JP2008505899A

JP2008505899A - ヒトグルカゴン様ペプチド−１修飾因子、並びにそれの糖尿病および関連症状の治療における使用

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Publication number: JP2008505899A
Application number: JP2007520360A
Authority: JP
Inventors: ウィリアム・アール・ユーイング; クラウディオ・マペッリ; リチャード・ビー・サルスカイ; テイサー・エス・ヘイク; ビング・ジー・リー; ダグラス・ジェイムズ・リージンガー; ロゲリオ・エル・マルティネス; イェヘン・チュ
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2004-07-02
Filing date: 2005-06-30
Publication date: 2008-02-28
Also published as: AU2005270129A1; WO2006014287A8; DE602005020017D1; EP1773877B1; BRPI0511393A; IL180434A0; US20080242593A1; AR049572A1; WO2006014287A1; PE20060713A1; TW200611704A; EP1773877A1; US7417028B2; KR20070042162A; ATE461218T1; CA2571794A1; US20060287242A1; RU2007104105A; MXPA06015193A; NO20070614L

Abstract

本発明は、天然のＧＬＰ−１ペプチドと同等またはより優れた生物活性を有し、したがってＧＬＰ活性に関連する疾患または障害の治療または予防に有用な新規なヒトグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）−受容体修飾因子を提供する。さらに、本発明はＩＩ型糖尿病におけるインスリン分泌を刺激するだけでなく、他の有用なインスリン分泌反応も生じる新規な化学修飾されたペプチドを提供する。これらの合成ペプチドＧＬＰ−１受容体修飾因子は、タンパク分解開裂への増加した安定性を示し、それらを経口または非経口投与用の理想的な治療上の候補薬にする。本発明のペプチドは望ましい薬物動態的特性および糖尿病の効力モデルにおける望ましい効力を示す。

Description

本出願は米国特許仮出願第６０／５８５，３５８号（２００４年７月２日出願）および米国特許仮出願第６０／６８４，８０５号（２００５年５月２６日出願）の優先権主張をし、これらの出願はそれぞれ本明細書にそのまま引用される。

（技術分野）
本発明は、未変性ペプチドのＧＬＰ−１の優れた生物特性を示し、ＧＬＰ−１未変性配列に比べタンパク分解開裂に増加した安定性を示し、これにより糖尿病症状の改善に有用である、新規なヒトグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）ペプチド受容体修飾因子、アゴニストまたは部分アゴニストを提供する。

（背景技術）
ＧＬＰ−１は、グルコース代謝、並びに胃腸での分泌および代謝において調整された機能を有する重要な腸ホルモンである。ヒトＧＬＰ−１は、プレプログルカゴンを起源とする３０個のアミノ酸ペプチドであり、例えば、遠位回腸中のＬ細胞で、膵臓で、および脳内で合成される。ＧＬＰ−１（７−３６）アミドおよびＧＬＰ−２を産するためのプレプログルカゴンの処理は、主にＬ細胞および脳幹内で起こる。ＧＬＰ−１は通常食物の摂取に応答して分泌され、特に炭水化物および脂質がＧＬＰ−１分泌を刺激する。ＧＬＰ−１はとても強く、低血糖症を引き起こすリスクが減少したグルコース依存性インスリン放出の効力がある刺激剤として確認されている。ＧＬＰ−１は、血漿グルカゴン濃度を低下させ、胃の空腹感を遅らせ、インスリン生合成を刺激し、インスリン感受性を向上させる（Nauck, 1997, Horm. Metab.Res. 47:1253-1258）。ＧＬＰ−１はまた、ブドウ糖耐性に障害のある患者におけるグルコースを感知し、応答する膵臓のβ細胞の能力も向上させる（Byrne, Eur. J. Clin. Invest., 28:72-78, 1998）。ヒトにおけるＧＬＰ−１のインスリン分泌効果は、一部インスリンレベルの増加のため、および一部インスリン感受性向上のため、グルコース代謝の速度を高める（D’Alessio, Eur. J. Clin. Invest., 28:72-78, 1994）。グルカゴン放出の阻害は、ＩＩ型糖尿病患者のＧＬＰ−１での治療に続いて見られるグルコースホメオスタシスにおける改善に貢献する付加的なメカニズムであると考えられる（Nauck, M.A., et al., Diabetologia 36:741-744, 1993）。上記のＧＬＰ−１の薬理特性は、それをＩＩ型糖尿病の治療のための非常に望ましい治療剤にする。

また、最近の研究で、わずかに多い生理学的量のＧＬＰ−１の注入が、有意に飽満を高め、通常の患者における食物摂取を減らすことが示されている（Flint, A., Raben, A., Astrup, A. and Holst, J.J., J.Clin.Invest, 101:515-520, 1998; Gutswiller, J.P., Goke, B., Drewe, J., Hildebrand, P., Ketterer, S., Handschin, D., Winterhaider, R., Conen, D and Beglinger, C. Gut 44:81-86, 1999;）。食物摂取および飽満の効果は、肥満患者においても保持されることが報告されている（Naslund, E., Barkeling, B., King, N., Gutniak, M., Blundell, J.E., Holst ,J.J., Rossner, S., and Hellstrom, P.M., Int. J. Obes. Relat. Metab. Disord., 23:304-311, 1999）。

上記で引用された研究において、胃の空腹感におけるＧＬＰ−１の公表された効果はまた、その現象が怪しくもあった。胃の空腹感は食後の血糖変動を生じる。インスリン分泌の刺激に加えて、ＧＬＰ−１がＢ細胞新生を刺激しながら、転写因子である膵島−十二指腸ホメオボックス−１(islet-duodenal homeobox-1)（ＩＤＸ−１）の発現を刺激し、それによって糖尿病の効果的な治療および／または予防剤であり得ることも示されている（Stoffers, D.A., Kieffer, T.J. Hussain, M.A.,Drucker, D.J., Bonner-Weir, S., Habener, J.F. and Egan, J.M. Diabetes, 40:741-748, 2000）。ＧＬＰ−１はまた、胃酸分泌を阻害することも示されており（Wettergren, A., Schjoldager, B., Mortensen, P.E., Myhre, J., Christiansen, J., Holst, J.J., Dig. Dis. Sci., 38:665-673, 1993）、胃潰瘍に対する保護が提供されうる。

ＧＬＰ−１が、例えば、心臓保護、神経保護、並びに学習および記憶誘導となりうる多くの付加的な膵臓外の効果を有することが最近報告されている（reviewed in Ahren, B., Horm. Metab. Res. 36:842-845, 2004）。したがって、ＧＬＰ−１が心不全（Nikolaidis, L.A., et al., Circulation 110:955-961, 2004）、虚血／再灌流傷害（Nikolaidis, L.A., et al., Circulation 109:962-965, 2004）、およびアルツハイマー病（Perry, T. and Greig, N.H., J. Alzheimers Dis. 4:487-496, 2002）の治療に用い得ることも提案されている。

ＧＬＰ−１は、インクレチンホルモン、例えば、食事で誘発されるインスリン分泌を高める腸ホルモンである（Holst, J.J., Curr. Med. Chem., 6:1005-1017, 1999）。それは、プログルカゴンをコードするグルカゴン遺伝子の産物である。この遺伝子は、膵臓のＡ細胞中ばかりでなく、腸の粘膜の内分泌Ｌ細胞中でも発現される。プログルカゴンは、１６０個のアミノ酸を含むペプチド（タンパク質）である。プログルカゴンの更なる処理で、ａ）グルカゴン、ｂ）Ｎ末端、おそらく不活性なフラグメント、およびｃ）「メジャープログルカゴンフラグメント」として一般的に言及されるラージＣ末端フラグメントの産生となる。このフラグメントは生物学的に不活性であると考えられる。たとえこのフラグメントが膵臓中および腸のＬ細胞中のいずれにも存在しても、ＧＬＰ−１およびＧＬＰ−２として一般的に言及される２つの高度に相同性のあるペプチドを生じる「メジャープログルカゴンフラグメント」の分解産物が観察されるのは、腸内だけである。これらの２つのペプチドは重要な生物学的活性を有する。ＧＬＰ−１のアミノ酸配列はそれ自体、Ｌ細胞に存在し、プログルカゴンの７８−１０７位に同定される。

現在、ＧＬＰ−１型分子の使用を含む療法は、かかるペプチドの血清半減期が極めて短いことから深刻な問題をもたらしている。例えば、ＧＬＰ−１（７−３７）は５分未満の血清半減期を有する。このように、拡張した薬物動態的プロファイルを有する、生物学的に活性なＧＬＰ−１受容体修飾因子、アゴニストまたはアンタゴニストの危機的な必要性が存在する。本発明が目指すのはこのことおよび他のニーズに対してである。

したがって、本発明は、未変性ペプチドのＧＬＰ−１の類似または優れた生物特性を示し、これにより糖尿病性および関連症状の改善に有用である、ＧＬＰ−１受容体修飾因子、アゴニスまたは部分アゴニストとして作用する新規なペプチドを提供する。

（発明の概要）
一つの態様として、本発明は、式Ｉの配列（配列番号：１）：
Ｘ_aa1−Ｘ_aa2−Ｘ_aa3−Ｘ_aa4−Ｘ_aa5−Ｘ_aa6−Ｘ_aa7−Ｘ_aa8−Ｘ_aa9−Ｘ_aa10−Ｘ_aa11 （Ｉ）
［式中、
Ｘ_aa1は、イミダゾールを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；該アミノ酸は、アルキル、アシル、ベンゾイル、Ｌ−ラクチル、アルキルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アリールアルキルオキシカルボニル、ヘテロサイクリルオキシカルボニル、ヘテロアリールアルキルオキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アリールアルキルカルバモイル、ヘテロサイクリルスルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリールアルキルスルホニル、ヘテロアリールアルキルスルホニルまたはヘテロアリールスルホニルで適宜置換された遊離アミノ基を適宜有し；および該遊離アミノ基が存在しない場合、Ｘ_aa1は、１またはそれ以上の炭素原子が１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換された脱アミノヒスチジン体であり；
Ｘ_aa2は、Ｄ−アラニン、α−アミノ−イソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｎ−メチル−Ｄ−アラニン、Ｎ−エチル−Ｄ−アラニン、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸、α−メチル−（Ｌ）−プロリン、２−メチルピペリジン−２−カルボン酸およびイソバリンからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘ_aa3は、（１）カルボン酸を含むアミノ酸側鎖または（２）イミダゾール側鎖を有する天然型または非天然型アミノ酸であり、その中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa4はグリシンであり；
Ｘ_aa5は、（Ｌ）−スレオニンおよび（Ｌ）−ノルバリンからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa6は、２つの側鎖を有する二置換α炭素を有する天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該２つの側鎖の少なくとも１つは芳香環を有し、および該２つの側鎖の少なくとも１つはアルキル基を有し；および該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１もしくはそれ以上のアルキル基または１もしくはそれ以上のハロ基で適宜置換され；
Ｘ_aa7は、ヒドロキシル基で置換されたアミノ酸側鎖を有する天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa8は、Ｌ−セリンおよびＬ−ヒスチジンからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa9は、カルボン酸を含むアミノ酸側鎖を有する天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa10は、式ＩＩ：

（式中、Ｒ₄は、水素、アルキル、およびハロからなる群から選択され；Ｒ₃およびＲ₆は独立して、水素、ハロ、メチル、エチル、アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、およびアルコキシからなる群から選択され；該アミノ酸のβ炭素に隣接するフェニル環は、アルキルまたはハロでさらに適宜置換され；および該アミノ酸のβ炭素の遠位末端のフェニル環は、ハロ、メチル、エチル、アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、およびアルコキシでさらに適宜置換される）の天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘ_aa11は、式ＩＶａ：

