JP2010001311A - 心肥大のための処置としてのヒストンデアセチラーゼの阻害 - Google Patents
心肥大のための処置としてのヒストンデアセチラーゼの阻害 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2010001311A JP2010001311A JP2009221681A JP2009221681A JP2010001311A JP 2010001311 A JP2010001311 A JP 2010001311A JP 2009221681 A JP2009221681 A JP 2009221681A JP 2009221681 A JP2009221681 A JP 2009221681A JP 2010001311 A JP2010001311 A JP 2010001311A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hdac
- tsa
- cardiac hypertrophy
- expression
- histone deacetylase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
- A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
- A61K31/401—Proline; Derivatives thereof, e.g. captopril
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/12—Antihypertensives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Abstract
【解決手段】病的な心肥大および心不全を処置する方法であって、この方法は、(a)病的な心肥大を有する患者を同定する工程;および(b)この患者にヒストンデアセチラーゼインヒビターを投与する工程を包含する。
【選択図】なし
Description
(発明の背景)
政府は、国立衛生研究所からの助成金番号NIH RO1 HL61544に従って、本発明の権利を有する。本発明は、米国仮出願番号60/325,311(2001年9月27日出願)および同第60/334,041(2001年10月31日出願)(これらの内容全体は、無条件で参考として本明細書によって援用される)に対する優先権の権利を主張する。
本発明は、一般的に、発生生物学および分子生物学の分野に関する。より詳細には、本発明は、心筋細胞における遺伝子調節および細胞生理学に関する。特に、本発明は、心肥大および心不全を処置するためのHDACインヒビターの使用に関する。
心臓に課された増加した仕事量に応答した心肥大は、基本的な適応性機構である。これは、神経刺激、内分泌刺激または機械的刺激のいずれかまたはこれらの組み合わせ結果としての、(細胞数よりもむしろ)細胞サイズおよび細胞質量における定量的な増加を反映する特殊なプロセスである。高血圧(心肥大に関与する別の因子)は、鬱血性心不全の頻出する前駆体である。心不全が生じる場合、左心室は通常、肥大かつ膨張し、そして心収縮機能(例えば、駆出率)が減少される。明らかに、心肥大応答は、複雑な症候群であり、そして心肥大を導く経路の解明が、種々の刺激から生じる心疾患の処置において有益である。
1. 病的な心肥大および心不全を処置する方法であって、この方法は、以下:
(a)病的な心肥大を有する患者を同定する工程;および
(b)この患者にヒストンデアセチラーゼインヒビターを投与する工程、
を包含する、方法。
(a)病的な心肥大が発生する危険がある患者を同定する工程;および
(c)この患者にヒストンデアセチラーゼインヒビターを投与する工程、
を包含する、方法。
(a)ヒストンデアセチラーゼインヒビターを提供する工程;
(b)このヒストンデアセチラーゼインヒビターで筋細胞を処理する工程;および
(c)1つ以上の心肥大パラメーターの発現を測定する工程、
を包含し、
ここで、このヒストンデアセチラーゼインヒビターで処置されていない筋細胞における1つ以上の心肥大パラメーターと比較した、この1つ以上の心肥大パラメーターにおける変化が、心肥大のインヒビターとしてこのヒストンデアセチラーゼインヒビターを同定する、
方法。
(a)少なくとも1つのクラスIヒストンデアセチラーゼおよび少なくとも1つのクラスIIヒストンデアセチラーゼを提供する工程;
(b)候補インヒビター物質とこのヒストンデアセチラーゼを接触させる工程;ならびに
(c)このヒストンデアセチラーゼの活性を測定する工程、
を包含し、
ここで、クラスIIヒストンデアセチラーゼ活性よりも大きいクラスIヒストンデアセチラーゼ活性における減少が、心肥大のインヒビターとしてこの候補インヒビター物質を同定する、方法。
1,173,562;EP 1,170,008;EP 1,123,111;JP 2001/348340;U.S. 2002/103192;U.S. 2002/65282;U.S. 2002/61860;WO 02/51842;WO 02/50285;WO 02/46144;WO 02/46129;WO 02/30879;WO 02/26703;WO 02/26696;WO 01/70675;WO 01/42437;WO 01/38322;WO 01/18045;WO 01/14581;Furumaiら(2002);Hinnebuschら(2002);Maiら(2002);Vigushinら(2002);Gottlicherら(2001);Jung(2001);Komatsuら(2001);Suら(2000)。
心不全は、世界中で罹患率および死亡率の主要な原因のうちの1つである。米国単独において、300万人の人が心筋症を有しながら現在生存し、そして別の400,000人が年基準で診断されていることが、推定で示されている。拡張型心筋症(DCM)はまた、「うっ血性心筋症」ともいわれ、このうっ血性心筋症は、心筋症の最も一般的な形態であり、そして推定100,000人の個体当たり40人に近い罹患率を有する(Durandら、1995)。DCMの他の症例も存在するが、よく知られている拡張型心筋症は、約20%の「特発性」DCMを示すと指摘されている。DCM症例の約半分が、特発性であり、残りは、既知の疾患プロセスと関連している。例えば、重篤な心筋損傷が、癌化学療法に使用される特定の薬物(例えば、ドキソルビシンおよびダウノルビシン)から生じ得る。さらに、多くのDCM患者は、慢性アルコール中毒である。幸運にも、これらの患者について、心不全の進行は、疾患経過の初期にアルコール消費を減らすかまたは止める場合、停止または逆転し得る。産辱性心筋症は、感染性続発症と関連する疾患なので、DCMの別の特発性形態である。要するに、心筋症(DCMを含む)は、重要な公衆衛生の問題である。
本発明者らは、MEF2が、そのカルボキシ末端活性化ドメインの3つの保存された部位のMAPキナーゼリン酸化によって活性化されることを以前に示した(Katohら、1998を参照のこと)。CaMKシグナル伝達がまた、クラスIIHDAC(これは、成体心臓において高レベルで発現され、ここで、MEF2活性化を抑制し得る)をリン酸化することによってMEF2を活性化する。リン酸化の際、これらのHDACは、14−3−3に結合し、そしてMEF2から分離し、核への移動およびMEF−2依存性転写の活性化を引き起こす。リン酸化され得ないクラスIIHDACの変異体は、MEF2から分離し得ず、そしてMEF2標的遺伝子の発現を不可逆性にブロックする。
ヌクレオソーム(クロマチン折り畳みの基本骨格)は、動的な高分子構造であり、クロマチン溶液コンフォメーションに影響を与える(WorkmanおよびKingston、1998)。ヌクレオソームコアは、ヒストンタンパク質であるH2A、HB、H3およびH4で構成される。ヒストンアセチル化は、変更された生物物理学的特性をふるまうヌクレオソームおよびヌクレオソーム配置を引き起こす。ヒストンアセチルトランスフェラーゼ(HAT)の活性とデアセチラーゼ(HDAC)の活性との間の均衡が、ヒストンアセチル化のレベルを決定する。脱アセチル化クロマチンが一般的に転写的に不活性であるのに対し、アセチル化されたヒストンは、クロマチンの遅延および遺伝子転写の活性化を引き起こす。
