JP2009067701A - Growth promoter of keratinized cell of epidermis and transglutaminase-1 production promoter - Google Patents
Growth promoter of keratinized cell of epidermis and transglutaminase-1 production promoter Download PDFInfo
- Publication number
- JP2009067701A JP2009067701A JP2007235884A JP2007235884A JP2009067701A JP 2009067701 A JP2009067701 A JP 2009067701A JP 2007235884 A JP2007235884 A JP 2007235884A JP 2007235884 A JP2007235884 A JP 2007235884A JP 2009067701 A JP2009067701 A JP 2009067701A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- transglutaminase
- extract
- promoter
- production
- water
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Description
本発明は、表皮角化細胞増殖促進剤及びトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤に関するものである。 The present invention relates to an epidermal keratinocyte proliferation promoter and a transglutaminase-1 production promoter.
表皮は、最下層である基底層から始まって、有棘層、顆粒層、角質層へと連なる４層構造からなるが、角質層に存在する大部分の細胞は、基底層から産まれた角化細胞である。通常、角化細胞は、基底層で産まれ、徐々に分化しながら上層に移動して角質細胞となって角質層を構成し、最終的に垢として角質層から脱落していく。 The epidermis has a four-layer structure that starts with the basal layer, which is the lowest layer, and continues to the spiny layer, the granule layer, and the stratum corneum. Most cells in the stratum corneum are keratinized from the basal layer. It is a cell. Normally, keratinocytes are born in the basal layer, gradually move to the upper layer while being differentiated to form horny cells to form the horny layer, and finally fall off from the horny layer as plaque.
角質層は皮膚の最外殻に存在しており、絶えずターンオーバーを繰り返して一定の厚さと水分量を保持して、外界からの刺激に対するバリアとしての役割を果たしている。皮膚では、このバリア機能を維持させるため、角化細胞が基底層で産まれてから垢となって剥がれ落ちるまでのサイクル（角化）を通常４週間の周期で繰り返し、表皮の新陳代謝を行っている。しかしながら、この角質層は加齢等によって新陳代謝機能が衰えるため、こじわ、くすみ、色素沈着、肌荒れ等の皮膚の老化症状を呈することになる。そのため、角化細胞の増殖を促進し、皮膚の新陳代謝機能を回復させることにより、これらの皮膚の老化症状を予防・改善できるものと考えられる。 The stratum corneum is present in the outermost shell of the skin, and continuously turns over to maintain a certain thickness and water content, thereby serving as a barrier against irritation from the outside world. In order to maintain this barrier function in the skin, the cycle (keratinization) from the time when keratinocytes are born in the basal layer until they become plaque and peel off is repeated in a cycle of usually 4 weeks to perform epidermal metabolism. . However, since this stratum corneum has a metabolic function that deteriorates with aging and the like, it exhibits skin aging symptoms such as wrinkles, dullness, pigmentation, and rough skin. Therefore, it is considered that these skin aging symptoms can be prevented and improved by promoting the proliferation of keratinocytes and restoring the metabolic function of the skin.
従来、表皮角化細胞増殖促進作用を有する種々の生薬が知られており（非特許文献１参照）、表皮角化細胞増殖促進作用を有するものとして、ハス胚芽抽出物（特許文献１参照）等が知られている。 Conventionally, various herbal medicines having epidermal keratinocyte proliferation promoting action are known (see Non-patent Document 1), and those having an epidermal keratinocyte proliferation promoting action include a lotus germ extract (see Patent Document 1) and the like. It has been known.
また、基底層、有棘層、顆粒層及び角質層から構成されている表皮は、外部刺激を緩和し、水分等の体内成分の逸失を制御する働きをしている。基底層で分裂し、増殖した細胞は、有棘層、顆粒層を通過しながら分化し、強固な架橋結合をもったケラチン蛋白線維で構成された角質層になり、最終的には垢として角質層から脱落する。特に、顆粒層では、細胞膜が肥厚して肥厚細胞膜を形成するとともに、トランスグルタミナーゼ−１の作用により、蛋白分子間がグルタミル−リジン架橋され、強靭なケラチン蛋白線維が形成される。さらに、その一部にセラミド等が共有結合し、疎水的な構造をとることで、細胞間脂質のラメラ構造の土台を供給し、角質バリア機能及び皮膚の保湿機能の基礎が形成される。 The epidermis composed of a basal layer, a spiny layer, a granule layer, and a stratum corneum serves to alleviate external stimuli and control the loss of body components such as moisture. Cells that divide and proliferate in the basal layer differentiate while passing through the spinous layer and granule layer, and become a stratum corneum composed of keratin protein fibers with strong cross-linking, and finally, as stratum corneum Drop off from the layer. In particular, in the granular layer, the cell membrane is thickened to form a thickened cell membrane, and between the protein molecules is glutamyl-lysine cross-linked by the action of transglutaminase-1 to form a strong keratin protein fiber. Furthermore, ceramide or the like is covalently bonded to a part thereof to form a hydrophobic structure, thereby providing a base of a lamellar structure of intercellular lipids and forming a foundation for a keratin barrier function and a skin moisturizing function.