（式中、該アミノ酸のＣ末端カルボニル炭素は窒素と結合して、カルボキサミド（ＮＨ₂）を形成し；Ｒ_4aは水素、アルキル、およびハロからなる群から選択され；Ｒ_3aおよびＲ_6aは各々独立して、水素、ハロ、メチル、エチル、アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、およびアルコキシからなる群から選択され；Ｒ₇は水素、メチル、およびエチルからなる群から選択され；Ｘ₁、Ｘ₂、Ｘ₃およびＸ₄は各々ＣまたはＮであるが、ただしＸ₁、Ｘ₂、Ｘ₃およびＸ₄の少なくとも１つはＮであり；該アミノ酸のβ炭素に隣接するフェニル環は、アルキルまたはハロでさらに適宜置換され；および該アミノ酸のβ炭素の遠位末端のフェニル環は、ハロ、メチル、エチル、アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、およびアルコキシでさらに適宜置換される）の天然型または非天然型アミノ酸である］
を有するポリペプチドを含む単離されたポリペプチドを対象とする。

さらに、Ｘ_aa3は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換されたヒスチジンであってもよい。Ｘ_aa3は、各々１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換された、Ｌ−アスパラギン酸またはＬ−グルタミン酸であってもよい。

Ｘ_aa6は、各々１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換された、α−メチル−フェニルアラニン、α−メチル−２−フルオロフェニルアラニン、またはα−メチル−２，６−ジフルオロフェニルアラニンであってもよい。

Ｘ_aa7は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換されたＬ−スレオニンであってもよい。

Ｘ_aa9は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換された、Ｌ−アスパラギン酸またはＬ−グルタミン酸であってもよい。

Ｘ_aa1は、アルキル、ジアルキル、アシル、ベンゾイル、Ｌ−ラクチル、アルキルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アラルキルオキシカルボニル、ヘテロサイクリルオキシカルボニル、ヘテロアリールアルキルオキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アラルキルカルバモイル、ヘテロサイクリルスルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリールアルキルスルホニル、ヘテロアリールアルキルスルホニルまたはヘテロアリールスルホニルで適宜置換される末端アミノ基を有する、Ｌ−ヒスチジンであってもよい。

Ｘ_aa1は、Ｌ−Ｎ−メチル−Ｈｉｓ、Ｌ−α−メチル−Ｈｉｓ、脱アミノ−Ｈｉｓ、３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−２−メチルプロパノイル、および（Ｓ）−３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−２−ヒドロキシプロパノイル（Ｌ−β−イミダゾールラクチル）からなる群から選択されてもよい。

Ｘ_aa2は、α−アミノ−イソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｄ−アラニン、Ｎ−メチル−Ｄ−アラニン、α−メチル−（Ｌ）−プロリン、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸および２−メチルピペリジン−２−カルボン酸からなる群から選択されてもよい。

Ｘ_aa4はグリシンであってもよい。

Ｘ_aa5は、Ｌ−ＴｈｒおよびＬ−Ｎｖａからなる群から選択されてもよい。

Ｘ_aa6は、Ｌ−α−Ｍｅ−Ｐｈｅ、Ｌ−α−Ｍｅ−２−フルオロ−Ｐｈｅ、およびＬ−α−Ｍｅ−２，６−ジフルオロ−Ｐｈｅからなる群から選択されてもよい。

Ｘ_aa7はＬ−Ｔｈｒであってもよい。

Ｘ_aa8はＬ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されてもよい。

Ｘ_aa9はＬ−Ａｓｐであってもよい。

Ｘ_aa10は、４−フェニル−フェニルアラニン、４−［（４'−メトキシ−２'−エチル）フェニル］フェニルアラニン、４−［（４'−エトキシ−２'−エチル）フェニル］フェニルアラニン、４−［（４'−メトキシ−２'−メチル）フェニル］フェニルアラニン、４−［（４'−エトキシ−２'−メチル）フェニル］フェニルアラニン、４−（２'−エチルフェニル）フェニルアラニン、４−（２'−メチルフェニル）フェニルアラニン、４−［（３'，５'−ジメチル）フェニル］フェニルアラニンおよび４−［（３'，４'−ジメトキシ）フェニル］フェニルアラニンからなる群から選択されてもよい。

Ｘ_aa11は、４−フェニル−３−ピリジルアラニン、４−（２'−メチルフェニル）−３−ピリジルアラニン、４−（２'−フルオロフェニル）−３−ピリジルアラニン、４−（２'−クロロフェニル）−３−ピリジルアラニン、４−［（３'，５'−ジメチル）フェニル］−３−ピリジルアラニン、４−（４'−トリフルオロメチルフェニル）−３−ピリジルアラニン、４−（３'−メトキシフェニル）−３−ピリジルアラニン、４−（３'−メチルフェニル）−３−ピリジルアラニン、４−（２'−メチルフェニル）−３，５−ピリミジルアラニンおよび４−（２'−エチルフェニル）−３−ピリジルアラニンからなる群から選択されてもよく；
この中で、Ｘ_aa11のＣ末端カルボニル炭素は窒素と結合して、カルボキサミド（ＮＨ₂）を形成し；および
Ｒ₇は水素およびメチルからなる群から選択される。

別の態様として、該単離されたポリペプチドは、式ＶＩ：

［式中、
Ｘ_aa2は、Ｄ−Ａｌａ、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏ、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸、２−メチルピペリジン−２−カルボン酸およびα−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなる群から選択されるアミノ酸であり；
ＸおよびＹは各々独立して、水素およびフルオロからなる群から選択され；
Ｘ_aa8は、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃は、水素、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ₆は、水素、ヒドロキシ、メトキシおよびエトキシからなる群から選択され；
Ｒ_3aは、水素、フルオロ、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aは、水素、メチルおよびメトキシからなる群から選択され；および
Ｒ₇は、水素およびメチルからなる群から選択される］
のポリペプチドであってもよい。

さらに、Ｘ_aa2は、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏおよびα−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなる群から選択されるアミノ酸であってもよく；
Ｘはフルオロであってもよく；
Ｙは水素であってもよく；
Ｘ_aa8は、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であってもよく；
Ｒ₃はエチルであってもよく；
Ｒ₆はメトキシであってもよく；
Ｒ_3aはメチルおよびエチルからなる群から選択されてもよく；
Ｒ_6aは水素であってもよく；および
Ｒ₇は水素であってもよい。

別の態様として、該ポリペプチドは、式ＶＩＩ：

［式中、
Ｒ₈は、メチル、エチル、

からなる群から選択され；
Ｘ_aa2は、Ｄ−Ａｌａ、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏ、α−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸、および２−メチルピペリジン−２−カルボン酸からなる群から選択されるアミノ酸であり；
ＸおよびＹは各々独立して、水素およびフルオロからなる群から選択され；
Ｘ_aa8は、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃は、水素、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ₆は、水素、ヒドロキシ、メトキシおよびエトキシからなる群から選択され；
Ｒ_3aは、水素、フルオロ、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aは、水素、メチルおよびメトキシからなる群から選択され；および
Ｒ₇は、水素およびメチルからなる群から選択される］
のポリペプチドであってもよい。

さらに、Ｒ₈はメチル、および

からなる群から選択されてもよく；
Ｘ_aa2は、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏおよびアミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなる群から選択されるアミノ酸であってもよく；
Ｘはフルオロであってもよく；
Ｙは水素であってもよく；
Ｘ_aa8は、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であってもよく；
Ｒ₃はエチルであってもよく；
Ｒ₆はメトキシであってもよく；
Ｒ_3aはメチルおよびエチルからなる群から選択されてもよく；
Ｒ_6aは水素であってもよく；
Ｒ₇は水素およびメチルからなる群から選択されてもよい。

別の態様として、該ポリペプチドは式ＶＩＩＩ：

［式中、
Ｒ₉は、水素、メチルおよびアルキルからなる群から選択され；
Ｘ_aa2は、Ｄ−Ａｌａ、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏ、α−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸および２−メチルピペリジン−２−カルボン酸からなる群から選択されるアミノ酸であり；
ＸおよびＹは各々独立して、水素およびフルオロからなる群から選択され；
Ｘ_aa8は、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃は、水素、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ₆は、水素、ヒドロキシ、メトキシおよびエトキシからなる群から選択され；
Ｒ_3aは、水素、フルオロ、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aは、水素、メチルおよびメトキシからなる群から選択され；
Ｒ₇は、水素およびメチルからなる群から選択される］
のポリペプチドであってもよい。

さらに、Ｒ₉は水素およびメチルからなる群から選択されてもよく；
Ｘ_aa2は、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏ、およびα−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなる群から選択されるアミノ酸であってもよく；
Ｘはフルオロであってもよく；
Ｙは水素であってもよく；
Ｘ_aa8はＬ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であってもよく；
Ｒ₃はエチルであってもよく；
Ｒ₆はメトキシであってもよく；
Ｒ_3aはメチルおよびエチルからなる群から選択されてもよく；
Ｒ_6aは水素であってもよく；
Ｒ₇は水素であってもよい。

別の態様として、該単離されたポリペプチドは下表の化合物群から選択される化合物であってもよい。

別の態様として、該単離されたポリペプチドは下表の化合物群から選択される化合物である。

別の態様として、該単離されたポリペプチドは

である。

別の態様として、該単離されたポリペプチドは

である。

別の態様として、該単離されたポリペプチドは

である。

別の態様として、本発明は式ＶＩａ：

［式中、
Ｐは、水素、フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）またはｔ−ブチルオキシカルボニル（t−Ｂｏｃ）であり；
Ｒ_3aは、メチル、エチルおよびフルオロからなる群から選択され；
Ｒ¹⁰はＯＨおよびＮＨ₂からなる群から選択され；および
Ｒ₇は水素およびメチルからなる群から選択される］
の化合物を対象とする。

別の態様として、本発明は式ＶＩＩａ：

［式中、
Ｐは、水素、フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）またはｔ−ブチルオキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）であり；
Ｒ_6aはメトキシであり；
Ｒ₁₀はＯＨおよびＮＨ₂からなる群から選択され；および
Ｒ₇は水素およびメチルからなる群から選択される］
の化合物を対象とする。

別の態様として、本発明は本明細書で記載されているような単離されたポリペプチドおよびその医薬的に許容される担体を含む医薬組成物を対象とする。

別の態様として、本発明は本明細書で記載されているような単離されたポリペプチドおよび少なくとも１つの治療剤を含む医薬組成物で、該治療剤が、抗糖尿病剤、抗肥満剤、降圧剤、抗アテローム硬化剤および脂質低下剤からなる群から選択される医薬組成物を対象とする。

該抗糖尿病剤は、ビグアナイド、スルホニル尿素、グルコシダーゼ阻害剤、ＰＰＡＲ γ アゴニスト、ＰＰＡＲ α／γデュアルアゴニスト、ａＰ２阻害剤、ＤＰＰ４阻害剤、インスリン増感剤、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）アナログ、インスリンおよびメグリチナイドからなる群から選択されてもよい。

該抗糖尿病剤は、メトホルミン、グリブリド、グリメピリド、グリピリド(glipyride)、グリピジド、クロロプロパミド、グリクラジド、アカルボース、ミグリトール、ピオグリタゾン、トログリタゾン、ロシグリタゾン、マルグリタザー、インスリン、Ｇｌ−２６２５７０、イサグリタゾン、ＪＴＴ−５０１、ＮＮ−２３４４、Ｌ８９５６４５、ＹＭ−４４０、Ｒ−１１９７０２、ＡＪ９６７７、レパグリニド、ナテグリニド、ＫＡＤ１１２９、ＡＲ−ＨＯ３９２４２、ＧＷ−４０９５４４、ＫＲＰ２９７、ＡＣ２９９３、ＬＹ３１５９０２、ＮＶＰ−ＤＰＰ−７２８Ａおよびサクサグリプチンからなる群から選択されてもよい。

