JP2008516949A

JP2008516949A - 選択的エストロゲン受容体βアゴニストとしての置換ベンゾピラン

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Publication number: JP2008516949A
Application number: JP2007536726A
Authority: JP
Inventors: ブライアン・ハースト・ノーマン; ティモシー・アイボ・リチャードソン
Original assignee: イーライリリーアンドカンパニー
Priority date: 2004-10-18
Filing date: 2005-10-05
Publication date: 2008-05-22
Also published as: ATE504582T1; US7354951B2; EP1805160B1; US20080064742A1; EP1805160A1; ES2361031T3; DE602005027378D1; WO2006044176A1; CA2578300A1

Abstract

本発明は、新規なベンゾピランＥＲ−βアゴニスト化合物、その医薬組成物、及び、夜尿症、閉塞性尿路疾患、前立腺肥大症、肥満、認知症、高血圧、失禁、大腸ガン、前立腺ガン、不妊、うつ病、白血病、炎症性大腸炎、及び関節炎等の、ＥＲ−βを介した疾患の治療へのこれらの化合物の使用に関する。
式（Ｉ）

（式中、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）_ｎ−、−ＣＦ_２−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＲ^１Ｈ−、又は−ＣＲ^２（ＯＨ）−であり；Ｒは、ハロ、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル、又はＲ^３−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；Ｒ^１は、フッ素、ヒドロキシル、シアノ、トリフルオロメチル、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル、（Ｃ_２−Ｃ_４）アルケニル、（Ｃ_２−Ｃ_４）アルキニル、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシ、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルカルボニルオキシ、又はベンジルであり；Ｒ^２は、トリフルオロメチル、又は（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルであり；Ｒ^３は、シアノ、ヒドロキシル、（Ｃ_２−Ｃ_４）アルケニル、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシ、又は（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシルカルボニルであり；ｎは、０、１、又は２であり；ｍは、０、１、又は２である）、及びその薬理学的に許容できる塩。

Description

本発明は、新規なベンゾピランＥＲ−βアゴニスト化合物、その医薬組成物、及び、前立腺肥大症、肥満、認知症、高血圧、失禁、大腸ガン、前立腺ガン、不妊、うつ病、白血病、炎症性大腸炎、及び関節炎等の、ＥＲ−βが媒介する疾患の治療へのこれらの化合物の使用に関する。

エストロゲンは、男性及び女性の双方の、生殖系、中枢神経系、骨格系、及び心臓血管系の発達及び恒常性に対して重要な役割を果たしている。近年、新たなエストロゲン受容体（ＥＲ）であるＥＲ−βが、ラット前立腺のｃＤＮＡライブラリーからクローニングされ、マウス及びヒトの前立腺に存在している。したがって、以前から知られているＥＲは現在ではＥＲ−αと呼ばれている。ＥＲ−αとＥＲ−βは、高いアミノ酸相同性を有しており、１７−βエストラジオール（Ｅ２）に対し同様の結合親和性を示し、ヘテロ又はホモ二量化して情報伝達複合体を形成する（例えば、非特許文献１及び２参照）。ＥＲ−α及びＥＲ−βは共にＥ２活性を示すが、これらの両者の間には組織中の分布及び機能において差があることがよく知られているため、サブタイプ選択的なリガンドは、種々の疾患に対する標的として魅力的である。興味深いことに、３−β，１７−β−アンドロスタンジオール、及び５−α−アンドロスタンが、ＥＲ−βに対する内在性リガンドであることが提唱されている（例えば、非特許文献３参照）。３−β，１７−β−アンドロスタンジオールは、５−α−位が還元された、活性な男性副性器中の細胞内アンドロゲンであるジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）の主要な代謝産物である。ＥＲ−β活性は、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ及びキノン還元酵素の発現量の増大によっても促進される。これらの２種類の酵素は、化学予防的解毒作用を有することが示された（非特許文献４及び５）。

近年のＥＲ−βの同定、及びＥＲ−αとＥＲ−βの有する生物学的な役割の相違に対する認識から、ＥＲ選択的なモジュレータも同様に重要な臨床上の用途を有すると思われる。ＥＲ−βは、前立腺、膀胱、卵巣、睾丸、肺、小腸、血管内皮、及び脳の種々の部位等の多くの組織において強く発現しているので、ＥＲ−βを選択的にモジュレートする化合物は、肥満、認知症、高血圧、失禁、大腸ガン、前立腺ガン、不妊、うつ病、白血病、炎症性大腸炎、及び関節炎等の、多くの病的症状の治療に有用であることが示唆された（例えば、非特許文献６及び７参照）。選択的な化合物は、ＥＲ−αを含む組織に対して最小限の効果しか有さず、したがって、副作用プロフィールを示すと思われる。したがって、ＥＲ−βアゴニストは、ＥＲ−αアンタゴニスト又はアゴニストと比べて異なる治療プロフィールを示し、ＥＲ−βによる情報伝達に依存する組織に特異的に利益をもたらす。

前立腺は、精液や血液中に存在する成分を産生している。それらの成分の幾つかは、調節ペプチドである。前立腺は、間質細胞及び上皮細胞を含み、後者のグループは、円柱分泌細胞及び基底非分泌細胞からなる。これらの基底細胞の増殖は、間質細胞の場合と同様、普通の前立腺疾患の１つである良性前立腺過形成（ＢＰＨ）を引き起こす。ＢＰＨは、尿道閉塞に至る前立腺の結節性の肥大を特徴とする進行性の疾患である。その結果、排尿頻度の増大、夜間頻尿、尿量の減少、及び排尿開始の困難等の症状が現れる。ＢＰＨの結果として、膀胱平滑筋の肥厚、非代償性膀胱、及び尿路感染の罹患率の増大が挙げられる。ＢＰＨの進行は、高齢の男性の集団にとっては不可避の現象であると考えられている。ＢＰＨは、７０歳以上の男性の約７０％に見られる。近年、ＢＰＨの薬物治療には、症状の緩和のためには、αアドレナリン拮抗薬が、また、過形成組織量の減少のためにはステロイド５αレダクターゼ阻害剤が用いられている。これらのアプローチによる治療的な利点は限られているため、新しい治療法が望まれている。
ＫｕｉｐｅｒＧＧ，ｅｔａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１３８：８６３−７０（１９９７）ＫｕｉｐｅｒＧＧｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９３：５９２５−３０（１９９６）ＷｅｉｈｕａＺ．ｅｔａｌ．ＰＮＡＳ９８：６３３０−５（２００１）ＣｈａｎｇＷＹｅｔａｌ．，Ｐｒｏｓｔａｔｅ４０：１１５−２４（１９９９）ＭｏｎｔａｎｏＭＭｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７３：２５４４３−９（１９９８）Ｊ．Ｇｕｓｔａｆｓｓｏｎ，ＴＩＰＳ，２４（９），ｐ４７９−４８５（２００３）Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１４４，ｐ．４２４１−４２４９（２００３）

第１の態様において、本発明は、式Ｉの化合物及びその薬理学的に許容できる塩を提供する。

式Ｉ
（式中、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）_ｎ−、−ＣＦ_２−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＲ^１Ｈ−、又は−ＣＲ^２（ＯＨ）−であり；
Ｒは、ハロ、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル、又はＲ^３−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｒ^１は、フッ素、ヒドロキシル、シアノ、トリフルオロメチル、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル、（Ｃ_２−Ｃ_４）アルケニル、（Ｃ_２−Ｃ_４）アルキニル、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシ、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルカルボニルオキシ、又はベンジルであり；
Ｒ^２は、トリフルオロメチル、又は（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルであり；
Ｒ^３は、シアノ、ヒドロキシル、（Ｃ_２−Ｃ_４）アルケニル、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシ、又は（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシルカルボニルであり；
ｎは、０、１、又は２であり；
ｍは、０、１、又は２である）

式Ｉの化合物の具体的な態様において、
Ｇは、−ＣＦ_２−、又は−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒは、ハロ、メチル、エチル、又はＲ^３−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｒ^３は、シアノ、ヒドロキシル、ビニル、メトキシ、又はエトキシであり；
ｍは、０又は１である。

式Ｉの化合物の具体的な態様において、
Ｇは、−ＣＦ_２−であり；
Ｒは、ハロ、メチル、エチル、又はＲ^３−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｒ^３は、シアノ、ヒドロキシル、ビニル、メトキシ、又はエトキシであり；
ｍは、０又は１である。

式Ｉの化合物の別の具体的な態様において、
Ｇは、−ＣＦ_２−、又は−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒは、ハロ、メチル、又はＲ^３−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｒ^３は、シアノ、ヒドロキシル、ビニル、又はメトキシであり；
ｍは、０又は１である。

式Ｉの化合物の別の具体的な態様において、Ｇは、−ＣＦ_２−、又は−Ｃ（Ｏ）−であり、Ｒは、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、メチル、メトキシメチル、シアノメチル、ヒドロキシメチル、又はビニルである。

式Ｉの化合物の別の具体的な態様において、Ｇは、−ＣＦ_２−であり、Ｒは、メチル又はメトキシメチルである。

別の態様において、式Ｉの化合物は、

並びに、それらのすべてのラセミ体混合物及び特定の鏡像異性体からなる群より選ばれる。

第２の態様において、本発明は、式Ｉの化合物又はその薬理学的に許容できる塩を、薬理学的に許容できる担体、希釈剤、又は賦形剤とともに含有する医薬組成物を提供する。

第３の態様において、本発明は、患者における夜間頻尿症、閉塞性尿路疾患、肥満、痴呆、高血圧、失調症、大腸癌、前立腺癌、不妊症、低下、白血病、炎症性腸疾患、関節炎または前立腺肥大症を治療する方法であって、前記患者に、有効量の式Ｉの化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む方法を提供する。

具体的な態様において、治療される症状は、前立腺肥大症である。

別の具体的な態様において、治療される症状は、前立腺癌である。

第４の態様において、本発明は、患者における夜間頻尿症、尿路疾患、肥満、痴呆、高血圧、失調症、大腸癌、前立腺癌、不妊症、低下、白血病、炎症性腸疾患、関節炎または前立腺肥大症を治療する方法であって、前記患者に、式Ｉの化合物又はその薬理学的に許容できる塩を、薬理学的に許容できる担体、希釈剤、又は賦形剤とともに含有する医薬組成物を投与することを含む方法を提供する。

第５の態様において、本発明は、式Ｉの化合物又はその薬理学的に許容できる塩の、夜間頻尿症、尿路疾患、肥満、痴呆、高血圧、失調症、大腸癌、前立腺癌、不妊症、低下、白血病、炎症性腸疾患、関節炎または前立腺肥大症の治療用医薬品の製造における使用を提供する。

第６の態様において、本発明は、ＥＲ−β受容体の機能を低下する方法であって、前記受容体を、式Ｉの化合物又はその薬理学的に許容できる塩と接触させることを含む方法を提供する。

第７の態様において、本発明は、患者におけるＥＲ−β受容体の機能を低下する方法であって、前記患者に、有効量の式Ｉの化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む方法を提供する。

第８の態様において、本発明は、ＥＲ−β受容体を介した疾患を治療する方法であって、有効量の式Ｉの化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む方法を提供する。

