JP2009219499A

JP2009219499A - 遺伝子破壊、それに関連する組成物および方法

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Publication number: JP2009219499A
Application number: JP2009129694A
Authority: JP
Inventors: Allison Anne Byers Horner; アンバイヤーズホーナーアリソン; Katherin E Combs; イー．コームズキャサリン; Ling Ling Culbertson; リンリンカルバートソン; Juan Delmas-Mata; デルマス−マータファン; Frederic Desauvage; デソベージュフレデリック; Liangfen Fan; ファンリアンフェン; Gretchen Frantz; フランツグレッチェン; Leslie Jane Green; ジェーングリーンレスリー; Erin Marie Massey; マリーマシーエリン; Dina Rebecca Mclain; レベッカマクレインディナ
Original assignee: Genentech Inc; Lexicon Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Genentech Inc; Lexicon Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2005-08-15
Filing date: 2009-05-28
Publication date: 2009-10-01
Also published as: US20110173708A1; AU2006280321A1; JP2009504183A; US8207396B2; US20080124344A1; WO2007021423A2; CA2619577A1; EP1922410A2; ZA200800970B; EP1995321A2; WO2007021423A3; US7931902B2; US20120272341A1

Abstract

【課題】遺伝子機能の特徴づけに関するトランスジェニック動物ならびに組成物および方法を提供する。
【解決手段】本発明により、種々の遺伝子の破壊が含まれているトランスジェニックマウスが提供される。このようなインビボにおける研究および特徴づけは、遺伝子破壊に関連する疾患または機能障害（例えば、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨の代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常）の予防、寛解または矯正に有用な治療薬および／または処置法の価値ある同定および発見を提供し得る。
【選択図】なし

Description

本発明は、トランスジェニック動物およびノックアウト動物を含む組成物ならびに疾患または障害の診断および処置のためにそのような組成物を使用する方法に関する。

細胞外タンパク質は、とりわけ、多細胞生物の形成、分化および維持において重要な役割を果たしている。多くの個々の細胞の運命、例えば、増殖、移動、分化または他の細胞との相互作用は、代表的には他の細胞および／または直属の環境から受ける情報により支配されている。この情報は、分泌ポリペプチド（例えば、分裂促進因子、生存因子、細胞傷害性因子、分化因子、神経ペプチドおよびホルモン）により伝達されることが多く、そのポリペプチドは、その後多様な細胞レセプターまたは膜結合タンパク質から受け、そして解釈される。これらの分泌ポリペプチドまたはシグナル伝達分子は、通常、細胞分泌経路を通って細胞外環境におけるそれらの作用部位に到達する。

分泌タンパク質は、医薬品、診断薬、バイオセンサーおよびバイオリアクターを含む様々な産業上の用途を有している。現在利用可能なほとんどのタンパク質薬物（例えば、血栓溶解剤、インターフェロン、インターロイキン、エリトロポイエチン、コロニー刺激因子および様々な他のサイトカイン）は、分泌タンパク質である。膜タンパク質であるそれらのレセプターもまた、治療薬または診断薬としての潜在性を有する。産業界および学術界の両方によって、新規の天然の分泌タンパク質を同定するための努力がなされている。多くの努力は、新規の分泌タンパク質に対するコード配列を同定するための哺乳動物組換えＤＮＡライブラリーのスクリーニングに着目している。スクリーニングの方法および手法の例は、文献に記載されている［例えば、非特許文献１；特許文献１を参照のこと］。

膜結合タンパク質およびレセプターは、とりわけ、多細胞生物の形成、分化および維持において重要な役割を果たし得る。多くの個々の細胞の運命、例えば、増殖、移動、分化または他の細胞との相互作用は、代表的には他の細胞および／または直属の環境から受ける情報により支配されている。この情報は、分泌ポリペプチド（例えば、分裂促進因子、生存因子、細胞傷害性因子、分化因子、神経ペプチドおよびホルモン）により伝達されることが多く、そのポリペプチドは、その後多様な細胞レセプターまたは膜結合タンパク質により受け、そして解釈される。このような膜結合タンパク質および細胞レセプターとしては、サイトカインレセプター、レセプターキナーゼ、レセプターホスファターゼ、細胞−細胞相互作用に関与するレセプターならびにセレクチンおよびインテグリンのような細胞接着分子が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、細胞の成長および分化を制御するシグナルの伝達は、部分的に、様々な細胞タンパク質のリン酸化により制御される。そのプロセスを触媒する酵素であるタンパク質チロシンキナーゼは、成長因子レセプターとしても機能できる。例としては、線維芽細胞成長因子レセプターおよび神経成長因子レセプターが挙げられる。

膜結合タンパク質およびレセプター分子は、医薬品および診断薬を含む様々な産業上の用途を有している。例えば、レセプター免疫接着は、レセプター−リガンド相互作用を阻止するための治療薬として使用され得る。膜結合タンパク質は、関連するレセプター／リガンド相互作用の潜在的なペプチドまたは低分子のインヒビターのスクリーニングのためにも使用され得る。

産業界および学術界の両方で新規の天然のレセプターまたは膜結合タンパク質を同定するための努力がなされている。多くの努力は、新規のレセプターまたは膜結合タンパク質に対するコード配列を同定するための哺乳動物組換えＤＮＡライブラリーのスクリーニングに着目している。

生物学的過程および疾患の過程における分泌タンパク質および膜結合タンパク質の重要性を鑑みれば、インビボでの研究および特徴づけは、疾患または機能障害の予防、寛解または矯正において有用な治療薬および／または処置法の価値ある同定および発見を提供とし得る。この点に関して、遺伝子操作されたマウスは、免疫学、癌、神経生物学、心臓血管生物学、肥満症および他の多くのものを含むヒトの疾患に関連する生物学的過程の機能的分析のための貴重な道具であることが示されている。遺伝子ノックアウトは高度に特異的なアンタゴニストの活性をインビボで予測することにより薬物作用の生物学的機序をモデル化しているものとして捉えることができる。ノックアウトマウスは、薬物の活性をモデル化していることが示されており；特定の薬学的標的タンパク質が欠損したマウスの表現型は、対応するアンタゴニスト薬物によって引き起こされるヒトの臨床表現型を模倣し得る。遺伝子ノックアウトは、標的の作用機序、標的の主要な生理学的役割、および標的の阻害から生じ得る機序に基づいた副作用を哺乳動物において発見可能とする。このタイプの例としては、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）欠損マウス［非特許文献２］およびシクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ１）遺伝子欠損マウス［非特許文献３］が挙げられる。逆に、マウスにおいて遺伝子をノックアウトすることは、対応する標的へのアゴニスト剤の投与後にヒトにおいて観察されるものとは逆の表現型作用を有することができる。例としては、変異の結果が赤血球産生不全であるエリトロポイエチンノックアウト［非特許文献４］および変異マウスが活動亢進および応答性亢進を示すＧＡＢＡ（Ａ）−Ｒ−β３ノックアウト［非特許文献５］が挙げられる。これらの表現型は共にヒトにおけるエリトロポイエチンおよびベンゾジアゼピンの投与の作用とは逆である。マウス遺伝学を用いて確証された標的の顕著な例は、ＡＣＣ２遺伝子である。ヒトＡＣＣ２遺伝子は数年前に同定されたが、薬物開発の標的としてのＡＣＣ２への関心は、ノックアウトマウスを用いたＡＣＣ２機能解析後の最近になってようやく活気づいた。ＡＣＣ２変異マウスは、その野生型同腹仔よりも大食であるが、より多くの脂肪を燃焼し、その脂肪細胞中への脂肪の貯留は少ないことから、この酵素は、肥満症の処置における化学的拮抗作用に関する推定標的となる［非特許文献６］。

本出願において、変異した遺伝子の破壊は、ＣＮＳ／神経の撹乱もしくは障害（例えば、不安）；眼の異常および関連疾患；アテローム性動脈硬化症を含む心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；異常な代謝障害（糖尿病および血清中のトリグリセリドおよびコレステロールのレベルの上昇に伴う異脂肪血症を含む）；免疫学的障害および炎症性障害；腫瘍学的障害；骨の代謝の異常もしくは障害（例えば、関節炎、骨粗鬆症および大理石骨病）；または胚性致死などの発達疾患を含む様々な疾患状態または機能障害に関連する表現型の観察結果をもたらした。
米国特許第５，５３６，６３７号明細書Ｋｌｅｉｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（１９９６）９３：７１０８−７１１３Ｅｓｔｈｅｒ，Ｃ．Ｒ．ｅｔａｌ．，Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．，７４：９５３−９６５（１９９６）Ｌａｎｇｅｎｂａｃｈ，Ｒ．ｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ，８３：４８３−４９２（１９９５）Ｗｕ，Ｃ．Ｓ．ｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ．，８３：５９−６７（１９９６）ＤｅＬｏｒｅｙ，Ｔ．Ｍ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，１８：８５０５−８５１４（１９９８）Ａｂｕ−Ｅｌｈｅｉｇａ，Ｌ．ｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９１：２６１３−２６１６（２００１）

（発明の要旨）
Ａ．実施形態
本発明により、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列が含まれている単離された核酸分子が提供される。

１つの態様においては、単離された核酸分子には、（ａ）本明細書中に開示される全長のアミノ酸配列、本明細書中に開示されるシグナルペプチドが欠失しているアミノ酸配列、本明細書中に開示されるシグナルペプチドを有しているかもしくはシグナルペプチドが含まれていない膜貫通タンパク質の細胞外ドメイン、または本明細書中に開示される全長のアミノ酸配列の任意の他の特異的に定義された断片を有している、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするＤＮＡ分子、あるいは、（ｂ）（ａ）のＤＮＡ分子の相補物に対して、少なくとも約８０％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８１％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８２％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８３％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８４％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８５％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８６％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８７％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８８％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８９％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９０％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９１％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９２％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９３％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９４％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９５％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９６％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９７％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９８％の核酸配列同一性、そして、あるいは、少なくとも約９９％の核酸配列同一性を有しているヌクレオチド配列が含まれる。

他の態様においては、単離された核酸分子には、（ａ）本明細書中に開示される全長のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのｃＤＮＡのコード配列、本明細書中に開示されるシグナルペプチドが含まれていないＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのコード配列、本明細書中に開示されるシグナルペプチドが含まれているかまたは含まれていない膜貫通ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの細胞外ドメインのコード配列、あるいは、本明細書中に開示される全長のアミノ酸配列の任意の他の特異的に定義された断片のコード配列が含まれているＤＮＡ分子；あるいは、（ｂ）（ａ）のＤＮＡ分子の相補物に対して、少なくとも約８０％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８１％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８２％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８３％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８４％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８５％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８６％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８７％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８８％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８９％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９０％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９１％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９２％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９３％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９４％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９５％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９６％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９７％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９８％の核酸配列同一性、そして、あるいは、少なくとも約９９％の核酸配列同一性を有しているヌクレオチド配列が含まれる。

さらなる態様においては、本発明は、（ａ）本明細書中に開示されるＡＴＣＣに寄託されたヒトのタンパク質のｃＤＮＡの任意のものによってコードされる同じ成熟ポリペプチドをコードするＤＮＡ分子、または（ｂ）（ａ）のＤＮＡ分子の相補物に対して、少なくとも約８０％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８１％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８２％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８３％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８４％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８５％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８６％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８７％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８８％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８９％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９０％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９１％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９２％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９３％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９４％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９５％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９６％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９７％の核酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９８％の核酸配列同一性、そして、あるいは、少なくとも９９％の核酸配列同一性を有しているヌクレオチド配列が含まれている単離された核酸分子に関する。

本発明の別の態様によっては、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列が含まれている単離された核酸分子が提供される。これは、膜貫通ドメインが欠失しているかまたは膜貫通ドメインが不活化させられているかのいずれかであるか、あるいは、そのようなコードヌクレオチド配列に対する相補物である。この場合、そのようなポリペプチドの膜貫通ドメイン（単数または複数）は本明細書中に開示される。したがって、本明細書中に記載されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの可溶性の細胞外ドメインが意図される。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのコード配列の断片、またはその相補物が提供される。これは、例えば、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの断片をコードするハイブリダイゼーションプローブ（これは、任意選択で、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体についての結合部位が含まれているポリペプチドをコードし得る）、あるいはアンチセンスオリゴヌクレオチドプローブとしての用途が見出され得る。このような核酸フラグメントは、通常約１０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１０ヌクレオチド長、あるいは約１５ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１５ヌクレオチド長、あるいは約２０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約２０ヌクレオチド長、あるいは約３０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約３０ヌクレオチド長、あるいは約４０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約４０ヌクレオチド長、あるいは約５０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約５０ヌクレオチド長、あるいは約６０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約６０ヌクレオチド長、あるいは約７０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約７０ヌクレオチド長、あるいは約８０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約８０ヌクレオチド長、あるいは約９０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約９０ヌクレオチド長、あるいは約１００ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１００ヌクレオチド長、あるいは約１１０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１１０ヌクレオチド長、あるいは約１２０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１２０ヌクレオチド長、あるいは約１３０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１３０ヌクレオチド長、あるいは約１４０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１４０ヌクレオチド長、あるいは約１５０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１５０ヌクレオチド長、あるいは約１６０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１６０ヌクレオチド長、あるいは約１７０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１７０ヌクレオチド長、あるいは約１８０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１８０ヌクレオチド長、あるいは約１９０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１９０ヌクレオチド長、あるいは約２００ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約２００ヌクレオチド長、あるいは約２５０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約２５０ヌクレオチド長、あるいは約３００ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約３００ヌクレオチド長、あるいは約３５０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約３５０ヌクレオチド長、あるいは約４００ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約４００ヌクレオチド長、あるいは約４５０ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約４５０ヌクレオチド長、あるいは約５００ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約５００ヌクレオチド長、あるいは約６００ヌクレオチドであるかまたは少なくとも約６００ヌクレオチド長、あるいは約７００ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約７００ヌクレオチド長、あるいは約８００ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約８００ヌクレオチド長、あるいは約９００ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約９００ヌクレオチド長、およびあるいは約１０００ヌクレオチド長であるかまたは少なくとも約１０００ヌクレオチド長であり、ここで、この文脈において、用語「約」とは、参照ヌクレオチド配列の長さ±その参照配列の長さの１０％を意味する。
ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の新規の断片が、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を、多数の周知の配列アラインメントプログラムのうちの任意のものを使用して他の公知のヌクレオチド配列とアラインメントすること、そして、どのＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の断片（単数または複数）が新規であるかを決定することによって、日常的に行われている様式で決定され得ることに留意されたい。そのようなＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の全てが、本明細書において意図される。これらのヌクレオチド分子の断片によってコードされるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、または、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド断片、好ましくは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド断片もまた意図される。これらには、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体についての結合部位が含まれる。

本発明により、本明細書中で上記で同定された単離された核酸配列のうちの任意のものによってコードされる、単離されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが提供される。

特定の態様においては、本発明は、単離されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに関し、これには、本明細書中に開示される全長のアミノ酸配列、本明細書中に開示されるシグナルペプチドが欠失しているアミノ酸配列、本明細書中に開示される、シグナルペプチドを有しているかもしくはシグナルペプチドが含まれていない膜貫通タンパク質の細胞外ドメイン、あるいは、本明細書中に開示される全長のアミノ酸配列の任意の他の特異的に定義される断片を有している、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対して、少なくとも約８０％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８１％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８２％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８３％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８４％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８５％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８６％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８７％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８８％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８９％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９０％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９１％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９２％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９３％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９４％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９５％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９６％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９７％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９８％のアミノ酸配列同一性、そして、あるいは、少なくとも約９９％のアミノ酸配列同一性を有しているアミノ酸配列が含まれる。

さらなる態様において、本発明は、単離されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに関し、これには、本明細書中に開示されるＡＴＣＣに寄託されたヒトのタンパク質のｃＤＮＡの任意のものによってコードされるアミノ酸配列に対して、少なくとも約８０％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８１％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８２％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８３％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８４％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８５％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８６％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８７％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８８％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約８９％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９０％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９１％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９２％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９３％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９４％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９５％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９６％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９７％のアミノ酸配列同一性、あるいは、少なくとも約９８％のアミノ酸配列同一性、そして、あるいは、少なくとも約９９％のアミノ酸配列同一性を有しているアミノ酸配列が含まれる。

１つの態様においては、本発明は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体ポリペプチドに関し、これは、少なくとも約１０アミノ酸長であるいか、あるいは、少なくとも約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００アミノ酸長、またはそれ以上である。任意選択で、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体ポリペプチドは、自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列と比較してわずか１つの保存的アミノ酸置換を有するか、または置換は有さないか、あるいは、自然界に存在している、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列と比較して、わずか２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０個の保存的アミノ酸置換を有するか、または置換を有さないであろう。

特異的な態様においては、本発明により、Ｎ末端シグナル配列および／または開始メチオニンが含まれていない、単離されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが提供され、これは、本明細書中で先に記載されたそのようなアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列によってコードされる。それらを生産するためのプロセスもまた、本明細書中に記載される。ここでは、これらのプロセスには、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの発現に適している条件下で適切なコード核酸分子が含まれているベクターを含む宿主細胞を培養する工程、および細胞培養物からＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを回収する工程が含まれる。

本発明の別の態様により、単離されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが提供される。これは、膜貫通ドメインが欠失させられているか、または膜貫通ドメインが不活化されているかのいずれかである。それらを生産するためのプロセスもまた、本明細書中で記載される。ここでは、これらのプロセスには、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの発現に適している条件下で適切なコード核酸分子が含まれているベクターを含む宿主細胞を培養する工程、および細胞培養物からＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを回収する工程が含まれる。

本発明により、本明細書中で定義される自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストおよびアンタゴニストが提供される。具体的には、アゴニストまたはアンタゴニストは、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体、あるいは低分子である。

本発明により、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対するアゴニストまたはアンタゴニストを同定する方法が提供される。この方法には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを候補の分子と接触させる工程、および上記ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドによって媒介される生物学的活性をモニターする工程が含まれる。好ましくは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドである。

本発明により、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、あるいは、本明細書中に記載されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニスト、あるいは、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体が、担体と共に含まれている物質の組成物が提供される。必要に応じて、前記担体は、薬学的に許容可能な担体である。

本発明により、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、あるいは、本明細書中で先に記載されたそれらのアゴニストまたはアンタゴニスト、あるいは、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体の、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体に反応する状態の処置に有用な医薬品の調製のための使用が提供される。

本発明は、本明細書中に記載するポリペプチドのいずれかをコードするＤＮＡを含むベクターを提供する。任意のこのようなベクターを含む宿主細胞もまた、提供される。例としては、前記宿主細胞は、ＣＨＯ細胞、Ｅ．ｃｏｌｉまたは酵母であり得る。本明細書中に記載するポリペプチドのいずれかを生成するためのプロセスがさらに提供され、そのプロセスは、宿主細胞を所望のポリペプチドの発現に適した条件下で培養する工程およびその細胞培養物から所望のポリペプチドを回収する工程を含む。

本発明は、異種性のポリペプチドまたはアミノ酸配列に融合された、本明細書中に記載するポリペプチドのいずれかを含むキメラ分子を提供する。そのようなキメラ分子の例は、エピトープタグ配列または免疫グロブリンのＦｃ領域に融合された、本明細書中に記載するポリペプチドのいずれかを含む。

本発明は、好ましくは、上記または下記のポリペプチドのいずれかに特異的に結合する抗体を提供する。必要に応じて、その抗体は、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、抗体フラグメントまたは一本鎖抗体である。

本発明は、ゲノムおよびｃＤＮＡヌクレオチド配列を単離するため、関連遺伝子の発現を測定または検出するために有用であり得るオリゴヌクレオチドプローブまたはアンチセンスプローブとしてのオリゴヌクレオチドプローブを提供し、ここで、それらのプローブは、上記または下記のヌクレオチド配列のいずれかから得られることがある。好ましいプローブの長さは、本明細書中に記載する。

本発明により、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型を同定する方法も提供される。この方法には、以下の工程が含まれる：
（ａ）そのゲノムにＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている非ヒトトランスジェニックジェニック動物を提供する工程；
（ｂ）前記非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定する工程；および
（ｃ）測定された生理学的特徴を性別一致野生型動物の生理学的特徴と比較する工程。ここでは、その野生型動物の生理学的特徴と異なる非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を、非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子の破壊から生じる表現型と同定する。１つの態様において、非ヒトトランスジェニック動物は、哺乳動物である。別の態様において、前記哺乳動物は、げっ歯類である。さらに別の態様において、前記哺乳動物は、ラットまたはマウスである。１つの態様においては、非ヒトトランスジェニック動物は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊についてヘテロ接合性である。別の態様において、性別一致野生型同腹仔と比較したときの非ヒトトランスジェニック動物によって示される表現型は、以下：神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常のうちの少なくとも１つである。

なおも別の態様において、前記神経障害は、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の増大である。なおも別の態様において、前記神経障害は、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の低減である。なおも別の態様において、前記神経障害は、ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズムである。なおも別の態様において、前記神経障害は、反転スクリーン試験中の運動協調性の増大である。なおも別の態様において、前記神経障害は、反転スクリーン試験中の障害性の運動協調性である。なおも別の態様において、前記神経障害としては、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害が挙げられる。そのような神経障害は、「不安障害」と定義されるカテゴリーを含み、その「不安障害」としては、軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、特段に特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴ったパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、社会不安、自閉症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、一極性障害、Ｉ型またはＩＩ型双極性障害、特段に特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物質誘導性気分障害、認知機能の増強、認知機能の低下（アルツハイマー病、脳卒中または脳の外傷に関連するものが挙げられるがこれらに限定されない）、疾患または損傷から生じる発作（癲癇、学習障害（ｌｅａｒｎｉｎｇｄｉｓｏｒｄｅｒ）／障害（ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ）、脳性麻痺が挙げられるがこれらに限定されない）が挙げられるがこれらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害（以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性（ｈｉｓｔｒｏｎｉｃ）、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない）に適用し得る。

別の態様において、前記眼の異常は、網膜の異常である。さらに別の態様において、前記眼の異常は、視覚問題または失明と一致する。なおも別の態様において、前記網膜の異常は、色素性網膜炎と一致するか、または網膜変性症または網膜の形成異常を特徴とする。

さらに別の態様において、前記網膜の異常は、網膜の形成異常、未熟児網膜症を含む様々な網膜症、水晶体後線維増殖症、血管新生緑内障、加齢性黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、隅角血管新生（ルベオーシス）、眼球の血管新生性疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺肥大（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織の移植、網膜動脈閉塞もしくは閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性症、色素性網膜炎、黄斑ジストロフィー、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、脳回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルヴェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、シニアローケン症候群、バルデー−ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレーム症候群、コケーン症候群、先天性脊椎・骨端異形成症（ｄｙｓｐｌａｉｓａｓｐｏｎｄｙｌｏｅｐｉｐｈｙｓａｒｉａｃｏｎｇｅｎｔｉａ）、フリン−エアード症候群、フリートライヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルク病（Ａｌｂｅｒｓ−Ｓｃｈｎｏｂｅｒｇｄｉｓｅａｓｅ）、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジール症候群（Ａｌａｇｉｌｅｓｙｎｄｒｏｍｅ）、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮症、ピエール・マリー症候群（Ｐｉｅｒｒｅ−Ｍａｒｉｅｄｕｎｓｄｒｏｍｅ）、スティックラー症候群、カロチン血症（ｃａｒｏｔｉｎｅｍｅｉａ）、シスチン蓄積症、ウォルフラム症候群、バッセン−コルンツヴァイク症候群、無βリポタンパク質血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖体沈着症、ホモシスチン尿症またはマンノシドーシスと一致する。

さらに別の態様において、前記眼の異常は、白内障である。さらになおも別の態様において、前記白内障は、全身性疾患（例えば、ヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群（Ｈａｌｌｅｒｍａｎ−Ｓｔｒｅｉｆｆｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、トリソミー（Ｔｒｉｓｍｏｙ）１３−１５、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、上皮小体機能低下症（ｈｙｐｏｐａｒａｔｈｒｏｉｄｉｓｍ）またはコンラーディ症候群）である。

さらに別の態様において、前記発達異常は、胚性致死または生存能低下を含む。

さらになおも別の態様において、前記心臓血管、内皮または血管形成の障害は、動脈疾患（例えば、真性糖尿病；乳頭浮腫；視神経萎縮；アテローム性動脈硬化症；アンギナ；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心臓肥大および鬱血性心不全などの心不全；高血圧症；炎症性血管炎；レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤ならびに動脈再狭窄）；静脈およびリンパの障害（例えば、血栓静脈炎、リンパ管炎およびリンパ浮腫）；末梢血管疾患；癌（例えば、血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細管および海綿状）、グロムス腫瘍、毛細管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管外皮腫、カポジ肉腫、リンパ管腫およびリンパ管肉腫）；腫瘍血管新生；外傷（例えば、創傷、熱傷および他の組織の傷害）、移植片固定、瘢痕；虚血再灌流傷害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患または骨粗鬆症である。

さらに別の態様において、前記免疫障害は、全身性エリテマトーデス（ｓｙｓｔｅｍｉｃｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｉｓ）；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節症；全身硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫媒介性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；真性糖尿病；免疫媒介性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；中枢および末梢神経系の脱髄疾患（例えば、多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギラン・バレー症候群および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシー）；肝胆疾患（例えば、感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の非肝向性（ｎｏｎ−ｈｅｐａｔｏｔｒｏｐｉｃ）のウイルスによる肝炎）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎および硬化性胆管炎）；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）；グルテン過敏性腸症およびホイップル病；水疱性疾患、多形性紅斑および接触性皮膚炎を含む自己免疫性または免疫媒介性の皮膚疾患、乾癬；アレルギー性疾患（例えば、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹）；肺の免疫学的疾患（例えば、好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎）；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含む移植関連疾患と一致する。

さらに別の態様において、前記骨代謝の異常または障害は、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症または大理石骨病である。

別の態様において、前記非ヒトトランスジェニック動物は、性別一致野生型同腹仔と比較して、以下の生理学的特徴：オープンフィールド試験中の不安様応答の増大；オープンフィールド試験中の不安の低減；オープンフィールド試験中の自発運動活性の低下；ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム（明期中の活性の低下）；歩行回数の減少を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；概日リズムを有しない機能低下；歩行回数の増加を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；ストレス誘導性高体温の増大；ストレス誘導性高体温の低下；反転スクリーン試験中の運動協調性の低下；尾懸垂における不動の増加（抑鬱様応答の増大）；尾懸垂試験中の抑鬱様応答の増大；尾懸垂試験中の不動性の増大または抑鬱様応答の減少；プレパルス抑制試験中の驚愕応答の低下；難聴を示唆する無驚愕応答；もしくは難聴；感覚運動ゲーティング／注意の低下を伴うプレパルス抑制の低下；ホットプレート試験における反応性の低下；ホットプレート試験における反応までの時間の減少；眼科学的異常；平均動静脈比の増大；瞳孔拡大薬である塩酸シクロペントレートに対する抵抗性；斜視細目；白斑を伴う斜視細目；白内障；網膜変性症；視力障害；基礎体温の低下；心拍数の減少；平均収縮期血圧の上昇；インスリン感度の増大；平均絶食時血清中グルコースレベルの上昇；平均血清中グルコースレベルの低下；平均血清中コレステロールレベルの上昇；平均血清中コレステロールレベルの低下；平均血清中トリグリセリドレベルの上昇；平均血清中トリグリセリドレベルの低下；耐糖能の増大；耐糖能障害；平均血清中インスリンレベルの低下；平均血清中カルシウムの上昇；ウロビリノーゲンの上昇、顕著な脂肪血；アルブミン、アラニンアミノトランスフェラーゼ、リン、およびカリウムレベルの上昇；平均血清中アルカリホスファターゼレベルの上昇；血中尿素窒素の上昇；顆粒球の割合の増大；全白血球（ＷＢＣ）数の増加；平均絶対好中球数の増大；好中球減少症；絶対リンパ球数の増加；絶対単球数の増加；脾臓中の単球およびＤＣ（ＣＤ１１ｂ＋、ＣＤ１１ｂ＋ｃ＋）の増加；平均血小板数の増加；リンパ節中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の上昇；好中球数の減少；ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の減少；平均赤血球（ＲＢＣ）数、ヘモグロビン濃度、およびヘマトクリットの減少；平均の赤血球分布幅の増大；平均小体容積および平均小体へのグロビンの減少；平均血小板数の減少および血小板の容積の増大；リンパ節中のＢ細胞数の増加；パイアー斑におけるＢ細胞のサブタイプの増加；リンパ節中のＢ細胞のパーセンテージの上昇；ＣＤ２５＋細胞の増加；胸腺ＤＮの増加、ＤＰＴ細胞の減少；リンパ節中のＣＤ１９＋細胞の増加；骨髄細胞中のＣＤ１１７の増加；ＣＤ４細胞の平均パーセンテージの上昇；ＣＤ８細胞の増加およびＢ細胞中での減少；腹腔洗浄におけるＣＤ１１ｂ＋細胞のパーセンテージの上昇；Ｂ２２０＋ＣＤ１１ｂＬｏｗＣＤ２３−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ＬｏｗおよびＣＤ１１ｂ−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＣＤ１１ｂ−ＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの低下；骨髄中のＢ２２０−ＣＤ４３Ｈｉ細胞のパーセンテージの上昇；脾臓中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ−細胞の増加；ＣＤ４およびＣＤ８細胞のＣＤ６２ｈｉ、ＣＤ４４ｉｎｔサブセットの増加；末梢ＣＤ１１７細胞の増加；パイアー斑の中のＴｃＲｂｅｔａ／ＣＤ３８の増加、胸腺中のＴｃＲｂｅｔａ＋細胞のパーセンテージの上昇；リンパ節中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ＋のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＨｉＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＭｅｄＣＤ２３−細胞のパーセンテージの低下；脾臓中のＣＤ６２ＬＨｉＣＤ４４ＤｉｍＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞のパーセンテージの低下；Ｂ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの低下；リンパ節および脾臓中のＣＤ４およびＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下；メモリーＴ細胞の増加（ＣＤ６２ＬｌｏＣＤ４４ｈｉの増加）；Ｔ細胞：Ｂ細胞比の低下；ナイーブＴ細胞の減少；腹腔洗浄中のＣＤ１１７細胞の減少；ＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下、卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ１応答の増大；卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ２ａ応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する平均血清ＩＬ−６応答の増大；ＬＰＳ負荷に対するＴＮＦα応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する血清ＭＣＰ−１応答の増大；平均血清中ＩｇＭレベルの増大；血清ＩｇＡの増加；平均血清ＩｇＧ１の増大；平均血清ＩｇＧ３の増大；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ１応答の低下；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ２ａ応答の低下；平均血清ＩｇＡレベルの低下；血清ＩｇＧ２ａレベルの低下；血清ＩｇＧ３レベルの低下；皮膚線維芽細胞増殖速度の増大；皮膚線維芽細胞増殖速度の低下；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの増加；平均体重の増加；平均体長の増大；総組織質量（ＴＴＭ）の増加；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の増加；椎骨骨梁の平均
体積、平均数および平均結合性密度の増加；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の低減；総組織質量（ＴＴＭ）の減少；除脂肪体重（ＬＢＭ）の減少；大腿骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；椎骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；全身、大腿、および脊椎の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；骨塩量（ＢＭＣ）の減少；骨塩密度指標の減少；体積測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）の減少；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の減少；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の減少；大理石骨病；骨粗鬆症；様々な組織における慢性炎症；両側水腎症（中程度から重症）および炎症；「洋ナシ型の腹部（ｐｅａｒｓｈａｐｅｄａｂｄｏｍｅｎ）」、左右対称に腫大した腎臓（多嚢胞性の腎疾患を示唆する）；コルチ器官の変性；肝細胞機能不全障害；胆道閉塞；組織球の浸潤を特徴とする肝脾腫大症；小腸、リンパ節、および脾臓中の組織球増殖症；脾腫、リンパ節腫脹症、およびリンパ節腫脹症；咽頭扁桃腺および扁桃腺の過形成；軽度〜中程度の過剰な延髄造血（ｍｉｌｄ−ｍｏｄｅｒａｔｅｅｘｔｒａｍｅｄｕｌｌａｒｙｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｓｉｓ）；ホモ接合性マウスは小さく、乾燥しており、そして少ない皮下脂肪の蓄積を示す；脂肪欠乏症；潰瘍性大腸炎；基底膜上の内蝸牛有毛細胞および外蝸牛有毛細胞細胞の両方の完全な欠失を特徴とする、内耳の感覚蝸牛有毛細胞のびまん性の顕著な変性；胃粘膜過形成および慢性的な炎症；胃重量の増加；精巣の精子形成障害；精巣上体の精液過少症および精子欠損；男性不妊症；リソソーム蓄積症；貧血；成長遅延；生存能力の低下；リンパ球の減少および脂肪欠乏症を伴う周産期致死性；ホモ接合性胚性致死；ならびにヘテロ接合性胚性致死のうちの少なくとも１つを示す。

本発明によってはまた、そのゲノムにＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている、非ヒトトランスジェニック動物に由来する単離された細胞が提供される。１つの態様において、前記単離された細胞は、マウス細胞である。なおも別の態様において、前記マウス細胞は、胚性幹細胞である。さらに別の態様において、前記単離された細胞は、性別一致野生型同腹仔と比較して、以下の表現型：神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常のうちの少なくとも１つを示す非ヒトトランスジェニック動物から得られる。本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型を調節する薬剤を同定する方法も提供される。この方法には、以下の工程が含まれる：
（ａ）そのゲノムにＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている非ヒトトランスジェニック動物を提供する工程；
（ｂ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定する工程；
（ｃ）（ｂ）の測定された生理学的特徴を性別一致野生型動物の生理学的特徴と比較する工程であって、ここで、前記野生型動物の生理学的特徴と異なる前記非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を、前記非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子の破壊から生じる表現型と同定する、工程；
（ｄ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物に試験薬剤を投与する工程；および
（ｅ）前記試験薬剤が、前記非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊と関連する同定された表現型を調節するか否かを判定する工程。

１つの態様において、前記遺伝子の破壊に関連する表現型は、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常を含む。

なおも別の態様において、前記神経障害は、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の増大である。なおも別の態様において、前記神経障害は、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の低減である。なおも別の態様において、前記神経障害は、ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズムである。なおも別の態様において、前記神経障害は、反転スクリーン試験中の運動協調性の増大である。なおも別の態様において、前記神経障害は、反転スクリーン試験中の障害性の運動協調性である。なおも別の態様において、前記神経障害としては、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害が挙げられる。そのような神経障害は、「不安障害」と定義されるカテゴリーを含み、その「不安障害」としては、軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、特段に特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴ったパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、社会不安、自閉症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、一極性障害、Ｉ型またはＩＩ型双極性障害、特段に特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物質誘導性気分障害、認知機能の増強、認知機能の低下（アルツハイマー病、脳卒中または脳の外傷に関連するものが挙げられるがこれらに限定されない）、疾患または損傷から生じる発作（癲癇、学習障害／障害、脳性麻痺が挙げられるがこれらに限定されない）が挙げられるがこれらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害（以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない）に適用し得る。

なおも別の態様において、前記眼の異常は、網膜の異常である。さらに別の態様において、前記眼の異常は、視覚問題または失明と一致する。なおも別の態様において、前記網膜の異常は、色素性網膜炎と一致するか、または網膜変性症または網膜の形成異常を特徴とする。

さらに別の態様において、前記網膜の異常は、網膜の形成異常、未熟児網膜症を含む様々な網膜症、水晶体後線維増殖症、血管新生緑内障、加齢性黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、隅角血管新生（ルベオーシス）、眼球の血管新生性疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺肥大（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織の移植、網膜動脈閉塞もしくは閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性症、色素性網膜炎、黄斑ジストロフィー、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、脳回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルヴェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、シニアローケン症候群、バルデー−ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレーム症候群、コケーン症候群、先天性脊椎・骨端異形成症、フリン−エアード症候群、フリートライヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルク病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジール症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮症、ピエール・マリー症候群、スティックラー症候群、カロチン血症、シスチン蓄積症、ウォルフラム症候群、バッセン−コルンツヴァイク症候群、無βリポタンパク質血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖体沈着症、ホモシスチン尿症またはマンノシドーシスと一致する。

さらに別の態様において、前記眼の異常は、白内障である。さらになおも別の態様において、前記白内障は、全身性疾患（例えば、ヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、トリソミー１３−１５、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、上皮小体機能低下症またはコンラーディ症候群）である。

さらに別の態様において、前記心臓血管、内皮または血管形成の障害は、動脈疾患（例えば、真性糖尿病；乳頭浮腫；視神経萎縮；アテローム性動脈硬化症；アンギナ；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心臓肥大および鬱血性心不全などの心不全；高血圧症；炎症性血管炎；レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤ならびに動脈再狭窄）；静脈およびリンパの障害（例えば、血栓静脈炎、リンパ管炎およびリンパ浮腫）；末梢血管疾患；癌（例えば、血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細管および海綿状）、グロムス腫瘍、毛細管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管外皮腫、カポジ肉腫、リンパ管腫およびリンパ管肉腫）；腫瘍血管新生；外傷（例えば、創傷、熱傷および他の組織の傷害）、移植片固定、瘢痕；虚血再灌流傷害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患または骨粗鬆症である。

さらに別の態様において、前記免疫障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節症；全身硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫媒介性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；真性糖尿病；免疫媒介性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；中枢および末梢神経系の脱髄疾患（例えば、多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギラン・バレー症候群および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシー）；肝胆疾患（例えば、感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の非肝向性のウイルスによる肝炎）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎および硬化性胆管炎）；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）；グルテン過敏性腸症およびホイップル病；水疱性疾患、多形性紅斑および接触性皮膚炎を含む自己免疫性または免疫媒介性の皮膚疾患、乾癬；アレルギー性疾患（例えば、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹）；肺の免疫学的疾患（例えば、好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎）；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含む移植関連疾患と一致する。

別の態様において、前記非ヒトトランスジェニック動物は、性別一致野生型同腹仔と比較して、以下の生理学的特徴：オープンフィールド試験中の不安様応答の増大；オープンフィールド試験中の不安の低減；オープンフィールド試験中の自発運動活性の低下；ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム（明期中の活性の低下）；歩行回数の減少を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；概日リズムを有しない機能低下；歩行回数の増加を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；ストレス誘導性高体温の増大；ストレス誘導性高体温の低下；反転スクリーン試験中の運動協調性の低下；尾懸垂における不動の増加（抑鬱様応答の増大）；尾懸垂試験中の抑鬱様応答の増大；尾懸垂試験中の不動性の増大または抑鬱様応答の減少；プレパルス抑制試験中の驚愕応答の低下；難聴を示唆する無驚愕応答；もしくは難聴；感覚運動ゲーティング／注意の低下を伴うプレパルス抑制の低下；ホットプレート試験における反応性の低下；ホットプレート試験における反応までの時間の減少；眼科学的異常；平均動静脈比の増大；瞳孔拡大薬である塩酸シクロペントレートに対する抵抗性；斜視細目；白斑を伴う斜視細目；白内障；網膜変性症；視力障害；基礎体温の低下；心拍数の減少；平均収縮期血圧の上昇；インスリン感度の増大；平均絶食時血清中グルコースレベルの上昇；平均血清中グルコースレベルの低下；平均血清中コレステロールレベルの上昇；平均血清中コレステロールレベルの低下；平均血清中トリグリセリドレベルの上昇；平均血清中トリグリセリドレベルの低下；耐糖能の増大；耐糖能障害；平均血清中インスリンレベルの低下；平均血清中カルシウムの上昇；ウロビリノーゲンの上昇、顕著な脂肪血；アルブミン、アラニンアミノトランスフェラーゼ、リン、およびカリウムレベルの上昇；平均血清中アルカリホスファターゼレベルの上昇；血中尿素窒素の上昇；顆粒球の割合の増大；全白血球（ＷＢＣ）数の増加；平均絶対好中球数の増大；好中球減少症；絶対リンパ球数の増加；絶対単球数の増加；脾臓中の単球およびＤＣ（ＣＤ１１ｂ＋、ＣＤ１１ｂ＋ｃ＋）の増加；平均血小板数の増加；リンパ節中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の上昇；好中球数の減少；ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の減少；平均赤血球（ＲＢＣ）数、ヘモグロビン濃度、およびヘマトクリットの減少；平均の赤血球分布幅の増大；平均小体容積および平均小体へのグロビンの減少；平均血小板数の減少および血小板の容積の増大；リンパ節中のＢ細胞数の増加；パイアー斑におけるＢ細胞のサブタイプの増加；リンパ節中のＢ細胞のパーセンテージの上昇；ＣＤ２５＋細胞の増加；胸腺ＤＮの増加、ＤＰＴ細胞の減少；リンパ節中のＣＤ１９＋細胞の増加；骨髄細胞中のＣＤ１１７の増加；ＣＤ４細胞の平均パーセンテージの上昇；ＣＤ８細胞の増加およびＢ細胞中での減少；腹腔洗浄におけるＣＤ１１ｂ＋細胞のパーセンテージの上昇；Ｂ２２０＋ＣＤ１１ｂＬｏｗＣＤ２３−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ＬｏｗおよびＣＤ１１ｂ−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＣＤ１１ｂ−ＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの低下；骨髄中のＢ２２０−ＣＤ４３Ｈｉ細胞のパーセンテージの上昇；脾臓中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ−細胞の増加；ＣＤ４およびＣＤ８細胞のＣＤ６２ｈｉ、ＣＤ４４ｉｎｔサブセットの増加；末梢ＣＤ１１７細胞の増加；パイアー斑の中のＴｃＲｂｅｔａ／ＣＤ３８の増加、胸腺中のＴｃＲｂｅｔａ＋細胞のパーセンテージの上昇；リンパ節中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ＋のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＨｉＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＭｅｄＣＤ２３−細胞のパーセンテージの低下；脾臓中のＣＤ６２ＬＨｉＣＤ４４ＤｉｍＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞のパーセンテージの低下；Ｂ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの低下；リンパ節および脾臓中のＣＤ４およびＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下；メモリーＴ細胞の増加（ＣＤ６２ＬｌｏＣＤ４４ｈｉの増加）；Ｔ細胞：Ｂ細胞比の低下；ナイーブＴ細胞の減少；腹腔洗浄中のＣＤ１１７細胞の減少；ＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下、卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ１応答の増大；卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ２ａ応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する平均血清ＩＬ−６応答の増大；ＬＰＳ負荷に対するＴＮＦα応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する血清ＭＣＰ−１応答の増大；平均血清中ＩｇＭレベルの増大；血清ＩｇＡの増加；平均血清ＩｇＧ１の増大；平均血清ＩｇＧ３の増大；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ１応答の低下；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ２ａ応答の低下；平均血清ＩｇＡレベルの低下；血清ＩｇＧ２ａレベルの低下；血清ＩｇＧ３レベルの低下；皮膚線維芽細胞増殖速度の増大；皮膚線維芽細胞増殖速度の低下；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの増加；平均体重の増加；平均体長の増大；総組織質量（ＴＴＭ）の増加；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の増加；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の増加；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の低減；総組織質量（ＴＴＭ）の減少；除脂肪体重（ＬＢＭ）の減少；大腿骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；椎骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；全身、大腿、および脊椎の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；骨塩量（ＢＭＣ）の減少；骨塩密度指標の減少；体積測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）の減少；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の減少；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の減少；大理石骨病；骨粗鬆症；様々な組織における慢性炎症；両側水腎症（中程度から重症）および炎症；「洋ナシ型の腹部」、左右対称に腫大した腎臓（多嚢胞性の腎疾患を示唆する）；コルチ器官の変性；肝細胞機能不全障害；胆道閉塞；組織球の浸潤を特徴とする肝脾腫大症；小腸、リンパ節、および脾臓中の組織球増殖症；脾腫、リンパ節腫脹症、およびリンパ節腫脹症；咽頭扁桃腺および扁桃腺の過形成；軽度〜中程度の過剰な延髄造血；ホモ接合性マウスは小さく、乾燥しており、そして少ない皮下脂肪の蓄積を示す；脂肪欠乏症；潰瘍性大腸炎；基底膜上の内蝸牛有毛細胞および外蝸牛有毛細胞細胞の両方の完全な欠失を特徴とする、内耳の感覚蝸牛有毛細胞のびまん性の顕著な変性；胃粘膜過形成および慢性的な炎症；胃重量の増加；精巣の精子形成障害；精巣上体の精液過少症および精子欠損；男性不妊症；リソソーム蓄積症；貧血；成長遅延；生存能力の低下；リンパ球の減少および脂肪欠乏症を伴う周産期致死性；ホモ接合性胚性致死；ならびにヘテロ接合性胚性致死のうちの少なくとも１つを示す。

本発明はまた、遺伝子の破壊と関連する表現型を調節する薬剤を提供する。１つの態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、アゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。さらに別の態様においては、アンタゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する生理学的特徴を調節する薬剤を同定する方法も提供される。この方法には、以下の工程が含まれる：
（ａ）そのゲノムにＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている非ヒトトランスジェニック動物を提供する工程；
（ｂ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物によって示される生理学的特徴を測定する工程；
（ｃ）（ｂ）の測定された生理学的特徴を性別一致野生型動物の生理学的特徴と比較する工程であって、ここで、前記野生型動物によって示される生理学的特徴と異なる前記非ヒトトランスジェニック動物によって示される生理学的特徴を、遺伝子の破壊に関連する生理学的特徴と同定する、工程；
（ｄ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物に試験薬剤を投与する工程；および
（ｅ）遺伝子破壊と関連する前記生理学的特徴が調節されているか否かを判定する工程。

１つの態様において、前記非ヒトトランスジェニック動物は、性別一致野生型同腹仔と比較して、以下の生理学的特徴のうちの少なくとも１つを示す。

本発明はまた、遺伝子の破壊に関連する生理学的特徴を調節する薬剤を提供する。１つの態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型のアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、アゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。さらに別の態様においては、アンタゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する行動を調節する薬剤を同定する方法も提供される。この方法には、以下の工程が含まれる：
（ａ）そのゲノムにＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている非ヒトトランスジェニック動物を提供する工程；
（ｂ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物によって示される行動を観察する工程；
（ｃ）（ｂ）の観察された行動を性別一致野生型動物の行動と比較する工程であって、ここで、前記野生型動物によって示される観察された行動と異なる、前記非ヒトトランスジェニック動物によって示される観察された行動を、遺伝子の破壊に関連する行動と同定する、工程；
（ｄ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物に試験薬剤を投与する工程；および
（ｅ）前記薬剤が、遺伝子破壊と関連する前記行動を調節するか否かを判定する工程。

１つの態様において、前記観察された行動は、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の増大である。なおも別の態様において、前記観察された行動は、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の低減である。なおも別の態様において、前記観察された行動は、ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズムである。なおも別の態様において、前記観察された行動は、反転スクリーン試験中の運動協調性の増大である。なおも別の態様において、前記観察された行動は、反転スクリーン試験中の障害性の運動協調性である。なおも別の態様において、前記観察された行動としては、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害が挙げられる。そのような神経障害は、「不安障害」と定義されるカテゴリーを含み、その「不安障害」としては、軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、特段に特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴ったパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、社会不安、自閉症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、一極性障害、Ｉ型またはＩＩ型双極性障害、特段に特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物質誘導性気分障害、認知機能の増強、認知機能の低下（アルツハイマー病、脳卒中または脳の外傷に関連するものが挙げられるがこれらに限定されない）、疾患または損傷から生じる発作（癲癇、学習障害／障害、脳性麻痺が挙げられるがこれらに限定されない）が挙げられるがこれらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害（以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない）に適用し得る。

本発明はまた、遺伝子の破壊に関連する行動を調節する薬剤を提供する。１つの態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型のアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、アゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。なお別の態様においては、アンタゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常を寛解するかあるいは調節する薬剤を同定する方法も提供される。この方法には、以下の工程が含まれる：
（ａ）そのゲノムにＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている非ヒトトランスジェニック動物を提供する工程；
（ｂ）前記非ヒトトランスジェニック動物に試験薬剤を投与する工程；および
（ｃ）前記試験薬剤が、前記非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊に関連する、前記神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常を寛解または調節するか否かを判定する工程。

なおも別の態様において、前記心臓血管、内皮または血管形成の障害は、動脈疾患（例えば、真性糖尿病；乳頭浮腫；視神経萎縮；アテローム性動脈硬化症；アンギナ；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心臓肥大および鬱血性心不全などの心不全；高血圧症；炎症性血管炎；レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤ならびに動脈再狭窄）；静脈およびリンパの障害（例えば、血栓静脈炎、リンパ管炎およびリンパ浮腫）；末梢血管疾患；癌（例えば、血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細管および海綿状）、グロムス腫瘍、毛細管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管外皮腫、カポジ肉腫、リンパ管腫およびリンパ管肉腫）；腫瘍血管新生；外傷（例えば、創傷、熱傷および他の組織の傷害）、移植片固定、瘢痕；虚血再灌流傷害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患または骨粗鬆症である。

さらになおも別の態様において、前記免疫障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節症；全身硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫媒介性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；真性糖尿病；免疫媒介性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；中枢および末梢神経系の脱髄疾患（例えば、多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギラン・バレー症候群および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシー）；肝胆疾患（例えば、感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の非肝向性のウイルスによる肝炎）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎および硬化性胆管炎）；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）；グルテン過敏性腸症およびホイップル病；水疱性疾患、多形性紅斑および接触性皮膚炎を含む自己免疫性または免疫媒介性の皮膚疾患、乾癬；アレルギー性疾患（例えば、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹）；肺の免疫学的疾患（例えば、好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎）；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含む移植関連疾患と一致する。

なおも別の態様において、前記骨代謝の異常または障害は、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症または大理石骨病である。

別の態様において、前記非ヒトトランスジェニック動物は、性別一致野生型同腹仔と比較して、以下の生理学的特徴：オープンフィールド試験中の不安様応答の増大；オープンフィールド試験中の不安の低減；オープンフィールド試験中の自発運動活性の低下；ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム（明期中の活性の低下）；歩行回数の減少を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；概日リズムを有しない機能低下；歩行回数の増加を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；ストレス誘導性高体温の増大；ストレス誘導性高体温の低下；反転スクリーン試験中の運動協調性の低下；尾懸垂における不動の増加（抑鬱様応答の増大）；尾懸垂試験中の抑鬱様応答の増大；尾懸垂試験中の不動性の増大または抑鬱様応答の減少；プレパルス抑制試験中の驚愕応答の低下；難聴を示唆する無驚愕応答；もしくは難聴；感覚運動ゲーティング／注意の低下を伴うプレパルス抑制の低下；ホットプレート試験における反応性の低下；ホットプレート試験における反応までの時間の減少；眼科学的異常；平均動静脈比の増大；瞳孔拡大薬である塩酸シクロペントレートに対する抵抗性；斜視細目；白斑を伴う斜視細目；白内障；網膜変性症；視力障害；基礎体温の低下；心拍数の減少；平均収縮期血圧の上昇；インスリン感度の増大；平均絶食時血清中グルコースレベルの上昇；平均血清中グルコースレベルの低下；平均血清中コレステロールレベルの上昇；平均血清中コレステロールレベルの低下；平均血清中トリグリセリドレベルの上昇；平均血清中トリグリセリドレベルの低下；耐糖能の増大；耐糖能障害；平均血清中インスリンレベルの低下；平均血清中カルシウムの上昇；ウロビリノーゲンの上昇、顕著な脂肪血；アルブミン、アラニンアミノトランスフェラーゼ、リン、およびカリウムレベルの上昇；平均血清中アルカリホスファターゼレベルの上昇；血中尿素窒素の上昇；顆粒球の割合の増大；全白血球（ＷＢＣ）数の増加；平均絶対好中球数の増大；好中球減少症；絶対リンパ球数の増加；絶対単球数の増加；脾臓中の単球およびＤＣ（ＣＤ１１ｂ＋、ＣＤ１１ｂ＋ｃ＋）の増加；平均血小板数の増加；リンパ節中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の上昇；好中球数の減少；ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の減少；平均赤血球（ＲＢＣ）数、ヘモグロビン濃度、およびヘマトクリットの減少；平均の赤血球分布幅の増大；平均小体容積および平均小体へのグロビンの減少；平均血小板数の減少および血小板の容積の増大；リンパ節中のＢ細胞数の増加；パイアー斑におけるＢ細胞のサブタイプの増加；リンパ節中のＢ細胞のパーセンテージの上昇；ＣＤ２５＋細胞の増加；胸腺ＤＮの増加、ＤＰＴ細胞の減少；リンパ節中のＣＤ１９＋細胞の増加；骨髄細胞中のＣＤ１１７の増加；ＣＤ４細胞の平均パーセンテージの上昇；ＣＤ８細胞の増加およびＢ細胞中での減少；腹腔洗浄におけるＣＤ１１ｂ＋細胞のパーセンテージの上昇；Ｂ２２０＋ＣＤ１１ｂＬｏｗＣＤ２３−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ＬｏｗおよびＣＤ１１ｂ−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２
２０＋ＣＤ１１ｂ−ＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの低下；骨髄中のＢ２２０−ＣＤ４３Ｈｉ細胞のパーセンテージの上昇；脾臓中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ−細胞の増加；ＣＤ４およびＣＤ８細胞のＣＤ６２ｈｉ、ＣＤ４４ｉｎｔサブセットの増加；末梢ＣＤ１１７細胞の増加；パイアー斑の中のＴｃＲｂｅｔａ／ＣＤ３８の増加、胸腺中のＴｃＲｂｅｔａ＋細胞のパーセンテージの上昇；リンパ節中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ＋のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＨｉＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＭｅｄＣＤ２３−細胞のパーセンテージの低下；脾臓中のＣＤ６２ＬＨｉＣＤ４４ＤｉｍＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞のパーセンテージの低下；Ｂ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの低下；リンパ節および脾臓中のＣＤ４およびＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下；メモリーＴ細胞の増加（ＣＤ６２ＬｌｏＣＤ４４ｈｉの増加）；Ｔ細胞：Ｂ細胞比の低下；ナイーブＴ細胞の減少；腹腔洗浄中のＣＤ１１７細胞の減少；ＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下、卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ１応答の増大；卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ２ａ応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する平均血清ＩＬ−６応答の増大；ＬＰＳ負荷に対するＴＮＦα応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する血清ＭＣＰ−１応答の増大；平均血清中ＩｇＭレベルの増大；血清ＩｇＡの増加；平均血清ＩｇＧ１の増大；平均血清ＩｇＧ３の増大；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ１応答の低下；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ２ａ応答の低下；平均血清ＩｇＡレベルの低下；血清ＩｇＧ２ａレベルの低下；血清ＩｇＧ３レベルの低下；皮膚線維芽細胞増殖速度の増大；皮膚線維芽細胞増殖速度の低下；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの増加；平均体重の増加；平均体長の増大；総組織質量（ＴＴＭ）の増加；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の増加；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の増加；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の低減；総組織質量（ＴＴＭ）の減少；除脂肪体重（ＬＢＭ）の減少；大腿骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；椎骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；全身、大腿、および脊椎の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；骨塩量（ＢＭＣ）の減少；骨塩密度指標の減少；体積測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）の減少；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の減少；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の減少；大理石骨病；骨粗鬆症；様々な組織における慢性炎症；両側水腎症（中程度から重症）および炎症；「洋ナシ型の腹部」、左右対称に腫大した腎臓（多嚢胞性の腎疾患を示唆する）；コルチ器官の変性；肝細胞機能不全障害；胆道閉塞；組織球の浸潤を特徴とする肝脾腫大症；小腸、リンパ節、および脾臓中の組織球増殖症；脾腫、リンパ節腫脹症、およびリンパ節腫脹症；咽頭扁桃腺および扁桃腺の過形成；軽度〜中程度の過剰な延髄造血；ホモ接合性マウスは小さく、乾燥しており、そして少ない皮下脂肪の蓄積を示す；脂肪欠乏症；潰瘍性大腸炎；基底膜上の内蝸牛有毛細胞および外蝸牛有毛細胞細胞の両方の完全な欠失を特徴とする、内耳の感覚蝸牛有毛細胞のびまん性の顕著な変性；胃粘膜過形成および慢性的な炎症；胃重量の増加；精巣の精子形成障害；精巣上体の精液過少症および精子欠損；男性不妊症；リソソーム蓄積症；貧血；成長遅延；生存能力の低下；リンパ球の減少および脂肪欠乏症を伴う周産期致死性；ホモ接合性胚性致死；ならびにヘテロ接合性胚性致死のうちの少なくとも１つを示す。

本発明はまた、遺伝子の破壊に関連する、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常を寛解または調節する薬剤を提供する。１つの態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型のアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、アゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。さらに別の態様においては、アンタゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。

本発明はまた、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常の処置のための治療薬を提供する。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの発現を調節する薬剤を同定する方法も提供される。この方法には、以下の工程が含まれる：
（ａ）試験薬剤を、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを発現している宿主細胞と接触させる工程；および
（ｂ）試験薬剤が、宿主細胞によるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの発現を調節するかどうかを決定する工程。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの発現を調節する薬剤も提供される。１つの態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲ
Ｏ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型のアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、アゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。さらに別の態様においては、アンタゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する状態に影響を与えることができる治療薬を評価する方法も提供される。この方法には、以下の工程が含まれる：
（ａ）そのゲノムにＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている非ヒトトランスジェニック動物を提供する工程；
（ｂ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定する工程；
（ｃ）（ｂ）の測定された生理学的特徴を性別一致野生型動物の生理学的特徴と比較する工程であって、ここで、前記野生型動物の生理学的特徴と異なる前記非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を、前記非ヒトトランスジェニック動物における前記遺伝子の破壊から生じる状態と同定する、工程；
（ｄ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物に試験薬剤を投与する工程；および
（ｅ）前記非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊に関連する同定された状態に対する前記試験薬剤の作用を評価する工程。

１つの態様において、前記状態は、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常である。

本発明はまた、遺伝子の破壊に関連する状態に影響を及ぼすことができる治療薬を提供する。１つの態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型のアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、アゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。さらに別の態様においては、アンタゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。

本発明はまた、遺伝子の破壊に関連する状態に影響を及ぼすことができる治療薬を含む薬学的組成物を提供する。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；または胚性致死を処置または予防または寛解する方法も提供される。この方法には、上記障害をすでに罹患しているか、もしくは上記障害に罹患しやすいか、または上記障害が予防される、そのような処置が必要な被験体に対して、治療薬、またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストの治療有効量を投与する工程が含まれ、それによって、上記障害または疾患が効率よく処置、または予防、または寛解される。

別の態様においては、治療薬は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型のアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、アゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。さらに別の態様においては、アンタゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常を寛解または調節する薬剤を同定する方法も提供される。この方法には、以下の工程が含まれる：
（ａ）非ヒトトランスジェニック動物細胞培養物を提供する工程であって、上記培養物の個々の細胞には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている、工程
（ｂ）前記細胞培養に試験薬剤を投与する工程；および
（ｃ）前記試験薬剤が、前記細胞培養物において、前記神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常を寛解または調節するか否かを判定する工程。なおも別の態様において、前記神経障害は、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の増大である。なおも別の態様において、前記神経障害は、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の低減である。なおも別の態様において、前記神経障害は、ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズムである。なおも別の態様において、前記神経障害は、反転スクリーン試験中の運動協調性の増大である。なおも別の態様において、前記神経障害は、反転スクリーン試験中の障害性の運動協調性である。なおも別の態様において、前記神経障害としては、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害が挙げられる。そのような神経障害は、「不安障害」と定義されるカテゴリーを含み、その「不安障害」としては、軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、特段に特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴ったパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、社会不安、自閉症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、一極性障害、Ｉ型またはＩＩ型双極性障害、特段に特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物質誘導性気分障害、認知機能の増強、認知機能の低下（アルツハイマー病、脳卒中または脳の外傷に関連するものが挙げられるがこれらに限定されない）、疾患または損傷から生じる発作（癲癇、学習障害／障害、脳性麻痺が挙げられるがこれらに限定されない）が挙げられるがこれらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害（以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない）に適用し得る。

本発明はまた、前記培養物中の遺伝子の破壊に関連する、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常を寛解または調節する薬剤を提供する。１つの態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型のアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、薬剤は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストあるいはアンタゴニストである。なお別の態様においては、アゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。さらに別の態様においては、アンタゴニスト薬剤は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型を調節する方法も提供される。この方法には、上記表現型をすでに有している可能性があるか、もしくは上記表現型を有しやすい被験体、または上記表現型が予防される被験体に対して、上記表現型を調節するとして同定された薬剤、またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストの有効量を投与する工程が含まれ、それによって、上記表現型が効率よく調節される。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する生理学的特徴を調節する方法も提供される。この方法には、上記生理学的特徴をすでに示しているか、もしくは上記生理学的特徴を示しやすい被験体、または上記生理学的特徴が予防される被験体に対して、上記生理学的特徴を調節するとして同定された薬剤、またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストンの有効量を投与する工程が含まれ、それによって、上記生理学的特徴が効率よく調節される。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する行動を調節する方法も提供される。この方法には、上記行動をすでに示しているか、もしくは上記行動を示しやすい被験体、または上記行動が予防される被験体に対して、上記行動を調節するとして同定された薬剤、またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストの有効量を投与する工程が含まれ、それによって、上記行動が効率よく調節される。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの発現を調節する方法も提供される。この方法には、上記ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを発現している宿主細胞に対して、上記発現を調節するとして同定された薬剤、またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストの有効量を投与する工程が含まれ、それによって、上記ポリペプチドの発現が効率よく調節される。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する状態を調節する方法も提供される。この方法には、上記症状を有しているか、もしくは上記症状を有しやすい被験体、または上記症状が予防される被験体に対して、上記症状を調節するとして同定された治療薬、またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストの治療有効量を投与する工程が含まれ、それによって、上記症状が効率よく調節される。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；または胚性致死を処置または予防または寛解する方法も提供される。この方法には、非ヒトトランスジェニック動物細胞培養物（上記培養物の個々の細胞には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている）に対して、上記障害を処置または予防または寛解するとして同定された薬剤、またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストの有効量を投与する工程が含まれ、それによって、上記障害が効率よく処置または予防または寛解される。

Ｂ．さらなる実施形態
なおもさらなる実施形態において、本発明は、本出願に係る潜在的な以下の一連の請求項に関する：
１．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型を同定する方法であって、本方法には：
（ａ）そのゲノムに、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている非ヒトトランスジェニック動物を提供する工程；
（ｂ）前記非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定する工程；および
（ｃ）前記測定された生理学的特徴を性別一致野生型動物の生理学的特徴と比較する工程が含まれ、
ここでは、前記野生型動物の前記生理学的特徴と異なる前記非ヒトトランスジェニック動物の前記生理学的特徴が、前記非ヒトトランスジェニック動物における前記遺伝子の破壊から生じる表現型と同定される。

２．前記非ヒトトランスジェニック動物が、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊についてヘテロ接合性である、請求項１に記載の方法。

３．性別一致野生型同腹仔と比較した場合の前記非ヒトトランスジェニック動物によって示される前記表現型が、以下：神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常のうちの少なくとも１つである、請求項１に記載の方法。

４．前記神経障害が、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の増大である、請求項３に記載の方法。

５．前記神経障害が、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の低減である、請
求項３に記載の方法。

６．前記神経障害が、ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズムである、請求項３に記載の方法。

７．前記神経障害が、反転スクリーン試験中の運動協調性の増大である、請求項３に記載の方法。

８．前記神経障害が、反転スクリーン試験中の障害性の運動協調性である、請求項３に記載の方法。

９．前記神経障害が、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏または感覚障害である、請求項３に記載の方法。

１０．前記眼の異常が、網膜の異常である、請求項３に記載の方法。

１１．前記眼の異常が、視覚問題または失明と一致する、請求項３に記載の方法。

１２．前記網膜の異常が、網膜色素変性症と一致する、請求項１０に記載の方法。

１３．前記網膜の異常が、網膜変性症または網膜の形成異常を特徴とする、請求項１０に記載の方法。

１４．前記網膜の異常が、網膜の形成異常、未熟児網膜症を含む様々な網膜症、水晶体後線維増殖症、血管新生緑内障、加齢性黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、隅角血管新生（ルベオーシス）、眼球の血管新生性疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺肥大（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織の移植、網膜動脈閉塞もしくは閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性症、色素性網膜炎、黄斑ジストロフィー、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、脳回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルヴェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、シニアローケン症候群、バルデー−ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレーム症候群、コケーン症候群、先天性脊椎・骨端異形成症、フリン−エアード症候群、フリートライヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルク病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジール症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮症、ピエール・マリー症候群、スティックラー症候群、カロチン血症、シスチン蓄積症、ウォルフラム症候群、バッセン−コルンツヴァイク症候群、無βリポタンパク質血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖体沈着症、ホモシスチン尿症またはマンノシドーシスと一致する、請求項１０に記載の方法。

１５．前記眼の異常が、白内障である、請求項３に記載の方法。

１６．前記白内障が、全身性疾患（例えば、ヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、トリソミー１３−１５、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、上皮小体機能低下症またはコンラーディ症候群）と一致する、請求項１５に記載の方法。

１７．前記発達異常が、胚性致死または生存能低下を含む、請求項３に記載の方法。

１８．前記心臓血管、内皮または血管形成の障害が、動脈疾患（例えば、真性糖尿病；乳頭浮腫；視神経萎縮；アテローム性動脈硬化症；アンギナ；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心臓肥大および鬱血性心不全などの心不全；高血圧症；炎症性血管炎；レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤ならびに動脈再狭窄）；静脈およびリンパの障害（例えば、血栓静脈炎、リンパ管炎およびリンパ浮腫）；末梢血管疾患；癌（例えば、血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細管および海綿状）、グロムス腫瘍、毛細管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管外皮腫、カポジ肉腫、リンパ管腫およびリンパ管肉腫）；腫瘍血管新生；外傷（例えば、創傷、熱傷および他の組織の傷害）、移植片固定、瘢痕；虚血再灌流傷害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患または骨粗鬆症である、請求項３に記載の方法。

１９．前記免疫障害が、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節症；全身硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫媒介性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；真性糖尿病；免疫媒介性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；中枢および末梢神経系の脱髄疾患（例えば、多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギラン・バレー症候群および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシー）；肝胆疾患（例えば、感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の非肝向性のウイルスによる肝炎）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎および硬化性胆管炎）；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）；グルテン過敏性腸症およびホイップル病；水疱性疾患、多形性紅斑および接触性皮膚炎を含む自己免疫性または免疫媒介性の皮膚疾患、乾癬；アレルギー性疾患（例えば、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹）；肺の免疫学的疾患（例えば、好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎）；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含む移植関連疾患である、請求項３に記載の方法。

２０．前記骨代謝の異常または障害が、関節炎、骨粗鬆症または大理石骨病である、請求項３に記載の方法。

２１．前記非ヒトトランスジェニック動物が、性別一致野生型同腹仔と比較して、以下の生理学的特徴：オープンフィールド試験中の不安様応答の増大；オープンフィールド試験中の不安の低減；オープンフィールド試験中の自発運動活性の低下；ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム（明期中の活性の低下）；歩行回数の減少を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；概日リズムを有しない機能低下；歩行回数の増加を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；ストレス誘導性高体温の増大；ストレス誘導性高体温の低下；反転スクリーン試験中の運動協調性の低下；尾懸垂における不動の増加（抑鬱様応答の増大）；尾懸垂試験中の抑鬱様応答の増大；尾懸垂試験中の不動性の増大または抑鬱様応答の減少；プレパルス抑制試験中の驚愕応答の低下；難聴を示唆する無驚愕応答；もしくは難聴；感覚運動ゲーティング／注意の低下を伴うプレパルス抑制の低下；ホットプレート試験における反応性の低下；ホットプレート試験における反応までの時間の減少；眼科学的異常；平均動静脈比の増大；瞳孔拡大薬である塩酸シクロペントレートに対する抵抗性；斜視細目；白斑を伴う斜視細目；白内障；網膜変性症；視力障害；基礎体温の低下；心拍数の減少；平均収縮期血圧の上昇；インスリン感度の増大；平均絶食時血清中グルコースレベルの上昇；平均血清中グルコースレベルの低下；平均血清中コレステロールレベルの上昇；平均血清中コレステロールレベルの低下；平均血清中トリグリセリドレベルの上昇；平均血清中トリグリセリドレベルの低下；耐糖能の増大；耐糖能障害；平均血清中インスリンレベルの低下；平均血清中カルシウムの上昇；ウロビリノーゲンの上昇、顕著な脂肪血；アルブミン、アラニンアミノトランスフェラーゼ、リン、およびカリウムレベルの上昇；平均血清中アルカリホスファターゼレベルの上昇；血中尿素窒素の上昇；顆粒球の割合の増大；全白血球（ＷＢＣ）数の増加；平均絶対好中球数の増大；好中球減少症；絶対リンパ球数の増加；絶対単球数の増加；脾臓中の単球およびＤＣ（ＣＤ１１ｂ＋、ＣＤ１１ｂ＋ｃ＋）の増加；平均血小板数の増加；リンパ節中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の上昇；好中球数の減少；ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の減少；平均赤血球（ＲＢＣ）数、ヘモグロビン濃度、およびヘマトクリットの減少；平均の赤血球分布幅の増大；平均小体容積および平均小体へのグロビンの減少；平均血小板数の減少および血小板の容積の増大；リンパ節中のＢ細胞数の増加；パイアー斑におけるＢ細胞のサブタイプの増加；リンパ節中のＢ細胞のパーセンテージの上昇；ＣＤ２５＋細胞の増加；胸腺ＤＮの増加、ＤＰＴ細胞の減少；リンパ節中のＣＤ１９＋細胞の増加；骨髄細胞中のＣＤ１１７の増加；ＣＤ４細胞の平均パーセンテージの上昇；ＣＤ８細胞の増加およびＢ細胞中での減少；腹腔洗浄におけるＣＤ１１ｂ＋細胞のパーセンテージの上昇；Ｂ２２０＋ＣＤ１１ｂＬｏｗＣＤ２３−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ＬｏｗおよびＣＤ１１ｂ−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＣＤ１１ｂ−ＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの低下；骨髄中のＢ２２０−ＣＤ４３Ｈｉ細胞のパーセンテージの上昇；脾臓中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ−細胞の増加；ＣＤ４およびＣＤ８細胞のＣＤ６２ｈｉ、ＣＤ４４ｉｎｔサブセットの増加；末梢ＣＤ１１７細胞の増加；パイアー斑の中のＴｃＲｂｅｔａ／ＣＤ３８の増加、胸腺中のＴｃＲｂｅｔａ＋細胞のパーセンテージの上昇；リンパ節中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ＋のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＨｉＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＭｅｄＣＤ２３−細胞のパーセンテージの低下；脾臓中のＣＤ６２ＬＨｉＣＤ４４ＤｉｍＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞のパーセンテージの低下；Ｂ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの低下；リンパ節および脾臓中のＣＤ４およびＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下；メモリーＴ細胞の増加（ＣＤ６２ＬｌｏＣＤ４４ｈｉの増加）；Ｔ細胞：Ｂ細胞比の低下；ナイーブＴ細胞の減少；腹腔洗浄中のＣＤ１１７細胞の減少；ＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下、卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ１応答の増大；卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ２ａ応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する平均血清ＩＬ−６応答の増大；ＬＰＳ負荷に対するＴＮＦα応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する血清ＭＣＰ−１応答の増大；平均血清中ＩｇＭレベルの増大；血清ＩｇＡの増加；平均血清ＩｇＧ１の増大；平均血清ＩｇＧ３の増大；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ１応答の低下；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ２ａ応答の低下；平均血清ＩｇＡレベルの低下；血清ＩｇＧ２ａレベルの低下；血清ＩｇＧ３レベルの低下；皮膚線維芽細胞増殖速度の増大；皮膚線維芽細胞増殖速度の低下；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの増加；平均体重の増加；平均体長の増大；総組織質量（ＴＴＭ）の増加；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の増加；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の増加；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の低減；総組織質量（ＴＴＭ）の減少；除脂肪体重（ＬＢＭ）の減少；大腿骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；椎骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；全身、大腿、および脊椎の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；骨塩量（ＢＭＣ）の減少；骨塩密度指標の減少；体積測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）の減少；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の減少；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の減少；大理石骨病；骨粗鬆症；様々な組織における慢性炎症；両側水腎症（中程度から重症）および炎症；「洋ナシ型の腹部」、左右対称に腫大した腎臓（多嚢胞性の腎疾患を示唆する）；コルチ器官の変性；肝細胞機能不全障害；胆道閉塞；組織球の浸潤を特徴とする肝脾腫大症；小腸、リンパ節、および脾臓中の組織球増殖症；脾腫、リンパ節腫脹症、およびリンパ節腫脹症；咽頭扁桃腺および扁桃腺の過形成；軽度〜中程度の過剰な延髄造血；ホモ接合性マウスは小さく、乾燥しており、そして少ない皮下脂肪の蓄積を示す；脂肪欠乏症；潰瘍性大腸炎；基底膜上の内蝸牛有毛細胞および外蝸牛有毛細胞細胞の両方の完全な欠失を特徴と
する、内耳の感覚蝸牛有毛細胞のびまん性の顕著な変性；胃粘膜過形成および慢性的な炎症；胃重量の増加；精巣の精子形成障害；精巣上体の精液過少症および精子欠損；男性不妊症；リソソーム蓄積症；貧血；成長遅延；生存能力の低下；リンパ球の減少および脂肪欠乏症を伴う周産期致死性；ホモ接合性胚性致死；ならびにヘテロ接合性胚性致死のうちの少なくとも１つを示す、請求項１に記載の方法。

２２．そのゲノムに、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている、非ヒトトランスジェニック動物に由来する単離細胞。

２３．マウス細胞である、請求項２２に記載の単離細胞。

２４．前記マウス細胞が、胚性幹細胞である、請求項２３に記載の単離細胞。

２５．性別一致野生型同腹仔と比較して、前記非ヒトトランスジェニック動物が以下の表現型：神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常のうちの少なくとも１つを示す、請求項２２に記載の単離細胞。

２６．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型を調節する薬剤を同定する方法であって、本方法には：
（ａ）そのゲノムに、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている非ヒトトランスジェニック動物を提供する工程；
（ｂ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定する工程；
（ｃ）（ｂ）の測定された生理学的特徴を性別一致野生型動物の生理学的特徴と比較する工程であって、ここで、前記野生型動物の前記生理学的特徴と異なる前記非ヒトトランスジェニック動物の前記生理学的特徴を、前記非ヒトトランスジェニック動物における前記遺伝子の破壊から生じる表現型と同定する、工程；
（ｄ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物に試験薬剤を投与する工程；および
（ｅ）前記試験薬剤が、前記非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊と関連する前記同定された表現型を調節するか否かを判定する工程
が含まれる、方法。

２７．前記遺伝子破壊と関連する前記表現型が、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害；脂質代謝障害；または発達異常を含む、請求項２６に記載の方法。

２８．前記神経障害が、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の増大である、請求項２７に記載の方法。

２９．前記神経障害が、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の低減である、請求項２７に記載の方法。

３０．前記神経障害が、ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズムである、請求項２７に記載の方法。

３１．前記神経障害が、反転スクリーン試験中の運動協調性の増大である、請求項２７に記載の方法。

３２．前記神経障害が、反転スクリーン試験中の障害性の運動協調性である、請求項２７に記載の方法。

３３．前記神経障害が、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏または感覚障害である、請求項２７に記載の方法。

３４．前記眼の異常が、網膜の異常である、請求項２７に記載の方法。

３５．前記眼の異常が、視覚問題または失明と一致する、請求項２７に記載の方法。

３６．前記網膜の異常が、網膜色素変性症と一致する、請求項３４に記載の方法。

３７．前記網膜の異常が、網膜変性症または網膜の形成異常を特徴とする、請求項３４に記載の方法。

３８．前記網膜の異常が、網膜の形成異常、未熟児網膜症を含む様々な網膜症、水晶体後線維増殖症、血管新生緑内障、加齢性黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、隅角血管新生（ルベオーシス）、眼球の血管新生性疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺肥大（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織の移植、網膜動脈閉塞もしくは閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性症、色素性網膜炎、黄斑ジストロフィー、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、脳回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルヴェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、シニアローケン症候群、バルデー−ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレーム症候群、コケーン症候群、先天性脊椎・骨端異形成症、フリン−エアード症候群、フリートライヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルク病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジール症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮症、ピエール・マリー症候群、スティックラー症候群、カロチン血症、シスチン蓄積症、ウォルフラム症候群、バッセン−コルンツヴァイク症候群、無βリポタンパク質血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖体沈着症、ホモシスチン尿症またはマンノシドーシスと一致する、請求項３４に記載の方法。

３９．前記眼の異常が、白内障である、請求項２７に記載の方法。

４０．前記白内障が、全身性疾患（例えば、ヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、トリソミー１３−１５、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、上皮小体機能低下症またはコンラーディ症候群）と一致する、請求項３９に記載の方法。

４１．前記発達異常が、胚性致死または生存能低下を含む、請求項２７に記載の方法。

４２．前記心臓血管、内皮または血管形成の障害が、動脈疾患（例えば、真性糖尿病；乳頭浮腫；視神経萎縮；アテローム性動脈硬化症；アンギナ；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心臓肥大および鬱血性心不全などの心不全；高血圧症；炎症性血管炎；レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤ならびに動脈再狭窄）；静脈およびリンパの障害（例えば、血栓静脈炎、リンパ管炎およびリンパ浮腫）；末梢血管疾患；癌（例えば、血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細管および海綿状）、グロムス腫瘍、毛細管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管外皮腫、カポジ肉腫、リンパ管腫およびリンパ管肉腫）；腫瘍血管新生；外傷（例えば、創傷、熱傷および他の組織の傷害）、移植片固定、瘢痕；虚血再灌流傷害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患または骨粗鬆症である、請求項２７に記載の方法。

４３．前記免疫障害が、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節症；全身硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫媒介性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；真性糖尿病；免疫媒介性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；中枢および末梢神経系の脱髄疾患（例えば、多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギラン・バレー症候群および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシー）；肝胆疾患（例えば、感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の非肝向性のウイルスによる肝炎）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎および硬化性胆管炎）；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）；グルテン過敏性腸症およびホイップル病；水疱性疾患、多形性紅斑および接触性皮膚炎を含む自己免疫性または免疫媒介性の皮膚疾患、乾癬；アレルギー性疾患（例えば、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹）；肺の免疫学的疾患（例えば、好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎）；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含む移植関連疾患である、請求項２７に記載の方法。

４４．前記骨代謝の異常または障害が、関節炎、骨粗鬆症または大理石骨病である、請求項２７に記載の方法。

４５．前記非ヒトトランスジェニック動物が、性別一致野生型同腹仔と比較して、以下の生理学的特徴：オープンフィールド試験中の不安様応答の増大；オープンフィールド試験中の不安の低減；オープンフィールド試験中の自発運動活性の低下；ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム（明期中の活性の低下）；歩行回数の減少を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；概日リズムを有しない機能低下；歩行回数の増加を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；ストレス誘導性高体温の増大；ストレス誘導性高体温の低下；反転スクリーン試験中の運動協調性の低下；尾懸垂における不動の増加（抑鬱様応答の増大）；尾懸垂試験中の抑鬱様応答の増大；尾懸垂試験中の不動性の増大または抑鬱様応答の減少；プレパルス抑制試験中の驚愕応答の低下；難聴を示唆する無驚愕応答；もしくは難聴；感覚運動ゲーティング／注意の低下を伴うプレパルス抑制の低下；ホットプレート試験における反応性の低下；ホットプレート試験における反応までの時間の減少；眼科学的異常；平均動静脈比の増大；瞳孔拡大薬である塩酸シクロペントレートに対する抵抗性；斜視細目；白斑を伴う斜視細目；白内障；網膜変性症；視力障害；基礎体温の低下；心拍数の減少；平均収縮期血圧の上昇；インスリン感度の増大；平均絶食時血清中グルコースレベルの上昇；平均血清中グルコースレベルの低下；平均血清中コレステロールレベルの上昇；平均血清中コレステロールレベルの低下；平均血清中トリグリセリドレベルの上昇；平均血清中トリグリセリドレベルの低下；耐糖能の増大；耐糖能障害；平均血清中インスリンレベルの低下；平均血清中カルシウムの上昇；ウロビリノーゲンの上昇、顕著な脂肪血；アルブミン、アラニンアミノトランスフェラーゼ、リン、およびカリウムレベルの上昇；平均血清中アルカリホスファターゼレベルの上昇；血中尿素窒素の上昇；顆粒球の割合の増大；全白血球（ＷＢＣ）数の増加；平均絶対好中球数の増大；好中球減少症；絶対リンパ球数の増加；絶対単球数の増加；脾臓中の単球およびＤＣ（ＣＤ１１ｂ＋、ＣＤ１１ｂ＋ｃ＋）の増加；平均血小板数の増加；リンパ節中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の上昇；好中球数の減少；ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の減少；平均赤血球（ＲＢＣ）数、ヘモグロビン濃度、およびヘマトクリットの減少；平均の赤血球分布幅の増大；平均小体容積および平均小体へのグロビンの減少；平均血小板数の減少および血小板の容積の増大；リンパ節中のＢ細胞数の増加；パイアー斑におけるＢ細胞のサブタイプの増加；リンパ節中のＢ細胞のパーセンテージの上昇；ＣＤ２５＋細胞の増加；胸腺ＤＮの増加、ＤＰＴ細胞の減少；リンパ節中のＣＤ１９＋細胞の増加；骨髄細胞中のＣＤ１１７の増加；ＣＤ４細胞の平均パーセンテージの上昇；ＣＤ８細胞の増加およびＢ細胞中での減少；腹腔洗浄におけるＣＤ１１ｂ＋細胞のパーセンテージの上昇；Ｂ２２０＋ＣＤ１１ｂＬｏｗＣＤ２３−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ＬｏｗおよびＣＤ１１ｂ−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＣＤ１１ｂ−ＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの低下；骨髄中のＢ２２０−ＣＤ４３Ｈｉ細胞のパーセンテージの上昇；脾臓中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ−細胞の増加；ＣＤ４およびＣＤ８細胞のＣＤ６２ｈｉ、ＣＤ４４ｉｎｔサブセットの増加；末梢ＣＤ１１７細胞の増加；パイアー斑の中のＴｃＲｂｅｔａ／ＣＤ３８の増加、胸腺中のＴｃＲｂｅｔａ＋細胞のパーセンテージの上昇；リンパ節中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ＋のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＨｉＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＭｅｄＣＤ２３−細胞のパーセンテージの低下；脾臓中のＣＤ６２ＬＨｉＣＤ４４ＤｉｍＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞のパーセンテージの低下；Ｂ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの低下；リンパ節および脾臓中のＣＤ４およびＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下；メモリーＴ細胞の増加（ＣＤ６２ＬｌｏＣＤ４４ｈｉの増加）；Ｔ細胞：Ｂ細胞比の低下；ナイーブＴ細胞の減少；腹腔洗浄中のＣＤ１１７細胞の減少；ＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下、卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ１応答の増大；卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ２ａ応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する平均血清ＩＬ−６応答の増大；ＬＰＳ負荷に対するＴＮＦα応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する血清ＭＣＰ−１応答の増大；平均血清中ＩｇＭレベルの増大；血清ＩｇＡの増加；平均血清ＩｇＧ１の増大；平均血清ＩｇＧ３の増大；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ１応答の低下；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ２ａ応答の低下；平均血清ＩｇＡレベルの低下；血清ＩｇＧ２ａレベルの低下；血清ＩｇＧ３レベルの低下；皮膚線維芽細胞増殖速度の増大；皮膚線維芽細胞増殖速度の低下；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの増加；平均体重の増加；平均体長の増大；総組織質量（ＴＴＭ）の増加；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の増加；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の増加；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の低減；総組織質量（ＴＴＭ）の減少；除脂肪体重（ＬＢＭ）の減少；大腿骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；椎骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；全身、大腿、および脊椎の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；骨塩量（ＢＭＣ）の減少；骨塩密度指標の減少；体積測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）の減少；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の減少；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の減少；大理石骨病；骨粗鬆症；様々な組織における慢性炎症；両側水腎症（中程度から重症）および炎症；「洋ナシ型の腹部」、左右対称に腫大した腎臓（多嚢胞性の腎疾患を示唆する）；コルチ器官の変性；肝細胞機能不全障害；胆道閉塞；組織球の浸潤を特徴とする肝脾腫大症；小腸、リンパ節、および脾臓中の組織球増殖症；脾腫、リンパ節腫脹症、およびリンパ節腫脹症；咽頭扁桃腺および扁桃腺の過形成；軽度〜中程度の過剰な延髄造血；ホモ接合性マウスは小さく、乾燥しており、そして少ない皮下脂肪の蓄積を示す；脂肪欠乏症；潰瘍性大腸炎；基底膜上の内蝸牛有毛細胞および外蝸牛有毛細胞細胞の両方の完全な欠失を特徴とする、内耳の感覚蝸牛有毛細胞のびまん性の顕著な変性；胃粘膜過形成および慢性的な炎症；胃重量の増加；精巣の精子形成障害；精巣上体の精液過少症および精子欠損；男性不妊症；リソソーム蓄積症；貧血；成長遅延；生存能力の低下；リンパ球の減少および脂肪欠乏症を伴う周産期致死性；ホモ接合性胚性致死；ならびにヘテロ接合性胚性致死のうちの少なくとも１つを示す、請求項２６に記載の方法。

４６．請求項２６に記載の方法によって同定された、薬剤。

４７．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである、請求項４６に記載の薬剤。

４８．前記アゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項４７に記載の薬剤。

４９．前記アンタゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項４７に記載の薬剤。

５０．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する生理学的特徴を調節する薬剤を同定する方法であって、本方法には：
（ａ）そのゲノムに、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている非ヒトトランスジェニック動物を提供する工程；
（ｂ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物によって示される生理学的特徴を測定する工程；
（ｃ）（ｂ）の測定された生理学的特徴を性別一致野生型動物の生理学的特徴と比較する工程であって、ここで、前記野生型動物によって示される前記生理学的特徴と異なる前記非ヒトトランスジェニック動物によって示される前記生理学的特徴を、遺伝子の破壊に関連する生理学的特徴と同定する、工程；
（ｄ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物に試験薬剤を投与する工程；および
（ｅ）遺伝子破壊と関連する前記生理学的特徴が調節されているか否かを判定する工程
が含まれる、方法。

５１．前記非ヒトトランスジェニック動物が、性別一致野生型同腹仔と比較して、以下の生理学的特徴：オープンフィールド試験中の不安様応答の増大；オープンフィールド試験中の不安の低減；オープンフィールド試験中の自発運動活性の低下；ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム（明期中の活性の低下）；歩行回数の減少を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；概日リズムを有しない機能低下；歩行回数の増加を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；ストレス誘導性高体温の増大；ストレス誘導性高体温の低下；反転スクリーン試験中の運動協調性の低下；尾懸垂における不動の増加（抑鬱様応答の増大）；尾懸垂試験中の抑鬱様応答の増大；尾懸垂試験中の不動性の増大または抑鬱様応答の減少；プレパルス抑制試験中の驚愕応答の低下；難聴を示唆する無驚愕応答；もしくは難聴；感覚運動ゲーティング／注意の低下を伴うプレパルス抑制の低下；ホットプレート試験における反応性の低下；ホットプレート試験における反応までの時間の減少；眼科学的異常；平均動静脈比の増大；瞳孔拡大薬である塩酸シクロペントレートに対する抵抗性；斜視細目；白斑を伴う斜視細目；白内障；網膜変性症；視力障害；基礎体温の低下；心拍数の減少；平均収縮期血圧の上昇；インスリン感度の増大；平均絶食時血清中グルコースレベルの上昇；平均血清中グルコースレベルの低下；平均血清中コレステロールレベルの上昇；平均血清中コレステロールレベルの低下；平均血清中トリグリセリドレベルの上昇；平均血清中トリグリセリドレベルの低下；耐糖能の増大；耐糖能障害；平均血清中インスリンレベルの低下；平均血清中カルシウムの上昇；ウロビリノーゲンの上昇、顕著な脂肪血；アルブミン、アラニンアミノトランスフェラーゼ、リン、およびカリウムレベルの上昇；平均血清中アルカリホスファターゼレベルの上昇；血中尿素窒素の上昇；顆粒球の割合の増大；全白血球（ＷＢＣ）数の増加；平均絶対好中球数の増大；好中球減少症；絶対リンパ球数の増加；絶対単球数の増加；脾臓中の単球およびＤＣ（ＣＤ１１ｂ＋、ＣＤ１１ｂ＋ｃ＋）の増加；平均血小板数の増加；リンパ節中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の上昇；好中球数の減少；ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の減少；平均赤血球（ＲＢＣ）数、ヘモグロビン濃度、およびヘマトクリットの減少；平均の赤血球分布幅の増大；平均小体容積および平均小体へのグロビンの減少；平均血小板数の減少および血小板の容積の増大；リンパ節中のＢ細胞数の増加；パイアー斑におけるＢ細胞のサブタイプの増加；リンパ節中のＢ細胞のパーセンテージの上昇；ＣＤ２５＋細胞の増加；胸腺ＤＮの増加、ＤＰＴ細胞の減少；リンパ節中のＣＤ１９＋細胞の増加；骨髄細胞中のＣＤ１１７の増加；ＣＤ４細胞の平均パーセンテージの上昇；ＣＤ８細胞の増加およびＢ細胞中での減少；腹腔洗浄におけるＣＤ１１ｂ＋細胞のパーセンテージの上昇；Ｂ２２０＋ＣＤ１１ｂＬｏｗＣＤ２３−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ＬｏｗおよびＣＤ１１ｂ−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＣＤ１１ｂ−ＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの低下；骨髄中のＢ２２０−ＣＤ４３Ｈｉ細胞のパーセンテージの上昇；脾臓中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ−細胞の増加；ＣＤ４およびＣＤ８細胞のＣＤ６２ｈｉ、ＣＤ４４ｉｎｔサブセットの増加；末梢ＣＤ１１７細胞の増加；パイアー斑の中のＴｃＲｂｅｔａ／ＣＤ３８の増加、胸腺中のＴｃＲｂｅｔａ＋細胞のパーセンテージの上昇；リンパ節中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ＋のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＨｉＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＭｅｄＣＤ２３−細胞のパーセンテージの低下；脾臓中のＣＤ６２ＬＨｉＣＤ４４ＤｉｍＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞のパーセンテージの低下；Ｂ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの低下；リンパ節および脾臓中のＣＤ４およびＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下；メモリーＴ細胞の増加（ＣＤ６２ＬｌｏＣＤ４４ｈｉの増加）；Ｔ細胞：Ｂ細胞比の低下；ナイーブＴ細胞の減少；腹腔洗浄中のＣＤ１１７細胞の減少；ＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下、卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ１応答の増大；卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ２ａ応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する平均血清ＩＬ−６応答の増大；ＬＰＳ負荷に対するＴＮＦα応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する血清ＭＣＰ−１応答の増大；平均血清中ＩｇＭレベルの増大；血清ＩｇＡの増加；平均血清ＩｇＧ１の増大；平均血清ＩｇＧ３の増大；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ１応答の低下；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ２ａ応答の低下；平均血清ＩｇＡレベルの低下；血清ＩｇＧ２ａレベルの低下；血清ＩｇＧ３レベルの低下；皮膚線維芽細胞増殖速度の増大；皮膚線維芽細胞増殖速度の低下；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの増加；平均体重の増加；平均体長の増大；総組織質量（ＴＴＭ）の増加；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の増加；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の増加；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の低減；総組織質量（ＴＴＭ）の減少；除脂肪体重（ＬＢＭ）の減少；大腿骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；椎骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；全身、大腿、および脊椎の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；骨塩量（ＢＭＣ）の減少；骨塩密度指標の減少；体積測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）の減少；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の減少；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の減少；大理石骨病；骨粗鬆症；様々な組織における慢性炎症；両側水腎症（中程度から重症）および炎症；「洋ナシ型の腹部」、左右対称に腫大した腎臓（多嚢胞性の腎疾患を示唆する）；コルチ器官の変性；肝細胞機能不全障害；胆道閉塞；組織球の浸潤を特徴とする肝脾腫大症；小腸、リンパ節、および脾臓中の組織球増殖症；脾腫、リンパ節腫脹症、およびリンパ節腫脹症；咽頭扁桃腺および扁桃腺の過形成；軽度〜中程度の過剰な延髄造血；ホモ接合性マウスは小さく、乾燥しており、そして少ない皮下脂肪の蓄積を示す；脂肪欠乏症；潰瘍性大腸炎；基底膜上の内蝸牛有毛細胞および外蝸牛有毛細胞細胞の両方の完全な欠失を特徴とする、内耳の感覚蝸牛有毛細胞のびまん性の顕著な変性；胃粘膜過形成および慢性的な炎症；胃重量の増加；精巣の精子形成障害；精巣上体の精液過少症および精子欠損；男性不妊症；リソソーム蓄積症；貧血；成長遅延；生存能力の低下；リンパ球の減少および脂肪欠乏症を伴う周産期致死性；ホモ接合性胚性致死；ならびにヘテロ接合性胚性致死のうちの少なくとも１つを示す、請求項５０に記載の方法。

５２．請求項５０に記載の方法によって同定された、薬剤。

５３．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである、請求項５２に記載の薬剤。

５４．前記アゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項５３に記載の薬剤。

５５．前記アンタゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項５３に記載の薬剤。

５６．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する行動を調節する薬剤を同定する方法であって、本方法には：
（ａ）そのゲノムに、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている非ヒトトランスジェニック動物を提供する工程；
（ｂ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物によって示される行動を観察する工程
（ｃ）（ｂ）の観察された行動を性別一致野生型動物の行動と比較する工程であって、ここで、前記野生型動物によって示される前記観察された行動と異なる、前記非ヒトトランスジェニック動物によって示される前記観察された行動を、遺伝子の破壊に関連する行動と同定する、工程；
（ｄ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物に試験薬剤を投与する工程；および
（ｅ）前記薬剤が、遺伝子破壊と関連する前記行動を調節するか否かを判定する工程
が含まれる、方法。

５７．前記行動が、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の増大である、請求項５６に記載の方法。

５８．前記行動が、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の低減である、請求項５６に記載の方法。

５９．前記行動が、ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズムである、請求項５６に記載の方法。

６０．前記行動が、反転スクリーン試験中の運動協調性の増大である、請求項５６に記載の方法。

６１．前記行動が、反転スクリーン試験中の障害性の運動協調性である、請求項５６に記載の方法。

６２．前記行動が、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏または感覚障害である、請求項５６に記載の方法。

６３．請求項５６に記載の方法によって同定された、薬剤。

６４．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである、請求項６３に記載の薬剤。

６５．前記アゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０，
抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項６４に記載の薬剤。

６６．前記アンタゴニストが、ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項６４に記載の薬剤。

６７．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常を寛解するかあるいは調節する薬剤を同定する方法であって、本方法には：
（ａ）そのゲノムに、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている非ヒトトランスジェニック動物を提供する工程；
（ｂ）前記非ヒトトランスジェニック動物に試験薬剤を投与する工程；および
（ｃ）前記試験薬剤が、前記非ヒトトランスジェニック動物において、前記神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常を寛解または調節するか否かを判定する工程
が含まれる、方法。

６８．前記神経障害が、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の増大である、請求項６７に記載の方法。

６９．前記神経障害が、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の低減である、請求項６７に記載の方法。

７０．前記神経障害が、ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズムである、請求項６７に記載の方法。

７１．前記神経障害が、反転スクリーン試験中の運動協調性の増大である、請求項６７に記載の方法。

７２．前記神経障害が、反転スクリーン試験中の障害性の運動協調性である、請求項６７に記載の方法。

７３．前記神経障害が、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏または感覚障害である、請求項６７に記載の方法。

７４．前記眼の異常が、網膜の異常である、請求項６７に記載の方法。

７５．前記眼の異常が、視覚問題または失明と一致する、請求項６７に記載の方法。

７６．前記網膜の異常が、網膜色素変性症と一致する、請求項７４に記載の方法。

７７．前記網膜の異常が、網膜変性症または網膜の形成異常を特徴とする、請求項７４に記載の方法。

７８．前記網膜の異常が、網膜の形成異常、未熟児網膜症を含む様々な網膜症、水晶体後線維増殖症、血管新生緑内障、加齢性黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、隅角血管新生（ルベオーシス）、眼球の血管新生性疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺肥大（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織の移植、網膜動脈閉塞もしくは閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性症、色素性網膜炎、黄斑ジストロフィー、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、脳回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルヴェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、シニアローケン症候群、バルデー−ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレーム症候群、コケーン症候群、先天性脊椎・骨端異形成症、フリン−エアード症候群、フリートライヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルク病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジール症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮症、ピエール・マリー症候群、スティックラー症候群、カロチン血症、シスチン蓄積症、ウォルフラム症候群、バッセン−コルンツヴァイク症候群、無βリポタンパク質血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖体沈着症、ホモシスチン尿症またはマンノシドーシスと一致する、請求項７４に記載の方法。

７９．前記眼の異常が、白内障である、請求項６７に記載の方法。

８０．前記白内障が、全身性疾患（例えば、ヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、トリソミー１３−１５、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、上皮小体機能低下症またはコンラーディ症候群）である、請求項７９に記載の方法。

８１．前記発達異常が、胚性致死または生存能低下を含む、請求項６７に記載の方法。

８２．前記心臓血管、内皮または血管形成の障害が、動脈疾患（例えば、真性糖尿病；乳頭浮腫；視神経萎縮；アテローム性動脈硬化症；アンギナ；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心臓肥大および鬱血性心不全などの心不全；高血圧症；炎症性血管炎；レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤ならびに動脈再狭窄）；静脈およびリンパの障害（例えば、血栓静脈炎、リンパ管炎およびリンパ浮腫）；末梢血管疾患；癌（例えば、血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細管および海綿状）、グロムス腫瘍、毛細管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管外皮腫、カポジ肉腫、リンパ管腫およびリンパ管肉腫）；腫瘍血管新生；外傷（例えば、創傷、熱傷および他の組織の傷害）、移植片固定、瘢痕；虚血再灌流傷害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患または骨粗鬆症である、請求項６７に記載の方法。

８３．前記免疫障害が、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節症；全身硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫媒介性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；真性糖尿病；免疫媒介性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；中枢および末梢神経系の脱髄疾患（例えば、多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギラン・バレー症候群および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシー）；肝胆疾患（例えば、感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の非肝向性のウイルスによる肝炎）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎および硬化性胆管炎）；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）；グルテン過敏性腸症およびホイップル病；水疱性疾患、多形性紅斑および接触性皮膚炎を含む自己免疫性または免疫媒介性の皮膚疾患、乾癬；アレルギー性疾患（例えば、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹）；肺の免疫学的疾患（例えば、好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎）；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含む移植関連疾患である、請求項６７に記載の方法。

８４．前記骨代謝の異常または障害が、関節炎、骨粗鬆症または大理石骨病である、請求項６７に記載の方法。

８５．前記非ヒトトランスジェニック動物が、性別一致野生型同腹仔と比較して、以下の生理学的特徴：オープンフィールド試験中の不安様応答の増大；オープンフィールド試験中の不安の低減；オープンフィールド試験中の自発運動活性の低下；ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム（明期中の活性の低下）；歩行回数の減少を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；概日リズムを有しない機能低下；歩行回数の増加を含むホームケージ活動性試験中の異常な概日リズム；ストレス誘導性高体温の増大；ストレス誘導性高体温の低下；反転スクリーン試験中の運動協調性の低下；尾懸垂における不
動の増加（抑鬱様応答の増大）；尾懸垂試験中の抑鬱様応答の増大；尾懸垂試験中の不動性の増大または抑鬱様応答の減少；プレパルス抑制試験中の驚愕応答の低下；難聴を示唆する無驚愕応答；もしくは難聴；感覚運動ゲーティング／注意の低下を伴うプレパルス抑制の低下；ホットプレート試験における反応性の低下；ホットプレート試験における反応までの時間の減少；眼科学的異常；平均動静脈比の増大；瞳孔拡大薬である塩酸シクロペントレートに対する抵抗性；斜視細目；白斑を伴う斜視細目；白内障；網膜変性症；視力障害；基礎体温の低下；心拍数の減少；平均収縮期血圧の上昇；インスリン感度の増大；平均絶食時血清中グルコースレベルの上昇；平均血清中グルコースレベルの低下；平均血清中コレステロールレベルの上昇；平均血清中コレステロールレベルの低下；平均血清中トリグリセリドレベルの上昇；平均血清中トリグリセリドレベルの低下；耐糖能の増大；耐糖能障害；平均血清中インスリンレベルの低下；平均血清中カルシウムの上昇；ウロビリノーゲンの上昇、顕著な脂肪血；アルブミン、アラニンアミノトランスフェラーゼ、リン、およびカリウムレベルの上昇；平均血清中アルカリホスファターゼレベルの上昇；血中尿素窒素の上昇；顆粒球の割合の増大；全白血球（ＷＢＣ）数の増加；平均絶対好中球数の増大；好中球減少症；絶対リンパ球数の増加；絶対単球数の増加；脾臓中の単球およびＤＣ（ＣＤ１１ｂ＋、ＣＤ１１ｂ＋ｃ＋）の増加；平均血小板数の増加；リンパ節中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の上昇；好中球数の減少；ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の減少；平均赤血球（ＲＢＣ）数、ヘモグロビン濃度、およびヘマトクリットの減少；平均の赤血球分布幅の増大；平均小体容積および平均小体へのグロビンの減少；平均血小板数の減少および血小板の容積の増大；リンパ節中のＢ細胞数の増加；パイアー斑におけるＢ細胞のサブタイプの増加；リンパ節中のＢ細胞のパーセンテージの上昇；ＣＤ２５＋細胞の増加；胸腺ＤＮの増加、ＤＰＴ細胞の減少；リンパ節中のＣＤ１９＋細胞の増加；骨髄細胞中のＣＤ１１７の増加；ＣＤ４細胞の平均パーセンテージの上昇；ＣＤ８細胞の増加およびＢ細胞中での減少；腹腔洗浄におけるＣＤ１１ｂ＋細胞のパーセンテージの上昇；Ｂ２２０＋ＣＤ１１ｂＬｏｗＣＤ２３−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ＬｏｗおよびＣＤ１１ｂ−細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＣＤ１１ｂ−ＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの低下；骨髄中のＢ２２０−ＣＤ４３Ｈｉ細胞のパーセンテージの上昇；脾臓中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ−細胞の増加；ＣＤ４およびＣＤ８細胞のＣＤ６２ｈｉ、ＣＤ４４ｉｎｔサブセットの増加；末梢ＣＤ１１７細胞の増加；パイアー斑の中のＴｃＲｂｅｔａ／ＣＤ３８の増加、胸腺中のＴｃＲｂｅｔａ＋細胞のパーセンテージの上昇；リンパ節中のＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ＋のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＨｉＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの上昇；腹腔洗浄中のＢ２２０＋ＭｅｄＣＤ２３−細胞のパーセンテージの低下；脾臓中のＣＤ６２ＬＨｉＣＤ４４ＤｉｍＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞のパーセンテージの低下；Ｂ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの低下；リンパ節および脾臓中のＣＤ４およびＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下；メモリーＴ細胞の増加（ＣＤ６２ＬｌｏＣＤ４４ｈｉの増加）；Ｔ細胞：Ｂ細胞比の低下；ナイーブＴ細胞の減少；腹腔洗浄中のＣＤ１１７細胞の減少；ＣＤ８細胞の平均パーセンテージの低下、卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ１応答の増大；卵白アルブミン負荷に対するＩｇＧ２ａ応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する平均血清ＩＬ−６応答の増大；ＬＰＳ負荷に対するＴＮＦα応答の増大；ＬＰＳ負荷に対する血清ＭＣＰ−１応答の増大；平均血清中ＩｇＭレベルの増大；血清ＩｇＡの増加；平均血清ＩｇＧ１の増大；平均血清ＩｇＧ３の増大；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ１応答の低下；卵白アルブミン負荷に対する血清ＩｇＧ２ａ応答の低下；平均血清ＩｇＡレベルの低下；血清ＩｇＧ２ａレベルの低下；血清ＩｇＧ３レベルの低下；皮膚線維芽細胞増殖速度の増大；皮膚線維芽細胞増殖速度の低下；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの増加；平均体重の増加；平均体長の増大；総組織質量（ＴＴＭ）の増加；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の増加；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の増加；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の低減；総組織質量（ＴＴＭ）の減少；除脂肪体重（ＬＢＭ）の減少；大腿骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；椎骨の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；全身、大腿、および脊椎の骨塩密度（ＢＭＤ）の減少；骨塩量（ＢＭＣ）の減少；骨塩密度指標の減少；体積測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）の減少；大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の減少；椎骨骨梁の平均体積、平均数および平均結合性密度の減少；大理石骨病；骨粗鬆症；様々な組織における慢性炎症；両側水腎症（中程度から重症）および炎症；「洋ナシ型の腹部」、左右対称に腫大した腎臓（多嚢胞性の腎疾患を示唆する）；コルチ器官の変性；肝細胞機能不全障害；胆道閉塞；組織球の浸潤を特徴とする肝脾腫大症；小腸、リンパ節、および脾臓中の組織球増殖症；脾腫、リンパ節腫脹症、およびリンパ節腫脹症；咽頭扁桃腺および扁桃腺の過形成；軽度〜中程度の過剰な延髄造血；ホモ接合性マウスは小さく、乾燥しており、そして少ない皮下脂肪の蓄積を示す；脂肪欠乏症；潰瘍性大腸炎；基底膜上の内蝸牛有毛細胞および外蝸牛有毛細胞細胞の両方の完全な欠失を特徴とする、内耳の感覚蝸牛有毛細胞のびまん性の顕著な変性；胃粘膜過形成および慢性的な炎症；胃重量の増加；精巣の精子形成障害；精巣上体の精液過少症および精子欠損；男性不妊症；リソソーム蓄積症；貧血；成長遅延；生存能力の低下；リンパ球の減少および脂肪欠乏症を伴う周産期致死性；ホモ接合性胚性致死；ならびにヘテロ接合性胚性致死のうちの少なくとも１つを示す、請求項６７に記載の方法。

８６．請求項６７に記載の方法によって同定された、薬剤。

８７．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである、請求項８６に記載の薬剤。

８８．前記アゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項８７に記載の薬剤。

８９．前記アンタゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項８７に記載の薬剤。

９０．請求項６７に記載の方法によって同定された、治療薬。

９１．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの発現を調節する薬剤を同定する方法であって、本本法には：
（ａ）試験薬剤を、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを発現している宿主細胞と接触させる工程；
（ｂ）試験薬剤が宿主細胞によるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの発現を調節するかどうかを決定する工程、
が含まれる、方法。

９２．請求項９１に記載の方法によって同定された、薬剤。

９３．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである、請求項９２に記載の薬剤。

９４．前記アゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項９３に記載の薬剤。

９５．前記アンタゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項９３に記載の薬剤。

９６．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ
４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する状態に影響を与えることができる治療薬を評価する方法であって、本方法には：
（ａ）そのゲノムに、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている非ヒトトランスジェニック動物を提供する工程；
（ｂ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定する工程；
（ｃ）（ｂ）の測定された生理学的特徴を性別一致野生型動物の生理学的特徴と比較する工程であって、ここで、前記野生型動物の前記生理学的特徴と異なる前記非ヒトトランスジェニック動物の前記生理学的特徴を、前記非ヒトトランスジェニック動物における前記遺伝子の破壊から生じる状態と同定する、工程；
（ｄ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物に試験薬剤を投与する工程；および
（ｅ）前記非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊に関連する前記同定された状態に対する前記試験薬剤の作用を評価する工程
が含まれる、方法。

９７．前記状態が、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害；脂質代謝障害；または発達異常である、請求項９６に記載の方法。

９８．請求項９６に記載の方法によって同定される治療薬。

９９．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである、請求項９８に記載の治療薬。

１００．前記アゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項９９に記載の治療薬。

１０１．前記アンタゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項９９に記載の治療薬。

１０２．請求項９８に記載の治療薬を含む薬学的組成物。

１０３．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；または胚性致死を処置または予防または寛解する方法であって、本方法には、前記障害をすでに有しているかもしくは前記障害に罹患しやすい被験体、または前記障害が予防される、そのような処置が必要な被験体に対して、請求項９４に記載の治療薬、またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストの治療有効量を投与する工程が含まれ、それによって、前記障害が処置または予防または寛解される、方法。

１０４．前記神経障害が、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の増大である、請求項１０３に記載の方法。

１０５．前記神経障害が、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の低減である、請求項１０３に記載の方法。

１０６．前記神経障害が、ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズムである、請求項１０３に記載の方法。

１０７．前記神経障害が、反転スクリーン試験中の運動協調性の増大である、請求項１０３に記載の方法。

１０８．前記神経障害が、反転スクリーン試験中の障害性の運動協調性である、請求項１０３に記載の方法。

１０９．前記神経障害が、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏または感覚障害である、請求項１０３に記載の方法。

１１０．前記眼の異常が、網膜の異常である、請求項１０３に記載の方法。

１１１．前記眼の異常が、視覚問題または失明と一致する、請求項１０３に記載の方法。

１１２．前記網膜の異常が、網膜色素変性症と一致する、請求項１１０に記載の方法。

１１３．前記網膜の異常が、網膜変性症または網膜の形成異常を特徴とする、請求項１１０に記載の方法。

１１４．前記網膜の異常が、網膜の形成異常、未熟児網膜症を含む様々な網膜症、水晶体後線維増殖症、血管新生緑内障、加齢性黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、隅角血管新生（ルベオーシス）、眼球の血管新生性疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺肥大（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織の移植、網膜動脈閉塞もしくは閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性症、色素性網膜炎、黄斑ジストロフィー、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、脳回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルヴェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、シニアローケン症候群、バルデー−ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレーム症候群、コケーン症候群、先天性脊椎・骨端異形成症、フリン−エアード症候群、フリートライヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルク病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジール症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮症、ピエール・マリー症候群、スティックラー症候群、カロチン血症、シスチン蓄積症、ウォルフラム症候群、バッセン−コルンツヴァイク症候群、無βリポタンパク質血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖体沈着症、ホモシスチン尿症またはマンノシドーシスと一致する、請求項１１０に記載の方法。

１１５．前記眼の異常が、白内障である、請求項１０３に記載の方法。

１１６．前記白内障が、全身性疾患（例えば、ヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、トリソミー１３−１５、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、上皮小体機能低下症またはコンラーディ症候群）である、請求項１１５に記載の方法。

１１７．前記発達異常が、胚性致死または生存能低下を含む、請求項１０３に記載の方法。

１１８．前記心臓血管、内皮または血管形成の障害が、動脈疾患（例えば、真性糖尿病；乳頭浮腫；視神経萎縮；アテローム性動脈硬化症；アンギナ；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心臓肥大および鬱血性心不全などの心不全；高血圧症；炎症性血管炎；レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤ならびに動脈再狭窄）；静脈およびリンパの障害（例えば、血栓静脈炎、リンパ管炎およびリンパ浮腫）；末梢血管疾患；癌（例えば、血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細管および海綿状）、グロムス腫瘍、毛細管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管外皮腫、カポジ肉腫、リンパ管腫およびリンパ管肉腫）；腫瘍血管新生；外傷（例えば、創傷、熱傷および他の組織の傷害）、移植片固定、瘢痕；虚血再灌流傷害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患または骨粗鬆症である、請求項１０３に記載の方法。

１１９．前記免疫障害が、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節症；全身硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫媒介性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；真性糖尿病；免疫媒介性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；中枢および末梢神経系の脱髄疾患（例えば、多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギラン・バレー症候群および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシー）；肝胆疾患（例えば、感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の非肝向性のウイルスによる肝炎）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎および硬化性胆管炎）；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）；グルテン過敏性腸症およびホイップル病；水疱性疾患、多形性紅斑および接触性皮膚炎を含む自己免疫性または免疫媒介性の皮膚疾患、乾癬；アレルギー性疾患（例えば、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹）；肺の免疫学的疾患（例えば、好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎）；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含む移植関連疾患である、請求項１０３に記載の方法。

１２０．前記骨代謝の異常または障害が、関節炎、骨粗鬆症または大理石骨病である、請求項１０３に記載の方法。

１２１．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常を寛解または調節する薬剤を同定する方法であって、本方法には：
（ａ）非ヒトトランスジェニック動物細胞培養物を提供する工程であって、前記培養物の
個々の細胞には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている、工程；
（ｂ）前記細胞培養に試験薬剤を投与する工程；および
（ｃ）前記試験薬剤が、前記細胞培養物において、前記神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；眼の異常；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；脂質代謝障害；または発達異常を寛解または調節するか否かを判定する工程
が含まれる、方法。

１２２．前記神経障害が、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の増大である、請求項１２１に記載の方法。

１２３．前記神経障害が、オープンフィールド活動性試験中の不安様応答の低減である、請求項１２１に記載の方法。

１２４．前記神経障害が、ホームケージ活動性試験中の異常な概日リズムである、請求項１２１に記載の方法。

１２５．前記神経障害が、反転スクリーン試験中の運動協調性の増大である、請求項１２１に記載の方法。

１２６．前記神経障害が、反転スクリーン試験中の障害性の運動協調性である、請求項１２１に記載の方法。

１２７．前記神経障害が、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏または感覚障害である、請求項１２１に記載の方法。

１２８．前記眼の異常が、網膜の異常である、請求項１２１に記載の方法。

１２９．前記眼の異常が、視覚問題または失明と一致する、請求項１２１に記載の方法。

１３０．前記網膜の異常が、網膜色素変性症と一致する、請求項１２８に記載の方法。

１３１．前記網膜の異常が、網膜変性症または網膜の形成異常を特徴とする、請求項１２８に記載の方法。

１３２．前記網膜の異常が、網膜の形成異常、未熟児網膜症を含む様々な網膜症、水晶体後線維増殖症、血管新生緑内障、加齢性黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、隅角血管新生（ルベオー
シス）、眼球の血管新生性疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺肥大（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織の移植、網膜動脈閉塞もしくは閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性症、色素性網膜炎、黄斑ジストロフィー、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、脳回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルヴェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、シニアローケン症候群、バルデー−ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレーム症候群、コケーン症候群、先天性脊椎・骨端異形成症、フリン−エアード症候群、フリートライヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルク病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジール症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮症、ピエール・マリー症候群、スティックラー症候群、カロチン血症、シスチン蓄積症、ウォルフラム症候群、バッセン−コルンツヴァイク症候群、無βリポタンパク質血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖体沈着症、ホモシスチン尿症またはマンノシドーシスと一致する、請求項１２８に記載の方法。

１３３．前記眼の異常が、白内障である、請求項１２１に記載の方法。

１３４．前記白内障が、全身性疾患（例えば、ヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、トリソミー１３−１５、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、上皮小体機能低下症またはコンラーディ症候群）である、請求項１３３に記載の方法。

１３５．前記発達異常が、胚性致死または生存能低下を含む、請求項１２１に記載の方法。

１３６．前記心臓血管、内皮または血管形成の障害が、動脈疾患（例えば、真性糖尿病；乳頭浮腫；視神経萎縮；アテローム性動脈硬化症；アンギナ；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心臓肥大および鬱血性心不全などの心不全；高血圧症；炎症性血管炎；レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤ならびに動脈再狭窄）；静脈およびリンパの障害（例えば、血栓静脈炎、リンパ管炎およびリンパ浮腫）；末梢血管疾患；癌（例えば、血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細管および海綿状）、グロムス腫瘍、毛細管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管外皮腫、カポジ肉腫、リンパ管腫およびリンパ管肉腫）；腫瘍血管新生；外傷（例えば、創傷、熱傷および他の組織の傷害）、移植片固定、瘢痕；虚血再灌流傷害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患または骨粗鬆症である、請求項１２１に記載の方法。

１３７．前記免疫障害が、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節症；全身硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫媒介性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；真性糖尿病；免疫媒介性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；中枢および末梢神経系の脱髄疾患（例えば、多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギラン・バレー症候群および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシー）；肝胆疾患（例えば、感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の非肝向性のウイルスによる肝炎）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎および硬化性胆管炎）；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）；グルテン過敏性腸症およびホイップル病；水疱性疾患、多形性紅斑および接触性皮膚炎を含む自己免疫性または免疫媒介性の皮膚疾患、乾癬；アレルギー性疾患（例えば、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹）；肺の免疫学的疾患（例
えば、好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎）；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含む移植関連疾患である、請求項１２１に記載の方法。

１３８．前記骨代謝の異常または障害が、関節炎、骨粗鬆症または大理石骨病である、請求項１２１に記載の方法。

１３９．請求項１２１に記載の方法によって同定された、薬剤。

１４０．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである、請求項１３９に記載の薬剤。

１４１．前記アゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項１４０に記載の薬剤。

１４２．前記アンタゴニストが、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体である、請求項１４０に記載の薬剤。

１４３．請求項１２１に記載の方法によって同定された、治療薬。

１４４．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型を調節する方法であって前記方法は、前記表現型をすでに有し得るか、または前記表現型を有する傾向にあり得るか、もしくは前記表現型を予防すべき状態であり得る被験体に、有効量の請求項４６に記載の薬剤またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストを投与する工程を含み、それにより、前記表現型を効果的に調節する、方法。

１４５．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する生理学的特徴を調節する方法であって、前記方法は、前記生理学的特徴をすでに示し得るか、または前記生理学的特徴を示す傾向にあり得るか、もしくは前記生理学的特徴を予防すべき状態であり得る被験体に、有効量の請求項５２に記載の薬剤またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストを投与する工程を含み、それにより、前記生理学的特徴を効果的に調節する、方法。前記方法は、前記生理学的特徴をすでに示し得るか、または前記生理学的特徴を示す傾向にあり得るか、もしくは前記生理学的特徴を予防すべき状態であり得る被験体に、有効量の請求項５２に記載の薬剤またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストを投与する工程を含み、それにより、前記生理学的特徴を効果的に調節する、方法。

１４６．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを
コードする遺伝子の破壊に関連する行動を調節する方法であって、前記方法は、前記行動をすでに示し得るか、または前記行動を示す傾向にあり得るか、もしくは前記示される行動を予防すべき状態であり得る被験体に、有効量の請求項６３に記載の薬剤またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストを投与する工程を含み、それにより、前記行動を効果的に調節する、方法。

１４７．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの発現を調節する方法であって、前記方法は、前記ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを発現している宿主細胞に有効量の請求項９２に記載の薬剤またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストを投与する工程を含み、それによって、前記ポリペプチドの発現を効果的に調節する、方法。

１４８．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が関連する状態を調節する方法であって、本方法には、前記状態を有しているか、もしくは前記状態に罹患しやすい被験体、または前記状態が予防される被験体に対して、請求項９８に記載の治療薬、またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストの治療有効量が投与される工程が含まれ、それによって前記状態が効率よく調節される、方法。

１４９．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００
６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；または胚性致死を処置または予防または寛解する方法であって、本方法には：非ヒトトランスジェニック動物細胞培養物（前記培養物の個々の細胞には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊が含まれている）に対して、請求項１３９に記載の薬剤、またはそのアゴニストもしくはアンタゴニストの治療有効量を投与する工程が含まれ、それによって、前記障害が効率よく処置または予防または寛解される、方法。