該抗肥満剤は、β３アドレナリン作動性アゴニスト、リパーゼ阻害剤、セロトニン（およびドパミン）再取り込み阻害剤、甲状腺受容体β化合物、ＣＢ−１アンタゴニスト、ＮＰＹ−Ｙ２およびＮＰＹ−Ｙ４受容体アゴニストおよび摂食障害剤からなる群から選択されてもよい。

該抗肥満剤は、オーリスタット、ＡＴＬ−９６２、ＡＪ９６７７、Ｌ７５０３５５、ＣＰ３３１６４８、シブトラミン、トピラメート、アキソキン、デキサアンフェタミン、フェンテルミン、フェニルプロパノールアミンリモナバン（ＳＲ１４１７１６Ａ）、ＰＹＹ（３−３６）、膵臓ポリペプチド（ＰＰ）およびマジンドールからなる群から選択されてもよい。

該脂質低下剤は、ＭＴＰ阻害剤、コレステロールエステル変換タンパク質、ＨＭＧＣｏＡ還元酵素阻害剤、スクアレン合成酵素阻害剤、フィブリン酸誘導体、ＬＤＬ受容体活性の上方制御剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、およびＡＣＡＴ阻害剤からなる群から選択されてもよい。

該脂質低下剤は、プラバスタチン、ロバスタチン、シンバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ニスバスタチン、ビサスタチン、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、クロフィブラート、アバシミベ、ＴＳ−９６２、ＭＤ−７００、ＣＰ−５２９４１４、およびＬＹ２９５４２７からなる群から選択されてもよい。

別の態様として、本発明は本明細書に記載の単離されたポリペプチドの治療上の有効量を治療が必要な哺乳類に投与することからなる、糖尿病、糖尿病性網膜症、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎障害、創傷治癒、インスリン抵抗性、高血糖、高インスリン血症、シンドロームＸ、糖尿病性合併症、血中脂肪酸またはグリセロールのレベルの上昇、高脂血症、肥満症、高トリグリセリド血症、アテローム性動脈硬化症または高血圧症の、治療方法または進行もしくは発症を遅らせる方法を対象とする。

該方法はさらに、抗糖尿病剤、抗肥満剤、降圧剤、および抗アテローム硬化剤からなる群から選択される１またはそれ以上の治療剤および脂質低下剤の治療上の有効量を、同時または連続して投与することを含んでもよい。

別の態様として、本発明は本明細書に記載の医薬組成物の治療上の有効量を治療が必要な哺乳類に投与することからなる、糖尿病、糖尿病性網膜症、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎障害、創傷治癒、インスリン抵抗性、高血糖、高インスリン血症、シンドロームＸ、糖尿病性合併症、血中脂肪酸またはグリセロールのレベルの上昇、高脂血症、肥満症、高トリグリセリド血症、アテローム性動脈硬化症または高血圧症の、治療方法または進行もしくは発症を遅らせる方法を対象とする。

別の態様として、本発明は本明細書に記載のポリペプチドを含む製剤の非経口投与からなる、本明細書に記載のポリペプチドの投与方法を対象とする。

別の態様として、本発明は本明細書に記載のポリペプチドを含む製剤の非経口でない投与からなる、本明細書に記載のポリペプチドの投与方法を対象とする。

該非経口投与は、静脈内（ＩＶ）ボーラス注入、ＩＶ注入、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、バッカル投与、経肺投与および眼の送達からなる群から選択されてもよい。

該皮下投与は速放性または徐放性製剤の使用を含んでもよい。

該筋肉内投与は速放性または徐放性製剤の使用を含んでもよい。

該製剤は、溶媒および共溶媒、溶解剤、乳化剤、濃化剤、キレート化剤、抗酸化剤、還元剤、抗微生物保存剤、緩衝剤およびｐＨ調整剤、充填剤、保護剤および張性剤、並びに特別の添加剤からなる群から選択される医薬的に許容される賦形剤をさらに含んでもよい。

該製剤はカプセル化した輸送（送達）システムをさらに含んでもよい。

（発明の詳細な説明）
本発明は、未変性ペプチドのＧＬＰ−１の優れた生物特性を示し、ＧＬＰ−１未変性配列に比べタンパク分解開裂に増加した安定性を示し、これにより糖尿病症状の改善に有用である、新規なヒトグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）ペプチド受容体修飾因子、アゴニストまたは部分アゴニストを提供する。

本発明のおよび本明細書に記載される合成単離ペプチドは、望ましくはＧＬＰ−１受容体のアゴニストまたは部分アゴニストとして、ＧＬＰ−１受容体を調節することができる。これらの合成ペプチドは、ＧＬＰ−１と比べ優れたインビボでの効力および薬物動態的特性を示す、すなわち、該ペプチドは、食後の血漿グルコースの低下および同時に起こる血漿インスリンレベルの増加があり、これにより皮下、肺の、経鼻、バッカルまたは徐放的な投与のための理想的な治療の候補にする。

本発明には、例えば、式Ｉの配列（配列番号：１）：
Ｘ_aa1−Ｘ_aa2−Ｘ_aa3−Ｘ_aa4−Ｘ_aa5−Ｘ_aa6−Ｘ_aa7−Ｘ_aa8−Ｘ_aa9−Ｘ_aa10−Ｘ_aa11 （Ｉ）
［式中、
Ｘ_aa1は、イミダゾールを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；該アミノ酸は、アルキル、アシル、ベンゾイル、Ｌ−ラクチル、アルキルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アリールアルキルオキシカルボニル、ヘテロサイクリルオキシカルボニル、ヘテロアリールアルキルオキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アリールアルキルカルバモイル、ヘテロサイクリルスルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリールアルキルスルホニル、ヘテロアリールアルキルスルホニルまたはヘテロアリールスルホニルで適宜置換された遊離アミノ基を適宜有し；および該遊離アミノ基が存在しない場合、Ｘ_aa1は、１またはそれ以上の炭素原子が１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換された脱アミノヒスチジン体であり；
Ｘ_aa2は、Ｄ−アラニン、α−アミノ−イソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｎ−メチル−Ｄ−アラニン、Ｎ−エチル−Ｄ−アラニン、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸、α−メチル−（Ｌ）−プロリン、２−メチルピペリジン−２−カルボン酸およびイソバリンからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘ_aa3は、（１）カルボン酸を含むアミノ酸側鎖または（２）イミダゾール側鎖を有する天然型または非天然型アミノ酸であり、その中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa4はグリシンであり；
Ｘ_aa5は、（Ｌ）−スレオニンおよび（Ｌ）−ノルバリンからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa6は、２つの側鎖を有する二置換α炭素を有する天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該２つの側鎖の少なくとも１つは芳香環を有し、および該２つの側鎖の少なくとも１つはアルキル基を有し；および該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１もしくはそれ以上のアルキル基または１もしくはそれ以上のハロ基で適宜置換され；
Ｘ_aa7は、ヒドロキシル基で置換されたアミノ酸側鎖を有する天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa8は、Ｌ−セリンおよびＬ−ヒスチジンからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa9は、カルボン酸を含むアミノ酸側鎖を有する天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa10は、式ＩＩ：

（式中、Ｒ₄は、水素、アルキル、およびハロからなる群から選択され；Ｒ₃およびＲ₆は独立して、水素、ハロ、メチル、エチル、アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、およびアルコキシからなる群から選択され；該アミノ酸のβ炭素に隣接するフェニル環は、水素、アルキルまたはハロでさらに適宜置換され；および該アミノ酸のβ炭素の遠位末端のフェニル環は、水素、ハロ、メチル、エチル、アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、およびアルコキシでさらに適宜置換される）の天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘ_aa11は、式ＩＶａ：

（式中、該アミノ酸のＣ末端カルボニル炭素は窒素と結合して、カルボキサミド（ＮＨ₂）を形成し；Ｒ_4aは水素、アルキル、およびハロからなる群から選択され；Ｒ_3aおよびＲ_6aは各々独立して、水素、ハロ、メチル、エチル、アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、およびアルコキシからなる群から選択され；Ｒ₇は水素、メチル、およびエチルからなる群から選択され；Ｘ₁、Ｘ₂、Ｘ₃およびＸ₄は各々ＣまたはＮであるが、ただしＸ₁、Ｘ₂、Ｘ₃およびＸ₄の少なくとも１つはＮであり；該アミノ酸のβ炭素に隣接するフェニル環は、水素、アルキルまたはハロでさらに適宜置換され；および該アミノ酸のβ炭素の遠位末端のフェニル環は、水素、ハロ、メチル、エチル、アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、およびアルコキシでさらに適宜置換される）の天然型または非天然型アミノ酸である］
を有するポリペプチドを含む単離されたポリペプチドが含まれる。

本明細書中で提供される定義は、制限なく用いられ、別に断る場合を除き、本明細書を通して用いられる用語に適用される。

アミノ酸およびペプチド化学の当業者は、アミノ酸が一般式：

（式中ＲおよびＲ’は本明細書で述べられている）によって表される化合物を含むことを知っている。別に断りがない限り、本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アミノ酸」には、特に制限なく、「α」炭素と称される同一の炭素に結合するアミノ基およびカルボキシル基を含み、その中でＲおよび／またはＲ'は、水素を含む天然または非天然側鎖である。「α」炭素における絶対構造「Ｓ」は、「Ｌ」または「天然」構造と一般に称される。「Ｒ」および「Ｒ置換基」の両方が水素と等しい場合は、該アミノ酸はグリシンであり、キラルではない。

別に断りがない限り、本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アミノアルコール」には、特に制限なく、天然または非天然型アミノ酸が含まれ、その中で、カルボキシ基は、バリノール、グリシノール、アラニノール、アリールアラニノール、ヘテロアリールアラニノールのようなメチルアルコールに置換（還元）される。

別に断りがない限り、本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アルキル」には、特に制限なく、直鎖および分枝鎖の両方の炭化水素が含まれ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、４，４−ジメチルペンチル、オクチル、２，２，４−トリメチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、それの様々な分枝鎖の異性体などのような通常の鎖で、１〜４０個の炭素、好ましくは１〜２０個の炭素、より好ましくは１〜８個の炭素が含まれる。更に、本明細書で定義されるようなアルキル基は、いずれかの有効な炭素原子上において、かかる鎖、例えば、これらに制限されないが、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、ヒドロキシ、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アルコキシ、アリールアルキルオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシ、アルカノイル、ハロ、ヒドロキシル、チオ、ニトロ、シアノ、カルボキシル、カルボニル（＝Ｏ）、サルボキサミド、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミド、アルキルアミノ、アリールアミド、ヘテロアリールアミド、アジド、グアニジノ、アミジノ、ホスホン基、ホスフィン基、スルホン基、スルホンアミド、ハロアリール、ＣＦ₃、ＯＣＦ₂、ＯＣＦ₃、アリールオキシ、ヘテロアリール、シクロアルキルアルコキシアルキル、シクロヘテロアルキルなどに一般的に結合する１またはそれ以上の官能基で適宜置換されて、トリフルオロメチル、３−ヒドロキシヘキシル、２−カルボキシプロピル、２−フルオロエチル、カルボキシメチル、シアノブチルなどのアルキル基を形成してもよい。