具体的な態様において、疾患は、夜間頻尿症、閉塞性尿路疾患、肥満、痴呆、高血圧、失調症、大腸癌、前立腺癌、不妊症、低下、白血病、炎症性腸疾患、関節炎または前立腺肥大症である。

具体的な態様において、治療される症状は、前立腺肥大症である。
別の具体的な態様において、治療される症状は、前立腺癌である。

本明細書で使用されるように、
ａ）用語「Ｃ_１−Ｃ_４アルキル」は、１〜４個の炭素原子を含む分岐又は直鎖のアルキルラジカル、特に限定されないが、例えば、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃブチル（ｓ−Ｂｕ）、又はｔｅｒｔ−ブチル（ｔ−Ｂｕ）を指す。

ｂ）用語「Ｃ_２−Ｃ_４アルケニル」は、２〜４個の炭素原子を含み、少なくとも１つの炭素間二重結合を有する分岐又は直鎖の炭化水素鎖を指す。Ｃ_２−Ｃ_４アルケニル基の例には、特に限定されないが、エテニル（ビニル）、プロペン−１−イル、プロペン−２−イル（イソプレニル）、プロペン−３−イル（アリル）、２−メチル−プロペン−３−イル、２−ブテン−４−イル、２−メチル−プロペン−１−イル、及び１−ブテン−１−イルが含まれる。

ｃ）用語「Ｃ_２−Ｃ_４アルキニル」は、２〜４個の炭素原子を含み、少なくとも１つの炭素間三重結合を有する直鎖又は分岐の炭化水素鎖を指す。Ｃ_２−Ｃ_４アルキニル基の例には、特に限定されないが、エチニル、プロピン−１−イル、プロピン−２−イル（イソプリニル）、プロピン−３−イル、２−メチル−プロピン−３−イル、２−ブチン−４−イル、２−メチル−プロピン−１−イル、及び１−ブチン−１−イルが含まれる。

ｄ）用語「ハロゲン化物」は、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨード原子を指す。

ｅ）記号

は、立体化学が指定されない結合を指す。

ｆ）記号

は、このページの平面から前方に突き出る結合を指す。

ｇ）記号

は、このページの平面から後方に突き出る結合を指す。

ｈ）調製及び実施例で使用されるように、以下の用語は次に示す意味を有する。「ｎｇ」は、ナノグラムを指し；「μｇ」は、マイクログラムを指し；「ｍｇ」は、ミリグラムを指し；「ｇ」は、グラムを指し；「ｋｇ」は、キログラムを指し；「ｎｍｏｌｅ」は、ナノモルを指し；「ｍｍｏｌ」は、ミリモルを指し；「ｍｏｌ」は、モルを指し；「μＬ」は、マイクロリットルを指し；「ｍＬ」は、ミリリットルを指し；「Ｌ」は、リットルを指し；「Ｒ_ｆ」は、解離因子を指し；「℃」は、摂氏温度を指し；「ｂｐ」は、沸点を指し；「ｍｍＨｇ」は、水銀ミリメートルでの圧力を指し；「ｍｐ」は、融点を指し；「ｄｅｃ」は、分解を指し；「［α］^２ _Ｄ ^０」は、２０℃におけるナトリウムのＤ系の特定の旋回度を指し；「ｃ」は、ｇ／ｍＬでの濃度を指し；「ｎＭ」は、ナノモルを指し；「μＭ」は、マイクロモルを指し；「ｍＭ」は、ミリモルを指し；「Ｍ」は、モルを指し；「Ｋ_ｉ」は、阻害定数を指し；「Ｋ_ｄ」は、解離定数を指し；「ｐｓｉ」は、１平方インチ当たりのポンドを指し；「ｒｐｍ」は、１分当たりの回転数を指し；「ＨＰＬＣ」は、高速液体クロマトグラフィーを指し；「ＨＲＭＳ」は、高分解能質量分析計を指し；「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを指し；「ブライン」は、塩化ナトリウムの飽和水溶液を指し；「Ｌ．Ｏ．Ｄ．」は、乾燥による損失を指し；「μＣｉ」は、マイクロキュリーを指し；「ｉ．ｐ．」は、腹腔内を指し；「ｉ．ｖ．」は、静脈内を指し；「ＤＰＭ」は、１分当たりの崩壊数を指す。

ｉ）用語「鏡像体過剰率」又は「ｅｅ」は、ある鏡像異性体Ｅ１が、２つの鏡像異性体Ｅ１及びＥ２の混合物において超過している割合を指す。即ち、｛（Ｅ１−Ｅ２）／（Ｅ１＋Ｅ２）｝×１００＝ｅｅである。

ｊ）用語「患者」は、特定のエストロゲン受容体−βを介した疾病に罹患した哺乳動物のような温血動物を指す。モルモット、イヌ、ネコ、ネズミ、マウス、ウマ、牛、ヒツジ、及びヒトが、この用語の意味の範囲に属する動物の例であることは理解される。

ｋ）式（Ｉ）の化合物の用語「有効量」及び「治療的有効量」は、肥満、痴呆、高血圧、失調症、大腸癌、前立腺癌、不妊症、低下、白血病、炎症性腸疾患のような、エストロゲン受容体−βが関連する疾病及び疾患を制御するのに有効な量を指す。

ｌ）用語「疾病の制御」は、本明細書で記載される疾病及び疾患を遅延、妨害、阻止、又は停止させるすべての処理を指すことが意図され、必ずしもすべての疾病及び疾患、症状を除去することを意味しないが、肥満、痴呆、高血圧、失調症、大腸癌、前立腺癌、不妊症、低下、白血病、炎症性腸疾患、関節炎または前立腺肥大症のような、エストロゲン受容体−βが関連する疾病及び疾患を予防的に治療することは含まれる。

ｍ）用語「その薬理学的に許容できる塩」は、酸付加塩又は塩基付加塩のいずれかを指す。

ｎ）用語「薬理学的に許容できる酸付加塩」は、式（Ｉ）で示される延期化合物の非毒性の有機又は無機のあらゆる酸付加塩に適用されることが意図される。適切な塩を形成する無機塩の例には、塩化水素、硫化水素、及びリン酸、並びにナトリウム一水素正リン酸塩、及び硫酸水素カリウムのような酸金属塩が含まれる。適切な塩を形成する有機酸の例には、モノ−、ジ−、トリカルボン酸が含まれる。このような酸の例には、例えば、酢酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、桂皮酸、サリチル酸、２−フェノキシ安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸、並びに、ベンゼンスルホン酸、メタンスルホン酸、及び２−ヒドロキシエタンスルホン酸のようなスルホン酸が含まれる。このような塩は、水和又は実質的に無水の形のいずれで存在してもよい。一般に、これら化合物の酸付加塩は、水及び種々の親水性有機溶剤に溶解し、それらの遊離の塩基形に比べ、高い沸点を示す。

ｏ）用語「薬理学的に許容できる酸付加塩」は、式（Ｉ）で示される延期化合物の非毒性の有機又は無機のあらゆる塩基付加塩に適用されることが意図される。適切な塩を形成する塩基の例には、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、又はバリウムの水酸化物のようなアルカリ金属又はアルカリ土類金属の水酸化物、アンモニア、並びに、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、及びピコリンのような脂肪族、脂環式、又は芳香族の有機アミンが含まれる。モノ−又はジ−塩基塩のいずれも前述した化合物とともに形成されてよい。

式Ｉの化合物は、１以上の不斉中心を有してよい。これらキラル中心の結果として、本発明の化合物は、ラセミ体、別れた鏡像異性体、ジアステレオマー、ジアステレオマー混合物として生じる。すべての不斉中心、別れた鏡像異性体、別れた異性体、及びそれらの混合物は、本発明の範囲内である。

ある光学異性体をその鏡像異性体より優先的に調製するため、多数のルートが入手できる。例えば、鏡像異性体の混合物を調製し、次に２つの鏡像異性体を分離してよい。ラセミ混合物の分離に広く使用される方法は、キラル高圧液体クロマトグラフィーの使用である。鏡像異性体混合物の分割に関する更なる詳細は、Ｊ．Ｊａｃｑｕｅｓ，ｅｔａｌ．，Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄＲｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ，（１９９１）において発見できる。

反応スキーム
式Ｉの化合物、及びその中間体は、以下のスキーム１〜６に示す反応により調製することができる。全ての置換基は、特記しない場合には、上に定義したとおりである。試薬及び出発物質は、当業者によって容易に入手できるものである。

スキーム１

Ｒｕｂｅｎｓｔｅｉｎ，Ｌ．Ｊ．，Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ，Ａｂｓｔｒａｃｔｓ１９２５，１２７，１９９８−２００４に記載の方法と同様の方法によって調製された臭化物１は、（カルベトキシメチレン）トリフェニルホスホランと反応して、α，β−不飽和エステル２を生成する。α，β−不飽和エステル２を、三臭化ホウ素（ＢＢｒ_３）と、ジクロロエタン中で加熱しながら反応させると、クマリン３が生成する。クマリン３のフェノール性ヒドロキシル基は、臭化ベンジルの存在下で炭酸カリウム（Ｋ_２ＣＯ_３）を用いて、３ａを生成し、ベンジルエーテルとして保護することができる。３ａのベンジル保護基は、３ａを三臭化ホウ素で処理し、未保護のクマリン３に戻し、次いでクロロメチルメチルエーテル（ＭＯＭＣｌ）の存在下で炭酸カリウムと反応させ、３ｂを生成することによりメトキシメチルエーテルと交換することができる。ベンジル基で保護されたクマリン３ａを、酢酸パラジウム［Ｐｄ（ＯＡｃ）_２］、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（ｐｄｄｆ）、炭酸水素ナトリウム（ＮａＨＣＯ_３）、及びメタノール（ＭｅＯＨ）の存在下で一酸化炭素と反応させると、８−カルボキシクマリン４が生成する。

スキーム２

スキーム２において、シクロペンタノイド５は、Ｔｒｏｓｔのトリメチレンメタン化合物；２−（アセトキシメチル）アリル−トリエチルシラン、酢酸パラジウム［Ｐｄ（ＯＡｃ）_２］、及びトリイソプロピルホスファイト［Ｐ（ＯｉＰｒ）_３］を用いて、６−ベンジルオキシ−８−カルボキシクマリン４への［３＋２］環化付加によって生成される（Ｔｒｏｓｔ，Ｂ．Ｍ．Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．１９８６，２５，１−２０）。その後、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（ＬｉＨＭＤＳ）等の当業者に公知である適当な塩基で５を脱保護し、次いで、エノラートを、ＴＨＦ等の適当な溶媒中でＮ−（５−クロロ−２−ピリジル）トリフリミドでトラップすることにより、５のエノールトリフラートを生成する。エノールトリフラートを、根岸反応の条件；ＴＨＦ等の適当な溶媒中で、塩化亜鉛（ＺｎＣｌ_２）、及びパラジウム−テトラキストリフェニルホスフィン［Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４］（Ｎｅｇｉｓｈｉ，Ｅ．Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．１９８２，１５，３４０−３４８）を用いてリチオ化されたｐ−ベンジルオキシブロモベンゼンとカップリングさせるとフラベン６が得られる。フラベン６のエノールを、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）の存在下でトリエチルシラン（Ｅｔ_３ＳｉＨ）により還元すると、フラバン７が得られる。フラバン７のカルボキシル基を水素化アルミニウムリチウムで還元して得られるベンジルアルコールを水素化ナトリウム及びヨウ化メチルと反応させるとメチルエーテル８が得られる。８のｅｘｏメチレン基を、四酸化オスミウム（ＯｓＯ_４）及びＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド（ＮＭＯ）を用いてジヒドロキシル化し、次いで、過ヨウ素酸ナトリウム（ＮａＩＯ_４）等の適当な酸化剤を用いて、ジオールの酸化的分解をワンポットで行うと、シクロペンタノン９が得られる。