図１は、ネイティブ配列ＰＲＯ２２６ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号１）を示し、ここで、配列番号１は、本明細書中で「ＤＮＡ３３４６０−１１６６」（ＵＮＱ２００）と称されるクローンである。図２は、図１に示される配列番号１のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号２）を示す。図３は、ネイティブ配列ＰＲＯ２５７ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号３）を示し、ここで、配列番号３は、本明細書中で「ＤＮＡ３５８４１−１１７３」（ＵＮＱ２２４）と称されるクローンである。図４は、図３に示される配列番号３のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号４）を示す。図５は、ネイティブ配列ＰＲＯ２６８ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号５）を示し、ここで、配列番号５は、本明細書中で「ＤＮＡ３９４２７−１１７９」（ＵＮＱ２３５）と称されるクローンである。図６は、図５に示される配列番号５のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号６）を示す。図７は、ネイティブ配列ＰＲＯ２９０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号７）を示し、ここで、配列番号７は、本明細書中で「ＤＮＡ３５６８０−１２１２」（ＵＮＱ２５３）と称されるクローンである。図８は、図７に示される配列番号７のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号８）を示す。図９は、ネイティブ配列ＰＲＯ３６００６ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号９）を示し、ここで、配列番号９は、本明細書中で「ＤＮＡ２２５５４３」（ＵＮＱ２９４）と称されるクローンである。図１０は、図９に示される配列番号９のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号１０）を示す。図１１は、ネイティブ配列ＰＲＯ３６３ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号１１）を示し、ここで、配列番号１１は、本明細書中で「ＤＮＡ４５４１９−１２５２」（ＵＮＱ３１８）と称されるクローンである。図１２は、図１１に示される配列番号１１のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号１２）を示す。図１３は、ネイティブ配列ＰＲＯ３６５ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号１３）を示し、ここで、配列番号１３は、本明細書中で「ＤＮＡ４６７７７−１２５３」（ＵＮＱ３２０）と称されるクローンである。図１４は、図１３に示される配列番号１３のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号１４）を示す。図１５は、ネイティブ配列ＰＲＯ３８２ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号１５）を示し、ここで、配列番号１５は、本明細書中で「ＤＮＡ４５２３４−１２７７」（ＵＮＱ３２３）と称されるクローンである。図１６は、図１５に示される配列番号１５のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号１６）を示す。図１７は、ネイティブ配列ＰＲＯ４４４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号１７）を示し、ここで、配列番号１７は、本明細書中で「ＤＮＡ２６８４６−１３９７」（ＵＮＱ３２８）と称されるクローンである。図１８は、図１７に示される配列番号１７のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号１８）を示す。図１９は、ネイティブ配列ＰＲＯ７０５ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号１９）を示し、ここで、配列番号１９は、本明細書中で「ＤＮＡ５０９１４−１２８９」（ＵＮＱ３６９）と称されるクローンである。図２０は、図１９に示される配列番号１９のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号２０）を示す。図２１は、ネイティブ配列ＰＲＯ１０７１ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号２１）を示し、ここで、配列番号２１は、本明細書中で「ＮＡ５８８４７−１３８３」（ＮＱ５２８）と称されるクローンである。図２２は、図２１に示される配列番号２１のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号２２）を示す。図２３は、ネイティブ配列ＰＲＯ１１２５ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号２３）を示し、ここで、配列番号２３は、本明細書中で「ＮＡ６０６１９−１４８２」（ＵＮＱ５６３）と称されるクローンである。図２４は、図２３に示される配列番号２３のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号２４）を示す。図２５は、ネイティブ配列ＰＲＯ１１３４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号２５）を示し、ここで、配列番号２５は、本明細書中で「ＤＮＡ５６８６５−１４９１」（ＵＮＱ５７２）と称されるクローンである。図２６は、図２５に示される配列番号２５のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号２６）を示す。図２７は、ネイティブ配列ＰＲＯ１１５５ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号２７）を示し、ここで、配列番号２７は、本明細書中で「ＤＮＡ５９８４９−１５０４」（ＵＮＱ５８５）と称されるクローンである。図２８は、図２７に示される配列番号２７のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号２８）を示す。図２９は、ネイティブ配列ＰＲＯ１２８１ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号２９）を示し、ここで、配列番号２９は、本明細書中で「ＤＮＡ５９８２０−１５４９」（ＵＮＱ６５１）と称されるクローンである。図３０は、図２９に示される配列番号２９のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号３０）を示す。図３１は、ネイティブ配列ＰＲＯ１３４３ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号３１）を示し、ここで、配列番号３１は、本明細書中で「ＤＮＡ６６６７５−１５８７」（ＵＮＱ６９８）と称されるクローンである。図３２は、図３１に示される配列番号３１のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号３２）を示す。図３３は、ネイティブ配列ＰＲＯ１３７９ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号３３）を示し、ここで、配列番号３３は、本明細書中で「ＤＮＡ５９８２８−１６０８」（ＵＮＱ７１６）と称されるクローンである。図３４は、図３３に示される配列番号３３のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号３４）を示す。図３５は、ネイティブ配列ＰＲＯ１３８０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号３５）を示し、ここで、配列番号３５は、本明細書中で「ＤＮＡ６０７４０−１６１５」（ＵＮＱ７１７）と称されるクローンである。図３６は、図３５に示される配列番号３５のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号３６）を示す。図３７は、ネイティブ配列ＰＲＯ１３８７ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号３７）を示し、ここで、配列番号３７は、本明細書中で「ＤＮＡ６８８７２−１６２０」（ＵＮＱ７２２）と称されるクローンである。図３８は、図３７に示される配列番号３７のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号３８）を示す。図３９は、ネイティブ配列ＰＲＯ１４１９ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号３９）を示し、ここで、配列番号３９は、本明細書中で「ＤＮＡ７１２９０−１６３０」（ＵＮＱ７３３）と称されるクローンである。図４０は、図３９に示される配列番号３９のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号４０）を示す。図４１は、ネイティブ配列ＰＲＯ１４３３ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号４１）を示し、ここで、配列番号４１は、本明細書中で「ＤＮＡ７１１８４−１６３４」（ＵＮＱ７３８）と称されるクローンである。図４２は、図４１に示される配列番号４１のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号４２）を示す。図４３は、ネイティブ配列ＰＲＯ１４７４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号４３）を示し、ここで、配列番号４３は、本明細書中で「ＤＮＡ７３７３９−１６４５」（ＵＮＱ７４５）と称されるクローンである。図４４は、図４３に示される配列番号４３のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号４４）を示す。図４５は、ネイティブ配列ＰＲＯ１５５０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号４５）を示し、ここで、配列番号４５は、本明細書中で「ＤＮＡ７６３９３−１６６４」（ＵＮＱ７６２）と称されるクローンである。図４６は、図４５に示される配列番号４５のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号４６）を示す。図４７は、ネイティブ配列ＰＲＯ１５７１ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号４７）を示し、ここで、配列番号４７は、本明細書中で「ＤＮＡ７３７３０−１６７９」（ＵＮＱ７７７）と称されるクローンである。図４８は、図４７に示される配列番号４７のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号４８）を示す。図４９は、ネイティブ配列ＰＲＯ１５７２ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号４９）を示し、ここで、配列番号４９は、本明細書中で「ＤＮＡ７３７３４−１６８０」（ＵＮＱ７７８）と称されるクローンである。図５０は、図４９に示される配列番号４９のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号５０）を示す。図５１は、ネイティブ配列ＰＲＯ１７５９ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号５１）を示し、ここで、配列番号５１は、本明細書中で「ＤＮＡ７６５３１−１７０１」（ＵＮＱ８３２）と称されるクローンである。図５２は、図５１に示される配列番号５１のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号５２）を示す。図５３は、ネイティブ配列ＰＲＯ１９０４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号５３）を示し、ここで、配列番号５３は、本明細書中で「ＤＮＡ８２３７２」（ＵＮＱ８８６）と称されるクローンである。図５４は、図５３に示される配列番号５３のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号５４）を示す。図５５は、ネイティブ配列ＰＲＯ３５１９３ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号５５）を示し、ここで、配列番号５５は、本明細書中で「ＤＮＡ２２５６８１」（ＵＮＱ９８３）と称されるクローンである。図５６は、図５５に示される配列番号５５のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号５６）を示す。図５７は、ネイティブ配列ＰＲＯ４３４１ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号５７）を示し、ここで、配列番号５７は、本明細書中で「ＤＮＡ８１７６１−２５８３」（ＵＮＱ１８９５）と称されるクローンである。図５８は、図５７に示される配列番号５７のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号５８）を示す。図５９は、ネイティブ配列ＰＲＯ４３４８ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号５９）を示し、ここで、配列番号５９は、本明細書中で「ＤＮＡ９２２３２−２５８９」（ＵＮＱ１９０２）と称されるクローンである。図６０は、図５９に示される配列番号５９のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号６０）を示す。図６１は、ネイティブ配列ＰＲＯ４３６９ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号６１）を示し、ここで、配列番号６１は、本明細書中で「ＤＮＡ９２２８９−２５９８」（ＵＮＱ１９１１）と称されるクローンである。図６２は、図６１に示される配列番号６１のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号６２）を示す。図６３は、ネイティブ配列ＰＲＯ４３８１ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号６３）を示し、ここで、配列番号６３は、本明細書中で「ＤＮＡ９２２２５−２６０３」（ＵＮＱ１９１６）と称されるクローンである。図６４は、図６３に示される配列番号６３のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号６４）を示す。図６５は、ネイティブ配列ＰＲＯ４４０７ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号６５）を示し、ここで、配列番号６５は、本明細書中で「ＤＮＡ９２２６４−２６１６」（ＵＮＱ１９３２）と称されるクローンである。図６６は、図６５に示される配列番号６５のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号６６）を示す。図６７は、ネイティブ配列ＰＲＯ４４２５ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号６７）を示し、ここで、配列番号６７は、本明細書中で「ＤＮＡ９３０１１−２６３７」（ＵＮＱ１９４２）と称されるクローンである。図６８は、図６７に示される配列番号６７のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号６８）を示す。図６９は、ネイティブ配列ＰＲＯ４９８５ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号６９）を示し、ここで、配列番号６９は、本明細書中で「ＤＮＡ５９７７０−２６５２」（ＵＮＱ２４２６）と称されるクローンである。図７０は、図６９に示される配列番号６９のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号７０）を示す。図７１は、ネイティブ配列ＰＲＯ４９８９ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号７１）を示し、ここで、配列番号７１は、本明細書中で「ＤＮＡ８０１３５−２６５５」（ＵＮＱ２４２９）と称されるクローンである。図７２は、図７１に示される配列番号７１のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号７２）を示す。図７３は、ネイティブ配列ＰＲＯ５７３７ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号７３）を示し、ここで、配列番号７３は、本明細書中で「ＤＮＡ９２９２９−２５３４−１」（ＵＮＱ２４５６）と称されるクローンである。図７４は、図７３に示される配列番号７３のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号７４）を示す。図７５は、ネイティブ配列ＰＲＯ５８００ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号７５）を示し、ここで、配列番号７５は、本明細書中で「ＤＮＡ１０８９１２−２６８０」（ＵＮＱ２５００）と称されるクローンである。図７６は、図７５に示される配列番号７５のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号７６）を示す。図７７は、ネイティブ配列ＰＲＯ５９９３ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号７７）を示し、ここで、配列番号７７は、本明細書中で「ＤＮＡ１００２７６−２６８４」（ＵＮＱ２５０４）と称されるクローンである。図７８は、図７７に示される配列番号７７のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号７８）を示す。図７９は、ネイティブ配列ＰＲＯ６０１７ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号７９）を示し、ここで、配列番号７９は、本明細書中で「ＤＮＡ９６８６０−２７００」（ＵＮＱ２５２４）と称されるクローンである。図７９は、ネイティブ配列ＰＲＯ６０１７ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号７９）を示し、ここで、配列番号７９は、本明細書中で「ＤＮＡ９６８６０−２７００」（ＵＮＱ２５２４）と称されるクローンである。図８０は、図７９に示される配列番号７９のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号８０）を示す。図８１は、ネイティブ配列ＰＲＯ７１７４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号８１）を示し、ここで、配列番号８１は、本明細書中で「ＤＮＡ９６８８３−２７４５」（ＵＮＱ２７８４）と称されるクローンである。図８２は、図８１に示される配列番号８１のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号８２）を示す。図８３は、ネイティブ配列ＰＲＯ９７４４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号８３）を示し、ここで、配列番号８３は、本明細書中で「ＤＮＡ１３６１１０−２７６３」（ＵＮＱ３００３）と称されるクローンである。図８３は、ネイティブ配列ＰＲＯ９７４４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号８３）を示し、ここで、配列番号８３は、本明細書中で「ＤＮＡ１３６１１０−２７６３」（ＵＮＱ３００３）と称されるクローンである。図８４は、図８３に示される配列番号８３のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号８４）を示す。図８５は、ネイティブ配列ＰＲＯ９８２１ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号８５）を示し、ここで、配列番号８５は、本明細書中で「ＤＮＡ１０８７２５−２７６６」（ＵＮＱ３０２３）と称されるクローンである。図８５は、ネイティブ配列ＰＲＯ９８２１ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号８５）を示し、ここで、配列番号８５は、本明細書中で「ＤＮＡ１０８７２５−２７６６」（ＵＮＱ３０２３）と称されるクローンである。図８６は、図８５に示される配列番号８５のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号８６）を示す。図８７は、ネイティブ配列ＰＲＯ９８５２ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号８７）を示し、ここで、配列番号８７は、本明細書中で「ＤＮＡ１２９３３２−２７７５」（ＵＮＱ３０３７）と称されるクローンである。図８７は、ネイティブ配列ＰＲＯ９８５２ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号８７）を示し、ここで、配列番号８７は、本明細書中で「ＤＮＡ１２９３３２−２７７５」（ＵＮＱ３０３７）と称されるクローンである。図８８は、図８７に示される配列番号８７のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号８８）を示す。図８９は、ネイティブ配列ＰＲＯ９８７３ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号８９）を示し、ここで、配列番号８９は、本明細書中で「ＤＮＡ１４３０７６−２７８７」（ＵＮＱ３０５４）と称されるクローンである。図９０は、図８９に示される配列番号８９のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号９０）を示す。図９１は、ネイティブ配列ＰＲＯ１０１９６ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号９１）を示し、ここで、配列番号９１は、本明細書中で「ＤＮＡ１４４８４１−２８１６」（ＵＮＱ３１１５）と称されるクローンである。図９２は、図９１に示される配列番号９１のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号９２）を示す。図９３は、ネイティブ配列ＰＲＯ３４７７８ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号９３）を示し、ここで、配列番号９３は、本明細書中で「ＤＮＡ２２０４３２」（ＵＮＱ３９６６）と称されるクローンである。図９４は、図９３に示される配列番号９３のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号９４）を示す。図９５は、ネイティブ配列ＰＲＯ２０２３３ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号９５）を示し、ここで、配列番号９５は、本明細書中で「ＤＮＡ１６５６０８」（ＵＮＱ６２０８）と称されるクローンである。図９６は、図９５に示される配列番号９５のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号９６）を示す。図９７は、ネイティブ配列ＰＲＯ２１９５６ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号９７）を示し、ここで、配列番号９７は、本明細書中で「ＤＮＡ１７８５１１−２９８６」（ＵＮＱ６９７３）と称されるクローンである。図９８は、図９７に示される配列番号９７のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号９８）を示す。図９９は、ネイティブ配列ＰＲＯ５７２９０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号９９）を示し、ここで、配列番号９９は、本明細書中で「ＤＮＡ２６９２３８」（ＵＮＱ８７８２）と称されるクローンである。図１００は、図９９に示される配列番号９９のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号１００）を示す。図１０１は、ネイティブ配列ＰＲＯ３８４６５ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号１０１）を示し、ここで、配列番号１０１は、本明細書中で「ＤＮＡ２２８００２」（ＵＮＱ９１２８）と称されるクローンである。図１０２は、図１０１に示される配列番号１０１のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号１０２）を示す。図１０３は、ネイティブ配列ＰＲＯ３８６８３ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号１０３）を示し、ここで、配列番号１０３は、本明細書中で「ＤＮＡ２２８１９９」（ＵＮＱ９６３８）と称されるクローンである。図１０４は、図１０３に示される配列番号１０３のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号１０４）を示す。図１０５は、ネイティブ配列ＰＲＯ８５１６１ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号１０５）を示し、ここで、配列番号１０５は、本明細書中で「ＤＮＡ３２９６３２」（ＵＮＱ１６１６８）と称されるクローンである。図１０６は、図１０５に示される配列番号１０５のコード配列から得られるアミノ酸配列（配列番号１０６）を示す。

好ましい実施形態の詳細な説明
Ｉ．定義
用語「ＰＲＯポリペプチド」および「ＰＲＯ」とは、本明細書中で使用されるとき、および番号の表記が直後に来る場合は、種々のポリペプチドのことをいい、ここで完全な表記（すなわちＰＲＯ／番号）は本明細書に記載する特定のポリペプチド配列のことをいう。用語「ＰＲＯ／番号ポリペプチド」および「ＰＲＯ／番号」（ここで、用語「番号」が本明細書中で使用される実際の番号の表記として提示される）は、ネイティブの配列のポリペプチドおよびポリペプチド改変体（これは本明細書においてさらに定義する）を包含する。本明細書中に記載されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、様々な供給源から、例えば、複数のヒトの組織タイプから、もしく
は別の供給源から単離することができ、また、組み換え方法もしくは合成方法によって調製することもできる。用語「ＰＲＯポリペプチド」とは、本明細書に開示した各々の個々のＰＲＯ／番号ポリペプチドのことをいう。「ＰＲＯポリペプチド」にあてはまる本明細書中のすべての開示は、ポリペプチドの各々を、個別にならびに総括していう。例えば、その調製、精製、誘導、それに対する抗体の形成、その投与、それを含有する組成物、それによる疾患の処置に関する記載などは本発明のポリペプチドの各々に個別に関するものである。用語「ＰＲＯポリペプチド」はまた、本明細書に開示したＰＲＯ／番号ポリペプチドの改変体を含む。

「自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド」には、自然界に存在しているものに由来する対応するＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドと同じアミノ酸配列を有しているポリペプチドが含まれる。そのような自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、自然界から単離することができ、また、組み換え手段もしくは合成手段によって生産することもできる。用語「自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１
５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド」には、特に、特異的なＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの自然界に存在している短縮型または分泌型（例えば、細胞外ドメインの配列）、自然界に存在している変異体形態（例えば、異なるようにスプライシングされた形態）、およびこれらのポリペプチドの自然界に存在している対立変異体が含まれる。本発明により、本明細書中に開示される自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが提供される。これは成熟配列であるか、または添付の図面に示される全長のアミノ酸配列が含まれている全長の自然界に存在している配列のポリペプチドである。開始コドンおよび終止コドンは、図面中では太字で示し、下線を付した。しかし、添付の図面の中で開示されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、図の中に１位のアミノ酸として本明細書中で指定されるメチオニン残基で始まるように示されるが、図中の１位のアミノ酸よりも上流もしくは下流のいずれかに存在している他のメチオニン残基が、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ
１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドについての開始アミノ酸残基として使用される場合があることも考えられ、そしてそれは可能である。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの「細胞外ドメイン」あるいは「ＥＣＤ」は、膜貫通ドメインと細胞質ドメインが原則として含まれていない、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの形態を意味する。通常、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのＥＣＤには、そのような膜貫通ドメインおよび／または細胞質ドメインの１％未満しか含まれず、好ましくは、そのようなドメインの０．５％未満しか含まれないであろう。本発明のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、
ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドについて同定された任意の膜貫通ドメインが、そのタイプの疎水性ドメインを同定するために当該分野で日常的に使用されている基準にしたがって同定されることは理解されるであろう。膜貫通ドメインの厳密な境界は変動し得るが、最もあり得るのは本明細書において最初に同定されたドメインのいずれかの末端において約５アミノ酸を超えないものである。したがって、任意選択で、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの細胞外ドメインには、実施例または明細書の中で同定されたような膜貫通ドメイン／細胞外ドメインの境界のいずれかの側の上にある約５個またはそれ未満のアミノ酸が含まれ得、そして、関連するシグナルペプチドを伴うかまたはそれらが含まれないそのようなポリペプチド、ならびに、それらをコードする核酸が、本発明によって意図される。

本明細書中に開示される様々なＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの「シグナルペプチド」のおおよその位置は、本明細書および／または添付の図面の中に示される。しかし、シグナルペプチドのＣ末端側の境界は様々であり得るが、ほとんどは、本明細書中で最初に同定されたシグナルペプチドのＣ末端側の境界のいずれかの側にある約５アミノ酸を超えないことに留意されない。ここでは、シグナルペプチドのＣ末端側の境界は、そのタイプのアミノ酸配列エレメントを同定するために当該分野で日常的に使用されている基準にしたがって同定され得る（例えば、Ｎｉｅｌｓｅｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｔ．Ｅｎｇ．１０：１−６（１９９７）およびｖｏｎＨｅｉｎｊｅｅｔａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ．Ｒｅｓ．１４：４６８３−４６９０（１９８６））。さらに、いくつかの場合において、分泌ポリペプチドからのシグナル配列の切断は、完全に均一ではなく、２つ以上の分泌種をもたらす。これらの成熟ポリペプチド
（シグナルペプチドは、本明細書において同定されたシグナルペプチドのＣ末端の境界のいずれかの側の約５アミノ酸以内において切断されている）およびそれらをコードするポリヌクレオチドは、本発明により企図される。

「ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド変異体」は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、好ましくは、本明細書中に開示される全長の自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列、本明細書中に開示されるシグナルペプチドが含まれていないＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列、本明細書中に開示される、シグナルペプチドが含まれているかま
たはシグナルペプチドが含まれていないＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの細胞外ドメイン、あるいは、本明細書中に開示される全長のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列の任意の他の断片（例えば、全長のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの完全なコード配列の一部のみを提示する核酸によってコードされるもの）と、少なくとも約８０％のアミノ酸配列同一性を有している、本明細書中で定義される活性のあるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを意味する。そのようなＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１
、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド変異体としては、例えば、全長の自然界に存在しているアミノ酸配列のＮ−もしくはＣ−末端で、１つ以上のアミノ酸が付加されているかまたは欠失させられている、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが挙げられる。通常は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド変異体は、本明細書中に開示される全長の自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列、本明細書中に開示されるシグナルペプチドが含まれていないＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列、本明細書中に開示される、シグナルペプチドが含まれているかまたはシグナルペプチドが含まれていないＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの細胞外ドメイン、あるいは、本明細書中に開示される全長のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列の任意の他の特異的に定義される断片を有しているか、あるいはそれらに対して、少なくとも約８０％のアミノ酸配列同一性を有しているか、またはそれらに対して、少なくとも約８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のアミノ酸配列同一性を有しているであろう。通常、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体ポリペプチドは、約１０アミノ酸長であるかまたは少なくとも約１０アミノ酸長であるか、あるいは、少なくとも約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００アミノ酸長であるか、またはそれ以上である。任意選択で、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体ポリペプチドは、自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列と比較してわずかに１つの保存的アミノ酸置換を有するか、あるいは、自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３

、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列と比較して、わずかに２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個の保存的アミノ酸置換を有するであろう。

本明細書中で同定されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列に関する「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」は、配列がアラインメントされ、そして必要に応じて、最大のパーセント配列同一性を得るためにギャップが導入された後の、そして、配列同一性の一部としてはいずれの保存的置換も考慮されない、特異的なＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列の中のアミノ酸残基と同一である候補の配列中のアミノ酸残基のパーセンテージとして定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定する目的のためのアラインメントは、当業者の範囲内の様々な方法、例えば、公的に入手可能なコンピュータソフトウェア（例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェア）を用いて達成することができる。当業者は、比較すべき配列の完全長に亘って最大アラインメントを達成するために必要ないずれかのアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。しかしながら、本明細書の目的のためには、％アミノ酸同一性の値は、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ−２を用いて生成し、ここでＡＬＩＧＮ−２プログラムに関する完全なソースコードを以下の表１に示す。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータープログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．によって著されており、そして以下の表１に示されるソース・コードが、Ｕ．Ｓ．ＣｏｐｙｒｉｇｈｔＯｆｆｉｃｅ，ＷａｓｈｉｎｇｔｏｎＤ．Ｃ．，２０５５９のユーザーマニュアルにファイルされている。ここでは、Ｕ．Ｓ．ＣｏｐｙｒｉｇｈｔＲｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎＮｏ．ＴＸＵ５１００８７として登録されている。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａから公的に入手することができ、または、以下の表１に示すソースコードからコンパイルしてもよい。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、ＵＮＩＸ（登録商標）オペレーティングシステム、好ましくはデジタルＵＮＩＸ（登録商標）Ｖ４．０Ｄ上で使用するためにコンパイルしなければならない。すべての配列比較パラメータはＡＬＩＧＮ−２プログラムにより設定され、変更しない。

アミノ酸配列比較のためにＡＬＩＧＮ−２を使用する場合において、所与のアミノ酸配列Ｂに対する所与のアミノ酸配列Ａの％アミノ酸配列同一性（これは代替として、所与のアミノ酸配列Ｂに対する特定の％アミノ酸配列同一性を有するか、または含む所与のアミノ酸配列Ａと表現できる）は、以下のとおり：
１００×分数Ｘ／Ｙ
式中、Ｘは、ＡとＢのプログラムによるアラインメントにおける配列アラインメントプログラムＡＬＩＧＮ−２によって同定された適合としてスコアされたアミノ酸残基の数であり、Ｙは、Ｂの中のアミノ酸残基の総数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さとは等しくない場合には、Ｂに対するＡの％アミノ酸配列同一性は、Ａに対するＢ
の％アミノ酸配列同一性とは等しくないであろうことが理解されるであろう。この方法を使用する％アミノ酸配列同一性の計算の一例として、表２および３には、「ＰＲＯ」と指定されたアミノ酸配列に対する「比較タンパク質（ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎＰｒｏｔｅｉｎ）」と指定されたアミノ酸配列の％アミノ酸配列同一性を計算するための方法が示される。ここでは、「ＰＲＯ」は、目的の仮想ＰＲＯポリペプチドのアミノ酸配列を示し、「比較タンパク質」は、目的の「ＰＲＯ」ポリペプチドがそれに対して比較されるポリペプチドのアミノ酸配列を示し、そして「Ｘ」、「Ｙ」、および「Ｚ」はそれぞれ、様々な仮想アミノ酸残基を示す。他に特段の記載がない限り、本明細書で使用するすべての％アミノ酸配列同一性の値は、ＡＬＩＧＮ−２コンピュータプログラムを用いて直前のパラグラフにおいて記載した通りに得られる。

「ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体ポリヌクレオチド」、あるいは、「ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体核酸配列」は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする核酸分子、好ましくは、本明細書中で定義される活性のあるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを意味し、これらは、本明細書中に開示される全長の自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列をコードするヌクレオチド配列、本明細書中に開示されるシグナルペプチドが含まれていない全長の自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列、本明細書中に開示される、シグナルペプチドが含まれているかもしくは含まれていないＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの細胞外ドメイン、あるいは、本明細書中に開示される全長のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列の任意の他の断片（例えば、全長のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの完全なコード配列のわずかに一部を示す核酸によってコードされるもの）をコードしているヌクレオチド配列と少なくとも約８０％の核酸配列同一性を有する。通常、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体ポリヌクレオチドは、本明細書中に開示される全長の自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド

配列、本明細書中に開示されるシグナルペプチドが含まれていない全長の自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列、本明細書中に開示される、シグナル配列が含まれているかもしくは含まれていないＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの細胞外ドメイン、あるいは、本明細書中に開示される全長のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド配列の任意の他の断片をコードする核酸配列と、少なくとも約８０％の核酸配列同一性を有するか、あるいは、少なくとも約８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の核酸配列同一性を有するであろう。改変体は、ネイティブヌクレオチド配列を包含しない。

通常、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体ポリヌクレオチドは、少なくとも約５ヌクレオチド長であるか、あるいは、少なくとも約６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０、８００、８１０、８２０、８３０、８４０、８５０、８６０、８７０、８８０、８９０、９００、９１０、９２０、９３０、９４０、９５０、９６０、９７０、９８０、９９０、または１０００ヌクレオチド長である。この状況では、用語「約」は、記載される長さのプラスマイナス１０％のヌクレオチド配列の長さを意味する。

本明細書中で同定されたＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３−、もしくはＰＲＯ８５１６１−をコードする核酸配列に関する「パーセント（％）核酸配列同一性」は、配列がアラインメントされ、そして必要に応じて、最大のパーセント配列同一性を得るためにギャップが導入された後の、目的のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１核酸配列の中のヌクレオチドと同一である候補の配列中のヌクレオチドのパーセンテージとして定義される。パーセント核酸配列同一性を決定する目的のためのアラインメントは、当業者の範囲内の様々な方法、例えば、公的に入手可能なコンピュータソフトウェア（例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェア）を用いて達成することができる。しかしながら、本明細書の目的のためには、％核酸同一性の値は、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ−２を用いて生成し、ここでＡＬＩＧＮ−２プログラムに関する完全なソースコードを以下の表１に示す。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータプログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．により作成され、そして以下の表１に示すソースコードは、米国著作権局ＷａｓｈｉｎｇｔｏｎＤ．Ｃ．，２０５５９においてユーザー文書と共に提出されており、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７として登録されている。ＡＬＩ
ＧＮ−２プログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａから公的に入手することができ、または、以下の表１に示すソースコードからコンパイルしてもよい。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、ＵＮＩＸ（登録商標）オペレーティングシステム、好ましくはデジタルＵＮＩＸ（登録商標）Ｖ４．０Ｄ上で使用するためにコンパイルしなければならない。すべての配列比較パラメータはＡＬＩＧＮ−２プログラムにより設定され、変更しない。

核酸配列比較のためにＡＬＩＧＮ−２を使用する場合において、所与の核酸配列Ｄに対する所与の核酸配列Ｃの％核酸配列同一性（これは代替として、所与の核酸配列Ｄに対する特定の％核酸配列同一性を有するか、または含む所与の核酸配列Ｃと表現できる）は、以下のとおり：
１００×分数Ｗ／Ｚ
［式中、Ｗは、ＣおよびＤのプログラムのアラインメントにおいて配列アラインメントプログラムＡＬＩＧＮ−２により同一で一致とスコア付けされたヌクレオチドの数であり、Ｚは、Ｄにおけるヌクレオチドの総数である］計算される。核酸配列Ｃの長さが核酸配列Ｄの長さと等しくない場合は、Ｄに対するＣの％核酸配列同一性は、Ｃに対するＤの％核酸配列同一性と等しくならないことが理解されるだろう。％核酸配列同一性の計算の例として、表４および５は、「ＰＲＯ−ＤＮＡ」と表記した核酸配列に対する「比較ＤＮＡ」と表記した核酸配列の％核酸配列同一性をどのように計算するかを示しており、ここで「ＰＲＯ−ＤＮＡ」は、目的の仮説ＰＲＯコード核酸配列を示し、「比較ＤＮＡ」は、目的の「ＰＲＯ−ＤＮＡ」核酸分子を比較する相手である核酸分子の核酸配列を示し、そして「Ｎ」、「Ｌ」および「Ｖ」は、各々異なる仮説ヌクレオチドを示す。他に特段の記載がない限り、本明細書で使用するすべての％核酸配列同一性の値は、ＡＬＩＧＮ−２コンピュータプログラムを用いて直前のパラグラフにおいて記載した通りに得られる。

本発明によってはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体ポリヌクレオチドも提供される。これらは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする核酸分子であり、そしてこれらは、本明細書中に開示される全長のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲ
Ｏ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列に対して、好ましくはストリンジェントなハイブリダイゼーションおよび洗浄条件下で、ハイブリダイズすることができる。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体ポリペプチドは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体ポリヌクレオチドによってコードされるものであり得る。

用語「全長のコード領域」は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする核酸に関して使用される場合には、本発明の全長のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲ
Ｏ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするヌクレオチドの配列を意味する（これは、多くの場合は、添付の図面において開始コドンと終結コドン（それらが含まれる）の間に示される）。用語「全長のコード領域」は、ＡＴＣＣに寄託された核酸に関して使用される場合には、ＡＴＣＣに寄託されたベクターの中に挿入されている、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするｃＤＮＡ部分を意味する（これは、多くの場合には、添付の図面の中で開始コドンと終結コドンの間（それらが含まれる）に示される）。

「単離された」とは、本明細書中で開示する様々なポリペプチドを説明するために用いる場合、その天然の環境の成分中から同定および分離および／または回収されたポリペプチドを意味する。その天然の環境の夾雑成分は、代表的にはポリペプチドの診断または治療上の使用を妨害する物質であり、それらとしては、酵素、ホルモンおよび他のタンパク質性または非タンパク質性の溶質が挙げられ得る。本発明は（１）スピニングカップ（ｓｐｉｎｎｉｎｇｃｕｐ）配列決定装置を用いてＮ末端または内部のアミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るのに十分な程度まで、または（２）クマシーブルー染色もしくは好ましくは銀染色を用いた非還元または還元条件下のＳＤＳ−ＰＡＧＥによる均質性となるように、ポリペプチドが精製されることを可能とする。単離されたポリペプチドには、組み換え体細胞の中のインサイチュのポリペプチドが含まれる。なぜなら、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの自然界での環境の少なくとも１つの成分が存在しないであろうからである。しかしながら通常は、単離されたポリペプチドは、少なくとも１つの精製工程により調製される。

「単離された」ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３
６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする核酸、あるいは他のポリペプチドをコードする核酸は、同定され、そして、ポリペプチドをコードする核酸の自然界での供給源に通常付随している少なくとも１つの混入している核酸分子から分離された核酸分子である。単離されたポリペプチドコード核酸分子は、自然界にそれが存在する形態または状態以外のものである。したがって、単離されたポリペプチドコード核酸分子は、天然の細胞内にそれが存在する場合、特定のポリペプチドコード核酸分子とは区別される。しかしながら、単離されたポリペプチドコード核酸分子は、例えば、その核酸分子が天然の細胞のものとは異なる染色体位置にある場合、通常そのポリペプチドを発現する細胞に含まれるポリペプチドコード核酸分子を包む。

用語「調節配列」は、特定の宿主生物中の作動可能に連結されたコード配列の発現のために必要なＤＮＡ配列のことをいう。例えば、原核生物に適した調節配列は、プロモーター、必要に応じてオペレーター配列およびリボソーム結合部位を包む。真核生物の細胞は、プロモーター、ポリアデニル化シグナルおよびエンハンサーを利用することが知られている。

核酸は、それが別の核酸配列との機能的関連性の内部におかれる場合に「作動可能に連結」されている。例えば、プレ配列または分泌リーダーに対するＤＮＡは、それがポリペプチドの分泌に関与するプレタンパク質として発現される場合にはそのポリペプチドに対するＤＮＡに作動可能に連結されており；プロモーターもしくはエンハンサーは、それが配列の転写に影響する場合にはコード配列に作動可能に連結されており；または、リボソーム結合部位は、それが翻訳を促進するように位置付けられている場合にコード配列に作動可能に連結されている。一般的に「作動可能に連結された」とは、連結されるＤＮＡ配列が隣接しており、そして、分泌リーダーの場合は隣接し、かつリーディングフェーズにあることを意味する。しかしながら、エンハンサーは、隣接している必要はない。連結は、好都合な制限部位におけるライゲーションにより達成される。そのような部位が存在しない場合は、合成オリゴヌクレオチドアダプターまたはリンカーを従来の慣行に従って使用する。

ハイブリダイゼーション反応の「ストリンジェンシー」とは、当業者が容易に決定できるものであり、一般的にプローブ長、洗浄温度および塩濃度に依存した実験的計算値である。一般に、長いプローブほど適切なアニーリングのためにより高温を必要とし、短いプローブほどより低温を必要とする。ハイブリダイゼーションは、一般に、相補鎖がその融点より低温の環境中に存在する場合、変性したＤＮＡが再アニーリングする能力に依存する。プローブとハイブリダイズ可能な配列との間の所望の相同性の程度が高いほど、使用できる相対温度は高くなる。その結果、より高い相対温度は、反応条件をよりストリンジェントとする傾向があり、より低い温度は、その傾向が小さい。ハイブリダイゼーション反応のストリンジェンシーに関するさらなる詳細および説明については、Ａｕｓｕｂｅｌ
ｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ＷｉｌｅｙＩｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅＰｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，（１９
９５）を参照のこと。

「ストリンジェントな条件」または「高ストリンジェンシー条件」とは、本明細書において定義する場合、（１）低いイオン強度および高い洗浄温度、例えば、０．０１５Ｍ塩化ナトリウム／０．００１５Ｍクエン酸ナトリウム／０．１％ドデシル硫酸ナトリウムを５０℃において使用するか；（２）ハイブリダイゼーションの間、ホルムアミドなどの変性剤、例えば、５０％（ｖ／ｖ）ホルムアミド＋０．１％ウシ血清アルブミン／０．１％Ｆｉｃｏｌｌ／０．１％ポリビニルピロリドン／５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ６．５＋７５０ｍＭ塩化ナトリウム、７５ｍＭクエン酸ナトリウムを４２℃で使用するか；または（３）５０％ホルミアミド、５×ＳＳＣ（０．７５ＭＮａＣｌ、０．０７５Ｍクエン酸ナトリウム）、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ６．８）、０．１％ピロリン酸ナトリウム、５×Ｄｅｎｈａｒｄｔ溶液、超音波処理サケ精子ＤＮＡ（５０μｇ／ｍＬ）、０．１％ＳＤＳおよび１０％デキストラン硫酸を４２℃で使用し、そして洗浄は４２℃で０．２×ＳＳＣ（塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム）および５５℃の５０％ホルムアミド、その後５５℃のＥＤＴＡ含有０．１×ＳＳＣからなる高ストリンジェンシー洗浄条件を使用するものとして特定され得る。

「中等度にストリンジェントな条件」とは、Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ；ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，ＮｅｗＹｏｒｋ：ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＰｒｅｓｓ，１９８９による説明と同一と考えてよく、そして、上記したものより低ストリンジェントな洗浄溶液およびハイブリダイゼーションの条件（例えば、温度、イオン強度および％ＳＤＳ）の使用を包む。中等度にストリンジェントな条件の例は、２０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ（１５０ｍＭＮａＣｌ、１５ｍＭクエン酸三ナトリウム）、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ７．６）、５×Ｄｅｎｈａｒｄｔ溶液、１０％デキストラン硫酸および２０ｍｇ／ｍＬ変性撹拌サケ精子ＤＮＡを含む溶液中３７℃での一晩のインキュベーションおよびその後の約３７〜５０℃における１×ＳＳＣ中フィルターの洗浄であるプローブ長などのような因子を適合させるために必要に応じて温度、イオン強度などを調節する方法は当業者の認識する通りである。

用語「エピトープタグ化」は、本明細書中で使用される場合は、「タグポリペプチド」に融合させられたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが含まれているキメラポリペプチドを意味する。タグポリペプチドは、対応する抗体が作製できるエピトープを提供するために十分な残基を有するが、融合相手のポリペプチドの活性を妨害しないくらい短い。タグポリペプチドは、好ましくは抗体が他のエピトープと実質的に交差反応しないほど高度に特有のものである。適当なタグポリペプチドは、一般に少なくとも６アミノ酸残基、そして通常は約８〜５０アミノ酸残基（好ましくは約１０〜２０アミノ酸残基）を有する。

本明細書中の目的についての「活性な」または「活性」は、自然界の、または自然界に
存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの生物学的活性および／あるいは免疫学的活性を保持している、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの形態（単数または複数）を意味する。ここでは、「生物学的」活性は、自然界の、または自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが有している抗原性エピトープに対する抗体の生産を誘導する能力以外の、自然界の、または自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドによって引き起こされる生物学的機能（阻害性または刺激性のいずれか）を意味し、そして、「免疫学的」活性は、自然界の、または自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８
２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが有している抗原性エピトープに対する抗体の生産を誘導する能力を意味する。

用語「アンタゴニスト」は、［他の場所で明確に限定されない限りは］最も広い意味で使用され、そしてこれには、本明細書中に開示される自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの生物学的活性を部分的、あるいは完全にブロックする、阻害する、または中和する任意の分子が含まれる。同様の様式で、用語「アゴニスト」は、［他の場所で明確に限定されない限りは］最も広い意味で使用され、そしてこれには、本明細書中に開示される自然界に存在している自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの生物学的活性を模倣する任意の分子が含まれる。

適切なアゴニストまたはアンタゴニスト分子としては、特に、自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、
ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、ペプチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、有機低分子などのアゴニストまたはアンタゴニスト抗体あるいは抗体断片、断片あるいは、アミノ酸配列変異体が挙げられる。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアゴニストあるいはアンタゴニストを同定するための方法には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを、候補のアゴニストもしくはアンタゴニスト分子と接触させる工程、およびＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに通常は関係している１つ以上の生物学的活性における検出可能な変化を測定する工程が含まれ得る。

「処置する」または「処置」または「軽減」とは、治療的な施療および予防的または防止的な手段の両方のことをいい、ここで、その目的は、ターゲティングされた病的状態または障害を予防するか緩徐化（低減）することである。処置を必要とする被験体は、すでに疾患を有し得るか、または、疾患を有する傾向にあり得るか、もしくは疾患を予防すべき状態であり得る。

「長期」投与とは、長期間に亘り初期の処置効果（活性）を維持するために短期の様式とは逆の持続的な様式における薬剤の投与のことをいう。「間欠的」投与は中断なく連続
的に行われるのではなく、周期的な性質を有する処置である。

「哺乳動物」とは、処置の目的のためには、哺乳動物に分類される任意の動物のことをいい、それらとしては、ヒト、ラットまたはマウスなどのげっ歯類、家畜および牧場動物および動物園、競技用または愛玩用の動物、例えば、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウサギなどが挙げられる。好ましくは、哺乳動物は、ヒトである。

さらなる１以上の処置薬と「組み合わせた」投与は、同時（併用）および任意の順序での連続投与を包む。

「担体」とは、本明細書中で使用されるとき、使用する用量および濃度において曝露対象となる細胞または哺乳動物に対して非毒性である薬学的に許容可能な担体、賦形剤または安定化剤を包む。生理学的に許容可能な担体は、水性のｐＨ緩衝溶液であることが多い。生理学的に許容可能な担体の例としては、緩衝剤（例えば、リン酸塩、クエン酸塩および他の有機酸）；アスコルビン酸を含む抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；タンパク質（例えば、血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリン）；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；アミノ酸（例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンまたはリシン）；グルコース、マンノースまたはデキストリンを含む、単糖類、二糖類および他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート化剤；マンニトールおよびソルビトールなどの糖アルコール；ナトリウムなどの塩形成対イオン；ならびに／または非イオン性界面活性剤、例えばＴＷＥＥＮ^ＴＭ、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）およびＰＬＵＲＯＮＩＣＳ^ＴＭが挙げられる。

「固相」とは、本発明の抗体が接着できる非水性マトリックスを意味する。本明細書において包含される固相の例としては、ガラス（例えば、細孔性ガラス）、多糖類（例えば、アガロース）、ポリアクリルアミド、ポリスチレン、ポリビニルアルコールおよびシリコーンから部分的または完全に形成されているものが挙げられる。文脈に応じて、固相は、アッセイプレートのウェルを含み得；他の場合は精製カラム（例えば、アフィニティークロマトグラフィーカラム）である。この用語はまた、米国特許第４，２７５，１４９号に記載されているものなどの個々の粒子の不連続な固相を含む。

「リポソーム」は、薬剤（例えば、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、あるいはそれらに対する抗体）の哺乳動物への送達に有用な様々なタイプの脂質、リン脂質、および／または界面活性剤から構成される小さい小胞である。リポソームの成分は生物学的膜の脂質の配置と同様に、二層を形成して通常配置される。

「低分子」とは、約５００ダルトン未満の分子量を有するものとして本明細書においては定義する。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合オリゴペプチド、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合有機分子、あるいは本明細書中に開示されるようなそれらのアゴニストまたはアンタゴニストの「有効量」は、具体的に記載される目的を実行するために十分な量である。「有効量」は記載した目的との関係において実験的に、そして日常的な様式で決定され得る。

用語「治療有効量」は、被験体または哺乳動物の疾患もしくは障害を「処置」するため
に有効な、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合オリゴペプチド、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合有機分子、あるいは、他の薬物の量を意味する。癌の場合には、治療有効量の薬物によって、癌細胞の数を減少させる；腫瘍の大きさを小さくする；癌細胞の末梢器官への浸潤を阻害する（すなわち、いくらか遅らせる、そして好ましくは、停止させる）；腫瘍の転移を阻害する（すなわち、いくらか遅らせる、そして好ましくは、停止させる）；腫瘍の増殖をいくらか阻害する；および／または癌に関連する症状の１つ以上をいくらか緩和することができる。「処置する」の本明細書における定義を参照のこと。薬剤が、既存の癌細胞の成長を予防し得、そして／または既存の癌細胞を殺滅し得る限り、その薬剤は、細胞分裂抑制性および／または細胞傷害性であり得る。

語句「心臓血管、内皮および血管形成の障害」、「心臓血管、内皮および血管形成の機能不全」、「心臓血管、内皮または血管形成の障害」および「心臓血管、内皮または血管形成の機能不全」は、交換可能に使用され、部分的には、血管に影響する全身性の障害（例えば、真性糖尿病、ならびに、動脈、毛細管、静脈および／またはリンパのような脈管自体の疾患）のことをいう。これには、血管形成および／または心臓血管形成を刺激する適応症ならびに血管形成および／または心臓血管形成を抑制するものが含まれる。そのような障害としては、例えば、動脈疾患（例えば、アテローム性動脈硬化症、高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象、動脈瘤、ならびに動脈の再狭窄）；静脈およびリンパ管の障害（例えば、静脈血栓症、リンパ管炎、およびリンパ水腫）；ならびに、他の血管の障害（例えば、末梢血管の疾患、癌（例えば、血管の腫瘍（例えば、血管腫（毛細血管および海綿状）、グロムス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポジ肉腫、リンパ管腫、および、リンパ管肉腫）、腫瘍の血管形成、外傷（例えば、創傷、熱傷、および他の損傷した組織）、インプラントの固定（ｉｍｐｌａｎｔｆｉｘａｔｉｏｎ）、瘢痕化、虚血再かん流傷害、関節リウマチ、脳血管疾患、腎疾患（例えば、急性腎不全）、あるいは、骨粗鬆症）が挙げられる。これらにはまた、アンギナ、急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心臓肥大およびＣＨＦなどの心不全が含まれる。

「肥大」とは、本明細書中で使用されるとき、腫瘍形成に関与しない天然の成長とは無関係の器官または構造の嵩の増大として定義される。器官または組織の肥大は、個々の細胞の嵩の増大（真の肥大）またはその組織を構成している細胞の数の増加（過形成）のいずれか、またはそれらの両方によるものである。心臓などの特定の器官は、出生後短期間で分裂する能力を失う。したがって、「心臓肥大」とは、成人において同時細胞分裂を伴わない心筋細胞のサイズおよび収縮タンパク質含有量の増大を特徴とする心臓の嵩の増大として定義される。肥大を刺激する原因となるストレスの特徴（例えば、心筋梗塞の場合のような、前負荷の増大、後負荷の増大、筋細胞の減少、または収縮力の一次的低下）が応答の性質を決定する場合に重要な役割を果たしていると考えられる。心臓肥大の早期の段階は、通常、筋原線維の大きさおよびミトコンドリアの増大により、ならびに、ミトコンドリアおよび核の膨大により形態学的に特徴付けられる。この段階において、筋細胞は、正常よりも大型となるが、細胞の組織は、大半は温存されている。心臓肥大のより進行した段階において、ミトコンドリアなどの特定の細胞内小器官のサイズまたは数の優先的な増大が生じ、そして、新しい収縮エレメントが不規則な様式で細胞の局所的領域に付加される。長期にわたって肥大している細胞は、細胞構成においてより明白な破壊を示し、これには、高度に分葉状となった膜を有している顕著に長くなった核が含まれる。これは、隣接する筋原線維に置き換わり、そして正常なＺ−バンドレジストレーション（Ｚ−ｂａｎｄｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ）の崩壊を引き起こす。表現「心臓肥大」は、根底にある心臓の傷害とは無関係に、様々な程度の心筋の構造上の損傷を特徴とするこの状態の進行の全ての段階を含むように使用される。したがって、この用語はまた、心臓肥大（例えば、血圧の上昇、大動脈の狭窄または心筋梗塞）の発生に寄与する生理学的状態を含む。

「心不全」とは、代謝している組織の要求に対して必要とされる速度では心臓が血液を送液しない心臓機能の異常のことをいう。心不全は、虚血性、先天性、リウマチ性または特発性の形態を含む多くの要因により誘発され得る。

「鬱血性心不全」（ＣＨＦ）は、心臓が末梢組織に対し酸素付加された血液を送達する
ために十分な心拍出量（経時的に心臓により送液される血液の容量）を供給することがますます不可能になっている進行性の病的状態である。ＣＨＦが進行するに従い、構造的および血行力学的な損傷が生じる。これらの損傷は、種々の徴候を有するが、１つの特徴的な症状は、心室の肥大である。ＣＨＦは、多くの様々な心臓障害の共通した最終結果である。

「心筋梗塞」は、一般に冠状動脈のアテローム性動脈硬化症から生じ、混合型の冠状動脈血栓を伴う場合が多い。これは２つの主要な型：心筋の壊死が心室壁の厚みすべてに関与している経壁梗塞、およびその壊死が心室壁から心外膜に至るまでの拡張を伴わない心内膜下、壁内心筋層、またはその両方が関与する心内膜下（非貫壁性）梗塞に分類され得る。心筋梗塞は、血行力学的作用の変化および心臓の損傷部および健常部における構造の変化の両方をもたらすことが知られている。すなわち、例えば、心筋梗塞は、心臓の最大心拍出量および一回拍出量を減少させる。また、間隙において生じるＤＮＡ合成の刺激ならびに罹患していない心臓の領域におけるコラーゲンの形成の増大が、心筋梗塞に関連する。

例えば、全末梢血管抵抗の増大に起因する長期間高血圧である心臓に対して与えられるストレスまたは緊張の増大の結果として、心臓肥大には「高血圧」が長く関わっている。慢性的な圧力の過剰負荷の結果として肥大した心室の特徴は減損した拡張期の機能である。Ｆｏｕａｄｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，４：１５００−１５０６（１９８４）；Ｓｍｉｔｈｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，５：８６９−８７４（１９８５）。長期の左心室の弛緩は、正常または過剰な収縮機能にも関わらず、早期の本態性高血圧において検出されている。Ｈａｒｔｆｏｒｄｅｔａｌ．，Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，６：３２９−３３８（１９８４）。しかしながら、血圧のレベルと心臓肥大の間には緊密な平行性はない。抗高血圧療法に応答した左心室機能の改善がヒトにおいて報告されているが、利尿剤（ヒドロクロロチアジド）、β−遮断薬（プロプラノロール）またはカルシウムチャネル遮断薬（ジルチアゼム）で多様に処置されている患者は、拡張機能の改善を伴わない左心室肥大の回復を示している。Ｉｎｏｕｙｅｅｔａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，５３：１５８３−７（１９８４）。

心臓肥大に伴う別の複合的心臓疾患は、「肥大性心筋症」である。この状態は、非常に多様な形態学的、機能的および臨床的な特徴により特徴付けられ（Ｍａｒｏｎｅｔａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３１６：７８０−７８９（１９８７）；Ｓｐｉｒｉｔｏｅｔａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３２０：７４９−７５５（１９８９）；ＬｏｕｉｅａｎｄＥｄｗａｒｄｓ，Ｐｒｏｇ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｄｉｓ．，３６：２７５−３０８（１９９４）；Ｗｉｇｌｅｅｔａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，９２：１６８０−１６９２（１９９５））、その不均質性は、それが全世代の患者に及んでいるという事実により強調されている。Ｓｐｉｒｉｔｏｅｔａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３３６：７７５−７８５（１９９７）。肥大性心筋症の原因もまた多様であり、ほとんど解明されていない。一般に、筋節タンパク質をコードする遺伝子における変異が、肥大性心筋症に関連している。最近のデータによれば、β−ミオシン重鎖の変異が、家族性の肥大性心筋症の症例の約３０〜４０パーセントを占め得ることが示唆されている。Ｗａｔｋｉｎｓｅｔａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３２６：１１０８−１１１４（１９９２）；Ｓｃｈｗａｒｔｚｅｔａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，９１：５３２−５４０（１９９５）；ＭａｒｉａｎａｎｄＲｏｂｅｒｔｓ，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，９２：１３３６−１３４７（１９９５）；Ｔｈｉｅｒｆｅｌｄｅｒｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ，７７：７０１−７１２（１９９４）；Ｗａｔｋｉｎｓｅｔａｌ．，Ｎａｔ．Ｇｅｎ．，１１：４３４−４３７（１９９５）。β−ミオシン重鎖以外に、他の位置の遺伝子変異としては、心臓トロポニンＴ、アルファトポミオシン、
心臓ミオシン結合タンパク質Ｃ、必須ミオシン軽鎖および調節ミオシン軽鎖が挙げられる。ＭａｌｉｋａｎｄＷａｔｋｉｎｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，１２：２９５−３０２（１９９７）を参照のこと。

弁上部「大動脈狭窄症」は、上行大動脈の狭窄を特徴とする遺伝性の血管障害であるが、肺動脈を含む他の動脈も罹患する場合がある。未処置の大動脈狭窄は、心筋の肥大ならびに最終的には心不全および死亡の原因となる心臓内圧の上昇をもたらす場合がある。この障害の病因は、完全には解明されていないが、内側平滑筋の肥大および恐らくは過形成が、この障害の顕著な特徴である。エラスチン遺伝子の分子改変体が、大動脈狭窄の発症および病因に関与していると報告されている。１９９７年７月２２日発行の米国特許第５，６５０，２８２号。

「弁逆流」は、心臓の弁の障害をもたらす心臓疾患の結果として生じる。リウマチ熱のような様々な疾患は、弁開口部の収縮または引き離しをもたらす場合があるが、他の疾患は、心内膜炎、心内膜または房室開口部の内膜の炎症および心臓手術の原因となる場合がある。弁狭窄部の狭小化および弁の閉鎖欠陥などの欠陥は、心臓腔中の血液の蓄積または弁を通過する血液の逆流をもたらす。改善されない場合、長期の弁の狭窄または不全により、心臓肥大および関連する心筋の損傷がもたらされ、それにより最終的には弁の交換が必要となる場合がある。

用語「免疫関連疾患」は、哺乳動物の免疫系の構成要素が、哺乳動物における罹患に対し、誘発、媒介または他の方法で寄与する疾患を意味する。同様に含まれるものは、免疫応答の刺激または介入が疾患の進行に対して寛解作用を有する疾患である。この用語に含まれるものは、免疫媒介炎症性疾患、非免疫媒介炎症性疾患、感染性疾患、免疫不全疾患、新生物形成などである。

用語「Ｔ細胞媒介疾患」は、Ｔ細胞が哺乳動物における罹患を直接的または間接的に媒介するか、他の方法において寄与する疾患を意味する。Ｔ細胞媒介疾患は、細胞媒介作用、リンフォカイン媒介作用などに関連し得、そしてＢ細胞が、例えばＴ細胞の分泌したリンフォカインにより刺激される場合にはＢ細胞関連作用にも関連し得る。

免疫関連疾患および炎症性疾患（そのいくつかは免疫細胞またはＴ細胞によって媒介される）の例としては以下が挙げられる：全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、若年性慢性関節炎、脊椎関節症、全身性硬化症（強皮症）、特発性炎症性筋疾患（皮膚筋炎、多発性筋炎）シェーグレン症候群、全身性血管炎、サルコイドーシス、自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）、自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫媒介性血小板減少症）、甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）、真性糖尿病、免疫媒介性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）、中枢および末梢神経系の脱髄疾患（例えば、多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギラン・バレー症候群および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシー）、肝胆疾患（例えば、感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の非肝向性（ｎｏｎ−ｈｅｐａｔｏｔｒｏｐｉｃ）のウイルスによる肝炎）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎および硬化性胆管炎）、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）、グルテン過敏性腸症およびホイップル病、水疱性疾患、多形性紅斑および接触性皮膚炎を含む自己免疫性または免疫媒介性の皮膚疾患、乾癬、アレルギー性疾患（例えば、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹）、肺の免疫学的疾患（例えば、好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎）、または移植片拒絶および移植片対宿主病を含む移植関連疾患。感染性疾患には、ウイルス性疾患（例えば、ＡＩＤＳ（ＨＩＶ感染）、Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、およびＥ型肝炎、ヘルペスなど）、細菌感染、真菌感染、原虫感染、および寄生虫感
染が含まれる。

本明細書中の「自己免疫疾患」は、個体の自己組織またはそれらのｃｏ−ｓｅｇｒｅｇａｔｅもしくは発現によって生じるか、またはそれらに対して特異的な疾患あるいは障害、あるいはそれらによって生じる状態である。自己免疫疾患または障害の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定はされない：関節炎（例えば、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、変形性関節症、乾癬性関節炎、および、強直性脊椎炎）、乾癬、アトピー性皮膚炎を含む皮膚炎；慢性特発性蕁麻疹（慢性自己免疫性蕁麻疹、多発性筋炎／皮膚筋炎、中毒性表皮剥離症、全身性硬化症および硬化症が含まれる）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）に関連する応答（クローン病、潰瘍性大腸炎）、および壊疽性膿皮症のｃｏ−ｓｅｇｒｅｇａｔｅを伴うＩＢＤ、結節性紅斑、原発性硬化性胆管炎、および／または上強膜炎）、呼吸窮迫症候群（成人呼吸窮迫症候群、（ＡＲＤＳ）が含まれる）、髄膜炎、ＩｇＥ媒介性疾患（例えば、アナフィラキシーおよびアレルギー性鼻炎）、脳炎（例えば、ラスムッセン脳炎、ブドウ膜炎）、大腸炎（例えば、顕微鏡的大腸炎およびコラーゲン蓄積大腸炎）、糸球体腎炎（ＧＮ）（例えば、膜形成性ＧＮ、特発性膜形成性ＧＮ、膜形成性増殖性ＧＮ（ＭＰＧＮ）（Ｉ型およびＩＩ型が含まれる）、および急性進行性ＧＮ）、アレルギー症状、湿疹、喘息、Ｔ細胞の浸潤が関係している症状、および慢性炎症反応、アテローム性動脈硬化症、自己免疫性心筋炎、白血球接着不全症、全身性エリテマドーデス（ＳＬＥ）（例えば、皮膚のＳＬＥ、狼瘡（腎炎、脳炎、小児の、非腎性、円盤状、脱毛症が含まれる）、若年発症型糖尿病、多発性硬化症（ＭＳ）（例えば、ｓｐｉｎｏ−ｏｐｔｉｃａｌＭＳ、アレルギー性脳脊髄炎、サイトカインもしくはＴリンパ球によって媒介される急性および遅延型過敏症に関連する炎症応答、結核症、サルコイドーシス、肉芽腫症（ウェゲナー肉芽腫症が含まれる）、無顆粒球症、脈管炎（大血管の脈管炎（リウマチ性多発筋痛症、および巨細胞（高安）動脈炎が含まれる）、中型の血管の脈管炎（川崎病、および結節性多発動脈炎が含まれる）、ＣＮＳ脈管炎、およびＡＮＣＡ関連脈管炎（例えば、チャーグ・ストラウス症候群（ＣＳＳ）が含まれる）、再生不良性貧血、クームズ陽性貧血、ＤｉａｍｏｎｄＢｌａｃｋｆａｎ貧血、免疫性溶血性貧血（自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）が含まれる）、悪性貧血、赤芽球癆（ＰＲＣＡ）、第ＶＩＩＩ因子欠乏、血友病Ａ、自己免疫性好中球減少症、汎血球減少症、白血球減少症、白血球の血管外遊出が関係している疾患、ＣＮＳ炎症性障害、多臓器損傷症候群、重症筋無力症、抗原−抗体複合体によって媒介される疾患、抗糸球体基底膜疾患、抗リン脂質抗体症候群、アレルギー性神経炎、ベーチェット病、キャッスルマン症候群、グッドパスチャー症候群、Ｌａｍｂｅｒｔ−Ｅａｔｏｎ筋無力症候群、レイノー症候群、シェーグレン症候群、スティーブンス・ジョンソン症候群、固形臓器の移植拒絶（高度なパネル反応性抗体力価についての前処理、組織中でのＩｇＡの蓄積、および腎臓移植、肝臓移植、小腸の移植、心臓移植などによって生じる拒絶が含まれる）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、水疱性類天疱瘡、天疱瘡（座瘡、天疱瘡、および天疱瘡粘膜類天疱瘡が含まれる）、自己免疫性多腺性内分泌障害、ライター症候群、スティフマン症候群、免疫複合体性腎炎、ＩｇＭ多発性ニューロパシー、またはＩｇＭによって媒介される神経障害、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、血小板減少症（例えば、心筋梗塞の患者によって生じる）（自己免疫性血小板減少症が含まれる）、精巣および卵巣の自己免疫性疾患（自己免疫性精巣炎および卵巣炎が含まれる）、原発性甲状腺機能低下症；自己免疫性内分泌疾患（自己免疫性甲状腺炎が含まれる）、慢性甲状腺炎（橋本甲状腺炎）、亜急性甲状腺炎、特発性甲状腺機能低下症、アジソン病、グレーヴス病、自己免疫性多腺症候群（または多腺内分泌障害症候群）Ｉ型糖尿病（インシュリン依存性真性糖尿病（ＩＤＤＭ）とも呼ばれる）（小児性ＩＤＤＭ、およびシーハン症候群が含まれる）；自己免疫性肝炎、リンパ球様間質性肺炎（ＨＩＶ）、閉塞性細気管支炎（非移植性）対ＮＳＩＰ、ギラン・バレー症候群、バージャー病（ＩｇＡ腎症）、原発性胆汁性肝硬変、セリアック病（グルテン性腸症）、ｃｏ−ｓｅｇｒｅｇａｔｅ疱疹状皮膚炎を伴う軟治性スプルー、クリオグロブリン血症、筋萎縮側索硬化症（ＡＬＳ；ルー・ゲーリック病）、冠動脈疾患、自己
免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、自己免疫性難聴、眼球クローヌスミオクローヌス症候群（ＯＭＳ）、多発性軟骨炎（例えば、軟治性多発性軟骨炎、肺胞タンパク症、アミロイドーシス、巨細胞性肝炎、強膜炎、意義が特定されていない／意義不明単クローン性免疫グロブリン血症（ＭＧＵＳ）、末梢神経障害、腫瘍随伴症候群、チャネル病（ｃｈａｎｎｅｌｏｐａｔｈｉｅｓ）（例えば、てんかん、偏頭痛、不整脈、筋肉の障害、難聴、失明、周期性四肢麻痺、およびＣＮＳのチャネル病；自閉症、炎症性筋疾患、ならびに、巣状分節状糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）。

用語「不安関連障害」とは、不安、気分および薬物乱用の障害のこといい、それらとしては、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害が挙げられるがこれらに限定されない。そのような障害としては、軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、特段に特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴ったパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、社会不安、自閉症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、一極性障害、Ｉ型またはＩＩ型双極性障害、特段に特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物質誘導性気分障害、認知機能の増強、認知機能の低下（アルツハイマー病、脳卒中または脳の外傷に関連するものが挙げられるがこれらに限定されない）、疾患または損傷から生じる発作（癲癇、学習障害／障害、脳性麻痺が挙げられるがこれらに限定されない）が挙げられる。さらに、不安障害は、人格障害（以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない）に適用し得る。

用語「脂質代謝障害」とは、コレステロールおよびトリグリセリドの異常な臨床化学レベルのことをいい、ここでこれらの脂質の高いレベルは、アテローム性動脈硬化症の指標となる。さらに、異常な血清中脂質レベルは、様々な心臓血管疾患（高血圧、脳卒中、冠状動脈疾患、糖尿病および／または肥満症を含む）の指標となり得る。

語句「眼の異常」とは、アテローム性動脈硬化症または様々な眼科学的異常に関連し得る眼の潜在的障害のことをいう。そのような障害としては、以下：網膜形成不全、様々な網膜症、再狭窄、網膜動脈閉塞もしくは閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性症、色素性網膜炎、黄斑ジストロフィー、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、脳回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルヴェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、シニアローケン症候群、バルデー−ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレーム症候群、コケーン症候群、先天性脊椎・骨端異形成症、フリン−エアード症候群、フリートライヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルク病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジール症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮症、ピエール・マリー症候群、スティックラー症候群、カロチン血症、シスチン蓄積症、ウォルフラム症候群、バッセン−コルンツヴァイク症候群、無βリポタンパク質血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖体沈着症、ホモシスチン尿症またはマンノシドーシスが挙げられるがこれらに限定されない。白内障もまた眼の異常と考えられ、そしてヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、トリソミー１３−１５、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、上皮小体機能低下症またはコンラーディ症候群などの全身性疾患と関連している。他の眼の発達異常としては、無虹彩症、前区および発育不全症候群が挙げられる。白内障はまた、眼内感染または炎症（ブドウ膜炎）の結果として生じる場合もある。

抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合オリゴペプチド、あるいは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合有機分子の「増殖阻害量」は、細胞（特に、腫瘍（例えば、癌細胞））のインビトロまたはインビボのいずれかでの増殖を阻害することができる量である。抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗Ｐ
ＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合オリゴペプチド、あるいは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合有機分子の「増殖阻害量」は、新生物性の細胞の増殖を阻害する目的については、経験的に、そして日常的に行われている様式で決定することができる。

抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、
抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合オリゴペプチド、あるいは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合有機分子の「細胞傷害量」は、インビトロまたはインビボのいずれかで、細胞（特に、腫瘍、例えば、癌細胞）の破壊を引き起こすことができる量である。抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲ
Ｏ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合オリゴペプチド、あるいは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合有機分子の「細胞傷害量」は、新生物性の細胞の増殖を阻害する目的について、経験的に、そして日常的に行われている様式で決定することができる。

用語「抗体」は最も広い意味で使用され、そして、特に、例えば、１つの抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ
９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体モノクローナル抗体（アゴニスト、アンタゴニスト、および中和抗体が含まれる）、多エピトープ特異性を有している抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体組成物、ポリクローナル抗体、単鎖抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体、ならびに、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体の断片（以下を参照のこと）が、これらが所望される生物学的活性または免疫学的活性を示す限りは、含まれる。用語「免疫グロブリン」（Ｉｇ）は、本明細書においては抗体と交換可能に使用される。

「単離された抗体」とは、その天然の環境の成分中から同定ならびに分離および／または回収されるものを意味する。その天然の環境の夾雑成分は、抗体の診断または治療上の使用を妨害する物質であり、それらとしては、酵素、ホルモンおよび他のタンパク質性または非タンパク質性の溶質が挙げられ得る。本発明は、（１）Ｌｏｗｒｙ法により測定した場合に抗体の９５重量％超まで、最も好ましくは９９重量％超まで、（２）スピニング
カップ配列決定装置を用いてＮ末端または内部のアミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るために十分な程度まで、または（３）クマシーブルーもしくは好ましくは銀染色を用いた還元または非還元条件下のＳＤＳ−ＰＡＧＥによる均質性となるように、抗体が精製されることを可能とする。単離された抗体は、組換え細胞内のｉｎｓｉｔｕの抗体を含むが、その理由は抗体の天然の環境の少なくとも１つの成分が存在しないためである。しかしながら、通常、単離された抗体は、少なくとも１つの精製工程により調製される。

基本的な４鎖抗体単位は、２本の同一の軽（Ｌ）鎖および２本の同一の重（Ｈ）鎖〜構成されるヘテロ４量体の糖タンパク質である（ＩｇＭ抗体は、Ｊ鎖と呼ばれるさらなるポリペプチドと共に基本的なヘテロ４量体単位５つからなり、したがって、１０個の抗原結合部位を含有するのに対し、分泌ＩｇＡ抗体は、重合してＪ鎖と共に基本的４鎖単位２〜５つを含む多価の組立物を形成することができる）。ＩｇＧの場合は、４鎖単位は、一般に約１５０，０００ダルトンである。各Ｌ鎖は、ジスルフィド共有結合１つによりＨ鎖に連結されているのに対し、２本のＨ鎖は、Ｈ鎖のアイソタイプに応じて１つ以上のジスルフィド結合により相互に連結されている。各Ｈ鎖および各Ｌ鎖はまた、規則的な間隔で鎖内ジスルフィド架橋を有する。各Ｈ鎖はＮ末端において可変ドメイン（Ｖ_Ｈ）とその後の３つの定常ドメイン（Ｃ_Ｈ）を各α鎖および各γ鎖について、そして４つのＣ_Ｈドメインをμおよびεアイソタイプについて有している。各Ｌ鎖は、Ｎ末端において可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）とその後の定常ドメイン（Ｃ_Ｌ）をそのもう一端において有している。Ｖ_Ｌは、Ｖ_Ｈと並列され、そしてＣ_Ｌは、重鎖の最初の定常ドメイン（Ｃ_Ｈ１）と並列される。特定のアミノ酸残基が、軽鎖および重鎖の可変ドメインの間の界面を形成すると考えられている。Ｖ_ＨとＶ_Ｌの対形成により、単一の抗原結合部位が形成される。様々なクラスの抗体の構造および特性については、例えば、ＢａｓｉｃａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ，ＤａｎｉｅｌＰ．Ｓｔｉｔｅｓ，ＡｂｂａＩ．ＴｅｒｒａｎｄＴｒｉｓｔｒａｍＧ．Ｐａｒｓｌｏｗ（ｅｄｓ．），Ａｐｐｌｅｔｏｎ＆Ｌａｎｇｅ，Ｎｏｒｗａｌｋ，ＣＴ，１９９４，ｐ．７１およびＣｈａｐｔｅｒ６を参照のこと。

任意の脊椎動物種に由来するＬ鎖を、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいてカッパおよびラムダと称される２つの明確に異なった型の１つに割りあて得る。その重鎖の定常ドメイン（Ｃ_Ｈ）のアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは、様々なクラスまたはアイソタイプに割りあてられ得る。免疫グロブリンには、５クラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭがあり、それぞれα、δ、ε、γおよびμと表記される重鎖を有する。γおよびαのクラスはさらに、Ｃ_Ｈ配列および機能の比較的小さい差異に基づいてサブクラスに分類され、例えば、ヒトは、以下のサブクラス：ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２を発現する。

用語「可変」は、可変ドメインの特定のセグメントが、抗体の間で配列が大きく異なっているという事実のことをいう。Ｖドメインは、抗原の結合を媒介し、そして、特定の抗体のその特定の抗原に対する特異性を決定する。しかしながら、可変性は、可変ドメインの１１０アミノ酸に亘って均一に分布していない。その代わり、Ｖ領域は、各々が９〜１２アミノ酸長の「超可変領域」と称される究極的な可変性のより短い領域によって分断された１５〜３０アミノ酸のフレームワーク領域（ＦＲ）と称される比較的不変の部分からなる。ネイティブの重鎖および軽鎖の可変ドメインは各々、βシート構造を連結する、そして一部の場合においてはその部分を形成するループを形成する３つの超可変領域により連結されたβシート配置を大半が採用している４つのＦＲを含む。個々の鎖の中の超可変領域は、ＦＲによって、他の鎖に由来する超可変領域と互いに接近した状態で保たれ、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔｅｔａｌ．，ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈｅｄ．ＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈＳｅｒｖｉｃｅ，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔ
ｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ．（１９９１）を参照のこと）。定常ドメインは、抗原への抗体の結合に直接関与していないが、様々なエフェクター機能（例えば、抗体依存性細胞内細胞傷害（ＡＤＣＣ）への抗体の関与）を示す。

用語「超可変領域」は、本明細書中で使用されるとき、抗原結合の原因となる抗体のアミノ酸残基のことをいう。超可変領域には、通常、「相補性決定領域」すなわち「ＣＤＲ」に由来するアミノ酸残基（例えば、Ｖ_Ｌ中の約２４〜３４（Ｌ１）、５０〜５６（Ｌ２）、および８９〜９７（Ｌ３）付近のアミノ酸残基、ならびに、Ｖ_Ｈ中の約１〜３５（Ｈ１）、５０〜６５（Ｈ２）、および９５〜１０２（Ｈ３）付近のアミノ酸残基；Ｋａｂａｔｅｔａｌ．，ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈｅｄ．ＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈＳｅｒｖｉｃｅ，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ．（１９９１））、ならびに／あるいは、「超可変ループ」に由来するアミノ酸残基（例えば、Ｖ_Ｌ中の約２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）、および９１〜９６（Ｌ３）、ならびに、Ｖ_Ｈ中の２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）、および９６〜１０１（Ｈ３）；ＣｈｏｔｈｉａａｎｄＬｅｓｋＪ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１〜９１７（１９８７））が含まれる。

用語「モノクローナル抗体」は、本明細書中で使用されるとき、実質的に均質な抗体の集団から得られた抗体のことをいい、すなわち、その集団を構成する個々の抗体は、わずかな量で存在し得る、天然に存在する可能性のある突然変異を除き同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一の抗原部位に指向されている。さらに、さまざまな決定基（エピトープ）に対して指向されたさまざまな抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して指向されている。その特異性に加えて、モノクローナル抗体は、他の抗体の混入を伴うことなく合成され得る点において好都合である。修飾語の「モノクローナル」とは、任意の特定の方法による抗体の作製を必要とするものとみなしてはならない。例えば、本発明において有用なモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）により最初に報告されたハイブリドーマ法により調製され得るか、または、細菌、真核生物または植物の細胞において組換えＤＮＡ法を用いて作製され得る（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照のこと）。「モノクローナル抗体」は、例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８（１９９１）およびＭａｒｋｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７（１９９１）に記載の手法を用いてファージ抗体ライブラリーから単離され得る。

本明細書中のモノクローナル抗体には、「キメラ」抗体（その中の重鎖および／または軽鎖の部分は、特定の種に由来するかまたは特定の抗体のクラスもしくはサブクラスに属している抗体の中の対応している配列と同一であるかあるいはそれらと相同であるが、鎖（単数または複数）の残りは、別の種に由来するかまたは別の抗体のクラスもしくはサブクラスに属している抗体の中の対応している配列と同一であるかまたはそれらに相同である）、ならびに、そのような抗体の断片が、それらが所望される生物学的活性を示す限りは、含まれる（米国特許第４，８１６，５６７号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１〜６８５５（１９８４）を参照のこと）。本明細書における目的のキメラ抗体は、非ヒト霊長類（例えば、旧世界ザル、類人猿など）から得られた可変ドメイン抗原結合配列およびヒト定常領域配列を含む「霊長類化」抗体を含む。

「インタクトな」抗体とは、抗原結合部位ならびにＣ_Ｌおよび少なくとも重鎖定常ドメインＣ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３を含むものである。定常ドメインは、ネイティブの配列の定常ドメイン（例えば、ヒトネイティブ配列定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列改
変体であり得る。好ましくはインタクトな抗体は、１つ以上のエフェクター機能を有する。

「抗体フラグメント」は、インタクトな抗体の一部分、好ましくはインタクトな抗体の抗原結合または可変の領域を含む。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２およびＦｖフラグメント；ダイアボディ；線状抗体（米国特許第５，６４１，８７０号の実施例２；Ｚａｐａｔａｅｔａｌ．，ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇ．８（１０）：１０５７−１０６２［１９９５］を参照のこと）；一本鎖抗体分子；ならびに抗体フラグメントから形成された多重特異性の抗体が挙げられる。

抗体のパパイン消化により、「Ｆａｂ」フラグメントと称される２本の同一の抗原結合フラグメント、および容易に結晶化する能力を反映した表記である残りの部分の「Ｆｃ」フラグメントが得られる。Ｆａｂフラグメントは、Ｈ鎖の可変領域ドメイン（Ｖ_Ｈ）とともにＬ鎖全体および１本の重鎖の第１の定常ドメイン（Ｃ_Ｈ１）からなる。各Ｆａｂフラグメントは、抗原結合に関しては１価であり、すなわち、単一の抗原結合部位を有する。抗体のペプシン処理により、単一の大型のＦ（ａｂ’）_２フラグメントが得られ、これは２価の抗原結合活性を有する２つのジスルフィド結合したＦａｂフラグメントに概ね相当し、そしてなお抗原に交差結合することができる。Ｆａｂ’フラグメントは、抗体のヒンジ領域に由来する１つ以上のシステインを含むＣ_Ｈ１ドメインのカルボキシ末端にさらに数残基を有することによりＦａｂフラグメントとは、異なっている。Ｆａｂ’−ＳＨは、本明細書においては定常ドメインのシステイン残基が遊離のチオール基を担持しているＦａｂ’に対する表記である。Ｆ（ａｂ’）_２抗体フラグメントは、当初はそれらの間にヒンジシステインを有するＦａｂ’フラグメントの対として作製された。抗体フラグメントの他の化学的カップリングも知られている。

Ｆｃフラグメントは、ジスルフィドで共に保持された両方のＨ鎖のカルボキシ末端部分を含む。抗体のエフェクター機能は、Ｆｃ領域における配列により決定され、この領域は、特定の型の細胞に存在するＦｃレセプター（ＦｃＲ）により認識される部分でもある。

「Ｆｖ」は、完全な抗原認識部位および抗原結合部位を含む最小の抗体フラグメントである。このフラグメントは、堅固な非共有結合の会合型としての１つの重鎖と１つの軽鎖との可変領域ドメインの２量体からなる。これらの２ドメインの折り畳みにより、６つの超可変ループ（３ループは各々Ｈ鎖およびＬ鎖由来）が生じ、これらは抗原結合のためのアミノ酸残基を与え、そして抗体に抗原結合特異性をもたらす。しかしながら、単一の可変ドメイン（または抗原に対して特異的なわずか３つのＣＤＲのみを含むＦｖの半分）であっても、結合部位全体よりも低親和性ではあるが、抗原を認識して結合する能力を有している。

「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」とも略記される「一本鎖Ｆｖ」は、連結されて単一のポリペプチド鎖となっているＶ_ＨおよびＶ_Ｌ抗体ドメインを含む抗体フラグメントである。好ましくは、ｓＦｖポリペプチドはさらに、抗原結合のために所望の構造をｓＦｖが形成できるようにするＶ_ＨドメインとＶ_Ｌドメインとの間のポリペプチドリンカーを含む。ｓＦｖに関する概説は、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，ＴｈｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙｏｆＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，ＲｏｓｅｎｂｕｒｇａｎｄＭｏｏｒｅｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，ＮｅｗＹｏｒｋ，ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）；Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ１９９９，後出を参照のこと。

用語「ダイアボディ」は、Ｖドメインの鎖内ではなく鎖間の対形成が達成されることにより２価のフラグメント、すなわち２つの抗原結合部位を有するフラグメントが生じるよ
うにＶ_ＨドメインとＶ_Ｌドメインの間により短いリンカー（約５〜１０残基）と共にｓＦｖフラグメント（前パラグラフを参照のこと）を構築することにより調製される小型抗体フラグメントのことをいう。２重特異性のダイアボディは、２つの「クロスオーバー」ｓＦｖフラグメントのヘテロ２量体であり、この場合、２つの抗体のＶ_ＨドメインおよびＶ_Ｌドメインは異なるポリペプチド鎖上に存在する。ダイアボディは、例えば、ＥＰ４０４，０９７；ＷＯ９３／１１１６１；およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４−６４４８（１９９３）により詳細に記載されている。

非ヒト（例えば、げっ歯類）抗体の「ヒト化」型は、非ヒト抗体から得られた最小の配列を含むキメラ抗体である。大部分に関しては、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域に由来する残基が、所望の抗体の特異性、親和性および能力を有する非ヒト種（例えば、マウス、ラット、ウサギまたは非ヒト霊長類）（ドナー抗体）の超可変領域に由来する残基で置き換えられているヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。一部の場合においては、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）の残基が対応する非ヒト残基により置き換えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体またはドナー抗体に存在しない残基を含んでよい。これらの改変は、抗体の性能をさらに精密化するために行われる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、そして代表的には２つの可変ドメインの実質的にすべてを含み、その場合、超可変ループのすべてまたは実質的にすべてが、非ヒト免疫グロブリンのそれに相当し、そしてＦＲのすべてまたは実質的にすべてがヒト免疫グロブリン配列のそれとなる。ヒト化抗体は、必要に応じてまた、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、代表的にはヒト免疫グロブリンのメンエキ免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部分を含む。さらに詳細な説明は、Ｊｏｎｅｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３２１：５２２−５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３−３２９（１９８８）；およびＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６（１９９２）を参照のこと。

「種依存性抗体」、例えば、哺乳動物非ヒトＩｇＥ抗体は、第１の哺乳動物種由来の抗原に対して、第２の哺乳動物種由来のその抗原のホモログに対するよりも、より強力な結合親和性を有する抗体である。通常、種依存性抗体は、ヒト抗原に対して「特異的に結合する」（すなわち、たった約１×１０^−７Ｍ、好ましくはたった約１×１０^−８Ｍ、そして最も好ましくはたった約１×１０^−９Ｍの結合親和性（Ｋｄ）値を有する）が、第２の非ヒト哺乳動物種由来の抗原のホモログに対しては、ヒト抗原に対するその結合親和性よりも、少なくとも約５０倍、または少なくとも約５００倍、または少なくとも約１０００倍弱い結合親和性を有する。種依存性抗体は、上記の抗体の様々な型のいずれかであり得るが、好ましくはヒト化抗体またはヒト抗体である。

「ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合オリゴペプチド」は、本明細書中に記載されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対して、（好ましくは、特異的に）結合するオリゴペプチドである。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合オリゴペプチドは、公知のオリゴペプチド合成方法論を使用して化学合成し、そして組み換え技術を使用して調製し、精製することができる。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合オリゴペプチドは、通常は、少なくとも約５アミノ酸長であるか、あるいは、少なくとも約６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、または１００アミノ酸長、あるいはそれ以上である。ここでは、そのようなオリゴペプチドは、本明細書中に記載されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３
、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対して、（好ましくは特異的に）結合することができる。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合オリゴペプチドは、周知の技術を使用して過度の実験を行うことなく同定することができる。この点に関し、ポリペプチド標的に特異的に結合することができるオリゴペプチドについてオリゴペプチドライブラリーをスクリーニングするための手法が当該分野で周知であることに注意されたい（例えば、米国特許第５，５５６，７６２号、同第５，７５０，３７３号、同第４，７０８，８７１号、同第４，８３３，０９２号、同第５，２２３，４０９号、同第５，４０３，４８４号、同第５，５７１，６８９号、同第５，６６３，１４３号；ＰＣＴ公開ＷＯ８４／０３５０６およびＷＯ８４／０３５６４；Ｇｅｙｓｅｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．，８１：３９９８−４００２（１９８４）；Ｇｅｙｓｅｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．，８２：１７８−１８２（１９８５）；Ｇｅｙｓｅｎｅｔａｌ．，ＳｙｎｔｈｅｔｉｃＰｅｐｔｉｄｅｓａｓＡｎｔｉｇｅｎｓ，１３０−１４９（１９８６）；Ｇｅｙｓｅｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．，１０２：２５９−２７４（１９８７）；Ｓｃｈｏｏｆｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４０：６１１−６１６（１９８８），Ｃｗｉｒｌａ，Ｓ．Ｅ．ｅｔａｌ．，（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８７：６３７８；Ｌｏｗｍａｎ，Ｈ．Ｂ．ｅｔａｌ．，（１９９１）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３０：１０８３２；Ｃｌａｃｋｓｏｎ，Ｔ．ｅｔａｌ．，（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４；Ｍａｒｋｓ，Ｊ．Ｄ．ｅｔａｌ．，（１９９１），Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１；Ｋａｎｇ，Ａ．Ｓ．ｅｔａｌ．，（１９９１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８８：８３６３およびＳｍｉｔｈ，Ｇ．Ｐ．（１９９１）ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２：６６８を参照のこと）。

「ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合有機分子」は、本明細書中に記載されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０
５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対して（好ましくは特異的に）結合する、本明細書中で定義されるオリゴペプチドまたは抗体以外の有機分子である。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合有機分子は、公知の方法論を使用して同定し、そして化学合成することができる（例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ００／００８２３およびＷＯ００／３９５８５を参照のこと）。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合有機分子は、通常、約２０００ダルトン未満の大きさであるか、あるいは、約１５００、７５０、５００、２５０、または２００ダルトン未満の大きさである。ここでは、本明細書中に記載されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対して（好ましくは、特異的に）結合することができるそのような有機分子は、周知の技術を使用して過度の実験を行うことなく同定することができる。この点に関し、ポリペプチド標的に結合できる分子について有機分子ライブラリーをスクリーニングする手法が当該分
野で周知であることに注意されたい（例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ００／００８２３およびＷＯ００／３９５８５を参照のこと）。

目的の抗原、例えば、腫瘍関連ポリペプチド抗原標的に「結合する」抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子は、好ましくは、抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子が抗原を発現している細胞または組織をターゲティングする場合の診断薬および／または処置薬として有用であり、そして他のタンパク質とは、有意な交差反応を起こさないような十分な親和性で抗原に結合するものである。「非標的」タンパク質への抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子の結合の程度は、蛍光励起細胞分取（ＦＡＣＳ）解析または放射免疫沈降（ＲＩＡ）により測定した場合に、抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子のその特定の標的タンパク質への結合の約１０％未満である。標的分子への抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子の結合に関しては、特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド標的上のエピトープに対して、用語「特異的結合」または「特異的に結合する」または「特異的である」は、非特異的な相互作用とは測定可能な差違がある結合を意味する。特異的結合は、例えば、一般には結合活性を有しない同様の構造の分子であるコントロール分子の結合と比較して分子の結合を決定することにより測定することができる。例えば、特異的結合は、標的と同様のコントロール分子、例えば、過剰量の非標識標的との競合により決定できる。この場合、プローブへの標識標的の結合が、過剰な非標識標的により競合的に抑制された場合に、特異的結合が示唆される。用語特定のポリペプチドあるいは特定のポリペプチド標的上のエピトープに対する「特異的結合」またはそれらに「対して特異的に結合する」またはそれらに「対して特異的である」は、本明細書中で使用される場合は、例えば、少なくとも約１０^−４Ｍ、あるいは、少なくとも約１０^−５Ｍ、あるいは、少なくとも約１０^−６Ｍ、あるいは、少なくとも約１０^−７Ｍ、あるいは、少なくとも約１０^−８Ｍ、あるいは、少なくとも約１０^−９Ｍ、あるいは、少なくとも約１０^−１０Ｍ、あるいは、少なくとも約１０^−１１Ｍ、あるいは、少なくとも約１０^−１２Ｍ、あるいはそれ以上の標的に対するＫｄを有している分子を示す。用語「特異的結合」は、分子が、任意の他のポリペプチドまたはポリペプチドエピトープに対しては実質的には結合することなく、特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド上のエピトープに結合する結合を意味する。

「ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１を発現している腫瘍細胞の増殖を阻害する」抗体、オリゴペプチド、または他の有機分子、あるいは「増殖阻害」抗体、オリゴペプチド、または他の有機分子は、適切なＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８
００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを発現または過剰発現している癌細胞の測定可能な増殖阻害を生じるものである。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、癌細胞の表面上で発現させられる膜貫通ポリペプチドである場合も、また、癌細胞によって生産され、そして分泌されるポリペプチドである場合もある。好ましい増殖阻害性抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体、オリゴペプチド、あるいは有機分子は、ＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３−、もしくはＰＲＯ８５１６１を発現している腫瘍細胞の増殖を、適切な対照と比較して、２０％または２０％以上、好ましくは、約２０％から約５０％、そしてなおより好ましくは、５０％または５０％以上（例えば、約５０％から約１００％）阻害する。対照は、通常は、試験される抗体、オリゴペプチド、または他の有機分子で処理されていない腫瘍細胞である。増殖阻害は、細胞培養物中、約０．１〜３０μｇ／ｍＬまたは約０．５ｎＭ〜２００ｎＭの抗体濃度において測定することができ、ここで増殖阻害は、抗体への腫瘍細胞の曝露から１〜１０日後に測定される。インビボの腫瘍細胞の増殖阻害は、様々な方法で決定できる。抗体は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３
、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体の、約１μｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ体重での投与によって、腫瘍の大きさの縮小、または腫瘍の増殖の減少が、抗体の最初の投与から約５日から３ヶ月以内に、好ましくは、約５日から３０日以内に生じる場合に、増殖阻害性である。

「アポトーシスを誘導する」抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子は、アネキシンＶの結合、ＤＮＡのフラグメント化、細胞収縮、小胞体の拡張、細胞の断片化および／または膜ベシクル（アポトーシス体と称する）の形成により判断されるプログラムされた細胞死を誘導するものである。細胞は、通常は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを過剰発現している細胞である。好ましくは、細胞は、腫瘍細胞、例えば、前立腺、乳房、卵巣、胃、子宮内膜、肺、腎臓、結腸、膀胱の細胞である。アポトーシスに関連する細胞事象を評価するために様々な方法が利用できる。例えば、ホスファチジルセリン（ＰＳ）転座は、アネキシン結合により測定でき；ＤＮＡフラグメント化は、ＤＮＡラダー化を介して評価でき；そして、ＤＮＡフラグメント化に伴う核／クロマチン縮合は、低二倍体細胞の任意の増大により評価できる。好ましくは、アポトーシスを誘導する抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子は、アネキシン結合アッセイにおいて非投与の細胞と比較してアネキシン結合の約２〜５０倍、好ましくは約５〜５０倍、そして最も好ましくは約１０〜５０倍の誘導をもたらすものである。

抗体の「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域（ネイティブ配列のＦｃ領域またはアミノ酸配列改変体のＦｃ領域）に起因し得る生物学的活性のことをいい、そして、抗体アイソタイプと共に変動する。抗体エフェクター機能の例としては、Ｃ１ｑ結合および補体依存性細胞傷害；Ｆｃレセプター結合；抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）；貪食作用；細胞表面レセプター（例えば、Ｂ細胞レセプター）のダウンレギュレーション；およびＢ細胞活性化が挙げられる。

「抗体依存性細胞媒介性細胞傷害」すなわち「ＡＤＣＣ」とは、特定の細胞傷害性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球およびマクロファージ）上に存在するＦｃレセプター（ＦｃＲ）に結合している分泌Ｉｇにより、これらの細胞傷害性エフェクター細胞が抗原担持標的細胞に特異的に結合し、そしてその後、細胞毒素により標的細胞
を殺滅することができるようにするという細胞傷害の形態のことをいう。抗体は、細胞傷害性細胞を「武装」させ、そしてそのような殺滅のために絶対に必要なものである。ＡＤＣＣを媒介する主要な細胞であるＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現するのに対し、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩおよびＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞上のＦｃＲの発現は、ＲａｖｅｔｃｈａｎｄＫｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−９２（１９９１）の４６４ページの表３に総括されている。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するためには、米国特許第５，５００，３６２号または同第５，８２１，３３７号に記載されているようなインビトロのＡＤＣＣアッセイを実施してよい。このようなアッセイに有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。あるいは、または追加的に、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、例えば、Ｃｌｙｎｅｓｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，９５：６５２−６５６（１９９８）に開示されているような動物モデルにおいてインビボで評価してよい。

「Ｆｃレセプター」すなわち「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合するレセプターを説明する。好ましいＦｃＲは、ネイティブ配列のヒトＦｃＲである。さらに、好ましいＦｃＲは、ＩｇＧ抗体に結合するもの（γレセプター）であり、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩおよびＦｃγＲＩＩＩのサブクラスのレセプターが挙げられ、これらのレセプターの対立遺伝子改変体および選択的スプライシング型も含まれる。ＦｃγＲＩＩレセプターは、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化レセプター」）およびＦｃγＲＩＩＢ（「抑制レセプター」）を包含し、これらはその細胞質ドメインにおいて主に異なっている類似のアミノ酸配列を有する。活性化レセプターＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメイン中に免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）を含む。抑制レセプターＦｃγＲＩＩＢは、その細胞質ドメインに免疫受容抑制性チロシンモチーフ（ＩＴＩＭ）を含む（Ｄａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３−２３４（１９９７）の概説Ｍを参照のこと）。ＦｃＲは、ＲａｖｅｔｃｈａｎｄＫｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−４９２（１９９１）；Ｃａｐｅｌｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ
４：２５−３４（１９９４）；およびｄｅＨａａｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０−４１（１９９５）において概説されている。将来同定されるものを含む他のＦｃＲは、本明細書においては用語「ＦｃＲ」に包含される。この用語はまた、胎児への母体ＩｇＧの移行の原因となる新生児レセプターＦｃＲｎも含む（Ｇｕｙｅｒｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）およびＫｉｍｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））。

「ヒトエフェクター細胞」は、１つ以上のＦｃＲを発現し、エフェクター機能を示す白血球である。好ましくは、この細胞は、少なくともＦｃγＲＩＩＩを発現し、そしてＡＤＣＣエフェクター機能を示す。ＡＤＣＣを媒介するヒト白血球の例としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、細胞傷害性Ｔ細胞および好中球が挙げられ；ＰＢＭＣおよびＮＫ細胞が好ましい。エフェクター細胞は、天然の起源から、例えば、血液から単離され得る。

「補体依存性細胞傷害」すなわち「ＣＤＣ」は、補体の存在下における標的細胞の溶解のことをいう。古典的補体経路の活性化は、その同種抗原に結合している（適切なサブクラスの）抗体に補体系の第１成分（Ｃ１ｑ）が結合することにより開始される。補体活性化を評価するためには、例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２０２：１６３（１９９６）に記載されているようなＣＤＣアッセイを実施してよい。

用語「癌」および「癌性の」は、代表的には調節されていない細胞の成長を特徴とする哺乳動物における生理学的状態のことをいうか、それを説明するものである。癌の例とし
ては、癌腫、リンパ種、芽腫、肉腫および白血病が挙げられるがこれらに限定されない。このような癌のより特定の例としては、扁平上皮癌、肺癌（小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌および肺の扁平上皮癌）、腹膜の癌、肝細胞癌、胃癌（消化器癌を含む）、膵癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞癌、乳癌、結腸癌、直腸結腸癌、子宮体癌または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌、肝癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝臓癌種および様々な型の頭頚部癌ならびにＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）；小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ；中悪性度／濾胞性ＮＨＬ；中悪性度のびまん性ＮＨＬ；高悪性度の免疫芽球性ＮＨＬ；高悪性度のリンパ芽球性ＮＨＬ；高悪性度の小型非分割細胞ＮＨＬ；嵩高い疾患（ｂｕｌｋｙｄｉｓｅａｓｅ）ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；およびワルデンシュトレームマクログロブリン血症を含む）；慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；ヘアリー細胞白血病；慢性骨髄芽球性白血病；および移植後のリンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）が挙げられる。好ましくは、癌は、ＩＧＦレセプターを発現する腫瘍、より好ましくは乳癌、肺癌、直腸結腸癌または前立腺癌、そして最も好ましくは乳癌または前立腺癌を含む。

「化学療法剤」とは、癌の処置において有用な化合物である。化学療法剤の例としては、アルキル化剤（例えば、チオテパおよびＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）シクロホスファミド）；スルホン酸アルキル（例えば、ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファン）；アジリジン（例えば、ベンゾドパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボコン、メツレドパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）およびウレドパ（ｕｒｅｄｏｐａ））；エチレンイミンおよびメチラメラミン（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド（ｔｒｉｅｔｈｉｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｅ）およびトリメチロールメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）を含む）；アセトゲニン（特にブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（合成アナログトポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン（ｃａｌｌｙｓｔａｔｉｎ）；ＣＣ−１０６５（アドゼレシン、カルゼレシン（ｃａｒｚｅｌｅｓｉｎ）およびビゼレシン合成アナログを含む）；クリプトフィシン（ｃｒｙｐｔｏｐｈｙｃｉｎ）（特にクリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成アナログ、ＫＷ−２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エレウテロビン（ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｂｉｎ）；パンクラチスタチン（ｐａｎｃｒａｔｉｓｔａｔｉｎ）；サルコジクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンジスタチン（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ）；ナイトロジェンマスタード（例えば、クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド（ｃｈｏｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミン、メルファラン、ノベンブシン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン（ｐｈｅｎｅｓｔｅｒｉｎｅ）、プレドニムスチン（ｐｒｅｄｎｉｍｕｓｔｉｎｅ）、トロフォスファミド（ｔｒｏｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、ウラシルマスタード）；ニトロソ尿素（ｎｉｔｒｏｓｕｒｅａ）（例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン（ｆｏｔｅｍｕｓｔｉｎｅ）、ロムスチン、ニムスチンおよびラニムヌスチン（ｒａｎｉｍｎｕｓｔｉｎｅ））；抗生物質（例えば、エネジン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケミシンガンマ１ＩおよびカリケミシンオメガＩ１（例えば、Ａｇｎｅｗ，ＣｈｅｍＩｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．，３３：１８３−１８６（１９９４））；ダイネミシン（ｄｙｎｅｍｉｃｉｎ）（ダイネミシンＡが含まれる）、ビスホスホネート（例えば、クロドロネート、エスペラマイシン、ならびにネオカルジノスタチン発色団（ｎｅｏｃａｒｚｉｎｏｓｔａｔｉｎｃｈｒｏｍｏｐｈｏｒｅ）、および関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン（ａｃｌａｃｉｎｏｍｙｓｉｎ）、アクチノマイシン、オートラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、アドリアマイシン（ＡＤＲＩＡＭ
ＹＣＩＮ（登録商標））ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、およびデオキシドキソルビシンが含まれる）、エピルビシン、エソルビシン、イダラルビシン、マルセロマイシン（ｍａｒｃｅｌｌｏｍｙｃｉｎ）、マイトマイシン、（例えば、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾトシン、ツベルシジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗物質（例えば、メトトレキセートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸アナログ（例えば、デノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセート、プリンアナログ（例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジンアナログ（例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン（ｄｏｘｉｆｌｕｒｉｄｉｎｅ）、エノシタビン（ｅｎｏｃｉｔａｂｉｎｅ）、フロキシウリジン（ｆｌｏｘｕｒｉｎｉｎｅ）；アンドロゲン（例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール（ｅｐｉｔｉｏｓｔａｎｏｌ）、メピチオスタン（ｍｅｐｉｔｉｏｓｔａｎｅ）、テストラクトン、抗副腎薬（ａｎｔｉ−ａｄｒｅｎａｌｓ（例えば、アミノグルテチミド（ａｍｉｎｏｇｌｕｔｅｔｈｉｍｉｄｅ）、ミトタン（ｍｉｔｏｔａｎｅ）、トリロスタン（ｔｒｉｌｏｓｔａｎｅ）；葉酸補充薬（例えば、フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃａｃｉｄ））；アセグラトン（ａｃｅｇｌａｔｏｎｅ）、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキセート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルシン；ジアジコン（ｄｉａｚｉｑｕｏｎｅ）；エルホルニチン（ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；メイタンシノイド（例えば、メイタンシンおよびアンサミトシン）；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダモール；ニトラクリン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）；ペントスタチン；フェナメト；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸（ｐｏｄｏｐｈｙｌｌｉｎｉｃａｃｉｄ）、２−エチルヒドラジド、プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（ＪＨＳＮａｔｕｒａｌＰｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン、スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（ｔｒｉｃｈｏｔｈｅｃｅｎｅ）（特に、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、およびアングイジン）；ウレタン（ｕｒｅｔｈａｎ）；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド（ｔａｘｏｉｄ）（例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）パクリタキセル（Ｂｒｉｓｔｏｌ−ＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂＯｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ−ｆｒｅｅ、パクリタキセルのアルブミン操作された（ａｌｂｕｍｉｎ−ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ）ナノ粒子処方物ドキセタキセル（ＡｍｅｒｉｃａｎＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＰａｒｔｎｅｒｓ，Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、およびＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）ドセタキセル（Ｒｈｏｎｅ−ＰｏｕｌｅｎｃＲｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ））；クロラムブシル（ｃｈｌｏｒａｎｂｕｃｉｌ）；ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキセート；白金アナログ（例えば、シスプラチン、およびカルボプラチン）；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミゴキサントロン；ビンクリスチン；ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標）ビノレルビン；ノバントロン；テニポシド；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；キセロダ（ｘｅｌｏｄａ）；イバンドロネート（ｉｂａｎｄｒｏｎａｔｅ）；ＣＰＴ−Ｉ１；トポイソメラーゼインヒビターＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイド（例えば、レチン酸）；カペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）；ならびに上記の任意のものの薬学的に受容可能な塩、酸または誘導体が
挙げられるが、これらに限定されない。

この定義に同様に含まれるものは、腫瘍に対するホルモンの作用を制御または阻害する作用を有する抗ホルモン剤（例えば、抗エストロゲンおよび選択的エストロゲンレセプターモジュレーター（ｍｏｄｕｌａｔｏｒ）（ＳＥＲＭ）（タモキシフェン（例えば、ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）タモキシフェンを含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン（ｔｒｉｏｘｉｆｅｎｅ）、ケオキシフェン（ｋｅｏｘｉｆｅｎｅ）、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン（ｏｎａｐｒｉｓｔｏｎｅ）およびＦＡＲＥＳＴＯＮトレミフェン；副腎におけるエストロゲン産生を制御する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼインヒビター（例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）酢酸メゲストロール、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）エキセメスタン、フォルメスタニー（ｆｏｒｍｅｓｔａｎｉｅ）、ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標）ボロゾール（ｖｏｒｏｚｏｌｅ）、ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）レトロゾールおよびＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）アナストロゾール）；および抗アンドロゲン（例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリドおよびゴセレリン）；ならびにトロキサシタビン（ｔｒｏｘａｃｉｔａｂｉｎｅ）（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシンアナログ）；アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に例えば、ＰＫＣ−アルファ、ＲａｌｆおよびＨ−Ｒａｓなどの異常な細胞増殖に関与するとされるシグナリ伝達経路における遺伝子の発現を抑制するもの；リボザイム（例えば、ＶＥＧＦ発現インヒビター（例えば、ＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（登録商標）リボザイム）およびＨＥＲ２発現インヒビター）；ワクチン（例えば、遺伝子療法ワクチン、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ワクチン、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ワクチンおよびＶＡＸＩＤ（登録商標）ワクチン；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）ｒＩＬ−２；ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）トポイソメラーゼ１インヒビター；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標）ｒｍＲＨ；および上記のいずれかの製薬上許容しうる塩、酸または誘導体である。

用語「細胞増殖性障害」および「増殖性障害」は、ある程度の異常な細胞増殖に関連する障害のことをいう。本発明の１つの態様において、細胞増殖性障害は、癌である。

「腫瘍」とは、本明細書中で使用されるとき、悪性良性に関わらずすべての新生物細胞の成長および増殖ならびにすべての前癌および癌性の細胞および組織のことをいう。

「細胞死を誘導する」抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子は、生存細胞を非生存性とするものである。細胞は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを発現する細胞であり、好ましくは、同じタイプの組織の正常な細胞と比較して、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ
１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを過剰発現する細胞である。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、癌細胞の表面上で発現される膜貫通ポリペプチドである場合も、また、癌細胞によって生産され、分泌されるポリペプチドである場合もある。好ましくは、その細胞は、癌細胞、例えば、乳房、卵巣、胃、子宮内膜、唾液腺、肺、腎臓、結腸、甲状腺、膵臓または膀胱の細胞である。インビトロでの細胞死は、抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）により誘導された細胞死を識別するために補体および免疫エフェクター細胞の非存在下において決定され得る。すなわち、細胞死に関するアッセイは、熱不活性化血清を用い（すなわち補体非存在下において）、そして免疫エフェクター細胞の非存在下において実施され得る。抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子が細胞死を誘導することができるか否かを判定するためには、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）、トリパンブルー（Ｍｏｏｒｅｅｔａｌ．，Ｃｙｔｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１７：１−１１（１９９５）を参照のこと）または７ＡＡＤの取り込みにより評価される膜完全性の喪失を、未処理細胞と比較して評価することができる。好ましい細胞死誘導性の抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子は、ＢＴ４７４細胞におけるＰＩ取り込みアッセイにおいてＰＩ取り込みを誘導するものである。

本明細書中で使用されるとき、用語「免疫接着物（ｉｍｍｕｎｏａｄｈｅｓｉｏｎ）」は、免疫グロブリンの定常ドメインのエフェクター機能に異種タンパク質の結合特異性（「接着」）を組み合わせた抗体様分子を表す。構造的には、免疫接着物は、抗体の抗原認識結合部位および抗原結合部位以外の所望の結合特異性を有する（すなわち「異種」）アミノ酸配列と免疫グロブリン定常ドメイン配列との融合を含む。免疫接着分子の接着部分は、代表的には、少なくともレセプターまたはリガンドの結合部位を含む隣接するアミノ酸配列である。免疫接着物における免疫グロブリン定常ドメイン配列は、任意の免疫グロブリン（例えば、ＩｇＧ−１、ＩｇＧ−２、ＩｇＧ−３またはＩｇＧ−４サブタイプ、ＩｇＡ（ＩｇＡ−１およびＩｇＡ−２を含む）、ＩｇＥ、ＩｇＤまたはＩｇＭ）から得てよい。

用語「標識」は、本明細書中で使用されるとき、「標識された」抗体を作製するために抗体に直接的または間接的に結合体化された検出可能な化合物または組成物のことをいう。標識は、それ自体が検出可能であり得る（例えば、放射性同位体標識または蛍光標識）か、または、酵素標識の場合は、検出可能な基質化合物または基質組成物の化学的改変を触媒し得る。

「複製防止剤」とは、アポトーシス、血管形成抑制、細胞増加、腫瘍殺傷、有糸分裂抑制、細胞周期進行遮断、細胞成長の停止、腫瘍への結合、細胞メディエーターとしての作用などの機序に関わらず、細胞の複製、機能および／または成長を抑制または防止するか、または細胞を破壊する薬剤である。そのような薬剤としては、化学療法剤、細胞傷害性薬剤、サイトカイン、増殖阻害剤もしくは抗ホルモン剤、例えば、抗エストロゲン化合物（例えば、タモキシフェン、オナプリストン（ＥＰ６１６８１２参照）などの抗プロゲステロン；またはフルタミドなどの抗アンドロゲン、ならびにアロミダーゼインヒビターまたはアンドロゲンなどのホルモン剤が挙げられる。

用語「細胞傷害性薬剤」は、本明細書中で使用されるとき、細胞の機能を抑制または防止および／または細胞の破壊を引き起こす物質のことをいう。この用語は、放射性同位元素（例えば、Ａｔ^２１１、Ｉ^１３１、Ｉ^１２５、Ｙ^９０、Ｒｅ^１８６、Ｒｅ^１８８、Ｓｍ^１５３、Ｂｉ^２１２、Ｐ^３２、およびＬｕの放射性同位体）化学療法薬（例えば、メトトレキセート、アドリアマイシン、ビンカアルカロイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド）、ドキソルビシン、メルファラン、マイトマイシンＣ、クロラムブシル、ダウノルビシン、または他の挿入剤）、およびそれらの酵素および断片（例えば、核酸分解酵素、抗生物質、および毒素（例えば、低分子毒素、または細菌、真菌、植物、もしくは動物を起源とする酵素活性のある毒素（それらの断片および／または変異体が含まれる））、ならびに、以下に開示される様々な抗腫瘍薬または抗癌剤を含むように意図される。他の細胞傷害性薬剤は、下に記載する。殺腫瘍傷性薬剤は、腫瘍細胞の破壊をもたらす。

本明細書においてアンタゴニストと組み合わせて使用するための特定の腫瘍型に対する本明細書中の好ましい細胞傷害性薬剤は、以下の通りである：
１．前立腺癌：アンドロゲン、ドセタキセル、パクリタキセル、エストラムスチン（ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ）、ドキソルビシン、ミトキサントロン、ＥｒｂＢ２ドメイン（単数または複数）に対する抗体（例えば、２Ｃ４（ＷＯ０１／００２４５；ハイブリドーマＡＴＣＣＨＢ−１２６９７）（これは、ＥｒｂＢ２の細胞外ドメインの中の１つの領域（例えば、ＥｒｂＢ２の約残基２２から約残基５８４（それらが含まれる）までの領域の中の任意の１つ以上の残基）に結合する）、ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）抗血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）ＯＳＩ−７７４（エルトチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ））（ＧｅｎｅｎｅｔｅｃｈａｎｄＯＳＩＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、または他の上皮成長因子受容体チロシンキナーゼ阻害剤（ＥＧＦＲＴＫＩ’ｓ）。
２．胃癌：５−フルオロウラシル（５ＦＵ）、ＸＥＬＯＤＡ^ＴＭカペシタビン、メトトレキサート、エトポシド、シスプラチン／カルボプラチン、パクリタキセル（ｐａｃｌｉｉｔａｘｅｌ）、ドセタキセル、ゲムシタビン、ドキソルビシンおよびＣＰＴ−１１（カンプトテシン（ｃａｍｐｔｏｔｈｃｉｎ）−１１；イリノテカン、米国商標名：ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標））。
３．膵臓癌：ゲムシタビン、５ＦＵ、ＸＥＬＯＤＡ^ＴＭカペシタビン、ＣＰＴ−１１、ドセタキセル、パクリタキセル、シスプラチン、カルボプラチン、ＴＡＲＣＥＶＡ^ＴＭエルロチニブおよび他のＥＧＦＲＴＫＩ。
４．直腸結腸癌：５ＦＵ、ＸＥＬＯＤＡ^ＴＭカペシタビン、ＣＰＴ−１１、オキサリプラチン、ＡＶＡＳＴＩＮ^ＴＭ抗ＶＥＧＦ、ＴＡＲＣＥＶＡ^ＴＭエルロチニブおよび他のＥＧＦＲＴＫＩならびにＥＧＦＲに結合しレセプター活性化および腫瘍へのシグナル伝達を開始するＥＧＦの能力を阻止するＥＲＢＩＴＵＸ^ＴＭ（旧称ＩＭＣ−Ｃ２２５）ヒト：マウス−キメラ化モノクローナル抗体。
５．腎臓癌：ＩＬ−２、インターフェロンアルファ、ＡＶＡＳＴＩＮ^ＴＭ抗ＶＥＧＦ、ＭＥＧＡＣＥ^ＴＭ（酢酸メゲストロール）プロゲスチン、ビンブラスチン、ＴＡＲＣＥＶＡ^ＴＭエルロチニブおよび他のＥＧＦＲＴＫＩ。

「増殖阻害剤」は、本明細書中で使用される場合は、細胞の増殖を阻害する化合物または組成物を意味し、特に、ＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３−、もしくはＰＲＯ８５１６１−をインビトロもしくはインビボのいずれかで発現している癌細胞を意味する。したがって、増殖阻害剤は、Ｓ期にあるＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３−、もしくはＰＲＯ８５１６１−を発現している細胞のパーセンテージを有意に低下させる薬剤であり得る。増殖阻害剤の例としては、細胞周期の進行を阻止する（Ｓ期以外の位置において）薬剤（例えば、Ｇ１停止およびＭ期停止を誘導する薬剤）が挙げられる。従来のＭ期遮断薬としては、ビンカ（ビンクリスチンおよびビンブラスチン）、タキサンおよびトポイソメラーゼＩＩインヒビター（例えば、ドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、エトポシドおよびブレオマイシン）が挙げられる。Ｇ１を停止させる薬剤、例えば、ＤＮＡアルキル化剤（例えば、タモキシフェン、プレドニソン、ダカルバジン、メクロレタミン、シスプラチン、メトトレキサート、５−フルオロウラシルおよびａｒａ−Ｃ）はまた、Ｓ期停止にまで及ぶ。さらなる情報は、Ｔｈｅ
ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢａｓｉｓｏｆＣａｎｃｅｒ，ＭｅｎｄｅｌｓｏｈｎａｎｄＩｓｒａｅｌ，ｅｄｓ．，Ｃｈａｐｔｅｒ１，“Ｃｅｌｌｃｙｃｌｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ，ａｎｄａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｄｒｕｇｓ”，Ｍｕｒａｋａｍｉｅｔａｌ．，（ＷＢＳａｕｎｄｅｒｓ：Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，１９９５）の特に１３ページに見ることができる。タキサン類（パクリタキセルおよびドセタキセル）は、共にイチイ属の木から得られた抗癌剤である。ヨーロッパイチイから得られたドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｒｈｏｎｅ−ＰｏｕｌｅｎｃＲｏｒｅｒ）は、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−ＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ）の半合成アナログである。パクリタキセルおよびドセタキセルは、チューブリン２量体からの微小管の組立を促進し、そして脱重合の防止によって微小管を安定化させることにより、細胞の有糸分裂の抑制をもたらす。

「ドキソルビシン」は、アントラサイクリン抗生物質である。ドキソルビシンの完全な化学名は、（８Ｓ−シス）−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ
−リキソ−ヘキサピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−８−（ヒドロキシアセチル）−１−メトキシ−５，１２−ナフタセンジオンである。

用語「サイトカイン」は、ある細胞集団により放出され、細胞間メディエーターとして別の細胞に作用するタンパク質に関する総称である。このようなサイトカインの例は、リンフォカイン、モノカインおよび従来のポリペプチドホルモンである。サイトカインに含まれるものは、成長ホルモン（例えば、ヒト成長ホルモン、Ｎ−メチオニルヒト成長ホルモンおよびウシ成長ホルモン）；副甲状腺ホルモン；チロキシン；インスリン；プロインスリン；レラキシン；プロレラキシン；糖タンパク質ホルモン（例えば、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）および黄体形成ホルモン（ＬＨ））；肝成長因子；線維芽細胞成長因子；プロラクチン；胎盤性ラクトーゲン；腫瘍壊死因子−αおよび−β；ミューラー阻害物質；マウスゴナドトロピン関連ペプチド；インヒビン；アクチビン；血管内皮成長因子；インテグリン；トロンボポエチン（ＴＰＯ）；神経成長因子（例えば、ＮＧＦ−β）；血小板成長因子；トランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）（例えば、ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−β）；インスリン様成長因子−Ｉおよび−ＩＩ；エリスロポエチン（ＥＰＯ）；骨誘導因子（ｏｓｔｅｏｉｎｄｕｃｔｉｖｅｆａｃｔｏｒ）；インターフェロン（例えば、インターフェロン−α、−βおよび−γ）；コロニー刺激因子（ＣＳＦ）（例えば、マクロファージ−ＣＳＦ（Ｍ−ＣＳＦ））；顆粒球−マクロファージ−ＣＳＦ（ＧＭ−ＣＳＦ）；および顆粒球−ＣＳＦ（Ｇ−ＣＳＦ）；インターロイキン（ＩＬ）（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−１ａ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２）；腫瘍壊死因子（例えば、ＴＮＦ−αまたはＴＮＦ−β）；および他のポリペプチド因子（ＬＩＦおよびキットリガンド（ＫＬ）を含む）である。本明細書中で使用されるとき、用語サイトカインは、天然起源由来または組換え細胞培養物由来のタンパク質およびネイティブ配列のサイトカインの生物学的活性同等物を含む。

用語「添付文書」とは、治療用製品の市販用パッケージ内に慣習的に含まれる指示書のことをいうために用いられ、そのような治療用製品の使用に関する適応症、使用法、用量、投与、禁忌および／または警告に関する情報を含んでいる。

用語「遺伝子」とは、（ａ）本明細書に開示したＤＮＡ配列の少なくとも１つを含む遺伝子；（ｂ）本明細書中で開示するＤＮＡ配列によりコードされるアミノ酸配列をコードする任意のＤＮＡ配列および／または（ｃ）本明細書中で開示するコード配列の相補物にハイブリダイズする任意のＤＮＡ配列のことをいう。好ましくは、この用語は、コード領域ならびに非コード領域を含み、好ましくは、正常な遺伝子発現に必要なすべての配列を包む。

用語「遺伝子ターゲティング」とは、ゲノムＤＮＡフラグメントが哺乳動物細胞内に導入され、そしてそのフラグメントが内在性の相同配列を特定して組換えを起こす場合に生じる相同組換えの型のことをいう。相同組換えによる遺伝子ターゲティングは、特定のゲノム配列を特定の設計の外因性ＤＮＡと置き換える組換えＤＮＡ技術を使用する。

用語「相同組換え」とは、相同なヌクレオチド配列の部位における２つのＤＮＡ分子または染色分体の間のＤＮＡフラグメントの交換のことをいう。

用語「標的遺伝子」（あるいは「標的遺伝子配列」または「標的ＤＮＡ配列」とも呼ばれる）は、相同組換えにより改変されるべき任意の核酸分子、ポリヌクレオチドまたは遺伝子のことをいう。標的配列は、インタクトな遺伝子、エクソンもしくはイントロン、調節配列または遺伝子間の任意の領域を含む。標的遺伝子は、個々のゲノムＤＮＡにおける
特定の遺伝子または遺伝子座の一部分を含み得る。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子の「破壊」は、ゲノムＤＮＡの断片が、内因性の相同配列とともに存在しているかまたはそれらと組み換えられる場合に生じる。この場合、破壊は、自然界に存在している遺伝子もしくはその一部の欠失、または自然界に存在している遺伝子の変異であるか、あるいは、破壊は、自然界に存在している遺伝子の機能的な不活化である。あるいは、配列の破壊は、遺伝子トラップベクターを用いた非特異的な挿入性の不活性化により生じてもよい（すなわち、ランダムに挿入されたトランスジーンを含み、発現する非ヒトトランスジェニック動物；例えば、２００２年８月２０日に発行された米国特許第６，４３６，７０７号を参照のこと）。これらの配列の破壊または改変としては、ＤＮＡ配列の挿入、ミスセンス、フレームシフト、欠失または置換もしくは置き換えあるいはそれらの任意の組合せが挙げられ得る。挿入は、動物、植物、真菌、昆虫、原生動物またはウイルス起源であり得る遺伝子全体の挿入を含む。破壊は、例えば、正常な遺伝子産物の産生を部分的または完全に抑制するか、または正常な遺伝子産物の活性を増強することにより、その正常な遺伝子産物を変更することができる。好ましくは、破壊は無意味な破壊であり、この場合、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子の有意な発現は存在しない。

用語「自然な発現」は、野生型のマウスの中に存在する発現レベルでの、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子によってコードされる全長のポリ
ペプチドの発現を意味する。したがって、内因性のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子の「自然ではない発現」が存在する破壊は、１つの細胞、選択された細胞、または哺乳動物の全ての細胞の、内因性のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子によってコードされるポリペプチドの少なくとも一部の発現の部分的あるいは完全な低下を意味する。

用語「ノックアウト」とは、破壊によりネイティブの遺伝子の機能的不活性化；ネイティブ遺伝子またはその一部分の欠失；またはネイティブの遺伝子の変異がもたらされるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子の破壊のことをいう。

用語「ノックイン（ｋｎｏｃｋ−ｉｎ）」は、マウスのオルトログ（または他のマウスの遺伝子）の、特異的なヒトＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ
６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３−、もしくはＰＲＯ８５１６１−をコードする遺伝子、あるいはそれらの変異体のうちの任意のものをコードするヒトｃＤＮＡでの置き換えを意味する（すなわち、破壊によって、自然界に存在しているヒト遺伝子での自然界に存在しているマウスの遺伝子の置き換えが生じる）。

用語「構築物」または「ターゲティング構築物」とは、標的の組織、細胞株または動物内に移行されるべき人工的に組み立てられたＤＮＡセグメントのことをいう。
代表的には、ターゲティング構築物は、特定の目的の遺伝子または核酸配列、マーカー遺伝子および適切なコントロール配列を含む。本明細書中で提供される場合は、標的化構築物には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１標的化構築物が含まれる。「ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１標的化構築物」には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子の少なくとも一部に対して相同であるＤＮＡ配列が含まれ、これらは、宿主細胞の中でＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４
、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子の破壊を生じることができる。

用語「トランスジェニック細胞」は、そのゲノムの中に、破壊されている、修飾されている、変更されている、あるいは、遺伝子標的化の方法によって完全にまたは部分的に置き換えられているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子が含まれている細胞を意味する。

用語「トランスジェニック動物」とは、本明細書に記載した方法または当該分野で周知の他の方法により破壊または他の方法で改変または変異されている特定の遺伝子をそのゲノム内に含む動物のことをいう。好ましくは、その非ヒトトランスジェニック動物は、哺乳動物である。より好ましくは、その哺乳動物は、げっ歯類（例えば、ラットまたはマウス）である。さらに、「トランスジェニック動物」は、ヘテロ接合の動物（すなわち、１つの欠損対立遺伝子および１つの野生型対立遺伝子）またはホモ接合の動物（すなわち、２つの欠損対立遺伝子）であり得る。胚は、動物の定義内に属するとみなす。動物を提供することは、胚が在胎期を満了するかどうかにかかわらず、交配もしくは他の方法によって、子宮内に胚または胎児を提供することを含む。

本明細書中で使用されるとき、用語「選択マーカー」および「位置選択マーカー」とは、遺伝子を有している細胞のみを特定の条件下で生存および／または成長させることができる、ある産物をコードする遺伝子のことをいう。例えば、導入されたネオマイシン耐性（Ｎｅｏ^ｒ）遺伝子を発現する植物細胞および動物細胞は、化合物Ｇ４１８に耐性である。Ｎｅｏ^ｒ遺伝子マーカーを有しない細胞は、Ｇ４１８により殺滅される。他の陽性選択マーカーは、当業者に公知であるか、または推測できるものである。

用語「調節する」または「調節」は、本明細書中で使用される場合は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４
７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子の機能、発現、活性、またはあるいは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子に関連する表現形の、低下、阻害、減少、緩和、増大、あるいは増強を意味する。

用語「寛解する」または「寛解」は、本明細書中で使用されるとき、状態、疾患、障害または表現型（異常または症状を含む）の減少、低減または排除のことをいう。

用語「異常性」は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１が関与している任意の疾患、障害、状態、あるいは表現形（病状および行動観察が含まれる）を意味する。

ＩＩ．本発明の組成物および方法
Ａ．全長のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド
本発明により、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドと本出願において呼ばれるポリペプチドをコードする、新しく同定され、単離されたヌクレオチド配列が提供される。具体的には、様々なＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするｃＤＮＡが、以下の実施例にさらに
詳細に開示されるように、同定され、そして単離されている。異なる回の発現において生産されたタンパク質は、様々なＰＲＯ数を生じ得るが、ＵＮＱ数は、任意の所定のＤＮＡおよびコードされるタンパク質について固有であり、変化しないであろうことに留意されたい。しかしながら、簡便のため、本明細書においては、本明細書中で開示する完全長のネイティブの核酸分子によりコードされるタンパク質ならびにＰＲＯの前記した定義に含まれるすべてのさらなるネイティブの相同体および改変体は、その起源または調製様式に関わらず、「ＰＲＯ／番号」と呼ぶ。

後述する実施例に開示するように、様々なｃＤＮＡクローンがＡＴＣＣに寄託されている。当業者は、これらのクローンの実際のヌクレオチド配列を、当該分野の日常的方法を用いて寄託クローンの配列決定により容易に決定することができる。予測されるアミノ酸配列は、日常的技術を用いてヌクレオチド配列から決定できる。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、および本明細書中に記載されるコード核酸について、出願人らは、その時点で利用できる配列情報を用いて同定することができる最良のリーディングフレームであると考えたものを同定した。

Ｂ．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド変異体
本明細書中に記載される全長の自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに加えて、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲ
Ｏ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体を調製することができることが想定される。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体は、適切なヌクレオチドの変化を、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ＤＮＡの中に導入することによって、そして／あるいは、所望されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの合成によって調製することができる。アミノ酸の変化によって、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４
８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの翻訳後プロセスを変化させる（例えば、グリコシル化部位の数もしくはその位置を変化させる、または膜結合特性を変更する）ことができることは、当業者には明らかであろう。

自然界に存在している全長の配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドにおける、あるいは、本明細書中に記載されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの様々なドメインにおけるバリエーションは、例えば、米国特許第５，３６４，９３４号に示されている保存的変異および非保存的変異についての技術およびガイドラインのうちの任意のものを使用して、作成することができる。バリエーションは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする１つ以上のコドンの置換、欠失、あるいは、挿入であり得、これによって、自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０
、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドと比較して、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアミノ酸配列の中に変化が生じる。任意選択で、バリエーションは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの１つ以上のドメインの中の任意の他のアミノ酸での、少なくとも１つのアミノ酸の置換による。どのアミノ酸残基を、所望される活性に有害な影響を及ぼすことなく挿入する、置換する、または欠失させることができるかを決定する指針は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの配列を、相同である公知のタンパク質分子の配列と比較すること、そして相同性の高い領域の中に作成されたアミノ酸配列の変化の数を最少にすることによって見出すことができる。アミノ酸置換は、１つのアミノ酸を同様の構造的および／または化学的特性を有する別のアミノ酸と置き換えること、例えば、ロイシンをセリンで置き換えること、すなわち保存的なアミノ酸の置き換えの結果であり得る。挿入および欠失は、必要に応じて約１〜５個のアミノ酸の範囲であってよい。許容される変異は、配列におけるアミノ酸の挿入、欠失または置換を系統的
に行うことおよび得られた改変体を完全長または成熟ネイティブ配列により示される活性について試験することにより決定され得る。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド断片が、本明細書中で提供される。そのようなフラグメントは、例えば、完全長のネイティブのタンパク質と比較した場合にＮ末端またはＣ末端で切断されているか、または、内部残基を欠いている場合がある。特定の断片には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの所望される生物学的活性については不可欠ではないアミノ酸残基は含まれない。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１断片は、多数の従来技術のうちの任意のものによって調製することができる。所望のペプチドフラグメントは、化学的に合成され得る。別のアプローチには、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ
５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１断片を、酵素消化によって、例えば、タンパク質を、特定のアミノ酸残基によって定義される部位でタンパク質を切断することが公知の酵素でタンパク質を処理することによって、または、適切な制限酵素でＤＮＡを消化し、そして所望される断片を単離することによって、作成することが含まれる。さらに別の適当な手法では、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）により所望のポリペプチドフラグメントをコードするＤＮＡフラグメントを単離して増幅する。そのＤＮＡフラグメントの所望の末端を定義するオリゴヌクレオチドをＰＣＲにおける５’および３’のプライマーとして使用する。好ましくは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド断片は、本明細書中に開示される自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドと、少なくとも１つの生物学的活性および／または免疫学的活性を共有する。

目的の保存的置換は、好ましい置換という見出しの下に表６に示す通りである。このような置換が、生物学的活性の変化をもたらす場合、より実質的な変化、表６において例示される置換と称される置換、またはアミノ酸クラスを参照して後でさらに説明するものが好ましく導入され、その生成物がスクリーニングされる。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの機能または免疫学的実体の実質的な修飾は、（ａ）置換の領域のポリペプチド骨格の構造（例えば、シート構造またはヘリックス構造）、（ｂ）標的部位での分子の電荷または疎水性、あるいは（ｃ）側鎖の大きさを維持することに対するそれらの効果が有意に異なる置換を選択することによって行われる。天然に存在する残基は、共通の側鎖の特性に基づいて群分けされ：
アミノ酸は、その側鎖の特性における類似性（Ａ．Ｌ．Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｓｅｃｏｎｄｅｄ．，ｐｐ．７３−７５，ＷｏｒｔｈＰｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ（１９７５））に従って：
（１）非極性；Ａｌａ（Ａ）、Ｖａｌ（Ｖ）、Ｌｅｕ（Ｌ）、Ｉｌｅ（Ｉ）、Ｐｒｏ（Ｐ
）、Ｐｈｅ（Ｆ）、Ｔｒｐ（Ｗ）、Ｍｅｔ（Ｍ）
（２）無電荷極性：Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、Ｔｈｒ（Ｔ）、Ｃｙｓ（Ｃ）、Ｔｙｒ（Ｙ）、Ａｓｎ（Ｎ）、Ｇｌｎ（Ｑ）
（３）酸性：Ａｓｐ（Ｄ）、Ｇｌｕ（Ｅ）
（４）塩基性：Ｌｙｓ（Ｋ）、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｈｉｓ（Ｈ）
に群分けされ得る。
あるいは、天然に存在する残基は、共通の側鎖の特性に基づいて：
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖の方向に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ
に群分けされ得る。

非保存的置換は、これらのクラスの１つのメンバーを別のクラスと交換することを含む。そのような置換された残基はまた、保存的置換部位内に、またはより好ましくは残りの（非保存的な）部位に導入され得る。

変異は、オリゴヌクレオチド媒介性（部位指向性）突然変異誘発、アラニンスキャニングおよびＰＣＲ突然変異誘発などの当該分野で公知の方法を用いて生成することができる。部位指向性突然変異誘発［Ｃａｒｔｅｒｅｔａｌ．，Ｎｕｃｌ．ＡｃｉｄｓＲｅｓ．，１３：４３３１（１９８６）；Ｚｏｌｌｅｒｅｔａｌ．，Ｎｕｃｌ．ＡｃｉｄｓＲｅｓ．，１０：６４８７（１９８７）］、カセット突然変異誘発［Ｗｅｌｌｓｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ，３４：３１５（１９８５）］、制限選択突然変異誘発［Ｗｅｌｌｓｅｔａｌ．，Ｐｈｉｌｏｓ．Ｔｒａｎｓ．Ｒ．Ｓｏｃ．ＬｏｎｄｏｎＳｅｒＡ，３１７：４１５（１９８６）］または他の公知の手法をクローニングされたＤＮＡに対して実施することによりＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１変異体ＤＮＡを生成することができる。改変体ＤＮＡを生成することができる。

