JP2010014429A - 液体クロマトグラフ - Google Patents

Abstract

【課題】分析対象成分を分画する動作と分画された分析対象成分を濃縮カラムに導いて濃縮する動作とを同時に行なうことができる液体クロマトグラフを提供する。
【解決手段】流路切換バルブ１４ａ，１４ｂ，１８ａ，１８ｂ，２２ａ，２２ｂ，４４及び流路選択バルブ２６，２８の切換えによって、分画流路、非分画流路、濃縮流路及び２次元目分析流路を構成することができる。濃縮流路と分画流路、非分画流路のいずれか１つの流路は同時に構成することができ、２次元目分析流路と分画流路、非分画流路のいずれか１つの流路も同時に構成することができる。
【選択図】 図１

Description

本発明は、高速液体クロマトグラフなどの液体クロマトグラフに関し、特に分離した成分を濃縮カラムに捕捉して濃縮する機能を備えた液体クロマトグラフに関するものである。

分離した成分を濃縮カラムに捕捉して濃縮する機能を備えた２次元液体クロマトグラフ（例えば、特許文献１を参照。）では、まず、分析流路中に注入された試料を移動相とともに１次元目の分析カラムに移送し、１次元目分析カラムで分離して、１つ以上の分析対象成分を含む溶離液をサンプルループなどの試料保持部で一時的に保持する。特許文献１のように、サンプルループが複数設けられている場合には、各サンプルループに分析対象成分を順に保持した後、サンプルループに保持した分析対象成分を濃縮カラムに搬送して濃縮し、その濃縮した分析対象成分を溶出させて２次元目の分析カラムに導いて再分析を行なう。
特許第３８６８８９９号公報

従来の２次元液体クロマトグラフは、１次元目分析で得られる分析対象成分をサンプルループで保持して分画する動作と、分画された分析対象成分を濃縮カラムに導いて濃縮する動作とを同時に行なうことができるようになっていない。そのため、サンプルループが１つだけ設けられている液体クロマトグラフでは、１つの分析対象成分をサンプルループで保持するとその分析対象成分の濃縮作業と２次元目分析が終了するまで一次元目分析を停止していた。また、サンプルループが複数設けられている液体クロマトグラフでは、それらのサンプルループに１次元目分析で分離した分析対象成分を分画し、その後、分画された分析対象成分を１つずつ順に濃縮カラムに導いて濃縮し、２次元目分析を行なうという作業を行なっていた。

上記のことから、分析対象成分の分画動作と、分画された分析対象成分を濃縮カラムに導いて濃縮する動作とを同時に行なうことができれば、分析対象成分の濃縮中も分画作業が行なえるため、分析時間を短縮できることになる。
そこで本発明は、分析対象成分を分画する動作と分画された分析対象成分を濃縮カラムに導いて濃縮する動作とを同時に行なうことができる液体クロマトグラフを提供することを目的とするものである。

本発明の液体クロマトグラフは、１次元目移動相を送液する１次元目送液機構、１次元目移動相とともに移送される試料を分離する１次元目分析カラム及び１次元目分析カラムで分離された各成分を検出するための１次元目検出器を備えた１次元目分析流路と、１次元目分析流路の下流側に配置され、１次元目分析カラムで分離された分析対象成分を含む溶出液を保持することができる少なくとも２つの試料保持部と、試料保持部に保持された分析対象成分を含む溶出液を搬送するための濃縮液を送液する濃縮液送液部及び濃縮液によって搬送される溶出液から分析対象成分を捕捉する濃縮カラムを備えた濃縮流路と、濃縮カラムに捕捉された分析対象成分を溶出させて移送するための２次元目移動相を送液する２次元目移動相送液部、２次元目移動相とともに移送される分析対象成分をさらに分離するための２次元目分析カラム及び２次元目分析カラムの下流側に設けられた２次元目検出器を備えた２次元目分析流路と、試料保持部の１つを１次元目分析流路に接続し、１次元目分析流路の接続されていない試料保持部を濃縮流路の濃縮液送液部と濃縮カラムの間に接続するとともに、それらの接続を切り換えることのできる第１の切換え機構と、濃縮カラムを２次元目分析流路の２次元目移動相送液部と２次元目分析カラムの間の位置と濃縮流路中の位置との間で切り換えて接続する第２の切換え機構と、を備えているものである。