スキーム３

スキーム３において、シクロペンタノン９のベンジル基を、パラジウム担持炭素（Ｐｄ／Ｃ）の存在下で水素（Ｈ_２）を用いて水素化することにより除去され、実施例１及び２の化合物が得られる。

スキーム４

スキーム４では、ブロモ置換ベンゾピラン１４が、スキーム２で記述したルートと実質的に同様の手順で、メトキシメチルエーテル保護クマリン３ｂから調製される。ベンゾピラン１４は、ＤＡＳＴで処理され、ジフルオロアナログ１５が形成される。

スキーム５

スキーム５において、ブロモ置換基を有するベンゾピラン１４を水及びＴＨＦ中塩化水素で処理すると、実施例５の化合物が得られる。ジフルオロアナログ１５について同様の処理を行うと、実施例６の化合物が得られる。ジフルオロベンゾピラン１５を、ヨウ化銅（Ｉ）（ＣｕＩ）、及びＰｄ（ＰＰｈ_３）_４の存在下で、プロピオニトリル等の適当な溶媒中でシアン化ナトリウムと反応させると、シアノ置換基を有するベンゾピラン１６が得られ、これを水及びＴＨＦ中塩化水素で脱保護すると、実施例７の化合物が得られる。ジフルオロブロモベンゾピラン１５を、ビニルボロン酸ジブチルエステル、炭酸ナトリウム（Ｎａ_２ＣＯ_３）、及びＰｄ（ＰＰｈ_３）_４と反応させると、ビニル置換基を有するベンゾピラン１７が得られ、これを水及びＴＨＦ中塩化水素で脱保護すると、実施例８の化合物が得られる。ジフルオロブロモベンゾピラン１５を、ブチルリチウム（ＢｕＬｉ）、次いでホウ酸トリイソプロピル［Ｂ（ＯｉＰｒ）_３］と反応させ、その後過酸化水素（Ｈ_２Ｏ_２）で酸化すると、ヒドロキシ置換基を有するベンゾピラン１８が得られ、これをＤｏｗｅｘ（登録商標）酸性樹脂で脱保護すると、実施例９の化合物が得られる。ジフルオロブロモベンゾピラン１５を、ブチルリチウム、次いでジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）と反応させ、その後水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ_４）で還元すると、ベンジルアルコール１９が得られる。ベンジルアルコール１９を、アセトンシアノヒドリンを用いて、適当な光延反応の条件下（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ，Ｏ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ１９８１，１−２８）でシアン化物と反応させ、その後水及びＴＨＦ中塩化水素で脱保護すると、実施例１０の化合物が得られる。

スキーム６

スキーム６において、１９のアルコールを水素化ナトリウム、次いでヨウ化メチルと反応させることができ、この反応によりメチルエーテル２０が得られる。２０を水及びＴＨＦ中塩化水素で脱保護すると、実施例４の化合物が得られる。２０のメチルエーテルは、パラジウム担持炭素（Ｐｄ／Ｃ）の存在下水素（Ｈ_２）を用いた還元条件下でも除去することができ、メチル置換基を有する化合物２１が得られる。２１を水及びＴＨＦ中塩化水素で脱保護すると、実施例３の化合物が得られる。１９を水及びＴＨＦ中塩化水素で脱保護すると、実施例１１の化合物が得られる。

調製１
（Ｅ）−３−（３−ブロモ−２−ヒドロキシ−５−メトキシ−フェニル）−アクリル酸エチルエステル（２）

臭化物１を、Ｒｕｂｅｎｓｔｅｉｎ，Ｌ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ，Ａｂｓｔｒａｃｔｓ１９２５，１２７，１９９８−２００４に記載の方法と同様の方法により調製する。臭化物１（１００ｇ、４３２．８１ｍｍｏｌ）を２Ｌのトルエン中に溶解する。（カルベトキシメチレン）−トリフェニルホスホラン（１５８．３２ｇ、４５４．４５ｍｍｏｌ）を加え、Ｎ_２置換し、室温で１時間撹拌する。減圧下で揮発物を除去し、Ｅｔ_２Ｏを加え、沈殿が生成するまで濃縮後、ろ過し、Ｅｔ_２Ｏで洗浄後、ろ液を減圧下で濃縮すると、２２７ｇの黒色油状物が得られる。フラッシュクロマトグラフィー（２ｋｇのシリカゲル、１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで最初の分画を除去し、１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで生成物を溶出する）で精製し、１１１ｇ（８５％）の調製物１を得る。ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ ７．８９（ｄ，Ｊ＝１６．１Ｈｚ，１Ｈ），７．０７（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），６．５４（ｄ，Ｊ＝１６．１Ｈｚ，１Ｈ），５．６（ｓ，１Ｈ），４．２７（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），１．３５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）．

調製２
８−ブロモ−６−ヒドロキシ−クロメン−２−オン（３）

冷却器を取り付け、５ＭＮａＯＨトラップと接続した１２Ｌ３つ口フラスコに、調製物１（１１１ｇ、３６８．６０ｍｍｏｌ）及びジクロロエタン（６Ｌ）を入れる。ＢＢｒ_３（３８７．８７ｇ、１４６．３６ｍＬ、１．５５ｍｏｌ）を滴下漏斗から加える。６０℃に加熱し、終夜撹拌する。０℃に冷却し、溶液が均一になるまでＭｅＯＨを注意深く加える。室温まで加温し、減圧下濃縮する。ＣＨ_２Ｃｌ_２を加えると、黒色の溶液及び暗褐色の固体が得られる。固体をろ取し、ろ液を減圧下濃縮すると、ろ液から３２．１ｇの暗褐色の固体、及びろ過により除去することができる５３．２ｇの暗紫色の固体が得られる。ろ液から最初に得られる固体は、出発物質が加水分解した酸である。最初にろ取する２番目の固体が目的生成物である。３２ｇの固体を再度反応させる。粗生成物をひとまとめにし、ＥｔＯＡｃを加え、ろ過後洗浄し、減圧乾燥すると、５５．６ｇの紫色の固体が得られる。ろ液を濃縮し、Ｅｔ_２Ｏ中で粉砕後、ろ過し乾燥すると、さらに１１．３ｇの暗褐色固体が得られる。２度の回収分からの調製物２の全収率は６６．９ｇ（７５％）である。ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １０．２（ｂｄｓ，１Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ，１Ｈ），６．４７（ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ）；ＬＲＭＳ（ＥＳ−）２３８．９（Ｍ−１）．

調製３
６−ベンジルオキシ−８−ブロモ−クロメン−２−オン（３ａ）

調製物２（６６．５ｇ、２７５．８９ｍｍｏｌ）を１．５Ｌの乾燥ＤＭＦに溶解する。細か粉末（３２５メッシュ）にしたＫ_２ＣＯ_３（９１．５６ｇ、６６２．１３ｍｍｏｌ）、次いで臭化ベンジル（５６．６３ｇ、３３１．０７ｍｍｏｌ）を加える。室温で終夜素早く撹拌する。２ＬのＥｔＯＡｃを加え、Ｈ_２Ｏ（１×２Ｌ）、１０％ＬｉＣｌ（３回。合計４Ｌ）、及び飽和食塩水で洗浄する。Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、ろ過後減圧下濃縮すると褐色の固体が得られる。固体を加熱したＥｔＯＡｃ（２Ｌ）中に溶解し、不溶性の褐色固体をろ取後、ヘキサン（約５００ｍＬ）を加え、一晩かけてゆっくりと冷却する。生成した褐色固体をろ取する。この操作により、５０．３ｇの暗褐色固体が得られる。２度目の沈殿がろ液から突然析出する。これにより８．１ｇの褐色固体が得られる。ろ液を約５００ｍＬに濃縮し、シリカゲル充填材（１ｋｇ、溶離液１：１ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）の上に注ぐと、さらに１４．９ｇのより暗褐色の固体が得られる。合計で７３．３ｇ（８０％）の調製物３が得られる。ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ ７．９６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４５−７．３２（ｍ，６Ｈ），６．５３（ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ），５．１５（ｓ，２Ｈ）．

調製４
６−ベンジルオキシ−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−８−カルボン酸メチルエステル（４）

耐圧フラスコに調製物３（３３ｇ、９９．６５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（２．２４ｇ、９．９６ｍｍｏｌ）、ｄｐｐｆ（６．６３ｇ、１１．９６ｍｍｏｌ）、及びＮａＨＣＯ_３（１０．５ｇ、１１９．５８ｍｍｏｌ）を入れる。Ｎ_２置換し、ＭｅＯＨ（５２５ｍＬ）、次いでＤＭＳＯ（３５０ｍＬ）を加え、再度Ｎ_２置換した後に、３０ｐｓｉでＣＯ置換する。８０℃に加熱し、圧力を３０ｐｓｉに保つ。２４時間撹拌すると、化合物はゆっくりと溶液に溶解する。冷却後終夜撹拌する。結晶が生成する。結晶をろ取し、ＥｔＯＡｃで洗浄後、ろ液をひとまとめにしてＭｅＯＨの大部分を除去し、ＥｔＯＡｃで希釈後、水、及び飽和食塩水で３回洗浄後、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、ろ過後濃縮して、結晶とひとまとめにする。暗褐色固体をシリカゲル充填材（１ｋｇ、１：１ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離）に通すと、橙色固体が得られる。ＣＨ_２Ｃｌ_２／ヘキサンから（数度にわたり）再結晶すると、２３．１ｇ（７５％）の調製物４が得られる。ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ ８．０１（ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ），７．６（ｍ，２Ｈ），７．４６（ｍ，２Ｈ），７．４ − ７．３５（ｍ，２Ｈ），７．３４（ｍ，１Ｈ），６．５５（ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ），５．１８（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ）；ＬＲＭＳ（ＥＳ＋）３１１．０４（Ｍ＋１）．

調製５
８−ブロモ−６−メトキシメトキシ−２−オキソ−２Ｈ−クロメン（３ｂ）

ＢＢｒ_３（０．７５ｍＬ、８ｍｍｏｌ）を、２０ｍＬのジクロロメタンに溶解した調製物３（６６２ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）に０℃で加える。１５分間撹拌する。８ｍＬのメタノールを加えた後濃縮する。６ｇのシリカゲルに吸着させ、フラッシュクロマトグラフィー（４０ｇ、１０〜５０％Ａ／Ｂ、Ａ＝１０％ＭｅＯＨを含むＥｔＯＡｃ、Ｂ＝ヘキサン）で精製すると、４７６ｍｇの８−ブロモ−６−ヒドロキシ−クロメン−２−オン（３）が得られる。８−ブロモ−６−ヒドロキシ−クロメン−２−オン（４７６ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）及びＫ_２ＣＯ_３（６６０ｍｇ、４．７７ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＤＭＦに溶解した溶液にクロロメチルメチルエーテル（０．１８ｍＬ）を加える。溶液を終夜撹拌し、さらに０．０９ｍＬのクロロメチルメチルエーテルを加え、２時間撹拌後ＥｔＯＡｃで希釈し、水、水：飽和食塩水の１：１混合物、飽和食塩水で洗浄後、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、ろ過後濃縮すると、５２４ｍｇ（１．８４ｍｍｏｌ、９３％）の調製物５が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．６３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），７．５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），７．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），６．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．７Ｈｚ），５．２０（ｓ，２Ｈ），３．５０（ｓ，３Ｈ）．

