JP2010185019A - キチン−ポリアミノ酸複合組成物、その製造方法、および、キチン−ポリアミノ酸複合材料 - Google Patents

Abstract

【課題】免疫活性が低く、各種形態への加工が容易でコストを低減できるキチン−ポリアミノ酸複合組成物を提供する。
【解決手段】キトサンと、ポリアミノ酸であるポリ−γ−グルタミン酸塩とのイオンコンプレックスを形成する。イオンコンプレックスに無水酢酸を添加してイオンコンプレックスのキトサン成分をＮ−アセチル化する。Ｎ−アセチル化されたイオンコンプレックスの脱アセチル化度は、用いたキトサンの脱アセチル化度を１とした場合に０．０５〜０．８０に調整し、キチン−ポリアミノ酸複合組成物であるＮ−アセチル化キトサン（キチン）／γ−ＰＧＡ複合組成物を生成する。
【選択図】なし

Description

本発明は、キチンとポリアミノ酸との複合体であるキチン−ポリアミノ酸複合組成物、その製造方法、および、キチン−ポリアミノ酸複合組成物から生成されるキチン−ポリアミノ酸複合材料に関する。

キチンは、蟹やイカ等の甲殻類から得られる天然多糖類であり、免疫活性が極めて低く生体吸収性や創傷治癒効果に優れる材料として知られている。しかしながら、キチンは結晶性高分子であり、水や一般的な溶媒には膨潤または溶解しないことから加工性に乏しく、有用な材料であるにもかかわらず余り有効活用されていない。
一方、キチンを脱アセチル化して得られるカチオン性アミノ多糖であるキトサンは、キチン由来の生体親和性はもとより免疫活性や抗菌性を有し、希薄な酸溶液に溶解することから加工性に優れ、医療素材分野をはじめとする様々な分野で有効活用されている（例えば、特許文献１または特許文献２参照）。

特許文献１に記載のものは、ポリ−γ−グルタミン酸塩とキトサンとからなる医療素材である。すなわち、アニオン成分であるポリ−γ−グルタミン酸塩と、カチオン成分であるキトサンとを混合してイオンコンプレックスを生成するものである。
キトサンの重合度が低いものほど溶解性は良好であるが複合膜の強度は低下する。また、脱アセチル化度が低いものほど反応性が乏しく、溶解性が劣る。これらの性質から、キトサンの重合度およびアセチル化度は適宜選別される。この範囲を外れる場合、イオン対のバランスの点から複合体作製が困難となる。
すなわち、ポリ−γ−グルタミン酸塩に対するキトサンの割合は、３質量％以上９７質量％以下の範囲で、医療用途により使い分けられる。
また、各医療素材に応じ、紡糸繊維、フィルム、シート、粉末、含水ゲル状で使用され、このゲルを高強度化するために、架橋試薬や放射線照射により架橋しても良い構成が採られている。

特許文献２に記載のものは、カルボキシメチル化キチン塩とポリ−Ｌ−グルタミン酸塩などとのポリイオンコンプレックス形成したものである。
キチンは、化学的、生体的に安定かつ安全であり、キチン質を主体としたポリイオンコンプレックスが画期的なものになる。しかしながら、キチンは極めて高結晶性でかつそのアミノアセチル基の結合が強固であるため、良好に溶解、分散、あるいは膨潤させる好適な溶剤が見付かっていない。キチンの溶剤としては、ジクロル酢酸、硫酸、蟻酸などがあるが、これらは分子量低下や分解を伴う溶剤である。
そして、特許文献２に記載のものでは、キチン誘導体の中で、カルボキシメチルキチンまたはその塩の脱アセチル化物が酸あるいはアルカリ水溶液、高濃度の中性塩にも可溶であることが見出されている。
Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン１構造単位当り０．１〜１．０（好ましくは０．３〜１．０）のカルボキシメチル化度を有するカルボキシメチル化キチンもしくはその塩のＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミン１構造単位当り０．１〜１．０（好ましくは０．３〜１．０）の脱アセチル化度を有するポリイオンコンプレックスの構成が採られている。