別に断りがない限り、本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アルケニル」には、特に制限なく、直鎖および分枝鎖の両方の炭化水素が含まれ、通常の鎖で、１またはそれ以上の二重結合を含む２〜４０個の炭素、好ましくは１〜３個の二重結合を含む２〜２０個の炭素、より好ましくは１〜２個の二重結合を含む２〜８個の炭素が含まれ、いずれの炭素も「アルキル」として上記で述べられたように適宜置換されてもよい。

別に断りがない限り、本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アルキニル」には、特に制限なく、直鎖および分枝鎖の両方の炭化水素が含まれ、通常の鎖で、１またはそれ以上の三重結合を含む２〜４０個の炭素、好ましくは１〜３個の三重結合を含む２〜２０個の炭素、より好ましくは１〜２個の三重結合を含む２〜８個の炭素が含まれ、いずれの炭素も「アルキル」として上記で述べられたように適宜置換されてもよい。

別に断りがない限り、本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「シクロアルキル」には、特に制限なく、１〜３個の環を含む飽和または一部不飽和（１または２個の二重結合を含む）環状炭化水素基、付加された、あるいは縮合したものが含まれ、全部で３〜２０個の炭素で形成する環で、好ましくは４〜７個の炭素で各々の環を形成した環を含む、単環式アルキル、二環式アルキルおよび三環式アルキルが含まれ；アリールとして述べられるような１個の芳香環に縮合してもよく、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロデシル、シクロドデシル、シクロヘキセニル、

が含まれ、これらのいずれの基も、いずれかの有効な炭素原子を通して、水素、ハロ、ハロアルキル、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アルケニル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アルキニル、シクロアルキルアルキル、フルオレニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールオキシ、アリールオキシアルキル、アリールアルコキシ、アリールチオ、アリールアゾ、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニル、ヘテロアリールヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヒドロキシ、ニトロ、オキソ、シアノ、カルボキシル、カルボニル（＝Ｏ）、カルボキサミド、アミノ、アミノが１または２個の置換基（アルキル、アリールまたは定義の中で述べられた他のアリール化合物のいずれか）を含む置換アミノ、アミド、アジド、グアニジノ、アミジノ、ホスホン基、ホスフィン基、スルホン基、スルホンアミド、チオール、アルキルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、アリールチオアルキル、アルコキシアリールチオ、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アリールスルフィニル、アリールスルフィニルアルキル、アリールスルホニルアミノまたはアリールスルホンアミノカルボニル、あるいは上記で示されたアルキル置換基のいずれかから選択される１個またはそれ以上の基で適宜置換されてもよい。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アリール」とは、特に制限なく、環の部分（例えば、フェニルまたはナフチル）で６〜１０個の炭素を含む単環式および二環式芳香環基をいい、「アリール」（例えば、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキル環）に縮合される１〜３個の付加的な環を適宜含んでいてもよく、いずれかの有効な炭素原子を通じて水素、アルキル、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アルケニル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、アルキニル、シクロアルキルアルキル、フルオレニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、アリールオキシ、アリールオキシアルキル、アリールアルコキシ、アリールチオ、アリールアゾ、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールアルケニル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシアルキル、ヒドロキシ、ニトロ、オキソ、シアノ、アミノ、アミノが１または２個の置換基（アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリール、もしくはアリールまたは定義の中で述べられた他のアリール化合物のいずれか）を含む置換アミノ、チオール、アルキルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、アリールチオアルキル、アルコキシアリールチオ、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルキルアミノカルボニル、シクロアルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、ヘテロアリールアミノカルボニル、ヘテロアリールアルキルアミノカルボニルアルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アリールスルフィニル、アリールスルフィニルアルキル、アリールスルホニルアミノまたはアリールスルホンアミノカルボニル、あるいは上記で示されたアルキル置換基のいずれかから選択される１個またはそれ以上の基で適宜置換されてもよい。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アリールアルキル」とは、特に制限なく、例えばベンジル、フェネチルまたはナフチルプロピルのようなアリール置換基（該アリールおよび／またはアルキル基は上記で定義されるように適宜置換されうる）を有する上記で定義されるようなアルキル基をいう。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アルコキシ」、「アリールオキシ」、「ヘテロアリールオキシ」、「アリールアルキルオキシ」、または「ヘテロアリールアルキルオキシ」には、特に制限なく、酸素原子と通じて結合される上記で定義されるようなアルキルまたはアリール基が含まれる。

本明細書で用いられている用語「ヘテロシクロ」、「ヘテロ環」、「ヘテロサイクリル」または「ヘテロ環（状）の」は、特に制限なく、飽和または不飽和の、炭素原子、並びに窒素、硫黄、酸素および／またはＳＯまたはＳＯ₂基から選択される１〜４個のヘテロ原子（該窒素および硫黄ヘテロ原子は適宜酸化されていてもよく、および該窒素ヘテロ原子は適宜四級化されていてもよい）からなる、無置換または置換された安定な４−、５−、６−または７員単環式環システムを表す。該ヘテロ環は、安定な構造の産物が生じるようにいずれかのヘテロ原子または炭素原子で結合し得る。かかるヘテロ環基の例には、これらに制限されないが、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、オキソピロリジニル、オキソピペラジニル、オキソピペリジニルおよびオキサジアゾリルが含まれる。適宜、ヘテロシクロ基は、１またはそれ以上の官能基、例えば「アルキル」または「アリール」を対象に記載した官能基で置換してもよい。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「ヘテロシクロアルキル」とは、特に制限なく、ヘテロシクロアルキル置換基を有する、上記で定義されたようなアルキル基をいい、この中で該「ヘテロシクロ」および／またはアルキル基は、上記で定義されているように適宜置換されうる。

本明細書で用いられている用語「ヘテロアリール」とは、特に制限なく、窒素、硫黄、酸素および／またはＳＯまたはＳＯ₂基から選択される１またはそれ以上のヘテロ原子を含む５−、６−または７員芳香族ヘテロ環をいう。かかる環は、別のアリールまたはヘテロアリール環と縮合されてもよく、可能なＮ−オキシドを含んでいてもよい。かかるヘテロアリール基の例には、これらに限らないが、フラン、ピロール、チオフェン、ピリジン、ピリミジン、ピラジン、ピリダジン、イソキサゾール、オキサゾール、イミダゾールなどが含まれる。適宜、ヘテロアリール基は、かかる鎖に一般的に結合する１またはそれ以上の官能基、例えば「アルキル」または「アリール」を対象に記載した官能基で置換してもよい。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「ヘテロアリールアルキル」とは、特に制限なく、ヘテロアリール置換基を有する、上記で定義されたようなアルキル基をいい、この中で該ヘテロアリールおよび／またはアルキル基は、上記で定義されているように適宜置換されうる。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アルキルオキシカルボニル」とは、特に制限なく、−ＯＣ（Ｏ）−基の酸素と結合する上記のアルキル基をいい、例えば、ＣＨ₃ＯＣ（Ｏ）−、ＣＨ₃ＣＨ₂ＯＣ（Ｏ）−またはＣＨ₂（ＯＨ）ＣＨ₂ＯＣ（Ｏ）−が挙げられる。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アリールオキシカルボニル」とは、特に制限なく、−ＯＣ（Ｏ）−基の酸素と結合する上記のアリール基をいう。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アリールアルキルオキシカルボニル」とは、特に制限なく、−ＯＣ（Ｏ）−基の酸素と結合する上記のアラルキル基をいう。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「ヘテロサイクリルオキシカルボニル」とは、特に制限なく、ヘテロサイクリル基のいずれかの炭素原子が−ＯＣ（Ｏ）−基の酸素に結合している上記で定義されているようなヘテロサイクリル基をいう。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「ヘテロアリールアルキルオキシカルボニル」とは、特に制限なく、ヘテロサイクリル基のいずれかの炭素原子が−ＯＣ（Ｏ）−基の酸素に結合している上記で定義されているようなヘテロアリールアルキル基をいう。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アルキルカルバモイル」とは、特に制限なく、−ＮＣ（Ｏ）−基の窒素に結合している上記で定義されているようなアルキル基をいい、例えば、ＣＨ₃ＮＨＣ（Ｏ）−、ＣＨ₃ＣＨ₂ＮＨＣ（Ｏ）−または（ＣＨ₃）₂ＮＨＣ（Ｏ）−が挙げられ、２個のアルキル基が存在する場合は、該アルキル基は適宜結合して４、５、６または７員環を形成でき、例えば、

となる。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アリールアルキルカルバモイル」とは、特に制限なく、−ＮＣ（Ｏ）−基の窒素に結合している上記で定義されているようなアリールアルキル基をいう。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「ヘテロサイクリルカルバモイル」とは、特に制限なく、−ＮＣ（Ｏ）−基の窒素に結合している上記で定義されているようなヘテロ環基をいう。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アルキルスルホニル」とは、特に制限なく、−Ｓ（Ｏ）₂−基の硫黄に結合している上記で定義されているようなアルキル基をいい、例えば、ＣＨ₃Ｓ（Ｏ）₂−、ＣＨ₃ＣＨ₂Ｓ（Ｏ）₂−または（ＣＨ₃）₂ＣＨ₂Ｓ（Ｏ）₂−が挙げられる。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アリールスルホニル」とは、特に制限なく、−Ｓ（Ｏ）₂−基の硫黄に結合している上記で定義されているようなアリール基をいう。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「アリールアルキルスルホニル」とは、特に制限なく、−Ｓ（Ｏ）₂−基の硫黄に結合している上記で定義されているようなアリールアルキル基をいう。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「ヘテロアリールスルホニル」とは、特に制限なく、−Ｓ（Ｏ）₂−基の硫黄に結合している上記で定義されているようなヘテロアリール基をいう。

本明細書で単独または別の基の一部として用いられている用語「ヘテロアリールアルキルスルホニル」とは、特に制限なく、−Ｓ（Ｏ）₂−基の硫黄に結合している上記で定義されているようなヘテロアリールアルキル基をいう。

用語「受容体修飾因子」とは、ＧＬＰ−１受容体に作用してその能力を変え、下流シグナル現象を制御する化合物をいう。受容体修飾因子の例には、標準的な薬理学の教科書（例えば、E.M. Ross and T.P. Kenakin in Goodman and Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th edition (2001) McGraw Hill, Chapter 2, pp. 31-43）に定義されているような、アゴニスト、アンタゴニスト、部分アゴニスト、インバースアゴニスト、アロステリックアンタゴニストおよびアロステリックポテンシエーターが含まれる。

当業者は本件および当該技術分野で提供されるような用語の意味を容易に認識する。

用語「糖尿病および関連障害または関連症状」は、これらに限らないが、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、耐糖能障害、肥満症、高血糖、シンドロームＸ、代謝異常症侯、糖尿病性合併症、および高インスリン血症をいう。

本明細書で用いられている用語「脂質調節」または「脂質低下」剤は、特に制限なく、ＬＤＬを低下させ、および／またはＨＤＬを上昇させ、および／またはトリグリセリドを低下させ、および／または総コレステロールを低下させる薬剤、および／または脂質障害を治療的に処置する他の公知のメカニズムをいう。

本発明の治療剤の投与には、これに制限されないが、本発明の薬剤の治療上の有効量の投与が含まれる。本明細書で用いられている用語「治療上の有効量」は、特に制限なく、本発明の組成物の投与によって治療されうる症状を治療または予防する治療剤の量をいう。その量は、検出できうる治療または予防または改善効果を示す十分な量である。その効果には、例えば、これに制限されないが、本明細書に挙げられる症状の治療または予防が含まれうる。患者への正確な有効量は、患者の大きさおよび健康状態、治療される症状の状態および程度、担当医の助言、および投与に選択された治療剤または治療剤の組合せに依存する。したがって、前もって正確な有効量を明記しておくことは有用ではない。

