JP2010195812A - コラゲナーゼ阻害作用を有する創傷改善剤および潰瘍形成改善剤 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】ホップ(Humulus Lupulus L.)の抽出物を有効成分として含有してなる、コラゲナーゼ阻害剤(特にコラゲナーゼ阻害作用を有する創傷改善剤および潰瘍形成改善剤)、コラゲナーゼ阻害剤を含有することを特徴とする食品もしくは食品素材、並びにビールまたは発泡酒を製造するにあたり、ホップ使用量の50〜90%を麦汁に添加して煮沸して得た高温の該麦汁に残りのホップを加えて静置し、濾過した後、発酵、熟成することを特徴とする、コラゲナーゼ阻害活性を有するビールまたは発泡酒の製造法。
【選択図】なし
Description
請求項2に記載の本発明は、前記エタノール可溶画分が80%エタノール可溶画分である、請求項1に記載の創傷改善剤である。
請求項3に記載の本発明は、ホップ(Humulus Lupulus L.)を80〜100℃で熱水抽出し、陽イオン交換樹脂に吸着させて水洗浄し、得られたエタノール可溶画分を有効成分として含有してなる、コラゲナーゼ阻害作用を有する潰瘍形成改善剤。
請求項4に記載の本発明は、前記エタノール可溶画分が80%エタノール可溶画分である、請求項3に記載の潰瘍形成改善剤である。
さらに、ホップを原料として用いたビール等のアルコール飲料であって、高いコラゲナーゼ阻害活性を有するアルコール飲料の製造方法が提供される。
上記文献の記載によれば、上記したホップの薬効作用は、ホップに含まれているポリフェノールによるものである。しかしながら、ホップ由来のポリフェノールによるマトリックスメタロプロテアーゼの阻害作用については、これまでに報告がない。
次に、ホップを含んだ溶液を1〜30分間、好ましくは1〜5分間加熱(80〜100℃)を行って、目的とする成分を抽出する。その後、抽出液を栓付遠心管に入れ1000〜3000rpm、好ましくは2000rpmで5〜30分間、好ましくは10分間の遠心分離を行って沈殿物を除き、清澄なホップ抽出液を得る。
抽出液は、そのままでコラゲナーゼ阻害剤として用いられるが、所望により、該抽出液をエバポレーターを用いて減圧下で濃縮乾固して得られたものを阻害作用剤として用いることができる。
振盪は、適当な振盪機を用いて150〜600rpm、好ましくは200〜400rpmにて20〜25℃(または室温)で10分間〜2時間、好ましくは20分間〜1時間ほど行って、目的とする成分を抽出する。得られた抽出液を栓付遠心管に入れ1000〜3000rpm、好ましくは2000rpmで5〜30分間、好ましくは10分間の遠心分離を行い、沈殿物を除いて清澄なホップ抽出液を得る。
この抽出液をコラゲナーゼ阻害剤として用いてもよいが、好ましくは、前述の如く、濃縮、乾固したものを用いる。
ポリフェノールを選択的に抽出する場合には、乾燥ホップ、好ましくは粉砕物に、ホップ重量に対して5〜100倍量、好ましくは30〜70倍量の水を加え、1〜30分間、好ましくは1〜5分間加熱(80〜100℃)を行う。
得られた煮沸液を栓付遠心管に入れ1000〜3000rpm、好ましくは2000rpmで5〜30分間、好ましくは10分間の遠心分離を行い、沈殿物を除き、清澄なホップ抽出液を得る。
次いで、エバポレーターを用いて減圧下で1〜20mL、好ましくは10mLまで濃縮する。濃縮液に0.2〜1mL、好ましくは0.5mLの6N塩酸と水酸化カルシウム1〜5g、好ましくは3gを加える。次に、適当な振盪機を用いて150〜600rpm、好ましくは200〜400rpmで1〜15分間、好ましくは10分間振盪する。混合液を栓付遠心管に入れて1000〜3000rpm、好ましくは2000rpmで5〜30分間、好ましくは10分間の遠心分離を行い、得られた沈殿物を10%酢酸溶液5〜20mL、好ましくは10mLを添加して沈殿物を溶解させる。
得られたエタノール可溶画分を、エバポレーターを用いて減圧下で濃縮乾固した後、得られた乾固物をポリフェノールを有効成分として含むコラゲナーゼ阻害剤として好適に用いることができる。
また、医薬品として用いる場合には、散剤、顆粒、錠剤、トローチ剤、カプセル剤、液剤、シロップ剤などの任意の剤形を採用することができる。製剤化にあたっては、賦形剤、結合剤などの常用の成分を必要に応じて適宜配合することができる。なお、有効成分の使用量については、用途などを考慮して適宜決定すればよい。
すなわち、仕込み工程において、麦汁を作る際にホップ使用量の50〜90%を麦汁に添加して常法により煮沸し、得られた高温の該麦汁に残りのホップを加えて静置する。静置時間は、10〜30分間が適当であり、好ましくは15〜25分間である。次いで、該麦汁を濾過した後、通常の発酵工程、熟成工程などを経て製品のビール、発泡酒を得る。
実施例1