なお、本発明の液体クロマトグラフにおける試料保持部は３つ以上設けられており、第１の切換え機構は各試料保持部を別々のタイミングで前記１次元目分析流路に接続するようになっていることが好ましい。そうすれば、１つの試料保持部に保持された分析対象成分の濃縮を行なっている間に２以上の分析対象成分が確認された場合にそれらの分析対象成分の分画を行なうことができる。

濃縮流路には試料保持部と濃縮カラムとの間に濃縮カラムでの分析対象成分の捕捉を促す希釈液を供給する希釈液送液流路がさらに接続されていれば、濃縮カラムに送られる分析対象成分を希釈して濃縮カラムでの分析対象成分の捕捉効率を高めることができる。

本発明の液体クロマトグラフは、１次元目分析流路、少なくとも２つの試料保持部、濃縮流路、２次元目分析流路を備え、さらには試料保持部の１つを１次元目分析流路に接続し、１次元目分析流路の接続されていない試料保持部を濃縮流路の濃縮液送液部と濃縮カラムの間に接続するとともに、それらの接続を切り換えることのできる第１の切換え機構と、濃縮カラムを２次元目分析流路の２次元目移動相送液部と２次元目分析カラムの間の位置と濃縮流路中の位置との間で切り換えて接続する第２の切換え機構と、を備えているので、分析対象成分を保持した試料保持部を濃縮流路の濃縮液送液部と濃縮カラムの間に接続して分析対象成分の濃縮作業を行ないながら、１次元目分析流路を別の試料保持部に接続して分析対象成分の分画作業を行なうことができる。したがって、濃縮作業中に１次元目分析を中断したり、１次元目分析が全て終了するまで濃縮作業の開始を待ったりする必要がないので、分析全体にかかる時間を短縮することができる。

図１は本発明の液体クロマトグラフの構成を示す流路構成図である。
この実施例の液体クロマトグラフは、１次元目分析流路１ａ、３つのサンプルループ（試料保持部）１６，２０，２４、濃縮液送液流路１ｂ−１、希釈液送液流路１ｂ−２、トラップカラム流路１ｄ、２次元目移動相送液流路１ｃ−１及び濃縮試料分析流路１ｃ−２を備えている。

１次元目分析流路１ａは、２種類の１次元目移動相２ａ，２ｂを送液する送液ポンプ４ａ，４ｂ及びそれらの１次元目移動相２ａ，２ｂを混合するミキサ６からなる１次元目送液機構、この流路内に試料を注入する試料注入部８、注入された試料を分離する１次元目分析カラム１０、及び１次元目分析カラム１０で分離された試料成分を検出する検出器１２を備えている。
サンプルループ１６，２０，２４は１次元目分析流路１ａで分離された分析対象成分を含む溶出液を滞留させることができる。

濃縮液送液流路１ｂ−１は例えば水などの濃縮液３０を送液するためのポンプ３２を備えている。
希釈液送液流路１ｂ−２は分析対象成分を含む溶出液を希釈するための希釈液３４を送液するためのポンプ３６を備えている。

トラップカラム流路１ｄは流れる液体から分析対象成分を捕捉して残りの液体を通過させるトラップカラム４６を備えている。

２次元目移動相送液流路１ｃ−１は２種類の２次元目移動相３８ａ，３８ｂを送液するためのポンプ４０ａ，４０ｂ及びそれらの液体を混合するミキサ４２からなる２次元目移動相送液装置を備えている。
濃縮試料分析流路１ｃ−２は２次元目分析カラム４８と２次元目検出器５０を備えている。

