JP2009085747A - アミノ酸分析方法およびアミノ酸分析装置 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】緩衝液の流量の変更と、アンモニアの溶出時間への影響が小さい、その他の分離パラメータの変更とを組み合わせることにより、アンモニアおよび任意のアミノ酸成分の溶出時間を調節する。ここで、アンモニアの溶出時間への影響が小さい分離パラメータとしてカラム温度、緩衝液のpH等がある。
【選択図】図7
Description
rf=100−(溶出時間/流量0.1mL/minの溶出時間×100)
各成分について、この溶出時間変化率rfは緩衝液の流量の変更量に依存し、各成分間で溶出時間変化率rfに有意差は見られない。つまり、どの成分についても、緩衝液流量の変化による溶出時間への影響はほぼ同様であり、成分による特徴は見出されない。
rt=100−(溶出時間/温度60℃の溶出時間×100)
表3に示すように、カラム温度一定で緩衝液の流量を変更した場合においては、各成分の溶出時間変化率に差は見られなかったが、表4のようにカラム温度を変更した場合、アンモニア(NH3)および隣接する任意のアミノ酸成分の溶出時間変化率に差が見られた。特に、アンモニア(NH3)は任意のアミノ酸と比較して溶出時間変化率が小さい。つまり、カラム温度を変更してもアンモニア(NH3)の溶出時間は変化しにくく、アンモニア(NH3)の溶出時間はカラム温度の変更の影響を受けにくいことがわかる。
緩衝液の流量223を、時点0分から34.6分まで0.300mL/minとし、アンモニア(NH3)の溶出時間に対応する35.6分から42.2分までの間、0.275mL/minに減少させ、45.2分以降は0.300mL/minに増加させている。ここで、緩衝液の流量変更に加え、アンモニア(NH3)溶出前にカラム温度を33分から80℃に上昇させるとともに緩衝液をB4(pH4.9)からB5(pH6.2)に切り替え、緩衝液のpHを上昇させる。
Claims (18)
- アンモニアを含むアミノ酸溶液を緩衝液とともに分離カラムに送液してアンモニアおよび各種アミノ酸を分離し、該アミノ酸溶液を反応装置内で反応した後、検出器によって前記アンモニアおよび前記各種アミノ酸を検出するアミノ酸分析方法であって、任意のアミノ酸またはアンモニアを成分iとし、グリシンまたはアラニンが溶出した後で、かつ、アンモニアが溶出する前の任意の時点に緩衝液の流量を変更しなかった場合における成分iの溶出時間をt1(i)とし、上記任意の時点に緩衝液の流量を変更した場合における成分iの溶出時間をt2(i)とし、下記数1により算出される溶出時間変化率をR(i)と定義し、アンモニアの溶出時間変化率R(NH3)を任意のアミノ酸成分jの溶出時間変化率R(j)より大きくすることを特徴とするアミノ酸分析方法。
- 請求項1記載のアミノ酸分析方法であって、前記緩衝液の流量の変更に加えて、前記分離カラムの温度、前記緩衝液のpH、前記緩衝液のナトリウムイオン濃度、前記緩衝液のリチウムイオン濃度および前記緩衝液の有機溶媒濃度のうちの一つまたは複数のパラメータを変更した場合の前記成分iの溶出時間t2(i)とし、上記任意の時点に前記緩衝液の流量および前記一つまたは複数のパラメータを変更しなかった場合の前記成分iの溶出時間t1(i)とし、前記数1により算出される溶出時間変化率をR(i)に関して、アンモニアの溶出時間変化率R(NH3)を任意のアミノ酸成分jの溶出時間変化率R(j)より大きくすることを特徴とするアミノ酸分析方法。
- 請求項1または2に記載のアミノ酸分析方法であって、前記任意のアミノ酸がヒスチジン、フェニルアラニン、リジン、オルニチン、トリプトファンまたはアルギニンのいずれかであることを特徴とするアミノ酸分析方法。
- アンモニアを含むアミノ酸溶液を緩衝液とともに分離カラムに送液してアンモニアおよび各種アミノ酸を分離し、該アミノ酸溶液を反応装置内で反応した後、検出器によって前記アンモニアおよび前記各種アミノ酸を検出するアミノ酸分析方法であって、グリシンまたはアラニンが溶出した後で、かつ、アンモニアが溶出する前の任意の時点に該分離カラムの温度を上昇させ、かつ、該緩衝液の流量を減少させることを特徴とするアミノ酸分析方法。
