＤ２０を発現する細胞が関与する疾患」の例として、限定されるものではないが、腫瘍形成疾患および免疫疾患、例えば、自己免疫疾患が挙げられる。治療および／または予防されうる腫瘍形成疾患の例として、前駆Ｂ細胞リンパ芽球性白血病／リンパ腫および成熟Ｂ細胞腫瘍、例えば、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）／小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、Ｂ細胞プロリンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、低悪性度、中悪性度および高悪性度ＦＬを含む、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、皮膚濾胞中心リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（ＭＡＬＴ型、節性および脾性）、ヘアリー細胞白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、形質細胞腫、形質細胞性骨髄腫、移植後リンパ増殖性疾患、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、および未分化大細胞リンパ腫（ＡＬＣＬ）を含む、Ｂ細胞リンパ腫、例えば、ＮＨＬが挙げられる。治療および／または予防されうるＣＤ２０を発現するＢ細胞が関与する免疫疾患の例として、乾癬、乾癬性関節炎、皮膚炎、全身性強皮症および硬化症、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎、呼吸窮迫症候群、髄膜炎、脳炎、ブドウ膜炎、糸球体腎炎、湿疹、喘息、アテローム性動脈硬化、白血球接着不全症、多発性硬化症、レイノー症候群、シェーグレン症候群、若年型糖尿病、ライター病、ベーチェット病、免疫複合体性腎炎、ＩｇＡ腎症、ＩｇＭ多発ニューロパシー、免疫介在性血小板減少症、例えば、急性特発性血小板減少性紫斑病および慢性特発性血小板減少性紫斑病、溶血性貧血、重症筋無力症、ループス腎炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ（ＲＡ）、アトピー性皮膚炎、天疱瘡、グレーブス病、橋本甲状腺炎、ヴェグナー肉芽腫症、オーメン症候群、慢性腎不全、急性伝染性単核球症、ＨＩＶ、およびヘルペスウイルス関連疾患が挙げられる。さらなる例は、重度の急性呼吸窮迫症候群および脈絡網膜炎である。さらにさらなる例は、Ｂ細胞とウイルス、例えば、エプスタイン・バー・ウイルス（ＥＢＶ）との感染が原因である疾患および障害である。さらにさらなる例はＣＯＰＤである。治療（例えば、改善）または予防されうる「ＭＡＧを発現する細胞が関与する疾患」の例として、限定されるものではないが、卒中、外傷性脳損傷および脊髄損傷などの急性疾患ならびにアルツハイマー病、前頭側頭型認知症（タウオパシー）、末梢神経障害、パーキンソン病、ハンチントン病および多発性硬化症を含む慢性疾患を含む多くの神経疾患の基礎となる神経変性のプロセスが挙げられる。したがって、抗ＭＡＧモノクローナル抗体またはＭＡＧアンタゴニストは、これらの疾患に付随する細胞死を改善することおよび機能回復を促進することの両方によって、これらの疾患の治療に有用でありうる。治療（例えば、改善）または予防されうる「ＯＳＭを発現する細胞が関与する疾患」の例として、限定されるものではないが、関節リウマチ、乾癬性関節炎、若年性関節炎、炎症性骨関節炎および／または反応性関節炎を含む、本発明にしたがって治療されうる炎症性関節炎が含まれる。治療されうる炎症性疾患には、特に、クローン病、潰瘍性大腸炎、胃炎、例えば、ピロリ菌感染が引き起こす胃炎、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アルツハイマー病、多発性硬化症および乾癬が含まれる。したがって、抗ＯＳＭモノクローナル抗体またはＯＳＭアンタゴニストは、例えば、これらの疾患に付随する細胞死を改善することおよび機能回復を促進することの両方によって、これらの疾患の治療に有用でありうる。

さらに別の実施態様において、本発明は、治療上有効な量の抗タンパク質抗体を含む本発明の抗タンパク質抗体処方を哺乳動物に投与することによってタンパク質を発現する細胞が関与する疾患を治療する方法に関し、ここで、該処方は、１０〜１００ｍＭ酢酸ナトリウム、２５〜１００ｍＭ塩化ナトリウム、０．５〜５％アルギニン遊離塩基、０．０２〜０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０１〜０．２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．０〜７．０に調整して、該安定性抗体処方は、哺乳動物に経口投与、非経口投与、鼻腔内投与、経膣投与、経直腸投与、舌投与、舌下投与、口腔内投与、経皮投与、静脈内投与、または皮下投与される。

さらに別の実施態様において、本発明は、治療上有効な量の抗ＯＳＭ抗体を含む本発明の抗ＯＳＭ抗体処方を哺乳動物に投与することによってＯＳＭを発現する細胞が関与する疾患を治療する方法に関し、ここで、該処方は、１０〜１００ｍＭ酢酸ナトリウム、２５〜１００ｍＭ塩化ナトリウム、０．５〜５％アルギニン遊離塩基、０．０２〜０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０１〜０．２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．０〜７．０に調整して、該安定性抗体処方は、哺乳動物に経口投与、非経口投与、鼻腔内投与、経膣投与、経直腸投与、舌投与、舌下投与、口腔内投与、経皮投与、静脈内投与、または皮下投与される。

さらに別の実施態様において、本発明は、治療上有効な量の抗ＭＡＧ抗体を含む本発明の抗ＭＡＧ抗体処方を哺乳動物に投与することによってＭＡＧを発現する細胞が関与する疾患を治療する方法に関し、ここで、該処方は、１０〜１００ｍＭ酢酸ナトリウム、２５〜１００ｍＭ塩化ナトリウム、０．５〜５％アルギニン遊離塩基、０．０２〜０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０１〜０．２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．０〜７．０に調整して、該安定性抗体処方は、哺乳動物に経口投与、非経口投与、鼻腔内投与、経膣投与、経直腸投与、舌投与、舌下投与、口腔内投与、経皮投与、静脈内投与、または皮下投与される。

さらに別の実施態様において、本発明は、治療上有効な量の抗ＣＤ抗体を含む本発明の抗ＣＤ２０抗体処方を哺乳動物に投与することによってＣＤ２０を発現する細胞が関与する疾患を治療する方法に関し、ここで、該処方は、１０〜１００ｍＭ酢酸ナトリウム、２５〜１００ｍＭ塩化ナトリウム、０．５〜５％アルギニン遊離塩基、０．０２〜０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０１〜０．２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．０〜７．０に調整して、該安定性抗体処方は、哺乳動物に経口投与、非経口投与、鼻腔内投与、経膣投与、経直腸投与、舌投与、舌下投与、口腔内投与、経皮投与、静脈内投与、または皮下投与される。

さらに別の実施態様において、本発明は、２０〜３００ｍｇ／ｍＬの濃度範囲の抗ＣＤ２０抗体を含む本発明の抗ＣＤ２０抗体処方を哺乳動物に投与することによってＣＤ２０を発現する細胞が関与する疾患を治療する方法に関し、ここで、該処方は、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、５１ｍＭ塩化ナトリウム、１％アルギニン遊離塩基、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．５に調整した。好ましい抗ＣＤ２０抗体はオファツムマブである。

前述の概要説明および以下の詳細な説明は両方とも、例示および説明のためのものであり、特許請求の範囲の発明をさらに説明することを意図とするものであることが理解されるべきである。

添付の図面は、本発明をさらに理解するために含まれており、本明細書の一部となり、本明細書の一部を構成し、本発明のいくつかの実施態様、および本発明の原理を説明するのに有用な説明と一緒に説明するものである。

図１は、二通りの２０ｍｇ／ｍＬ（３０ｍＭクエン酸塩、１００ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ６．５）の抗ＣＤ２０抗体の標準処方（ＲｅｆＭａｔ）を示す。 図２は、二通りの２０ｍｇ／ｍＬ（５０ｍＭ酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム（５１ｍＭ）、１％アルギニン遊離塩基、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０２％ポリソルベート８０、ＨＣｌでｐＨを５．５に調整）の抗ＣＤ２０抗体の本発明（ＰｌａｔＦｏｒｍ）処方の１の実施態様を示す。 図３は、ＤＳＣによる本発明（ＰｌａｔＦｏｒｍ）の処方実施態様および標準処方バッファー（ＲｅｆＭａｔ）における抗ＣＤ２０抗体の熱安定性の比較を図示する。熱力学的に、見掛けＴｍの変化が処方間で０．５℃未満であるので、２種の処方はそのＤＳＣプロファイルに見られるように類似している。