スキャニングアミノ酸分析もまた、隣接する配列に沿って１つ以上のアミノ酸を同定するために使用できる。好ましいスキャニングアミノ酸には比較的小型の中性のアミノ酸が包含される。このようなアミノ酸としては、アラニン、グリシン、セリンおよびシステインが挙げられる。アラニンは、代表的には、それがベータ炭素を超えた側鎖を排除し、改変体の主鎖のコンホメーションを変更する可能性が低いため、この群の中では好ましいスキャニングアミノ酸である［ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍａｎｄＷｅｌｌｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１−１０８５（１９８９）］。アラニンはまた、代表的には、それが最も一般的なアミノ酸であるため好ましい。さらに、アラニンは、頻繁に埋没した位置および曝露される位置の両方において存在する［Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，ＴｈｅＰｒｏｔｅｉｎｓ，（Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，Ｎ．Ｙ．）；Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｊ．Ｍｏｌ
．Ｂｉｏｌ．，１５０：１（１９７６）］。アラニン置換が十分な量の改変体をもたらさない場合は、同配体（ｉｓｏｔｅｒｉｃ）アミノ酸を使用できる。

Ｃ．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの修飾
ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの共有結合による修飾が、本発明の範囲に含まれる。共有結合による修飾の１つのタイプには、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの標的化されたアミノ酸残基を、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの選択された側鎖あるいはＮ末端またはＣ末端残基と反応することができる有機誘導体化剤と反応させる工程が含まれる。二官能性物質での誘導は、例えば、抗ＰＲＯ２２６、
抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体を精製するための方法に使用される水不溶性支持マトリックスまたは表面への、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの架橋のため、ならびにその逆に、有用である。一般に使用される架橋結合剤としては、例えば、１，１−ビス（ジアゾアセチル）−２−フェニルエタン、グルタルアルデヒド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、例えば、４−アジドサリチル酸とのエステル、ホモ２官能性イミドエステル（３，３’−ジチオビス（スクシンイミジルプロピオネート）などのジスクシンイミジルエステルを含む）、２官能性マレイミド（例えば、ビス−Ｎ−マレイミド−１，８−オクタンおよびメチル−３−［（ｐ−アジドフェニル）ジチオ］プロピオイミデート）などの薬剤が挙げられる。

他の改変としては、グルタミニル残基およびアスパルギニル残基からそれぞれ対応するグルタミル残基およびアスパルチル残基への脱アミド化、プロリンおよびリシンのヒドロキシル化、セリル残基またはスレオニル残基のヒドロキシル基のホスホリル化、リシン、アルギニンおよびヒスチジン側鎖のα−アミノ基のメチル化［Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：ＳｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，ＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ｐｐ．７９−８６（１９８３）］、Ｎ末端アミンのアセチル化ならびに任意のＣ末端カルボキシル基のアミド化が挙げられる。

本発明の範囲に含まれるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ
９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの別のタイプの共有結合による修飾には、ポリペプチドの自然界でのグリコシル化パターンを変更することが含まれる。「自然界でのグリコシル化パターンを変更すること」は、本明細書中での目的については、自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの中に見られる１つ以上の炭水化物部分を欠失させること（根底にあるグリコシル化部位を除去することによるか、または、化学的および／もしくは酵素的手段によりグリコシル化を欠失させることのいずれかによる）、ならびに／あるいは、自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの中には存在しない１つ以上のグリコシル化部位を付加することを意味する。さらに、この語句は、存在する様々な炭化水素部分の性質および比率の変化を含む、ネイティブタンパク質のグリコシル化の定性的変化を含む。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対するグリコシル化部位の付加は、アミノ酸配列を変更することによって行われる場合がある。変更は、例えば、自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１
３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１に対する、１つ以上のセリンまたはスレオニン残基の付加、あるいはそれらによる置換によって作成される場合がある（Ｏ−結合グリコシル化部位について）。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１アミノ酸配列は、任意選択で、ＤＮＡレベルでの変化によって、特には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするＤＮＡを、所望されるアミノ酸に翻訳されるであろうコドンを生じるように予め選択された塩基で変異させることによって、変化させられる場合がある。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド上の炭水化物部分の数を増加させる別の手段は、ポリペプチドへのグリコシドの化学的または酵素的カップリングによる。そのような方法は、当該分野において、例えば、１９８７年９月１１日公開のＷＯ８７／０５３３０およびＡｐｌｉｎａｎｄＷｒｉｓｔｏｎ，ＣＲＣＣｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，ｐｐ．２５９−３０６（１９８１）に記載されて
いる。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド上に存在している炭水化物部分の除去は、グリコシル化の標的とされるアミノ酸残基をコードしているコドンの、化学的、または酵素的、または突然変異による置換によって行われる場合がある。化学的脱グリコシル化手法は、当該分野で公知であり、そして例えば、Ｈａｋｉｍｕｄｄｉｎ，ｅｔａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，２５９：５２（１９８７）およびＥｄｇｅｅｔａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１１８：１３１（１９８１）に記載されている。ポリペプチド上の炭水化物部分の酵素的切断は、Ｔｈｏｔａｋｕｒａｅｔａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．１３８：３５０（１９８７）に記載されている種々のエンドグリコシダーゼおよびエキソグリコシダーゼの使用によって達成され得る。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの別のタイプの共有結合による修飾には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを、様々な非タンパク質性のポリマー（例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、またはポリオキシアルキレン）のうちの１つに対して、米国特許第４，６４０，８３５号；同第４，４９６，６８９号；同第４，３０１，１４４号；同第４，６７０，４１７号；同第４，７９１，１９２号または同第４，１７９，３３７号に示されている様式で連結させることが含まれる。

本発明のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドはまた、別の、異種ポリペプチドまたはアミノ酸配列に対して融合させられたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが含まれているキメラ分子を形成させるような方法で修飾される場合もある。

そのようなキメラ分子には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの、それに対して抗ｔａｇ抗体を選択的に結合させることができるエピトープを提供するタグポリペプチドとの融合体が含まれる。エピトープタグは、一般的には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアミノ
末端またはカルボキシル末端に配置される。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのそのようなエピトープタグ化形態の存在は、タグポリペプチドに対する抗体を使用して検出することができる。また、エピトープタグが提供されることにより、抗タグ抗体またはエピトープタグに結合する別のタイプの親和性マトリックスを使用する親和性による精製によって、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを容易に精製することが可能となる。様々なタグポリペプチドおよびその対応する抗体が当該分野で周知である。例としては、ポリヒスチジン（ポリ−ｈｉｓ）またはポリヒスチジン−グリシン（ポリ−ｈｉｓ−ｇｌｙ）タグ；インフルエンザＨＡタグポリペプチドおよびその抗体１２ＣＡ５［Ｆｉｅｌｄｅｔａｌ．，Ｍｏｌ．ＣｅｌｌＢｉｏｌ．，８：２１５９−２１６５（１９８８）］；ｃ−ｍｙｃタグおよびそれに対する８Ｆ９、３Ｃ７、６Ｅ１０、Ｇ４、Ｂ７および９Ｅ１０抗体［Ｅｖａｎｅｔａｌ．，ＭｏｌｅｃｕｌａｒａｎｄＣｅｌｌｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，５：３６１０−３６１６（１９８５）］；ならびに単純ヘルペスウイルス糖タンパク質Ｄ（ｇＤ）タグおよびその抗体［Ｐａｂｏｒｓｋｙｅｔａｌ．，ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，３（６）：５４７−５５３（１９９０）］が挙げられる。他のタグポリペプチドとしては、Ｆｌａｇ−ペプチド［Ｈｏｐｐｅｔａｌ．，ＢｉｏＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，６：１２０４−１２１０（１９８８）］；ＫＴ３エピトープペプチド［Ｍａｒｔｉｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５５：１９２−１９４（１９９２）］；α−チューブリンエピトープペプチド［Ｓｋｉｎｎｅｒｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６６：１５１６３−１５１６６（１９９１）］；およびＴ７遺伝子１０タンパク質ペプチドタグ［Ｌｕｔｚ−Ｆｒｅｙｅｒｍｕｔｈｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８７：６３９３−６３９７（１９９０）］が挙げられる。

キメラ分子には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４
８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの、免疫グロブリンまたは免疫グロブリンの特定の領域との融合体が含まれ得る。キメラ分子の２価の形態（「イムノアドヘシン」とも称する）については、このような融合はＩｇＧ分子のＦｃ領域に対するものであり得る。Ｉｇ融合体には、好ましくは、Ｉｇ分子の中の少なくとも１つの可変領域の代わりに、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの可溶性（膜貫通ドメインが欠失させられているか、または不活化させられている）形態の置換が含まれる。本発明の特に好ましい態様において、免疫グロブリン融合は、ＩｇＧ１分子のヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３；またはＩｇＧ１分子のヒンジ、ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３領域を含む。免疫グロブリン融合の生成については、１９９５年６月２７日発行の米国特許第５，４２８，１３０号も参照のこと。

Ｄ．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの調製
以下の記載は、主に、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１核酸が含まれているベクターで形質転換またはトランスフェクトされた細胞を培養することによる、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６
、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの生産に関する。もちろん、当該分野で周知の別の方法が、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを調製するために使用される場合があることも想定される。例えば、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１配列、あるいはその一部は、固相技術を使用して直接的なペプチド合成によって生産することができる［例えば、Ｓｔｅｗａｒｔｅｔａｌ．，Ｓｏｌｉｄ−ＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｗ．Ｈ．ＦｒｅｅｍａｎＣｏ．，ＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ（１９６９）；Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８５：２１４９−２１５４（１９６３）を参照のこと］。インビトロのタンパク質合成を、手動の手法または自動により実施してよい。自動合成は、例えば、ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒ（ＦｏｓｔｅｒＣｉｔｙ，ＣＡ）を用いて製造元の指示書により達成され得る。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２
０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの様々な部分を別々に化学合成し、そして化学的もしくは酵素的方法を使用して結合させて、全長のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを生産することができる。

１．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするＤＮＡの単離
ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするＤＮＡは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ｍＲＮＡを有しており、そして検出可能なレベルでそれを発現すると考えられる組織から調製された
ｃＤＮＡライブラリーから得ることができる。したがって、ヒトＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３−、もしくはＰＲＯ８５１６１−ＤＮＡは、実施例に記載されるように、ヒトの組織から調製されたｃＤＮＡライブラリーから簡単に得ることができる。ＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１−をコードする遺伝子はまた、ゲノムライブラリーから、あるいは公知の合成手順によって得ることもできる（例えば、自動核酸合成）。

ライブラリーは、目的の遺伝子またはそれによってコードされるタンパク質を同定するために設計されたプローブ（例えば、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対する抗体、あるいは少なくとも約２０〜８０塩基のオリゴヌクレオチド）を用いてスクリーニングすることができる。選択されたプローブを用いたｃＤＮＡライブラリーまたはゲノムライブラリーのスクリーニングは、Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ（ＮｅｗＹｏｒｋ：ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ，１９８９）に記載されているような標準的な手順を用いて実施され得る。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３
４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１をコードする遺伝子を単離するための別の手段は、ＰＣＲ方法を使用することである［Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，前出；Ｄｉｅｆｆｅｎｂａｃｈｅｔａｌ．，ＰＣＲＰｒｉｍｅｒ：Ａ
ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ（ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ，１９９５）］。

後述する実施例は、ｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングするための手法を説明するものである。プローブとして選択されたオリゴヌクレオチド配列は、偽陽性を最小限とするために十分な長さのものであり、そして十分明白なものでなければならない。このオリゴヌクレオチドは、好ましくは、スクリーニングされるライブラリーのＤＮＡへのハイブリダイゼーション時にそれが検出できるように標識される。標識方法は、当該分野で周知であり、それらとしては、^３２Ｐ標識ＡＴＰのような放射性標識、ビオチニル化または酵素標識の使用が挙げられる。中ストリンジェンシーおよび高ストリンジェンシーを含むハイブリダイゼーション条件は、Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，前出に記載されている。

このようなライブラリースクリーニング法において同定された配列は、ＧｅｎＢａｎｋなどの公的データベースまたは他の私的配列データベースに寄託され入手可能である他の既知配列と比較し、アラインメントすることができる。分子の所定領域内または完全長配列に渡る配列同一性（アミノ酸またはヌクレオチドレベルのいずれかで）は、当該分野で公知の方法を用いて、そして、本明細書に記載するように決定することができる。

タンパク質コード配列を有する核酸は、本明細書において初めて開示された推定アミノ酸配列を用いて、そして、必要に応じて、前出のＳａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．に記載されている従来のプライマー伸長手順を用いて、選択されたｃＤＮＡまたはゲノムライブラリーをスクリーニングすることにより前駆体を検出すること、および、ｃＤＮＡに逆転写されていないｍＲＮＡの中間体をプロセシングすることにより得られうる。

２．宿主細胞の選択および形質転換
宿主細胞は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの生産のための本明細書中に記載される発現ベクターまたはクローニングベクターでトランスフェクトされるかまたは形質転換され、そして、プロモーターを誘導する、形質転換体を選択する、または所望される配列をコードしている遺伝子を増幅することに適する
ように修飾された通常の栄養培地の中で培養される。培地、温度、ｐＨなどのような培養条件は、過度の実験を要することなく当業者が選択できる。一般に、細胞培養の産生性を最大にするための原理、プロトコルおよび実際の手法は、ＭａｍｍａｌｉａｎＣｅｌｌ
Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：ａＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ，Ｍ．Ｂｕｔｌｅｒ，ｅｄ．（ＩＲＬＰｒｅｓｓ，１９９１）およびＳａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，前出に見ることができる。

真核生物細胞トランスフェクションおよび原核生物細胞トランスフェクションの方法は、当業者に公知であり、例えば、ＣａＣｌ_２、ＣａＰＯ_４、リポソーム媒介およびエレクトロポレーションである。使用する宿主細胞に応じて、形質転換は、その細胞に適切な標準的手法を用いて実施する。前出のＳａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，に記載されているように塩化カルシウムを使用するカルシウム処理またはエレクトロポレーションが原核生物に対して一般に使用される。Ｓｈａｗｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ，２３：３１５（１９８３）および１９８９年６月２９日公開のＷＯ８９／０５８５９に記載されているように、特定の植物細胞の形質転換には、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓによる感染が使用される。細胞壁を有しない哺乳動物細胞に対しては、ＧｒａｈａｍａｎｄｖａｎｄｅｒＥｂ，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，５２：４５６−４５７（１９７８）のリン酸カルシウム沈降法を使用できる。哺乳動物細胞宿主系トランスフェクションの一般的態様は、米国特許第４，３９９，２１６号に記載されている。酵母への形質転換は、代表的には、ＶａｎＳｏｌｉｎｇｅｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂａｃｔ．１３０：９４６（１９７７）およびＨｓｉａｏｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ），７６：３８２９（１９７９）の方法に従って実施される。しかしながら、細胞にＤＮＡを導入するための別の方法（例えば、核マイクロインジェクション、エレクトロポレーション、インタクトな細胞との細菌プロトプラスト融合またはポリカチオン、例えば、ポリブレン、ポリオルニチン）も使用され得る。哺乳動物細胞を形質転換するための様々な手法については、Ｋｅｏｗｎｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１８５：５２７−５３７（１９９０）およびＭａｎｓｏｕｒｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３６：３４８−３５２（１９８８）を参照のこと。

本明細書におけるベクター内のＤＮＡをクローニングまたは発現するために適当な宿主細胞としては、原核生物、酵母または高等真核生物の細胞が挙げられる。適当な原核生物としては、真正細菌（例えば、グラム陰性またはグラム陽性の生物体、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉなどのＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ科）が挙げられるがこれらに限定されない。様々なＥ．ｃｏｌｉ株（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉＫ１２株ＭＭ２９４（ＡＴＣＣ３１，４４６）；Ｅ．ｃｏｌｉＸ１７７６（ＡＴＣＣ３１，５３７）；Ｅ．ｃｏｌｉ株Ｗ３１１０（ＡＴＣＣ２７，３２５）およびＫ５７７２（ＡＴＣＣ５３，６３５））が公的に入手できる。他の適当な原核生物宿主細胞としては、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ科（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉなどのＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ属、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ属、Ｅｒｗｉｎｉａ属、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ属、Ｐｒｏｔｅｕｓ属、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ属（例えば、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、Ｓｅｒｒａｔｉａ属（例えば、Ｓｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃａｎｓ）およびＳｈｉｇｅｌｌａ属ならびにＢａｃｉｌｌｉ属（例えば、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓおよびＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ（例えば、１９８９年４月１２日公開のＤＤ２６６，７１０に開示されているＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ４１Ｐ））、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなどのＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ属およびＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ属が挙げられる。これらの例は、説明であって限定するものではない。株Ｗ３１１０は、組換えＤＮＡ産物の発酵のための一般的な宿主菌株であるため、１つの特に好ましい宿主または親宿主である。好ましくは、宿主細胞は、最小量のタンパク質分解酵素を分泌する。例えば、菌株Ｗ３１１０は、宿主に内在性であるタンパク質をコードする遺伝子における遺伝的変異に影響を及ぼすように改変してよく、そのような宿主の例としては、完全な遺伝子型ｔｏｎＡを有するＥ．ｃｏ
ｌｉＷ３１１０株１Ａ２；完全な遺伝子型ｔｏｎＡｐｔｒ３を有するＥ．ｃｏｌｉＷ３１１０株９Ｅ４；完全な遺伝子型ｔｏｎＡｐｔｒ３ｐｈｏＡＥ１５（ａｒｇＦ−ｌａｃ）１６９ｄｅｇＰｏｍｐＴｋａｎ^ｒを有するＥ．ｃｏｌｉＷ３１１０株２７Ｃ７（ＡＴＣＣ５５，２４４）；完全な遺伝子型ｔｏｎＡｐｔｒ３ｐｈｏＡＥ１５（ａｒｇＦ−ｌａｃ）１６９ｄｅｇＰｏｍｐＴｒｂｓ７ｉｌｖＧｋａｎ^ｒを有するＥ．ｃｏｌｉＷ３１１０株３７Ｄ６；非カナマイシン耐性ｄｅｇＰ欠失変異を有する株３７Ｄ６であるＥ．ｃｏｌｉＷ３１１０菌株４０Ｂ４；および、１９９０年８月７日に発行された米国特許第４，９４６，７８３号に開示されている変異体の細胞周辺腔プロテアーゼを有するＥ．ｃｏｌｉ株が挙げられる。あるいは、インビトロにおけるクローニング方法、例えば、ＰＣＲまたは他の核酸ポリメラーゼ反応が適当である。

原核生物に加えて、真核微生物（例えば、糸状菌または酵母）も、ＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３−、もしくはＰＲＯ８５１６１−をコードするベクターについての適切なクローニングまたは発現宿主である。Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ
ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅは、一般に使用されている下等真核生物の宿主微生物である。他のものとしては、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｐｏｍｂｅ（ＢｅａｃｈａｎｄＮｕｒｓｅ，Ｎａｔｕｒｅ，２９０：１４０［１９８１］；１９８５年５月２日公開のＥＰ１３９，３８３）；Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ属宿主（米国特許第４，９４３，５２９号；Ｆｌｅｅｒｅｔａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，９：９６８−９７５（１９９１））（例えば、Ｋ．ｌａｃｔｉｓ（ＭＷ９８−８Ｃ，ＣＢＳ６８３、ＣＢＳ４５７４；Ｌｏｕｖｅｎｃｏｕｒｔｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．，１５４（２）：７３７−７４２［１９８３］）、Ｋ．ｆｒａｇｉｌｉｓ（ＡＴＣＣ１２，４２４）、Ｋ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ（ＡＴＣＣ１６，０４５）、Ｋ．ｗｉｃｋｅｒａｍｉｉ（ＡＴＣＣ２４，１７８）、Ｋ．ｗａｌｔｉｉ（ＡＴＣＣ５６，５００）、Ｋ．ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｒｕｍ（ＡＴＣＣ３６，９０６；ＶａｎｄｅｎＢｅｒｇｅｔａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，８：１３５（１９９０））、Ｋ．ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓおよびＫ．ｍａｒｘｉａｎｕｓ）；ｙａｒｒｏｗｉａ属（ＥＰ４０２，２２６）；Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ（ＥＰ１８３，０７０；Ｓｒｅｅｋｒｉｓｈｎａｅｔａｌ．，Ｊ．ＢａｓｉｃＭｉｃｒｏｂｉｏｌ．，２８：２６５−２７８［１９８８］）；Ｃａｎｄｉｄａ属；Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｉａ（ＥＰ２４４，２３４）；Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａｃｒａｓｓａ（Ｃａｓｅｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７６：５２５９−５２６３［１９７９］）；Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ属（例えば、Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ（１９９０年１０月３１日公開のＥＰ３９４，５３８））；および糸状菌（例えば、Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ属、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ属、Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ属（１９９１年１月１０日公開のＷＯ９１／００３５７）およびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属宿主（例えば、Ａ．ｎｉｄｕｌａｎｓ（Ｂａｌｌａｎｃｅｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１１２：２８４−２８９［１９８３］；Ｔｉｌｂｕｒｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ，２６：２０５−２２１［１９８３］；Ｙ
ｅｌｔｏｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：１４７０−１４７４［１９８４］）およびＡ．ｎｉｇｅｒ（ＫｅｌｌｙａｎｄＨｙｎｅｓ，ＥＭＢＯＪ．，４：４７５−４７９［１９８５］））が挙げられる。メチロトロピック（Ｍｅｔｈｙｌｏｔｒｏｐｉｃ）酵母が、本発明において適しており、そしてそれらとしては、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ属、Ｃａｎｄｉｄａ属、Ｋｌｏｅｃｋｅｒａ属、Ｐｉｃｈｉａ属、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ属、Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ属およびＲｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ属からなる属から選択される、メタノールで生育できる酵母が挙げられるがこれらに限定されない。このクラスの酵母の例となる特定の種のリストは、Ｃ．Ａｎｔｈｏｎｙ，ＴｈｅＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｏｆＭｅｔｈｙｌｏｔｒｏｐｈｓ，２６９（１９８２）に見ることができる。

グリコシル化されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの発現に適している宿主細胞は、多細胞生物に由来する。無脊椎動物の細胞の例としては、昆虫細胞（例えば、ＤｒｏｓｏｐｈｉｌａＳ２およびＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ
Ｓｆ９）ならびに植物細胞が挙げられる。有用な哺乳動物宿主細胞株の例としては、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞およびＣＯＳ細胞が挙げられる。より特定の例としては、ＳＶ４０で形質転換したサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ−７、ＡＴＣＣＣＲＬ１６５１）；ヒト胚性腎株（２９３細胞または懸濁培地中の生育のためにサブクローニングされた２９３細胞、Ｇｒａｈａｍｅｔａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．，３６：５９（１９７７））；チャイニーズハムスター卵巣細胞／−ＤＨＦＲ（ＣＨＯ、ＵｒｌａｕｂａｎｄＣｈａｓｉｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：４２１６（１９８０））；マウスセルトーリ細胞（ＴＭ４、Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．，２３：２４３−２５１（１９８０））；ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ
ＣＣＬ７５）；ヒト肝細胞（ＨｅｐＧ２，ＨＢ８０６５）；およびマウス乳癌（ＭＭＴ０６０５６２、ＡＴＣＣＣＣＬ５１）が挙げられる。適切な宿主細胞の選択は、当業者の知る通りである。

３．複製可能なベクターの選択および使用
ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする核酸（例えば、ｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡ）は、クローニング（ＤＮＡの増幅）のた
め、または発現のための複製可能なベクターに挿入される場合がある。様々なベクターが公的に入手可能である。そのベクターは、例えば、プラスミド、コスミド、ウイルス粒子またはファージの形態であり得る。適切な核酸配列が、種々の手順によりベクター内に挿入され得る。一般に、ＤＮＡは、当該分野で公知の手法を用いて適切な制限エンドヌクレアーゼ部位に挿入される。ベクター構成要素としては、一般に、シグナル配列の１つ以上、複製起点、マーカー遺伝子の１つ以上、エンハンサーエレメント、プロモーターおよび転写終止配列が挙げられるがこれらに限定されない。これらの構成要素の１つ以上を含む適当なベクターの構築は、当業者に公知の標準的なライゲーション手法を用いる。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、組み換えによって直接生産することができるだけではなく、また、シグナル配列であり得る異種ポリペプチド、または、成熟タンパク質またはポリペプチドのＮ末端に特異的切断部位を有している他のポリペプチドとの融合ポリペプチドとしても生産することができる。一般的には、シグナル配列はベクターの成分であり得るか、あるいは、ベクターの中に挿入されるＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３−、もしくはＰＲＯ８５１６１−をコードするＤＮＡの一部であり得る。シグナル配列は、例えば、アルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ、ｌｐｐまたは熱安定性エンテロトキシンＩＩリーダーの群から選択される原核生物のシグナル配列であり得る。酵母の分泌のためには、シグナル配列は、例えば、酵母インベルターゼリーダー、アルファ因子リーダー（ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓおよびＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓのα−因子リーダーを包み、後者は、米国特許第５，０１０，１８２号に記載）または酸ホスファターゼリーダー、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓグルコアミラーゼリーダー（１９９０年４月４日公開のＥＰ３６２，１７９）または１９９０年１１月１５日公開のＷＯ９０／１３６４６に記載のシグナルであり得る。哺乳動物細胞発現においては、同じか関連する種の分泌ポリペプチド由来のシグナル配列などの哺乳動物シグナル配列を用いてタンパク質の分泌を誘導し得、ウイルスの分泌リーダーも使用され得る。

発現およびクローニングベクターは、両方とも１つ以上の選択された宿主細胞においてベクターを複製可能とする核酸配列を含む。そのような配列は、種々の細菌、酵母および
ウイルスに関して周知である。プラスミドｐＢＲ３２２由来の複製起点が、大部分のグラム陰性細菌に適しており、２μプラスミド起点は、酵母に適しており、そして様々なウイルス起点（ＳＶ４０、ポリオーマ、アデノウイルス、ＶＳＶまたはＢＰＶ）は、哺乳動物細胞におけるクローニングベクターのために有用である。

発現ベクターおよびクローニングベクターは、代表的には、選択可能なマーカーとも呼ばれる選択遺伝子を含む。代表的な選択遺伝子は、（ａ）抗生物質または他のトキシン、例えば、アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキサートまたはテトラサイクリンに対する耐性を付与するタンパク質、（ｂ）栄養要求性の欠損を補うタンパク質、または（ｃ）複合培地から利用できない重要な栄養を供給するタンパク質をコードしており、例えば、ＢａｃｉｌｌｉのためのＤ−アラニンラセマーゼをコードする遺伝子である。

哺乳動物細胞についての適切な選択マーカーの一例は、ＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３−、もしくはＰＲＯ８５１６１−をコードする核酸を取り込むための細胞成分の同定が可能なマーカーであり、例えば、ＤＨＦＲまたはチミジンキナーゼである。野生型ＤＨＦＲを使用する場合の適切な宿主細胞は、Ｕｒｌａｕｂｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：４２１６（１９８０）に記載されているように調製および増殖させたＤＨＦＲ活性欠損のＣＨＯ細胞である。酵母において使用に適した選択遺伝子は、酵母プラスミドＹＲｐ７中に存在するｔｒｐ１遺伝子である［Ｓｔｉｎｃｈｃｏｍｂｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２８２：３９（１９７９）；Ｋｉｎｇｓｍａｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ，７：１４１（１９７９）；Ｔｓｃｈｅｍｐｅｒｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ，１０：１５７（１９８０）］。ｔｒｐ１遺伝子は、トリプトファン中で生育する能力を欠いた酵母の変異株、例えば、ＡＴＣＣ番号４４０７６またはＰＥＰ４−１のための選択マーカーを提供する［Ｊｏｎｅｓ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，８５：１２（１９７７）］。

発現およびクローニングベクターには、通常、ｍＲＮＡの合成を指示するための、ＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３−、もしくはＰＲＯ８５１６１−を
コードする核酸配列に対して動作可能であるように連結されたプロモーターが含まれる。種々の潜在的宿主細胞により認識されるプロモーターは、周知である。原核生物の宿主と共に使用するのに適したプロモーターとしては、β−ラクタマーゼおよびラクトースプロモーター系［Ｃｈａｎｇｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２７５：６１５（１９７８）；Ｇｏｅｄｄｅｌｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２８１：５４４（１９７９）］、アルカリホスファターゼ、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーター系［Ｇｏｅｄｄｅｌ，ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓ．，８：４０５７（１９８０）；ＥＰ３６，７７６］およびハイブリッドプロモーター（例えば、ｔａｃプロモーター［ｄｅＢｏｅｒｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８０：２１−２５（１９８３）］）が挙げられる。細菌システムにおいて使用されるプロモーターには、また、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするＤＮＡに対して動作可能であるように連結されたシャインダルガノ（Ｓｈｉｎｅ−Ｄａｌｇａｒｎｏ（Ｓ．Ｄ．））配列も含まれるであろう。

酵母である宿主とともに使用される適切なプロモーター配列の例としては、３−ホスホグリセレートキナーゼ［Ｈｉｔｚｅｍａｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５５：２０７３（１９８０）］または他のタンパク質分解酵素［Ｈｅｓｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｄｖ．ＥｎｚｙｍｅＲｅｇ．，７：１４９（１９６８）；Ｈｏｌｌａｎｄ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１７：４９００（１９７８）］、例えば、エノラーゼ、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、グルコース−６−リン酸イソメラーゼ、３−ホスホグリセレートムターゼ、ピルビン酸キナーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ、ホスホグルコースイソメラーゼ、およびグルコキナーゼのプロモーターが挙げられる。

生育条件により制御される転写のさらなる利点を有する誘導プロモーターである他の酵母プロモーターは、アルコールデヒドロゲナーゼ２、イソチトクロームＣ、酸ホスファターゼ、窒素代謝に関連する分解性酵素、メタロチオネイン、グリセルアルデヒド３リン酸脱水素酵素およびマルトースおよびガラクトースの利用を担う酵素のためのプロモーター領域である。酵母発現において使用するために適したベクターおよびプロモーターは、ＥＰ７３，６５７においてさらに記載されている。

哺乳動物宿主細胞の中のベクターからのＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９
８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１の転写は、例えば、ウイルス（例えば、ポリオーマウイルス、鶏痘ウイルス（１９８９年７月５日に公開されたＵＫ２，２１１，５０４）、アデノウイルス（例えば、アデノウイルス（例えば、アデノウイルス２）、ウシパピローマウイルス、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、およびシミアンウイルス４０（ＳＶ４０））のゲノムから得られたプロモーターによって、異種哺乳動物のプロモーター（例えば、アクチンプロモーター、または免疫グロブリンプロモーター）から得られたプロモーターによって、あるいは、熱ショックプロモーターから得られたプロモーターによって、そのようなプロモーターが宿主細胞システムと適合性であるとの条件で制御される。

高等真核生物によるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするＤＮＡの転写は、ベクターの中にエンハンサー配列を挿入することによって増大させることができる。エンハンサーは、通常、転写を増大させるプロモーターに対して作用する約１０〜３００ｂｐのＤＮＡのシス作用性エレメントである。哺乳動物遺伝子由来の多くのエンハンサー配列が現在知られている（グロビン、エラスターゼ、アルブミン、α−フェトプロテインおよびインスリン）。しかしながら代表的には、真核生物細胞ウイルス由来のエンハンサーを使用する。例としては、複製起点の後側上のＳＶ４０エンハンサー（ｂｐ１００−２７０）、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製起点の後側上のポリオーマエンハンサーおよびアデノウイルスエンハンサーが挙げられる。エンハンサーは、ベクターの中では、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１をコードする配列に対して５’位置または３’位置でスプライシングされ得るが、プロモーターの５’位置にあることが好ましい。

真核生物宿主細胞（酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒトまたは他の多細胞生物体由来の有核細胞）中で使用される発現ベクターはまた、転写の終止のため、およびｍＲＮＡの安定化のために必要な配列を含む。そのような配列は、真核生物またはウイルスのＤＮＡまたはｃＤＮＡの５’側、場合によっては３’側の非翻訳領域から一般に得られる。これらの領域には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６
００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするｍＲＮＡの非翻訳部分の中に、ポリアデニル化された断片として転写されるヌクレオチドセグメントが含まれる。

組み換え体である脊椎動物細胞培養物中でのＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの合成に適応させるために適しているさらに他の方法、ベクター、および宿主細胞は、Ｇｅｔｈｉｎｇｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２９３：６２０−６２５（１９８１）；Ｍａｎｔｅｉｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２８１：４０−４６（１９７９）；ＥＰ１１７，０６０；およびＥＰ１１７，０５８に記載されている。

４．遺伝子の増幅／発現の検出
遺伝子の増幅および／または発現は、例えば、ｍＲＮＡの転写を定量するための従来のサザンブロッティング、ノーザンブロッティング［Ｔｈｏｍａｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：５２０１−５２０５（１９８０）］、ドットブロッティング（ＤＮＡ分析）またはｉｎｓｉｔｕハイブリダイゼーションにより、適切に標識されたプローブを用い、本明細書において提供される配列に基づいて、直接試料中で測定してよい。あるいは、ＤＮＡ二重鎖、ＲＮＡ二重鎖およびＤＮＡ−ＲＮＡハイブリッド二重鎖またはＤＮＡ−タンパク質二重鎖を含む特定の二重鎖を認識できる抗体を使用してよい。そしてその抗体が標識され得、表面上の二重鎖の形成により二重鎖に結合した抗体の存在が検出できるように二重鎖が表面に結合した状態でアッセイが実施され得る。

あるいは、遺伝子発現が、細胞または組織の切片の免疫組織化学的染色などの免疫学的方法および細胞培養物または体液のアッセイにより測定されることにより、遺伝子産物の発現が直接定量され得る。免疫組織化学的染色および／またはサンプル液体のアッセイに有用な抗体は、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体のいずれかであり得、そして任意の哺乳動物において調製され得る。好都合であるには、抗体は、自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ
１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対して、あるいは、本明細書中で提供されるＤＮＡ配列に基づく合成ペプチドに対して、あるいは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ＤＮＡに対して融合させられた、特異的な抗体エピトープをコードする外来配列に対して調製され得る。

５．ポリペプチドの精製
ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの複数の形態を、培養培地から、または宿主細胞溶解物から回収することができる。膜結合の場合は、適当な界面活性溶液（例えば、Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００）を用いるか、酵素的切断により、膜から遊離させることができる。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの発現に使用される細胞は、様々な物理的手段または化学的手段（例えば、凍結解凍サイクル、超音波処理、機械的な破壊、または細胞溶解剤）によって破壊することができる。

組み換え体細胞タンパク質またはポリペプチドからＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを精製することが所望される場合がある。以下の手順、すなわち、イオン交換カラムによる分画；エタノール沈降；逆相ＨＰＬＣ；シリカまたは陽イオン交換樹脂（例えば、ＤＥＡＥ）によるクロマトグラフィー；クロマトフォーカシング；ＳＤＳ−ＰＡＧＥ；硫酸アンモニウム沈降法；例えば、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ−７５を用いたゲル濾過；ＩｇＧなどの夾雑物を除去するためのプロテインＡセファロースカラム；およびＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのエピトープタグ化型を結合させるための金属キレートカラムが適当な精製の手順の例である。タンパク質精製の様々な方法を使用してよく、そのような方法は、当該分野で公知であり、例えば、Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒ，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１８２（１９９０）；Ｓｃｏｐｅｓ，ＰｒｏｔｅｉｎＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，ＮｅｗＹｏｒｋ（１９８２）に記載されている。選択される精製抗体（単数または複数）は、例えば、使用される生産プロセスと、生産される特定のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの性質に応じて様々であろう。

Ｅ．ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３
４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの使用
ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列（あるいはそれらの相補鎖）は、分子生物学の分野において様々な用途を有している。これには、染色体および遺伝子のマッピングにおけるハイブリダイゼーションプローブとしての使用、ならびにアンチセンスＲＮＡおよびＤＮＡの作成における使用が含まれる。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１核酸はまた、本明細書中に記載される組み換え技術による、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの調製にも有用であろう。

全長の自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７
、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子、あるいはそれらの一部は、全長のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ｃＤＮＡを単離するため、あるいは、さらに他のｃＤＮＡ（例えば、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの自然界に存在している変異体、または他の種に由来するＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするｃＤＮＡ）を単離するためのハイブリダイゼーションプローブとして使用される場合がある。これらは、本明細書中に開示される自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ
４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１配列に対して、所望される配列同一性を有している。必要に応じて、プローブの長さは、約２０〜約５０塩基であろう。ハイブリダイゼーションプローブは、全長の自然界に存在しているヌクレオチド配列の少なくとも部分的に新規である領域に由来し得る。この場合、これらの領域は、過度の実験を行うことなく、そして自然界に存在している配列のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１のプロモーター、エンハンサーエレメント、およびイントロンが含まれているゲノム配列から、決定され得る。例として、スクリーニング方法には、約４０塩基の選択されたプローブを合成するために、公知のＤＮＡ配列を使用して、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子のコード領域を単離する工程が含まれるであろう。ハイブリダイゼーションプローブは、^３２Ｐもしくは^３５Ｓなどの放射性核種を含む種々の標識、またはアビジン／ビオチンカップリング系を介してプローブに結合されたアルカリホスファターゼなどの酵素標識により標識され得る。本発明のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子の配列に対して相補的である配列を有している標識されたプローブは、そのようなライブラリーのどのメンバーに対してプローブがハイブリダイズするかを決定するために、ヒトｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、またはｍＲＮＡのライブラリーをスクリーニングするために使用することができる。ハイブリダイゼーションの手法は、後述する実施例にお
いてさらに詳細に説明する。

本出願に開示する任意のＥＳＴ配列を、本明細書中で開示する方法を用いてプローブとして同様に使用してよい。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１核酸の他の有用な断片には、アンチセンスまたはセンスのオリゴヌクレオチドが含まれ、これらには、標的であるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ｍＲＮＡ（センス）、あるいは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ＤＮＡ（アンチセンス）配列に結合することができる一本鎖の核酸配列（ＲＮＡまたはＤＮＡのいずれか）が含まれる。本発明のアンチセンスまたはセンスオリゴヌクレオチドには、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ
３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ＤＮＡのコード領域の断片が含まれる。そのようなフラグメントは、一般に、少なくとも約１４ヌクレオチド、好ましくは、約１４〜３０ヌクレオチドを含む。所与のタンパク質をコードするｃＤＮＡ配列に基づいてアンチセンスまたはセンスのオリゴヌクレオチドを誘導する能力は、例えば、ＳｔｅｉｎａｎｄＣｏｈｅｎ（ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．４８：２６５９，１９８８）およびｖａｎｄｅｒＫｒｏｌｅｔａｌ．（ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ６：９５８，１９８８）に記載されている。

標的核酸配列へのアンチセンスオリゴヌクレオチドまたはセンスオリゴヌクレオチドの結合により、増強された二重鎖分解、転写または翻訳の早期の終了を含むいくつかの手段の１つによるか、または他の手段による、標的配列の転写または翻訳を阻止する二重鎖の形成がもたらされる。したがって、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１の発現をブロックするために使用することができる。アンチセンスオリゴヌクレオチドまたはセンスオリゴヌクレオチドはさらに、改変された糖ホスホジエステル骨格（または他の糖連結部、例えば、ＷＯ９１／０６６２９に記載のもの）を有するオリゴヌクレオチドを含み、ここで、そのような糖連結部は、内因性ヌクレアーゼに対して抵抗性である。抵抗性の糖連結部を有するそのようなオリゴヌクレオチドは、インビボで安定である（すなわち酵素による分解に抵抗することができる）が、標的ヌクレオチド配列に結合することができる配列特異性は、保持している。

センスオリゴヌクレオチドまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドの他の例としては、ＷＯ９０／１００４８に記載されているような有機部分、およびポリ−（Ｌ−リシン）などの標的核酸配列に対するオリゴヌクレオチドの親和性を増大させる他の部分に共有結合したオリゴヌクレオチドが挙げられる。エリプチシンなどのさらに別のインターカレート剤およびアルキル化剤または金属錯体をセンスオリゴヌクレオチドまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドに結合させることにより標的核酸配列に対するアンチセンスオリゴヌクレオチドまたはセンスオリゴヌクレオチドの結合特異性を改変し得る。

アンチセンスオリゴヌクレオチドまたはセンスオリゴヌクレオチドは、任意の遺伝子導入法（例えば、ＣａＰＯ_４媒介ＤＮＡトランスフェクション、エレクトロポレーションを含む）によってか、またはエプスタイン・バーウイルスなどの遺伝子導入ベクターを使用することにより、標的核酸配列を含む細胞内に導入され得る。好ましい操作法においては、アンチセンスオリゴヌクレオチドまたはセンスオリゴヌクレオチドは、適当なレトロウイルスベクターに挿入される。標的核酸配列を含む細胞を組換えレトロウイルスベクターにインビボまたはｅｘｖｉｖｏのいずれかで接触させる。適当なレトロウイルスベクターとしては、マウスレトロウイルスＭ−ＭｕＬＶ、Ｎ２（Ｍ−ＭｕＬＶ由来のレトロウイルス）から得られたもの、またはＤＣＴ５Ａ、ＤＣＴ５ＢおよびＤＣＴ５Ｃと表記されるダブルコピーベクター（ＷＯ９０／１３６４１を参照のこと）が挙げられるがこれらに限定されない。

センスオリゴヌクレオチドまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドはまた、ＷＯ９１／０４７５３に記載されるようにリガンド結合分子との結合体の形成により標的ヌクレオチド配列を含む細胞内に導入され得る。適当なリガンド結合分子としては、細胞表面レセプター、成長因子、他のサイトカインまたは細胞表面レセプターに結合する他のリガンドが挙げられるがこれらに限定されない。好ましくは、リガンド結合分子の結合体化は、リガンド結合分子がその対応する分子またはレセプターに結合する能力を実質的に妨害したり、センスオリゴヌクレオチドもしくはアンチセンスオリゴヌクレオチドまたはそのコンジュゲート型の細胞内への進入を阻止したりすることはない。

あるいは、センスオリゴヌクレオチドまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＷＯ９０／１０４４８に記載されるようにオリゴヌクレオチド−脂質複合体の形成により標的核酸配列を含む細胞内に導入され得る。センスオリゴヌクレオチドまたはアンチセンスオリゴヌクレオチド−脂質複合体は、好ましくは、内在性リパーゼにより細胞内で解離される。

アンチセンスまたはセンスのＲＮＡまたはＤＮＡ分子は、一般に、少なくとも約５塩基長、約１０塩基長、約１５塩基長、約２０塩基長、約２５塩基長、約３０塩基長、約３５塩基長、約４０塩基長、約４５塩基長、約５０塩基長、約５５塩基長、約６０塩基長、約６５塩基長、約７０塩基長、約７５塩基長、約８０塩基長、約８５塩基長、約９０塩基長、約９５塩基長、約１００塩基長またはそれより長い。

プローブはまた、密接に関係しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１をコをードする配列の同定のための配列のプールを作成するためのＰＣＲ技術において使用される場合もある。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列はまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子のマッピングのため、あるいは、遺伝的障害を有している個体の遺伝子分析のためのハイブリダイゼーションプローブを構築するためにも、使用することができる。本明細書において提供されるヌクレオチド配列は、既知の手法（例えば、ｉｎｓｉｔｕハイブリダイゼーション、既知染色体マーカーに対する連鎖分析およびライブラリーを用いたハイブリダイゼーションスクリーニング）を用いて染色体および染色体の特定の領域にマッピングされ得る。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１をコードする配列が別のタンパク質に結合するタンパク質をコードする場合（例えば、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１が受容体である場合）には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、結合相互作用に関係している他のタンパク質あるいは分子を同定するためのアッセイにおいて使用することができる。そのような方法により、レセプター／リガンド結合相互作用のインヒビターを同定できる。そのような結合相互作用に関与するタンパク質はまた、結合相互作用のペプチドまたは低分子のインヒビターまたはアゴニストについてのスクリーニングにおいて使用できる。また、受容体ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１は、相関するリガンド（単数または複数）を単離するために使用することもできる。スクリーニングアッセイは、自然界に存在しているＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、あるいは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの受容体の生物学的活性を模倣するリード化合物を見つけるために設計することができる。そのようなスクリーニングアッセイは、化学物質ライブラリーのハイスループットスクリーニングに適したアッセイを含み、低分子薬剤候補の同定に特に適するものとなっている。企図される低分子は、合成の有機または無機の化合物を含む。アッセイは、タンパク質−タンパク質結合アッセイ、生化学的スクリーニングアッセイ、イムノアッセイおよび細胞ベースアッセイを含む種々の形式で実施でき、これらは、当該分野で十分に特徴付けられている。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする核酸、あるいはその修飾された形態はまた、トランスジェニック動物または「ノックアウト」動物のいずれかを作成するためにも使用することができる。これはその後、治療上有用である試薬の開発およびスクリーニングに有用である。トランスジェニック動物（例えば、マウスまたはラット）は、トランスジーンを含む細胞を有する動物であり、そのトランスジーンは、出生前、例えば、胚の段階において動物または動物の先祖に導入されている。トランスジーンは、トランスジェニック動物を発生する細胞のゲノム内に組み込まれるＤＮＡである。本発明により、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするｃＤＮＡが提供され、これは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするＤＮＡを発現する細胞を含むトランスジェニック動物を作成するために使用される確立されている技術およびゲノム配列にしたがって、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするゲノムＤＮＡをクローニングするために使用することができる。当該分野で公知の任意の手法を用いて、標的遺伝子トランスジーンを動物に導入することにより、トランスジェニック動物の創始者が作製され得る。そのような技術としては、前
核マイクロインジェクション（ｐｒｏｎｕｃｌｅａｒｍｉｃｒｏｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）（米国仮特許出願番号４，８７３，１９１号、同第４，７３６，８６６号、および同第４，８７０，００９号）；生殖系へのレトロウイルス媒介性遺伝子導入（ＶａｎｄｅｒＰｕｔｔｅｎ，ｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，８２：６１４８−６１５２（１９８５））；胚性幹細胞の中での遺伝子標的化（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，ｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ，５６：３１３−３２１（１９８９））；遺伝子トラップベクターを使用する非特異的な挿入による不活化（ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃｉｎｓｅｒｔｉｏｎａｌｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎｕｓｉｎｇａｇｅｎｅｔｒａｐｖｅｃｔｏｒ）（米国特許第６，４３６，７０７号）；胚のエレクトロポレーション（Ｌｏ，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，３：１８０３−１８１４（１９８３））；および精子媒介性遺伝子導入（Ｌａｖｉｔｒａｎｏ，ｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ，５７：７１７−７２３（１９８９））；などが挙げられるが、これらに限定はされない。通常、特定の細胞は、組織特異的エンハンサーを用いたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１トランスジーンの取り込みについて標的化される。胚段階で動物の生殖系に導入されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするトランスジーンのコピーが含まれているトランスジェニック動物は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするＤＮＡの発現の増大の効果を試験するために使用することができる。そのような動物は、例えば、過剰発現に関連する病的状態からの保護を付与すると考えられる試薬に対する供試動物として使用できる。本発明のこの側面によれば、その試薬で動物を処置し、そして病的状態の発生率がトランスジーンを有する非処置の動物と比較して低減していれば、病的状態に対する潜在的治療的介入があったことを示す。あるいは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのヒト以外のホモログを使用して、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１「ノックアウト」動物を構築することができる。これは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする内因性の遺伝子と、動物の胚性幹細胞の中に導入されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする変更されたゲノムＤＮＡの間での相同組み換えの結果としての、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１タンパク質をコードする欠損遺伝子または変化した遺伝子を有している。好ましくは、前記ノックアウト動物は、哺乳動物である。より好ましくは、前記哺乳動物は、げっ歯類（例えば、ラットまたはマウス）である。例えば、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするｃＤＮＡを、確立されている技術にしたがってＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４

３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするゲノムＤＮＡをクローン化するために使用することができる。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ
３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするゲノムＤＮＡの一部は、欠失させることができ、また、別の遺伝子（例えば、組み込みをモニターするために使用することができる選択マーカーをコードする遺伝子）で置き換えることもできる。代表的には、非改変フランキングＤＮＡ（５’および３’末端の両方）の数キロ塩基をベクター内に含める［相同組換えベクターの説明については、例えば、ＴｈｏｍａｓａｎｄＣａｐｅｃｃｈｉ，Ｃｅｌｌ，５１：５０３（１９８７）を参照のこと］。そのベクターは、胚性幹細胞系統内に導入し（例えば、エレクトロポレーションによって）、そして導入されたＤＮＡが内在性ＤＮＡと相同組換えを起こしている細胞を選択する［例えば、Ｌｉｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ，６９：９１５（１９９２）を参照のこと］。次に選択された細胞を動物（例えば、マウスまたはラット）の胚盤胞内に注入し、凝集キメラを形成する［例えば、Ｂｒａｄｌｅｙ，ＴｅｒａｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａｓａｎｄＥｍｂｒｙｏｎｉｃＳｔｅｍＣｅｌｌｓ：ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ，Ｅ．Ｊ．Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ，ｅｄ．（ＩＲＬ，Ｏｘｆｏｒｄ，１９８７）ｐｐ．１１３−１５２参照］。次にキメラ胚を適当な擬似妊娠の雌里親動物内に移植し、胚を妊娠期間満了させることにより、「ノックアウト」動物を作製することができる。相同組換えされたＤＮＡをその生殖細胞に保有する子孫を標準的な手法で同定し、その動物の全細胞が相同組換えＤＮＡを含む動物を育てるために使用することができる。ノックアウト動物は、例えば、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子が存在しないことが原因である、特定の病状に対して、あるいはそのような病状をそれらが発症することに対して防御するそれらの能力について、特性決定することができる。

さらに、ノックアウトマウスは、遺伝子の機能および薬剤標的に関する薬学的有用性の発見において、ならびに所与の標的に関連する潜在的な標的上の副作用の測定において、高度な情報源であり得る。遺伝子の機能および生理学的特徴は、マウスとヒトとの間で十分保存されているが、その理由は、それらが共に哺乳動物であり、同様の数の遺伝子を含んでおり、それらの遺伝子が種間で高度に保存されているためである。例えば、マウス１６番染色体上の遺伝子の９８％がヒトオルソログを有することが最近十分に裏付けられた（Ｍｕｒａｌｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２９６：１６６１−７１（２００２））。

胚性幹（ＥＳ）細胞における遺伝子ターゲティングは、ヒト疾患に関連する多くの遺伝子における無発現変異を有するマウスの構築を可能にしているが、必ずしも遺伝子疾患のすべてが無発現変異に起因するわけではない。マウスの遺伝子座を破壊し、変異を有するヒト対応物を導入する遺伝子の置き換え（ノックイン）のための方法を確立することによってヒト疾患の価値あるマウスモデルを設計できる。その後、ヒトタンパク質をターゲティングするインビボの薬剤アッセイを実施できる（Ｋｉｔａｍｏｔｏｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃａｌＲｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２２２：７４２−４７（１９９６））。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする核酸もまた、遺伝子治療において使用することができる。遺伝子療法の用途においては、例えば、欠損遺伝子の置き換えのための治療上有効な遺伝子産物のインビボ合成を達成するために細胞内に遺伝子を導入する。「遺伝子療法」とは、単回処置により持続した作用が達成される従来の遺伝子療法および治療上有効なＤＮＡまたはｍＲＮＡの単回投与または反復投与を行う遺伝子治療薬の投与の両方を含む。アンチセンスのＲＮＡおよびＤＮＡは、インビボで特定の遺伝子の発現を阻止するための治療薬として使用され得る。短いアンチセンスオリゴヌクレオチドは、細胞内に移入され、そこで細胞膜による限定された取り込みにより生じるその低い細胞内濃度にも関わらずインヒビターとして作用することができることが既に明らかになっている（Ｚａｍｅｃｎｉｋｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８３：４１４３−４１４６［１９８６］）。そのオリゴヌクレオチドは、例えば、その負に帯電したホスホジエステル基を非電荷の基で置換することにより、その取り込みが増強されるように改変できる。

生存細胞に核酸を導入するために使用できる種々の手法が存在する。その手法は、インビトロで核酸を培養細胞中に、または意図する宿主の細胞内にインビボで移入させるか応じて変動する。インビトロの哺乳動物細胞への核酸の移入に適する手法としては、リポソームの使用、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション、細胞融合、ＤＥＡＥデキストラン、リン酸カルシウム沈降法などが挙げられる。現時点で好ましいインビボの遺伝子導入の手法としては、ウイルス（代表的には、レトロウイルス）ベクターによるトランスフェクションおよびウイルスコートタンパク質−リポソーム媒介トランスフェクションが挙げられる（Ｄｚａｕｅｔａｌ．，ＴｒｅｎｄｓｉｎＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１１，２０５−２１０［１９９３］）。一部の状況においては、核酸起源に対し、標的細胞をターゲティングする薬剤（例えば、細胞表面膜タンパク質または標的細胞に対して特異的な抗体、標的細胞上のレセプターに対するリガンドなど）を提供することが望ましい。リポソームを使用する場合は、エンドサイトーシスに関連する細胞表面膜タンパク質に結合するタンパク質をターゲティングのためおよび／または取り込みを促進するために使用され得、そのようなものとしては、例えば、特定の細胞型に対して向性のキャプシドタンパク質またはそのフラグメント、サイクリングにおいて内在化を起こすタンパク質に対する抗体、細胞内局在化をターゲティングして細胞内半減期を増大させるタンパク質が挙げられる。レセプター媒介エンドサイトーシスの手法は、例えば、Ｗｕｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２，４４２９−４４３２（１９８７）；およびＷａｇｎｅｒｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８７，３４１０−３４１４（１９９０）に記載されている。遺伝子の作製および遺伝子療法のプロトコルについての概説は、Ａｎｄｅｒｓｏｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２５６，８０８−８１３（１９９２）を参照のこと。

本明細書中に記載されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１
２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドはまた、タンパク質の電気泳動の目的のための分子量マーカーとして使用することもでき、そして単離された核酸配列は、そのようなマーカーを組み換えによって発現させるために使用することができる
本明細書中に記載されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする核酸分子、またはそれらの断片は、染色体の同定に有用である。この点に関し、実際の配列データに基づいた染色体マーカー試薬で現在使用できるものは、比較的少ないため、新しい染色体マーカーを同定する必要性がなお存在している。本発明のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１核酸分子のそれぞれは、染色体マーカーとして使用することができる。

本発明のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、および核酸分子はまた、組織型分類のために診断的に使用することもできる。この場合、
本発明のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、別のものと比較して場合に１つの組織において（好ましくは、同じ組織型の正常な組織と比較した罹患している組織において）異なって発現され得る。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１核酸分子については、ＰＣＲ、ノーザンブロット分析、サザンブロット分析、およびウェスタンブロット分析のためのプローブを作成するための用途が見出されるであろう。

本明細書中に記載されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、治療薬としても使用することができる。本発明のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、薬学的に有用な組成物を調製す
るための公知の方法にしたがって処方することができる。これによっては、そのＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１産物が、薬学的に許容される担体である媒体と共に混合される。治療用処方物は、凍結乾燥処方物または水溶液の形態で、任意の生理学的に許容可能な担体、賦形剤または安定化剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ１６ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０））と、所望の純度を有する活性成分とを混合することにより保存用に調製される。許容可能な担体、賦形剤または安定化剤は、使用される用量および濃度においてレシピエントにとって非毒性であり、そしてそれらとしては、緩衝物質（例えば、リン酸塩、クエン酸塩および他の有機酸）；抗酸化剤（アスコルビン酸を含む）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；タンパク質（例えば、血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリン）；親水性ポリマー（例えば、ポリビニルピロリドン、アミノ酸（例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンまたはリシン））；単糖類、二糖類および他の炭水化物（グルコース、マンノースまたはデキストロースを含む）；キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）；糖アルコール（例えば、マンニトールまたはソルビトール）；塩形成対イオン（例えば、ナトリウム）；および／または非イオン性界面活性剤（例えば、ＴＷＥＥＮ^ＴＭ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ^ＴＭまたはＰＥＧ）が挙げられる。

インビボ投与のために使用される処方物は、滅菌されていなければならない。これは、凍結乾燥および再構成の前後に滅菌濾過膜に通して濾過することにより容易に達成される。

本明細書中の治療用組成物は、一般に、滅菌された取出し口を有する容器、例えば、皮下注射用の針で穿刺可能である蓋を有する静脈用溶液バッグまたはバイアル内に入っている。

投与経路は、公知の方法によるものであり、例えば、静脈内、腹腔内、脳内、筋肉内、眼内、動脈内または病巣内の経路により注射または注入を行うか、局所投与を行うか、または徐放系による。

本発明の薬学的組成物の用量および所望の薬剤濃度は、意図される特定の用途に応じて変動し得る。適切な用量または投与経路の決定は、十分に当業者の範囲内である。動物実験は、ヒトの治療有効量の決定のための信頼できる指針を与える。有効用量の種間のスケーリングは、Ｍｏｒｄｅｎｔｉ，Ｊ．ａｎｄＣｈａｐｐｅｌｌ，Ｗ．“Ｔｈｅｕｓｅ
ｏｆｉｎｔｅｒｓｐｅｃｉｅｓｓｃａｌｉｎｇｉｎｔｏｘｉｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ”，ＴｏｘｉｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓａｎｄＮｅｗＤｒｕｇＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｙａｃｏｂｉｅｔａｌ．，Ｅｄｓ．，ＰｅｒｇａｍｏｎＰｒｅｓｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ１９８９，ｐｐ．４２−９６に記載されている原則に従って実施できる。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１
、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、あるいは、それらに対するアゴニストまたはアンタゴニストのインビボでの投与が使用される場合には、通常の投与量は、投与経路に応じて、１日あたり約１０ｎｇ／哺乳動物のｋｇ体重から１００ｍｇ／哺乳動物のｋｇ体重、またはそれ以上、好ましくは、約１μｇ／ｋｇ／日から１０ｍｇ／ｋｇ／日である。特定の用量および送達方法に関する指針は、文献に記載されており；例えば、米国特許第４，６５７，７６０号；同第５，２０６，３４４号；または同第５，２２５，２１２号を参照のこと。異なる処置用化合物および異なる障害に対しては、異なる製剤が有効であることが予想され、ある器官または組織をターゲティングする投与は、例えば、別の器官または組織の場合とは異なる様式の送達を必要とする場合がある。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの徐放投与が、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド投与が必要な任意の疾患あるいは障害の処置に適している放出特性を有している処方物において所望される場合には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１
７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのマイクロカプセル化が想定される。徐放性放出のための組換えタンパク質のマイクロカプセル化は、ヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）、インターフェロン（ｒｈＩＦＮ）、インターロイキン−２およびＭＮｒｇｐ１２０を用いて良好に行われている。Ｊｏｈｎｓｏｎｅｔａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，２：７９５−７９９（１９９６）；Ｙａｓｕｄａ，Ｂｉｏｍｅｄ．Ｔｈｅｒ．，２７：１２２１−１２２３（１９９３）；Ｈｏｒａｅｔａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，８：７５５−７５８（１９９０）；Ｃｌｅｌａｎｄ，“ＤｅｓｉｇｎａｎｄＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＳｉｎｇｌｅＩｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎＶａｃｃｉｎｅｓＵｓｉｎｇＰｏｌｙｌａｃｔｉｄｅＰｏｌｙｇｌｙｃｏｌｉｄｅＭｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅＳｙｓｔｅｍｓ”，ＶａｃｃｉｎｅＤｅｓｉｇｎ：ＴｈｅＳｕｂｕｎｉｔａｎｄＡｄｊｕｖａｎｔＡｐｐｒｏａｃｈ，ＰｏｗｅｌｌａｎｄＮｅｗｍａｎ，ｅｄｓ，（ＰｌｅｎｕｍＰｒｅｓｓ：ＮｅｗＹｏｒｋ，１９９５），ｐｐ．４３９−４６２；ＷＯ９７／０３６９２，ＷＯ９６／４００７２，ＷＯ９６／０７３９９；および米国特許第５，６５４，０１０号。

これらのタンパク質の徐放性処方物は、生体適合性および広範な生体分解性を有することからポリ乳酸グリコール酸（ＰＬＧＡ）共重合体を用いて開発された。ＰＬＧＡの分解生成物である乳酸およびグリコール酸は、ヒト身体内で迅速に除去される。さらに、このポリマーの分解性は、その分子量および組成に応じて数ヶ月〜数年に調節できる。Ｌｅｗｉｓ，“Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｒｅｌｅａｓｅｏｆｂｉｏａｃｔｉｖｅａｇｅｎｔｓｆｒｏｍｌａｃｔｉｄｅ／ｇｌｙｃｏｌｉｄｅｐｏｌｙｍｅｒ”，Ｍ．ＣｈａｓｉｎａｎｄＲ．Ｌａｎｇｅｒ（Ｅｄｓ．），ＢｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅＰｏｌｙｍｅｒｓａｓＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙＳｙｓｔｅｍｓ（ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ：ＮｅｗＹｏｒｋ，１９９０），ｐｐ．１−４１。

本発明には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを模倣する化合物（アゴニスト）、あるいは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの作用を妨げる化合物（アンタゴニスト）を同定する
ための化合物のスクリーニング方法が含まれる。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを模倣するアゴニストは、ネガティブな表現形が、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊がそのゲノムに含まれている非ヒトトランスジェニック動物を用いた知見に基づいて観察される場合に、特に治療的に有用である。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの作用を妨げるアンタゴニストは、ポジティブな表現形が非ヒトトランスジェニックノックアウト動物を用いた観察に基づいて観察される場合に、特に治療的に有用である。アンタゴニスト薬物の候補についてのスクリーニングアッセイは、本明細書中で同定された遺伝子によってコードされるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに結合するかまたはそれらと複合体
を形成するか、あるいは、別の方法で他の細胞性タンパク質とのコードポリペプチドの相互作用を妨害する化合物を同定するように設計される。そのようなスクリーニングアッセイは、化学物質ライブラリーのハイスループットスクリーニングに適したアッセイを含み、それは、低分子薬剤候補の同定に特に適したものとなっている。

そのアッセイは、例えば、タンパク質−タンパク質結合アッセイ、生化学的スクリーニングアッセイ、イムノアッセイおよび細胞ベースのアッセイを含む種々の形式において実施でき、これらは、当該分野で十分に特徴付けられている。

アンタゴニストについての全てのアッセイは、これらには、薬物の候補を、本明細書中で同定された核酸によってコードされるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドと、これらの２つの成分が相互作用できるために十分な条件下で、十分な時間の間、接触させることが必要である点で共通している。

結合アッセイにおいては、相互作用は、結合であり、そして形成される複合体は、単離され得るか、または反応混合物中で検出され得る。本明細書中で同定された遺伝子によってコードされるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、あるいは、薬物の候補は、固相（例えば、マイクロタイタープレート）上に、共有結合または非共有結合によって固定される。非共有結合は、一般的には、固体表面を、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの溶液でコーティ
ングし、そして乾燥させることによって行われる。あるいは、固定されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに特異的な固定された抗体（例えば、モノクローナル抗体）を、固体表面にそれを結合させるために使用することができる。このアッセイは、検出可能な標識で標識されていてよい固定化されていない成分を固定化された成分、例えば、固定された成分を有するコーティングされた表面に添加することにより行う。反応終了後、非反応成分を、例えば洗浄により除去し、そして固体表面に固定された複合体を検出する。元々、固定されていない成分が検出可能な標識を有する場合は、表面に固定化された標識の検出は、複合体形成が起こったことを示す。元々、固定されていない成分が標識を有していない場合は、複合体形成は、例えば、固定化された複合体に特異的に結合する標識された抗体を使用することにより検出できる。

候補の化合物が、本明細書中で同定された遺伝子によってコードされる特定のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドと相互作用するが、それらに結合はしない場合には、そのポリペプチドとのその相互作用は、タンパク質−タンパク質相互作用を検出するための周知の方法によってアッセイすることができる。そのようなアッセイとしては、従来の方法（例えば、架橋結合、同時免疫沈降および勾配またはクロマトグラフィーカラムを介した同時精製）が挙げられる。さらに、タンパク質−タンパク質相互作用は、ＣｈｅｖｒａｙａｎｄＮａｔｈａｎｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：５７８９−５７９３（１９９１）により開示されているように、Ｆｉｅｌｄｓおよび共同研究者らにより報告された酵母ベースの遺伝子系（ＦｉｅｌｄｓａｎｄＳｏｎｇ，Ｎａｔｕｒｅ（Ｌｏｎｄｏｎ），３４０：２４５−２４６（１９８９）；Ｃｈｉｅｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８８：９５７８−９５８２（１９９１））を用いてモニタリングできる。多くの転写活性化物質（例えば、酵母ＧＡＬ４）は、２つの物理的に個別のモジュラードメイン、一方は、ＤＮＡ結合ドメインとして作用するもの、他方は、転写活性化ドメインとして機能するものからなる。上記文献に記載された酵母発現系（一般に「ツーハイブリッド系」と呼ばれる）は、この性質を利用しており、そして、２つのハイブリッドタンパク質を使用し、一方においては、標的タンパク質がＧＡＬ４のＤＮＡ結合ドメインに融合しており、他方においては、候補の活性化タンパク質が活性化ドメインに融合している。ＧＡＬ４活性化プロモーターの制御下のＧＡＬ１−ｌａｃＺレポーター遺伝子の発現は、タンパク
質−タンパク質相互作用を介したＧＡＬ４活性の再構成に依存している。相互作用ポリペプチドを含むコロニーは、β−ガラクトシダーゼに対する発色基質を用いて検出される。ツーハイブリッド手法を用いて２つの特定のタンパク質の間のタンパク質−タンパク質相互作用を同定するための完全なキット（ＭＡＴＣＨＭＡＫＥＲ^ＴＭ）は、Ｃｌｏｎｔｅｃｈから市販されている。この系はまた、特定のタンパク質相互作用に関与するタンパク質ドメインをマッピングするため、ならびにこれらの相互作用に必須であるアミノ酸残基を限定するためにも応用できる。

本明細書中で同定されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子と、他の細胞内成分または細胞外成分との相互作用を妨害する化合物は、以下のように試験することができる：通常、遺伝子産物および細胞内または細胞部外の成分を含む反応混合物を、２つの生成物の相互作用および結合を可能にする条件下および時間に渡り調製する。候補化合物が結合を抑制する能力を試験するために、反応を試験化合物の非存在下および存在下において実施する。さらに、プラセボを第３の反応混合物に添加し、ポジティブコントロールとして使用し得る。試験化合物と混合物中に存在する細胞内または細胞外の成分との間の結合（複合体形成）は、上記した通りモニタリングされる。コントロール反応においては、複合体が形成されるが試験化合物を含む反応混合物では、形成しないことは、被験化合物が被験化合物とその反応相手との相互作用を妨害することを示す。

アンタゴニストについてアッセイするためには、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが、特定の活性についてスクリーニングされる化合物と共に細胞に添加され得、そして、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの存在下で目的の活性を阻害する化合物の能力が、その化合物がＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対するアンタゴニストであることを示す。あるいは、アンタゴニストは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドと、膜結合型のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド受容体あるいは組み換え体受容体を有している可能性のあるアンタゴニストを、競合阻害アッセイに適している条件下で混合することによって検出することができる。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、例えば、放射性によって標識することができ、その結果、受容体に結合させられたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド分子の数を、可能性のあるアンタゴニストの有効性を決定するために使用することができる。そのレセプターをコードする遺伝子は、当業者に公知の多くの方法、例えば、リガンドパニングおよびＦＡＣＳソーティングにより同定できる。Ｃｏｌｉｇａｎｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎ．，１（２）：Ｃｈａｐｔｅｒ５（１９９１）。好ましくは、発現クローニングが使用される。この場合、ポリアデニル化ＲＮＡは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに反応する細胞から調製され、そして、このＲＮＡから作成されたｃＤＮＡライブラリーはプールに分けられて、ＣＯＳ細胞、あるいは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドには反応しない他の細胞をトランスフェクトするために使用される。ガラススライド上で増殖させられたトランスフェクトされた細胞は、標識されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６
０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに曝される。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、部位特異的プロテインキナーゼについての認識部位のヨウ素化、またはそれを含めることが含まれる様々な手段によって標識することができる。固定化およびインキュベーションの後、スライドをオートラジオグラフ分析に供する。陽性のプールを同定し、サブプールを調製し、相互作用的なサブプール化および再スクリーニングの過程を用いて再トランスフェクトし、最終的に推定レセプターをコードする単一のクローンを得る。

受容体の同定のための別のアプローチとしては、標識されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが、レセプター分子を発現する細胞膜または抽出調製物と光親和性結合させられる。架橋結合された物質をＰＡＧＥで分離し、Ｘ線フィルムに曝露する。レセプターを含む標識された複合体を切り出し、ペプチドフラグメントに分離し、そしてタンパク質マイクロ配列決定に供することができる。マイクロ配列決定から得られたアミノ酸配列を用いて、ｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングするための変性オリゴヌクレオチドプローブのセットを設計することにより、推定レセプターをコードする遺伝子を同定する。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９
、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対するアンタゴニストの効果を評価する別のアプローチは、公知のノックアウト表現形を模倣するために、野生型マウスに対して、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１アンタゴニストを投与することである。したがって、当業者は、最初に、目的のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子がノックアウトし、そしてＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子のノックアウトまたは破壊の結果としての得られた表現形を観察する。続いて、当業者は次に、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ
９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対するアンタゴニストを野生型マウスに投与することにより、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対するアンタゴニストの有効性を評価することができる。有効なアンタゴニストは、ノックアウト動物において最初に観察された表現型の作用を模倣すると予測される。

同様に、当業者は、公知のネガティブなノックアウトの表現形を緩和するために、非ヒトトランスジェニックマウスに対して、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１アゴニストを投与することにより、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対するアゴニストの効果を評価することができる。したがって、当業者は、最初に、目的のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９
９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子をノックアウトし、そしてＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１遺伝子のノックアウトまたは破壊の結果としての得られる形を観察する。続いて、当業者は次に、非ヒトトランスジェニックマウスに対してＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対するアゴニストを投与することにより、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対するアゴニストの有効性を評価することができる。有効なアゴニストは、ノックアウト動物において最初に観察された負の表現型の作用を寛解すると予測される。

アンタゴニストについての別のアッセイにおいては、受容体を発現している哺乳動物細胞または膜調製物が、標識されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、
ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドとともに、候補の化合物の存在下でインキュベートされる。次に、この相互作用を増強または阻止する化合物の能力を測定することができる
可能性のあるアンタゴニストのさらに特異的な例としては、免疫グロブリンのＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドとの融合体に結合するオリゴヌクレオチド、そして具体的には、抗体（これには、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体、ならびにそれらの断片）、単鎖抗体、抗イディオタイプ抗体、ならびにそのような抗体または断片のキメラバージョンもしくはヒト化バージョン、さらには、ヒト抗体および抗体断片が含まれるが、これらに限定はされない）が挙げられる。あるいは、可能性のあるアンタゴニストは、密接に関連しているタンパク質、例えば、受容体を認識するが、影響は及ぼさず、それによってＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの作用を競合的に阻害する、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの成熟形態であり得る。

別の可能性のあるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９
、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドアンタゴニストは、アンチセンス技術を使用して調製されたアンチセンスＲＮＡまたはＤＮＡ構築物である。この場合、例えば、アンチセンスＲＮＡまたはＤＮＡ分子は、標的化されたｍＲＮＡにハイブリダイズして、タンパク質の翻訳を妨げることによって、ｍＲＮＡの翻訳を直接ブロックするように作用する。アンチセンス技術を用いて、三重らせん形成またはアンチセンスＤＮＡもしくはアンチセンスＲＮＡを介して遺伝子発現を制御することができ、これらの方法は、両方ともＤＮＡまたはＲＮＡへのポリヌクレオチドの結合に基づいている。例えば、本明細書中の成熟ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列の５’コード部分は、約１０から４０塩基対の長さのアンチセンスＲＮＡオリゴヌクレオチドを設計するために使用される。ＤＮＡオリゴヌクレオチドは、転写に関与する遺伝子の領域に相補であるように設計（三重らせん−Ｌｅｅｅｔａｌ．，Ｎｕｃｌ．ＡｃｉｄｓＲｅｓ．，６：３０７３（１９７９）；Ｃｏｏｎｅｙｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４１：４５６（１９８８）；Ｄｅｒｖａｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５１：１３６０（１９９１））することにより、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの転写および産生を妨害する。アンチセンスＲＮＡオリゴヌクレオチドは、インビボでｍＲＮＡにハイブリダイズして、ｍＲＮＡ分子のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、Ｐ
ＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドへの翻訳をブロックする（アンチセンス−Ｏｋａｎｏ，Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，５６：５６０（１９９１）；ＯｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓａｓＡｎｔｉｓｅｎｓｅＩｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎ（ＣＲＣＰｒｅｓｓ：ＢｏｃａＲａｔｏｎ，ＦＬ，１９８８））。上記に記載されるオリゴヌクレオチドはまた、アンチセンスＲＮＡまたはＤＮＡをインビボで発現させて、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの生産を阻害することができるように、細胞に送達することもできる。アンチセンスＤＮＡを使用する場合は、例えば、標的遺伝子ヌクレオチド配列の約−１０〜＋１０位の間の翻訳開始部位から得られるオリゴデオキシリボヌクレオチドが好ましい。

可能性のあるアンタゴニストとしては、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの活性部位、受容体結合部位、または成長因子、あるいは、他の関連する結合部位に結合し、それによって、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの正常な生物学的活性をブロックする低分子が挙げられる。低分子の例としては、小型のペプチドまたはペプチド様分子、好ましくは、可溶性ペプチドおよび合成の非ペプチジル有機化合物または非ペプチジル無機化合物が挙げられ
るがこれらに限定されない。

リボザイムは、ＲＮＡの特異的切断を触媒することができる酵素的ＲＮＡ分子である。リボザイムは、相補的な標的ＲＮＡへの配列特異的ハイブリダイゼーション、およびその後のエンドヌクレアーゼ的切断により作用する。潜在的ＲＮＡ標的内の特異的リボザイム切断部位は、公知の手法により同定できる。さらに詳細な説明については、例えば、Ｒｏｓｓｉ，ＣｕｒｒｅｎｔＢｉｏｌｏｇｙ，４：４６９−４７１（１９９４）およびＰＣＴ公開ＷＯ９７／３３５５１（１９９７年９月１８日公開）を参照のこと。

転写を抑制するために使用される三重らせん形成における核酸分子は、一本鎖でありデオキシヌクレオチドから構成されるものでなければならない。これらのオリゴヌクレオチドの塩基の組成は、Ｈｏｏｇｓｔｅｅｎの塩基対形成の規則によって三重らせん形成を促進するように設計され、その規則には、一般に二重鎖の一方の鎖の上にかなりの長さのプリンまたはピリミジンが必要となる。さらに詳細な説明は、前出のＰＣＴ公開ＷＯ９７／３３５５１を参照のこと。

これらの低分子は、上記したスクリーニングアッセイの任意の１つ以上により、そして／または当業者に周知の他のスクリーニング手法により、同定することができる。

本明細書に開示した分子の診断上および治療上の使用はまた、後に開示および説明する正の機能のアッセイのヒットに基づき得る。
Ｆ．抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体
本発明により、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体が提供される。これらは、治療薬および／または診断薬として、本明細書中での用途が見出され得る。例示される抗体は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、二重特異性抗体およびヘテロ結合体化抗体を含む。

１．ポリクローナル抗体
ポリクローナル抗体は、好ましくは、関連する抗原およびアジュバントの複数回の皮下（ｓｃ）注射または腹腔内（ｉｐ）注射により動物中で産生させる。その関連する抗原は、（特に合成ペプチドを使用する場合）免疫される種において免疫原となるタンパク質に結合体することが有用であり得る。例えば、抗原は、二官能性薬剤または誘導体形成性の物質、例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル（システイン残基を介した結合体化）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（リシン残基を介する）、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、ＳＯＣｌ_２またはＲ^１Ｎ＝Ｃ＝ＮＲ（式中、ＲおよびＲ^１は、異なるアルキル基である）を用いて、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、血清アルブミン、ウシチログロブリンまたはダイズトリプシンインヒビターに結合体化され得る。

例えば、１００μｇまたは５μｇのタンパク質または結合体（それぞれウサギまたはマウスの場合）を３容量のフロイント完全アジュバントと混合し、その溶液を複数部位に皮内注射することにより、抗原、免疫原性結合体または誘導体に対して動物を免疫する。１ヵ月後、複数部位への皮下注射によりフロイント完全アジュバント中のペプチドまたは結合体の元の量の１／５〜１／１０を用いて動物を追加免疫する。７〜１４日後、動物から採血し、血清の抗体力価をアッセイする。力価が平衡に達するまで動物を追加免疫する。結合体はまた、タンパク質融合物として組換え細胞培養物中において作製することもできる。また、ミョウバンなどの凝集剤を適宜使用して、免疫応答を増強する。

２．モノクローナル抗体
モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）により、初めて報告されたハイブリドーマ法を用いて作製され得るか、または組換えＤＮＡ法（米国特許第４，８１６，５６７号）によりされ得る。

ハイブリドーマ法においては、マウスまたは他の適切な宿主動物（例えば、ハムスター）を上記したように免疫することにより、免疫に使用するタンパク質に特異的に結合する抗体を産生するか、または産生可能であるリンパ球を誘発させる。あるいは、リンパ球は、インビトロで免疫され得る。免疫の後、リンパ球を単離し、次に適当な融合剤（例えば、ポリエチレングリコール）を用いてミエローマ細胞株と融合することにより、ハイブリドーマ細胞が形成される（Ｇｏｄｉｎｇ，ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９−１０３（ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，１９８６））。

このように調製されたハイブリドーマ細胞を適当な培養培地中に播種して生育させるが、その培地は、好ましくは、融合していない親ミエローマ細胞（融合相手とも呼ばれる）の生育または生存を抑制する１つ以上の物質を含むものである。例えば、親ミエローマ細胞が、酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠失している場合は、ハイブリドーマに対する選択培養培地は、代表的には、ヒポキサンチン、アミノプテリンおよびチミジンを含み（ＨＡＴ培地）、これらの物質は、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の生育を妨害する。

好ましい融合相手であるミエローマ細胞は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞による抗体の安定した高レベルの産生を支援し、そして融合していない親細胞に対して選択する選択培地に対して感受性であるものである。好ましいミエローマ細胞株は、マウスミエローマ株（例えば、ＳａｌｋＩｎｓｔｉｔｕｔｅＣｅｌｌＤｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣａｌｉｆｏｒｎｉａＵＳＡより入手可能なＭＯＰＣ−２１およびＭＰＣ−１１マウス腫瘍から得られるものおよびＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖｉｒｇ
ｉｎｉａ，ＵＳＡより入手可能なＳＰ−２および誘導体、例えば、Ｘ６３−Ａｇ８−６５３細胞）である。ヒトミエローマおよびマウス−ヒトヘテロミエローマ細胞株もまた、ヒトモノクローナル抗体の産生に関して記載されている（Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）；およびＢｒｏｄｅｕｒｅｔａｌ．，ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｙＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３（ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．ＮｅｗＹｏｒｋ，１９８７））。

ハイブリドーマ細胞を生育させる培養培地は、抗原に対して指向されたモノクローナル抗体の産生に関してアッセイされる。好ましくは、ハイブリドーマ細胞により産生されるモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降またはインビトロの結合アッセイ（例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）または酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ））により測定する。

モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Ｍｕｎｓｏｎｅｔａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０７：２２０（１９８０）に記載のスキャッチャード分析により測定できる。

所望の特異性、親和性および／または活性の抗体を産生するハイブリドーマ細胞が一旦同定されると、限界希釈法によりクローンをサブクローニングし、標準的な方法により生育させ得る（Ｇｏｄｉｎｇ，ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９−１０３（ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，１９８６））。この目的のための適当な培地としては、例えば、Ｄ−ＭＥＭまたはＲＰＭＩ−１６４０培地が挙げられる。さらに、ハイブリドーマ細胞は、例えば、マウスへの細胞のｉ．ｐ．注射により、動物における腹水腫瘍としてインビボで生育させてよい。

サブクローンにより分泌されたモノクローナル抗体は、従来の抗体精製手順（例えば、アフィニティクロマトグラフィ（例えば、プロテインＡまたはプロテインＧ−セファロースを使用）またはイオン交換クロマトグラフィー、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析など）により、培養培地、腹水または血清から適宜分離する。

モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を用いて（例えば、マウス抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを用いることにより）容易に単離および配列決定される。ハイブリドーマ細胞は、そのようなＤＮＡの好ましい起源となる。一旦、単離されると、そのＤＮＡは、発現ベクター内に入れられ、次いで宿主細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞または他の方法で抗体タンパク質を産生しないミエローマ細胞）にトランスフェクトされることにより、組換え宿主細胞内でモノクローナル抗体の合成を行う。抗体をコードするＤＮＡの細菌における組換え発現に関する概説としては、Ｓｋｅｒｒａｅｔａｌ．，Ｃｕｒｒ．ＯｐｉｎｉｏｎｉｎＩｍｍｕｎｏｌ．，５：２５６−２６２（１９９３）およびＰｌｕｅｃｋｔｈｕｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖｓ．１３０：１５１−１８８（１９９２）が挙げられる。

モノクローナル抗体または抗体フラグメントは、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３４８：５５２−５５４（１９９０）に記載の手法を用いて作製した抗体ファージライブラリーから単離できる。Ｃｌａｃｋｓｏｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８（１９９１）およびＭａｒｋｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７（１９９１）は、ファージライブラリーを用いたそれぞれマウスおよびヒトの抗体の単離を報告している。その後の出版物は、チェインシ
ャフリングによる高親和性（ｎＭ範囲）のヒト抗体の産生（Ｍａｒｋｓｅｔａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：７７９−７８３（１９９２））ならびに極めて大型のファージライブラリーを構築するためのストラテジとしてのコンビナトリアル感染およびインビボ組換え（Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅｅｔａｌ．，Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ．Ｒｅｓ．，２１：２２６５−２２６６（１９９３））を報告している。すなわち、これらの手法は、モノクローナル抗体の単離のための従来のモノクローナル抗体ハイブリドーマ手法の実行可能な代替法である。

抗体をコードするＤＮＡは、例えば、相同なマウス配列に対してヒトの重鎖および軽鎖の定常ドメイン（Ｃ_ＨおよびＣ_Ｌ）配列を置換することにより（米国特許第４，８１６，５６７号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１（１９８４））、または非免疫グロブリンポリペプチド（異種ポリペプチド）に対するコード配列の全部または一部に免疫グロブリンコード配列を融合することにより、キメラ抗体または融合抗体のポリペプチドが産生されるように改変され得る。非免疫グロブリンポリペプチド配列は、抗体の定常ドメインに対して置換することができるか、または抗体の１つの抗原複合化部位の可変ドメインに対して置換されることにより、抗原に対する特異性を有する１つの抗原複合化部位および異なる抗原に対する特異性を有する別の抗原複合化部位を含むキメラ２価抗体が生成される。

３．ヒト抗体およびヒト化抗体
本発明の抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体にはさらに、ヒト化抗体またはヒト抗体が含まれ得る。非ヒト（例えば、マウス）抗体のヒト化型は、非ヒト免疫グロブリンから得られる最小配列を含むキメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖またはそのフラグメント（例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２または抗体の他の抗原結合サブ配列）である。ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）を包含し、これにおいては、レシピエントの相補性決定領域（ＣＤＲ）に由来する残基が所望の特異性、親和性および能力を有する非ヒト種（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）（ドナー抗体）のＣＤＲに由来する残基で置き換えられている。一部の場合においては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク残基は、対応する非ヒト残基により置き換えられている。ヒト化抗体はまた、レシピエント抗体および移入されたＣＤＲ配列またはフレームワーク配列のいずれにも存在しない残基を含んでよい。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、代表的には２つの可変ドメインの実質的にすべてを含み、これにおいては、ＣＤＲ領域のすべてまたは実質的にすべてが非ヒト免疫グロブリンのそれに相当し、そしてＦＲ領域のすべてまたは実質的にすべてがヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のそれである。ヒト化抗体はまた、必要に応じてさらに免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部分、代表的には、ヒト免疫グロブリンの少なくとも一部分を含む［Ｊｏｎｅｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２−５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３−３２９（１９８８）；およびＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．
Ｂｉｏｌ．，２：５９３−５９６（１９９２）］。

非ヒト抗体をヒト化するための方法は、当該分野で周知である。一般に、ヒト化抗体は、非ヒトである起源からそれに導入された１つ以上のアミノ酸残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基は、しばしば「移入」残基と呼ばれ、これらは、代表的には、「移入」可変ドメインに由来する。ヒト化は、本質的には、げっ歯類のＣＤＲまたはＣＤＲ配列とヒト抗体の対応する配列を置換することにより、Ｗｉｎｔｅｒおよび共同研究者らの方法に従って実施することができる（Ｊｏｎｅｓｅｔａｌ．Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２−５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎｅｔａｌ．Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３−３２７（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎｅｔａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４−１５３６（１９８８））に従って実施することができる。したがって、そのような「ヒト化」抗体は、インタクトなヒト可変ドメインより実質的に少ない部分が非ヒト種由来の対応する配列により置換されているキメラ抗体（米国特許第４，８１６，５６７号）である。実際、ヒト化抗体は、代表的には、一部のＣＤＲ残基および恐らくは、一部のＦＲ残基が、げっ歯類抗体における類似の部位に由来する残基により置換されているヒト抗体である。

ヒト化抗体の作製において使用される軽鎖および重鎖の両方のヒト可変ドメインの選択は、抗体がヒトの治療上の使用を意図している場合は、抗原性およびＨＡＭＡ（ヒト抗マウス抗体）応答を低減するために極めて重要である。いわゆる「ベストフィット」法にしたがって、げっ歯類抗体の可変ドメインの配列を、既知のヒト可変ドメイン配列の全ライブラリーに対してスクリーニングする。げっ歯類のものに最も近似しているヒトＶドメイン配列を同定し、そして、その内部にあるヒトフレームワーク領域（ＦＲ）をヒト化抗体として許容する（Ｓｉｍｓｅｔａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）；Ｃｈｏｔｈｉａｅｔａｌ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１（１９８７））。別の方法は、軽鎖または重鎖の特定のサブグループのすべてのヒト抗体のコンセンサス配列から得られる特定のフレームワーク領域を使用する。同じフレームワークがいくつかの異なるヒト化抗体に対して使用され得る（Ｃａｒｔｅｒｅｔａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）；Ｐｒｅｓｔａ
ｅｔａｌ．Ｊ．Ｉｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３））。

抗原に対する高い結合親和性および他の望ましい生物学的特性を保持しながら抗体をヒト化させることがさらに重要である。この目標を達成するために、好ましい方法にしたがって、親配列およびヒト化配列の三次元モデルを用いて、親配列および様々な概念的ヒト化産物の分析のプロセスにより、ヒト化抗体が調製される。三次元の免疫グロブリンモデルは、一般に入手可能であり、当業者によく知られているものである。選択された候補免疫グロブリン配列の推定三次元コンホメーション構造を図画し、表示するコンピュータプログラムが利用できる。これらの表示を精査することにより、候補免疫グロブリン配列が機能する際の残基の推定される役割の分析、すなわち候補免疫グロブリンがその抗原に結合する能力に影響する残基の分析が可能になる。このようにして、ＦＲ残基を、レシピエントおよび移入配列から、選択して組み合わせることができ、その結果、所望の抗体特性（例えば、標的抗原に対して増大した親和性）が達成される。一般に、超可変領域残基が、抗原結合への影響において、直接、そして最も実質的に関与する。

ヒト化抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗
ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体の様々な形態が想定される。例えば、ヒト化抗体は、抗体フラグメント（例えば、Ｆａｂ）であり得、これは、必要に応じて、免疫複合体を形成するために１個以上の細胞傷害性薬剤と結合体化される。あるいは、ヒト化抗体は、インタクトな抗体（例えば、インタクトなＩｇＧ１抗体）であり得る。

ヒト化の代替として、ヒト抗体が作製され得る。例えば、内因性免疫グロブリン産生のない状況下においてヒト抗体の完全なレパートリーを免疫により産生することができるトランスジェニック動物（例えば、マウス）を作製することが現在可能である。例えば、キメラマウスおよび生殖細胞系変異マウスにおける抗体重鎖連結領域（Ｊ_Ｈ）遺伝子のホモ接合性の欠失が、内因性の抗体産生の完全な抑制をもたらすことが報告されている。ヒト生殖細胞系免疫グロブリン遺伝子アレイをそのような生殖細胞系変異マウスへの移入することは、抗原チャレンジ時のヒト抗体の産生をもたらすことになる。例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５−２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎｅｔａｌ．，ＹｅａｒｉｎＩｍｍｕｎｏ．７：３３（１９９３）；米国特許第５，５４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，５９１，６６９号（すべてＧｅｎＰｈａｒｍ）；同第５，５４５，８０７号；およびＷＯ９７／１７８５２を参照のこと。

あるいは、ファージディスプレイ技術（ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３４８：５５２−５５３［１９９０］）を用いることにより、免疫されていないドナー由来の免疫グロブリン可変（Ｖ）ドメイン遺伝子レパートリーからヒト抗体およびヒト抗体フラグメントをインビトロで作製することができる。この手法によれば、抗体Ｖドメイン遺伝子を糸状バクテリオファージ（例えば、Ｍ１３またはｆｄ）の主要なまたは副次的なコートタンパク質遺伝子のいずれかにインフレームでクローニングし、ファージ粒子の表面上の機能的抗体フラグメントとしてディスプレイさせる。糸状粒子は、ファージゲノムの一本鎖ＤＮＡコピーを含むため、抗体の機能的特性に基づいた選択もまた、これらの特性を示す抗体をコードする遺伝子の選択をもたらす。すなわち、ファージは、Ｂ細胞の特性の一部を模倣する。ファージディスプレイは、例えば、Ｊｏｈｎｓｏｎ，ＫｅｖｉｎＳ．ａｎｄＣｈｉｓｗｅｌｌ，ＤａｖｉｄＪ．，ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＳｔｒｕｃｔｕｒａｌＢｉｏｌｏｇｙ，３：５６４−５７１（１９９３）において概説されている種々の形式で実施できる。Ｖ遺伝子セグメントのいくつかの起源をファージディスプレイのために使用できる。Ｃｌａｃｋｓｏｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８（１９９１）では、免疫したマウスの脾臓から得られたＶ遺伝子の小型のランダムなコンビナトリアルライブラリーから抗オキサゾロン抗体の多様なアレイを単離した。免疫されていないヒトドナー由来のＶ遺伝子のレパートリーを構築することができ、そして抗原の多様なアレイ（自己抗原を含む）に対する抗体を、Ｍａｒｋｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９１）またはＧｒｉｆｆｉｔｈｅｔａｌ．，ＥＭＢＯＪ．１２：７２５−７３４（１９９３）により記載された手法に本質的に従って単離することができる。米国特許第５，５６５，３３２号および同第５，５７３，９０５号も参照のこと。

上記したように、ヒト抗体はまた、インビトロでの活性化されたＢ細胞により作製され得る（米国特許第５，５６７，６１０号および同第５，２２９，２７５号を参照のこと）
。
４．抗体フラグメント
特定の状況において、抗体全体ではなく、抗体フラグメントを使用するほうが有利である。より小さいサイズのフラグメントは、迅速なクリアランスを可能にし、そして固形腫瘍への向上した到達をもたらし得る。

抗体フラグメントの作製のための様々な手法が開発されている。伝統的には、これらのフラグメントは、インタクトな抗体のタンパク質分解的消化を介して得ていた（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏｅｔａｌ．，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃａｌＭｅｔｈｏｄｓ２４：１０７−１１７（１９９２）；およびＢｒｅｎｎａｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照のこと）。しかしながら、これらのフラグメントは、現在、組換え宿主細胞により直接作製することができる。Ｆａｂ、ＦｖおよびＳｃＦｖ抗体フラグメントはすべて、Ｅ．ｃｏｌｉにおいて発現させ、これより分泌させることができ、これにより、大量のこれらのフラグメントを効率的に産生できる。抗体フラグメントは、上記した抗体ファージライブラリーから単離できる。あるいは、Ｆａｂ’−ＳＨフラグメントを直接、Ｅ．ｃｏｌｉから回収し、化学的に結合してＦ（ａｂ’）_２フラグメントを形成することができる（Ｃａｒｔｅｒｅｔａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１０：１６３−１６７（１９９２）。別の方法によれば、Ｆ（ａｂ’）_２フラグメントは、組換え宿主細胞培養物から直接単離できる。サルベージレセプター結合エピトープ残基を含むインビボ半減期が延長したＦａｂおよびＦ（ａｂ’）_２フラグメントは、米国特許第５，８６９，０４６号に記載されている。抗体フラグメントの産生のための他の手法は、当業者に明らかである。選択された抗体は、一本鎖Ｆｖフラグメント（ｓｃＦｖ）である。ＷＯ９３／１６１８５；米国特許第５，５７１，８９４号；および米国特許第５，５８７，４５８号を参照のこと。ＦｖおよびｓＦｖは、定常領域を欠いたインタクトな複合化部位を有する唯一の種であり；すなわち、それらは、インビボにおいて使用する間の低い非特異的結合に適している。ｓＦｖ融合タンパク質を構築することにより、ｓＦｖのアミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかにエフェクタータンパク質を融合させてよい。ＡｎｔｉｂｏｄｙＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ｅｄ．Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ，前出を参照のこと。抗体フラグメントはまた、例えば、米国特許第５，６４１，８７０号に記載の「線状抗体」であってもよい。そのような線状抗体フラグメントは、単一特異性または二重特異性であり得る。

５．二重特異性抗体
二重特異性抗体は、少なくとも２つの異なるエピトープに対する結合特異性を有する抗体である。例示的な二重特異的抗体は、本明細書中に記載されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１タンパク質の２つの異なるエピトープに結合することができる。他のそのような抗体は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７
、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１結合部位を、別のタンパク質についての結合部位と組み合わせることができる。あるいは、ＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３−、もしくはＰＲＯ８５１６１−を発現している細胞に対すてして細胞性の防御機構を集中させ、そして局在化させるために、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１アームを、Ｔ細胞受容体分子のような白血球上の誘引分子（ｔｒｉｇｇｅｒｉｎｇｍｏｌｅｃｕｌｅ）（例えば、ＣＤ３）、またはＩｇＧについてのＦｃ受容体（ＦｃγＲ）（例えば、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）、およびＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６））に結合するアームと組み合わせることができる。二重特異的抗体はまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを発現する細胞に対して、細胞毒性薬を局在化させるためにも使用することができる。これらの抗体は、ＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、
ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３−、もしくはＰＲＯ８５１６１−結合アームと、細胞毒性薬（例えば、サポリン、抗インターフェロン−α、ビンカアルカロイド、リシンＡ鎖、メトトレキセート、または放射性同位体ハプテン）に結合するアームを有している。二重特異性抗体は、完全長抗体または抗体フラグメント（例えば、Ｆ（ａｂ’）_２二重特異性抗体）として調製できる。

ＷＯ９６／１６６７３は、二重特異性抗ＥｒｂＢ２／抗ＦｃγＲＩＩＩ抗体を記載しており、そして米国特許第５，８３７，２３４号は、二重特異性抗ＥｒｂＢ２／抗ＦｃγＲＩ抗体を開示している。二重特異性抗ＥｒｂＢ２／Ｆｃα抗体は、ＷＯ９８／０２４６３に示されている。米国特許第５，８２１，３７７号は、二重特異性抗ＥｒｂＢ２／抗ＣＤ３抗体を教示している。

二重特異性抗体を作製するための方法は、当該分野で公知である。完全長二重特異性抗体の従来の調製は、２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の同時発現に基づいており、その場合、２つの鎖は、異なる特異性を有する（Ｍｉｌｌｓｔｅｉｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３０５：５３７−５３９（１９８３））。免疫グロブリンの重鎖および軽鎖のランダムな取合せに起因して、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は、１０種の異なる抗体分子の潜在的混合物を生成し、そのうちわずか１種のみが正しい二重特異性構造を有する。通常、アフィニティクロマトグラフィ工程により行われる正しい分子の精製は、かなり面倒であり、そして生成物収率は、低い。同様の手順がＷＯ９３／０８８２９およびＴｒａｕｎｅｃｋｅｒｅｔａｌ．，ＥＭＢＯＪ，１０：３６５５−３６５９（１９９１）に開示されている。

異なる方法によれば、所望の結合特異性を有する抗体可変ドメイン（抗体−抗原複合化部位）を、免疫グロブリンの定常ドメイン配列に融合させる。好ましくは、融合は、少なくとも一部のヒンジ、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３領域を含むＩｇ重鎖定常ドメインと行う。融合物の少なくとも１つにおいて存在する、軽鎖結合に必要な部位を含む第１の重鎖定常領域（Ｃ_Ｈ１）を有することが望ましい。免疫グロブリン重鎖融合物、および所望であれば、免疫グロブリン軽鎖をコードするＤＮＡを別々の発現ベクターに挿入し安定な宿主細胞に同時トランスフェクトする。これにより、構築において使用した３種のポリペプチド鎖の等しくない比率が、所望の二重特異性抗体の最適な収率をもたらす場合、その３種のポリペプチドフラグメントの相互の割合を調節する際に多大な柔軟性がもたらされる。しかしながら、等しい比率における少なくとも２つのポリペプチド鎖の発現が高収率をもたらす場合、または比率が所望の鎖の組み合わせの収率に有意に影響しない場合は、単一の発現ベクター内に２つまたは３つすべてのポリペプチド鎖に関するコード配列を挿入することが可能である。

本発明は、一方のアームにおける第１の結合特異性を有するハイブリッド免疫グロブリン重鎖および他方のアームにおけるハイブリッド免疫グロブリン重鎖−軽鎖対（第２の結合特異性をもたらす）から構成される二重特異性抗体を提供する。この非対称の構造は、
二重特異性分子の片方にのみ免疫グロブリン軽鎖が存在することにより、分離の効率的方法が提供されるため、望ましくない免疫グロブリン鎖の組み合わせから所望の二重特異性化合物を分離することを容易にすることがわかっている。この方法は、ＷＯ９４／０４６９０に開示されている。二重特異性抗体の作製のさらに詳細な説明は、例えば、Ｓｕｒｅｓｈｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ１２１：２１０（１９８６）を参照のこと。

米国特許第５，７３１，１６８号に記載の別の方法によれば、抗体分子対の間の界面を操作することにより、組換え細胞培養から回収されるヘテロ２量体の割合を最大限にすることができる。好ましい界面は、Ｃ_Ｈ３ドメインの少なくとも一部を含む。この方法において、第１の抗体分子の界面に由来する１つ以上の小型アミノ酸側鎖をより大きい鎖（例えば、チロシンまたはトリプトファン）で置き換える。大型の側鎖と同一または同様のサイズの代償的な「空洞」が、大型のアミノ酸側鎖をより小さいもの（例えば、アラニンまたはスレオニン）と置き換えることによって第２の抗体分子の界面上に形成される。これは、ホモ２量体などの他の望ましくない最終生成物よりもヘテロ２量体の収率を増大させるための機序を提供する。

二重特異性抗体は、架橋結合された抗体または「ヘテロ結合体」抗体を含む。例えば、ヘテロ結合体における抗体の一方をアビジンに、そして他方をビオチンに結合することができる。このような抗体は、例えば、望ましくない細胞に免疫系細胞をターゲティングするため（米国特許第４，６７６，９８０号）およびＨＩＶ感染の処置のため（ＷＯ９１／００３６０、ＷＯ９２／２００３７３およびＥＰ０３０８９）に提案されている。ヘテロ結合体抗体は、任意の好都合な架橋結合法を用いて作製され得る。適当な架橋結合剤は、当該分野で周知であり、そして多くの架橋結合の手法と共に米国特許第４，６７６，９８０号に開示されている。

抗体フラグメントから二重特異性抗体を作製するための手法もまた、文献に記載されている。例えば、二重特異性抗体は、キメラ連結を用いて調製できる。Ｂｒｅｎｎａｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２２９：８１（１９８５）は、Ｆ（ａｂ’）_２フラグメントを作製するためにインタクトな抗体をタンパク質分解的に切断する手順を記載している。これらのフラグメントをジチオール複合体形成剤、亜ヒ酸ナトリウムの存在下で還元することにより、隣接ジチオールを安定化させ、分子間ジスルフィドの形成を妨害する。次に、形成されたＦａｂ’フラグメントをチオニトロベンゾエート（ＴＮＢ）誘導体に変換する。次に、Ｆａｂ’−ＴＮＢ誘導体の１つを、メルカプトエチルアミンで還元することによりＦａｂ’−チオールに再変換し、等モル量の他のＦａｂ’−ＴＮＢ誘導体と混合することにより、二重特異性抗体が形成される。生成した二重特異性抗体は、酵素の選択的固定化のための試薬として使用できる。

最近の進歩により、化学的に結合することにより二重特異性抗体を形成することができる、Ｅ．ｃｏｌｉからのＦａｂ’−ＳＨフラグメントの直接の回収が容易になった。Ｓｈａｌａｂｙｅｔａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７５：２１７−２２５（１９９２）は、完全にヒト化された二重特異性抗体Ｆ（ａｂ’）_２分子の作製を記載している。各Ｆａｂ’フラグメントを別個にＥ．ｃｏｌｉから分泌させ、インビトロの指向性化学カップリングに供することにより、二重特異性抗体が作製される。このようにして形成された二重特異性抗体は、ＥｒｂＢ２レセプターを過剰発現する細胞および正常ヒトＴ細胞に結合することができ、同時にヒト乳房腫瘍標的に対するヒト細胞傷害性リンパ球の溶解活性をトリガーすることができた。組換え細胞培養物から直接、二重特異性抗体フラグメントを作製して単離する様々な手法も報告されている。例えば、二重特異性抗体を、ロイシンジッパーを用いて調製する。Ｋｏｓｔｅｌｎｙｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（５）：１５４７−１５５３（１９９２）。ＦｏｓおよびＪｕｎタンパク質由来のロイ
シンジッパーペプチドを、遺伝子融合により２種の異なる抗体のＦａｂ’部分に連結した。その抗体のホモ２量体を、ヒンジ領域で還元することによりモノマーを形成し、次に、再び酸化して抗体ヘテロ２量体を形成させた。この方法はまた、抗体ホモ２量体の調製にも利用できる。Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：６４４４−６４４８（１９９３）に記載の「ダイアボディ」手法は、二重特異性抗体フラグメントを作製するための代替機序を提供している。そのフラグメントは、同じ鎖の２ドメイン間の対形成を可能とするには、短すぎるリンカーによってＶ_Ｌに連結されたＶ_Ｈを含む。したがって、１つのフラグメントのＶ_ＨおよびＶ_Ｌドメインが別のフラグメントの相補的なＶ_ＬドメインおよびＶ_Ｈドメインに強制的に対形成させられ、これにより２つの抗原結合部位が形成される。一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）２量体の使用による二重特異性抗体フラグメントを作製するための別のストラテジも報告されている。Ｇｒｕｂｅｒｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５２：５３６８（１９９４）を参照のこと。

２価より多価の抗体も企図される。例えば、３重特異性抗体が作製され得る。Ｔｕｔｔ
ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）。

６．ヘテロ結合体抗体
ヘテロ結合体抗体もまた、本発明の範囲内に含まれる。ヘテロ結合体抗体は、２つの共有結合した抗体から構成される。このような抗体は、例えば、望ましくない細胞に免疫系細胞をターゲティングするため［米国特許第４，６７６，９８０号］およびＨＩＶ感染の処置のため［ＷＯ９１／００３６０、ＷＯ９２／２００３７３およびＥＰ０３０８９］に提案されている。この抗体は、架橋結合剤を用いる方法を含む合成タンパク質化学における公知の方法を用いてインビトロで調製され得ると企図される。例えば、免疫トキシンは、ジスルフィド交換反応を用いて、またはチオエーテル結合の形成によって構築され得る。この目的に適した試薬の例としては、イミノチオレートおよびメチル−４−メルカプトブチルイミデートならびに例えば、米国特許第４，６７６，９８０号に開示されているものが挙げられる。

７．多価抗体
多価抗体は、抗体が結合する抗原を発現する細胞によって、２価抗体より急速に内部移行（および／または異化）され得る。本発明の抗体は、３つ以上の抗原結合部位を有する多価抗体（ＩｇＭクラス以外である）（例えば、４価抗体）であり得、その抗体は、抗体のポリペプチド鎖をコードする核酸の組換え発現により容易に作製できる。多価抗体は、二量体化ドメインおよび３つ以上の抗原結合部位を含み得る。好ましい二量体化ドメインは、Ｆｃ領域またはヒンジ領域を含む（またはそれからなる）。この設定において、その抗体は、Ｆｃ領域およびＦｃ領域に対してアミノ末端側に３つ以上の抗原結合部位を含む。好ましい多価抗体は、本明細書中で３個〜約８個、好ましくは、４個の抗原結合部位を含む（またはそれからなる）。多価抗体は、少なくとも１つのポリペプチド鎖（および好ましくは、２つのポリペプチド鎖）を含み、ここでそのポリペプチド鎖は、２つ以上の可変ドメインを含む。例えば、そのポリペプチド鎖は、ＶＤ１−（Ｘ１）_ｎ−ＶＤ２−（Ｘ２）_ｎ−Ｆｃを含み得、式中、ＶＤ１は、第１の可変ドメイン、ＶＤ２は、第２の可変ドメイン、Ｆｃは、Ｆｃ領域の１つのポリペプチド鎖であり、Ｘ１およびＸ２は、アミノ酸またはポリペプチドを示し、ｎは、０または１である。例えば、そのポリペプチド鎖は、ＶＨ−ＣＨ１−柔軟なリンカー−ＶＨ−ＣＨ１−Ｆｃ領域鎖；またはＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１−Ｆｃ領域鎖を含み得る。本明細書中の多価抗体は、好ましくは、さらに少なくとも２つ（好ましくは、４つ）の軽鎖可変ドメインポリペプチドを含む。本明細書中の多価抗体は、例えば、約２個〜約８個の軽鎖可変ドメインポリペプチドを含み得る。本明細書において企図される軽鎖可変ドメインポリペプチドは、軽鎖可変ドメインを含み、そして必要に応じて、さらにＣＬドメインを含む。

８．エフェクター機能の操作
例えば、抗体の抗原依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を増強するために、エフェクター機能に関して本発明の抗体を改変することが望ましい場合がある。これは、１つ以上アミノ酸置換を抗体のＦｃ領域に導入することにより達成され得る。代替または追加として、システイン残基をＦｃ領域に導入することにより、この領域における鎖間のジスルフィド結合の形成が可能とされ得る。このように作製されたホモ２量体抗体は、向上した内部移行能力ならびに／または増大した補体媒介性細胞殺滅および抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を有し得る。Ｃａｒｏｎｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１７６：１１９１−１１９５（１９９２）およびＳｈｏｐｅｓ，Ｂ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：２９１８−２９２２（１９９２）を参照のこと。増強された抗腫瘍活性を有するホモ２量体抗体はまた、Ｗｏｌｆｆｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５３：２５６０−２５６５（１９９３）に記載されているように、ヘテロ２官能性架橋リンカーを用いて調製され得る。あるいは、二重のＦｃ領域を有することから、増強された補体溶解およびＡＤＣＣ能力を有し得る抗体を作製することもできる。Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎｅｔａｌ．，ＡｎｔｉＣａｎｃｅｒＤｒｕｇＤｅｓｉｇｎ３：２１９−２３０（１９８９）を参照のこと。その抗体の血清中半減期を延長するために、例えば、米国特許第５，７３９，２７７号に記載されるように抗体（特に抗体フラグメント）中にサルベージレセプター結合エピトープを取り込んでよい。本明細書中で使用されるとき、用語「サルベージレセプター結合エピトープ」とは、ＩｇＧ分子（例えば、ＩｇＧ_１、ＩｇＧ_２、ＩｇＧ_３およびＩｇＧ_４）のインビボの血清中半減期を延長する原因となるＩｇＧ分子のＦｃ領域のエピトープのことをいう。

９．免疫複合体
本発明はまた、細胞傷害性薬剤（例えば、化学療法剤、増殖阻害剤、トキシン（例えば、細菌、真菌、植物または動物起源の酵素的に活性なトキシンまたはそのフラグメント）または放射性同位体（すなわち、放射性結合体）に結合体化された抗体を含む免疫複合体に関する。

このような免疫複合体の作製に有用な化学療法剤は、上記の通りである。使用され得る酵素的に活性なトキシンおよびそのフラグメントとしては、ジフテリアＡ鎖、ジフテリアトキシンの非結合活性フラグメント、外毒素Ａ鎖（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ由来）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデクシンＡ鎖、アルファ−サルシン（ｓａｒｃｉｎ）、Ａｌｅｕｒｉｔｅｓｆｏｒｄｉｉタンパク質、ジアンチン（ｄｉａｎｔｈｉｎ）タンパク質、Ｐｈｙｔｏｌａｃａａｍｅｒｉｃａｎａタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩおよびＰＡＰ−Ｓ）、ｍｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａインヒビター、クルシン（ｃｕｒｃｉｎ）、クロチン（ｃｒｏｔｉｎ）、ｓａｐａｏｎａｒｉａｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓインヒビター、ゲロニン（ｇｅｌｏｎｉｎ）、マイトゲリン（ｍｉｔｏｇｅｌｌｉｎ）、レストリクトシン（ｒｅｓｔｒｉｃｔｏｃｉｎ）、フェノマイシン（ｐｈｅｎｏｍｙｃｉｎ）、エノマイシン（ｅｎｏｍｙｃｉｎ）およびトリコテシン（ｔｒｉｃｏｔｈｅｃｅｎｅ）が挙げられる。種々の放射性核種が、放射性結合体化抗体の作製のために使用できる。例としては、^２１２Ｂｉ、^１３１Ｉ、^１３１Ｉｎ、^９０Ｙおよび^１８６Ｒｅが挙げられる。抗体と細胞傷害性薬剤との結合体は、種々の２官能性タンパク質カップリング剤（例えば、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの２官能性誘導体（例えば、ジメチルアジピミデートＨＣＬ）、活性エステル（例えば、スベリン酸ジスクシンイミジル）、アルデヒド（例えば、グルタルアルデヒド）、ビス−アジド化合物（例えば、ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン）、ビスジアゾニウム誘導体（例えば、ビス（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）−エチレンジアミン）、ジイソシアネート（例えば、トリエン２，６−ジイソシアネート）およびビス活性フッ素化合物（例えば、１，５−
ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン））を用いて作製される。例えば、リシン免疫トキシンは、Ｖｉｔｅｔｔａｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３８：１０９８（１９８７）に記載されているように調製され得る。炭素−１４−標識１−イソチオシアナトベンジル−３−メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＭＸ−ＤＴＰＡ）は、抗体への放射性核種の結合体化のための例示的なキレート剤である。ＷＯ９４／１１０２６を参照のこと。

抗体および１つ以上の低分子トキシン（例えば、カリケアマイシン、メイタンシノイド、トリコテシンおよびＣＣ１０６５）およびトキシン活性を有するこれらの毒素の誘導体の結合体もまた本明細書中で企図される。

メイタンシンおよびメイタンシノイド
本発明により、１つ以上のメイタンシノイド分子に結合させられた抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体（全長または断片）が提供される。

メイタンシノイドは、チューブリン重合を抑制することにより機能する有糸分裂インヒビターである。メイタンシンは、東アフリカの低木であるＭａｙｔｅｎｕｓｓｅｒｒａｔａから最初に単離された（米国特許第３，８９６，１１１号）。その後、特定の微生物もまた、メイタンシノイド（例えば、メイタンシノールおよびＣ−３メイタンシノールエステル）を産生することが発見された（米国特許第４，１５１，０４２号）。合成のメイタンシノールならびにその誘導体およびアナログは、例えば、米国特許第４，１３７，２３０号；同第４，２４８，８７０号；同第４，２５６，７４６号；同第４，２６０，６０８号；同第４，２６５，８１４号；同第４，２９４，７５７号；同第４，３０７，０１６号；同第４，３０８，２６８号；同第４，３０８，２６９号；同第４，３０９，４２８号；同第４，３１３，９４６号；同第４，３１５，９２９号；同第４，３１７，８２１号；同第４，３２２，３４８号；同第４，３３１，５９８号；同第４，３６１，６５０号；同第４，３６４，８６６号；同第４，４２４，２１９号；同第４，４５０，２５４号；同第４，３６２，６６３号；および同第４，３７１，５３３号に開示されており、これらの開示は、本明細書により、参考として明示的に援用される。

メイタンシノイド−抗体結合体
その処置指標を向上させる試みにおいて、メイタンシンおよびメイタンシノイドは、腫瘍細胞抗原に特異的に結合する抗体に結合体化された。メイタンシノイドを含む免疫複合体およびその治療的用途は、例えば、米国特許第５，２０８，０２０号、同第５，４１６，０６４号および欧州特許ＥＰ０４２５２３５Ｂ１（これらの開示は、本明細書により参考として明示的に援用される）に開示されている。Ｌｉｕｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９３：８６１８−８６２３（１９９６）は、ヒト直腸結腸癌に対して指向されたモノクローナル抗体Ｃ２４２に連結されたＤＭ１と命名され
たメイタンシノイドを含む免疫複合体を記載している。この結合体は、培養された結腸癌細胞に対しては、高度に細胞傷害性であることが見出され、そしてインビボの腫瘍生育アッセイにおいて抗腫瘍活性を示した。Ｃｈａｒｉｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５２：１２７−１３１（１９９２）は、ヒト結腸癌細胞株上の抗原に結合するマウス抗体Ａ７に、またはＨＥＲ−２／ｎｅｕ癌遺伝子に結合する別のマウスモノクローナル抗体ＴＡ．１にジスルフィドリンカーを介してメイタンシノイドを結合体化した免疫複合体を記載している。ＴＡ．１−メイタンシノイド結合体の細胞傷害性は、細胞当たり３×１０^５のＨＥＲ−２表面抗原を発現するヒト乳癌細胞株ＳＫ−ＢＲ−３に対してインビトロで試験された。薬剤結合体は、遊離メイタンシノイド薬剤と同様の細胞傷害性の程度を達成しており、これは、抗体分子当たりのメイタンシノイド分子の数を増大させることにより増大させることができた。Ａ７−メイタンシノイド結合体は、マウスにおいて低い全身性の細胞傷害性を示した。

抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体−メイタンシノイド結合体（免疫結合体）
抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体−メイタンシノイド結合体は、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体を、メイタンシノイド分子に対して、抗体またはメイタンシノイド分子のいずれの生物学的活性も有意には低下させることなく化学的に連結させることによって調製される。抗体分子当たり平均３〜４個のメイタンシノイド分子を結合体化すると、抗体の機能または溶解性に悪影響を及ぼすことなく標的細胞の細胞傷害性を増強する場合に有効であることがわかっているが、１分子の毒素／抗体であっても、裸の抗体を使用したときよりも細胞傷害性を増強すると期待される。メイタンシノイドは、当該分野で周知であり、そして公知の手法により合成され得るか、または天然起源から単離され得る。適当なメイタンシノイドは、例えば、米国特許第５，２０８，０２０号ならびに上記した他の特許および特許でない出版物に開示されている。好ましいメイタンシノイドは、メイタンシノールおよび芳香環において、またはマインタンシノール分子（例えば、様々なメインタンシノールエステル）の他の位置において改変されているマインタンシノールアナログである。

抗体−メイタンシノイド結合体を作製するための当該分野で公知の連結基が、多数存在し、それらとしては、例えば、米国特許第５，２０８，０２０号または欧州特許０４２５２３５Ｂ１ならびにＣｈａｒｉｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５２：１２７−１３１（１９９２）に開示されているものが挙げられる。連結基としては、上で特定した特許に開示されているような、ジスルフィド基、チオエーテル基、酸不安定性基、光不安定性基、ペプチダーゼ不安定性基、またはエステラーゼ不安定性基が挙げられるが、ジスルフィド基およびチオエーテル基が好ましい。

抗体とメイタンシノイドとの結合体は、種々の２官能性タンパク質カップリング剤（例えば、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの２官能性誘導体（例えば、ジメチルアジピミデートＨＣＬ）、活性エステル（例えば、スベリン酸ジスクシンイミジル）、アルデヒド（例えば、グルタルアルデヒド）、ビス−アジド化合物（例えば、ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン）、ビスジアゾニウム誘導体（例えば、ビス（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）エチレンジアミン）、ジイソシアネート（例えば、トルエン２，６−ジイソシアネート）およびビス活性フッ素化合物（例えば、１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン））を用いて作製され得る。特に好ましいカップリング剤としては、ジスルフィド結合を提供するためのＮ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）（Ｃａｒｌｓｓｏｎｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，１７３：７２３−７３７［１９７８］）およびＮ−スクシンイミジル−４−（２−ピリジルジチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）が挙げられる。

リンカーは、連結の型に応じて様々な位置においてメイタンシノイド分子に結合され得る。例えば、エステル結合は、従来のカップリング手法を用いてヒドロキシル基との反応により形成され得る。この反応は、ヒドロキシル基を有するＣ３位、ヒロドキシメチルで改変されたＣ１４位、ヒドロキシル基で改変されたＣ１５位およびヒドロキシル基を有するＣ２０位において起こり得る。連結は、メイタンシノールまたはメイタンシノールアナログのＣ３位において形成される。

カリケアマイシン
目的の別の免疫結合体には、１つ以上のカリケアマイシン分子に結合させられた抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ
１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体が含まれる。抗生物質のカリケアマイシンファミリーは、ピコモル以下の濃度において２本鎖ＤＮＡ切断をもたらすことができる。カリケアマイシンファミリーの結合体の調製に関しては、米国特許第５，７１２，３７４号、同第５，７１４，５８６号、同第５，７３９，１１６号、同第５，７６７，２８５号、同第５，７７０，７０１号、同第５，７７０，７１０号、同第５，７７３，００１号、同第５，８７７，２９６号を参照のこと（すべてＡｍｅｒｉｃａｎＣｙａｎａｍｉｄＣｏｍｐａｎｙ）。使用され得るカリケアマイシンの構造アナログとしては、γ_１ ^Ｉ、α_２ ^Ｉ、α_３ ^Ｉ、Ｎ−アセチル−γ_１ ^Ｉ、ＰＳＡＧおよびθ^Ｉ _ｌ（Ｈｉｍｍａｎｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５３：３３３６−３３４２（１９９３）、Ｌｏｄｅｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５８：２９２５−２９２８（１９９８）および上記したＡｍｅｒｉｃａｎＣｙａｎａｍｉｄに対する米国特許）が挙げられるが、これらに限定されない。抗体を結合体化できる別の抗腫瘍剤は、葉酸代謝拮抗薬であるＱＦＡである。カリケアマイシンおよびＱＦＡは、両方とも細胞内の作用部位を有し、原形質膜を容易に通過しない。したがって、抗体媒介性の内部移行を介したこれらの薬剤の細胞内取り込みは、その細胞傷害性作用を大きく増大させる。

他の細胞傷害性薬剤
本発明の抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体に対して結合させることができる他の抗腫瘍薬としては、ＢＣＮＵ、ストレプトゾイシン、ビンクリスチン、および５−フルオロウラシル、米国特許第５，０５３，３９４号、同第５，７７０，７１０号に記載されているまとめてＬＬ−Ｅ３３２８８複合体として知られている薬剤のファミリー、ならびに、エスペラマイシン（米国特許第５，８７７，２９６号）が挙げられる。

使用され得る酵素的に活性なトキシンおよびそのフラグメントとしては、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性フラグメント、外毒素Ａ鎖（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ由来）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデクシンＡ鎖、アルファ−サルシン、Ａｌｅｕｒｉｔｅｓｆｏｒｄｉｉタンパク質、ジアンチンタンパク質、Ｐｈｙｔｏｌａｃａａｍｅｒｉｃａｎａタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩおよびＰＡＰ−Ｓ）、ｍｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａインヒビター、クルシン、クロチン、ｓａｐａｏｎａｒｉａｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓインヒビター、ゲロニン、マイトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシンおよびトリコテシンが挙げられる。例
えば、１９９３年１０月２８日に公開されたＷＯ９３／２１２３２を参照のこと。

本発明はさらに、抗体と核溶解活性を有する化合物（例えば、リボヌクレアーゼまたはＤＮＡエンドヌクレアーゼ（例えば、デオキシリボヌクレアーゼ；ＤＮＡｓｅ））との間に形成される免疫複合体を企図している。

腫瘍の選択的破壊のためには、抗体は、高度に放射性の原子を含んでよい。様々な放射性同位体を、放射性物質が結合させられた抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体の生産に利用することができる。例としては、Ａｔ^２１１、Ｉ^１３１、Ｉ^１２５、Ｙ^９０、Ｒｅ^１８６、Ｒｅ^１８８、Ｓｍ^１５３、Ｂｉ^２１２、Ｐ^３２、Ｐｂ^２１２およびＬｕの放射性同位体が挙げられる。診断のために結合体を使用する場合、その結合体は、シンチグラフィー試験用の放射性原子、例えば、ｔｃ^９９ｍもしくはＩ^１２３、または核磁気共鳴（ＮＭＲ）イメージング（磁気共鳴イメージングＭＲＩとしても公知の）要のスピン標識（例えば、ヨウ素−１２３、さらにヨウ素−１３１、インジウム−１１１、フッ素−１９、炭素−１３、窒素−１５、酸素−１７、ガドリニウム、マンガンまたは鉄）を含み得る。

放射標識または他の標識を、公知の方法で結合体に取り込ませてよい。例えば、水素の代わりにフッ素−１９を含む適当なアミノ酸前駆体を用いて、ペプチドを生合成し得るか、またはアミノ酸化学合成法により合成し得る。標識（例えば、ｔｃ^９９ｍまたはＩ^１２３、Ｒｅ^１８６、Ｒｅ^１８８およびＩｎ^１１１）をペプチド内のシステイン残基を介して結合することができる。イットリウム−９０は、リシン残基を介して結合できる。ＩＯＤＯＧＥＮ法（Ｆｒａｋｅｒｅｔａｌ（１９７８）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．８０：４９−５７）を用いてヨウ素−１２３を取り込むことができる。“ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓｉｎＩｍｍｕｎｏｓｃｉｎｔｉｇｒａｐｈｙ”（Ｃｈａｔａｌ，ＣＲＣＰｒｅｓｓ１９８９）は、他の方法を詳細に説明している。

抗体と細胞傷害性薬剤との結合体は、種々の２官能性のタンパク質カップリング剤（例えば、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの２官能性誘導体（例えば、ジメチルアジピミデートＨＣＬ）、活性エステル（例えば、スベリン酸ジスクシンイミジル）、アルデヒド（例えば、グルタルアルデヒド）、ビス−アジド化合物（例えば、ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン）、ビスジアゾニウム誘導体（例えば、ビス（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）エチレンジアミン）、ジイソシアネート（例えば、トリエン２，６−ジイソシアネート）およびビス活性フッ素化合物（例えば、１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン）を用いて作製され得る。例えば、リシン免疫トキシンは、Ｖｉｔｅｔｔａｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３８：１０９８（１９８７）に記載されてい
るように調製され得る。炭素−１４−標識１−イソチオシアナトベンジル−３−メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＭＸ−ＤＴＰＡ）は、抗体への放射性核種の結合体化のための例示的なキレート剤である。ＷＯ９４／１１０２６を参照のこと。リンカーは、細胞内での細胞傷害性薬剤の放出を容易にする「切断可能なリンカー」であり得る。例えば、酸不安定性リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、光不安定性リンカー、ジメチルリンカーまたはジスルフィド含有リンカー（Ｃｈａｒｉｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５２：１２７−１３１（１９９２）；米国特許第５，２０８，０２０号）が使用され得る。

あるいは、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、または抗ＰＲＯ８５１６１抗体と、細胞毒性薬が含まれている融合タンパク質を、例えば、組み換え技術またはペプチド合成によって作成することができる。ＤＮＡの長さは、相互に隣接するか、または結合体の所望の特性を損なわないリンカーペプチドをコードする領域によって分離されている結合体の２つの部分をコードするそれぞれの領域を含み得る。