流路選択バルブ２６は濃縮液送液流路１ｂ−１の接続先を流路切換バルブ１４ａ側、１８ａ側、２２ａ側の３段階に切り換えるものであり、流路選択バルブ２８は流路切換バルブ４４の接続先を流路切換バルブ１４ｂ、１８ｂ、２２ｂの３段階に切り換えるものである。流路選択バルブ２６と２８は互いに同期して切り換えられるものであり、流路選択バルブ２６において流路切換バルブ１４ａが選択されると流路選択バルブ２８では流路切換バルブ１４ｂが選択され、流路選択バルブ２６において流路切換バルブ１８ａが選択されると流路選択バルブ２８では流路切換バルブ１８ｂが選択され、流路選択バルブ２６において流路切換バルブ２２ａが選択されると流路選択バルブ２８では流路切換バルブ２２ｂが選択される。

流路切換バルブ１４ａは、流路切換バルブ１８ａに繋がるポート、流路切換バルブ１４ｂに繋がるポート、サンプルループ１６の一端に繋がるポート及び流路選択バルブ２６を介して濃縮液送液流路１ｂ−１に繋がるポートを備えている。流路切換バルブ１４ａは流路切換バルブ１８ａに繋がるポートを流路切換バルブ１４ｂに繋がるポートとサンプルループ１６の一端に繋がるポートとの間で切り換えて接続することができ、流路切換バルブ１８ａに繋がるポートと流路切換バルブ１４ｂに繋がるポートとを接続しているときは、サンプルループ１６の一端に繋がるポートと流路選択バルブ２６を介して濃縮液送液流路１ｂ−１に繋がるポートとを接続する。

流路切換バルブ１４ｂは、流路切換バルブ１４ａに繋がるポート、サンプルループ１６の他端に繋がるポート、流路選択バルブ２８を介して流路切換バルブ４４に繋がるポート及びドレインに繋がるポートを備えている。流路切換バルブ１４ｂはサンプルループ１６の他端に繋がるポートを流路選択バルブ２８を介して流路切換バルブ４４に繋がるポートとドレインに繋がるポートとの間で切り換えて接続することができる。さらに流路切換バルブ１４ｂは、サンプルループ１６の他端に繋がるポートと流路選択バルブ２８に繋がるポートとを接続しながら流路切換バルブ１４ａに繋がるポートとドレインに繋がるポートとを接続することができる。

流路切換バルブ１８ａは、流路切換バルブ１４ａに繋がるポート、流路切換バルブ２２ａに繋がるポート、サンプルループ２０の一端に繋がるポート及び流路選択バルブ２６を介して濃縮液送液流路１ｂ−１に繋がるポートを備えている。流路切換バルブ１８ａは流路切換バルブ２２ａに繋がるポートを流路切換バルブ１４ａに繋がるポートとサンプルループ２０の一端に繋がるポートとの間で切り換えて接続することができ、流路切換バルブ２２ａに繋がるポートと流路切換バルブ１４ａに繋がるポートとを接続しているときは、サンプルループ２０の一端に繋がるポートと流路選択バルブ２６を介して濃縮液送液流路１ｂ−１に繋がるポートとを接続する。

流路切換バルブ１８ｂは、サンプルループ２０の他端に繋がるポート、流路選択バルブ２８を介して流路切換バルブ４４に繋がるポート及びドレインに繋がるポートを備えている。流路切換バルブ１８ｂは、サンプルループ２０の他端に繋がるポートを、流路選択バルブ２８を介して流路切換バルブ４４に繋がるポートとドレインに繋がるポートとの間で切り換えて接続することができる。

流路切換バルブ２２ａは、１次元目分析流路１ａの下流端に繋がるポート、流路切換バルブ１８ａに繋がるポート、サンプルループ２４の一端に繋がるポート及び流路選択バルブ２６を介して濃縮液送液流路１ｂ−１に繋がるポートを備えている。流路切換バルブ２２ａは１次元目分析流路１ａの下流端に繋がるポートを流路切換バルブ１８ａに繋がるポートとサンプルループ２４の一端に繋がるポートとの間で切り換えて接続することができ、１次元目分析流路１ａの下流端に繋がるポートと流路切換バルブ１８ａに繋がるポートとを接続しているときはサンプルループ２４の一端に繋がるポートと流路選択バルブ２６を介して濃縮液送液流路１ｂ−１に繋がるポートとを接続する。