本発明の１の実施態様は、せん断および温度安定性抗体処方に関する。

別の実施態様において、本発明は、高温および５５℃での振盪の同時応力条件下の処方で見られる予想外の安定性を提供する。

本発明のさらなる実施態様は、標準処方（例えば、３０ｍＭクエン酸塩、１００ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ６．５）に比べてより安定な処方である。本発明の処方は、応力条件に曝された場合に沈殿の減少（透明な状態）を示したが、標準処方は凝集していた。そのＤＳＣ（示差走査熱量計）プロファイルに見られるように、熱力学的に２種の処方は類似しているので、この結果は予測不可能であった。

本発明の記載において、特定の用語は、以下に定義するように用いられる。

「タンパク質処方」または「抗体処方」なる語は、活性成分の生物活性が明らかに有効となるようなかかる形態であって、処方が投与されるであろう対象に対し毒性がある付加的な成分を含有しない製剤をいう。

「医薬上許容される」賦形剤（ビヒクル、添加剤）は、用いられる活性成分の有効量を与えるために対象哺乳動物に適当に投与されうるものである。例えば、賦形剤の濃度はまた、注射の適合性に関連する。

「安定な」処方は、その中のタンパク質が、本質的には、保存するとその物理的および／または化学的安定性ならびに／あるいは生物活性を保持するものである。タンパク質の安定性を測定する種々の分析法は、当該分野にて利用可能であり、例えば、Peptide and Protein Drug Delivery, 247-301, Vincent Lee Ed., Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., Pubs (1991) and Jones, A. Adv. Drug Delivery Rev. 10: 29-90 (1993)に掲載されている。安定性は、選択された温度にて選択された時間測定されうる。好ましくは、処方は、常温または４０℃にて少なくとも１ヶ月間安定ならびに／あるいは２〜８℃にて少なくとも１〜２年間安定である。さらに、処方は生成物の凍結（例えば、−７０℃まで）および解凍の後で安定でありうることが望ましい。

色および／または透明度の外観試験によって観察される、あるいはＵＶ光散乱（可視化凝集物を測定する）またはサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって測定されるような凝集、沈殿および／または変性の変化をほとんどまたは全く示さない場合、タンパク質は、生物医薬処方において「その物理的安定性を保持する」。ＳＥＣは、必ずしも可視化凝集物の前駆体ではない可溶性凝集物を測定する。

所定の時間での化学的安定性が、タンパク質が下記のその生物活性を保持すると考えられるようなものである場合、タンパク質は、生物医薬処方において「その化学的安定性を保持する」。化学的に分解された種は、生物学的に活性でかつ化学的に不安定でありうる。化学的安定性は、タンパク質の化学的に変化した形態を検出および定量化することによって評価されうる。化学変化は、ＳＥＣ、例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび／またはマトリックス関連レーザー脱離イオン化／飛行時間型質量分析（ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ ＭＳ）を用いて評価されうるサイズ修正（例えば、クリッピング）が関与しうる。他の種類の化学変化には、例えば、イオン交換クロマトグラフィーにより評価されうる荷電変化（例えば、変性の結果として生じるもの）が含まれる。

所定の時間での抗体の生物活性の変化が、抗原結合アッセイにおいて測定される医薬処方を調製した時点で示される生物活性の約１０％以内（アッセイの誤差内）である場合、抗体は、医薬処方において「その生物活性を保持する」。抗体の他の「生物活性」アッセイは、以下に詳述されている。

「等張な」なる語は、目的処方が本質的にヒト血液と同じ浸透圧を有することを意味する。１の実施態様において、本発明の等張な処方は、一般に、２５０〜３５０ｍＯｓｍの範囲の浸透圧を有するであろう。他の実施態様において、本発明の等張な処方は、約３５０〜４５０ｍＯｓｍの浸透圧を有するであろう。さらに別の実施態様において、本発明の等張な処方は、４５０ｍＯｓｍを超える浸透圧を有するであろう。等張性は、例えば、蒸気圧型または氷結型浸透圧計を用いて測定されうる。

本明細書に用いられる、「バッファー」とは、その酸−塩基共役成分の作用によってｐＨの変化に耐える緩衝化溶液をいう。１の実施態様において、本発明のバッファーは、約４．５〜約６．０の範囲のｐＨ；別の実施態様において、約４．８〜約５．８；さらなる実施態様において、約５．５のｐＨを有する。該範囲でｐＨを調整するであろうバッファーの例として、酢酸塩（例えば、酢酸ナトリウム）、コハク酸塩（例えば、コハク酸ナトリウム）、グルコン酸塩、ヒスチジン、クエン酸塩および他の有機酸バッファーが挙げられる。凍結融解に安定な処方が望ましい場合、バッファーは、好ましくはリン酸塩ではない。

医薬の意味において、本発明を鑑みると、抗体の「治療上有効な量」は、治療において抗体が有効である障害の予防または治療に有効な量をいう。「障害」は、抗体での治療から恩恵を受けるであろう任意の病態である。これには、哺乳動物が問題となっている障害に罹患しやすくなる病状を含む慢性および急性障害または疾患が含まれる。好ましい実施態様において、「障害」は、ＣＤ２０を発現する細胞が関与する疾患である。

「保存剤」は、本質的に細菌作用を低下させるために処方に含まれうる化合物であり、そのため、例えば、多用途処方の製造を促進する。潜在的な保存剤の例として、塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンズアルコニウム（アルキル基が長鎖化合物である塩化アルキルベンジルジメチルアンモニウムの混合物）、および塩化ベンゼトニウムが挙げられる。他の種類の保存剤として、芳香族アルコール類似、例えば、フェノール、ブチルアルコールおよびベンジルアルコール、アルキルパラベン類、例えば、メチルパラベンまたはプロピルパラベン、カテコール、レソルシノール、シクロヘキサノール、３−ペンタノール、およびｍ−クレゾールが挙げられる。本明細書において最も好ましい保存剤はベンジルアルコールである。

「抗体」なる語は、最も広い意味で用いられ、特に、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および所望の生物活性を示す限りは抗体断片を包含する。

「抗体断片」は、全長抗体の一部、一般的には、その抗原結合領域または可変領域を含む。抗体断片の例として、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、およびＦｖ断片；ダイアボディ（diabodies）；線状抗体；一本鎖抗体分子；および抗体断片から形成される多重抗体が挙げられる。

本明細書に用いられる「モノクローナル抗体」なる語は、実質的に同種の抗体、すなわち、少量で存在しうる可能性のある天然由来の変種を除けば同一である群を含む個々の抗体の群から得られた抗体をいう。モノクローナル抗体は、特異性が高く、単一抗原部位に対して作製される。さらに、典型的に異なるデターミナント（エピトープ）に対して作製される異なる抗体を含む通常（ポリクローナル）抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原の単一決定基に対して作製される。「モノクローナル」なる修飾句は、抗体の実質的に同種の群から得られるような抗体の特徴を示し、特定の方法によって抗体の必要な群と解釈されるものではない。例えば、本発明にしたがって用いられるモノクローナル抗体は、Kohler et al., Nature 256:495 (1975)に初めて記載されたハイブリドーマ法によって作製されうるか、または組み換えDNA法によって作製されうる(例えば、米国特許番号第4,816,567号を参照)。「モノクローナル抗体」はまた、例えば、Clackson et al., Nature 352:624-626 (1991)およびMarks et al., J. Mol. Biol. 222:581-597 (1991)に記載の技法を用いてファージ抗体ライブラリーから単離されうる。