ホップペレット3gを100mLの蒸留水に加え、3分間煮沸した。冷却後、3000rpmで10分間の遠心分離を行い、得られた上清を脱イオン水で10倍希釈した溶液80μLをサンプルとした(試験区1)。ホップの代わりに緑茶を用いて同様に処理を行って得た溶液80μLと、ザクロを使用して得た溶液80μLを、それぞれ試験区2、試験区3とした。
反応終了後に,エタノール溶液200μLを添加して反応を停止させ、2000×gで15分間遠心分離して得た上澄液を励起光495nm、蛍光520nmで強度を測定した。なお、対照として、試料の代わりに水を用いた場合についても、同様の測定を行った。
反応活性阻害率は下記の(1)式により算出した。式中、B1は反応液中の試料として水を用いたときの蛍光強度を、B2はB1の反応液のコラゲナーゼをトリス緩衝液にしたときの蛍光強度を、S1は試料添加時の蛍光強度を、S2はS1の反応液中のコラゲナーゼをトリス緩衝液にしたときの蛍光強度を、それぞれ示す。
反応終了後に、エタノール溶液300μLを添加して反応を停止させ、2000×gで15分間遠心分離して得た上澄液を励起光495nm、蛍光520nmで強度を測定した。なお、対照として、試料の代わりに水を用いた場合についても、同様の測定を行った。反応活性阻害率は上記(1)式により算出した。式中のB1、B2、S1およびS2は、それぞれ前記した蛍光強度を示す。
I型コラゲナーゼの活性測定結果を表1に、IV型コラゲナーゼの活性測定結果を表2に示す。これらの表から明らかなように、ホップ抽出成分は、緑茶やザクロの抽出成分と同等のコラゲナーゼ阻害活性を示した。
乾燥ホップ3gを100mLの蒸留水で3分間煮沸した。得られた煮沸液を遠心分離(3000rpm、10分間)し、清澄な液を得た。次に、エバポレーターを用いて減圧下で10mLまで濃縮した。濃縮液に0.5mLの6N塩酸と水酸化カルシウム3gを加えた後、振盪機を使って強く振盪した(300rpm、5分間)。
混合液を遠心分離(3000rpm、10分間)して得た沈殿物に10%酢酸溶液10mLを添加して沈殿物を溶解させた。次いで、水酸化ナトリウム溶液でpHを6.5に調整後、陽イオン交換樹脂(ワットマンン SE52)5gを添加してポリフェノールを吸着後、遠心分離(3000rpm、10分間)を行って樹脂を回収した。この樹脂を蒸留水で洗浄後、80%エタノールで洗浄してポリフェノールを回収した。
エタノール可溶画分をエバポレーターを用いて減圧下で濃縮乾固し、得られた乾固物を脱イオン水5mLで溶解した。ホップから抽出されたポリフェノールを含む成分について、実施例1と同様にしてコラゲナーゼ阻害活性を測定したところ、強い阻害活性が認められた。なお、ポリフェノールを除いた画分には阻害活性が見られなかった。
市販ビール、ホップを含まない麦汁、ホップを入れて90分間煮沸した麦汁のそれぞれから遠心分離して得た上清について、実施例1と同様にしてコラゲナーゼ阻害活性を測定した。結果を表3および表4に示した。これらの結果から明らかなように、市販ビール、ホップを含まない麦汁およびホップを添加し90分間煮沸した麦汁のいずれも阻害活性は低い値を示した。
ホップを含まない麦汁1Lにホップ2gを添加し、90分間煮沸した麦汁(試料a)、ホップを含まない麦汁1Lに1.4gのホップを添加し,90分間煮沸した後、加熱を止めた高温麦汁に0.6gのホップを添加し、20分間静置させて得た麦汁(試料b)のそれぞれの上清について、実施例1と同様にしてコラゲナーゼ阻害活性を測定した。結果を表5および表6に示した。これらの表から明らかなように、一部のホップを添加後、煮沸せずに20分間放置して作成した麦汁、すなわち試料bのコラゲナーゼ阻害活性は高い値を示した。
また、試料aおよび試料bのそれぞれの麦汁を発酵させて常法により製造したビールについて、同様にしてコラゲナーゼ阻害活性を測定した。その結果を表7に示した。表7より、試料b、すなわちホップ添加後高温で20分静置して作成した麦汁を発酵させて得たビールのコラゲナーゼ阻害活性が高いことが分かる。
Claims (4)
- ホップ(Humulus Lupulus L.)を80〜100℃で熱水抽出し、陽イオン交換樹脂に吸着させて水洗浄し、得られたエタノール可溶画分を有効成分として含有してなる、コラゲナーゼ阻害作用を有する創傷改善剤。
- 前記エタノール可溶画分が80%エタノール可溶画分である、請求項1に記載の創傷改善剤。
- ホップ(Humulus Lupulus L.)を80〜100℃で熱水抽出し、陽イオン交換樹脂に吸着させて水洗浄し、得られたエタノール可溶画分を有効成分として含有してなる、コラゲナーゼ阻害作用を有する潰瘍形成改善剤。
- 前記エタノール可溶画分が80%エタノール可溶画分である、請求項3に記載の潰瘍形成改善剤。
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