しかし、加齢とともに表皮におけるトランスグルタミナーゼ−１の産生量が減少すると、角質バリア機能及び皮膚の保湿機能が低下するため、肌荒れ、乾燥肌等の皮膚の老化症状を呈したり、乾燥性皮膚疾患（例えば、アトピー性皮膚炎、乾癬、魚鱗癬等）を発症したりするようになる。そのため、表皮におけるトランスグルタミナーゼ−１の産生を促進することにより、皮膚の老化症状や乾燥性皮膚疾患等を予防、治療又は改善することができると考えられる。このようなトランスグルタミナーゼ−１産生促進作用を有するものとして、ニガリ又はその構成成分である塩化カルシウム等が知られている（特許文献２参照）。
本発明は、安全性の高い天然物の中から表皮角化細胞増殖促進作用及びトランスグルタミナーゼ−１産生促進作用を有するものを見出し、それを有効成分とする表皮角化細胞増殖促進剤及びトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤を提供することを目的とする。 The present invention finds an epidermal keratinocyte proliferation promoting action and a transglutaminase-1 production promoting action among highly safe natural products, and an epidermal keratinocyte proliferation promoting agent and transglutaminase containing the same as active ingredients -1 production promoter.
上記課題を解決するため、本発明の表皮角化細胞増殖促進剤及びトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤は、ワカメ及び／又はヒジキからの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。 In order to solve the above-mentioned problems, the epidermal keratinocyte growth promoter and transglutaminase-1 production promoter of the present invention are characterized by containing an extract from wakame and / or hinoki as an active ingredient.
本発明によれば、天然物であるワカメ及び／又はヒジキからの抽出物を有効成分として含有し、安全性に優れた表皮角化細胞増殖促進剤及びトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤を提供することができる。 According to the present invention, an epidermis keratinocyte proliferation promoter and a transglutaminase-1 production promoter that are excellent in safety and contain an extract from natural seaweed and / or cypress as an active ingredient. Can do.
以下、本発明について説明する。
本発明の表皮角化細胞増殖促進剤及びトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤は、ワカメ及び／又はヒジキからの抽出物を有効成分として含有する。
The present invention will be described below.
The epidermal keratinocyte proliferation promoter and transglutaminase-1 production promoter of the present invention contain an extract from seaweed and / or cypress as an active ingredient.
ここで本発明において「ワカメ及び／又はヒジキからの抽出物」には、ワカメ及び／又はヒジキを抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。 Here, in the present invention, “an extract from seaweed and / or hijiki” includes an extract obtained from seaweed and / or hijiki as an extraction raw material, a diluted or concentrated liquid of the extract, and the extract is dried. The obtained dried product, or any of these roughly purified products or purified products is included.
本発明において使用する抽出原料は、ワカメ（学名：Undaria pinnatifida）及びヒジキ（学名：Hizikia fusiformis）である。なお、本発明における抽出原料としてのワカメ及びヒジキは、未加工のものであってもよいし、それらの乾燥物等の加工されたものであってもよい。 The extraction raw materials used in the present invention are wakame (scientific name: Undaria pinnatifida) and hijiki (scientific name: Hizikia fusiformis). In addition, the raw seaweed and the hinoki as the extraction raw material in the present invention may be unprocessed or processed such as a dried product thereof.
ワカメ（Undaria pinnatifida）は、チガイソ科ワカメ属に属する一年生の海藻であって、北海道南西部から九州にかけての海岸で、低潮線付近から下に生育しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得るワカメの構成部位としては、例えば、葉部（葉体，成葉）、茎部（中芯，中肋）、胞子葉部、全藻、根部等が挙げられるが、好ましくは全藻である。 Wakame (Undaria pinnatifida) is an annual seaweed belonging to the genus Wakame, which grows from the vicinity of the low tide on the coast from southwestern Hokkaido to Kyushu, and can be easily obtained from these areas. Can do. Examples of the constituent parts of wakame that can be used as an extraction raw material include leaf parts (leaf bodies, adult leaves), stem parts (core, middle cocoons), spore leaves, whole algae, roots, etc. Is a whole algae.
ヒジキ（Hizikia fusiformis）は、ホンダワラ科ヒジキ属に属する多年生の海藻であって、北海道南部から南西諸島にかけての海岸で、潮間帯下部の岩上に生育しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得るヒジキの構成部位としては、例えば、葉部、茎部、全藻、根部等が挙げられるが、好ましくは全藻である。 Hijiki (Hizikia fusiformis) is a perennial seaweed belonging to the genus Hidaikira, which grows on the rocks in the lower intertidal zone on the coast from southern Hokkaido to the Nansei Islands, and can be easily obtained from these areas. Can do. Examples of the constituent parts of cypress that can be used as an extraction raw material include leaves, stems, total algae, roots, and the like, preferably total algae.