本発明のペプチドは、ｏｂ／ｏｂマウスにおけるブドウ糖耐性試験で評価し、以下の実施例２２に記載されているように相対インビボ効力を評価した。本発明のペプチドは、WO 2003/033671（本明細書にそのまま引用される）からの化合物Ｉによって例示されるペプチドに関連した、グルコース低下の効力モデルにおける優れた効能および優れた薬物動態（実施例２５に記載される、イヌでの皮下注射によって測定されるような）を示し、それは表ＩおよびＩＩに図示されている。

表Ｉ

表ＩＩ

ＡＵＣ＝曲線下の面積。ＡＵＣ値は、個々の動物においてベースラインとして絶食の血漿グルコース値を用いて計算する。ＡＵＣにおけるパーセントの変化は、同実験においてベヒクル処置された群でのＡＵＣに関して計算される。所定のｐ値は、偏差の解析（ＡＮＯＶＡ）、続くフィッシャーのｐｏｓｔｈｏｃテストを用いたベヒクル処置された群と比較して決定する（**ＮＳ＝統計的有意差なし）。

本明細書に記載されているペプチドおよびそのアナログは、様々な固相技術を用いた化学合成、例えばバラニィらの文献［G. Barany and R.B. Merrifield, 「The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology」; Volume 2 -「Special Methods in Peptide Synthesis, Part A」, pp. 3-284, E. Gross and J. Meienhofer, Eds., Academic Press, New York, 1980; およびin J. M. Stewart and J. D. Young, 「Solid-Phase Peptide Synthesis」, 2nd Ed., Pierce Chemical Co., Rockford, IL, 1984.］に記載されている方法によって製造され得る。

本発明における使用の所望の戦略は、アミノ酸側鎖を一時的に保護するためのｔｅｒｔ−ブチル基と共に、α−アミノ基を一時的に保護するためのＦｍｏｃ（９−フルオレニルメチルメチルオキシカルボニル）基に基づく（参照：例えば、E. Atherton and R. C. Sheppard, 「The Fluorenylmethoxycarbonyl Amino Protecting Group」, in「The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology」; Volume 9 -「Special Methods in Peptide Synthesis, Part C」, pp. 1-38, S. Undenfriend and J. Meienhofer, Eds., Academic Press, San Diego, 1987.）。

本発明のペプチドは、ペプチドのＣ末端から始める不溶のポリマー支持体（「レジン」ともいう）上での段階的な方法で合成できる。合成はアミドまたはエステル結合の形成を通じて該レジンにペプチドのＣ末端アミノ酸を付けることで開始する。これは最後にそれぞれＣ末端アミドまたはカルボン酸として生じているペプチドを外す。あるいは、Ｃ末端アミノアルコールが存在する場合は、ここに記載されているように、Ｃ末端残基は２−メトキシ−４−アルコキシベンジルアルコールレジン（SASRIN(登録商標), Bachem Bioscience, Inc., King of Prussia, PA）に結合してもよく、ペプチド配列構築が完了後、生じたペプチドアルコールはＴＨＦ中のＬｉＢＨ₄で外される（参照：J. M. Stewart and J. D. Young, supra, p. 92）。

該合成に用いられるＣ末端アミノ酸およびすべての他のアミノ酸は、α−アミノ保護基が合成中に選択的に除かれ得るように他と異なって保護されたα−アミノ基および（もし存在するなら）側鎖官能基性を有することが要求される。アミノ酸のカップリングは、活性エステルとしてのそれのカルボキシル基の活性化およびレジンに付いたＮ−末端アミノ酸の遮断されていないα−アミノ基との反応によって行われる。α−アミノ基脱保護およびカップリングの進行は完全なペプチド配列が構築するまで繰り返す。該ペプチドは次いで、副反応を制限するために通常適当なスカベンジャーの存在下、側鎖官能基性の同時の脱保護を伴いレジンから脱保護する。生じたペプチドは最終的に逆相ＨＰＬＣで精製される。

最終的なペプチドへの前駆体として要求されるペプチジルレジンの合成には、市販品として入手可能な架橋ポリスチレンポリマーレジン（Novabiochem、San Diego、CA； Applied Biosystems、Foster City、CA）が利用される。本発明に使用される好ましい固体の支持体は、Ｃ末端カルボキサミド用に、４−（２'，４'−ジメトキシフェニル−Ｆｍｏｃ−アミノメチル）−フェノキシアセチル−ｐ−メチルベンズヒドリルアミンレジン（リンクアミドＭＢＨＡレジン）；９−Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ−メリフィールドレジン（シーバーアミドレジン）；４−（９−Ｆｍｏｃ）アミノメチル−３，５−ジメトキシフェノキシ）バレリル−アミノメチル−メリフィールドレジン（ＰＡＬレジン）である。最初と後のアミノ酸のカップリングは、ＤＩＣ／ＨＯＢＴ、ＨＢＴＵ／ＨＯＢＴ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰ、またはＤＩＣ／ＨＯＡＴ、ＨＡＴＵ／ＨＯＡＴからそれぞれ生成されるＨＯＢＴまたはＨＯＡＴ活性エステルを用いて行われ得る。本発明に使用される好ましい固体の支持体は、保護されたペプチドフラグメント用に、２−クロロトリチルクロリドレジンおよび９−Ｆｍｏｃ−アミノ−キサンテン−３−イルオキシ−メリフィールドレジン（シーバーアミドレジン）である。２−クロロトリチルクロリドレジンへの最初のアミノ酸の負荷は、ジクロロメタンおよびＤＩＥＡ中のレジンとのＦｍｏｃ保護されたアミノ酸の反応によって、最もよく達成される。必要なら、少量のＤＭＦを加えてアミノ酸の溶解を促進してもよい。

本明細書に記載される１１量体ペプチドアナログの合成は、ペプチドシンセサイザー、例えば、アドバンスドケムテック万能ペプチドシンセサイザー(Advanced Chemtech Multiple Peptide Synthesizer)（ＭＰＳ３９６）またはアプライドバイオシステムズ(Applied Biosystems Inc.)ペプチドシンセサイザー（ＡＢＩ４３３Ａ）を用いて行いうる。ＭＰＳ３９６を用いたなら、９６個までのペプチドが同時に合成された。ＡＢＩ４３３Ａシンセサイザーを用いたなら、個々のペプチドが連続して合成された。どちらの場合ににおいても、順次の固相ペプチド合成は、本明細書に述べられているＦｍｏｃ／ｔ−ブチル保護戦略を利用して行われた。

Ｘ_aa11位およびＸ_aa10位に存在する非天然型で非売のアミノ酸は、２つの方法の１つで、該ペプチド鎖に導入された。最初のアプローチでは、Ｂｏｃ−またはＦｍｏｃ保護された非天然型アミノ酸を適当な有機合成方法を用いて溶液中製造した。生じた誘導体を次いでペプチドの順次の合成に用いた。あるいは、要求される非天然型アミノ酸を、合成有機化学方法を直接用いてレジンの上に作った。非天然型で非売のアミノ酸がＸ_aa6位または他のいずれかのＸ_aa位で導入の必要が合った場合、要求されるＦｍｏｃ保護された非天然型アミノ酸を溶液中合成した。かかる誘導体は次いで順次の固相ペプチド合成に用いた。

本発明に用いる目的物は、以下に示すＦｍｏｃアミノ酸誘導体である。

それぞれペプチド用のペプチジルレジン前駆体は、標準的な方法（参照：例えば、D. S. King et al. Int. J. Peptide Protein Res. 36, 1990, 255-266）を用いて開裂および脱保護してもよい。本発明に用いられる望ましい方法は、スカベンジャーとして水およびＴＩＳの存在下ＴＦＡの使用である。典型的には、該ペプチジルレジンは、室温で２〜６時間ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９４：３：３、ｖ：ｖ：ｖ；１ｍＬ／１００ｍｇのペプチジルレジン）中攪拌される。使い終わったレジンは次いで濾去し、ＴＦＡ溶液を濃縮し、または減圧乾燥する。生じたクルードのペプチドは、沈澱させて、Ｅｔ₂Ｏで洗浄するか、またはプレパラティブＨＰＬＣでの精製のためにＤＭＳＯまたは５０％酢酸水に直接溶解させる。

目的の純度を有するペプチドは、プレパラティブＨＰＬＣ、例えば、ウォーターズ４０００型または島津製作所ＬＣ−８Ａ型液体クロマトグラフを用いる精製で得られる。クルードなペプチドの該溶液を、ＹＭＣＳ５ＯＤＳ（２０×１００ｍｍ）カラムに注入し、２２０ｎｍのＵＶ吸収で溶離液をモニターしながら、１４〜２０ｍＬ／分の流速を用いて、どちらも０.１％ＴＦＡで緩衝化されたＭｅＣＮ／水の直線的なグラジエントで溶離する。精製したペプチドの構造は、エレクトロスプレーＭＳ分析で確認できる。

以下の略号は、実施例および本明細書の他の箇所で用いられる。
Ｐｈ＝フェニル
Ｂｎ＝ベンジル
ｉ−Ｂｕ＝イソブチル
ｉ−Ｐｒ＝イソプロピル
Ｍｅ＝メチル
Ｅｔ＝エチル
Ｐｒ＝ｎ−プロピル
Ｂｕ＝ｎ−ブチル
ＴＭＳ＝トリメチルシリル
ＴＩＳ＝トリイソプロピルシラン
Ｅｔ₂Ｏ＝ジエチルエーテル
ＨＯＡｃまたはＡｃＯＨ＝酢酸
ＭｅＣＮまたはＣＨ₃ＣＮ＝アセトニトリル
ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ＴＦＥ＝α，α，α−トリフルオロエタノール
Ｅｔ₂ＮＨ＝ジエチルアミン
ＮＭＭ＝Ｎ−メチルモルホリン
ＮＭＰ＝Ｎ−メチルピロリドン
ＤＣＭ＝ジクロロメタン
ｎ−ＢｕＬｉ＝ｎ−ブチルリチウム
Ｐｄ／Ｃ＝パラジウム炭素
ＰｔＯ₂＝酸化白金
ＴＥＡ＝トリエチルアミン
ｍｉｎ＝分
ｈまたはｈｒ＝時
Ｌ＝リットル
ｍＬまたはｍｌ＝ミリリットル
μＬ＝マイクロリットル
ｇ＝グラム
ｍｇ＝ミリグラム
ｍｏｌ＝モル
ｍｍｏｌ＝ミリモル
ｍｅｑ＝ミリ当量
ｒｔまたはＲＴ＝室温
ｓａｔまたはｓａｔ’ｄ＝飽和
ａｑ．＝水（の）
ｍｐ＝融点
Ｂｉｐ＝ビフェニルアラニン
ＬｉＢＨ₄＝水素化ホウ素リチウム
ＮＢＳ＝Ｎ−ブロモ−コハク酸アミド
ＢＯＰ試薬＝ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス−ジメチルアミノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（カストロ試薬）
ＰｙＢＯＰ試薬＝ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＴＵ＝２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＡＴＵ＝Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＣＴＵ＝２−（６−クロロ−１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＤＭＡＰ＝４−（ジメチルアミノ）ピリジン
ＤＩＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン
ＥＤＡＣ＝３−エチル−３'−（ジメチルアミノ）プロピル−カルボジイミド塩酸塩（または１−［（３−（ジメチル）アミノ）プロピル］）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩）
ＦｍｏｃまたはＦＭＯＣ＝フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＢｏｃまたはＢＯＣ＝ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
Ｃｂｚ＝カルボベンジルオキシまたはカルボベンゾキシまたはベンジルオキシカルボニル
ＨＯＢＴまたはＨＯＢＴ・Ｈ₂Ｏ＝１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物
Ｃｌ−ＨＯＢｔ＝６−クロロ−ベンゾトリアゾール
ＨＯＡＴ＝１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィ
ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィ
ＬＣ／ＭＳ＝高速液体クロマトグラフィ／マススペクトル
ＭＳまたはＭａｓｓＳｐｅｃ＝マススペクトル
ＮＭＲ＝核磁気共鳴
ＳｃまたはＳＣ＝皮下の
ＩＰまたはｉｐ＝腹腔内
ＧＴＴ＝ブドウ糖耐性試験
ＮＢＳ＝Ｎ−ブロモコハク酸イミド