「ヒト化」形態のヒト以外（例えば、マウス）抗体は、ヒト以外の免疫グロブリンから生じる最小配列を含有するキメラ抗体である。ヒト化抗体はほとんど、レシピエントの超可変領域からの残基が、所望の特異性、親和性および能力を有するマウス、ラット、ウサギまたはヒト以外の霊長類などのヒト以外の種（ドナー抗体）の超可変領域からの残基によって置き換えられるヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。ある場合には、ヒト免疫グロブリンのＦＲ残基は、対応するヒト以外の残基によって置き換えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体でまたはドナー抗体で見出されない残基を含んでいてもよい。抗体をさらに精製するためにこれらの修飾が行われる。一般に、ヒト化抗体は、全てのまたは実質的に全ての超可変領域がヒト以外の免疫グロブリンのものに相当し、全てのまたは実質的に全てのＦＲ領域がヒト免疫グロブリン配列のものである、実質的に全ての少なくとも１個、典型的には２個の可変領域を含むであろう。ヒト化抗体はまた、所望により、少なくとも一部の免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンのものを含むであろう。さらなる詳細については、Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-329 (1988); and Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596 (1992)を参照。

「一本鎖Ｆｖ」または「ｓＦｖ」抗体断片は、抗体のＶ_ＨおよびＶ_Ｌ領域を含み、ここで、該領域は、単一ポリペプチド鎖に存在する。一般には、Ｆｖポリペプチドは、ｓＦｖが抗体結合の所望の構造を形成できるようにするＶ_ＨおよびＶ_Ｌ領域間のポリペプチドリンカーをさらに含む。ｓＦｖの概説については、Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds. Springer-Verlag, N.Y., pp. 269-315 (1994)を参照。

「ダイアボディ」なる語は、断片が同一ポリペプチド鎖（Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌ）中に軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）に結合した重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）を含む、２個の抗原結合部位を有する小型抗体断片をいう。あまりにも短すぎて同一鎖上の２個の領域間で組み合わせることができないリンカーを用いることによって、領域は、別の鎖の相補的な領域と組み合わせられ、２個の抗原結合部位を作製する。ダイアボディは、例えば、EP 404,097; WO 93/11161;およびHollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448 (1993)にさらに詳しく記載されている。

本願に用いられる「線状抗体」なる表現は、Zapata et al. Protein Eng. 8(10):1057-1062 (1995)に記載の抗体をいう。つまり、これらの抗体は、一組の抗原結合領域を形成する一組の直列Ｆｄセグメント（Ｖ_Ｈ−−Ｃ_Ｈ−−Ｖ_Ｈ１−−Ｃ_Ｈ１）を含む。線状抗体は、二重特異性または単一特異性でありうる。

処方される抗体は、好ましくは本質的に純粋であり、望ましくは本質的に同種である（すなわち、夾雑タンパク質などを含まない）。「本質的に純粋な」抗体は、組成物の総重量に対し、少なくとも約９０重量％、好ましくは少なくとも約９５重量％の抗体を含む組成物を意味する。「本質的に同種の」抗体は、組成物の総重量に対し、少なくとも９９重量％の抗体を含む組成物を意味する。

「治療」は、治療的処置および予防的処置または予防対策の両方をいう。治療を必要とするものには、すでに障害を伴うものならびに障害を予防すべきものが含まれる。

治療対象の「哺乳動物」は、限定されるものではないが、ヒト、家畜および農用動物、ならびに動物園の、スポーツ用、またはペット用動物、例えば、イヌ、ウマ、ネコ、およびウシを含む、哺乳動物に分類される任意の動物をいう。

「応力条件」は、タンパク質に化学的および物理的に不適であり、許容されないタンパク質安定性（例えば、熱、せん断、化学的応力）を与えうる環境をいう。

サイズ排除クロマトグラフィーは、粒子がそのサイズまたは流体力学的容量に基づき分離されるクロマトグラフ法である。

動的光散乱は、タンパク質散乱の時間依存性を測定する方法である。従来、該時間依存性は、分子の流体力学半径を得るために処理される。

「ＤＳＣ」は、示差走査熱量測定をいう：ＤＳＣ収集パラメータは、限定されるものではないが、１ｍｇ／ｍｌタンパク質、７０℃／時間の走査速度を有する５〜８０℃のスキャンおよび１５分の待ち時間（prewait）でありうる。バッファー−バッファースキャンは最初に得られ、生データから差し引かれうる。データは、バッファーを補正し、タンパク質濃度を正常化し、次いで、プロットされうる。凝集は基準値補正を妨げることができる。

以下の実施例は、本発明をさらに説明するものである。実施例は、本発明の範囲を限定することを意図とするものではなく、本発明のさらなる理解を提供するものである。

本発明は、本発明を説明することを意図とする以下の実施例によってさらに説明される。これらの実施例は、本発明の範囲を限定するものとして解釈されることを意図とするものではない。本明細書の開示を考慮しても、本発明の多くの修正および変更は可能であり、そのため、本発明の範囲内にある。以下の実施例は、標準的方法を用いて行われ、かかる標準的方法は、特に詳細に記載されている場合を除き、当業者に周知かつありふれたものである。

実施例１．１：プラットフォーム処方バッファーの調製
本発明の１の実施態様において、４リットルの酢酸塩バッファーを調製した。この実施態様において、最終バッファーは、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、５１ｍＭ ＮａＣｌ、１．０％アルギニン、０．０２％ポリソルベート８０、ｐＨ５．５から成っていた。酢酸ナトリウム三水和物、エデト酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ）、ポリソルベート８０およびＬ−アルギニン遊離塩基を３．５Ｌの脱イオン水に溶解することによってバッファーを調製した。ｐＨを３Ｎ ＨＣｌを用いて５．５に調製したらすぐに、容量を４．０Ｌまで引き上げ、バッファーを０．４５μｍフィルターユニットを用いて濾過した。次いで、使用するまでバッファーを２〜８℃にて保存しうる。本願に記載の「％」なる語句は、「容量％」を示す。

実施例２．１：プラットフォーム処方バッファー中のオファツムマブの調製
本発明の１の実施態様において、オファツムマブを、プラットフォーム処方（５０ｍＭ酢酸ナトリウム、５１ｍＭ ＮａＣｌ、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０２％ポリソルベート８０、および１．０％アルギニン（遊離塩基））に透析濾過し（diafiltrated）、安定にするために濃縮した。オファツムマブを、３種の膜を伴うラボスケールタンジェンシャルフローシステム（lab-scale tangential flow system）を用いてプラットフォーム処方に透析濾過した。プラットフォームバッファーに透析濾過した後、オファツムマブを１７９ｍｇ／ｍＬの最大濃度に濃縮した。すべてのプロセルを終えるのに操作時間は約３日かかり、収率は９６．１％であった。約２０〜１７９ｍｇ／ｍＬの濃度範囲を研究できるように、１７９ｍｇ／ｍＬの一部をプラットフォーム処方バッファーで希釈した。

実施例３．１：外観（ＧＡ）直接比較のための標準およびプラットフォーム処方中のオファツムマブの調製
１２週間以上の外観の直接比較および振盪実験のために、抗ＣＤ２０抗体（オファツムマブ）を２０ｍｇ／ｍＬの濃度で標準処方およびプラットフォーム（本発明の１の実施態様）処方中に調製した。
標準およびプラットフォーム処方の抗ＣＤ２０抗体を、低タンパク質結合０．２μｍ膜フィルターを用いて濾過した。濾過後、きれいなドラフト中で無菌操作を用いて各処方を５ｃｃバイアル中に３ｍＬ充填し、栓をし、圧着した。各処方の２つのバイアルを、温度調節して振盪機上に置いた。バイアルを、５５℃の温度にて３２５ｒｐｍで振盪した。加熱振盪している間、４２時間にわたって一定時間ごとに、実施例３．２に記載するように、外観を観察した。図１および２は、それぞれ、加熱振盪の１８．５時間後の、標準およびプラットフォーム処方を示す。振盪研究の全体の外観結果は、プラットフォームより急速に５５℃の温度にて振盪させる場合に、標準処方が時間とともに粒子を生成するであろうことを示した。

実施例３．２：ＧＡ、１８．５時間の振盪研究−外観オファツムマブ、２０および１００ｍｇ／ｍＬ
抗ＣＤ２０モノクローナル抗体の振盪研究サンプルの外観（ＧＡ）を以下の表に示す。色、透明度および可視粒子状物質を記載するＩｇＧ抗体溶液に用いられうる一般法を用いてＧＡを達成した。