ワカメ又はヒジキからの抽出物に含有される表皮角化細胞増殖促進作用又はトランスグルタミナーゼ−１産生促進作用を有する物質の詳細は不明であるが、海藻類の抽出に一般に用いられている抽出方法によって、ワカメ又はヒジキからこれらの作用を有する抽出物を得ることができる。 Although details of the substance having an epidermal keratinocyte growth promoting action or transglutaminase-1 production promoting action contained in an extract from seaweed or cypress are unknown, it depends on the extraction method generally used for the extraction of seaweeds. An extract having these actions can be obtained from wakame or hijiki.
例えば、上記海藻類を乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用いて粉砕し、抽出溶媒による抽出に供することにより、表皮角化細胞増殖促進作用又はトランスグルタミナーゼ−１産生促進作用を有する抽出物を得ることができる。上記海藻類の乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、ワカメ又はヒジキの極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。 For example, after drying the seaweed, it is pulverized as it is or using a crusher, and is subjected to extraction with an extraction solvent to obtain an extract having an epidermal keratinocyte proliferation promoting action or a transglutaminase-1 production promoting action. be able to. The seaweed may be dried in the sun or using a commonly used dryer. Moreover, after performing pretreatment, such as degreasing, with a nonpolar solvent such as hexane, it may be used as an extraction raw material. By performing pretreatment such as degreasing, extraction with a polar solvent such as seaweed or cypress can be efficiently performed.
抽出溶媒としては、極性溶媒を用いるのが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温度で使用することが好ましい。 As the extraction solvent, it is preferable to use a polar solvent, and examples thereof include water and hydrophilic organic solvents. These may be used alone or in combination of two or more at room temperature or a temperature below the boiling point of the solvent. Is preferred.
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。 Examples of water that can be used as the extraction solvent include pure water, tap water, well water, mineral spring water, mineral water, hot spring water, spring water, fresh water, and the like, and those subjected to various treatments. Examples of the treatment applied to water include purification, heating, sterilization, filtration, ion exchange, osmotic pressure adjustment, buffering, and the like. Therefore, the water that can be used as the extraction solvent in the present invention includes purified water, hot water, ion-exchanged water, physiological saline, phosphate buffer, phosphate buffered saline, and the like.
抽出溶媒として使用することのできる親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。 Examples of hydrophilic organic solvents that can be used as the extraction solvent include lower aliphatic alcohols having 1 to 5 carbon atoms such as methanol, ethanol, propyl alcohol, and isopropyl alcohol; lower aliphatic ketones such as acetone and methyl ethyl ketone; -C2-C5 polyhydric alcohols, such as butylene glycol, propylene glycol, and glycerol, etc. are mentioned.
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０質量部に対して低級脂肪族アルコール１〜９０質量部を混合することが好ましく、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水１０質量部に対して低級脂肪族ケトン１〜４０質量部を混合することが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０質量部に対して多価アルコール１０〜９０質量部を混合することが好ましい。 When using the liquid mixture of 2 or more types of polar solvents as an extraction solvent, the mixing ratio can be adjusted suitably. For example, when using a liquid mixture of water and a lower aliphatic alcohol, it is preferable to mix 1 to 90 parts by weight of a lower aliphatic alcohol with respect to 10 parts by weight of water. When using a mixed solution, it is preferable to mix 1 to 40 parts by mass of a lower aliphatic ketone with 10 parts by mass of water, and when using a mixed solution of water and a polyhydric alcohol, water 10 It is preferable to mix 10 to 90 parts by mass of polyhydric alcohol with respect to parts by mass.
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。 The extraction treatment is not particularly limited as long as the soluble component contained in the extraction raw material can be eluted in the extraction solvent, and can be performed according to a conventional method. For example, the extraction raw material is immersed in an extraction solvent 5 to 15 times (mass ratio) of the extraction raw material, the soluble components are extracted at room temperature or under reflux, and then filtered to remove the extraction residue. A liquid can be obtained. The obtained extract is diluted, concentrated, dried, purified, etc. according to a conventional method in order to obtain a diluted or concentrated solution of the extract, a dried product of the extract, or a crude purified product or a purified product thereof. Processing may be performed.
精製は、例えば、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等により行うことができる。得られた抽出液はそのままでも表皮角化細胞増殖促進剤又はトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤の有効成分として使用することができるが、濃縮液又は乾燥物としたものの方が使用しやすい。 Purification can be performed by, for example, activated carbon treatment, adsorption resin treatment, ion exchange resin treatment, or the like. The obtained extract can be used as it is as an active ingredient of an epidermal keratinocyte growth promoter or transglutaminase-1 production promoter, but a concentrated solution or a dried product is easier to use.