7、HDAC 9およびHDAC 10)(Kaoら、2000)が、クローン化され、そして同定されている(Grozingerら、1999;Zhouら、2001;Tongら、2002)。さらに、HDAC 11が、同定されたが、クラスIまたはクラスIIのいずれかは未だ分類されていない(Gaoら、2002)。全てが、触媒領域中に相同性を共有する。しかし、HDAC 4、HDAC 5、HDAC 7、HDAC 9およびHDAC 10は、他のHDACに見出されない特有のアミノ末端伸長部を有する。このアミノ末端領域は、MEF2結合ドメインを含む。HDAC 4、HDAC 5およびHDAC 7は、心臓遺伝子発現の調節に関与することが示され、そして特定の実施形態において、MEF2転写活性を抑制することが示されている。クラスIIHDACがMEF2活性を抑制する正確な機構は、完全に理解されていない。1つの可能性は、MEF2へのHDAC結合が、競合的にかまたはネイティブな転写的に活性であるMEF2のコンフォメーションを不安定化することのいずれかによって、MEF2転写活性を阻害するということである。クラスII HDACが、脱アセチル化を進行させるためにヒストンの近位に、HDACを局在または位置付けるために、MEF2との二量体化を必要とする可能性がまた存在する。
ヒストンデアセチラーゼに対する種々のインヒビターが同定されている。提唱される用途は、広範にわたるが、主に癌治療に集中している。Saundersら(1999);Jungら(1997);Jungら(1999);Vigushinら(1999);Kimら(1999);Kitazomoら(2001);Vigusinら(2001);Hoffmannら(2001);Kramerら(2001);Massaら(2001);Komatsuら(2001);Hanら(2001)。このような治療は、固形癌および非ホジキンリンパ腫のNIHに支援された第1相治験の対象である。HDACがまた、導入遺伝子の転写を増加し、従って遺伝子治療に対する可能な補助剤を構成する。Yamanoら(2000);Suら(2000)。
1,123,111;JP 2001/348340;U.S. 2002/103192;U.S. 2002/65282;U.S. 2002/61860;WO 02/51842;WO 02/50285;WO 02/46144;WO 02/46129;WO 02/30879;WO 02/26703;WO 02/26696;WO 01/70675;WO 01/42437;WO 01/38322;WO 01/18045;WO 01/14581;Furumaiら(2002);Hinnebuschら(2002);Maiら(2002);Vigushinら(2002);Gottlicherら(2001);Jung(2001);Komatsuら(2001);Suら(2000)。
(A.治療養生法)
本発明の1つの実施形態において、HDACインヒビターを使用する心肥大の処置のための方法が、提供される。本願の目的のために、処置は、以下のような心肥大の1つ以上の症状を減少させる工程を包含する:減少した運動能力、減少した血液駆出量、増加した左心室末端拡張圧、増加した肺毛細管くさび圧、減少した心拍出量、心臓インデックス、増加した肺動脈圧、増加した左心室末端収縮寸法および左心室末端拡張寸法、および増加した左心室壁ストレス、壁緊張および壁の厚み、ならびに右心室についての同様の症状。さらに、HDACインヒビターの使用は、心肥大およびその関連する症状が生じるのを回避し得る。
別の実施形態において、他の治療様式と組み合わせて、HDAC阻害を使用することが考えられている。従って、上記の治療に加えて、患者により多くの「標準的」薬学的心臓治療をまた提供し得る。標準的治療の例としては、制限することなく、いわゆる「β遮断剤」、抗高血圧剤、強心剤、抗血栓剤、血管拡張薬、ホルモン拮抗薬、イオントロープ(iontrope)、利尿薬、エンドセリン拮抗薬、カルシウムチャネル遮断剤、ホスホジエステラーゼインヒビター、ACEインヒビター、2型アンギオテンシン拮抗薬およびサイトカイン遮断剤/インヒビターが挙げられる。
臨床適用が意図される場合、薬学的組成物は、意図される適用のために適切な形態で調製される。一般に、これは、発熱物質、ならびにヒトまたは動物に有害であり得る他の不純物が基本的に含まない組成物を調製することを伴う。
本発明はさらに、心肥大の予防または逆転において有用であるHDACのインヒビターを同定するための方法を包含する。これらのアッセイは、候補物質の大きいライブラリーの無作為スクリーニングを含み得る;あるいは、これらのアッセイは、それらにHDACの機能をより阻害させるようである構造的属性に眼を向けて選択された特定のクラスの化合物に集中するために使用され得る。
(a)候補モジュレーターを提供する工程;
(b)候補モジュレーターをHDACと混合する工程;
(c)HDAC活性を測定する工程;および
(d)工程(c)における活性を、候補モジュレーターの非存在下における活性と比較する工程、
を包含し、ここで、測定された活性の間の差異が、候補化合物が、実際に、化合物、細胞または動物のモジュレーターであることを示す。
本明細書中で使用される場合、用語「候補物質」は、HDAC活性を潜在的に阻害し得る任意の分子をいう。この候補物質は、タンパク質もしくはそのフラグメント、低分子、または核酸でさえあり得る。このことは、最も有用な薬理学的化合物が、本明細書中のいずれかに列挙される、公知のHDACインヒビターに構造的に関連している化合物である場合に判明し得る。改善した化合物を開発するのを助けるためのリード化合物を使用することは、「合理的薬物設計」として公知であり、そして公知のインヒビターおよび活性化因子との比較だけでなく、標的分子の構造に関する推定を含む。
実行するのに速く、安価な、そして容易なアッセイは、インビトロアッセイである。このようなアッセイ(速くそして多数で実行され得る)は一般に、単離された分子を使用し、それにより、短い期間で得られ得る情報の量を増加する。種々の容器(試験管、プレート、シャーレ、およびディップスティックまたはビーズのような他の表面)がアッセイを実行するために使用され得る。
本発明はまた、細胞中のHDACを調節するそれらの能力について化合物をスクリーニングすることを意図する。この目的のために特に操作された細胞を含む、種々の細胞株が、このようなスクリーニングアッセイに利用され得る。
インビボアッセイは、特定の欠損を有するように操作されているトランスジェニック動物、または生物体内に異なる細胞に到達しそして影響する候補物質の能力を測定するために使用され得る輸送マーカーを含む、心臓病の種々の動物モデルの使用を含む。これらのサイズ、取り扱いの容易さ、およびこれらの生理学および遺伝子構成に関する情報に起因して、マウスは、特にトランスジェニックについて、好ましい実施形態である。しかし、ラット、ウサギ、ハムスター、モルモット、スナネズミ、マーモット、ネコ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ウシ、ウマおよびサル(チンパンジー、ギボンおよびヒヒを含む)を含む他の動物も同様に適切である。インヒビターについてのアッセイは、これらの種のいずれかに由来する動物モデルを使用して行なわれ得る。
本明細書中で使用される場合、用語「心不全」は、心臓の血液を汲み出す能力を減少させる任意の状態をいうために広範に使用される。結果として、うっ血および水腫が、組織において発生する。最も頻繁に、心不全は、減少した冠血流より生じる心筋層の減少した収縮性によって引き起こされる;しかし、心臓弁に対する損傷、ビタミン不足、および原発性心筋疾患を含む、多数のほかの因子が、心不全を生じ得る。心不全の正確な生理学的機構は、完全に理解されていないが、心不全は、交感神経、副交感神経、および圧受容体応答を含む、いくつかの心臓の自律神経特性における障害に関連すると一般に考えられている。成句「心不全の発現」は、心不全に関連する実験室知見を含む、心不全に関連する全ての続発症(例えば、短い呼吸、圧痕水腫、拡大した過敏な肝臓、うっ積した頚部静脈、肺ラ音など)を含むように広範に使用される。
