JP2010266709A - レーザ走査顕微鏡及びその制御方法、並びにプログラム - Google Patents
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Abstract
【解決手段】まず、設定されたXYZ走査領域AXYZをプレビュー走査して(S12)、プレビュー画像IP1ないしIPnを取得し(S13)、クロップ領域AC1ないしACnを設定する(S15ないしS18)。次に、設定されたクロップ領域AC1ないしACnに基づいて算出した本走査を行う際の各Zステップにおけるクロップ領域AC1ないしACmを本走査して(S19,S20)、クロップ画像IC1ないしICmを取得する。そして、取得したクロップ画像IC1ないしICmから3次元画像を生成することで、少ないリソースで有効な解析を行うことができる。本発明は、例えば、試料Sの3次元データを取得するコンフォーカル顕微鏡に適用できる。
【選択図】図3
Description
Claims (9)
- 光源と、前記光源からの光を試料上で2次元走査する走査手段と、前記走査手段と前記試料との間に配置された対物レンズと、前記対物レンズと前記試料とを前記対物レンズの光軸方向に相対移動させる駆動手段とを備えるレーザ走査顕微鏡において、
前記駆動手段によって第1の移動量ごとに移動させながら、前記走査手段によって前記試料の概略の形状を得るための領域であるプレビュー領域内を走査することで得られるプレビュー画像を取得するプレビュー画像取得手段と、
取得された前記プレビュー画像に基づいて、前記駆動手段によって前記第1の移動量よりも細かい第2の移動量ごとに移動させながら前記試料の詳細な形状を得るために前記走査手段により走査すべき領域であるクロップ領域を設定するクロップ領域設定手段と、
前記駆動手段によって前記第2の移動量ごとに移動させながら、前記走査手段によって前記クロップ領域内を走査することで得られるクロップ画像を取得するクロップ画像取得手段と、
取得された前記クロップ画像に基づいて、前記試料の3次元画像を生成する3次元画像生成手段と
を備えることを特徴とするレーザ走査顕微鏡。 - 前記試料には、フォトコンバージョンタイプの蛍光蛋白質が予め発現されており、
前記蛍光蛋白質が発現された前記試料に対して、所定の波長のUVレーザ光を照射するレーザ照射手段をさらに備え、
前記クロップ領域設定手段は、前記UVレーザ光による光刺激によって励起特性が変化した前記試料の前記プレビュー画像に基づいて、前記クロップ領域を設定する
ことを特徴とする請求項1に記載のレーザ走査顕微鏡。 - 前記クロップ領域は、前記プレビュー画像の所定の閾値以上の輝度値を有する領域の重心を中心として決定する
ことを特徴とする請求項2に記載のレーザ走査顕微鏡。 - 前記蛍光蛋白質は、フォトコンバージョンタイプの蛍光蛋白質ある
ことを特徴とする請求項2に記載のレーザ走査顕微鏡。 - 取得された前記プレビュー画像に基づいて、前記試料の走査方向の各断面の像を表示する表示手段をさらに備え、
前記クロップ領域設定手段は、ユーザの操作に応じて、前記クロップ領域を設定する
ことを特徴とする請求項1に記載のレーザ走査顕微鏡。 - 前記クロップ領域設定手段は、前記第2の移動量ごとに走査される前記クロップ領域の大きさが全て同じになるように、前記クロップ領域を設定する
ことを特徴とする請求項1に記載のレーザ走査顕微鏡。 - 前記クロップ領域設定手段は、前記第2の移動量ごとに走査される前記クロップ領域が必要最小限の大きさであって、個別の大きさとなるように、前記クロップ領域を設定する
ことを特徴とする請求項1に記載のレーザ走査顕微鏡。 - 光源と、前記光源からの光を試料上で2次元走査する走査手段と、前記走査手段と前記試料との間に配置された対物レンズと、前記対物レンズと前記試料とを前記対物レンズの光軸方向に相対移動させる駆動手段とを備えるレーザ走査顕微鏡の制御方法において、
前記駆動手段によって第1の移動量ごとに移動させながら、前記走査手段によって前記試料の概略の形状を得るための領域であるプレビュー領域内を走査することで得られるプレビュー画像を取得し、
取得された前記プレビュー画像に基づいて、前記駆動手段によって前記第1の移動量よりも細かい第2の移動量ごとに移動させながら前記試料の詳細な形状を得るために前記走査手段により走査すべき領域であるクロップ領域を設定し、
前記駆動手段によって前記第2の移動量ごとに移動させながら、前記走査手段によって前記クロップ領域内を走査することで得られるクロップ画像を取得し、
取得された前記クロップ画像に基づいて、前記試料の3次元画像を生成する
ステップを含むことを特徴とする制御方法。 - 光源と、前記光源からの光を試料上で2次元走査する走査手段と、前記走査手段と前記試料との間に配置された対物レンズと、前記対物レンズと前記試料とを前記対物レンズの光軸方向に相対移動させる駆動手段とを備えるレーザ走査顕微鏡の画像処理をコンピュータに実行させるプログラムであって、
前記駆動手段によって第1の移動量ごとに移動させながら、前記走査手段によって前記試料の概略の形状を得るための領域であるプレビュー領域内を走査することで得られるプレビュー画像を取得し、
取得された前記プレビュー画像に基づいて、前記駆動手段によって前記第1の移動量よりも細かい第2の移動量ごとに移動させながら前記試料の詳細な形状を得るために前記走査手段により走査すべき領域であるクロップ領域を設定し、
前記駆動手段によって前記第2の移動量ごとに移動させながら、前記走査手段によって前記クロップ領域内を走査することで得られるクロップ画像を取得し、
取得された前記クロップ画像に基づいて、前記試料の3次元画像を生成する
ステップを含むことを特徴とするプログラム。
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