特開平１１−２７６５７２号公報 特開昭５５−１６１８０５号公報

しかしながら、特殊で有害な有機溶媒にしか溶解しないキチンの加工性を改善する目的で、特許文献２に記載のようなキチン誘導体を利用する構成では、キチン誘導体は有害な溶媒を用いた溶液中での反応になり、その精製も困難なことから非常に高価である。また、特許文献２に記載のようなＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミン１構造単位当り０．１〜１．０（好ましくは０．３〜１．０）の脱アセチル化度を有するポリイオンコンプレックスを利用する構成では、特許文献１に記載のように、脱アセチル化度が低いものほど反応性が乏しいため、特許文献２に記載の脱アセチル化度が０．３未満の場合には、反応収率が低いため生産効率も低くなる。
また、マクロファージによる免疫活性の検討から、キチンは免疫活性を示さないが、７０％脱アセチル化キチン（キトサン）＞３０％脱アセチル化キチン（キトサン）≧カルボキシメチル化キチン＞キチンで免疫活性を示すことが確認（「キチン、キトサンの応用−キチン、キトサン研究会編」ｐ．１９６）されている。これは、脱アセチル化度が高いキトサンになる程、より強い抗菌性や抗カビ性を示すことと同じ傾向である。この様に、特許文献１に記載のような脱アセチル化度が０．３以上で特許文献２に記載のようなキトサンを構成成分とする医療素材は免疫反応による様々な副作用を引き起こす原因ともなるおそれがある。
このように、免疫活性のない、よりキチンに近い成分で構成された材料の開発が望まれている。

本発明は、上述した点に鑑みて、免疫活性が低く、各種形態への加工が容易で製造コストを低減できるキチン−ポリアミノ酸複合組成物、その製造方法、および、キチン−ポリアミノ酸複合材料を提供することを目的とする。

本発明に記載のキチン−ポリアミノ酸複合組成物は、キトサンと、ポリアミノ酸とのイオンコンプレックスのＮ−アセチル化により得られたことを特徴とする。

そして、本発明では、前記Ｎ−アセチル化されたイオンコンプレックスは、前記キトサンの脱アセチル化度を１とした場合に０．０５以上０．８０以下、好ましくは０．１以上０．４以下である構成とすることが好ましい。

また、本発明では、前記ポリアミノ酸は、ポリ−γ−グルタミン酸とその塩とのうちの少なくともいずれか一方である構成とすることが好ましい。

さらに、本発明では、前記Ｎ−アセチル化したイオンコンプレックスは、複合比（ポリアミノ酸／キチン）が０．１以上である構成とすることが好ましい。

本発明に記載のキチン−ポリアミノ酸複合材料は、本発明に記載のキチン−ポリアミノ酸複合組成物を原料として生成されたことを特徴とする。

本発明に記載のキチン−ポリアミノ酸複合組成物の製造方法は、キトサンと、ポリアミノ酸とのイオンコンプレックスを形成し、この得られたイオンコンプレックスの前記キトサン成分をＮ−アセチル化してキチン化することを特徴とする。

そして、本発明では、前記キトサン成分のＮ−アセチル化は、無水酢酸の添加によることを構成とすることが好ましい。

さらに、本発明では、前記無水酢酸の添加は、少量を複数回に分けて実施する構成とすることが好ましい。

また、本発明では、前記キトサン成分のキチン化は、副反応として生成したＯ−アセチル基をアルカリ溶液中で処理することにより脱Ｏ−アセチル化することを含む構成とすることが好ましい。

さらに、本発明では、前記キトサン成分のキチン化後に酸性溶液を添加する構成とすることが好ましい。

本発明によれば、キトサンとポリアミノ酸とのイオンコンプレックスをＮ−アセチル化することで、キトサンの脱アセチル化度が高くなることによる免疫活性が増大する不都合を防止できる。さらには、有機溶媒を用いることなく水による膨潤や酸に溶解でき、スポンジ状やフィルム状などの各種形態に加工することができ、例えば免疫活性が低い医療素材や化粧品材料などとして製造することが容易で製造コストを低減できる。

以下、本発明に係るキチン−ポリアミノ酸複合材料について説明する。
［キチン−ポリアミノ酸複合材料の構成］
本発明のキチン−ポリアミノ酸複合材料は、例えば医療素材や化粧品材料などに利用されるもので、キチン−ポリアミノ酸複合組成物を原料として生成したものである。
このキチン−ポリアミノ酸複合材料は、例えばパウダー、フィルム、シート、ファイバー、スポンジ、ジェル素材や注射液などの液状など、各種形態に生成され、表面処理剤、医療用素材、化粧品、繊維製品などとして利用される。