調製６
８−ベンジルオキシ−２−メチレン−４−オキソ−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−６−カルボン酸メチルエステル（５）

調製物４（１９８ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＯＡｃ）_２（１７ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）を４ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液に、２−（アセトキシメチル）アリル−トリメチルシラン（０．１６３ｍＬ、０．１２２ｍｍｏｌ）、次いでトリイソプロピルホスファイト（０．１２ｍＬ、０．４９ｍｍｏｌ）を加える。６０℃で終夜撹拌後、溶液を室温まで冷却し、減圧下で濃縮後、ＥｔＯＡｃで希釈する。溶液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、及び飽和食塩水で洗浄する。Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮すると油状物が得られる。この物質をシリカゲルクロマトグラフィー（１０ｇ、１０〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、流速３５ｍＬ／分で３０分間）で精製すると、８０ｍｇ（０．２０８ｍｍｏｌ、６３％）の調製物６と、３０ｍｇの回収された出発物質（０．０９１ｍｍｏｌ、２７％）が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．４８−７．３６（ｍ，６Ｈ），７．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），５．１０（ｓ，２Ｈ），５．０１（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），３．４３（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５，３．１Ｈｚ），３．２１−３．１０（ｍ，２Ｈ），２．８６−２．７４（ｍ，２Ｈ），２．４３（ｍ，１Ｈ）．

調製７
８−ベンジルオキシ−４−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−２−メチレン−１，２，３，９ｂ−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−６−カルボン酸メチルエステル（６）

ｐ−ベンジルオキシブロモベンゼン（２．１７ｇ、８．２５ｍｍｏｌ）を８２ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液に、−７８℃でｔ−ＢｕＬｉ（９．７ｍＬの１．７Ｍペンタン溶液、８．２５ｍｍｏｌ）、次いですぐにＺｎＣｌ_２（８．２５ｍＬの１Ｍエーテル溶液、８．２５ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を０℃に昇温し、後述する方法により調製されるエノールトリフラートが準備できるまで放置する。

調製物６（２．０ｇ、５．４９ｍｍｏｌ）を５５ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液を−７８℃に冷却する。ＬｉＨＭＤＳ（６．６ｍＬの１Ｍヘキサン溶液、６．６ｍｍｏｌ）を加える。４５分間撹拌する。カニューレを通してＮ−（５−クロロ−２−ピリジル）トリフリミド（２．５ｇ、６．６ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液を加える。０℃に昇温し、２時間撹拌する。溶液をＥｔＯＡｃで希釈後、１ＭＨＣｌで２度、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。上述のエノールトリフラート及びＰｄ（ＰＰｈ_３）_４（６３４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）に、カニューレを通して上述のアリール亜鉛の溶液を加える。溶液を６０℃で１時間加熱する。溶液をＥｔＯＡｃで希釈後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。シリカゲルクロマトグラフィー（バイオタージ社４０Ｌカラム、３０〜８０％ＣＨ_２Ｃｌ_２／ヘキサン、流速５０ｍＬ／分で６０分間）で精製すると、１．１３ｇ（２．１３ｍｍｏｌ、３９％）の調製物７が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．７６−７．７２（ｍ，２Ｈ），７．５０−７．３５（ｍ，１１Ｈ），７．０９−７．０６（ｍ，２Ｈ），６．９７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．３，３．１Ｈｚ），５．１５（ｓ，２Ｈ），５．１０（ｓ，２Ｈ），５．１１−５．０２（ｍ，２Ｈ），４．００（ｓ，３Ｈ），３．９５（ｍ，１Ｈ），３．５４（ｍ，１Ｈ），３．４０（ｍ，１Ｈ），３．１２（ｍ，１Ｈ），２．５０（ｍ，１Ｈ）．

調製８
８−ベンジルオキシ−４−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−２−メチレン−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−６−カルボン酸メチルエステル（７）

カニューレを通して、調製物７（１．１０ｇ、２．０７ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解した溶液を、ＴＦＡ（７８０ｍｇ、６．８４ｍｍｏｌ）及びＥｔ_３ＳｉＨ（３．３ｍＬ、２０．７ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解した溶液に０℃で加える。５分間撹拌後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチする。有機溶液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で２度洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。シリカゲルクロマトグラフィー（バイオタージ社４０Ｌカラム、５０〜１００％ＣＨ_２Ｃｌ_２／ヘキサン、流速５０ｍＬ／分で６０分間）で精製すると、８００ｍｇ（１．５０ｍｍｏｌ、７３％）の調製物８が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）７．５２−７．３４（ｍ，１３Ｈ），７．０８−７．０３（ｍ，２Ｈ），７．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），５．２１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ），５．１３（ｓ，２Ｈ），５．０７（ｓ，２Ｈ），４．７９−４．７５（ｍ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），２．９８−２．８４（ｍ，２Ｈ），２．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．３Ｈｚ），２．３７（ｍ，１Ｈ），２．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１７．１Ｈｚ）．

調製９
８−ベンジルオキシ−４−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−６−メトキシメチル−２−メチレン−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン（８）

ＬＡＨ（７．１５ｍＬの１ＭＴＨＦ溶液、７．１５ｍｍｏｌ）を、調製物８（７６３ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）を８ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液に０℃で加える。溶液を２時間撹拌後、１０ｍＬの飽和塩化アンモニウム水溶液及び５ｍＬの１ＭＮａＯＨ水溶液でクエンチする。ＥｔＯＡｃで希釈し、３０分間撹拌する。分液し、水層をＥｔＯＡｃで２回抽出する。有機溶液をひとまとめにし、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮すると、７１９ｍｇのアルコールが得られる。アルコール（６９８ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）を１４ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液に、０℃で水素化ナトリウム（６０％油中分散物を１１０ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を加える。溶液を３０分間撹拌後、ヨウ化メチル（０．１７ｍＬ、２．７３ｍｍｏｌ）を加える。冷却浴を取り除き、２時間撹拌する。０℃に冷却し、飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで希釈後、１／２飽和食塩水、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。シリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ、１０〜２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、流速３５ｍＬ／分で４５分間）で精製すると、６１１ｍｇ（１．１８ｍｍｏｌ、８５％）の調製物９が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．５１−７．３３（ｍ，１２Ｈ），７．０７−７．０３（ｍ，２Ｈ），６．９７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），６．７６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），５．１５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ），５．１３（ｓ，２Ｈ），５．０７（ｓ，２Ｈ），４．８０−４．７２（ｍ，２Ｈ），４．６０（ｓ，２Ｈ），３．６０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），３．４７（ｓ，３Ｈ），２．９３（ｍ，１Ｈ），２．７７（ｍ，１Ｈ），２．６４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．３Ｈｚ），２．３９（ｍ，１Ｈ），２．０９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９，１５．８Ｈｚ）．

調製１０
８−ベンジルオキシ−４−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−６−メトキシメチル−１，３ａ，４，９ｂ−テトラヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−２−オン（９）

四酸化オスミウム（０．７３ｍＬの２．５重量％ｔ−ＢｕＯＨ溶液、０．０５８ｍｍｏｌ）を、調製物９（５９８ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（０．１３ｍＬ、１．１８ｍｍｏｌ）、及びＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキシド（２７０ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＴＨＦ及び５ｍＬの水に溶解した溶液に加える。終夜撹拌後、５ｍＬのＴＨＦ、５ｍＬの水、及び過ヨウ素酸ナトリウム（１．２ｇ、５．６１ｍｍｏｌ）を加える。４時間撹拌する。飽和Ｎａ_２ＳＯ_３水溶液及び飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液の１：１混合溶液でクエンチする。その後３０分間撹拌する。水層をＥｔＯＡｃで２回抽出する。ひとまとめにした有機溶液を、飽和Ｎａ_２ＳＯ_３水溶液及び飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液の１：１混合溶液、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。シリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ、１０〜３０％Ａ／Ｂ、Ａ＝ＥｔＯＡｃ、Ｂ＝１０％ＣＨ_２Ｃｌ_２を含むヘキサン）で精製すると、５０８ｍｇ（０．９７６ｍｍｏｌ、８５％）の調製物１０が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）７．５０−７．３４（ｍ，１２Ｈ），７．０６−７．０３（ｍ，２Ｈ），７．０２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），６．７１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），５．１７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ），５．１３（ｓ，２Ｈ），５．０６（ｓ，２Ｈ），４．６０（ｓ，２Ｈ），３．９１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），３．４７（ｓ，３Ｈ），２．９９（ｍ，１Ｈ），２．８１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４，１８．５Ｈｚ），２．６３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１８．５Ｈｚ），２．３２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．３，１８．５Ｈｚ），２．０４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９，１８．９Ｈｚ）．

調製１２
６−ブロモ−８−メトキシメトキシ−２−メチレン−２，３，３ａ，９ｂ−テトラヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−４−オン（１１）

調製１２は、調製６と同様の手順で、調製５から調製される。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．１９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），６．８２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），５．１１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），５．０９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），４．９６−４．９４（ｍ，２Ｈ），３．４５（ｓ，３Ｈ），３．３７（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．７，７．０Ｈｚ），３．１４−３．０２（ｍ，２Ｈ），２．８１−２．６８（ｍ，２Ｈ），２．３６（ｍ，１Ｈ）．

調製１３
６−ブロモ−８−メトキシメトキシ−４−（４−メトキシメトキシ−フェニル）−２−メチレン−１，２，３，９ｂ−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン（１２）

調製１３は、調製７と同様の手順で、調製１２から調製される。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．６４−７．６０（ｍ，２Ｈ），７．１５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，０．９Ｈｚ），７．０８−７．０４（ｍ，２Ｈ），６．７４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，０．９Ｈｚ），５．１９（ｓ，２Ｈ），５．１１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ），５．０９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ），５．０２（ｂｓ，１Ｈ），４．９５（ｂｓ，１Ｈ），３．９１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），３．４７（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｍ，１Ｈ），３．３２（ｍ，１Ｈ），３．０７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６，１３．６Ｈｚ），２．４４（ｍ，１Ｈ）．

調製１４
６−ブロモ−８−メトキシメトキシ−４−（４−メトキシメトキシ−フェニル）−２−メチレン−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン（１３）

調製１４は、調製８と同様の手順で、調製１３から調製される。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．４３−７．３９（ｍ，２Ｈ），７．１１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，０．９Ｈｚ），７．０６−７．０３（ｍ，２Ｈ），６．８０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，０．９Ｈｚ），５．１７（ｓ，２Ｈ），５．１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ），５．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ），５．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ），４．７５（ｂｓ，１Ｈ），４．７４（ｂｓ，１Ｈ），３．５６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），３．４７（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｓ，３Ｈ），２．９０（ｍ，１Ｈ），２．７６（ｍ，１Ｈ），２．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．３Ｈｚ），２．２８（ｍ，１Ｈ），２．０６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４，１６．７Ｈｚ）．

