JP2008534972A - サンプル液の検査装置及び方法 - Google Patents
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Abstract
Description
for Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)」,第76巻第7号,アナリティカル・ケミストリー(Analytical Chemistry)(2004年4月1日発行)という文献は、そのp.1832−1837に、個々のELISA法ステップのためのいわゆるコンパクトディスク(CD)の形態をしたマイクロフルイディックシステムを記載している。サンプル液、洗浄液、検出抗体入りの液体及び基質液体を対応の受入れチャンバに追加し、これら受入れチャンバは、CDの対応した回転の変化により次々に単一の割り当てられた反応チャンバ内に送り込まれ、対応の反応が生じる。かくして、個々のステップをマイクロフルイディックシステム内で実施することができる。しかしながら、ピペット操作という労力は、それほど減少しない。というのは、従来型ELISA法と比較して、洗浄ステップの繰り返しが回避されるに過ぎないからである。
本発明の一特徴は、第1の共通受入れチャンバからサンプル液を好ましくは排他的に受け入れる幾つかの第1の計量チャンバ及び第2の共通受入れチャンバから希釈液を好ましくは排他的に受け入れる幾つかの第2の計量チャンバを提供することにある。第1の計量チャンバ、及び(又は)、第2の計量チャンバは、容積が様々であり、第1の計量チャンバ、及び(又は)、第2の計量チャンバは、一対ずつ互いに割り当てられ、各対は、割り当てられた反応チャンバに連結され、第1の計量チャンバ及び第2の計量チャンバにそれぞれ入れられている量のサンプル液及び希釈液が一対ずつ割り当てられた反応チャンバ内に移送されて混合され、それによりサンプル液を種々の希釈比で希釈できるようになっている。特許請求の範囲に記載されたこの希釈を以下、略して「並行希釈」とも称する。かくして、ピペット操作に要する費用が最小限に抑えられ、即ち、第1及び第2の共通受入れチャンバだけを外部から液体で満たし、非常に高い精度のサンプル液の希釈系列を具体化できる。
並行希釈に関し、注目されるべきこととして、好ましくは、単一の希釈ステップで、したがって、並行希釈3〜20で、特に、大まかには10回の希釈又は種々の希釈比が得られる。当然のことながら、装置1では幾つかの並行希釈が更に生じ得る。したがって、装置1は、必要ならば、図1に示すような構成を幾つか更に有することができる。
Claims (36)
- 特にELISA法によってサンプル液(3)を検査する装置(1)であって、
前記サンプル液(3)を受け入れる第1の共通受入れチャンバ(4)と、
前記第1の受入れチャンバに連結されていて、特に、圧力、及び、毛管力の少なくともいずれか1つによって前記サンプル液(3)を収容する幾つかの第1の計量チャンバ(5)と、
希釈液(8)を収容する第2の共通受入れチャンバ(7)と、
前記第2の受入れチャンバ(7)に連結されていて、特に圧力、毛管力、及び、遠心力の少なくともいずれか1つによって前記希釈液(8)を排他的に受け入れる幾つかの第2の計量チャンバ(9)と、
幾つかの反応チャンバ(11)とを有し、
前記第1の計量チャンバ(5)、及び、前記第2の計量チャンバ(9)は、容積が様々であり、前記第1の計量チャンバ(5)、及び、前記第2の計量チャンバ(9)の少なくともいずれか1つは、一対ずつ互いに割り当てられ、各対は、割り当てられた反応チャンバ(11)に連結され、前記第1の計量チャンバ(5)及び前記第2の計量チャンバ(9)にそれぞれ入れられている量の前記サンプル液(3)及び前記希釈液(8)が一対ずつ前記割り当てられた反応チャンバ(11)内に移送されて混合され、それにより、前記サンプル液(3)を種々の希釈比で希釈できるようになっている、
ことを特徴とする装置。 - 前記第1の計量チャンバ(5)の容積は、特に前記第1の受入れチャンバ(4)から始まって増大し又は減少し、前記第2の計量チャンバ(9)の容積は、前記割り当てられた第1の計量チャンバ(5)の容積とは逆に、減少し又は増大するようになっていることを特徴とする、請求項1記載の装置。