本発明によれば、抗体−レセプター結合体を患者に投与し、その後浄化剤を用いて循環系から未結合の結合体を除去し、次に細胞傷害性薬剤（例えば、放射性ヌクレオチド）に結合体化された「リガンド」（例えば、アビジン）を投与する、腫瘍の予備ターゲティングにおいて利用するための「レセプター」（例えば、ストレプトアビジン）に抗体は結合体化され得る。

１０．免疫リポソーム（Ｉｍｍｕｎｏｌｉｐｏｓｏｍｅ）
本明細書中に開示される抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体はまた、免疫リポソームとして所望することもできる。「リポソーム」は、哺乳動物における薬剤の送達のために有用な様々な型の脂質、リン脂質および／または界面活性剤から構成される小型のビヒクルである。リポソームの成分は、一般に、生物学的膜の脂質の配置と類似の二層形態で配置している。抗体を含むリポソームは、例えば、Ｅｐｓｔｅｉｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃ
ｉ．ＵＳＡ８２：３６８８（１９８５）；Ｈｗａｎｇｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ７７：４０３０（１９８０）；米国特許第４，４８５，０４５号および同第４，５４４，５４５号；および１９９７年１０月２３日に公開されたＷＯ９７／３８７３１に記載されているような当該分野で公知の方法により調製される。長期の循環時間を有するリポソームは、米国特許第５，０１３，５５６号に開示されている。

特に有用なリポソームは、ホスファチジルコリン、コレステロールおよびＰＥＧ誘導体化ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＰＥ）を含む脂質組成物を用いて逆相蒸発法により作製することができる。リポソームを、所定の孔径のフィルターに通して押し出すことにより、所望の直径を有するリポソームが得られる。本発明の抗体のＦａｂ’フラグメントは、ジスルフィド相互交換反応によりＭａｒｔｉｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５７：２８６−２８８（１９８２）に記載されているようにリポソームに結合体化され得る。化学療法剤は、必要に応じてリポソーム内に含まれる。Ｇａｂｉｚｏｎｅｔａｌ．，Ｊ．ＮａｔｉｏｎａｌＣａｎｃｅｒＩｎｓｔ．８１（１９）：１４８４（１９８９）を参照のこと。

１１．抗体の薬学的組成物
本明細書中で同定されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに特異的に結合する抗体、ならびに、本明細書中で先に開示されたスクリーニングアッセイによって同定された他の分子は、薬学的組成物の形態で様々な障害の処置のために投与することができる。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが細胞内にあり、そして完全な抗体が阻害剤として使用される場合には、インターナライズ抗体（ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚｉｎｇａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）が好ましい。しかしながら、リポフェクションまたはリポソームはまた、抗体または抗体フラグメントを細胞に送達するためにも使用できる。抗体フラグメントを用いる場合、標的タンパク質の結合ドメインに特異的に結合する最も小さい阻害性フラグメントが好ましい。例えば、抗体の可変領域の配列に基づいて、標的タンパク質配列に結合する能力を保持しているペプチド分子を設計でき
る。そのようなペプチドは、化学合成および／または組換えＤＮＡ技術による調製が可能である。例えば、Ｍａｒａｓｃｏｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：７８８９−７８９３（１９９３）を参照のこと。本明細書中の処方物はまた、処置すべき特定の適応症に必要な２つ以上の活性化合物、好ましくは、相互に悪影響を及ぼさない補足的な活性を有するものを含み得る。あるいは、またはさらに、その組成物は、その機能を増強する薬剤（例えば、細胞傷害性薬剤、サイトカイン、化学療法剤または増殖阻害剤）を含み得る。このような分子は、意図する目的のために有効である量における組み合わせにおいて適宜存在する。

活性成分はまた、例えば、コアセルベーション法または界面重合により調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセルおよびポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセル中、コロイド状薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミン微小球、マイクロエマルジョン、ナノ粒子およびナノカプセル）中、またはマクロエマルジョン中に封入してもよい。このような手法は、前出のＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓに開示されている。

インビボ投与のために使用される処方物は、滅菌されていなければならない。これは、滅菌された濾過膜に通す濾過により容易に達成される。

徐放性処方物が調製され得る。徐放性処方物の適当な例としては、抗体を含む固体疎水性ポリマーの半透過性マトリックスが挙げられ、そのようなマトリックスは、成形された物、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態である。徐放性マトリックスの例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）またはポリ（ビニルアルコール））、ポリ乳酸（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸とγエチル−Ｌ−グルタメートとのコポリマー、非分解性エチレン−酢酸ビニル、分解性乳酸−グリコール酸コポリマー（例えば、ＬＵＰＲＯＮＤＥＰＯＴ^ＴＭ（乳酸−グリコール酸コポリマーおよび酢酸ロイプロリドから構成される注射可能な微小球））およびポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。エチレン−酢酸ビニルおよび乳酸−グリコール酸などのポリマーは、１００日間にわたる分子の放出を可能にするが、特定のヒドロゲルは、より短い時間にタンパク質を放出する。カプセル化抗体が身体内に長時間残存する場合、それらは、３７℃の水分への曝露の結果として、変性するか凝集し、生物学的活性を消失するか、または免疫原性が変化する可能性がある。合理的なストラテジは、関与する機序に応じて安定化のために工夫することができる。例えば、凝集の機序がチオ−ジスルフィド交換を介した分子間Ｓ−Ｓ結合の形成であることが発見されれば、スルフィドリル残基の改変、酸性溶液からの凍結乾燥、水分含有量の制御、適切な添加物の使用および特定のポリマーマトリックス組成物の開発によって安定化が達成され得る。

Ｇ．抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６
、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体の使用
本発明の抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体は、神経障害；心臓血管、内皮もしくは血管形成の障害；免疫障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常もしくは障害；胚発達障害もしくは胚性致死、または代謝障害について、様々な治療的用途および／または診断的用途を有している。例えば、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１についての診断アッセイにおいて（例えば、特異的な細胞、組織、または血清の中でのその発現（およびいくつかの場合には、ディファレンシャルな発現）を検出することにおいて）使用することができる。当該分野で公知の様々な診断アッセイの手法、例えば、競合的結合アッセイ、直接または間接のサンドイッチアッセイおよび不均質または均質な相のいずれかにおいて行う免疫沈降アッセイが使用され得る［Ｚｏｌａ，ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＡＭａｎｕａｌｏｆＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ＣＲＣＰｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．（１９８７）ｐｐ．１４７−１５８］。診断アッセイにおいて使用される抗体は、検出可能な部分で標識できる。その検出可能な部分は、直接的または間接的に検出可能なシグナルを生成することができるものでなければならない。例えば、その検出可能な部分は、放射性同位体（例えば、^３Ｈ、^１４Ｃ、^３２Ｐ、^３５Ｓまたは^１２５Ｉ）、蛍光または化学発
光化合物（例えば、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミンまたはルシフェリン）または酵素（例えば、アルカリホスファターゼ、ベータガラクトシダーゼまたは西洋ワサビペルオキシダーゼ）であり得る。その検出可能な部分に抗体を結合体化するための当該分野で公知の任意の方法（Ｈｕｎｔｅｒｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１４４：９４５（１９６２）；Ｄａｖｉｄｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１３：１０１４（１９７４）；Ｐａｉｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．，４０：２１９（１９８１）；およびＮｙｇｒｅｎ，Ｊ．Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．ａｎｄＣｙｔｏｃｈｅｍ．，３０：４０７（１９８２）に記載されているものを含む）を使用し得る。

抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３、もしくは抗ＰＲＯ８５１６１抗体はまた、組み換え細胞培養物、または自然界に存在している供給源からのＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの親和性による精製にも有用である。この過程においては、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに対する抗体が、当該分野で周知の方法を使用して適切な支持体（例えば、Ｓｅｐｈａｄｅｘ樹脂または濾紙）上に固定される。その後、固定された抗体は、精製されるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、
ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが含まれている試料と接触させられ、その後、支持体が、固定された抗体に結合させられたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを除く、試料中の実質的に全ての材料を除去するであろう適切な溶媒で洗浄される。最後に、支持体は、抗体からＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３、もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを放出するであろう別の適切な溶媒で洗浄される。

以下の実施例は、説明のみを目的としており、本発明の範囲をいかなる面でも限定する意図はない。

本明細書中で引用したすべての特許および文献の参考資料は、その全体が本明細書により参考として援用される。

実施例において言及される市販の試薬は、他に指示がない限り、製造者の指示書に従って使用した。以下の実施例において、また本明細書を通して、ＡＴＣＣアクセッション番号によって同定される細胞の起源は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡである。

実施例１：新規のポリペプチドおよびそれらをコードするｃＤＮＡを同定するための細胞外ドメインホモロジースクリーニング
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ公的データベースからの約９５０個の既知の分泌タンパク質の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列（もしあれば、分泌シグナル配列を含む）を使用して、ＥＳＴデータベースを検索した。そのＥＳＴデータベースは、公的データベース（例えば、Ｄ
ａｙｈｏｆｆ、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のデータベース（例えば、ＬＩＦＥＳＥＱ^ＴＭ，ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含んでいた。検索は、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ−２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して、ＥＣＤタンパク質配列の、ＥＳＴ配列の６フレーム翻訳との比較として実施した。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上の比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，ＷＡ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。

この細胞外ドメインホモロジースクリーニングを使用して、コンセンサスＤＮＡ配列を、ｐｈｒａｐを使用して他の同定されているＥＳＴ配列に対して構築した。さらに、得られたコンセンサスＤＮＡ配列を、しばしば（必ずしもそうではないが）ＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ−２およびｐｈｒａｐの繰り返しサイクルを使用して、伸長することにより、上に記載したＥＳＴ配列の起源を使用してできる限りコンセンサス配列を伸長した。

上に記載したように得られたコンセンサス配列に基づいて、次いでオリゴヌクレオチドを、目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するためおよびＰＲＯポリペプチドについての完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するために合成し、使用した。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般に２０〜３０ヌクレオチドの範囲であり、約１００〜１０００ｂｐ長のＰＣＲ産物が得られるように設計されることが多い。プローブ配列は、代表的には４０〜５５ｂｐ長である。いくつかの場合において、コンセンサス配列が約ｌ〜１．５ｋｂｐより大きいとき、さらなるオリゴヌクレオチドを合成する。完全長クローンについていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙのように、ＰＣＲプライマー対を用いてＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用して、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の一方を用いて目的の遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡクローンを単離するために使用したｃＤＮＡライブラリーを、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡの試薬などの市販の試薬を使用して標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡを、ＮｏｔＩ部位を含むオリゴｄＴをプライマーとして増幅し、ＳａｌＩ半リン酸化（ｈｅｍｉｋｉｎａｓｅｄ）アダプターに平滑末端で連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適切にサイズ分離し、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）に所定の方向で独特のＸｈｏＩ部位およびＮｏｔＩ部位においてクローニングした。

実施例２：アミラーゼスクリーニングによるｃＤＮＡクローンの単離
１．オリゴｄＴをプライマーとするｃＤＮＡライブラリーの調製
ｍＲＮＡを、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡ（ＦａｓｔＴｒａｃｋ２）の試薬およびプロトコルを使用して目的のヒト組織から単離した。このＲＮＡを使用し、ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤの試薬（ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＰｌａｓｍｉｄＳｙｓｔｅｍ）およびプロトコルを使用して、ベクターｐＲＫ５Ｄに、オリゴｄＴをプライマーとするｃＤＮＡライブラリーを生成した。この手順において、二本鎖ｃＤＮＡのうち、１０００ｂｐより大きいものを分離し、ＳａｌＩ／ＮｏｔＩリンカー付加されたｃＤＮＡを、ＸｈｏＩ／ＮｏｔＩ切断されたベ
クターにクローニングした。ｐＲＫ５Ｄは、ＸｈｏＩ／ＮｏｔＩｃＤＮＡクローニング部位の前に、ｓｐ６転写開始部位、ＳｆｉＩ制限酵素部位の順でそれらを有するクローニングベクターである。

２．ランダムプライマーをプライマーとするｃＤＮＡライブラリーの調製
１次ｃＤＮＡクローンの５’末端を優先的に表すために、２次ｃＤＮＡライブラリーを構築した。Ｓｐ６ＲＮＡを１次ライブラリー（上記）から生成し、このＲＮＡを使用し、ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓの試薬（ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＰｌａｓｍｉｄＳｙｓｔｅｍ，上を参照のこと）およびプロトコルを使用して、ランダムプライマーをプライマーとするｃＤＮＡライブラリーをベクターｐＳＳＴ−ＡＭＹ．０に構築した。この手順において、二本鎖ｃＤＮＡを、５００〜１０００ｂｐに分離し、ＮｏｔＩアダプターに平滑末端でリンカー付加し、ＳｆｉＩで切断し、そしてＳｆｉＩ／ＮｏｔＩで切断されたベクターにクローニングした。ｐＳＳＴ−ＡＭＹ．０は、ｃＤＮＡクローニング部位およびマウスアミラーゼ配列の前に酵母アルコールデヒドロゲナーゼプロモーター（分泌シグナルなしの成熟配列）、続いて、クローニング部位の後に酵母アルコールデヒドロゲナーゼターミネーターを有するクローニングベクターである。このようにして、アミラーゼ配列とインフレームで融合されたこのベクターにクローニングされたｃＤＮＡは、適切にトランスフェクトされた酵母コロニーからアミラーゼを分泌するようになる。

３．形質転換および検出
上の段落２に記載したライブラリー由来のＤＮＡを氷上で冷やし、エレクトロコンピテントＤＨ１０Ｂ細菌（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，２０ｍＬ）に加えた。次いで細菌およびベクター混合物を、製造者によって推奨されているように電気穿孔処理した。続いて、ＳＯＣ培地（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，１ｍＬ）を加えて、混合物を３７℃で３０分間インキュベートした。次いで、形質転換体をアンピシリンを含む標準的な１５０ｍｍＬＢプレート２０枚に播き、１６時間インキュベートした（３７℃）。陽性のコロニーをプレートから拾い、そのＤＮＡを標準的なプロトコル、例えば、ＣｓＣｌ勾配を使用して細菌のペレットから単離した。次いで、精製されたＤＮＡを以下の酵母プロトコルに用いた。

酵母法は、３つのカテゴリーに分けられる：（１）プラスミド／ｃＤＮＡ結合ベクターによる酵母の形質転換；（２）アミラーゼを分泌する酵母クローンの検出および単離；ならびに（３）酵母コロニーからの直接の挿入断片のＰＣＲ増幅ならびに配列決定およびさらなる解析のためのそのＤＮＡの精製。

使用した酵母株は、ＨＤ５６−５Ａ（ＡＴＣＣ−９０７８５）であった。この株は、以下の遺伝子型：ＭＡＴアルファ、ｕｒａ３−５２、ｌｅｕ２−３、ｌｅｕ２−１１２、ｈｉｓ３−１１、ｈｉｓ３−１５、ＭＡＬ^＋、ＳＵＣ^＋、ＧＡＬ^＋を有する。好ましくは、翻訳後経路を欠く酵母変異体が、使用され得る。このような変異体は、ｓｅｃ７１、ｓｅｃ７２、ｓｅｃ６２において転座不全（ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｄｅｆｉｃｉｅｎｔ）対立遺伝子を有し得、切断されたｓｅｃ７１が最も好ましい。あるいは、これらの遺伝子の正常な作用を干渉するアンタゴニスト（アンチセンスヌクレオチドおよび／またはリガンドを含む）、この翻訳後経路に関連する他のタンパク質（例えば、ＳＥＣ６１ｐ、ＳＥＣ７２ｐ、ＳＥＣ６２ｐ、ＳＥＣ６３ｐ、ＴＤＪ１ｐまたはＳＳＡ１ｐ−４ｐ）またはこれらのタンパク質の複合体形成物もまた、好ましくは、アミラーゼを発現する酵母と組み合わせて使用され得る。

形質転換は、Ｇｉｅｔｚｅｔａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ．Ｒｅｓ．，２０：１４２５（１９９２）によって概説されているプロトコルに基づいて行われた。次いで、形質転換された細胞を寒天からＹＥＰＤ複合培地ブロス（１００ｍＬ）に接種し、３０℃で一晩生育した。ＹＥＰＤブロスを、Ｋａｉｓｅｒｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＹｅａｓｔＧｅｎｅｔｉｃｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＰｒｅｓｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，ＮＹ，ｐ．２０７（１９９４）に記載されているように調製した。次いで、一晩培養したものを、新鮮ＹＥＰＤブロス（５００ｍＬ）に約２×１０^６細胞／ｍＬ（およそＯＤ_６００＝０．１）に希釈し、１×１０^７細胞／ｍＬ（およそＯＤ_６００＝０．４〜０．５）まで再び生育した。

次いで、細胞を回収し、形質転換に向けて調製し、ＧＳ３ローター瓶に移し、ＳｏｒｖａｌＧＳ３ローターにて５，０００ｒｐｍで５分間、遠心分離し、上清を廃棄し、次いで、滅菌水に再懸濁し、ＢｅｃｋｍａｎＧＳ−６ＫＲ遠心機において、５０ｍＬファルコンチューブにて３，５００ｒｐｍで再度遠心分離した。その上清を廃棄し、続いて細胞をＬｉＡｃ／ＴＥ（１０ｍＬ，１０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ，１ｍＭＥＤＴＡｐＨ７．５，１００ｍＭＬｉ_２ＯＯＣＣＨ_３）で洗浄し、ＬｉＡｃ／ＴＥ（２．５ｍＬ）に再懸濁した。

微量遠心チューブ内で、調製した細胞（１００μＬ）と、新たに変性された一本鎖サケ精巣ＤＮＡ（ＬｏｆｓｔｒａｎｄＬａｂｓ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）と形質転換ＤＮＡ（１μｇ、１０μＬ未満の体積）とを混合することによって形質転換を起こした。混合物をボルテックスにより手短に混合し、次いで、４０％ＰＥＧ／ＴＥ（６００μＬ，４０％ポリエチレングリコール−４０００，１０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ，１ｍＭＥＤＴＡ，１００ｍＭＬｉ_２ＯＯＣＣＨ_３，ｐＨ７．５）を加えた。この混合物を穏やかに混合し、３０分間、撹拌しながら３０℃でインキュベートした。次いで、細胞を１５分間、４２℃の熱ショックにかけ、反応容器を１２，０００ｒｐｍで５〜１０秒間微量遠心し、デカントし、そしてＴＥ（５００μＬ，１０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ，１ｍＭＥＤＴＡｐＨ７．５）に再懸濁した後、再度遠心分離した。次いで、細胞をＴＥ（１ｍＬ）に希釈し、アリコート（２００μＬ）を、１５０ｍｍ増殖プレート（ＶＷＲ）に予め調製された選択培地に播いた。

あるいは、多数の少量反応の代わりに、形質転換を、単一の大規模反応を使用して実施し、ここで試薬の量は、それに合うようにスケールアップした。

使用した選択培地は、Ｋａｉｓｅｒｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＹｅａｓｔＧｅｎｅｔｉｃｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＰｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ
ＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，ＮＹ，ｐ．２０８−２１０（１９９４）に記載されているように調製されたウラシルを欠く合成完全デキストロース寒天（ＳＣＤ−Ｕｒａ）であった。形質転換体を、３０℃にて２〜３日間生育した。

アミラーゼを分泌するコロニーの検出を、選択増殖培地中に赤デンプン（ｒｅｄｓｔａｒｃｈ）を含ませることによって行った。Ｂｉｅｌｙｅｔａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１７２：１７６−１７９（１９８８）によって報告されている手順により、デンプンを赤色色素（ＲｅａｃｔｉｖｅＲｅｄ−１２０，Ｓｉｇｍａ）に結合させた。結合したデンプンを、最終濃度０．１５％（ｗ／ｖ）でＳＣＤ−Ｕｒａ寒天プレートに取り込ませ、リン酸カリウムを用いてｐＨ７．０（５０〜１００ｍＭの最終濃度）まで緩衝した。

十分に分離し、同定可能な単一のコロニーを得るために、陽性のコロニーを拾い、新鮮選択培地（１５０ｍｍプレート上）に画線した。アミラーゼ分泌が陽性の十分に分離した単一のコロニーを、緩衝ＳＣＤ−Ｕｒａ寒天に赤デンプンを直接取り込むことによって検出した。陽性のコロニーを、デンプンを分解して、陽性のコロニーの周辺に直接可視化されるクリアなハローを生じる能力によって判定した。

４．ＰＣＲ増幅によるＤＮＡの単離
陽性のコロニーを単離したら、その一部をつま楊枝で拾い、９６ウェルプレート内の滅菌水（３０μＬ）に希釈した。このとき、陽性のコロニーを、凍結して次の解析のために保存するか、またはすぐに増幅した。細胞のアリコート（５μＬ）を、２５μＬ容量中、以下：０．５μＬのＫｌｅｎｔａｑ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）；４．０μＬの１０ｍＭｄＮＴＰ’ｓ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ−Ｃｅｔｕｓ）；２．５μＬのＫｅｎｔａｑ緩衝液（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）；０．２５μＬの順方向オリゴ１；０．２５μＬの逆方向オリゴ２；１２．５μＬの蒸留水を含むＰＣＲ反応用の鋳型として使用した。順方向オリゴヌクレオチド１の配列は：
５’−ＴＧＴＡＡＡＡＣＧＡＣＧＧＣＣＡＧＴＴＡＡＡＴＡＧＡＣＣＴＧＣＡＡＴＴＡＴＴＡＡＴＣＴ−３’（配列番号：１０７）
逆方向オリゴヌクレオチド２の配列は：
５’−ＣＡＧＧＡＡＡＣＡＧＣＴＡＴＧＡＣＣＡＣＣＴＧＣＡＣＡＣＣＴＧＣＡＡＡＴＣＣＡＴＴ−３’（配列番号：１０８）
であった。
次いで、ＰＣＲを以下のとおりに行った：
ａ．変性９２℃、５分
ｂ．変性９２℃、３０秒
アニーリング５９℃、３０秒
伸長７２℃、６０秒を３サイクル
ｃ．変性９２℃、３０秒
アニーリング５７℃、３０秒
伸長７２℃、６０秒を３サイクル
ｄ．変性９２℃，３０秒
アニーリング５５℃，３０秒
伸長７２℃，６０秒を２５サイクル
ｅ．４℃保持
オリゴヌクレオチドの下線を引いた領域を、それぞれ、ＡＤＨプロモーター領域およびアミラーゼ領域にアニーリングさせ、挿入断片が存在しないとき、ベクターｐＳＳＴ−ＡＭＹ．０から３０７ｂｐの領域を増幅した。代表的には、これらのオリゴヌクレオチドの５’末端の最初の１８ヌクレオチドは、配列決定プライマー用のアニーリング部位を含んでいた。したがって、空のベクターからのＰＣＲ反応の総産物は、３４３ｂｐであった。しかしながら、シグナル配列融合ｃＤＮＡは、かなり長いヌクレオチド配列を生じた。

ＰＣＲの後、反応物（５μＬ）のアリコートを、Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，前出に記載されているようなＴｒｉｓ−ホウ酸塩−ＥＤＴＡ（ＴＢＥ）緩衝液系を使用した１％アガロースゲルのアガロースゲル電気泳動にかけた。４００ｂｐより長い単一の強力なＰＣＲ産物を生じたクローンを、９６ＱｉａｑｕｉｃｋＰＣＲ精製カラム（ＱｉａｇｅｎＩｎｃ．，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，ＣＡ）で精製後、ＤＮＡ配列決定によってさらに解析した。

実施例３：シグナルアルゴリズム解析を使用したｃＤＮＡクローンの単離
様々なポリペプチドをコードする核酸配列を、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）によって開発された、ＥＳＴに基づく企業のシグナル配列探索アルゴリズムを適用することによって同定するだけでなく、クラスター化し、公的データベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および／または企業データベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）からＥＳＴフラグメントを構築した。シグナル配列アルゴリズムは、問題の配列または配列フラグメントの５’−末端の第１および必要に応じて
第２のメチオニンコドン（ＡＴＧ）の周辺のＤＮＡヌクレオチドの特徴に基づいて分泌シグナルスコアを計算する。１番目のＡＴＧの後に続くヌクレオチドは、いかなる終止コドンも含まない、少なくとも３５個の明白なアミノ酸をコードしなければならない。１番目のＡＴＧが、必要なアミノ酸を有する場合、２番目のＡＴＧは、試験されない。どちらもが必要条件を満たさない場合、候補配列は、スコア付けされない。ＥＳＴ配列が確実なシグナル配列を含むか否かを判定するために、ＡＴＧコドンの周辺のＤＮＡおよび対応するアミノ酸配列を、分泌シグナルに関連することが知られている７つのセンサー（評価パラメータ）のセットを使用してスコア付けする。アルゴリズムの使用により、数多くのポリペプチドをコードする核酸配列が同定された。

上記の実施例１〜３に記載の技術を用い、数多くの完全長ｃＤＮＡクローンが、本明細書中に開示したＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードすると同定された。次いで、これらのｃＤＮＡを、以下の表７に示すように、ブダペスト条約に従ってＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，１０８０１ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＢｌｖｄ．，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ２０１１０−２２０９，ＵＳＡ（ＡＴＣＣ）に寄託した。さらに、ＰＲＯ３６００６ポリペプチドをコードするＤＮＡ２２５５４３の配列をＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＦ１７０４８４から同定し；ＰＲＯ１９０４ポリペプチドをコードするＤＮＡ８２３７２の配列をＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＢ００７４５４から同定し；ＰＲＯ３５１９３ポリペプチドをコードするＤＮＡ２２５６８１の配列をＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｄ１４０１２から同定し、ＰＲＯ３４７７８ポリペプチドをコードするＤＮＡ２２０４３２の配列をＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＦ３６９７０８から同定し；ＰＲＯ２０２３３ポリペプチドをコードするＤＮＡ１６５６０８の配列をＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＦ２８６０９５から同定し；ＰＲＯ５７２９０ポリペプチドをコードするＤＮＡ２６９２３８の配列をＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＦ３２６５９１から同定し；ＰＲＯ３８４６５ポリペプチドをコードするＤＮＡ２２８００２の配列をＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＦ４１２４０９から同定し；ＰＲＯ３８６８３ポリペプチドをコードするＤＮＡ２２８１９９の配列をＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＫ０２４３６５から同定し；そしてＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするＤＮＡ３２９６３２の配列をＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＦ４７９２６０から同定した。

特許手続上の微生物の寄託の国際承認に関するブダペスト条約（ブダペスト条約）の規定に基づいてこれらの寄託を行った。これは、寄託日から３０年間、寄託物の生存可能な培養物の維持を保証するものである。寄託物は、ブダペスト条約の規定に基づいてＧｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．とＡＴＣＣとの合意に従い、ＡＴＣＣから入手可能であり、これは、どれが最初であろうとも、関連の米国特許の発行時または任意の米国または外国の特許出願の公開時に、寄託培養物の子孫が永久かつ無制限に入手可能であることを保証し、米国特許法第１２２条およびそれに従う特許庁長官規則（特に参照番号８８６ＯＧ６３８の３７ＣＦＲ第１．１４条を含む）に従って権利を有すると米国商標特許庁長官が決定した者に子孫を入手可能とすることを保証するものである。

本出願の譲受人は、適当な条件下で培養されていたときに、寄託された材料の培養物が、死滅または損失または破壊された場合、通知時に、その材料が迅速に同一の別のものに置き換えられることに同意する。寄託された材料の入手可能性は、特許法に従いあらゆる政府の権限下で認められた権利に違反して、本発明を実施するライセンスであるとみなされるものではない。

実施例４：ヒトＰＲＯ２２６ポリペプチド［ＵＮＱ２００］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
コンセンサスＤＮＡ配列を、上の実施例１に記載したように他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。
ＥＧＦ様ホモログをコードするこの構築されたコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ２８７４４と特定する。
そのＤＮＡ２８７４４コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ２２６についての完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー（２８７４４．ｆ）（ＯＬＩ５５６）：
５’−ＡＴＴＣＴＧＣＧＴＧＡＡＣＡＣＴＧＡＧＧＧＣ−３’
（配列番号：１０９）
逆方向ＰＣＲプライマー（２８７４４．ｒ）（ＯＬＩ５５７）：
５’−ＡＴＣＴＧＣＴＴＧＴＡＧＣＣＣＴＣＧＧＣＡＣ−３’
（配列番号：１１０）
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ２８７４４配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ（２８７４４．ｐ）（ＯＬＩ５５５）：
５’−ＣＣＴＧＧＣＴＡＴＣＡＧＣＡＧＧＴＧＧＧＣＴＣＣＡＡＧＴＧＴＣＴＣＧＡＴＧＴＧＧＡＴＧＡＧＴＧＴＧＡ−３’ （配列番号：１１１）
完全長クローンの起源についていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、下で同定されるＰＣＲプライマーを用いたＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの一方を使用して、ＰＲＯ２２６遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児肺組織から単離した。

上記のようにして単離された単離されたクローンのＤＮＡ配列決定により、ＤＮＡ３３４６０−１１６６の完全長ＤＮＡ配列［図１、配列番号：１］；およびＰＲＯ２２６の誘導タンパク質配列が得られた。

ＤＮＡ３３４６０−１１６６の全コード配列を、図１（配列番号：１）に示す。クローンＤＮＡ３３４６０−１１６６は、ヌクレオチド６２−６４位の明らかな翻訳開始部位およびヌクレオチド１３９１−１３９３位の明らかな終止コドンを有する単一のオープンリーディングフレームを含む。予測されるポリペプチド前駆体は４４３アミノ酸長である。図２（配列番号２）に示す完全長ＰＲＯ２２６配列の解析により、さまざまな重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。図２に示す完全長ＰＲＯ２２６ポリペプチドの解析により、以下：ほぼアミノ酸１〜ほぼアミノ酸２５にシグナルペプチド；ほぼアミノ酸１９８〜ほぼアミノ酸２０２およびほぼアミノ酸３９４〜ほぼアミノ酸３９８にＮ−グリコシル化部位；ほぼアミノ酸７６〜ほぼアミノ酸８２、ほぼアミノ酸１４５〜ほぼアミノ酸１５１、ほぼアミノ酸１８２〜ほぼアミノ酸１８８、ほぼアミノ酸２２２〜ほぼアミノ酸２２８、ほぼアミノ酸２９０〜ほぼアミノ酸２９６、ほぼアミノ酸３０５〜ほぼアミノ酸３１１、ほぼアミノ酸３７１〜ほぼアミノ酸３７７およびほぼアミノ酸３８１〜ほぼアミノ酸３８７にＮ−ミリストイル化部位；ならびにほぼアミノ酸１４０〜ほぼアミノ酸１５２、ほぼアミノ酸１７７〜ほぼアミノ酸１８９、ほぼアミノ酸２１７〜ほぼアミノ酸２２９，およびほぼアミノ酸２５８〜ほぼアミノ酸２７０にアスパラギン酸およびアスパラギンヒドロキシル化部位の存在が証明された。クローンＤＮＡ３３４６０〜１１６６は、１９９７年１０月１６日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０９３７６が割り当てられている。

図２（配列番号：２）に示す完全長ＰＲＯ２２６配列のＢＬＡＳＴおよびＦａｓｔＡ配列アラインメント解析に基づき、ＥＧＦ様ホモログＤＮＡ３３４６０−１１６６は、ＨＴタンパク質および／またはフィブリンとアミノ酸配列同一性を示す（それぞれ、４９％および３８％）。

実施例５：ヒトＰＲＯ２５７ポリペプチド［ＵＮＱ２２４］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
コンセンサスＤＮＡ配列を、上の実施例１に記載したようにｐｈｒａｐを使用して他のＥＳＴ配列に関して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ２８７３１と
命名する。ＤＮＡ２８７３１コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ２５７についての完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。

ＰＣＲプライマーの対（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：
５’−ＴＣＴＣＴＡＴＴＣＣＡＡＡＣＴＧＴＧＧＣＧ−３’（配列番号：１１２）
逆方向ＰＣＲプライマー：
５’−ＴＴＴＧＡＴＧＡＣＧＡＴＴＣＧＡＡＧＧＴＧＧ−３’（配列番号：１１３）
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するＤＮＡ２８７３１コンセンサス配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＧＧＡＡＧＧＡＴＣＣＴＴＣＡＣＣＡＧＣＣＣＣＡＡＴＴＡＣＣＣＡＡＡＧＣＣＧＣＡＴＣＣＴＧＡＧＣ−３’（配列番号：１１４）
完全長クローンの起源についていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、上で同定されたＰＣＲプライマーを用いたＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの一方を使用して、ＰＲＯ２５７遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児腎臓組織から単離した。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、ＰＲＯ２５７［本明細書中でＤＮＡ３５８４１−１１７３と命名する（図３；配列番号３）］に対する完全長ＤＮＡ配列およびＰＲＯ２５７に対して誘導タンパク質配列が得られた。

ＤＮＡ３５８４１−１１７３のヌクレオチド配列全体を図３（配列番号３）に示す。クローンＤＮＡ３５８４１−１１７３は、ヌクレオチド９６４−９６６位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド２７８５−２７８７位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図３）。予測されるポリペプチド前駆体は、６０７アミノ酸長である（図４；配列番号４）。クローンＤＮＡ３５８４１−１１７３は、１９９７年１０月１７日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＡＴＣＣ２０９４０３が割り当てられている。

完全長ＰＲＯ２５７ポリペプチドのアミノ酸配列の解析から、その一部分がエブネリンタンパク質に対して有意な相同性を有することが示唆され、それにより、ＰＲＯ２５７は、エブネリンタンパク質と関連する新規なタンパク質構成員であり得ることが示される。

実施例６：ヒトＰＲＯ２６８ポリペプチド［ＵＮＱ２３５］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
コンセンサスＤＮＡ配列を、上の実施例１に記載したように他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ３５６９８と命名する。そのＤＮＡ３５６９８コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ２６８についての完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。

順方向および逆方向ＰＣＲプライマーを合成した：
順方向ＰＣＲプライマー１：
５’−ＴＧＡＧＧＴＧＧＧＣＡＡＧＣＧＧＣＧＡＡＡＴＧ−３’（配列番号：１１５）
順方向ＰＣＲプライマー２：
５’−ＴＡＴＧＴＧＧＡＴＣＡＧＧＡＣＧＴＧＣＣ−３’（配列番号：１１６）
順方向ＰＣＲプライマー３：
５’−ＴＧＣＡＧＧＧＴＴＣＡＧＴＣＴＡＧＡＴＴＧ−３’（配列番号：１１７）
逆方向ＰＣＲプライマー：
５’−ＴＴＧＡＡＧＧＡＣＡＡＡＧＧＣＡＡＴＣＴＧＣＣＡＣ−３’（配列番号：１１８）
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ３５６９８配列から構築した：ハイブリダイゼーションプローブ
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＧＧＡＧＴＣＴＴＧＣＡＧＴＴＣＣＣＣＴＧＧＣＡＧＴＣＣＴＧＧＴＧＣＴＧＴＴＧＣＴＴＴＧＧＧ−３’（配列番号：１１９）
完全長クローンの起源についていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、上で同定されたＰＣＲプライマーを用いたＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの一方を使用して、ＰＲＯ２６８遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児肺組織から単離した。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、ＰＲＯ２６８［本明細書中でＤＮＡ３０４２７−１１７９と命名する］（配列番号５）に対する完全長ＤＮＡ配列およびＰＲＯ２６８に対して誘導タンパク質配列が得られた。

ＤＮＡ３９４２７−１１７９のヌクレオチド配列全体を図５（配列番号５）に示す。クローンＤＮＡ３９４２７−１１７９は、ヌクレオチド１３−１５位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド８５３−８５５位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図５）。予測されるポリペプチド前駆体は、２８０アミノ酸長である（図６；配列番号６）。クローンＤＮＡ３９４２７−１１７９）は、１９９７年１０月１７日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＡＴＣＣ２０９３９５が割り当てられている。

完全長ＰＲＯ２６８ポリペプチドのアミノ酸配列の解析から、これがタンパク質ジスルフィドイソメラーゼと有意な相同性を有することが示唆され、それにより、ＰＲＯ２６８が新規なタンパク質ジスルフィドイソメラーゼであり得ることが示される。

実施例７：ヒトＰＲＯ２９０ポリペプチド［ＵＮＱ２５３］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
発現配列タグ（ＥＳＴ）ＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を検索し、ベージュおよびＦＡＮとの相同性を示したＥＳＴを同定した。
次いで、同定されたＥＳＴ配列に基づくオリゴヌクレオチドプローブ合成し、完全長ｃＤＮＡクローンを同定する試みにおいてヒト胎児腎臓ｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングするために使用した。オリゴヌクレオチドプローブは、以下の配列：
５’ＴＧＡＣＴＧＣＡＣＴＡＣＣＣＣＧＴＧＧＣＡＡＧＣＴＧＴＴＧＡＧＣＣＡＧＣＴＣＡＧＣＴＧ３’（配列番号：１２０）
を有した。

ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児副腎組織から単離した。ヒトＰＲＯ２９０をコードするｃＤＮＡクローンを単離するために使用したｃＤＮＡライブラリーは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡの試薬などの市販の試薬を使用して標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡを、ＮｏｔＩ部位を含むオリゴｄＴをプライマーとして増幅し、ＳａｌＩ半リン酸化（ｈｅｍｉｋｉｎａｓｅｄ）アダプターに平滑末端で連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適切にサイズ分離し、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）に所定の方向で独特のＸｈｏＩおよびＮｏｔＩにおいてクローニングした。

ｃＤＮＡクローンを同定し、全体を配列決定した。ＤＮＡ３５６８０−１２１２のヌクレオチド配列全体を図７（配列番号７）に示す。クローンＤＮＡ３５６８０−１２１２は、ヌクレオチド２９３−２９５位の明らかな翻訳開始部位およびヌクレオチド３３０２−３３０４位の終止コドンを有する単一のオープンリーディングフレームを含む（図７；配列番号：７）。予測されるポリペプチド前駆体は、１００３アミノ酸長である（図８；配列番号８）。

現在、ＰＲＯ２９０ポリペプチドはＦＡＮおよび／またはベージュと関連していると考えられている。クローンＤＮＡ３５６８０−１２１２は、１９９８年４月２１日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０９７９０が割り当てられている。寄託されたクローンは、本明細書に示した説明的なものではなく、実際には正確な配列を有することを理解されたい。図８に示される完全長ＰＲＯ２９０タンパク質は、推定分子量が約１１２，０１３ダルトン、ｐＩが約６．４である。

実施例８：ヒトＰＲＯ３６３ポリペプチド［ＵＮＱ３１８］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上記の実施例１に記載のさまざまなＥＳＴ配列に対するコンセンサス配列を得た。ここで、得られたコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ４２８２８と命名する。そのＤＮＡ４２８２８コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ３６３に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。

ＰＣＲプライマー対（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー（４２８２８．ｆｌ）：５’−ＣＣＡＧＴＧＣＡＣＡＧＣＡＧＧＣＡＡＣＧＡＡＧＣ−３’（配列番号：１２１）
逆方向ＰＣＲプライマー（４２８２８．ｒｌ）：
５’−ＡＣＴＡＧＧＣＴＧＴＡＴＧＣＣＴＧＧＧＴＧＧＧＣ−３’（配列番号：１２２）さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ４２８２８配列から構築した
ハイブリダイゼーションプローブ（４２８２８．ｐ１）
５’−ＧＴＡＴＧＴＡＣＡＡＡＧＣＡＴＣＧＧＣＡＴＧＧＴＴＧＣＡＧＧＡＧＣＡＧＴＧＡＣＡＧＧＣ−３’（配列番号：１２３）
完全長クローンの起源についていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、上で同定されたＰＣＲプライマー対を用いたＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの一方を使用して、ＰＲＯ３６３遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児腎臓組織から単離した（ＬＩＢ２２７）。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、ＰＲＯ３６３［本明細書中でＵＮＱ３１８（ＤＮＡ４５４１９−１２５２）と命名する］（配列番号１１）に対する完全長ＤＮＡ配列およびＰＲＯ３６３に対して誘導タンパク質配列が得られた。

ＵＮＱ３１８（ＤＮＡ４５４１９−１２５２）のヌクレオチド配列全体を図１１（配列番号１１）に示す。クローンＵＮＱ３１８（ＤＮＡ４５４１９−１２５２）は、ヌクレオチド１９０−１９２位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１３０９−１３１１位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図１１）。予測されるポリペプチド前駆体は、３７３アミノ酸長である（図１２）。図１２に示される完全長ＰＲＯ３６３タンパク質は、推定分子量が約４１，２８１ダルトン、ｐＩが約８．３３である。膜貫通ドメインが、図１２（配列番号：１２）に示すアミノ酸配列のアミノ酸２２１〜２５４に存在する。ＰＲＯ３６３ポリペプチドはまた、ほぼアミノ酸１５〜５６およびほぼアミノ酸８７〜１１６の少なくとも２つのミエリンＰ０タンパク質ドメインを有する。クローンＵＮＱ３１８（ＤＮＡ４５４１９−１２５２）は、１９９８年２月５日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０９６１６が割り当てられている。

完全長ＰＲＯ３６３ポリペプチドのアミノ酸配列の解析から、これが細胞表面タンパク質ＨＣＡＲと有意な配列類似性を有することが示唆され、それにより、ＰＲＯ３６３が新規なＨＣＡＲホモログであり得ることが示される。より詳しくは、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ３６３アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列ＨＳ４６ＫＤＡ＿１、ＨＳＵ９０７１６＿１、ＭＭＣＡＲＨ＿１、ＭＣＡＲＨＯＭ＿１、ＭＭＵ９０７１５＿１、Ａ３３＿ＨＵＭＡＮ、Ｐ＿Ｗ１４１４６、Ｐ＿Ｗ１４１５８、Ａ４２６３２およびＢ４２６３２との間の有意な相同性が証明された。

実施例９：ヒトＰＲＯ３６５ポリペプチド［ＵＮＱ３２０］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
コンセンサスＤＮＡ配列を、上の実施例１に記載したように他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ３５６１３と命名する。そのＤＮＡ３５６１３コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ３６５に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。

順方向および逆方向ＰＣＲプライマーを以下のように合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：
５’−ＡＡＴＧＴＧＡＣＣＡＣＴＧＧＡＣＴＣＣＣ−３’
（配列番号：１２４）
順方向ＰＣＲプライマー：
５’−ＡＧＧＣＴＴＧＧＡＡＣＴＣＣＣＴＴＣ−３’
（配列番号：１２５）
逆方向ＰＣＲプライマー：
５’−ＡＡＧＡＴＴＣＴＴＧＡＧＣＧＡＴＴＣＣＡＧＣＴＧ−３’
（配列番号：１２６）
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ３５６１３配列から構築した：ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＡＡＴＣＣＣＴＧＣＴＣＴＴＣＡＴＧＧＴＧＡＣＣＴＡＴＧＡＣＧＡＣＧＧＡＡＧＣＡＣＡＡＧＡＣＴＧ−３’
（配列番号：１２７）
完全長クローンの起源についていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、上で同定されたＰＣＲプライマー対の一方を用いたＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの一方を使用して、ＰＲＯ３６５遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児腎臓組織から単離した。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、ＰＲＯ３６５［本明細書中でＤＮＡ４６７７７−１２５３と命名する］（配列番号１３）に対する完全長ＤＮＡ配列およびＰＲＯ３６５に対して誘導タンパク質配列が得られた。

ＤＮＡ４６７７７−１２５３）のヌクレオチド配列全体を図１３（配列番号１３）に示す。クローンＤＮＡ４６７７７−１２５３）は、ヌクレオチド１５−１７位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド７２０−７２２位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図１３）。予測されるポリペプチド前駆体は、２３５アミノ酸長である（図１４；配列番号１４）。クローンＤＮＡ４６７７７−１２５３にコードされるポリペプチド配列の重要な領域が同定され、これは、図１４に示すように、以下：アミノ酸１−２０に相当するシグナルペプチド、アミノ酸２１に相当する成熟タンパク質の開始点および多能性Ｎ−グリコシル化部位を含む。クローンＤＮＡ４６７７７−１２５３は、１９９８年２月５日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＡＴＣＣ２０９６１９が割り当てられている。

完全長ＰＲＯ３６５ポリペプチドのアミノ酸配列の解析から、その一部分がヒト２−１９タンパク質に対して有意な相同性を有することが示唆され、それにより、ＰＲＯ３６５は、新規なヒト２−１９タンパク質ホモログであり得ることが示される。

実施例１０：ヒトＰＲＯ３８２ポリペプチド［ＵＮＱ３２３］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上記の実施例１に記載のさまざまなＥＳＴ配列に対するコンセンサス配列を得た。ここで、得られたコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ３０８９２と命名する。そのＤＮＡ３０８９２コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ３８２に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。

ＰＣＲプライマー対（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：
５’−ＴＧＡＣＡＴＣＧＣＣＣＴＴＡＴＧＡＡＧＣＴＧＧＣ−３’（配列番号：１２８）逆方向ＰＣＲプライマー：
５’−ＴＡＣＡＣＧＴＣＣＣＴＧＴＧＧＴＴＧＣＡＧＡＴＣ−３’（配列番号：１２９）さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ３０８９２配列から構築した
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＣＧＴＴＣＡＡＴＧＣＡＧＡＡＡＴＧＡＴＣＣＡＧＣＣＴＧＴＧＴＧＣＣＴＧＣＣＣＡＡＣＴＣＴＧＡＡＧＡＧ−３’（配列番号：１３０）
完全長クローンの起源についていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、上で同定されたＰＣＲプライマー対を用いたＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの一方を使用して、ＰＲＯ３８２遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児腎臓組
織から単離した（ＬＩＢ２２７）。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、ＰＲＯ３８２［本明細書中でＵＮＱ３２３（ＤＮＡ４５２３４−１２７７）と命名する］（配列番号１５）に対する完全長ＤＮＡ配列およびＰＲＯ３８２に対して誘導タンパク質配列が得られた。

ＵＮＱ３２３（ＤＮＡ４５２３４−１２７７）のヌクレオチド配列全体を図１５（配列番号１５）に示す。クローンＵＮＱ３２３（ＤＮＡ４５２３４−１２７７）は、ヌクレオチド１２６−１２８位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１４８５−１４８７位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図１５）。予測されるポリペプチド前駆体は、４５３アミノ酸長である（図１６；配列番号１６）。図１６に示される完全長ＰＲＯ３８２タンパク質は、推定分子量が約４９，３３４ダルトン、ｐＩが約６．３２である。図１６（配列番号：１６）に示す天然ＰＲＯ３８２のアミノ酸配列の解析により、ほぼアミノ酸２４０〜ほぼアミノ酸２８４に推定膜貫通ドメイン、ほぼアミノ酸１〜ほぼアミノ酸２０に推定シグナルペプチド、ほぼアミノ酸３８６〜ほぼアミノ酸４１９に推定アップル（ａｐｐｌｅ）ドメイン、ほぼアミノ酸３９４〜ほぼアミノ酸４０６に推定Ｋｒｉｎｇｌｅドメインおよびほぼアミノ酸２５３〜ほぼアミノ酸２５８にヒスチジン含有プロテアーゼ活性部位の存在が示される。クローンＵＮＱ３２３（ＤＮＡ４５２３４−１２７７）は、１９９８年３月５日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０９６５４が割り当てられている。

完全長ＰＲＯ３８２ポリペプチドのアミノ酸配列の解析から、これがセリンプロテアーゼタンパク質と有意な相同性を有することが示唆され、それにより、ＰＲＯ３８２は、新規なセリンプロテアーゼであり得ることが示される。具体的には、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ３８２アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列、ＨＳＵ７５３２９＿１、ＥＮＴＫ＿ＭＯＵＳＥ、ＨＥＰＳ＿ＨＵＭＡＮ、ＡＦ０３００６５＿１、ＨＥＰＳ＿ＲＡＴ、ＰＬＭＮ＿ＰＩＧ、Ｐ＿Ｒ８９４３０、Ｐ＿Ｒ８９４３５、ＰＬＭＮ＿ＨＯＲＳＥ、ＰＬＭＮ＿ＢＯＶＩＮおよびＰ＿Ｒ８３９５９との間の有意な相同性が証明された。

実施例１１：ヒトＰＲＯ４４４ポリペプチド［ＵＮＱ３２８］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上記の実施例２に記載のアミラーゼスクリーニングで単離されたｃＤＮＡ配列をＤＮＡ１３１２１と命名した。この配列に対するオリゴヌクレオチドプローブを作製し、上記の実施例２のパラグラフ１に記載のようにして作製したヒト胎児肺ライブラリー（ＬＩＢ２５）をスクリーニングするために使用した。クローニングベクターはｐＲＫ５Ｂ（ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）であり、ｃＤＮＡサイズ排除は２８００ｂｐ未満であった。

同定された完全長クローンは、ヌクレオチド６０８−６１０位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド９５９−９６１位に見られる終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図１７；配列番号１７）。予測されるポリペプチド前駆体は、１１７アミノ酸長であり、その算出分子量は、約１２，６９２ダルトン、推定ｐＩは、約７．５０である。図１８（配列番号：１８）に示す完全長ＰＲＯ４４４配列の解析により、アミノ酸１〜ほぼアミノ酸１６にシグナルペプチドの存在が証明された。Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ４４４アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：
ＣＥＦ４４Ｄ１２＿８、Ｐ＿Ｒ８８４５２、ＹＮＥ１＿ＣＡＥＥＬ、Ａ４７３１２、ＡＦ００９９５７＿１およびＡ０６１３３＿１との間の相同性が証明された。

クローンＤＮＡ２６８４６−１３９７は、１９９８年１０月２７日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３４０６が割り当てられた。

実施例１２：ヒトＰＲＯ７０５ポリペプチド［ＵＮＱ３６９］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上記の実施例１に記載のさまざまなＥＳＴ配列に対するコンセンサス配列を得た。ここで、得られたコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ４３４３７と命名する。そのＤＮＡ４３４３７コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ７０５に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。

ＰＣＲプライマー対（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：５’−ＡＡＧＣＧＴＧＡＣＡＧＣＧＧＧＣＡＣＧＴＣ−３’（配列番号：１３１）
逆方向ＰＣＲプライマー：５’−ＴＧＣＡＣＡＧＴＣＴＣＴＧＣＡＧＴＧＣＣＣＡＧＧ−３’（配列番号：１３２）
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ４３４３７配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ（４３４３７．ｐ１）
５’−ＧＡＡＴＧＣＴＧＧＡＡＣＧＧＧＣＡＣＡＧＣＡＡＡＧＣＣＡＧＡＴＡＣＴＴＧＣＣＴＧ−３’（配列番号：１３３）
完全長クローンの起源についていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、上で同定されたＰＣＲプライマー対を用いたＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの一方を使用して、ＰＲＯ７０５遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児腎臓組織から単離した（ＬＩＢ２２７）。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、ＰＲＯ７０５［本明細書中でＵＮＱ３６９（ＤＮＡ５０９１４−１２８９と命名する）（配列番号１９）に対する完全長ＤＮＡ配列およびＰＲＯ７０５に対して誘導タンパク質配列が得られた。

ＵＮＱ３６９（ＤＮＡ５０９１４−１２８９）のヌクレオチド配列全体を図１９（配列番号１９）に示す。クローンＵＮＱ３６９（ＤＮＡ５０９１４−１２８９）は、ヌクレオチド５６６−５６８位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド２２３１−２２３３位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図１９）。予測されるポリペプチド前駆体は、５５５アミノ酸長である（図２０；配列番号２０）。図２０に示される完全長ＰＲＯ７０５タンパク質は、推定分子量が約６２，７３６ダルトン、ｐＩが約５．３６である。図２０に示す完全長ＰＲＯ７０５配列の解析により、以下：
ほぼアミノ酸１〜ほぼアミノ酸２３にシグナルペプチド、ほぼアミノ酸４１８〜ほぼアミノ酸４３６に真核生物ＤＮＡトポイソメラーゼＩ活性部位、ならびにほぼアミノ酸２３７〜ほぼアミノ酸２７９、ほぼアミノ酸４２１〜ほぼアミノ酸４５８、ほぼアミノ酸５３〜ほぼアミノ酸７４、ほぼアミノ酸４６６〜ほぼアミノ酸５０４、ほぼアミノ酸３０８〜ほぼアミノ酸３５５、ほぼアミノ酸１０４〜ほぼアミノ酸１５６およびほぼアミノ酸３７９〜ほぼアミノ酸４１０に種々のグリピカンタンパク質に対して相同性を示す種々の領域の存在が証明された。クローンＵＮＱ３６９（ＤＮＡ５０９１４−１２８９）は、１９９８年３月３１日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０９７２２が割り当てられている。

完全長ＰＲＯ７０５ポリペプチドのアミノ酸配列の解析から、これがＫ−グリピカンタンパク質と有意な配列類似性を有することが示唆され、それにより、ＰＲＯ７０５は、新規なグリピカンタンパク質ファミリー構成員であり得ることが示される。より詳しくは、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ７０５アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列、ＧＰＣＫ＿ＭＯＵＳＥ、ＧＬＹＰ＿ＣＨＩＣＫ、ＧＬＹＰ＿ＲＡＴ、ＧＬＹＰ＿ＨＵＭＡＮ、ＧＰＣ２＿ＲＡＴ、ＧＰＣ５＿ＨＵＭＡＮ、ＧＰＣ３＿ＨＵＭＡＮ、ＧＰＣ３＿ＲＡＴ、Ｐ＿Ｒ３０１６８およびＣＥＣ０３Ｈ１２＿２との間の有意な相同性が証明された。

実施例１３：ヒトＰＲＯ１０７１ポリペプチド［ＵＮＱ５２８］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上記の実施例１に記載のさまざまなＥＳＴ配列に対するコンセンサス配列を得た。ここで、得られたコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ５３０３５と命名する。ＤＮＡ５３０３５コンセンサス配列に基づき、該コンセンサス配列が、概説すると完全長タンパク質をコードするようであったクローンであるＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号２８７２５６９と有意な配列同一性を共有することが測定された。そのため、ＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号２８７２５６９を購入し、適正な配列が確認されるように、その挿入物を得て配列決定した。この配列を本明細書中でＵＮＱ５２８またはＤＮＡ５８８４７−１３８３と命名する。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、ＰＲＯ１０７１［本明細書中でＵＮＱ５２８（ＤＮＡ５８８４７−１３８３）と命名する］（配列番号２１）に対する完全長ＤＮＡ配列およびＰＲＯ１０７１に対して誘導タンパク質配列が得られた。

ＵＮＱ５２８（ＤＮＡ５８８４７−１３８３）のヌクレオチド配列全体を図２１（配列番号２１）に示す。クローンＵＮＱ５２８（ＤＮＡ５８８４８−１３８３）は、ヌクレオチド１３３−１３５位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１７０８−１７１０位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図２１）。予測されるポリペプチド前駆体は、５２５アミノ酸長である（図２２；配列番号２２）。図２２に示される完全長ＰＲＯ１０７１タンパク質は、推定分子量が約５８，４１６ダルトン、ｐＩが約６．６２である。図２２（配列番号２２）に示す完全長ＰＲＯ１０７１配列の解析により、以下：
ほぼアミノ酸１〜ほぼアミノ酸２５のシグナルペプチド、ほぼアミノ酸２５１〜ほぼアミノ酸２５４の潜在的Ｎ−グリコシル化部位、ほぼアミノ酸３８５〜ほぼアミノ酸３９９のトロンボスポンジン−１相同性ブロックならびにほぼアミノ酸３８５〜ほぼアミノ酸３９９、ほぼアミノ酸４４５〜ほぼアミノ酸４５９およびほぼアミノ酸４２〜ほぼアミノ酸５６のフォンビルブラント因子Ｃ型相同性ブロックの存在が証明された。クローンＵＮＱ５２８（ＤＮＡ５８８４７−１３８３）は、１９９８年５月２０日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０９８７９が割り当てられている。

完全長ＰＲＯ１０７１ポリペプチドのアミノ酸配列の解析から、これが、トロンボスポンジンタンパク質と有意な配列類似性を有することが示唆され、それにより、ＰＲＯ１０７１は新規なトロンボスポンジンホモログであり得ることが示される。より詳しくは、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１０７１アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列、ＡＢ００２３６４＿１、Ｄ６７０７６＿１、ＢＴＰＣＩＮＰＧＮ＿１、ＣＥＴ１３Ｈ１０＿１、ＣＥＦ２５Ｈ８＿５、ＣＥＦ５３Ｂ６＿２、ＣＥＣ２６Ｃ６＿６、ＨＳＳＥＭＧ＿１、ＣＥＴ２１Ｂ６＿４およびＢＴＹ０８５６１＿１との間の有意な相同性が証明された。

実施例１４：ヒトＰＲＯ１１２５ポリペプチド［ＵＮＱ５６３］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上の実施例３に記載したシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、Ｉｎｃｙｔｅデータベースから単一のＥＳＴクラスター配列が同定できた。次いで、そのＥＳＴクラスター配列を、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴ
ＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較することにより、存在する相同性を同定した。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ５６５４０と命名する。

ＤＮＡ５６５４０コンセンサス配列とＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号１４８６１１４内に包含されるＥＳＴ配列との間で観察された配列相同性に鑑みて、そのＩｎｃｙｔｅ
ＥＳＴクローン１４８６１１４を購入し、そのｃＤＮＡ挿入断片を得て、配列決定した。この挿入断片が、完全長タンパク質をコードしていることが見出された。このｃＤＮＡ挿入断片の配列を図２３に示し、本明細書中でＤＮＡ６０６１５−１４８２と命名する。

図２３に示す完全長クローンは、ヌクレオチド４７−４９位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１３８８−１３９０位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図２３；配列番号２３）。予測されるポリペプチド前駆体（図２４，配列番号２４）は、４４７アミノ酸長である。ＰＲＯ１１２５は、算出分子量が約４９，７９８ダルトン、推定ｐＩが約９．７８である。クローンＤＮＡ６０６１９−１４８２は、１９９８年６月１６日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０９９９３が割り当てられている。該クローンは実際の配列を有するものであること、および該配列は、本明細書では、軽微なエラーを生じる傾向にあり得る現在の技術に基づく説明的なものであることを理解されたい。

完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析（ＡＬＩＧＮコンピュータプログラム）に基づき、ＰＲＯ１１２５は、以下のＤａｙｈｏｆｆ命名配列：
ＲＣＯ１＿ＮＥＵＣＲ；Ｓ５８３０６；ＰＫＷＡ＿ＴＨＥＣＵ；Ｓ７６０８６；Ｐ＿Ｒ８５８８１；ＨＥＴ１＿ＰＯＤＡＮ；ＳＰＵ９２７９２＿１；ＡＰＡＦ＿ＨＵＭＡＮ；Ｓ７６４１４およびＳ５９３１７
といくらかの配列同一性を示す。

実施例１５：ヒトＰＲＯ１１３４ポリペプチド［ＵＮＱ５７２］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上の実施例３に記載したシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、ＩｎｃｙｔｅデータベースからＥＳＴクラスター配列（７５１１と命名）が同定できた。次いで、そのＥＳＴクラスター配列を、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較することにより、存在する相同性を同定した。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９
６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ５５７２５と命名する。２つの企業ＧｅｎｅｎｔｅｃｈＥＳＴ配列を構築に使用した。

ＤＮＡ５５７２５コンセンサス配列とＭｅｒｃｋＥＳＴクローン番号Ｈ９４８９７内に包含されるＥＳＴ配列との間で観察された配列相同性に鑑みて、そのＭｅｒｃｋＥＳＴクローンＨ９４８９７を購入し、そのｃＤＮＡ挿入断片を得て、配列決定した。この挿入断片が、完全長タンパク質をコードしていることが見出された。このｃＤＮＡ挿入断片の配列を図２５に示し、本明細書中でＤＮＡ５６８６５−１４９１と命名する。

クローンＤＮＡ５６８６５−１４９１）は、ヌクレオチド１５３−１５５位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１２６６−１２６８位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図２５；配列番号２５）。予測されるポリペプチド前駆体は、３７１アミノ酸長である（図２６；配列番号２６）。図２６に示される完全長ＰＲＯ１１３４タンパク質は、推定分子量が約４１，９３５ダルトン、ｐＩが約９．５８である。図２６（配列番号２６）に示す完全長ＰＲＯ１１３４配列の解析により、以下：
ほぼアミノ酸１〜ほぼアミノ酸２３にシグナルペプチド、ほぼアミノ酸１０３〜ほぼアミノ酸１０６、ほぼアミノ酸２４９〜ほぼアミノ酸２５２およびほぼアミノ酸２５７〜ほぼアミノ酸２６０に潜在的Ｎ−グリコシル化部位ならびにほぼアミノ酸２８０〜ほぼアミノ酸３０６にチロシナーゼＣｕＡ−結合領域タンパク質に対して相同性を有するアミノ酸ブロックの存在が証明された。クローンＤＮＡ５６８６５−１４９１は、１９９８年６月２３日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３０２２が割り当てられている。

図２６（配列番号２６）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１１３４アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｆ２０Ｐ５＿１８、ＡＣ００２３９６＿１０、Ｓ４７８４７、Ｃ６４１４６、ＧＳＰＡ＿ＢＡＣＳＵ、Ｐ＿Ｗ１０５６４、ＲＦＡＩ＿ＥＣＯＬＩ、Ｙ２５８＿ＨＡＥＩＮ、ＲＦＡＪ＿ＳＡＬＴＹおよびＰ＿Ｒ３２９８５との間の有意な相同性が明らかになった。

実施例１６：ヒトＰＲＯ１１５５ポリペプチド［ＵＮＱ５８５］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上の実施例３に記載したシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、Ｉｎｃｙｔｅデータベースから単一のＥＳＴクラスター配列が同定できた。次いで、そのＥＳＴクラスター配列を、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴ
ＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較することにより、存在する相同性を同定した。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ５６
１０２と命名する。

ＤＮＡ５６１０２コンセンサス配列とＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号２８５８８７０内に包含されるＥＳＴ配列との間で観察された配列相同性に鑑みて、そのＩｎｃｙｔｅ
ＥＳＴクローン２８５８８７０を購入し、そのｃＤＮＡ挿入断片を得て、配列決定した。この挿入断片が、完全長タンパク質をコードしていることが見出された。このｃＤＮＡ挿入断片の配列を図２７に示し、本明細書中でＤＮＡ５９８４９−１５０４と命名する。

図２７に示す完全長クローンは、ヌクレオチド１５８−１６０位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド５６３−５６５位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図２７；配列番号２７）。予測されるポリペプチド前駆体（図２８，配列番号２８）は、１３５アミノ酸長である。ＰＲＯ１１５５は、算出分子量が約１４，８３３ダルトン、推定ｐＩが約９．７８である。クローンＤＮＡ５９８４９−１５０４は、１９９８年６月１６日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０９９８６が割り当てられている。実際のクローンは正確な配列を有するものであるが、本明細書では、軽微な配列決定エラーを生じる傾向にある説明的なものにすぎないことを理解されたい。

完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析（ＡＬＩＧＮコンピュータプログラムを使用）に基づき、ＰＲＯ１１５５は、以下のＤａｙｈｏｆｆ命名配列：
ＴＫＮＫ＿ＢＯＶＩＮ；ＰＶＢ１９Ｘ５８７＿１；ＡＦ０１９０４９＿１；Ｐ＿Ｗ００９４８；Ｓ７２８６４；Ｐ＿Ｗ００９４９；Ｉ６２７４２；ＡＦ０３８５０１＿１；ＴＫＮＧ＿ＨＵＭＡＮ；およびＹＡＴ１＿ＲＨＯＢＬ
といくらかのアミノ酸配列同一性を示す。本明細書に示した情報に基づくと、ＰＲＯ１１５５は神経保護および認知増進の提供においてある役割を果たしている可能性がある。

実施例１７：ヒトＰＲＯ１２８１ポリペプチド［ＵＮＱ６５１］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
コンセンサスＤＮＡ配列を、上の実施例１に記載したように他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ３５７２０と命名する。そのＤＮＡ３５７２０コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ１２８１に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：
５’−ＴＧＧＡＡＧＧＣＴＧＣＣＧＣＡＡＣＧＡＣＡＡＴＣ−３’（配列番号：１３４）；
５’−ＣＴＧＡＴＧＴＧＧＣＣＧＡＴＧＴＴＣＴＧ−３’（配列番号：１３５）；および５’−ＡＴＧＧＣＴＣＡＧＴＧＴＧＣＡＧＡＣＡＧ−３’（配列番号：１３６）。
逆方向ＰＣＲプライマー：
５’−ＧＣＡＴＧＣＴＧＣＴＣＣＧＴＧＡＡＧＴＡＧＴＣＣ−３’（配列番号：１３７）；および
５’−ＡＴＧＣＡＴＧＧＧＡＡＡＧＡＡＧＧＣＣＴＧＣＣＣ−３’（配列番号：１３８）。
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ３５７２０配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ：
５’−ＴＧＣＡＣＴＧＧＴＧＡＣＣＡＣＧＡＧＧＧＧＧＴＧＣＡＣＴＡＴＡＧＣＣＡＴＣ
ＴＧＧＡＧＣＴＧＡＧ−３’（配列番号：１３９）。

完全長クローンの起源についていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、上で同定されたＰＣＲプライマー対を用いたＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの一方を使用して、ＰＲＯ１２８１遺伝子をコードするクローンを単離した。
ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡは、単離されたヒト胎児肝臓であった。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、ＰＲＯ１２８１［本明細書中でＤＮＡ５９８２０−１５４９と命名する］（図２９、配列番号２９）に対する完全長ＤＮＡ配列およびＰＲＯ１２８１に対して誘導タンパク質配列が得られた。

ＰＲＯ１２８１のコード配列全体を図２９に示す（配列番号２９）。クローンＤＮＡ５９８２０−１５４９は、ヌクレオチド２２８−２３０位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド２５５３−２５５５位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる。予測されるポリペプチド前駆体は、７７５アミノ酸長である。図３０に示される完全長ＰＲＯ１２８１タンパク質は、推定分子量が約８５，４８１ダルトン、ｐＩが約６．９２である。
さらなる特徴としては、ほぼアミノ酸１−１５のシグナルペプチド；ならびにほぼアミノ酸１３８−１４１および３６１−３６４の潜在的Ｎ−グリコシル化部位が挙げられる。

図３０（配列番号３０）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１２８１アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｓ４４８６０、ＣＥＴ２４Ｄ１＿１、ＣＥＣ３８Ｈ２＿３、ＣＡＣ２＿ＨＡＥＣＯ、Ｂ３Ａ２＿ＨＵＭＡＮ、Ｓ２２３７３、ＣＥＦ３８Ａ３＿２、ＣＥＣ３４Ｆ６＿２、ＣＥＣ３４Ｆ６＿３，およびＣＥＬＴ２２Ｂ１１＿３との間のいくらかの相同性が明らかになった。

クローンＤＮＡ５９８２０−１５４９は、１９９８年８月１８日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３１２９が割り当てられている。
実施例１８：ヒトＰＲＯ１３４３ポリペプチド［ＵＮＱ６９８］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上記の実施例２に記載のアミラーゼスクリーニングで単離されたｃＤＮＡ配列は、ＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメントコンピュータプログラムによって、いずれの既知のヒトコード核酸に対しても有意な配列同一性を有しないことがわかった。このｃＤＮＡ配列を本明細書中でＤＮＡ４８９２１と命名する。プローブをＤＮＡ４８９２１分子の配列から作製し、上記パラグラフ１に記載のようにして作製したヒト平滑筋細胞組織ライブラリーをスクリーニングするために使用した。クローニングベクターは、ｐＲＫ５Ｂ（ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）であり、ｃＤＮＡサイズ排除は２８００ｂｐ未満であった。

使用したオリゴヌクレオチドプローブは、次のとおりであった：
順方向ＰＣＲプライマー：（４８９２１．ｆ１）
５’−ＣＡＡＴＡＴＧＣＡＴＣＴＴＧＣＡＣＧＴＣＴＧＧ−３’（配列番号：１４０）
逆方向ＰＣＲプライマー：（４８９２１．ｒ１）
５’−ＡＡＧＣＴＴＣＴＣＴＧＣＴＴＣＣＴＴＴＣＣＴＧＣ−３’（配列番号：１４１）ハイブリダイゼーションプローブ（４８９２１．ｐ１）
５’−ＴＧＡＣＣＣＣＡＴＴＧＡＧＡＡＧＧＴＣＡＴＴＧＡＡＧＧＧＡＴＣＡＡＣＣＧＡ
ＧＧＧＣＴＧ−３’（配列番号：１４２）
同定された完全長クローンは、ヌクレオチド７１−７３位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド８１２−８１４位に見られる終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図３１；配列番号３１）。予測されるポリペプチド前駆体は、２４７アミノ酸長であり、その算出分子量は、約２５，３３５ダルトン、推定ｐＩは、約７．０である。図３２（配列番号３２）に示す完全長ＰＲＯ１３４３配列の解析により、以下：
ほぼアミノ酸１〜ほぼアミノ酸２５のシグナルペプチドおよびほぼアミノ酸３５〜ほぼアミノ酸２２５のスポロゾイト周囲反復配列に相同な領域の存在が証明された。クローンＤＮＡ６６６７５−１５８７は、１９９８年９月２２日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３２８２が割り当てられている。

図３２（配列番号３２）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１３４３アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＣＳＰ＿ＰＬＡＣＣ、ＣＥＦ２５Ｈ８＿２、Ｕ８８９７４＿４０、ＢＮＡＭＲＮＡＡ＿１、ＢＯＢＯＰＣ３＿１、Ｓ５８１３５、ＡＦ０６１８３２＿１、ＢＨＵ５２０４０＿１、ＨＵＭＰＲＯＦＩＬＥ＿１およびＭＴＶ０２３＿１４との間の有意な相同性が明らかになった。

さらに、ＤＮＡ４８９２１配列に対して相同性を有するＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン（ＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号４７０１１４８）を得、挿入物を配列決定し、それにより、図３１に示すＤＮＡ６６６７５−１５８７配列が得られた。

実施例１９：ヒトＰＲＯ１３７９ポリペプチド［ＵＮＱ７１６］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
コンセンサスＤＮＡ配列を、上の実施例１に記載したように他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ４５２３２と命名する。そのＤＮＡ４５２３２コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ１３７９に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：５’−ＴＧＧＡＣＡＣＣＧＴＡＣＣＣＴＧＧＴＡＴＣＴＧＣ−３’（配列番号：１４３）
逆方向ＰＣＲプライマー：５’−ＣＣＡＡＣＴＣＴＧＡＧＧＡＧＡＧＣＡＡＧＴＧＧＣ−３’（配列番号：１４４）
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ４５２３２配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＴＧＴＡＴＧＴＧＣＡＣＡＣＣＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＣＣＴＣＣＡＡＧＧＧＣＡＡＧＧＡＧＡＡＣ−３’（配列番号：１４５）。

完全長クローンの起源についていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、上で同定されたＰＣＲプライマー対を用いたＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの一方を使用して、ＰＲＯ１３７９遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児腎臓組織から単離した。

上記のようにして単離されたクローンのＤＮＡ配列決定により、ＰＲＯ１３７９の完全長ＤＮＡ配列が得られ、これを本明細書中でＤＮＡ５９８２８−１６０８と命名し、図３３（配列番号：３３）に示し、ＰＲＯ１３７９の誘導タンパク質配列（配列番号：３４）を示す。

ＰＲＯ１３７９のコード配列全体を図３３に示す（配列番号３３）。クローンＤＮＡ５９８２８−１６０８は、ヌクレオチド１０−１２位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１７３２−１７３４位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる。予測されるポリペプチド前駆体は、５７４アミノ酸長である。図３４に示される完全長ＰＲＯ１３７９タンパク質は、推定分子量が約６５，３５５ダルトン、ｐＩが約８．７３である。さらなる特徴としては、ほぼアミノ酸１−１７のシグナルペプチドならびにほぼアミノ酸１６０−１６３、２８７−２９０および３２３−３２６の潜在的Ｎ−グリコシル化部位が挙げられる。

図３４（配列番号３４）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１３７９アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＹＨＹ８＿ＹＥＡＳＴ、ＡＦ０４０６２５＿１、ＨＰ７１４３９４＿１，およびＨＩＶ１８Ｕ４５６３０＿１との間のいくらかの相同性が明らかになった。

クローンＤＮＡ５９８２８−１６０８は、１９９８年８月２５日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３１５８が割り当てられている。

実施例２０：ヒトＰＲＯ１３８０ポリペプチド［ＵＮＱ７１７］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上記の実施例２に記載のアミラーゼスクリーニングで単離されたｃＤＮＡ配列を本明細書中でＤＮＡ４５７７６と命名する。ＤＮＡ４５７７６配列に基づき、オリゴヌクレオチドプローブを作製し、上記の実施例２のパラグラフ１に記載のようにして作製したヒト網膜ライブラリーをスクリーニングするために使用した。クローニングベクターはｐＲＫ５Ｂ（ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄ前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）であり、ｃＤＮＡサイズ排除は２８００ｂｐ未満であった。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー（４５７７６．ｆ１）：５’−ＴＴＴＴＧＣＧＧＴＣＡＣＣＡＴＴＧＴＣＴＧＣ−３’（配列番号：１４６）および
逆方向ＰＣＲプライマー（４５７７６．ｒ１）：５’−ＣＧＴＡＧＧＴＧＡＣＡＣＡＧＡＡＧＣＣＣＡＧＧ−３’（配列番号：１４７）。
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するＤＮＡ４５７７６配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ（４５７７６．ｐ１）
５’−ＴＡＣＧＧＣＡＴＧＡＣＣＧＧＣＴＣＣＴＴＴＣＣＴＡＴＧＡＧＧＡＡＣＴＣＣＣＡＧＧＣＡＣＴＧＡＴＡＴ−３’（配列番号：１４８）。

完全長クローンの起源についていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、上で同定されたＰＣＲプライマー対を用いたＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの一方を使用して、ＰＲＯ１３８０遺伝子をコードするクローンを単離した。

同定された完全長クローンは、ヌクレオチド３６−３８位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１４６２−１４６３位の終止シグナルを有する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図３５；配列番号３５）。予測されるポリペプチド前駆体は、４７０アミノ酸長であり、その算出分子量は、約５１，７１５ダルトン、推定ｐＩは、約７．８６である。
さらなる特徴としては、ほぼアミノ酸５０−７４、１０５−１２７、１３５−１５３、１６３−１８３、２２８−２５２、３０５−３３０および４４８−４７２の膜貫通ドメイン；ほぼアミノ酸１４−１７および８４−８７の潜在的Ｎ−グリコシル化部位；ならびにほぼアミノ酸６０−６８にジヒドロ葉酸レダクターゼシグニチャー（ｓｉｇｎａｔｕｒｅ）が挙げられる。

図３６（配列番号３６）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１３８０アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＨＳＵ８１３７５＿１、ＣＥＺＫ８０９＿６、ＣＥＫ０２Ｅ１１＿１、ＡＦ０３４１０２＿１、ＪＣ４１９６、ＣＥＦ３６Ｈ２＿２、Ｐ＿Ｒ９２３１５、ＹＡＣ２＿ＹＥＡＳＴ、Ｆ１７０７＿１３，およびＣＥＦ４４Ｄ１２＿３との間の相同性が明らかになった。

クローンＤＮＡ６０７４０−１６１５は、１９９８年１１月３日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３４５６が割り当てられた。

実施例２１：ヒトＰＲＯ１３８７ポリペプチド［ＵＮＱ７２２］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上の実施例３に記載したシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、Ｉｎｃｙｔｅデータベースから単一のＥＳＴクラスター配列が同定できた。次いで、そのＥＳＴクラスター配列を、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴ
ＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較することにより、存在する相同性を同定した。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ５６２５９と命名する。

ＤＮＡ５６２５９コンセンサス配列とＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号３５０７９２４内に包含されるＥＳＴ配列との間で観察された配列相同性に鑑みて、そのＩｎｃｙｔｅ
ＥＳＴクローン３５０７９２４を購入し、そのｃＤＮＡ挿入断片を得て、配列決定した。この挿入断片が、完全長タンパク質をコードしていることが見出された。このｃＤＮＡ挿入断片の配列を図３７に示し、本明細書中でＤＮＡ６８８７２−１６２０と命名する。

クローンＤＮＡ６８８７２−１６２０は、ヌクレオチド８５−８７位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１２６７−１２６９位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図３７；配列番号３７）。予測されるポリペプチド前駆体は、３９４アミノ酸長である（図３８）。図３８に示される完全長ＰＲＯ１３８７タンパク質は、推定分子量が約４４，３３９ダルトン、ｐＩが約７．１０である。図３
８（配列番号３８）に示す完全長ＰＲＯ１３８７配列の解析により、以下：
ほぼアミノ酸１〜ほぼアミノ酸１９にシグナルペプチド、ほぼアミノ酸２７５〜ほぼアミノ酸２９６に膜貫通ドメイン、ほぼアミノ酸７６〜ほぼアミノ酸７９、ほぼアミノ酸２３１〜ほぼアミノ酸２３４、ほぼアミノ酸３０２〜ほぼアミノ酸３０５、ほぼアミノ酸３０７〜ほぼアミノ酸３１０およびほぼアミノ酸３７６〜ほぼアミノ酸３７９に潜在的Ｎ−グリコシル化部位、ならびにほぼアミノ酸２１０〜ほぼアミノ酸２３９およびほぼアミノ酸９２〜ほぼアミノ酸１２１にミエリンｐ０タンパク質に対して相同性を有するアミノ酸配列ブロックの存在が証明された。クローンＤＮＡ６８８７２−１６２０は、１９９８年８月２５日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３１６０が割り当てられている。

図３８（配列番号３８）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１３８７アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｐ＿Ｗ３６９５５、ＭＹＰ０＿ＨＥＴＦＲ、ＨＳ４６ＫＤＡ＿１、ＡＦ０４９４９８＿１、ＭＹＯ０＿ＨＵＭＡＮ、ＡＦ０３０４５４＿１、Ａ５３２６８、ＳＨＰＴＣＲＡ＿１、Ｐ＿Ｗ１４１４６およびＧＥＮ１２８３８との間の有意な相同性が明らかになった。

実施例２２：ヒトＰＲＯ１４１９ポリペプチド［ＵＮＱ７３３］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上の実施例３に記載したシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、ＩｎｃｙｔｅデータベースからＥＳＴクラスター配列が同定できた。次いで、そのＥＳＴクラスター配列を、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較することにより、存在する相同性を同定した。ＥＳＴの１つ以上は、罹患扁桃腺組織ライブラリー由来のものであった。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ５９７６１と命名する。

ＤＮＡ５９７６１コンセンサス配列とＩｎｃｙｔｅＥＳＴ３８１５００８内に包含されるＥＳＴ配列との間で観察された配列相同性に鑑みて、そのＥＳＴを含むクローンを購入し、そのｃＤＮＡ挿入断片を得て、配列決定した。このｃＤＮＡ挿入断片の配列を図３９に示し、本明細書中でＤＮＡ７１２９０−１６３０と命名する。

図３９に示す完全長クローンは、ヌクレオチド８６−８８位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド３４１−３４３位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図３９；配列番号３９）。予測されるポリペプチド前駆体（図４０，配列番号４０）は、配列番号４０のアミノ酸約１〜１７のシグナルペプチドを有する８５アミノ酸長である。ＰＲＯ１４１９は、算出分子量が約９，７００ダルトン、推定ｐＩが約９．５５である。クローンＤＮＡ７１２９０−１６３０は、１９９８年９月２２日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３２７５が割り当てられた。

図４０（配列番号４０）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１４１９アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列（デ
ータは本明細書中で援用される）：Ｓ０７９７５（Ｂ３−ｈｏｒｄｅｉｎ）、Ｃ４８２３２、ＨＯＲ７＿ＨＯＲＶＵ、ＧＥＮ１１７６４、Ｓ１４９７０、ＡＦ０２０３１２＿１、ＳＴＡＪ３２２０＿１、ＣＥＲ０７Ｅ３＿１、ＣＥＹ３７Ａ１Ｂ＿４，およびＡＴＡＣ００４２３８１０との間の相同性が明らかになった。

実施例２３：ヒトＰＲＯ１４３３ポリペプチド［ＵＮＱ７３８］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
コンセンサスＤＮＡ配列を、上の実施例１に記載したように他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ４５２３０と命名する。そのＤＮＡ４５２３０コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ１４３３に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー（４５２３０．ｆ１）：
５’−ＧＣＴＧＡＣＣＴＧＧＴＴＣＣＣＡＴＣＴＡＣＴＣＣ−３’（配列番号：１４９）逆方向ＰＣＲプライマー（４５２３０．ｒ１）：
５’−ＣＣＣＡＣＡＧＡＣＡＣＣＣＡＴＧＡＣＡＣＴＴＣＣ−３’（配列番号：１５０）さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ４５２３０配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ（４５２３０．ｐ１）
５’−ＡＡＧＡＡＴＧＡＡＴＴＧＴＡＣＡＡＡＧＣＡＧＧＴＧＡＴＣＴＴＣＧＡＧＧＡＧＧＧＣＴＣＣＴＧＧＧＧＣＣ−３’（配列番号：１５１）
完全長クローンの起源についていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、上で同定されたＰＣＲプライマー対を用いたＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの一方を使用して、ＰＲＯ１４３３遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児腎臓組織から単離した。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、ＰＲＯ１４３３［本明細書中でＤＮＡ７１１８４−１６３４と命名する］（図４１、配列番号４１）に対する完全長ＤＮＡ配列およびＰＲＯ１４３３に対して誘導タンパク質配列が得られた。

ＤＮＡ７１１８４−１６３４のヌクレオチド配列全体を図４１（配列番号４１）に示す。クローンＤＮＡ７１１８４−１６３４は、ヌクレオチド１８５−１８７位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１３４９−１３５１位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図４１）。予測されるポリペプチド前駆体は、３８８アミノ酸長である（図４２）。図４２に示される完全長ＰＲＯ１４３３タンパク質は、推定分子量が約４３，８３１ダルトン、ｐＩが約９．６４である。図４２（配列番号４２）に示す完全長ＰＲＯ１４３３配列の解析により、以下：
ほぼアミノ酸７６〜ほぼアミノ酸９７に膜貫通ドメイン、ほぼアミノ酸６０〜ほぼアミノ酸６３、ほぼアミノ酸１７３〜ほぼアミノ酸１７６およびほぼアミノ酸２２８〜ほぼアミノ酸２３１に潜在的Ｎ−グリコシル化部位ならびにほぼアミノ酸１０〜ほぼアミノ酸１５、ほぼアミノ酸４１〜ほぼアミノ酸４６、ほぼアミノ酸８４〜ほぼアミノ酸８９、ほぼアミノ酸１２０〜ほぼアミノ酸１２５、ほぼアミノ酸１６９〜ほぼアミノ酸１７４、ほぼアミノ酸２２９〜ほぼアミノ酸２３４、ほぼアミノ酸２４０〜ほぼアミノ酸２４５、ほぼアミノ酸３１８〜ほぼアミノ酸３２３およびほぼアミノ酸３７８〜ほぼアミノ酸３８３に潜在的Ｎ−ミリストイル化（ｍｙｒｉｓｔｏｌａｔｉｏｎ）部位の存在が証明された。クロ
ーンＤＮＡ７１１８４−１６３４は、１９９８年９月２２日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３２６６が割り当てられている。

図４２（配列番号４２）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１４３３アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＣＥＬＷ０１Ａ１１＿４、ＣＥＦ５９Ａ１＿４、Ｓ６７１３８、ＭＴＶ０５０＿３、Ｓ７５１３５およびＳ１２４１１との間の有意な相同性が明らかになった。

実施例２４：ヒトＰＲＯ１４７４ポリペプチド［ＵＮＱ７４５］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
発現配列タグ（ＥＳＴ）ＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を検索し、ＥＳＴを同定した。
このＥＳＴにより、膵臓分泌トリプシンインヒビターに対する相同性が示された。

このＥＳＴを含むクローンをＩｎｃｙｔｅ（これは子宮頚部組織ライブラリー由来）から購入し、全体を配列決定すると、ＰＲＯ１４７４をコードする配列番号：４３の核酸が示された。

ＰＲＯ１４７４のヌクレオチド配列全体を図４３（配列番号４３）に示す。クローンＤＮＡ７３７３９−１６４５は、ヌクレオチド４５−４７位に明らかな翻訳開始部位およびヌクレオチド３００−３０２位の終止コドンを有する単一のオープンリーディングフレームを含む（図４３；配列番号：４３）。予測されるポリペプチド前駆体は８５アミノ酸長である。図４４に示されるように、Ｋａｚａｌセリンプロテアーゼインヒビターファミリーシグニチャーは、配列番号：４４のほぼアミノ酸４５から始まる。また、図４４に、インテグリンα鎖の保存された領域を示す（配列番号：４４のほぼアミノ酸３２から始まる）。クローンＤＮＡ７３７３９−１６４５は、１９９８年９月２２日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３２７０が割り当てられている。図４４に示された完全長ＰＲＯ１４７４タンパク質は、約９，２３２ダルトンの推定分子量および約７．９４のｐＩを有する。

図４４（配列番号４４）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１４７４アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＩＯＶＯ＿ＦＲＡＥＲ、ＩＯＶＯ＿ＦＲＡＡＦ、ＩＯＶＯ＿ＦＲＡＣＯ、ＩＯＶＯ＿ＣＹＲＭＯ、ＩＯＶＯ＿ＳＴＲＣＡ、Ｈ６１４９２、Ｃ６１５８９、ＩＯＶＯ＿ＰＯＬＰＬ、Ｄ６１５８９，およびＩＯＶＯ＿ＴＵＲＭＥとの間の配列同一性が明らかになった。

実施例２５：ヒトＰＲＯ１５５０ポリペプチド［ＵＮＱ７６２］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上記の実施例３に記載のシグナル配列アルゴリズムの使用により、ＣＥＬＴ１５Ｂ７＿１２と命名され、本明細書では「ＤＮＡ１００２２」とも称するＭｅｒｃｋデータベースからのＥＳＴ配列の同定が可能となった。次いで、このＥＳＴ配列を、公的およびプロプライエタリＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋａｎｄＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標））を含むさまざまな発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較し、既存の相同性を同定した。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上
であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ５５７０８と命名する。

ＤＮＡ５５７０８配列とＩｎｃｙｔｅＥＳＴ番号３４１１６５９内に包含される配列との間の配列相同性に鑑みて、そのＥＳＴクローン３４１１６５９を購入し、そのｃＤＮＡ挿入断片を得て、その全体に亘って配列決定した。このｃＤＮＡ挿入断片の配列を図４５に示し、本明細書中でＤＮＡ７６３９３−１６６４と命名する。

図４５に示す完全長クローンは、ヌクレオチド１３８−１４０位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド８６７−８６９位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図４５；配列番号４５）。予測されるポリペプチド前駆体（図４６、配列番号：４６）は２４３アミノ酸長である。ＰＲＯ１５５０タンパク質他の特徴としては：ほぼアミノ酸１−３０のシグナル配列；ほぼアミノ酸１９５−２１７の疎水性ドメイン；およびほぼアミノ酸１８６−１８９の潜在的Ｎ−グリコシル化部位が挙げられる。ＰＲＯ１５５０は、およそ２６，２６６ダルトンの計算分子量およびおよそ８．４３の推定ｐＩを有する。クローンＤＮＡ７６３９３−１６６４は、１９９８年１０月６日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３３２３が割り当てられた。

図４６（配列番号４６）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１５５０アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＣＥＬＦ５９Ｅ１２＿１１；ＣＡ２４＿ＡＳＣＳＵ；ＡＦ０１８０８２＿１；ＣＡ１３＿ＢＯＶＩＮ；ＣＡ５４＿ＨＵＭＡＮ；ＣＡ３４＿ＨＵＭＡＮ；ＨＵＭＣＯＬ７Ａ１Ｘ＿１；Ｐ＿Ｗ０９６４３；ＡＦ０５３５３８＿１；およびＨＳＥＭＣＸＩＶ２＿１との間のいくらかの相同性が明らかになった。

実施例２６：ヒトＰＲＯ１５７１ポリペプチド［ＵＮＱ７７７］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
コンセンサスＤＮＡ配列を、上の実施例１に記載したように他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ６９５５９と命名する。
ＤＮＡ６９５５９コンセンサス配列とＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号３１４０７６０内に含まれるＥＳＴ配列間で観察された相同性に基づき、ＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号３１４０７６０を購入し、ｃＤＮＡ挿入物を得て配列決定した。このｃＤＮＡ挿入断片の配列を図４７に示し、本明細書中でＤＮＡ７３７３０−１６７９と命名する。

クローンＤＮＡ７３７３０−１６７９は、ヌクレオチド９０−９２位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド８０７−８０９位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図４７；配列番号４７）。予測されるポリペプチド前駆体は、２３９アミノ酸長である（図４８）。図４８に示される完全長ＰＲＯ１５７１タンパク質は、推定分子量が約２５，６９９ダルトン、ｐＩが約８．９９である。図４８（配列番号４８）に示す完全長ＰＲＯ１５７１配列の解析により、以下：
ほぼアミノ酸１〜ほぼアミノ酸２１のシグナルペプチドならびにほぼアミノ酸８２〜ほぼアミノ酸１０３、ほぼアミノ酸１１５〜ほぼアミノ酸１４１およびほぼアミノ酸１６０〜ほぼアミノ酸１８２の膜貫通ドメインの存在が証明された。クローンＤＮＡ７３７３０−１６７９は、１９９８年１０月６日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＡＴＣＣ２０３３２０が割り当てられている。

図４８（配列番号４８）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１５７１アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＡＦ０７２１２８＿１、ＡＢ０００７１２＿１、ＡＢ０００７１４＿１、ＡＦ００７１８９＿１、ＡＦ０００９５９＿１、ＡＦ０６８８６３＿１、Ｐ＿Ｗ１５２８８、ＰＭ２２＿ＨＵＭＡＮ、Ｐ＿Ｒ３００５６およびＬＳＵ４６８２４＿１との間の有意な相同性が明らかになった。

実施例２７：ヒトＰＲＯ１５７２ポリペプチド［ＵＮＱ７７８］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上記の実施例１に記載の方法を用い、コンセンサス配列を得た。このコンセンサス配列を本明細書中で「ＤＮＡ６９５６０」と命名する。

ＤＮＡ６９５６０コンセンサス配列および本明細書に示した他の情報に基づき、該構築物由来の別のＥＳＴ（ＩｎｃｙｔｅＤＮＡ３０５１４２４）を含むクローンを購入し、配列決定した。

ＰＲＯ１５７３のコード配列全体を図４９に示す（配列番号４９）。
クローンＤＮＡ７３７３４−１６８０は、ヌクレオチド９０−９２位に明らかな翻訳開始部位およびヌクレオチド８７３−８７５位に明らかな終止コドンを有する単一のオープンリーディングフレームを含む。予測されるポリペプチド前駆体は２６１アミノ酸長である。シグナルペプチドは配列番号：５０のほぼアミノ酸１−２３であり、膜貫通ドメインはほぼアミノ酸８１−１００、１２１−１４１および１７３−１９４である。膜貫通ドメインの１つ以上が欠失または不活化されたものであり得る。

Ｎ−グリコシル化部位、Ｎ−ミリストイル化部位、チロシンキナーゼリン酸化部位および原核生物膜リポタンパク質脂質結合部位の位置を図５０に示す。クローンＤＮＡ７３７３４−１６８０は、１９９８年１０月２０日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３３６３が割り当てられている。図５０に示す完全長ＰＲＯ１５７２タンパク質は、約２７，８５６ダルトンの推定分子量および約８．５のｐＩを有する。

図５０（配列番号５０）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１５７２アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列（本明細書中で援用される）：ＡＦ０７２１２７＿１、ＨＳＵ８９９１６＿１、ＡＢ０００７１３＿１、ＡＢ０００７１４＿１、ＡＢ０００７１２＿１、ＡＦ０００９５９＿１、ＡＦ０７２１２８＿１、ＡＦ０６８８６３＿１、Ｐ＿Ｗ２９８８１，およびＰ＿Ｗ５８８６９との間の配列同一性が明らかになった。

実施例２８：ヒトＰＲＯ１７５９ポリペプチド［ＵＮＱ８３２］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上の実施例３に記載したシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、ＩｎｃｙｔｅデータベースからＥＳＴクラスター配列（ＤＮＡ１０５７１と命名）が同定できた。次いで、そのＥＳＴクラスター配列を、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較することにより、存在する相同性を同定した。

ＥＳＴの１つ以上は、アレルギー性喘息患者のプールされた好酸球に由来するものであった。
相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ５７３１３と命名する。

ＤＮＡ５７３１３配列とＩｎｃｙｔｅＥＳＴ２４３４２５５間の配列相同性に鑑み、このＥＳＴを含むクローンを購入し、ｃＤＮＡ挿入物を得て、配列決定した。

このｃＤＮＡ挿入断片の配列を図５１に示し、本明細書中でＤＮＡ７６５３１−１７０１と命名する。

図５１に示す完全長クローンは、ヌクレオチド１２５−１２７位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１４７５−１４７７位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図５１；配列番号５１）。

シグナルペプチドおよび膜貫通ドメインのおよその位置を図５２に示し、一方、Ｎ−ミリストイル化部位、脂質結合部位、アミド化部位部位およびキナーゼリン酸化部位のおよその位置を図５２に示す。予測されるポリペプチド前駆体（図５２、配列番号：５２）は４５０アミノ酸長である。ＰＲＯ１７５９は、およそ４９，７６５ダルトンの計算分子量およびおよそ８．１４の推定ｐＩを有する。
クローンＤＮＡ７６５３１−１７０１は、１９９８年１１月１７日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３４６５が割り当てられた。

図５２（配列番号５２）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１７５９アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＯＰＤＥ＿ＰＳＥＡＥ、ＴＨ１１＿ＴＲＹＢＢ、Ｓ６７６８４、ＲＧＴ２＿ＹＥＡＳＴ、Ｓ６８３６２、ＡＴＳＵＧＴＲＰＲ＿１、Ｐ＿Ｗ１７８３６（ＰａｔｅｎｔａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎＷＯ９７１５６６８−Ａ２）、Ｆ６９５８７、Ａ４８０７６，およびＡ４５６１１との間の配列同一性が明らかになった。

実施例２９：ヒトＰＲＯ４３４１ポリペプチド［ＵＮＱ１８９５］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ公的データベースからの約９５０個の既知の分泌タンパク質の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列（もしあれば、分泌シグナル配列を含む）を使用して、ＥＳＴデータベースを検索した。そのＥＳＴデータベースは、公的データベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）、ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含んでいた。検索は、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を使用して、ＥＣＤタンパク質配列とＥＳＴ配列の６フレーム翻訳との比較として実施した。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。

ＰＲＯ４３４１をコードするコンセンサスＤＮＡ配列を、他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ４５４３３と命名する。

そのＤＮＡ４５４３３コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ４３４１に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般に２０〜３０ヌクレオチドの範囲であり、約１００〜１０００ｂｐ長のＰＣＲ産物が得られるように設計されることが多い。プローブ配列は、代表的には４０〜５５ｂｐ長である。いくつかの場合において、コンセンサス配列が約ｌ〜１．５ｋｂｐより大きいとき、さらなるオリゴヌクレオチドを合成する。完全長クローンについていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，前出のように、ＰＣＲプライマー対を用いてＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の一方を使用して、目的の遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：５’ＴＴＣＴＣＴＧＧＣＣＧＡＣＧＣＴＧＴＧＡＧＧ３’（配列番号：１５２）；および
逆方向ＰＣＲプライマー：５’ＧＣＣＡＴＡＡＧＧＧＣＡＴＴＧＣＡＣＡＣＡＡＡＧＧ３’（配列番号：１５３）。

さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサス４５４３３配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ５’ＡＧＴＣＣＣＴＧＣＴＴＣＡＡＣＡＧＧＧＣＣＡＣＣＴＧＣＴＡＣＣＣＧＡＣＣＴＣＴＣＣＡＣ３’（配列番号：１５４）。

完全長クローンの起源についていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、上で同定されたＰＣＲプライマー対を用いたＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの一方を使用して、ＰＲＯ４３４１遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児肺から単離した。ｃＤＮＡクローンを単離するために使用したｃＤＮＡライブラリーは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡの試薬などの市販の試薬を使用して標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡを、ＮｏｔＩ部位を含むオリゴｄＴをプライマーとして増幅し、ＳａｌＩ半リン酸化アダプターに平滑末端で連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適切にサイズ分離し、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）に所定の方向で独特のＸｈｏＩ部位およびＮｏｔＩ部位においてクローニングした。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、ＰＲＯ４３４１［本明細書中でＤＮＡ８１７６１−２５８３と命名する］（図５７、配列番号５７）に対する完全長ＤＮＡ配列およびＰＲＯ４３４１に対して誘導タンパク質配列が得られた。

ＰＲＯ４３４１のコード配列全体を図５７に示す（配列番号５７）。クローンＤＮＡ８１７６１−２５８３は、ヌクレオチド３６−３８位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド２０９１−２０９３位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる。予測されるポリペプチド前駆体は、６８５アミノ酸長である｝。ＤＮＡ８１７６１−２５８３と命名されるクローンＤＮＡ８１７６１−２５８３（ＵＮＱ１８９５）は、１９９９年３月２３日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３８６２が割り当てられた。図５８に示される完全長ＰＲＯ４３４１タンパク質は、推定分子量が約７４６０５ダルトン、ｐＩが約６．８９である。

図５８（配列番号５８）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ４３４１アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列（本明細書中に組み込まれた配列および関連テキスト）：Ｐ＿Ｗ１１７１９、Ｉ５０７１９、Ｐ＿Ｗ００８７６、ＤＬＬ１＿ＨＵＭＡＮ、Ｐ＿Ｗ１８３４８、ＡＦ０３００３１＿１、ＡＦ０２０２０１＿１、ＡＦ０２８５９３＿１、Ｐ＿Ｗ０５８３３およびＣＲＢ＿ＤＲＯＭＥとの間の相同性が明らかになった。

したがって、ＰＲＯ４３４１はＤｅｌｔａに関連し、癌、創傷修復、分化障害の処置またはかかる処置に有用な化合物を開発する（発達）ためのアッセイに有用であると考えられる。

実施例３０：ヒトＰＲＯ４３４８ポリペプチド［ＵＮＱ１９０２］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ公的データベースからの約９５０個の既知の分泌タンパク質の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列（もしあれば、分泌シグナル配列を含む）を使用して、ＥＳＴデータベースを検索した。そのＥＳＴデータベースは、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）、ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含んでいた。検索は、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を使用して、ＥＣＤタンパク質配列とＥＳＴ配列の６フレーム翻訳との比較として実施した。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。

ＰＲＯ４３４８をコードするコンセンサスＤＮＡ配列を、他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ７７５００と命名する。

ＤＮＡ７７５００コンセンサス配列に基づき、ＤＮＡ９２２３２−２５８９が同定された。

ＤＮＡ配列決定により、ＰＲＯ４３４８（本明細書中でＤＮＡ９２２３２−２５８９と命名する［図５９、配列番号：５９］の完全長ＤＮＡ配列；およびＰＲＯ４３４８の誘導タンパク質配列が得られた。

ＰＲＯ４３４８のコード配列全体を図５９に示す（配列番号５９）。

クローンＤＮＡ９２２３２−２５８９は、配列番号：５９のヌクレオチド５７−５９位に明らかな翻訳開始部位、およびヌクレオチド７８９−７９１に明らかな終止コドンを有する単一のオープンリーディングフレームを含む。予測されるポリペプチド前駆体は２４４アミノ酸長である。ＤＮＡ９２２３２−２５８９と命名されたクローンＤＮＡ９２２３２−２５８９（ＵＮＱ１９０２）は、１９９９年３月３０日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３８９５が割り当てられている。図６０に示す完全長ＰＲＯ４３４８タンパク質は、約２８３１９ダルトンの推定分子量および約８．７８のｐＩを有する。

図６０（配列番号６０）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ４３４８アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｄ７０５５４、Ｄ６９２６７、ＹＨ０９＿ＹＥＡＳＴ、Ｄ７１６２０、ＡＢ０１９１９６＿１、Ｆ７１１０２、ＣＯＱ５＿ＹＥＡＳＴ、ＢＩＯＣ＿ＳＥＲＭＡ、Ｓ６１２０２，およびＰＭＴＡ＿ＲＨＯＳＨとの間の相同性が明らかになった。

実施例３１：ヒトＰＲＯ４３６９ポリペプチド［ＵＮＱ１９１１］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）によって開発された、企業のシグナル配列探索アルゴリズムをＥＳＴに適用することによってＤＮＡ９２２８９−２５９８を同定するだけでなく、クラスター化し、公的データベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および／または企業データベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）からＥＳＴフラグメントを構築した。そのシグナル配列アルゴリズムは、目的の配列または配列フラグメントの５’−末端の１番目および必要に応じて２番目のメチオニンコドン（ＡＴＧ）周辺のＤＮＡヌクレオチドの特徴に基づいて分泌シグナルスコアを計算する。１番目のＡＴＧの後のヌクレオチドは、いかなる終止コドンも有しない少なくとも３５個の明確なアミノ酸をコードしなければならない。１番目のＡＴＧが必要なアミノ酸を有する場合、２番目のＡＴＧは、試験されない。どちらもが必要条件を満たさない場合、候補配列は、スコア付けされない。ＥＳＴ配列が確実なシグナル配列を含むか否かを判定するために、ＡＴＧコドンの周辺のＤＮＡ配列および対応するアミノ酸配列を、分泌シグナルに関連することが知られている７つのセンサー（評価パラメータ）のセットを使用してスコア付けする。

上記のシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、ＩｎｃｙｔｅデータベースからＥＳＴクラスター配列が同定できた。次いで、そのＥＳＴクラスター配列を、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較することにより、存在する相同性を同定した。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ７５１８０と命名する。ＤＮＡ７５１８０に鑑み、ＤＮＡ９２２８９が同定された。

図６１に示す完全長クローンは、ヌクレオチド７４−７６位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド７７６−７７８位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディン
グフレームを含んでいた（図６１；配列番号６１）。予測されるポリペプチド前駆体（図６２，配列番号６２）は、２３４アミノ酸長である。ＰＲＯ４３６９は、算出分子量が約２６０７７ダルトン、推定ｐＩが約８．１３である。

図６２（配列番号６２）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ４３６９アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列（本明細書中に組み込まれた配列および関連テキスト）：Ｙ０８１＿ＨＵＭＡＮ、ＮＵＣＬ＿ＣＨＩＣＫ、Ｓ６４４３９、ＹＧ３Ａ＿ＹＥＡＳＴ、ＣＥＬＦ１２Ｆ３＿３、ＡＴＧＥＬＳＯＬＩ＿１、Ｓ５５３９５、ＮＦＭ＿ＲＡＢＩＴ、ＰＦＡＨＳＰ８６Ｂ＿１およびＮＰＭ＿ＸＥＮＬＡとの間の相同性が明らかになった。

ＤＮＡ９２２８９−２５９８と命名されるクローンＤＮＡ９２２８９−２５９８（ＵＮＱ１９１１）は、１９９９年５月２５日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１３１が割り当てられている。

実施例３２：ヒトＰＲＯ４３８１ポリペプチド［ＵＮＱ１９１６］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）によって開発された、企業のシグナル配列探索アルゴリズムをＥＳＴに適用することによってＤＮＡ９２２２５−２６０３を同定するだけでなく、クラスター化し、公的データベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および／または企業データベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）からＥＳＴフラグメントを構築した。そのシグナル配列アルゴリズムは、目的の配列または配列フラグメントの５’−末端の１番目および必要に応じて２番目のメチオニンコドン（ＡＴＧ）周辺のＤＮＡヌクレオチドの特徴に基づいて分泌シグナルスコアを計算する。１番目のＡＴＧの後のヌクレオチドは、いかなる終止コドンも有しない少なくとも３５個の明確なアミノ酸をコードしなければならない。１番目のＡＴＧが必要なアミノ酸を有する場合、２番目のＡＴＧは、試験されない。どちらもが必要条件を満たさない場合、候補配列は、スコア付けされない。ＥＳＴ配列が確実なシグナル配列を含むか否かを判定するために、ＡＴＧコドンの周辺のＤＮＡ配列および対応するアミノ酸配列を、分泌シグナルに関連することが知られている７つのセンサー（評価パラメータ）のセットを使用してスコア付けする。

上記のシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、ＩｎｃｙｔｅデータベースからＥＳＴ配列が同定できた。次いで、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースとこのＥＳＴ配列を比較することにより、存在する相同性を同定した。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。

該構築に使用されたＥＳＴの１つ以上は、胸腺組織ライブラリー由来のものであった。

そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ７９１３６と命名する。

ＤＮＡ７９１３６配列に鑑み、ＤＮＡ９２２２５−２６０３を同定し、配列決定した。

図６３に示す完全長クローンは、ヌクレオチド１４５−１４７位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド４６０−４６２位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図６３；配列番号６３）。予測されるポリペプチド前駆体（図６４，配列番号６４）は、１０５アミノ酸長である。ＰＲＯ４３８１は、算出分子量が約１０８０３ダルトン、推定ｐＩが約７．２である。

図６４（配列番号６４）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ４３８１アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列（本明細書中に組み込まれた配列および関連テキスト）：Ａ２ＡＣ＿ＣＡＶＰＯ、Ｐ１０２ＫＢ＿３９、Ｓ７１２３、Ｉ５４３４３、ＨＳＬ２５Ａ３＿１、Ｃ７１４６６、Ｐ＿Ｒ６２３８２、Ｓ７６７７４、ＨＳ０９３４，およびＡ６４７６３との間の相同性が明らかになった。

ＤＮＡ９２２２５−２６０３と命名されるクローンＤＮＡ９２２２５−２６０３（ＵＮＱ１９１６）は、１９９９年４月２０日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３９５０が割り当てられている。

実施例３３：ヒトＰＲＯ４４０７ポリペプチド［ＵＮＱ１９３２］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）によって開発された、企業のシグナル配列探索アルゴリズムをＥＳＴに適用することによってＤＮＡ９２２６４−２６１６を同定するだけでなく、クラスター化し、公的データベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および／または企業データベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）からＥＳＴフラグメントを構築した。そのシグナル配列アルゴリズムは、目的の配列または配列フラグメントの５’−末端の１番目および必要に応じて２番目のメチオニンコドン（ＡＴＧ）周辺のＤＮＡヌクレオチドの特徴に基づいて分泌シグナルスコアを計算する。１番目のＡＴＧの後のヌクレオチドは、いかなる終止コドンも有しない少なくとも３５個の明確なアミノ酸をコードしなければならない。１番目のＡＴＧが必要なアミノ酸を有する場合、２番目のＡＴＧは、試験されない。どちらもが必要条件を満たさない場合、候補配列は、スコア付けされない。ＥＳＴ配列が確実なシグナル配列を含むか否かを判定するために、ＡＴＧコドンの周辺のＤＮＡ配列および対応するアミノ酸配列を、分泌シグナルに関連することが知られている７つのセンサー（評価パラメータ）のセットを使用してスコア付けする。

上記のシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、ＩｎｃｙｔｅデータベースからＥＳＴクラスター配列が同定できた。次いで、そのＥＳＴクラスター配列を、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較することにより、存在する相同性を同定した。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，
Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。

クラスター配列および配列アラインメントに基づき、ＤＮＡ９２２６４−２６１６を同定し、配列決定した。

図６５に示す完全長クローンは、ヌクレオチド１０９−１１１位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド７５７−７５９位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図６５；配列番号６５）。予測されるポリペプチド前駆体（図６６，配列番号６６）は、２１６アミノ酸長である。ＰＲＯ４４０７は、算出分子量が約２３７２９ダルトン、推定ｐＩが約４．７３である。

図６６（配列番号６６）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ４４０７アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＳＣ１Ｅ６＿１２、Ｄ８０００３＿１、ＨＭＧＡ＿ＳＯＹＢＮ、ＤＲＯＴＲＯ１２＿１、ＨＳＵ９１９３４＿１、ＧＥＮ１４３３８、ＡＦ０５１９４５＿１、Ａ４５６４４、Ｐ＿Ｗ６０２１３，およびＰ＿Ｗ３３８０７との間の相同性が明らかになった。

ＤＮＡ９２２６４−２６１６と命名されるクローンＤＮＡ９２２６４−２６１６（ＵＮＱ１９３２）は、１９９９年４月２７日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３９６９が割り当てられている。

実施例３４：ヒトＰＲＯ４４２５ポリペプチド［ＵＮＱ１９４２］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
上の実施例３に記載したシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、ＩｎｃｙｔｅデータベースからＥＳＴクラスター配列が同定できた。次いで、そのＥＳＴクラスター配列を、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較することにより、存在する相同性を同定した。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ８１０９９と命名する。

ＤＮＡ８１０９９配列とＥＳＴクローン番号ＡＡ４４８７４４に含まれたＥＳＴ配列間で観察された配列相同性に鑑み、ＥＳＴクローンＡＡ４４８７４４をＭｅｒｃｋから購入し、ｃＤＮＡ挿入物を得て、配列決定した。
このｃＤＮＡ挿入物の配列を本明細書中でＤＮＡ９３０１１−２６３７と命名する。

図６７に示す完全長クローンは、ヌクレオチド２７−２９位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド４３５−４３７位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図６７；配列番号６７）。予測されるポリペプチド前駆体（図６８，配列番号６８）は、１３６アミノ酸長である。ＰＲＯ４４２５は、算出分子量が約１５，５７７ダルトン、推定ｐＩが約８．８８である。

図６８（配列番号６８）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ４４２５アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＨＧＳ＿ＲＥ２９５、Ｓ４４６５５、ＹＯＪ８＿ＣＡＥＥＬ、ＶＢＲ１＿ＣＬＶＫ、Ｐ＿Ｒ３９５２０、Ｐ＿Ｒ６５３３２、Ｐ＿Ｒ３９３８８、ＴＧＬ４＿ＨＵＭＡＮ、ＹＫＡＢ＿ＣＡＥＥＬ，およびＳ７１１０５との間の相同性が明らかになった。

クローンＤＮＡ９３０１１−２６３７）は、１９９９年５月４日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０−ＰＴＡが割り当てられている。

実施例３５：ヒトＰＲＯ４９８５ポリペプチド［ＵＮＱ２４２６］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ公的データベースからの約９５０個の既知の分泌タンパク質の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列（もしあれば、分泌シグナル配列を含む）を使用して、ＥＳＴデータベースを検索した。そのＥＳＴデータベースは、企業のＥＳＴデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｐａｌｏ
Ａｌｔｏ，ＣＡ）を含んでいた。検索は、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を使用して、ＥＣＤタンパク質配列とＥＳＴ配列の６フレーム翻訳との比較として実施した。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。

コンセンサスＤＮＡ配列を、上に記載したように他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ４２８１９と命名する。いくつかの場合において、ＤＮＡ４２８１９コンセンサス配列は、ＢＬＡＳＴおよびｐｈｒａｐの繰り返しサイクルを使用して伸長された中間コンセンサスＤＮＡ配列から得られ、これにより、上記のＥＳＴ配列の起源を使用してその中間コンセンサス配列をできる限り伸長した。

そのＤＮＡ４２８１９コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ４９８５に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般に２０〜３０ヌクレオチドの範囲であり、約１００〜１０００ｂｐ長のＰＣＲ産物が得られるように設計されることが多い。プローブ配列は、代表的には４０〜５５ｂｐ長である。いくつかの場合において、コンセンサス配列が約ｌ〜１．５ｋｂｐより大きいとき、さらなるオリゴヌクレオチドを合成する。完全長クローンについていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，前出のように、ＰＣＲプライマー対を用いてＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の一方を使用して、目的の遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：５’−ＴＧＴＣＣＴＣＴＡＴＴＧＧＡＧＡＡＣＣＡＣＡＧＣＣ−３’（配列番号：１５５）
逆方向ＰＣＲプライマー：５’−ＴＡＡＡＡＧＴＴＧＧＣＴＧＧＧＣＡＡＡＧＴＴＴＧＣ
−３’（配列番号：１５６）
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ４２８１９配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＣＴＣＡＧＴＡＴＧＧＡＣＣＡＡＡＧＴＡＣＣＣＡＡＧＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＴＧＡＧＡＡＡＣＡＴＴＧＧＣＡ−３’（配列番号：１５７）
ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト甲状腺組織から単離した。ｃＤＮＡクローンを単離するために使用したｃＤＮＡライブラリーは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡの試薬などの市販の試薬を使用して標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡを、ＮｏｔＩ部位を含むオリゴｄＴをプライマーとして増幅し、ＳａｌＩ半リン酸化アダプターに平滑末端で連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適切にサイズ分離し、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）に所定の方向で独特のＸｈｏＩ部位およびＮｏｔＩ部位においてクローニングした。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、完全長ＰＲＯ４９８５ポリペプチドに対する完全長ＤＮＡ配列（本明細書中でＤＮＡ５９７７０−２６５２と命名［図６９，配列番号６９］）およびＰＲＯ４９８５ポリペプチドに対して誘導タンパク質配列が得られた。

上で同定した完全長クローンは、ヌクレオチド１３３−１３５位の明らかな翻訳開始部位およびヌクレオチド３１７２−３１７４位の終止シグナルを有する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図６９，配列番号６９）。予測されるポリペプチド前駆体は、１０１３アミノ酸長であり、その算出分子量は、約１１１，３４８．５０ダルトン、推定ｐＩは、約６．３４である。図７０（配列番号７０）に示す完全長ＰＲＯ４９８５配列の解析により、図７０に示す種々の重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。クローンＤＮＡ５９７７０−２６５２は、１９９９年７月２７日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−４２７が割り当てられている。

図７０（配列番号７０）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ４９８５アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＣＥＦ５８Ｅ６＿３；ＸＥＬＥＲＴＫ＿１；ＣＥＬＷ０２Ｃ１２＿２；Ｉ４９０７１；Ｉ４８６５３；ＥＰＢ３＿ＭＯＵＳＥ；ＥＰＢ３＿ＨＵＭＡＮ；ＬＭＧ１＿ＤＲＯＭＥ；ＣＶＵ９０２２６＿１；Ｐ＿Ｗ５７０４６との間の配列同一性が明らかになった。

実施例３６：ヒトＰＲＯ４９８９ポリペプチド［ＵＮＱ２４２９］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ公的データベースからの約９５０個の既知の分泌タンパク質の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列（もしあれば、分泌シグナル配列を含む）を使用して、ＥＳＴデータベースを検索した。

ＥＳＴデータベースには、（１）公的ＥＳＴデータベース（例えば、Ｍｅｒｃｋ／ワシントン大学）、（２）公的ＥＳＴデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）、ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ＰａｌｏＡｌｔｏ、ＣＡ）、および（３）Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈの公的ＥＳＴデータベースが含まれた。

検索は、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌ
ｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を使用して、ＥＣＤタンパク質配列とＥＳＴ配列の６フレーム翻訳との比較として実施した。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。

コンセンサスＤＮＡ配列を、上に記載したように他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ５４２０６と命名する。いくつかの場合において、ＤＮＡ５４２０６コンセンサス配列は、ＢＬＡＳＴおよびｐｈｒａｐの繰り返しサイクルを使用して伸長された中間コンセンサスＤＮＡ配列から得られ、これにより、上記のＥＳＴ配列の起源を使用してその中間コンセンサス配列をできる限り伸長した。

そのＤＮＡ５４２０６コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ４９８９に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般に２０〜３０ヌクレオチドの範囲であり、約１００〜１０００ｂｐ長のＰＣＲ産物が得られるように設計されることが多い。プローブ配列は、代表的には４０〜５５ｂｐ長である。いくつかの場合において、コンセンサス配列が約ｌ〜１．５ｋｂｐより大きいとき、さらなるオリゴヌクレオチドを合成する。完全長クローンについていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，前出のように、ＰＣＲプライマー対を用いてＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の一方を使用して、目的の遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：５’−ＣＡＡＧＧＴＣＣＴＧＣＧＧＡＡＴＧＴＣＴＣＴＧＧ−３’（配列番号：１５８）
逆方向ＰＣＲプライマー：５’−ＧＧＧＡＡＧＴＣＣＴＧＧＡＡＣＴＧＧＴＴＣＣＧＧ−３’（配列番号：１５９）
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ５４２０６配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＣＣＴＣＡＴＣＡＣＣＣＴＧＧＣＴＡＡＣＡＡＣＧＡＧＣＴＴＡＡＧＴＣＣＣＴＣＡＣＣＡＧＣＡＡＧ−３’（配列番号：１６０）
ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト精巣組織から単離した。ｃＤＮＡクローンを単離するために使用したｃＤＮＡライブラリーは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡの試薬などの市販の試薬を使用して標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡを、ＮｏｔＩ部位を含むオリゴｄＴをプライマーとして増幅し、ＳａｌＩ半リン酸化アダプターに平滑末端で連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適切にサイズ分離し、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）に所定の方向で独特のＸｈｏＩ部位およびＮｏｔＩ部位においてクローニングした。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、完全長ＰＲＯ４９８９
ポリペプチドに対する完全長ＤＮＡ配列（本明細書中でＤＮＡ８０１３５−２６５５と命名［図７１，配列番号７１］）およびＰＲＯ４９８９ポリペプチドに対して誘導タンパク質配列が得られた。

上で同定した完全長クローンは、ヌクレオチド２２３−２２５位の明らかな翻訳開始部位およびヌクレオチド７７５−７７７位の終止シグナルを有する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図７１，配列番号７１）。予測されるポリペプチド前駆体は、１８４アミノ酸長であり、その算出分子量は、約２０，５０９ダルトン、推定ｐＩは、約６．４７である。図７２（配列番号７２）に示す完全長ＰＲＯ４９８９配列の解析により、図７２に示す種々の重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。

クローンＤＮＡ８０１３５は、１９９９年６月１５日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−２３４が割り当てられている。

図７２（配列番号７２）に示される完全長配列のＡＬＩＧＮ−２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ４９８９アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＤＤＵ８２５１２＿１；ＡＦ０６１４４３＿１；ＡＦ０５４８２７＿１；ＡＦ０６８９１９＿１；ＡＢ０１６８１６＿１；ＡＴＹ１６０４６＿１；ＡＦ０６８９２０＿１；ＡＦ０５４８２８＿１；ＣＹＡＡ＿ＹＥＡＳＴ；およびＣＹＡＡ＿ＳＣＨＰＯとの間の配列同一性が明らかになった。

実施例３７：ヒトＰＲＯ５７３７ポリペプチド［ＵＮＱ２４５６］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
発現された配列タグ（ＥＳＴ）ＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）、ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ＰａｌｏＡｌｔｏ、ＣＡ）を、ヒトインターロイキン−１受容体アンタゴニスト（ｈＩＬ−１Ｒａ）配列に関して検索し、本明細書中で１４３３１５６と命名したＥＳＴ配列が同定され、これは、ｈＩＬ−１Ｒａ既知タンパク質との相同性を示した。ＥＳＴクローン１４３３１５６をＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（ＰａｌｏＡｌｔｏ、ＣＡ）から購入し、ｃＤＮＡ挿入物を得てその全体を配列決定し、ＤＮＡ９２９２９−２５３４配列を得た。

ＤＮＡ９２９２９−２５３４のヌクレオチド配列全体を図７３（配列番号７３）に示す。
クローンＤＮＡ９２９２９−２５３４は、ヌクレオチド９６−９８位に明らかな翻訳開始部位およびヌクレオチド４９８−５００に終止コドンを有する単一のオープンリーディングフレームを含む（図７３；配列番号：７３）。

予測されるポリペプチド前駆体（ｈＩＬ−１Ｒａ２）は１３４アミノ酸長である。推定シグナル配列は、アミノ酸１−１７位に存在する。クローンＤＮＡ９２９２９−２５３４は、１９９９年１月１２日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号２０３５８６が割り当てられた。図７４に示す完全長ｈＩＬ−１ｒａ２タンパク質は、約１４，９２７ダルトンの推定分子量および約４．８のｐＩを有する。

完全長配列のＢＬＡＳＴおよびＦａｓｔＡ配列アラインメント解析（ＡＬＩＧＮ−２コンピュータプログラムを使用）に基づき、ｈＩＬ−１Ｒａ２（図７４、配列番号：７４）は、ｈＩＬ−１Ｒタンパク質との有意なアミノ酸配列同一性を示す。ｈＩＬ−１Ｒａ２は、ｈＩＬ−１Ｒのスプライス改変体であると考えられる。

実施例３８：ヒトＰＲＯ５８００ポリペプチド［ＵＮＱ２５００］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ公的データベースからの約９５０個の既知の分泌タンパク質の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列（もしあれば、分泌シグナル配列を含む）を使用して、ＥＳＴデータベースを検索した。そのＥＳＴデータベースは、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）を含んでいた。検索は、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を使用して、ＥＣＤタンパク質配列とＥＳＴ配列の６フレーム翻訳との比較として実施した。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。

コンセンサスＤＮＡ配列を、上に記載したように他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ１０２８３６と命名する。いくつかの場合において、コンセンサス配列は、ＢＬＡＳＴおよびｐｈｒａｐの繰り返しサイクルを使用して伸長された中間コンセンサスＤＮＡ配列から得られ、これにより、上記のＥＳＴ配列の起源を使用してその中間コンセンサス配列をできる限り伸長した。

そのＤＮＡ１０２８３６コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ５８００に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般に２０〜３０ヌクレオチドの範囲であり、約１００〜１０００ｂｐ長のＰＣＲ産物が得られるように設計されることが多い。プローブ配列は、代表的には４０〜５５ｂｐ長である。いくつかの場合において、コンセンサス配列が約ｌ〜１．５ｋｂｐより大きいとき、さらなるオリゴヌクレオチドを合成する。完全長クローンについていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ
ＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，前出のように、ＰＣＲプライマー対を用いてＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の一方を使用して、目的の遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー１：５’−ＣＡＧＣＧＡＡＣＣＧＧＧＴＧＣＣＧＧＧＴＣ−３’（配列番号：１６１）
順方向ＰＣＲプライマー２：５’−ＧＡＧＣＧＡＣＧＡＧＣＧＣＧＣＡＧＣＧＡＡＣ−３’（配列番号：１６２）
順方向ＰＣＲプライマー３：
５’−ＡＴＡＣＴＧＣＧＡＴＣＧＣＴＡＡＡＣＣＡＣＣＡＴＧＣＧＣＣＧＣＣＧＣＣＴＧＴＧＧＣＴＧ−３’（配列番号：１６３）
逆方向ＰＣＲプライマー１：５’−ＧＣＣＧＧＣＣＴＣＴＣＡＧＧＧＣＣＴＣＡＧ−３’（配列番号：１６４）
逆方向ＰＣＲプライマー２：５’−ＣＣＣＡＣＧＴＧＴＡＣＡＧＡＧＣＧＧＡＴＣＴＣ−３’（配列番号：１６５）
逆方向ＰＣＲプライマー３：５’−ＧＡＧＡＣＣＡＧＧＡＣＧＧＧＣＡＧＧＡＡＧＴＧ−３’（配列番号：１６６）
逆方向ＰＣＲプライマー４：５’−ＣＡＧＧＣＡＣＣＴＴＧＧＧＧＡＧＣＣＧＣＣ−３’
（配列番号：１６７）
逆方向ＰＣＲプライマー５：５’−ＣＣＣＡＣＧＴＧＴＡＣＡＧＡＧＣＧＧＡＴＣＴＣ−３’（配列番号：１６８）
逆方向ＰＣＲプライマー６：５’−ＧＡＧＡＣＣＡＧＧＡＣＧＧＧＣＡＧＧＡＡＧＴＧ−３’（配列番号：１６９）
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ１０２８３６配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＣＴＣＴＡＣＧＧＧＴＡＣＴＧＣＡＧＧＴＴＣＣＧＧＧＡＧＣＧＣＡＴＣＧＡＡＧＡＧＡＡＣＧＧ−３’（配列番号：１７０）
ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児肝臓組織から単離した。ｃＤＮＡクローンを単離するために使用したｃＤＮＡライブラリーは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡの試薬などの市販の試薬を使用して標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡを、ＮｏｔＩ部位を含むオリゴｄＴをプライマーとして増幅し、ＳａｌＩ半リン酸化アダプターに平滑末端で連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適切にサイズ分離し、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔ
ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）に所定の方向で独特のＸｈｏＩ部位およびＮｏｔＩ部位においてクローニングした。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、完全長ＰＲＯ５８００ポリペプチドに対する完全長ＤＮＡ配列（本明細書中でＤＮＡ１０８９１２−２６８０と命名［図７５，配列番号７５］）およびＰＲＯ５８００ポリペプチドに対して誘導タンパク質配列が得られた。