以下の実施例は、本発明の種々の局面をさらに例示するために含まれる。以下の実施例に開示される技術は、発明者らによって発見された技術および/または組成物が本発明の実施において十分に機能することを示し、従って、その実行のための好ましい様式を構成すると考えられ得ることが当業者によって理解されるべきである。しかし、当業者は、本発明の開示を考慮して、多数の改変が開示された特定の実施形態においてなされ得、そしてなお本発明の精神および範囲から逸脱することなく同様または類似の結果を得ることを理解するべきである。
(材料および方法)
(細胞培養)
1日齢のラット由来の心室筋細胞を、5%ウシ血清を含むMEM中に低密度でプレートし、そして無血清MEM中で研究した。培養物を、PE(#P6126、Sigma−Aldrich Corp.,St.Louis,MO)、IL−1(#501−RL,R&D Systems,Minneapolis,MN)、TSA(#GR−309,BIOMOL Research Laboratories,Inc.,Plymouth Meeting,PA)またはそれらのビヒクル(PEについてはアスコルビン酸;IL−1についてはウシ血清アルブミン;TSAについてはジメチルスルホキシド)で処理した。
総細胞抽出物を、Cell Signaling Technology(Beverly,MA)からの抗体(アセチル化リジン抗体:#9441、リジン9におけるアセチル化ヒストンH3抗体:#9671、リジン23におけるアセチル化ヒストンH3抗体:#9674、ヒストンH3抗体:#9712)を使用するウェスタンブロット分析に供した。アセチル化ヒストンH3の核局在化を、同じ抗体を使用する免疫染色によって試験した。
培養した筋細胞の増殖を、14C−フェニルアラニンと共に連続的にインキュベートした後、放射性標識されたタンパク質の含有量を定量した。筋細胞遺伝子プログラムの評価のために、総RNAを、TRIZol(GIBCO,Carlsbad,Calfornia)を用いて細胞から抽出して、そしてSERCA、α−/β−MyHC、ANP、BNP、および心臓のα−アクチンについてのプローブを用いてRNase保護アッセイにおいて使用した。全てのサンプルはまた、RNAローディングのための中間コントロールとして、グルセルアルデヒドリン酸デヒドロゲナーゼ(GAPDH)を含んだ。
筋細胞を、HDAC1、4、5についてのサイトメガロウイルスプロモーター駆動Flagタグ化発現ベクター、およびクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)遺伝子の発現7を駆動するSERCA(3500bp)、αMyHC(2900bp)、またはβMyHC(3300bp)についてのラットプロモーターを保有するレポータープラスミドを用いるリン酸カルシウム同時沈澱を使用して、トランスフェクトした。レポーター発現を、SEAP(BD Bioscieces Clontech,Palo Alto,CA)を用いるトランスフェクション効率についての補正を用いて、以前に記載されるように、48時間後に評価した。HDACの過剰発現を、抗Flag M2抗体(Sigma−Aldrich Corp.St.Louis,MO)を使用するウェスタンブロット分析によって確認した。
(TSAは心筋細胞におけるタンパク質アセチル化を増加する)
TSAは、タンパク質アセチル化における全体の増加を生じるはずであると考えていたので、最初の実験は、TSAが心筋細胞におけるHDAC活性を阻害し得ることを確認することに指向した。アセチル化の程度を、アセチル化リジン残基に特異的な抗体を使用して決定した。発明者らは、ウェスタンブロットおよび細胞免疫蛍光分析の両方によって、24時間のTSAへの曝露が、多数のタンパク質において、そして特にヒストンH3において、アセチル化リジン残基を効果的に増加したことを示した。
TSA自体は、筋細胞増殖に影響を与えないが、発明者らは、TSAがPEおよびIL−1の両方に対する個々の肥大応答を増強することを見出した。両方の肥大刺激は、SERCA(図1A)およびαMyHC(図1B)発現を下方制御し、そして両方のアゴニストに対する組み合わせた曝露は、さらなる抑制を生じた。対照的に、TSAは、SERCA2aおよびαMyHC mRNAの両方の基底発現を増加させた。TSAの前処理はまた、両方の肥大刺激によるSERCA発現の抑制における実質的な逆転を生じた。明らかに、TSAは、αMyHC発現に対するPEの効果のほぼ完全な逆転を生じたが、この効果は、IL−1処理(または同時処理)細胞の場合において、より顕著ではなかった。発明者らは以前に、PEおよびIL−1を用いた心筋細胞の同時処理が、通常のαMyHC発現のPE誘導をほぼ50%抑制することを示した。TSAは、この遺伝子の基底発現またはPE誘導のいずれに対しても影響を与えなかったが、IL−1単独の存在下でαMyHC発現を増加し、そしてPE/IL−1同時処理細胞においてIL−1の効果を逆転した。同様の逆転がまた、sACT遺伝子で見られた(WangおよびLong、未公開データ)。明らかに、TSAは、任意の肥大処理条件下で、心臓のα−アクチン、ANP、BNPの遺伝子発現に影響を与えなかった(データは示されていない)。
これらの標的遺伝子についてのmRNA発現の研究と一致して、TSAはまた、SERCA2(図2A)およびαMyHC(図2B)遺伝子の両方の基底プロモーター活性を増加したが、βMyHC(図2C)の活性は増加しなかった。さらに、HDAC1または4についての発現ベクターを有するこれらの構築物の同時発現はまた、SERCA(図2A)およびαMyHC(図2D)遺伝子の両方のプロモーター活性を減少した。しかし、対照的に、HDAC5は、他のアイソフォームの発現レベルと同様の発現レベルにも関わらず、いずれの遺伝子のプロモーター活性をも阻害することに失敗した(データは示されていない)。明らかに、3つ全てのHDAC構築物は、αMyHCプロモーター活性(図2D)におけるPE誘導性の増加を減弱し得た。
(材料および方法)
(心筋細胞単離)
心臓を、妊娠15日目の雌性Sprague−Dawleyラット(Harlan,Houston,TX)から回収した。リン酸緩衝化生理食塩水中で刻んだ後、心筋細胞を、0.1%(w/v)Pancreatin(Sigma,St.Louis,MO)溶液の連続消化画分から単離した。画分を回収し:プレート培地に再懸濁し;プールし;次いで心筋細胞集団から線維芽細胞を分離するために2時間プレートした。懸濁細胞を、再び回収し、そしてトランスフェクションおよび免疫蛍光実験のために1×106細胞/ウェルで6ウェルシャーレ中にプレートし、そしてRNA分析のために10cmシャーレ中で2×106細胞をプレートした。
プレーティングの24時間後、細胞を、Lipofectamine Plus試薬(Invitrogen,Carlsbad,CA)を使用して、総量1μg/mlで5時間トランスフェクトした。トランスフェクトした細胞をインキュベートし、次いで、さらに24時間処理した。細胞を、溶解し、そしてそれらの溶解物を、Lucysoft2照度計(Rosys Anthos,New Castle,DE)を使用して、蛍光についてLuciferase Assay System(Promega,Madison,WI)を用いてアッセイした。
新生児心筋細胞を、96ウェルプレートに播種して、そして72時間処理した。細胞を、1×PBS中で2回洗浄し、4%パラホルムアルデヒド/1×PBS中で固定し、そして0.1% Triton−X100を用いて浸透させた。ブロッキング後、細胞を10μg/mlモノクローナル抗ANF抗体(Biodesign)と共に1時間インキュベートした。ウェルを、1%BSA/1×PBSで2回洗浄し、次いで1×PBS/1%BSA中1:1000でヤギ抗マウスIgG−Fc−HRP(Jackson Labs,location)と共に1時間インキュベートした。細胞を、1%BSA/1×PBSで2回洗浄し、1×PBSで2回洗浄し、次いでブロットし、乾燥した。Luminol(Pierce,Rockford,IL)を添加し、そして化学発光を、Fusion