流路切換バルブ２２ｂは、サンプルループ２４の他端に繋がるポート、流路選択バルブ２８を介して流路切換バルブ４４に繋がるポート及びドレインに繋がるポートを備えている。流路切換バルブ２２ｂは、サンプルループ２４の他端に繋がるポートを、流路選択バルブ２８を介して流路切換バルブ４４に繋がるポートとドレインに繋がるポートとの間で切り換えて接続することができる。

流路切換バルブ４４は、流路選択バルブ２８を介して流路切換バルブ１４ｂ，１８ｂ，２２ｂに繋がるポート、トラップカラム流路１ｄの上流端と下流端にそれぞれ繋がるポート、２次元目移動相送液流路１ｃ−１に繋がるポート、濃縮試料分析流路１ｃ−２に繋がるポート及びドレインに繋がるポートを備えている。流路切換バルブ４４は、トラップカラム流路１ｄの上流端に繋がるポートを、流路選択バルブ２８を介して流路切換バルブ１４ｂ，１８ｂ，２２ｂに繋がるポートと２次元目移動相送液流路１ｃ−１に繋がるポートとの間で切り換えて接続することができる。流路切換バルブ４４は、トラップカラム流路１ｄの上流端に繋がるポートと流路選択バルブ２８を介して流路切換バルブ１４ｂ，１８ｂ，２２ｂに繋がるポートとを接続しているときはトラップカラム流路１ｄの下流端に繋がるポートとドレインに繋がるポートとを接続し、トラップカラム流路１ｄの上流端に繋がるポートと２次元目移動相送液流路１ｃ−１に繋がるポートとを接続しているときはトラップカラム流路１ｄの下流端に繋がるポートと濃縮試料分析流路１ｃ−２に繋がるポートとを接続する。

希釈液送液流路１ｂ−２は流路選択バルブ２８と流路切換バルブ４４の間の流路に合流している。

以上の構成により、この実施例の液体クロマトグラフは流路選択バルブ２６，２８と流路切換バルブ１４ａ，１４ｂ，１８ａ，１８ｂ，２２ａ，２２ｂ，４４による接続流路の切換えによって、分画流路、非分画流路、濃縮流路、２次元目分析流路を構成することができる。流路切換バルブ１４ａ，１４ｂ，１８ａ，１８ｂ，２２ａ，２２ｂは１次元目分析流路１ａとサンプルループ１６，２０，２４の接続を切り換えるとともに、各サンプルループ１６，２０，２４の濃縮流路への接続を切り換える第１の切換え機構を構成し、流路切換バルブ４４はトラップカラム流路１ｄの濃縮流路と２次元目分析流路への接続を切り換える第２の切換え機構を構成する。

以下に、流路選択バルブ２６，２８と流路切換バルブ１４ａ，１４ｂ，１８ａ，１８ｂ，２２ａ，２２ｂ，４４による接続流路の切換えにより構成される流路について説明する。

流路切換バルブ２２ａを１次元目分析流路１ａの下流端に繋がるポートと流路切換バルブ１８ａに繋がるポートとが接続された状態にし、流路切換バルブ１８ａを流路切換バルブ２２ａに繋がるポートと流路切換バルブ１４ａに繋がるポートとが接続された状態にし、流路切換バルブ１４ａを流路切換バルブ１８ａに繋がるポートと流路切換バルブ１４ｂに繋がるポートとが接続された状態にし、流路切換バルブ１４ｂを流路切換バルブ１４ａに繋がるポートとドレインに繋がるポートとが接続された状態にすることにより、図２の太線で示された非分画流路が構成される。非分画流路では、１次元目分析流路１ａからの液体をどのサンプルループ１６，２０，２４を通過させることなくドレインから排出することができる。

流路切換バルブ２２ａを１次元目分析流路１ａの下流端に繋がるポートと流路切換バルブ１８ａに繋がるポートとが接続された状態にし、流路切換バルブ１８ａを流路切換バルブ２２ａに繋がるポートと流路切換バルブ１４ａに繋がるポートとが接続された状態にし、流路切換バルブ１４ａを流路切換バルブ１８ａに繋がるポートとサンプルループ１６の一端に繋がるポートとが接続された状態にし、流路切換バルブ１４ｂをサンプルループ１６の他端に繋がるポートとドレインに繋がるポートとが接続された状態にすることにより、溶出液をサンプルループ１６内に保持するための分画流路が構成される。