上で同定した完全長クローンは、ヌクレオチド７−９位の明らかな翻訳開始部位およびヌクレオチド５１７−５１９位の終止シグナルを有する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図７５，配列番号７５）。予測されるポリペプチド前駆体は、１７０アミノ酸長であり、その算出分子量は、約１９，６６３ダルトン、推定ｐＩは、約１１．８１である。図７６（配列番号７６）に示す完全長ＰＲＯ５８００配列の解析により、図７６に示す種々の重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。クローンＤＮＡ１０８９１２−２６８０は、１９９９年５月２５日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１２４が割り当てられている。

図７６（配列番号７６）に示される完全長配列のＡＬＩＧＮ−２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ５８００アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｐ＿Ｗ５２５９５、Ｐ＿Ｗ５７３１３、ＦＧＦＡ＿ＨＵＭＡＮ、Ｐ＿Ｗ５７２６４、ＦＧＦＡ＿ＲＡＴ、Ｐ＿Ｗ５２５９７、ＭＭＵ９４５１７＿１、ＦＧＦＡ＿ＭＯＵＳＥ、Ｐ＿Ｗ５７３０６およびＤ８６３３３＿１との間の配列同一性が明らかになった。

実施例３９：ヒトＰＲＯ５９９３ポリペプチド［ＵＮＱ２５０４］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ公的データベースからの約９５０個の既知の分泌タンパク質の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列（もしあれば、分泌シグナル配列を含む）を使用して、ＥＳＴデータベースを検索した。

ＥＳＴデータベースには、（１）公的ＥＳＴデータベース（例えば、Ｍｅｒｃｋ／ワシントン大学）、（２）公的ＥＳＴデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）、Ｉｎｃｙ
ｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ＰａｌｏＡｌｔｏ、ＣＡ）、（３）Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈの公的ＥＳＴデータベースが含まれた。検索は、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を使用して、ＥＣＤタンパク質配列とＥＳＴ配列の６フレーム翻訳との比較として実施した。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。

このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ９１３６５と命名する。いくつかの場合において、ＤＮＡ９１３６５コンセンサス配列は、ＢＬＡＳＴおよびｐｈｒａｐの繰り返しサイクルを使用して伸長された中間コンセンサスＤＮＡ配列から得られ、これにより、上記のＥＳＴ配列の起源を使用してその中間コンセンサス配列をできる限り伸長した。

そのＤＮＡ９１３６５コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ５９９３に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般に２０〜３０ヌクレオチドの範囲であり、約１００〜１０００ｂｐ長のＰＣＲ産物が得られるように設計されることが多い。プローブ配列は、代表的には４０〜５５ｂｐ長である。いくつかの場合において、コンセンサス配列が約ｌ〜１．５ｋｂｐより大きいとき、さらなるオリゴヌクレオチドを合成する。完全長クローンについていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，前出のように、ＰＣＲプライマー対を用いてＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の一方を使用して、目的の遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：５’ＣＧＡＣＣＣＡＡＧＣＧＧＡＴＣＧＡＡＧＧＴＴＣ３’
（配列番号：１７１）
逆方向ＰＣＲプライマー：５’ＧＴＣＡＣＴＴＣＣＴＧＧＣＡＣＣＡＧＣＴＧＣＴＣ３’ （配列番号：１７２）
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ９１３６５配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ
５’ＧＴＴＡＧＣＡＡＣＴＣＴＣＴＧＧＣＡＧＣＣＴＴＴＧＣＴＴＡＣＡＴＴＡＧＡＧＡＣＣＡＣＣＣＧ３’（配列番号：１７３）
ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト大動脈内皮組織から単離した。ｃＤＮＡクローンを単離するために使用したｃＤＮＡライブラリーは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡの試薬などの市販の試薬を使用して標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡを、ＮｏｔＩ部位を含むオリゴｄＴをプライマーとして増幅し、ＳａｌＩ半リン酸化アダプターに平滑末端で連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適切にサイズ分離し、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）に所定の方向で独特のＸｈｏＩ部位およびＮｏｔＩ部位においてクローニングした。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、完全長ＰＲＯ５９９３
ポリペプチドに対する完全長ＤＮＡ配列（本明細書中でＤＮＡ１００２７６−２６８４と命名［図７７，配列番号７７］）およびＰＲＯ５９９３ポリペプチドに対して誘導タンパク質配列が得られた。

上で同定した完全長クローンは、ヌクレオチド４１１−４１３位の明らかな翻訳開始部位およびヌクレオチド１７３４−１７３６位の終止シグナルを有する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図７７，配列番号７７）。予測されるポリペプチド前駆体は、４４１アミノ酸長であり、その算出分子量は、約４９４８３ダルトン、推定ｐＩは、約６．９１である。図７８（配列番号７８）に示す完全長ＰＲＯ５９９３配列の解析により、図７８に示す種々の重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。クローンＤＮＡ１００２７６−２６８４は、１９９９年７月２０日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−３８０が割り当てられている。

図７８（配列番号７８）に示される完全長配列のＡＬＩＧＮ−２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ５９９３アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＣＥＦ３２Ａ７＿４；ＣＥＦ３２Ａ７＿３；ＬＥＧ＿ＡＮＴＣＲ；ＡＦ０８１１４９＿１；Ｐ＿Ｗ７４５８５；ＨＡＳＡ１３１５８１＿１；ＲＮＵ７２４８７＿１；ＡＦ１１１０９８＿１；Ｐ＿Ｗ５９０５０との間の配列同一性が明らかになった。

実施例４０：ヒトＰＲＯ６０１７ポリペプチド［ＵＮＱ２５２４］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）によって開発された、企業のシグナル配列探索アルゴリズムをＥＳＴに適用することによってＤＮＡ９６８６０−２７００を同定するだけでなく、クラスター化し、公的データベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および／または企業データベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）からＥＳＴフラグメントを構築した。そのシグナル配列アルゴリズムは、目的の配列または配列フラグメントの５’−末端の１番目および必要に応じて２番目のメチオニンコドン（ＡＴＧ）周辺のＤＮＡヌクレオチドの特徴に基づいて分泌シグナルスコアを計算する。１番目のＡＴＧの後のヌクレオチドは、いかなる終止コドンも有しない少なくとも３５個の明確なアミノ酸をコードしなければならない。１番目のＡＴＧが必要なアミノ酸を有する場合、２番目のＡＴＧは、試験されない。どちらもが必要条件を満たさない場合、候補配列は、スコア付けされない。ＥＳＴ配列が確実なシグナル配列を含むか否かを判定するために、ＡＴＧコドンの周辺のＤＮＡ配列および対応するアミノ酸配列を、分泌シグナルに関連することが知られている７つのセンサー（評価パラメータ）のセットを使用してスコア付けする。

上記のシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）データベース，ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡからＥＳＴクラスター配列が同定でき同定でき、本明細書中でＣＬＵ９８６１１と命名する。次いで、そのＥＳＴクラスター配列を、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較することにより、存在する相同性を同定した。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった
比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ８２３９２と命名する。

ＤＮＡ８２３９２配列とＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）データベース由来のクローン番号６５３１５３に包含されるＥＳＴ配列との間の配列相同性に鑑みて、ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ，クローン番号６５３１５３を購入し、そのｃＤＮＡ挿入断片を得て、配列決定した。このｃＤＮＡ挿入断片が、完全長タンパク質をコードしていることが見出された。このｃＤＮＡ挿入断片の配列を図７９に示し、本明細書中でＤＮＡ９６８６０−２７００と命名する。

クローンＤＮＡ９６８６０−２７００は、ヌクレオチド８３−８５位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１６６７−１６６９位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図７９；配列番号７９）。予測されるポリペプチド前駆体は、５２８アミノ酸長である（図８０）。図８０に示される完全長ＰＲＯ６０１７タンパク質は、推定分子量が約５９，０００ダルトン、ｐＩが約８．７３である。図８０（配列番号８０）に示す完全長ＰＲＯ６０１７配列の解析により、図８０に示す種々の重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。クローンＤＮＡ９６８６０−２７００は、１９９９年８月３日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−４７８が割り当てられている。

図８０（配列番号８０）に示される完全長配列のＡＬＩＧＮ−２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ６０１７アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＨＳＡ０１１００１＿１；Ｐ＿Ｗ３６９０３；ＨＳＨＥ６＿１；ＡＦ１１１０９２＿１；ＧＥＮ１４０４６；Ｐ＿Ｗ４８７５６；ＡＣ００４２６２＿１；ＡＦ０３１５７３＿１；Ｐ＿Ｗ０７６００；Ｐ＿Ｗ３７４１２との間の配列同一性が明らかになった。

実施例４１：ヒトＰＲＯ７１７４ポリペプチド［ＵＮＱ２７８４］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）によって開発された、企業のシグナル配列探索アルゴリズムをＥＳＴに適用することによってＤＮＡ９６８８３−２７４５を同定するだけでなく、クラスター化し、公的データベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および／または企業データベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）からＥＳＴフラグメントを構築した。そのシグナル配列アルゴリズムは、目的の配列または配列フラグメントの５’−末端の１番目および必要に応じて２番目のメチオニンコドン（ＡＴＧ）周辺のＤＮＡヌクレオチドの特徴に基づいて分泌シグナルスコアを計算する。１番目のＡＴＧの後のヌクレオチドは、いかなる終止コドンも有しない少なくとも３５個の明確なアミノ酸をコードしなければならない。１番目のＡＴＧが必要なアミノ酸を有する場合、２番目のＡＴＧは、試験されない。どちらもが必要条件を満たさない場合、候補配列は、スコア付けされない。ＥＳＴ配列が確実なシグナル配列を含むか否かを判定するために、ＡＴＧコドンの周辺のＤＮＡ配列および対応するアミノ酸配列を、分泌シグナルに関連することが知られている７つのセンサー（評価パラメータ）のセットを使用してスコア付けする。

上記のシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）データベース，ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，
ＣＡからＥＳＴクラスター配列が同定でき同定でき、本明細書中でＣＬＵ９２１８８と命名する。次いで、そのＥＳＴクラスター配列を、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較することにより、存在する相同性を同定した。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ８３６０４と命名する。

ＤＮＡ８３６０４配列とＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）データベース由来のクローン番号３３６２２８４に包含されるＥＳＴ配列との間の配列相同性に鑑みて、ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ，クローン番号３３６２２８４を購入し、そのｃＤＮＡ挿入断片を得て、配列決定した。このｃＤＮＡ挿入断片が、完全長タンパク質をコードしていることが見出された。このｃＤＮＡ挿入断片の配列を図８１に示し、本明細書中でＤＮＡ９６８８３−２７４５と命名する。

クローンＤＮＡ９６８８３−２７４５は、ヌクレオチド３−５位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１５４５−１５４７位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図８１；配列番号８１）。予測されるポリペプチド前駆体は、５１４アミノ酸長である（図８２）。図８２に示される完全長ＰＲＯ７１７４タンパク質は、推定分子量が約５５，６８７ダルトン、ｐＩが約８．７８である。図８２（配列番号８２）に示す完全長ＰＲＯ７１７４配列の解析により、図８２に示す種々の重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。クローンＤＮＡ９６８８３−２７４５は、１９９９年８月１７日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−５４４が割り当てられている。

図８２（配列番号８２）に示される完全長配列のＡＬＩＧＮ−２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ７１７４アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＲＮＵ４４１２９＿１；ＥＲ５３＿ＨＵＭＡＮ；ＸＬＵ４４１３０＿１；Ｐ＿Ｗ８８６９９；ＶＰ３６＿ＣＡＮＦＡ；Ｇ０１４４７；Ｐ＿Ｗ６７８４６；Ｐ＿Ｗ６７９６３；ＨＳＥＲＧＩＣＰ０２＿１；およびＣＣＡＤ＿ＣＨＩＣＫとの間の配列同一性が明らかになった。

実施例４２：ヒトＰＲＯ９７４４ポリペプチド［ＵＮＱ３００３］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
天然のヒトＰＲＯ９７４４ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローン（ＤＮＡ１３６１１０−２７６３）は、ＣＡＲＤドメイン含有分子ＳＯＣＡ−１を用いて同定された。より具体的には、ＳＯＣＡ−１のＮ末端部分をコードするｃＤＮＡ断片を用いて、ヒト胎児腎臓ライブラリーをスクリーニングした。
いくつかの陽性コロニーを選出し、ＤＮＡを調製して配列決定した。
ＤＮＡ配列決定により、ｃＤＮＡクローンの１つが、ヒトＲａｃタンパク質に相同な本明細書中でＤＮＡ１３６１１０−２７６３と命名する完全長オープンリーディングフレームタンパク質をコードするを含むことが明らかになった。

クローンＤＮＡ１３６１１０−２７６３は、ヌクレオチド２４２−２４４位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１３３４−１３３６位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図８３；配列番号８３）。予測されるポリペプチド前駆体は、３６４アミノ酸長である（図８４；配列番号８４）。図８４に示される完全長ＰＲＯ９７４４タンパク質は、推定分子量が約４２１９５ダルトン、ｐＩが約７．４である。図８４（配列番号８４）に示す完全長ＰＲＯ９７４４配列の解析により、図８４に示す種々の重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。
クローンＤＮＡ１３６１１０−２７６３は、１９９９年９月１４日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−６５２が割り当てられている。

図８４に示す完全長配列（配列番号：８４）のＡＬＩＧＮ−２配列アラインメント解析を用いたＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ９７４４アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＫＲＡＣ＿ＤＩＣＤＩ、ＫＡＰＣ＿ＤＩＣＤＩ、ＰＫ２＿ＤＩＣＤＩ、ＫＡＰＣ＿ＤＲＯＭＥ、ＧＥＮ１３１８１、ＧＥＮ１２２８８、Ｐ＿Ｒ９５９１１、ＴＣＵ６３７４２＿１、ＳＧＫ＿ＨＵＭＡＮおよびＡＦ１３５７９４＿１との配列同一性が示された。

実施例４３：ヒトＰＲＯ９８２１ポリペプチド［ＵＮＱ３０２３］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）によって開発された、企業のシグナル配列探索アルゴリズムをＥＳＴに適用することによってＤＮＡ１０８７２５−２７６６を同定するだけでなく、クラスター化し、公的データベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および／または企業データベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）からＥＳＴフラグメントを構築した。そのシグナル配列アルゴリズムは、目的の配列または配列フラグメントの５’−末端の１番目および必要に応じて２番目のメチオニンコドン（ＡＴＧ）周辺のＤＮＡヌクレオチドの特徴に基づいて分泌シグナルスコアを計算する。１番目のＡＴＧの後のヌクレオチドは、いかなる終止コドンも有しない少なくとも３５個の明確なアミノ酸をコードしなければならない。１番目のＡＴＧが必要なアミノ酸を有する場合、２番目のＡＴＧは、試験されない。どちらもが必要条件を満たさない場合、候補配列は、スコア付けされない。ＥＳＴ配列が確実なシグナル配列を含むか否かを判定するために、ＡＴＧコドンの周辺のＤＮＡ配列および対応するアミノ酸配列を、分泌シグナルに関連することが知られている７つのセンサー（評価パラメータ）のセットを使用してスコア付けする。

上記のシグナル配列アルゴリズムを使用することにより、ＩｎｃｙｔｅデータベースからＥＳＴ配列が同定でき同定でき、本明細書中でＤＮＡ２１２７７と命名する。次いで、公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および企業のＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現配列タグ（ＥＳＴ）データベースとこのＥＳＴ配列を比較することにより、存在する相同性を同定した。相同性検索を、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を使用して行った。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆ
Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。そこから得られたコンセンサス配列を、本明細書中でＤＮＡ９
１９７１と命名する。

ＤＮＡ９１９７１配列とＩｎｃｙｔｅデータベースのクローン番号３２３２８３３Ｈ１に含まれるＥＳＴ配列との間で観察された配列相同性に鑑み、クローン番号３２３２８３３を購入し、ｃＤＮＡ挿入物を得て、配列決定した。
このｃＤＮＡ挿入断片が、完全長タンパク質をコードしていることが見出された。このｃＤＮＡ挿入断片の配列を図８５に示し、本明細書中でＤＮＡ１０８７２５−２７６６と命名する。

クローンＤＮＡ１０８７２５−２７６６は、ヌクレオチド１９６−１９８位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド７０９−７１１位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図８５；配列番号８５）。
予測されるポリペプチド前駆体を図８６に示す。図８６に示す完全長ＰＲＯ９８２１タンパク質は約１９１１８ダルトンの推定分子量および約５．９９のｐＩを有する。
図８６（配列番号８６）に示す完全長ＰＲＯ９８２１配列の解析により、図８６に示す種々の重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。クローンＤＮＡ１０８７２５−２７６６は、１９９９年１０月１９日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−８６３が割り当てられている。

図８６（配列番号８６）に示される完全長配列のＡＬＩＧＮ−２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ９８２１アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｐ＿Ｙ２７５７３；ＵＰＡＲ＿ＭＯＵＳＥ；ＵＰＡＲ＿ＲＡＴ；Ｓ４２１５２；ＳＰ６３＿ＳＴＲＰＵ；ＡＦ００７７８９＿１；ＣＥＬＲ１１Ｆ４＿１；ＬＹ６Ａ＿ＭＯＵＳＥ；Ｐ＿Ｙ０２７３８；およびＡＦ１４１３７７＿１との間の配列同一性が明らかになった。

実施例４４：ヒトＰＲＯ９８５２ポリペプチド［ＵＮＱ３０３７］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）によって開発された、企業のシグナル配列探索アルゴリズムをＥＳＴに適用することによってＤＮＡ１２９３３２−２７７５を同定するだけでなく、クラスター化し、公的データベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および／または企業データベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）からＥＳＴフラグメントを構築した。そのシグナル配列アルゴリズムは、目的の配列または配列フラグメントの５’−末端の１番目および必要に応じて２番目のメチオニンコドン（ＡＴＧ）周辺のＤＮＡヌクレオチドの特徴に基づいて分泌シグナルスコアを計算する。１番目のＡＴＧの後のヌクレオチドは、いかなる終止コドンも有しない少なくとも３５個の明確なアミノ酸をコードしなければならない。１番目のＡＴＧが必要なアミノ酸を有する場合、２番目のＡＴＧは、試験されない。どちらもが必要条件を満たさない場合、候補配列は、スコア付けされない。ＥＳＴ配列が確実なシグナル配列を含むか否かを判定するために、ＡＴＧコドンの周辺のＤＮＡ配列および対応するアミノ酸配列を、分泌シグナルに関連することが知られている７つのセンサー（評価パラメータ）のセットを使用してスコア付けする。

上記のシグナル配列アルゴリズムの使用によって、ＤＮＡ１２４０６５コンセンサス配列の同定が可能となり、この配列に基づいてオリゴヌクレオチドを合成した。
これらのオリゴヌクレオチドを用いて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ９８５２についての完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するために順方向および逆方向ＰＣＲプライ
マーは、一般に２０〜３０ヌクレオチドの範囲であり、約１００〜１０００ｂｐ長のＰＣＲ産物が得られるように設計されることが多い。プローブ配列は、代表的には４０〜５５ｂｐ長である。いくつかの場合において、コンセンサス配列が約ｌ〜１．５ｋｂｐより大きいとき、さらなるオリゴヌクレオチドを合成する。完全長クローンについていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，前出のように、ＰＣＲプライマー対を用いてＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の一方を使用して、目的の遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：５’−ＣＧＡＴＡＣＴＣＧＣＧＧＧＡＧＧＣＴＡＡＣ−３’ （配列番号：１７４）
逆方向ＰＣＲプライマー：５’−ＣＣＴＴＣＴＧＧＧＴＧＴＣＴＣＣＡＧＴＴＡＧＣＧ−３’ （配列番号：１７５）
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ１２４０６５配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＣＡＡＣＴＣＧＣＧＣＡＣＴＣＡＡＡＧＡＴＧＧＴＣＣＣＣＡＴＣＣＣＴＧＣＴＧ−３’（配列番号：１７６）
ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト胎児腎臓組織から単離した。ｃＤＮＡクローンを単離するために使用したｃＤＮＡライブラリーは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡの試薬などの市販の試薬を使用して標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡを、ＮｏｔＩ部位を含むオリゴｄＴをプライマーとして増幅し、ＳａｌＩ半リン酸化アダプターに平滑末端で連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適切にサイズ分離し、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔ
ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）に所定の方向で独特のＸｈｏＩ部位およびＮｏｔＩ部位においてクローニングした。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、完全長ＰＲＯ９８５２ポリペプチドに対する完全長ＤＮＡ配列（本明細書中でＤＮＡ１２９３３２−２７７５と命名［図８７，配列番号８７］）およびＰＲＯ９８５２ポリペプチドに対して誘導タンパク質配列が得られた。

クローンＤＮＡ１２９３３２−２７７５は、ヌクレオチド１８−２０位の明らかな翻訳開始部位を有し、ヌクレオチド１２９６−１２９８位の終止コドンで終結する単一のオープンリーディングフレームを含んでいる（図８７）。予測されるポリペプチド前駆体は、４２６アミノ酸長である（図８８）。図８８に示される完全長ＰＲＯ９８５２タンパク質は、推定分子量が約４６，８８４ダルトン、ｐＩが約７．０１である。図８８（配列番号８８）に示す完全長ＰＲＯ９８５２配列の解析により、図８８に示す種々の重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。クローンＤＮＡ１２９３３２−２７７５は、１９９９年１１月９日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−９４４が割り当てられている。

図８８（配列番号８８）に示される完全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ９８５２アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｃ７０６４３；Ｐ＿Ｙ１９５５７；Ａ７２１１４；Ｂ７１５５１；Ｓ７４７０５；Ｈ７０７
９３；Ｆ６９８１２；Ｔ０８７１５；Ｐ＿Ｙ３４７５０；Ｐ＿Ｗ１４４５０との間の配列同一性が明らかになった。

実施例４５：ヒトＰＲＯ９８７３ポリペプチド［ＵＮＱ３０５４］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ公的データベースからの約９５０個の既知の分泌タンパク質の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列（もしあれば、分泌シグナル配列を含む）を使用して、ＥＳＴデータベースを検索した。
ＥＳＴデータベースには、（１）公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）、（２）公的ＥＳＴデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）、ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ＰａｌｏＡｌｔｏ、ＣＡ）、および（３）Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈの公的ＥＳＴデータベースが含まれた。
検索は、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を使用して、ＥＣＤタンパク質配列とＥＳＴ配列の６フレーム翻訳との比較として実施した。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。

コンセンサスＤＮＡ配列を、上に記載したように他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ１１７９４２と命名する。いくつかの場合において、コンセンサス配列は、ＢＬＡＳＴおよびｐｈｒａｐの繰り返しサイクルを使用して伸長された中間コンセンサスＤＮＡ配列から得られ、これにより、上記のＥＳＴ配列の起源を使用してその中間コンセンサス配列をできる限り伸長した。

そのＤＮＡ１１７９４２コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ９８７３に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般に２０〜３０ヌクレオチドの範囲であり、約１００〜１０００ｂｐ長のＰＣＲ産物が得られるように設計されることが多い。プローブ配列は、代表的には４０〜５５ｂｐ長である。いくつかの場合において、コンセンサス配列が約ｌ〜１．５ｋｂｐより大きいとき、さらなるオリゴヌクレオチドを合成する。完全長クローンについていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ
ＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，前出のように、ＰＣＲプライマー対を用いてＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の一方を使用して、目的の遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：５’−ＣＡＧＡＡＡＡＡＡＧＧＡＡＧＡＴＧＧＣＡＡＧ−３’
（配列番号：１７７）；
順方向ＰＣＲプライマー：５’−ＧＧＣＡＡＧＡＡＴＡＴＴＧＴＴＡＣＴＴＴＴＣＣＴＣＣＣＧ−３’ （配列番号：１７８）；
逆方向ＰＣＲプライマー：５’−ＴＴＡＣＣＡＧＣＴＴＴＧＡＧＴＡＣＡＣＡＴＡＧＡ−３’ （配列番号：１７９）；および
逆方向ＰＣＲプライマー：５’−ＡＡＣＧＴＴＡＡＴＧＡＡＴＣＴＡＣＡＧＴＣＣＧＧＧＧＣ−３’ （配列番号：１８０）。

さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ１１７９４２配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＧＧＴＣＣＡＴＡＡＡＴＡＴＴＣＣＡＴＧＣＡＣＡＧＣＡＣＡＴＡＣＡＧＣＣＡＣＡＡＧＡＣＣＣＧＧＧＡＧＧ−３’（配列番号：１８１）；およびハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＴＧＴＧＣＡＴＧＧＡＡＴＡＴＴＴＡＴＧＧＡＣＣＧＴＣＴＡＧＣＴＴＣＣＡＡＧＡＡＧ−３’（配列番号：１８２）；
ｃＤＮＡライブラリーを構築するためのＲＮＡをヒト脳組織から単離した。ｃＤＮＡクローンを単離するために使用したｃＤＮＡライブラリーは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡの試薬などの市販の試薬を使用して標準的な方法によって構築した。

ｃＤＮＡを、ＮｏｔＩ部位を含むオリゴｄＴをプライマーとして増幅し、ＳａｌＩ半リン酸化アダプターに平滑末端で連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適切にサイズ分離し、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）に所定の方向で独特のＸｈｏＩ部位およびＮｏｔＩ部位においてクローニングした。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、完全長ＰＲＯ９８７３ポリペプチドに対する完全長ＤＮＡ配列（本明細書中でＤＮＡ１４３０７６−２７８７と命名［図８９，配列番号８９］）およびＰＲＯ９８７３ポリペプチドに対して誘導タンパク質配列が得られた。

上で同定した完全長クローンは、ヌクレオチド３８−４０位の明らかな翻訳開始部位およびヌクレオチド４２２−４４４位の終止シグナルを有する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図８９，配列番号８９）。予測されるポリペプチド前駆体は、１２８アミノ酸長であり、その算出分子量は、約１４３３２ダルトン、推定ｐＩは、約４．８３である。図９０（配列番号９０）に示す完全長ＰＲＯ９８７３配列の解析により、図９０に示す種々の重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。クローンＤＮＡ１４３０７６−２７８７は、１９９９年１２月７日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１０２８が割り当てられている。

図９０（配列番号９０）に示される完全長配列のＡＬＩＧＮ−２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ９８７３アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＭＩＡ＿ＨＵＭＡＮ、Ａ４２９６５＿１、Ｐ＿Ｒ６９８１１、ＭＩＡ＿ＢＯＶＩＮ、ＲＮＵ６７８８４＿１、ＧＥＮ１４１６４、ＭＩＡ＿ＭＯＵＳＥ、Ｐ＿Ｒ６９８１２、Ｐ＿Ｙ２４７８８，およびＰ＿Ｙ２２２３６との間の配列同一性が明らかになった。

実施例４６：ヒトＰＲＯ１０１９６ポリペプチド［ＵＮＱ３１１５］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ公的データベースからの約９５０個の既知の分泌タンパク質の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列（もしあれば、分泌シグナル配列を含む）を使用して、ＥＳＴデータベースを検索した。そのＥＳＴデータベースは、（１）公的ＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および（２）企業のＥＳＴデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）、ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，Ｃ
Ａ）を含んでいた。検索は、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を使用して、ＥＣＤタンパク質配列とＥＳＴ配列の６フレーム翻訳との比較として実施した。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。

コンセンサスＤＮＡ配列を、上に記載したように他のＥＳＴ配列に関してｐｈｒａｐを使用して構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ１３９１４６と命名する。いくつかの場合において、コンセンサス配列は、ＢＬＡＳＴおよびｐｈｒａｐの繰り返しサイクルを使用して伸長された中間コンセンサスＤＮＡ配列から得られ、これにより、上記のＥＳＴ配列の起源を使用してその中間コンセンサス配列をできる限り伸長した。

次いで、ＥＳＴクローン番号５３９８３５３をＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）、ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、ＰａｌｏＡｌｔｏ、ＣＡから購入し、該クローンのｃＤＮＡ挿入物を得て全体を配列決定した。

上記のクローンから得た挿入物のＤＮＡ配列決定により、完全長ＰＲＯ１０１９６ポリペプチド（本明細書中でＤＮＡ１４４８４１−２８１６と命名する［図９１、配列番号：９１］）の完全長ＤＮＡ配列が得られ、該ＰＲＯ１０１９６ポリペプチドの誘導タンパク質配列が得られた。

上で同定した完全長クローンは、ヌクレオチド１５１−１５３位の明らかな翻訳開始部位およびヌクレオチド７７５−７７７位の終止シグナルを有する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図９１，配列番号９１）。予測されるポリペプチド前駆体は、２０８アミノ酸長であり、その算出分子量は、約２２１８７ダルトン、推定ｐＩは、約５．０８である。図９２（配列番号９２）に示す完全長ＰＲＯ１０１９６配列の解析により、図９２に示す種々の重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。クローンＤＮＡ１４４８４１−２８１６は、２０００年１月１１日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−１１８８が割り当てられている。

図９２（配列番号９２）に示される完全長配列のＡＬＩＧＮ−２配列アラインメント解析を使用したＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ１０１９６アミノ酸配列と以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｐ＿Ｙ０８５８１、ｒＦＧＦ１９＿１、ＡＢ０１８１２２＿１、ＡＦ１１０４００＿１、Ｐ＿Ｙ０８５８２、ＦＧＦＦ＿ＭＯＵＳＥ、ＦＧＦ６＿ＭＯＵＳＥ、Ｐ＿Ｒ８０７８１およびＰ＿Ｒ７０８２５との間の配列同一性が明らかになった。

実施例４７：ヒトＰＲＯ２１９５６ポリペプチド［ＵＮＱ６９７３］をコードするｃＤＮＡクローンの単離
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ公的データベースからの約９５０個の既知の分泌タンパク質の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列（もしあれば、分泌シグナル配列を含む）を使用して、ＥＳＴデータベースを検索した。
データベースには、公的データベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）が含まれた。この場合、ＧｅｎＢａｎｋのゲノムＤＮＡ配列を、スタンフォード大学から使用許諾された遺伝子予測プログラムＧＥＮＳＣＡＮを用いて解析した。ＧＥＮＳＣＡＮ解析により、遺伝子コード領域が予測され、ＥＣＤ検索に供され得る配列がもたらされる。検索は、コンピュータ
プログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を使用して、ＥＣＤタンパク質配列とＥＳＴ配列の６フレーム翻訳との比較として実施した。既知のタンパク質をコードしなかった、ＢＬＡＳＴスコアが７０（またはいくつかの場合においては９０）またはそれ以上であった比較結果を、クラスター化し、そしてプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列を構築した。

コンセンサスＤＮＡ配列を構築した。このコンセンサス配列を本明細書中でＤＮＡ１４６８２２と命名する。

そのＤＮＡ１４６８２２コンセンサス配列に基づいて、１）目的の配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定するため、および２）ＰＲＯ２１９５６に対する完全長コード配列のクローンを単離するためのプローブとして使用するためにオリゴヌクレオチドを合成した。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般に２０〜３０ヌクレオチドの範囲であり、約１００〜１０００ｂｐ長のＰＣＲ産物が得られるように設計されることが多い。プローブ配列は、代表的には４０〜５５ｂｐ長である。いくつかの場合において、コンセンサス配列が約ｌ〜１．５ｋｂｐより大きいとき、さらなるオリゴヌクレオチドを合成する。完全長クローンについていくつかのライブラリーをスクリーニングするために、そのライブラリー由来のＤＮＡを、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，前出のように、ＰＣＲプライマー対を用いてＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性のライブラリーを使用し、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の一方を使用して、目的の遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：
５’−ＡＣＡＧＣＡＣＣＡＡＧＴＴＴＣＴＧＡＧＣＡＡＣＴＴＣＣＴ−３’（配列番号：１８３）
逆方向ＰＣＲプライマー：
５’−ＡＣＴＴＧＡＧＧＴＴＧＴＣＡＣＣＧＣＡＣＡＣＧ− ３’（配列番号：１８４）
さらに、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ１４６８２２配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＡＧＡＧＡＧＧＡＡＡＣＡＡＧＧＡＣＣＴＧＣＧＧＧＣＡＣＧＧＧＣＡＧＡＣＧ−３’（配列番号：１８５）
種々の組織に由来する５０の異なるヒトｃＤＮＡライブラリーのプールをクローニングに使用した。
ｃＤＮＡクローンを単離するために使用したｃＤＮＡライブラリーは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡの試薬などの市販の試薬を使用して標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡを、ＮｏｔＩ部位を含むオリゴｄＴをプライマーとして増幅し、ＳａｌＩ半リン酸化アダプターに平滑末端で連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適切にサイズ分離し、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含まないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）を参照のこと）に所定の方向で独特のＸｈｏＩ部位およびＮｏｔＩ部位においてクローニングした。

上で記載したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定により、完全長ＰＲＯ２１９５６ポリペプチドに対する完全長ＤＮＡ配列（本明細書中でＤＮＡ１７８５５１−２９８６
と命名［図９７，配列番号９７］）およびＰＲＯ２１９５６ポリペプチドに対して誘導タンパク質配列が得られた。

上で同定した完全長クローンは、ヌクレオチド７４−７６位の明らかな翻訳開始部位およびヌクレオチド１１４５−１１４７位の終止シグナルを有する単一のオープンリーディングフレームを含んでいた（図９７，配列番号９７）。予測されるポリペプチド前駆体は、３５７アミノ酸長であり、その算出分子量は、約３９００１ダルトン、推定ｐＩは、約９．２８である。図９８（配列番号９８）に示す完全長ＰＲＯ２１９５６配列の解析により、図９８に示す種々の重要なポリペプチドドメインの存在が証明され、ここで、その重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は、上記のようにおよその位置である。クローンＤＮＡ１７８５１１−２９８６は、２０００年９月１２日にＡＴＴＣに寄託され、ＡＴＣＣ寄託番号ＰＴＡ−２４５２が割り当てられている。

図９８（配列番号９８）に示す完全長配列のＡＬＩＧＮ−２配列アラインメント解析を使用したタンパク質データベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の解析により、ＰＲＯ２１９５６アミノ酸配列と以下のタンパク質配列：ＷＮ１４＿ＣＨＩＣＫとの間の配列同一性が明らかになった。

実施例４８：ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの役割を調査するため、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ
１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１遺伝子における破壊を、相同組換えまたはレトロウイルス挿入技術によって作出した。具体的には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１遺伝子に破壊を含むトランスジェニックマウス（すなわち、ノックアウトマウス）を、遺伝子ターゲティングまたは遺伝子トラッピングのいずれかによって作出した。サザンブロット解析により変異を確認することにより、５’末端と３’末端の両方における正確なターゲティングを確認した。挿入部位に隣接するエクソンにアニーリングするプライマーを使用したＲＴ−ＰＣＲによって裏付けられるように、遺伝子特異的なジェノタイピングをゲノムＰＣＲによって行うことにより、内在性の天然の転写物が失われていることが確認された。ターゲティングベクターを１２９系統のＥＳ細胞に電気穿孔し、標的クローンを同定した。標的クローンを宿主胚盤胞に微量注入することにより、キメラを作製した。キメラをＣ５７動物と交雑し、Ｆ１ヘテロ接合体を作製した。ヘテロ接合体を交雑受精することにより、Ｆ２野生型、ヘテロ接合体およびホモ接合体コホートを作製し、表現型解析に使用した。まれに、Ｆ１ヘテロ接合体が十分に作製されない場合に、そのＦ１へテロ接合体を野生型Ｃ５７マウスと交雑することにより、十分なヘテロ接合体を得て、表現型の解析用のコホートと交雑させた。すべての表現型解析を生後１２〜１６週から実施した。

表現型結果の全体的な概要：
４８．１．ＤＮＡ３３４６０−１１６６（ＵＮＱ２００）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ２２６ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ３３４６０−１１６６と命名）（ＵＮＱ２００）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２１４７４ムス・ムスクルス上皮細胞増殖因子含有フィブリン様細胞外マトリックスタンパク質２（Ｅｆｅｍｐ２）；参照タンパク質：
Ｑ９ＪＭ０６Ｑ９ＪＭ０６Ｑ９ＪＭ０６ＥＧＦ−ＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧＦＩＢＵＬＩＮ−ＬＩＫＥＥＸＴＲＡＣＥＬＬＵＬＡＲＭ；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０１６９３８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０１６９３８ＮＩＤ：８３９３２９８ホモ・サピエンスホモ・サピエンスＥＧＦ含有フィブリン様細胞外マトリックスタンパク質２（ＥＦＥＭＰ２）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｏ９５９６７ＦＢＬ４＿ＨＵＭＡＮＯ９５９６７ＥＧＦ−ＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧＦＩＢＵＬＩＮ−ＬＩＫＥＥＸＴＲＡＣＥＬＬＵＬ。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＥＦＥＭＰ２のオルソログであるＥｆｅｍｐ２（上皮細胞増殖因子含有フィブリン様細胞外マトリックスタンパク質２）である。別名としては、ＭＢＰ１、ＵＰＨ１、ＦＢＬＮ４、０６１００１１Ｋ１１Ｒｉｋ、フィブリン４およびフィブリン−４が挙げられる。

ＥＦＥＭＰ２は、おそらく細胞外マトリックスタンパク質としての機能を果たす分泌タンパク質である。該タンパク質は、シグナルペプチド、６つの上皮細胞増殖因子（ＥＧＦ）様ドメイン、および球状フィブリン型モジュールを含む。ＥＦＥＭＰ２は、大きな静脈および動脈の内側層ならびに多種多様な他の組織で顕著に発現される。ＥＦＥＭＰ２は、血液凝固、補体活性化、および発生中の細胞の運命の決定などのプロセスにおいてある役割を果たしている可能性がある。
ＥＦＥＭＰ２は、染色体１１にマッピングされる網膜症の候補遺伝子である（Ｋａｔｓａｎｉｓｅｔａｌ．，ＨｕｍＧｅｎｅｔ１０６（１）：６６−７２（２０００）；Ａｒｇｒａｖｅｓｅｔａｌ．，ＥＭＢＯＲｅｐ４（１２）：１１２７−３１（２００３））。

遺伝子ターゲティングまたは遺伝子トラップによる変異を、系統１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ由来の胚性幹（ＥＳ）細胞において生じさせる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスと交雑させ、Ｆ１ヘテロ接合性動物を作製する。これらの子孫を、交雑受精することにより、Ｆ２の野生型、ヘテロ接合性およびホモ接合性の変異体子孫を作製する。まれに、例えば、Ｆ１マウスがキメラからほとんど得られない場合に、Ｆ１ヘテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスと交雑することにより、交雑受精用のさらなるヘテロ接合性動物を得て、Ｆ２マウスを作製する。この世代のマウスについてレベルＩ表現型解析を実施する。

カイ二乗値＝２０．２９有意性＝３．９２７１９３４Ｅ−５（ｈｏｍ／ｎ）＝０．０９平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１から３をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２１４７４．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプルにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．１．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ３３４６０−１１６６（ＵＮＱ２００）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト上皮細胞増殖因子含有フィブリン様細胞外マトリックスタンパク質２（ＥＦＥＭＰ２）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）変異型の後期胚致死性がもたらされた。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）病理学
顕微鏡的：胚致死性．
第１２．５日に、４９の胚を観察した：
１２個の（−／−）胚、１９個の（＋／−）胚、９個の（＋／＋）胚、８個の不明確なおよび１個のｉｎｃ−ｈｅｔ−ｈｏｍ。
これらの１２．５日胚において、肉眼または組織学的検査による構造的発生異常は検出されなかった。

致死性の胚の発達異常に関連する考察：
ノックアウトマウスにおける胚性致死は、通常、種々の重篤な発生上の問題（神経変性疾患、血管障害、炎症性疾患が挙げられるが、これらに限定されない）によって生じるか、または遺伝子／タンパク質が多くの細胞型において基礎的な細胞シグナル伝達プロセスで重要な役割を果たす場合に生じる。さらに、胚性致死は、潜在的な癌モデルとして有用である。同様に、対応するヘテロ接合性（＋／−）変異動物は、これらがノックアウトされた遺伝子の機能に関する非常に有益なてがかりを明らかにする表現型および／または病理学報告を示す場合に特に有用である。例えば、ＥＰＯノックアウト動物は胚致死性を示したが、胚に関する病理学報告は、ＲＢＣの著しい欠如を示した。

４８．２．ＤＮＡ３５８４１−１１７３（ＵＮＱ２２４）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ２５７ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ３５８４１−１１７３と命名）（ＵＮＱ２２４）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿００８４１１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿００８４１１ＮＩＤ：１１９９３９４０ムス・ムスクルスムス・ムスクルス内在性膜会合タンパク質１（Ｉｔｍａｐ１）；参照タンパク質：
Ｐ７０４１２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｐ７０４１２ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＩＮＴＥＧＲＡＬＭＥＭＢＲＡＮＥ−ＡＳＳＯＣＩＡＴＥＤＰＲＯＴＥＩＮ１；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０２２０３４ホモ・サピエンスＣＵＢおよび透明帯様ドメイン１（ＣＵＺＤ１）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ８６ＵＰ６ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８６ＵＰ６ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
膜貫通タンパク質ＵＯ−４４Ｄ。

目的のマウス遺伝子は、Ｃｕｚｄ１（ＣＵＢおよび透明帯様ドメイン１）、ヒトＣＵＺＤ１のオルソログである。
別名としては、ＵＳＧ、ＥＲＧ−１、ＵＯ−４４、ＵＴＣＺＰ、Ｉｔｍａｐ１、内在性膜会合タンパク質１およびエストロゲン調節遺伝子１が挙げられる。

ＣＵＺＤ１は、シグナルペプチド、２つのＣＵＢ（補体亜成分Ｃ１ｒ／Ｃ１ｓ、ウニＵｅｇｆタンパク質、骨形成タンパク質１）ドメイン、透明帯（ＺＰ）ドメイン、およびＣ末端付近に膜貫通セグメントを含む内在性膜タンパク質である（Ｋａｓｉｋｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＪ３３０Ｐｔ２）：９４７−５０（１９９８）；Ｃｈｅｎｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７５（７）：５２４８（１９９９））。
ＣＵＢ（ＩｎｔｅｒＰｒｏアクセッションＩＰＲ０００８５９）およびＺＰ（ＰｆａｍアクセッションＰＦ００１００）ドメインは、一般的に、タンパク質−タンパク質相互作用に関与する細胞外タンパク質に見られる。ＣＵＺＤ１の正確な機能は不明である。
ＣＵＺＤ１は、正常な卵巣組織および卵巣腫瘍の上皮ならびに妊婦の子宮の子宮内膜および卵管由来の上皮において発現され、ここで、ＣＵＺＤ１は、エストロゲンによって上方調節され、プロゲステロンによって下方調節される（Ｃｈｅｎｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７５（７）：５２４８（１９９９）；Ｈｕｙｎｈｅｔａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ１４２（７）：２９８５−９５（２００１））。
これらの上皮において、ＣＵＺＤ１は、原形質膜上（Ｈｕｙｎｈｅｔａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ１４２（７）：２９８５−９５（２００１）；Ｌｅｏｎｇｅｔ
ａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ２３（３３）：５７０７−１８（２００４）または子宮上皮の尖領域内の粒状構造体内（Ｉｍａｍｕｒａら（ｅａｌ）、ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ
２７７（５２）：５０７２５−３３（２００２））に確認されることがあり得る。
ＣＵＺＤ１はまた、膵臓の腺房細胞のトリプシノゲン含有チモーゲン顆粒の膜上で発現される（Ｉｍａｍｕｒａｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７７（５２）：５０７２５−３３（２００２））。
ＣＵＺＤ１は、生殖周期および妊娠（Ｋａｓｉｋ、ＢｉｏｃｈｅｍＪ３３０Ｐｔ２）：９４７−５０（１９９８）；Ｃｈｅｎｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７５（７）：５２４８（１９９９）、細胞運動および細胞−細胞相互作用（Ｌｅｏｎｇｅｔａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ２３（３３）：５７０７−１８（２００４）、上皮細胞増殖および分化（Ｈｕｙｎｈｅｔａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ１４２（７）：２９８５−９５（２００１）、および消化（Ｉｍａｍｕｒａ
ｅａｌ、ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７７（５２）：５０７２５−３３（２００２））においてある役割を果たしている可能性がある。

Ｉｍａｍｕｒａおよび共働者（ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７７（５２）：５０７２５−３３２００２））により、ノックアウトマウスを用いて、ＣＵＺＤ１の生理学的役割が調査された。彼らにより、分泌促進薬誘導性および食事誘導性膵炎の易罹患性は、ＣＵＺＤ１ホモ接合性ヌルマウスにおいて野生型マウスよりもずっと高いことが示された。
生殖には影響がないようであった。
Ｉｍａｍｕｒａおよび共働者により、ＣＵＺＤ１は、チモーゲン顆粒内でのトリプシノゲン活性化のモジュレーションにおいてある役割を果たしていること、および改変されたトリプシノゲン活性化は、膵炎の重症性と関連していることが提案された。

カイ二乗値＝１．７５有意性＝０．４１６８６２（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２２平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿００８４１１．２）。
１．野生型発現パネル：
標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによって試験した２６の成体組織試料のうち、脳；目；脾臓；腎臓；骨格筋；胃、小腸および結腸；心臓；脂肪；心臓の帯状組織（ｂａｎｄｅｄ）；皮膚線維芽細胞；前立腺；ならびにＭＧ１２ＤＰＣにおいて検出された。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．２．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ３５８４１−１１７３（ＵＮＱ２２４）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトＣＵＢおよび透明帯様ドメイン１（ＣＵＺＤ１）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）マウスにおける血清ＩｇＧ３レベルの増加ならびにＢ細胞サブセットのパーセンテージの増加がもたらされた。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）免疫学表現型解析
免疫関連疾患および炎症性疾患は、正常な生理機能において、傷害または損傷に応答し、傷害または損傷からの修復を開始し、そして外来生物体に対する先天的および後天的な防御を開始することにとって重大な意味を有する、かなり複雑で、複雑に相互連結していることが多い生物学的経路の症状または結果である。これらの正常な生理学的経路が、応答の強度に直接関連してか、異常な制御もしくは過度の刺激の結果としてか、自己に対する応答としてか、またはこれらの組み合わせのいずれかとして、さらなる傷害または損傷を引き起こすときに、疾患または病態が生じる。

これらの疾患の起源が、多段階の経路および複数の異なる生物学的系／経路に関連することが多いが、これらの経路の１個以上の重大な点における介入は、寛解性または治療的な効果を有し得る。治療的な介入は、有害なプロセス／経路の拮抗作用または有益なプロセス／経路の刺激のいずれかによって生じ得る。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は、哺乳動物の免疫応答の重要な成分である。Ｔ細胞は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己の分子に関連する抗原を認識する。この抗原は、抗原提示細胞、ウイルス感染細胞、癌細胞、移植片などの表面上にＭＨＣ分子とともに提示され得る。Ｔ細胞系は、宿主哺乳動物に対して健康への脅威をもたらすこれらの改変細胞を排除する。Ｔ細胞としては、ヘルパーＴ細胞および細胞傷害性Ｔ細胞が挙げられる。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原−ＭＨＣ複合体を認識した後、広範囲に増殖する。ヘルパーＴ細胞はまた、種々のサイトカイン、すなわち、リンフォカインを分泌する。リンフォカインは、Ｂ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞および免疫応答に関与する他の種々の細胞の活性化において中心的な役割を果たす。

多くの免疫応答において、炎症細胞は、損傷または感染の部位を浸潤する。遊走細胞は、罹患組織の組織学的検査によって決定され得るような、好中球、好酸球、単球またはリンパ球であり得る。ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ｅｄ．ＪｏｈｎＥ．Ｃｏｌｉｇａｎ，１９９４，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．
多くの免疫関連疾患が知られており、広く研究されている。このような疾患としては、免疫媒介性炎症性疾患（例えば、関節リウマチ、免疫媒介性腎疾患、肝胆疾患、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬および喘息）、非免疫媒介性炎症性疾患、感染性疾患、免疫不全疾患、新形成および移植片拒絶などが挙げられる。免疫学の分野において、炎症および炎症性障害の処置のための標的を同定した。

免疫学の分野において、炎症および炎症性障害の処置のための標的を本明細書中で同定した。免疫関連疾患は、１つの場合において、免疫応答を抑制することによって処置され得る。免疫刺激性活性を有する分子を阻害する中和抗体の使用は、免疫媒介性疾患および炎症性疾患の処置に有益であり得る。免疫応答を阻害する分子は、免疫応答を阻害するために（タンパク質を直接または抗体アゴニストの使用を介して）利用され得、その結果、免疫関連疾患を寛解させ得る。

以下の試験を実施した：
血清免疫グロブリンアイソタイピングアッセイ：
ＣｙｔｏｍｅｔｒｉｃＢｅａｄＡｒｒａｙ（ＣＢＡ）キットを使用して、血清免疫グロブリンアイソタイピングアッセイを行う。このアッセイを使用して、１つのサンプル中のマウスモノクローナル抗体の重鎖および軽鎖のアイソタイプを迅速に同定する。示される値は、「相対蛍光単位」であり、κ軽鎖の検出に基づく。６未満のいかなる値も有意ではない。

結果：
血清Ｉｍｍ．２：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のもの、（＋／＋）マウスの中央値、および累積（＋／＋）歴史的中央値と比較した場合、平均血清ＩｇＧ３レベルの上昇を示した。

変異（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較してＩｇＧ３血清免疫グロブリンの上昇を示した。ＩｇＧ３免疫グロブリンは、中和作用を有し、それほどではないが、補体系の活性化に重要である。観察された表現型から、ＰＲＯ２５７ポリペプチドが、炎症性応答の負の制御因子であることが示唆される。これらの免疫学的異常から、ＰＲＯ２５７ポリペプチドのアンタゴニストまたはインヒビターが、免疫系を刺激し得（例えば、Ｔ細胞増殖）、この作用が白血病および他のタイプの癌の場合の個体ならびにＡＩＤＳ罹患者などの免疫無防備状態の患者にとって有益であり得る場合に有用性が見出され得ることが示唆される。したがって、負の制御因子として作用するＰＲＯ２５７ポリペプチドは、免疫応答を阻害し得、例えば、移植片拒絶または移植片対宿主病の場合における有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であり得る。

蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）解析
手順：
ＣＤ４、ＣＤ８およびＴ細胞レセプターを含む、末梢血由来の免疫細胞組成物のＦＡＣＳ解析を実施して、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球に対するＣＤ１９、白血球マーカーとしてのＣＤ４５およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞に対するｐａｎＮＫを評価した。ＦＡＣＳ解析は、２匹の野生型および６匹のホモ接合性マウスにおいて実施し、胸腺、脾臓、骨髄およびリンパ節由来の細胞を含んだ。

これらの研究において、解析される細胞を、胸腺、末梢血、脾臓、骨髄およびリンパ節から単離した。単核細胞集団内のＣＤ４およびＣＤ８陽性のＴ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞および単球の相対的比率を決定するようにフローサイトメトリーを設定した。Ｂｅｃｔｏｎ−ＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ３−レーザーＦＡＣＳ装置を使用して、免疫状態を評価した。表現型アッセイおよびスクリーニングのために、この装置は、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比に加えて、ＣＤ４＋／ＣＤ８−、ＣＤ８＋／ＣＤ４−、ＮＫ、Ｂ細胞および単球の数を記録する。６つの系統特異的抗体のパネル：ＣＤ４５ＰｅｒＣＰ、抗ＴＣＲｂＡＰＣ、ＣＤ４ＰＥ、ＣＤ８ＦＩＴＣ、ｐａｎ−ＮＫＰＥおよびＣＤ１９ＦＩＴＣを用いて、各マウス由来の溶解末梢血の単一サンプルを染色することによって単核細胞プロファイルを得た。２種類のＦＩＴＣ標識抗体およびＰＥ標識抗体は、相互に排他的な細胞タイプを染色する。ＣｅｌｌＱｕｅｓｔソフトウェアを備えたＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターを使用してサンプルを解析した。

結果：
組織特異的ＦＡＣＳプロジェクト：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものと比較した場合、腹腔洗浄液において
、Ｂ２２０＋ＣＤ１１ｂＣＤ２３−細胞の低パーセンテージの増加およびＢ２２０＋ＣＤ１１ｂ−ＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの減少を示した。

４８．３．ＤＮＡ３９４２７−１１７９（ＵＮＱ２３５）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ２６８ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ３９４２７−１１７９と命名）（ＵＮＱ２３５）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＢＣ０１７６０３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＢＣ０１７６０３ＮＩＤ：１７１６０８５６ムス・ムスクルスムス・ムスクルス、ＲＩＫＥＮｃＤＮＡ２８１０４２５Ａ０４遺伝子、クローンＭＧＣ：２７６０３ＩＭＡＧＥ：４５０３１２９；参照タンパク質：
Ｑ８ＶＢＴ０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＶＢＴ０ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＲＩＫＥＮＣＤＮＡ２８１０４２５Ａ０４ＧＥＮＥ；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０３０７５５ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０３０７５５ＮＩＤ：１３５５９５１５ホモ・サピエンスホモ・サピエンスチオレドキシンドメイン含有（ＴＸＮＤＣ）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９Ｙ４Ｔ６ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９Ｙ４Ｔ６ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＨＹＰＯＴＨＥＴＩＣＡＬ３２．５ＫＤＡＰＲＯＴＥＩＮ（ＦＲＡＧＭＥＮＴ）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＴＸＮＤＣ（チオレドキシンドメイン含有）のオルソログであるＴｘｎｄｃ１（チオレドキシンドメイン含有１）である。
別名としては、２８１０４２５Ａ０４Ｒｉｋ、ＴＭＸ、ＴＸＮＤＣ１、ＤＫＦＺＰ５６４Ｅ１９６２、チオレドキシンドメイン含有、およびチオレドキシン関連膜貫通タンパク質が挙げられる。

ＴＸＮＤＣは、主に小胞体内に存在している内在性膜タンパク質であり、おそらく、タンパク質ジスルフィドイソメラーゼとしての機能を果たしている。
該タンパク質は、シグナルペプチド、チオレドキシンドメイン、および１つまたはおそらく２つの膜貫通セグメントを含む。
チオレドキシンドメインは、さまざまな酸化還元反応に可逆的に関与し得るジチオール活性中心を含む。
さらに、チオレドキシンドメインは、小胞体の内腔内に突き出ており、ここでは、おそらく、他の酵素とともにタンパク質のフォールディングならびにレドックス状態の調節に関与している。ＴＸＮＤＣの発現は、遍在性であるが、肺、腎臓、肝臓および胎盤において特に高い（Ｍａｔｓｕｏｅｔａｌ．，ＡｒｃｈＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓ４２３（１）：８１−７（２００４）；Ｍａｔｓｕｏｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７６（１３）：１００３２−８（２００１））。

カイ二乗値＝７．３３有意性＝０．０２５６０４１７２（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２７平均同腹仔数＝１０
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２８３３９．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプルにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．３．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ３９４２７−１１７９（ＵＮＱ２３５）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトチオレドキシンドメイン含有（ＴＸＮＤＣ）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、変異型（−／−）マウスにおいて骨中無機質密度の測定値の減少がもたらされた。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）骨代謝および全身診断学：放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

Ｄｅｘａ解析−試験の説明：
手順：４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性マウスおよび８匹のホモ接合性マウスのコホートをこのアッセイで試験した。二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を、うまく使用して骨の変化を同定した。麻酔動物を試験し、骨塩量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比、容量測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿骨ＢＭＤおよび椎骨ＢＭＤを測定した。

Ａｖｅｒｔｉｎ（１．２５％２，２，２，−トリブロモエタノール，２０ｍＬ／ｋｇ体重）をマウスに腹腔内注射することにより麻酔し、体長および体重を測定し、次いで、そのマウスをＤＥＸＡスキャンのためにＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（Ｌｕｎａｒ
Ｉｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位にした。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを使用して、目的の領域（ＲＯＩ）［すなわち、全身、椎骨および両大腿骨］の骨塩密度（ＢＭＤ）および脂肪組成物（％脂肪）および総組織質量（ＴＴＭ）を測定した。

骨マイクロＣＴ解析：
手順：マイクロＣＴを使用して、非常に感度の高いＢＭＤの測定を行った。１つの椎骨および１つの大腿骨を、４匹の野生型マウスおよび８匹のホモ接合性マウスのコホートか
ら取り出した。腰部の５つの椎骨骨梁骨体積、骨梁厚、結合性密度ならびに大腿骨中軸の骨の総面積および皮質厚の測定を行った。μＣＴ４０スキャンにより、骨量および構造についての詳細な情報が得られた。複数の骨を、サンプルホルダーに置き、自動的にスキャンした。装置ソフトウェアを使用して、解析用の目的の領域を選択した。骨梁骨パラメータを、１６マイクロメートルの解像度で第５腰部椎骨（ＬＶ５）において解析し、皮質骨パラメータを、２０マイクロメートルの解像度で大腿骨中軸において解析した。

結果：
Ｄｅｘａ：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均におけるレベルと比較して、全身、大腿骨および脊椎骨における体積測定による平均骨塩密度の減少を示した。
マイクロＣＴ：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均のものと比較して、大腿骨中軸の平均断面積の減少を示した。

Ｄｅｘａおよび骨マイクロＣＴ解析によって解析された（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔と比較して、異常な骨障害を示唆する、骨の測定値の減少を示した。骨の負の表現型は、ＰＲＯ２６８ポリペプチドまたはそのアゴニストが、骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。さらに、ＰＲＯ２６８ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ２６８ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む異常な骨代謝に関連する炎症性疾患を含む、異常な骨障害または病理学的な骨障害に導き得る。

４８．４．ＤＮＡ３５６８０−１２１２（ＵＮＱ２５３）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ２９０ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ３５６８０−１２１２と命名）（ＵＮＱ２５３）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＸＭ＿１５０２４３ＰＲＥＤＩＣＴＥＤ：
ムス・ムスクルスｃＤＮＡ配列ＢＣ０４２３９６（ＢＣ０４２３９６）；参照タンパク質：
ＸＰ＿１５０２４３ｍＫＩＡＡ０５４０タンパク質［ムス・ムスクルス］；参照ヒト遺伝子配列：
ＸＭ＿２９１０６４ＰＲＥＤＩＣＴＥＤ：
ホモ・サピエンスＫＩＡＡ０５４０タンパク質（ＫＩＡＡ０５４０）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
ＸＰ＿２９１０６４ＰＲＥＤＩＣＴＥＤ：
ＫＩＡＡ０５４０タンパク質［ホモ・サピエンス］．
目的のマウス遺伝子は、ヒトＫＩＡＡ０５４０タンパク質のオルソログであるｃＤＮＡ配列ＢＣ０４２３９６である。別名としては、ｍＫＩＡＡ０５４０および１１１００１４Ｆ２３Ｒｉｋが挙げられる。
ＫＩＡＡ０５４０タンパク質は、推定シグナルペプチドまたはシグナルアンカー、ＢＥＡＣＨドメイン（ＰＦＡＭアクセッションＰＦ０２１３８）、および４つのタンデムＷＤ４０反復配列（ＳＭＡＲＴアクセッションＳＭ００３２０）を含む。
バイオインフォマティック解析により、該タンパク質は、細胞外（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））であり得ることが示唆される。
ＫＩＡＡ０５４０タンパク質のドメイン構成は、リソソームおよびエンドソームへ、およびこれらからのタンパク質の選出（ｓｏｒｔｉｎｇ）（Ｂａｒｂｏｓａｅｔａｌ．，
Ｎａｔｕｒｅ３８５（６６１１）：９７（１９９６））に関与している可能性があるＬＹＳＴ（リソソーム輸送調節因子）のものと類似する。

カイ二乗値＝６．０７有意性＝０．０４８０７４６６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．１９平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン４〜１１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＸＭ＿１５０２４３．４）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、骨以外の胚性幹（ＥＳ）細胞および２６のすべての成体組織サンプルにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．４．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ３５６８０−１２１２（ＵＮＱ２５３）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ホモ接合性変異型マウスは、顆粒球のパーセンテージの増加、ＬＰＳ攻撃に対する血清ＩＬ−６応答の増加、血清ＩｇＧ２ａレベルの低下、平均血清ＩｇＭレベルの増加；末梢血中のＣＤ４およびＣＤ８細胞の平均パーセンテージの減少；ならびに脾臓におけるＢ細胞に対するＴ細胞の比の減少を含む数多くの免疫学的異常を示した。また、変異型は、これらの細胞に通常存在する顆粒化を欠く好中球を示した。好中球の減少もまた観察され、好中球減少症がもたらされた。
（−／−）マウスは、血小板の減少および血小板容積の増加を示した。
血液化学解析により、平均血清グルコースレベルの低下および平均血清トリグリセリドの減少という観察結果がもたらされた。
ホモ接合性変異型マウスはまた、その性別一致野生型同腹仔のものと比較した場合、骨測定値の減少を示した。
標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）免疫学表現型解析
免疫関連疾患および炎症性疾患は、正常な生理機能において、傷害または損傷に応答し、傷害または損傷からの修復を開始し、そして外来生物体に対する先天的および後天的な防御を開始することにとって重大な意味を有する、かなり複雑で、複雑に相互連結していることが多い生物学的経路の症状または結果である。これらの正常な生理学的経路が、応答の強度に直接関連してか、異常な制御もしくは過度の刺激の結果としてか、自己に対す
る応答としてか、またはこれらの組み合わせのいずれかとして、さらなる傷害または損傷を引き起こすときに、疾患または病態が生じる。

以下の試験を実施した：
血液学解析：
試験の説明：血液試験は、Ａｂｂｏｔｔ社のＣｅｌｌ−Ｄｙｎ３５００Ｒ自動血液学分析装置によって行う。その特徴の一部としては、５種類の白血球分画が挙げられる。「患者」レポートには、全部で２２を超えるパラメータが含まれ得る。

結果：
血液学：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、好中球計数の減少を示した。
しかしながら、自動解析によって（−／−）マウスで観察された好中球減少症は、手動の分画（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ）では確認されなかった。
（−／−）マウスは正常な白血球分布を有するが、好中球は、細胞内に通常存在する顆粒化を示さない。
（−／−）マウスはまた、平均血小板計数の減少および平均血小板容積の増加を示した。

これらの結果は、変異型（−／−）マウスが、観察した好中球内での異常な顆粒化に伴う好中球減少症に関連する異常を示したことを示す。好中球は、血中の主要な食作用性白血球である。
したがって、（−／−）マウスは、感染に対処する能力障害を有する。

また、ＤＮＡ３５６８０−１２１２遺伝子が欠損した変異型マウスにより、凝固障害に関連する表現型がもたらされた。
これと関連して、ＰＲＯ２９０ポリペプチドまたはそのアゴニストは、異常な血液凝固に関連する障害（例えば、血友病など）の処置に有用であり得る。

急性期反応：
試験の説明：細菌のリポ多糖（ＬＰＳ）は、エンドトキシンであり、急性期反応および全身性炎症の強力な誘導物質である。レベルＩのＬＰＳマウスの腹腔内に（ｉ．ｐ．）、２００μＬ滅菌食塩水中の致死量未満の用量のＬＰＳを２６ゲージ針を使用して注射した。この用量は、試験マウスの平均体重に基づき、１μｇ／ｇ体重とした。注射の３時間後に１００μＬの血液サンプルを採取し、ＴＮＦａ、ＭＣＰ−１およびＩＬ−６の存在をＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ装置で解析した。

結果：
急性期反応：（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、ＬＰＳ攻撃に対する平均血清ＩＬ−６応答が増加した
まとめると、ＬＰＳ内毒素攻撃は、ＰＲＯ２９０ポリペプチドをコードする遺伝子が欠損したノックアウトマウスは、その野生型同腹仔と比較した場合、免疫学的異常を示すことを示した。特に、変異マウスは、ＬＰＳ内毒素で攻撃した場合、免疫応答（ＩＬ−６産生）を誘発する能力が増加し、炎症誘発応答を示す。ＩＬ−６は、より後期のＢ細胞活性化に寄与する。さらに、ＩＬ−６は、急性期応答および全身炎症の誘導で極めて重要な役割を果たす。このことは、ＰＲＯ２９０ポリペプチドに対するインヒビターまたはアンタゴニストが、免疫系を刺激し得、この作用が白血病および他のタイプの癌の場合の個体ならびにＡＩＤＳ罹患者などの免疫無防備状態の患者にとって有益であり得る場合に有用性が見出され得ることが示唆される。したがって、ＰＲＯ２９０ポリペプチドまたはそのアゴニストは、免疫応答の阻害に有用であり得、例えば、移植片拒絶または移植片対宿主病の場合における有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であり得る。

血清免疫グロブリンアイソタイピングアッセイ：
ＣｙｔｏｍｅｔｒｉｃＢｅａｄＡｒｒａｙ（ＣＢＡ）キットを使用して、血清免疫グロブリンアイソタイピングアッセイを行う。このアッセイを使用して、１つのサンプル中のマウスモノクローナル抗体の重鎖および軽鎖のアイソタイプを迅速に同定する。示される値は、「相対蛍光単位」であり、κ軽鎖の検出に基づく。６未満のいかなる値も有意ではない。

結果：
血清Ｉｍｍ．２：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のもの、当該実行プロジェクト内の（＋／＋）マウス、および歴史的中央値と各々について比較した場合、平均血清ＩｇＭレベルの増加および平均血清ＩｇＧ２ａレベルの低下を示した。

変異（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、ＩｇＭ血清免疫グロブリンの増加を示した。ＩｇＭ免疫グロブリンは、細菌のトキシンの中和に対する体
液性免疫応答において最初に産生され、補体系を活性化する際に特に重要である。観察された表現型から、ＰＲＯ２９０ポリペプチドが、炎症性応答の負の制御因子であることが示唆される。これらの免疫学的異常から、ＰＲＯ２９０ポリペプチドのインヒビター（アンタゴニスト）が、免疫系（例えば、Ｔ細胞増殖）を刺激し得る重要な物質であり得、この作用が白血病および他のタイプの癌の場合の個体ならびにＡＩＤＳ罹患者などの免疫無防備状態の患者にとって有益であり得る場合に有用性が見出され得ることが示唆される。したがって、ＰＲＯ２９０ポリペプチドまたはそのアゴニストは、免疫応答を阻害に有用であり得、例えば、移植片拒絶または移植片対宿主病の場合における有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であり得る。

血清免疫グロブリンアイソタイピングアッセイにより、ホモ接合体（−／−）マウスが、その性別一致同腹仔（＋／＋）コントロールと比較して、平均血清ＩｇＧ２ａレベルの低下を示したことが明らかになった。

血清免疫グロブリンアイソタイピングアッセイにより、ホモ接合性成体が、血清ＩｇＧ２ａレベルの低下を示したことが明らかになった。したがって、ホモ接合体は、（＋／＋）同腹仔と比較して異常に低い血清免疫グロブリンを示した。したがって、ＰＲＯ２９０ポリペプチドをコードする遺伝子は、免疫グロブリン（またはガンマグロブリン）を生成するのに必須である。同様に、ＩｇＧ２ａ免疫グロブリンは、中和作用を有し、それほどではないにせよ、補体系の活性化に重要である。

蛍光活性化細胞分取（ＦＡＣＳ）解析
手順：
末梢血由来の免疫細胞組成物（Ｔリンパ球を評価するためのＣＤ４、ＣＤ８、およびＴ細胞受容体、Ｂリンパ球のためのＣＤ１９、白血球マーカーとしてのＣＤ４５、およびナチュラルキラー細胞のためのｐａｎＮＫが含まれる）のＦＡＣＳ解析を行った。２匹の野生型マウスおよび６匹のホモ接合体マウスに対してＦＡＣＳ解析を行い、マウスは、胸腺、脾臓、骨髄、およびリンパ節由来の細胞を含んでいた。

これらの研究では、分析細胞を、胸腺、末梢血、脾臓、骨髄、およびリンパ節から単離した。単核細胞集団中のＣＤ４およびＣＤ８陽性Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、および単球の相対的比率が決定されるようにフローサイトメトリーをデザインした。Ｂｅｃｔｏｎ−ＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ３−レーザーＦＡＣＳ装置を使用して、免疫状態を評価した。表現型アッセイおよびスクリーニングのために、この機械は、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比に加えて、ＣＤ４＋／ＣＤ８−、ＣＤ８＋／ＣＤ４−、ＮＫ、Ｂ細胞、および単球の数を記録する。単核細胞プロフィールを、６系統特異的抗体のパネル（ＣＤ４５ＰｅｒＣＰ、抗ＴＣＲｂＡＰＣ、ＣＤ４ＰＥ、ＣＤ８ＦＩＴＣ、ｐａｎ−ＮＫＰＥ、およびＣＤ１９ＦＩＴＣ）を使用した各マウス由来の溶解末梢血の単一サンプルの染色によって導いた。２つのＦＩＴＣおよびＰＥ標識抗体は、相互排除する細胞型を染色する。ＣｅｌｌＱｕｅｓｔソフトウェアを備えたＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターを使用して、サンプルを分析した。

結果：
ＦＡＣＳ３：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、ＣＤ４およびＣＤ８細胞の平均パーセンテージの減少を特徴とする末梢血中の白血球サブセットの分布の変化を示した。

組織特異的ＦＡＣＳプロジェクト：
（−／−）マウスはまた、その（＋／＋）同腹仔のものと比較した場合、散乱（ｓｃａｔ
ｔｅｒ）による顆粒球のパーセンテージの増加を示したが、骨髄におけるＢ２２０−ＣＤ４３Ｈｉ細胞のパーセンテージの増加は示されなかった。
（−／−）マウスにおいて、ＳＳＣ−ｈｉ集団は大きなＳＳＣ−ｉｎｔ集団に置き換えられた。
（−／−）マウスはまた、腹腔洗浄液中においてＢ２２０ＨｉＣＤ２３＋細胞のパーセンテージの増加を示した。

組織特異的ＦＡＣＳ−マウス：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものと比較した場合、脾臓において、Ｔ細胞：Ｂ細胞比の減少およびＣＤ６２ＬＨｉＣＤ４４ＤｉｍＣＤ４＋およびＣＤ８＋細胞のパーセンテージの減少を示した。

したがって、ＰＲＯ２９０ポリペプチドまたはそのアゴニストは、Ｂ細胞生成の負の調節因子としての機能を果たしている。

（ｃ）骨代謝および全身診断学：放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

骨マイクロＣＴ解析：
手順：マイクロＣＴを使用して、非常に感度の高いＢＭＤの測定を行った。１つの椎骨および１つの大腿骨を、４匹の野生型マウスおよび８匹のホモ接合性マウスのコホートから取り出した。腰部の５つの椎骨骨梁骨体積、骨梁厚、結合性密度ならびに大腿骨中軸の骨の総面積および皮質厚の測定を行った。μＣＴ４０スキャンにより、骨量および構造についての詳細な情報が得られた。複数の骨を、サンプルホルダーに置き、自動的にスキャンした。装置ソフトウェアを使用して、解析用の目的の領域を選択した。骨梁骨パラメータを、１６マイクロメートルの解像度で第５腰部椎骨（ＬＶ５）において解析し、皮質骨パラメータを、２０マイクロメートルの解像度で大腿骨中軸において解析した。

結果：
Ｄｅｘａ：
雄および雌（−／−）マウスの両方は、歴史的平均と比較した場合、平均総組織マスおよび骨塩量および密度の測定値の減少を示し、差は雌においてより顕著であった。
雌（−／−）マウスは、全身容量測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）、椎骨骨中無機質密度（ＢＭＤ）および全身骨中無機質密度の減少を示した（大きな差＞２ＳＤ）。
（−／−）マウスはまた、大腿骨骨中無機質密度（ＢＭＤ）および全身骨塩量（ＢＭＣ）の減少を示した。

マイクロＣＴ：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均椎骨骨梁の体積、数、厚さおよび結合性密度の減少を示し、大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積の減少を示した。

Ｄｅｘａおよび骨マイクロＣＴ解析によって解析された（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔と比較して、異常な骨障害を示唆する、骨の測定値の減少および身体の質量の測定値の減少を示した。（−／−）マウスは、負の骨表現型を示し、骨の代謝障害を反映する骨測定値が異常に減少した。
また、平均総組織マスの減少は、組織消耗性障害に関連する代謝障害を示す。
その負の骨表現型は、ＰＲＯ２９０ポリペプチドまたはそのアゴニストが、骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。さらに、ＰＲＯ２９０ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ２９０ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む異常な骨代謝に関連する炎症性疾患を含む異常な骨障害または病理学的な骨障害に導き得る。

（ｄ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝領域では、糖尿病の治療のための標的を同定することができる。血液化学表現型解析には、血糖値測定が含まれる。ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を、マウスの血流化学試験のために使用した。代謝領域では、糖尿病治療のための標的を同定することができる。
結果：
雌（−／−）マウスはまた、顕著な平均血清グルコースレベルの低下を示した。
これらの研究において、変異型（−／−）マウスは、インスリン感受性の増大のためであり得る血清グルコースレベルの顕著な減少を示した。したがって、ＰＲＯ２９０ポリペプチドまたはそのコード遺伝子に対するアンタゴニスト（インヒビター）は、損傷したグルコースホメオスタシスの処置に有用であり得る。

（ｅ）表現型解析：心臓学
心臓血管生物学の分野において、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、様々な冠動脈疾患、異常脂肪血症（例えば、高コレステロール（高コレステロール血症）および血清トリグリセリドの増加（高トリグリセリド血症））、糖尿病および／または肥満症の処置のための標的を本明細書中で同定した。表現型試験は、血清コレステロールおよび血清トリグリセリドの測定を含んでいた。

血中脂質
手順：４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性マウスおよび８匹のホモ接合性マウスのコホートを、このアッセイで試験した。高いコレステロールレベルおよび血中トリグリセリドレベルの上昇は、心血管疾患および／または糖尿病の発症における認識された危険因子である。血中脂質の測定により、血中脂質レベルを制御する生物学的スイッチの発見が容易になる。血中脂質レベルを上昇させる因子の阻害は、心血管疾患リスクの軽減に有用であり得る。これらの血液化学試験では、ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用して測定値を記録した。

結果：
血液化学：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均血清中トリグリセリドレベルの低下を示した。

まとめると、これらのノックアウト変異型マウスは、脂質代謝に関して正の表現型を示した。
したがって、ＰＲＯ２９０遺伝子が欠損した変異型マウスは、脂質血異常、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、または様々な冠動脈疾患と関連する心血管疾患の処置のモデルとして役立ち得る。

４８．５．ＤＮＡ２２５５４３（ＵＮＱ２９４）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ３６００６ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ２２５５４３と命名）（ＵＮＱ２９４）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
Ｍ＿１４５５８１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１４５５８１ＮＩＤ：２１７０４１６７ムス・ムスクルスムス・ムスクルスシアル酸結合レクチンＳｉｇｌｅｃ−Ｆ（ＬＯＣ２３３１８６）；参照タンパク質：
Ｑ９２０Ｇ３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９２０Ｇ３ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＳＩＡＬＩＣＡＣＩＤ−ＢＩＮＤＩＮＧＬＥＣＴＩＮＳＩＧＬＥＣ−Ｆ；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿００３８３０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿００３８３０ＮＩＤ：４５０２６５８ホモ・サピエンスホモ・サピエンスシアル酸結合Ｉｇ様レクチン５（ＳＩＧＬＥＣ５）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｏ１５３８９ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｏ１５３８９ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＯＢＢＩＮＤＩＮＧＰＲＯＴＥＩＮ−２（ＳＩＧＬＥＣ５）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＳＩＧＬＥＣ５のオルソログであるＳｉｇｌｅｃ５（シアル酸結合Ｉｇ様レクチン５）である。別名としては、ｍＳｉｇｌｅｃ−Ｆ、シアル酸結合レクチンＳｉｇｌｅｃ−Ｆ、ＯＢＢＰ２、ＣＤ３３Ｌ２、ＯＢ−ＢＰ２、ＳＩＧＬＥＣ−５、ＣＤ３３抗原様２、ＯＢ結合タンパク質−２、およびシアル酸結合免疫グロブリン様レクチン５が挙げられる。

ＳＩＧＬＥＣ５は、主に、骨髄単球性系統の未成熟細胞、特に、血中の好酸球および骨髄中の好酸球前駆体において発現されるＩ型内在性原形質膜タンパク質である。該タンパク質は、シグナルペプチド、４つの細胞外免疫グロブリン様ドメイン、膜貫通セグメント、および１つ以上の細胞質免疫受容体チロシン系阻害性モチーフ（ＩＴＩＭ）を含む。
チロシンリン酸化の場合、ＩＴＩＭは、いくつかのホスファターゼのＳＨ２ドメインと結合し得る。ＳＩＧＬＥＣ５の細胞外ドメインは、リポ多糖上のα２，３結合シアル酸と結合し、おそらく細胞接着分子またはシグナル伝達受容体としての機能を果たす（Ｃｏｒｎｉｓｈｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ９２（６）：２１２３−３２（１９９８）；Ｐａｔｅｌｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７４（３２）：２２７２９−３８（１９９９）；Ａｎｇａｔａｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７６（４８）：４５１２８−３６（２００１）；Ｚｈａｎｇｅｔａｌ．，ＥｕｒＪＩｍｍｕｎｏｌ
３４（４）：１１７５−８４（２００４））。
ＳＩＧＬＥＣ５は、好酸球、好中球、単球、肺、脾臓および胎盤において発現される（Ｚ
ｈａｎｇｅｔａｌ．，ＥｕｒＪＩｍｍｕｎｏｌ３４（４）：１１７５−８４（２００４）；Ｐａｔｅｌｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７４（３２）：２２７２９−３８（１９９９）；Ｅｒｉｃｋｓｏｎ−Ｍｉｌｌｅｒｅｔａｌ．，Ｅｘｐ
Ｈｅｍａｔｏｌ３１（５）：３８２−８（２００３））。
好中球ＳＩＧＬＥＣ５発現は、ｆＭＬＰおよび腫瘍壊死因子−αでの処置に応答して上方調節され、ＳＩＧＬＥＣ５は、ｆＭＬＰに応答した好中球の酸化的大量放出の増大に関与している。これらの活性により、ＳＩＧＬＥＣ５は、微生物への曝露後に細胞−細胞相互作用または食作用に関与することによって免疫細胞機能においてある役割を果たしていることが示唆される（Ｅｒｉｃｋｓｏｎ−Ｍｉｌｌｅｒｅｔａｌ．，ＥｘｐＨｅｍａｔｏｌ３１（５）：３８２−８（２００３）；Ｊｏｎｅｓｅｔａｌ．，ＭｏｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌ４９（５）：１２１３−２５（２００３））。

カイ二乗値＝１．６１有意性＝０．４４７０８７９（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２５平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１から４および先行する非コードエクソンをターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿１４５５８１．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプルのうちの脳、脊椎、眼、胸腺、脾臓、肺、および腎臓中の標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．５．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ２２５５４３（ＵＮＱ２９４）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトシアル酸結合Ｉｇ様レクチン５（ＳＩＧＬＥＣ５）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、雌（−／−）マウスにおいて皮膚線維芽細胞の増殖割合の増加がもたらされた。また、変異型（−／−）マウスは、リンパ節および腹腔洗浄液の両方においてＢ細胞およびＢ細胞前駆体のパーセンテージの増加を示した。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）免疫学表現型解析
免疫関連疾患および炎症性疾患は、正常な生理機能において、傷害または損傷に応答し、傷害または損傷からの修復を開始し、そして外来生物体に対する先天的および後天的な防御を開始することにとって重大な意味を有する、かなり複雑で、複雑に相互連結してい
ることが多い生物学的経路の症状または結果である。これらの正常な生理学的経路が、応答の強度に直接関連してか、異常な制御もしくは過度の刺激の結果としてか、自己に対する応答としてか、またはこれらの組み合わせのいずれかとして、さらなる傷害または損傷を引き起こすときに、疾患または病態が生じる。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は、哺乳動物の免疫応答の重要な成分である。
Ｔ細胞は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己の分子に関連する抗原を認識する。この抗原は、抗原提示細胞、ウイルス感染細胞、癌細胞、移植片などの表面上にＭＨＣ分子とともに提示され得る。Ｔ細胞系は、宿主哺乳動物に対して健康への脅威をもたらすこれらの改変細胞を排除する。Ｔ細胞としては、ヘルパーＴ細胞および細胞傷害性Ｔ細胞が挙げられる。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原−ＭＨＣ複合体を認識した後、広範囲に増殖する。ヘルパーＴ細胞はまた、種々のサイトカイン、すなわち、リンフォカインを分泌する。リンフォカインは、Ｂ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞および免疫応答に関与する他の種々の細胞の活性化において中心的な役割を果たす。

以下の試験を実施した：
蛍光（Ｆｌｏｕｒｅｓｃｅｎｃｅ）標識細胞分取（ＦＡＣＳ）解析
手順：
ＣＤ４、ＣＤ８およびＴ細胞レセプターを含む、末梢血由来の免疫細胞組成物のＦＡＣＳ解析を実施して、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球に対するＣＤ１９、白血球マーカーとしてのＣＤ４５およびナチュラルキラー細胞に対するｐａｎＮＫを評価した。ＦＡＣＳ解析は、２匹の野生型および６匹のホモ接合性マウスにおいて実施し、胸腺、脾臓、骨髄およびリンパ節由来の細胞を含んだ。

これらの研究において、解析される細胞を、胸腺、末梢血、脾臓、骨髄およびリンパ節から単離した。単核細胞集団内のＣＤ４およびＣＤ８陽性のＴ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞お
よび単球の相対的比率を決定するようにフローサイトメトリーを設定した。Ｂｅｃｔｏｎ−ＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ３−レーザーＦＡＣＳ装置を使用して、免疫状態を評価した。表現型アッセイおよびスクリーニングのために、この装置は、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比に加えて、ＣＤ４＋／ＣＤ８−、ＣＤ８＋／ＣＤ４−、ＮＫ、Ｂ細胞および単球の数を記録する。６つの系統特異的抗体のパネル：ＣＤ４５ＰｅｒＣＰ、抗ＴＣＲｂＡＰＣ、ＣＤ４ＰＥ、ＣＤ８ＦＩＴＣ、ｐａｎ−ＮＫＰＥおよびＣＤ１９ＦＩＴＣを用いて、各マウス由来の溶解末梢血の単一サンプルを染色することによって単核細胞プロファイルを得た。２種類のＦＩＴＣ標識抗体およびＰＥ標識抗体は、相互に排他的な細胞タイプを染色する。ＣｅｌｌＱｕｅｓｔソフトウェアを備えたＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターを使用してサンプルを解析した。

結果：
組織特異的ＦＡＣＳ−プロジェクト：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものと比較した場合、リンパ節においてＢ細胞のパーセンテージの増加を示した。
（−／−）マウスはまた、腹腔洗浄液中において、Ｂ２２０−ＣＤ１１ｂＨｉ細胞のパーセンテージの減少ならびにＢ２２０−ＣＤ１１ＬｏｗおよびＣＤ１１ｂ細胞のパーセンテージの増加を示した。
したがって、ＵＮＱ２９４は、Ｂ細胞生成および分化の負の調節因子であるようである。

（ｃ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、血糖測定を含む。マウスにおける血液化学試験を実施するためにＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用した。代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。

結果：
血液化学：雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清グルコースレベルが増加した。雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清コレステロールレベルが増加した。
しかしながら、すべての雄（−／−）マウスは、歴史的平均より高い血清グルコースレベルを有した。

したがって、変異型（−／−）マウスは、グルコース代謝の変化と関連するものであり得る高血糖症または糖尿病を示した。

（ｄ）成体皮膚細胞増殖：
手順：皮膚細胞を１６週齢の動物（２匹の野生型マウス４匹のホモ接合性マウス）から単離した。これらを、初代線維芽細胞培養物に発達させて、その線維芽細胞増殖速度を厳密に制御されたプロトコルにおいて測定した。このアッセイが過剰増殖性表現型および低増殖性表現型を検出する能力は、ｐ５３およびＫｕ８０で証明されている。Ｂｒｄｕ取り込みを使用して増殖を測定した。

詳細には、これらの研究において、皮膚線維芽細胞増殖アッセイを使用した。標準化された培養物中の細胞数の増加を、相対的な増殖性能力の基準として使用した。野生型マウスおよび変異マウスから採取した皮膚バイオプシーから初代線維芽細胞を確立した。５万個の細胞の２つ組または３つ組の培養物を播種し、６日間生育させた。培養期間の終わりに、培養物中に存在する細胞の数を、電子粒子カウンターを使用して測定した。

結果：
皮膚増殖：雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均皮膚線維芽細胞増殖速度が増加した。

したがって、ホモ接合体変異マウスは、高増殖表現型を示した。これらの所見によって示唆されるように、ＰＲＯ３６００６ポリペプチドまたはその作用剤は、腫瘍抑制因子として機能することができ、異常な細胞増殖の減少に有用であろう。

４８．６．ＤＮＡ４５４１９−１２５２（ＵＮＱ３１８）遺伝子破壊を含むマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験では、ＰＲＯ３６３ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ４５４１９−１２５２と示す）（ＵＮＱ３１８）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報を以下に示す：変異マウス遺伝子は、以下に対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿１３３７３３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１３３７３３ＮＩＤ：
ｇｉ３１５４２０３４ｒｅｆＮＭ＿１３３７３３．２ムス・ムスクルスＲＩＫＥＮ
ｃＤＮＡ９０３０４２５Ｅ１１遺伝子（９０３０４２５Ｅ１１Ｒｉｋ）；参照タンパク質：Ｑ８Ｒ３７３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８Ｒ３７３ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＣＡＲ様膜タンパク質（脂肪細胞接着分子）（ムス・ムスクルス成体雄盲腸ｃＤＮＡ、ＲＩＫＥＮ完全長高含有ライブラリー、クローン：９１３０２３２Ｏ１７産物：ＡＤＩＰＯＣＹＴＥ−ＳＰＥＣＩＦＩＣＰＲＯＴＥＩＮ５、完全挿入物配列）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０２４７６９ホモ・サピエンス脂肪細胞特異的接着分子（ＡＳＡＭ）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９Ｈ６Ｂ４ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９Ｈ６Ｂ４ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＣＤＮＡ：
ＦＬＪ２２４１５ＦＩＳ、ＣＬＯＮＥＨＲＣ０８５６１（ＨＹＰＯＴＨＥＴＩＣＡＬ
４１．３ＫＤＡＰＲＯＴＥＩＮ）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＡＳＡＭ（脂肪細胞特異的接着分子）のオルソログであるＲＩＫＥＮｃＤＮＡ９０３０４２５Ｅ１１遺伝子である。別名としては、ＡＳＡＭ、ＣＬＭＰ、ＦＬＪ２２４１５、ａｓｐ５、ＩＧＳＦ１１、ＣＡＲ様膜タンパク質および脂肪細胞特異的タンパク質５が挙げられる。

ＡＳＡＭは、おそらく細胞接着分子および強固な連結部の成分としての機能を果たしているＩ型原形質膜タンパク質である。
該タンパク質は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属し、シグナルペプチド、免疫グロブリン様ドメイン、免疫グロブリン定常２型ドメイン、膜貫通セグメントおよび細胞質テールからなる。ＡＳＡＭは、主に、多種多様な組織由来の上皮細胞において発現され、おそらく細胞−細胞連絡および強固な連結部形成においてある役割を果たしている（Ｒａｓｃｈｐｅｒｇｅｒｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７９（１）：７９６−８０４（２００４）；ＫａｔｏｈおよびＫａｔｏｈ、ＩｎｔＪＯｎｃｏｌ２３（２）：５２５−３１（２００３））。

ターゲティングされたか遺伝子トラップされた変異を、系統１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ由来の胚性幹（ＥＳ）細胞で行った。キメラマウスを、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスと交配してＦ１ヘテロ接合体動物を作製する。これらの子孫を交雑受精してＦ２野生型子孫、
ヘテロ接合体変異子孫、およびホモ接合体変異子孫を作製する。稀に、例えば、Ｆ１マウスがキメラからほとんど得られない場合、Ｆ１ヘテロ接合体マウスを、１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスと交雑してさらなるヘテロ接合体動物を作製し、これを交雑受精してＦ２マウスを作製する。この世代由来のマウスに対してレベルＩ表現型解析を行う。

カイ二乗＝７．０６有意性＝０．０２９３０４９１６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．１７平均同腹仔数＝１０
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
１．野生型発現パネル：
２．ＱＣ発現：
４８．６．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ４５４１９−１２５２（ＵＮＱ３１８））
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト脂肪細胞特異的接着分子（ＡＳＡＭ）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）変異型のバイアビリティの低下がもたらされた。
ＣＡＴスキャン分析および検死の両方により、生存ホモ接合性変異型マウスにおいて、臨床的に観察された平均収縮期血圧の顕著な増加および血中尿素窒素の増加と一致する両側性水腎症および炎症が明らかになった。
変異型（−／−）マウスは、「洋ナシ形の腹」ならびに多発性嚢胞腎と認められる慢性炎症を伴う両側性で腫脹した腎臓を示した。
また、変異型は、その野生型同腹仔よりも小さく、数多くの血液化学、免疫学的および神経学的異常を示した。
成長遅延のさらなる証拠が、骨中無機質密度の測定値の減少とともに体脂肪、除脂肪体重および総組織マスの減少も示す変異型（−／−）マウスによって示される。標的遺伝子の破壊を、サザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）病理学
全般的な観察結果：（−／−）マウスの生存能低下が観察された。
顕微鏡的：１２．５日目に、４８個の胚：１１個の（−／−）胚、１８個の（＋／−）胚、１０個の（＋／＋）胚、５個の再吸収モルおよび４個の不確定な胚が観察された。
３匹の（−／−）マウスはすべて、両側性水腎症を示した。
また、化膿性および熱性肉芽種性（ｐｙｒｏｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｕｓ）炎症も２／３匹の（−／−）マウスにおいて認められ、これらの変異型における細菌感染に対する易罹患性の増大を示す（尿分析により尿路感染症の可能性が示された）。

（ｃ）免疫学表現型解析
免疫関連疾患および炎症性疾患は、正常な生理機能において、傷害または損傷に応答し、傷害または損傷からの修復を開始し、そして外来生物体に対する先天的および後天的な防御を開始することにとって重大な意味を有する、かなり複雑で、複雑に相互連結していることが多い生物学的経路の症状または結果である。これらの正常な生理学的経路が、応答の強度に直接関連してか、異常な制御もしくは過度の刺激の結果としてか、自己に対する応答としてか、またはこれらの組み合わせのいずれかとして、さらなる傷害または損傷を引き起こすときに、疾患または病態が生じる。

結果：
血液学：雌（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均絶対好中球数の増加を示した。

（ｄ）骨代謝および身体診断
（１）組織マスおよび除脂肪体重の測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ解析−試験の説明：
手順：野生型、ヘテロ接合体、およびホモ接合体マウスのコホートを、このアッセイで試験した。二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を使用して、総組織マス（ＴＴＭ）の変化を首尾よく同定した。

マウスを、アベルチン（１．２５％２，２，２−トリブロモエタノール、２０ｍＬ／ｋｇ体重）の腹腔内注射によって麻酔し、体長および体重を測定し、ＤＥＸＡスキャンのために、マウスをＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメータ（ＬｕｎａｒＩｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位で配置した。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを使用して、関心領域（ＲＯＩ）（すなわち、全身、脊椎、および両大腿骨）中の骨中無機質密度（ＢＭＤ）、脂肪組成（％脂肪）、および総組織マス（ＴＴＭ）を決定した。

身体測定（体長および体重）：
身体測定：約１６週齢で体長および体重の測定を行った。

結果：
体重：（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均体重が減少した。

体長：（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均体長の減少を示した。
また、８匹の（−／−）マウスのうち６匹は「洋ナシ形」の腹を示した。

生殖能力：
解析に利用可能な雄（−／−）マウスでは、交配の４０日後子供が生まれなかった。

基礎体温：
雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、基礎体温中央値の減少を示した。

（２）骨代謝：放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

Ｄｅｘａ解析−試験の説明：
手順：野生型、ヘテロ接合性およびホモ接合性のコホートをこのアッセイで試験した。二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を、うまく使用して骨の変化を同定した。麻酔動物を試験し、骨塩量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比、容量測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿骨ＢＭＤおよび椎骨ＢＭＤを測定した。

骨マイクロＣＴ解析：
手順：マイクロＣＴを使用して、非常に感度の高いＢＭＤの測定を行った。１つの椎骨および１つの大腿骨を、野生型マウスおよびホモ接合性マウスのコホートから取り出した
。腰部の５つの椎骨骨梁骨体積、骨梁厚、結合性密度ならびに大腿骨中軸の骨の総面積および皮質厚の測定を行った。μＣＴ４０スキャンにより、骨量および構造についての詳細な情報が得られた。複数の骨を、サンプルホルダーに置き、自動的にスキャンした。装置ソフトウェアを使用して、解析用の目的の領域を選択した。骨梁骨パラメータを、１６マイクロメートルの解像度で第５腰部椎骨（ＬＶ５）において解析し、皮質骨パラメータを、２０マイクロメートルの解像度で大腿骨中軸において解析した。

ＣＡＴスキャン分析
試験の説明：ＣＴ造影剤であるＯｍｎｉｐａｑｕｅ３００（ＮｙｃｏｍｅｄＡｍｅｒｓｈａｎ，３００ｍｇヨウ素／ｍＬ、０．２５ｍＬ／動物または２．５０〜３．７５ｇヨウ素／ｋｇ体重）をマウスの腹腔内に注射した。約１０分間、ケージ内で安静にさせた後、Ａｖｅｒｔｉｎ（１．２５％２，２，２，−トリブロムエタノール、２０ｍＬ／ｋｇ体重）を腹腔内注射することによりそのマウスを鎮静させた。麻酔動物を試験台に腹臥位にして、ＭｉｃｒｏＣＡＴスキャナー（ＩｍＴｅｋ，Ｉｎｃ．）を使用してＣＡＴスキャンを行った。三次元像を、ＩｍＴｅｋ３ＤＲＥＣＯＮソフトウェアを使用してワークステーションクラスターでＦｅｌｄｋａｍｐアルゴリズムによって再構成した。

結果：
Ｄｅｘａ：
雄（−／−）マウスは、平均総組織マスおよび除脂肪体重の顕著な減少を示した。雄および雌（−／−）マウスの両方は、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均体脂肪パーセント、総脂肪質量およびすべての骨塩密度関連測定値の顕著な減少を示した。

マイクロＣＴ：
顕著な差はなし。
しかしながら、解析に利用可能な（−／−）マウスはなかった。

ＣＡＴスキャン：
解析した３匹すべての（−／−）マウス（Ｍ−１５４、Ｆ−８１およびＦ−１４７）は、多発性嚢胞腎または重症な水腎症を示唆する著しい炎症を伴う両側性で腫脹した腎臓を示した。これらの結果は、血中尿素窒素レベルの増加および以下に報告する全身性高血圧症と一致する。
１匹の（＋／−）マウス（Ｆ−７６）もまた、左側に中等度の水腎症を示した。

ＰＲＯ３６３ポリペプチドをコードする遺伝子が欠損した変異（−／−）マウスは、体重および体長の減少および組織るいそう疾患（総体脂肪（％）および脂肪質量（ｇ）の減少）を特徴とする成長遅延と一致する表現型を示す。したがって、ＰＲＯ３６３ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニストまたはインヒビターは、これらの代謝関連効果および成長関連効果を模倣するであろう。他方では、ＰＲＯ３６３ポリペプチドまたはその作用剤は、糖尿病などの代謝障害または他の組織るいそう疾患の防止および／または治療で有用であろう。

また、ＤＥＸＡによって解析した（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔と比較した場合、異常な骨障害を示唆する、骨測定値の減少およびボディマス測定値の減少を示した。
（−／−）マウスは、骨代謝障害を反映する異常な骨測定値の減少を含む負の骨表現型を示した。
また、平均総組織マスおよび除脂肪体重の減少は、成長遅延および組織消耗性障害に関連する代謝障害を示す。
骨の負の表現型は、ＰＲＯ３６３ポリペプチドまたはそのアゴニストが、正常な成長発達に加えて骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。
さらに、ＰＲＯ３６３ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ３６３ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む異常な骨代謝に関連する炎症性疾患を含む異常な骨障害または病理学的な骨障害に導き得る。

（ｅ）表現型解析：ＣＮＳ／神経学
神経学の分野において、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含む神経性障害および精神医学的障害の処置のためのインビボにおいて有効な標的の同定についての解析に本明細書中では注目した。神経障害は、「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。その「不安障害」としては、以下：軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、別段特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴うパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、Ｉ型またはＩＩ型の双極性障害、別段特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物質誘導性気分障害が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害にあてはまることがあり、その人格障害としては、以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない。

手順：
行動スクリーニングを、野生型、ヘテロ接合性変異マウスおよびホモ接合性変異マウスのコホートにおいて実施した。生存能低下のために、より早期の試験が必要とならない限り、すべての行動試験は、１２〜１６週齢の間に実施した。これらの試験には、不安、活動レベルおよび探索を測定するためのオープンフィールドが含まれていた。
機能観察バッテリー（ＦＯＢ）試験−尾部懸垂試験：
ＦＯＢは、肉眼的に感覚および運動の欠損を決定するために動物に適用される一連の状況である。肉眼的神経機能を評価するアーウィンの神経学的スクリーニング由来の試験の一部を使用する。一般に、短期間の触覚、嗅覚、および視覚に対する刺激を動物に適用して、その正常に検出および応答する能力を決定する。これらの簡潔な試験は約１０分かかり、試験終了後にマウスをそのホームケージに戻す。

尾部懸垂試験：
尾部懸垂試験は、げっ歯類の抑鬱症様挙動モデルとして開発された手順である。この特定の準備では、マウスの尾部を６分間懸垂し、それに応じてマウスがこの位置から逃れるためにもがく。一定時間後、マウスのもがきは減少し、これは、どうすることもできないパラダイムの学習型と解釈される。無効なデータ（すなわち、試験中にその尾部を登る）を有する動物を、この分析から排除する。

結果：
尾部懸垂２：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、変異型において鬱様応答の増大を示唆する不動時間中央値の増加を示した。

したがって、ノックアウトマウスは、抑鬱症、全般性不安障害、認知障害、痛覚過敏、感覚障害、および／または双極性障害と一致する表現型を示した。したがって、ＰＲＯ３６３ポリペプチドおよびその作用剤は、抑鬱性障害に関連する症状の治療または改善に有用であろう。

（ｆ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、血糖測定を含む。マウスにおける血液化学試験を実施するためにＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用した。血糖値の測定に加えて、以下の血液化学試験もまた日常的に行う：アルカリホスファターゼ；アラニンアミノ−トランスフェラーゼ；アルブミン；ビリルビン；亜リン酸；クレアチニン；ＢＵＮ＝血中尿素窒素；カルシウム；尿酸；ナトリウム；カリウム；および塩化物。代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、インスリン感度およびグルコース代謝の変化を測定する耐糖能試験を含む。異常な耐糖能試験結果は、以下の障害または状態：１型糖尿病および２型糖尿病、シンドロームＸ、様々な循環器疾患および／または肥満症を示唆し得るが、これらに限定されない。

結果：
血液化学：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清アルカリホスファターゼレベルが増加した。
これらの結果は、多発性嚢胞腎の顕著な病理所見および血中尿素窒素の増加と一致する。

（−／−）マウスはまた、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清グルコースレベルの減少を示した。
また、雄および雌（−／−）マウスの両方は、平均血清血中尿素窒素レベルの増加を示した。
平均血清グルコースレベルの低下は、これらの変異型（−／−）マウスにおける耐糖能の向上という観察結果と一致する。
同様に、血中尿素窒素の増加レベルは、腎臓機能不全および／または組織消耗性疾患と一致する。

（ｇ）表現型解析：代謝−血液化学／耐糖能
代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、血糖測定を含む。マウスにおける血液化学試験を実施するためにＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用した。代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、インスリン感度およびグルコース代謝の変化を測定する耐糖能試験を含む。異常な耐糖能試験結果は、以下の障害または状態：１型糖尿病および２型糖尿病、シンドロームＸ、様々な循環器疾患および／または肥満症を示唆し得るが、これらに限定されない。

手順：野生型およびホモ接合性マウスのコホートをこのアッセイに使用した。耐糖能試験は、哺乳動物における損傷したグルコースホメオスタシスを定義するための標準的な試験である。Ｌｉｆｅｓｃａｎ血糖測定器を使用して耐糖能試験を行った。２０％溶液として送達される２ｇ／ｋｇのＤ−グルコースを動物にＩＰ注射し、血糖値を注射の０、３０、６０および９０分後に測定した。

結果：
経口耐糖能：
解析に利用可能な雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、耐糖能の向上を示した。

（ｈ）心臓学−血圧
説明：
ＶｉｓｉｔｅｃｈＢＰ−２０００血圧解析システムによる４日間の非侵襲性テールカフ法によって収縮期血圧を測定する。血圧を、４日間にわたって１日１０回測定する。次いで、４日間の値を平均して、マウスの意識下収縮期血圧を得る。

結果：
血圧：
雄および雌（−／−）マウスの両方は、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、変異型（−／−）マウスにおいて全身性高血圧症を示唆する平均収縮期血圧の顕著な上昇を示した（顕著な腎臓病理と一致する）。

４８．７．ＤＮＡ４６７７７−１２５３（ＵＮＱ３２０）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ３６５ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ４６７７７−１２５３と命名）（ＵＮＱ３２０）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２０６２２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０２０６２２ＮＩＤ：
ｇｉ２２２９６８７９ｒｅｆＮＭ＿０２０６２２．１ムス・ムスクルスＲＩＫＥＮ
ｃＤＮＡ９０３０６２４Ｃ２４遺伝子（９０３０６２４Ｃ２４Ｒｉｋ）；参照タンパク質：
Ｑ９Ｄ３０９ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９Ｄ３０９ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
タンパク質ＦＡＭ３Ｂ前駆体；参照ヒト遺伝子配列：
配列類似性３を有するＮＭ＿０５８１８６ホモ・サピエンスファミリー、構成員Ｂ（ＦＡＭ３Ｂ）、転写物改変体１；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｐ５８４９９ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｐ５８４９９ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
タンパク質ＦＡＭ３Ｂ前駆体（タンパク質ＰＲＥＤ４４）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＦＡＭ３Ｂ（配列類似性３を有するファミリー、構成員Ｂ）のオルソログであるＯＲＦ９（オープンリーディングフレーム９）である。
別名としては、２−２１、Ｄ１６Ｊｈｕ１９ｅ、９０３０６２４Ｃ２４Ｒｉｋ、ＰＲＥＤ４４、Ｃ２１ｏｒｆ１１、Ｃ２１ｏｒｆ７６、Ｄ２１Ｍ１６ＳＪＨＵ１９ｅ、サイトカイン様タンパク質２−２１、染色体２１オープンリーディングフレーム１１が挙げられる。

ＦＡＭ３Ｂは、おそらくシグナル伝達性リガンドとしての機能を果たしている分泌サイトカインである。該タンパク質は、膵島のα−およびβ−細胞において高レベルで、ならびに小腸、前立腺、細精管内の円形精子細胞、数多くの脳幹の核の神経細胞体、および小脳のプルキンエ細胞において低レベルで発現される。ＦＡＭ３Ｂは、β細胞からのインスリン分泌の基礎レベルを上昇させ得、カスパーゼ−３−媒介性経路によって島細胞においてアポトーシスを誘導し得る（Ｚｈｕｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ８０（２）：１４４−５０（２００２）；Ｃａｏｅｔａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｅｓ５２（９）：２２９６−３０３（２００３））。

遺伝子ターゲティングまたは遺伝子トラップによる変異を、系統１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ由来の胚性幹（ＥＳ）細胞において生じさせる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスと交雑させ、Ｆ１ヘテロ接合性動物を作製する。これらの子孫を、交雑受精することにより、Ｆ２の野生型、ヘテロ接合性およびホモ接合性の変異体子孫を作製する。まれに、例えば、Ｆ１マウスがキメラからほとんど得られない場合に、Ｆ１ヘテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスと交雑することにより、交雑受
精用のさらなるヘテロ接合性動物を得て、Ｆ２マウスを作製する。この世代のマウスについてレベルＩ表現型解析を実施する。

カイ二乗値＝０．９１有意性＝０．６３４４４７９３（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２５平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１および２をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２０６２２．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル（骨および脂肪以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．７．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ４６７７７−１２５３（ＵＮＱ３２０）
（ａ）全体的な表現型の概要：
配列類似性３を有するヒトファミリー、構成員Ｂ（ＦＡＭ３Ｂ）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、脾臓においてＣＤｂ＋ＣＤ１１ｃ−細胞（これは、単球／マクロファージおよび好中球を含む）のパーセンテージの増加を示す（−／−）マウスがもたらされた。
変異型（−／−）マウスはまた、平均心拍数の減少を示した。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は、哺乳動物の免疫応答の重要な成分である。Ｔ細胞は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己の分子に関連する抗原を認識する。この抗原は、抗原提示細胞、ウイルス感染細胞、癌細胞、移植片などの表面上にＭＨＣ分子とともに提示され得る。Ｔ細胞系は、宿主哺乳動物に対して健康への脅威をもたらすこれらの改変細胞を排除する。Ｔ細胞としては、ヘルパーＴ細胞および細胞傷害性Ｔ細胞が挙げられる。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原−ＭＨＣ複合体を認識した後、広範囲に増殖する。ヘルパーＴ細胞はまた、種々のサイトカイン、すなわち
、リンフォカインを分泌する。リンフォカインは、Ｂ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞および免疫応答に関与する他の種々の細胞の活性化において中心的な役割を果たす。

以下の試験を実施した：
蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）解析
手順：
ＣＤ４、ＣＤ８およびＴ細胞レセプターを含む、末梢血由来の免疫細胞組成物のＦＡＣＳ解析を実施して、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球に対するＣＤ１９、白血球マーカーとしてのＣＤ４５およびナチュラルキラー細胞に対するｐａｎＮＫを評価した。ＦＡＣＳ解析は、２匹の野生型および６匹のホモ接合性マウスにおいて実施し、胸腺、脾臓、骨髄およびリンパ節由来の細胞を含んだ。

結果：
組織特異的ＦＡＣＳ−マウス：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものと比較した場合、脾臓においてＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ−細胞のパーセンテージの増加を示した。
したがって、変異型（−／−）マウスは、脾臓において単球／マクロファージおよび好中球のレベルの上昇を示した。

（ｃ）心臓学−心拍数
説明：
ＶｉｓｉｔｅｃｈＢＰ−２０００血圧解析システムによる４日間の非侵襲性テールカフ法によって心拍数を測定する。心拍数を、４日間にわたって１日１０回測定する。次いで、４日間の値を平均して、マウスの意識下心拍数を得る。

心拍数：
（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均心拍数の減少（１〜２ＳＤ未満）を示した。

４８．８．ＤＮＡ４５２３４−１２７７（ＵＮＱ３２３）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ３８２ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ４５２３４−１２７７と命名）（ＵＮＱ３２３）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０８０７２７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０８０７２７ＮＩＤ：１８１４１５５８ムス・ムスクルスムス・ムスクルス膜貫通プロテアーゼ、セリン３（Ｔｍｐｒｓｓ３）；参照タンパク質：
Ｑ８ＶＤＥ０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＶＤＥ０ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＴＭＰＲＳＳ３ＰＲＯＴＥＩＮ；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０２４０２２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０２４０２２ＮＩＤ：１３１７３４７０ホモ・サピエンスホモ・サピエンス膜貫通プロテアーゼ、セリン３（ＴＭＰＲＳＳ３）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｐ５７７２７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｐ５７７２７ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＴＲＡＮＳＭＥＭＢＲＡＮＥＰＲＯＴＥＡＳＥ、ＳＥＲＩＮＥ３（ＥＣ３．４．２１．−）（ＳＥＲＩＮＥＰＲＯＴＥＡＳＥＴＡＤＧ−１２）（ＴＵＭＯＲＡＳＳＯＣＩＡＴＥＤＤＩＦＦＥＲＥＮＴＩＡＬＬＹ−ＥＸＰＲＥＳＳＥＤＧＥＮＥ−１２ＰＲＯＴＥＩＮ）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＴＭＰＲＳＳ３のオルソログであるＴｍｐｒｓｓ３（膜貫通プロテアーゼ、セリン３）である。別名としては、ＤＦＮＢ８、ＤＦＮＢ１０、ＥＣＨＯＳ１、ＴＡＤＧ１２およびセリンプロテアーゼＴＡＤＧ１２が挙げられる。

ＴＭＰＲＳＳ３は、主に小胞体上に存在するＩＩ型内在性膜タンパク質であり、おそらくチャネル活性化セリンプロテアーゼとしての機能を果たしている。該タンパク質は、膜貫通セグメント、ＬＤＬ受容体Ａドメイン、スカベンジャー受容体ドメイン、タンパク質分解活性化部位、およびＣ末端セリンプロテアーゼドメインを含む（Ｗａｌｌｒａｐｐｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ６０（１０）：２６０２−６（２０００）；Ｇｕｉｐｐｏｎｉｅｔａｌ．，ＨｕｍＭｏｌＧｅｎｅｔ１１（２３）：２８２９−３６（２００２））。
バイオインフォマティック解析（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））ＴＭＰＲＳＳ３が細胞外タンパク質であり得ることが示唆された。
ＴＭＰＲＳＳ３は、上皮のアミロリド感受性ナトリウムチャネルＥＮａＣの切断をインビトロで触媒し、該チャネルを活性化する。
ＴＭＰＲＳＳ３は、ＥＮａＣ、例えば、蝸牛内のコルチ器および血管条を支持する細胞で
あるらせん神経節もまた発現するいくつかの組織において発現される。ＴＭＰＲＳＳ３はまた、胸腺、胃、精巣およびＥ１９マウス胚においても発現される。
ＴＭＰＲＳＳ３は、おそらく、ＥＮａＣ活性を調節することにより聴力においてある役割を果たしており、これにより、内耳の内リンパにおいて低濃度のナトリウムが維持される（Ｇｕｉｐｐｏｎｉｅｔａｌ．，ＨｕｍＭｏｌＧｅｎｅｔ１１（２３）：２８２９−３６（２００２））。
ＴＭＰＲＳＳ３は、多くの場合、ある種の型の癌で過剰発現され、ここでは転移および腫瘍浸潤においてある役割を果たしている可能性がある（Ｗａｌｌｒａｐｐｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ６０（１０）：２６０２−６（２０００）；Ｕｎｄｅｒｗｏｏｄｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ１５０２（３）：３３７−５０（２０００）；Ｓａｗａｓａｋｉｅｔａｌ．，ＴｕｍｏｕｒＢｉｏｌ２５（３）：１４１−８（２００４））。
ＴＭＰＲＳＳ３遺伝子における変異は感音難聴を引き起こし得る（Ｗａｔｔｅｎｈｏｆｅｒｅｔａｌ．，ＪＭｏｌＭｅｄ８０（２）：１２４−３１（２００２）；Ｌｅｅｅｔａｌ．，ＪＭｅｄＧｅｎｅｔ４０（８）：６２９−３１（２００３）；Ａｈｍｅｄｅｔａｌ．，ＢＭＣＭｅｄＧｅｎｅｔ５（１）：２４（２００４））。

カイ二乗値＝０．７６有意性＝０．６８３８６１４３（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２４平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０８０７２７．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、２６のすべての成体組織サンプルのうち、脳、脊椎、眼、胸腺、脾臓、および血液において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．８．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ４５２３４−１２７７（ＵＮＱ３２３）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト膜貫通プロテアーゼ、セリン３（ＴＭＰＲＳＳ３）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）マウスにおいて驚愕応答はもたらされず、聴力障害を示唆した。
顕微解析により、ホモ接合性変異型マウスにおいて、プレパルス抑制試験の際に認められた聴力障害と一致するコルチ器の変性が明らかになった。
標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）病理学
顕微鏡的：
解析に利用可能な４匹の（−／−）マウスのうち、３匹がコルチ器の変性を示した；該器官は、残りの変異型では、組織学的切開（ｓｅｃｔｉｏｎ）のレベルではなかった。
これは、臨床的に認められた聴力障害の可能性と一致する。

（ｃ）表現型解析：ＣＮＳ／神経学
神経学の分野において、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含む神経性障害および精神医学的障害の処置のためのインビボにおいて有効な標的の同定についての解析に本明細書中では注目した。神経障害は、「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。その「不安障害」としては、以下：軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、別段特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴うパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、Ｉ型またはＩＩ型の双極性障害、別段特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物質誘導性気分障害が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害にあてはまることがあり、その人格障害としては、以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない。

手順：
行動スクリーニングを、４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性マウスおよび８匹のホモ接合性変異マウスのコホートにおいて実施した。生存能低下のために、より早期の試験が必要とならない限り、すべての行動試験は、１２〜１６週齢の間に実施した。これらの試験には、不安、活動レベルおよび探索を測定するためのオープンフィールドが含まれていた。

聴覚驚愕反射のプレパルス抑制
聴覚驚愕反射のプレパルス抑制は、大きな１２０デシベル（ｄＢ）驚愕誘発音が、より小さい（プレパルス）音に先行する場合に起こる。ＰＰＩパラダイムは、６種類の異なる試行型（７０ｄＢバックグラウンドノイズ、１２０ｄＢ単独、７４ｄＢ＋１２０ｄＢ−ｐｐ４、７８ｄＢ＋１２０ｄＢ−ｐｐ８、８２ｄＢ＋１２０ｄＢ−ｐｐ１２、および９０ｄＢ＋１２０ｄＢ−ｐｐ２０）からなり、各々、擬似ランダム順に６回、合計３６回の試行が繰り返される。刺激に対する最大応答（Ｖｍａｘ）を、各試行型について平均する。１００以下の１２０ｄＢ平均値を有する動物は、解析から除外する。プレパルスが動物の驚愕刺激に対する応答を抑制するパーセンテージを計算し、グラフで示す。

結果：
ＰＰＩ：
８匹の（−／−）マウスはすべて、驚愕応答を示さず、変異型における聴力障害を示唆した。
したがって、プレパルス抑制は評価され得なかった。
コルチ器の変性はこれらの観察結果と一致する。

概日性試験の説明：
雌マウスを、試験の１日目の午後４時に４８．２ｃｍ×２６．５ｃｍのホームケージ内に個々に収容し、飼料および水を随意に与える。動物を、１２時間明／暗サイクル（午前７時に点灯し、午後７時に消灯する）に曝露する。システムソフトウェアが、動物の動きによって引き起こされる光線遮断回数を記録し、光線中断回数は自動的に移動回数で割り算される。活動性は、３日間の試験中、１時間間隔で６０回記録する。得られたデータは、３日間の試験期間における各時間で記録した活動性レベル（概日リズム）の中央値および各明／暗サイクル中の総活動性（自発活動性）の中央値によって示される。

結果：
日周期：
雌（−／−）マウスは、明期の１つにおいて活性の急上昇を示したが、サイクルの破壊は、試験期間を通して一貫していなかった。

４８．９．ＤＮＡ２６８４６−１３９７（ＵＮＱ３２８）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ４４４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ２６８４６−１３９７と命名）（ＵＮＱ３２８）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２６２７４ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０２６２７４ＮＩＤ：
ｇｉ３１５４１９７２ｒｅｆＮＭ＿０２６２７４．２ムス・ムスクルスＲＩＫＥＮ
ｃＤＮＡ４９３０４７０Ｄ１９遺伝子（４９３０４７０Ｄ１９Ｒｉｋ）；参照タンパク質
Ｑ８ＢＶＲ６ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＢＶＲ６ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ムス・ムスクルス成体雄精巣ｃＤＮＡ、ＲＩＫＥＮ完全長高含有ライブラリー、クローン：４９３０４７０Ｄ１９産物：仮想ＳＰｌａおよびＲＹアノジン受容体（ＳＰＲＹ）／ＳＰＲＹドメイン／ＲＩＮＧフィンガー含有タンパク質、完全挿入物配列（ＲＩＫＥＮｃＤＮＡ４９３０４７０Ｄ１９）（ＭＫＩＡＡ１９７２タンパク質）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿１３３３６８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１３３３６８ＮＩＤ：
ｇｉ４５３８７９４８ｒｅｆＮＭ＿１３３３６８．１ホモ・サピエンスＫＩＡＡ１９７２タンパク質（ＫＩＡＡ１９７２）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：Ｑ９６ＤＸ４ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９６ＤＸ４ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
仮想タンパク質ＫＩＡＡ１９７２。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＫＩＡＡ１９７２タンパク質のオルソログであるＲＩＫＥＮｃＤＮＡ４９３０４７０Ｄ１９遺伝子である。

ＫＩＡＡ１９７２タンパク質は、シグナルペプチド、ＳＰＲＹ（ｓｐｌＡおよびｒｙアノジン受容体）ドメイン（ＳＭＡＲＴアクセッションＳＭ００４４９）、ならびにＲＩＮＧ（Ｒｉｎｇフィンガー）ドメイン（ＳＭＡＲＴアクセッションＳＭ００１８４）を含む推定Ｅ３ユビキチンリガーゼである。
ＲＩＮＧドメインは、多くの場合、Ｅ３ユビキチンリガーゼ活性を有し、多くのＥ３ユビキチンリガーゼに見られ得る（ＳＭＡＲＴアクセッションＳＭ００１８４）。
ＳＰＲＹドメインは、おそらくタンパク質−タンパク質相互作用に関与している（Ｗａｎｇｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２８０（１６）：１６３９３−４０１（２００５））。バイオインフォマティック解析により、ＫＩＡＡ１９７２タンパク質は細胞外であることが示唆される（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））。

カイ二乗値＝０．８３有意性＝０．６６０３４０３（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２２平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２６２７４．１）。
１．野生型発現パネル：
標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによって試験した２６の成体組織試料で、胚性幹（ＥＳ）細胞ならびに脊髄；胸腺；脾臓；肺；肝臓；骨格筋；骨；胃、小腸および結腸；心臓；脂肪；喘息肺；および血液において検出された。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．９．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ２６８４６−１３９７（ＵＮＱ３２８）
（ａ）全体的な表現型の概要：
推定ヒトＥ３ユビキチンリガーゼ（ＫＩＡＡ１９７２）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、数多くの免疫学的異常を示す小型の（−／−）マウスがもたらされた。ホモ接合性変異型マウスは、その性別一致野生型同腹仔よりも小さく、平均体重および体長、総組織マスおよび除脂肪体重の減少を示した。その野生型同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、数多くの免疫学的異常、例えば、末梢血中のナチュラルキラー細胞のパーセンテージの減少ならびにＬＰＳ攻撃に対する平均血清ＩＬ−６およびＴＮＦα応答の増大がホモ接合性変異型マウスにおいて認められた。（−／−）マウスで観察された免疫学的異常は、ＵＮＱ３２８のＥ３ユビキチンリガーゼ活性により媒介される作用機序によるものであり得る。
また、変異型は、オープンフィールド試験において活動性の低下または鬱様表現型を示した。
（−／−）マウスは、拡張期血圧の増加および心拍数の減少を伴う全身性高血圧症を示した。血液化学の結果により、おそらく肝細胞機能不全または胆管閉塞に関連しているアルカリホスファターゼレベルの増加が示された。雄（−／−）マウスは、マイクロＣＴ椎骨密度の測定値の顕著な減少を示した。
標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）免疫表現型解析
免疫関連疾患および炎症疾患は、通常の生理学では発作または損傷に応答し、発作または損傷からの修復を開始し、外来生物に対する先天性および後天性防御を増加させるために極めて重要な非常に複雑でしばしば複数の相互関連した生物学的経路の徴候および結果である。これらの正常な生理学的経路が応答強度の直接的関連、異常な制御または過剰な刺激の結果、自己反応、またはこれらの組み合わせとしてさらなる発作または損傷を引き起こす場合、疾患または病変が起こる。

これらの疾患の発症は、しばしば多段階経路およびしばしば複数の異なる生体系／生物学的経路に関与するが、１つまたは複数のこれらの経路における臨界点での介入が改善効果または治療効果を示し得る。有害な過程／経路の拮抗作用または有益な過程／経路の刺激のいずれかによって治療介入を行うことができる。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は、哺乳動物免疫応答の重要な構成要素である。Ｔ細胞は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己分子に関連する抗原を認識する。抗原を、抗原提示細胞、ウイルス感染細胞、癌細胞、移植片などの表面上のＭＨＣ分子と共に提示することができる。Ｔ細胞系は、宿主哺乳動物の健康に害を及ぼすこれらの変化した細胞を排除する。Ｔ細胞には、ヘルパーＴ細胞および細胞傷害性Ｔ細胞が含まれる。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原−ＭＨＣ複合体の認識後に大規模に増殖する。ヘルパーＴ細胞はまた、Ｂ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、および免疫応答に関与する種々の他の細胞の活性化で中心的な役割を果たす種々のサイトカイン（すなわち、リンフォカイン）を分泌する。

多くの免疫応答では、炎症細胞が損傷部位または感染部位に浸潤する。移動細胞は、罹患組織の組織学的試験によって決定することができる好中球、好酸球、単球、またはリンパ球であり得る。ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ｅｄ．ＪｏｈｎＥ．Ｃｏｌｉｇａｎ，１９９４，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．
多くの免疫関連疾患が公知であり、広く研究されている。このような疾患には、免疫介在炎症疾患（関節リウマチ、免疫介在腎臓疾患、肝胆疾患、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬、および喘息など）、非免疫介在炎症疾患、感染症、免疫不全、新形成、および移植片拒絶などが含まれる。免疫学領域では、炎症および炎症障害の治療のための標的を同定した。

免疫学領域では、本明細書中で、炎症および炎症障害の治療のための標的を同定した。免疫関連障害を、ある場合において、免疫応答の抑制によって治療することができる。免疫刺激活性を有する分子を阻害する中和抗体の使用は、免疫介在疾患および炎症疾患の治療で有利であろう。免疫応答を阻害する分子（直接または抗体作用剤の使用を介したタンパク質）を使用して、免疫応答を阻害し、免疫関連疾患を改善することができる。

以下の試験を行った。

急性期応答：
試験の説明：細菌リポ多糖（ＬＰＳ）は内毒素であり、そのようなものとして、急性期応答および全身性炎症の強い誘導因子である。レベルＩＬＰＳマウスに、２６ゲージの針を使用して、亜致死量のＬＰＳを含む２００μＬ滅菌生理食塩水を腹腔内（ｉ．ｐ．）注射した。この用量は、注射から３時間後に１μｇ／ｇ体重で試験したマウスの平均体重に基づいた。次いで、１００μＬの血液サンプルを採取し、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ装置でＴＮＦａ、ＭＣＰ−１、およびＩＬ−６の存在について分析した。

結果：
急性期応答：（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、ＬＰＳ攻撃に対する平均血清ＩＬ−６およびＴＮＦ−α応答が増加した。

まとめると、ＬＰＳ内毒素攻撃は、ＰＲＯ４４４ポリペプチドをコードする遺伝子が欠損したノックアウトマウスは、その野生型同腹仔と比較した場合、免疫学的異常を示すことを示した。特に、変異マウスは、ＬＰＳ内毒素で攻撃した場合、免疫応答（ＩＬ−６およびＴＮＦ−α産生）を誘発する能力の増加を示した。ＩＬ−６およびＴＮＦ−αは、より後期のＢ細胞活性化に寄与する。さらに、ＩＬ−６は、急性期反応および全身性炎症の誘導に重要な役割を果たす。これにより、ＰＲＯ４４４ポリペプチドのインヒビターまたはアンタゴニストが免疫系を刺激し、この効果が白血病、他の癌型、および免疫不全患者（ＡＩＤＳ患者など）などの場合の個体に有利である場合に使用されるであろうということが示唆される。したがって、ＰＲＯ４４４ポリペプチドまたはその作用剤は、免疫応答の阻害で有用であり、例えば、移植片拒絶または移植片対宿主疾患の場合の有害な免疫応答の抑制のための有用な候補であろう。

蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）解析
手順：
ＣＤ４、ＣＤ８およびＴ細胞レセプターを含む、末梢血由来の免疫細胞組成物のＦＡＣＳ解析を実施して、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球に対するＣＤ１９、白血球マーカーとしてのＣＤ４５およびナチュラルキラー細胞に対するｐａｎＮＫを評価した。ＦＡＣＳ解析は、２匹の野生型および６匹のホモ接合性マウスにおいて実施し、胸腺、脾臓、骨髄およびリンパ節由来の細胞を含んだ。

結果：
ＦＡＣＳ３：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、ナチュラルキラー細胞の平均パーセンテージの減少を特徴とする末梢血中の白血球サブセットの分布の変化を示した。

これらのＦＡＣＳ結果から、ホモ接合性変異マウスにおいてナチュラルキラー細胞の平均パーセンテージが減少したことが示される。ナチュラルキラー細胞は、ウイルスの免疫および腫瘍に対する防御に関係するので、これらの細胞は、ウイルス感染に対する防御の第一線である。ナチュラルキラー細胞すなわちＮＫ細胞は、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害におけるエフェクターとして作用し、それらは、事前の免疫または活性化の必要なしに、特定のリンパ系腫瘍細胞株をインビトロでにおいて殺滅する能力によって同定されてきた。
したがって、ＰＲＯ４４４ポリペプチドまたはそのアゴニストは、この白血球生成の刺激または調節に有用であり得る。

（ｃ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝領域では、代謝障害の治療のための標的を同定することができる。血液化学表現型解析は血糖値測定も含む。ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ．Ｒｏｃｈｅ）を、マウスの血流化学試験のために使用した。血糖値の測定に加えて、以下の血液化学試験も日常的に行う：アルカリホスファターゼ；アラニンアミノトランスフェラーゼ；アルブミン；ビリルビン；リン；クレアチニン；ＢＵＮ＝血中尿素窒素；カルシウム；尿酸；ナトリウム；カリウム；および塩化物。代謝領域では、糖尿病治療のための標的を同定することができる。血液化学表現型解析は、インスリン感受性およびグルコース代謝の変化を測定するための耐糖能試験を含む。耐糖能試験の異常な結果は、以下の障害または容態を示し得るが、これらに限定されない：１型および２型糖尿病、症候群Ｘ、種々の心血管疾患、および／または肥満症。

手順：
血液化学：雄および雌（−／−）マウスの両方は、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清アルカリホスファターゼレベルが増加した。この結果は、肝臓の変化に起因する可能性が高い。
これらの結果は、肝細胞機能不全または胆管閉塞によるものであり得る。

（ｄ）骨代謝および骨診断
（１）組織マスおよび除脂肪体重測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ解析−試験の説明：
手順：４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性マウスおよび８匹のホモ接合性マウスのコホートをこのアッセイで試験した。二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を、うまく使用して総組織質量（ＴＴＭ）の変化を同定した。

Ａｖｅｒｔｉｎ（１．２５％２，２，２，−トリブロモエタノール，２０ｍＬ／ｋｇ体重）をマウスに腹腔内注射することにより麻酔し、体長および体重を測定し、次いで、そのマウスをＤＥＸＡスキャンのためにＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（Ｌｕｎａｒ
Ｉｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位にした。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを使用して、目的の領域（ＲＯＩ、すなわち、全身、椎骨および両大腿骨）の骨塩密度（ＢＭＤ）および脂肪組成物（％脂肪）および総組織質量（ＴＴＭ）を測定した。

結果：
体重：（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して平均体重の減少を示した。

体長：（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して平均体長が減少した。
（２）骨代謝：放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

結果：
Ｄｅｘａ：
雄および雌（−／−）マウスの両方は、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均総組織マス、除脂肪体重、ならびに骨塩量および密度の測定値の減少を示した。

マイクロＣＴ：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均脊椎小柱の体積、数、厚さ、および連結密度が顕著に減少し、大腿骨中軸の平均皮質厚および平均断面積が減少した。

ＰＲＯ４４４ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失した変異型（−／−）マウスは、体重および体長の減少が顕著な成長遅延と一致する表現型を示す。
したがって、ＰＲＯ４４４ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニストまたはインヒビターは、これらの代謝関連作用および成長関連作用を模倣し得る。他方で、ＰＲＯ４４４ポリペプチドまたはそのアゴニストは、糖尿病または他の組織るいそう疾患などの代謝障害の予防および／または処置に有用であり得る。
また、ＤＥＸＡおよびマイクロＣＴによって解析した（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔と比較した場合、骨測定値の減少およびボディマス測定値の減少を示し、異常な骨障害が示唆された。
その（−／−）マウスは、負の骨表現型を示し、骨の代謝障害を反映する骨測定値が異常に減少した。
また、平均総組織マスおよび除脂肪体重の減少は、成長遅延および組織消耗性障害に関連する代謝障害を示す。
骨の負の表現型は、ＰＲＯ４４４ポリペプチドまたはそのアゴニストが、正常な成長発達に加えて骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。

ＰＲＯ４４４ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎または骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ４４４ポリペプチドのアンタゴニスト（またはインヒビター）およびそのコード遺伝子は、関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む異常な骨代謝に関連する炎症性障害を含む異常または病的な骨障害を引き起こすであろう。

手順：
行動スクリーニングを、４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性マウスおよび８匹のホモ接合性変異マウスのコホートにおいて実施した。生存能低下のために、より早期の試験が必要とならない限り、すべての行動試験は、１２〜１６週齢の間に実施した。これらの試験は、不安、活動性レベルおよび探索を計測するためのオープンフィールドを含んだ。

オープンフィールド試験：
公知の薬物のいくつかの標的は、オープンフィールド試験において表現型を示した。これらとしては、セロトニン（ｓｅｒａｔｏｎｉｎ）トランスポーター、ドーパミントランスポーター（Ｇｉｒｏｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．１９９６Ｆｅｂ１５；３７９（６５６６）：６０６−１２）およびＧＡＢＡレセプター（Ｈｏｍａｎｉｃｓｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ．１９９７Ａｐｒ１５；９４（８）：４１４３−８）のノックアウトを含む。自動化されたオープンフィールドアッセイをカスタマイズして、感情状態に関連する変化および学習に関する探索パターンを扱った。まず、フィールド（４０×４０ｃｍ）をマウスに対して比較的大きくなるように選択することによって探索に関連する自発運動の変化を取り上げるように設計した。さらに、４つの穴を床に設け、探索に特に関連する活動である鼻の突っ込みを可能にした。この試験に関連した感情状態を高めるためにいくつかの因子を設けた。オープンフィールド試験は、マウスが試験される最初の実験的手順であり、なされる測定は被験体のチャンバーとの最初の経験であった。さらに、オープンフィールドは明るく照らした。これらの因子のすべてによって、新しい開放性空間に関連する天然の不安が高められる。次いで、探索活動のパターンおよび程度ならびに特に中心からの全移動距離比は、不安または抑鬱症に対する罹りやすさに関する変化を識別することができる。３つの異なったレベルでの赤外線ビームを用いた大きな活動領域（４０ｃｍ×４０ｃｍ、ＡｃｃｕＳｃａｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓのＶｅｒｓａＭａｘ動物活動性モニターシステム）を用いて、直立、穴への突っ込みおよび自発運動を記録した。動物を中心に置き、その活動を２０分間測定した。
この試験のデータを４分間隔で５回分析した。全移動距離（ｃｍ）、垂直移動回数（直立）、穴突っ込み回数および中心からの全移動距離比を記録した。

マウスが新しい環境に対して正常な慣れ応答を示す傾向を、５回の間隔にわたるその水平自発運動の変化すべてを測定することにより評価する。経時的な活動性の変化のこの算定傾きは、絶対値ではなく正規化された全移動距離を使用して決定する。傾きは５回の間隔のそれぞれにおける正規化された活動を通しての回帰直線から決定する。正常な慣れは、負の傾きの値によって表される。

結果：
雄（−／−）マウスは、オープンフィールド試験の際、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、活動性の低下を示し、変異型における不安様応答の減少が示唆された。

注目すべき差が、オープンフィールド活動性試験中に観察された。（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、中心領域にいる時間の合計の中央値の増加（活動性の低下）を示した。これは、変異体における不安様応答の低下を示唆する。したがって、ノックアウトマウスは、抑鬱症、全般性不安障害、認知障害、痛覚過敏ならびに感覚障害および／または双極性障害と一致する表現型を示した。したがって、ＰＲＯ４４４ポリペプチドおよびそのアゴニストは、抑鬱性障害に関連する症状の処置または寛解に有用であり得る。

（ｆ）心臓学−血圧／心拍数
説明：
ＶｉｓｉｔｅｃｈＢＰ−２０００血圧解析システムによる４日間の非侵襲性テールカフ法によって収縮期血圧を測定する。血圧を、４日間にわたって１日１０回測定する。次いで、４日間の値を平均して、マウスの意識下収縮期血圧を得る。

結果
血圧：
雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものと比較した場合、平均収縮期血圧の増大を示したが、歴史的平均内であった。

説明：
ＶｉｓｉｔｅｃｈＢＰ−２０００血圧解析システムによる４日間の非侵襲性テールカフ法によって心拍数を測定する。心拍数を、４日間にわたって１日１０回測定する。次いで、４日間の値を平均して、マウスの意識下心拍数を得る。
心拍数：
雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均心拍数の減少を示した。

４８．１０．ＤＮＡ５０９１４−１２８９（ＵＮＱ３６９）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ７０５ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ５０９１４−１２８９と命名）（ＵＮＱ３６９）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０１１８２１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０１１８２１ＮＩＤ：７１０６３２４ムス・ムスクルスムス・ムスクルスグリピカン６（Ｇｐｃ６）；参照タンパク質：
Ｑ９Ｒ０８７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９Ｒ０８７ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＧＬＹＰＩＣＡＮ−６ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿００５７０８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿００５７０８ＮＩＤ：８０５１６０１ホモ・サピエンスホモ・サピエンスグリピカン６（ＧＰＣ６）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９Ｙ６２５ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９Ｙ６２５ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＧＬＹＰＩＣＡＮ−６ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＧＰＣ６のオルソログであるＧｐｃ６（グリピカン６）である別名としては、ＭＧＣ３２２２１、６７２０４２９Ｃ２２Ｒｉｋ、ｂＡ６２Ｄ２３．１（グリピカン６）、ｂＡ６３２Ｌ２．２（グリピカン６）およびｂＡ１５８Ｂ１４．１（グリピカン６）が挙げられる。

ＧＰＣ６は、増殖因子シグナル伝達の共受容体または調節因子として機能している可能性がある細胞外グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）固定ヘパラン硫酸プロテオグリカンである。該タンパク質は、ほとんどの組織、特に腎臓および卵巣において発現される。
ＧＰＣ６は、おそらく、発達中の形態形成においてある役割を果たしている（Ｖｅｕｇｅｌｅｒｓｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７４（３８）：２６９６８−７７（１９９９）；Ｐａｉｎｅ−Ｓａｕｎｄｅｒｓｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ５７（３）：４５５−８（１９９９）；ＤｅＣａｔａｎｄＤａｖｉｄ、ＳｅｍｉｎＣｅｌｌＤｅｖＢｉｏｌ１２（２）：１１７−２５（２００１）；Ｆｉｌｍｕｓ、Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ１１（３）：１９Ｒ−２３Ｒ（２００１））。

カイ二乗値＝１２．３６有意性＝０．００２０７０４２８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．１１平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０１１８２１．１）をターゲティングした。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプルにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．１０．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ５０９１４−１２８９（ＵＮＱ３６９）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトグリピカン６（ＧＰＣ６）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）変異型の致死がもたらされた。
しかしながら、すべての（−／−）マウスが胚致死性を示した場合であっても、致死にはばらつきがあった：
一部の致死は１２．５日前であり、一部は通常１２．５日であった。
ホモ接合性マウスにおけるこの観察された致死は、おそらく増殖因子シグナル伝達の血管または欠如によるものであり得る。ヘテロ接合性（＋／−）マウスは、平均血清グルコースレベルの増加ならびに血小板計数の増加を示した。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）病理学
顕微鏡的：１２．５日目に、４０個の胚：６個の（−／−）胚、１８個の（＋／−）胚、１１個の（＋／＋）胚、４個の再吸収モルおよび１個の不確定な胚が観察された。
しかしながら、（−／−）胚では構造的発達異常は検出されなかった。

遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は、免疫組織化学によって組織パネルにおいて検出されなかった。

（ｃ）免疫表現型解析
免疫関連疾患および炎症疾患は、通常の生理学では発作または損傷に応答し、発作または損傷からの修復を開始し、外来生物に対する先天性および後天性防御を増加させるために極めて重要な非常に複雑でしばしば複数の相互関連した生物学的経路の徴候および結果である。これらの正常な生理学的経路が応答強度の直接的関連、異常な制御または過剰な刺激の結果、自己反応、またはこれらの組み合わせとしてさらなる発作または損傷を引き起こす場合、疾患または病変が起こる。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は、哺乳動物免疫応答の重要な構成要素である。Ｔ細胞は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己分子に関連する抗原を認識する。抗原を、抗原提示細胞、ウイルス感染細胞、癌細胞、移植片などの表面上のＭＨＣ分子と共に提示することができる。Ｔ細胞系は、宿主哺乳動物の健康に害を及ぼすこれらの変化した細胞を排除する。Ｔ細胞には、ヘルパーＴ細胞および細胞傷害性Ｔ細胞が含まれる。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原−ＭＨＣ複合体の認識後に大規
模に増殖する。ヘルパーＴ細胞はまた、Ｂ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、および免疫応答に関与する種々の他の細胞の活性化で中心的な役割を果たす種々のサイトカイン（すなわち、リンフォカイン）を分泌する。

以下の試験を行った。

血液学解析：
試験の説明：血液試験は、Ａｂｂｏｔｔ社のＣｅｌｌ−Ｄｙｎ３５００Ｒ自動血液学分析装置によって行う。その特徴の一部としては、５種類の白血球分画が挙げられる。「患者」レポートには、全部で２２を超えるパラメータが含まれ得る。

結果：
血液学：（＋／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血小板数の増加を示した。

したがって、ヘテロ接合性マウスにより、凝固障害に関連する表現型がもたらされた。

（ｄ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝領域では、糖尿病治療のための標的を同定することができる。血液化学表現型解析には、血糖値測定が含まれる。ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ．Ｒｏｃｈｅ）を、マウスの血流化学試験のために使用した。代謝領域では、糖尿病治療のための標的を同定することができる。

結果：
血液化学：雌（＋／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均血清グルコースレベルの増加を示した。
したがって、ヘテロ接合性（＋／−）マウスは、異常なグルコース代謝に関連する負の表現型を示した。

４８．１１．ＤＮＡ５８８４７−１３８３（ＵＮＱ５２８）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１０７１ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ５８８４７−１３８３と命名）（ＵＮＱ５２８）を破壊した。これらの研究のた
めの遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＡＫ０４５０８５ムス・ムスクルス９．５日胚の単為発生胚（ｐａｒｔｈｅｎｏｇｅｎｏｔｅ）ｃＤＮＡ、ＲＩＫＥＮ完全長高含有ライブラリー、クローン：Ｂ１３００３１Ｃ０１産物：ＡＤＡＭ−ＴＳＲＥＬＡＴＥＤＰＲＯＴＥＩＮ１ホモログ［ホモ・サピエンス］；参照タンパク質：
Ｑ８ＢＬＩ０ＡＤＡＭＴＳ様タンパク質１前駆体（Ｐｕｎｃｔｉｎ）ｇｉ｜２６３３７０５９｜ｄｂｊ｜ＢＡＣ３２２１３．１｜無名タンパク質産物［ムス・ムスクルス］；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿１３９２３８ホモ・サピエンスＡＤＡＭＴＳ様１（ＡＤＡＭＴＳＬ１）、転写物改変体１；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
ＮＰ＿６４０３２９ＡＤＡＭＴＳ様１アイソフォーム１［ホモ・サピエンス］。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＡＤＡＭＴＳＬ１のオルソログであるＡｄａｍｔｓｌ１（ＡＤＡＭＴＳ様１）である。別名としては、ｐｕｎｃｔｉｎ−１、６７２０４２６Ｂ０９Ｒｉｋ、ＡＤＡＭＴＳＲ１、ＭＧＣ４０１９３、ｐｕｎｃｔｉｎ、ＡＤＡＭＴＳＬ−１、ＡＤＡＭＴＳ様、トロンボスポンジン、およびＡＤＡＭ−ＴＳ関連タンパク質１が挙げられる。

ＡＤＡＭＴＳＬ１は、主に骨格筋において発現される分泌タンパク質であり、おそらく細胞外マトリックスタンパク質としての機能を果たしている。
ＡＤＡＭＴＳＬ１は、プロテアーゼのＡＤＡＭＴＳファミリーと構造が類似している。
該タンパク質は、シグナルペプチド、トロンボスポンジン型１反復配列（ＰＦＡＭアクセッションＰＦ０００９０）、ＡＤＡＭ−ＴＳスペーサー１領域（ＰＦＡＭアクセッションＰＦ０５９８６）、および２〜４つ以上のトロンボスポンジン型Ｉ反復配列を含むが、メタロプロテアーゼおよびディスインテグリン様ドメインを欠く（Ｈｉｒｏｈａｔａｅｔ
ａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７７（１４）：１２１８２−９（２００２））。

カイ二乗値＝０．９２有意性＝０．６３１２８３６４（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２４平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＡＫ０４５０８５）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験した骨、脂肪および血液以外の２６のすべての成体組織サンプルにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．１１．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ５８８４７−１３８３（ＵＮＱ５２８）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトＡＤＡＭＴＳ様１（ＡＤＡＭＴＳＬ１）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）マウス平均皮膚線維芽細胞の増殖割合の減少を示すことがもたらされた。
また、変異型（−／−）マウスは、総組織マス、除脂肪体重の減少および骨中無機質密度の測定値の減少を示した。
ホモ接合性マウスはまた、平均血清グルコースレベルの上昇を示した。
標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）骨代謝および全身診断学／放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

結果：
Ｄｅｘａ：
雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均総組織マス、除脂肪体重、ならびに骨塩量および密度の測定値の減少を示し
た。
しかしながら、変異型の平均骨塩量指数（ＢＭＣ／ＬＢＭ）は歴史的範囲内であった。

ＰＲＯ１０７１ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失した変異型（−／−）マウスは、組織消耗性疾患と一致する表現型（総組織マスおよび除脂肪体重の減少）を示す。
したがって、ＰＲＯ１０７１ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニストまたはインヒビターは、これらの代謝関連作用を模倣し得る。他方で、ＰＲＯ１０７１ポリペプチドまたはそのアゴニストは、悪液質または他の組織るいそう疾患などのそのような代謝障害の予防および／または処置に有用であり得る。

また、ＤＥＸＡによって解析した（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔と比較した場合、骨測定値の減少ならびに全身骨塩量および密度の測定値の減少を示し、異常な骨障害を示唆する。
その（−／−）マウスは、負の骨表現型を示し、骨の代謝障害を反映する骨測定値が異常に減少した。
骨の負の表現型は、ＰＲＯ１０７１ポリペプチドまたはそのアゴニストが、正常な成長発達に加えて骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。
さらに、ＰＲＯ１０７１ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ１０７１ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む異常な骨代謝に関連する炎症性疾患を含む、異常な骨障害または病理学的な骨障害に導き得る。

（ｃ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝領域では、糖尿病および他の代謝障害の治療のための標的を同定することができる。血液化学表現型解析には、血糖値測定が含まれる。ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ．Ｒｏｃｈｅ）を、マウスの血流化学試験のために使用した。代謝領域では、糖尿病治療のための標的を同定することができる。

結果：
血液化学：雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清グルコースレベルが増加した。

したがって、変異型（−／−）マウスは、グルコース代謝の変化または糖尿病と関連するものであり得る高血糖症を示した。
ＰＲＯ１０７１ポリペプチドまたはそのアゴニストは、正常なグルコースレベル／代謝の維持に有用であり得、おそらく糖尿病の処置に有用であり得る。

（ｄ）成体皮膚細胞増殖：
手順：皮膚細胞を１６週齢の動物（２匹の野生型マウスおよび４匹のホモ接合性マウス）から単離した。これらを、初代線維芽細胞培養物に発達させて、その線維芽細胞増殖速度を厳密に制御されたプロトコルにおいて測定した。このアッセイが過剰増殖性表現型および低増殖性表現型を検出する能力は、ｐ５３およびＫｕ８０で証明されている。Ｂｒｄｕ取り込みを使用して増殖を測定した。

結果：
皮膚の増殖：
雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均皮膚線維芽細胞の増殖割合の減少を示した。

したがって、ホモ接合性変異マウスは、低増殖性の表現型を示した。これらの観察結果により示唆されるように、ＰＲＯ１０７１ポリペプチドのアンタゴニストまたはインヒビターは、この低増殖性表現型を模倣し得、腫瘍サプレッサーとして機能し得、異常な細胞増殖を低下させるのに有用であり得る。

４８．１２．ＤＮＡ６０６１９−１４８２（ＵＮＱ５６３）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１１２５ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ６０６１９−１４８２と命名）（ＵＮＱ５６３）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０１３７６３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０１３７６３ＮＩＤ：
ｇｉ３１５４３８４４ｒｅｆＮＭ＿０１３７６３．２ムス・ムスクルストランスデューシン（β様２（Ｔｂｌ２）；参照タンパク質：
Ｑ８ＣＦＹ０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＣＦＹ０ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
トランスデューシン（β）様２と類似；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０３２９８８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０３２９８８ＮＩＤ：
ｇｉ１４６７０３７８ｒｅｆＮＭ＿０３２９８８．１ホモ・サピエンストランスデューシン（β）様２（ＴＢＬ２）、転写物改変体２；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ８Ｎ２Ｌ６ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８Ｎ２Ｌ６ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
仮想タンパク質ＦＬＪ９０１３８。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＴＢＬ２のオルソログであるＴｂｌ２（トランスデューシン［β］様２）である。別名としては、ＷＳ−ｂＴＲＰ、ＷＢＳＣＲ１３、ＷＳ−βＴＲＰ、ＤＫＦＺＰ４３Ｎ０２４およびウィリアムス−−ビューレン症候群染色体領域１３が挙げられる。

ＴＢＬ２は、シグナルペプチドおよび５つのＷＤ４０反復配列を含む推定分泌タンパク質である（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））。
ＷＤ４０反復配列を含むタンパク質は、一般的に、多タンパク質複合体合成の骨格としての機能を果たす。ＷＤ４０反復配列を有するタンパク質の例としては、Ｇタンパク質、転写因子およびＥ３ユビキチンリガーゼ（ＳＭＡＲＴアクセッションＳＭ００３２０）が挙げられる。
ＴＢＬ２は、主に、精巣、骨格筋、心臓および種々の内分泌組織において発現される。
ＴＢＬ２は、ウィリアムス−ビューレン症候群に関与している可能性がある（Ｍｅｎｇｅｔａｌ．，ＨｕｍＧｅｎｅｔ１０３（５）：５９０−９（１９９８）；Ｐｅｒｅｚ−Ｊｕｒａｄｏｅｔａｌ．，ＣｙｔｏｇｅｎｅｔＣｅｌｌＧｅｎｅｔ８６（３−４）：２７７−８４（１９９９））。

遺伝子ターゲティングまたは遺伝子トラップによる変異を、系統１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ由来の胚性幹（ＥＳ）細胞において生じさせる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビ
ノマウスと交雑させ、Ｆ１ヘテロ接合性動物を作製する。これらの子孫を、交雑受精することにより、Ｆ２の野生型、ヘテロ接合性およびホモ接合性の変異体子孫を作製する。まれに、例えば、Ｆ１マウスがキメラからほとんど得られない場合に、Ｆ１ヘテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスと交雑することにより、交雑受精用のさらなるヘテロ接合性動物を得て、Ｆ２マウスを作製する。この世代のマウスについてレベルＩ表現型解析を実施する。

カイ二乗値＝３．１９有意性＝０．２０２９０８５２（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０１３７６３．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル（骨格筋、骨、胃、小腸および結腸以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．１２．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ６０６１９−１４８２（ＵＮＱ５６３）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトトランスデューシン（β）様２（ＴＢＬ２）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、マイクロＣＴ骨梁数の増加および大腿骨中軸断面積の増加を示す変異型（−／−）マウスがもたらされた。
（−／−）マウスはまた、（＋／＋）同腹仔対照と比較した場合、体重および体長の増加を示した。
雄（−／−）マウスは、生殖能力の問題を示した。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）骨代謝および全身診断学
（１）組織質量および除脂肪体重の測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ解析−試験の説明：
手順：４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性マウスおよび８匹のホモ接合性マウスのコホートをこのアッセイで試験した。二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を、うまく使用して総組織質量（ＴＴＭ）の変化を同定した。

結果：
体重：
（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均体重の増加を示し、その差は雄においてより顕著であった。

体長：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均体長の増加を示した。

生殖能力：
解析に利用可能な雄（−／−）マウスでは、雌（＋／＋）マウス交配の４０日後、子供が生まれなかった。

結果：
マイクロＣＴ：
雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均椎骨梁数の増加および平均大腿骨中軸断面積の増加を示した。

まとめると、（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較した場合、椎骨および大腿骨測定値の増加を示した。
これらの結果から、ノックアウト変異表現型が、大理石骨病のような骨の異常に関連し得ることが示唆される。大理石骨病は、骨の異常な肥厚および硬化ならびに骨の異常な脆弱性を特徴とする状態である。そのため、ＰＲＯ１１２５ポリペプチドまたはそのアゴニストは、大理石骨病および他の骨関連障害の処置に有益であり得る。一方で、ＰＲＯ１１２５ポリペプチドのインヒビターまたはアンタゴニストは、骨の治癒に有用であり得る。

また、変異型（−／−）マウスは、平均総組織マスおよび除脂肪体重の増加ならびに体重および体長の増加を示した。
これらの研究により、変異（−／−）非ヒトトランスジェニック動物が肥満に関連し得る負の表現型を示すことが示唆される。したがって、ＰＲＯ１１２５ポリペプチドまたはその作用剤は、正常な成長および代謝過程に不可欠であり、肥満の予防および／または治療で特に重要であろう。

４８．１３．ＤＮＡ５６８６５−１４９１（ＵＮＱ５７２）遺伝子破壊を含むマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験では、ＰＲＯ１１３４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ５６８６５−１４９１と示す）（ＵＮＱ５７２）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報を以下に示す：変異マウス遺伝子は、以下に対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２９６２６ムス・ムスクルスＲＩＫＥＮｃＤＮＡ２４１０００４Ｈ０５遺伝子（２４１０００４Ｈ０５Ｒｉｋ）；参照タンパク質：
Ｑ９ＣＷＴ８Ｑ９ＣＷＴ８Ｑ９ＣＷＴ８２４１０００４Ｈ０５ＲＩＫＰＲＯＴＥＩＮ；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿００１０１０９８３ホモ・サピエンスグリコシルトランスフェラーゼ８ドメイン含有１（ＧＬＴ８Ｄ１）、転写物改変体３；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：Ｑ９Ｐ０Ｉ５Ｑ９Ｐ０Ｉ５Ｑ９Ｐ０Ｉ５ＡＤ−０１７ＰＲＯＴＥＩＮＧＬＹＣＯＳＹＬＴＲＡＮＳＦＥＲＡＳＥ。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＧＬＴ８Ｄ１（グリコシルトランスフェラーゼ８ドメイン含有１）のオルソログであるＲＩＫＥＮｃＤＮＡ２４１０００４Ｈ０５遺伝子である。
別名としては、５４３０４１４Ｎ１４Ｒｉｋ、ＡＤ−０１７、ＭＳＴＰ１３９、ＦＬＪ１４６１１およびグリコシルトランスフェラーゼＡＤ−０１７が挙げられる。

ＧＬＴ８Ｄ１は、シグナルアンカーまたはシグナルペプチドおよびグリコシルトランスフェラーゼファミリー８ドメインからなる推定グリコシルトランスフェラーゼである。このドメインを含む酵素は、典型的には、アクセプター分子と活性化ドナー分子間のＯ−グリコシド結合の形成を触媒する。このドメインを含む酵素の一例は、共基質としてＵＤＰ−グルコースを用いてその自己グリコシル化を触媒するグリコーゲンシンターゼと強固に会合したタンパク質であるグリコゲニン（ＰｆａｍアクセッションＰＦ０１５０１）である。ＧＬＴ８Ｄ１の細胞内の位置は不明である。
バイオインフォマティック解析により、該タンパク質は細胞外であり得るか、またはゴルジ装置上に位置し得ることが示唆される（Ｃｏｕｔｉｎｈｏｅｔａｌ．，ＪＭｏｌ
Ｂｉｏｌ３２８（２）：３０７−１７（２００３））。

ターゲティングされたか遺伝子トラップされた変異を、系統１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ由来の胚性幹（ＥＳ）細胞で行った。キメラマウスを、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスと交
配してＦ１ヘテロ接合体動物を作製する。これらの子孫を交雑受精してＦ２野生型子孫、ヘテロ接合体変異子孫、およびホモ接合体変異子孫を作製する。稀に、例えば、Ｆ１マウスがキメラからほとんど得られない場合、Ｆ１ヘテロ接合体マウスを、１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスと交雑してさらなるヘテロ接合体動物を作製し、これを交雑受精してＦ２マウスを作製する。この世代由来のマウスに対してレベルＩ表現型解析を行う。

カイ二乗＝０．７９有意性＝０．６７３６８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２３平均同腹仔数＝８変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１〜６をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２９６２６．１）。
１．野生型発現パネル：胚性幹（ＥＳ）細胞およびＲＴ−ＰＣＲによって試験した２６個全ての成体組織サンプル中の標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊を、サザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．１３．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ５６８６５−１４９１（ＵＮＱ５７２））
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトグリコシルトランスフェラーゼ８ドメイン含有１（ＧＬＴ８Ｄ１）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、雄（−／−）マウスにおいて感覚運動ゲーティング／注意の障害がもたらされた。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）表現型解析：ＣＮＳ／神経学
神経学の分野において、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含む神経性障害および精神医学的障害の処置のためのインビボにおいて有効な標的の同定についての解析に本明細書中では注目した。神経障害は、「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。その「不安障害」としては、以下：軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、別段特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴うパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、Ｉ型またはＩＩ型の双極性障害、別段特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物質誘導性気分障害が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害にあてはまることがあり、その人格障害としては、以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない。

手順：
行動スクリーニングを、４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性マウスおよび８匹のホモ接合性変異マウスのコホートにおいて実施した。生存能低下のために、より早期の試験が必要とならない限り、すべての行動試験は、１２〜１６週齢の間に実施した。これらの試験は、不安、活動性レベルおよび探索を計測するためのオープンフィールドを含んだ
。

結果：
ＰＰＩ：
雄（−／−）マウスは、ｐｐ８、ｐｐ１２およびｐｐ２０中、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、阻害の減少を示し、変異型における感覚運動ゲーティング／注意の障害を示した。

４８．１４．ＤＮＡ５９８４９−１５０４（ＵＮＱ５８５）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１１５５ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ５９８４９−１５０４と命名）（ＵＮＱ５８５）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿００９３１２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿００９３１２ＮＩＤ：ｎａムス・ムスクルスムス・ムスクルスタキキニン２（Ｔａｃ２）；参照タンパク質：
Ｐ５５０９９ＴＫＮＫ＿ＭＯＵＳＥＰ５５０９９ＮＥＵＲＯＫＩＮＩＮＢＰＲＥＣＵＲＳＯＲＮＫＢＮＥＵＲＯＭＥＤＩ；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０１３２５１ホモ・サピエンスタキキニン３（ニューロメジンＫ、ニューロキニンβ）（ＴＡＣ３）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９ＵＨＦ０ＴＫＮＫ＿ＨＵＭＡＮＱ９ＵＨＦ０ＮＥＵＲＯＫＩＮＩＮＢＰＲＥＣＵＲＳＯＲＮＫＢＮＥＵＲＯＭＥＤＩ。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＴＡＣ３（タキキニン３［ニューロメジンＫ、ニューロキニンβ］）のオルソログであるＴａｃ２（タキキニン２）である。
別名としては、物質Ｋ、ニューロキニン２、ニューロキニンＡ、ニューロメジンＬ、神経ペプチドＫ、ニューロキニンα、ＮＫＢ、ＮＫＮＢ、ＰＲＯ１１５５、ＺＮＥＵＲＯＫ１、ニューロメジンＫ、ニューロキニンβ、γタキキニン３、およびニューロキニンＢ様タンパク質が挙げられる。

ＴＡＣ３は、受容体ＴＡＣＲ１、ＴＡＣＲ２またはＴＡＣＲ３のリガンドとしての機能を果たすペプチド神経伝達物質である。ＴＡＣ３は、末梢ニューロンから放出され、さまざまな組織上のそのコグネート受容体と相互作用する。
ＴＡＣ３は、おそらく、胎児および胎盤における血管緊張および血圧の調節のパラクリンホルモンとしての機能を果たしている。
ＴＡＣ３は、胎児血管系を拡張させ、胎児動脈血圧を減少させる。
ＴＡＣ３は、ＴＡＣＲ１と相互作用することにより胎盤の血管系を拡張させる。
ＴＡＣＲ１の活性化およびその結果としての血圧の低下は、一酸化窒素合成もプロスタサイクリン合成のいずれも伴わない（Ｂｒｏｗｎｂｉｌｌｅｔａｌ．，ＪＣｌｉｎＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌＭｅｔａｂ８８（５）：２１６４−７０（２００３）；Ｐｉｎ
ｔｏｅｔａｌ．，ＥｕｒＪＰｈａｒｍａｃｏｌ４９４（２−３）：２３３−９（２００４））。
ＴＡＣ３は、おそらく、正常な妊娠での高い胎盤血流の維持においてある役割を果たしており（Ｌａｌｉｂｅｒｔｅｅｔａｌ．，ＲｅｇｕｌＰｅｐｔ１１７（２）：１２３−６（２００４））、ＴＡＣ３産生は、子癇前症に関与している可能性がある（Ｓｃｈｌｅｍｂａｃｈｅｔａｌ．，ＡｍＪＯｂｓｔｅｔＧｙｎｅｃｏｌ１８９（５）：１４１８−２２（２００３）；Ｐａｇｅｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ４０５（６７８８）：７９７−８００（２０００））。

カイ二乗値＝１．１５有意性＝０．５６２７０４８６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２２平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：
コードエキソン１の前の２つの非コードエキソンおよびコードエキソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿００９３１２．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル（脳、脊椎、および眼）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．１４．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ５９８４９−１５０４（ＵＮＱ５８５）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトタキキニン３（ニューロメジンＫ、ニューロキニンβ）（ＴＡＣ３）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、全身大腿骨骨中無機質密度および骨塩量の減少ならびに連結密度の減少を示す（−／−）マウスがもたらされた。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）骨代謝：放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

骨マイクロＣＴ分析：
手順：マイクロＣＴも使用して、非常に高感度のＢＭＤ測定を行った。１つの脊椎骨および１つの大腿骨を、４匹の野生型マウスおよび８匹のホモ接合体マウスのコホートから採取した。第５腰椎小柱体積、小柱の厚さ、連結密度（ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ密度）、大腿骨骨幹部総骨領域、および皮質の厚さの測定を行った。μＣＴ４０スキャンにより、骨量および骨構築に関する詳細な情報が得られた。複数の骨を、サンプルホルダーに入れ、自動でスキャンした。装置のソフトウェアを使用して、分析のための関心領域を選択した。１６μｍの分解能で第５腰椎（ＬＶ５）における骨小柱パラメータを分析し、２０μｍの分解能で大腿骨骨幹部における皮質骨パラメータを分析した。
結果：
ＤＥＸＡ：
雌（−／−）マウスは、全身および大腿骨骨中無機質密度ならびに骨塩量の減少を示した。

マイクロＣＴ：
（−／−）マウスは、連結密度の減少を示した。

Ｄｅｘａおよび骨マイクロＣＴ解析によって解析された（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、異常な骨障害を示唆する、骨の測定値の減少を示した。さらに、（−／−）マウスは、負の骨表現型を示し、骨の代謝障害を反映する骨測定値が異常に減少した。骨の負の表現型は、ＰＲＯ１１５５ポリペプチドまたはそのアゴニストが、骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。さらに、ＰＲＯ１１５５ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ１１５５ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、異常な骨代謝に関連する炎症性疾患（関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む）を含む、異常または病理学的な骨障害に導き得る。

４８．１５．ＤＮＡ５９８２０−１５４９（ＵＮＱ６５１）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１２８１ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ５９８２０−１５４９と命名）（ＵＮＱ６５１）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿００１００１５６６ムス・ムスクルスＤＮＡセグメント、Ｃｈｒ１、Ｂｒｉｇｈ
ａｍ＆Ｗｏｍｅｎ￥’ｓＧｅｎｅｔｉｃｓ１３６３発現（Ｄ１Ｂｗｇ１３６３ｅ）；参照タンパク質：
Ｑ６ＩＱＸ７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ６ＩＱＸ７ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
コンドロイチン重合因子、アイソフォームａ；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０２４５３６ホモ・サピエンスコンドロイチン重合因子（ＣＨＰＦ）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ８ＩＺ５２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＩＺ５２ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
コンドロイチン重合因子（硫酸コンドロイチンシンターゼ）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＣＨＰＦ（コンドロイチン重合因子）のオルソログであるＤ１Ｂｗｇ１３６３ｅ（ＤＮＡセグメント、Ｃｈｒ１、Ｂｒｉｇｈａｍ＆Ｗｏｍｅｎ’ｓＧｅｎｅｔｉｃｓ１３６３発現）である。別名としては、１７０００２８Ｎ０３Ｒｉｋ、ＣＳＳ２、ＦＬＪ２２６７８および硫酸コンドロイチンシンターゼ２が挙げられる。

ＣＨＰＦは、細胞表面上および細胞外マトリックス内に見られるプロテオグリカンである硫酸コンドロイチンの生合成に関与する酵素または酵素サブユニットとしての機能を果たす推定ＩＩ型膜タンパク質である。該タンパク質は、シグナルペプチドまたはシグナルアンカーのいずれかおよびコンドロイチンＮ−アセチルガラクトサミニルトランスフェラーゼドメインを含む（ＰｆａｍアクセッションＰＦ０５６７９）。
ＣＨＰＦは、コンドロイチン上の交互のＮ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）およびＤ−グルクロン酸（ＧｌｃＵＡ）残基の重合の触媒に関与している；しかしながら、ＣＨＰＦが、この反応を単独で、または糖質（コンドロイチン）シンターゼ１とのヘテロ二量体として触媒し得るかどうかは明らかではない。他の硫酸コンドロイチン合成酵素と同様、ＣＨＰＦは、ゴルジ装置の内腔内に存在している可能性が高い（Ｋｉｔａｇａｗａｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７８（２６）：２３６６６−７１（２００３）；Ｙａｄａｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７８（３２）：３０２３５−４７（２００３））。
しかしながら、バイオインフォマティック解析から、ＣＨＰＦは細胞外タンパク質であることが示唆される（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））。
ＣＨＰＦは、生理学的プロセス、例えば、神経回路網形成、細胞遊走、器官形成およびサイトカインシグナル伝達などにおいてある役割を果たしている（Ｋｉｔａｇａｗａｅｔ
ａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７８（２６）：２３６６６−７１（２００３）；Ｙａｄａｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７８（３２）：３０２３５−４７（２００３）；Ｉｚｕｍｉｋａｗａｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７９（５１）：５３７５５−６１（２００４））。
さらに、ＣＨＰＦは、他の硫酸コンドロイチン生合成酵素と同様、脊髄損傷の処置の標的であり得る（Ｋｉｔａｇａｗａｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７８（２６）：２３６６６−７１（２００３））。

遺伝子ターゲティングまたは遺伝子トラップによる変異を、系統１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ由来の胚性幹（ＥＳ）細胞において生じさせる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスと交雑させ、Ｆ１ヘテロ接合性動物を作製する。これらの子孫を、交雑受精することにより、Ｆ２の野生型、ヘテロ接合性およびホモ接合性の変異体子孫を作製する。まれに、例えば、Ｆ１マウスがキメラからほとんど得られない場合に、Ｆ１ヘテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスと交雑することにより、交雑受精用のさらなるヘテロ接合性動物を得て、Ｆ２マウスを作製する。この世代のマウスにつ
いてレベルＩ表現型解析を実施する。

カイ二乗値＝０．６７有意性＝０．７１５３３８０５（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２７平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：
コードエキソン１〜３ならびにコードエキソン１の前の２つの非コードエキソンを標的化した（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿００１００１５６５．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および２６のすべての成体組織サンプル（骨格筋および脂肪以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．１５．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ５９８２０−１５４９（ＵＮＱ６５１）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトコンドロイチン重合因子（ＣＨＰＦ）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、平均血清コレステロールおよび平均血清グルコースレベルの増加を示す（−／−）マウスがもたらされた。
ＵＮＱ６５１が、コンドロイチンシンセターゼ（ＣＨＳＹ１）媒介性コンドロイチン重合に必要とされ、硫酸コンドロイチン生合成において機能を果たすことに注目することは興味深い。ＣＨＳＹ１は、自然関節炎を発症させる（ｂｅｄｅｖｅｌｏｐ）ようである。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）表現型解析：心臓学
心臓血管生物学の分野において、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、様々な冠動脈疾患、異常脂肪血症（例えば、高コレステロール（高コレステロール血症）および血清トリグリセリドの増加（高トリグリセリド血症））、糖尿病および／または肥満症の処置のための標的を本明細書中で同定した。表現型試験は、血清コレステロールおよび血清トリグリセリドの測定を含んでいた。

結果：
血液化学：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均血清中コレステロールレベルの上昇を示した。

上でまとめられたように、（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均血清コレステロールレベルの上昇を示した。したがって、ＰＲＯ１２８１遺伝子が欠損した変異マウスは、心血管疾患のモデルとして役立ち得る。ＰＲＯ１２８１ポリペプチドまたはそのコード遺伝子は、コレステロールなどの血中脂質の制御に有用であり得る。したがって、ＰＲＯ１２８１ポリペプチドまたはそのアゴニストは、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、様々な冠状動脈疾患、高コレステロール血症、糖尿病および／または肥満症のような心血管疾患の処置に有用であり得る。

（ｃ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、血糖測定を含む。マウスにおける血液化学試験を実施するためにＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用した。代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的が同定され得る。

結果：
雌ヘテロ接合性（＋／−）およびホモ接合性（−／−）マウスの両方は、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均血清グルコースレベルの増加を示した。
したがって、変異型（＋／−）および（−／−）マウスは、グルコース代謝の変化または糖尿病と関連するものであり得る高血糖症を示した。
ＰＲＯ１２８１ポリペプチドまたはそのアゴニストは、正常なグルコースレベル／代謝の維持に有用であり得、おそらく糖尿病の処置に有用であり得る。

４８．１６．ＤＮＡ６６６７５−１５８７（ＵＮＱ６９８）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１３４３ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ６６６７５−１５８７と命名）（ＵＮＱ６９８）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿１７２２０５ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１７２２０５ＮＩＤ：
ｇｉ２６２５１３０６ｒｅｆＮＭ＿１７２２０５．１ムス・ムスクルスｓｕｐｒａｂａｓｉｎ（Ｓｂｓｎ−ｐｅｎｄｉｎｇ）；参照タンパク質：
Ｑ８ＣＩＴ９ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＣＩＴ９ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
基底上細胞特異的タンパク質ｕｐｒａｂａｓｉｎ；参照ヒト遺伝子配列：
ＢＣ０６３６４０ホモ・サピエンスＨＬＡＲ６９８、ｍＲＮＡ（ｃＤＮＡクローンＭＧＣ：７５５３３ＩＭＡＧＥ：４７５０６４０）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ６ＵＷＰ８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ６ＵＷＰ８ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＨＬＡＲ６９８（仮想タンパク質）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＵＮＱ６９８（ＨＬＡＲ６９８）のオルソログであるＳｂｓｎ（ｓｕｐｒａｂａｓｉｎ）である。別名としては、１１１０００５Ｄ１９Ｒｉｋおよび基底上細胞特異的タンパク質が挙げられる。

Ｓｂｓｎは、主に、分化中の基底上細胞ケラチノサイトにおいて発現される分泌タンパク質であり、おそらく皮膚の構造的成分としての機能を果たしている
Ｓｂｓｎは、シグナルペプチドおよび複雑性が低く、高パーセンテージのグリシン、グルタミン、ヒスチジンおよびアラニン残基からなる多数の領域を含む。Ｓｂｓｎは、組織トランスグルタミナーゼ２および表皮トランスグルタミナーゼ３の基質であり、該タンパク質は、細胞外および細胞内成分と架橋し、角化細胞外被表皮の一部となり得ることが示唆される。
Ｓｂｓｎは、表皮の基底上細胞上皮だけでなく、舌および胃の基底上細胞上皮においても発現される。Ｓｂｓｎは、おそらく、表皮の分化および高度に層化された水不透過性バリア、すなわち皮膚の形成においてある役割を果たしている（Ｐａｒｋｅｔａｌ．，Ｊ
ＢｉｏｌＣｈｅｍ２７７（４７）：４５１９５−２０２（２００２）；Ｍｏｆｆａｔｔｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ３３４：１２３−３１（２００４））。

カイ二乗値＝０．３８有意性＝０．８２６９５９１３（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２５平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１および２をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿１７２２０５．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプル（肝臓、骨格筋、骨、および脂肪以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．１６．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ６６６７５−１５８７（ＵＮＱ６９８）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトＵＮＱ６９８（ＨＬＡＲ６９８）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、骨中無機質密度の測定値の減少ならびに平均血清コレステロールのレベルの上昇を示す（−／−）マウスがもたらされた。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）骨代謝および全身診断学：放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測
定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

結果：
Ｄｅｘａ：
雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、全身骨中無機質密度および大腿骨骨中無機質密度ならびに全身容量測定による骨塩密度の測定値の減少を示した。

Ｄｅｘａによって解析された（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔と比較して、異常な骨障害を示唆する、骨密度の測定値の減少を示した。その（−／−）マウスは、負の骨表現型を示し、骨の代謝障害を反映する骨測定値が異常に減少した。
骨の負の表現型は、ＰＲＯ１３４３ポリペプチドまたはそのアゴニストが、正常な成長発達に加えて骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。
さらに、ＰＲＯ１３４３ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ１３４３ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む異常な骨代謝に関連する炎症性疾患を含む、異常な骨障害または病理学的な骨障害に導き得る。

（ｃ）表現型解析：心臓学
心臓血管生物学の分野において、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、様々な冠動脈疾患、異常脂肪血症（例えば、高コレステロール（高コレステロール血症）および血清トリグリセリドの増加（高トリグリセリド血症））、糖尿病および／または肥満症の処置のための標的を本明細書中で同定した。表現型試験は、血清コレステロールおよび血清トリグリセリドの測定を含んでいた。

結果：
血液化学：雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均血清中コレステロールレベルの増加を示した。

上でまとめられたように、（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均血清中コレステロールレベルの増加を示した。したがって、ＰＲＯ１３４３遺伝子が欠損した変異マウスは、心血管疾患のモデルとして役立ち得る。ＰＲＯ１３４３ポリペプチドまたはそのコード遺伝子は、コレステロールなどの血中脂質の制御に有用であり得る。したがって、ＰＲＯ１３４３ポリペプチドまたはそのアゴニストは、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、様々な冠状動脈疾患、高コレステロール血症、糖尿病および／または肥満症のような心血管疾患の処置に有用であり得る。

４８．１７．ＤＮＡ５９８２８−１６０８（ＵＮＱ７１６）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１３７９ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ５９８２８−１６０８と命名）（ＵＮＱ７１６）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿１３３７７９ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１３３７７９ＮＩＤ：
ｇｉ１９５２７００５ｒｅｆＮＭ＿１３３７７９．１ムス・ムスクルスＲＩＫＥＮ
ｃＤＮＡ４９３０５３４Ｅ１５遺伝子（４９３０５３４Ｅ１５Ｒｉｋ）；参照タンパク質：
Ｑ９９ＪＡ３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９９ＪＡ３ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ニューロン発達関連タンパク質（ニューロン発達関連タンパク質７）（ＲＩＫＥＮｃＤＮＡ４９３０５３４Ｅ１５ｇｅｎｅ）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０１５９３７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０１５９３７ＮＩＤ：
ｇｉ２３３９７６５２ｒｅｆＮＭ＿０１５９３７．２ホモ・サピエンスホスファチジルイノシトールグリカンクラスＴ（ＰＩＧＴ）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９６９Ｎ２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９６９Ｎ２ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ホスファチジルイノシトールグリカンクラスＴ前駆体（ＤＪ４５３Ｃ１２．７）（仮想タンパク質ＰＬＡＣＥ１０１０３３０）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＰＩＧＴのオルソログであるＰｉｇｔ（ホスファチジルイノシトールグリカン、クラスＴ）である。別名としては、ＣＧＩ−０６、４９３０５３４Ｅ１５Ｒｉｋ、ＭＧＣ８９０９およびＧＰＩトランスアミダーゼ成分ＰＩＧ−Ｔが挙げられる。

ＰＩＧＴは、小胞体内に存在するＩ型内在性膜タンパク質であり、おそらく、グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）トランスアミダーゼの非触媒性サブユニットとしての機能を果たしている。
ＧＰＩトランスアミダーゼは、５つのサブユニットからなり、タンパク質へのＧＰＩの移動を触媒する。ＰＩＧＴは、ＧＰＩトランスアミダーゼ複合体を安定化させ、活性部位への基質タンパク質の接近を調節する（Ｏｈｉｓｈｉｅｔａｌ．，ＥＭＢＯＪ２０（１５）：４０８８−９８（２００１）；Ｖａｉｎａｕｓｋａｓｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７７（３４）：３０５３５−４２（２００２）；Ｏｈｉｓｈｉｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７８（１６）：１３９５９−６７（２００３）；Ｅｉｓｅｎｈａｂｅｒｅｔａｌ．，Ｂｉｏｅｓｓａｙｓ２５（４）：３６７−８
５（２００３））。

カイ二乗値＝４７．２有意性＝５．６３１８３６７Ｅ−１１（ｈｏｍ／ｎ）＝０．０平均同腹仔数＝７
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１から３をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿１３３７７９．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および２６のすべての成体組織サンプルにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊を、サザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．１７．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ５９８２８−１６０８（ＵＮＱ７１６）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ＵＮＱ７１６、ＤＮＡ５９８２８ヒトホスファチジルイノシトールグリカン、クラスＴ（ＰＩＧＴ）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）マウスの致死がもたらされた。
ヘテロ接合性（＋／−）マウスは、骨塩量および密度の測定値の減少を示した。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）病理学
顕微鏡的：胚性致死により試験されなかった。１２．５日目に、４４個の胚：２７個の（＋／−）胚、５個の（＋／＋）胚、および１２個の再吸収モル（ｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎｍｏｌｅｓ）が観察された。

致死性の胚の発達異常に関連する考察：
ノックアウトマウスにおける胚性致死は、通常、種々の重篤な発生上の問題（神経変性疾患、血管障害、炎症性疾患が挙げられるが、これらに限定されない）によって生じるか、または遺伝子／タンパク質が多くの細胞型において基礎的な細胞シグナル伝達プロセスで重要な役割を果たす場合に生じる。さらに、胚性致死マウスは、潜在的な癌モデルとして有用である。同様に、対応するヘテロ接合性（＋／−）変異動物は、これらがノックアウトされた遺伝子の機能に関する非常に有益なてがかりを明らかにする表現型および／または病理学報告を示す場合に特に有用である。例えば、ＥＰＯノックアウト動物は胚致死性を示したが、胚に関する病理学報告は、ＲＢＣの著しい欠如を示した。

（ｃ）骨代謝および全身診断学／放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

Ｄｅｘａ解析−試験の説明：
手順：４匹の野生型マウスおよび４匹のヘテロ接合性マウスのコホートをこのアッセイで試験した。二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を、うまく使用して骨の変化を同定した。麻酔動物を試験し、骨塩量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比、容量測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿骨ＢＭＤおよび椎骨ＢＭＤを測定した。

骨マイクロＣＴ解析：
手順：マイクロＣＴを使用して、非常に感度の高いＢＭＤの測定を行った。１つの椎骨および１つの大腿骨を、４匹の野生型マウスおよび８匹のヘテロ接合性マウスのコホートから取り出した。腰部の５つの椎骨骨梁骨体積、骨梁厚、結合性密度ならびに大腿骨中軸の骨の総面積および皮質厚の測定を行った。μＣＴ４０スキャンにより、骨量および構造についての詳細な情報が得られた。複数の骨を、サンプルホルダーに置き、自動的にスキャンした。装置ソフトウェアを使用して、解析用の目的の領域を選択した。骨梁骨パラメータを、１６マイクロメートルの解像度で第５腰部椎骨（ＬＶ５）において解析し、皮質骨パラメータを、２０マイクロメートルの解像度で大腿骨中軸において解析した。

結果：
Ｄｅｘａ：
雄（＋／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均骨塩量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭおよび全身骨中無機質密度（ＢＭＤ）の減少を示した。

マイクロＣＴ：雄（＋／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均のものと比較して、平均脊椎小柱の体積、数、厚さ、および連結密度が減少した。

Ｄｅｘａおよび骨マイクロＣＴ解析によって解析された（＋／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、異常な骨障害を示唆する、骨の測定値の減少を示した。（＋／−）マウスはまた、負の骨表現型を示し、骨の代謝障害を反映する骨測定値が異常に減少した。骨の負の表現型は、ＰＲＯ１３７９ポリペプチドまたはそのアゴニストが、骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。さらに、ＰＲＯ１３７９ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ１３７９ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、異常な骨代謝に関連する炎症性疾患（関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む）を含む、異常または病理学的な骨障害に導き得る。

４８．１８．ＤＮＡ６０７４０−１６１５（ＵＮＱ７１７）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１３８０ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ６０７４０−１６１５と命名）（ＵＮＱ７１７）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２３５９６ムス・ムスクルス溶質担体ファミリー２９（ヌクレオシド輸送体）、構成員３（Ｓｌｃ２９ａ３）；参照タンパク質：
Ｑ９９Ｐ６５ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９９Ｐ６５ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＥＱＵＩＬＩＢＲＡＴＩＶＥＮＵＣＬＥＯＳＩＤＥＴＲＡＮＳＰＯＲＴＥＲ３；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０１８３４４ホモ・サピエンス溶質担体ファミリー２９（ヌクレオシド輸送体）、構成員３（ＳＬＣ２９Ａ３）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９ＢＺＤ２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＢＺＤ２ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＥＱＵＩＬＩＢＲＡＴＩＶＥＮＵＣＬＥＯＳＩＤＥＴＲＡＮＳＰＯＲＴＥＲ３。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＳＬＣ２９Ａ３のオルソログであるＳｌｃ２９ａ３（溶質担体ファミリー２９［ヌクレオシド輸送体］、構成員３）である。別名としては、Ｅｎｔ３、４９３３４３５Ｃ２１Ｒｉｋ、ＦＬＪ１１１６０および平衡的（ｅｑｕｉｌｉｂｒａｔｉｖｅ）ヌクレオシド輸送体３が挙げられる。

ＳＬＣ２９Ａ３は、リソソーム内在性膜タンパク質であり、平衡的輸送体としての機能を果たし、ヌクレオシドの受動的流入および流出を媒介している（Ｂａｌｄｗｉｎｅｔ
ａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２８０（１６）：１５８８０−７（２００５））。該タンパク質は、主に、腎臓および精巣のセルトリ細胞において発現される（Ｌｕｅｔ
ａｌ．，ＤｒｕｇＭｅｔａｂＤｉｓｐｏｓ３２（１２）：１４５５−６１（２００４）；Ｋａｔｏｅｔａｌ．，ＪＰｈａｒｍａｃｏｌＥｘｐＴｈｅｒ３１２（２）：６０１−８（２００５））。
ＳＬＣ２９Ａ３は、リソソーム内での核酸の分解によって生成されるヌクレオシドの放出においてある役割を果たしている可能性がある。ＳＬＣ２９Ａ３はまた、抗癌および抗ウイルスヌクレオシド類縁体の性質（Ｌｕｅｔａｌ．，ＤｒｕｇＭｅｔａｂＤｉｓｐｏｓ３２（１２）：１４５５−６１（２００４））および精子形成（Ｋａｔｏｅｔ
ａｌ．，ＪＰｈａｒｍａｃｏｌＥｘｐＴｈｅｒ３１２（２）：６０１−８（２００５））においてある役割を果たしている可能性がある。

カイ二乗値＝５．５有意性＝０．０６３９２７８６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２平均同腹仔数＝１０
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１および２をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２３５９６．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプルにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣイメージ：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．１８．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ６０７４０−１６１５（ＵＮＱ７１７）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト溶質担体ファミリー２９（ヌクレオシド輸送体）、構成員３（ＳＬＣ２９Ａ３）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、慢性炎症を有する（−／−）マウスにおいて組織球増殖症、リンパ節腫脹症および肝脾腫大症がもたらされた。検死により、リンパ節腫脹症および脾腫とともに、ホモ接合性変異型マウスの小腸、脾臓およびリンパ節における組織球増殖症が明らかになった。ＵＮＱ７１７遺伝子は、単球および樹状細胞上に発現され、免疫学的障害において特に重要である（自己免疫に役割を果たしている可能性がある）。また、ホモ接合性変異型マウスは、貧血性であり、その野生型同腹仔および歴史的平均のレベルと比較した場合、数多くの他の免疫学的および血液化学異常を示した。（−／−）マウスはまた、その同腹仔（＋／＋）対象と比較した場合、ストレス誘導型高体温応答の減少を示した。標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）病理学
肉眼的：
（−／−）マウスは、脾腫およびリンパ節腫脹症を示した。
顕微鏡的：
解析した６匹の（−／−）マウスはすべて、小腸、リンパ節および脾臓において種々の程度の組織球増殖症を示した。（−／−）マウスはまた、脾臓、リンパ節および胸腺においてリンパ系枯渇（Ｔ細胞）を示した。疾患の初期段階では、皮質胸腺細胞のアポトーシスと関連する胸腺皮質において抗原提示細胞の空胞変性、および空腸における最小限の組織球浸潤物が見られた。より進行した場合では、脾臓は軽度に腫脹し、組織球細胞によるＴ細胞（細動脈周囲リンパ系鞘）の多発性置換を伴った。Ｂ細胞領域（濾胞）は比較的正常であった。
ほとんどの変異型の赤脾髄において赤血球増殖の増大が見られた。しかしながら、散在する赤血球系細胞は、拡張した透明な細胞質に囲まれた暗色の萎縮した核を有した。リンパ節は腫脹し、髄質索および傍皮質領域にびまん性の組織球浸潤物を含んでおり、同時に、Ｔ細胞リンパ球が減少していた。
縮小された空腸絨毛の粘膜下組織および固有層は、主に組織球からなる細胞浸潤物によって拡張された。十二指腸および回腸は類似しているがより軽度の浸潤物を有した。
胸腺皮質は、大量の高度に空胞化した細胞質を有する増大した数のマクロファージ体を含んでいた。２つの最も重症な症例では、組織球細胞の大量の浸潤物による脾臓およびすべてのリンパ節の著しい腫脹が認められた。また、肝洞様毛細血管および小腸粘膜は、組織
球によってびまん的に浸潤され、小腸絨毛の著しい鈍化および融合が認められた。
この場合も、最も重症な病変は空腸におけるものであった。
組織球浸潤物は膵臓の間質内に拡張し、萎縮および腺房腺の減少がもたらされた。すべてのリンパ系組織においてＴ細胞の著しい全身性の減少が認められた。組織内の組織球細胞の分布から、これらがＴ細胞系統のものであることが示唆される。

以下の試験を行った。

血液学分析：
試験の説明：Ａｂｂｏｔｔ’ｓＣｅｌｌ−Ｄｙｎ３５００Ｒ（自動血液学分析器）
によって血液試験を行う。いくつかのその特徴には、５つの白血球分類が含まれる。「患者」報告は、全部で２２個のパラメータを対象とすることができる。

結果：
血液学：（−／−）マウスは、その野生型同腹仔（＋／＋）マウスおよび歴史的平均と比較した場合、総白血球数および絶対単級数の増加を示した。
また、（−／−）マウスは、平均赤血球計数、ヘモグロビン濃度およびヘマトクリットの減少ならびに平均赤血球分布幅の増大を示した。（−／−）マウスはまた、平均血小板計数の減少および平均血小板容積の増加を示した。

総白血球および絶対単球計数の増加は、上記の病理所見と一致する。

（−／−）マウスは、その野生型同腹仔（＋／＋）マウスおよび歴史的平均と比較した場合、平均赤血球数、ヘモグロビンレベルおよびヘマトクリットの減少を示した。

これらの結果は、貧血に関連する表現型に関係する。したがって、ＰＲＯ１３８０ポリペプチド、そのアゴニストまたはＰＲＯ１３８０ポリペプチドをコードする遺伝子は、正常な赤血球産生に必須であるに違いなく、ゆえに貧血または低ヘマトクリットに関連する血液障害の処置に有用であり得る。

さらに、（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均血小板数の減少を示した。

したがって、ＤＮＡ６０７４０−１６１５遺伝子が欠損した変異マウスは、凝血障害に関連する表現型を生じた。
これと関連して、ＰＲＯ１３８０ポリペプチドまたはそのアゴニストは、異常な血液凝固に関連する障害（例えば、血友病など）の処置に有用であり得る。

結果：
急性期反応：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均血清ＩＬ−６、ＴＮＦαおよびＬＰＳ攻撃に対するＭＣＰ−１応答の増加を示した。

卵白アルブミン負荷
手順：このアッセイは、７匹の野生型および８匹のホモ接合体において行った。ニワトリ卵白アルブミン（ＯＶＡ）は、Ｔ細胞依存性抗原であり、マウスにおける抗原特異的免疫応答の研究用のモデルタンパク質として一般に使用されている。ＯＶＡは無毒で不活性であり、したがって、免疫応答が誘発されない場合であっても動物に害をもたらさない。ＯＶＡに対するマウスの免疫応答は、Ｔ細胞応答を惹起させる免疫優性ペプチドが、同定されている程度まで充分に特徴付けされている。抗ＯＶＡ抗体を、免疫処置の８〜１０日後に酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＺＡ）を用いて検出することができ、抗体の異なるアイソタイプの測定によって、遺伝子操作されたマウスにおいて欠損性応答をもたらし得
る複雑なプロセスに関するさらなる情報が得られる。

上記のように、このプロトコルでは、マウスが抗原特異的免疫応答を生じる能力が評価される。動物に５０ｍｇのニワトリ卵白アルブミン（完全フロイントアジュバント中に乳化）をＩＰ注射し、１４日後に、抗卵白アルブミン抗体（ＩｇＭ、ＩｇＧ１およびＩｇＧ２サブクラス）の血清力価を測定した。血清サンプル中のＯＶＡ特異的抗体の量は、９６ウェルサンプルプレートをスキャンする装置によって得られる光学密度（ＯＤ）値に比例する。データは、各血清サンプルの一組の連続希釈物に対して収集した。

この負荷の結果：
卵白アルブミン：
（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、卵白アルブミン攻撃に対する平均血清ＩｇＧ１応答の減少を示した。

要約すると、卵白アルブミン負荷試験は、ＰＲＯ１３８０ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失したノックアウトマウスが、その野生型同腹仔と比較すると免疫学的異常を示すことを示す。特に、変異マウスは、Ｔ細胞依存性ＯＶＡ抗原で攻撃すると、免疫学的応答を生じる能力の低下を示した。
したがって、ＰＲＯ１３８０ポリペプチドのインヒビターまたはアンタゴニストは、これらの免疫学的所見に類似した症状を呈し得る。
これらの結果は、脾臓、リンパ節および胸腺におけるリンパ系枯渇（Ｔ細胞）を示す病理報告と一致する。

結果：
血清Ｉｍｍ．２：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のもの、該プロジェクトの（＋／＋）中央値および累積（＋／＋）歴史的中央値と比較した場合、平均血清ＩｇＡレベルおよびＩｇＭの増加を示した。

変異（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、ＩｇＡ血清免疫グロブリンの上昇を示した。ＩｇＡは、細菌のトキシンおよびウイルスを中和し得る上皮細胞保護体として主に機能する。明らかでない疾患の感受性が選択的ＩｇＡ欠損と関連するが、その感受性は、通常の集団よりも慢性肺疾患を有する人々においてよくあることである。このことは、ＩｇＡの欠損が、様々な病原体による肺感染症に対する素因をもたらし得、そして体表での防御におけるＩｇＡの役割と一致することを示唆する。
この場合、ノックアウトマウスで観察された表現型により、ＰＲＯ１３８０ポリペプチドのインヒビター（アンタゴニスト）がこれらの免疫学的効果を模倣し得るを示唆するＩｇＡ血清レベルの増加がもたらされた。

蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）解析
手順
ＣＤ４、ＣＤ８およびＴ細胞レセプターを含む、末梢血由来の免疫細胞組成物のＦＡＣＳ解析を実施して、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球に対するＣＤ１９、白血球マーカーとしての
ＣＤ４５およびナチュラルキラー細胞に対するｐａｎＮＫを評価した。ＦＡＣＳ解析は、２匹の野生型および６匹のホモ接合性マウスにおいて実施し、胸腺、脾臓、骨髄およびリンパ節由来の細胞を含んだ。

結果：
組織特異的ＦＡＣＳの全体的観察結果：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、リンパ節および脾臓におけるＣＤ４およびＣＤ８細胞の平均パーセンテージの減少（野生型のおよそ１／３）；記憶Ｔ細胞の増加（ＣＤ６２ＬｌｏＣＤ４４ｈｉ細胞においておよそ５倍増加（％ＣＤ４またはＣＤ８計）；ナイーブＴ細胞の減少（およそ２倍）；ＣＤ２５＋細胞の増加：胸腺のＤＮの増加、ＤＰＴ細胞の減少；ならびに脾臓における単球およびＤＣの平均パーセンテージの増加（ＣＤ１１ｂ＋、ＣＤ１１ｂ＋ｃ＋（およそ５倍）および腹腔洗浄液（ＣＤ１１ｂ＋）；ＬＮにおけるＣＤ１９＋細胞の増加；骨髄細胞におけるＣＤ１１７の増加を特徴とする末梢血中の白血球サブセットの分布の変化を示した。

これらの結果は、変異型（−／−）マウスがリンパ系枯渇（Ｔ細胞）、組織球増殖症、リンパ節腫脹症および脾腫を示した病理学的観察結果と一致した。

（ｄ）骨代謝および全身診断学／放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

Ａｖｅｒｔｉｎ（１．２５％２，２，２，−トリブロモエタノール，２０ｍＬ／ｋｇ体重）をマウスに腹腔内注射することにより麻酔し、体長および体重を測定し、次いで、そ
のマウスをＤＥＸＡスキャンのためにＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（Ｌｕｎａｒ
Ｉｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位にした。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを使用して、目的の領域（ＲＯＩ）［すなわち、全身、椎骨および両大腿骨］の骨塩密度（ＢＭＤ）および脂肪組成物（％脂肪）および総組織質量（ＴＴＭ）を測定した。

ＣＡＴスキャンプロトコル：
ＣＴ造影剤であるＯｍｎｉｐａｑｕｅ３００（ＮｙｃｏｍｅｄＡｍｅｒｓｈａｎ，３００ｍｇヨウ素／ｍＬ、０．２５ｍＬ／動物または２．５０〜３．７５ｇヨウ素／ｋｇ体重）をマウスの腹腔内に注射した。約１０分間、ケージ内で安静にさせた後、Ａｖｅｒｔｉｎ（１．２５％２，２，２，−トリブロムエタノール、２０ｍＬ／ｋｇ体重）を腹腔内注射することによりそのマウスを鎮静させた。麻酔動物を試験台に腹臥位にして、ＭｉｃｒｏＣＡＴスキャナー（ＩｍＴｅｋ，Ｉｎｃ．）を使用してＣＡＴスキャンを行った。三次元像を、ＩｍＴｅｋ３ＤＲＥＣＯＮソフトウェアを使用してワークステーションクラスターでＦｅｌｄｋａｍｐアルゴリズムによって再構成した。

結果：
Ｄｅｘａ：雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均総体脂肪パーセントおよび脂肪質量（ｇ）の低下を示した。
ＰＲＯ１３８０ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失した変異型（−／−）マウスは、組織消耗性疾患（総体脂肪（％およびｇ）の減少）と一致する表現型を示す。
したがって、ＰＲＯ１３８０ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニストまたはインヒビターは、これらの代謝関連作用および成長関連作用を模倣し得る。
他方において、ＰＲＯ１３８０ポリペプチドまたはそのアゴニストは、異常な脂肪代謝に関連するまたは他の組織消耗性疾患の予防および／または処置に有用であり得る。
ＣＡＴＳｃａｎ：
３匹すべての（−／−）マウス（Ｍ−９５、Ｍ−１０３およびＦ−１２９）は中等度の脾腫を示した。

結果：
血液化学：雄および雌（−／−）マウスの両方は、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清コレステロールレベルが低下した。

まとめると、これらのノックアウト変異型マウスは、脂質代謝に関して正の表現型を示した。
したがって、ＰＲＯ１３８０遺伝子が欠損した変異型マウスは、脂質血異常、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中と関連する心血管疾患または様々な冠動脈疾患の処置のモデルとして役立ち得る。

（ｆ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝領域では、糖尿病の治療のための標的を同定することができる。血液化学表現型解析には、血糖値測定が含まれる。ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ．Ｒｏｃｈｅ）を、マウスの血流化学試験のために使用した。代謝領域では、糖尿病治療のための標的を同定することができる。

結果：
雄および雌（−／−）マウスの両方は、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清グルコースレベルが低下した。この結果は、肝臓の変化に起因する可能性が高い。
これらの結果は、変異型（−／−）マウスにおけるインスリン感受性の増大を示し得る。

（ｇ）表現型解析：ＣＮＳ／神経学
神経学領域では、本分析は、神経学的障害および精神医学的障害（抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫性障害、分裂病、認知障害、痛覚過敏、および感覚障害が含まれる）の治療のためのインビボでの有効な標的の同定に焦点を当てた。神経障害には、「不安障害」と定義されるカテゴリーが含まれ、以下が含まれるが、これらに限定されない：軽度から中等度の不安、一般的病状に起因する不安障害、詳細不明の不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖を伴うパニック障害、広場恐怖を伴わないパニック障害、外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定恐怖症、物質誘発性不安障害、急性アルコール離脱、強迫性障害、広場恐怖、双極性障害（Ｉ型またはＩＩ型）、詳細不明の双極性障害、気分循環性障害、うつ病性障害、大うつ病性障害、気分障害、物質誘発性気分障害。さらに、不安障害は、人格障害に適用することができ、人格障害には、以下の型が含まれるが、これらに限定されない：偏執傾向型、反社会型、回避性行動型、境界性人格障害型、依存型、演技型、自己陶酔型、強迫型、分裂型、および統合失調型。

手順：
４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合体変異マウス、および８匹のホモ接合体変異マウスのコホートに対して挙動スクリーニングを行った。全ての挙動試験を、生存率の低下によってより早期の試験が必要とならない限り、１２週齢と１６週齢との間で行った。これらの試験には、不安、活動レベル、および探索を測定するためのオープンフィールドが含まれていた。

機能観察バッテリー（ＦＯＢ）試験−ストレス誘導過温症：
ＦＯＢは、肉眼的に感覚および運動の欠損を決定するために動物に適用される一連の状況である。肉眼的神経機能を評価するアーウィンの神経学的スクリーニング由来の試験の一部を使用する。一般に、短期間の触覚、嗅覚、および視覚に対する刺激を動物に適用して、その正常に検出および応答する能力を決定する。これらの簡潔な試験は約１０分かかり、試験終了後にマウスをそのホームケージに戻す。

結果：
不安：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、ストレス誘導性高熱試験中に応答が減少し、変異体において不安様応答が減少したことが示唆される。したがって、ノックアウトマウスは、抑鬱症、全般性不安障害、認知障害、痛覚過敏および感覚障害ならびに／または双極性障害と一致する表現型を示した。したがって、ＰＲＯ１３８０ポリペプチドおよびそのアゴニストは、抑鬱性障害に関連する
症状の処置または寛解に有用であり得る。

４８．１９．ＤＮＡ６８８７２−１６２０（ＵＮＱ７２２）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１３８７ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ６８８７２−１６２０と命名）（ＵＮＱ７２２）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿００１００５４２１ムス・ムスクルス遺伝子モデル６３８、（ＮＣＢＩ）（Ｇｍ６３８）；参照タンパク質：
Ｑ８０ＵＬ９ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８０ＵＬ９ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
接着分子ＡＭＩＣＡ；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿１５３２０６ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１５３２０６ＮＩＤ：
ｇｉ２３３９７４５０ｒｅｆＮＭ＿１５３２０６．１ホモ・サピエンス接着分子ＡＭＩＣＡ（ＡＭＩＣＡ）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ８Ｎ９Ｉ７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８Ｎ９Ｉ７ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
仮想タンパク質ＦＬＪ３７０８０。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＡＭＩＣＡ１（接着分子、ＣＸＡＤＲ抗原１と相互作用する）のオルソログであるＡＭＩＣＡ（接着分子ＡＭＩＣＡ）である。別名としては、ＧＭ６３８、遺伝子モデル６３８、ＭＧＣ６１０２５、ＪＡＭＬ、ＦＬＪ３７０８０、連結性接着分子、およびＣＸＡＤＲ抗原１と相互作用する接着分子が挙げられる。

ＡＭＩＣＡ１は、Ｉ型内在性原形質膜タンパク質であり、おそらく、細胞接着分子としての機能を果たしている。
該タンパク質は、シグナルペプチド、２つの細胞外免疫グロブリン様ドメイン、膜貫通セグメントおよび細胞質テールを含む。
ＡＭＩＣＡ１は、主に、顆粒球および他の造血系細胞において発現され、おそらく白血球移動においてある役割を果たしている（Ｍｏｏｇ−Ｌｕｔｚｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ
１０２（９）：３３７１−８（２００３））。

カイ二乗値＝０．０９有意性＝０．９５５９９７４７（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２４平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１〜３をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿００１００５４２１．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプル（皮膚線維芽細胞骨以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣイメージ：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．１９．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ６８８７２−１６２０（ＵＮＱ７２２）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ＣＸＡＤＲ抗原１（ＡＭＩＣＡ１）と相互作用するヒト接着分子のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）マウスにおける卵白アルブミン攻撃に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答の減少がもたらされた。ホモ接合性（−／−）マウスはまた、ホットプレート試験の際、応答潜時の減少を示した。
変異型雌（−／−）マウスは、総体脂肪の増加を示した。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

多くの免疫応答において、炎症細胞は、損傷または感染の部位を浸潤する。遊走細胞は、罹患組織の組織学的検査によって決定され得るような、好中球、好酸球、単球またはリンパ球であり得る。ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ｅｄ．ＪｏｈｎＥ．Ｃｏｌｉｇａｎ，１９９４，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．
多くの免疫関連疾患が知られており、広く研究されている。このような疾患としては、免疫媒介性炎症性疾患（例えば、関節リウマチ、免疫媒介性腎疾患、肝胆疾患、炎症性腸
疾患（ＩＢＤ）、乾癬および喘息）、非免疫媒介性炎症性疾患、感染性疾患、免疫不全疾患、新形成および移植片拒絶などが挙げられる。免疫学の分野において、炎症および炎症性障害の処置のための標的を同定した。

以下の試験を実施した：
卵白アルブミン攻撃
手順：このアッセイは、７匹の野生型および８匹のホモ接合体マウスにおいて行った。ニワトリ卵白アルブミン（ＯＶＡ）は、Ｔ細胞依存性抗原であり、マウスにおける抗原特異的免疫応答の研究用のモデルタンパク質として一般に使用されている。ＯＶＡは無毒で不活性であり、したがって、免疫応答が誘発されない場合であっても動物に害をもたらさない。ＯＶＡに対するマウスの免疫応答は、Ｔ細胞応答を惹起させる免疫優性ペプチドが同定されている程度まで充分に特徴付けされている。抗ＯＶＡ抗体を、免疫処置の８〜１０日後に酵素結合イムノソルベント検定法（ＥＬＩＺＡ）を用いて検出することができ、抗体の異なるアイソタイプの測定によって、遺伝子操作されたマウスにおいて欠陥性応答をもたらし得る複雑なプロセスに関するさらなる情報が得られる。

上記のように、このプロトコルは、マウスが抗原特異的免疫応答を生じる能力を評価する。動物に５０ｍｇのニワトリ卵白アルブミン（完全フロイントアジュバント中に乳化）をＩＰ注射し、１４日後に、抗卵白アルブミン抗体（ＩｇＭ、ＩｇＧ１およびＩｇＧ２サブクラス）の血清力価を測定した。血清試料中のＯＶＡ特異的抗体の量は、９６ウェル試料プレートをスキャンする装置によって得られる光学密度（ＯＤ）値に比例する。データは、各血清試料の一組の連続希釈物に対して収集した。

この攻撃の結果：
卵白アルブミン：（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清ＩｇＧ２ａ応答の低下を示した。

まとめると、卵白アルブミン攻撃研究は、ＰＲＯ１３８７ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失したノックアウトマウスが、その野生型同腹仔と比較した場合、免疫学的異常を示すことを示す。特に、変異マウスは、Ｔ細胞依存性ＯＶＡ抗原で攻撃した場合、免疫学的応答を誘発する能力の低下を示した。したがって、ＰＲＯ１３８７ポリペプチドまたはそのアゴニストは、免疫系の刺激（例えば、Ｔ細胞増殖など）に有用であり得、この効果が白血病、他の癌型、および免疫不全患者（ＡＩＤＳ患者など）などの場合の個体に有利である場合に使用されるであろうということが示唆される。したがって、ＰＲＯ１３８７ポリペプチドのインヒビター（アンタゴニスト）は、免疫応答の阻害で有用であり、例えば、移植片拒絶または移植片対宿主疾患の場合の有害な免疫応答の抑制のための有用な候補であろう。

（ｃ）骨代謝および放射線表現型解析
骨代謝領域では、本明細書中で、標的を、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症、および大理石骨病の治療、ならびに骨治癒を促進する標的の同定のために同定した。試験は、以下を含んでいた。
・大腿骨および脊椎骨における骨中無機質密度の測定のためのＤＥＸＡ
・骨小柱および皮質骨の骨中無機質密度の非常に高分解能且つ非常に高感度の測定のためのマイクロＣＴ。

Ｄｅｘａ解析−試験の説明：
手順：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体、および８匹のホモ接合体のコホートを、このアッセイで使用した。二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を使用して、骨の変化を首尾よく同定した。麻酔した動物を試験し、骨塩量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比、容積測定骨中無機質密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿骨ＢＭＤ、および脊椎骨ＢＭＤを測定した。

結果：
雌（−／−）マウスは、その性別一致野生型（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、総体脂肪（％およびｇ）の増加を示した。

これらの研究により、変異（−／−）非ヒトトランスジェニック動物が肥満に関連し得る負の表現型を示すことが示唆される。したがって、ＰＲＯ１３８７ポリペプチドまたはその作用剤は、正常な成長および代謝過程に不可欠であり、肥満の予防および／または治療で特に重要であろう。

（ｄ）表現型解析：ＣＮＳ／神経学
神経学の分野において、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含む神経性障害および精神医学的障害の処置のためのインビボにおいて有効な標的の同定についての解析に本明細書中では注目した。神経障害は、「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。その「不安障害」としては、以下：軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、別段特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴うパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、Ｉ型またはＩＩ型の双極性障害、別段特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物質誘導性気分障害が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害にあてはまることがあり、その人格障害としては、以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない。

手順：
行動スクリーニングを、４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性マウスおよび８匹のホモ接合性変異マウスのコホートにおいて実施した。生存能低下のために、より早期の試験が必要とならない限り、すべての行動試験は、１２〜１６週齢の間に実施した。これらの試験は、不安、活動性レベルおよび探索を計測するためのオープンフィールドを含んだ。
機能観察バッテリー（ＦＯＢ）試験−ホットプレート試験：
ＦＯＢは、肉眼的に感覚および運動の欠損を決定するために動物に適用される一連の状況である。肉眼的神経機能を評価するアーウィンの神経学的スクリーニング由来の試験の
一部を使用する。一般に、短期間の触覚、嗅覚、および視覚に対する刺激を動物に適用して、その正常に検出および応答する能力を決定する。これらの簡潔な試験は約１０分かかり、試験終了後にマウスをそのホームケージに戻す。

ホットプレート試験
試験の説明：侵害受容についてのホットプレート試験を、各マウスを小型の閉鎖系である５５℃のホットプレートに置くことによって実施する。ホットプレート上での最大時間を３０秒として、後肢応答（なめる、振るまたは跳ねる）までの時間を記録する。各動物を１回試験する。

結果：
ホットプレート試験での応答までの時間が、性別一致野生型同腹仔および歴史的平均と比較して、（−／−）マウスでは短かったことから、疼痛に対する感度が増加していることが示唆される。

４８．２０．ＤＮＡ７１２９０−１６３０（ＵＮＱ７３３）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１４１９ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ７１２９０−１６３０と命名）（ＵＮＱ７３３）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＢＣ０３７１５６ムス・ムスクルスｃＤＮＡ配列ＢＣ０３７１５６；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿１５２９９７ホモ・サピエンス染色体４オープンリーディングフレーム７（Ｃ４ｏｒｆ７）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ８ＮＦＵ４ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＮＦＵ４ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
濾胞性樹状細胞分泌ペプチド前駆体（ＦＤＣ−ＳＰ）（ＦＤＣ分泌タンパク質）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＣ４ｏｒｆ７（染色体４オープンリーディングフレーム７）のオルソログであるｃＤＮＡ配列ＢＣ０３７１５６である。別名としては、ＭＧＣ７１８９４、ＦＤＣ−ＳＰ、ＦＤＣＳＰおよび濾胞性樹状細胞分泌ペプチドが挙げられる。

Ｃ４ｏｒｆ７は、主に扁桃腺の濾胞性樹状細胞によって発現される８４−アミノ酸分泌タンパク質であり、おそらく、シグナル伝達リガンドとしての機能を果たしている。
Ｃ４ｏｒｆ７発現は、濾胞性樹状細胞内の腫瘍壊死因子−αおよび血中白血球内のリポ多糖によって刺激され得る。さらに、Ｃ４ｏｒｆ７は、非常に高いレベルで炎症扁桃陰窩において発現される。
扁桃腺に加え、Ｃ４ｏｒｆ７はまた、いくつかの他の組織、例えば、リンパ節、気管、前立腺、甲状腺、胃、結腸、脾臓、末梢血白血球および骨髄においても発現される。
該タンパク質は活性化Ｂ細胞に結合し得、Ｃ４ｏｒｆ７が免疫機能においてある役割を果たしていることを示唆する（Ｍａｒｓｈａｌｌｅｔａｌ．，ＪＩｍｍｕｎｏｌ１６９（５）：２３８１−９（２００２））。

カイ二乗値＝０．８１有意性＝０．６６６９７６８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２３平均同腹仔数＝１０
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１および２をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＢＣ０３７１５６）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル（眼および胸腺のみ）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣイメージ：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．２０．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ７１２９０−１６３０（ＵＮＱ７３３）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト染色体４オープンリーディングフレーム７（Ｃ４ｏｒｆ７）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、卵白アルブミン攻撃に対するＩｇＧ２ａ応答の増大を示す変異型（−／−）マウスがもたらされた。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

この攻撃の結果：
卵白アルブミン：（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清ＩｇＧ２ａ応答の増加を示した。

まとめると、卵白アルブミン攻撃研究は、ＰＲＯ１４１９ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失したノックアウトマウスが、その野生型同腹仔と比較した場合、免疫学的異常を示すことを示す。
ＵＮＱ７３３は濾胞性樹状細胞によって分泌され、Ｂ細胞（これは、ＴＮＦαによって誘導され得る）に特異的に結合するため、ＵＮＱ７３３は炎症性障害においてある役割を果たしている可能性がある。アデノイドおよび扁桃腺の過形成もまた観察された。
特に、変異マウスは、Ｔ細胞依存性ＯＶＡ抗原で攻撃すると、免疫学的応答を生じる能力の低下を示した。したがって、ＰＲＯ１４１９ポリペプチドのインヒビター（アンタゴニ
スト）は、免疫系の刺激（例えば、Ｔ細胞増殖など）に有用であり得、この効果が個体に有益であり得る場合（例えば、白血病および他のタイプの癌の場合などにおいて、ならびに免疫無防備状態の患者（例えば、ＡＩＤＳ罹患者））において有用性が見出され得る。したがって、ＰＲＯ１４１９ポリペプチドまたはそのアゴニストは、免疫応答の阻害に有用であり得、このため、例えば、移植片拒絶または移植片対宿主病の場合において有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であり得る。

４８．２１．ＤＮＡ７１１８４−１６３４（ＵＮＱ７３８）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１４３３ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ７１１８４−１６３４と命名）（ＵＮＱ７３８）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２６３８４ムス・ムスクルスジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ２（Ｄｇａｔ２）；参照タンパク質：
Ｑ９ＤＣＶ３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＤＣＶ３ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
０６１００１０Ｂ０６Ｒｉｋタンパク質（ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０３２５６４ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０３２５６４ＮＩＤ：
ｇｉ２６０２４１９６ｒｅｆＮＭ＿０３２５６４．２ホモ・サピエンスジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼホモログ２（マウス）（ＤＧＡＴ２）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９６ＰＤ７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９６ＰＤ７ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２（仮想タンパク質）（ＧＳ１９９９完全タンパク質）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＤＧＡＴ２（ジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼホモログ２［マウス］）のオルソログであるＤｇａｔ２（ジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼ２）である。
別名としては、ＤＧＡＴ−２、０６１００１０Ｂ０６Ｒｉｋ、ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２、ＨＭＦＮ１０４５およびＧＳ１９９９完全体が挙げられる。
ＤＧＡＴ２は小胞体上に存在する内在性膜タンパク質であり、長鎖アシル−ＣｏＡとジアシルグリセロールからのトリグリセリドの形成を触媒する酵素としての機能を果たす。

ＤＧＡＴ２の発現は遍在性であるが、肝臓、白色脂肪、乳腺、小腸および皮膚の脂腺において非常に多いようである。
ＤＧＡＴ２は、エネルギー代謝および皮膚バリア機能においてある役割を果たしている（Ｃａｓｅｓｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７６（４２）：３８８７０−６（２００１）；Ｗａｋｉｍｏｔｏｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ３１０（２）：２９６−３０２（２００３）；Ｓｔｏｎｅｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７９（１２）：１１７６７−７６（２００４））。さらに、ＤＧＡＴ２は糖尿病および乾癬と関連している可能性がある（ＷａｔｅｒｍａｎｎおよびＺａｍｍｉｔ、ＩｎｔＪＯｂｅｓＲｅｌａｔＭｅｔａｂＤｉｓｏｒｄ
２６（５）：７４２−３（２００２）；Ｍｅｅｇａｌｌａｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ２９８（３）：３１７−２３（２００２）；Ｗａｋｉｍｏｔｏｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ３１０（２）：２９６−３０２（２００３））。

ＳｃｏｔＳｔｏｎｅおよび同僚（２００４）により、ノックアウトマウスを用いてＤＧＡＴ２の生理学的役割が調査された。彼らにより、ＤＧＡＴ２（−／−）マウスは脂肪減少性であり、生後、早期に死亡することが示された。組織トリグリセリドおよびエネルギー基質含量は、（＋／＋）マウスよりもＤＧＡＴ２（−／−）マウスにおいてかなり低かった。さらに、皮膚の異常およびバリア維持機能は、ＤＧＡＴ２（−／−）マウスにおいて明白であったが、（＋／＋）マウスではそうでなく、ＤＧＡＴ２（−／−）マウスの早期の生後致死に寄与するエネルギー恒常性異常および脱水が示唆される。Ｓｃｏｔおよび同僚により、マウスにおけるトリグリセリド生合成の大部分ではＤＧＡＴ２が関与し、治療目的のためのＤＧＡＴ２の阻害は、ＤＧＡＴ２機能が生存に不可欠なようであるため、注意して取り組むべきであると結論付けられた。

カイ二乗値＝２．６２有意性＝０．２６９８２００６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．１８平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２６３８４．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル（脂肪以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣイメージ：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．２１．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ７１１８４−１６３４（ＵＮＱ７３８）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトジアシルグリセロールＯ−アシルトランスフェラーゼホモログ２（マウス）（ＤＧＡＴ２）のオルソログをコードするＵＮＱ７３８遺伝子の変異により、（−／−）変異型の周産期致死がもたらされた。
遺伝子情報により、この変異によってホモ接合性変異型の周産期致死がもたらされたことが示される。ホモ接合性変異型マウスは小型で虚弱であり、生後５日以内に死亡した。
検死により、変異型は脱水しており、皮下脂肪貯蔵の減少（異常な脂質代謝を示唆）ならびに脾臓および胸腺におけるリンパ球の減少を伴うことが明らかになった。標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）病理学
肉眼的：
（−／−）マウスは小型で脱水しており、皮下脂肪貯蔵の減少を示した。

顕微鏡的：
周産期死亡が（−／−）マウスにおいて認められた。
（−／−）マウスは、胸腺および脾臓におけるリンパ球の減少を示した。
外部ノックアウトマウスは、報告によると脂肪減少性であり、明らかに、エネルギー代謝のための基質の著しい低減および皮膚における透過性バリア機能障害のために生後すぐに死亡した。
遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は、免疫組織化学によって分析された組織パネルのうちで精巣および精巣上体中に検出された。

骨マイクロＣＴ解析：
手順：マイクロＣＴを使用して、非常に感度の高いＢＭＤの測定を行った。１つの椎骨および１つの大腿骨を、４匹の野生型マウスおよび４匹のヘテロ接合性マウスのコホートから取り出した。腰部の５つの椎骨骨梁骨体積、骨梁厚、結合性密度ならびに大腿骨中軸の骨の総面積および皮質厚の測定を行った。μＣＴ４０スキャンにより、骨量および構造についての詳細な情報が得られた。複数の骨を、サンプルホルダーに置き、自動的にスキャンした。装置ソフトウェアを使用して、解析用の目的の領域を選択した。骨梁骨パラメ
ータを、１６マイクロメートルの解像度で第５腰部椎骨（ＬＶ５）において解析し、皮質骨パラメータを、２０マイクロメートルの解像度で大腿骨中軸において解析した。

結果：
マイクロＣＴ：
雄ヘテロ接合性（＋／−）マウスは、その性別一致野生型同腹仔および歴史的平均と比較した場合、小柱数および連結密度の増加を示した。

まとめると、（＋／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較した場合、小柱数および連結密度の増加を示した。
これらの結果から、ノックアウト変異表現型が、大理石骨病のような骨の異常に関連し得ることが示唆される。大理石骨病は、骨の異常な肥厚および硬化ならびに骨の異常な脆弱性を特徴とする状態である。そのため、ＰＲＯ１４３３ポリペプチドまたはそのアゴニストは、大理石骨病および他の骨関連障害の処置に有益であり得る。

４８．２２．ＤＮＡ７３７３９−１６４５（ＵＮＱ７４５）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１４７４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ７３７３９−１６４５と命名）（ＵＮＱ７４５）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿００１００１８０３ムス・ムスクルス食道癌調節遺伝子−２（Ｅｃｇ２）；参照タンパク質：
Ｑ６ＩＥ３２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ６ＩＥ３２ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
食道癌調節遺伝子−２前駆体；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０３２５６６ホモ・サピエンス食道癌調節遺伝子−２（ＥＣＧ２）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｐ５８０６２食道癌調節遺伝子−２タンパク質前駆体（ＥＣＲＧ−２）（ＵＮＱ７４５／ＰＲＯ１４７４）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＥＣＧ２のオルソログであるＥｃｇ２（食道癌調節遺伝子−２）である。別名としては、ＥＣＲＧ２が挙げられる。

ＥＣＧ２は、おそらくプロテアーゼンヒビターとしての機能を果たしている推定分泌タンパク質である（ＰｕｅｎｔｅおよびＬｏｐｅｚ−Ｏｔｉｎ、ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１４（４）：６０９−２２（２００４））。
該タンパク質は、シグナルペプチドおよびＫａｚａｌ型セリンプロテアーゼインヒビタードメインを含む（ＳＭＡＲＴアクセッションＳＭ００２８０）。
また、ＥＣＧ２は、メタロチオネイン２Ａと関連し得る腫瘍抑制因子候補である。食道癌細胞において異所性発現されたＥＣＧ２は、核および細胞質内でメタロチオネインと共局在し、細胞増殖を阻害し、アポトーシスを誘導する。
ＥＣＧ２遺伝子における変異は、食道の扁平上皮癌に関与していた（Ｙｕｅｅｔａｌ．，ＩｎｔＪＣａｎｃｅｒ１０８（２）：２３２−６（２００４）；Ｃｕｉｅｔ
ａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ３０２（４）：９０４−１５（２００３））。

遺伝子ターゲティングまたは遺伝子トラップによる変異を、系統１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ由来の胚性幹（ＥＳ）細胞において生じさせる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスと交雑させ、Ｆ１ヘテロ接合性動物を作製する。これらの子孫を、交雑受精する
ことにより、Ｆ２の野生型、ヘテロ接合性およびホモ接合性の変異体子孫を作製する。まれに、例えば、Ｆ１マウスがキメラからほとんど得られない場合に、Ｆ１ヘテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスと交雑することにより、交雑受精用のさらなるヘテロ接合性動物を得て、Ｆ２マウスを作製する。この世代のマウスについてレベルＩ表現型解析を実施する。

カイ二乗値＝１．３８有意性＝０．５０１５７６０７（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２８平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１〜３をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿００１００１８０３．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された１３の成体組織サンプルのうち眼のみにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣイメージ：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．２２．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ７３７３９−１６４５（ＵＮＱ７４５）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト食道癌調節遺伝子−２（ＥＣＧ２）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、総組織マスの減少および骨中無機質密度の測定値の減少を示すホモ接合性（−／−）マウスがもたらされた。一部の雌（−／−）マウスは肥満であり、総体脂肪の増加および高いトリグリセリドレベルを示した。遺伝子破壊を、サザンブロットによって確認した。

Ａｖｅｒｔｉｎ（１．２５％２，２，２，−トリブロモエタノール，２０ｍＬ／ｋｇ体重）をマウスに腹腔内注射することにより麻酔し、体長および体重を測定し、次いで、そのマウスをＤＥＸＡスキャンのためにＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（Ｌｕｎａｒ
Ｉｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位にした。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフト
ウェアを使用して、目的の領域（ＲＯＩ）［すなわち、全身、椎骨および両大腿骨］の骨塩密度（ＢＭＤ）および脂肪組成物（％脂肪）および総組織質量（ＴＴＭ）を測定した。

結果：
Ｄｅｘａ：
雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均全身および大腿骨骨中無機質密度（ＢＭＤ）の減少ならびに総組織マスの減少を示した。また、数匹の雌（−／−）マウスは、高い総体脂肪を示した［１〜２匹の雌（−／−）マウスは肥満であり、総体脂肪の増加を伴い、高い平均血清トリグリセリドレベルを示した］。
集団は全体的に、肥満／２型糖尿病の特徴を示さなかった。

Ｄｅｘａ解析によって解析された（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔と比較して、異常な骨障害を示唆する、骨の測定値の減少を示した。さらに、この（−／−）マウスは、骨代謝障害を反映する骨測定値が異常に減少した負の骨表現型を示した。骨の負の表現型は、ＰＲＯ１４７４ポリペプチドまたはそのアゴニストが、骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。さらに、ＰＲＯ１４７４ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ１４７４ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、異常な骨代謝に関連する炎症性疾患（関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む）を含む、異常または病理学的な骨障害に導き得る。

４８．２３．ＤＮＡ７６３９３−１６６４（ＵＮＱ７６２）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１５５０ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ７６３９３−１６６４と命名）（ＵＮＱ７６２）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＡＫ００３６７４ムス・ムスクルス１８日胚完全体ｃＤＮＡ、ＲＩＫＥＮ完全長高含有ライブラリー、クローン：１１１００１４Ｂ０７産物：仮想コラーゲン三重らせん反復配列含有タンパク質、完全挿入物配列；参照タンパク質：
Ｑ９Ｄ１Ｄ６ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９Ｄ１Ｄ６ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
１１１００１４Ｂ０７Ｒｉｋタンパク質；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿１３８４５５ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１３８４５５ＮＩＤ：
ｇｉ３４１４７５４６ｒｅｆＮＭ＿１３８４５５．２ホモ・サピエンスコラーゲン三重らせん反復配列含有１（ＣＴＨＲＣ１）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９６ＣＧ８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９６ＣＧ８ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＲＩＫＥＮｃＤＮＡ１１１００１４Ｂ０７遺伝子（コラーゲン三重らせん反復配列含有タンパク質１）と類似。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＣＴＨＲＣ１のオルソログであるＣｔｈｒｃ１（コラーゲン三重らせん反復配列含有１）である。別名としては、１１１００１４Ｂ０７Ｒｉｋが挙げられる。

ＣＴＨＲＣ１は、シグナルペプチドおよびコラーゲン三重らせん反復配列を含む分泌タンパク質である。
ＣＴＨＲＣ１は、再形成中の外膜の線維芽細胞およびバルーン型損傷血管組織の新生内膜の平滑筋細胞において発現され、また、石灰化中のヒト動脈硬化性プラークマトリックスにおいても見られる。
ＣＴＨＲＣ１は、正常な動脈内では発現されない。
ＣＴＨＲＣ１の発現は、トランスフォーミング増殖因子−βおよび骨形成タンパク質−４に応答して上方調節される。ＣＴＨＲＣ１は、Ｉ型コラーゲンの発現および分泌を阻害し、細胞遊走を増強する。
したがって、ＣＴＨＲＣ１は、コラーゲンの沈着を阻害し、脈細胞の遊走を促進することにより血管再形成においてある役割を果たしているようである（Ｐｙａｇａｙｅｔａｌ．，ＣｉｒｃＲｅｓ９６（２）：２６１−８（２００５））。

カイ二乗値＝３．４３有意性＝０．１７９９６３７１（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２７平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１および２をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＡＫ０７６４９８）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル（肝臓および骨以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣイメージ：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４３．２３．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ７６３９３−１６６４（ＵＮＱ７６２）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトコラーゲン三重らせん反復配列含有１（ＣＴＨＲＣ１）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（＋／−）および（−／−）マウスの両方において、血清アルカリ
ホスファターゼレベルの増加がもたらされた。雌（−／−）マウスはまた、皮膚増殖割合の顕著な減少を示した。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）発現パターン：
ＧｅｎｅＬｏｇｉｃ解析により、ＵＮＱ７６２は皮膚および乳房組織において特異的に発現されることが示される。
［プロトコルの実施例５４および５５を参照］
（ｃ）成体皮膚細胞の増殖：
手順：１６週齢の動物（２匹の野生型および４匹のホモ接合体）から皮膚細胞を単離した。これらを、初代線維芽細胞培養物中で成長させ、線維芽細胞の増殖速度を厳格に規制したプロトコルで測定した。このアッセイが高増殖表現型および低増殖表現型を検出する能力を、ｐ５３およびＫｕ８０を使用して証明した。Ｂｒｄｕ組み込みを使用して、増殖を測定した。

詳細には、これらの研究では、皮膚線維芽細胞増殖アッセイを使用した。標準化培養物中での細胞数の増加を、相対増殖能の基準として使用した。初代線維芽細胞を、野生型マウスおよび変異マウスから採取した皮膚生検から確立した。５万個の細胞の２連または３連の培養物をプレートし、６日間成長させた。培養終了後、培養物中に存在する細胞数を、電子粒子計数器を使用して決定した。

結果：
雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較した場合、平均皮膚線維芽細胞増殖速度が減少した。

したがって、ホモ接合体変異マウスは、低増殖表現型を示した。これらの所見によって示唆されるように、ＰＲＯ１５５０ポリペプチドのアンタゴニストまたはインヒビターは、この低増殖表現型を模倣し、腫瘍抑制因子として機能することができ、異常な細胞増殖の減少に有用であろう。
したがって、ＵＮＱ７６２は、線維芽細胞の活性化および遊走においてある役割を果たしている。

（ｄ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、血糖測定を含む。マウスにおける血液化学試験を実施するためにＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用した。血糖値の測定に加えて、以下の血液化学試験もまた日常的に行う：アルカリホスファターゼ；アラニンアミノ−トランスフェラーゼ；アルブミン；ビリルビン；亜リン酸；クレアチニン；ＢＵＮ＝血中尿素窒素；カルシウム；尿酸；ナトリウム；カリウム；および塩化物。代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、インスリン感度およびグルコース代謝の変化を測定する耐糖能試験を含む。異常な耐糖能試験結果は、以下の障害または状態：１型糖尿病および２型糖尿病、シンドロームＸ、様々な循環器疾患および／または肥満症を示唆し得るが、これらに限定されない。

結果：
雄および雌（−／−）マウスの両方は、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清アルカリホスファターゼレベルが顕著に増加した。
また、ヘテロ接合性（＋／−）動物、特に雄においてアルカリホスファターゼの上昇が認められる。

４８．２４．ＤＮＡ７３７３０−１６７９（ＵＮＱ７７７）遺伝子が破壊されたマウス
の作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１５７１ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ７３７３０−１６７９と命名）（ＵＮＱ７７７）を破壊したこれらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：
ＮＭ＿０１９５００ムス・ムスクルスクラウジン１４（Ｃｌｄｎ１４）；参照タンパク質：
Ｑ９Ｚ０Ｓ３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９Ｚ０Ｓ３ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
クラウジン−１４；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿１４４４９２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１４４４９２ＮＩＤ：
ｇｉ２１５３６２９３ｒｅｆＮＭ＿１４４４９２．１ホモ・サピエンスクラウジン１４（ＣＬＤＮ１４）、転写物改変体１；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：Ｏ９５５００ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｏ９５５００ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
クラウジン−１４。

目的のマウス遺伝子は、Ｃｌｄｎ１４（クラウジン（ｃｌａｕｄｉｎ）１４）（ヒトＣＬＤＮ１４のオーソログ）である。
別名としては、ＤＦＮＢ２９が挙げられる。

ＣＬＤＮ１４は、おそらく、接着分子として、および上皮細胞または内皮細胞周囲の物理的バリアを形成する強固な連結部、構造の成分としての機能を果たしている内在性原形質膜タンパク質である。ＣＬＤＮ１４は、隣接細胞上の相補的タンパク質および自身と相互作用し、側方共重合体を形成する。
強固な連結部により、傍細胞空間を介する水および溶質の移動ならびに上皮細胞または内皮細胞の先端表面と側底または管腔外（ａｂｌｕｍｉｎａｌ）表面間の原形質膜タンパク質の移動の移動が抑制される。また、強固な連結部は、細胞骨格タンパク質およびシグナル伝達分子を漸増させ、おそらく、シグナル伝達プロセスに関与している（Ｇｏｎｚａｌｅｚ−Ｍａｒｉｓｃａｌｅｔａｌ．，ＰｒｏｇＢｉｏｐｈｙｓＭｏｌＢｉｏｌ
８１（１）：１−４４（２００３）；Ｔｓｕｋｉｔａｅｔａｌ．，ＮａｔＲｅｖ
ＭｏｌＣｅｌｌＢｉｏｌ２（４）：２８５−９３（２００１）；Ｈｅｉｓｋａｌａｅｔａｌ．，Ｔｒａｆｆｉｃ２（２）：９３−８（２００１））。
強固な連結部の一成分として、ＣＬＤＮ１４は、おそらく、傍細胞輸送および細胞非対称性においてある役割を果たしている。
ＣＬＤＮ１４の発現は、蝸牛内部および外有毛細胞および支持細胞内、腎臓の集合管内、ならびに肝臓の小葉周囲において明白である（Ｙｏｓｅｆｅｔａｌ．，ＨｕｍＭｏｌＧｅｎｅｔ１２（１６）：２０４９−６１（２００３））。
ＣＬＤＮ１４における変異により、ヒトでは難聴が引き起こされる（Ｗｉｌｃｏｘｅｔ
ａｌ．，Ｃｅｌｌ１０４（１）：１６５−７２（２００１））。

Ｂｅｎ−Ｙｏｓｅｆおよび同僚（２００３）により、ノックアウトマウスを用いてＣＬＤＮ１４の生理学的役割が調査された。彼らにより、ＣＬＤＮ１４（−／−）マウスは、蝸牛外有毛細胞の急速な変性、内有毛細胞の低速変性、およびカチオンの傍細胞透過性の減少を示し、難聴がもたらされることが示された。
また、彼らにより、ＣＬＤＮ１４は、有毛細胞と支持細胞の強固な連結部において発現されることが示された。
Ｂｅｎ−Ｙｏｓｅｆおよび同僚により、ＣＬＤＮ１４は、カチオンの傍細胞輸送を制限するのに必要とされ、これは、外有毛細胞の側底表面周囲の流体の適正なイオン組成の維持に重要であると結論付けられた。

カイ二乗値＝０．６７有意性＝０．７１５３３８０５（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２７平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０１９５００．３）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル（脳、脊椎および眼）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣイメージ：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．２４．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ７３７３０−１６７９（ＵＮＱ７７７）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトクラウジン１４（ＣＬＤＮ１４）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、蝸牛有毛細胞変性を示す聴力障害（−／−）マウスがもたらされた。顕微解析により、ホモ接合性変異型マウスの内耳内の蝸牛有毛感覚細胞の変性および減損が明らかになり、プレパルス抑制試験の際に認められた聴力障害が確認された。
また、変異型は、その野生型同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均血小板計数の増加ならびにＣＤ４およびＣＤ８細胞のサブセットの増加を示した。
変異型（−／−）マウスはまた、椎骨容積、数および連結密度の減少とともに骨関連測定値の減少を示した。変異型（−／−）マウスは、平均血清コレステロールおよびトリグリセリドレベルの増加を示した。
標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）発現：
クラウジン１４は、蝸牛でのその発現のための聴力機能に関与する強固な連結タンパク質である。
クラウジン１４の発現の増加はまた、関節リウマチにおける滑膜マクロファージと関連し、したがって、免疫システムに重要な役割を果たす。

（ｃ）病理学
顕微鏡的：
（−／−）マウスは、基底膜上の内外両方の蝸牛有毛細胞の完全な消失を特徴とする内耳内の蝸牛有毛感覚細胞のびまん性の著しい変性を示した。
遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は、免疫組織化学によって組織パネルにおいて検出されなかった。

（ｄ）免疫表現型解析
免疫関連疾患および炎症疾患は、通常の生理学では発作または損傷に応答し、発作または損傷からの修復を開始し、外来生物に対する先天性および後天性防御を増加させるために極めて重要な非常に複雑でしばしば複数の相互関連した生物学的経路の徴候および結果である。これらの正常な生理学的経路が応答強度の直接的関連、異常な制御または過剰な刺激の結果、自己反応、またはこれらの組み合わせとしてさらなる発作または損傷を引き起こす場合、疾患または病変が起こる。

以下の試験を行った。

結果：
血液学：（＋／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均におけるレベルと比較して、平均血小板数の増加を示した。

したがって、ＤＮＡ７３７３０−１６７９遺伝子が欠損した変異マウスは、凝血障害に関連する表現型を生じた。したがって、ＰＲＯ１５７１ポリペプチドのインヒビターまたはアンタゴニストは、血友病などの異常な血液凝固に関連する障害の治療で有用であろう。

結果：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、細胞集団におけるＣＤ６２ｈｉ、ＣＤ４４ｉｎｔ（ＣＤ４およびＣＤ８のサブセット）細胞の平均パーセンテージの増加を特徴とする末梢血中の白血球サブセットの分布の変化を示した。

したがって、ＰＲＯ１５７１ポリペプチドをコードする遺伝子をノックアウトすることにより、Ｔ細胞集団の増加が引き起こされる。これらの観察結果から、ＰＲＯ１５７１ポリペプチドまたはＰＲＯ１５７１をコードする遺伝子が、Ｔ細胞増殖の負の制御因子として作用するようである。
したがって、ＰＲＯ１５７１ポリペプチドのアンタゴニストまたはインヒビターは、Ｔ細胞増殖の増強に有益であり得る。

（ｅ）骨代謝および全身診断学／放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測
定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

結果：
マイクロＣＴ：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均脊椎小柱の体積、数および結合性密度の減少を示した。

マイクロＣＴ解析によって解析された（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、異常な骨障害を示唆する、骨の測定値の減少を示した。骨の負の表現型は、ＰＲＯ１５７１ポリペプチドまたはそのアゴニストが、骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。さらに、ＰＲＯ１５７１ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ１５７１ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、異常な骨代謝に関連する炎症性疾患（関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む）を含む、異常または病理学的な骨障害に導き得る。

（ｆ）表現型解析：ＣＮＳ／神経学
神経学の分野において、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含む神経性障害および精神医学的障害の処置のためのインビボにおいて有効な標的の同定についての解析に本明細書中では注目した。神経障害は、「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。その「不安障害」としては、以下：軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、別段特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴うパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、Ｉ型またはＩＩ型の双極性障害、別段特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物
質誘導性気分障害が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害にあてはまることがあり、その人格障害としては、以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない。

手順：
行動スクリーニングを、４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性変異マウスおよび８匹のホモ接合性変異マウスのコホートにおいて実施した。生存能低下のために、より早期の試験が必要とならない限り、すべての行動試験は、１２〜１６週齢の間に実施した。これらの試験は、不安、活動性レベルおよび探索を計測するためのオープンフィールドを含んだ。

結果：
ＰＰＩ：
８匹の（−／−）マウスはすべて驚愕応答を示さず、変異型における聴力障害を示した。したがって、プレパルス抑制は評価され得なかった。
これらの結果は、（−／−）マウスが、基底膜上の内外両方の蝸牛有毛細胞の完全な消失を特徴とする内耳内の蝸牛有毛感覚細胞のびまん性の著しい変性を示したという観察結果と一致する。

（ｇ）表現型解析：心臓学
心臓血管生物学の分野において、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、様々な冠動脈疾患、異常脂肪血症（例えば、高コレステロール（高コレステロール血症）および血清トリグリセリドの増加（高トリグリセリド血症））、糖尿病および／または肥満症の処置のための標的を本明細書中で同定した。表現型試験は、血清コレステロールおよび血清トリグリセリドの測定を含んでいた。

結果：
血液化学：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均血清中コレステロールレベルおよび平均血清中トリグリセリドレベルの上昇を示した。

上記に概要を示したように、（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清コレステロールおよびトリグリセリドレベルの増加を示した。
したがって、ＰＲＯ１５７１遺伝子が欠損した変異マウスは、心血管疾患のモデルとして役立ち得る。ＰＲＯ１５７１ポリペプチドまたはそのコード遺伝子は、コレステロールおよびトリグリセリドなどの血中脂質の制御に有用であり得る。したがって、ＰＲＯ１５７１ポリペプチドまたはそのアゴニストは、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、様々な冠状動脈疾患、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、糖尿病および／または肥満症のような心血管疾患の処置に有用であり得る。

４８．２５．ＤＮＡ７３７３４−１６８０（ＵＮＱ７７８）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１５７２ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ７３７３４−１６８０と命名）（ＵＮＱ７７８）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０１９８１５ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０１９８１５ＮＩＤ：
ｇｉ９７９００７４ｒｅｆＮＭ＿０１９８１５．１ムス・ムスクルスクラウジン１８（Ｃｌｄｎ１８）；参照タンパク質：
Ｐ５６８５７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｐ５６８５７ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
クラウジン−１８；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０１６３６９ホモ・サピエンスクラウジン１８（ＣＬＤＮ１８）、転写物改変体１；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｐ５６８５６ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｐ５６８５６ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
クラウジン−１８。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＣＬＤＮ１８のオルソログであるＣｌｄｎ１８（クローディン１８）である。ＣＬＤＮ１８は、主に肺および胃上皮細胞において発現される内在性原形質膜タンパク質であり、強固な連結部の一成分としての機能を果たす。ＣＬＤＮ１８は、おそらく、傍細胞輸送および細胞極性においてある役割を果たしている（Ｎｉｉｍｉ
ｅｔａｌ．，ＭｏｌＣｅｌｌＢｉｏｌ２１（２１）：７３８０−９０（２００１）；Ｈｅｉｓｋａｌａｅｔａｌ．，Ｔｒａｆｆｉｃ２（２）：９３−８（２００１）；Ｇｏｎｚａｌｅｚ−Ｍａｒｉｓｃａｌｅｔａｌ．，ＰｒｏｇＢｉｏｐｈｙｓ
ＭｏｌＢｉｏｌ８１（１）：１−４４（２００３））。

カイ二乗値＝０．３３有意性＝０．８４７８９３７（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２４平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン２から４をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０１９８１５．１）。
１．野生型発現パネル：
標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによって試験した２６の成体組織試料のうち、脊髄；肺；腎臓；胃、小腸および結腸；および喘息肺において検出された。
２．ＱＣ発現：ＱＣイメージ：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．２５．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ７３７３４−１６８０（ＵＮＱ７７８）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトクラウジン１８（ＣＬＤＮ１８）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）マウスにおいて骨塩量および密度の測定値の減少がもたらされた。
雄および雌ホモ接合性変異型マウスの両方は、その性別一致野生型同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、骨塩量および密度の測定値の顕著な減少を示した。また、ホモ接合性変異型は、数多くの免疫学的異常、例えば、白血球計数の増加およびＬＰＳ攻撃に対するＩＬ−６応答の増加を示した。
検死により、ホモ接合性変異型マウスにおいて胃腺上皮の異常な分化および慢性炎症を伴う胃粘膜の肥厚が明らかになった。標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）発現：
クラウジン１８は、肺および胃に大きく限定された特有の発現パターンを有し、他の組織での発現は比較的低い。
発現は関節リウマチと関連し、滑膜線維芽細胞、マクロファージおよびＴ細胞では発現は増加している。

（ｃ）病理学
肉眼的：
（−／−）マウスは、著しく肥厚した胃粘膜を示した。

顕微鏡的：
（−／−）マウスは、胃の主要細胞および傍細胞の数の減少ならびに粘液様細胞の数の増加を伴う胃腺上皮の正常な分化の著しい低下を特徴とする胃粘膜の変化を示した。多数の分岐を有する異常な腺が存在し、また、中等度の炎症浸潤物が粘膜および固有層内に存在し、腺性粘膜の上部に拡張していた。
これらの観察結果は、胃での特異的発現と一致する。
ＧｅｎｅＬｏｇｉｃデータは、ヒト胃腺癌におけるＵＮＱ７７８の発現の減少を示す。多くの領域で、胃腺は、傍細胞および主要細胞と置き換わった数多くの粘液様細胞を含んだ。
また、２／３匹の雄（−／−）マウスで下顎唾液腺の線条導管において好酸球細胞質顆粒
の著しい減少が認められた。（−／−）マウスはまた、（＋／＋）同腹仔と比較した場合、胃の重量の増加を示した。
遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は、免疫組織化学によって組織パネルにおいて検出されなかった。

以下の試験を行った。

血液学解析：
試験の説明：血液試験は、Ａｂｂｏｔｔ社のＣｅｌｌ−Ｄｙｎ３５００Ｒ自動血液学分析装置によって行う。その特徴の一部としては、５種類の白血球分画が挙げられる。「患
者」レポートには、全部で２２を超えるパラメータが含まれ得る。

結果：
血液学：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均白血球、絶対好中球、絶対リンパ球および血小板計数の増加を示した。

これらの結果は、変異（−／−）マウスが、その野生型同腹仔と比較して、いくつかの免疫学的異常を示すことを示す。まとめると、血液学の結果は、ホモ接合体変異マウスがその同腹仔コントロールと比較して白血球数、好中球数およびリンパ球数の増加を示し、これは、細胞外病原体を飲み込むか死滅させる食細胞活性または能力が増加したマクロファージ前駆体レベルの上昇を示す。
したがって、ＰＲＯ１５７２ポリペプチドは、正常な免疫学的プロフィールの維持、特に、適応免疫に必須であるはずである。また、変異型（−／−）マウスは、血小板計数の増加を示した。
したがって、ＤＮＡ７３７３４−１６８０遺伝子が欠損した変異マウスは、凝血障害に関連する表現型を生じた。これに関して、ＰＲＯ１５７２ポリペプチドのインヒビターまたはアンタゴニストは、血友病などの異常な血液凝固に関連する障害の治療で有用であろう。

結果：
ＣＤ１１７細胞の有意な減少が、野生型（＋／＋）同腹仔と比較して変異型（−／−）マウスで腹腔洗浄液中において観察された。したがって、造血系前駆細胞は、これらのノックアウトマウスにおいて減少している。
したがって、ＰＲＯ１５７２ポリペプチドをコードする遺伝子は、造血系前駆細胞の発達および／または生成に必須であるはずである。

結果：
急性期応答：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、ＬＰＳ攻撃に対するＩＬ−６応答の増加を示した。

まとめると、ＬＰＳ内毒素攻撃は、ＰＲＯ１５７２ポリペプチドをコードする遺伝子が欠損したノックアウトマウスは、その野生型同腹仔と比較した場合、免疫学的異常を示すことを示した。特に、変異マウスは、ＬＰＳ内毒素で攻撃した場合、免疫応答（ＩＬ−６産生）を誘発する能力が増加し、炎症誘発応答を示す。ＩＬ−６は、より後期のＢ細胞活性化に寄与する。さらに、ＩＬ−６は、急性期応答および全身性炎症の誘導で極めて重要な役割を果たす。このことは、ＰＲＯ１５７２ポリペプチドに対するインヒビターまたはアンタゴニストが、免疫系を刺激し得、この作用が白血病および他のタイプの癌の場合の個体ならびにＡＩＤＳ罹患者などの免疫無防備状態の患者にとって有益であり得る場合に有用性が見出され得ることが示唆される。したがって、ＰＲＯ１５７２ポリペプチドまたはそのアゴニストは、免疫応答の阻害に有用であり得、例えば、移植片拒絶または移植片対宿主病の場合における有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であり得る。

（ｅ）骨代謝および全身診断学／放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

結果：
Ｄｅｘａ：
（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均骨塩量および密度の測定値の顕著な減少を示した。

マイクロＣＴ：
雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均大腿骨中軸皮質の厚さ、骨梁容積および骨梁厚さの顕著な減少を示した。

Ｄｅｘａおよび骨マイクロＣＴ解析によって解析された（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、異常な骨障害を示唆する、骨の測定値の減少を示した。（−／−）マウスはまた、負の骨表現型を示し、骨の代謝障害を反映する骨測定値が異常に減少した。骨の負の表現型は、ＰＲＯ１５７２ポリペプチドまたはそのアゴニストが、骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。さらに、ＰＲＯ１５７２ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ１５７２ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、異常な骨代謝に関連する炎症性疾患（関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む）を含む、異常または病理学的な骨障害に導き得る。

４８．２６．ＤＮＡ７６５３１−１７０１（ＵＮＱ８３２）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１７５９ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ７６５３１−１７０１と命名）（ＵＮＱ８３２）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿１３４１００ムス・ムスクルスＤＮＡセグメント、Ｃｈｒ１５、マウスＧｅｎｏｍｅＩｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ２７（Ｄ１５Ｍｇｉ２７）；参照タンパク質：
Ｑ９２１Ｙ４ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９２１Ｙ４ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
Ｄ１５Ｍｇｉ２７タンパク質（ムス・ムスクルスＮＯＤ由来ＣＤ１１ｃｖｅ樹状細胞ｃＤＮＡ、ＲＩＫＥＮ完全長高含有ライブラリー、クローン：Ｆ６３０１０９Ｈ０６産物：仮想一般基質輸送体含有タンパク質、完全挿入物配列）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０３２８８９ホモ・サピエンス仮想タンパク質ＭＧＣ１１３０８（ＭＧＣ１１３０８）；ヒトタンパク質配列は、次の参照に対応する：
Ｑ９６ＩＡ５ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９６ＩＡ５ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＵＮＫＮＯＷＮ（ＰＲＯＴＥＩＮＦＯＲＭＧＣ：１１３０８）。

目的のマウス遺伝子は、ヒト仮想タンパク質ＭＧＣ１１３０８のオルソログであるＤ１５Ｍｇｉ２７（ＤＮＡセグメント、Ｃｈｒ１５、マウスＧｅｎｏｍｅＩｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ２７）である。

仮想タンパク質ＭＧＣ１１３０８は、推定内在性原形質膜タンパク質（Ｃｌａｒｋｅ
ｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））で「主要促通（ｆａｃｉｌｉｔａｔｏｒ）スーパーファミリー」（ＭＦＳ）構成員であり、おそらく輸送体としての機能を果たしている（Ｐａｏｅｔａｌ．，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ
ＭｏｌＢｉｏｌＲｅｖ６２（１）：１−３４（１９９８））。
該タンパク質は、主に、ＤＵＦ７９１（「未知機能のタンパク質」）ドメイン内のシグナルペプチドおよび１０回膜貫通セグメントからなる（ＰｆａｍアクセッションＰＦ０５６３１）。

カイ二乗値＝１．１４有意性＝０．５６５５２５５（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２６平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿１３４１００．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および２６のすべての成体組織サンプル（骨以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣイメージ：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．２６．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ７６５３１−１７０１（ＵＮＱ８３２）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト仮想タンパク質ＭＧＣ１１３０８のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）マウスにおいて鬱様応答の減少がもたらされた。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）表現型解析：ＣＮＳ／神経学
神経学の分野において、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含む神経性障害および精神医学的障害の処置のためのインビボにおいて有効な標的の同定についての解析に本明細書中では注目した。神経障害は、「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。その「不安障害」としては、以下：軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、別段特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴うパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、Ｉ型またはＩＩ型の双極性障害、別段特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物
質誘導性気分障害が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害にあてはまることがあり、その人格障害としては、以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない。

機能観察バッテリー（ＦＯＢ）試験−尾部懸垂試験：
ＦＯＢは、肉眼的に感覚および運動の欠損を決定するために動物に適用される一連の状況である。肉眼的神経機能を評価するアーウィンの神経学的スクリーニング由来の試験の一部を使用する。一般に、短期間の触覚、嗅覚、および視覚に対する刺激を動物に適用して、その正常に検出および応答する能力を決定する。これらの簡潔な試験は約１０分かかり、試験終了後にマウスをそのホームケージに戻す。

結果：
尾部懸垂２：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、不動時間中央値の減少を示し、変異型における鬱様応答の減少が示唆された。
まとめると、尾部懸垂試験により、軽度〜中等度の不安、一般病状による不安および／または双極性障害；多動性；感覚障害；強迫性障害、統合失調症もしくは偏執性人格と関連するものであり得る不安の増大と関連する表現型が明らかになった。
したがって、ＰＲＯ１７５９ポリペプチドまたはそのアゴニストは、かかる神経学的障害の処置に有用であり得る。

４８．２７．ＤＮＡ８２３７２（ＵＮＱ８８６）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１９０４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ８２３７２と命名）（ＵＮＱ８８６）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＭＩＳ＿ＵＮＱ８８６ＬＧＩＤ：１５２０８；参照タンパク質：
ＭＩＳ＿ＵＮＱ８８６ＯＲＦ（ＬＧＩＤ：１５２０８）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿００４５９０ホモ・サピエンスケモカイン（Ｃ−Ｃモチーフ）リガンド１６（ＣＣＬ１６）；ヒトタンパク質配列は、次の参照に対応する：
Ｏ１５４６７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｏ１５４６７ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
小さい誘導サイトカインＡ１６前駆体（ＣＣＬ１６）（ＩＬ−１０誘導ケモカイン）（ケモカインＬＥＣ）（肝臓発現ケモカイン）（モノタクチン−１）（ＭＴＮ−１）（ケモカ
インＣＣ−４）（ＨＣＣ−４）（ＮＣＣ−４）（リンパ球および単球化学誘引物質）（ＬＭＣ）（ＬＣＣ−１）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＣＣＬ１６（ケモカイン［Ｃ−Ｃモチーフ］リガンド１６）のオルソログである推定転写物（Ｌｅｘｉｃｏｎアクセッション：ＭＩＳ＿ＵＮＱ８８６）である。別名としては、ＬＥＣ、ＬＭＣ、ＮＣＣ４、ＣＫｂ１２、ＨＣＣ−４、ＬＣＣ−１、Ｍｔｎ−１、ＮＣＣ−４、ＳＣＹＬ４、ＩＬＩＮＣＫ、ＳＣＹＡ１６、モノタクチン−１、ケモカインＬＥＣ、ケモカインＣＣ−４、新たなＣＣケモカイン４、ＩＬ−１０誘導ケモカイン、肝臓発現ケモカイン、肝臓ＣＣケモカイン−１前駆体、ならびにリンパ球および単球化学誘引物質が挙げられる。