実施例４：示差走査熱量測定（ＤＳＣ）による標準およびプラットフォームバッファー中のオファツムマブ溶液の熱安定性の測定
ＤＳＣによる試験を適正に終了するために、バッファー単独およびタンパク質とのスキャンを得た。標準およびプラットフォーム処方中のタンパク質を、実施例４．１に示すように１ｍｇ／ｍＬに希釈した。各スキャン前に１５分平衡化して７０℃／時間の走査速度で５〜８０℃スキャンするようにＤＳＣを設定してデータを得た。ＤＳＣサンプル細胞の容量は、約０．５ｍＬであった。バッファーおよびタンパク質のスキャンを得た後、次いで、バッファースキャンをタンパク質スキャンから差し引くことができた。サンプル中のタンパク質濃度を、各スキャン中の濃度を補正するために得た（実施例４．２を参照）。Ｔ_ｕｎの値、℃、変性の開始、Ｔ_ｍ、℃、（転移最大値での）変性温度およびＴ_１／２、℃、半分の高さでのピーク幅（転移の三次構造および共同性の変化を示す）を、各処方のオファツムマブについて得た（実施例４．３を参照）。実際のＤＳＣスキャンは図３にて見ることができる。ＤＳＣの結果に基づき、標準処方中またはプラットフォーム処方中のいずれかのオファツムマブは、類似のＤＳＣプロファイルを有しているため、類似の熱安定性を有することが期待されるであろう。

実施例４．１：オファツムマブｐＨ研究の生物物理学的特性評価のためのサンプル調製：

実施例４．２：Ａ２８０測定

実施例４．３：ＤＳＣ結果

実施例５．１：高濃度の達成、抗ＯＳＭ
別の実施態様において、タンパク質を失わないように低分子量を切り捨て細胞膜を超える抗ＯＳＭ抗体を攪拌しながら徐々に交換した攪拌細胞を用い、ＮａＣｌを含有しない（上記実施例１．１に記載の）プラットフォーム処方バッファー中で２７８ｍｇ／ｍＬの抗ＯＳＭの濃度に達した。さらに、タンジェンシャルフロー（ＴＧＦ）を用いて、ＮａＣｌを含有しない（上記実施例１．１に記載の）プラットフォーム処方バッファー中で約２２８ｍｇ／ｍＬの濃度に達した。最終的に、物質はまた、２種の膜を伴うラボスケールＴＧＦユニットを用いて調製された。ラボスケールユニット中で調製された物質は、（上記実施例１．１に記載の）プラットフォーム処方バッファー中で約２１２ｍｇ／ｍＬに達した。３工程すべてから調製された物質を安定に保ち、すべての物質は保存条件２〜８℃にて安定であることが見出された。

実施例５．１：安定性研究、抗ＯＳＭ
本発明の１の実施態様において、濃度の範囲での抗ＯＳＭ抗体の安定性を観察するために溶液研究を新設した。攪拌細胞を介して実施例５．１で調製された物質を、ＴＧＦ方法を介して調製された物質と一緒に、安定に置いた。該濃度のａＯＳＭを処方バッファー中に希釈することによって２１２ｍｇ／ｍＬより低濃度にした。結果として、該研究には、９５〜２７８ｍｇ／ｍＬの範囲に及ぶ濃度が含まれる。２〜８℃の保存条件ならびに−２０、２５および４０℃の保存を含むいくつかの応力条件を利用した。研究は１６週続いた。１６週のサンプルをまた、２−８℃で保存し、その後の時点、３２週で再度試験した。すべての処方を、塩化ナトリウムを添加することなく（上記実施例１．１に記載の）プラットフォーム処方バッファー中で調製した。塩化ナトリウムは、等張溶液を確保するためにプラットフォーム処方に加えられ、タンパク質の安定性を補助するためには加えられない。物理的（ｐＨ、外観）、生化学的（Ａ２８０ｎｍ，ＳＥＣ−ＨＰＬＣ，ｃＩＥＦ，ＳＤＳ−ＰＡＧＥによる濃度）および活性（結合ＥＬＩＳＡ）測定値は、プラットフォーム中の９５〜２７８ｍｇ／ｍＬの抗ＯＳＭ抗体の濃度が少なくとも３２週間２〜８℃の保存条件下で維持されうることを示す。また、そのことは該研究で確認され、凝集およびアミド分解は抗ＯＳＭの主な分解経路と考えられうる。

本発明のこの実施態様において、プラットフォーム処方中の約１５０および２００ｍｇ／ｍＬの抗ＯＳＭ抗体濃度を、凍結／解凍サイクルに３回付し、２〜８℃にて４８時間勢いよく振盪した。両条件での結果は、用いられるすべての物理的、生化学的および活性測定によると３回の凍結／解凍サイクルおよびガラス製バイアル中での４８時間の振盪の後、高濃度でさえ、物質が安定であったことを示す。

本発明の別の実施態様において、ラボスケールの抗ＯＳＭを、（実施例１．１に記載の）プラットフォーム処方中で１５０ｍｇ／ｍＬに調製し、同一プラットフォーム処方中で１００ｍｇ／ｍＬの抗ＯＳＭ ＧＭＰ大規模バッチと比較した。抗ＯＳＭ抗体を、５、２５および４０℃ならびに、−４０および−７０℃を含む複数の凍結条件および抗ＯＳＭ抗体が−７０℃にて凍結（瞬間凍結）され、次いで、−４０または−２０℃にて保存される条件にて静置した。約１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＯＳＭ抗体が、５℃の保存条件で安定性を維持し、用いられるすべての物理的、化学的および活性測定によって大量調製されたＧＭＰ１００ｍｇ／ｍＬ物質と同様の安定性プロファイルを有することを該結果は示す。両方の濃度は、２５および４０℃で研究された熱応力条件で同様の分解プロファイルを有していた。すべての凍結保存条件は、安定しているようであり、−７０℃にて凍結し、次いで、−２０℃にて保存したサンプルを除き同様の結果を得た。２週の時点で、これらのサンプルは、ＳＥＣ−ＨＰＬＣによって凝集の増加の傾向をすでに示し始めていた。これは、１００ｍｇ／ｍＬサンプル中では見られず、濃度依存性によるものと考えられる。しかしながら、本発明の別の実施態様は、−７０℃の保存が利用不可能な場合に、−４０℃の凍結保存条件が考えられうることであると該研究は示唆している。さらに別の実施態様において、−７０℃での凍結、その後の−４０℃の温度での保存はまた、別法でありうる。

実施例６．１：（実施例１．１に記載の）プラットフォーム処方を正当化するために用いられる抗ＭＡＧ抗体のプレフォーミュレーションおよびフォーミュレーション研究
熱安定性：抗ＭＡＧ抗体を、以下の実験に用いた。４．０〜８．５のｐＨ範囲を有する１０種くらいの等張液を調製した。Ｓｌｉｄｅ−ａ−ｌｙｓｅｒ透析法を、実験用１０ｍｇ／ｍＬ溶液を１０ｍｌ製造するために用いた。これらのサンプルを、熱分析のために関連バッファーで、１ｍｇ／ｍＬに希釈した。抗ＭＡＧ抗体の４．０〜８．５のｐＨ範囲を有する溶液中での熱安定性を、Ｓｅｔｅｒａｍ Ｍｉｃｒｏ ＤＳＣ ＩＩＩを用いて行った。サンプルを、０．７℃／分の速度で２５℃〜９０℃の熱イベントについてスキャンし、スキャニング前に３０分間等温保持を始めた。各測定を二通り行った。参照物質は各サンプルを模倣するために不活性（バッファー、全成分−抗ＭＡＧ抗体）であり、参照サンプルとサンプルのサイズは同一であり、０．８ｇに近かった。すべてのデータは、抗ＭＡＧ抗体の熱安定性がｐＨに関係なく優れていることを示唆している。全くまたは少しも凝集または沈殿が観察されなかった４．５以上のｐＨを有する溶液を除き、変性は６８℃〜７２℃の範囲で始まり、沈殿は約７５℃〜８５℃で始まる。

