JP2009120564A - ヒアルロン酸産生促進物質 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】魚類、鳥類、哺乳類等の肉、骨、皮から得られた動物由来エキスとして、ヒアルロン酸産生促進剤を得る。得られたエキスは十分な食経験のある天然由来物であるため、安全面にも優れており、広範な用途に利用できる。
【選択図】なし
Description
(実施例1)
(シロサケの水抽出による魚肉エキスの調製)
ミンチ状としたシロサケ肉(830.4g)に対し、脱イオン水(2490 g)を加え、撹拌してエキス成分の抽出を行った。遠心分離により固液分離して得られた上清をセライトろ過した。得られた溶液(ろ液)を電気透析装置により脱塩処理した。電気透析処理した処理液をエバポレーターにより1/20に濃縮した後、活性炭を加え加熱した。常温まで放冷した後、ろ過した。得られた溶液をフリーズドライ(FD)により乾燥し、サケエキス(固体)を得た。
(ヒアルロン酸産生促進試験および評価方法)
24穴プレートの各ウェルに、3.6×104(cells/mL)の濃度でヒト皮膚正常繊維芽細胞SF-TYを1mL播種した。5%FBS(牛胎児血清)含有培地を用い、37℃、5%CO2にて3日間培養し、0.5%FBS含有培地にて試料を調整し、この培地に交換した。更に、24時間培養後の培養上清をサンプルとして、ELISAにてヒアルロン酸量を定量した。同時に細胞数をカウントし、細胞あたりのヒアルロン酸量としても評価した。尚、陰性対照として試料無添加培地を用いた。データに関しては細胞数無考慮を採用した。試料として、本発明の動物エキスは試験容器中に最終濃度50μg/mLとなるよう添加した。
本試験の試料として、製造例1にて得られたサケ由来エキスおよび同様にして得られるカツオ、チキン由来エキスを調製し試験に供した。また、その中に含まれるアンセリン、カルノシン、クレアチン、乳酸の各物質についても同濃度で試験に供した。
(アンセリン、カルノシンの定量方法)
HPLC:Alliance 2965(Waters)
カラム:資生堂Capcell Pak C18 ODS (150 mm×4.6 mm I.D., 5μm), 30℃
溶媒:200mM りん酸二水素アンモニウム、100mM ペンタンスルホン酸ナトリウム、pH2.0(HClで調整)、4% アセトニトリル
流速:0.8ml/min
検出:PDA 220nm
インジェクション:10μl
分析時間:15分
試料濃度:500ppm(n=3)、
標準物質(アンセリン、カルノシン):6.25, 12.5, 25, 50, 100, 200 ppm
(クレアチン、クレアチニン定量方法)
使用機器:Waters Alliance 2695/PDA2996 (Waters)
カラム:XTerra(R) MS C18 3.5μm 4.6x100mm (Waters) 、37℃
使用溶媒:アセトニトリル:蒸留水(0.1 %ヘプタフルオロ酪酸)
グラジエント:0→5分 (5:95) →10分 (50:50) →15分 (5:95) →30分 (5:95)
流速:0.5 mL/min
分析時間:20分
注入量:10 μL
検出波長:210 nm
試料濃度:1000ppm(n=3)、
標準物質(クレアチン):10, 20, 40, 60, 100, 200, 400, 600 ,1000 ppm
(乳酸の定量法)
試料溶液:
アンセリン含有サケエキスの5000ppm水溶液(5mL)を、予めメタノール10mL及び水10mLを通液して平衡化したSep-Pak cartridge(C18plus、Waters)に供した。素通りした液をメンブレンフィルター(φ0.45mm、Millipore)にてろ過したものをサンプル溶液とし、下記条件にてHPLC分析を行った。
使用機器:Waters Alliance 2695 / PDA2998 (Waters)
カラム:IC-Sep ICE-ORH-081 φ6.5×300mm (Transgenomic)、35℃
使用溶媒:0.01M硫酸
流速:0.5 mL/分
分析時間:20分
注入量:10 μL
検出波長:210 nm
標準物質:DL-乳酸カルシウム(それぞれ200ppm)。
図1の通り、本発明の各種動物由来エキスは、ヒアルロン酸の産生を促進する作用を有することが確認できた。また、図2の通り動物由来エキス中に含まれるアンセリン、カルノシン、クレアチン、乳酸の各物質についてもヒアルロン酸の産生を促進する作用を有することが確認された。また、図1、図2の結果から、動物由来エキス中に含まれるアンセリン、カルノシン、クレアチン、乳酸もしくはエキス中の他の成分が相乗的に効果を発揮していることが判明した。
Claims (5)
- アンセリン、カルノシン、クレアチン及び乳酸の少なくとも1種を有効成分として含有するヒアルロン酸産生促進剤。
- 魚類、鳥類または哺乳類の肉、骨または皮から得られ、アンセリン、カルノシン、クレアチン及び乳酸の少なくとも1種を含むエキスを含有する請求項1に記載のヒアルロン酸産生促進剤。
- 魚類、鳥類または哺乳類の肉、骨または皮から得られ、アンセリン、カルノシン、クレアチン及び乳酸の少なくとも1種を含むエキスからなる請求項1に記載のヒアルロン酸産生促進剤。
- 請求項1〜3のいずれかに記載のヒアルロン酸産生促進剤が添加されてなることを特徴とする食品。
- 請求項1〜3のいずれかに記載のヒアルロン酸産生促進剤が添加されてなることを特徴とする化粧品。
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