- 請求項4記載のアミノ酸分析方法であって、アンモニアが前記分離カラムから分離溶出した後に、前記緩衝液の流量を増加させることを特徴とするアミノ酸分析方法。
- 請求項4記載のアミノ酸分析方法であって、アンモニアが前記分離カラムから分離溶出した後に、前記分離カラムの温度を低下させ、かつ、前記緩衝液の流量を増加させることを特徴とするアミノ酸分析方法。
- 請求項4記載のアミノ酸分析方法であって、前記分離カラムの温度を更に上昇させ、かつ、前記緩衝液の流量を増加させることを特徴とするアミノ酸分析方法。
- アンモニアを含むアミノ酸溶液を緩衝液とともに分離カラムに送液してアンモニアおよび各種アミノ酸を分離し、該アミノ酸溶液を反応装置内で反応した後、検出器によって前記アンモニアおよび前記各種アミノ酸を検出するアミノ酸分析方法であって、グリシンまたはアラニンが溶出した後で、かつ、アンモニアが溶出する前の任意の時点に該緩衝液のpH、該緩衝液のナトリウムイオン濃度、該緩衝液のリチウムイオン濃度および該緩衝液の有機溶媒濃度のうちの一つを変更し、かつ、該緩衝液の流量を減少させることを特徴とするアミノ酸分析方法。
- アンモニアを含むアミノ酸溶液を緩衝液とともに分離カラムに送液してアンモニアおよび各種アミノ酸を分離し、該アミノ酸溶液を反応装置内で反応した後、検出器によって前記アンモニアおよび前記各種アミノ酸を検出するアミノ酸分析方法であって、グリシンまたはアラニンが溶出した後で、かつ、アンモニアが溶出する前の任意の時点に該分離カラムの温度、該緩衝液のpH、該緩衝液のナトリウムイオン濃度、該緩衝液のリチウムイオン濃度および該緩衝液の有機溶媒濃度のうちの少なくとも二つを変更し、かつ、該緩衝液の流量を減少させることを特徴とするアミノ酸分析方法。
- アンモニアを含むアミノ酸溶液を緩衝液とともに分離カラムに送液してアンモニアおよび各種アミノ酸を分離し、該アミノ酸溶液を反応装置内で反応した後、検出器によって前記アンモニアおよび前記各種アミノ酸を検出するアミノ酸分析方法であって、グリシンまたはアラニンが溶出した後で、かつ、アンモニアが溶出する前の任意の時点に該分離カラムの温度を上昇させ、かつ、該緩衝液の流量を増加させることを特徴とするアミノ酸分析方法。
- 複数の緩衝液容器、緩衝液送液手段、分離カラム、反応装置および検出器を具備するアミノ酸分析装置であって、該分離カラムの温度、該緩衝液のpH、該緩衝液のナトリウムイオン濃度、該緩衝液のリチウムイオン濃度および該緩衝液の有機溶媒濃度のうち、少なくともいずれか一つを変更する手段と、該緩衝液の流量を変更する手段とを具備し、アンモニアと任意のアミノ酸とを分離可能としたことを特徴とするアミノ酸分析装置。
- 複数の緩衝液容器、緩衝液送液手段、分離カラム、反応装置および検出器を具備するアミノ酸分析装置であって、該分離カラムの温度、該緩衝液のpH、該緩衝液のナトリウムイオン濃度、該緩衝液のリチウムイオン濃度および該緩衝液の有機溶媒濃度のうちの少なくともいずれか一つを変更する手段と、該緩衝液の流量を変更する手段とを具備し、コンピュータを、該分離カラムの温度、該緩衝液のpH、該緩衝液のナトリウムイオン濃度、該緩衝液のリチウムイオン濃度および該緩衝液の有機溶媒濃度のうちの少なくともいずれか一つを変更する手段、ならびに該緩衝液の流量を変更する手段として機能させるためのプログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体を具備し、アンモニアと任意のアミノ酸とを分離可能としたことを特徴とするアミノ酸分析装置。
- アンモニアを含むアミノ酸溶液を緩衝液とともに分離カラムに送液してアンモニアおよび各種アミノ酸を分離し、該アミノ酸溶液を反応装置内で反応した後、検出器によって前記アンモニアおよび前記各種アミノ酸を検出するアミノ酸分析をコンピュータに実行させるプログラムであって、グリシンまたはアラニンが溶出した後で、かつ、アンモニアが溶出する前の任意の時点に該分離カラムの温度、該緩衝液のpH、該緩衝液のナトリウムイオン濃度、該緩衝液のリチウムイオン濃度および該緩衝液の有機溶媒濃度のうちの一つを変更する工程と、該緩衝液の流量を減少させる工程とをコンピュータに実行させるプログラム。