調製１５
６−ブロモ−８−メトキシメトキシ−４−（４−メトキシメトキシ−フェニル）−１，３ａ，４，９ｂ−テトラヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−２−オン（１４）

調製１５は、調製１０と同様の手順で、調製１４から調製される。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．４１−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．１６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１，０．９Ｈｚ），７．０８−７．０４（ｍ，２Ｈ），６．７８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１，０．９Ｈｚ），５．１８（ｓ，１Ｈ），５．１７（ｓ，２Ｈ），５．０７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），５．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），３．８７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），３．４７（ｓ，３Ｈ），３．４５（ｓ，３Ｈ），３．００（ｍ，１Ｈ），２．７９（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．３，８．４，１８．５Ｈｚ），２．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１８．５Ｈｚ），２．２１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．０，１８．０Ｈｚ），２．０１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９，１８．５Ｈｚ）．

調製１６
６−ブロモ−２，２−ジフルオロ−８−メトキシメトキシ−４−（４−メトキシメトキシ−フェニル）−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン（１５）

調製物１５（４６５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を３ｍＬの（ジエチルアミノ）硫黄（ＩＶ）トリフルオリド及び３ｍＬのジクロロエタンに溶解した溶液を、１６×１５０ｍｍの細菌培養管に入れ、４０℃で終夜撹拌する。溶液を、塩化メチレン：飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の１：１混合物に撹拌しながら加え、クエンチする。分液し、有機溶液を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。得られた物質を、４ｇのシリカゲルに吸着し、シリカゲルクロマトグラフィー（４０ｇ、０〜２０％Ａ／Ｂ、Ａ＝ＥｔＯＡｃ、Ｂ＝１０％ＣＨ_２Ｃｌ_２を含むヘキサン）で精製すると、４２０ｍｇ（０．８６ｍｍｏｌ、８６％）の調製物１６が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．４３−７．３９（ｍ，２Ｈ），７．１７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，０．９Ｈｚ），７．１０−７．１６（ｍ，２Ｈ），６．７７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，０．９Ｈｚ），５．１９（ｓ，２Ｈ），５．１１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．７Ｈｚ），５．０９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），５．０６（ｂｓ，１Ｈ），３．６８（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝３．０，８．８Ｈｚ），２．９５（ｄｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，１５．４，７．９Ｈｚ），２．７５（ｍ，１Ｈ），２．３０（ｄｑ，１Ｈ，Ｊ＝３．１，１５．４Ｈｚ），２．１０（ｍ，１Ｈ），１．８９（ｍ，１Ｈ）．

調製１７
２，２−ジフルオロ−８−メトキシメトキシ−４−（４−メトキシメトキシ−フェニル）−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−６−カルボニトリル（１６）

調製物１６（２４ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（７ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）、シアン化銅（３６ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）、及びＰｄ（ＰＰｈ_３）_４（２１ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）を入れた４ｍＬのバイアルに、０．５ｍＬのプロピオニトリルを加える。溶液を窒素で５分間バブリングした後、密封して、撹拌しながら終夜９０℃に加熱する。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、水、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。得られた物質を、５００ｍｇのシリカゲルに吸着し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４ｇ、０〜２０％Ａ／Ｂ、Ａ＝ＥｔＯＡｃ、Ｂ＝１０％ＣＨ_２Ｃｌ_２を含むヘキサン）で精製すると、１７ｍｇ（０．０３４ｍｍｏｌ、７９％）の調製物１７が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．３７−７．３３（ｍ，２Ｈ），７．１４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．９，３．１Ｈｚ），７．０７−７．０３（ｍ，２Ｈ），７．０２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．９，３．１Ｈｚ），５．１７（ｓ，２Ｈ），５．１１（ｂｓ，１Ｈ），５．１０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），５．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），３．６５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），２．９５（ｄｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．２，７．５，１４．９Ｈｚ），２．７３（ｍ，１Ｈ），２．３０（ｍ，１Ｈ），２．０６（ｍ，１Ｈ），１．９１（ｍ，１Ｈ）．

調製１８
２，２−ジフルオロ−８−メトキシメトキシ−４−（４−メトキシメトキシ−フェニル）−６−ビニル−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン（１７）

０．４５ｍＬのトルエン、０．１ｍＬの無水エタノール、及びビニルボロン酸ジブチルエステル（０．０３０ｍＬ、０．１３６ｍｍｏｌ）を、調製物１６（３０ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ_３）_４（７ｍｇ、０．００６１ｍｍｏｌ）を入れた４ｍＬバイアルに加える。溶液を窒素で５分間バブリングした後、密封して、撹拌しながら終夜８０℃に加熱する。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和食塩水で洗浄する。水層をＥｔＯＡｃで抽出する。ひとまとめにした有機溶液を飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。得られた物質を、５００ｍｇのシリカゲルに吸着し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４ｇ、０〜２０％Ａ／Ｂ、Ａ＝ＥｔＯＡｃ、Ｂ＝１０％ＣＨ_２Ｃｌ_２を含むヘキサン）で精製すると、１２ｍｇ（０．０２８ｍｍｏｌ、４５％）の調製物１８が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．３８−７．３３（ｍ，２Ｈ），７．１４−７．０５（ｍ，４Ｈ），６．７４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），５．７７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．３，１８．１Ｈｚ），５．２８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．３，１２．３Ｈｚ），５．２０（ｓ，２Ｈ），５．１５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），５．１３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．７Ｈｚ），５．０２（ｂｓ，１Ｈ），３．６７（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝３．１，１１．０Ｈｚ），３．５０（ｓ，１Ｈ），２．８９（ｍ，１Ｈ），２．７４（ｍ，１Ｈ），２．３０（ｍ，１Ｈ），２．１７（ｍ，１Ｈ），１．８６（ｍ，１Ｈ）．

調製１９
２，２−ジフルオロ−８−メトキシメトキシ−４−（４−メトキシメトキシ−フェニル）−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−６−オール（１８）

調製物１６（４９ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を１ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液に、−７８℃でメチルリチウム（０．０３２ｍＬの１．６ＭＥｔ_２Ｏ溶液、０．０５ｍｍｏｌ）、次いでｎ−ブチルリチウム（０．１２６ｍＬの１．６Ｍヘキサン溶液、０．２０ｍｍｏｌ）を加える。溶液を１０分間撹拌後、ホウ酸トリイソプロピル（０．０７０ｍＬ、０．３０ｍｍｏｌ）を加える。溶液を１５分間撹拌後、０．１ｍＬの酢酸、次いで０．１ｍＬの過酸化水素を加える。溶液を終夜撹拌する。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和食塩水、１：１飽和食塩水：飽和亜硫酸ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。得られた物質を、１．０ｇのシリカゲルに吸着し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（１０ｇ、０〜２０％Ａ／Ｂ、Ａ＝ＥｔＯＡｃ、Ｂ＝１０％ＣＨ_２Ｃｌ_２を含むヘキサン）で精製すると、３８ｍｇ（０．０９０ｍｍｏｌ、９０％）の調製物１９が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．３３−７．２９（ｍ，２Ｈ），７．１０−７．０６（ｍ，２Ｈ），６．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），６．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），５．６８（ｓ，１Ｈ），５．２０（ｓ，２Ｈ），５．１１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ），５．０９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ），５．０４（ｂｓ，１Ｈ），３．６４（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，１０．０Ｈｚ），３．５０（ｓ，３Ｈ），３．４８（ｓ，３Ｈ），２．８４（ｄｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．２，１２．３，７．５Ｈｚ），２．７３（ｍ，１Ｈ），２．３５（ｍ，１Ｈ），２．１９（ｍ，１Ｈ），１．９０（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５１４．５Ｈｚ）．

調製２０
［２，２−ジフルオロ−８−メトキシメトキシ−４−（４−メトキシメトキシ−フェニル）−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−６−イル］−メタノール（１９）

調製物１６（９７ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液に、−７８℃でメチルリチウム（０．０６２ｍＬの１．６ＭＥｔ_２Ｏ溶液、０．１０ｍｍｏｌ）、次いでｎ−ブチルリチウム（０．２５ｍＬの１．６Ｍヘキサン溶液、０．４０ｍｍｏｌ）を加える。溶液を１５分間撹拌後、ＤＭＦ（０．０７７ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を加える。溶液を３０分間撹拌後、飽和塩化アンモニウム水溶液で反応をクエンチする。溶液を室温まで昇温させ、分液後、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。ひとまとめにした有機溶液を、１／２飽和食塩水、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。この物質を１ｍＬのＴＨＦ及び１ｍＬのメタノールに溶解する。水素化ホウ素ナトリウム（３５ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を加える。溶液を３０分間撹拌後、飽和塩化アンモニウム水溶液で反応をクエンチする。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。得られた物質を、シリカゲルに吸着し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（１０ｇ、０〜３０％Ａ／Ｂ、Ａ＝ＥｔＯＡｃ、Ｂ＝１０％ＣＨ_２Ｃｌ_２を含むヘキサン）で精製すると、６８ｍｇ（０．１６ｍｍｏｌ、８７％）の調製物２０が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．３２−７．２７（ｍ，２Ｈ），７．０３−７．０７（ｍ，２Ｈ），６．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），６．７２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），５．１７（ｓ，２Ｈ），５．１１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ），５．０９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），５．０３（ｂｓ，１Ｈ），４．７３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６，１３．２Ｈｚ），４．６８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６，１３．２Ｈｚ），３．６６（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝３．５，８．８Ｈｚ），３．４７（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｓ，３Ｈ），２．８６（ｄｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．２，１０．１，７．５Ｈｚ），２．７２（ｍ，１Ｈ），２．３１（ｍ，１Ｈ），２．１８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），２．１３（ｍ，１Ｈ），１．８６（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５，１４．５Ｈｚ）．

調製２１
２，２−ジフルオロ−８−メトキシメトキシ−４−（４−メトキシメトキシ−フェニル）−６−メトキシメチル−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン（２０）

調製物２０（４１１ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液に、０℃で水素化ナトリウム（６０％油中分散物を７５ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）を加える。溶液を１５分間撹拌後、ヨウ化メチル（０．１２ｍＬ、１．９２ｍｍｏｌ）を加える。溶液をゆっくり室温まで昇温させ、終夜撹拌する。さらに、水素化ナトリウム（６０％油中分散物を７５ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ及びヨウ化メチル（０．１２ｍＬ、１．９２ｍｍｏｌ）を加え、４時間撹拌する。飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで希釈後、分液し、水層をＥｔＯＡｃで抽出後、ひとまとめにした有機溶液を飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。シリカゲルクロマトグラフィー（バイオタージ社４０Ｓカラム、混合比１０：９０：０〜１０：６５：２５のＣＨ_２Ｃｌ_２：ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、流速５０ｍＬ／分で６０分間）で精製すると、３８４ｍｇ（０．８５ｍｍｏｌ、９１％）の調製物２１が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ７．３４−７．２９（ｍ，２Ｈ），７．０７−７．０３（ｍ，２Ｈ），６．９７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），６．７１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），５．１７（ｓ，２Ｈ），５．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），５．０９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），４．９９（ｂｓ，１Ｈ），４．５４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ），４．５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ），３．６５（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝３．１，９．７Ｈｚ），３．４８（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｓ，３Ｈ），３．４２（ｓ，３Ｈ），２．８６（ｄｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，１２．３，７．９Ｈｚ），２．７０（ｍ，１Ｈ），２．２９（ｍ，１Ｈ），２．１０（ｍ，１Ｈ），１．８２（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．９，１４．９Ｈｚ）．