Plate Reader(Perkin Elmer/Packard)で検出した。
総RNAを、未処理、フェニレフリン処理、TSA処理、またはフェニレフリンおよびTSAの同時処理のいずれかの心筋細胞から単離した。1マイクログラムのRNAを、Nitrocellulose(Bio−Rad,Hercules,CA)にブロットし、そして末端標識オリゴで50℃で14時間ハイブリダイズした。
ガラスカバーガラスを、1×PBS(40μg/ml)中でラミニンを溶解することによって、カバーガラスを溶液中に浸漬することによって、そしてそれらを風乾することによって、ラミニン(Invitrogen,Carlsbad,CA)でコーティングした。細胞を、24時間処理し、洗浄し、3.7%ホルムアミドで10分間固定し、1×PBSで洗浄し、そして3%BSAおよび0.1%NP−40(Sigma,St.Louis,MO)を含む1×PBSで浸漬した。一次抗体を、3%BSAおよび0.1%NP−40を含む1×PBS中で30分間置き、次いで1×PBS中で3回洗浄した。二次FITC抗体またはTRITC抗体(Vector Laboratories,Inc.,Burlingame,CA)を、一次抗体と同じ緩衝溶液中でインキュベートし(1:200)、次いで1×PBSで洗浄し、カバーし引き続き可視化した。イメージを、デジタルカメラ(Hamamatsu Photonics,Hamamatsu City,Japan)を使用して取り込んだ。
心筋細胞を、処理したRPMI培地(Invitrogen,Carksbad,CA)中で(1.0μCi/ml;172Ci/mmol sp.活性)トリチウム化ロイシン(ICN Biochemicals,Inc.,Irvine,CA)と共にインキュベートした。6時間のインキュベーション後、細胞を、1×PBSで2回洗浄し、次いで氷上で30分間、10%TCA中でインキュベートした。その後、細胞を、5%TCAで2回洗浄し、水で1回洗浄し、次いで0.25 NaOH中で溶解した。溶解物を、シンチレーションカウンター(Beckman,Fullerton,CA)によってシンチレーション液の6分の1容量で測定した。
ブロッキング後、細胞を、50μg/ml抗S6タンパク質(Cell Singaling,location)を含む1%BSA/1×PBS中で、1時間インキュベートした。洗浄後、細胞を、1:400の希釈率で、IgG−HRP(Jackson Labs,location)と共にインキュベートした。次いで、細胞を、1%BSA/1×PBS中で2回洗浄し、1×PBS中で洗浄し、次いでブロットし、乾燥した。Luminol(Pierce,Rockford,IL)を添加し、そして化学発光を、Fusion Reader(Perkin Elmer/Packard)で検出した。
RNAを、未処理、フェニレフリン処理、TSA処理、およびフェニレフリン/TSA同時処理ラット新生児心筋細胞から、Trizol(Invitrogen,Carlsbad,CA)を使用して単離した。RNAを、調製し、そしてAffymetrixプロトコルに従って、U34Aチップ(Affymetrix,Inc.,Santa Clara,CA)上でハイブリダイズした。ハイブリダイゼーションの強度を、Micoro Array Suite 5.0(Affymetrix,Inc.,Santa Clara,CA)によって検出し、そして遺伝子発現における変化を決定し、そしてMicoro Array Suite 5.0(Affymetrix,Inc.,Santa
Clara,CA)によって分析した。
ヒストンデアセチラーゼ(HDAC)が遺伝子発現を調節するので、本発明者らは、HDAC阻害が、心肥大と関連した遺伝子の発現を変化させるか否かを分析した。心房性ナトリウム利尿因子(ANF)はこのような遺伝子の1つであり、そしてその発現は、肥大アゴニストの存在下で増大する。HDAC阻害がANF遺伝子活性化に影響するか否かを決定するために、トランスフェクション実験をANFプロモーターを用いて実施し、そしてトランスフェクトされた心筋細胞をフェニレフリンおよびいくつかのHDACインヒビターで処理した。トリコスタチン(TSA)、酪酸ナトリウム(NaBut)またはHC毒素(HC)での心筋細胞の処理は、ANFプロモーターを活性化しなかった。しかし、HDACインヒビターは、フェニレフリン処理によるプロモーターの活性化を完全にブロックした(図3A)。この効果は特異的であった。なぜなら、各HDACインヒビターを単独でまたはフェニレフリンと一緒にかのいずれかで処理した心筋細胞は、CMV−Lac Zレポーターの転写活性を増大したからである(図3B)。このことは、これらの薬理学的薬剤の作用が、ANFの転写制御に特異的であって、一般的な転写阻害に由来しなかったことを示す。
以下の参考文献は、それらが本明細書の記載を補充して典型的な手順または他の詳細を提供する程度に、本明細書中に参考として詳細に援用される:
結論として、本発明は、心肥大を処置する方法および予防する方法を提供する。クラスII HDAC(クロマチン構造および遺伝子発現の調節に関与することが知られている)が心肥大に対して有益な効果を有することが示されている。驚くべきことに、本発明は、HDACインヒビターが、胎児心臓遺伝子発現を阻害し、そして筋節の構築を妨害することにより、心肥大を阻害することを実証する。
Claims (1)
- 明細書に記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US32531101P | 2001-09-27 | 2001-09-27 | |
US33404101P | 2001-10-31 | 2001-10-31 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2002284313A Division JP2003238445A (ja) | 2001-09-27 | 2002-09-27 | 心肥大のための処置としてのヒストンデアセチラーゼの阻害 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2010001311A true JP2010001311A (ja) | 2010-01-07 |
Family
ID=26984878
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2002284313A Withdrawn JP2003238445A (ja) | 2001-09-27 | 2002-09-27 | 心肥大のための処置としてのヒストンデアセチラーゼの阻害 |
JP2009221681A Pending JP2010001311A (ja) | 2001-09-27 | 2009-09-25 | 心肥大のための処置としてのヒストンデアセチラーゼの阻害 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2002284313A Withdrawn JP2003238445A (ja) | 2001-09-27 | 2002-09-27 | 心肥大のための処置としてのヒストンデアセチラーゼの阻害 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US6706686B2 (ja) |
EP (1) | EP1297851B1 (ja) |
JP (2) | JP2003238445A (ja) |
AT (1) | ATE287731T1 (ja) |
DE (1) | DE60202727T2 (ja) |
DK (1) | DK1297851T3 (ja) |