式ＩＶａのアミノ酸合成の一般的方法
式ＩＶａの保護されたアミノ酸はいくつかの方法で製造できる。例えば（反応式Ａ）、ヨードブロモ−ヘテロ環ｉ（式中、Ｘ₃＝Ｎ）は、標準的な文献の方法で、ボロン酸とパラジウム媒介触媒を介してカップリングし、アリールヘテロ環ブロミドｉｉを与え、それはリチウム化し、ジメチルホルムアミドのようなアシル化剤で反応させてアルデヒド体ｉｉｉを与えることができる。該アルデヒド体は水素化ホウ素ナトリウムまたは類似の試薬でアルコール体ｉｖに還元し、対応するブロミド体ｖは、４８％臭化水素酸中化合物ｉｖの延長した還流によって製造される。オドンネルの方法（O’Donnell，Tetrahedron Letters 39 8775 (1998)）後のキラル触媒を用いた化合物ｖとの２−（ジフェニルメチル−エンアミノ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチルのアルキル化は、キラルなエステル体ｖｉへと導き、それは強い非水系の酸で脱保護およびＦｍｏｃＣｌでの処理後、優位に一方のキラル体のＦｍｏｃｔ−ブチルエステル体ｖｉｉを与える。通常の有機溶媒からの化合物ｖｉｉの再結晶化で、エナンチオマー過剰率＞９５％の化合物ｖｉｉｉが得られる。強い非水系の酸を用いた該エステルの除去で、式ＩＶａの化合物が得られる。

あるいは、式ＩＶａの化合物は、メチルヘテロ環ｉｘ（反応式Ｂ）のラジカル誘導ブロム化してブロモメチルヘテロ環ｘを得ることによって製造できる。上記のオドンネル(O'Donnell)の方法による化合物ｘのアルキル化および類似の再結晶化で、高エナンチオマー過剰率でキラルなエステル体ｘｉｉｉに導かれる。反応式Ａに記載のようなボロン酸カップリングで、式ＩＶａの化合物に導かれる。

化合物ｉｘは、オキシ臭化リンでの処理によってヒドロキシヘテロ環ｘｉｖから製造される（反応式Ｃ）。

中間体ｉｘの別の合成には、亜鉛−銅カップリングによる、化合物ｘｖ、メチル−３−イオド−アラネート、および化合物ｉを用いる（反応式Ｄ）。

アリールピリミジニルメチルブロミド体ｘｘｉｉｉ（Ｘ₂、Ｘ₃＝Ｎ、Ｘ₁、Ｘ₄＝ＣＲ_4a）は、アリールニトリルｘｖ（反応式Ｅ）から製造できる。

ヒドロキシピリミジン体ｘｖｉは、ヒドロキシルアミン塩酸塩での該ニトリル体の処理によって化合物ｘｖから製造される。ピリミジン体ｘｖｉｉは化合物ｘｖｉの水素化から生じる。エノールメチレンマロネートｘｖｉｉｉでの化合物ｘｖｉｉの縮合でピリミジン体ｘｉｘへと導き、それはオキシ塩化リンでクロル化して、化合物ｘｘが得られる。触媒による水素化を経由する脱ハロゲン化により、化合物ｘｘｉへと導き、ＤｉＢＡｌを用いた還元でアルコール体ｘｘｉｉを得る。オキシ臭化リンを用いた該アルコールの処理で不安定なブロミド体ｘｘｉｉｉへと導き、これは保護されたアミノ酸ｖｉを得るために反応式Ａにあるようにすぐに使用しなければならない。

式ＩＶａ（Ｒ₇＝Ｍｅ）の化合物は、カパディアの方法（Kapadia, J. Org. Chem. 66 1903 (2001)）でオキサゾリジン体ｘｘｉｖから製造される（反応式Ｆ）。カリウムヘキサメチルジシラジドまたは他の強塩基を用いる化合物ｖとの化合物ｘｘｉｖのアルキル化で、化合物ｘｘｖを得る。化合物ｘｘｖの強酸加水分解、続く該アミンの保護（ＦｍｏｃＣｌまたはＦｍｏｃＯＳｕなどを用いる）で、式ＩＶａのタイプの化合物を得る。

ペプチド化学分野における当業者には、アミノ酸がＤおよびＬ異性体の両方として生じ、本発明が本明細書に記載されたペプチドの合成に導入されたアミノ酸の異性体のいずれかまたは混合物の使用を含むことは承知されている。

実施例１
１１量体ペプチドの同時固相ペプチド合成
ＭＰＳ−３９６ペプチドシンセサイザーによる自動同時合成プロトコールを用いる連続するペプチド鎖伸張の前に、Ｘ_aa10位およびＸ_aa11位にアミノ酸を含むジペプチジルレジンを、バッチ単位のモードで以下の手動の方法を用いて製造した。手動によるカップリングに用いられるＮ−α−Ｆｍｏｃ保護されたビフェニルアラニンまたはフェニル−ヘテロアリール−アラニン誘導体の合成は、上記の一般的な実験に、および実施例１０〜１６および実施例２１〜２２に同様に記載されている。

いくつかの１１量体アナログ合成に十分な９−Ｆｍｏｃ−アミノキサンテン−３−イルオキシ−メリフィールドレジン（シーバーアミドレジン；負荷量：０.５〜０.７ｍｍｏｌ／ｇ）の量は、ＤＭＦ（４×１０ｍＬ／ｇ、５分）で洗浄して増やした。Ｆｍｏｃ基は次いで、２つの処理、すなわち、それぞれ５および１５分で、２０％ピペリジン／ＤＭＦ（１０ｍＬ／ｇ）での処理を用いて除去した。該レジンは、ＤＭＦ（４×１０ｍＬ／ｇ）およびＮＭＰ（４×１０ｍＬ／ｇ）で洗浄した。０.５ＭＦｍｏｃ−Ｌ−４−（２'−メチルフェニル）−３−ピリジルアラニン−ＯＨ（ＨＣｌ塩）（１.１当量）、（または式ＩＶａで表されるいずれかの他のアミノ酸の同化合物）、ＰｙＢＯＰ（１.１当量）およびＤＩＥＡ（３.３当量）のＮＭＰ溶液を、該レジンに加えた。次いでレジンを振り混ぜ、１６〜２４時間ボルテックスした。カップリングの完了は定性的ニンヒドリン試験を用いてモニターした。レジンを排水し、ＮＭＰ（３×１０ｍＬ／ｇ）およびＤＭＦ（３×１０ｍＬ／ｇ）で洗浄し、１０％無水酢酸／ＤＣＭ（１０ｍＬ／ｇ）で９０分間処理した。ＤＣＭ洗浄（４×１０ｍＬ／ｇ）後、媒介されたＤＩＣ／ＨＯＡｔを用いた第２の手動カップリングサイクルは次いで、２０％ピペリジン／ＤＭＦでＦｍｏｃ基の除去から始め、カップリングステップにおいて式ＩＩで表されるようなＦｍｏｃ保護されたビフェニルアラニンアナログを用いて、行った。この合成反応式で、目的のＦｍｏｃ保護されたジペプチジル−シーバーアミドレジンを生成した。

計画されたアナログのセットの合成に要求されるかかるジペプチジルレジンは、以下の方法における１回のランにつき９６個までのペプチドの自動ＭＰＳ合成に用いられた。該ジペプチジルレジンは、ジクロロメタン／ＤＭＦ（６０:４０）中の懸濁液として、アドバンスドケムテックＭＰＳ３９６シンセサイザーの９６ウェル反応器の中に、反応器のウェルあたりレジンの０.０１〜０.０２５ｍｍｏｌ（２０〜５０ｍｇ）に対応する量で、負荷された。反応器は該機器の上にセットされ、排水された。ウェルは次いでＤＭＦ（０.５〜１.０ｍＬ、３×２分）で洗浄され、あらかじめプログラムされた配列合成表によって決定されているようなそれぞれのペプチド配列を集めるのに要求されている自動カップリングサイクルの数に合わせた。

典型的な０.０２５ｍｍｏｌ／ウェルの９６個の化合物の同時合成に用いられる詳細な段階的合成プロトコールは、以下に記載されている。このプロトコールは、個々の１回のランあたり１２〜９６の範囲のアナログの配列の同時合成に適用された。一般的な合成プロトコールは、反応式１に図示されている。

合成を開始する前に、以下の試薬溶液を調製し、要求されるように機器に置いた：１.５Ｍ（１５％）ピペリジン／ＤＭＦ；０.５ＭＤＩＥＡ／ＮＭＰ；０.３６ＭＤＩＣ／ＮＭＰ；１Ｍ（１０％）無水酢酸／ＤＭＦ。要求されるＦｍｏｃ保護されたアミノ酸を０.３６Ｍの０.３６ＭＨＯＡｔ／ＮＭＰ溶液として調製し、３２位のアミノ酸ラックにおける適当な位置に置いた。

上記で調製されたＦｍｏｃ保護されたジペプチジルレジンは２０％ピペリジン／ＤＭＦ（１.０ｍＬ；１×５分；１×１５分）での処理により脱保護された。レジンは次いでＮＭＰ（８×１.０ｍＬ）で洗浄された。

次のアミノ酸、典型的にはＦｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、または要求されるなら適当な直交の保護をされた別のＦｍｏｃ−アミノ酸のカップリングは、適当なＦｍｏｃ−アミノ酸（０.０７５ｍｍｏｌ、３.０当量）、ＨＣＴＵ（０.０７５ｍｍｏｌ、３.０当量）およびＤＩＥＡ（０.１５ｍｍｏｌ、６.０当量）のＮＭＰ（１ｍＬ）溶液の手動でのすべてのウェルへの添加によって行われた。窒素気圧（３〜５ｐｓｉ）による反応器の排出およびＮＭＰ（４×１.０ｍＬ）でのウェルの洗浄後、カップリングは３時間続けられた。

次のカップリングサイクルは、上記で述べられているようなＦｍｏｃ基の除去から始め、この位置で望まれる配列の置換によって要求されるようなＦｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨの、または異なるＦｍｏｃ−アミノ酸のカップリングが含まれた。該カップリングは、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ用に記載されたカップリングに一致する方法で実施された。次のカップリングステップは、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨまたは他の選択されたＦｍｏｃ−アミノ酸のいずれかを、要求されているこの配列の位置に導入する同じ方法で実施された。

次のＦｍｏｃ−アミノ酸（例えば、Ｆｍｏｃ−α−メチル−Ｐｈｅ−ＯＨまたはそれのアナログ）は以下のようにカップリングした：通常の方法でのＦｍｏｃの脱保護後、Ｆｍｏｃ−アミノ酸（１〜５当量）、ＨＯＡｔ（１〜５当量）およびＤＩＣ（１〜５当量）は、ＮＭＰ（１.０ｍＬ）溶液として手動で加えられ、該カップリングは１６〜２４時間続けられた。該カップリングはこのケースでは繰り返さなかった。通常のカップリング後の洗浄の後、該ペプチジルレジンを本明細書中で記載しているような無水酢酸でキャッピングした。