ｐＨ安定性プロファイル：熱安定性を得られた同一の物質をまた、該実験に用いた。各溶液からの約１ｍＬアリコートをザルスタット（Ｓａｒｓｔｅｄｔ）チューブに充填し、温度調節キャビネットで５０℃および５℃にて１ヵ月間保存した。サンプルの安定性を、活性の測定として多くの生化学的（ＩＥＸ−ＨＰＬＣ、ＲＰ−ＨＰＬＣ、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびＳＥＣ−ＨＰＬＣ）技法およびＥＬＩＳＡを用いて比較した。ＩＥＸ−ＨＰＬＣ方法は、サンプルにおけるｐＨ変化により、何も結果をもたらさなかった。５０℃での抗ＭＡＧ抗体の安定性が７．０を超えるｐＨ値で最も悪いことをすべてのアッセイが認めることを該結果は示す。抗ＭＡＧ抗体の安定性が、４．５〜５．５のｐＨ範囲を有する溶液中で最適であることをＥＬＩＳＡおよびＲＰ−ＨＰＬＣ結果は示唆し、最適安定性が５．０および６．０の間のｐＨ範囲で見出されうることをＳＥＣ−ＨＰＬＣ結果および非還元性ＣＥ−ＳＤＳ−ＰＡＧＥ結果は示唆している。

ｐＨ溶解性プロファイル：ＰＥＧ沈殿法を、抗ＭＡＧ抗体の４．０〜８．５のｐＨを有する溶液における溶解性を測定するために用いた。十分なＰＥＧ６０００を２５％〜７５％のタンパク質を沈殿させるために加え、理想的には５だが少なくとも３の２５〜７５％沈殿値を得た。６．２５％および２５％の間の溶液のｐＨによって、ＰＥＧ６０００を加えた。混合物を一晩静置し、０．２μｍフィルターに通して濾過し、タンパク質含量を濾液中で測定した。Ｈｅｗｌｅｔｔ Ｐａｃｋａｒｄ ８４５３ ＵＶ検出器を２８０ｎｍでのサンプルの分析に用い、タンパク質の濃度を１．６１Ｅを用いて測定した。各溶液のタンパク質濃度のｌｏｇ値を、各沈殿法に用いられるＰＥＧ６０００濃度に対してプロットした。ｙ軸上の切片はタンパク質の試験溶液における溶解性を示す。抗ＭＡＧ抗体の４．０〜８．５のｐＨを有する溶液における溶解性は、ＰＥＧ沈殿法によって測定され、所望の１００ｍｇ／ｍＬが可溶化剤を加えることなく６．５および７．５の間のｐＨ範囲で達成され得ないことを示す。１０００ｍｇ／ｍＬの溶解度は、ｌｏｇ外挿が非常に高い値を得たすべての結果について記録される。

安定性に対するせん断の効果：各溶液の２ｍＬサンプルを、攪拌フリーを伴う発光キュベットに加えた。キュベットを、２０℃に恒温したＰｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＬＳ ５０Ｂ蛍光光度計中に入れ、高速で攪拌した。攪拌キュベット中の可視微粒子の量の測定値を、４００ｎｍに設定した励起波長および発光波長を伴う発光測定値から得た。攪拌サンプルの分析を３０分毎に行った。抗ＭＡＧ抗体が６．５〜５．５のｐＨ値範囲を有する溶液中せん断応力に最も感度が高く、溶液のｐＨが４．５または４．０である場合最も感度が低いことを結果は示唆している。

Ｃｕ（ＩＩ）結合評価：銅イオンは、モノクローナル抗体の分解に関与している。相互作用は、すぐに分光的に可視化されうる。加えられたＣｕ（ＩＩ）を含まない抗ＭＡＧ抗体は、可視範囲でＣＤシグナルを示さない。最大９０μＭのＣｕ（ＩＩ）を加えると、５７０ｎｍでの負のバンドは、加えられたＣｕ（ＩＩ）の量とともに増加した。沈殿物は塩化Ｃｕ（ＩＩ）を加えると観察され、混合すると該沈殿物は消失した。沈殿物が混合後にはっきりと見え続けた場合に滴定を止めた。観察されたスキャンの変化が沈殿によるものではなかったことを確認するために、１００μＭ Ｃｕ（ＩＩ）を含有する１０ｍｇ／ｍＬサンプルを濾過し、濾液を再度スキャンした。スキャンは、ＣＤシグナル約５７０ｎｍが存在することならびにＣｕ（ＩＩ）および抗ＭＡＧ抗体の間の相互作用が起こることを結論付けることと十分同等である。

溶解性に対するバッファーの種類および可溶化剤の効果：多数の共溶媒、塩、緩衝剤および他の賦形剤は、異なる結合（静電相互作用、ファンデルワールス相互作用、水素結合および他の近距離力）によってタンパク質の溶解性／安定性に影響を及ぼす。変性の遊離エネルギーが増大する場合、タンパク質が安定化する（溶解度が増大する）。賦形剤が選択的に変性タンパク質と相互作用する場合（変性の遊離エネルギーの低下）、タンパク質が不安定化する（溶解度が低下する）。抗ＭＡＧ抗体の溶解性を、同一ｐＨを達成するために酢酸塩またはリン酸塩バッファーを用いて比較した。溶解性はまた、ｐＨ５．５および６．５にて測定され、そして、アルギニンをバッファーに加えた後、モノクローナル抗体の既知の可溶化剤を決定した。精製した抗ＭＡＧ抗体を試験ビヒクル中に透析した。試験ビヒクルは、リン酸塩バッファーｐＨ５．５、酢酸塩バッファーｐＨ５．５＋１％アルギニン、リン酸塩バッファーｐＨ５．５＋１％アルギニン、リン酸塩バッファーｐＨ６．５＋１％アルギニンで、すべてほぼ等張であった。活性の最終濃度は約５ｍｇ／ｍＬであった。酢酸塩バッファーが、リン酸塩バッファーに比べてより高い抗ＭＡＧ抗体の溶解性を明確に与えることを該結果は示す。アルギニンの添加は、両タイプのバッファーにおいて、すべてのｐＨ値で抗ＭＡＧ抗体の溶解性を増大した。

安定性に対するキレート剤および窒素の効果：Ｃｕ（ＩＩ）および抗ＭＡＧ抗体の間の相互作用は前の実験で（存在しないことが）確認され、ＥＤＴＡはＣｕ（ＩＩ）のよいキレート剤であるので、そのため、ＥＤＴＡのビヒクルへの添加は、分解速度を低下させうる。分解過程それ自体、酸素で燃焼されるので、ビヒクルから酸素を取り除き、容器のヘッドスペースに保存される物質はまた、該経路を介する分解を防止しうる。Ｃｕ（ＩＩ）と抗ＭＡＧ抗体との相互作用を確認し、ＥＤＴＡの添加ならびにビヒクルおよび容器のヘッドスペースを窒素でパージすることが抗ＭＡＧ抗体の分解を減少させるかを評価するために熱安定性実験を行った。精製した抗ＭＡＧ抗体を、等張にするためにＮａＣｌを含有する５０ｍＭ酢酸塩バッファーｐＨ５．５中に透析し、ビヒクルで１０ｍｇ／ｍＬに希釈した。該溶液を、実験用処方を製造するために用いた。これらのサンプルを、分析前に５０℃にて２５日間培養した。ＳＥＣ−ＨＰＬＣおよびＥＬＩＳＡによってサンプルの安定性を分析した。０．１ｍＭおよび０．２ｍＭ ＥＤＴＡを該溶液に加えた場合、抗ＭＡＧの安定性は０．０３４ｍＭ Ｃｕ（ＩＩ）〜０．３４ｍＭ Ｃｕ（ＩＩ）の添加によって影響を受けないことをＳＥＣ−ＨＰＬＣおよびＥＬＩＳＡの両方の結果は示唆している。０．３４ｍＭ Ｃｕ（ＩＩ）〜抗ＭＡＧ溶液単独の添加は、活性の大きな分解をもたらした。窒素でパージすることは、Ｃｕ（ＩＩ）単独を加えた場合の分解に比べて活性の分解を低下させたが、酸素を窒素に置き換えることは、ＥＤＴＡの添加と同程度まで分解の拡大を低下させるようには見えなかった。分解を遅らせるためにＥＤＴＡおよび窒素のどちらも用いず、サンプルをＣｕ（ＩＩ）と混合しなかった場合に、低分子量物質の出現がＥＤＴＡとのサンプル中よりわずかに大きく、これが、賦形剤または容器閉鎖系における少量のＣｕ（ＩＩ）の存在によるかもしれないことをＳＥＣ−ＨＰＬＣ結果も示唆していた。