ワカメ又はヒジキからの抽出物は特有の匂いを有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、皮膚外用剤等に配合する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。 Since the extract from wakame or hinoki has a unique odor, it can be purified for the purpose of decoloring, deodorizing, etc. within a range that does not cause a decrease in its physiological activity. Since it is not used in a large amount when it is blended in, there is no practical problem even if it is not purified.
以上のようにして得られるワカメ及びヒジキからの抽出物は、表皮角化細胞増殖促進作用及びトランスグルタミナーゼ−１産生促進作用を有しているため、それぞれの作用を利用して表皮角化細胞増殖促進剤及びトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤の有効成分として用いることができる。なお、本発明においては、ワカメ抽出物及びヒジキ抽出物のうちのいずれか一方を上記有効成分として用いてもよいし、両者を混合して上記有効成分として用いてもよい。ワカメ抽出物及びヒジキ抽出物を混合して上記有効成分として用いる場合、その配合比は、それらの作用の程度に応じて適宜決定すればよい。 The extract from seaweed and cypress obtained as described above has an action to promote epidermal keratinocyte proliferation and an effect to promote transglutaminase-1 production. It can be used as an active ingredient of a promoter and a transglutaminase-1 production promoter. In the present invention, any one of the wakame extract and the hinoki extract may be used as the active ingredient, or both may be mixed and used as the active ingredient. When a wakame extract and a hinoki extract are mixed and used as the active ingredient, the blending ratio may be appropriately determined according to the degree of their action.
本発明の表皮角化細胞増殖促進剤又はトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤は、ワカメ及び／又はヒジキからの抽出物のみからなるものであってもよいし、上記抽出物を製剤化したものであってもよい。 The epidermal keratinocyte growth promoter or transglutaminase-1 production promoter of the present invention may be composed only of an extract from seaweed and / or cypress, or a preparation of the above extract. May be.
ワカメ及び／又はヒジキからの抽出物は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味・矯臭剤等を用いることができる。ワカメ及び／又はヒジキからの抽出物は、他の組成物（例えば、皮膚化粧料、飲食品等）に配合して使用することができるほか、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。 The extract from wakame and / or hijiki is in any form such as powder, granule, tablet, liquid, etc., using a pharmaceutically acceptable carrier such as dextrin and cyclodextrin and other optional auxiliaries according to conventional methods. It can be formulated into a dosage form. In this case, as an auxiliary agent, for example, an excipient, a binder, a disintegrant, a lubricant, a stabilizer, a flavoring / flavoring agent, and the like can be used. Extracts from wakame and / or hinoki can be used in other compositions (for example, skin cosmetics, foods and drinks), and used as ointments, liquids for external use, patches, etc. Can do.
なお、本発明の表皮角化細胞増殖促進剤又はトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤は、必要に応じて、表皮角化細胞増殖促進作用又はトランスグルタミナーゼ−１産生促進作用を有する他の天然抽出物を配合して有効成分として用いることができる。 In addition, the epidermal keratinocyte proliferation promoter or transglutaminase-1 production promoter of the present invention may be selected from other natural extracts having an epidermal keratinocyte proliferation promoting action or a transglutaminase-1 production promoting action as necessary. It can mix | blend and can be used as an active ingredient.
本発明の表皮角化細胞増殖促進剤又はトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤の投与方法としては、一般に経皮投与、経口投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。また、本発明の表皮角化細胞増殖促進剤又はトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。 The administration method of the epidermal keratinocyte proliferation promoter or transglutaminase-1 production promoter of the present invention generally includes transdermal administration, oral administration, etc., but depending on the type of disease, it can be used for its prevention / treatment, etc. A suitable method may be appropriately selected. In addition, the dose of the epidermal keratinocyte proliferation promoter or transglutaminase-1 production promoter of the present invention may be appropriately increased or decreased depending on the type of disease, severity, individual differences among patients, administration method, administration period, and the like.
本発明の表皮角化細胞増殖促進剤は、ワカメ及び／又はヒジキからの抽出物が有する表皮角化細胞増殖促進作用を通じて、表皮角化細胞の増殖を促進し、シワ形成、弾力性低下等の皮膚の老化症状を予防、治療又は改善することができる。ただし、本発明の表皮角化細胞増殖促進剤は、これらの用途以外にも表皮角化細胞増殖促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。なお、ワカメ及び／又はヒジキからの抽出物は、それらの表皮角化細胞増殖促進作用を通じて、例えば、創傷や火傷等を原因とする皮膚疾患における皮膚再生用治療剤等の有効成分としても用いることができる。 The epidermal keratinocyte proliferation promoter of the present invention promotes the proliferation of epidermal keratinocytes through the epidermal keratinocyte proliferation promoting action possessed by the extract from seaweed and / or cypress, such as wrinkle formation, reduced elasticity, etc. It can prevent, treat or ameliorate skin aging symptoms. However, the epidermal keratinocyte proliferation promoter of the present invention can be used for all applications that are meaningful for exerting an epidermal keratinocyte proliferation promoting action in addition to these applications. In addition, the extract from seaweed and / or hinoki is also used as an active ingredient of a therapeutic agent for skin regeneration in skin diseases caused by wounds, burns, etc., through their epidermal keratinocyte proliferation promoting action. Can do.