次のカップリングステップには、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨまたはこの位置での配列置換によって要求されるような置換アナログが含まれた。１０当量のＦｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨまたは置換アナログが用いられ、該カップリングが１６時間続けられ、用いられたカップリング試薬がＮＭＰ中のＤＩＣ／ＨＯＡｔであること以外は、該カップリングはＦｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨおよびそのアナログの初期のＭＰＳカップリングに記載されているように行われた。通常のカップリング後の洗浄の後、該ペプチジルレジンを１０％無水酢酸／ＤＣＭ（１×１ｍＬ×６０分）でキャッピングした。

Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨのカップリングに記載されている同一のカップリングプロトコールが使用され、次の３つのアミノ酸残基に繰り返された。Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨは、上記段落で記載されているＦｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ残基として、目的の１１量体ペプチドアナログの配列アセンブリを完成させるために、カップリングした。ある配列の位置で要求される市販品としておよび非市販品として入手可能な非天然型アミノ酸のカップリングのために、６位（Ｘ_aa6）での新規なアミノ酸用に上述されたカップリングと類似の単一のカップリングプロトコールを用いた。

最終的に、Ｆｍｏｃ基を、上述のように２０％ピペリジン／ＤＭＦで除去し、該ペプチジルレジンをＤＭＦ（４×１.０ｍＬ）およびＤＣＭ（４×１.０ｍＬ）で洗浄した。該レジンを次いで、１０〜１５分窒素ガス（５ｐｓｉ）の定圧を用いて反応器ブロック上で乾燥した。

ａ．開裂／脱保護
目的のペプチドは、以下のようなＴＦＡ開裂混合物で処理して、それぞれのペプチジルレジンから、開裂／脱保護された。ＴＦＡ／ＤＣＭ／トリ−イソプロピルシラン（７０：２８：２）（１.０ｍＬ）の溶液は、反応器のブロック内の各ウェルに加えられ、次いで１０分間ボルテックスした。これはもう２回繰り返され、ウェルからの該ＴＦＡ溶液は、風袋を量る前の、反応器の底の上にマッチングした９６のバイアルブロックにあるバイアルの中に正圧によって収集された。該バイアルはキャップされ、さらに９０分間弱くボルテックスされた。該バイアルはキャップせずに、スピードバック(登録商標)（サバント）で約０.２ｍＬの量まで濃縮した。該クルードなペプチドは、次いで更にジイソプロピルエーテル（３ｍＬ）を加えて、短くボルテックスして沈殿化した。沈澱物は遠心分離で小さくまとめ、上清をデカントした。該バイアルはスピードバック(登録商標)（サバント）で乾燥し、典型的には＞１００％の収率（２０〜４０ｍｇ）でクルードなペプチドを得た。該クルードなペプチドは、以下のプレパラティブＨＰＬＣで精製するために、２ｍＬの０.６％水酸化アンモニウムに直接溶かした。

ｂ．クルードなペプチドのプレパラティブＨＰＬＣ精製
プレパラティブＨＰＬＣは、ウォーターズ４０００型または島津製作所ＬＣ−８Ａ型液体クロマトグラフで実施した。クルードなペプチドの各溶液をＹＭＣＳ５ＯＤＳ（２０×１００ｍｍ）カラムに注入し、どちらも０.１％ＴＦＡで緩衝化されたＭｅＣＮ／水の直線的なグラジエントで溶離した。用いた典型的なグラジエントは、１４ｍＬ／分の流速で、１５分かけて２０％〜５０％［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］で、２２０ｎｍの流出ＵＶ検出であった。溶離した目的の生成物は、典型的には１０〜１１分後不純物とよく分離し、通常フラクションコレクターに単一の１０〜１５ｍＬのフラクションに集められた。目的のペプチドは、ＨＰＬＣフラクションの凍結乾燥でアモルファスの白色散剤として得られた。

ｃ．精ペプチドのＨＰＬＣ分析
上記のようにプレパラティブＨＰＬＣで精製後、各ペプチドはＳＣＬ−１０Ａシステムコントローラー、ＳＩＬ−１０Ａ自動注入装置、ＳＰＤ１０ＡＶまたはＳＰＤ−Ｍ６ＡＵＶ／ＶＩＳ検出器、またはＳＰＤ−Ｍ１０Ａダイオードアレイ検出器からなる島津製作所ＬＣ−１０ＡＤまたはＬＣ−１０ＡＴ分析用ＨＰＬＣシステムの分析ＲＰ−ＨＰＬＣによって分析した。ＹＭＣＯＤＳＳ３（４.６×５０ｍｍ）カラムを用い、溶離は以下のグラジエントの一つを用いて行った：８分かけて１０〜７０％Ｂ／Ａ、２.５ｍＬ／分（方法Ａ）；８分かけて５〜８０％Ｂ／Ａ、２.５ｍＬ／分（方法Ｂ）；８分かけて５〜７０％Ｂ／Ａ、２.５ｍＬ／分（方法Ｃ）；８分かけて２５〜７５％Ｂ／Ａ、２.５ｍＬ／分（方法Ｄ）；８分かけて２０〜７５％Ｂ／Ａ、２.５ｍＬ／分（方法Ｅ）；８分かけて１５〜７０％Ｂ／Ａ、２.５ｍＬ／分（方法Ｆ）；８分かけて１０〜９０％Ｂ／Ａ、２.５ｍＬ／分（方法Ｇ）；８分かけて２０〜６５％Ｂ／Ａ、２.５ｍＬ／分（方法Ｈ）；８分かけて５〜９０％Ｂ／Ａ、２.０ｍＬ／分（方法Ｉ）；８分かけて５〜９０％Ｂ／Ａ、２.５ｍＬ／分（方法Ｊ）；８分かけて２０〜８０％Ｂ／Ａ、２.５ｍＬ／分（方法Ｋ）；８分かけて１０〜１００％Ｂ／Ａ、２.５ｍＬ／分（方法Ｌ）；８分かけて１０〜７５％Ｂ／Ａ、２.５ｍＬ／分（方法Ｍ）。移動相Ａ：０.１％ＴＦＡ／水；移動相Ｂ：０.１％ＴＦＡ／アセトニトリル。純度は典型的には＞９０％だった。

ｄ．マススペクトル分析による構造確認
各ペプチドは、フローインジェクションまたはＬＣ／ＭＳモードにてエレクトロスプレイマススペクトル分析（ＥＳ−ＭＳ）で構造確認した。ファインニガン(Finnigan)ＳＳＱ７０００単一四極子マススペクトル装置（ThermoFinnigan、San Jose、CA）を、正および負イオンエレクトロスプレーモードにてすべての分析で用いた。フルスキャンデータは、１.０秒のスキャン時間で３００〜２２００ａｍｕのマス範囲にわたって要求された。四極子は単位導入法(unit resolution)で操作した。フローインジェクション分析のために、マススペクトル装置はウォーターズ６１６ＨＰＬＣポンプ（Waters Corp.、Milford、MA）に調整され、ＨＴＳＰＡＬ自動注入装置（CTC Analytics、Zwingen、Switzerland）が添えられた。サンプルは０.１％水酸化アンモニウムを含む水：アセトニトリル＝５０：５０の移動相に注入した。分析の流速は０.４２ｍＬ／分であり、注入量は６μｌであった。サーモセパレーションズコンスタメトリック(ThermoSeparations Constametric)３５００液体クロマトグラフ（ThermoSeparation Products、San Jose、CA）およびＨＴＳＰＡＬ自動注入装置を、ＬＣ／ＭＳ分析用に用いた。クロマトグラフ分離は、ルナ(Luna)Ｃ₁₈、５ミクロンカラム、２×３０ｍｍ（Phenomenex、Torrance、CA）を用いて行った。分析の流速は１.０ｍＬ／分であり、カラム排出はエレクトロスプレイインターフェイスの中への流量を４００μl／分にするよう分配した。４分かけた０％〜１００％Ｂ／Ａの直線的グラジエントを操作し、その中で移動相Ａは１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む水：アセトニトリル＝９８：２であり、移動相Ｂは１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む水：アセトニトリル＝１０：９０であった。ＵＶの応答は２２０ｎｍでモニターした。該サンプルを２００μlのＨ₂Ｏ：ＭｅＣＮ＝５０:５０（０.０５％ＴＦＡ）に溶かした。注入量は５μｌであった。

すべての場合において、実験的に測定された分子量は、計算されたモノ同位体の分子量の０.５ダルトン以内であった。

実施例２
Ａ．Ｎ−アシル化された１１量体ペプチドアナログ合成の一般的方法（反応式２）.
Ｎ−アシル化した１１量体ペプチドアナログの合成は、反応式２に示すように、保護された１１量体ペプチジルレジン中間体（１）（０.０１５ｍｍｏｌ）から始め、本明細書に記載されているように製造した。Ｆｍｏｃ基は本明細書に記載されている方法を用いて除去し、生じたレジン中間体２は、本明細書に記載されている一般的方法に記載されているカップリングプロトコールを用いて、関連したＦｍｏｃ保護されたアミノ酸またはカルボン酸とカップリングされた。適当な無水物が入手可能な場合は、Ｎ−アシル化はＮＭＰ中の５当量の無水物を用いて行った。生じたＮ−アシル化された１１量体アナログ（３）は開裂／脱保護され、本明細書に記載されている一般的方法で、プレパラティブＨＰＬＣで精製した。

Ｂ．１１量体ペプチドアナログのＮ−カルバメート誘導体合成の一般的方法
１１量体ペプチドアナログのＮ−カルバメート誘導体の合成は、保護された１１量体ペプチジルレジン中間体（１）（０.０１５ｍｍｏｌ）から始め、本明細書に記載されているように製造してよい。Ｆｍｏｃ基を本明細書に記載されている方法を用いて除去し、生じたレジン中間体２は、三級アミンのような適当な塩基の存在下関連したクロロホルメート体と、あるいはジカルボネートと、またはｐ−ニトロフェニルまたはフェニルまたはヒドロキシ−スクシンイミジルカルボネートのような活性なカルボネートと反応させる。

Ｃ．１１量体ペプチドアナログのＮ−ウレア誘導体合成の一般的方法
１１量体ペプチドアナログのＮ−ウレア誘導体の合成は、保護された１１量体ペプチジルレジン中間体（１）（０.０２５ｍｍｏｌ）から始め、本明細書に記載されているように製造してよい。Ｆｍｏｃ基を本明細書に記載されている方法を用いて除去し、生じたレジン中間体２は、例えば文献（K. Burgess et al., J. Am. Chem. Soc. 1997, 119, 1556-1564）にあるように製造した関連したイソシアネートと反応される；あるいはレジン中間体２は関連したカルバモイルクロリドと反応され得る。同様に、１０量体ペプチドアナログのＮ−ウレア誘導体は、保護された１０量体ペプチジルレジン中間体から始め、Ｆｍｏｃの除去および生じたペプチジルレジン中間体の関連したイソシアネートまたはカルバミルクロリドとの反応で製造してよい。

Ｄ．１１量体ペプチドアナログのＮ−スルホンアミド合成の一般的方法
１１量体ペプチドアナログのＮ−スルホンアミドの合成は、保護された１１量体ペプチジルレジン中間体（１）（０.０２５ｍｍｏｌ）から始め、本明細書に記載されているように製造してよい。Ｆｍｏｃ基を本明細書に記載されている方法を用いて除去し、生じたレジン中間体２は、関連したスルホニルクロリドと反応される。同様に、１０量体ペプチドアナログのＮ−スルホンアミドは、保護された１０量体ペプチジルレジン中間体から始め、Ｆｍｏｃの除去および生じたペプチジルレジン中間体の関連したスルホニルクロリドとの反応で製造してよい。

