JP2009298739A - 光障害の軽減剤 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】鉄化合物を有効成分とする5−アミノレブリン酸、その誘導体又はそれらの塩投与時の光障害の軽減剤。
【選択図】なし
Description
さらに5−アミノレブリン酸の投与は、プロトポルフィリンIXの生成を利用した脳腫瘍の術中診断にも応用されている(非特許文献3)。
従って、本発明の目的は、5−アミノレブリン酸投与時に生じる光障害を軽減する手段を提供することにある。
また、本発明は、(A)5−アミノレブリン酸、その誘導体又はそれらの塩と(B)鉄化合物とを組み合せてなる細胞の活性化剤を提供するものである。
5−アミノレブリン酸又は誘導体としては、次の一般式(1)で表されるものが挙げられる。
R2R1NCH2COCH2CH2COR3 (1)
[式中、R1及びR2は各々独立に、水素原子、アルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリール基又はアラルキル基を示し;R3はヒドロキシ基、アルコキシ基、アシルオキシ基、アルコキシカルボニルオキシ基、アリールオキシ基、アラルキルオキシ基又はアミノ基を示す。]
8週齢雄のCH3マウスの背部の毛を、皮膚表面に傷をつけないよう短く刈った。翌日毛を刈った場所に傷の無いことを確認し、1ケージ2匹に分け、尾にマジックし、個体識別を行い、体重を測定した。(ALA)塩酸塩を5%グルコース溶液に溶解して、経口ゾンデを用いて、ALA塩酸塩50,100,150mg/kgを経口投与した。
投与後遮光し、時間毎に皮膚をVLD−M1(分光器内蔵型紫色半導体レーザー装置、エムアンドエム社)を用いて405nmを照射し、635nmの発光を測定した。その際、組織由来の500nmの白色蛍光(自家蛍光)も測定し、白色蛍光の影響を考慮した。塗布後遮光した状態で四時間経過した後、マウスを尊殺し、塗布部分の毛根の凍結切片を作成し、蛍光顕微鏡で蛍光の有無を確認した。
その結果、蛍光強度(635nm/500nm)は、塗布後210分で最高に達し、その後減衰した(図1)。また、蛍光顕微鏡で、405nmの蛍光をあて毛根付近で赤色光部位を観察し、ALAが代謝されてプロとポルフィリンIXに変換されことを確認した(図2)。
8週齢雄のCH3マウスの背部の毛を、皮膚表面に傷をつけないよう短く刈った。翌日毛を刈った場所に傷の無いことを確認し、1ケージ2匹に分け、尾にマジックし、個体識別を行い、体重を測定した。経口ゾンデを用いて、ALA塩酸塩100mg/kgを経口投与した後、鉄剤(クエン酸第一鉄、ジエチレントリアミン五酢酸鉄アンモニウム(DTPA−Fe)、ピロリン酸第二鉄、硫酸第一鉄)をALAとモル比が1:4となるように続けてゾンデで経口投与した。なお、ALA塩酸塩のみを経口投与したものをコントロールとした。投与後遮光し、時間毎に皮膚をVLD−M1(分光器内蔵型紫色半導体レーザー装置、エムアンドエム社)を用いて405nmを照射し、635nmの発光を測定した。その際、組織由来の500nmの白色蛍光(自家蛍光)も測定し、白色蛍光の影響を考慮した。塗布後遮光した状態で四時間経過した後、マウスを尊殺し、塗布部分の毛根の凍結切片を作成し、蛍光顕微鏡で蛍光の有無を確認した。
その結果、鉄なしのときの時間毎の蛍光強度(635nm/500nm)を100%とした場合、クエン酸第一鉄とDTPA−Feでは、塗布30分以降において80%以上蛍光強度を抑制しているのに対し、ピロリン酸第二鉄と硫酸第一鉄では、80%未満しか抑制していなかった(表1)。また、蛍光顕微鏡で、405nmの蛍光をあてたところ、クエン酸第一鉄とDTPA−Feでは赤色光部位を観察できず、プロとポルフィリンIXに鉄が配位されヘムに変換されことを確認した(図3)。