- 一対ずつ互いに割り当てられた前記第1の計量チャンバ(5)及び前記第2の計量チャンバ(9)の容積の合計は、同一であることを特徴とする、請求項1又は2記載の装置。
- 前記反応チャンバ(11)のうちの少なくとも1つからの希釈状態の前記サンプル液(3)を更に希釈することができる、請求項1〜3のうちいずれか一項に記載の装置。
- 前記第1の計量チャンバ(5)は、特に第1のチャネル(18)を介して、前記サンプル液(3)を受け入れる前記第1の共通受入れチャンバ(4)に並列に連結され、特に、前記サンプル液(3)を前記第1の計量チャンバ(5)から前記割り当てられた反応チャンバ(11)内に移す前に、前記第1のチャネル(18)を空にすることができることを特徴とする、請求項1〜4のうちいずれか一項に記載の装置。
- 前記第2の計量チャンバ(9)は、特に第2のチャネル(19)を介して、前記希釈液(8)を受け入れる前記第2の共通受入れチャンバ(7)に並列に連結され、特に、前記希釈液(8)を前記第2の計量チャンバ(9)から前記割り当てられた反応チャンバ(11)内に移す前に、前記第2のチャネル(19)を空にすることができることを特徴とする、請求項1〜5のうちいずれか一項に記載の装置。
- 第2の計量チャンバ(9)は、各々、連結部(12)を介して、割り当てられた反応チャンバ(11)に連結され、前記割り当てられた第1の計量チャンバ(5)は各々、前記割り当てられた反応チャンバ(11)に並列に連結され又は特に液体停止部(S1)を介して前記連結部(12)に並列に連結され、好ましくは、前記希釈液(8)は、前記第2の計量チャンバ(9)から前記反応チャンバ(11)内への移送の際に、前記第1の計量チャンバ(3)から前記反応チャンバ(11)内への前記サンプル液(3)の移送を支援して、特に前記液体停止部(S1)に打ち勝つために、且つ(或いは)、特に前記反応チャンバ(11)への前記第1の計量チャンバ(5)の前記連結部(12)の区分において前記サンプル液(3)と前記希釈液(8)の混合を生じさせるために、流出側における前記割り当てられた第1の計量チャンバ(5)の前記連結部又は前記液体停止部(S1)を濡らすようになっていることを特徴とする、請求項1〜6のうちいずれか一項に記載の装置。
- 特に圧力、遠心力及び(又は)毛管力により希釈状態のサンプル液(3)を受け入れる追加の第1の計量チャンバ(5′)が、前記反応チャンバ(11)のうちの少なくとも1つに、又は、幾つかの反応チャンバ(11)に並列に連結され、特に圧力、遠心力、及び、毛管力のうちの少なくとも1つにより、前記希釈液(8)を受け入れる追加の第2の計量チャンバ(9′)が、前記第2の受入れチャンバ(7)に連結され、収集チャンバ(10)が、希釈液(8)又は追加分の希釈液(8)のために前記第2の計量チャンバ(9)に割り当てられ、前記追加の第1の計量チャンバ(5′)、及び、前記追加の第2の計量チャンバ(9′)のうちの少なくとも1つは、容積が様々であり、前記追加の第1の計量チャンバ(5′)、及び、前記追加の第2の計量チャンバ(9′)は、一対ずつ互いに割り当てられ、各対は、割り当てられた追加の反応チャンバ(11′)に連結され、前記追加の第1の計量チャンバ(5′)、及び、前記追加の第2の計量チャンバ(9′)にそれぞれ入れられている量の前記サンプル液(3)、及び、前記希釈液(8)が一対ずつ前記割り当てられた追加の反応チャンバ(11′)内に移送されて混合され、それにより、前記サンプル液(3)を種々の希釈比で希釈できるようになっていることを特徴とする、請求項1〜7のうちいずれか一項に記載の装置。
- 前記追加の第1の計量チャンバ(5′)の容積は、増大し又は減少し、前記追加の第2の計量チャンバ(9′)の容積は、前記割り当てられた追加の第1の計量チャンバ(5′)の容積とは逆に、減少し又は増大するようになっていることを特徴とする、請求項8に記載の装置。
- 一対ずつそれぞれ割り当てられた前記追加の第1の計量チャンバ(5′)、及び、前記追加の第2の計量チャンバ(9′)の容積の合計は、同一であることを特徴とする、請求項9記載の装置。