本発明のトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤は、ワカメ及び／又はヒジキからの抽出物が有するトランスグルタミナーゼ−１産生促進作用を通じて、シミ、シワ形成、弾力性低下等の皮膚の老化症状を予防、治療又は改善することができる。ただし、本発明のトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤は、これらの用途以外にもトランスグルタミナーゼ−１産生促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。なお、ワカメ及び／又はヒジキからの抽出物は、それらのトランスグルタミナーゼ−１産生促進作用を通じて、トランスグルタミナーゼ−１の欠乏に起因する疾患（例えば、魚鱗癬、乾癬、アトピー性皮膚炎等の皮膚疾患）の予防・治療剤の有効成分としても用いることができる。 The transglutaminase-1 production promoter of the present invention prevents and treats skin aging symptoms such as spots, wrinkle formation, and decreased elasticity through transglutaminase-1 production promoting action of an extract from seaweed and / or cypress Or it can be improved. However, the transglutaminase-1 production promoter of the present invention can be used for all uses that are meaningful for exerting a transglutaminase-1 production promoting action in addition to these uses. It should be noted that extracts from seaweed and / or cypress are used for diseases caused by deficiency of transglutaminase-1 through their transglutaminase-1 production promoting action (for example, skin diseases such as ichthyosis, psoriasis, and atopic dermatitis). ) Can be used as an active ingredient of the preventive / therapeutic agent.
なお、本発明の表皮角化細胞増殖促進剤又はトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。 The epidermal keratinocyte proliferation promoter or transglutaminase-1 production promoter of the present invention is suitably applied to humans, but as long as each effect is exerted, animals other than humans are used. It can also be applied to.
以下、製造例及び試験例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。 Hereinafter, although a manufacture example and a test example are shown and this invention is demonstrated concretely, this invention is not restrict | limited to each following example at all.
〔製造例１〕ワカメ抽出物の製造
ワカメ乾燥物の粗粉砕物１００ｇに抽出溶媒１５００ｍＬを加え、穏やかに攪拌しながら８０℃にて２時間保ち、熱時濾過した。得られた抽出液を４０℃で減圧下にて濃縮し、減圧乾燥機で乾燥してワカメ抽出物を得た（試料１〜３）。抽出溶媒として、水、５０質量％エタノール（水とエタノールとの質量比１：１）、８０質量％エタノール（水とエタノールとの質量比１：４）を用いたときの各抽出物の収量（固形分換算）を表１に示す。
[Production Example 1] Production of wakame extract 1500 ml of extraction solvent was added to 100 g of a coarsely pulverized dried wakame product, kept at 80 ° C for 2 hours with gentle stirring, and filtered while hot. The obtained extract was concentrated under reduced pressure at 40 ° C. and dried with a vacuum drier to obtain wakame extract (Samples 1 to 3). Yield of each extract when water, 50 mass% ethanol (mass ratio of water and ethanol 1: 1), 80 mass% ethanol (mass ratio of water and ethanol 1: 4) was used as the extraction solvent ( Table 1 shows the solid content conversion.
〔製造例２〕ヒジキ抽出物の製造
ヒジキ乾燥物の粗粉砕物１００ｇに抽出溶媒１５００ｍＬを加え、穏やかに攪拌しながら８０℃にて２時間保ち、熱時濾過した。得られた抽出液を４０℃で減圧下にて濃縮し、減圧乾燥機で乾燥してヒジキ抽出物を得た（試料４〜６）。抽出溶媒として、水、５０質量％エタノール（水とエタノールとの質量比１：１）、８０質量％エタノール（水とエタノールとの質量比１：４）を用いたときの各抽出物の収量（固形分換算）を表２に示す。
[Production Example 2] Manufacture of a hinoki extract To 100 g of the crushed dried hinoki, 1500 mL of an extraction solvent was added, kept at 80 ° C for 2 hours with gentle stirring, and filtered while hot. The obtained extract was concentrated under reduced pressure at 40 ° C. and dried with a vacuum dryer to obtain a hinoki extract (samples 4 to 6). Yield of each extract when water, 50 mass% ethanol (mass ratio of water and ethanol 1: 1), 80 mass% ethanol (mass ratio of water and ethanol 1: 4) was used as the extraction solvent ( Table 2 shows (in terms of solid content).