ES (1) | ES2236415T3 (ja) |
PT (1) | PT1297851E (ja) |
Families Citing this family (57)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1137771A2 (en) * | 1998-11-10 | 2001-10-04 | The Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods for preventing cardiac hypertrophy and heart failure by inhibition of mef2 transcription factor |
JP2001149081A (ja) * | 1999-11-29 | 2001-06-05 | Cyclex Co Ltd | 脱アセチル化酵素の活性測定方法、並びにこれら酵素の阻害剤もしくは促進剤のスクリーニング方法 |
PE20020354A1 (es) * | 2000-09-01 | 2002-06-12 | Novartis Ag | Compuestos de hidroxamato como inhibidores de histona-desacetilasa (hda) |
US6706686B2 (en) * | 2001-09-27 | 2004-03-16 | The Regents Of The University Of Colorado | Inhibition of histone deacetylase as a treatment for cardiac hypertrophy |
US7154002B1 (en) | 2002-10-08 | 2006-12-26 | Takeda San Diego, Inc. | Histone deacetylase inhibitors |
US20040077083A1 (en) * | 2002-10-17 | 2004-04-22 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense modulation of histone deacetylase 4 expression |
US7250514B1 (en) | 2002-10-21 | 2007-07-31 | Takeda San Diego, Inc. | Histone deacetylase inhibitors |
US20070104688A1 (en) | 2003-02-13 | 2007-05-10 | City Of Hope | Small interfering RNA mediated transcriptional gene silencing in mammalian cells |
US20040171118A1 (en) * | 2003-02-13 | 2004-09-02 | City Of Hope | Methods for directing DNA methylation in mammalian cells using homologous short double stranded RNAs |
US7375228B2 (en) * | 2003-03-17 | 2008-05-20 | Takeda San Diego, Inc. | Histone deacetylase inhibitors |
CA2526423A1 (en) * | 2003-05-21 | 2004-12-29 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Inhibition of protein kinase c-mu (pkd) as a treatment for cardiac hypertrophy and heart failure |
CN1964714B (zh) * | 2003-08-29 | 2011-09-28 | Hdac默克研究有限责任公司 | 辛二酰苯胺异羟肟酸和吉西他滨在制备用于治疗癌症的药物中的用途 |
WO2005066151A2 (en) * | 2003-12-19 | 2005-07-21 | Takeda San Diego, Inc. | Histone deacetylase inhibitors |
US20050159470A1 (en) * | 2003-12-19 | 2005-07-21 | Syrrx, Inc. | Histone deacetylase inhibitors |
CA2555632A1 (en) * | 2004-02-02 | 2005-08-18 | Myogen, Inc. | Inhibition of protein kinase c-related kinase (prk) as a treatment for cardiac hypertrophy and heart failure |
US20050197336A1 (en) * | 2004-03-08 | 2005-09-08 | Miikana Therapeutics Corporation | Inhibitors of histone deacetylase |
US7345043B2 (en) * | 2004-04-01 | 2008-03-18 | Miikana Therapeutics | Inhibitors of histone deacetylase |
CA2561954A1 (en) * | 2004-04-05 | 2005-10-20 | Myogen, Inc. | Inhibition of nuclear export as a treatment for cardiac hypertrophy and heart failure |
JP5074921B2 (ja) | 2004-04-07 | 2012-11-14 | アキシオジェネシス エージー | 非侵襲性生体外機能組織検定システム |
ES2354997T3 (es) | 2004-05-11 | 2011-03-21 | Axiogenesis Ag | Ensayo para el descubrimiento de fármacos basado en células diferenciadas in vitro. |
FI20040675A0 (fi) * | 2004-05-12 | 2004-05-12 | Orion Corp | Menetelmä sydämen hypertrofian hoitoon ja estoon |
US20060110390A1 (en) * | 2004-08-25 | 2006-05-25 | Myogen, Inc. | Inhibition of Ku as a treatment for cardiovascular diseases |
WO2006060382A2 (en) * | 2004-11-30 | 2006-06-08 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Use of hdac and/or dnmt inhibitors for treatment of ischemic injury |
JP2008524246A (ja) * | 2004-12-16 | 2008-07-10 | タケダ サン ディエゴ インコーポレイテッド | ヒストンデアセチラーゼ阻害剤 |
US7772245B2 (en) | 2005-02-14 | 2010-08-10 | Miikana Therapeutics, Inc. | Inhibitors of histone deacetylase |
US20100087328A1 (en) * | 2005-03-01 | 2010-04-08 | The Regents Of The University Of Michigan | Brm expression and related diagnostics |