界面活性剤の効果：界面活性剤は両親媒性分子であり、そのため、それらは、疎水性／親水性界面（例えば、空気／水または固体／水界面）にまたがるであろう。タンパク質はまた、凝集および沈殿の主な原因である、これらの種類の界面に吸着する。界面活性剤は、タンパク質吸着の範囲を疎水性／親水性界面に制限することによって界面誘導性凝集を阻止する。他の賦形剤に関して、界面活性剤は、異なる結合によってタンパク質と相互作用する。多くの界面活性剤は、選択的に変性状態と結合するため、通常の安定性を低下させる。したがって、せん断誘発性凝集を阻止する界面活性剤の最低濃度を決定するための研究が行われた。初めに、精製した抗ＭＡＧ抗体を、１％アルギニンを含有する酢酸塩バッファーｐＨ５．５のビヒクル中で５０ｍｇ／ｍＬに希釈した。５０ｍｇ／ｍＬ研究の最適濃度範囲における１００ｍｇ／ｍＬ試験溶液および界面活性剤を用いて、研究を繰り返した。これは、処方開発を活発にするために行われた。唯一試験した界面活性剤はポリソルベート８０であった、というのも、該界面活性剤は注射用賦形剤として承認されており、該界面活性剤は、以前はモノクローナル抗体のせん断誘発性凝集を減少させるのに用いられていたためである。０．００１％〜０．２％のポリソルベート８０の濃度の添加を評価した。ポリソルベート８０を含む溶液のせん断応力安定性は、ポリソルベートを含まない抗ＭＡＧ溶液のせん断応力安定性と比較した。該結果は、ポリソルベート８０の添加が、抗ＭＡＧのせん断応力安定性を改善したことを立証し、０．０２％ポリソルベート８０の添加が、用いられるモデルにおけるせん断誘発性凝集を完全に取り除くのに十分でありうることを示唆している。また、０．０２％ポリソルベート８０の添加は、１００ｍｇ／ｍＬの抗ＭＡＧ抗体を含有する試験溶液におけるせん断誘発性凝集をほとんど取り除いた。

安定性に対するバッファーの種類、濃度および塩化ナトリウムの効果：賦形剤および抗ＭＡＧ抗体の間の相互作用は、抗ＭＡ抗体の長期の安定性をもたらしうる。かかる相互作用は、賦形剤の選択および／または濃度をもたらすであろう。生成物は、バッファーの濃度を変化させることによって等張に調節されうるが、典型的には、塩化ナトリウムまたはスクロースがこのために用いられる。活性−賦形剤相互作用は、生成物の等張性を調節する最も効果的な方法の選択を補助しうる。精製した抗ＭＡＧ抗体を、等張溶液を作製するために１％アルギニンおよび塩化ナトリウムを加えてｐＨ５．５−６．０の以下のビヒクル：酢酸ナトリウム、リン酸カリウムおよびリン酸ナトリウムビヒクルに透析した。次いで、溶液を、適当なビヒクルで２０ｍｇ／ｍＬに希釈した。１ｍＬアリコートを２ｍＬバイアルに充填した。次いで、各溶液からの２つのバイアルを分析まで５℃にて保存し、２つのバイアルを５０℃にて２８日間保存し、次いで、分析した。活性の測定としてＳＥＣ−ＨＰＬＣおよびＥＬＩＳＡによってサンプルの安定性を分析した。酢酸塩バッファーの濃度の変化およびＮａＣｌの種々の濃度の添加が、活性成分の安定性に対する効果をほとんどまたは全く有していなかったことを該結果は示す。さらに、酢酸塩およびリン酸塩バッファーを含有するビヒクル間の抗ＭＡＧ抗体安定性は異なるものである。しかしながら、この相違は、バッファーよりむしろｐＨの相違によるものであろう。ＥＬＩＳＡアッセイは、異なるビヒクルにおける抗ＭＡＧ抗体安定性の相違を示唆していなかった。バッファーの濃度が、活性成分の安定性に対する効果をほとんど有していなかったことおよびオスモル濃度が、安定性をもたらすことなくＮａＣｌで調節されうることを該研究は示唆していた。酢酸塩バッファーが、リン酸塩バッファーに比べてより長期の安定性を提供しうることも該研究は示した。

光の効果：タンパク質の安定性は、特定のアミノ酸、特に、高分子の外面上のトリプトファンの存在により様々な程度の光照射によってもたらされる。ペプチドについて、分子中のトリプトファンの識別は、該分子の光に対する感受性を示しうる。巨大タンパク質について、トリプロファンの識別は、分子の光感受性を決定するのに十分ではなく、三次構造中のアミノ酸の位置はまた、知られている必要がある。高分子のプレフォーミュレーション／フォーミュレーション研究の信頼性を確保するために、その光感受性は、研究から排除されなければならない。このため、抗ＭＡＧ抗体の光感受性を測定した。光における抗ＭＡＧ抗体の安定性はまた、ＧＭＰ安定性研究中にＩＣＨ指針にしたがって決定されるであろう。精製した抗ＭＡＧ抗体は実験のために用いられた。抗ＭＡＧ抗体の濃度は１００ｍｇ／ｍＬであり、用いられるビヒクルは０．０５ｍＭ ＥＤＴＡおよび０．０２％ポリソルベート８０を含有する５０ｍＭ酢酸塩バッファー、ｐＨ５．５であった。１ｍＬアリコートを２ｍＬのタイプＩガラス製バイアルに充填し、Ｗｅｓｔストッパーで閉じた。１つのバイアルを、分析まで５℃にて保存した。Ａｔｌａｓ Ｓｕｎｔｅｓｔ ＣＰＳキャビネット中に４つのバイアルを置いた。これらのバイアルの１つは、光を遮断するために包装されていた。キャビネットは、３００ワット−時間／ｍ_２の照射を与えるように設定された。１つのバイアルを、２時間、４時間および６時間の照射後キャビネットから取り除いた。キャビネット中の包装したバイアルを６時間後取り除いた。サンプルをＳＥＣ−ＨＰＬＣで分析した。結果は、光照射して凝集物の量のわずかな増加を示す。その増加は、光照射に比べて小さいと考えられうる。該光研究に基づくと、抗ＭＡＧ抗体は、開発研究の目的のために、光感受性とは考えられなかった。

オスモル濃度：医薬上、注射の等張化の必要性は投与経路によって制御されている。等張化は注射に対する疼痛を軽減するけれども、皮下注射のための溶液は必ずしも等張にする必要はない。静脈注射のための溶液は、一般に、等張にすべきである。低張液は、赤血球の溶血をもたらし、高張液は静脈の壁を損傷しうる。抗ＭＡＧ抗体はＩＶ注射によって得られうる。血清のオスモル濃度は３０５ｍＯｓｍである。低張液のＩＶ注射からの副作用は、わずかに低張な溶液の注射より重大だと考えられるため、抗ＭＡＧ抗体の標的オスモル濃度を、２８０ｍＯｓｍ〜３５０ｍＯｓｍの範囲で３１５ｍＯｓｍに設定した。個々の賦形剤および活性成分の溶液のオスモル濃度を測定した。次いで、処方のオスモル濃度を測定し、完全処方のオスモル濃度が３１５ｍＯｓｍになるまで該処方をＮａＣｌで調節した。ＮａＣｌを除く処方中の個々の成分からの寄与は、１８５ｍＯｓｍであると計算された。３１５ｍＯｓｍのオスモル濃度を達成するために、最初に３．９ｍｇのＮａＣｌを加えた。実験的に、該処方の得られたオスモル濃度は３０４ｍＯｓｍであったので、さらなる量のＮａＣｌを加えて、処方におけるＮａＣｌの全量を４．２ｍｇ／ｍＬにした。