- アンモニアを含むアミノ酸溶液を緩衝液とともに分離カラムに送液してアンモニアおよび各種アミノ酸を分離し、該アミノ酸溶液を反応装置内で反応した後、検出器によって前記アンモニアおよび前記各種アミノ酸を検出するアミノ酸分析をコンピュータに実行させるプログラムであって、グリシンまたはアラニンが溶出した後で、かつ、アンモニアが溶出する前の任意の時点に該分離カラムの温度、該緩衝液のpH、該緩衝液のナトリウムイオン濃度、該緩衝液のリチウムイオン濃度および該緩衝液の有機溶媒濃度のうちの少なくとも二つを変更する工程と、該緩衝液の流量を減少させる工程とをコンピュータに実行させるプログラム。
- 請求項13または14に記載のプログラムであって、アンモニアが前記分離カラムから分離溶出した後に、前記緩衝液の流量を増加させる工程をコンピュータに実行させるプログラム。
- アンモニアを含むアミノ酸溶液を緩衝液とともに分離カラムに送液してアンモニアおよび各種アミノ酸を分離し、該アミノ酸溶液を反応装置内で反応した後、検出器によって前記アンモニアおよび前記各種アミノ酸を検出するアミノ酸分析をコンピュータに実行させるプログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体であって、グリシンまたはアラニンが溶出した後で、かつ、アンモニアが溶出する前の任意の時点に該分離カラムの温度、該緩衝液のpH、該緩衝液のナトリウムイオン濃度、該緩衝液のリチウムイオン濃度および該緩衝液の有機溶媒濃度のうちの一つを変更する工程と、該緩衝液の流量を減少させる工程とをコンピュータに実行させるプログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体。
- アンモニアを含むアミノ酸溶液を緩衝液とともに分離カラムに送液してアンモニアおよび各種アミノ酸を分離し、該アミノ酸溶液を反応装置内で反応した後、検出器によって前記アンモニアおよび前記各種アミノ酸を検出するアミノ酸分析をコンピュータに実行させるプログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体であって、グリシンまたはアラニンが溶出した後で、かつ、アンモニアが溶出する前の任意の時点に該分離カラムの温度、該緩衝液のpH、該緩衝液のナトリウムイオン濃度、該緩衝液のリチウムイオン濃度および該緩衝液の有機溶媒濃度のうちの少なくとも二つを変更する工程と、該緩衝液の流量を減少させる工程とをコンピュータに実行させるプログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体。
- 請求項16または17に記載のコンピュータ読み取り可能な記録媒体であって、アンモニアが前記分離カラムから分離溶出した後に、前記緩衝液の流量を増加させる工程とをコンピュータに実行させるプログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体。
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---|---|---|---|---|
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JPS61241662A (ja) * | 1985-04-19 | 1986-10-27 | Hitachi Ltd | アミノ酸分析装置 |
JPH04194750A (ja) * | 1990-11-28 | 1992-07-14 | Hitachi Ltd | 生体液中のアミノ酸分析方法および装置 |
JP2007017327A (ja) * | 2005-07-08 | 2007-01-25 | Hitachi High-Technologies Corp | アミノ酸分析法および分析装置 |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102841158A (zh) * | 2012-09-26 | 2012-12-26 | 贵州省烟草科学研究所 | 一种用氨基酸分析仪测定卷烟主流烟气中的氨的方法 |
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