（キチン−ポリアミノ酸複合組成物）
そして、原料のキチン−ポリアミノ酸複合組成物は、キトサンと、ポリアミノ酸とのイオンコンプレックスのＮ−アセチル化により得られる。
キチン、キトサンは化１に示すように、ｍ：グルコサミン（キトサン）とｎ：Ｎ−アセチルグルコサミン（キチン）とが不規則に混在した状態のものであり、ｍとｎの割合は脱アセチル度（ＤＤＡ）あるいはＮ−アセチル化度で表される。ｍの割合が多くなるとキトサンの性質が強くなり、ｎの割合が多くなるとキチンの性質が強くなる。
すなわち、以下の化１において、ｍ≧ｎで入手が容易で比較的に安価なキトサンと、ポリアミノ酸とのイオンコンプレックスを形成する。
このキトサンに酢酸水溶液を加えるとともにポリアミノ酸を加え、イオンコンプレックスを形成する。なお、イオンコンプレックスに用いるキトサンは、脱アセチル化度（ＤＤＡ）が９０％以下であることが好ましく、５０％以下であることがより好ましい。
そして、ポリアミノ酸としては、例えばポリ−γ−グルタミン酸（以下、γ−ＰＧＡと称す。）とその塩とのうちの少なくともいずれか一方が用いられる。なお、γ−ＰＧＡに限られるものではなく、他のポリアミノ酸とその塩とのうちの少なくともいずれか一方も利用することができる。ポリアミノ酸としては、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸、ポリリジン、ポリアルギニン等があげられるが、生理的ｐＨでは負電荷を持つポリグルタミン酸とポリアスパラギン酸を用いることが好ましい。これらアミノ酸の異性体については特に限定されず、Ｌ体、Ｄ体、ＤＬ体のいずれを用いてもよいが、天然アミノ酸の立体配置であるＬ体を用いることが好ましい。
また、イオンコンプレックスの形成の際、酢酸水溶液を用いる場合に限らない。例えば、希塩酸、クエン酸水溶液等のカルボン酸水溶液、アスコルビン酸水溶液等を用いてもよい。

そして、イオンコンプレックスをＮ−アセチル化、すなわち、以下の化２に示すように、イオンコンプレックスに無水酢酸を添加してイオンコンプレックスのキトサン成分をＮ−アセチル化し、キチン化する。
ここで、キトサン成分のＮ−アセチル化に際して、無水酢酸を用いているので、効率よくＮ−アセチル化できる。なお、Ｎ−アセチル化は無水酢酸に限られるものではなく、塩化アセチル等を用いてもよい。
また、無水酢酸は、少量で複数回に分けて添加して繰り返してＮ−アセチル化することが好ましい。この繰り返しＮ−アセチル化する処理により、脱アセチル化度を低減できるためである。

ここで、Ｎ−アセチル化されたイオンコンプレックスの脱アセチル化度は、用いたキトサンの脱アセチル化度を１とした場合に０．０５以上０．８０以下、好ましくは０．１以上０．４以下に調整されることが好ましい。
ここで、用いたキトサンの脱アセチル化度を１とした場合のＮ−アセチル化されたイオンコンプレックスの脱アセチル化度が０．８０より大きくなると、免疫活性が増大し、医療素材や化粧品材料に利用しにくくなるおそれがある。一方、脱アセチル化度は低いことが望ましいが０．０５より小さくするためには反応処理が煩雑となり生産性の向上が望めなくなる。このため、Ｎ−アセチル化されたイオンコンプレックスの脱アセチル化度は、用いたキトサンの脱アセチル化度を１とした場合に０．０５以上０．８０以下、好ましくは０．１以上０．４以下に設定される。

このイオンコンプレックスのＮ−アセチル化処理後、アルカリ溶液を添加する。すなわち、以下の化３で示すように、イオンコンプレックスのＮ−アセチル化処理時に副反応として生成するＯ−アセチル基を、アルカリ溶液により脱Ｏ−アセチル化し、Ｎ−アセチル化キトサン（＝キチン）とγ−ＰＧＡとのイオンコンプレックス、すなわちキチン−ポリアミノ酸複合組成物が得られる。
ここで、アルカリ溶液としては、例えば、強塩基性のため加水分解を速やかに進行させることができる水酸化カリウムが好適に利用される。なお、アルカリ溶液としては、水酸化カリウムに限らず、例えば、物性、化学特性は水酸化カリウムとほぼ同じで、水酸化カリウムより安価な水酸化ナトリウムなども利用することができる。