ＣＣＬ１６は、サイトカイン受容体ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ５およびＣＣＲ８の低親和性リガンドとして（Ｈｏｗａｒｄｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ９６（３）：８４０−５（２０００）；Ｎｏｍｉｙａｍａｅｔａｌ．，ＩｎｔＩｍｍｕｎｏｌ１３（８）：１０２１−９（２００１））および好酸球上に発現されるヒスタミン受容体Ｈ４の高親和性リガンドとして（Ｎａｋａｙａｍａｅｔａｌ．，ＪＩｍｍｕｎｏｌ１７３（３）：２０７８−８３（２００４））の機能を果たす分泌タンパク質である。
ＣＣＬ１６は、肝細胞によって構成的に発現され（Ｎｏｍｉｙａｍａｅｔａｌ．，ＩｎｔＩｍｍｕｎｏｌ１３（８）：１０２１−９（２００１）；Ｓｈｏｕｄａｉｅｔ
ａｌ．，ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ１３９６（３）：２７３−７（１９９８））、ＣＣＬ１６発現は、活性化単球においてインターロイキン−１０によって上方調節される（Ｈｅｄｒｉｃｋｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ９１（１１）：４２４２−７（１９９８））。
ＣＣＬ１６は、免疫細胞機能の調節因子である。ＣＣＬ１６は、好酸球、単球、Ｔ細胞および樹状細胞の走化性を刺激し、マクロファージの機能を増強し、Ｔ細胞溶解活性を増大させる（Ｎａｋａｙａｍａｅｔａｌ．，ＪＩｍｍｕｎｏｌ１７３（３）：２０７８−８３（２００４）；Ｇｕｉｄｕｃｃｉｅｔａｌ．，ＪＩｍｍｕｎｏｌ１７２（７）：４０２６−３６（２００４）；Ｃａｐｐｅｌｌｏｅｔａｌ．，ＪＬｅｕｋｏｃＢｉｏｌ７５（１）：１３５−４２（２００４））。
ＣＣＬ１６は、内皮細胞において血管形成活性を誘発することにより血管形成においてある役割を果たしている可能性がある（Ｓｔｒａｓｌｙｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ１０３（１）：４０−９（２００４））。
ＣＣＬ１６は、腫瘍成長を遅延させ、転移を抑制し得、該サイトカインは、ある種の型の癌の処置に有用であり得ることが示唆される（Ｌｉｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ６３（２３）：８３８４−９２（２００３）；Ｇｕｉｄｕｃｃｉｅｔａｌ．，Ｊ
Ｉｍｍｕｎｏｌ１７２（７）：４０２６−３６（２００４））。

カイ二乗値＝＝０．５有意性＝０．７７８８００８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２６平均同腹仔数＝＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１から３をターゲティングした。
１．野生型発現パネル：
標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによって試験した１３の成体組織試料のうち、胚性幹（ＥＳ）細胞ならびに脳、脊髄および目において検出された。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊を、サザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．２７．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ８２３７２（ＵＮＱ８８６））
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトケモカイン（Ｃ−Ｃモチーフ）リガンド１６（ＣＣＬ１６）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、雌（−／−）マウスにおいて平均総組織マスおよび総体脂肪の増加がもたらされた。
変異型（−／−）マウスはまた、腹腔ＣＤ１１７細胞およびパイエル班のＴＣＲｂ／ＣＤ３８細胞の増加を示した。該マウスは、ＬＰＳ攻撃に対するＩＬ−６応答の増加ならびに平均血清ＩｇＧ３レベルの低下を示した。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）発現
ＨＣＣ−４（ＣＣＬ−１６としても知られる）は、主に肝臓において産生されるケモカインである。
これは、単球およびリンパ球のケモカインであることが知られているが、血管内皮細胞での血管形成プログラムにおいても機能を有する。
ＨＣＣ−４は、潰瘍性大腸炎において上方調節され、Ｈ４ヒスタミン受容体への結合を介した好酸球輸送に関与している。

（ｃ）免疫学表現型解析
免疫関連疾患および炎症性疾患は、正常な生理機能において、傷害または損傷に応答し、傷害または損傷からの修復を開始し、そして外来生物体に対する先天的および後天的な防御を開始することにとって重大な意味を有する、かなり複雑で、複雑に相互連結していることが多い生物学的経路の症状または結果である。これらの正常な生理学的経路が、応答の強度に直接関連してか、異常な制御もしくは過度の刺激の結果としてか、自己に対する応答としてか、またはこれらの組み合わせのいずれかとして、さらなる傷害または損傷を引き起こすときに、疾患または病態が生じる
これらの疾患の起源が、多段階の経路および複数の異なる生物学的系／経路に関連することが多いが、これらの経路の１個以上の重大な点における介入は、寛解性または治療的な効果を有し得る。治療的な介入は、有害なプロセス／経路の拮抗作用または有益なプロセス／経路の刺激のいずれかによって生じ得る。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は、哺乳動物の免疫応答の重要な成分である。Ｔ細胞は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己の分子に関連する抗原を認識する。この抗原は、抗原提示細胞、ウイルス感染細胞、癌細胞、移植片などの表
面上にＭＨＣ分子とともに提示され得る。Ｔ細胞系は、宿主哺乳動物に対して健康への脅威をもたらすこれらの改変細胞を排除する。Ｔ細胞としては、ヘルパーＴ細胞および細胞傷害性Ｔ細胞が挙げられる。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原−ＭＨＣ複合体を認識した後、広範囲に増殖する。ヘルパーＴ細胞はまた、種々のサイトカイン、すなわち、リンフォカインを分泌する。リンフォカインは、Ｂ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞および免疫応答に関与する他の種々の細胞の活性化において中心的な役割を果たす。

結果：
組織特異的ＦＡＣＳ−プロジェクト：
（−／−）マウスは、腹腔ＣＤ１１７細胞（増加）およびパイエル班におけるＴＣＲｂ／ＣＤ３８細胞における表現型を示した。したがって、ＰＲＯ１９０４ポリペプチドまたはＰＲＯ１９０４タンパク質をコードする遺伝子は、造血系前駆細胞発達および／または生成の負の調節因子としての機能を果たすようである。

まとめると、ＬＰＳ内毒素攻撃は、ＰＲＯ１９０４ポリペプチドをコードする遺伝子が欠損したノックアウトマウスは、その野生型同腹仔と比較した場合、免疫学的異常を示すことを示した。特に、変異マウスは、ＬＰＳ内毒素で攻撃した場合、免疫応答（ＩＬ−６産生）を誘発する能力が増加し、炎症誘発応答を示す。ＩＬ−６は、より後期のＢ細胞活性化に寄与する。さらに、ＩＬ−６は、急性期反応および全身性炎症の誘導に重要な役割を果たす。これにより、ＰＲＯ１９０４ポリペプチドのインヒビターまたはアンタゴニストが免疫系を刺激し、この効果が白血病、他の癌型、および免疫不全患者（ＡＩＤＳ患者など）などの場合の個体に有利である場合に使用されるであろうということが示唆される。したがって、ＰＲＯ１９０４ポリペプチドまたはその作用剤は、免疫応答の阻害で有用であり、例えば、移植片拒絶または移植片対宿主疾患の場合の有害な免疫応答の抑制のための有用な候補であろう。

結果：
血清Ｉｍｍ．２：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔、計画実行用の（＋／＋）マウスおよび歴史的中央値と比較して平均血清中ＩｇＧ３レベルの低下を示した。

血清免疫グロブリンアイソタイピングアッセイは、その性別一致同腹仔（＋／＋）コントロールと比較して、ホモ接合体（−／−）マウスにおける平均血清ＩｇＧ３のレベルの低下または減少を示した。

血清免疫グロブリンアイソタイピングアッセイにより、ホモ接合性成体が、血清ＩｇＧ３レベルの低下を示したことが明らかになった。したがって、ホモ接合体は、（＋／＋）同腹仔と比較して異常に低い血清免疫グロブリンを示した。したがって、ＰＲＯ１９０４ポリペプチドをコードする遺伝子は、免疫グロブリン（またはガンマグロブリン）を生成
するのに必須である。別で、Ｉｇｇ３免疫グロブリンは、中和作用を有し、それほどではないにせよ、補体系の活性化に重要である。

結果：
Ｄｅｘａ：
雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均総組織マス、総体脂肪パーセントおよび総脂肪質量の顕著な増加を示した。雌（−／−）マウスはまた、平均全身骨塩量、骨塩量指数ＢＭＣ／ＬＢＭおよび椎骨骨中無機質密度（ＢＭＤ）の減少を示した。
骨関連測定値の減少を伴う総組織マスおよび総体脂肪の増加は、脂肪および骨細胞が共通の前駆細胞から生じるため、有意である。

これらの結果から、変異（−／−）非ヒトトランスジェニック動物が、肥満に関する負の表現型を示すことが示唆される。したがって、ＰＲＯ１９０４ポリペプチドまたはそのアゴニストは、正常な成長および代謝プロセスに必須であり、特に肥満症の予防および／または処置に重要であり得る。

また、骨密度および含量の測定値の減少は異常な骨障害を示唆する。
（−／−）マウスは、骨代謝障害を反映する異常な骨測定値の減少を含む負の骨表現型を示した。その負の骨表現型は、ＰＲＯ１９０４ポリペプチドまたはそのアゴニストが、骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。さらに、ＰＲＯ１９０４ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ１９０４ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む異常な骨代謝に関連する炎症性疾患を含む異常な骨障害または病理学的な骨障害に導き得る。

４８．２８．ＤＮＡ２２５６８１（ＵＮＱ９８３）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ３５１９３ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ２２５６８１と命名）（ＵＮＱ９８３）を破壊した。
ＮＭ＿０１９４４７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０１９４４７ＮＩＤ：９５０６７７８ムス・ムスクルスムス・ムスクルス肝細胞増殖因子アクチベーター（Ｈｇｆａｃ）；参照タンパク質：
Ｑ９Ｒ０９８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９Ｒ０９８ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＨＥＰＡＴＯＣＹＴＥＧＲＯＷＴＨＦＡＣＴＯＲＡＣＴＩＶＡＴＯＲＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＥＣ３．４．２１．−）（ＨＧＦＡＣＴＩＶＡＴＯＲ）（ＨＧＦＡ）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿００１５２８ホモ・サピエンスＨＧＦアクチベーター（ＨＧＦＡＣ）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ０４７５６ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ０４７５６ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＨＥＰＡＴＯＣＹＴＥＧＲＯＷＴＨＦＡＣＴＯＲＡＣＴＩＶＡＴＯＲＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＥＣ３．４．２１．−）（ＨＧＦＡＣＴＩＶＡＴＯＲ）（ＨＧＦＡ）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＨＧＦＡＣのオルソログであるＨｇｆａｃ（肝細胞増殖因子アクチベーター）である。別名としては、ＨＧＦＡが挙げられる。

ＨＧＦＡＣは、主に肝臓において発現される分泌タンパク質であり、セリンプロテアーゼとしての機能を果たし、肝細胞増殖因子を切断および活性化する。
該タンパク質は、トロンビンによって切断および活性化され得る不活性チモーゲンとして発現される。ＨＧＦＡＣは、肝臓だけでなく、発達中の腎臓の尿管芽および多数の骨髄腫細胞においても発現される。ＨＧＦＡＣは、肝臓、腎臓、胎盤、肺および乳腺の発達、腸粘膜の修復、ならびに多数の骨髄腫細胞の増殖および生存に関与しているＨＧＦシグナル伝達に重要な役割を果たす（Ｉｔｏｈｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓ
Ａｃｔａ１４９１（１−３）：２９５−３０２（２０００）；Ｍｉｙａｚａｗａｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２６８（１４）：１００２４−８（１９９２）；Ｓｈｉｍｏｍｕｒａｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２６８（３０）：２２９２７−３２（１９９３）；ｖａｎＡｄｅｌｓｂｅｒｇｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７６（１８）：１５０９９−１０６（２００１）；Ｉｔｏｈｅｔａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ１２７（５）：１４２３−３５（２００４）；Ｔｊｉｎｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ１０４（７）：２１７２−５（２００４）。

Ｉｔｏｈおよび同僚（２００４）により、ノックアウトマウスにおいてＨＧＦＡＣの生理学的役割が調査された。彼らにより、デキストラン硫酸ナトリウムの経口投与による胃腸の損傷に起因する死亡は、ＨＧＦＡＣホモ接合性ヌルマウスにおいて野生型マウスよりも高いことが示された。さらに、彼らにより、ＨＧＦ活性化および上皮再生による損傷粘膜の修復は、ホモ接合性ヌルマウスでは障害されたが、野生型マウスでは障害されなかったことが示された。ＨＧＦ活性化および上皮再生による損傷粘膜の修復は、ホモ接合性ヌルマウスでは障害されたが、野生型マウスでは障害されなかった。
Ｉｔｏｈおよび同僚により、ＨＧＦＡＣは、損傷した超腸粘膜の修復に必要とされるが、正常な発達には必須ではないと結論付けられた。

カイ二乗値＝０．０３有意性＝０．９８５１１１９５（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２５平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１から９をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０１９４４７．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプル（骨格筋および骨以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣイメージ：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．２８．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ２２５６８１（ＵＮＱ９８３）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト肝細胞増殖因子アクチベーター（ＨＧＦＡＣ）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、平均血清グルコースレベルの増加を示す（−／−）マウスがもたらされた。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、血糖測定を含む。マウスにおける血液化学試験を実施するためにＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用した。代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。

結果：
雌（−／−）マウスは、異常なグルコース代謝および／または糖尿病に関連するものであり得る平均血清グルコースレベルの増加を示した。

したがって、変異型（−／−）マウスは、グルコース代謝の変化または糖尿病と関連するものであり得る高血糖症を示した。
ＰＲＯ３５１９３ポリペプチドまたはそのアゴニストは、正常なグルコースレベル／代謝の維持に有用であり得、おそらく糖尿病の処置に有用であり得る。

４８．２９．ＤＮＡ８１７６１−２５８３（ＵＮＱ１８９５）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ４３４１ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ８１７６１−２５８３と命名）（ＵＮＱ１８９５）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０１９４５４ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０１９４５４ＮＩＤ：９５０６５４６ムス・ムスクルスムス・ムスクルスδ様４（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）（Ｄｌｌ４）；参照タンパク質：
Ｑ９ＤＢＵ９ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＤＢＵ９ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＤＥＬＴＡ−ＬＩＫＥ４ＨＯＭＯＬＯＧ（ＤＲＯＳＯＰＨＩＬＡ）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０１９０７４ホモ・サピエンスδ様４（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）（ＤＬＬ４）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９ＮＲ６１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＮＲ６１ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＤＥＬＴＡ−ＬＩＫＥＰＲＯＴＥＩＮ４ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＤＲＯＳＯＰＨＩＬＡＤＥＬＴＡＨＯＭＯＬＯＧ４）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＤＬＬ４のオルソログであるＤｌｌ４（δ様４［Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ］）である。別名としては、Ｄｅｌｔａ４、δ様４タンパク質、δ４前駆体、δリガンド４前駆体、ノッチリガンドＤＬＬ４前駆体、ノッチリガンドδ−２前駆体、δ様４ホモログ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）、およびｈδ２が挙げられる。

ＤＬＬ４は、ノッチリガンドのδファミリーに属するＩ型原形質膜タンパク質である。ＤＬＬ４は、シグナルペプチド、δ鋸歯状（ｓｅｒｒａｔｅ）リガンド（ＤＳＬ）ドメイン、少なくとも７つの上皮細胞増殖因子（ＥＧＦ）様反復配列、膜貫通セグメント、および細胞質Ｃ末端を含む。ＤＬＬ４は、受容体ＮＯＴＣＨ１およびＮＯＴＣＨ４を活性化し得る（Ｓｈｕｔｔｅｒｅｔａｌ．，ＧｅｎｅｓＤｅｖ１４（１１）：１３１３−８（２０００））、これは、ｗｈｉｃｈｐｌａｙａｎ重要な役割ｉｎ血管形成において重要な役割を果たす（Ｋｒｅｂｓｅｔａｌ．，ＧｅｎｅｓＤｅｖ１４（１１）：１３４３−５２（２０００））。
ＤＬＬ４は、主に、発達中のマウス胚の動脈の血管内皮、成体マウス、および腫瘍モデルにおいて発現される（Ｓｈｕｔｔｅｒｅｔａｌ．，ＧｅｎｅｓＤｅｖ１４（１１）：１３１３−８（２０００）；Ｍａｉｌｈｏｓｅｔａｌ．，Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ６９（２−３）：１３５−４４（２００１））。
ＤＬＬ４は、造血系および血管系の発達においてある役割を果たしており（Ｄｏｒｓｃｈｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ１００（６）：２０４６−５５（２００２）；Ｌａｕｒｅｔｅｔａｌ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ１８（４）：７８８−９７（２００４））、ある種の型の癌の処置のための治療潜在性を有し得る（Ｔｏｈｄａｅｔａｌ．，ＩｎｔＪＯｎｃｏｌ２２（５）：１０７３−９（２００３））。

数名の研究者者により、ノックアウトマウスを用いてＤＬＬ４の生理学的役割が研究された。Ｋｒｅｂｓおよび共働者［ＧｅｎｅｓＤｅｖ１８（２０）：２４６９−７３（２００４）］ならびにＧａｌｅおよび同僚［ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵ
ＳＡ１０１（４５）：１５９４９−５４（２００４）］により、ＤＬＬ４ヘテロ接合性胚では血管再形成が欠損し、ハプロ不全致死がもたらされることが示された。彼らにより、血管再形成は、ＤＬＬ４遺伝子量に感受性であると結論付けられた。
Ｄｕａｒｔｅおよび同僚［ＧｅｎｅｓＤｅｖ１８（２０）：２４７４−８（２００４）］によって、生殖細胞系伝達キメラをＩＣＲ雌マウスと交配させることによりＤＬＬ４ヘテロ接合性マウスが成功裏に作製された。ＤＬＬ４ヘテロ接合性マウスは、ＩＣＲ背景では２７％頻度で生成されたが、１２９／Ｓｖ−ＣＰ背景ではＤＬＬ４ヘテロ接合性マウスは生成されなかった。動脈血管の発達における欠陥は、すべてのＤＬＬ４ヘテロ接合性胚において、種々の程度で明白であった。生存している雄および雌ＤＬＬ４ヘテロ接合性マウスは、見かけ上、正常で生殖能を有した。
胚致死性は、１０．５日のＤＬＬ４ホモ接合性ヌルマウスで観察され、主に動脈血管の発達における重症な欠陥が示された。
Ｄｕａｒｔｅおよび同僚により、胚の血管発達は、系統依存的ハプロ不全によって一部示されるように、ＤＬＬ４レベル非常に感受性であると結論付けられた。彼らにより、ＤＬＬ４は、成体の血管新生における介入のための治療的有用性を有し得ることが示された。

カイ二乗値＝０．０有意性＝０．０（ｈｏｍ／ｎ）＝０．０平均同腹仔数＝０
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１〜８をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０１９４５４．１）。
１．野生型発現パネル：
標的遺伝子の発現は、骨格筋、喘息肺、ＬＰＳ肝臓、血液、皮膚線維芽細胞、ＭＧ１２ＤＰＣおよび離乳（授乳）後第３日のＭＧを除くＲＴ−ＰＣＲによって試験した２６の成体組織試料のすべてにおいて検出された。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．２９．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ８１７６１−１５８３（ＵＮＱ１８９５））
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトδ様４（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）（ＤＬＬ４）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（＋／−）および（−／−）変異型の致死がもたらされた。
遺伝子情報により、この変異によって、ヘテロ接合性およびホモ接合性変異型の両方の致死がもたらされたことが示される。１１．５日および１２．５日に調べたヘテロ接合性胚では、構造的発達異常は検出されなかった。ホモ接合性変異型胚は観察しなかった。
標的遺伝子の破壊を、サザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）病理学
顕微鏡的：
胚致死性．
（−／−）胚は観察しなかった。
１１．５日または１２．５日（＋／−）胚では、構造的発達異常は検出されなかった。
死亡率についての胚発達異常に関する考察：
ノックアウトマウスにおける胚性致死は、通常、種々の重篤な発達上の問題（神経変性疾患、血管障害、炎症性疾患が含まれるが、これらに限定されない）または遺伝子／タンパク質が多くの細胞型において基礎的な細胞シグナル伝達過程で重要な役割を果たすことに起因する。さらに、胚性致死は、潜在的な癌モデルとして有用である。同様に、対応するヘテロ接合体（＋／−）変異動物は、これらがノックアウト遺伝子の機能に関する非常に有益なてがかりが明らかとなる表現型および／または病理学報告を示す場合に特に有用である。例えば、ＥＰＯノックアウト動物は胚致死性を示すが、胚に関する病理学報告は、ＲＢＣの著しい欠如を示した。

４８．３０．ＤＮＡ９２２３２−２５８９（ＵＮＱ１９０２）遺伝子破壊を含むマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験では、ＰＲＯ４３４８ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ９２２３２−２５８９と示す）（ＵＮＱ１９０２）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報を以下に示す：変異マウス遺伝子は、以下に対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２７３３４ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０２７３３４ＮＩＤ：
ｇｉ３３５６３２８９ｒｅｆＮＭ＿０２７３３４．２ムス・ムスクルスＲＩＫＥＮ
ｃＤＮＡ３３００００１Ｈ２１遺伝子（３３００００１Ｈ２１Ｒｉｋ）；参照タンパク質：
Ｑ８Ｃ６Ｂ０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８Ｃ６Ｂ０ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ムス・ムスクルス１７日胚ｈｅａｄｃＤＮＡ、ＲＩＫＥＮ完全長高含有ライブラリー、クローン：３３００００１Ｈ２１産物：仮想Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニン依存性メチルトランスフェラーゼ構造含有タンパク質、完全挿入物配列（ＤＫＦＺＰ５８６Ａ０５２２タンパク質）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０１４０３３ホモ・サピエンスＤＫＦＺＰ５８６Ａ０５２２タンパク質（ＤＫＦＺＰ５８６Ａ０５２２）；ヒトタンパク質配列は、以下に対応する：
Ｑ９Ｈ８Ｈ３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９Ｈ８Ｈ３ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＣＤＮＡＦＬＪ１３６３１ＦＩＳ、ＣＬＯＮＥＰＬＡＣＥ１０１１０９０、ＨＩＧＨＬＹＳＩＭＩＬＡＲＴＯＨＯＭＯＳＡＰＩＥＮＳＭＲＮＡ；ＣＤＮＡＤＫＦＺＰ５８６Ａ０５２２（ＦＲＯＭＣＬＯＮＥＤＫＦＺＰ５８６Ａ０５２２）（ＵＮＫＮＯＷＮ）（ＰＲＯＴＥＩＮＦＯＲＭＧＣ：１１０８１）（ＤＫＦＺＰ５８６Ａ０５２２ＰＲＯＴＥＩＮ）。

目的のマウス遺伝子は、遺伝子（ＤＫＦＺＰ５８６Ａ０５２２タンパク質のオーソログ）のＲＩＫＥＮｃＤＮＡ３３００００１Ｈ２１遺伝子である。
別名としては、２２１０４１４Ｈ１６Ｒｉｋ、ＵｂｉＥ、Ａａｍ−Ｂ、およびＡＡＭ−Ｂタンパク質が挙げられる。

ＤＫＦＺＰ５８６Ａ０５２２タンパク質は、メチルトランスフェラーゼ酵素として機能している可能性がある推定ＩＩ型内在性膜タンパク質である。
該タンパク質は、シグナルアンカーおよびＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニン依存性メチルトランスフェラーゼスーパーファミリードメインを含む（ＳＣＯＰアクセッションｄ１ｆｐ２ａ２；ＩｎｔｅｒＰｒｏアクセッションＩＰＲ００００５１およびＩＰＲ００１６０
１）。
このドメインを有するタンパク質は、Ｓ−アデノシル−Ｌ−メチオニンをメチル供与体として用いて特定のＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質または低分子基質のメチル化を触媒する。ＤＫＦＺＰ５８６Ａ０５２２タンパク質は細胞外タンパク質であり得る（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））。

ターゲティングされたか遺伝子トラップされた変異を、系統１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ由来の胚性幹（ＥＳ）細胞で行った。キメラマウスを、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスと交配してＦ１ヘテロ接合体動物を作製する。これらの子孫を交雑受精してＦ２野生型子孫、ヘテロ接合体変異子孫、およびホモ接合体変異子孫を作製する。稀に、例えば、Ｆ１マウスがキメラからほとんど得られない場合、Ｆ１ヘテロ接合体マウスを、１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスと交雑してさらなるヘテロ接合体動物を作製し、これを交雑受精してＦ２マウスを作製する。この世代由来のマウスに対してレベルＩ表現型解析を行う。

カイ二乗＝２．３有意性＝０．３１６６３６７７（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２３平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２７３３４）。
１．野生型発現パネル：胚性幹（ＥＳ）細胞およびＲＴ−ＰＣＲによって試験した２６個の成体組織サンプル中の標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊を、サザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．３０．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ９２２３２−２５８９（ＵＮＱ１９０２））
（ａ）全体的な表現型の概要：
推定ヒトＩＩ型内在性膜タンパク質（ＤＫＦＺＰ５８６Ａ０５２２）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、骨塩量および骨中無機質密度の測定値の減少を示す変異型（−／−）マウスがもたらされた。
遺伝子破壊を、サザンブロットによって確認した。

（ｂ）骨代謝および身体診断／放射線表現型解析
骨代謝領域では、本明細書中で、標的を、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症、および大理石骨病の治療、ならびに骨治癒を促進する標的の同定のために同定した。試験は、以下を含んでいた。
・大腿骨および脊椎骨における骨中無機質密度の測定のためのＤＥＸＡ
・骨小柱および皮質骨の骨中無機質密度の非常に高分解能且つ非常に高感度の測定のためのマイクロＣＴ。

Ｄｅｘａ解析−試験の説明：
手順：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体、および８匹のホモ接合体のコホートを、このアッセイで使用した。二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を使用して、骨の変
化を首尾よく同定した。麻酔した動物を試験し、骨塩量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比、容積測定骨中無機質密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿骨ＢＭＤ、および脊椎骨ＢＭＤを測定した。

結果：
Ｄｅｘａ：
雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均骨塩量、全身骨塩密度および椎骨骨中無機質密度の測定値の減少を示した。骨密度および含量の測定値の減少は異常な骨障害を示唆する。

（−／−）マウスは、負の骨表現型を示し、骨の代謝障害を反映する骨測定値が異常に減少した。骨の負の表現型は、ＰＲＯ４３４８ポリペプチドまたはそのアゴニストが、骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。さらに、ＰＲＯ４３４８ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ４３４８ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、異常な骨代謝に関連する炎症性疾患（関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む）を含む、異常または病理学的な骨障害に導き得る。

４８．３１．ＤＮＡ９２２８９−２５９８（ＵＮＱ１９１１）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ４３６９ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ９２２８９−２５９８と命名）（ＵＮＱ１９１１）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２３４０３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０２３４０３ＮＩＤ：
ｇｉ１２９６３６６４ｒｅｆＮＭ＿０２３４０３．１ムス・ムスクルス中胚葉発達候補２（Ｍｅｓｄｃ２）；参照タンパク質：
Ｑ９ＥＲＥ７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＥＲＥ７ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
中胚葉発達候補２；参照ヒト遺伝子配列：
ＢＣ００９２１０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＢＣ００９２１０ＮＩＤ：１４３２７９７１ホモ・サピエンスホモ・サピエンス、中胚葉発達候補２と類似、クローンＭＧＣ：１６１８５ＩＭＡＧＥ：３６３７４４９；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ１４６９６ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ１４６９６ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
中胚葉発達候補２。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＭＥＳＤＣ２のオルソログであるＭｅｓｄｃ２（中胚葉発達候補２）である。別名としては、ＭＧＣ２５９５９、ｍＫＩＡＡ００８１、２２１００１５Ｏ１１Ｒｉｋ、ＢＯＣＡ、ＭＥＳＤ、およびＫＩＡＡ００８１が挙げられる。

ＭＥＳＤＣ２は、小胞体上に存在するタンパク質であり、おそらく、Ｗｎｔシグナル伝達共受容体ＬＲＰ５およびＬＲＰ６のシャペロンタンパク質または他の低密度リポタンパク質受容体ファミリー構成員のシャペロンタンパク質としての機能を果たしている。ＭＥＳＤＣ２は、カーゴ輸送またはＷｎｔシグナル伝達を伴うプロセス、例えば、発達および骨形成中の胚極性および中胚葉誘導などにおいてある役割を果たしている可能性がある（Ｗｉｎｅｓｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ７２（１）：８８−９８（２００１）；Ｈｓｉｅｈｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ１１２（３）：３５５−６７（２００３）；ＣｕｌｉａｎｄＭａｎｎ、Ｃｅｌｌ１１２（３）：３４３−５４（２００３）；ＨｅｒｚａｎｄＭａｒｓｃｈａｎｇ、Ｃｅｌｌ１１２（３）：２８９−９２（２００３）；Ｚｈａｎｇｅｔａｌ．，ＭｏｌＣｅｌｌＢｉｏｌ２４（１１）：４６７７−８４（２００４））。

カイ二乗値＝４２．６９有意性＝５．３７０１２７Ｅ−１０（ｈｏｍ／ｎ）＝０．０平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２３４０３．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプルにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣイメージ：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．３１．１．ＤＮＡ９２２８９−２５９８（ＵＮＱ１９１１）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト中胚葉発達候補２（ＭＥＳＤＣ２）のオルソログをコードするＵＮＱ１９１１遺伝子の変異により、（−／−）変異型の致死がもたらされた。遺伝子情報により、この変異
によってホモ接合性変異型の致死がもたらされたことが示される。ヘテロ接合性マウスは、その野生型同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均血清ＩｇＧ１および卵白アルブミン攻撃に対するＩｇＧ２ａ応答の増加を示した。平均血清ＩｇＭレベルの増加もまた、（＋／−）マウスにおいて観察された。
標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）病理学
顕微鏡的：
胚致死性により、顕微鏡解析は行なわなかった。
１２．５日目に、４７個の胚：２７個の（＋／−）胚、４個の（＋／＋）胚、１４個の再吸収モル（ｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎｍｏｌｅｓ）および１個の未定胚が観察された。
ＵＮＱ１９１１は、中胚葉の分化に不可欠な染色体領域内に存在する未知機能のタンパク質である。ＵＮＱ１９１１は、おそらく中胚葉分化調節に重要な役割を果たしており、これは、ホモ接合性マウスにおいて生じた胚致死性によって説明され得る。
遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は、免疫組織化学によって組織パネルにおいて検出されなかった。

この攻撃の結果：
卵白アルブミン：（＋／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、卵白アルブミン攻撃に対する平均血清ＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａ応答の増加を示した。

まとめると、卵白アルブミン攻撃研究は、ＰＲＯ４３４８ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失したノックアウトへテロ接合性マウスが、その野生型同腹仔と比較した場合、免疫学的異常を示すことを示す。特に、変異（＋／−）マウスは、Ｔ細胞依存性ＯＶＡ抗原で攻撃した場合、免疫学的応答を誘発する能力の増加を示した。したがって、ＰＲＯ４３４８ポリペプチドのアンタゴニスト（インヒビター）は、免疫系の刺激（例えば、Ｔ細胞増殖）に有用であり、この効果が白血病、他の癌型、および免疫不全患者（ＡＩＤＳ患者など）などの場合の個体に有利である場合に使用されるであろうということが示唆される。したがって、ＰＲＯ
４３４８ポリペプチドまたはその作用剤は、免疫応答の阻害で有用であり、例えば、移植片拒絶、移植片対宿主疾患、または自己免疫疾患の場合の有害な免疫応答の抑制のための有用な候補であろう。

結果：
血清Ｉｍｍ．２：
（＋／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔、計画実行用の（＋／＋）マウスおよび歴史的中央値と比較して平均血清中ＩｇＭレベルの上昇を示した。

変異体（＋／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して平均血清ＩｇＭ免疫グロブリンレベルの上昇を示した。ＩｇＭ免疫グロブリンは、細菌のトキシンの中和に対する体液性免疫応答において最初に産生され、補体系を活性化する際に特に重要である。観察された表現型から、ＰＲＯ４３４８ポリペプチドが、炎症性応答の負の制御因子であることが示唆される。これらの免疫学的異常から、ＰＲＯ４３４８ポリペプチドのインヒビター（アンタゴニスト）が、免疫系（例えば、Ｔ細胞増殖）を刺激し得る重要な物質であり得、この作用が白血病および他のタイプの癌の場合の個体ならびにＡＩＤＳ罹患者などの免疫無防備状態の患者にとって有益であり得る場合に有用性が見出され得ることが示唆される。したがって、ＰＲＯ４３４８ポリペプチドまたはそのアゴニストは、免疫応答を阻害に有用であり得、例えば、移植片拒絶または移植片対宿主病の場合における有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であり得る。

４８．３２．ＤＮＡ９２２２５−２６０３（ＵＮＱ１９１６）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ４３８１ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ９２２２５−２６０３と命名）（ＵＮＱ１９１６）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿１７８０６６ムス・ムスクルスＲＩＫＥＮｃＤＮＡ１１１００１２Ｄ０８遺伝子（１１１００１２Ｄ０８Ｒｉｋ）；参照タンパク質：
Ｑ８ＣＦＵ０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＣＦＵ０ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＲＩＫＥＮｃＤＮＡ１１１００１２Ｄ０８；参照ヒト遺伝子配列：
ＡＫ０５７１７９ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＡＫ０５７１７９ＮＩＤ：１６５５２７７４ホモ・サピエンスホモ・サピエンスｃＤＮＡＦＬＪ３２６１７ｆｉｓ、クローンＳＴＯＭＡ２０００２５７。

目的のマウス遺伝子は、「ホモ・サピエンスｃＤＮＡＦＬＪ３２６１７ｆｉｓ、クローンＳＴＯＭＡ２０００２５７」で表されるヒト遺伝子のオルソログであるＲＩＫＥＮ
ｃＤＮＡ１１１００１２Ｄ０８遺伝子である。

該仮想タンパク質は、おそらく、７回膜貫通ドメインからなる内在性膜タンパク質である。
バイオインフォマティック解析から、該仮想タンパク質は原形質膜上に存在することが示
唆される。

カイ二乗値＝０．８３有意性＝０．６６０３４０３（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２７平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：
コードエキソン１の前の非コードエキソンならびにコードエキソン１および２を標的化した（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿１７８０６６．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプル（骨以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．３２．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ９２２２５−２６０３（ＵＮＱ１９１６）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト仮想膜タンパク質のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）マウスにおいて感覚運動ゲーティング／注意の障害がもたらされた。
雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均体重の増加を示した。
また、ホモ接合性マウスは、その（＋／＋）同腹仔対照と比較した場合、血小板計数の増加およびＣＤ８細胞の平均パーセンテージの減少を示したため、免疫学的異常も（−／−）マウスにおいて観察された。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

これらの疾患の発症は、しばしば多段階経路およびしばしば複数の異なる生体系／生物学的経路に関与するが、１つまたは複数のこれらの経路における臨界点での介入が改善効果または治療効果を示し得る。有害な過程／経路の拮抗作用または有益な過程／経路の刺
激のいずれかによって治療介入を行うことができる。

以下の試験を行った。

これらの研究では、分析細胞を、胸腺、末梢血、脾臓、骨髄、およびリンパ節から単離した。単核細胞集団中のＣＤ４およびＣＤ８陽性Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、および単球の相対的比率が決定されるようにフローサイトメトリーをデザインした。Ｂｅｃｔｏｎ−ＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ３−レーザーＦＡＣＳ装置を使用して、免疫状態を評価した。表現型アッセイおよびスクリーニングのために、この機械は、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比に加えて、ＣＤ４＋／ＣＤ８−、ＣＤ８＋／ＣＤ４−、ＮＫ、Ｂ細胞、および単球の数を記録する。単核細胞プロフィールを、６系統特異的抗体のパネル（ＣＤ４５ＰｅｒＣＰ、抗ＴＣＲｂＡＰＣ、ＣＤ４ＰＥ、ＣＤ８ＦＩＴＣ、ｐａｎ−ＮＫＰＥ、およびＣＤ１９ＦＩＴＣ）を使用した各マウス由来の溶解末梢血の単一サンプルの染色によって導いた。２つのＦＩＴＣおよびＰＥ標識抗体は、相互排除する細胞型を染色する。ＣｅｌｌＱｕｅｓｔソフトウェアを備えたＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓ
ｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターを使用して、サンプルを分析した。

結果：
ＦＡＣＳ３：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、ＣＤ８細胞の平均パーセンテージの減少を特徴とする末梢血中の白血球サブセットの分布の変化を示した。

したがって、ＰＲＯ４３８１ポリペプチドをコードする遺伝子のノックアウトは、Ｔ細胞集団の減少を引き起こす。これらの観察結果から、ＰＲＯ４３８１ポリペプチドまたはＰＲＯ４３８１をコードする遺伝子は、Ｔ細胞増殖の負の制御因子として作用するようだ。
したがって、ＰＲＯ４３８１ポリペプチドは、Ｔ細胞増殖の増強に有益であり得る。

結果：
血液学：（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均血小板数の増加を示した。

したがって、ＤＮＡ９２２２５−２６０３遺伝子が欠損した変異マウスは、凝血障害に関連する表現型を生じた。これに関して、ＰＲＯ４３８１ポリペプチドのインヒビターまたはアンタゴニストは、血友病などの異常な血液凝固に関連する障害の治療で有用であろう。

手順：
行動スクリーニングを、４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性マウスおよび８匹のホモ接合性変異マウスのコホートにおいて実施した。生存能低下のために、より早期の試験が必要とならない限り、すべての行動試験は、１２〜１６週齢の間に実施した。これらの試験には、不安、活動レベル、および探索を測定するためのオープンフィールドが含まれていた。

結果：
ＰＰＩ：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、ｐｐ８、ｐｐ１２およびｐｐ２０中、阻害の減少を示し、変異型における感覚運動ゲーティング／注意の障害を示した。

４８．３３．ＤＮＡ９２２６４−２６１６（ＵＮＱ１９３２）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ４４０７ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ９２２６４−２６１６と命名）（ＵＮＱ１９３２）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿１７５４０８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１７５４０８ＮＩＤ：
ｇｉ３１３４１８２２ｒｅｆＮＭ＿１７５４０８．２ムス・ムスクルスＲＩＫＥＮ
ｃＤＮＡＡ９３００２７Ｈ０６遺伝子（Ａ９３００２７Ｈ０６Ｒｉｋ）；参照タンパク質：
Ｑ８Ｃ６Ｔ０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８Ｃ６Ｔ０ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
仮説タンパク質；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿１５３３４５ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１５３３４５ＮＩＤ：
ｇｉ２３５０３２７０ｒｅｆＮＭ＿１５３３４５．１ホモ・サピエンス仮想タンパク質ＦＬＪ９０５８６（ＦＬＪ９０５８６）；ヒトタンパク質配列は、次の参照に対応する：
Ｑ８ＩＶ３１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＩＶ３１ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
仮説タンパク質。

目的のマウス遺伝子は、ヒト仮説タンパク質ＦＬＪ９０５８６のオルソログであるＲＩＫＥＮｃＤＮＡＡ９３００２７Ｈ０６遺伝子である。

仮想タンパク質ＦＬＪ９０５８６は、弱い推定シグナルペプチドおよび重複膜貫通セグメントを含む。該仮想タンパク質は、原形質膜から分泌され得るか、または原形質膜上に位置し得る（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））。

遺伝子ターゲティングまたは遺伝子トラップによる変異を、系統１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ由来の胚性幹（ＥＳ）細胞において生じさせる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスと交雑させ、Ｆ１ヘテロ接合性動物を作製する。これらの子孫を、交雑受精することにより、Ｆ２の野生型、ヘテロ接合性およびホモ接合性の変異体子孫を作製する。まれに、例えば、Ｆ１マウスがキメラからほとんど得られない場合に、Ｆ１ヘテロ接合性マ
ウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスと交雑することにより、交雑受精用のさらなるヘテロ接合性動物を得て、Ｆ２マウスを作製する。この世代のマウスについてレベルＩ表現型解析を実施する。

カイ二乗値＝４．２１有意性＝０．１２１８４５６７（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２１平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：
コードエキソン１および２を標的化した（ＮＣＢＩアクセッションＢＹ０３２７９３およびＮＭ＿１７５４０８．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル（脊髄、骨格筋、脂肪以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．３３．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ９２２６４−２６１６（ＵＮＱ１９３２）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト仮想タンパク質ＦＬＪ９０５８６のオルソログをコードする遺伝子の変異により、平均血清グルコースレベルの増加を示すヘテロ接合性（＋／−）およびホモ接合性（−／−）マウスの両方がもたらされた。また、変異型マウスにおいて免疫学的異常も観察され、腹腔洗浄液中ではＢ細胞サブセットのパーセンテージが減少した。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

これらの研究において、解析される細胞を、胸腺、末梢血、脾臓、骨髄およびリンパ節から単離した。単核細胞集団内のＣＤ４およびＣＤ８陽性のＴ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞および単球の相対的比率を決定するようにフローサイトメトリーを設定した。Ｂｅｃｔｏｎ−ＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ３−レーザーＦＡＣＳ装置を使用して、免疫状態を評価した。表現型アッセイおよびスクリーニングのために、この装置は、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比に加えて、ＣＤ４＋／ＣＤ８−、ＣＤ８＋／ＣＤ４−、ＮＫ、Ｂ細胞および単球の数を記録する。６つの系統特異的抗体のパネル：ＣＤ４５ＰｅｒＣＰ、抗ＴＣＲｂＡＰＣ、ＣＤ４ＰＥ、ＣＤ８ＦＩＴＣ、ｐａｎ−ＮＫＰＥおよびＣＤ１９ＦＩＴＣを用いて、各マウス由来の溶解末梢血の単一サンプルを染色することによって単核細胞プロファイルを得る。２種類のＦＩＴＣ標識抗体およびＰＥ標識抗体は、相互に排他的な細胞タイプを染色する。ＣｅｌｌＱｕｅｓｔソフトウェアを備えたＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターを使用してサンプルを解析する。

結果：
組織特異的ＦＡＣＳ−プロジェクト：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものと比較した場合、腹腔洗浄液中においてＢ２２０ＭｅｄＣＤ２３−細胞のパーセンテージの減少を示した。

これらの結果は、該ノックアウトマウスがＢ細胞サブセットの減少を示したことを示す
。
したがって、変異型ホモ接合性マウスは、Ｂ細胞前駆細胞レベルの減少と関連する免疫学的異常を示した。

これらの結果は、ノックアウト（−／−）マウスがその野生型（＋／＋）同腹仔と比較した場合、免疫学的異常を示すことを示す。ＰＲＯ４４０７ポリペプチドのアンタゴニスト（インヒビター）は、この表現型を模倣することが予測され得る。
ＰＲＯ４４０７ポリペプチドまたはそのアゴニストは、Ｂ細胞発達の陽性調節因子としての機能を果たすようであり、Ｂ細胞の発達または成熟に有用であり得、これは、次いで、速やかな免疫応答に関与し得る。

結果：
血液化学：
雌ヘテロ接合性（＋／−）およびホモ接合性（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均血清グルコースレベルの増加（同腹仔野生型マウスより約２ＳＤ上）を示した。したがって、ヘテロ接合性およびホモ接合性（−／−）マウスの両方は、異常なグルコース代謝に関連する負の表現型を示した。
しかしながら、雌血清インスリンおよび尿中グルコースレベルは正常であった。

４８．３４．ＤＮＡ９３０１１−２６３７（ＵＮＱ１９４２）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ４４２５ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ９３０１１−２６３７と命名）（ＵＮＱ１９４２）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＸＭ＿１３２０７０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＸＭ＿１３２０７０ＮＩＤ：
ｇｉ５１７１０９５７ｒｅｆＸＭ＿１３２０７０．３ＰＲＥＤＩＣＴＥＤ：
ムス・ムスクルスＲＩＫＥＮｃＤＮＡ４９３０４４３Ｆ０５遺伝子（４９３０４４３Ｆ０５Ｒｉｋ）；参照タンパク質：
サイトカイン様タンパク質Ｃ１７前駆体（ＵＮＱ１９４２／ＰＲＯ４４２５）［ムス・ムスクルス］と類似するＸＰ＿１３２０７０；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０１８６５９ホモ・サピエンスサイトカイン様タンパク質Ｃ１７（Ｃ１７）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９ＮＲＲ１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＮＲＲ１ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
サイトカイン様タンパク質Ｃ１７前駆体（ＵＮＱ１９４２／ＰＲＯ４４２５）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＣ１７（サイトカイン様タンパク質Ｃ１７）のオルソログであるＲＩＫＥＮｃＤＮＡ４９３０４４３Ｆ０５遺伝子である。別名としては、Ｇｍ１４７が挙げられる。

Ｃ１７は、ＣＤ３４単核幹細胞によって分泌されるタンパク質であり、おそらくシグナル伝達リガンドとしての機能を果たしている。
該タンパク質は、シグナルペプチドを含み、一般的に、他のサイトカインと構造的類似性
を共有している。
Ｃ１７の発現は、幹細胞を維持するサイトカインによって上方調節され、幹細胞の分化を刺激する造血系コロニー刺激因子によって下方調節される（Ｌｉｕｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ６５（３）：２８３−９２（２０００））。
Ｃ１７は、造血または免疫においてある役割を果たしている可能性がある。

カイ二乗値＝３．４３有意性＝０．１７９９６３７１（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２３平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準
説明：コードエクソン２から４をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＢＣ０６３１０３．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および骨格筋以外の１３のすべての成体組織サンプルにおいて標的遺伝子の発現を検出した
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．３４．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ９３０１１−２６３７（ＵＮＱ１９４２）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトサイトカイン様タンパク質Ｃ１７（Ｃ１７）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）マウスで、末梢血中のＣＤ４細胞のパーセンテージの増加、胸腺おけるＴＣＲβ＋の増加、リンパ節におけるＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ＋の増加およびナチュラルキラー細胞の増加、ならびに腹腔洗浄液中のＣＤ１１７＋細胞のパーセンテージの増加がもたらされた。
ＩｇＧ２ａの減少およびＩｇＡ平均血清レベルの増加もまた（−／−）マウスにおいて示された。
（−／−）マウスはまた、網膜の動脈対静脈比の増加を示した。
変異型（−／−）マウスはまた、小柱数および連結密度の増加を示した。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）発現
Ｃ１７は、ＩＳＨ試験によって示されるように、動脈内皮において発現される。
Ｃｈｒ４付近は、骨発達に関与する遺伝子を多く含む。
［プロトコルの実施例５７参照］
（ｃ）免疫学表現型解析
免疫関連疾患および炎症性疾患は、正常な生理機能において、傷害または損傷に応答し、傷害または損傷からの修復を開始し、そして外来生物体に対する先天的および後天的な防御を開始することにとって重大な意味を有する、かなり複雑で、複雑に相互連結していることが多い生物学的経路の症状または結果である。これらの正常な生理学的経路が、応答の強度に直接関連してか、異常な制御もしくは過度の刺激の結果としてか、自己に対する応答としてか、またはこれらの組み合わせのいずれかとして、さらなる傷害または損傷を引き起こすときに、疾患または病態が生じる。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は、哺乳動物の免疫応答の重要な成分である。Ｔ細胞は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己の分子に関連する抗原を認識する。この抗原は、抗原提示細胞、ウイルス細胞、癌細胞、グラフトなどの表面に、ＭＨＣ分子とともに提示され得る。このＴ細胞系は、宿主哺乳動物に対する健康上の脅威を有するこれらの改変細胞を排除する。Ｔ細胞としては、ヘルパーＴ細胞および細胞傷害性Ｔ細胞が挙げられる。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原−ＭＨＣ複合体を認識した後、広範囲に増殖する。ヘルパーＴ細胞はまた、種々のサイトカイン、すなわち、リンフォカインを分泌する。リンフォカインは、Ｂ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞および免疫応答に関与する他の種々の細胞の活性化において中心的な役割を果たす。

これらの研究において、解析される細胞を、胸腺、末梢血、脾臓、骨髄およびリンパ節から単離した。単核細胞集団内のＣＤ４およびＣＤ８陽性のＴ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞および単球の相対的比率を決定するようにフローサイトメトリーを設定した。Ｂｅｃｔｏｎ
−ＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ３−レーザーＦＡＣＳ装置を使用して、免疫状態を評価した。表現型アッセイおよびスクリーニングのために、この装置は、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比に加えて、ＣＤ４＋／ＣＤ８−、ＣＤ８＋／ＣＤ４−、ＮＫ、Ｂ細胞および単球の数を記録する。６つの系統特異的抗体のパネル：ＣＤ４５ＰｅｒＣＰ、抗ＴＣＲｂＡＰＣ、ＣＤ４ＰＥ、ＣＤ８ＦＩＴＣ、ｐａｎ−ＮＫＰＥおよびＣＤ１９ＦＩＴＣを用いて、各マウス由来の溶解末梢血の単一サンプルを染色することによって単核細胞プロファイルを得た。２種類のＦＩＴＣ標識抗体およびＰＥ標識抗体は、相互に排他的な細胞タイプを染色する。ＣｅｌｌＱｕｅｓｔソフトウェアを備えたＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターを使用してサンプルを解析した。

結果：
ＦＡＣＳ３：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、ＣＤ４細胞の平均パーセンテージの増加を特徴とする末梢血中の白血球サブセットの分布の変化を示した。

組織特異的ＦＡＣＳ−プロジェクト：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものと比較した場合、胸腺におけるＴｃＲβ＋細胞のパーセンテージの増加、リンパ節におけるＣＤ１１ｂ＋ＣＤ１１ｃ＋およびＮＫ細胞のパーセンテージの増加、ならびに腹腔洗浄液中のＣＤ１１７＋細胞のパーセンテージの増加を示した。

したがって、ＰＲＯ４４２５ポリペプチドをコードする遺伝子をノックアウトすることにより、Ｔ細胞集団の増加が引き起こされる。これらの観察結果から、ＰＲＯ４４２５ポリペプチドまたはＰＲＯ４４２５をコードする遺伝子が、Ｔ細胞増殖の負の制御因子として作用するようである。したがって、ＰＲＯ４４２５ポリペプチドまたはその作用剤は、自己免疫疾患（例えば、関節リウマチ患者）などで起こるＴ細胞増殖が顕著であるような場合には、Ｔ細胞増殖の負の調節因子として有用であろう。さらに、ＰＲＯ４４２５ポリペプチドは、皮膚移植片拒絶の防止で特に有用であろう。

さらに、ＦＡＣＳ結果から、ホモ接合性変異マウスにおいてナチュラルキラー細胞の平均パーセンテージが増加したことが示される。ナチュラルキラー細胞は、ウイルスの免疫および腫瘍に対する防御に関係するので、これらの細胞は、ウイルス感染に対する防御の第一線である。ナチュラルキラー細胞すなわちＮＫ細胞は、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害におけるエフェクターとして作用し、それらは、事前の免疫または活性化の必要なしに、特定のリンパ系腫瘍細胞株をインビトロでにおいて殺滅する能力によって同定されてきた。
したがって、ＰＲＯ４４２５ポリペプチドは、ＮＫ生成の負の調節因子としての機能を果たす。

結果：
血清Ｉｍｍ．２：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のもの、当該実行プロジェクト内の（＋／＋）マウスおよび歴史的中央値と比較した場合、平均血清ＩｇＧ２ａレベルの低下および平均血清ＩｇＡレベルのわずかな増加
を示した。

血清免疫グロブリンアイソタイピングアッセイにより、成体ホモ接合体が、血清ＩｇＧ２ａレベルの低下を示したことが明らかになった。したがって、ホモ接合体は、（＋／＋）同腹仔と比較して異常に低い血清中免疫グロブリンを示した。したがって、ＰＲＯ４４２５ポリペプチドをコードする遺伝子は、免疫グロブリン（またはガンマグロブリン）を生成するのに必須である。別で、ＩｇＧ２ａ免疫グロブリンは、中和作用を有し、それほどではないにせよ、補体系の活性化に重要である。

（ｄ）心血管表現型解析
心血管生物学領域では、心血管障害、内皮障害、または血管障害の治療のための潜在的標的を同定するために表現型試験を行った。１つのこのような表現型試験には、種々の眼の異常を合図するための網膜動静脈比（Ａ／Ｖ比）を決定するための眼底撮影法および血管造影法が含まれた。異常なＡ／Ｖ比は、高血圧の血管疾患（および高血圧を引き起こす任意の疾患（例えば、アテローム性動脈硬化症））、糖尿病、または眼科疾患に対応する他の眼疾患に関連し得るこのような全身疾患または障害を示す。このような眼の異常には、以下が含まれ得るがこれらに限定されない：網膜の異常は、以下である：網膜の形成異常、種々の網膜症、再狭窄、網膜動脈閉鎖又は閉塞；網膜血管系の二次的萎縮を生じる網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルヴェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、シニアローケン症候群、バルデー−ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレーム症候群（Ａｌｓｔｏｍ’ｓｓｙｎｄｒｏｍｅ）、コケーン症候群、先天性脊骨端形成異常（ｄｙｓｐｌａｉｓａｓｐｏｎｄｙｌｏｅｐｉｐｈｙｓａｒｉａｃｏｎｇｅｎｔｉａ）、フリン−エアード症候群、フリートライヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルク病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルヒ症候群、アラジール症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール・マリー症候群、スティックラー症候群、カロチン血症、シスチン蓄積症、ウォルフラム症候群、バッセン−コルンツヴァイク症候群、無βリポ蛋白血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖体沈着症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシス。

手順：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体、および８匹のホモ接合体のコホートを、このアッセイで試験した。Ｈａｗｅｓおよび共同執筆者（Ｈａｗｅｓｅｔａｌ．，１９９９ＭｏｌｅｃｕｌａｒＶｉｓｉｏｎ１９９９；５：２２）にしたがって修正したＫｏｗａＧｅｎｅｓｉｓ小動物用眼底カメラを使用して、意識のある動物に対して眼底撮影法を行った。フルオレセインの腹腔内注射によって、各試験についての直接照明眼底画像および蛍光血管造影図を取得した。直接的な眼科的変化に加えて、この試験は、糖尿病およびアテローム性動脈硬化症などの全身疾患または他の網膜異常に関連した網膜の変化を検出することができる。通常の光線下の眼底写真を得た。血管造影により、眼の動脈および静脈を試験することが可能であった。さらに、眼の動脈−静脈（Ａ／Ｖ）比を決定した。

上記プロトコルを使用して、作製したＦ２野生型、ヘテロ接合体、およびホモ接合体変異子孫に対して眼科学分析を行った。詳細には、ＫｏｗａＣＯＭＩＴ＋ソフトウェアを使用した眼底画像に従ってＡ／Ｖ比を測定し、計算した。この試験は、瞳孔散大によってカラー写真を撮影する。この画像は、多くの疾患の検出および分類に役立つ。動脈−静脈比（Ａ／Ｖ）は、静脈の直径に対する動脈の直径の比である（血管の分岐前に測定する）
。多くの疾患（すなわち、糖尿病、心血管障害、乳頭浮腫、視神経萎縮、他の眼の異常（網膜変性（色素性網膜炎として公知）など）、網膜の形成異常、視覚問題、または失明）がこの比に影響を及ぼす。したがって、野生型（＋／＋）同腹仔と比較してホモ接合体（−／−）およびヘテロ接合体（＋／−）変異子孫の動脈−静脈比が増加する表現型所見は、このような病的状態を示すであろう。

結果：
眼底：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、網膜の平均動脈対静脈比の増加を示した。

この試験では、（−／−）は、その（＋／＋）同腹仔と比較した場合、平均動脈対静脈（Ａ／Ｖ）比の増加を示し、網膜の変性が示唆された。
まとめると、ＰＲＯ４４２５ポリペプチドをコードするＤＮＡ９３０１１−２６３７と同定された遺伝子をノックアウトすることによって、ホモ接合性変異体の子孫は、網膜変性に関連する表現型を示す。そのような検出された網膜の変化は、高血圧症（および高血圧症、例えば、アテローム性動脈硬化症を引き起こす任意の疾患）、網膜変性症などの眼科学的障害に対応する他の眼球の疾患の血管系の疾患に関連し得る心血管全身疾患または障害に最もよく関連する。したがって、ＰＲＯ４４２５コード遺伝子のアンタゴニスト（インヒビター）は、類似の病理学的な網膜の変化に導き得る一方で、アゴニストは、高血圧症、アテローム性動脈硬化症または網膜変性症およびこの状態（上で同定されたように）に関連する疾患を含む他の眼科学的障害の処置における治療薬として有用であり得る。

（ｅ）骨代謝：放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

骨マイクロＣＴ解析：
手順：マイクロＣＴを使用して、非常に感度の高いＢＭＤの測定を行った。１つの椎骨および１つの大腿骨を、４匹の野生型マウスおよび８匹のホモ接合性マウスのコホートから取り出した。腰部の５つの椎骨骨梁骨体積、骨梁厚、結合性密度ならびに大腿骨中軸の
骨の総面積および皮質厚の測定を行った。μＣＴ４０スキャンにより、骨量および構造についての詳細な情報が得られた。複数の骨を、サンプルホルダーに置き、自動的にスキャンした。装置ソフトウェアを使用して、解析用の目的の領域を選択した。骨梁骨パラメータを、１６マイクロメートルの解像度で第５腰部椎骨（ＬＶ５）において解析し、皮質骨パラメータを、２０マイクロメートルの解像度で大腿骨中軸において解析した。

結果：
マイクロＣＴ：
雄（−／−）マウスは、小柱数および連結密度の増加を示した。

まとめると、（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較した場合、骨梁の骨塩密度の増加を示した。これらの結果から、ノックアウト変異表現型が、大理石骨病のような骨の異常に関連し得ることが示唆される。大理石骨病は、骨の異常な肥厚および硬化ならびに骨の異常な脆弱性を特徴とする状態である。そのため、ＰＲＯ４４２５ポリペプチドまたはそのアゴニストは、大理石骨病またはその他の骨関連障害の処置に有益であり得る。一方、ＰＲＯ４４２５ポリペプチドのインヒビターまたはアンタゴニスト）は、骨の治癒に有用であり得る。

４８．３５．ＤＮＡ５９７７０−２６５２（ＵＮＱ２４２６）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ４９８５ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ５９７７０−２６５２と命名）（ＵＮＱ２４２６）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＸＭ＿２０３９７８ＰＲＥＤＩＣＴＥＤ：
ムス・ムスクルスＲＩＫＥＮｃＤＮＡ５３３０４１７Ｃ２２遺伝子（５３３０４１７Ｃ２２Ｒｉｋ）；参照タンパク質：
ＸＰ＿２０３９７８ＲＩＫＥＮｃＤＮＡ５３３０４１７Ｃ２２遺伝子［ムス・ムスクルス］；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０２０７７５ホモ・サピエンスｍａｂａ１（ＫＩＡＡ１３２４）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
ＮＰ＿０６５８２６ｍａｂａ１［ホモ・サピエンス］。

目的のマウス遺伝子は、ヒトｍａｂａ１のオルソログであるＲＩＫＥＮｃＤＮＡ５３３０４１７Ｃ２２遺伝子である。
別名としては、ＫＩＡＡ１３２４およびＲＰ１１−３５２Ｐ４．１が挙げられる。

Ｍａｂａ１は、シグナルペプチド、ケラチン／高硫黄Ｂ２タンパク質（Ｂ２）ドメインを含む大きな細胞外領域、膜貫通セグメント、および短い細胞質Ｃ末端からなる推定内在性原形質膜タンパク質である。Ｂ２ドメインを有するタンパク質としては、タンパク質のケラチン／高硫黄Ｂ２ファミリーが挙げられ、これは、分化中の有毛細胞によって合成される有毛繊維の成分としての機能を果たす（Ｍｉｔｓｕｉｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ２０８（２）：１２３−９（１９９８）；Ｒｏｇｅｒｓｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７６（２２）：１９４４０−５１（２００１）；Ｓｈｉｂｕｙａｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ８３（４）：６７９−９３（２００４））。

遺伝子ターゲティングまたは遺伝子トラップによる変異を、系統１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ由来の胚性幹（ＥＳ）細胞において生じさせる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスと交雑させ、Ｆ１ヘテロ接合性動物を作製する。これらの子孫を、交雑受精することにより、Ｆ２の野生型、ヘテロ接合性およびホモ接合性の変異体子孫を作製する。ま
れに、例えば、Ｆ１マウスがキメラからほとんど得られない場合に、Ｆ１ヘテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスと交雑することにより、交雑受精用のさらなるヘテロ接合性動物を得て、Ｆ２マウスを作製する。この世代のマウスについてレベルＩ表現型解析を実施する。

カイ二乗値＝０．５２有意性＝０．７７１０５１６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２６平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＸＭ＿２０３９７８．４）。
１．野生型発現パネル：
標的遺伝子の発現は、骨格筋、骨、心臓、脂肪、血液、心臓の帯状組織、大動脈樹状部、ＭＧ５週バージン（ｖｉｒｇｉｎ）、ＭＧ成熟バージン、出産（ｐａｒｔｕｍ）（授乳）後第３日のＭＧ、離乳後第３日（退縮早期）のＭＧ、および離乳後第７日（退縮後期）のＭＧを除くＲＴ−ＰＣＲによって試験した２６の成体組織試料すべてにおいて検出された。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．３５．１．ＤＮＡ５９７７０−２６５２（ＵＮＱ２４２６）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトｍａｂａ１のオルソログをコードする遺伝子の変異により、雄（−／−）マウスにおいて精子形成の欠陥がもたらされた。顕微解析により、雄ホモ接合性変異型において臨床的に認められた不妊症と一致するホモ接合性変異型マウスの精巣における精子形成の欠陥および精液過少症ならび副睾丸（ｅｐｉｄｉｄｙｍｕｓ）における精子の欠陥が明らかになった。（−／−）マウスはまた、体脂肪の減少を示した。
標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）病理学
顕微鏡的：
雄（−／−）マウスは、精巣における中等度のびまん性の精子形成の欠陥および精液過少症ならびに副睾丸における精子の欠陥を示した。
雄（−／−）マウスは、精子形成における後期の欠陥を示し、円形（ｒｏｕｎｄ）精子細胞段階を超える発達は行なわれなかった。
精母細胞は、大きな円形の頭部および大きな細胞質小滴を示した。
遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は、免疫組織化学によって組織パネルにおいて検出されなかった。

（ｃ）骨診断
生殖能力：
雄（−／−）マウスでは、雌（＋／＋）マウスとの交配６０日後および４回の交配後、子供は生まれなかった。該マウスは健常であるようであったが、腹圧による陰茎勃起は誘導され得なかった。

骨代謝：放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

結果：
Ｄｅｘａ：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均総脂肪パーセントおよび総脂肪質量の減少を示した。

ＰＲＯ４９８５ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失した変異型（−／−）マウスは、組織消耗性疾患（総体脂肪（％）および脂肪質量（ｇ）の減少）または異常な脂質代謝と一致する表現型を示す。したがって、ＰＲＯ４９８５ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニストまたはインヒビターは、これらの異常な代謝関連作用および発達関連作用を模倣し得る。
他方において、ＰＲＯ４９８５ポリペプチドまたはそのアゴニストは、かかる代謝障害の予防および／または処置ならびに正常な雄の生殖能力の発達に有用であり得る。

４８．３６．ＤＮＡ８０１３５−２６５５（ＵＮＱ２４２９）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ４９８９ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ８０１３５−２６５５と命名）（ＵＮＱ２４２９）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿１５３５４２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１５３５４２ＮＩＤ：
ｇｉ２３９５６３０７ｒｅｆＮＭ＿１５３５４２．１ムス・ムスクルス仮想タンパク質ＭＧＣ２５７１９（ＭＧＣ２５７１９）；参照タンパク質：
Ｑ８ＣＩ７０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＣＩ７０ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ロイシン高含有反復配列含有２０；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０１８２０５ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０１８２０５ＮＩＤ：
ｇｉ８９２２６４３ｒｅｆＮＭ＿０１８２０５．１ホモ・サピエンス仮想タンパク
質ＦＬＪ１０７５１（ＦＬＪ１０７５１）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ８ＴＣＡ０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＴＣＡ０ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
仮想タンパク質ＦＬＪ３７４１５。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＬＲＲＣ２０のオルソログであるＬｒｒｃ２０（２０を含むロイシンリッチ反復）である。
別名としては、ＭＧＣ２５７１９、ｃＤＮＡ配列ＢＣ０３６３０４、ＦＬＪ１０７５１、およびＦＬＪ１０８４４が挙げられる。

ＬＲＲＣ２０は、ロイシン高含有反復配列を含む１８４アミノ酸の推定細胞外タンパク質である（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））。

カイ二乗値＝１．８６有意性＝０．３９４５５３７２（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２６平均同腹仔数＝１０
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿１５３５４２．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル（骨および脂肪以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．３６．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ８０１３５−２６５５（ＵＮＱ２４２９）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトロイシン高含有反復配列含有２０（ＬＲＲＣ２０）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、オープンフィールド試験の際に不安の減少を示す（−／−）マウスがもたらされた。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）表現型解析：ＣＮＳ／神経学
神経学の分野において、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含む神経性障害および精神医学的障害
の処置のためのインビボにおいて有効な標的の同定についての解析に本明細書中では注目した。神経障害は、「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。その「不安障害」としては、以下：軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、別段特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴うパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、Ｉ型またはＩＩ型の双極性障害、別段特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物質誘導性気分障害が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害にあてはまることがあり、その人格障害としては、以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない。

手順：
行動スクリーニングを、４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性変異マウスおよび８匹のホモ接合性変異マウスのコホートにおいて実施した。
生存能低下のために、より早期の試験が必要とならない限り、すべての行動試験は、１２〜１６週齢の間に実施した。これらの試験は、不安、活動性レベルおよび探索を計測するためのオープンフィールドを含んだ。

オープンフィールド試験：
公知の薬物のいくつかの標的は、オープンフィールド試験において表現型を示した。これらとしては、セロトニン（ｓｅｒａｔｏｎｉｎ）トランスポーター、ドーパミントランスポーター（Ｇｉｒｏｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．１９９６Ｆｅｂ１５；３７９（６５６６）：６０６−１２）およびＧＡＢＡレセプター（Ｈｏｍａｎｉｃｓｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ．１９９７Ａｐｒ１５；９４（８）：４１４３−８）のノックアウトを含む。自動化されたオープンフィールドアッセイをカスタマイズして、感情状態に関連する変化および学習に関する探索パターンを扱った。まず、フィールド（４０×４０ｃｍ）をマウスに対して比較的大きくなるように選択することによって探索に関連する自発運動の変化を取り上げるように設計した。さらに、４つの穴を床に設け、探索に特に関連する活動である鼻の突っ込みを可能にした。この試験に関連した感情状態を高めるためにいくつかの因子を設けた。オープンフィールド試験は、マウスが試験される最初の実験的手順であり、なされる測定は被験体のチャンバーとの最初の経験であった。さらに、オープンフィールドは明るく照らした。これらの因子のすべてによって、新しい開放性空間に関連する天然の不安が高められる。次いで、探索活動のパターンおよび程度ならびに特に中心からの全移動距離比は、不安または抑鬱症に対する罹りやすさに関する変化を識別することができる。３つの異なったレベルでの赤外線ビームを用いた大きな活動領域（４０ｃｍ×４０ｃｍ、ＡｃｃｕＳｃａｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓのＶｅｒｓａＭａｘ動物活動性モニターシステム）を用いて、直立、穴への突っ込みおよび自発運動を記録した。動物を中心に置き、その活動を２０分間測定した。この試験のデータを４分間隔で５回分析した。全移動距離（ｃｍ）、垂直移動回数（直立）、穴突っ込み回数および中心からの全移動距離比を記録した。

結果：
（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、オー
プンフィールド試験中の中心にいる時間の合計の中央値の増加を示したことから、変異体における不安様応答の低下が示唆される。
（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、中心にいる時間の合計の中央値の増加を示したことから、変異体における不安様応答の低下が示唆される。したがって、ノックアウトマウスは、抑鬱症、全般性不安障害、認知障害、痛覚過敏ならびに感覚障害および／または双極性障害と一致する表現型を示した。したがって、ＰＲＯ４９８９ポリペプチドおよびそのアゴニストは、抑鬱性障害に関連する症状の処置または寛解に有用であり得る。

４８．３７．ＤＮＡ９２９２９−２５３４−１（ＵＮＱ２４５６）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ５７３７ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ９２９２９−２５３４−１と命名）（ＵＮＱ２４５６）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿１５３５１１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１５３５１１ＮＩＤ：
ｇｉ２３９４３８２９ｒｅｆＮＭ＿１５３５１１．１ムス・ムスクルスインターロイキン１ファミリー、構成員９（Ｉｌ１ｆ９）；参照タンパク質：
Ｑ８Ｒ４６０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８Ｒ４６０ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。インターロイキン１ファミリー構成員９（ＩＬ−１Ｆ９）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０１９６１８ホモ・サピエンスインターロイキン１ファミリー、構成員９（ＩＬ１Ｆ９）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９ＮＺＨ８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＮＺＨ８ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
インターロイキン１ファミリー構成員９（ＩＬ−１Ｆ９）（インターロイキン−１ホモログ１）（ＩＬ−１Ｈ１）（インターロイキン−１ε）（ＩＬ−１ε）（ＩＬ−１関連タンパク質２）（ＩＬ−１ＲＰ２）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＩＬ１Ｆ９のオルソログであるＩｌ１ｆ９（インターロイキン１ファミリー、構成員９）である。別名としては、ＩＬ−１Ｆ９、ＩＬ１Ｅ、ＩＬ１Ｈ１、ＩＬ−１Ｈ１、ＩＬ１ＲＰ２、ＩＬ−１ＲＰ２、ＩＬ−１−ε、ＩＬ−１（ＥＰＳＩＬＯＮ）、インターロイキン−１ε、ＩＬ−１関連タンパク質２、インターロイキン−１ホモログ１、およびインターロイキン１関連タンパク質２が挙げられる。

ＩＬ１Ｆ９は、核因子κＢを活性化する受容体ＩＬ１ＲＬ２のリガンドとしての機能を果たす分泌タンパク質である。
ＩＬ１Ｆ９は、さまざまな組織、例えば、皮膚、肺、胃および食道などに由来する上皮において発現され、腫瘍壊死因子−αによって、およびケラチノサイトにおいてインターフェロン−γによって誘導される。

ＩＬ１Ｆ９は、おそらく、免疫機能および炎症においてある役割を果たしている（Ｄｅｂｅｔｓｅｔａｌ．，ＪＩｍｍｕｎｏｌ１６７（３）：１４４０−６（２００１）；Ｋｕｍａｒｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７５（１４）：１０３０８−１４（２０００）；Ｔｏｗｎｅｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７９（１４）：１３６７７−８８（２００４））。

カイ二乗値＝１．４１有意性＝０．４９４１０８６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２８平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１から３をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッション
）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプルに（骨格筋および脂肪以外）おいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．３７．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ９２９２９−２５３４−１（ＵＮＱ２４５６）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトインターロイキン１ファミリー、構成員９（ＩＬ１Ｆ９）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、除脂肪体重の減少を示す変異型（−／−）マウスがもたらされた。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）発現
ＵＮＱ２４５６は、扁平上皮癌または異形成（頭部および首部の）；扁平上皮癌（肺の）；ならびにアデノイド扁桃腺の過形成において上方調節される。ＵＮＱ２４５６はまた乾癬においても上方調節される。
［プロトコルの実施例５４および５５参照］
（ｃ）骨代謝および全身診断学／放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

結果：
Ｄｅｘａ：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均除脂肪体重の減少を示した。

ＰＲＯ５７３７ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失した変異型（−／−）マウスは、組織消耗性疾患（除脂肪体重の減少）と一致する表現型を示す。
したがって、ＰＲＯ５７３７ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニストまたはインヒビターは、これらの代謝関連作用を模倣し得る。他方で、ＰＲＯ５７３７ポリペプチドまたはそのアゴニストは、悪液質または他の組織るいそう疾患などのそのような代謝障害の予防および／または処置に有用であり得る。

４８．３８．ＤＮＡ１０８９１２−２６８０（ＵＮＱ２５００）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ５８００ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ１０８９１２−２６８０と命名）（ＵＮＱ２５００）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２３３０４ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０２３３０４ＮＩＤ：
ｇｉ１２９６３６２６ｒｅｆＮＭ＿０２３３０４．１ムス・ムスクルス線維芽細胞増殖因子２２（Ｆｇｆ２２）；参照タンパク質：
Ｑ９ＥＳＳ２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＥＳＳ２ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＦＩＢＲＯＢＬＡＳＴＧＲＯＷＴＨＦＡＣＴＯＲ−２２ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＦＧＦ−２２）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０２０６３７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０２０６３７ＮＩＤ：
ｇｉ１０１９０６７１ｒｅｆＮＭ＿０２０６３７．１ホモ・サピエンス線維芽細胞増殖因子２２（ＦＧＦ２２）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９ＨＣＴ０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＨＣＴ０ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＦＩＢＲＯＢＬＡＳＴＧＲＯＷＴＨＦＡＣＴＯＲ−２２ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＦＧＦ−２２）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＦＧＦ２２のオルソログであるＦｇｆ２２（線維芽細胞増
殖因子２２）である。
別名としては、ＦＧＦ−２２および２２１０４１４Ｅ０６Ｒｉｋが挙げられる。

ＦＧＦ２２は、シグナル伝達リガンドとしての機能を果たす分泌タンパク質である。該タンパク質は、シグナルペプチドおよび線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）ドメインからなり、ＦＧＦ受容体２と結合し得る（Ｕｍｅｍｏｒｉｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ１１８（２）：２５７−７０（２００４）；Ｂｏｉｌｌｙｅｔａｌ．，ＣｙｔｏｋｉｎｅＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒＲｅｖ１１（４）：２９５−３０２（２０００）；Ｅｒｉｋｓｓｏｎｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ８８（８）：３４４１−５（１９９１）；Ｍｕｒｚｉｎｅｔａｌ．，ＪＭｏｌＢｉｏｌ
２２３（２）：５３１−４３（１９９２））。
ＦＧＦ２２は、皮膚上皮および毛嚢の内毛根鞘において発現され、ここでは、おそらく、毛髪の発達および皮膚の発達ならびに修復においてある役割を果たしている（Ｎａｋａｔａｋｅｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ１５１７（３）：４６０−３（２００１）；Ｂｅｙｅｒｅｔａｌ．，ＥｘｐＣｅｌｌＲｅｓ２８７（２）：２２８−３６（２００３））；Ｗｉｌｋｉｅｅｔａｌ．，ＣｕｒｒＢｉｏｌ５（５）：５００−７（１９９５））。
ＦＧＦ２２はまた舌および脳においても発現され、ここでは、前シナプス（ｐｒｅｓｙｎａｐｔｉｃ）組織化においてある役割を果たしている（Ｕｍｅｍｏｒｉｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ１１８（２）：２５７−７０（２００４））。

カイ二乗値＝２．３１有意性＝０．３１５０５７５５（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２５平均同腹仔数＝１０
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１から３をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２３３０４．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル（脳、脊髄、眼、および胸腺）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。
４８．３８．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ１０８９１２−２６８０（ＵＮＱ２５００）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト線維芽細胞増殖因子２２（ＦＧＦ２２）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）マウスの末梢血中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞のパーセンテージの
減少がもたらされた。
標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

以下の試験を実施した：
蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）解析
手順：
ＣＤ４、ＣＤ８およびＴ細胞レセプターを含む、末梢血由来の免疫細胞組成物のＦＡＣＳ解析を実施して、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球に対するＣＤ１９、白血球マーカーとしての
ＣＤ４５およびナチュラルキラー細胞に対するｐａｎＮＫを評価した。ＦＡＣＳ解析は、２匹の野生型および６匹のホモ接合性マウスにおいて実施し、胸腺、脾臓、骨髄およびリンパ節由来の細胞を含んだ。

まとめると、ＦＡＣＳの結果は、特に、ＰＲＯ５８００ポリペプチドをコードするＤＮＡ１０８９１２−２６８０遺伝子のノックアウトと関連する負の表現型の指標であるナチュラルキラー細胞の平均パーセンテージの減少に鑑みると、ホモ接合性変異型マウスが免疫系の障害を有することを示す。ナチュラルキラー細胞は、ウイルスの免疫および腫瘍に対する防御に関係するので、これらの細胞は、ウイルス感染に対する防御の第一線である。ナチュラルキラー細胞すなわちＮＫ細胞は、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害におけるエフェクターとして作用し、それらは、事前の免疫または活性化の必要なしに、特定のリンパ系腫瘍細胞株をインビトロでにおいて殺滅する能力によって同定されてきた。しかしながら、宿主防御におけるこれらの公知の機能は、いくつかの細胞内の病原体、特にヘルペスウイルスの感染の初期においてである。したがって、ＰＲＯ５８００ポリペプチドおよびその作用剤は、健康な免疫系に重要であり、且つ特にウイルス感染時の免疫系刺激で有用であろう。

４８．３９．ＤＮＡ１００２７６−２６８４（ＵＮＱ２５０４）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ５９９３ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ１００２７６−２６８４と命名）（ＵＮＱ２５０４）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
該変異型マウス遺伝子は以下のものに対応する。ヌクレオチド参照：ＡＦ３５８２５７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＡＦ３５８２５７ＮＩＤ：１７５２９６８８ムス・ムスクルスムス・ムスクルスＣ２１ｏｒｆ６３タンパク質（Ｃ２１ｏｒｆ６３）；参照タンパク質：Ｐ５８６５９ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｐ５８６５９ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＰＲＯＴＥＩＮＣ２１ＯＲＦ６３ＨＯＭＯＬＯＧＰＲＥＣＵＲＳＯＲ；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０５８１８７ホモ・サピエンス染色体２１オープンリーディングフレーム６３（Ｃ２１ｏｒｆ６３）；ヒトタンパク質配列は、以下に対応する：参照：
Ｐ５８６５８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｐ５８６５８ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＰＲＯＴＥＩＮＣ２１ＯＲＦ６３ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＰＲＯＴＥＩＮＰＲＥＤ３４）（ＳＵＥ２１）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＣ２１ｏｒｆ６３（染色体２１オープンリーディングフレーム６３）のオルソログであるＲＩＫＥＮｃＤＮＡ４９３１４０８Ａ０２（遺伝子である。
別名としては、１７０００９２Ｍ１４Ｒｉｋ、Ｂ１８、ＳＵＥ２１、およびＰＲＥＤ３４が挙げられる。

Ｃ２１ｏｒｆ６３は、細胞接着分子またはシグナル伝達受容体として機能している可能性がある推定原形質膜タンパク質である（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））該タンパク質は、２つの細胞外ガラクトース結合レクチンドメイン（ＰＦＡＭアクセッションＰＦ０２１４０）、膜貫通セグメント、および１００アミノ酸細胞質セグメントを含む。

カイ二乗値＝１．１６有意性＝０．５５９８９８４（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２７平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＡＦ３５８２５７）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプル（骨格筋および骨以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．３９．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ１００２７６−２６８４（ＵＮＱ２５０４）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ＵＮＱ２５０４、ＤＮＡ１００２７６ヒト染色体２１オープンリーディングフレーム６３（Ｃ２１ｏｒｆ６３）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、
（−／−）マウスにおいて、瞳孔拡張薬である塩酸シクロペントレートに対する抵抗性がもたらされた。ホモ接合性変異型マウスは、その野生型同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、眼底検査の際に使用された拡張薬に対する抵抗性を示した。
また、変異型（−／−）マウスは、ホットプレート試験において、除脂肪体重の減少および応答潜時の減少を示した。標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

結果：
Ｄｅｘａ：
（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均除脂肪体重の減少を示した。

ＰＲＯ５９９３ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失した変異型（−／−）マウスは、組織消耗性疾患（除脂肪体重の減少）と一致する表現型を示す。
したがって、ＰＲＯ５９９３ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニストまたはインヒビターは、これらの代謝関連作用を模倣し得る。他方で、ＰＲＯ５９９３ポリペプチドまたはそのアゴニストは、悪液質または他の組織るいそう疾患などのそのような代謝障害の予防および／または処置に有用であり得る。

（ｃ）心血管表現型解析
心血管生物学領域では、心血管障害、内皮障害、または血管障害の治療のための潜在的標的を同定するために表現型試験を行った。１つのこのような表現型試験には、種々の眼の異常を合図するための網膜動静脈比（Ａ／Ｖ比）を決定するための眼底撮影法および血管造影法が含まれた。異常なＡ／Ｖ比は、高血圧の血管疾患（および高血圧を引き起こす任意の疾患（例えば、アテローム性動脈硬化症））、糖尿病、または眼科疾患に対応する他の眼疾患に関連し得るこのような全身疾患または障害を示す。このような眼の異常には、以下が含まれ得るがこれらに限定されない：網膜の異常は、以下である：網膜の形成異
常、種々の網膜症、再狭窄、網膜動脈閉鎖又は閉塞；網膜血管系の二次的萎縮を生じる網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルヴェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、シニアローケン症候群、バルデー−ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレーム症候群（Ａｌｓｔｏｍ’ｓｓｙｎｄｒｏｍｅ）、コケーン症候群、先天性脊骨端形成異常（ｄｙｓｐｌａｉｓａｓｐｏｎｄｙｌｏｅｐｉｐｈｙｓａｒｉａｃｏｎｇｅｎｔｉａ）、フリン−エアード症候群、フリートライヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルク病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルヒ症候群、アラジール症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール・マリー症候群、スティックラー症候群、カロチン血症、シスチン蓄積症、ウォルフラム症候群、バッセン−コルンツヴァイク症候群、無βリポ蛋白血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖体沈着症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシス。

上記プロトコルを使用して、作製したＦ２野生型、ヘテロ接合体、およびホモ接合体変異子孫に対して眼科学分析を行った。詳細には、ＫｏｗａＣＯＭＩＴ＋ソフトウェアを使用した眼底画像に従ってＡ／Ｖ比を測定し、計算した。この試験は、瞳孔散大によってカラー写真を撮影する。この画像は、多くの疾患の検出および分類に役立つ。動脈−静脈比（Ａ／Ｖ）は、静脈の直径に対する動脈の直径の比である（血管の分岐前に測定する）。多くの疾患（すなわち、糖尿病、心血管障害、乳頭浮腫、視神経萎縮、他の眼の異常（網膜変性（色素性網膜炎として公知）など）、網膜の形成異常、視覚問題、または失明）がこの比に影響を及ぼす。したがって、野生型（＋／＋）同腹仔と比較してホモ接合体（−／−）およびヘテロ接合体（＋／−）変異子孫の動脈−静脈比が増加する表現型所見は、このような病的状態を示すであろう。

結果：
眼底：
（−／−）マウスは、瞳孔拡張薬である塩酸シクロペントレートに対する抵抗性を示した。４匹の雄のみを検査した；これらのうち、２つの画像のみが解釈可能である；瞳孔は、これらの動物では正常に拡張しなかった。
２つの画像のみ濁りを示す。
動物のうち１匹は、眼底検査において濁りを有し、また、目に「白斑」を有すると報告された。機能観察バッテリー試験により、やや斜視の目を誘導する顕著な目の変化を有する１匹の野生型（＋／＋）マウスおよび２匹のホモ接合性（−／−）マウスがもたらされた；１匹の（−／−）マウスは、斜視の目に白斑を示した。
（−／−）マウスは、身体の震えおよび探索行動の低減を示した。したがって、検査した変異型（−／−）マウスは、角膜の変化および／または白内障形成に関連するものであり得るある程度の網膜異常を示した。

結果：
ホットプレート：
（−／−）マウスは応答潜時の減少を示し、変異型における急性の痛みに対する感受性の増大が示唆された。
４８．４０．ＤＮＡ９６８６０−２７００（ＵＮＱ２５２４）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ６０１７ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ９６８６０−２７００と命名）（ＵＮＱ２５２４）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：変異マウス遺伝子は、以下に対応する：参照ヌクレオチド：
ＸＭ＿３５６１１８ＰＲＥＤＩＣＴＥＤ：
ムス・ムスクルス遺伝子モデル１１０９、（ＮＣＢＩ）（Ｇｍ１１０９）；参照タンパク質：
ＸＰ＿３５６１１８ＰＲＥＤＩＣＴＥＤ：
Ｇタンパク質共役受容体１１４［ムス・ムスクルス］と類似；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿１５３８３７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１５３８３７ＮＩＤ：
ｇｉ２４４７５８７０ｒｅｆＮＭ＿１５３８３７．１ホモ・サピエンスＧタンパク質共役受容体１１４（ＧＰＲ１１４）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
ＮＰ＿７２２５７９Ｇタンパク質共役受容体１１４［ホモ・サピエンス］ｇｉ｜２２７４９６２１｜ｇｂ｜ＡＡＨ３２４０１．１｜Ｇタンパク質共役受容体１１４［ホモ・サピエンス］。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＧＰＲ１１４のオルソログであるＧｐｒ１１４（Ｇタンパク質共役受容体１１４）である。別名としては、ＰＧＲ２７およびＧｍ１１０９が挙げられる。

ＧＰＲ１１４は、セクレチンファミリーのＧタンパク質共役受容体である（Ｆｒｅｄｒｉｋｓｓｏｎｅｔａｌ．，ＦＥＢＳＬｅｔｔ５３１（３）：４０７−１４（２００２）；Ｂｊａｒｎａｄｏｔｔｉｒｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ８４（１）：２３−３３（２００４））。
このファミリーの構成員は、一般的に、大きなＮ末端セグメント、Ｇタンパク質共役受容体タンパク質分解性部位（ＧＰＳ）ドメイン（ＳＭＡＲＴアクセッションＳＭ００３０３）、およびセクレチンファミリー７回膜貫通受容体ドメイン（ＰｆａｍアクセッションＰＦ００００２）からなる。セクレチンファミリーＧタンパク質共役受容体としては、セクレチン、カルシトニン、および血管活性腸管ペプチド受容体が挙げられ、これらは、アデニル・シクラーゼまたはホスホリパーゼＣを活性化する（ＰｆａｍアクセッションＰＦ００００２）。

カイ二乗値＝１．１６有意性＝０．５５９８９８４（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２４平均同腹仔数＝１０
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン４から７をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＸＭ＿３５６１１８．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル（脳、胚、肝臓、骨格筋、骨、胃、小腸および結腸、および脂肪以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．４０．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ９６８６０−２７００（ＵＮＱ２５２４）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトＧタンパク質共役受容体１１４（ＧＰＲ１１４）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、除脂肪体重の減少および骨中無機質密度の測定値の減少を示す（−／−）マウスがもたらされた。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

結果：
Ｄｅｘａ：雄（−／−）マウスが、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均除脂肪体重の減少を示した。
雄（−／−）マウスはまた、平均骨塩量および密度関連測定値の減少を示した。

マイクロＣＴ：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、大腿骨中軸の断面積の減少を示した。

ＰＲＯ６０１７ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失した変異型（−／−）マウスは、組織消耗性疾患（除脂肪体重の減少）と一致する表現型を示す。
したがって、ＰＲＯ６０１７ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニストまたはインヒビターは、これらの代謝関連作用を模倣し得る。他方で、ＰＲＯ６０１７ポリペプチドまたはそのアゴニストは、悪液質または他の組織るいそう疾患などのそのような代謝障害の予防および／または処置に有用であり得る。

また、ＤＥＸＡによって解析した（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔と比較し
た場合、骨測定値の減少およびボディマス測定値の減少を示し、異常な骨障害が示唆された。
また、除脂肪体重の減少は、成長遅延および組織消耗性障害に関連する代謝障害を示す。骨の負の表現型は、ＰＲＯ６０１７ポリペプチドまたはそのアゴニストが、正常な成長発達に加えて骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。
さらに、ＰＲＯ６０１７ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ６０１７ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む異常な骨代謝に関連する炎症性疾患を含む異常な骨障害または病理学的な骨障害に導き得る。

４８．４１．ＤＮＡ９６８８３−２７４５（ＵＮＱ２７８４）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ７１７４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ９６８８３−２７４５と命名）（ＵＮＱ２７８４）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
該変異型マウス遺伝子は、以下のものに対応する。ヌクレオチド参照：ＮＭ＿１９９２２２ムス・ムスクルスｃＤＮＡ配列ＢＣ０２０１８８（ＢＣ０２０１８８）；参照タンパク質：Ｑ８ＶＣＤ３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＶＣＤ３ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＥＲＧＩＣ−５３様タンパク質前駆体（レクチン、マンノース結合１様）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０２１８１９ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０２１８１９ＮＩＤ：
ｇｉ１１１４１８９０ｒｅｆＮＭ＿０２１８１９．１ホモ・サピエンスレクチン、マンノース結合１様（ＬＭＡＮ１Ｌ）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９ＨＡＴ１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＨＡＴ１ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＥＲＧＩＣ−５３様タンパク質前駆体（レクチン、マンノース結合１様）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＬＭＡＮ１Ｌ（レクチン、マンノース結合１様）のオルソログである「ｃＤＮＡ配列ＢＣ０２０１８８」である。別名としては、ＥＲＧＬ、ＣＰＬＸ３、ＣＰＸＩＩＩ、ＦＬＪ１３９９３、ＥＲＧＩＣ−５３Ｌ、コンプレキシンＩＩＩ、およびＥＲＧＩＣ−５３様タンパク質が挙げられる。

ＬＭＡＮ１Ｌは、シグナルペプチド、マメ科レクチン様ドメイン（ＰｆａｍアクセッションＰＦ０３３８８）、および膜貫通セグメントを含む推定Ｉ型膜タンパク質である。該タンパク質は、おそらく、小胞体（ＥＲ）−ゴルジ中間区画内に位置するカーゴ受容体ＥＲＧＩＣ−５３のカーゴ受容体または調節因子としての機能を果たしている。ＥＲＧＩＣ−５３は、マンノース含有糖タンパク質と結合し、糖タンパク質の分取および小胞体からゴルジ複合体への移動に関与している（Ｙｅｒｕｓｈａｌｍｉｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ
２６５（１−２）：５５−６０（２００１）；Ｈａｕｒｉｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＳｏｃＳｙｍｐ６９：７３−８２（２００２）；Ｓｃｈｒａｇｅｔａｌ．，ＴｒｅｎｄｓＢｉｏｃｈｅｍＳｃｉ２８（１）：４９−５７（２００３））。
ＥＲＧＩＣ−５３と同様、ＬＭＡＮ１Ｌは、おそらくＥＲ−ゴルジ中間区画内に存在している；しかしながら、バイオインフォマティック解析により、ＬＭＡＮ１Ｌは細胞外タンパク質であることが示唆される（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））。
ＬＭＡＮ１Ｌは、前立腺、心房、唾液腺、脾臓および中枢神経系において発現され、おそらく糖タンパク質のフォールディングおよび分泌においてある役割を果たしている（Ｙｅｒｕｓｈａｌｍｉｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ２６５（１−２）：５５−６０（２００１
）；Ｈａｕｒｉｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＳｏｃＳｙｍｐ６９：７３−８２（２００２）；Ｓｃｈｒａｇｅｔａｌ．，ＴｒｅｎｄｓＢｉｏｃｈｅｍＳｃｉ２８（１）：４９−５７（２００３））。

カイ二乗値＝１．７６有意性＝０．４１４７８２９（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２６平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：
コードエキソン２〜４を標的化した（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２１８１９．１［ヒト］）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル中の眼のみにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．４１．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ９６８８３−２７４５（ＵＮＱ２７８４）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトレクチン、マンノース結合１様（ＬＭＡＮ１Ｌ）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（＋／−）および（−／−）マウスの両方において、血清グルコースの増加ならびに平均血清コレステロールレベルの増加がもたらされた。尿検査によって、ウロビリノゲンレベルの増加が示された。
変異型（−／−）マウスは、髄外造血を示した。
変異型（−／−）マウスはまた、数多くの免疫学的異常を示した。
日周期試験によって、（−／−）マウスにおいて移動計数の減少または活動性の低下が示された。変異型（−／−）マウスはまた、骨梁容積、数および連結密度の減少を示した。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）発現
ＧｅｎｅＬｏｇｉｃ発現パターンにより、リンパおよび前立腺において高い組織発現が示された。ＩＳＨによって、特異的シグナルが脾臓において観察された。
シグナル強度は、前立腺癌で観察されたものと同程度に強く、Ｂ細胞脾臓小胞の広い境界域で選択的であった。ＵＮＱ２７８４発現およびノックアウト表現型により、Ｂ細胞機能における役割が支持される。
［プロトコルの実施例５７参照］
（ｃ）免疫学表現型解析
免疫関連疾患および炎症性疾患は、正常な生理機能において、傷害または損傷に応答し、傷害または損傷からの修復を開始し、そして外来生物体に対する先天的および後天的な防御を開始することにとって重大な意味を有する、かなり複雑で、複雑に相互連結していることが多い生物学的経路の症状または結果である。これらの正常な生理学的経路が、応答の強度に直接関連してか、異常な制御もしくは過度の刺激の結果としてか、自己に対する応答としてか、またはこれらの組み合わせのいずれかとして、さらなる傷害または損傷を引き起こすときに、疾患または病態が生じる。

結果：
血液学：（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均
血小板数の増加を示した。

したがって、ＤＮＡ９６８８３−２７４５遺伝子が欠損した変異マウスは、凝血障害に関連する表現型を生じた。これに関して、ＰＲＯ７１７４ポリペプチドのインヒビターまたはアンタゴニストは、血友病などの異常な血液凝固に関連する障害の治療で有用であろう。

結果：
組織特異的ＦＡＣＳ−プロジェクト：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものと比較した場合、リンパ節においてＴ細胞：Ｂ細胞比の減少を示した。
（−／−）マウスはまた、パイエル班においてＢ２２０＋ＣＤ３８低ＩｇＭ−およびＴＣＲβ＋ＣＤ３８＋細胞のパーセンテージの増加を示した。また、軽度〜中等度の髄外造血が、４匹のホモ接合性（−／−）マウスにおいて報告された。

これらの観察結果は、パイエル班においてＢ細胞サブタイプに変化が認められることを示す。
また、リンパ節においてＢ細胞数の増加が観察された。
したがって、ＰＲＯ７１７４ポリペプチドは、Ｂ細胞生成の負の調節因子およびＴ細胞生成の陽性調節因子としての機能を果たすようである。

（ｄ）表現型解析：心臓学
心臓血管生物学の分野において、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、様々な冠動脈疾患、異常脂肪血症（例えば、高コレステロール（高コレステロール血症）および血清トリグリセリドの増加（高トリグリセリド血症））、糖尿病および／または肥満症の処置のための標的を本明細書中で同定した。表現型試験は、血清コレステロールおよび血清トリグリセリドの測定を含んでいた。

結果：
血液化学：
雄（＋／−）および（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均血清コレステロールの増加を示した。

上記に概要を示したように、（＋／−）および（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清コレステロールレベルの増加を示した。
したがって、ＰＲＯ７１７４遺伝子が欠損した変異マウスは、心血管疾患のモデルとして役立ち得る。ＰＲＯ７１７４ポリペプチドまたはそのコード遺伝子は、コレステロールなどの血中脂質の制御に有用であり得る。したがって、ＰＲＯ７１７４ポリペプチドまたはそのアゴニストは、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、様々な冠状動脈疾患、高コレステロール血症、糖尿病および／または肥満症のような心血管疾患の処置に有用であり得る。

（ｅ）表現型解析：
代謝−血液化学／尿検査
代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、血糖測定を含む。マウスにおける血液化学試験を実施するためにＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用した。血糖値の測定に加えて、以下の血液化学試験もまた日常的に行う：アルカリホスファターゼ；アラニンアミノ−トランスフェラーゼ；アルブミン；ビリルビン；亜リン酸；クレアチニン；ＢＵＮ＝血中尿素窒素；カルシウム；尿酸；ナトリウム；カリウム；および塩化物。代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、インスリン感度およびグルコース代謝の変化を測定する耐糖能試験を含む。異常な耐糖能試験結果は、以下の障害または状態：１型糖尿病および２型糖尿病、シンドロームＸ、様々な循環器疾患および／または肥満症を示唆し得るが、これらに限定されない。

結果：
雄および雌（＋／−）および（−／−）マウスの両方は、その野生型（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清グルコースレベルの増加（歴史的平均より約２ＳＤ上）を示した。

したがって、変異型（＋／−）および（−／−）マウスは、グルコース代謝の変化と関連する高血糖症または糖尿病を示した。
ＰＲＯ７１７４ポリペプチドまたはそのアゴニストは、正常なグルコースレベル／代謝の維持に有用であり得、おそらく糖尿病の処置に有用であり得る。
ヘテロ接合性およびホモ接合性マウスにおける平均血清グルコースレベルの上昇に加え、雄および雌変異型マウスはまた、尿中ウロビリノゲンの肉眼レベルの上昇（４匹のヘテロ接合性（＋／−）マウスのうち２匹および４匹のホモ接合性（−／−）マウス３匹で約２０倍増加）を示した。
血清ビリルビンは正常であった。
これらの結果は、おそらく腎臓機能不全と関連している尿の異常の関数であり得る。

（ｆ）表現型解析：ＣＮＳ／神経学
神経学の分野において、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含む神経性障害および精神医学的障害の処置のためのインビボにおいて有効な標的の同定についての解析に本明細書中では注目した。神経障害は、「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。その「不安障害」としては、以下：軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、別段特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴うパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、Ｉ型またはＩＩ型の双極性障害、別段特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物質誘導性気分障害が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害にあてはまることがあり、その人格障害としては、以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない。

結果：
（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、１時間の慣れ期間ならびにホームケージ活動性試験の両方の明期の際、歩行回数の減少（活動性の低下）を示した。これらの結果は、致死性または抑鬱症と一致する。ＰＲＯ７１７４ポリペプチドのアンタゴニストまたはインヒビターまたはＰＲＯ７１７４ポリペプチドをコードする遺伝子は、この挙動を模倣すると予想される。同様に、ＰＲＯ７１７４ポリペプチドまたはそのアゴニストは、かかる神経学的障害、例えば抑鬱障害の処置または不活発状態、認知障害、痛覚過敏および感覚障害などの他の不安様症状の低減に有用であり得る。

（ｇ）骨代謝および全身診断学／放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測
定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

結果：
マイクロＣＴ：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均脊椎子柱骨の体積、数、おより連結密度が減少した。

マイクロＣＴ解析によって解析された（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、異常な骨障害を示唆する、骨の測定値の減少を示した。（−／−）マウスはまた、負の骨表現型を示し、骨の代謝障害を反映する骨測定値が異常に減少した。骨の負の表現型は、ＰＲＯ７１７４ポリペプチドまたはそのアゴニストが、骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。さらに、ＰＲＯ７１７４ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ７１７４ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、異常な骨代謝に関連する炎症性疾患（関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む）を含む、異常または病理学的な骨障害に導き得る。

４８．４２．ＤＮＡ１３６１１０−２７６３（ＵＮＱ３００３）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ９７４４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ１３６１１０−２７６３と命名）（ＵＮＱ３００３）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２２４１６ムス・ムスクルスセリン／トレオニンキナーゼ３２Ｂ（Ｓｔｋ３２ｂ）；参照タンパク質：
Ｑ９ＪＪＸ８Ｑ９ＪＪＸ８Ｑ９ＪＪＸ８ＳＥＲＩＮＥ／ＴＨＲＥＯＮＩＮＥＰＲ
ＯＴＥＩＮＫＩＮＡＳＥ；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０１８４０１ホモ・サピエンスセリン／トレオニンキナーゼ３２Ｂ（ＳＴＫ３２Ｂ）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９ＮＹ５７Ｑ９ＮＹ５７Ｑ９ＮＹ５７ＳＥＲＩＮＥ／ＴＨＲＥＯＮＩＮＥＰＲＯＴＥＩＮＫＩＮＡＳＥ．
目的のマウス遺伝子は、ヒトＳＴＫ３２ＢのオルソログであるＳｔｋ３２ｂ（セリン／トレオニンキナーゼ３２Ｂ）である。
別名としては、ＳＴＫＧ６、Ｓｔｋ３２、ＹＡＮＫ２、２５１０００９Ｆ０８Ｒｉｋ、ＨＳＡ２５０８３９、およびセリントレオニンキナーゼ３２が挙げられる。

ＳＴＫ３２Ｂは、セリン／トレオニンプロテインキナーゼ触媒性ドメインを含む推定細胞質セリン／トレオニンプロテインキナーゼである（ＳＭＡＲＴアクセッションＳＭ００２２０）。
バイオインフォマティック解析から、ＳＴＫ３２Ｂは細胞外タンパク質であり得ることが示唆される（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））。

カイ二乗値＝０．４４有意性＝０．８０２５１８８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２５平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン３をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２２４１６．１）。
１．野生型発現パネル：
標的遺伝子の発現は、脾臓、肺、肝臓、骨格筋、骨、脂肪、喘息肺、ＬＰＳ肝臓、血液、大動脈樹状部およびａｎｄ皮膚線維芽細胞を除くＲＴ−ＰＣＲによって試験した２６の成体組織試料のすべてにおいて検出された。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．４２．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ１３６１１０−２７６３（ＵＮＱ３００３）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトセリン／トレオニンキナーゼ３２Ｂ（ＳＴＫ３２Ｂ）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、平均血清トリグリセリドレベルの増加を示す（−／−）マウスがもたらされた。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

結果：
血液化学：雄および雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均血清中トリグリセリドレベルの上昇を示した。

上でまとめられたように、（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均血清トリグリセリドレベルの著しい上昇を示した。したがって、ＰＲＯ９７４４遺伝子が欠損した変異マウスは、心血管疾患のモデルとして役立ち得る。ＰＲＯ９７４４ポリペプチドまたはそのコード遺伝子は、トリグリセリドなどの血中脂質の制御に有用であり得る。したがって、ＰＲＯ９７４４ポリペプチドまたはそのアゴニストは、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、様々な冠状動脈疾患、高トリグリセリド血症、糖尿病および／または肥満症のような心血管疾患の処置に有用であり得る。

４８．４３．ＤＮＡ１０８７２５−２７６６（ＵＮＱ３０２３）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ９８２１ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ１０８７２５−２７６６と命名）（ＵＮＱ３０２３）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿１７７１３９ムス・ムスクルスＲＩＫＥＮｃＤＮＡＥ１３０１１５Ｅ０３遺伝子（Ｅ１３０１１５Ｅ０３Ｒｉｋ）；参照タンパク質：Ｑ８ＢＰＰ５ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＢＰＰ５ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
タンパク質ＵＮＱ３０２３／ＰＲＯ９８２１前駆体；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿１９４３１７ホモ・サピエンス仮想タンパク質ＭＧＣ５２０５７（ＭＧＣ５２０５７）；ヒトタンパク質配列は、次の参照に対応する：
Ｑ８６Ｙ７８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８６Ｙ７８ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
タンパク質ＵＮＱ３０２３／ＰＲＯ９８２１前駆体。

目的のマウス遺伝子は、ヒト仮説タンパク質ＭＧＣ５２０５７のオーソログであるＲＩＫＥＮｃＤＮＡＥ１３０１１５Ｅ０３遺伝子である。

仮想タンパク質ＭＧＣ５２０５７は、シグナルペプチドおよびＬｙ−６抗原／ｕＰＡ受容体様（ＬＵ）ドメイン（ＳＭＡＲＴアクセッションＳＭ００１３４）からなる推定細胞外タンパク質（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ１３（１０）：２２６５−７０（２００３））。同様のドメイン構成を有するタンパク質としては、ＣＤ５９抗原（これは、細胞を補体媒介性溶解から保護する）およびＬＹ６Ｄが挙げられ、これらは、ケラチノサイトにおける細胞−細胞接着に関与している（Ｂｒａｋｅｎｈｏｆｆｅｔａｌ．，ＪＣｅｌｌＢｉｏｌ１２９（６）：１６７７−８９（１９９５）；Ｃｌａｙｔｏｎｅｔａｌ．，ＥｕｒＪＩｍｍｕｎｏｌ３３（２）：５２２−３１（２００３））。

カイ二乗値＝４．３５有意性＝０．１１３６０８１６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２２平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿１７７１３９．３）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および２６のすべての成体組織サンプル（骨格筋、脂肪およびＬＰＳ肝以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．４３．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ１０８７２５−２７６６（ＵＮＱ３０２３）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト仮想タンパク質ＭＧＣ５２０５７のオルソログをコードする遺伝子の変異により、骨塩量および骨中無機質密度の測定値の減少を示す（−／−）マウスがもたらされた。ＵＮＱ３０２３は未知タンパク質であり、（−／−）マウスでは免疫学的表現型を有しない。しかしながら、ＵＮＱ３０２３はＥＣＤにおいて、補体活性化経路に重要なＣＤ５９のものと同様のＵＰＡＲ＿ＬＹ６ドメインを有するようである。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

結果：
Ｄｅｘａ：
雄および雌（−／−）マウスの両方は、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、骨塩量、ＢＭＣ／ＬＢＭ指数および全身骨中無機質密度の測定値の減少を示した。

Ｄｅｘａ解析によって解析された（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、異常な骨障害を示唆する、骨の測定値の減少を示した。骨の負の表現型は、ＰＲＯ９８２１ポリペプチドまたはそのアゴニストが、骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。さらに、ＰＲＯ９８２１ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ９８２１ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、異常な骨代謝に関連する炎症性疾患（関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む）を含む、異常または病理学的な骨障害に導き得る。

４８．４４．ＤＮＡ１２９３３２−２７７５（ＵＮＱ３０３７）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験では、ＰＲＯ９８５２ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ１２９３３２−２７７５と命名）（ＵＮＱ３０３７）を破壊した。
これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：
該変異型マウス遺伝子は、以下のものに対応する。ヌクレオチド参照：ＮＭ＿１４５９３７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１４５９３７ＮＩＤ：
ｇｉ２２１２２３６０ｒｅｆＮＭ＿１４５９３７．１ムス・ムスクルスＥＳＴＡＩ４６３１０２（ＡＩ４６３１０２）；参照タンパク質：
Ｑ８Ｒ０Ｆ３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８Ｒ０Ｆ３ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
スルファターゼ修飾因子１前駆体（Ｃ−α−ホルミルグリシン生成酵素１）；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿１８２７６０ホモ・サピエンススルファターゼ修飾因子１（ＳＵＭＦ１）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ８ＮＢＫ３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＮＢＫ３ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
スルファターゼ修飾因子１前駆体（Ｃ−α−ホルミル（ｆｏｒｍｙ）グリシン生成酵素１）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＳＵＭＦ１のオルソログであるＳｕｍｆ１（スルファターゼ修飾因子１）である。別名としては、ＦＧＥ、ＭＧＣ３９０７６、ＥＳＴＡＩ４６３１０２、およびＣ−α−ホルミルグリシン生成酵素が挙げられる。

ＳＵＭＦ１は、小胞体の内腔内の酵素であり、種々のスルファターゼ、例えば、ＧＡＬＮＳ（ガラクトサミン［Ｎ−アセチル］−６−スルフェートスルファターゼ）、ＡＲＳＡ（アリールスルファターゼＡ）、ＳＴＳ（ステロイドスルファターゼ［ミクロソームの］、アリールスルファターゼＣ、アイソザイムＳ）、およびＡＲＳＥ（アリールスルファターゼＥ［軟骨異形成プンクタタ１］）などの触媒性部位においてＣ−α−ホルミルグリシンへのシステインの変換を触媒する。この本訳語修飾は、これらのスルファターゼの酵素活性に必要とされる。
ＳＵＭＦ１は、いくつかの組織、例えば、心臓、脳、胎盤、肺、肝臓、骨格筋、腎臓および膵臓ならびに皮膚線維芽細胞において発現される。ＳＵＭＦ１における変異は、リソソーム蓄積症（ＯＭＩＭ２７２２００）である多くのスルファターゼ欠損を引き起こし得る（Ｃｏｓｍａｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ１１３（４）：４２１−２（２００３）；Ｄｉｅｒｋｓｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ１１３（４）：４３５−４４（２００３）；Ｃｏｓｍａｅｔａｌ．，ＨｕｍＭｕｔａｔ２３（６）：５７６−８１（２００４）；Ｐｒｅｕｓｓｅｒ−Ｋｕｎｚｅｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２８０（１５）：１４９００−１０（２００５））。

カイ二乗値＝１３．９２有意性＝９．４９０９６５Ｅ−４（ｈｏｍ／ｎ）＝０．１２平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿１４５９３７．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプルにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．４４．１．ＤＮＡ１２９３３２−２７７５（ＵＮＱ３０３７）遺伝子が破壊され
たマウスの作製および解析
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトスルファターゼ修飾因子１（ＳＵＭＦ１）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）マウスにおいてバイアビリティの低下およびリソソーム蓄積症がもたらされた。
遺伝子情報により、この変異によってホモ接合性変異型マウスのバイアビリティの低下がもたらされたことが示される。
ホモ接合性変異型マウスでは、完全なレベル１試験を行なわなかった。
部分解析に利用可能な雌変異型マウスは、成長遅延ならびに血液化学、免疫学および神経学的異常の徴候を示した。顕微解析により、すべての組織において大きな細胞質内小胞によって拡張されたマクロファージを特徴とする変異型におけるリソソーム蓄積症が明らかになった。標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）病理学
肉眼的：
（−／−）マウスは、いくつかの骨格異常、例えば、凸形胸骨、脊柱後弯症、四肢の縮小を示した。

顕微鏡的：
（−／−）マウスは、すべての組織において大きな細胞質内小胞によって拡張されたマクロファージを特徴とするリソソーム蓄積症を示した。罹患マクロファージは、脾赤色髄およびリンパ節洞では非常に数が多かったが、頭蓋骨および長骨骨端内ではびまん的であった。肝臓のクッパー細胞ならびに脳および脊髄のグリア細胞（主に小神経膠細胞）もまた、大きな細胞質内小胞によって拡張されていた。
大きな拡張クッパー細胞は肝類洞内に突出し、拡張していた。
一部のＩｔｏ細胞もまた肥大性のようであった。
中枢神経系では、罹患ミクログリア細胞は、脳および脊髄の白質（ｗｈｉｔｅｔｒａｃｔ）において非常に数が多かった。動脈（大動脈）平滑筋細胞は、多くの場合で透明な細胞質小胞によって拡張されていた。より重度な罹患変異型では、拡張細胞が骨格の正常な骨髄と置き換わっており、前庭蝸牛神経を囲み、圧迫していた。長骨における該病変は骨幹端において最も重症であり、ここでは、多くの場合で骨芽細胞および骨梁の完全な非存在、ならびに破骨細胞の数の増加が認められた。骨端では、正常な細胞要素が、大きな拡張マクロファージ、疎性変色しやすくかつ淡く染色される薄い着色細胞外マトリックスおよび散在性離脱軟骨細胞と置き換わっていた。骨端軟骨の正常な成熟配列は完全に破壊され、増殖中および肥大性軟骨細胞正常な柱状アレイの非存在を特徴とした。また、長骨の骨端軟骨鋳型の骨化の低減および関節異常が認められた。この肉眼による明白な骨格異常は、骨の発達および成熟の異常を反映する。
遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は、免疫組織化学解析によって組織パネルにおいて検出されなかった。

これらの疾患の発症は、しばしば多段階経路およびしばしば複数の異なる生体系／生物学的経路に関与するが、１つまたは複数のこれらの経路における臨界点での介入が改善効
果または治療効果を示し得る。有害な過程／経路の拮抗作用または有益な過程／経路の刺激のいずれかによって治療介入を行うことができる。

以下の試験を行った。

結果：
血液学：
雌（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、ヘモグロビン、ヘマトクリット、平均赤血球容積、平均赤血球容積および平均赤血球ヘモグロビンの減少を示した。雌（−／−）マウスはまた、赤血球分布幅の増加を示した。

（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、ヘモグロビンレベル、ヘマトクリットおよび赤血球容積の減少を示した。

これらの結果は、貧血に関連する表現型に関係する。したがって、ＰＲＯ０９５２ポリペプチド、そのアゴニストまたはＰＲＯ９８５２ポリペプチドをコードする遺伝子は、正常な赤血球産生に必須であるに違いなく、ゆえに貧血または低ヘマトクリットに関連する血液障害の処置に有用であり得る。

蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）解析
手順：
ＣＤ４、ＣＤ８およびＴ細胞レセプターを含む、末梢血由来の免疫細胞組成物のＦＡＣＳ解析を実施して、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球に対するＣＤ１９、白血球マーカーとしてのＣＤ４５およびナチュラルキラー細胞に対するｐａｎＮＫを評価した。ＦＡＣＳ解析は、野生型およびホモ接合性マウスにおいて実施し、胸腺、脾臓、骨髄およびリンパ節由来の細胞を含んだ。

結果：
ＦＡＣＳ３：
（−／−）マウスは、
その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、Ｂ細胞の平均パーセンテージの減少およびＣＤ８細胞の平均パーセンテージの増加を特徴とする末梢血中の白血球サブセットの分布の変化を示した。
これらの結果は、ノックアウト（−／−）マウスがその野生型（＋／＋）同腹仔と比較した場合、免疫学的異常を示すことを示す。
ＰＲＯ９８５２ポリペプチドのアンタゴニスト（インヒビター）は、この表現型を模倣することが予測され得る。
ＰＲＯ９８５２ポリペプチドまたはそのアゴニストは、Ｔ細胞生成の負の調節因子およびＢ細胞発達の陽性調節因子としての機能を果たすようであり、Ｂ細胞の発達または成熟に有用であり得、これは、次いで、速やかな免疫応答に関与し得る。
卵白アルブミン攻撃
手順：このアッセイは、野生型およびホモ接合体マウスにおいて行った。ニワトリ卵白アルブミン（ＯＶＡ）は、Ｔ細胞依存性抗原であり、マウスにおける抗原特異的免疫応答の研究用のモデルタンパク質として一般に使用されている。ＯＶＡは無毒で不活性であり、したがって、免疫応答が誘発されない場合であっても動物に害をもたらさない。ＯＶＡに対するマウスの免疫応答は、Ｔ細胞応答を惹起させる免疫優性ペプチドが同定されている程度まで充分に特徴付けされている。抗ＯＶＡ抗体を、免疫処置の８〜１０日後に酵素結合イムノソルベント検定法（ＥＬＩＺＡ）を用いて検出することができ、抗体の異なるアイソタイプの測定によって、遺伝子操作されたマウスにおいて欠陥性応答をもたらし得る複雑なプロセスに関するさらなる情報が得られる。

上記のように、このプロトコルは、マウスが抗原特異的免疫応答を生じる能力を評価する。動物に５０ｍｇのニワトリ卵白アルブミン（完全フロイントアジュバント中に乳化）をＩＰ注射し、１４日後に、抗卵白アルブミン抗体（ＩｇＭ、ＩｇＧ１およびＩｇＧ２サ
ブクラス）の血清力価を測定した。血清試料中のＯＶＡ特異的抗体の量は、９６ウェル試料プレートをスキャンする装置によって得られる光学密度（ＯＤ）値に比例する。データは、各血清試料の一組の連続希釈物に対して収集した。

この攻撃の結果：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清ＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａ応答の減少を示した。

まとめると、卵白アルブミン攻撃研究は、ＰＲＯ９８５２ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失したノックアウトマウスが、その野生型同腹仔と比較した場合、免疫学的異常を示すことを示す。特に、変異マウスは、Ｔ細胞依存性ＯＶＡ抗原で攻撃した場合、免疫学的応答を誘発する能力の低下を示した。したがって、ＰＲＯ９８５２ポリペプチドまたはそのアゴニストは、免疫系の刺激（例えば、Ｔ細胞増殖など）に有用であり得、この効果が白血病、他の癌型、および免疫不全患者（ＡＩＤＳ患者など）などの場合の個体に有利である場合に使用されるであろうということが示唆される。したがって、ＰＲＯ９８５２ポリペプチドのインヒビター（アンタゴニスト）は、免疫応答の阻害に有用であり得、このため、例えば、移植片拒絶または移植片対宿主病の場合において有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であり得る。

手順：
行動スクリーニングを、野生型マウス、ヘテロ接合性変異マウスおよびホモ接合性変異マウスのコホートにおいて実施した。生存能低下のために、より早期の試験が必要とならない限り、すべての行動試験は、１２〜１６週齢の間に実施した。これらの試験は、不安、活動性レベルおよび探索を測定するオープンフィールドを含んだ。

オープンフィールド試験：
公知の薬物のいくつかの標的は、オープンフィールド試験において表現型を示した。これらとしては、セロトニン（ｓｅｒａｔｏｎｉｎ）トランスポーター、ドーパミントランスポーター（Ｇｉｒｏｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．１９９６Ｆｅｂ１５；３７９（６５６６）：６０６−１２）およびＧＡＢＡレセプター（Ｈｏｍａｎｉｃｓｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ．１９９７Ａｐｒ１５；９４（８）：４１４３−８）のノックアウトを含む。自動化されたオープンフィールドアッセイをカスタマイズして、感情状態に関連する変化および学習に関する探索パターンを扱った。まず、フィールド（４０×４０ｃｍ）をマウスに対して比較的大きくなるように選択することによって探索に関連する自発運動の変化を取り上げるように設計した。さらに
、４つの穴を床に設け、探索に特に関連する活動である鼻の突っ込みを可能にした。この試験に関連した感情状態を高めるためにいくつかの因子を設けた。オープンフィールド試験は、マウスが試験される最初の実験的手順であり、なされる測定は被験体のチャンバーとの最初の経験であった。さらに、オープンフィールドは明るく照らした。これらの因子のすべてによって、新しい開放性空間に関連する天然の不安が高められる。次いで、探索活動のパターンおよび程度ならびに特に中心からの全移動距離比は、不安または抑鬱症に対する罹りやすさに関する変化を識別することができる。３つの異なったレベルでの赤外線ビームを用いた大きな活動領域（４０ｃｍ×４０ｃｍ、ＡｃｃｕＳｃａｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓのＶｅｒｓａＭａｘ動物活動性モニターシステム）を用いて、直立、穴への突っ込みおよび自発運動を記録した。動物を中心に置き、その活動を２０分間測定した。この試験のデータを４分間隔で５回分析した。全移動距離（ｃｍ）、垂直移動回数（直立）、穴突っ込み回数および中心からの全移動距離比を記録した。

結果：
（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、オープンフィールド試験中の中心にいる時間の合計の中央値の増加を示したことから、変異体における不安様応答の低下が示唆される。

注目すべき差が、オープンフィールド活動性試験中に観察された。（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、中心領域にいる時間の合計の中央値の増加を示した。これは、変異体における不安様応答の低下を示唆する。したがって、ノックアウトマウスは、抑鬱症、全般性不安障害、認知障害、痛覚過敏ならびに感覚障害および／または双極性障害と一致する表現型を示した。したがって、ＰＲＯ９８５２ポリペプチドおよびそのアゴニストは、抑鬱性障害に関連する症状の処置または寛解に有用であり得る。

機能観察バッテリー（ＦＯＢ）試験−尾部懸垂試験：
ＦＯＢは、全身感覚および運動欠陥を測定するために動物に適用される一連の状態である。全身の神経機能を評価するＩｒｗｉｎ神経性のスクリーニングからの試験のサブセットを使用する。一般に、短期間、触覚、嗅覚および視覚の刺激を動物に適用することにより、それらが正常に検知および応答する能力を測定する。これらの簡単な試験は、約１０分を要し、マウスは、試験後、ホームケージに戻される。

結果：
尾部懸垂２：
雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、不動時間の増加を示し、変異型における鬱様応答の増加が示唆された。

したがって、ノックアウトマウスは、抑鬱症、全般性不安障害、認知障害、痛覚過敏、感覚障害、および／または双極性障害と一致する表現型を示した。したがって、ＰＲＯ９８５２ポリペプチドおよびその作用剤は、抑鬱性障害に関連する症状の治療または改善に有用であろう。

結果：
ＰＰＩ：
（−／−）マウスは、驚愕応答を示さず、変異型における聴力障害を示した。
したがって、プレパルス抑制は評価され得なかった。

結果：
日周期：
雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、１時間および１２時間慣れ期間およびすべての明／暗期中、歩行回数の減少を示した。

これらの結果は、不活発状態または抑鬱障害と一致する。
ＰＲＯ９８５２ポリペプチドまたはＰＲＯ９８５２コード遺伝子のアンタゴニストまたはインヒビターは、この挙動を模倣することが予測され得る。
同様に、ＰＲＯ９８５２ポリペプチドまたはそのアゴニストは、かかる神経学的障害、例えば、抑鬱障害の処置または不活発状態、認知障害、痛覚過敏および感覚障害などの他の不安様症状の低減に有用であり得る。

反転スクリーン試験：
野生型マウス、ヘテロ接合性変異マウスおよびホモ接合性変異マウスのコホートに対して行動スクリーニングを行った。生存能低下によってより早期の試験が必要とならない限り、すべての行動試験を１２〜１６週齢で行った。これらの試験には、不安、活動レベルおよび探索を測定するためのオープンフィールドが含まれていた。

反転スクリーン試験データ：
反転するスクリーンを使用して、運動力／共調を測定する。訓練されていないマウスを
、金属棒上に水平に配置した正方形（７．５ｃｍ×７．５ｃｍ）のワイヤースクリーンの上に個別に置いた。次いで、マウスがスクリーン下になるように、その棒を１８０°回転させた。以下の行動応答を、１分間の試験にわたって記録した：落下、登上せず、および登上。

結果：

運動力の欠損は、（−／−）マウスまたは（＋／−）マウスと（＋／＋）マウスとの間で落下応答が５０％異なる場合に明らかである。登上しなかった０／８もしくは１／８匹の（−／−）マウスまたは（＋／−）マウスは、運動協調性障害を示す。登上した７／８もしくは８／８匹の（−／−）マウスまたは（＋／−）マウスは、運動協調性の増強を示す。

反転スクリーン試験を、基本的な感覚および運動観察を測定するように設定する：
解析した８匹の（−／−）マウスのうち、５匹がスクリーンから落下したのに対して、１／８匹の（＋／＋）マウスが落下した。これらの結果から、変異体の運動協調性の障害が示唆される。これらの結果は、下に示すような骨関連測定値における観察結果と一致する。

（ｅ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、血糖測定を含む。マウスにおける血液化学試験を実施するためにＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用した。血糖値の測定に加えて、以下の血液化学試験も日常的に行う：アルカリホスファターゼ；アラニンアミノトランスフェラーゼ；アルブミン；ビリルビン；リン；クレアチニン；ＢＵＮ＝血中尿素窒素；カルシウム；尿酸；ナトリウム；カリウム；および塩化物。代謝領域では、糖尿病治療のための標的を同定することができる。血液化学表現型解析は、インスリン感受性およびグルコース代謝の変化を測定するための耐糖能試験を含む。耐糖能試験の異常な結果は、以下の障害または容態を示し得るが、これらに限定されない：１型および２型糖尿病、症候群Ｘ、種々の心血管疾患、および／または肥満症。

結果：
血液化学：
雌（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、アルカリホスファターゼ、アルブミン、アラニンアミノトランスフェラーゼ、リンおよびカリウムレベルの増加を示した。

これらの血液化学異常は、ＰＲＯ９８５２コード遺伝子がマウスにおいてノックアウトされた場合、バイアビリティの低下の結果と一致する。

（ｆ）骨代謝および全身診断学
（１）組織質量および除脂肪体重の測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ解析−試験の説明：
手順：野生型マウス、ヘテロ接合性マウスおよびホモ接合性マウスのコホートをこのア
ッセイで試験した。二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を、うまく使用して総組織質量（ＴＴＭ）の変化を同定した。

Ａｖｅｒｔｉｎ（１．２５％２，２，２，−トリブロモエタノール，２０ｍＬ／ｋｇ体重）をマウスに腹腔内注射することにより麻酔し、体長および体重を測定し、次いで、そのマウスをＤＥＸＡスキャンのためにＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（Ｌｕｎａｒ
Ｉｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位にした。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを使用して、目的の領域（ＲＯＩ、すなわち、全身、椎骨および両大腿骨）の骨塩密度（ＢＭＤ）および脂肪組成物（％脂肪）および総組織質量（ＴＴＭ）を測定した。
身体測定（体長および体重）：
身体測定：約１６週齢で体長および体重の測定を行った。