US7604939B2 (en) * | 2005-03-01 | 2009-10-20 | The Regents Of The University Of Michigan | Methods of identifying active BRM expression-promoting HDAC inhibitors |
JP2008540574A (ja) * | 2005-05-11 | 2008-11-20 | タケダ サン ディエゴ インコーポレイテッド | ヒストンデアセチラーゼ阻害剤 |
WO2007011757A1 (en) * | 2005-07-14 | 2007-01-25 | Myogen, Inc. | Use of inhibitors of the ubiquitin proteasome pathway for increasing contractility of the heart |
CN101263121A (zh) * | 2005-07-14 | 2008-09-10 | 塔克达圣地亚哥公司 | 组蛋白脱乙酰基酶抑制剂 |
CN101282718A (zh) * | 2005-08-10 | 2008-10-08 | 诺瓦提斯公司 | 脱乙酰酶抑制剂的使用方法 |
EP1965824A4 (en) * | 2005-11-18 | 2011-10-19 | Gloucester Pharmaceuticals Inc | METABOLITENE DERIVATIVES OF HDAC INHIBITOR FK228 |
EP1962888A2 (en) * | 2005-11-18 | 2008-09-03 | Myogen, Inc. | Uses for camkii and hdacs in the treatment of heart conditions |
US20070207950A1 (en) * | 2005-12-21 | 2007-09-06 | Duke University | Methods and compositions for regulating HDAC6 activity |
JP2009525955A (ja) * | 2006-01-13 | 2009-07-16 | タケダ サン ディエゴ インコーポレイテッド | ヒストンデアセチラーゼ阻害剤 |
CA2647359A1 (en) * | 2006-03-29 | 2007-11-08 | Edward Via Virginia College Of Osteopathic Medicine | Tumor cell differentiation agents as chemical inhibitors and treatments for intracellular parasites |
AU2007234380A1 (en) * | 2006-04-06 | 2007-10-11 | Novartis Ag | Combination of organic compounds |
EP2010476A4 (en) | 2006-04-13 | 2011-01-26 | Univ Wake Forest Health Sciences | NITROXYL DISPENSERS FROM C-NITROSO COMPOUNDS |
US20100137239A1 (en) * | 2006-04-24 | 2010-06-03 | Gloucester Pharmaceuticals | Gemcitabine combination therapy |
WO2007146730A2 (en) | 2006-06-08 | 2007-12-21 | Gloucester Pharmaceuticals | Deacetylase inhibitor therapy |
CN101801994A (zh) * | 2006-12-29 | 2010-08-11 | 格洛斯特制药公司 | 制备Romidepsin |
BRPI0720734A2 (pt) * | 2006-12-29 | 2014-01-07 | Gloucester Pharmaceuticals Inc | Preparação da romidepsina |
WO2008140708A1 (en) * | 2007-05-09 | 2008-11-20 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Use of hdac inhibitors for treatment of cardiac rhythm disorders |
US7737175B2 (en) * | 2007-06-01 | 2010-06-15 | Duke University | Methods and compositions for regulating HDAC4 activity |
WO2009048540A1 (en) * | 2007-10-05 | 2009-04-16 | U.S. Department Of Veterans Affairs Office Of General Counsel - Psg Iv (024) | Method and composition for treating heart failure |
WO2009089598A2 (en) * | 2008-01-18 | 2009-07-23 | Katholieke Universiteit Leuven | Msmb-gene methylation based diagnosis, staging and prognosis of prostate cancer |
US20100212036A1 (en) * | 2008-09-30 | 2010-08-19 | Olson Eric N | Selective inhibition of histone deacetylases 1 and 2 as a treatment for cardiac hypertrophy |
WO2011032088A1 (en) | 2009-09-11 | 2011-03-17 | Arca Biopharma, Inc. | Polymorphisms in the pde3a gene |
US20120190817A2 (en) | 2010-07-12 | 2012-07-26 | Celgene Corporation | Romidepsin solid forms and uses thereof |
US8859502B2 (en) | 2010-09-13 | 2014-10-14 | Celgene Corporation | Therapy for MLL-rearranged leukemia |
EP2627316B1 (en) | 2010-10-13 | 2019-03-27 | Medivir AB | Pharmaceutical formulation for histone deacetylase inhibitors |
AU2013202506B2 (en) | 2012-09-07 | 2015-06-18 | Celgene Corporation | Resistance biomarkers for hdac inhibitors |
AU2013202507B9 (en) | 2012-11-14 | 2015-08-13 | Celgene Corporation | Inhibition of drug resistant cancer cells |
NZ630311A (en) | 2013-12-27 | 2016-03-31 | Celgene Corp | Romidepsin formulations and uses thereof |
TWI808055B (zh) | 2016-05-11 | 2023-07-11 | 美商滬亞生物國際有限公司 | Hdac 抑制劑與 pd-1 抑制劑之組合治療 |