この後、さらに酸性溶液を添加してｐＨを調整することが好ましい。
すなわち、酸性溶液の添加により、水洗処理しても、複合比（γ−ＰＧＡ／キチン）の低下が押さえられ、キチンに近い組成のＮ−アセチル化キトサン（＝キチン）とγ−ＰＧＡとのイオンコンプレックスが得られるためである。なお、Ｎ−アセチル化したイオンコンプレックスの複合比（γ−ＰＧＡ／キチン）は、水洗処理後であっても０．１以上とすることが好ましい。
ここで、酸性溶液としては、少量の添加で中和を完了させるため、強酸である塩酸水溶液が好適に利用されるが、塩酸水溶液に限らず、例えばクエン酸、アスコルビン酸等の弱酸を利用することもできる。

このように、上記方法によりキチン−ポリアミノ酸複合組成物を形成することで、Ｎ−アセチル化と、このＮ−アセチル化の反応で生成したＯ−アセチル基の脱Ｏ−アセチル化との条件を調整することで、脱アセチル化度が小さなＮ−アセチル化キトサン（＝キチン）とγ−ＰＧＡとのイオンコンプレックスの形成ができる。
したがって、免疫活性化が低く、例えば医療素材や化粧品材料などとして好適に利用できる。

次に、実施例を挙げて、本発明をより具体的に説明する。
なお、本発明は実施例などの内容に何ら限定されるものではない。

［比較例１〜４］
＜キトサン／γ−ＰＧＡ複合体の調製＞
コーヨーキトサンＤＡＣ−５０（商品名）（甲陽ケミカル製、脱アセチル化度４５％）１ｇに、１．０％酢酸水溶液を１００ｍｌ加え、メカニカルスターラーを用いて完全に溶けるまで攪拌した。
このＤＡＣ−５０／酢酸水溶液をメカニカルスターラーで攪拌(６００ｒｐｍ)しながら、１．０％γ−ＰＧＡ水溶液（ＶＩＤＡＮ製）１００ｍｌを、滴下漏斗を用いてゆっくり滴下した。
このγ−ＰＧＡ水溶液の滴下終了後に３０分間攪拌を継続した後、白濁が沈殿するまで静置した。静置後に上澄みを除いてメタノール２０ｍｌを加えて攪拌し、再び白濁が沈殿するまで静置した。同じ操作を３回繰り返し、溶液中の水分を除去した。
この溶液中の水分を除去した後、孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターを用いて吸引濾過し、沈殿物を回収した。
得られた沈殿物を４０℃で一晩、真空乾燥し、比較例１の試料とした。
また、ＤＡＣ−５０に、メタノール２０ｍｌを加えた後、無水酢酸（キトサンのＮＨ₂基に対して３当量）を加え、一晩攪拌することでアセチル化を行った。この後、上澄みを除き沈殿をメタノールで洗浄し、孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターを用いて吸引濾過することで沈殿物を回収した。
アセチル化された沈殿物に０．５Ｍ水酸化カリウムのメタノール溶液（水酸化カリウム１．４ｇをメタノール５０ｍｌに溶解）を加え、一晩攪拌することで脱Ｏ−アセチル化を行った。その後、上澄みを除いて沈殿をメタノールで洗浄し、孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターを用いて吸引濾過することで沈殿物を回収した。
沈殿物を４０℃で一晩、真空乾燥し、比較例２の試料（ＤＤＡ＝１１）とした。
さらに、後述する実施例１〜７の試料の調整と同様に、ＤＤＡ（％）やＭｗが異なる原料キトサンを用いて、比較例３，４の試料を作製した。

［実施例１〜７］
＜Ｎ−アセチル化キトサン（キチン）／γ−ＰＧＡ複合組成物の調製＞
比較例１の試料の調製の際に得られた沈殿物に、メタノール２０ｍｌを加えた後、無水酢酸（キトサンのＮＨ₂基に対して０〜９当量：実施例１〜７）を加え、一晩攪拌することでアセチル化を行った。この後、上澄みを除き沈殿をメタノールで洗浄し、孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターを用いて吸引濾過することで沈殿物を回収した。繰り返しアセチル化を行う場合、回収した沈殿物にメタノール２０ｍｌ、無水酢酸（３〜６当量：実施例４，６，７）を加え、同様の操作で洗浄、回収した。
アセチル化された沈殿物に０．５Ｍ水酸化カリウムのメタノール溶液（水酸化カリウム２．８ｇをメタノール１００ｍｌに溶解）を加え、一晩攪拌することで脱Ｏ−アセチル化を行った。その後、上澄みを除いて沈殿をメタノールで洗浄し、孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターを用いて吸引濾過することで沈殿物を回収した。
沈殿物を４０℃で一晩、真空乾燥し、実施例１〜７の試料とした。