8週齢雄のCH3マウスの背部の毛を、皮膚表面に傷をつけないよう短く刈った。翌日毛を刈った場所に傷の無いことを確認し、1ケージ2匹に分け、尾にマジックし、個体識別を行い、体重を測定した。ゾンデを用いて、ALA塩酸塩100mg/kgを経口投与した後、クエン酸第一鉄をALAとモル比が1:0.25、1:0.5、1:2、1:4となるように続けてゾンデで経口投与した。投与後遮光し、時間毎に皮膚をVLD−M1(分光器内蔵型紫色半導体レーザー装置、エムアンドエム社)を用いて405nmを照射し、635nmの発光を測定した。その際、組織由来の500nmの白色蛍光(自家蛍光)も測定し、白色蛍光の影響を考慮した。塗布後遮光した状態で四時間経過した後、マウスを尊殺し、塗布部分の毛根の凍結切片を作成し、蛍光顕微鏡で蛍光の有無を確認した。
その結果、クエン酸第一鉄をALAとモル比が1:0.25、1:0.5、1:2、1:4となるよう投与すると120分をピークとしてそれ以降蛍光強度が抑制されていくことを確認した。(図4)。
8週齢オスのCH3マウスの背部の毛を、処方液を塗布できるよう剃毛した。翌日剃毛した場所に傷の無いことを確認し、1ケージ2匹に分け、尾にマジックし、個体識別を行った。ALAリン酸塩0.6%、1.5%、3%、6%を塗布した。塗布後遮光し、時間毎に皮膚をVLD−M1(分光器内蔵型紫色半導体レーザー装置、エムアンドエム社)を用いて405nmを照射し、635nmの発光を測定した。その際、組織由来の500nmの白色蛍光(自家蛍光)も測定し、白色蛍光の影響を考慮した。塗布後遮光した状態で四時間経過した後、マウスを尊殺し、塗布部分の毛根の凍結切片を作成し、蛍光顕微鏡で蛍光の有無を確認した。
その結果、蛍光強度(635nm/500nm)は、塗布後240分まで向上した(図5)。また、蛍光顕微鏡で、405nmの蛍光をあて毛根付近で赤色光部位を観察し、ALAが代謝されてプロとポルフィリンIXに変換されことを確認した(図6)。
8週齢オスのCH3マウスの背部の毛を、処方液を塗布できるよう剃毛した。翌日剃毛した場所に傷の無いことを確認し、1ケージ2匹に分け、尾にマジックし、個体識別を行った。ALA塩酸塩6%とDTPA−FeをALAとモル比が1:0.25、1:0.5、1:2、1:4となる詳報液を作成し塗布した。塗布後遮光し、時間毎に皮膚をVLD−M1(分光器内蔵型紫色半導体レーザー装置、エムアンドエム社)を用いて405nmを照射し、635nmの発光を測定した。その際、組織由来の500nmの白色蛍光(自家蛍光)も測定し、白色蛍光の影響を考慮した。塗布後遮光した状態で四時間経過した後、マウスを尊殺し、塗布部分の毛根の凍結切片を作成し、蛍光顕微鏡で蛍光の有無を確認した。
その結果、DTPA−FeをALAとモル比が1:0.25、1:0.5、1:2、1:4となるよう投与すると180分をピークとしてそれ以降蛍光強度が抑制されていくことを確認した。(図7)。
Claims (6)
- 鉄化合物を有効成分とする5−アミノレブリン酸、その誘導体又はそれらの塩投与時の光障害の軽減剤。
- 鉄化合物が、有機酸の鉄塩である請求項1記載の光障害の軽減剤。
- 有機酸の鉄塩が、有機酸と鉄を含むキレート錯体である請求項2記載の光障害の軽減剤。
- (A)5−アミノレブリン酸、その誘導体又はそれらの塩と(B)鉄化合物とを組み合せてなる細胞の活性化剤。
- (B)鉄化合物が、有機酸の鉄塩である請求項4記載の細胞の活性化剤。
- 有機酸の鉄塩が、有機酸と鉄を含むキレート錯体である請求項5記載の細胞の活性化剤。
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