結果：
体重：（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均体重の減少を示した。

体長：
解析した２匹の雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均体長の減少を示した。

Ｄｅｘａ解析−試験の説明：
手順：野生型マウス、ヘテロ接合性マウスおよびホモ接合性マウスのコホートをこのアッセイで試験した。二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を、うまく使用して骨の変化を同定した。麻酔動物を試験し、骨塩量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比、容量測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿骨ＢＭＤおよび椎骨ＢＭＤを測定した。

結果：
Ｄｅｘａ：
解析に利用可能な２匹の雌（−／−）マウスは、歴史的平均と比較した場合、総組織マス、除脂肪体重、総体脂肪パーセント、総脂肪質量および全身骨塩量の減少を示した。
しかしながら、この２匹の雌（＋／＋）マウスはまた、同様の測定値の減少を示した。
マイクロＣＴ：
顕著な差はなし。
しかしながら、解析に利用可能な（−／−）マウスはなかった。

ＰＲＯ９８５２ポリペプチドをコードする遺伝子が欠損した変異（−／−）マウスは、体重および体長の減少および組織るいそう疾患（総体脂肪（％）および脂肪質量（ｇ）の減少）を特徴とする、成長遅延と一致する表現型を示す。したがって、ＰＲＯ９８５２ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニストまたはインヒビターは、これらの代謝関連効果および成長関連効果を模倣するであろう。他方では、ＰＲＯ９８５２ポリペプチドまたはその作用剤は、糖尿病または他の組織るいそう疾患などの代謝障害の予防および／または治療で有用であろう。

また、ＤＥＸＡによって解析した（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔と比較した場合、骨測定値の減少およびボディマス測定値の減少を示し、異常な骨障害が示唆された。
また、平均総組織マスおよび除脂肪体重の減少は、成長遅延および組織消耗性障害に関連する代謝障害を示す。
骨の負の表現型は、ＰＲＯ９８５２ポリペプチドまたはそのアゴニストが、正常な成長発達に加えて骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。
さらに、ＰＲＯ９８５２ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ９８５２ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、異常な骨代謝に関連する炎症性疾患（関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む）を含む、異常または病理学的な骨障害に導き得る。

これらの所見は、病理報告および顕微鏡観察結果と一致する。

（ｇ）心臓学／診断−血圧
説明：
ＶｉｓｉｔｅｃｈＢＰ−２０００血圧分析システムによる４日間の非侵襲性テールカフ法によって収縮期血圧を測定する。血圧を、４日間にわたって１日１０回測定する。次いで、４日間の値を平均して、マウスの意識下収縮期血圧を得る。

結果：
血圧：
解析に利用可能な２匹の雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、高血圧症を示す平均収縮期血圧の増大を示した。

４８．４５．ＤＮＡ１４３０７６−２７８７（ＵＮＱ３０５４）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ９８７３ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ１４３０７６−２７８７と命名）（ＵＮＱ３０５４）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２０５９５ムス・ムスクルスオトラプリン（ｏｔｏｒａｐｌｉｎ）（Ｏｔｏｒ）；参照タンパク質：
Ｑ９ＪＩＥ３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＪＩＥ３ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
オトラプリン前駆体（黒色腫阻害活性様タンパク質）；参照ヒト遺伝子配列：ＮＭ＿０２０１５７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０２０１５７ＮＩＤ：
ｇｉ２１６１８３４５ｒｅｆＮＭ＿０２０１５７．２ホモ・サピエンスオトラプリン（ＯＴＯＲ）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９ＮＲＣ９ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＮＲＣ９ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
オトラプリン前駆体（繊線維芽細胞由来タンパク質）（黒色腫阻害活性様タンパク質）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＯＴＯＲのオルソログであるＯｔｏｒ（オトラプリン）である。別名としては、Ｆｄｐ、ＭＩＡ、ＭＩＡＬ、ＣＤＲＡＰ、繊線維芽細胞由来タンパク質、および黒色腫阻害活性様タンパク質が挙げられる。

ＯＴＯＲは、主に、蝸牛および内耳腔の感覚上皮の下方の間葉細胞層によって発現される分泌タンパク質である。
該タンパク質は、シグナルペプチドおよびＳＨ３ドメインからなり、翻訳後修飾を受け、硫酸化および共有結合性ホモ二量体化をもたらす（Ｒｅｎｄｔｏｒｆｆｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ７１（１）：４０−５２（２００１）；Ｓｔｏｌｌｅｔａｌ．，ＰｒｏｔｅｉｎＳｃｉ１２（３）：５１０−９（２００３）；Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ６６（３）：２４２−８（２０００））。
ＯＴＯＲは、細胞外マトリックスの一成分として、またはシグナル伝達リガンドとして機能している可能性がある（ＢｏｓｓｅｒｈｏｆｆおよびＢｕｅｔｔｎｅｒ、Ｈｉｓｔｏｌ
Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌ１７（１）：２８９−３００（２００２））。
ＯＴＯＲは、おそらく、周期的な間充組織の軟骨形成においてある役割を果たしており、発達中の耳嚢の形成に関与している。（Ｃｏｈｅｎ−Ｓａｌｍｏｎｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７５（５１）：４００３６−４１（２０００））。
ＯＴＯＲにおける変異は難聴を引き起こし得る（Ｃｏｈｅｎ−Ｓａｌｍｏｎｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７５（５１）：４００３６−４１（２０００）；Ｒｅｎｄｔｏｒｆｆｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ７１（１）：４０−５２（２００１）。

カイ二乗値＝０．８１有意性＝０．６６６９７６８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２７平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１から３をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２０５９５．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３のすべての成体組織サンプル（脳、脊椎、眼、および胸腺）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．４５．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ１４３０７６−２７８７（ＵＮＱ３０５４）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトオトラプリン（ＯＴＯＲ）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、雄（−／−）マウスにおいて不安関連応答の増大がもたらされた。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

結果：
不安：雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、オープンフィールド試験中の中心にいる時間の合計の中央値の減少を示したことから、変異体における不安様応答の増大が示唆される。
（−／−）マウスは、（＋／＋）マウスと比較した場合、２、３および５回の間隔で中心にいる時間の合計の中央値の減少を示し、（−／−）マウスにおける不安の増大−様応答が示唆された。

まとめると、オープンフィールド試験により、軽度から中程度の不安、全般的病状による不安および／もしくは双極性障害；活動亢進；感覚障害；強迫性障害、精神分裂病または妄想性人格に関連し得る不安の増大に関連する表現型が明らかになった。したがって、ＰＲＯ９８７３ポリペプチドまたはそのアゴニストは、そのような神経障害の処置に有用であり得る。

４８．４６．ＤＮＡ１４４８４１−２８１６（ＵＮＱ３１１５）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ１０１９６ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ１４４８４１−２８１６と命名）（ＵＮＱ３１１５）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２００１３ムス・ムスクルス線維芽細胞増殖因子２１（Ｆｇｆ２１）；参照タンパク質：
Ｑ９ＪＪＮ１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＪＪＮ１ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ増殖因子−２１前駆体（ＦＧＦ−２１）；参照ヒト遺伝子配列：ＮＭ＿０１９１１３ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０１９１１３ＮＩＤ：９５０６５９６ホモ・サピエンスホモ・サピエンス線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９ＮＳＡ１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＮＳＡ１ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＦＩＢＲＯＢＬＡＳＴＧＲＯＷＴＨＦＡＣＴＯＲ−２１ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＦＧＦ−２１）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＦＧＦ２１のオルソログであるＦｇｆ２１（線維芽細胞増殖因子２１）である。
別名としては、ＦＧＦ−２１およびＵＮＱ３１１５が挙げられる。

ＦＧＦ２１は、主に肝臓で発現される推定分泌タンパク質である。該２０９アミノ酸タンパク質は、シグナルペプチドおよび線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）ドメインを含む（ＰｆａｍアクセッションＰＦ００１６７）。
ＦＧＦ２１は、シグナル伝達リガンドとして機能している可能性がある（Ｎｉｓｈｉｍｕｒａｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ１４９２（１）：２０３−６（２０００））。

カイ二乗値＝２．４５有意性＝０．２９３７５７７（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２５平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１から３をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２００１３．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、１３の成体組織サンプルのうち、脳のみにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．４６．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ１４４８４１−２８１６（ＵＮＱ３１１５）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、平均血清コレステロールおよびグルコースレベルの増加を示す（−／−）マウスがもたらされた。変異型（−／−）マウスはまた、総組織マスおよび総体脂肪の増加を示した。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

結果：
血液化学：（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均血清中コレステロールレベルの上昇を示した。

上記に概要を示したように、（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清コレステロールレベルの増加を示した。
したがって、ＰＲＯ１０１９６遺伝子が欠損した変異マウスは、心血管疾患のモデルとして役立ち得る。ＰＲＯ１０１９６ポリペプチドまたはそのコード遺伝子は、コレステロールなどの血中脂質の制御に有用であり得る。したがって、ＰＲＯ１０１９６ポリペプチドまたはそのアゴニストは、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、様々な冠状動脈疾患、高コレステロール血症、糖尿病および／または肥満症のような心血管疾患の処置に有用であり得る。

結果：
ホモ接合性（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清グルコースレベルの上昇を示した。

したがって、変異型（−／−）マウスは、グルコース代謝の変化または糖尿病と関連するものであり得る高血糖症を示した。
ＰＲＯ１０１９６ポリペプチドまたはそのアゴニストは、正常なグルコースレベル／代謝の維持に有用であり得、おそらく糖尿病の処置に有用であり得る。

結果：
雄（−／−）マウスは、その性別一致野生型（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、総組織マスおよび総体脂肪（％およびｇ）の増加を示した。

これらの研究により、変異（−／−）非ヒトトランスジェニック動物が肥満に関連し得る負の表現型を示すことが示唆される。したがって、ＰＲＯ１０１９６ポリペプチドまたはその作用剤は、正常な成長および代謝過程に不可欠であり、肥満または他の成長関連障害の予防および／または治療で特に重要であろう。

４８．４７．ＤＮＡ２２０４３２（ＵＮＱ３９６６）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ３４７７８ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ２２０４３２と命名）（ＵＮＱ３９６６）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
該変異型マウス遺伝子は、以下のものに対応する。ヌクレオチド参照：ＮＭ＿１３０８６６ムス・ムスクルス嗅神経受容体７８（Ｏｌｆｒ７８）；参照タンパク質：
Ｑ８ＶＢＶ９Ｑ８ＶＢＶ９Ｑ８ＶＢＶ９ＯＬＦＡＣＴＯＲＹＲＥＣＥＰＴＯＲＭＯＲ１８−２ＰＲＯＳＴＡＴＥ−ＳＰＥＣＩＦ；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０３０７７４ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０３０７７４ＮＩＤ：１９９２３６３０ホモ・サピエンスホモ・サピエンス嗅神経受容体、ファミリー５１、サブファミリーＥ、構成員２（ＯＲ５１Ｅ２）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９Ｈ２５５ＯＸＥ２＿ＨＵＭＡＮＱ９Ｈ２５５ＯＬＦＡＣＴＯＲＹＲＥＣＥＰＴＯＲ５１Ｅ２ＰＲＯＳＴＡＴＥＳＰＥＣＩ．
目的のマウス遺伝子は、ヒトＯＲ５１Ｅ２（嗅神経受容体、ファミリー５１、サブファミリーＥ、構成員２）のオルソログであるＯｌｆｒ７８（嗅神経受容体７８）である。別名としては、ＰＳＧＲ；ＲＡ１ｃ；ＭＯＬ２．３；ＭＯＲ１８−２；４６３３４０２Ａ２１Ｒｉｋ；嗅神経受容体ＭＯＲ１８−２；ＧＡ＿ｘ６Ｋ０２Ｔ２ＰＢＪ９−５４５９６５７−５４５８６９５；ＯＲ５２Ａ２；ＯＲ５１Ｅ３Ｐ；嗅神経受容体ＯＲ１１−１６；前立腺特異的Ｇタンパク質共役受容体；嗅神経受容体、ファミリー５２、サブファミリーＡ、構成員２；嗅神経受容体、ファミリー５１、サブファミリーＥ、構成員３偽遺伝子が挙げられる。

ＯＲ５１Ｅ２は、主に前立腺において発現される内在性膜タンパク質であり、おそらくＧタンパク質共役受容体としての機能を果たしている。
該タンパク質は、７回膜貫通受容体（ロドプシンファミリー）ドメイン（ＰＦＡＭアクセッションＰＦ００００１）を含み、嗅神経受容体ファミリー構成員と著しい類似性を示し、ＧＮＡ１２（グアニンヌクレオチド結合タンパク質［Ｇタンパク質］α１２）と相互作用する。
ＯＲ５１Ｅ２はまた、ヒトの嗅神経組織および脳の延髄、マウスの脳および結腸、ならびにラットの脳および肝臓においても発現される（Ｘｕｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ６０（２３）：６５６８−７２（２０００）；Ｙｕａｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ
２７８（１−２）：４１−５１（２００１）；Ｘｉａｅｔａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ２０（４１）：５９０３−７（２００１））。
ＯＲ５１Ｅ２の発現は、多くの場合で前立腺癌において上方調節され、該タンパク質が前立腺癌の早期検出および処置に有用であり得ることを示唆する（Ｗｅｎｇｅｔａｌ．，ＩｎｔＪＣａｎｃｅｒ１１３（５）：８１１−８（２００５））。

遺伝子ターゲティングまたは遺伝子トラップによる変異を、系統１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ
由来の胚性幹（ＥＳ）細胞において生じさせる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスと交雑させ、Ｆ１ヘテロ接合性動物を作製する。これらの子孫を、交雑受精することにより、Ｆ２の野生型、ヘテロ接合性およびホモ接合性の変異体子孫を作製する。まれに、例えば、Ｆ１マウスがキメラからほとんど得られない場合に、Ｆ１ヘテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスと交雑することにより、交雑受精用のさらなるヘテロ接合性動物を得て、Ｆ２マウスを作製する。この世代のマウスについてレベルＩ表現型解析を実施する。

カイ二乗値＝０．３２有意性＝０．８５２１４３７６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２７平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿１３０８６６．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および２６のすべての成体組織サンプル（肝臓および脂肪以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．４７．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ２２０４３２（ＵＮＱ３９６６）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト嗅神経受容体、ファミリー５１、サブファミリーＥ、構成員２（ＯＲ５１Ｅ２）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、総組織マスおよび総体脂肪の増加ならびにコレステロールレベルの増加を示す（−／−）マウスがもたらされた。耐糖能の向上もまた変異型（−／−）マウスにおいて観察された。
神経学試験により、ホモ接合性マウスにおいてストレス誘導型高体温が示された。遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

上記に概要を示したように、（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清コレステロールレベルの増加を示した。
したがって、ＰＲＯ３４７７８遺伝子が欠損した変異マウスは、心血管疾患のモデルとして役立ち得る。ＰＲＯ３４７７８ポリペプチドまたはそのコード遺伝子は、コレステロールなどの血中脂質の制御に有用であり得る。したがって、ＰＲＯ３４７７８ポリペプチドまたはそのアゴニストは、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、心不全、脳卒中、様々な冠状動脈疾患、高コレステロール血症、糖尿病および／または肥満症のような心血管疾患の処置に有用であり得る。

（ｃ）表現型解析：代謝−血液化学／耐糖能
代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、血糖測定を含む。マウスにおける血液化学試験を実施するためにＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用した。代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、インスリン感度およびグルコース代謝の変化を測定する耐糖能試験を含む。異常な耐糖能試験結果は、以下の障害または状態：１型糖尿病および２型糖尿病、シンドロームＸ、様々な循環器疾患および／または肥満症を示唆し得るが、これらに限定されない。

手順：２匹の野生型および４匹のホモ接合性マウスのコホートをこのアッセイに使用した。耐糖能試験は、哺乳動物における損傷したグルコースホメオスタシスを定義するための標準的な試験である。Ｌｉｆｅｓｃａｎ血糖測定器を使用して耐糖能試験を行った。２０％溶液として送達される２ｇ／ｋｇのＤ−グルコースを動物にＩＰ注射し、血糖値を注射の０、３０、６０および９０分後に測定した。

結果：
耐糖能試験：変異（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較した場合、耐糖能の増強を示した。

これらの研究において、変異型（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、試験した３回すべてで、正常な空腹時グルコースの存在下、耐糖能の増加または向上を示した。したがって、ノックアウトマウスは、インスリン感受性の増加またはグルコースホメオスタシス障害の反対の表現型パターンを示し、そのようなものとして、ＰＲＯ３４７７８ポリペプチドまたはそのコード遺伝子に対するアンタゴニスト（インヒビター）は、グルコースホメオスタシス障害の治療で有用であろう。

Ｄｅｘａ解析−試験の説明：
手順：４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性マウスおよび８匹のホモ接合性マウス
のコホートをこのアッセイで試験した。二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を、うまく使用して骨の変化を同定した。麻酔動物を試験し、骨塩量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比、容量測定による骨塩密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿骨ＢＭＤおよび椎骨ＢＭＤを測定した。

これらの研究により、変異（−／−）非ヒトトランスジェニック動物が肥満に関連し得る負の表現型を示すことが示唆される。したがって、ＰＲＯ３４７７８ポリペプチドまたはその作用剤は、正常な成長および代謝過程に不可欠であり、肥満の予防および／または治療で特に重要であろう。

機能観察バッテリー（ＦＯＢ）試験−ストレス誘導過温症：
ＦＯＢは、全身感覚および運動欠陥を測定するために動物に適用される一連の状態である。全身の神経機能を評価するＩｒｗｉｎ神経性のスクリーニングからの試験のサブセットを使用する。一般に、短期間、触覚、嗅覚および視覚の刺激を動物に適用することにより、それらが正常に検知および応答する能力を測定する。これらの簡単な試験は、約１０分を要し、マウスは、試験後、ホームケージに戻される。

結果：
不安：（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、ストレス誘導性高熱に対する感受性が増加し、変異体における不安様応答の増加が示唆された。まとめると、機能観察試験により、軽度から中等度の不安、一般的病状に起因する不安、および／または双極性障害、活動亢進、感覚障害、強迫性障害、分裂病、または偏執性人格に関連し得る不安の増加に関連する表現型が明らかとなった。したがって、ＰＲＯ３４７７８ポリペプチドまたはその作用剤は、このような神経障害の治療で有用であろう。

４８．４８．ＤＮＡ１６５６０８（ＵＮＱ６２０８）遺伝子破壊を含むマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験では、ＰＲＯ２０２３３ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ１６５６０８と示す）（ＵＮＱ６２０８）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報を以下に示す：変異マウス遺伝子は、以下に対応する：参照ヌクレオチド：ＮＭ＿１７８２５７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿１７８２５７ＮＩＤ：
ｇｉ３０１４２７０８ｒｅｆＮＭ＿１７８２５７．１ムス・ムスクルスインターロイキン２２受容体、α１（Ｉｌ２２ｒａ１）；参照タンパク質：
Ｑ８０ＸＺ４ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８０ＸＺ４ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
インターロイキン−２２受容体α鎖；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０２１２５８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０２１２５８ＮＩＤ：
ｇｉ３１３１７２３８ｒｅｆＮＭ＿０２１２５８．２ホモ・サピエンスインターロイキン２２受容体、α１（ＩＬ２２ＲＡ１）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９ＨＢ２２ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＨＢ２２ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＩＬ−２２受容体。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＩＬ２２ＲＡ１のオルソログであるＩｌ２２ｒａ１（インターロイキン２２受容体、α１）である。別名としては、Ｉｌ２２ｒ、ＩＬ−２２Ｒ、ＣＲＦ２−９、およびインターロイキン−２２受容体α鎖が挙げられる。

ＩＬ２２ＲＡ１は、ＩＬ２２受容体複合体のサブユニットとしての機能を果たすＩ型内在性原形質膜タンパク質である。ＩＬ２２受容体複合体は、ＩＬ２２ＲＡ１およびインターロイキン１０受容体β（ＩＬ１０ＲＢ）の両方からなり、これらは、Ｔ細胞によって放出されるインターロイキン２２（ＩＬ２２）と結合する（Ｘｉｅｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７５（４０）：３１３３５−９（２０００）；Ｋｏｔｅｎｋｏｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７６（４）：２７２５−３２（２００１））。ＩＬ２２受容体複合体の活性化により、ＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路を介して遺伝子転写が刺激され得、いくつかのＭＡＰキナーゼ経路が活性化され得る（Ｘｉｅｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７５（４０）：３１３３５−９（２０００）；Ａｇｇａｒｗａｌ
ｅｔａｌ．，ＪＩｎｔｅｒｆｅｒｏｎＣｙｔｏｋｉｎｅＲｅｓ２１（１２）：１０４７−５３（２００１）；Ｌｅｊｅｕｎｅｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７７（３７）：３３６７６−８２（２００２））。
ＩＬ２２ＲＡ１は、肝臓、腎臓、膵臓、小腸、結腸、血管内皮および皮膚ケラチノサイトにおいて発現される（Ｋｏｔｅｎｋｏｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７６（４）：２７２５−３２（２００１）；Ａｇｇａｒｗａｌｅｔａｌ．，ＪＩｎｔｅｒｆｅｒｏｎＣｙｔｏｋｉｎｅＲｅｓ２１（１２）：１０４７−５３（２００１）；Ｒａｍｅｓｈｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ６３（１６）：５１０５−１３（２００３）；Ｗｏｌｋｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ２１（２）：２４１−５４
（２００４）。
さらに、ＩＬ２２ＲＡ１発現は、リポ多糖による刺激に応答して肝臓において（Ｔａｃｈｉｉｒｉｅｔａｌ．，ＧｅｎｅｓＩｍｍｕｎ４（２）：１５３−９（２００３））およびインターフェロン−γに応答してケラチノサイトにおいて（Ｗｏｌｋｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ２１（２）：２４１−５４（２００４））上方調節される。
ＩＬ２２ＲＡ１は、先天性免疫（Ｗｏｌｋｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ２１（２）：２４１−５４（２００４））、肝臓損傷の予防および修復（Ｒａｄａｅｖａｅｔａｌ．，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ３９（５）：１３３２−４２（２００４））、血管形成（Ｒａｍｅｓｈｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ６３（１６）：５１０５−１３（２００３））、ならびに癌細胞のアポトーシス（Ｓａｕａｎｅｅｔａｌ．，ＪＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌ１９６（２）：３３４−４５（２００３））においてある役割を果たしている可能性がある。

カイ二乗＝０．４６有意性＝０．７９４５３３６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２３平均同腹仔数＝７
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン２から４をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿１７８２５７．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプル（骨格筋および骨以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．４８．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ１６５６０８（ＵＮＱ６２０８）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトインターロイキン２２受容体、α１（ＩＬ２２ＲＡ１）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、小型の雌（−／−）マウスがもたらされた。．
雌ホモ接合性変異型マウスは、その性別一致野生型同腹仔よりも小さく、体重および体長の減少、総組織マスの減少、および除脂肪体重の減少ならびに骨塩量および骨中無機質密度の測定値の減少を示した。
標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）発現
ＵＮＱ６２０８は、膵臓の腫瘍において過剰発現される。
［プロトコルの実施例５４および５５を参照］
（ｃ）骨代謝および骨診断
（１）組織質量および除脂肪体重の測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ解析−試験の説明：
手順：４匹の野生型マウス、４匹のヘテロ接合性マウスおよび８匹のホモ接合性マウスのコホートをこのアッセイで試験した。二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）を、うまく使用して総組織質量（ＴＴＭ）の変化を同定した。

結果：
体重：
（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均体重の減少を示し、その差は雌においてより顕著であった。

体長：
雌（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均体長の減少を示した。

結果：
Ｄｅｘａ：
雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔のものおよび歴史的平均と比較した場合、平均総組織マス、除脂肪体重、骨塩量、ならびに骨中無機質密度（全身ＢＭＤ、大腿骨ＢＭＤおよび椎骨ＢＭＤ）の顕著な減少を示した。

ＰＲＯ２０２３３ポリペプチドをコードする遺伝子が欠失した変異型雌（−／−）マウスは、体重および体長ならびに総組織マスおよび除脂肪体重の減少が顕著な成長遅延と一致する表現型を示す。したがって、ＰＲＯ２０２３３ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニストまたはインヒビターは、これらの代謝効果および成長関連効果を模倣し得る。他方で、ＰＲＯ２０２３３ポリペプチドまたはそのアゴニストは、糖尿病または他の組織るいそう疾患などの代謝障害の予防および／または処置に有用であり得る。

また、ＤＥＸＡによって解析した（−／−）マウスは、その（＋／＋）同腹仔と比較した場合、骨測定値の減少およびボディマス測定値の減少を示し、異常な骨障害が示唆された。
（−／−）マウスは、骨代謝障害を反映する異常な骨測定値の減少を含む負の骨表現型を示した。
また、平均総組織マスおよび除脂肪体重の減少は、成長遅延および組織消耗性障害に関連する代謝障害を示す。
骨の負の表現型は、ＰＲＯ２０２３３ポリペプチドまたはそのアゴニストが、正常な成長発達に加えて骨ホメオスタシスの維持に有用であり得ることを示唆する。
さらに、ＰＲＯ２０２３３ポリペプチドは、骨の治癒または関節炎もしくは骨粗鬆症の処置に有用であり得る一方で、ＰＲＯ２０２３３ポリペプチドまたはそのコード遺伝子のアンタゴニスト（またはインヒビター）は、関節炎、骨粗鬆症および骨減少症を含む異常な骨代謝に関連する炎症性疾患を含む異常な骨障害または病理学的な骨障害に導き得る。

４８．４９．ＤＮＡ１７８５１１−２９８６（ＵＮＱ６９７３）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ２１９５６ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ１７８５１１−２９８６と命名）（ＵＮＱ６９７３）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０１１７１９ムス・ムスクルスウイングレス（ウイングレス）型ＭＭＴＶ組込み部位９Ｂ（Ｗｎｔ９ｂ）；参照タンパク質：Ｏ３５４６８Ｗｎｔ−９ｂタンパク質前駆体（Ｗｎｔ−１５）（Ｗｎｔ−１４ｂ）ｇｉ｜１８１８１９１７｜ｄｂｊ｜ＢＡＢ８３８６６．１｜Ｗｎｔ１４ｂ［ムス・ムスクルス］；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿００３３９６ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿００３３９６ＮＩＤ：
ｇｉ１７０１７９７５ｒｅｆＮＭ＿００３３９６．１ホモ・サピエンスウイングレス型ＭＭＴＶ組込み部位ファミリー、構成員１５（ＷＮＴ１５）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｏ１４９０５ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｏ１４９０５ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＷＮＴ−１５ＰＲＯＴＥＩＮＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＷＮＴ−１４Ｂ）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＷＮＴ９Ｂ（ウイングレス型ＭＭＴＶ組込み部位ファミリー、構成員９Ｂ）のオルソログであるＷｎｔ９ｂ（ウイングレス型ＭＭＴＶ組込み部位９Ｂ）である。別名としては、Ｗｎｔ１４ｂ、Ｗｎｔ１５、ウイングレス型ＭＭＴＶ組込み部位１５、およびウイングレス型ＭＭＴＶ組込み部位ファミリー構成員１５が挙げられる。

ＷＮＴ９Ｂは、おそらく、Ｇタンパク質共役受容体の縮れｆｒｉｚｚｌｅｄファミリーの構成員のリガンドとしての機能を果たしている分泌タンパク質である（Ｋａｔｏｈ、ＩｎｔＪＭｏｌ
Ｍｅｄ９（６）：５７９−８４（２００２））。
該タンパク質は、発達中ではほとんどの組織において、および成体期では腎臓および脳において発現される（Ｑｉａｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ８１（１）：３４−４６（２００３）；Ｋｉｒｉｋｏｓｈｉｅｔａｌ．，ＩｎｔＪＯｎｃｏｌ１９（５）：９４７−５２（２００１）；ＫｉｒｉｋｏｓｈｉａｎｄＫａｔｏｈ、ＩｎｔＪＭｏｌＭｅｄ９（２）：１３５−９（２００２））。
ＷＮＴ９Ｂは、胚形成および神経分化においてある役割を果たしている可能性がある（Ｋｉｒｉｋｏｓｈｉｅｔａｌ．，ＩｎｔＪＯｎｃｏｌ１９（５）：９４７−５２（２００１）；ＫｉｒｉｋｏｓｈｉａｎｄＫａｔｏｈ、ＩｎｔＪＭｏｌＭｅｄ
９（２）：１３５−９（２００２））。
ＷＮＴ９Ｂの過剰発現は、ある種の型の乳癌においてある役割を果たしている可能性があり（Ｑｉａｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ８１（１）：３４−４６（２００３））、ＷＮＴ９Ｂ遺伝子の破壊によりマウスにおいて口唇口蓋裂が引き起こされ得る（Ｊｕｒｉｌｏｆｆｅｔａｌ．，ＢｉｒｔｈＤｅｆｅｃｔｓＲｅｓＡＣｌｉｎＭｏｌＴｅｒａｔｏｌ７３（２）：１０３−１３（２００５））。

カイ二乗値＝１５．６１有意性＝４．０７６９１５Ｅ−４（ｈｏｍ／ｎ）＝０．０９平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン２から４をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０１１７１９．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプル（骨格筋；骨；および胃；小腸、および結腸以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．４９．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ１７８５１１−２９８６（ＵＮＱ６９７３）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトウイングレス型ＭＭＴＶ組込み部位ファミリー、構成員９Ｂ（ＷＮＴ９Ｂ）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、（−／−）変異型の致死がもたらされた。
遺伝子情報により、この変異によってホモ接合性変異型の致死がもたらされたことが示される。
ヘテロ接合性マウスでは、顕著な表現型は観察されなかった。標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

（ｂ）病理学
顕微鏡的：１２．５日目に、４１個の胚：１０個の（−／−）胚、１８個の（＋／−）胚、７個の（＋／＋）胚、５個の再吸収モル（ｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎｍｏｌｅｓ）および１個の不確定な胚が観察された。
しかしながら、（−／−）胚では、構造的発達異常は検出されなかった。
遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は、免疫組織化学によって組織パネルにおいて検出されなかった。

４８．５０．ＤＮＡ２６９２３８（ＵＮＱ８７８２）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ５７２９０ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ２６９２３８と命名）（ＵＮＱ８７８２）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０３２３９８ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０３２３９８ＮＩＤ：
ｇｉ１４１６１６９７ｒｅｆＮＭ＿０３２３９８．１ムス・ムスクルス細胞膜小胞会合タンパク質（Ｐｌｖａｐ）；参照タンパク質：
Ｑ９９ＪＢ１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９９ＪＢ１ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
ＰＶ１タンパク質；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿０３１３１０ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：ＮＭ＿０３１３１０ＮＩＤ：
ｇｉ１３７７５２３７ｒｅｆＮＭ＿０３１３１０．１ホモ・サピエンス細胞膜小胞会合タンパク質（ＰＬＶＡＰ）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９ＢＸ９７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＢＸ９７ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＰＶ１タンパク質。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＰＬＶＡＰのオルソログであるＰｌｖａｐ（細胞膜小胞会合タンパク質）である。別名としては、ＰＶ−１、ＭＥＣＡ３２、ＰＶ１、ＦＥＬＳ、ｇｐ６８、および有窓内皮関連構造タンパク質が挙げられる。

ＰＬＶＡＰは、小窩の両方の気孔隔膜、経内皮チャネルｓ、および小胞空砲（ｖｅｓｉｃｕｌｏｖａｃｕｏｌａｒ）細胞小器官ならびに内皮窓の隔壁と関連しているＩＩ型内在性原形質膜タンパク質である。該タンパク質は、おそらく、これらの隔壁の形成および構造においてある役割を果たしており、溶質の選択的バリアとしての機能を果たす。
ＰＬＶＡＰは、血液脳関門の発達および微小血管の透過性などのプロセスにおいてある役割を果たしている可能性がある（Ｈａｌｌｍａｎｎｅｔａｌ．，ＤｅｖＤｙｎ２０２（４）：３２５−３２（１９９５）；Ｓｔａｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ７２（３）：３０４−１３（２００１）；Ｓｔａｎ、ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＨｅａｒｔＣｉｒｃＰｈｙｓｉｏｌ２８６（４）：Ｈ１３４７−５３（２００４））。
ＰＬＶＡＰはまた、さまざまな内分泌および非内分泌細胞、例えば、膵島δ細胞、神経葉下垂体細胞、黄体細胞、成体細精管内の生殖細胞、新生児精巣の間質細胞、および発達中の卵胞の卵胞膜細胞層などにおいても発現される（Ｈｎａｓｋｏｅｔａｌ．，ＪＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌ１７５（３）：６４９−６１（２００２））。

カイ二乗値＝１．７７有意性＝０．４１２７１４１８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２２平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０３２３９８．１）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプル（骨以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．５０．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ２６９２３８（ＵＮＱ８７８２）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト細胞膜小胞会合タンパク質（ＰＬＶＡＰ）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、オープンフィールド試験において不安の減少を示す変異型（−／−）マウスがもたらされた。
変異型（−／−）マウスはまた、平均血清グルコースレベルの低下を示した。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）発現
ＵＮＱ８７８２は腎臓明細胞癌において過剰発現される。
［プロトコルの実施例５４および５５を参照］
（ｃ）表現型解析：ＣＮＳ／神経学
神経学の分野において、抑鬱症、全般性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫性障害、精神分裂病、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含む神経性障害および精神医学的障害の処置のためのインビボにおいて有効な標的の同定についての解析に本明細書中では注目
した。神経障害は、「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。その「不安障害」としては、以下：軽度から中程度の不安、全般的病状による不安障害、別段特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖症を伴うパニック障害、広場恐怖症を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質誘導性不安障害、急性アルコール禁断、強迫性障害、広場恐怖症、Ｉ型またはＩＩ型の双極性障害、別段特定されない双極性障害、循環病、抑鬱性障害、大鬱性障害、気分障害、物質誘導性気分障害が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、不安障害は、人格障害にあてはまることがあり、その人格障害としては、以下のタイプ：妄想性、反社会性、回避行動、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、分裂性および統合失調型が挙げられるがこれらに限定されない。

結果：
雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、オープンフィールド試験中の中心にいる時間の合計の中央値の増加を示したことから、変
異体における不安様応答の低下が示唆される。

注目すべき差が、オープンフィールド活動性試験中に観察された。雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、中心領域にいる時間の合計の中央値の増加を示した。これは、変異体における不安様応答の低下を示唆する。したがって、ノックアウトマウスは、抑鬱症、全般性不安障害、認知障害、痛覚過敏ならびに感覚障害および／または双極性障害と一致する表現型を示した。したがって、ＰＲＯ５７２９０ポリペプチドおよびそのアゴニストは、抑鬱性障害に関連する症状の処置または寛解に有用であり得る。

（ｄ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、血糖測定を含む。マウスにおける血液化学試験を実施するためにＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用した。代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。

結果：
雄（−／−）マウスはまた、異常なグルコース代謝および／または糖尿病に関連するものであり得る平均血清グルコースレベルの低下を示した。

これらの研究において、変異型（−／−）マウスは、インスリン感受性の増大のためであり得る血清グルコースレベルの減少を示した。したがって、ＰＲＯ５７２９０ポリペプチドまたはそのコード遺伝子に対するアンタゴニスト（インヒビター）は、損傷したグルコースホメオスタシスの処置に有用であり得る。

４８．５１．ＤＮＡ２２８００２（ＵＮＱ９１２８）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ３８４６５ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ２２８００２と命名）（ＵＮＱ９１２８）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：ＮＭ＿０２７２０９ムス・ムスクルス膜貫通（ｓｐａｎｎｉｎｇ）４−ドメイン、サブファミリーＡ、構成員６Ｂ（Ｍｓ４ａ６ｂ）；参照タンパク質：
Ｑ９９Ｎ０９膜貫通４−ドメインサブファミリーＡ構成員６Ｂｇｉ｜１３６４９４０９｜ｇｂ｜ＡＡＫ３７４１８．１｜ＭＳ４Ａ６Ｂタンパク質［ムス・ムスクルス］；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿１５２８５２ホモ・サピエンス膜貫通４−ドメイン、サブファミリーＡ、構成員６Ａ（ＭＳ４Ａ６Ａ）、転写物改変体１；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ９Ｈ２Ｗ１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９Ｈ２Ｗ１ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
ＣＤＡ０１（ＭＳ４Ａ６Ａ−ＰＯＬＹＭＯＲＰＨ）（ＭＳ４Ａ６Ａタンパク質）。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＭＳ４Ａ６Ａ（膜貫通４−ドメイン、サブファミリーＡ、構成員６Ａ）のオルソログであるＭｓ４ａ６ｂ（膜貫通４−ドメイン、サブファミリーＡ、構成員６Ｂ）である。別名としては、１８１００２７Ｄ１０Ｒｉｋ、ＣＤＡ０１、ＭＳ４Ａ６、４ＳＰＡＮ３、ＣＤ２０Ｌ３、ＭＳＴ０９０、ＭＳＴＰ０９０、４ＳＰＡＮ３．２、ＭＧＣ２２６５０、ＨＡＩＲＢ−ｉｓｏ、ＭＳ４Ａ６Ａ−多型形、ＣＤ２０様前駆体、４回膜貫通タンパク質３．１、および４回膜貫通タンパク質３．２が挙げられる。

ＭＳ４Ａ６Ａは、おそらくシグナル伝達受容体複合体の一成分としての機能を果たしている内在性原形質膜タンパク質である。該タンパク質は、ＣＤ２０／ＩｇＥＦｃ受容体
βサブユニットファミリードメイン内の４回膜貫通セグメントからなる。
このドメインを有するタンパク質としては、細胞表面受容体サブユニットＣＤ２０、高親和性ＩｇＥ受容体β鎖、およびＨＴｍ４が挙げられ、これらは、造血系細胞上で発現される。ＭＳ４Ａ６Ａの種々の発現が、一部のＢ細胞、骨髄単球性および赤白血病細胞株において明白であった（ＬｉａｎｇａｎｄＴｅｄｄｅｒ、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ７２（２）：１１９−２７（２００１）；Ｉｓｈｉｂａｓｈｉｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ２６４（１）：８７−９３（２００１））。

カイ二乗値＝０．２１有意性＝０．９００３２４５（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２５平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１〜３をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２７２０９．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、２６のすべての成体組織サンプル（骨および喘息の肺以外）において標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．５１．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ２２８００２（ＵＮＱ９１２８）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒト膜貫通４−ドメイン、サブファミリーＡ、構成員６Ａ（ＭＳ４Ａ６Ａ）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、平均血清グルコースの増加および耐糖能障害を伴うインスリンレベルの減少を示す（−／−）マウスがもたらされた。変異型（−／−）マウスはまた、皮膚線維芽細胞増殖の減少を示した。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）発現
ＵＮＱ９１２８は、卵巣腫瘍（乳頭を含む漿液性嚢胞腺癌）において過剰発現される。［プロトコルの実施例５４および５５を参照］
（ｃ）
血液化学／耐糖能
代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、血糖測定を含む。マウスにおける血液化学試験を実施するためにＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用した。代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、インスリン感度およびグルコース代謝の変化を測定する耐糖能試験を含む。異常な耐糖能試験結果は、以下の障害または状態
：１型糖尿病および２型糖尿病、シンドロームＸ、様々な循環器疾患および／または肥満症を示唆し得るが、これらに限定されない。

結果：
血糖値／耐糖能試験：
（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、耐糖能障害を示した。（−／−）マウスは、平均絶食時血清中グルコースレベルの上昇を示した。

これらの研究では、（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、試験した３つ全ての間隔で正常な空腹時血糖の存在下で耐糖能が減少を示したかまたは耐糖能障害を示した。したがって、ノックアウト変異マウスは、グルコースホメオスタシス障害の表現型パターンを示し、それゆえ、ＰＲＯ３８４９６ポリペプチド（またはそのアゴニスト）またはそれをコードする遺伝子は、グルコースホメオスタシス障害および／または糖尿病を含む様々な循環器疾患に関連した状態の処置に有用であり得る。

インスリンデータ：
試験の説明：ＬｅｘｉｃｏｎＧｅｎｅｔｉｃｓは、マウスにおける定量的インスリンアッセイの実施のための臨床的状況で、ＣｏｂｒａＩＩシリーズ自動γカウンティングシステムを使用する。

結果：
インスリン：（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清インスリンレベルが減少した。

血清グルコースレベル
結果：
ホモ接合性（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清グルコースレベルの増加を示した。

したがって、変異型（−／−）マウスは、グルコース代謝の変化と関連する高血糖症または糖尿病を示した。
ＰＲＯ３８４６５ポリペプチドまたはそのアゴニストは、正常なグルコースレベル／代謝の維持に有用であり得、おそらく糖尿病の処置に有用であり得る。
これらの結果は、変異型（−／−）マウスにおいて観察されたインスリンレベルの減少と一致する。

結果：
雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、平均皮膚線維芽細胞増殖速度の減少を示した。

したがって、ホモ接合性変異マウスは、低増殖表現型を示した。これらの観察結果により示唆されるように、ＰＲＯ３８４６５ポリペプチドのアンタゴニストまたはインヒビターは、この低増殖表現型を模倣し、腫瘍抑制因子として機能することができ、異常な細胞増殖の減少に有用であろう。

４８．５２．ＤＮＡ２２８１９９（ＵＮＱ９６３８）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ３８６８３ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ２２８１９９と命名）（ＵＮＱ９６３８）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＸＭ＿３５７９８６ＰＲＥＤＩＣＴＥＤ：
ムス・ムスクルスＲＩＫＥＮｃＤＮＡ１１１０００８Ｉ１４遺伝子（１１１０００８Ｉ１４Ｒｉｋ）；参照タンパク質：
ＸＰ＿３５７９８６ＭＵＣ１６［ムス・ムスクルス］；参照ヒト遺伝子配列：
ＡＦ４１４４４２ホモ・サピエンス卵巣癌関連腫瘍マーカーＣＡ１２５ｍＲＮＡ、完全ｃｄｓ；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ８ＷＸＩ７ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＷＸＩ７ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
卵巣癌関連腫瘍マーカーＣＡ１２５。

目的のマウス遺伝子は、ヒトＭＵＣ１６（ムチン１６）のオルソログであるＲＩＫＥＮ
ｃＤＮＡ１１１０００８Ｉ１４遺伝子である。別名としては、ＣＡ１２５、ＦＬＪ１４３０３、およびＣＡ１２５卵巣癌抗原が挙げられる。

ＭＵＣ１６は、さまざまな上皮において発現され、上皮卵巣癌細胞において過剰発現される内在性原形質膜巨大糖タンパク質である。該タンパク質は、大きなＮ末端細胞外セグメント、膜貫通セグメント、および短いＣ末端細胞質ドメインからなる。
該細胞外Ｎ末端のセグメントは、選択的なスプライシングのため長さが種々であるが、２０，０００もの多くのアミノ酸からなるものであり得る。
このセグメントは高度にＯ−グリコシル化され、多くのセリンおよびトレオニン残基を含む。該細胞外セグメントは、Ｎ末端ドメインおよび原形質膜付近のＳＥＡドメイン（ウニ精子タンパク質、エンテロキナーゼ、アグリンに見られるドメイン）の４０〜６０もの多くのタンデム反復配列からなる。
ＳＥＡドメインは、一般的に、高度にグリコシル化されたタンパク質において見られ、おそらく、隣接分子上の糖鎖との結合に関与している（ＳＭＡＲＴアクセッションＳＭ００２００）。
ＭＵＣ１６の細胞外セグメントは、タンパク質分解性切断によって細胞外空間内に放出され得る（Ｏ’Ｂｒｉｅｎｅｔａｌ．，ＴｕｍｏｕｒＢｉｏｌ２２（６）：３４８
−６６（２００１）；Ｏ’Ｂｒｉｅｎｅｔａｌ．，ＴｕｍｏｕｒＢｉｏｌ２３（３）：１５４−６９（２００２））。
ＭＵＣ１６は、おそらく、免疫抑制および生殖能力、母性免疫応答からの胚の保護に関与している。
上皮卵巣腫瘍細胞におけるＭＵＣ１６の上方調節により、細胞傷害性Ｔ細胞およびナチュラルキラー細胞の回避が可能となり得る（ＫｕｉＷｏｎｇｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７８（３１）：２８６１９−３４（２００３））。
さらに、ＭＵＣ１６は、異型細胞接着および転移においてある役割を果たしている可能性がある（Ｒｕｍｐｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２７９（１０）：９１９０−８（２００４））。

カイ二乗値＝１．２６有意性＝０．５３２５９１８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２２平均同腹仔数＝９
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：
コードエキソン６０−６３を標的化した（ＮＣＢＩアクセッションＸＭ＿３５７９８６．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された、胚性幹細胞（ＥＳ）細胞および１３のすべての成体組織サンプルに（脳、骨格筋、および骨以外）おいて標的遺伝子の発現を検出した。
さらなるＲＴ−ＰＣＲ試験により、（＋／＋）マウス由来の正常なＲＮＡ組織における発現が、以下の通りに示された。雄（＋／＋）マウスでは心臓、肺、精巣および精管；雌（＋／＋）マウスでは心臓、肺、卵巣／卵管（ファローピウス管を含む）および子宮。
２．ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．５２．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ２２８１９９（ＵＮＱ９６３８）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトムチン１６（ＭＵＣ１６）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、皮膚線維芽細胞増殖割合の減少を示す（−／−）マウスがもたらされた。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）成体皮膚細胞増殖：
手順：皮膚細胞を１６週齢の動物（２匹の野生型マウスおよび４匹のホモ接合性マウス）から単離した。これらを、初代線維芽細胞培養物に発達させて、その線維芽細胞増殖速
度を厳密に制御されたプロトコルにおいて測定した。このアッセイが過剰増殖性表現型および低増殖性表現型を検出する能力は、ｐ５３およびＫｕ８０で証明されている。Ｂｒｄｕ取り込みを使用して増殖を測定した。

結果：雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔と比較して、平均皮膚線維芽細胞増殖速度の減少を示した。

したがって、ホモ接合性変異マウスは、低増殖性表現型を示した。これらの観察結果により示唆されるように、ＰＲＯ３８６８３ポリペプチドのアンタゴニストまたはインヒビターは、腫瘍サプレッサーとして機能し得、異常な細胞増殖を低下させるのに有用であり得る。

４８．５３．ＤＮＡ３２９６３２（ＵＮＱ１６１６８）遺伝子が破壊されたマウスの作製および解析
これらのノックアウト実験において、ＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードする遺伝子（ＤＮＡ３２９６３２と命名）（ＵＮＱ１６１６８）を破壊した。これらの研究のための遺伝子特異的情報は、以下のとおりである：変異されたマウス遺伝子は、次のものに対応する：参照ヌクレオチド：
ＮＭ＿０２７０２２ムス・ムスクルスケモカイン様因子スーパーファミリー２Ａ（Ｃｋｌｆｓｆ２ａ）；参照タンパク質：
Ｑ９ＤＡＲ１ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ９ＤＡＲ１ＮＩＤ：
ムス・ムスクルス（マウス）。
１７００００１Ｋ０４Ｒｉｋタンパク質；参照ヒト遺伝子配列：
ＮＭ＿１４４６７３ホモ・サピエンスケモカイン様因子スーパーファミリー２（ＣＫＬＦＳＦ２）；ヒトタンパク質配列は、次のものに対応する：
Ｑ８ＴＡＺ６ＡＣＣＥＳＳＩＯＮ：Ｑ８ＴＡＺ６ＮＩＤ：
ホモ・サピエンス（ヒト）。
推定（ケモカイン様因子スーパーファミリー２）と類似。

目的のマウス遺伝子は、Ｃｋｌｆｓｆ２ａ（ケモカイン様因子スーパーファミリー２Ａ）、ヒトＣＫＬＦＳＦ２（ケモカイン様因子スーパーファミリー２）のオルソログである。
別名としては、Ｃ３２、Ｃｋｌｆ、ＡＲＲ１９、ＣＫＬＦ３、ＣＫＬＦ４、ＣＫＬＦ５、Ｃｋｌｆ１、ＵＣＫ−１、Ｃｋｌｆｓｆ２−１ｂ、１７００００１Ｋ０４Ｒｉｋ、１７０００４１Ｎ１５Ｒｉｋ、１７０００６３Ｋ２０Ｒｉｋ、ケモカイン様因子、ケモカイン様因子スーパーファミリー２−１ｂ、ＦＬＪ２５７３２、ＭＧＣ３９４３６およびＣＫＬＦＳＦ２−ｖ２が挙げられる。

ＣＫＬＦＳＦ２は、主に精巣および前立腺で発現される内在性膜タンパク質である。該タンパク質は、４つの膜貫通セグメントをＭＡＲＶＥＬ（膜会合性）ドメイン内に含む。ＭＡＲＶＥＬドメインを有するタンパク質は、膜同格事象（例えば、輸送小胞生物発生）において機能し得る（ＰＦＡＭアクセッションＰＦ０１２８４）。

ＣＫＬＦＳＦ２は細胞質に存在するが、アンドロゲン活性化アンドロゲン受容体と複合体
を形成した後、核に転位する。ＣＫＬＦＳＦ２は、ヒストンデアセチラーゼ４を漸増させることによりアンドロゲン受容体のトランス活性化を抑制し得るものである。したがって、ＣＫＬＦＳＦ２は、アンドロゲン受容体コリプレッサーとしての機能を果たすようである。バイオインフォマティック解析により、ＣＫＬＦＳＦ２は原形質膜内に存在することが示唆される。ＣＫＬＦＳＦ２は、細胞増殖、細胞分化および雄の生殖プロセスに関与している可能性がある（Ｘｉａｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ１５９１（１−３）：１６３−１７３（２００２）；Ｒｕｉｅｔａｌ．，Ｍｏｌ
ＢｉｏｌＲｅｐ３０（４）：２２９−３７（２００３）；Ｈａｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ８１（６）：６０９−１７（２００３）；Ｊｅｏｎｇｅｔａｌ．，ＭｏｌＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌ１８（１）：１３−２５（２００４））。

カイ二乗値＝２．４１有意性＝０．２９９６９１９８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２５平均同腹仔数＝８
変異情報
変異型：相同組換え（標準）
説明：コードエクソン１および２をターゲティングした（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ＿０２７０２２．２）。
１．野生型発現パネル：ＲＴ−ＰＣＲによって試験された１３の成体組織サンプルのうち、脳のみにおいて標的遺伝子の発現を検出した。
２．ＱＣ発現：ＱＣ画像：標的遺伝子の破壊をサザンハイブリダイゼーション解析によって確認した。

４８．５３．１．表現型解析（破壊遺伝子：ＤＮＡ３２９６３２（ＵＮＱ１６１６８）
（ａ）全体的な表現型の概要：
ヒトケモカイン様因子スーパーファミリー２（ＣＫＬＦＳＦ２）のオルソログをコードする遺伝子の変異により、アルカリホスファターゼレベルの増加および体脂肪の増加を示す（−／−）マウスがもたらされた。
遺伝子破壊をサザンブロットによって確認した。

（ｂ）表現型解析：代謝−血液化学
代謝の分野において、糖尿病の処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、血糖測定を含む。マウスにおける血液化学試験を実施するためにＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を使用した。血糖値の測定に加えて、以下の血液化学試験もまた日常的に行う：アルカリホスファターゼ；アラニンアミノ−トランスフェラーゼ；アルブミン；ビリルビン；亜リン酸；クレアチニン；ＢＵＮ＝血中尿素窒素；カルシウム；尿酸；ナトリウム；カリウム；および塩化物。代謝の分野において、糖尿病の
処置のための標的を同定し得る。血液化学表現型解析は、インスリン感受性およびグルコース代謝の変化を測定するための耐糖能試験を含む。耐糖能試験の異常な結果は、以下の障害または容態を示し得るが、これらに限定されない：１型および２型糖尿病、症候群Ｘ、種々の心血管疾患、および／または肥満症。

結果：
雄（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較した場合、平均血清アルカリホスファターゼの増加を示した。

（ｃ）骨代謝および放射線表現型解析
骨代謝の分野において、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症および大理石骨病の処置のため、ならびに骨の治癒を促進する標的を同定するための標的を本明細書中で同定した。試験は：
・大腿骨および椎骨における骨塩密度を測定するためのＤＥＸＡ
・骨梁と皮質骨の両方についての骨塩密度を非常に高い解像度および非常に高い感度で測定するためのマイクロＣＴ
を含んだ。

結果：
Ｄｅｘａ：雌（−／−）マウスは、その性別一致（＋／＋）同腹仔および歴史的平均と比較して、平均総体脂肪パーセントおよび総脂肪質量の増加を示した。

これらの研究から、変異（−／−）非ヒトトランスジェニック動物が、肥満症に関連し得る負の表現型を示すことが示唆される。したがって、ＰＲＯ８５１６１ポリペプチドまたはそのアゴニストは、正常な成長および代謝プロセスに必須であり、特に肥満症の予防および／または処置に重要であり得る。

実施例４９：
ハイブリダイゼーションプローブとしてのＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５
９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１の使用
以下の方法は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列のハイブリダイゼーションプローブとしての使用を示す。

本明細書中に開示した完全長または成熟ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのコード配列を含むＤＮＡは、ヒト組織ｃＤＮＡライブラリーまたはヒト組織ゲノムライブラリーにおいて、相同なＤＮＡ（例えば、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの天然に存在する改変体をコードするものなど）をスクリーニングするためのプローブとして使用される。

いずれかのライブラリーＤＮＡを含むフィルターのハイブリダイゼーションおよび洗浄は、下記の高ストリンジェンシー条件下で行う。
放射能標識ＰＲＯ２２６−、ＰＲＯ２５７−、ＰＲＯ２６８−、ＰＲＯ２９０−、ＰＲＯ３６００６−、ＰＲＯ３６３−、ＰＲＯ３６５−、ＰＲＯ３８２−、ＰＲＯ４４４−、ＰＲＯ７０５−、ＰＲＯ１０７１−、ＰＲＯ１１２５−、ＰＲＯ１１３４−、ＰＲＯ１１５５−、ＰＲＯ１２８１−、ＰＲＯ１３４３−、ＰＲＯ１３７９−、ＰＲＯ１３８０−、ＰＲＯ１３８７−、ＰＲＯ１４１９−、ＰＲＯ１４３３−、ＰＲＯ１４７４−、ＰＲＯ１５
５０−、ＰＲＯ１５７１−、ＰＲＯ１５７２−、ＰＲＯ１７５９−、ＰＲＯ１９０４−、ＰＲＯ３５１９３−、ＰＲＯ４３４１−、ＰＲＯ４３４８−、ＰＲＯ４３６９−、ＰＲＯ４３８１−、ＰＲＯ４４０７−、ＰＲＯ４４２５−、ＰＲＯ４９８５−、ＰＲＯ４９８９−、ＰＲＯ５７３７−、ＰＲＯ５８００−、ＰＲＯ５９９３−、ＰＲＯ６０１７−、ＰＲＯ７１７４−、ＰＲＯ９７４４−、ＰＲＯ９８２１−、ＰＲＯ９８５２−、ＰＲＯ９８７３−、ＰＲＯ１０１９６−、ＰＲＯ３４７７８−、ＰＲＯ２０２３３−、ＰＲＯ２１９５６−、ＰＲＯ５７２９０−、ＰＲＯ３８４６５−、ＰＲＯ３８６８３− またはＰＲＯ８５１６１由来プローブのフィルターへのハイブリダイゼーションは、５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、０．１％ピロリン酸ナトリウム、５０ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ６．８、２×デンハルト溶液および１０％硫酸デキストランの溶液中、４２℃で２０時間行なわれる。
フィルターの洗浄は、０．１×ＳＳＣおよび０．１％ＳＤＳの水溶液中、４２℃で行う
完全長の天然の配列ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするＤＮＡと所望の配列同一性を有するＤＮＡが、次いで、当該技術分野で知られた標準技術を用いて同定され得る。

実施例５０：
大腸菌でのＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１の発現
この実施例は、大腸菌での組換え発現によるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの非グリコシル化形態の調製を示す。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドをコードするＤＮＡ配列を、まず、選択したＰＣＲプライマーを用いて増幅させる。プライマーは、選択した発現ベクター上の制限酵素部位に対応する制限酵素部位を含む必要がある。さまざまな発現ベクターを使用し得る。適当なベクターの一例は、アンピシリンおよびテトラサイクリン耐性の遺伝子を含むｐＢＲ３２２（大腸菌由来；Ｂｏｌｉｖａｒｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ、２：９５（１９７７）を参照）である。ベクターを制限酵素で消化し、脱ホスホリル化する。ＰＣＲ増幅された配列を、次いで、ベクター内にライゲートする。
該ベクターは、好ましくは、抗生物質耐性遺伝子、ｔｒｐプロモーター、ポリヒスリーダー（最初の６つのＳＴＩＩコドン、ポリヒス配列およびエンテロキナーゼ切断部位を含む）、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１コード領域、λ転写ターミネーターならびにａｒｇＵ遺伝子をコードする配列を含む。

次いで、ライゲーション混合物を用い、選択した大腸菌系統をＳａｍｂｒｏｏｋｅｔ
ａｌ．（前出）に記載の方法を用いて形質転換する。形質転換体を、ＬＢプレート上でのその生育能力によって同定し、次いで抗生物質耐性コロニーを選択する。プラスミドＤＮＡを、制限解析によって単離し、ＤＮＡ配列決定によって確認し得る。

選択されたクローンは、液体培養培地（例えば、抗生物質を加えたＬＢブロスなど）中で一晩培養し得る。一晩培養物は、続いて大規模培養物にイノキュレートするために使用され得る。次いで、細胞を所望の光学密度まで培養し、この間に発現プロモーターが作動する。

細胞をさらに数時間培養した後、細胞を、遠心分離によって回収し得る。
遠心分離によって得られた細胞ペレットは、当該技術分野で知られた種々の薬剤を用いて可溶化され得、可溶化されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ
１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１タンパク質は、次いで、タンパク質の強固な結合を可能にする条件下で金属キレートカラムを用いて精製され得る。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１は、大腸菌においてポリ−ヒスタグ化形態で、以下の手順を用いて発現させ得る。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１をコードするＤＮＡを、まず、選択したＰＣＲプライマーを用いて増幅させる。プライマーは、選択した発現ベクター上の制限酵素部位に対応する制限酵素部位、ならびに効率的で信頼性のある翻訳の開始、金属キレートカラム上での速やかな精製およびエンテロキナーゼによるタンパク質分解的除去をもたらすのに有用な他の配列を含む。次いで、ＰＣＲ増幅されたポリ−Ｈｉｓタグ化配列を発現ベクター内にライゲートし、これを用いて菌株５２（Ｗ３１１０ｆｕｈＡ（ｔｏｎＡ）ｌｏｎｇａｌＥｒｐｏＨｔｓ（ｈｔｐＲｔｓ）ｃｌｐＰ（ｌａｃＩｑ）系の大腸菌宿主を形質転換する。形質転換体を、まず、５０ｍｇ／ｍＬのカルベニシリンを含有するＬＢ中にて３０℃で、振とうさせながら３〜５のＯ．Ｄ．６００が達成されるまで培養する。次いで、培養物をＣＲＡＰ培地（３．５７ｇの（ＮＨ_４）_２ＳＯ_４、０．７１ｇのクエン酸ナトリウム・２Ｈ２Ｏ、１．０７ｇのＫＣｌ、５．３６ｇのＤｉｆｃｏ製酵母抽出物、５．３６ｇのＳｈｅｆｆｉｅｌｄｈｙｃａｓｅＳＦ（５００ｍＬの水中）、ならびに１１０ｍＭのＭＰＯＳ、ｐＨ７．３、０．５５％（ｗ／ｖ）のグルコースおよび７ｍＭのＭｇＳＯ_４を混合することにより調製）中で５０〜１００倍に希釈し、およそ２０〜３０時間３０℃で、振とうさせながら培養する。試料を取り出し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ解析によって発現を確認し、バルク培養物を遠心分離して細胞をペレット化する。細胞ペレットは、精製およびリフォールディングまで凍結しておく。

０．５〜１Ｌの発酵物からの大腸菌ペースト（６〜１０ｇのペレット）を１０容量（ｗ
／ｖ）で７Ｍグアニジン、２０ｍＭＴｒｉｓ（ｐＨ８）バッファー中に再懸濁する。固形亜硫酸ナトリウムおよび四チオン酸ナトリウムを、それぞれ、終濃度が０．１Ｍおよび０．０２Ｍとなるように添加し、溶液を一晩４℃で攪拌する。この工程により、すべてのシステイン残基がスルフィトリル化（ｓｕｌｆｉｔｏｌｉｚａｔｉｏｎ）によってブロックされた変性タンパク質がもたらされる。この溶液を４０，０００ｒｐｍで、Ｂｅｃｋｍａｎ超遠心分離機にて３０分間遠心分離する。上清みを３〜５容量の金属キレートカラムバッファー（６Ｍグアニジン、２０ｍＭＴｒｉｓ、ｐＨ７．４）で希釈し、０．２２ミクロンフィルターに通して濾過して清澄化する。清澄化された抽出物を、金属キレートカラムバッファー中で平衡化した５ｍＬ容ＱｉａｇｅｎＮｉ−ＮＴＡ金属キレートカラム上に負荷する。カラムを５０ｍＭイミダゾール（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ，Ｕｔｒｏｌグレード）を含有するさらなるバッファー（ｐＨ７．４）で洗浄する。タンパク質を、２５０ｍＭイミダゾールを含有するバッファーで溶出する。所望のタンパク質を含む画分をプールし、４℃で保存する。タンパク質濃度を、そのアミノ酸配列に基づいて計算された消衰係数を用い、２８０ｎｍにおけるその吸光度によって推定する。

タンパク質を、２０ｍＭＴｒｉｓ（ｐＨ８．６）、０．３ＭＮａＣｌ、２．５Ｍの尿素、５ｍＭのシステイン、２０ｍＭのグリシンおよび１ｍＭＥＤＴＡからなる新たに調製したリフォールディングバッファー中に試料をゆっくり希釈することによりリフォールディングさせる。リフォールディング容量は、最終タンパク質濃度が５０〜１００マイクログラム／ｍＬとなるように選択される。リフォールディング溶液は、１２〜３６時間４℃で穏やかに攪拌する。リフォールディング反応を、終濃度０．４％（およそ３のｐＨ）までＴＦＡを添加することによってクエンチする。タンパク質のさらなる精製の前に、溶液を０．２２ミクロンフィルターに通して濾過し、アセトニトリルを２〜１０％の終濃度まで添加する。リフォールディングさせたタンパク質をＰｏｒｏｓＲ１／Ｈ逆相カラム上で、０．１％ＴＦＡの移動相バッファーを用い、１０〜８０％のアセトニトリルの勾配での溶出を伴ってクロマトグラフィー処理する。Ａ２８０吸光度を有する画分のアリコートをＳＤＳポリアクリルアミドゲル上で解析し、均質なリフォールディングタンパク質を含む画分をプールする。一般的に、大部分のタンパク質が適正にリフォールディングされた種は、その疎水性内部が最も緻密であり、逆相樹脂との相互作用から遮断されるため、最低濃度のアセトニトリルで溶出される。凝集した種は、通常、より高いアセトニトリル濃度で溶出される。ミスフォールド形態のタンパク質を所望の形態から分離することに加え、逆相工程ではまた、内毒素を試料から除去する。

所望のフォールドされたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを含有する画分をプールし、アセトニトリルを、該溶液に指向した穏やかな窒素流を用いて除去する。透析によって、または構築バッファー中で平衡化したＧ２５Ｓｕｐｅｒｆｉｎｅ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）樹脂を用いたゲル濾過によって、０．１４Ｍの塩化ナトリウムおよび４％マンニトールを含む２０ｍＭＨｅｐｅｓ（ｐＨ６．８）中にタンパク質を構築し、滅菌濾過する。

実施例５１：
哺乳動物細胞でのＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１の発現
この実施例は、哺乳動物細胞での組換え発現による、おそらくグリコシル化された形態のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの調製を示す。

ベクターｐＲＫ５（ＥＰ３０７，２４７（１９８９年３月１５日公開）を参照のこと）を発現ベクターとして使用する。
任意選択で、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ＤＮＡを、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ＤＮＡの挿入を可能にする選択した制限酵素を有するｐＲＫ５内に、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（前出）に記載のものなどのライゲー
ション方法を用いてライゲートさせる。得られたベクターを、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２２６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２５７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２６８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２９０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３６００６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３６３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３６５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３８２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ７０５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０７１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１３４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１５５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１２８１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３４３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３７９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３８０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３８７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４１９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４３３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４７４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５５０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５７１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５７２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１７５９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１９０４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３５１９３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３４１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３４８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３６９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３８１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４０７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４９８５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４９８９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５７３７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５８００、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５９９３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６０１７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ７１７４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９７４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８２１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８５２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８７３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０１９６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３４７７８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２０２３３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２１９５６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５７２９０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３８４６５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３８６８３またはｐＲＫ５−ＰＲＯ８５１６１と呼ぶ。

選択される宿主細胞は２９３細胞であり得る。ヒト２９３細胞（ＡＴＣＣＣＣＬ１５７３）を組織培養プレート内で、ウシ胎仔血清ならびに任意選択で栄養成分および／または抗生物質を補給したＤＭＥＭなどの培地中でコンフルエンスまで培養する。
約１０μｇのｐＲＫ５−ＰＲＯ２２６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２５７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２６８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２９０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３６００６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３６３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３６５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３８２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ７０５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０７１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１３４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１５５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１２８１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３４３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３７９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３８０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３８７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４１９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４３３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４７４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５５０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５７１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５７２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１７５９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１９０４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３５１９３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３４１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３４８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３６９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３８１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４０７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４９８５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４９８９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５７３７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５８００、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５９９３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６０１７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ７１７４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９７４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８２１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８５２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８７３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０１９６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３４７７８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２０２３３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２１９５６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５７２９０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３８４６５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３８６８３またはｐＲＫ５−ＰＲＯ８５１６１ＤＮＡを、ＶＡＲＮＡ遺伝子［Ｔｈｉｍｍａｐｐａｙａｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ、３１：５４３（１９８２）］をコードするＤＮＡ約１μｇと混合し、５００μｌの１ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ、０．１ｍＭＥＤＴＡ、０．２２７ＭＣａＣｌ_２に溶解する。
この混合物に、５００μＬの５０ｍＭＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３５）、２８０ｍＭＮａＣｌ、１．５ｍＭＮａＰＯ_４を滴下し、２５℃で１０分間、沈殿物を形成させる。沈殿物を懸濁して２９３細胞に添加し、３７℃で約４時間沈降させる。培養培地を吸引除去し、２ｍＬの２０％グリセロール含有ＰＢＳを３０秒間添加する。次いで、２９３細胞を血清無含有培地で洗浄し、新鮮培地を添加し、細胞を約５日間インキュベートする。

トランスフェクションのおよそ２４時間後、培養培地を除去し、培養培地（単独）または２００μＣｉ／ｍＬの^３５Ｓ−システインおよび２００μＣｉ／ｍＬの^３５Ｓ−メチオニンを含有する培養培地と交換する。１２時間のインキュベーション後、ならし培地を回収し、スピンフィルターにて濃縮し、１５％ＳＤＳゲル上に負荷する。
処理したゲルは、選択した時間、乾燥させ、フィルムに露光してＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの存在を顕現させ得る。トランスフェクト細胞を含む培養物は、さらなるインキュベーション（血清無含有培地中）に供してもよく、培地を、選択したバイオアッセイにおいて試験する。

択一的な技術の一例では、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１を、Ｓｏｍｐａｒｙｒａｃｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、１２：７５７５（１９８１）に記載された硫酸デキストラン法を用いて２９３細胞内に一過的に導入させ得る。２９３細胞を、最大密度までスピナーフラスコ内で培養し、７００μｇのｐＲＫ５−ＰＲＯ２２６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２５７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２６８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２９０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３６００６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３６３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３６５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３８２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ７０５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０７１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１３４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１５５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１２８１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３４３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３７９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３８０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３８７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４１９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４３３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４７４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５５０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５７１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５７２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１７５９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１９０４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３５１９３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３４１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３４８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３６９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３８１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４０７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４９８５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４９８９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５７３７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５８００、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５９９３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６０１７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ７１７４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９７４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８２１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８５２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８７３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０１９６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３４７７８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２０２３３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２１９５６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５７２９０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３８４６５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３８６８３または
ｐＲＫ５−ＰＲＯ８５１６１ＤＮＡを添加する。該細胞を、まず、スピナーフラスコから遠心分離によって濃縮し、ＰＢＳで洗浄する。ＤＮＡ−デキストラン沈殿物を、細胞ペレット上で４時間インキュベートする。細胞を２０％グリセロールで９０秒間処理し、組織培養培地で洗浄し、組織培養培地、５μｇ／ｍＬウシインスリンおよび０．１μｇ／ｍＬウシトランスフェリンを入れたスピナーフラスコ内に再導入する。約４日後、ならし培地を遠心分離し、濾過して細胞および残屑を除去する。
発現されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１を含有する試料は、次いで、任意の選択した方法、例えば、透析および／またはカラムクロマトグラフィーなどによって濃縮および精製され得る。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１は、ＣＨＯ細胞において発現され得る。
ｐＲＫ５−ＰＲＯ２２６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２５７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２６８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２９０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３６００６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３６３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３６５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３８２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ７０５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０７１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１３４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１５５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１２８１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３４３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３７９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３８０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３８７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４１９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４３３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４７４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５５０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５７１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５７２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１７５９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１９０４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３５１９３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３４１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３４８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３６９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３８１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４０７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４９８５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４９８９、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５７３７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５８００、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５９９３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６０１７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ７１７４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９７４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８２１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８５２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８７３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０１９６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３４７７８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２０２３３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２１９５６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５７２９０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３８４６５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３８６８３またはｐＲＫ５−ＰＲＯ８５１６１でＣＨＯ細胞を、ＣａＰＯ_４またはＤＥＡＥ−デキストランなど
の既知の試薬を用いてトランスフェクトし得る。上記のように、細胞培養物をインキュベートすることができ、培地は培養培地（単独）または^３５Ｓ−メチオニンなどの放射能標識を含有する培地と交換することができる。
ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの存在を調べた後、培養培地を、血清無含有培地と交換してもよい。
好ましくは、培養物を約６日間インキュベートし、次いで、ならし培地を回収する。
発現されたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１を含む培地は、次いで、任意の選択した方法によって濃縮および精製され得る。

エピトープタグ化ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１も、宿主ＣＨＯ細胞において発現させ得る。
ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９
６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１を、ｐＲＫ５ベクターからサブクローニングしてもよい。
サブクローン挿入物はＰＣＲに供し、インフレームで、選択したエピトープタグ（例えば、ポリ−Ｈｉｓタグなど）とともにバキュロウイルス発現ベクター内に融合させ得る。
ポリ−ヒスタグ化ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１挿入物は、次いで、安定なクローンの選択のためのＤＨＦＲなどの選択マーカーを含むＳＶ４０駆動ベクター内にサブクローニングされ得る。
最後に、ＣＨＯ細胞にＳＶ４０駆動ベクターをトランスフェクトさせ得る（上記のようにして）。標識化は、上記のように、発現を確認するために行い得る。
発現されたポリ−ヒスタグ化ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１を含む培養培地は、次いで、任意の選択した方法、例えば、Ｎｉ^２＋−キレートアフィニティクロマトグラフィーなどによって濃縮および精製され得る。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１も、ＣＨＯおよび／またはＣＯＳ細胞において一過的発現手順によって、あるいはＣＨＯ細胞において別の安定な発現手順によって発現され得る。

ＣＨＯ細胞における安定な発現は、下記の手順を用いて行われる。タンパク質はＩｇＧ構築物（イムノアドヘシン）として発現させ、それぞれのタンパク質の可溶性形態のコー
ド配列（例えば、細胞外ドメイン）を、ヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ２ドメインを含有するＩｇＧ１定常領域配列と融合させる、および／またはポリ−Ｈｉｓタグ化された形態である。

ＰＣＲ増幅後、それぞれのＤＮＡを、ＣＨＯ発現ベクター内に、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔ
ａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，Ｕｎｉｔ３．１６，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ（１９９７）に記載のような標準的は手法を用いてサブクローニングする。ＣＨＯ発現ベクターは、ｃＤＮＡの簡便なシャトリングが可能となるように目的のＤＮＡの５’および３’側に適合性の制限部位を有するように構築する。ＣＨＯ細胞における発現に使用されるベクターは、Ｌｕｃａｓｅｔａｌ．Ｎｕｃｌ．ＡｃｉｄｓＲｅｓ．２４：９（１７７４−１７７９（１９９６）に記載されているとおりであり、対象のｃＤＮＡおよびジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ）の発現を駆動するためのＳＶ４０初期プロモーター／エンハンサーを使用する。ＤＨＦＲ発現により、トランスフェクション後のプラスミドの安定な維持のための選択が可能になる。

１２マイクログラムの所望のプラスミドＤＮＡを、およそ１０００００００個のＣＨＯ細胞内に、市販のトランスフェクション試薬Ｓｕｐｅｒｆｅｃｔ（登録商標）（Ｑｉａｇｅｎ）、Ｄｏｓｐｅｒ（登録商標）またはＦｕｇｅｎｅ（登録商標）（ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ）を用いて導入する。細胞を、Ｌｕｃａｓｅｔａｌ．（前出）に記載のようにして培養する。およそ３×１０^７細胞を、下記のようなさらなる培養および生成のために、アンプル内で凍結させる。

プラスミドＤＮＡの入ったアンプルを、水浴内への配置によって解凍し、ボルテックスによって混合する。内容物を、１０ｍＬの培地を入れた遠心分離チューブ内にピペッティングし、１０００ｒｐｍで５分間遠心分離する。上清みを吸引し、細胞を１０ｍＬの選択培地（５％の０．２μｍ透析濾過ウシ胎児血清含有０．２μｍ濾過ＰＳ２０）中に再懸濁する。次いで、細胞のアリコートを、９０ｍＬの選択培地を入れた１００ｍＬ容量のスピナー内に採取する。１〜２日後、細胞を、１５０ｍＬの選択培養培地で満たした２５０ｍＬ容量のスピナー内に移し、３７℃でインキュベートする。さらに２〜３日後、２５０ｍＬ、５００ｍＬおよび２０００ｍＬ容量のスピナーに３×１０^５細胞／ｍＬを播種する。細胞培地を新たな培地と、遠心分離および生産培地中への再懸濁によって交換する。任意の適当なＣＨＯ培地を使用し得るが、米国特許第５，１２２，４６９号（１９９２年６月１６日発行）に記載の生産培地を実際に使用することができる。３Ｌ容量の生産用スピナーに１．２×１０^６細胞／ｍＬで播種する。第０日目、細胞数ｐＨを測定する（ｉｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ）。第１日目、スピナーから試料を採取し、濾過空気でのスパージングを開始する。第２日目、スピナーから試料を採取し、温度を３３℃にシフトし、３０ｍＬの５００ｇ／Ｌグルコースおよび０．６ｍＬの１０％消泡剤（例えば、３５％ポリジメチルシロキサンエマルジョン、ＤｏｗＣｏｒｎｉｎｇ３６５医薬グレードＥｍｕｌｓｉｏｎ）を採用する。作製全体を通して、ｐＨは、７．２前後に維持されるように必要に応じて調整する。１０日後、またはバイアビリティが７０％未満に低下したときまで、細胞培養物を、遠心分離および０．２２μｍフィルターに通す濾過によって回収する。濾液は、４℃で保存するか、または直接、精製用カラム上に負荷するかのいずれかとした。

ポリ−Ｈｉｓタグ化構築物に関して、タンパク質は、Ｎｉ−ＮＴＡカラム（Ｑｉａｇｅｎ）を用いて精製する。精製前、イミダゾールをならし培地に５ｍＭの濃度まで添加する。ならし培地を、２０ｍＭＨｅｐｅｓ（ｐＨ７．４）０．３ＭＮａＣｌおよび５ｍＭイミダゾール含有バッファー中で平衡化した６ｍＬ容量のＮｉ−ＮＴＡカラム上に、４〜５ｍＬ／分の流速で４℃にてポンピングする。負荷後、カラムをさらなる平衡化バッファーで洗浄し、タンパク質を、０．２５Ｍイミダゾールを含有する平衡化バッファーで溶出
させる。高度に精製されたタンパク質を、続いて、２５ｍＬ容量のＧ２５Ｓｕｐｅｒｆｉｎｅ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）カラムを用い、１０ｍＭＨｅｐｅｓ、０．１４ＭＮａＣｌおよび４％マンニトール（ｐＨ６．８）を含有する保存バッファー中にて脱塩し、−８０℃で保存する。

イムノアドヘシン（Ｆｃ含有）構築物をならし培地から、以下のようにして精製する。ならし培地を、２０ｍＭリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ６．８）中で平衡化しておいた５ｍＬ容量のタンパク質Ａカラム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）上にポンピングする。負荷後、１００ｍＭクエン酸（ｐＨ３．５）で溶出する前に、カラムを平衡化バッファーで徹底的に洗浄する。溶出させたタンパク質は、１ｍＬずつの画分を、２７５μＬの１ＭＴｒｉｓバッファー（ｐＨ９）を入れたチューブ内に収集することにより直ちに中和する。高度に精製されたタンパク質を、続いて、ポリ−Ｈｉｓタグ化タンパク質について上記の保存バッファー中にて脱塩する。均質性を、ＳＤＳポリアクリルアミドゲルおよびエドマン分解によるＮ末端アミノ酸配列決定によって評価する。

実施例５２：
酵母でのＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１の発現
以下の方法は、酵母でのＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１の組換え発現を示す。

まず、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９
０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１の細胞内産生または分泌のための酵母発現ベクターを、ＡＤＨ２／ＧＡＰＤＨプロモーターから構築する。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１およびプロモーターをコードするＤＮＡを、選択したプラスミドの適当な制限酵素部位内に挿入し、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１の細胞内発現を指向する。
分泌のため、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１をコードするＤＮＡを、選択したプラスミド内に、ＡＤＨ２／ＧＡＰＤＨプロモーター、天然のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１シグナルペプチドまたは他の哺乳動物シグナルペプチド、あるいは、例えば、酵母α−因子またはインベルターゼ分泌シグナル／リーダー配列、ならびにＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、Ｐ
ＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１の発現のためのリンカー配列（必要であれば）をコードするＤＮＡとともにクローニングし得る。

次いで、酵母細胞、例えば酵母菌株ＡＢ１１０などを、上記の発現プラスミドで形質転換し、選択した発酵培地中で培養させ得る。形質転換された酵母の上清みを、１０％トリクロロ酢酸を用いた沈殿によって解析し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分離した後、ゲルをクマシーブルー染色で染色し得る。

組換えＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１を、続いて、遠心分離によって発酵培地から酵母細胞を取り出し、次いで、選択したカートリッジフィルターを用いて培地を濃縮することにより単離および精製し得る。
ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１を含む濃縮物は、選択したカラムクロマトグラフィー樹脂を用いてさらに精製され得る。

実施例５３：
バキュロウイルス感染昆虫細胞でのＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、
ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１の発現
以下の方法は、バキュロウイルス感染昆虫細胞におけるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１の組換え発現を示す。

ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１をコードする配列を、バキュロウイルス発現ベクター内に含まれるエピトープタグの上流に融合させる。かかるエピトープタグとしては、ポリ−Ｈｉｓタグおよび免疫グロブリンタグ（ＩｇＧのＦｃ領域など）が挙げられる。さまざまなプラスミド、例えば、市販のプラスミド（例えば、ｐＶＬ１３９３（Ｎｏｖａｇｅｎ）など）から誘導されるプラスミドを使用し得る。
簡単には、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１をコードする配列またはＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４
３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１のコード配列の所望の部分、例えば、タンパク質が細胞外のものである場合は、膜貫通タンパク質の細胞外ドメインをコードする配列または成熟タンパク質をコードする配列を、５’および３’領域に相補的なプライマーを用いるＰＣＲによって増幅させる。５’プライマーは、（選択した）フランキング制限酵素部位を組み込んでいてよい。次いで、産物を、選択した制限酵素で消化し、発現ベクター内にサブクローニングする。

組換えバキュロウイルスを、上記のプラスミドおよびＢａｃｕｌｏＧｏｌｄ（商標）ウイルスＤＮＡ（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）をＳｐｏｄｏｐｔｅｒａｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（「Ｓｆ９」）細胞（ＡＴＣＣＣＲＬ１７１１）内に、リポフェクチン（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬから市販）を用いてコトランスフェクトすることにより作製する。２８℃で４〜５日間のインキュベーション後、放出されたウイルスを回収し、さらなる増幅に用いる。ウイルス感染およびタンパク質発現は、Ｏ’Ｒｅｉｌｌｅｙｅｔａｌ．Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｅｃｔｏｒｓ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，Ｏｘｆｏｒｄ：ＯｘｆｏｒｄＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ（１９９４）に記載のように行う。

発現されたポリ−ヒスタグ化ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１は、次いで、例えば、Ｎｉ^２＋−キレートアフィニティクロマトグラフィーによって以下のようにして精製され得る。抽出物は、組換えウイルス感染Ｓｆ９細胞から、Ｒｕｐｅｒｔｅｔａｌ．Ｎａｔｕｒｅ，３６２：１７５−１７９（１９９３）に記載のように調製する。簡単には、Ｓｆ９細胞を洗浄し、音波破砕バッファー（２５ｍＬＨｅｐｅｓ、ｐＨ７．９；１２．５ｍＭＭｇＣｌ_２；０．１ｍＭＥＤＴＡ；１０％グリセロール；０．１％ＮＰ−４０；０．４ＭＫＣｌ）中に再懸濁し、氷上で２０秒間、２回音波破砕する。音波破砕物を遠心分離によって清澄化し、上清みを、負荷バッファー（５０ｍＭリン酸塩、３００ｍＭＮａＣｌ、１０％グリセロール、ｐＨ７．８）中で５０倍に希釈し、０．４５μｍフィルターに通して濾過する。Ｎｉ^２＋ＮＴＡアガロースカラム（Ｑｉａｇｅｎから市販）を５ｍＬ容量の床を用いて調製し、２５ｍＬの水で洗浄し、２５ｍＬの負荷バッファーで平衡化する。濾過した細胞抽出物をカラム上に０．５ｍＬ／分で負荷する。カラムをベースラインＡ_２８０まで負荷バッファーで洗浄し、この時点で、画分収集を開始する。次に、カラムを二次洗浄バッファー（５０ｍＭリン酸塩；３００ｍＭＮａＣｌ、１０％グリセロール、ｐＨ６．０）で洗浄し、これにより、非特異的結合タンパク質を溶出する。再度Ａ_２８０ベースラインに達した後、カラムを二次洗浄バッファー中０〜５００ｍＭイミダゾールの勾配で展開させる。１ｍＬずつの画分を収集し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび銀染色またはＮｉ^２＋−ＮＴＡコンジュゲートアルカリホスファターゼ（Ｑ
ｉａｇｅｎ）を用いたウエスタンブロットによって解析する。
溶出されたＨｉｓ_１０タグ化ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１を含む画分をプールし、負荷バッファーに対して透析する。

あるいはまた、ＩｇＧタグ化（またはＦｃタグ化）ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１の精製が、既知のクロマトグラフィー技術、例えば、プロテインＡまたはプロテインＧカラムクロマトグラフィーなどを用いて行なわれ得る。

実施例５４：
ＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）を用いた組織発現プロファイリング
遺伝子発現情報を含む公的データベース（ＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）、ＧｅｎｅＬｏｇｉｃＩｎｃ．、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）を、その発現が、他の腫瘍（１種類もしくは複数種）および／または正常組織と比べて、目的の特定の腫瘍組織（１種類または複数種）において有意に上方調節されるポリペプチド（およびそのコード核酸）を同定する試みにおいて解析した。具体的には、ＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）データベースの解析は、ＧｅｎｅＬｏｇｉｃＩｎｃ．、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤから入手可能なＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）データベースとの使用のためのソフトウエア、またはＧｅｎｅｎｔｅｃｈ、Ｉｎｃ．において書き込みおよび開発されたＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）データベースとの使用のための公的ソフトウエアのいずれかを用いて行なった。解析における陽性ヒットの評価は、例えば、正常な必須の組織および／または正常なに増殖している組織における組織特異性、腫瘍特異性および発現レベルを含むいくつかの基準に基づく。以下は、ＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）データベースの解析で測定したその組織発現プロフィールにより、他の腫瘍（１種類もしくは複数種）および／または正常組織と比べ、特定の腫瘍（１種類または複数種）内での高い組織発現および発現の有意な上方調節が証明され、任意選択で、正常な必須の組織および／または正常なに増殖している組織において比較的低い発現が証明される分子の一覧である。組織発現プロファイリングは、いくつかのＵＮＱ遺伝子において行なった。その結果を実施例４８に開示する。

実施例５５：
癌性腫瘍におけるＵＮＱ遺伝子の上方調節を検出するためのマイクロアレイ解析
核酸マイクロアレイは、数千の遺伝子配列を含むものである場合が多く、罹病組織において、その正常対応組織と比べて示差的に発現される遺伝子の同定に有用である。核酸マイクロアレイを用いて、試験および対照組織試料由来の試験および対照ｍＲＮＡ試料を逆転写し、標識してｃＤＮＡプローブを作製した。
次いで、ｃＤＮＡプローブを、固相支持体上に固定化した核酸のアレイにハイブリダイズさせる。アレイは、該アレイの各構成員の配列および位置が既知であるように構成される。例えば、ある種の疾患状態で発現されることがわかっている遺伝子の選択肢を、固相支持体上にアレイ状に整列させ得る。
標識プローブとアレイ構成員とのハイブリダイゼーションにより、プローブを誘導した試料が、該遺伝子を発現することが示される。試験（疾患組織）試料由来のプローブのハイブリダイゼーションシグナルが対照（正常組織）試料由来のプローブのハイブリダイゼーションシグナルより大きい場合、該疾患組織で過剰発現される遺伝子（１つまたは複数）が同定される。
この結果が暗示することは、罹病組織で過剰発現されるタンパク質が、疾患状態の存在の診断用マーカーとしてだけでなく、疾患状態の処置ための治療標的としても有用であるということである。

核酸のハイブリダイゼーションおよびマイクロアレイ技術の方法論は、当該技術分野でよく知られている。一例において、ハイブリダイゼーションのための核酸の具体的な調製物およびプローブ、スライドならびにハイブリダイゼーション条件はすべて、２００１年３月３０日に出願されたＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ０１／１０４８２号に詳述されており、これは、引用により本明細書に組み込まれる。

本発明の実施例では、特定の癌性腫瘍（１種類もしくは複数種）で過剰発現されるポリペプチドを同定する試みにおいて、種々のヒト組織に由来する癌性腫瘍を、異なる組織型および／または非癌性ヒト組織に由来する癌性腫瘍と比べて上方調節される遺伝子発現について試験した。特定のある実験では、同じ組織型（多くの場合、同じ患者由来）の癌性ヒト腫瘍組織および非癌性ヒト腫瘍組織を採取し、ＵＮＱポリペプチド発現について解析した。さらに、さまざまな異なる任意のヒト腫瘍に由来する癌性ヒト腫瘍組織を採取し、上皮の起源、例えば、肝臓、腎臓および肺の非癌性ヒト組織をプールすることにより調製した「普遍的」上皮対照試料と比較した。プールした組織から単離されるｍＲＮＡは、これらの異なる組織から発現された遺伝子産物の混合物である。プールした対照試料を用いたマイクロアレイハイブリダイゼーション実験により、２色解析において線形プロットを作成した。
次いで、２色解析において作成した直線の傾きを用い、各実験での（試験：対照検出）の比を標準化した。次いで、種々の実験の標準化した比を比較し、遺伝子発現のクラスタリングを同定するために使用した。したがって、プールした「普遍的対照」試料により、単純な２試料比較での有効な相対的遺伝子発現の測定が可能になっただけでなく、いくつかの実験間での多試料比較も可能になった。

本発明の実験では、本明細書に記載のＵＮＱポリペプチドコード核酸配列から誘導した核酸プローブを、マイクロアレイの創製に使用し、種々の腫瘍組織由来のＲＮＡを、該アレイとのハイブリダイゼーションに使用した。以下にこれらの実験の結果を示すが、これは、本発明の種々のＵＮＱポリペプチドが種々のヒト腫瘍組織において、その正常な対応組織（１種類または複数種）と比べて有意に過剰発現されることを示す。さらに、以下に示す分子はすべて、その特異的腫瘍組織（１種類または複数種）で、「普遍的」上皮対照と比べて有意に過剰発現される。
上記のように、これらのデータは、本発明のＵＮＱポリペプチドが、１種類以上の癌性腫瘍の存在の診断用マーカーとして有用であるだけでなく、該腫瘍の処置のための治療標的
としての目的を果たすことを示す。マイクロアレイ解析は、いくつかのＵＮＱ遺伝子において行なった。その結果を実施例４８に開示する。

実施例５６：
ＵＮＱｍＲＮＡ発現の定量的解析
このアッセイでは、５’ヌクレアーゼアッセイ（例えば、ＴａｑＭａｎ（登録商標））およびリアルタイム定量的ＰＣＲ（例えば、ＡＢＩＰｒｉｚｍ７７００ＳｅｑｕｅｎｃｅＤｅｔｅｃｔｉｏｎＳｙｓｔｅｍ（登録商標）（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓＤｉｖｉｓｉｏｎ、ＦｏｓｔｅｒＣｉｔｙ、ＣＡ））を使用し、癌性腫瘍（１種類または複数種）において、他の癌性腫瘍または正常な非癌性組織と比べて有意に過剰発現される遺伝子を見出した。５’ヌクレアーゼアッセイ反応は、ＴａｑＤＮＡポリメラーゼ酵素の５’エキソヌクレアーゼ活性を利用して遺伝子発現をリアルタイムでモニターする蛍光ＰＣＲ系技術である。２種類のオリゴヌクレオチドプライマー（その配列は目的の遺伝子またはＥＳＴ配列に基づく）を用い、ＰＣＲ反応に典型的なアンプリコンを作製する。第３のオリゴヌクレオチドまたはプローブは、該２つのＰＣＲプライマー間に位置するヌクレオチド配列が検出されるように設計される。プローブは、ＴａｑＤＮＡポリメラーゼ酵素によって伸長可能でないものであり、レポーター蛍光色素およびクエンチャー蛍光色素で標識されている。レポーター色素からのレーザー誘導型発光はいずれも、該２つの色素がプローブ上で互いに近接した位置になると、該クエンチング色素によって消光される。ＰＣＲ増幅反応中、ＴａｑＤＮＡポリメラーゼ酵素は、鋳型依存的にプローブを切断する。その結果生じるプローブ断片は溶液中で解離し、放出されたレポーター色素からのシグナルには、第２のフルオロフォアの消光効果はない。１分子のレポーター色素が遊離するごとに新たな分子が合成され、非消光レポーター色素の検出により、データの定量的解釈の根拠が提供される。

５’ヌクレアーゼ手順は、リアルタイム定量的ＰＣＲ装置、例えば、ＡＢＩＰｒｉｓｍ７７００ＴＭＳｅｑｕｅｎｃｅＤｅｔｅｃｔｉｏｎにて行なう。
該システムは、サーモサイクラー、レーザー、電荷結合素子（ＣＣＤ）カメラおよびコンピュータからなる。該システムにより、サーモサイクラーの９６ウェル形式にて試料を増幅させる。増幅中、レーザー誘導型蛍光シグナルを、９６個のウェルすべてについて光ファイバーケーブルによりリアルタイムで収集し、ＣＣＤで検出する。
該システムは、機器の作動のため、およびデータ解析のためのソフトウエアを含む。

スクリーニングのための出発材料は、さまざまな異なる癌性組織から単離したｍＲＮＡとした。
該ｍＲＮＡは、例えば、蛍光測定により正確に定量される。
陰性対照として、ＲＮＡを、試験対象の癌性組織と同じ組織型の種々の正常組織から単離した。

５’ヌクレアーゼアッセイデータを、まず、Ｃｔすなわち閾値サイクルで示す。これは、蛍光レポーターシグナルの蓄積がバックグラウンドレベルを超えるサイクルと規定される。ΔＣｔ値を、癌ｍＲＮＡの結果を正常なヒトｍＲＮＡの結果と比べたときの、核酸試料中の特定の標的配列の相対出発コピー数の定量的測度として用いる。１Ｃｔ単位は１ＰＣＲサイクルまたは正常に対しておよそ２倍の相対増加に相当するため、２単位は４倍相対増加に相当する、３単位は８倍相対増加に相当するなどであり２種類以上の異なる組織間でのｍＲＮＡ発現の相対増加倍数が定量的に測定され得る。この技術を用いて、分子は、特定の腫瘍（１種類もしくは複数種）において、その正常な非癌性対応組織（１種類または複数種）（ともに同じおよび異なる組織ドナー由来）と比べて有意に過剰発現されると同定され、したがって、哺乳動物における癌の診断および治療の優れたポリペプチド標的である。
ＵＮＱ遺伝子に関する具体的な結果実施例４８に開示する。

実施例５７：
インサイチュハイブリダイゼーション
インサイチュハイブリダイゼーションは、細胞または組織の調製物中の核酸配列の検出および局在化のための強力で多目的な技術である。これは、例えば、遺伝子発現部位を同定するため、転写の組織分布を解析するため、ウイルス感染を特定および局在化するため、特異的ｍＲＮＡ合成の変化を追跡するため、および染色体マッピングを補助するために有用であり得る。

インサイチュハイブリダイゼーションは、ＬｕおよびＧｉｌｌｅｔｔ、ＣｅｌｌＶｉｓｉｏｎ１：１６９−１７６（１９９４）のプロトコルの最適化バージョンに従って、ＰＣＲ作製^３３Ｐ標識リボプローブを用いて行なった。簡単には、ホルマリン固定パラフィン包埋ヒト組織を切片化し、脱パラフィン処理し、プロテイナーゼＫ（２０ｇ／ｍｌ）中で１５分間３７℃でタンパク質除去し、インサイチュハイブリダイゼーションのために、ＬｕおよびＧｉｌｌｅｔｔ（前掲）に記載のようにしてさらに処理した。［^３３−Ｐ］ＵＴＰ標識アンチセンスリボプローブをＰＣＲ産物から作製し、５５℃で一晩ハイブリダイズさせた。
スライドをＫｏｄａｋＮＴＢ２核トラック乳剤中に浸漬し、４週間露光した。

^３３Ｐ−リボプローブ合成
６．０μｌ（１２５ｍＣｉ）の^３３Ｐ−ＵＴＰ（ＡｍｅｒｓｈａｍＢＦ１００２、ＳＡ＜２０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）をスピードバック乾燥した。
乾燥^３３Ｐ−ＵＴＰを入れた各チューブに、以下の成分を添加した：
２．０μｌ５×転写バッファー
１．０μｌＤＴＴ（１００ｍＭ）
２．０μｌＮＴＰミックス（２．５ｍＭ：
１０μ；各々１０ｍＭのＧＴＰ、ＣＴＰ＆ＡＴＰ＋１０μｌＨ_２Ｏ）
１．０μｌＵＴＰ（５０μＭ）
１．０μｌＲｎａｓｉｎ
１．０μｌＤＮＡ鋳型（１μｇ）
１．０μｌＨ_２Ｏ
１．０μｌＲＮＡポリメラーゼ（通常、ＰＣＲ産物についてＴ３＝ＡＳ、Ｔ７＝Ｓ）
チューブを３７℃で１時間インキュベートした。
１．０μｌのＲＱ１ＤＮアーゼを添加した後、３７℃で１５分間インキュベーションした。
９０μｌのＴＥ（１０ｍＭＴｒｉｓｐＨ７．６／１ｍＭＥＤＴＡｐＨ８．０）を添加し、混合物をＤＥ８１紙上にピペッティングした。
残留溶液をＭｉｃｒｏｃｏｎ−５０限外濾過ユニットに負荷し、プログラム１０を用いてスピンさせた（６分間）。
この濾過ユニットを第２のチューブ上に反転（ｉｎｖｅｒｔ）させ、プログラム２を用いてスピンさせた（３分間）。
最終回収スピン後、１００μｌＴＥを添加した。
１μｌの最終産物をＤＥ８１紙上にピペッティングし、６ｍｌのＢｉｏｆｌｕｏｒＩＩ中で計数した。
プローブをＴＢＥ／尿素ゲル上で泳動させた。

１〜３μｌのプローブまたは５μｌのＲＮＡＭｒｋＩＩＩを３μｌの負荷バッファーに添加した。９５℃のヒートブロックで３分間加熱後、プローブを氷上に直に配置した。
ゲルのウェルをフラッシュ洗浄し、試料を負荷し、１８０〜２５０ボルトで４５分間泳動させた。
ゲルをサランラップでラップし、−７０℃のフリーザー内で１時間から一晩、増感スクリーンを有するＸＡＲフィルムに露光させた。
^３３Ｐ−ハイブリダイゼーション
Ａ．凍結切片の前処理
スライドをフリーザーから取り出し、アルミニウムトレイ上に置き、室温で５分間解凍した。
トレイを５５℃のインキュベーター内に５分間入れ、凝縮を低減させた。
スライドをドラフト内で氷上４％パラホルムアルデヒドにて１０分間固定し、０．５×ＳＳＣ中で５分間、室温にて洗浄した（２５ｍｌの２０×ＳＳＣ＋９７５ｍｌのＳＱＨ_２Ｏ）。
０．５μｇ／ｍｌのプロテイナーゼＫ中で１０分間３７℃にてタンパク質除去後（２５０ｍｌの予備加温ＲＮアーゼ無含有ＲＮＡｓｅバッファー中１２．５μｌの１０ｍｇ／ｍｌのストック）、切片を０．５×ＳＳＣ中で１０分間室温にて洗浄した。
切片を７０％、９５％、１００％エタノール中で、各々２分間脱水した。

Ｂ．パラフィン包埋切片の前処理
スライドを脱パラフィン処理し、ＳＱＨ_２Ｏ中に入れ、２×ＳＳＣ中で室温にて各々５分間２回リンス処理した。切片を、２０μｇ／ｍｌのプロテイナーゼＫ（２５０ｍｌのＲＮアーゼ無含有ＲＮアーゼバッファー中１０ｍｇ／ｍｌを５００μｌ；３７℃、１５分間）（ヒト胚）、または８×プロテイナーゼＫ（２５０ｍｌのＲｎアーゼバッファー中１００μｌ、３７℃、３０分間）（ホルマリン組織）中でタンパク質除去した。続いて、０．５×ＳＳＣ中でのリンス処理および脱水を上記のようにして行なった。

Ｃ．プレハイブリダイゼーション
スライドを、内側をＢｏｘバッファー（４×ＳＳＣ、５０％ホルムアミド）飽和濾紙で覆ったプラスチックボックス内に並べた。

Ｄ．ハイブリダイゼーション
１．０×１０^６ｃｐｍのプローブおよび１．０μｌのｔＲＮＡ（５０ｍｇ／ｍｌストック）／スライドを９５℃で３分間加熱した。スライドを氷上で冷却し、４８μｌのハイブリダイゼーションバッファーをスライドごとに添加した。
ボルテックス後、５０μｌの^３３Ｐミックスを、スライド上の５０μｌのプレハイブリダイゼーション液に添加した。スライドを一晩５５℃でインキュベートした。

Ｅ．洗浄
洗浄は、２×１０分間、２×ＳＳＣ、ＥＤＴＡを用いて室温で行なった（４００ｍｌの２０×ＳＳＣ＋１６ｍｌの０．２５ＭＥＤＴＡ、Ｖ_ｆ＝４Ｌ）後、ＲＮアーゼＡ処理を３７℃で３０分間行なった（２５０ｍｌのＲｎアーゼバッファー中１０ｍｇ／ｍｌを５００μｌ＝２０μｇ／ｍｌ）。スライドを２×１０分間、２×ＳＳＣ、ＥＤＴＡを用いて室温で洗浄した。ストリンジェンシー洗浄条件は、以下のとおりとした。
２時間５５℃で０．１×ＳＳＣ、ＥＤＴＡ（２０ｍｌの２０×ＳＳＣ＋１６ｍｌのＥＤＴＡ、Ｖ_ｆ＝４Ｌ）。

Ｆ．オリゴヌクレオチド
インサイチュ解析を、本明細書中に開示したさまざまなＤＮＡ配列において行なった。これらの解析に用いたオリゴヌクレオチドは、添付の図面に示した核酸（またはその相補配列）に相補的となるように入手した。

Ｇ．結果
インサイチュ解析を、本明細書中に開示したさまざまなＤＮＡ配列において行なった。その結果を実施例４８に開示する。

実施例５８：
ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１に結合する抗体の調製
この実施例は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１に特異的に結合し得るモノクローナル抗体の調製を示す。

モノクローナル抗体を作製するための手法は当該技術分野で知られており、例えば、Ｇｏｄｉｎｇ（前出）に記載されている。
使用され得る免疫原としては、精製ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１
７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを含む融合タンパク質、および組換えＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを細胞表面上に発現する細胞が挙げられる。免疫原の選択は、当業者が必要以上に実験を行うことなく行い得る。

Ｂａｌｂ／ｃなどのマウスを、完全フロイントアジュバント中に乳化させたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１免疫原で免疫処置し、１〜１００マイクログラムの量で皮下または腹腔内注射する。
あるいはまた、免疫原を、ＭＰＬ−ＴＤＭアジュバント（ＲｉｂｉＩｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｈａｍｉｌｔｏｎ，ＭＴ）中に乳化させ、動物の後肢支脚皿パッドに注射する。次いで、免疫処置されたマウスを１０〜１２日後、選択したアジュバント中に乳化させたさらなる免疫原で追加免疫刺激する。その後、数週間、マウスにさらなる免疫処置注射により追加免疫刺激してもよい。
血清試料をマウスから、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３または抗ＰＲＯ８５１６１抗体を検出するためのＥＬＩＳＡアッセイにおける試験のために、眼窩後採血によって定期的に採取され得る。

適当な抗体力価が検出された後、抗体に関して「陽性」の動物にＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１の最終の静脈内注射剤が注射され得る。３〜４日後、マウスを屠殺し、脾臓細胞を回収する。
次いで、脾臓細胞を、選択したマウス骨髄腫細胞株（例えば、ＡＴＣＣから番号ＣＲＬ１５９７で入手可能なＰ３Ｘ６３ＡｇＵ．１など）に融合させる（３５％ポリエチレングリコールを用いて）。融合によりハイブリドーマ細胞が生成され、次いで、これは、非融合細胞、骨髄腫ハイブリッドおよび脾臓細胞ハイブリッドの増殖を阻害するためのＨＡＴ（ヒポキサンチン、アミノプテリンおよびチミジン）培地を入れた９６ウェル組織培養プレートにプレーティングされ得る。

ハイブリドーマ細胞はＥＬＩＳＡで、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１に対する反応性に関してスクリーニングされる。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１に対する所望のモノクローナル抗体を分泌する「陽性」ハイブリドーマ細胞の決定は、当該技術分野の技量の範囲内である。

陽性ハイブリドーマ細胞を同系Ｂａｌｂ／ｃマウスに腹腔内注射すると、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲ
Ｏ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３または抗ＰＲＯ８５１６１モノクローナル抗体を含有する腹水が生成され得る。
あるいはまた、ハイブリドーマ細胞を組織培養フラスコまたはローラーボトル内で培養してもよい。腹水内に産生されたモノクローナル抗体の精製は、硫酸アンモニウム沈殿の後ゲル排除クロマトグラフィーを用いて行い得る。あるいはまた、タンパク質Ａまたはタンパク質Ｇに対する抗体の結合に基づくアフィニティクロマトグラフィを使用し得る。

実施例５９：
特異的抗体を用いたＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの精製
天然または組換えＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、タンパク質精製技術分野のさまざまな標準技術によって精製され得る。
例えば、ｐｒｏ−ＰＲＯ２２６、ｐｒｏ−ＰＲＯ２５７、ｐｒｏ−ＰＲＯ２６８、ｐｒｏ−ＰＲＯ２９０、ｐｒｏ−ＰＲＯ３６００６、ｐｒｏ−ＰＲＯ３６３、ｐｒｏ−ＰＲＯ３６５、ｐｒｏ−ＰＲＯ３８２、ｐｒｏ−ＰＲＯ４４４、ｐｒｏ−ＰＲＯ７０５、ｐｒｏ−ＰＲＯ１０７１、ｐｒｏ−ＰＲＯ１１２５、ｐｒｏ−ＰＲＯ１１３４、ｐｒｏ−ＰＲＯ１１５５、ｐｒｏ−ＰＲＯ１２８１、ｐｒｏ−ＰＲＯ１３４３、ｐｒｏ−ＰＲＯ１３７９、ｐｒｏ−ＰＲＯ１３８０、ｐｒｏ−ＰＲＯ１３８７、ｐｒｏ−ＰＲＯ１４１９、ｐｒｏ−ＰＲＯ１４３３、ｐｒｏ−ＰＲＯ１４７４、ｐｒｏ−ＰＲＯ１５５０、ｐｒｏ−ＰＲＯ１５７１、ｐｒｏ−ＰＲＯ１５７２、ｐｒｏ−ＰＲＯ１７５９、ｐｒｏ−ＰＲＯ１９０４、ｐｒｏ−ＰＲＯ３５１９３、ｐｒｏ−ＰＲＯ４３４１、ｐｒｏ−ＰＲＯ４３４８、ｐｒｏ−ＰＲＯ４３６９、ｐｒｏ−ＰＲＯ４３８１、ｐｒｏ−ＰＲＯ４４０７、ｐｒｏ−ＰＲＯ４４２５、ｐｒｏ−ＰＲＯ４９８５、ｐｒｏ−ＰＲＯ４９８９、ｐｒｏ−ＰＲＯ５７３７
、ｐｒｏ−ＰＲＯ５８００、ｐｒｏ−ＰＲＯ５９９３、ｐｒｏ−ＰＲＯ６０１７、ｐｒｏ−ＰＲＯ７１７４、ｐｒｏ−ＰＲＯ９７４４、ｐｒｏ−ＰＲＯ９８２１、ｐｒｏ−ＰＲＯ９８５２、ｐｒｏ−ＰＲＯ９８７３、ｐｒｏ−ＰＲＯ１０１９６、ｐｒｏ−ＰＲＯ３４７７８、ｐｒｏ−ＰＲＯ２０２３３、ｐｒｏ−ＰＲＯ２１９５６、ｐｒｏ−ＰＲＯ５７２９０、ｐｒｏ−ＰＲＯ３８４６５、ｐｒｏ−ＰＲＯ３８６８３またはｐｒｏ−ＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、成熟ＰＲＯ２２６、成熟ＰＲＯ２５７、成熟ＰＲＯ２６８、成熟ＰＲＯ２９０，成熟ＰＲＯ３６００６、成熟ＰＲＯ３６３、成熟ＰＲＯ３６５、成熟ＰＲＯ３８２、成熟ＰＲＯ４４４、成熟ＰＲＯ７０５、成熟ＰＲＯ１０７１、成熟ＰＲＯ１１２５、成熟ＰＲＯ１１３４、成熟ＰＲＯ１１５５、成熟ＰＲＯ１２８１、成熟ＰＲＯ１３４３、成熟ＰＲＯ１３７９、成熟ＰＲＯ１３８０、成熟ＰＲＯ１３８７、成熟ＰＲＯ１４１９、成熟ＰＲＯ１４３３、成熟ＰＲＯ１４７４、成熟ＰＲＯ１５５０、成熟ＰＲＯ１５７１、成熟ＰＲＯ１５７２、成熟ＰＲＯ１７５９、成熟ＰＲＯ１９０４、成熟ＰＲＯ３５１９３、成熟ＰＲＯ４３４１、成熟ＰＲＯ４３４８、成熟ＰＲＯ４３６９、成熟ＰＲＯ４３８１、成熟ＰＲＯ４４０７、成熟ＰＲＯ４４２５、成熟ＰＲＯ４９８５、成熟ＰＲＯ４９８９、成熟ＰＲＯ５７３７、成熟ＰＲＯ５８００、成熟ＰＲＯ５９９３、成熟ＰＲＯ６０１７、成熟ＰＲＯ７１７４、成熟ＰＲＯ９７４４、成熟ＰＲＯ９８２１、成熟ＰＲＯ９８５２、成熟ＰＲＯ９８７３、成熟ＰＲＯ１０１９６、成熟ＰＲＯ３４７７８、成熟ＰＲＯ２０２３３、成熟ＰＲＯ２１９５６、成熟ＰＲＯ５７２９０、成熟ＰＲＯ３８４６５、成熟ＰＲＯ３８６８３または成熟ＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、またはｐｒｅ−ＰＲＯ２２６、ｐｒｅ−ＰＲＯ２５７、ｐｒｅ−ＰＲＯ２６８、ｐｒｅ−ＰＲＯ２９０、ｐｒｅ−ＰＲＯ３６００６、ｐｒｅ−ＰＲＯ３６３、ｐｒｅ−ＰＲＯ３６５、ｐｒｅ−ＰＲＯ３８２、ｐｒｅ−ＰＲＯ４４４、ｐｒｅ−ＰＲＯ７０５、ｐｒｅ−ＰＲＯ１０７１、ｐｒｅ−ＰＲＯ１１２５、ｐｒｅ−ＰＲＯ１１３４、ｐｒｅ−ＰＲＯ１１５５、ｐｒｅ−ＰＲＯ１２８１、ｐｒｅ−ＰＲＯ１３４３、ｐｒｅ−ＰＲＯ１３７９、ｐｒｅ−ＰＲＯ１３８０、ｐｒｅ−ＰＲＯ１３８７、ｐｒｅ−ＰＲＯ１４１９、ｐｒｅ−ＰＲＯ１４３３、ｐｒｅ−ＰＲＯ１４７４、ｐｒｅ−ＰＲＯ１５５０、ｐｒｅ−ＰＲＯ１５７１、ｐｒｅ−ＰＲＯ１５７２、ｐｒｅ−ＰＲＯ１７５９、ｐｒｅ−ＰＲＯ１９０４、ｐｒｅ−ＰＲＯ３５１９３，ｐｒｅ− ＰＲＯ４３４１、ｐｒｅ−ＰＲＯ４３４８、ｐｒｅ−ＰＲＯ４３６９、ｐｒｅ−ＰＲＯ４３８１、ｐｒｅ−ＰＲＯ４４０７、ｐｒｅ−ＰＲＯ４４２５、ｐｒｅ−ＰＲＯ４９８５、ｐｒｅ−ＰＲＯ４９８９、ｐｒｅ−ＰＲＯ５７３７、ｐｒｅ−ＰＲＯ５８００、ｐｒｅ−ＰＲＯ５９９３、ｐｒｅ−ＰＲＯ６０１７、ｐｒｅ−ＰＲＯ７１７４、ｐｒｅ−ＰＲＯ９７４４、ｐｒｅ−ＰＲＯ９８２１、ｐｒｅ−ＰＲＯ９８５２、ｐｒｅ−ＰＲＯ９８７３、ｐｒｅ−ＰＲＯ１０１９６、ｐｒｅ−ＰＲＯ３４７７８、ｐｒｅ−ＰＲＯ２０２３３、ｐｒｅ−ＰＲＯ２１９５６、ｐｒｅ−ＰＲＯ５７２９０、ｐｒｅ−ＰＲＯ３８４６５、ｐｒｅ−ＰＲＯ３８６８３またはｐｒｅ−ＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、目的のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに特異的な抗体を用いるイムノアフィニティクロマトグラフィーによって精製される。一般に、イムノアフィニティカラムは、抗ＰＲＯ２２６、抗ＰＲＯ２５７、抗ＰＲＯ２６８、抗ＰＲＯ２９０、抗ＰＲＯ３６００６、抗ＰＲＯ３６３、抗ＰＲＯ３６５、抗ＰＲＯ３８２、抗ＰＲＯ４４４、抗ＰＲＯ７０５、抗ＰＲＯ１０７１、抗ＰＲＯ１１２５、抗ＰＲＯ１１３４、抗
ＰＲＯ１１５５、抗ＰＲＯ１２８１、抗ＰＲＯ１３４３、抗ＰＲＯ１３７９、抗ＰＲＯ１３８０、抗ＰＲＯ１３８７、抗ＰＲＯ１４１９、抗ＰＲＯ１４３３、抗ＰＲＯ１４７４、抗ＰＲＯ１５５０、抗ＰＲＯ１５７１、抗ＰＲＯ１５７２、抗ＰＲＯ１７５９、抗ＰＲＯ１９０４、抗ＰＲＯ３５１９３、抗ＰＲＯ４３４１、抗ＰＲＯ４３４８、抗ＰＲＯ４３６９、抗ＰＲＯ４３８１、抗ＰＲＯ４４０７、抗ＰＲＯ４４２５、抗ＰＲＯ４９８５、抗ＰＲＯ４９８９、抗ＰＲＯ５７３７、抗ＰＲＯ５８００、抗ＰＲＯ５９９３、抗ＰＲＯ６０１７、抗ＰＲＯ７１７４、抗ＰＲＯ９７４４、抗ＰＲＯ９８２１、抗ＰＲＯ９８５２、抗ＰＲＯ９８７３、抗ＰＲＯ１０１９６、抗ＰＲＯ３４７７８、抗ＰＲＯ２０２３３、抗ＰＲＯ２１９５６、抗ＰＲＯ５７２９０、抗ＰＲＯ３８４６５、抗ＰＲＯ３８６８３または抗ＰＲＯ８５１６１ポリペプチド抗体を、活性化したクロマトグラフィー樹脂に共有結合させることにより構築される。

ポリクローナル免疫グロブリンを、免疫血清から、硫酸アンモニウムでの沈殿、または固定化したタンパク質Ａ（ＰｈａｒｍａｃｉａＬＫＢＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）上での精製のいずれかによって調製する。同様に、モノクローナル抗体を、マウス腹水から、硫酸アンモニウム沈殿または固定化したタンパク質Ａ上でのクロマトグラフィーによって調製する。部分精製された免疫グロブリンを、ＣｎＢｒ活性化ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（商標）（ＰｈａｒｍａｃｉａＬＫＢＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）などのクロマトグラフィー樹脂に共有結合させる。抗体を樹脂にカップリングさせ、樹脂をブロックし、誘導体樹脂を、製造業者の使用説明書に従って洗浄する。

かかるイムノアフィニティカラムは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを可溶性形態で含む細胞から画分を調製することによる、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの精製に利用される。
この調製物を、デタージェントの添加による分画遠心分離により得られた完全体細胞または亜細胞画分の可溶化によって、または当該技術分野でよく知られた他の方法によって誘導する。あるいはまた、シグナル配列を含む可溶性ポリペプチドを、有用な量で、該細胞を培養している培地中に分泌し得る。

可溶性のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド含有調製物をイムノアフィニティカラムに通し、カラムを、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの優先的な吸収を許容する条件下（例えば、デタージェントの存在下の高イオン強度バッファー）で洗浄する。
次いで、カラムを、抗体／ＰＲＯ２２６、抗体／ＰＲＯ２５７、抗体／ＰＲＯ２６８、抗体／ＰＲＯ２９０、抗体／ＰＲＯ３６００６、抗体／ＰＲＯ３６３、抗体／ＰＲＯ３６５、抗体／ＰＲＯ３８２、抗体／ＰＲＯ４４４、抗体／ＰＲＯ７０５、抗体／ＰＲＯ１０７１、抗体／ＰＲＯ１１２５、抗体／ＰＲＯ１１３４、抗体／ＰＲＯ１１５５、抗体／ＰＲＯ１２８１、抗体／ＰＲＯ１３４３、抗体／ＰＲＯ１３７９、抗体／ＰＲＯ１３８０、抗体／ＰＲＯ１３８７、抗体／ＰＲＯ１４１９、抗体／ＰＲＯ１４３３、抗体／ＰＲＯ１４７４、抗体／ＰＲＯ１５５０、抗体／ＰＲＯ１５７１、抗体／ＰＲＯ１５７２、抗体／ＰＲＯ１７５９、抗体／ＰＲＯ１９０４、抗体／ＰＲＯ３５１９３、抗体／ＰＲＯ４３４１、抗体／ＰＲＯ４３４８、抗体／ＰＲＯ４３６９、抗体／ＰＲＯ４３８１、抗体／ＰＲＯ４４０７、抗体／ＰＲＯ４４２５、抗体／ＰＲＯ４９８５、抗体／ＰＲＯ４９８９、抗体／ＰＲＯ５７３７、抗体／ＰＲＯ５８００、抗体／ＰＲＯ５９９３、抗体／ＰＲＯ６０１７、抗体／ＰＲＯ７１７４、抗体／ＰＲＯ９７４４、抗体／ＰＲＯ９８２１、抗体／ＰＲＯ９８５２、抗体／ＰＲＯ９８７３、抗体／ＰＲＯ１０１９６、抗体／ＰＲＯ３４７７８、抗体／ＰＲＯ２０２３３、抗体／ＰＲＯ２１９５６、抗体／ＰＲＯ５７２９０、抗体／ＰＲＯ３８４６５、抗体／ＰＲＯ３８６８３または抗体／ＰＲＯ８５１６１ポリペプチド結合を破壊する（例えば、およそｐＨ２〜３などのｐＨバッファーまたは高濃度のカオトロピック剤（例えば、尿素もしくはチオシアン酸イオンなど）を許容する）条件下で溶出し、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１
０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドを収集する。

実施例６０：薬物スクリーニング
本発明は、さまざまな薬物スクリーニング技術のいずれかにおいて、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドまたはその結合断片を使用することによる化合物のスクリーニングに特に有用である。かかる試験に用いられるＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドまたは断片は、溶液中で遊離しているか、固相支持体に付着されているか、細胞表面上に存在＜ｂｏｒｎ＞するか、または細胞内に存在するかのいずれかであり得る。薬物スクリーニング方法の一例では、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドまたは断片を発現する組換え核酸で安定的に形質転換される真核生物または原核生物の宿主細胞が利用される。薬物は、競合的結合アッセイで、かかる形質転換細胞に対してスクリーニングする。かかる細胞は、バイアブルな状態または固定された形態のいずれかで、標準的な結合アッセイに使用できる。
例えば、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１
４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドまたは断片と、試験対象の薬剤との複合体の形成が測定され得る。あるいはまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドと、その標的細胞または試験対象の薬剤によってもたらされる標的受容体との複合体形成の減損を調べることができる。

したがって、本発明は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド関連疾患または障害に影響を与え得る薬物または任意の他の薬剤のスクリーニング方法を提供する。このような方法は、かかる薬剤をＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドまたはその断片と接触させること、および（Ｉ）該薬剤とＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７
５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドまたは断片との複合体の存在について、または（ｉｉ）ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドまたは断片と細胞との複合体の存在について、当該技術分野でよく知られた方法によってアッセイすることを含む。かかる競合的結合アッセイでは、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドまたは断片は、典型的には標識される。
適当なインキュベーション後、遊離ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドまたは断片を、結合形態で存在するものから分離し、遊離または非複合体形成標識の量は、具体的な薬剤がＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２
５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドまたはに結合する能力、またはＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド／細胞複合体に干渉する能力の目安である。

薬物スクリーニングのための別の技術は、ポリペプチドに対して適当な結合親和性を有する化合物のハイスループットスクリーニングを提供するものであり、１９８４年９月１３日に公開されたＷＯ８４／０３５６４に詳細に記載されている。簡単に述べると、多数の異なる小ペプチド試験化合物を固相基材上、例えば、プラスチックピンまたはなんらかの他の表面上で合成する。
ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに適用されると、ペプチド試験化合物は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドと反応し、洗浄される。
結合ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５
９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、当該技術分野でよく知られた方法によって検出される。精製ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドはまた、前述の薬物スクリーニング技術における使用のためにプレート上に直接コートしてもよい。また、非中和抗体を用いてペプチドを捕捉し、固相支持体上に固定化してもよい。

本発明ではまた、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドに結合し得る中和抗体が、試験化合物と、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドまたはその断片に対する結合に関して特異的に競合する競合的薬物スクリーニングアッセイの使用が想定される。このようにして、該抗体は、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ
１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドと、１つ以上の抗原決定基を共有するペプチドがあればその存在を検出するために使用され得る。

実施例６１：合理的な薬物設計
合理的な薬物設計の目的は、生物学的に活性な目的のポリペプチド（すなわち、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド）またはこれらと相互作用する低分子、例えばアゴニスト、アンタゴニストもしくはインヒビターの構造的類縁体を作製することである。これらの例の任意のものが、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのより活性または安定な形態の薬物、またはＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのインビボの機能を増強するか、もしくは外機能に干渉する薬物を構築するために使用され得る（Ｈｏｄｇｓｏｎ、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、９：１９−２１（１９９１）参照）。

アプローチの一例において、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、Ｐ
ＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド、またはＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３もしくはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド−インヒビター複合体の３次元構造は、ｘ線結晶学、コンピュータモデル設計または、最も典型的にはこの２つのアプローチの組合せによって測定される。ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドは、その分子の構造を解明するため、および活性部位（１つまたは複数）を決定するために、形状および変化の両方を確認しなければならない。頻度は低いが、ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドの構造に関する有用な情報は、相同タンパク質の構造に基づいたモデル設計により取得され得る。どちらの場合も、関連する構造の情報を用いて、類縁ＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲ
Ｏ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチド様分子を設計するか、または効率的なインヒビターを同定する。
合理的な薬物設計の有用な例としては、ＢｒａｘｔｏｎａｎｄＷｅｌｌｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３１：７７９６−７８０１（１９９２）に示されたような改善された活性もしくは安定性を有する分子、またはＡｔｈａｕｄａｅｔａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１１３：７４２−７４６（１９９３）に示されたような天然ペプチドのインヒビター、作用剤もしくはアンタゴニストとして作用する分子が挙げられ得る。

また、上記のようにして機能アッセイによって選択された標的特異的抗体を単離し、次いで、その結晶構造を解明することも可能である。このアプローチは、原理的には、その後の薬物設計の基礎となり得るファーマコアをもたらす。タンパク質結晶学は、機能性の薬理学的に活性な抗体に対する抗イデオタイプ抗体（抗ｉｄ）を作製することにより、全く回避することが可能である。鏡像の鏡像として、抗ｉｄの結合部位は、元の受容体の類縁体であることが予測され得る。次いで、抗ｉｄを、化学的または生物学的に作製されたペプチドのバンクからペプチドを同定および単離するために使用できる。次いで、単離されたペプチドは、ファーマコアとしての役目を果たし得る。

本発明のおかげで、充分な量のＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドが、Ｘ線結晶学などの解析試験を行なうために利用可能となり得る。また、本明細書に示したＰＲＯ２２６、ＰＲＯ２５７、ＰＲＯ２６８、ＰＲＯ２９０、ＰＲＯ３６００６、ＰＲＯ３６３、ＰＲＯ３６５、ＰＲＯ３８２、ＰＲＯ４４４、ＰＲＯ７０５、ＰＲＯ１０７１、ＰＲＯ１１２５、ＰＲＯ１１３４、ＰＲＯ１１５５、ＰＲＯ１２８１、ＰＲＯ１３４３、ＰＲＯ１３７９、ＰＲＯ１３８０、ＰＲＯ１３８７、ＰＲＯ１４１９、ＰＲＯ１４３３、ＰＲＯ１４７４、ＰＲＯ１５５０、ＰＲＯ１５７１、ＰＲＯ１５７２、ＰＲＯ１７５９、ＰＲＯ１９０４、ＰＲＯ３５１９３、ＰＲＯ４３４１、ＰＲＯ４３４８、ＰＲＯ４３６９、ＰＲＯ４３８１、ＰＲＯ４４０７、ＰＲＯ４４２５、ＰＲＯ４９８５、ＰＲＯ４９８９、ＰＲＯ５７３７、ＰＲＯ５８００、ＰＲＯ５９９３、ＰＲＯ６０１７、ＰＲＯ７１７４、ＰＲＯ９７４４、ＰＲＯ９８２１、ＰＲＯ９８５２、ＰＲＯ９８７３、ＰＲＯ１０１９６、ＰＲＯ３４７７８、ＰＲＯ２０２３３、ＰＲＯ２１９５６、ＰＲＯ５７２９０、ＰＲＯ３８４６５、ＰＲＯ３８６８３またはＰＲＯ８５１６１ポリペプチドのアミノ酸配列の知得により、ｘ線結晶学の代替的または付加的なコンピュータモデル設計技術を用いるものに対する手引きを提供する。

Claims

明細書に記載の発明。