［実施例８，９］
＜Ｎ−アセチル化キトサン（キチン）／γ−ポリグルタミン酸複合組成物複合比の調製＞
上記実施例１〜７の試料の調製の際に得られたサンプル１ｇに純水１００ｍｌを加えた分散液を、１Ｍ ＨＣｌでｐＨを４に調整し、孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターを用いて吸引濾過することで沈殿物を回収し、４０℃で一晩、真空乾燥し、実施例８，９の試料とした。

[実施例１０〜１３]
実施例１〜７の試料の調整と同様に、ＤＤＡ（％）やＭｗが異なる原料キトサンを用いて、実施例１０〜１３の試料を作製した。

［実験］
実施例１〜１３および比較例１〜４について、収率、脱アセチル化度、複合比（ポリ−γ−グルタミン酸塩／キチン）を求めた。また、酸溶解性について比較評価した。

＜収率＞
収率［％］は、以下の関係式１に基づいて算出した。その結果を以下の表１に示す。
（関係式１）
(キチン−ポリアミノ酸複合組成物の質量)/{(DAC-50の質量)＋(γ-PGAの質量)}×100

＜脱アセチル化度＞
脱アセチル化度（ＤＤＡ）［％］は、以下の関係式２に基づいて算出した。その結果を表１に示す。
（関係式２）
（(Ｇ×６)／（Ｋ））×１００
但し、関係式２において、Ｇ、Ｋは以下の値を示す。
Ｇ：グルコサミン（キトサン）残基の２位の水素(3.2ppm)の積分値
Ｋ：キトサンの２〜６位の水素(3.5〜4ppm＋3.2ppm)の積分値

＜Ｎ−アセチル化キトサン（キチン）／γ−ポリグルタミン酸複合組成物の複合比＞
実施例１〜７の試料１ｇに純水１００ｍｌを加えて水洗し、孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターを用いて吸引濾過することで沈殿物を回収し、４０℃で一晩、真空乾燥した。なお、水洗時の各試料のｐＨは８〜１０であった。
実施例８，９の試料1ｇに純水１００ｍｌを加え攪拌し、そこにｐＨが４になるまで１％塩酸水溶液を滴下した。３０分攪拌後に上澄みを除き、メタノールを加えて攪拌し、上澄みを除く操作を３回繰り返すことで沈殿を洗浄し、孔径０．４５μｍのメンブレンフィルターを用いて吸引濾過することで沈殿物を回収し、４０℃で一晩、真空乾燥した。
そして、公知の^１Ｈ−ＮＭＲを用いて水洗前後における複合比を求め、変化の状況を確認した。なお、混合比は、以下の関係式３に基づいて算出した。その結果を表１に示す。
（関係式３）
（Ｄ＋Ｎ）：Ｐ
但し、関係式３において、Ｄ、Ｎ、（Ｄ＋Ｎ）、Ｐは以下の値を示す。
Ｄ：ＤＡＣ−５０中のグルコサミン（キトサン）残基数
Ｎ：Ｎ−アセチルグルコサミン（キチン）残基数
（Ｄ＋Ｎ）：｛(2〜6位の水素(3.5〜4ppm)の積分値)/6｝
Ｐ：γ-PGA中のグルタミン酸残基数(γ-PGAのα水素(4.5ppm)の積分値)

＜Ｎ−アセチル化キトサン（キチン）／γ−ポリグルタミン酸複合組成物の酸溶解実験＞
各実施例１〜１３および比較例１〜４を、それぞれ２０％塩酸水溶液に、徐々に撹拌しながら添加して、溶解状況を目視観察で確認した。

