JP2010529415A5 - - Google Patents
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Description
発明の最初の側面によれば、遊離イオン存在を特徴付ける光信号を生成可能な複合体を含む医薬組成物が得られる。
発明の第２の側面によれば、遊離イオン存在を特徴付ける光信号を生成可能な複合体を含む、活発な虫歯および／または酸蝕症による活発な歯の脱灰を見つけるために使用される組成物が得られる。
その組成物は、医薬的に許容される剤形を成しており、その組成物は、できれば液体、粉末、またはゲルであることが好ましい。その組成物は、約１ｎｇ／ｍｌ乃至約１０ｍｇ／ｍｌの複合体、または、十分に高いＳＮ比を与える濃縮物を含んでもよい。
その組成物は、タンパク質またはタンパク質複合体を含んでもよい。そのような複合体は、生成される光信号に結びつく遊離イオンを結合したとき構造変化を受けてもよい。
その組成物は、タンパク質またはタンパク質複合体を含んでもよい。そのような複合体は、生成される光信号に結びつく遊離イオンを結合したとき構造変化を受けてもよい。
そのタンパク質またはタンパク質複合体は、エクオリン、オベリン、クリチン、ミトロコミン、ハリスタウリン、ピアリディン、ムネミオプシン、シンプレクチン、ジーアール−ボリノプシン、カゼイン、カルゼクエストリン、カレックスサイチン、カルシウム結合のシステインプロテアーゼ、カルモデュリンおよび他のＥＦハンドタンパク質ベロビンを含んでいることが好ましい。その分野での熟練者は、機能的に同様で、過度の努力なしで選ばれうる他のタンパク質またはタンパク質複合体に気づくであろう。
そのタンパク質またはタンパク質複合体は、蛍光性のタンパク質、ならびに、カルモデュリン、カルモデュリン結合ペプチド（Ｍ１３）、および増大した緑または黄色を放出する蛍光性のタンパク質のようなイオン結合タンパク質を縦に連結した融合体を含むことが好ましい。
これらは、信号を強めるため、信号の継続時間を延長するため、またはその放射スペクトルを変更するために、例えば、遺伝子のＤＮＡ配列を変更することにより、または、アセチル化、エトキシカルボニル化、フルオレスカミン修飾もしくはフルオレセイン標識により、または、ＧＦＰエクオリン（US2003175807）のようなキメラタンパク質の創作により、修飾されてもよい。光信号をもたらすイオンを結合するときに構造変化を受けるような、同様な機能を持つタンパク質またはタンパク質複合体もまた、使用されてもよい。
その方法は、その組成物に触れさせる前に、歯を感光性の溶液に触れさせる工程をさらに含んでもよい。感光性の溶液は、酸性または(プラークが存在する所の)糖を含有する溶液であってもよい。これは、酸蝕症に対する歯の感受性が決定されることを可能にするであろう。これは、歯の酸蝕症に対する個人の感受性を評価するために使用されうる。この方法は、食べ物や飲み物の製品の歯の侵食特性を評価するためにも使用されうる。
その方法は、感光性の溶液の適用と検出組成物の適用との間に、所定の時間が経過するのを許す工程をさらに含んでもよい。これは、口の中のだ液が増えるのを可能にすることであり、使用者が、だ液の防護効果を評価するのを可能にする。この期間は、例えば、１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７，１８，１９，２０，２１，２２，２３，２４，２５，２６，２７，２８，２９または３０秒であってもよいが、口の中のだ液がその通常の量や組成に戻るのを可能にするために必要と考えられる他の時間であってもよい。例えば、１分、２分、または最高５分は必要とされるかもしれない。必要とされる時間の長さは、個々の患者のだ液の容量と流れに依存するだろうし、その分野での熟練者によって容易に決定され得る。