調製２２
２，２−ジフルオロ−８−メトキシメトキシ−４−（４−メトキシメトキシ−フェニル）−６−メチル−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン（２０）

調製物２１（１９２ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液に、２ｍＬのｉＰｒＯＨ中に懸濁させた７０ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃを加える。溶液を６０ｐｓｉで水素置換する。溶液を２時間撹拌する。溶液をろ過後濃縮する。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４０ｇ、０〜３０％Ａ／Ｂ、Ａ＝ＥｔＯＡｃ、Ｂ＝１０％ＣＨ_２Ｃｌ_２を含むヘキサン）で精製すると、１２８ｍｇ（０．３０ｍｍｏｌ、７１％）の調製物２２が得られる。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）７．３９−７．３４（ｍ，２Ｈ），７．０９−７．０５（ｍ，２Ｈ），６．７５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），６．６３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），５．２０（ｓ，２Ｈ），５．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），５．０９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），５．００（ｂｓ，１Ｈ），３．６６（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝３．５，９．７Ｈｚ），３．５０（ｓ，３Ｈ），３．４９（ｓ，３Ｈ），２．８９（ｄｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，１２．７，７．９Ｈｚ），２．７３（ｍ，１Ｈ），２．３１（ｍ，１Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ），２．１３（ｍ，１Ｈ），１．８４（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．０，１４．５Ｈｚ）．

実施例１
８−ヒドロキシ−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−６−メチル−１，３ａ，４，９ｂ−テトラヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−２−オン

調製物１０（５７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を１ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液に、１ｍＬのｉＰｒＯＨ中に懸濁させた２０ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃを加える。室温で、溶液を水素で置換する。溶液を１時間撹拌する。溶液をろ過後濃縮する。この物質を５００ｍｇのシリカゲルに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４ｇ、３０〜６０％Ａ／Ｂ、Ａ＝１０％ＭｅＯＨを含むＥｔＯＡｃ、Ｂ＝ヘキサン）で精製すると、実施例１の化合物が得られる。ＨＲＭＳｃａｌｃ．ｆｏｒＣ_１９Ｈ_１９Ｏ_４：３１１．１２８３；ｆｏｕｎｄ：３１１．１２６３（Ｍ＋Ｈ）．

実施例２
８−ヒドロキシ−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−６−メトキシメチル−１，３ａ，４，９ｂ−テトラヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−２−オン

調製物１０（２６ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を０．５ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液に、０．５ｍＬのｉＰｒＯＨ中に懸濁させた６ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃを加える。室温で、溶液を水素で置換する。溶液を４時間撹拌する。反応を注意深くＴＬＣで追跡し、還元が進みすぎるのを避ける。溶液をろ過後濃縮する。この物質を５００ｍｇのシリカゲルに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４ｇ、３０〜６０％Ａ／Ｂ、Ａ＝１０％ＭｅＯＨを含むＥｔＯＡｃ、Ｂ＝ヘキサン）で精製すると、実施例２の化合物が得られる。ＨＲＭＳｃａｌｃ．ｆｏｒＣ_２０Ｈ_２０Ｏ_５Ｎａ：３６３．１２０９；ｆｏｕｎｄ：３６３．１２４５（Ｍ＋Ｎａ）．

実施例３
２，２−ジフルオロ−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−６−メチル−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−８−オール

実施例３は、実施例５と同様の手順で、調製２２から調製する。２つの鏡像異性体は、キラル分取ＨＰＬＣ（ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ、ｉＰｒＯＨ／ヘプタン）で分離した。

鏡像異性体Ａ： ^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：７．２４−７．２８（ｍ，２Ｈ），６．７６−６．８０（ｍ，２Ｈ），６．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），６．３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），４．９０（ｂｓ，１Ｈ），３．６０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），２．８８（ｍ，１Ｈ），２．６６（ｍ，１Ｈ），２．２２（ｍ，１Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），２．０２（ｍ，１Ｈ），１．７２（ｍ，１Ｈ）．ＨＰＬＣ（ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ，６０／４０ヘプタン／ｉ−ＰｒＯＨ；１ｍＬ／ｍｉｎ；ｔ_Ｒ＝４．０ｍｉｎ）．ＬＲＭＳ：３３１．２（Ｍ−Ｈ）．

鏡像異性体Ｂ： ^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）： δ ７．２４−７．２８（ｍ，２Ｈ），６．７６−６．８０（ｍ，２Ｈ），６．４６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），６．３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），４．９０（ｂｓ，１Ｈ），３．６０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），２．８８（ｄｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．２，１１．８，７．５Ｈｚ），２．６６（ｍ，１Ｈ），２．２２（ｍ，１Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），２．０２（ｍ，１Ｈ），１．７２（ｍ，１Ｈ）．ＨＰＬＣ（ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ，６０／４０ヘプタン／ｉ−ＰｒＯＨ；１ｍＬ／ｍｉｎ；ｔ_Ｒ＝５．１ｍｉｎ）．ＬＲＭＳ：３３１．２（Ｍ−Ｈ）．

実施例４
２，２−ジフルオロ−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−６−メトキシメチル−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−８−オール

実施例４は、実施例５と同様の手順で、調製２１から調製する。２つの鏡像異性体は、キラル分取ＨＰＬＣ（ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ、ｉＰｒＯＨ／ヘプタン）で分離した。

鏡像異性体Ａ： ^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：７．２３−７．２７（ｍ，２Ｈ），６．７６−６．８０（ｍ，２Ｈ），６．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），６．５２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），４．９４（ｂｓ，１Ｈ），４．５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），４．４５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ），３．６２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），３．３７（ｓ，３Ｈ），２．８９（ｍ，１Ｈ），２．６８（ｍ，１Ｈ），２．２４（ｍ，１Ｈ），２．０５（ｍ，１Ｈ），１．７３（ｍ，１Ｈ）．ＨＰＬＣ（ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ，６０／４０ヘプタン／ｉ−ＰｒＯＨ；１ｍＬ／ｍｉｎ；ｔ_Ｒ＝３．８ｍｉｎ）．ＬＲＭＳ：３６１．１２（Ｍ−Ｈ）．

鏡像異性体Ｂ： ^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：７．２３−７．２７（ｍ，２Ｈ），６．７６−６．８０（ｍ，２Ｈ），６．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），６．５２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），４．９４（ｂｓ，１Ｈ），４．５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ），４．４５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），３．６２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），３．３７（ｓ，３Ｈ），２．８９（ｍ，１Ｈ），２．６８（ｍ，１Ｈ），２．２４（ｍ，１Ｈ），２．０５（ｍ，１Ｈ），１．７３（ｍ，１Ｈ）．ＨＰＬＣ（ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ，６０／４０ヘプタン／ｉ−ＰｒＯＨ；１ｍＬ／ｍｉｎ；ｔ_Ｒ＝５．５ｍｉｎ）．ＬＲＭＳ：３６１．１３（Ｍ−Ｈ）．

実施例５
８−ヒドロキシ−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−６−メトキシメチル−１，３ａ，４，９ｂ−テトラヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−２−オン

調製物１５（２５ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）を０．５ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液に、０．２５ｍＬの５ＭＨＣｌ水溶液を加える。溶液を終夜撹拌する。ＥｔＯＡｃで希釈し、溶解度を増大させるために少量のＭｅＯＨを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄する。水層を、５％ＭｅＯＨを含むＥｔＯＡｃで抽出する。ひとまとめにした有機溶液をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。この物質を５００ｍｇのシリカゲルに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４ｇ、３０〜６０％Ａ／Ｂ、Ａ＝１０％ＭｅＯＨを含むＥｔＯＡｃ、Ｂ＝ヘキサン）で精製すると、実施例５の化合物が得られる。ＨＲＭＳｃａｌｃ．ｆｏｒＣ_１８Ｈ_１４ＢｒＯ_４：３７５．００５５；ｆｏｕｎｄ：３７５．００３２（Ｍ−Ｈ）．

実施例６
６−ブロモ−２，２−ジフルオロ−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−８−オール

実施例６は、実施例５と同様の手順で、調製１６から調製する。ＨＲＭＳｃａｌｃ．ｆｏｒＣ_１８Ｈ_１４ＢｒＦ_２Ｏ_４：３９５．００９５；ｆｏｕｎｄ：３９５．０１０７（Ｍ−Ｈ）．

実施例７
２，２−ジフルオロ−８−ヒドロキシ−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−６−カルボニトリル

実施例７は、実施例５と同様の手順で、調製１７から調製する。ＨＲＭＳｃａｌｃ．ｆｏｒＣ_１９Ｈ_１４Ｆ_２ＮＯ_３：３４２．０９４２；ｆｏｕｎｄ：３４２．０９４６（Ｍ−Ｈ）．

実施例８
２，２−ジフルオロ−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−６−ビニル−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−８−オール

実施例８は、実施例５と同様の手順で、調製１８から調製する。ＨＲＭＳｃａｌｃ．ｆｏｒＣ_２０Ｈ_１９Ｆ_２Ｏ_３：３４５．１３０２；ｆｏｕｎｄ：３４５．１３２５（Ｍ＋１）

実施例９
２，２−ジフルオロ−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−６，８−ジオール

調製物１９を２ｍＬのメタノールに溶解した溶液に、５００ｍｇのＤｏｗｅｘ（登録商標）５０ＷＸ−２００酸性イオン交換樹脂を加える。溶液をゆっくり終夜撹拌する。溶液をろ過後、樹脂をメタノールで洗浄する。ひとまとめにしたろ液を濃縮後、得られる物質をシリカゲルに吸着させる。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４ｇ、１５〜７０％Ａ／Ｂ、Ａ＝１０％ＭｅＯＨを含むＥｔＯＡｃ、Ｂ＝ヘキサン）で精製すると、実施例９の化合物が得られる。ＨＲＭＳｃａｌｃ．ｆｏｒＣ_１８Ｈ_１７Ｆ_２Ｏ_４：３３５．１０９５；ｆｏｕｎｄ：３３５．１１１４（Ｍ＋Ｈ）．

実施例１０
［２，２−ジフルオロ−８−ヒドロキシ−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−６−イル］−アセトニトリル