なお、流路切換バルブ２２ａは上記の状態で、流路切換バルブ１８ａを流路切換バルブ２２ａに繋がるポートとサンプルループ２０の一端に繋がるポートとが接続された状態にし、流路切換バルブ１８ｂをサンプルループ２０の他端に繋がるポートとドレインに繋がるポートとが接続された状態にすれば、溶出液をサンプルループ２０内に保持するための分画流路が構成される。また、流路切換バルブ２２ａを１次元目分析流路１ａの下流端に繋がるポートとサンプルループ２４の一端に繋がるポートとが接続された状態にし、流路切換バルブ２２ｂをサンプルループ２４の他端に繋がるポートとドレインに繋がるポートとが接続された状態にすれば、溶出液をサンプルループ２４内に保持するための分画流路が構成される。

流路選択バルブ２６，２８を流路切換バルブ１４ａ，１４ｂ側に切り換え、流路切換バルブ１４ａを濃縮液送液流路１ｂ−１に繋がるポートとサンプルループ１６の一端に繋がるポートとが接続された状態にし、流路切換バルブ１４ｂをサンプルループ１６の他端に繋がるポートと流路切換バルブ４４に繋がるポートとが接続された状態にし、流路切換バルブ４４を流路切換バルブ１４に繋がるポートとトラップカラム流路１ｄの上流端に繋がるポートとが接続された状態にすれば、サンプルループ１６内に滞留した分析対象成分を含む溶出液を濃縮液によってトラップカラム４６に搬送して濃縮するための濃縮流路が構成される。このとき、流路切換バルブ１４ａにおいて流路切換バルブ１８ａに繋がるポートと流路切換バルブ１４ｂに繋がるポートとが接続されているので、非分画流路を同時に構成することも可能である。また、流路切換バルブ１８ａ，１８ｂ又は流路切換バルブ２２ａ，２２ｂを切り換えて、サンプルループ２０又は２４を用いて分析対象成分を分画するための分画流路を上記の濃縮流路と同時に構成することも可能である。

同様に、流路選択バルブ２６，２８を流路切換バルブ１８ａ，１８ｂ側、又は流路切換バルブ２２ａ，２２ｂ側に切り換え、その選択された流路切換バルブ１８ａ又は２２ａを濃縮液送液流路１ｂ−１に繋がるポートとサンプルループ２０又は２４の一端に繋がるポートとが接続された状態にし、それに対応して流路切換バルブ１８ｂ又は２２ｂをサンプルループ２０又は２４の他端に繋がるポートと流路切換バルブ４４に繋がるポートとが接続された状態にし、流路切換バルブ４４を流路切換バルブ１４に繋がるポートとトラップカラム流路１ｄの上流端に繋がるポートとが接続された状態にすれば、サンプルループ２０や２４内に滞留した分析対象成分を濃縮するための濃縮流路が構成される。このときも、非分画流路や分画流路をその濃縮流路と同時に構成することができる。

流路切換バルブ４４を、２次元目移動相送液流路１ｃ−１に繋がるポートとトラップカラム流路１ｄの上流端に繋がるポートとが接続され、トラップカラム流路１ｄの下流端に繋がるポートと濃縮試料分析流路１ｃ−２に繋がるポートとが接続された状態にすることで、トラップカラム４６に捕捉された分析対象成分を２次元目移動相によって２次元目分析カラム４８に導いて分析するための２次元目分析流路が構成される。このとき、非分画流路又は各サンプルループ１６，２０，２４への分析対象成分の分画を行なう分画流路を同時に構成することができる。

次に、この液体クロマトグラフにおける分析の手順を図２〜図１０を用いて説明する。
オートサンプラなどによって試料注入部８に注入された試料は１次元目移動相とともに１次元目分析カラム１０に移送されて分離され、分離された分析対象成分が検出器１２で検出される。検出器１２で分析対象成分が検出されるまでは、図２において太線で示されているように、非分画流路を構成して１次元目分析流路１ａからの移動相をドレインから排出しながら分析対象成分が確認されるまで待機する。