〔試験例１〕表皮角化細胞増殖促進作用試験
製造例１により得られたワカメ抽出物（試料１〜３）及び製造例２により得られたヒジキ抽出物（試料４〜６）について、以下のようにして表皮角化細胞増殖促進作用を試験した。
[Test Example 1] Epidermal keratinocyte proliferation promoting action test The wakame extract (Samples 1 to 3) obtained in Production Example 1 and the hinoki extract (Samples 4 to 6) obtained in Production Example 2 were as follows. Thus, the epidermal keratinocyte proliferation promoting action was tested.
正常ヒト新生児表皮角化細胞（ＮＨＥＫ−Ｎｅｏ）を、正常ヒト表皮角化細胞長期培養用増殖培地（EpiLife-KG2）を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を１．５×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度にEpiLife-KG2にて希釈した後、コラーゲンコートした９６ウェルプレートに１ウェルあたり１００μＬずつ播種し、一晩培養した。培養終了後、EpiLife-KG2で溶解した試料溶液（試料１〜６）を各ウェルに１００μＬずつ添加し、３日間培養した。 Normal human newborn epidermal keratinocytes (NHEK-Neo) were cultured using normal human epidermal keratinocyte long-term culture growth medium (EpiLife-KG2), and then cells were collected by trypsin treatment. The collected cells were diluted with EpiLife-KG2 to a cell density of 1.5 × 10 4 cells / mL, then seeded at 100 μL per well in a collagen-coated 96-well plate, and cultured overnight. After completion of the culture, 100 μL of a sample solution (samples 1 to 6) dissolved in EpiLife-KG2 was added to each well and cultured for 3 days.
表皮角化細胞増殖促進作用は、ＭＴＴアッセイ法を用いて測定した。培養終了後、培地を抜き、終濃度０．４ｍｇ／ｍＬでＰＢＳ（−）に溶解したＭＴＴを各ウェルに１００μＬずつ添加した。２時間培養した後に、細胞内に生成したブルーホルマザンを２−プロパノール１００μＬで抽出した。抽出後、波長５７０ｎｍにおける吸光度を測定した。同様に濁度として波長６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。測定した各吸光度から、下記式により表皮角化細胞増殖促進率（％）を算出した。 The epidermal keratinocyte proliferation promoting action was measured using the MTT assay. After completion of the culture, the medium was removed, and 100 μL of MTT dissolved in PBS (−) at a final concentration of 0.4 mg / mL was added to each well. After culturing for 2 hours, blue formazan produced in the cells was extracted with 100 μL of 2-propanol. After extraction, the absorbance at a wavelength of 570 nm was measured. Similarly, the absorbance at a wavelength of 650 nm was measured as turbidity, and the difference between the two was used as the amount of blue formazan produced. From each measured absorbance, the epidermal keratinocyte proliferation promotion rate (%) was calculated by the following formula.
表皮角化細胞増殖促進率(％)＝Ｓｔ／Ｃｔ×１００
式中、Ｓｔは「試料溶液添加時の吸光度」を表し、Ｃｔは「試料溶液無添加時の吸光度」を表す。
結果を表３に示す。
Epidermal keratinocyte proliferation promotion rate (%) = St / Ct × 100
In the formula, St represents “absorbance when a sample solution is added”, and Ct represents “absorbance when no sample solution is added”.
The results are shown in Table 3.
表３に示すように、ワカメ抽出物及びヒジキ抽出物は、優れた表皮角化細胞増殖促進作用を有することが確認された。 As shown in Table 3, it was confirmed that the wakame extract and the hinoki extract have an excellent epidermal keratinocyte proliferation promoting action.
〔試験例２〕トランスグルタミナーゼ−１産生促進作用試験
製造例１により得られたワカメ抽出物（試料１〜３）及び製造例２により得られたヒジキ抽出物（試料４〜６）について、以下のようにしてトランスグルタミナーゼ−１産生促進作用を試験した。
[Test Example 2] Transglutaminase-1 production promoting action test The wakame extract (Samples 1 to 3) obtained in Production Example 1 and the hinoki extract (Samples 4 to 6) obtained in Production Example 2 were as follows. Thus, the transglutaminase-1 production promoting action was tested.