- 前記装置(1)は、1種類又は2種類以上の液体(14)、例えば、試薬、特に抗体入りの液体、洗浄液、例えば、特に前記反応チャンバ(11,11′)内における自由結合部位の遮断のための遮断液、例えば、特に検出抗体に結合される酵素入りの液体、及び、例えば、基質入りの液体のうちの少なくとも1つを、特に次々に受け入れる第3の受入れチャンバ(13)を有することを特徴とする、請求項1〜10のうちいずれか一項に記載の装置。
- 特に前記ELISA法によってサンプル液(3)を検査する装置(1)であって、特に請求項1〜11のうちいずれか一に記載の装置(1)において、
前記サンプル液(3)を受け入れる第1の受入れチャンバ(4)と、
種々の液体(14)を次々に受け入れる第3の受入れチャンバ(13)と、
前記サンプル液(3)、及び、前記種々の液体(14)を次々に供給できる幾つかの反応チャンバ(11,11′)とを有し、
前記装置(1)は、前記液体(14)を再び受け入れる前に、その度毎に前記第3の受入れチャンバ(13)が空になるように構成されている、
ことを特徴とする装置。 - 前記装置(1)は、試薬、特に抗体入りの液体、洗浄液、例えば、特に前記反応チャンバ(11,11′)内における自由結合部位の遮断のための遮断液、例え、特に検出抗体に結合される酵素入りの液体、及び、例えば、基質入りの液体のうちの少なくとも1つを、前記第3の受入れチャンバ(13)によって受け入れることができるように構成されていることを特徴とする、請求項12記載の装置。
- 前記反応チャンバ(11)のうちの幾つか又は全ては、圧力、毛管力、及び、遠心力のうちの少なくとも1つによって、液体(14)を次々に受け入れる前記第3の受入れチャンバ(13)に連結されていることを特徴とする、請求項11〜13のうちいずれか一項に記載の装置。
- 前記装置(1)は、液体(3,8,14)を受け入れるために、前記反応チャンバ(11,11′)、及び、下流側の検査チャンバ(16)、及び、収集チャネル(17)のうちの少なくとも1つに割り当てられた、少なくとも1つの収集チャンバ(15)を有することを特徴とする、請求項1〜14のうちいずれか一項に記載の装置。
- 前記装置は、検査チャンバ(16)を有し、前記検査チャンバは、前記反応チャンバ(11,11′)内で進行する検出反応を特に同時に停止できるように、前記反応チャンバ(11)、及び、追加の反応チャンバ(11′)のうちの少なくとも1つに割り当てられ、前記反応チャンバ(11,11′)内に入っている液体(14)は、特に、圧力、毛管力、及び、遠心力のうちの少なくとも1つによって、特に同時に前記割り当てられた検査チャンバ(16)内に移送可能であり、特に、前記反応チャンバ(11,11′)内には不動化された試薬、例えば、酵素が存在することを特徴とする、請求項1〜15のうちいずれか一項に記載の装置。
- 前記装置(1)は、好ましくは、丸形ディスク、例えば、CDの形態でマイクロフルイディックシステムとして設計されると共に、(或いは)、セグメント状モジュールで構成されていることを特徴とする、請求項1〜16のうちいずれか一項に記載の装置。
- 特にELISA法によってサンプル液(3)を検査する方法であって、
前記サンプル液(3)を第1の共通受入れチャンバ(4)に供給し、前記受入れチャンバ(4)から幾つかの第1の計量チャンバ(5)内に中継し、
希釈液(8)を第2の共通受入れチャンバ(7)に供給し、該受入れチャンバ(7)から幾つかの第2の計量チャンバ(9)内に中継し、
前記第1の計量チャンバ(5)、及び、前記第2の計量チャンバ(9)のうちの少なくとも1つは、容積が様々であり、前記第1の計量チャンバ(5)、及び、前記第2の計量チャンバ(9)のうちの少なくとも1つは、一対ずつ互いに割り当てられ、前記第1の計量チャンバ(5)、及び、前記第2の計量チャンバ(9)にそれぞれ入れられている量の前記サンプル液(3)、及び、前記希釈液(8)を一対ずつ前記割り当てられた反応チャンバ(11)内に移送して混合し、それにより、前記サンプル液(3)を種々の希釈比で希釈し、次に検査する、
ことを特徴とする方法。 - 前記第1の受入れチャンバ(4)から前記割り当てられた反応チャンバ(11)内への前記サンプル液(3)の供給のために、前記第1の計量チャンバ(5)が連結されている第1のチャネル(18)を、まず最初に空にし、