発明の第７の具体化によると、イオン感受性の複合体を含有する組成物、その組成物を適用する手段、および検出装置を含む、脱灰を検出するのに使用されるキットが得られる。そのキットは、酸性の、または糖を含有する感光性の溶液を含んでもよい。そのキットは、歯または歯の模型の関心のある領域に印を付けるための格子のような目印をさらに含んでもよい。そのキットは、多くの理由のために購入可能である。歯科医は、酸蝕症に対する患者の感受性を評価するのに使用するために、市販されている便利な試用キットを持ちたいかもしれない。酸蝕症感受性の家庭用の試用キットは、その時どんな予防対策を採るかを決める消費者によって使用されうる。食べ物または飲み物の製品の製造業者は、彼らの製品の歯の侵食特性に興味があるならば、その試用キットを購入することができる。
本発明の文脈中で、「イオン感応性の複合体」は、脱灰の結果として放出される遊離イオンの存在による光信号特性を作り出すことができる複合体を意味している。その複合体は、色素、ＥＤＴＡレポーター複合体のような合成イオンキレート剤、または、クラウンエーテルレポーター複合体、タンパク質もしくはタンパク質レポーターの複合体、分子認識ポリマーレポーター複合体、もしくはホリディ接合のようなマクロサイクルであってもよい。それらは、イオンへの感受性を増大させるため、信号強度を改善するため、信号を伸ばすため、ＳＮ比を改善するため、スペクトル応答を改善するために修飾されていてもよい。組換え体または修飾されたタンパク質が使用されてもよい。
その組成物がタンパク質またはタンパク質複合体を含む場所では、それは遊離イオンと結合するときに、光信号を生成するだろう。そのようなタンパク質またはタンパク質複合体は、例えば、遺伝子のＤＮＡ配列を変更することによって、アセチル化、エトキシルカーボン化、フルオレスカミン修飾もしくはフルオレセインラベリングによって、または、信号を高める、信号の継続期間を延長する、もしくはその放射スペクトルを変更するためのＧＦＰエクオリン(US2003175807)のようなキメラタンパク質の生成によって修飾されてもよい。光信号をもたらすイオンまたは有機物との結合時に構造変化を受けるというような、似た機能を有するタンパク質およびタンパク質複合体が使用されてもよい。
蛍光タンパク質のさらなる例は、GFPの修飾された形であるペリカムである。Nagai et al, PNAS 98 (6): 3197 (2001)で述べられているように、CaMと、ペリカムの結合ペプチドMl3との間のCa2+を誘発する相互作用は、円形に変換された(cp)YFPの蛍光特性に変化を引き起こす。
これらの例は、イオン検出においてタンパク質レポーター複合体の使用方法を説明するのに役立つ。関連するタンパク質は、結合するか、特定のイオンを結合するときに構造を変化する、いかなる種類のものであってもよい。カルシウムでは、それらは、カゼイン、カルゼクエストリン、カレックスサイチン、カルシウム結合のシステインプロテアーゼ、カルモジュリンおよび他のＥＦハンドタンパク質である。レポーターは、色素または、蛍光もしくは発光タンパク質であってもよい。
その方法は、タンパク質組成物で曝される前に、糖類または酸性の溶液のような感光性の溶液に歯をさらすステップをさらに含んでもよい。感光性の溶液は、神経過敏および酸蝕症を検出するための脱灰の作用によく似ており、特殊な問題の範囲を評価するために使用されてもよい。例えば、酸溶液は、(例えば、歯の酸蝕症からの)象牙質または(例えば、歯茎の低下からの)歯根の露出の領域を識別するために使用されてもよい。これは、歯の特定の部分が他の部分より強く酸溶液に反応するだろうし、それゆえ識別されることができるためである。例えば、エナメル質に比べて、象牙質およびセメント質中のより低度の鉱物化により、感光性の溶液の付加は、より多くの象牙質およびセメント質からのカルシウムの放出を引き起こすであろう。イオン感応性レポーターの適用上、(象牙質の酸蝕症または神経過敏の領域に対応する)象牙質の領域は、エナメル質の領域よりも明るい、すなわちより強い光信号を伴い、その結果、問題の範囲を示すであろう。これは、結果の正確さを高めるであろう。