TWI794171B (zh) | 2016-05-11 | 2023-03-01 | 美商滬亞生物國際有限公司 | Hdac抑制劑與pd-l1抑制劑之組合治療 |
CN114980887A (zh) | 2019-12-20 | 2022-08-30 | 特纳亚治疗股份有限公司 | 氟代烷基-噁二唑及其用途 |
Family Cites Families (24)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5534615A (en) * | 1994-04-25 | 1996-07-09 | Genentech, Inc. | Cardiac hypertrophy factor and uses therefor |
US5968981A (en) * | 1995-07-28 | 1999-10-19 | The Regents Of The University Of California | Retinoid suppression of ventricular muscle cell hypertrophy |
DE69920247T2 (de) | 1998-10-19 | 2005-09-29 | Methylgene, Inc., Saint-Laurent | Veränderung der dns methyltransferase durch kombinationstherapie |
JP4269041B2 (ja) | 1999-03-02 | 2009-05-27 | 国立大学法人九州工業大学 | 新規な環状テトラペプチド誘導体とその医薬用途 |
JP2003500052A (ja) | 1999-05-03 | 2003-01-07 | メチルジーン インコーポレイテッド | ヒストン脱アセチル酵素の抑制 |
DE60041542D1 (de) | 1999-08-20 | 2009-03-26 | Univ Texas | Hdac4- und hdac5-abhängige regulation der genexpression im herzen |
JP2001081031A (ja) | 1999-08-30 | 2001-03-27 | Schering Ag | 溶解性および経口吸収性を改善したベンズアミド誘導体含有製剤 |
AU7108400A (en) * | 1999-09-03 | 2001-04-10 | Salk Institute For Biological Studies, The | Modulation of gene expression by modulating histone acetylation |
JP2003508501A (ja) | 1999-09-07 | 2003-03-04 | コンジュケム,インコーポレーテッド | 生物学的結合のための肺送達 |
EP1212357B1 (en) | 1999-09-08 | 2007-05-02 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Crystal structure of a deacetylase and inhibitors thereof |
WO2001038322A1 (en) | 1999-11-23 | 2001-05-31 | Methylgene, Inc. | Inhibitors of histone deacetylase |
ES2260080T3 (es) | 1999-12-08 | 2006-11-01 | Axys Pharmaceuticals, Inc. | Proteinas histono deacetilasa-8, acidos nucleicos y procedimiento de utilizacion. |
AU2001248701A1 (en) | 2000-03-24 | 2001-10-03 | Methylgene, Inc. | Inhibitors of histone deacetylase |
AU2001298014A1 (en) | 2000-03-24 | 2003-01-29 | Methylgene, Inc. | Inhibition of specific histone deacetylase isoforms |
JP2001348340A (ja) | 2000-06-07 | 2001-12-18 | Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd | ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤 |
EP1170008A1 (en) | 2000-07-07 | 2002-01-09 | Chemotherapeutisches Forschungsinstitut Georg-Speyer-Haus | Valproic acid and derivatives thereof as histone deacetylase inhibitors |
AU2001290131B2 (en) | 2000-09-29 | 2007-11-15 | Topotarget Uk Limited | Carbamic acid compounds comprising a sulfonamide linkage as HDAC inhibitors |
GB0023983D0 (en) | 2000-09-29 | 2000-11-15 | Prolifix Ltd | Therapeutic compounds |
EP1598067B1 (en) | 2000-09-29 | 2009-05-06 | TopoTarget UK Limited | Carbamic acid compounds comprising an amide linkage for the treatment of malaria |
US20020103192A1 (en) | 2000-10-26 | 2002-08-01 | Curtin Michael L. | Inhibitors of histone deacetylase |
AR035659A1 (es) | 2000-12-07 | 2004-06-23 | Hoffmann La Roche | Hidroxiamidas de acido (1-oxo-1,2,3,4-tetrahidro-naftalen-2-il)-alcanoico, proceso para la manufactura de estos compuestos, composiciones farmaceuticas que contienen dichos compuestos y los usos de los mismos |
EP1346052A2 (en) | 2000-12-20 | 2003-09-24 | Novartis AG | Histone deacetylase-related gene and protein |
AR035513A1 (es) | 2000-12-23 | 2004-06-02 | Hoffmann La Roche | Derivados de tetrahidropiridina, proceso para prepararlos, composiciones farmaceuticas que los contienen, y uso de dichos compuestos en la preparacion de medicamentos |
US6706686B2 (en) * | 2001-09-27 | 2004-03-16 | The Regents Of The University Of Colorado | Inhibition of histone deacetylase as a treatment for cardiac hypertrophy |
-
2002