その後、前記サンプル液(3)を前記第1の計量チャンバ(5)から前記割り当てられた反応チャンバ(11)内に移送し、且つ、前記第2の受入れチャンバ(4)からの前記サンプル液(3)の供給のために前記第2の計量チャンバ(9)が連結されている第2のチャネル(19)をまず最初に空にし、或いは、前記サンプル液(3)を前記第1の計量チャンバ(5)から前記割り当てられた反応チャンバ(11)内に移送し、或いは、前記第2の受入れチャンバ(4)からの前記サンプル液(3)の供給のために前記第2の計量チャンバ(9)が連結されている第2のチャネル(19)をまず最初に空にし、
その後、前記サンプル液(3)を前記第2の計量チャンバ(9)から前記割り当てられた反応チャンバ(11)内に移送する、
ことを特徴とする請求項18記載の方法。 - 連結部(12)を介する前記第1の計量チャンバ(5)から前記割り当てられた反応チャンバ(11)内への前記サンプル液(3)の移送の間、又は、移送中、前記希釈液(8)は、前記割り当てられた第2の計量チャンバ(9)から前記反応チャンバ(11)内への移送の際に前記連結部(12)を通って流れ、好ましくは、前記希釈液(8)は、前記第2の計量チャンバ(9)から前記反応チャンバ(11)内への移送の際に、前記第2の計量チャンバ(9)から前記割り当てられた反応チャンバ(11)内への前記サンプル液(3)の移送を支援して、特に前記液体停止部(S1)に打ち勝つために流出側における前記割り当てられた第1の計量チャンバ(5)の前記連結部を濡らすことを特徴とする、請求項18又は19記載の方法。
- 前記計量チャンバ(5,9)から前記割り当てられた反応チャンバ(11)内へのそれぞれの前記連結部(12)を介する前記サンプル液(3)、及び、前記希釈液(8)の移送中、特に前記連結部(12)内に既に存在する前記液体(3,8)を混合するために、前記サンプル液(3)を、前記連結部(12)を通って流れている前記希釈液(8)中に側方に送り込み、或いは、前記希釈液(8)を、前記連結部(12)を通って流れている前記サンプル液(3)中に側方に送り込むことを特徴とする、請求項18〜20のうちいずれか一項に記載の方法。
- 前記サンプル液(3)と前記希釈液(8)を、特に良好な混合のためにそれぞれの前記反応チャンバ(11)内に並行して、又は、同時に移送することを特徴とする、請求項18〜21のうちいずれか一項に記載の方法。
- 前記反応チャンバ(11)のうちの少なくとも1つからの前記希釈されたサンプル液(3)を更に希釈することを特徴とする、請求項18〜22のうちいずれか一項に記載の方法。
- 再度希釈のために、既に一度希釈された前記サンプル液(3)を反応チャンバ(11)から追加の第1の計量チャンバ(5′)に送り、前記希釈液(8)を追加の第2の計量チャンバ(9′)に送り、前記追加の第1の計量チャンバ(5′)、及び、前記追加の第2の計量チャンバ(9′)のうちの少なくとも1つは、容積が様々であり、前記追加の第1の計量チャンバ(5′)、及び、前記追加の第2の計量チャンバ(9′)のうちの少なくとも1つは、一対ずつ互いに割り当てられ、前記追加の第1の計量チャンバ(5′)、及び、前記追加の第2の計量チャンバ(9′)にそれぞれ入れられている量の前記既に一度希釈されたサンプル液(3)、及び、前記希釈液(8)を一対ずつ前記割り当てられた追加の反応チャンバ(11′)内に移送して混合し、それにより、前記既に一度希釈されたサンプル液(3)を種々の希釈比で更に希釈し、次に検査するようになっていることを特徴とする、請求項23記載の方法。
- 特にELISA法によってサンプル液(3)を検査する方法であって、特に請求項18〜24のうちいずれか一項に記載の方法において、
検出反応は、前記サンプル液(3)中の被分析物質の検出のために前記反応チャンバ(11,11′)内で進行し、
種々の液体(14)を圧力、遠心力、及び、毛管力のうちの少なくとも1つによって、共通の第3の受入れチャンバ(13)を介して、次々に前記反応チャンバ(11,11′)に送り、
前記第3の受入れチャンバ(13)を、毛管力、及び、遠心力のうちの少なくとも1つによって、新たな液体(14)を受け入れる前に自動的に空にする、