正常ヒト新生児表皮角化細胞（ＮＨＥＫ−Ｎｅｏ）を、正常ヒト新生児表皮角化細胞用増殖培地（ＫＧＭ）を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を１×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度になるようにＫＧＭで希釈した後、９６ウェルプレートに１ウェルあたり１００μＬずつ播種し、２日間培養した。培養終了後、ＫＧＭで溶解した試料溶液（試料１〜６）を各ウェルに１００μＬずつ添加し、２４時間培養した。培養終了後、培地を抜き、細胞をプレートに固定させ、細胞表面に発現したトランスグルタミナーゼ−１の量を、モノクローナル抗ヒトトランスグルタミナーゼ−１抗体を用いたＥＬＩＳＡ法により測定した。得られた測定結果から、下記式によりトランスグルタミナーゼ−１産生促進率（％）を算出した。 Normal human neonatal epidermal keratinocytes (NHEK-Neo) were cultured using normal human neonatal epidermal keratinocyte growth medium (KGM), and then cells were collected by trypsin treatment. The collected cells were diluted with KGM to a cell density of 1 × 10 5 cells / mL, then seeded at 100 μL per well in a 96-well plate, and cultured for 2 days. After completion of the culture, 100 μL of a sample solution (samples 1 to 6) dissolved in KGM was added to each well and cultured for 24 hours. After completion of the culture, the medium was removed, the cells were fixed to the plate, and the amount of transglutaminase-1 expressed on the cell surface was measured by ELISA using a monoclonal anti-human transglutaminase-1 antibody. From the obtained measurement results, the transglutaminase-1 production promotion rate (%) was calculated by the following formula.
トランスグルタミナーゼ−１産生促進率(％)＝Ａ／Ｂ×１００
式中、Ａは「試料添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｂは「試料無添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表す。
試験結果を表４に示す。
Transglutaminase-1 production promotion rate (%) = A / B × 100
In the formula, A represents “absorbance at a wavelength of 405 nm when a sample is added”, and B represents “absorbance at a wavelength of 405 nm when no sample is added”.
The test results are shown in Table 4.
表４に示すように、ワカメ抽出物及びヒジキ抽出物は、優れたトランスグルタミナーゼ−１産生促進作用を有することが確認された。 As shown in Table 4, it was confirmed that the wakame extract and the hinoki extract have an excellent transglutaminase-1 production promoting action.
本発明の表皮角化細胞増殖促進剤又はトランスグルタミナーゼ−１産生促進剤は、皮膚の老化症状等の予防、治療又は改善に大きく貢献できる。 The epidermal keratinocyte proliferation promoter or transglutaminase-1 production promoter of the present invention can greatly contribute to the prevention, treatment or improvement of skin aging symptoms and the like.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2007235884A JP2009067701A (en) | 2007-09-11 | 2007-09-11 | Growth promoter of keratinized cell of epidermis and transglutaminase-1 production promoter |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2007235884A JP2009067701A (en) | 2007-09-11 | 2007-09-11 | Growth promoter of keratinized cell of epidermis and transglutaminase-1 production promoter |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2009067701A true JP2009067701A (en) | 2009-04-02 |
Family
ID=40604351
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2007235884A Pending JP2009067701A (en) | 2007-09-11 | 2007-09-11 | Growth promoter of keratinized cell of epidermis and transglutaminase-1 production promoter |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2009067701A (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011148742A (en) * | 2010-01-22 | 2011-08-04 | Noevir Co Ltd | Cell activator and skin external preparation |
| JP2014062090A (en) * | 2012-08-29 | 2014-04-10 | Kao Corp | Transglutaminase activator |
| JP2016204273A (en) * | 2015-04-16 | 2016-12-08 | 理研ビタミン株式会社 | Sirtuin gene activator |
| US10064800B2 (en) | 2012-08-29 | 2018-09-04 | Kao Corporation | Transglutaminase activator |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07101871A (en) * | 1992-12-24 | 1995-04-18 | Lion Corp | Promoter for synthesis of hyaluronic acid in living body |
| JP2001181167A (en) * | 1999-12-24 | 2001-07-03 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | Inhibitor for elastase activity and cosmetic composition |
| JP2001278769A (en) * | 2000-03-29 | 2001-10-10 | Kao Corp | Skin cosmetic |
| JP2003238434A (en) * | 2002-02-20 | 2003-08-27 | Shiono Koryo Kk | Hyaluronidase activity inhibitor, food and beverage and cosmetic containing the same |
| JP2004083484A (en) * | 2002-08-27 | 2004-03-18 | Nobel Kagaku Kogyo Kk | Skin external preparation |
| JP2008239493A (en) * | 2007-03-23 | 2008-10-09 | Naris Cosmetics Co Ltd | External preparation for skin |
-
2007
- 2007-09-11 JP JP2007235884A patent/JP2009067701A/en active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07101871A (en) * | 1992-12-24 | 1995-04-18 | Lion Corp | Promoter for synthesis of hyaluronic acid in living body |