調製物２０（５８ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（１７５ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）、及びアセトンシアノヒドリン（０．１２５ｍＬ、１．３７ｍｍｏｌ）を１ｍＬのＴＨＦに溶解した溶液に、０℃で、アゾジカルボン酸ジイソプロピル（０．１３ｍＬ、０．６６ｍｍｏｌ）をシリンジから滴下する。溶液を一晩かけてゆっくり室温に昇温させる。溶液を濃縮し、得られる物質をシリカゲルに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（１０ｇ、０〜３０％Ａ／Ｂ、Ａ＝ＥｔＯＡｃ、Ｂ＝１０％ＣＨ_２Ｃｌ_２を含むヘキサン）で精製する。得られる物質を２ｍＬのＴＨＦに溶解し、１ｍＬの５ＭＨＣｌ水溶液を加える。溶液を終夜撹拌する。ＥｔＯＡｃで希釈し、溶解度を増大させるために少量のＭｅＯＨを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥後、ろ過、濃縮する。この物質をシリカゲルに吸着させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（４ｇ、１０〜６０％Ａ／Ｂ、Ａ＝１０％ＭｅＯＨを含むＥｔＯＡｃ、Ｂ＝ヘキサン）で精製すると、実施例１０の化合物が得られる。ＨＲＭＳｃａｌｃ．ｆｏｒＣ_２０Ｈ_１７Ｆ_２ＮＮａＯ_３：３８０．１０７４；ｆｏｕｎｄ：３８０．１０６０（Ｍ＋Ｎａ）．

実施例１１
２，２−ジフルオロ−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−６−ヒドロキシメチル−１，２，３，３ａ，４，９ｂ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］クロメン−８−オール

試験手順
ＥＲ結合アッセイ
５０ｍＭＮ−［２−ヒドロキシエチル］ピペラジン−Ｎ’−［２−エタンスルホン酸（Ｈｅｐｅｓ）ｐＨ７．５、１．５ｍＭＥＤＴＡ、１５０ｍＭＮａＣｌ、１０％グリセロール、１ｍｇ／ｍＬオボアルブミン、５ｍＭＤＴＴ、０．０２５μＣｉ／ウェルの３Ｈ−エストラジオール（ＮＥＮ社、＃ＮＥＴ５１７１１８Ｃｉ／ｍｍｏｌ、１ｍＣｉ／ｍＬにて）及び１０ｎｇ／ウェルのＥＲ−α又はＥＲ−β受容体（ＰａｎＶｅｒａ社）を含む緩衝溶液中で、競合ＥＲ結合アッセイを行う。１０種類の異なる濃度で競合化合物を加える。１μＭのＥ２（１７−βエストラジオール、Ｓｉｇｍａ社、セントルイス、ミズーリ州）の存在下、非特異的結合を決定する。結合反応物（１４０μＬ）を室温にて４時間インキュベートし、次いで、各反応物に７０μＬの冷デキストラン炭末（ＤＣＣ）緩衝液を加える（ＤＣＣ緩衝液は、アッセイ緩衝液５０ｍＬ当たり、０．７５ｇの活性炭［Ｓｉｇｍａ社］及び０．２５ｇのデキストラン［Ｐｈａｒｍａｃｉａ社］を加えることによって調製する）。インキュベーションプレートをオービタル・シェーカーで４℃にて８分間混合し、次いで、３，０００ｒｐｍで４℃にて１０分間遠心分離する。混合物の１２０μＬの画分を別の９６ウェルの白色平底プレート（Ｃｏｓｔａｒ社）に移し、１７５μＬのＷａｌｌａｃＯｐｔｉｐｈａｓｅＨｉｓａｆｅ３シンチレーション液を各ウェルに加える。プレートに封をし、次いで、オービタル・シェーカーで激しく振とうする。２．５時間のインキュベーション後、Ｗａｌｌａｃマイクロベータ・カウンターでカウントする。１０μＭにおけるＩＣ_５０及び阻害率（パーセント）を計算する。ＥＲ−α及びＥＲ−β受容体に対する飽和結合によって、^３Ｈ−エストラジオールのＫ_ｄを決定する。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆの式を用いて、化合物のＩＣ_５０値をＫ_ｉ値に変換し、飽和結合アッセイによって、Ｋ_ｄ値を決定する。

好ましい化合物は、２０ｎＭ以下のＫ_ｉで、ＥＲ−β受容体に結合する。より好ましい化合物は、１ｎＭ以下のＫ_ｉで、ＥＲ−β受容体に結合する。ＥＲ−α受容体に比べてＥＲ−β受容体に対して選択的である化合物は、ＥＲ−α受容体に対するＫ_ｉよりも低いＫ_ｉでＥＲ−β受容体に結合する。

上に述べたアッセイで決定されるように、実施例１〜１１の化合物は、ＥＲ−αサブタイプに対して約４〜＞１０００ｎＭの、ＥＲ−βサブタイプに対しては約０．３〜１２０ｎＭの結合親和性（Ｋ_ｉ）を有する。さらに、注目すべきことに、実施例４の化合物のエナンチオマーＡは、９１という選択性比（ＥＲ−αＫ_ｉ／ＥＲ−βＫ_ｉ）を示す。それに対して、国際公開第０３／０４４００６号パンフレットの実施例１における選択性比は８である。

ＥＲ受容体アッセイ
本発明の化合物のアゴニスト活性は、Ｈａｒｒｉｓ，Ｈ．Ａ．；Ｋａｔｚｅｎｅｌｌｅｎｂｏｇｅｎ，Ｊ．Ａ．；Ｋａｔｚｅｎｅｌｌｅｎｂｏｇｅｎ，Ｂ．Ｓ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１４３，ｐ．４１７２−４１７７（２００２）に記載されたアッセイからも決定できる。

ＬＮＣａＰヒトＰＣａ異種移植アッセイ
ＥＲ−βアゴニストの評価は、正常な性的成熟を示す（５〜６週齢）Ｈｓｄ：無胸腺ヌード−ｎｕ（無胸腺ヌード）雄性マウスの体内で成長させる、アンドロゲン感受性ＬＮＣａＰヒト前立腺ガン（ＰＣａ）異種移植片の成長における影響について行われる。正常な精巣を有する雄性マウスの気管前領域に、２．０×１０^６個の腫瘍細胞を皮下経路によって左右相称に注入した。ポジティブコントロールグループとして役に立つように、陰嚢経路を介してマウスを去勢する。腫瘍注入の翌日から、１日１回皮下又は胃管栄養投与により、０．２ｍＬ容中、種々の投与レベルで、異種移植マウスに試験化合物を投与する。試験化合物は、平均グループ平均体重に基づいて、毎週、再製剤する。これらの実験のためのビヒクルは、０．２５％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０を含む１％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）である。体重及び腫瘍の測定値を週１回の頻度で記録し、電子キャリパー測定器から、ＪＭＰ（登録商標）（ＳＡＳ社；カリー、ノースカロライナ州）表計算ソフトに直接入力する。立方ミリメートル単位での腫瘍の体積は、次の式：Ｌ×Ｗ×Ｈ×０．５２３６を用いてＪＭＰで計算する。個々のマウスについての腫瘍及び体重応答を週１回の頻度で記録する。ＬＮＣａＰ腫瘍体積が対数期増殖に入るとき、３〜４日毎に病変を測定する。対数腫瘍値のリニアモデリングを用いて成長速度を決定し、リニア外挿モデル（ＳＡＳ；カリー、ノースカロライナ州）を用いて治療失敗（腫瘍体積＝１３００〜１５００ｍｍ^３）までの時間を決定する。ヒト動物における使用を考慮するために、腫瘍体積が１２００〜１４００ｍｍ^３に至るときに、動物を屠殺する。剖検時に、最終腫瘍測定及び体重を記録し、心臓穿刺を介して全血を得、氷上で凝固させる。適当に標識した０．５ｍＬエッペンドルフマイクロチューブに血清を移し、サンプルを−８０℃にてバイオマーカー分析のために保管する。

良性前立腺過形成（ＢＰＨ）アッセイ
マウスのＢＰＨアッセイは、基本的に、以前報告された（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．２００４Ａｐｒ；１５０（４）：５９１−６０３）ラットのＢＰＨ試験の修正法として行われる。３０週齢ＣＤ−１雄性マウスを１頭ずつケージに入れ、１週間飼育し、ビヒクル又は様々な１日量の化合物を、１％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）及び０．２５％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０を含有するＰＢＳ、ｐＨ６．８の製剤として経口投与する。試験終了後、動物をＣＯ_２により屠殺し、心臓穿刺により血液を採取する。次いで、動物の剖検を行い、腹側前立腺、精嚢、及び／又は睾丸を無傷のまま採取し、各処理群間の臓器の湿重量の変化を測定する。ビヒクル対照群と比べた場合の、腹側前立腺重量の有意な減少を、Ｄｕｎｎｅｔ検定により確認する。これらの動物由来の血漿を用いてホルモンの変化を測定し、ビヒクル対照群と比較する。前立腺組織をＲＮＡｌａｔｅｒ（商品名）溶液中で瞬間凍結し、ＲＮｅａｓｙキット（Ｑｉａｇｅｎ社）を用いて全ＲＮＡを得る。ＳＰＧ−２に対する特異的Ｔａｑｍａｎプライマー、又はクラスタリン、１８ＳリボソームＲＮＡ（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社、フォスターシティ、カリフォルニア州、カタログ番号４３１０８９３Ｅ）、及び平滑筋ミオシン重鎖（ラットのＧｅｎｂａｎｋ配列ＮＭ＿０１３６０７から誘導）を、リアルタイムＰＣＲを用いたこれらの前立腺組織におけるバイオマーカーの変化を定量するために用いる。

ＰＣＲプライマー：
マウスＳＧＰ−２ｇｉ１９２１４９ −６１ＦＣＧＣＡＧＡＣＣＧＧＡＣＴＣＣＡＧＡＴ
マウスＳＧＰ−２ｇｉ１９２１４９ −１２１ＲＣＣＡＣＧＣＡＣＡＧＣＡＧＧＡＧＡＡＴ
マウスＳＧＰ−２ＴａｑＭａｎプローブ：
マウスＳＧＰ−２ｇｉ１９２１４９ −８１ＴＣＣＡＡＧＧＡＧＧＣＣＡＣＧＣＣＡＴＧＡＡ

本発明において例示された化合物は、この検査におけるビヒクル対照群に比べ、腹側前立腺重量を有意に減少させるが、好ましい化合物は、１０ｍｇ／ｋｇ／日以下の用量で前立腺重量を有意に減少させる。

治療への使用方法及び用量
本明細書において記載されている種々の疾患及び身体状態は、当業者には周知であり、認識されている。治療有効量の式Ｉの化合物を用いて、関連する疾患又は身体状態に罹患している患者を治療することによって、あるいは、それらの疾患又は身体状態に罹患している患者を予防的に処置することによって、当業者がそれらの疾患及び身体状態に影響を及ぼしうることも認識されている。

治療有効量は、従来技術を用いて、同様な状況下で得られた結果を観察することにより、当業者である担当診断医によって容易に決定することができる。治療有効量、用量の決定において、担当診断医によって考慮される多くの因子としては、哺乳類の種；大きさ、年齢及び全身の健康状態；関連する特定の疾患；疾患の程度又は関与又は重篤さ；個々の患者の応答；投与される特定の化合物；投与様式；投与される調製物のバイオアベイラビリティ特性；及び他の関連する事情等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。

式Ｉの化合物の治療有効量は、体重１ｋｇ及び１日あたり約０．００１ｍｇ（ｍｇ／ｋｇ／日）〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日で変動すると思われる。好ましい量は、当業者が決定することができる。