検出器１２で分析対象成分が検出されたときは、図３において太線で示されているように、検出器１２で検出された分析対象成分を含む溶出液をサンプルループ１６側に送る分画流路を構成し、サンプルループ１６内にその溶出液を滞留させる。なお、ここでは最初に検出された分析対象成分をサンプルループ１６内に滞留させているが、サンプルループ２０内又はサンプルループ２４内に滞留させてもよい。

１つの分析対象成分を分画した後は、図４において最太線で示されているように、サンプルループ１６内の分析対象成分を含む溶出液をトラップカラム４６に送る濃縮流路を構成し、ポンプ３２を駆動してサンプルループ１６内の分析対象成分を含む溶出液をトラップカラム４６に導く。このとき、ポンプ３６を駆動して希釈液送液流路１ｂ−２から希釈液を濃縮流路に供給することにより、トラップカラム４６に導かれる分析対象成分を含む溶出液が希釈され、トラップカラム４６による分析対象成分の捕捉が促される。

図４や図５において最太線よりやや細い太線で示されているように、上記の濃縮作業中も非分画流路（図４）又は分画流路（図５）が構成されているので、１次元目分析流路１ａで１次元目分析を続行して、新たな分析対象成分が確認されたときはその分析対象成分をサンプルループ２０内に滞留させて分画することができる。濃縮作業中にさらに新たな分析対象成分が確認されたときは、図８において最太線よりやや細い太線で示されているように、その分析対象成分を含む溶出液をサンプルループ２４側に送る分画流路を構成してサンプルループ２４内に滞留させることができる。

分析対象成分の濃縮作業が終了した後は、ポンプ３２，３６を停止して濃縮液、希釈液の送液を停止し、図６又は図７において最太線で示されているように、２次元目分析流路を構成して２次元目分析を開始する。ポンプ４０ａ，４０ｂを駆動して二次元目移動相を２次元目分析流路中で流し、トラップカラム４６に捕捉されていた分析対象成分を２次元目移動相によって溶出させて２次元目分析カラム４８に導く。２次元目分析カラム４８に導かれた分析対象成分はさらに分離されて２次元目検出器５０に導かれる。

この２次元目分析中も１次元目分析流路１ａで１次元目分析を続行することができ、図６，図７において最太線よりやや細い太線で示されているように、新たな分析対象成分の分画作業を行なうことができる。

分析対象成分の２次元目分析が終了した後は、ポンプ４０ａ，４０ｂを停止して２次元目移動相の送液を停止し、図９又は図１０において最太線で示されているように、次のサンプルループ（ここではサンプルループ２０）に保持された分析対象成分の濃縮作業を行なう濃縮流路を構成する。この場合も、サンプルループ１６内に保持した分析対象成分の濃縮作業時と同様に、サンプルループ２０や２４内に保持した分析対象成分の濃縮作業時も１次元目分析を続行して新たな分析対象成分の分画作業を行なうことができる。空になったサンプルループ１６は、図１０において最太線よりやや細い太線で示されているように、新たに検出された分析対象成分を滞留させることができる。

以上、説明したように、この実施例の液体クロマトグラフは、複数のサンプルループ１６，２０，２４を備え、１つのサンプルループで保持した分析対象成分の濃縮作業又は２次元目分析を行なっている間に他のサンプルループを用いて新たな分析対象成分の分画を行なうことができるので、分析全体にかかる時間を短縮することができる。

従来のように、全ての分析対象成分の分画作業が終了するまで濃縮作業を開始しないとすると、サンプルループ内に保持された分解しやすい成分は濃縮作業が開始されるまでの間に分解されてしまうことがあった。しかし、この実施例では、１つの分析対象成分をサンプルループで保持した後、即座にその分析対象成分の濃縮作業を行なうことができるので、分析対象成分がサンプルループ内に保持された状態で待機する時間が短縮され、分析対象成分が分解される前に濃縮と２次元目分析を行なうことが可能になる。

なお、以上説明した液体クロマトグラフにおいて、試料保持部として３つのサンプルループ１６，２０，２４を設けているが、２つ又は４つ以上のサンプルループを試料保持部として設けてもよい。