プラットフォーム処方
開発研究から、表１で得られたプラットフォーム処方を提案する。

より詳細な実施態様において、本発明の抗ＣＤ２０抗体処方は、発がん性障害、例えば、Ｂ細胞リンパ腫、例えば、ＮＨＬを含むＣＤ２０を発現する腫瘍細胞の存在によって特徴づけられる障害を伴う対象を治療するために用いられうる。治療および／または予防されうる発がん性疾患の例として、前駆Ｂ細胞リンパ芽球性白血病／リンパ腫および成熟Ｂ細胞腫瘍例えば、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）／小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、Ｂ細胞プロリンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、低悪性度、中悪性度および高悪性度ＦＬを含む、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、皮膚濾胞中心リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（ＭＡＬＴ型、節性および脾性）、ヘアリー細胞白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、形質細胞腫、形質細胞性骨髄腫、移植後リンパ増殖性疾患、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、および未分化大細胞リンパ腫（ＡＬＣＬ）を含む、Ｂ細胞リンパ腫、例えば、ＮＨＬが挙げられる。

非ホジキンリンパ腫のさらなる例は、リンパ腫様肉芽腫症、 原発性滲出液リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、 縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、重鎖病(γ、μ、およびα病を含む)、免疫抑制剤での療法によって誘発されるリンパ腫、例えば、シクロスポリン誘発性リンパ腫、およびメトトレキサート誘発性リンパ腫である。

さらなる実施態様において、本発明の抗ＣＤ２０抗体処方は、ホジキンリンパ腫を治療するために用いられうる。

本発明の抗ＣＤ２０抗体処方によって治療および／または予防されうるＣＤ２０を発現する細胞が関与する免疫障害（疾患）の例として、自己免疫疾患、例えば、乾癬、乾癬性関節炎、皮膚炎、全身性強皮症および硬化症、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎、呼吸窮迫症候群、髄膜炎、脳炎、ブドウ膜炎、糸球体腎炎、湿疹、喘息、アテローム性動脈硬化、白血球接着不全症、多発性硬化症、レイノー症候群、シェーグレン症候群、若年型糖尿病、ライター病、ベーチェット病、免疫複合体性腎炎、ＩＧＡ腎症、ＩＧＭ多発ニューロパシー、免疫介在性血小板減少症、例えば、急性特発性血小板減少性紫斑病および慢性特発性血小板減少性紫斑病、溶血性貧血、重症筋無力症、ループス腎炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ（ＲＡ）、アトピー性皮膚炎、天疱瘡、グレーブス病、橋本甲状腺炎、ヴェグナー肉芽腫症、オーメン症候群、慢性腎不全、急性伝染性単核球症、ＨＩＶ、およびヘルペスウイルス関連疾患が挙げられる。さらなる例は、急性呼吸窮迫症候群および脈絡網膜炎である。さらに、他の疾患および障害には、Ｂ細胞とウイルス、例えば、エプスタイン・バー・ウイルス（ＥＢＶ）との感染によって引き起こされるかまたは媒介されるものが含まれる。

自己抗体および／または過剰なＢリンパ球活性が顕著であって、本発明の抗ＣＤ２０抗体処方によって治療および／または予防されうる炎症、免疫および／または自己免疫疾患のさらなる例として、以下：
血管炎および他の血管障害、例えば、顕微鏡的多発性血管炎、チャーグ・ストラウス症候群、および他のＡＮＣＡ関連血管炎、結節性多発動脈炎、本態性クリオグロブリン血症性血管炎（ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｃｒｙｏｇｌｏｂｕｌｉｎａｅｍｉｃ ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ）、皮膚白血球破砕性血管炎、川崎病、高安動脈炎、巨細胞動脈炎、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、原発性または単離性脳血管炎、結節性紅斑、閉塞性血栓血管炎、血栓性血小板減少性紫斑病（溶血性尿毒症症候群を含む）、および皮膚白血球破砕性血管炎を含む、続発性血管炎（例えば、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、Ｂ細胞腫瘍、関節リウマチ、シェーグレン症候群、または全身性エリテマトーデスに続発する）が挙げられる；さらなる例は、結節性紅斑、アレルギー性血管炎、脂肪織炎、ウェーバー・クリスチャン病、高グロブリン血症性紫斑病、およびバージャー病；皮膚障害、例えば、接触性皮膚炎、線状ＩｇＡ皮膚症、白斑、壊疽性膿皮症、後天性表皮水疱症、尋常性天疱瘡（瘢痕性類天疱瘡および水疱性類天疱瘡を含む）、円形脱毛症（全身性脱毛症および完全脱毛症を含む）、疱疹状皮膚炎、多形性紅斑、および慢性自己免疫性じんましん（血管神経性浮腫およびじんましん様血管炎を含む）；免疫介在性血球減少症、例えば、自己免疫性好中球減少症、および赤芽球癆；結合組織疾患、例えば、ＣＮＳループス、円板状紅斑性狼瘡、ＣＲＥＳＴ症候群、混合型結合組織疾患、多発性筋炎／皮膚筋炎、封入体筋炎、続発性アミロイドーシス、Ｉ型およびＩＩ型クリオグロブリン血症、線維筋痛、リン脂質抗体症候群、続発性血友病、再発性多発性軟骨炎、サルコイドーシス、スティフマン症候群、およびリウマチ熱である；さらなる例は、好酸球性筋膜炎；関節炎、例えば、強直性脊椎炎、若年性慢性関節炎、成人スティル病、およびＳＡＰＨＯ症候群である；さらなる例は、仙腸骨炎、反応性関節炎、スティル病、および痛風；血液疾患、例えば、無形成性貧血、原発性溶血性貧血（寒冷凝集素症候群を含む）、ＣＬＬまたは全身性エリテマトーデスに続発する溶血性貧血；ＰＯＥＭＳ症候群、悪性貧血、およびヴァルデンストレーム高グロブリン血症性紫斑病である；さらなる例は、無顆粒球症、自己免疫性好中球減少症、フランクリン病、セリグマン（Ｓｅｌｉｇｍａｎｎ）病、μ鎖病、胸腺腫およびリンパ腫に続発する腫瘍随伴症候群、およびＶＩＩＩ因子インヒビター形成；内分泌障害、例えば、多腺性内分泌障害、およびアジソン病である；さらなる例は、自己免疫性低血糖症、自己免疫性甲状腺機能低下症、自己免疫性インスリン症候群、ド・ケルヴァン甲状腺炎、およびインスリン受容体抗体介在性インスリン抵抗性；肝−消化器疾患、例えば、セリアック病、ウィップル病、原発性胆汁性肝硬変、慢性活動性肝炎、および原発性硬化性胆管炎である；さらなる例は、自己免疫性胃炎；腎症、例えば、急速進行性糸球体腎炎、連鎖球菌感染後腎炎、グッドパスチャー症候群、膜性糸球体腎炎、およびクリオグロブリン血症腎炎である；さらなる例は、微小変化型疾患；神経障害、例えば、自己免疫性腎症、多発単神経炎、ランバート・イートン（Ｌａｍｂｅｒｔ−Ｅａｔｏｎ）筋無力症候群、シデナム舞踏病、脊髄癆、およびギラン・バレー症候群である；さらなる例は、ミエロパシー／熱帯性痙性不全対麻痺、重症筋無力症、急性炎症性脱髄性多発神経障害、および慢性炎症性脱髄性多発神経障害；心疾患および肺疾患、例えば、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、線維化性肺胞炎、閉塞性細気管支炎、アレルギー性アスペルギルス症、嚢胞性線維症、レフラー症候群、心筋炎、および心膜炎である；さらなる例は、過敏性肺炎、および肺癌に続発する腫瘍随伴症候群；アレルギー疾患、例えば、気管支喘息および高ＩｇＥ症候群である；さらなる例は、一過性黒内障；眼科疾患、例えば、特発性脈絡網膜炎；感染症、例えば、パルボウイルスＢ型感染（ハンズ・アンド・ソックス（ｈａｎｄｓ−ａｎｄ−ｓｏｃｋｓ）症候群を含む）；および婦人科−産科疾患、例えば、反復流産、習慣性流産、および子宮内発育遅延である；さらなる例は、婦人科腫瘍に続発する腫瘍随伴症候群；男性生殖疾患、例えば、精巣悪性腫瘍に続発する腫瘍随伴症候群；ならびに、移植による疾患、例えば、同種移植および異種移植拒絶反応、および移植片対宿主疾患である。