ことを特徴とする方法。 - 前記反応チャンバ(11,11′)に種々の液体(14)、例えば、試薬、特に抗体入りの液体、洗浄液、例えば、特に前記反応チャンバ(11,11′)内における自由結合部位の遮断のための遮断液、例えば、特に検出抗体に結合される酵素入りの液体、及び、例えば、基質入りの液体のうちの少なくとも1つを、好ましくは、共通の第3の受入れチャンバ(13)を介して特に圧力、毛管力、及び、遠心力のうちの少なくとも1つによって次々に供給することを特徴とする、請求項18〜25のうちいずれか一に記載の方法。
- 前記第3の受入れチャンバ(13)を、新たな液体(14)を受け入れる前に、その度毎に、特に、毛管力、及び、遠心力のうちの少なくとも1つによって自動的に空にすることを特徴とする、請求項26記載の方法。
- 前記サンプル液(3)を送る前に前記反応チャンバ(11,11′)に、好ましくは、不動化された試薬、特に、抗体を施し、特に、前記反応チャンバ(11,11′)を、好ましくは、不動化された試薬、特に抗体で被覆することを特徴とする、請求項18〜27のうちいずれか一項に記載の方法。
- 前記試薬の不動化後、前記反応チャンバ(11,11′)内の依然として自由な結合部位を遮断液で遮断することを特徴とする、請求項28記載の方法。
- 被覆及び(又は)遮断のそれぞれの後、特に一度に一回だけ、洗浄のための洗浄液を前記反応チャンバ(11,11′)中に送ることを特徴とする、請求項28又は29記載の方法。
- それぞれの希釈比の前記サンプル液(3)を特に圧力、毛管力、及び、遠心力のうちの少なくとも1つによって、それぞれの前記反応チャンバ(11,11′)内に送り込むことを特徴とする、請求項28〜30のうちいずれか一項に記載の方法。
- 或る反応時間後で、且つ、前記試薬への前記サンプル液(3)中の前記被分析物質の結合後、或いは、或る反応時間後、或いは前記試薬への前記サンプル液(3)中の前記被分析物質の結合後、前記反応チャンバ(11,11′)を洗浄し、次に、前記試薬及び前記被分析物質から成る化合物に結合する検出試薬、特に酵素入りの検出抗体を前記反応チャンバ(11,11′)内に送り込み、最終的に非結合状態の検出試薬、又は、非結合状態の酵素を再び洗い落とすことを特徴とする、請求項31記載の方法。
- 非結合状態の検出試薬又は非結合状態の酵素の洗い落とし後、基質を前記反応チャンバ(11,11′)内に送り込み、検出反応において前記検出試薬又は酵素により、特に酵素の作用で検出基質に改質し又は変換することを特徴とする、請求項32記載の方法。
- 前記反応チャンバ(11,11′)内において、前記サンプル液(3)中の被分析物質の検出のための、特に酵素的、又は、他の触媒的検出反応が進行し、そうする際、検出基質が作られることを特徴とする、請求項18〜33のうちいずれか一項に記載の方法。
- 前記検出反応を、それぞれの前記反応チャンバ(11,11′)内に入っている液体を好ましくは、圧力、毛管力、及び、遠心力のうちの少なくとも1つによって、前記基質及び前記検出基質と共に前記反応チャンバ(11,11′)から割り当てられた検査チャンバ(16)内に移送し、このようにして、検出反応に必要な反応の相手を分離することにより、幾つかの反応チャンバ(11,11′)内において、又は、全ての反応チャンバ(11,11′)内において、同時に停止させることを特徴とする、請求項32〜34のうちいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法を特に丸形ディスク、例えば、CDの形態のマイクロフルイディックシステム、及び、好ましくは、セグメント状モジュール(M)のうちの少なくとも1つから成る構造体中で実施し、特に、プロセスシーケンスを制御する遠心力を生じさせるために、前記マイクロフルイディックシステムを、或る特定の時点で、或る特定の時間間隔で、且つ或る特定の回転速度で回転させ、或いは、或る特定の時間間隔で回転させ、或いは、或る特定の回転速度で回転させることを特徴とする、請求項18〜35のうちいずれか一項に記載の方法。
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