上述した疾患及び身体状態に罹患している患者の治療を達成するために、化合物を治療有効量において体内に吸収され利用可能にする、経口、吸入及び非経口経路等のいずれかの形態あるいは様式で、式Ｉの化合物を投与することができる。例えば、式Ｉの化合物を、経口、エアロゾル又は乾燥粉末の吸入、皮下、筋肉内、静脈内、経皮、鼻腔内、直腸、局所等で投与することができる。一般に、喘息等の呼吸器疾患の治療には、経口又は吸入投与が好ましい。製薬業者であれば、選択された化合物の特定の性質、治療の対象となる疾患又は身体状態、疾患又は身体状態の段階及び他の関連する事情に応じて、適切な投与形態及び様式を容易に選択することができる。（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．（１９９０））。

本発明の化合物は、単独で、あるいは医薬的に許容しうる担体又は賦形剤と組み合わせた医薬組成物の形態で投与することができ、その割合及び性質は、選択された化合物の溶解度及び化学的性質、選ばれた投与経路及び標準的医薬実務によって決定される。本発明の化合物は、それ自体有効であるが、安定性、結晶化の便宜、溶解度の増大等のために、酸付加塩又は塩基付加塩等の医薬的に許容しうる塩の形態で製剤及び投与してもよい。

式Ｉで示される化合物の医薬組成物は、製薬業界で周知の方法で製造される。担体又は賦形剤は、有効成分のためのビヒクル又は媒体として作用することができる固体、半固体又は液体材料であってよい。適当な担体又は賦形剤は、当業界で周知である。医薬組成物は、経口、吸入、非経口又は局所使用のために適合させることができ、錠剤、カプセル剤、エアロゾル、吸入剤、座剤、液剤、懸濁液剤などの剤形で患者に投与することができる。

本発明の化合物は、例えば、不活性希釈剤又は可食性の担体と共に経口投与することができる。本発明の化合物は、ゼラチンカプセルに封入してもよく、錠剤としてもよい。経口治療投与のために、化合物を賦形剤に組み入れてもよく、錠剤、トローチ剤、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁製剤、シロップ剤、カシェ剤、チューインガム等の形態で用いることもできる。これらの製剤は、通常、有効成分として少なくとも４％の本発明の化合物を含んでいるが、特定の形態に応じて変化してよく、単位重量の４％〜約７０％が都合がよい。組成物中に存在する化合物の量は、適当な用量が得られるような量である。当業者は、本発明に係る好ましい組成物及び製剤を決定することができる。

錠剤、丸剤、カプセル剤、トローチ剤等は、以下に示す１又は複数のアジュバントを含んでいてもよい：微結晶セルロース、トラガカントゴム又はゼラチン等の結合剤；デンプン又はラクトース等の賦形剤、アルギン酸、プリモゲル（Ｐｒｉｍｏｇｅｌ）、コーンスターチ等の崩壊剤；ステアリン酸マグネシウム又はステロテックス（Ｓｔｅｒｏｔｅｘ）等の滑沢剤；コロイダルシリカ等の流動促進剤；及びスクロース若しくはサッカリン等の甘味剤又はペパーミント、サリチル酸メチル又はオレンジ香味料等の香味剤。単位投与剤形がカプセル剤である場合、上記のタイプの材料に加えて、ポリエチレングリコール又は脂肪油等の液体担体を含んでもよい。他の単位投与剤形は、コーティング剤等の投与単位の物理的形体を変更する他の種々の材料を含んでもよい。したがって、錠剤又は丸剤は、糖類、セラック又は他の腸溶性コーティング剤でコーティングすることができる。シロップ剤は、本発明の化合物に加えて、甘味料及び保存剤としてのスクロース、色素及び着色剤及び香味剤を含んでいてもよい。これらの種々の組成物を製造するのに用いた材料は、医薬的に純粋であり、使用した量において非毒性であるべきである。

非経口投与による治療のために、本発明の化合物は、溶液又は懸濁液として製剤されてもよい。これらの製剤は、少なくとも０．１％の本発明の化合物を含む必要があるが、それらの重量の０．１〜約５０％の範囲で変化してもよい。このような組成物中に存在する式Ｉの化合物の量は、適当な用量が得られるような量である。当業者は、好ましい組成物及び製剤を決定することができる。

本発明の化合物は、エアロゾル又は乾燥粉末等の吸入によって投与してもよい。デリバリーは、液化ガス又は圧縮ガスによって、あるいは本発明の化合物又はその製剤を分注する適当なポンプシステムによって行ってもよい。吸入によって式Ｉの化合物を投与するための製剤は、単相、二相又は三相系でデリバリーすることができる。式Ｉの化合物のエアロゾルによる投与に、種々の系が有効である。乾燥粉末製剤は、適当な粒子径に式Ｉの化合物をペレット化又は粉末化するか、あるいはペレット化又は粉末化された式Ｉの化合物をラクトース等の適当な担体材料と混合することによって調製する。吸入によるデリバリーは、必要なコンテナ、アクティベーター、バルブ、サブコンテナ等を含む。吸入による投与のための好ましいエアロゾル及び乾燥粉末製剤は、当業者が決定することができる。

本発明の化合物は、局所投与することもでき、その場合、担体は、溶液、軟膏又はゲル基剤を適当に含む。たとえば、基剤は、以下に示す１又は複数の物質を含んでいてもよい：ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、蜜蝋、鉱物油、水、及びアルコール等の希釈剤、並びに乳化剤及び安定剤。局所製剤は、約０．１〜約１０％ｗ／ｖ（単位体積あたりの重量）濃度の、式Ｉの化合物又はその薬理学的に許容できる塩を含むことができる。

溶液又は懸濁液は、以下に示す１又は複数のアジュバントを含んでいてもよい：注射用水、生理食塩水、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又は他の合成溶媒等の滅菌希釈剤；ベンジルアルコール又はメチルパラベン等の抗菌剤；アスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウム等の抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸等のキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩又はリン酸塩等の緩衝剤及び塩化ナトリウム又はデキストロースなどの張性の調節剤。非経口製剤は、ガラス又はプラスチック製の、アンプル、使い捨て注射器又は複数回投与バイアルに封入することができる。

Claims

式Ｉの化合物及びその薬理学的に許容できる塩。

式Ｉ
（式中、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）_ｎ−、−ＣＦ_２−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＲ^１Ｈ−、又は−ＣＲ^２（ＯＨ）−であり；
Ｒは、ハロ、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル、又はＲ^３−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｒ^１は、フッ素、ヒドロキシル、シアノ、トリフルオロメチル、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル、（Ｃ_２−Ｃ_４）アルケニル、（Ｃ_２−Ｃ_４）アルキニル、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシ、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルカルボニルオキシ、又はベンジルであり；
Ｒ^２は、トリフルオロメチル、又は（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキルであり；
Ｒ^３は、シアノ、ヒドロキシル、（Ｃ_２−Ｃ_４）アルケニル、（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシ、又は（Ｃ_１−Ｃ_４）アルコキシルカルボニルであり；
ｎは、０、１、又は２であり；
ｍは、０、１、又は２である）
Ｇは、−ＣＦ_２−、又は−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒは、ハロ、メチル、エチル、又はＲ^３−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｒ^３は、シアノ、ヒドロキシル、ビニル、メトキシ、又はエトキシであり；
ｍは、０又は１である請求項１記載の化合物及びその薬理学的に許容できる塩。
Ｇは、−ＣＦ_２−であり；
Ｒは、ハロ、メチル、エチル、又はＲ^３−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｒ^３は、シアノ、ヒドロキシル、ビニル、メトキシ、又はエトキシであり；
ｍは、０又は１である請求項１又は２記載の化合物及びその薬理学的に許容できる塩。
Ｇは、−ＣＦ_２−、又は−Ｃ（Ｏ）−であり、
Ｒは、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、メチル、メトキシメチル、シアノメチル、ヒドロキシメチル、又はビニルである請求項１から３いずれか記載の化合物及びその薬理学的に許容できる塩。
Ｇは、−ＣＦ_２−であり、
Ｒは、メチル又はメトキシメチルである請求項１から４いずれか記載の化合物及びその薬理学的に許容できる塩。
からなる群より選ばれる請求項１から５いずれか記載の化合物、並びに、その鏡像異性体及び薬理学的に許容できる塩。
請求項１から６いずれか記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を、薬理学的に許容できる担体、希釈剤、又は賦形剤とともに含有する医薬組成物。
患者における夜間頻尿症、閉塞性尿路疾患、肥満、痴呆、高血圧、失調症、大腸癌、前立腺癌、不妊症、低下、白血病、炎症性腸疾患、関節炎または前立腺肥大症を治療する方法であって、前記患者に、有効量の請求項１から６いずれか記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む方法。
患者における前立腺肥大症を治療する方法であって、前記患者に、有効量の請求項１から６いずれか記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む方法。
患者における前立腺癌を治療する方法であって、前記患者に、有効量の請求項１から６いずれか記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む方法。
前記患者はヒトである請求項８から１０いずれか記載の方法。
請求項１から６いずれか記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩の、夜間頻尿症、尿路疾患、肥満、痴呆、高血圧、失調症、大腸癌、前立腺癌、不妊症、低下、白血病、炎症性腸疾患、関節炎または前立腺肥大症の治療用医薬品の製造における使用。
請求項１から６いずれか記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩の、前立腺肥大症の治療用医薬品の製造における使用。
請求項１から６いずれか記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩の、前立腺癌の治療用医薬品の製造における使用。
ＥＲ−β受容体を介した疾患を有する患者を治療する方法であって、前記患者に、有効量の請求項１から６いずれか記載の化合物を投与することを含む方法。
前記疾患は前立腺癌である請求項１５記載の方法。
前記疾患は前立腺肥大症である請求項１５記載の方法。
前記患者はヒトである請求項１５から１７いずれか記載の方法。
請求項１から６いずれか記載の化合物の、ＥＲ−β受容体を介した疾患の治療用医薬品の製造における使用。
前記疾患は前立腺癌である請求項１９記載の使用。
前記ＥＲ−β受容体を介した疾患は、前立腺肥大症である請求項１９記載の使用。
ＥＲ−β受容体の機能を低下する方法であって、前記受容体を、請求項１から６いずれか記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩と接触させることを含む方法。
患者におけるＥＲ−β受容体の機能を低下する方法であって、前記患者に、有効量の請求項１から６いずれか記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む方法。
患者におけるＥＲ−β受容体を介した疾患を治療する方法であって、前記患者に、有効量の請求項１から６いずれか記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む方法。
前記疾患は、夜間頻尿症、閉塞性尿路疾患、肥満、痴呆、高血圧、失調症、大腸癌、前立腺癌、不妊症、低下、白血病、炎症性腸疾患、関節炎、または前立腺肥大症である請求項２４記載の方法。
前記疾患は前立腺肥大症である請求項２４又は２５記載の方法。
前記疾患は前立腺癌である請求項２４又は２５記載の方法。
前記患者はヒトである請求項２２から２７いずれか記載の方法。
Ｇは、−ＣＦ_２−であり；
Ｒは、ハロ、メチル、エチル、又はＲ^３−（ＣＨ_２）_ｍ−であり；
Ｒ^３は、シアノ、ヒドロキシル、ビニル、メトキシ、又はエトキシであり；
ｍは、０又は１である請求項１記載の化合物又はその薬理学的に許容できる塩。