- 2002-09-26 US US10/256,221 patent/US6706686B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-09-27 ES ES02021676T patent/ES2236415T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-09-27 PT PT02021676T patent/PT1297851E/pt unknown
- 2002-09-27 DK DK02021676T patent/DK1297851T3/da active
- 2002-09-27 DE DE60202727T patent/DE60202727T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-09-27 AT AT02021676T patent/ATE287731T1/de not_active IP Right Cessation
- 2002-09-27 JP JP2002284313A patent/JP2003238445A/ja not_active Withdrawn
- 2002-09-27 EP EP02021676A patent/EP1297851B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2004
- 2004-03-16 US US10/801,985 patent/US6946441B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-07-26 US US11/190,074 patent/US20060025333A1/en not_active Abandoned
- 2005-08-30 US US11/215,844 patent/US20060069014A1/en not_active Abandoned
-
2009
- 2009-09-25 JP JP2009221681A patent/JP2010001311A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ATE287731T1 (de) | 2005-02-15 |
DK1297851T3 (da) | 2005-05-30 |
US20040186049A1 (en) | 2004-09-23 |
US20030144340A1 (en) | 2003-07-31 |
ES2236415T3 (es) | 2005-07-16 |
JP2003238445A (ja) | 2003-08-27 |
US20060069014A1 (en) | 2006-03-30 |
EP1297851B1 (en) | 2005-01-26 |
PT1297851E (pt) | 2005-06-30 |
EP1297851A1 (en) | 2003-04-02 |
US20060025333A1 (en) | 2006-02-02 |
US6946441B2 (en) | 2005-09-20 |
DE60202727T2 (de) | 2005-12-29 |
US6706686B2 (en) | 2004-03-16 |
DE60202727D1 (de) | 2005-03-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2010001311A (ja) | 心肥大のための処置としてのヒストンデアセチラーゼの阻害 | |
Rai et al. | Downregulation of the apelinergic axis accelerates aging, whereas its systemic restoration improves the mammalian healthspan | |
US11458137B2 (en) | Compositions and methods of using tyrosine kinase inhibitors | |
AU2005277384B2 (en) | PDE5 inhibitor compositions and methods for treating cardiac indications | |
AU2002313700A1 (en) | Method for reducing hypertension and heart failure | |
EP1427401A2 (en) | Method for reducing hypertension and heart failure | |
US20210069184A1 (en) | Methods and compositions for prevention and treatment of cardiac hypertrophy | |
EP3419666A1 (en) | Alpha-1-adrenergic receptor agonist therapy | |
EP1605262A1 (en) | Method of identifying inhibitors of cardiac hypertrophy | |
Groban et al. | Differential effects of late-life initiation of low-dose enalapril and losartan on diastolic function in senescent Fischer 344× Brown Norway male rats | |
Xu et al. | Ang II enhances atrial fibroblast autophagy and promotes atrial remodeling through the AT1-ERK-mTOR signaling pathway | |
WO2011119939A2 (en) | Manipulation of calcium channels to regulate after-depolarization events in cardiac myocytes | |
EP3756667A1 (en) | Inhibitors of adamts4 or adamts5 for use in preventing or treating cardiac remodeling and chronic heart failure | |
Yáñez Bisbe | Role of TRPV4 channels in adverse cardiac remodelling | |
Devine | Tumor Induced Cardiovascular Dysfunction | |
Rifki | RalGDS-Dependent Cardiomyocyte Autophagy Is Necessary for Load-Induced Ventricular Hypertrophy | |
Stokes | METHODS AND COMPOSITIONS FOR PREVENTION AND TREATMENT OF CARDIAC HYPERTROPHY-Patent Information |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20090925 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100917 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120105 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20120207 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20120210 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20121023 |