１の実施態様において、ＣＤ２０を発現する細胞が関与する疾患は、潰瘍性大腸炎、クローン病、若年型糖尿病、多発性硬化症、免疫介在性血小板減少症、例えば、特発性血小板減少性紫斑病および慢性特発性血小板減少性紫斑病、溶血性貧血（自己免疫性溶血性貧血を含む）、重症筋無力症、全身性硬化症、または尋常性天疱瘡から選択される炎症性、免疫および／または自己免疫疾患である。

別の実施態様において、神経変性のプロセスは、卒中、外傷性脳損傷および脊髄損傷などの急性疾患ならびにアルツハイマー病、前頭側頭型認知症（タウオパシー）、末梢神経障害、パーキンソン病、ハンチントン病および多発性硬化症を含む慢性疾患を含む多くの神経疾患の基礎となる。したがって、抗ＭＡＧモノクローナル抗体またはＭＡＧアンタゴニストは、これらの疾患に付随する細胞死を改善することおよび機能回復を促進することの両方によって、これらの疾患の治療に有用でありうる。

別の実施態様において、本発明にしたがって治療されうる炎症性関節症には、関節リウマチ、乾癬性関節炎、若年性関節炎、炎症性骨関節炎および／または反応性関節炎が含まれる。治療されうる炎症性疾患には、特に、クローン病、潰瘍性大腸炎、胃炎、例えば、ピロリ菌感染が引き起こす胃炎、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アルツハイマー病、多発性硬化症および乾癬が含まれる。したがって、抗ＯＳＭモノクローナル抗体またはＯＳＭアンタゴニストは、例えば、これらの疾患に付随する細胞死を改善することおよび機能回復を促進することの両方によって、これらの疾患の治療に有用でありうる。

本発明は、本明細書に記載の具体的な実施態様によって範囲が限定されるものではない。実際に、本明細書に記載のものに加えて本発明の種々の修正は、当業者には外国語明細書から明らかになるであろう。かかる修正は、添付の特許請求の範囲の範囲に含まれることを意図とする。

Claims (26)

1. 治療上有効な量のタンパク質を含むタンパク質処方であって、１０〜１００ｍＭ酢酸ナトリウム、２５〜１００ｍＭ塩化ナトリウム、０．５〜５％アルギニン遊離塩基、０．０２〜０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０１〜０．２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．０〜７．０に調整したタンパク質処方。
2. タンパク質が、タンパク質断片、抗体、ＩｇＧ抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体断片、およびポリクローナル抗体断片からなる群より選択される、請求項１記載のタンパク質処方。
3. タンパク質がモノクローナル抗体である、請求項１記載のタンパク質処方。
4. 処方が、約５℃の温度にて少なくとも２年間安定である、請求項１記載のタンパク質処方。
5. 処方が、約２５℃の温度にて少なくとも３ヶ月間安定である、請求項１記載のタンパク質処方。
6. 処方が、約４０℃の温度にて少なくとも１ヶ月間安定である、請求項１記載のタンパク質処方。
7. 処方が、約５５℃の温度にて少なくとも１日間安定である、請求項１記載のタンパク質処方。
8. 処方が、振盪させながら約５〜５５℃の温度範囲にて少なくとも１日間安定である、請求項１記載のタンパク質処方。
9. 処方が約２０〜３００ｍｇ／ｍＬの量で存在する、請求項１記載のタンパク質処方。
10. 酢酸ナトリウムが約５０ｍＭの量で存在する、請求項１記載のタンパク質処方。
11. 抗ＣＤ抗体処方が約ｐＨ５．５である、請求項１記載のタンパク質処方。
12. 塩化ナトリウムが約５１ｍＭの量で存在する、請求項１記載のタンパク質処方。
13. アルギニン遊離塩基が約１％の量で存在する、請求項１記載のタンパク質処方。
14. ＥＤＴＡが約０．０５ｍＭの量で存在する、請求項１記載のタンパク質処方。
15. ポリソルベート８０が約０．０２％の量で存在する、請求項１記載のタンパク質処方。
16. ２０〜３００ｍｇ／ｍＬの濃度範囲のタンパク質を含むタンパク質処方であって、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、５１ｍＭ塩化ナトリウム、１％アルギニン遊離塩基、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．５に調整したタンパク質処方。
17. ２０〜３００ｍｇ／ｍＬの濃度範囲の抗ＯＳＭ抗体を含むタンパク質処方であって、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、５１ｍＭ塩化ナトリウム、１％アルギニン遊離塩基、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．５に調整したタンパク質処方。
18. ２０〜３００ｍｇ／ｍＬの濃度範囲の抗ＭＡＧ抗体を含むタンパク質処方であって、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、５１ｍＭ塩化ナトリウム、１％アルギニン遊離塩基、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．５に調整したタンパク質処方。
19. ２０〜３００ｍｇ／ｍＬの濃度範囲の抗ＣＤ２０抗体を含むタンパク質処方であって、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、５１ｍＭ塩化ナトリウム、１％アルギニン遊離塩基、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．５に調整したタンパク質処方。
20. 哺乳動物におけるタンパク質を発現する細胞が関与する疾患の治療方法であって、治療上有効な量の抗タンパク質抗体を含む抗タンパク質抗体処方であって、１０〜１００ｍＭ酢酸ナトリウム、２５〜１００ｍＭ塩化ナトリウム、０．５〜５％アルギニン遊離塩基、０．０２〜０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０１〜０．２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．０〜７．０に調整した抗タンパク質抗体処方を投与することを含む、方法。
21. 哺乳動物におけるＭＡＧを発現する細胞が関与する疾患の治療方法であって、治療上有効な量の抗ＭＡＧ抗体を含む抗ＭＡＧ抗体処方であって、１０〜１００ｍＭ酢酸ナトリウム、２５〜１００ｍＭ塩化ナトリウム、０．５〜５％アルギニン遊離塩基、０．０２〜０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０１〜０．２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．０〜７．０に調整した抗ＭＡＧ抗体処方を投与することを含む、方法。
22. 哺乳動物におけるＯＳＭを発現する細胞が関与する疾患の治療方法であって、治療上有効な量の抗ＯＳＭ抗体を含む抗ＯＳＭ抗体処方であって、１０〜１００ｍＭ酢酸ナトリウム、２５〜１００ｍＭ塩化ナトリウム、０．５〜５％アルギニン遊離塩基、０．０２〜０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０１〜０．２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．０〜７．０に調整した抗ＯＳＭ抗体処方を投与することを含む、方法。
23. 哺乳動物におけるタンパク質を発現する細胞が関与する疾患の治療方法であって、２０〜３００ｍｇ／ｍＬの濃度範囲の抗タンパク質抗体を含む抗タンパク質抗体処方であって、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、５１ｍＭ塩化ナトリウム、１％アルギニン遊離塩基、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．５に調整した抗タンパク質抗体処方を投与することを含む、方法。
24. 哺乳動物におけるＯＳＭを発現する細胞が関与する疾患の治療方法であって、２０〜３００ｍｇ／ｍＬの濃度範囲の抗ＯＳＭ抗体を含む抗ＯＳＭ抗体処方であって、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、５１ｍＭ塩化ナトリウム、１％アルギニン遊離塩基、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．５に調整した抗ＯＳＭ抗体処方を投与することを含む、方法。
25. 哺乳動物におけるＭＡＧを発現する細胞が関与する疾患の治療方法であって、２０〜３００ｍｇ／ｍＬの濃度範囲の抗ＭＡＧ抗体を含む抗ＭＡＧ抗体処方であって、５０ｍＭ酢酸ナトリウム、５１ｍＭ塩化ナトリウム、１％アルギニン遊離塩基、０．０５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０２％ポリソルベート８０をさらに含み、ｐＨ５．５に調整した抗ＭＡＧ抗体処方を投与することを含む、方法。
26. 処方が静脈または皮下経路によって哺乳動物に投与される、請求項２０、２１、２２、２３、２４または２５記載の方法。

Images