JP2010158171A5 - - Google Patents

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  1. 体細胞から人工多能性幹細胞を製造する方法であって、少なくとも1種のmiRNAの存在下で核初期化因子により該体細胞を核初期化する工程を含み、ここで、該miRNAがhsa-miR-372、hsa-miR-373又はhsa-miR-373/373*、hsa-miR-371-373クラスター、hsa-miR-302b又はhsa-miR-302b/302b*、hsa-miR-302-367クラスター、hsa-miR-520c又はhsa-miR-520c-5p/520c-3p、mmu-miR-291a又はmmu-miR-291a-5p/291a-3p、mmu-miR-294又はmmu-miR-294/294*、及びmmu-miR-295又はmmu-miR-295/295*からなる群から選ばれるRNAに含まれるmiRNAであり、並びに、該核初期化因子が(a)Octファミリーメンバー、(b)Octファミリーメンバー及びKlfファミリーメンバー、(c)Octファミリーメンバー及びNanog、或いは(d)Octファミリーメンバー、Klfファミリーメンバー及びMycファミリーメンバー、を少なくとも含むが、Sox2を含まないことを特徴とする、前記方法。
  2. 少なくとも1種のmiRNAの存在下で行うことを特徴とする核初期化の効率を高める方法であって、該miRNAがhsa-miR-372、hsa-miR-373又はhsa-miR-373/373*、hsa-miR-371-373クラスター、hsa-miR-302b又はhsa-miR-302b/302b*、hsa-miR-302-367クラスター、hsa-miR-520c又はhsa-miR-520c-5p/520c-3p、mmu-miR-291a又はmmu-miR-291a-5p/291a-3p、mmu-miR-294又はmmu-miR-294/294*、及びmmu-miR-295又はmmu-miR-295/295*からなる群から選ばれるRNAに含まれるmiRNAであり、並びに、該核初期化が、Sox2を含まない核初期化因子によって行われる、前記方法。
  3. 核初期化因子が、(a)Octファミリーメンバー、(b)Octファミリーメンバー及びKlfファミリーメンバー、(c)Octファミリーメンバー及びNanog、或いは(d)Octファミリーメンバー、Klfファミリーメンバー及びMycファミリーメンバー、を少なくとも含む、請求項2に記載の方法。
  4. OctファミリーメンバーがOct3/4であり、KlfファミリーメンバーがKlf4であり、又はMycファミリーメンバーがc-Mycである請求項1又は3に記載の方法。
  5. 核初期化因子が(a)Oct3/4、(b)Oct3/4及びKlf4、(c)Oct3/4及びNanog、或いは(d)Oct3/4、Klf4及びc-Mycである請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
  6. なくとも1種のmiRNAもしくはその前駆体RNAをコードするDNAを含むベクターを体細胞中に導入することを含む請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法。
  7. miRNAが配列番号1〜5、10〜12及び14から選択されるRNA配列に含まれるmiRNAである請求項1〜6のいずれか1項に記載の方法。
  8. miRNAが18〜25塩基からなる請求項1〜7のいずれか1項に記載の方法。
  9. 体細胞がヒトの体細胞である請求項1〜8のいずれか1項に記載の方法。
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