| JP2001181167A (en) * | 1999-12-24 | 2001-07-03 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | Inhibitor for elastase activity and cosmetic composition |
| JP2001278769A (en) * | 2000-03-29 | 2001-10-10 | Kao Corp | Skin cosmetic |
| JP2003238434A (en) * | 2002-02-20 | 2003-08-27 | Shiono Koryo Kk | Hyaluronidase activity inhibitor, food and beverage and cosmetic containing the same |
| JP2004083484A (en) * | 2002-08-27 | 2004-03-18 | Nobel Kagaku Kogyo Kk | Skin external preparation |
| JP2008239493A (en) * | 2007-03-23 | 2008-10-09 | Naris Cosmetics Co Ltd | External preparation for skin |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| JPN6012049517; Ｐｈｙｔｅｓｓｅｎｃｅ Ｗａｋａｍｅ Ａｎｔｉ-ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｔｏ Ｍａｉｎｔａｉｎ ｔｈｅ ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ ｏｆ ｙｏｕｎｇ ｓｋｉｎ: 'Ｐｈｙｔｅｓｓｅｎｃｅ Ｗａｋａｍｅ Ａｎｔｉ-ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｔｏ Ｍａｉｎｔａｉｎ ｔｈｅ ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ ｏｆ ｙｏｕｎｇ ｓｋｉｎ' Ｅｕｒｏ Ｃｏｓｍｅｔ Ｖｏｌ．１４，Ｎｏ．６, 2006, Ｐａｇｅ．２２-２３ * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011148742A (en) * | 2010-01-22 | 2011-08-04 | Noevir Co Ltd | Cell activator and skin external preparation |
| JP2014062090A (en) * | 2012-08-29 | 2014-04-10 | Kao Corp | Transglutaminase activator |
| US10064800B2 (en) | 2012-08-29 | 2018-09-04 | Kao Corporation | Transglutaminase activator |
| JP2016204273A (en) * | 2015-04-16 | 2016-12-08 | 理研ビタミン株式会社 | Sirtuin gene activator |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5969738B2 (en) | Anti-glycation agent | |
| JP2022010412A (en) | Anti-aging agent | |
| JP2008273875A (en) | Agent for suppressing increase of expression of stem cell factor | |
| JP5889546B2 (en) | Hexosaminidase release inhibitor, stem cell growth factor mRNA expression increase inhibitor, hydrogen peroxide cell disorder preventive / ameliorating agent and glutathione production promoter | |
| JP2009191039A (en) | EXPRESSION PROMOTOR FOR HYALURONIC ACID SYNTHETASE 3mRNA, EXPRESSION PROMOTOR FOR AQUAPORIN 3mRNA, EXPRESSION PROMOTOR FOR SERINE PALMITOYLTRANSFERASE mRNA, AND PRODUCTION PROMOTOR FOR LAMININ 5 | |
| JP2009067701A (en) | Growth promoter of keratinized cell of epidermis and transglutaminase-1 production promoter | |
| JP2009040757A (en) | Agent promoting laminin 5 production, agent normalizing dermal basement membrane, and agent promoting recovery of skin lesion | |
| JP5751981B2 (en) | Novel phenylethanoid glycosides and skin cosmetics | |
| JP2008255051A (en) | Ceramide synthesis promoter, skin barrier function-ameliorating agent, and agent for preventing and treating disease caused by ceramide synthesis trouble | |
| JP5761888B2 (en) | Anti-aging agent and skin cosmetics | |
| JP2006316028A (en) | Antiaging agent and epidermal keratinizing cell proliferation accelerator | |
| JP2014221739A (en) | Type vii collagen expression promoter | |
| JP2012162487A (en) | Whitening agent, anti-aging agent and skin cosmetic | |
| JP5067916B2 (en) | Skin cosmetics and hair cosmetics | |
| JP2012219031A (en) | LAMININ 5 PRODUCTION PROMOTER, INTEGRIN α6β4 PRODUCTION PROMOTER, SKIN BASEMENT MEMBRANE-NORMALIZING AGENT, SKIN DAMAGE-RESTORING PROMOTER, AND AQUAPORIN 3mRNA EXPRESSION PROMOTER | |
| JP2006008571A (en) | Moisturizer, antioxidant, antiaging agent, skin cosmetic and beauty drink and food | |
| JP5072300B2 (en) | Cyclic AMP phosphodiesterase inhibitor | |
| JP2015086168A (en) | Lipase inhibitor, and skin cosmetic for sebum control | |
| JP2009114146A (en) | Transglutaminase-1 production promoter and involucrin production promoter | |
| JP2012056933A (en) | Elastin production promoter | |
| JP6175216B2 (en) | Preventive and therapeutic agents for arthritis | |
| JP2010065007A (en) | Claudin-1 production promoter and skin barrier function improving agent | |
| JP5155543B2 (en) | Endothelin-1 production inhibitor, hexosaminidase release inhibitor, anti-inflammatory / whitening skin preparation, endothelin-1 production inhibition method, and hexosaminidase release inhibition method | |
| JP5993724B2 (en) | Elastin production promoter and skin cosmetics | |
| JP5132030B2 (en) | Immunostimulants, antitumor agents, anti-inflammatory agents, anti-aging agents and skin cosmetics |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20100618 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120926 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20130417 |