感光性の溶液は、特定の状態にある個人の感受性を評価するのにも使用されてもよい。歯の酸蝕症により影響され易いそれらの個人は、より多くの脱灰および、それによるより大きな応答を示すであろう。エナメル質の構造および組織は、歯の酸蝕症への感受性を評価することにおいて、だ液ほど重要ではない。だ液の組成、体積、組成物および流れは、個人の酸蝕症感受性を決定するのに重要な役割を果たす。本発明の科学技術は、個人のだ液(特にだ液の薄膜)によって与えられた保護を含む、酸の挑戦に対する歯のエナメル質の抵抗を決定することができるだろう。このような量的なテストは、患者の感受性を決定し、治療を監視する歯科医および歯科衛生士、ならびに、何の作用が脱灰のレベルの明確な説明を変えるのかを理解したい、ねり歯みがきの開発者および食物科学者に有益であるだろう。さらに、このテストは、新しい酸蝕症防止コーティングの推進において有益であるだろう。それゆえ、酸蝕症による脱灰のためのテストの代替バージョンは、だ液が口の中で徐々に作られるよう、侵食溶液にさらした後、例えば、1秒以下、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、または30秒の所定の時間待つこと、および、その後検出組成物で脱灰の範囲を調べることを伴うであろう。その所定の時間は、再びだ液が徐々に作られるよう、必要であれば最高1、2、または5分まで伸ばされうる。
Claims (12)
- 遊離イオン存在を特徴付ける光信号を生成可能な複合体を含む医薬組成物。
- 遊離イオン存在を特徴付ける光信号を生成可能な複合体を含む、活発な虫歯および／または酸蝕症による活発な歯の脱灰を見つけるために使用される組成物。
- 医薬的に許容される剤形を成している、請求項１乃至９のいずれか１項に記載の組成物。
- 前記タンパク質またはタンパク質複合体は、エクオリン、オベリン、クリチン、ミトロコミン、ハリスタウリン、ピアリディン、ムネミオプシン、シンプレクチン、ジーアール−ボリノプシン、カゼイン、カルゼクエストリン、カレックスサイチン、カルシウム結合のシステインプロテアーゼ、カルモデュリンおよび他のＥＦハンドタンパク質ベロビン、またはそれらの混合物を含む、請求項１３記載の組成物。
- 前記タンパク質またはタンパク質複合体は、蛍光性のタンパク質、カルモデュリンおよびカルモデュリン結合ペプチド（Ｍ１３）が縦に連結した融合体を含む、請求項１３記載の組成物。
- 前記タンパク質またはタンパク質複合体は、前記信号を強めるために、またはその放射スペクトルを変更するために修飾されている、請求項１３記載の組成物。
- 前記タンパク質またはタンパク質複合体の前記修飾は、遺伝子のＤＮＡ配列の変更を通じて、または、アセチル化、エトキシカルボニル化、フルオレスカミン修飾もしくはフルオレセイン標識により、または、キメラタンパク質の創作により成される、請求項１９記載の組成物。
- 前記組成物に触れさせる前に、前記歯を感光性の溶液に触れさせる工程をさらに含む、請求項２７記載の方法。
- 前記感光性の溶液は酸性の溶液を含む、請求項２９記載の方法。
- 前記感光性の溶液は糖を含有する溶液を含む、請求項２９記載の方法。
- 前記感光性の溶液の適用と請求項１乃至２３のいずれか１項に記載の前記検出組成物の適用との間に、所定の時間が経過するのを許す、請求項２９記載の方法。
- 酸性の、または糖を含有する感光性の溶液をさらに含む、請求項３５記載のキット。
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