［実験結果］
上記表１の実験結果から、実施例１〜７の試料における水洗前後の複合比と、塩酸でｐＨ調整した実施例８，９の試料における水洗前後の複合比とを比較すると、塩酸処理により、複合比の低下を抑えられることが分かる。
また、実施例１０〜１３の試料におけるキチン／γ−ＰＧＡ複合組成物のＤＤＡ比を比較すると、原料であるキトサンのＭｗ量ではなくＤＤＡ（％）の値がキチン／γ−ＰＧＡ複合組成物のＤＤＡ比の低下に影響を及ぼす傾向があることが分かる。
さらに、実施例５，６と実施例７，８の結果から、無水酢酸を複数回に分けて添加した方が、作製された複合体のＤＤＡ（％）が小さくなっていることが分かる。

また、キトサン原料であるＤＡＣ−５０を単にアセチル化して得られたキチン（ＤＤＡ＝１１）（比較例２）や、キトサン原料のＤＤＡ（％）が大きすぎる比較例３，４では、２０％塩酸水溶液に不溶であったが、実施例１〜１３のＮ−アセチル化により調製したものは、可溶であった。比較例１のＤＡＣ−５０とγ−ＰＧＡを用いて単にイオンコンプレックスを形成させた複合体（ＤＤＡ＝４５）は２０％塩酸水溶液に僅かに溶解したが、その溶解性は実施例１〜１３のＮ−アセチル化により調製したものの１/２以下であった。
なお、実施例１〜１３は、２０％塩酸水溶液に単位容積当たり６質量％の割合まで溶解することが確認できた。なお、これより濃度が高くなると、粘性が高くなり溶解作業が困難となった。

本発明では、例えばパウダー、フィルム、シート、ファイバー、スポンジ、ジェル素材、注射液、表面処理剤、繊維製品などの各種形態で医療素材や化粧品材料などに利用できる。

Claims (10)

1. キトサンと、ポリアミノ酸とのイオンコンプレックスのＮ−アセチル化により得られた
   ことを特徴としたキチン−ポリアミノ酸複合組成物。
2. 請求項１に記載のキチン−ポリアミノ酸複合組成物であって、
   前記Ｎ−アセチル化されたイオンコンプレックスは、前記キトサンの脱アセチル化度を１とした場合に０．０５以上０．８０以下である
   ことを特徴としたキチン−ポリアミノ酸複合組成物。
3. 請求項１または請求項２に記載のキチン−ポリアミノ酸複合組成物であって、
   前記ポリアミノ酸は、ポリ−γ−グルタミン酸とその塩とのうちの少なくともいずれか一方である
   ことを特徴としたキチン−ポリアミノ酸複合組成物。
4. 請求項１から請求項３までのいずれか一項に記載のキチン−ポリアミノ酸複合組成物であって、
   前記Ｎ−アセチル化したイオンコンプレックスは、複合比（ポリアミノ酸／キチン）が０．１以上である
   ことを特徴としたキチン−ポリアミノ酸複合組成物。
5. 請求項１から請求項４までのいずれか一項に記載のキチン−ポリアミノ酸複合組成物を原料として生成された
   ことを特徴としたキチン−ポリアミノ酸複合材料。
6. キトサンと、ポリアミノ酸とのイオンコンプレックスを形成し、
   この得られたイオンコンプレックスの前記キトサン成分をＮ−アセチル化してキチン化する
   ことを特徴とするキチン−ポリアミノ酸複合組成物の製造方法。
7. 請求項６に記載のキチン−ポリアミノ酸複合組成物の製造方法であって、
   前記キトサン成分のＮ−アセチル化は、無水酢酸の添加による
   ことを特徴とするキチン−ポリアミノ酸複合組成物の製造方法。
8. 請求項７に記載のキチン−ポリアミノ酸複合組成物の製造方法であって、
   前記無水酢酸の添加は、少量を複数回に分けて実施する
   ことを特徴とするキチン−ポリアミノ酸複合組成物の製造方法。
9. 請求項６から請求項８までのいずれか一項に記載のキチン−ポリアミノ酸複合組成物の製造方法であって、
   前記キトサン成分のキチン化は、副反応として生成したＯ−アセチル基をアルカリ溶液中で処理することにより脱Ｏ−アセチル化することを含む
   ことを特徴とするキチン−ポリアミノ酸複合組成物の製造方法。
10. 請求項９に記載のキチン−ポリアミノ酸複合組成物の製造方法であって、
    前記キトサン成分のキチン化後に酸性溶液を添加する
    ことを特徴とするキチン−ポリアミノ酸複合組成物の製造方法。