一実施例の液体クロマトグラフの構成を概略的に示す流路構成図である。 同実施例の液体クロマトグラフにおいて、非分画流路が構成されたときの状態を示す流路構成図である。 同実施例の液体クロマトグラフにおいて、分画流路が構成されたときの状態を示す流路構成図である。 同実施例の液体クロマトグラフにおいて、濃縮流路と非分画流路が構成されたときの状態を示す流路構成図である。 同実施例の液体クロマトグラフにおいて、濃縮流路と分画流路が構成されたときの状態を示す流路構成図である。 同実施例の液体クロマトグラフにおいて、２次元目分析流路と分画流路が構成されたときの状態を示す流路構成図である。 同実施例の液体クロマトグラフにおいて、２次元目分析流路と非分画流路が構成されたときの状態を示す流路構成図である。 同実施例の液体クロマトグラフにおいて、濃縮流路と分画流路が構成されたときの状態を示す流路構成図である。 同実施例の液体クロマトグラフにおいて、濃縮流路と非分画流路が構成されたときの状態を示す流路構成図である。 同実施例の液体クロマトグラフにおいて、濃縮流路と分画流路が構成されたときの状態を示す流路構成図である。

符号の説明

１ａ １次元目分析流路
１ｂ−１ 濃縮液送液流路
１ｂ−２ 希釈液送液流路
１ｃ−１ ２次元目移動相送液流路
１ｃ−２ 濃縮試料分析流路
１ｄ トラップカラム流路
２ａ，２ｂ １次元目移動相
４ａ，４ｂ，３２，３６，４０ａ，４０ｂ 送液ポンプ
６，４２ ミキサ
８ 試料注入部
１０ １次元目分析カラム
１２ １次元目検出器
１４ａ，１４ｂ，１８ａ，１８ｂ，２２ａ，２２ｂ，４４ 流路切換バルブ
１６，２０，２４ サンプルループ
２６，２８ 流路選択バルブ
３０ 濃縮液
３４ 希釈液
３８ａ，３８ｂ ２次元目移動相
４６ トラップカラム
４８ ２次元目分析カラム
５０ ２次元目検出器

Claims (3)

1. １次元目移動相を送液する１次元目送液機構、１次元目移動相とともに移送される試料を分離する１次元目分析カラム及び前記１次元目分析カラムで分離された各成分を検出するための１次元目検出器を備えた１次元目分析流路と、
   前記１次元目分析流路の下流側に配置され、前記１次元目分析カラムで分離された分析対象成分を含む溶出液を保持することができる少なくとも２つの試料保持部と、
   前記試料保持部に保持された分析対象成分を含む溶出液を搬送するための濃縮液を送液する濃縮液送液部及び前記濃縮液によって搬送される溶出液から分析対象成分を捕捉する濃縮カラムを備えた濃縮流路と、
   前記濃縮カラムに捕捉された分析対象成分を溶出させて移送するための２次元目移動相を送液する２次元目移動相送液部、前記２次元目移動相とともに移送される分析対象成分をさらに分離するための２次元目分析カラム及び前記２次元目分析カラムの下流側に設けられた２次元目検出器を備えた２次元目分析流路と、
   前記試料保持部の１つを前記１次元目分析流路に接続し、前記１次元目分析流路の接続されていない試料保持部を前記濃縮流路の濃縮液送液部と濃縮カラムの間に接続するとともに、それらの接続を切り換えることのできる第１の切換え機構と、
   前記濃縮カラムを前記２次元目分析流路の２次元目移動相送液部と２次元目分析カラムの間の位置と前記濃縮流路中の位置との間で切り換えて接続する第２の切換え機構と、を備えている液体クロマトグラフ。
2. 前記試料保持部は３つ以上設けられており、第１の切換え機構は各試料保持部を別々のタイミングで前記１次元目分析流路に接続する請求項１に記載の液体クロマトグラフ。
3. 前記濃縮流路には前記試料保持部と前記濃縮カラムとの間に濃縮カラムでの分析対象成分の捕捉を促す希釈液を供給する希釈液送液流路がさらに接続されている請求項１又は２に記載の液体クロマトグラフ。

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