Ｅ．１１量体ペプチドアナログのＮ−スルホニルウレア誘導体合成の一般的方法
１１量体ペプチドアナログのＮ−スルホニルウレア誘導体の合成は、保護された１１量体ペプチジルレジン中間体（１）（０.０２５ｍｍｏｌ）から始め、本明細書に記載されているように製造してよい。Ｆｍｏｃ基を本明細書に記載されている方法を用いて除去し、生じたレジン中間体２は、関連したスルファモイルクロリドＲ₄Ｒ₅Ｎ−ＳＯ₂−Ｃｌと反応して、スルホニル尿素中間体を産生する（参照：例えば、P. Davern et al. J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2, 1994 (2), 381-387）。同様に、１０量体ペプチドアナログのＮ−スルホニル尿素誘導体は、保護された１０量体ペプチジルレジン中間体から始め、Ｆｍｏｃの除去および生じたペプチジルレジン中間体の関連したスルファモイルクロリドＲ₄Ｒ₅Ｎ−ＳＯ₂−Ｃｌとの反応で製造してよい。

実施例３
アプライドバイオシステムズモデル４３３Ａペプチドシンセサイザーを用いた１１量体ペプチドアナログの固相合成
以下が、アップグレードされたアプライドバイオシステムズ(Applied Biosystems)モデル４３３Ａペプチドシンセサイザーを用いた、典型的な１１量体ペプチドアナログの固相合成の一般的記載である。アップグレードされたシンセサイザーのハードウェアおよびソフトウェアは、カップリングのフィードバックコントロールで、Ｆｍｏｃ脱保護ステップの伝導率のモニタリングを可能にした。該プロトコールは、０.０５〜１.０ｍｍｏｌの合成スケールの範囲が許容された。

２つの非天然型Ｃ末端アミノ酸の導入は、１１量体アナログの同時合成に関連して、上記に記載した。かかるＦｍｏｃ保護されたジペプチジルレジンは、このＡＢＩ合成に用いられた。Ｆｍｏｃ保護されたジペプチジルレジン（０.１ｍｍｏｌ）は、機器上の適当なサイズの容器の中に入れ、６回ＮＭＰで洗浄し、２２％ピペリジン／ＮＭＰ（各々２および８分）での２回の処理を用いて脱保護した。１または２回の追加のモニタリングされた脱保護ステップは、モニタリングの選択の条件を満足するまで行った（最後の２つの伝導率基準の脱保護ピークの間の差は＜１０％）。全脱保護時間は１０〜１２分であった。脱保護されたジペプチジルレジンはＮＭＰで６回洗浄し、次いで次のアミノ酸とカップリングした。手順は次ステップに用いられている実施例によって図示されている。

このように、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨは、以下の方法を用いて次にカップリングした：Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（１ｍｍｏｌ、１０当量）を２ｍＬのＮＭＰ中溶解し、０.４５ＭＨＢＴＵ／ＨＯＢｔのＤＭＦ（２.２ｍＬ）溶液および２ＭＤＩＥＡ／ＮＭＰ（１ｍＬ）の続く添加で活性化した。活性化されたＦｍｏｃ保護されたアミノ酸の溶液を次いで反応容器に移し、該カップリングを、脱保護ステップからのフィードバックに依存して、３０〜６０分間を続けた。該レジンを次いでＮＭＰで６回洗浄し、目的の配列の集合体を完成させるために、上述のような追加の脱保護／カップリングサイクルを８回行った。連続して用いられたＦｍｏｃ−アミノ酸は、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−α−メチル−Ｐｈｅ（２−フルオロ）−ＯＨまたはそのアナログ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｉｂ−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨであった。最終的に、上記で述べたように、該Ｆｍｏｃ基は２２％ピペリジン／ＮＭＰで除去され、該ペプチジルレジンをＮＭＰおよびＤＣＭで６回洗浄し、真空乾燥した。

あるいは、Ｆｍｏｃ保護されたアミノ酸（０.２６ｍｍｏｌ）が０.５ＭＨＯＡｔ／ＤＭＦ（０.５２ｍＬ）およびＤＩＣ（４０μＬ）のその後の添加によって活性化され、手動で反応容器に移され、１４〜１８時間カップリングされた修正されたカップリングプロトコールが用いられた。

Ａ．開裂／脱保護
目的のペプチドは、ＴＦＡ／水／トリ−イソプロピルシラン（９６：２：２）（３.０ｍＬ）の溶液で２時間処理して、そのそれぞれのペプチジルレジンから開裂／脱保護した。該レジンを濾去し、ＴＦＡ（１.０ｍＬ）ですすぎ、およびＴＦＡ濾液を合わせて、３５ｍＬのＥｔ₂Ｏに加えた。生じた沈殿物を遠心分離で集め、最終的に乾燥し、白色の固形物としてクルードなペプチド生成物を得た（２３２ｍｇ）。これを本明細書に記載のようにプレパラティブＨＰＬＣで精製した。用いたグラジエントは、４０分かけての１５％〜４５％の［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］であった。純粋な生成物を含むフラクションは、集められ、凍結乾燥され、純粋な生成物を得た（２８.４ｍｇ、回収率：１８％）。

実施例４
式ＩＩおよびＩＶａで表されるＸ _aa10 位およびＸ _aa11 位でのビフェニルアラニンおよびフェニル−ヘテロアリール−アラニンアナログの合成
Ｘ_aa10位およびＸ_aa11位の残基が、式ＩＩおよびＩＶａで表される置換アミノ酸アナログ、すなわち、ビフェニルアラニンアナログ（Ｂｉｐアナログ）またはフェニル−ヘテロアリール−アラニンアナログによって表されたこれらのアナログでは、ペプチド鎖への導入は、以下の２つのアプローチの一つで実施された。

Ａ．アプローチＡ：固相スズキ縮合
アプローチＡにおいて、固相スズキ縮合は、その後の固相ペプチド合成を実施するのに適した様式で要求される修飾されたビフェニルアラニンまたはフェニル−ヘテロアリール−アラニン残基を製造するのに実施され、ターゲットのペプチドを得た。ターゲットのペプチドにおけるＸ_aa11位のアミノ酸が修飾されたビフェニルアラニンまたはフェニル−ヘテロアリール−アラニン残基で表される場合、反応式３に示されるように製造された。Ｂｏｃ α−アミン保護基除去後、鎖の伸張は、前のセクションに記載されているように、多様なペプチド合成を用いて続けられ、目的の１１量体ペプチドまたはそれの誘導体を得た。修飾されたビフェニルアラニンアナログがターゲットのペプチドのＸ_aa10位にある場合、要求されるアミノ酸は反応式４に示されるように、固体の支持体上の適切なジペプチド前駆体を用いて製造された。

要求される修飾されたビフェニルアラニン誘導体を含む生じたジペプチジル部分は次いで、ターゲットの１１量体ペプチドまたはそれの誘導体の合成を行うのに用いた。Ｘ_aa10位およびＸ_aa11位の両方が新規なビフェニルアラニンまたはフェニル−ヘテロアリール−アラニン残基を要求した場合、２つの一連の固相スズキ反応は反応式５（下記）に示すように実施された。

１．Ｘ _aa11 位で式ＩＶａで表されるアミノ酸を含むシンフェーズ(登録商標)ランタンの製造の一般的方法（スズキカップリング）

ａ．一般的方法Ａ
クノール結合(Knorr linkage)（Ｂｏｃ−アミノ酸−レジン）またはアミノ酸−クノール結合（Ｂｏｃ−ジペプチド−レジン）を介して直接結合したＮ^α−Ｂｏｃ−（Ｓ）−２−アミノ−３−（６−ブロモピリジン−３−イル）プロパン酸残基またはＮ^α−Ｂｏｃ−Ｌ−４−ヨードフェニルアラニン残基で誘導化されたシンフェーズ(SynPhase)(登録商標)ランタン(Lantern)（Ａシリーズ（０.０７５ｍｍｏｌ／ランタン）またはＤシリーズ（０.０３５ｍｍｏｌ／ランタン）、ミモトープス(Mimotopes)製）を、ネジの蓋付きの１３×１００ｍｍガラス培養チューブに入れた。（以下の方法はＤシリーズランタンに用いた。反応物の同様の比を、Ａシリーズランタンを含む反応に用いた。）アリール−またはヘテロアリール−ボロン酸（０.１４０ｍｍｏｌ、４当量）を０.３０ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドに溶かした。生じた溶液を１３×１００ｍｍガラス培養チューブ中の該ランタンに加えた。

リン酸カリウム（０.２８０ｍｍｏｌ、８当量、２Ｍ水溶液の０.１４ｍＬ）をアリール−またはヘテロアリール−ボロン酸溶液に加え、続いて４.０ｍｇのテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）触媒（約１０モル％、０.００３５ｍｍｏｌ）を含む０.１０ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド溶液を加えた。生じた混合物を窒素で覆い、反応容器をしっかりと蓋をし、軌道型振とう器において１７〜２０時間８０℃で置いた。Ｂｏｃ基開裂の前に、該ランタンを濾過器具に移し、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（３×１ｍＬ）およびジクロロメタン（３×１ｍＬ）で洗浄した（ランタンあたり、最低３分／洗浄サイクル）（以下の一般的方法を参照）。

ｂ．一般的方法Ｂ
反応は、別の触媒を用いる以外は一般的方法Ａのように行った。この手順のために、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）を触媒として用いた。Ｄ−シリーズランタンスケールの反応のために、約１０ｍｏｌ％（０.００３５ｍｏｌ）触媒を用いた。

２．Ｂｏｃ基の開裂方法
ａ．方法Ａ
（以下の方法をＤシリーズランタンに適用させる：０.０３５ｍｍｏｌ／ランタン。同様に適切に量られた方法が、Ａシリーズランタン用に用いられた：０.０７５ｍｍｏｌ／ランタン。）一般的方法ＡまたはＢに記載のようにして製造されたＢｏｃ保護されたランタンを、トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート、２，６−ルチジンおよびジクロロメタン（容量比１：１：３）を含む０.５ｍＬの試薬溶液で処理した。それぞれ緩和な攪拌しながら１時間のかかる２つの試薬処理後、該レジンをジクロロメタン（４×１.０ｍＬ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×１.０ｍＬ）、およびジクロロメタン（３×１.０ｍＬ）で洗浄した。該ランタンを次いで、ペプチド合成シークエンスの次のアシル化（カップリング反応）に付した。

ｂ．方法Ｂ
一般的方法ＡまたはＢに記載されているように製造されたＢｏｃ保護されたランタンは、緩和な攪拌しながら室温で１時間０.５ｍＬの１ＮＨＣｌ／無水１，４−ジオキサンで処理した。該ランタンは、１，４−ジオキサン（２×１.０ｍＬ）、１０％Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン／Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（容量：容量）（２×１.０ｍＬ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（３×１.０ｍＬ）、およびジクロロメタン（３×１.０ｍＬ）で洗浄し、次工程のアシル化（カップリング反応）ステップに用意される遊離のアミノ−ランタンを得た。

実施例６
Ｘ _aa10 位で修飾されたビフェニルアラニン残基を含むランタン製造の一般的方法
スズキカップリングに代わる上述の一般的方法（ＡおよびＢ）は、反応式４に示されるように、シンフェーズ(登録商標)ランタンに結合するアミノ酸（Ｘ_aa11位で）で開始し、Ｘ_aa10位で修飾したＰｈｅを含む要求されるジペプチジルランタンを得るのに利用された。

実施例７
Ｘ _aa10 位およびＸ _aa11 位の両方で式ＩＩおよび式ＩＶａで表されるアミノ酸を含むランタン製造の一般的方法
Ｘ_aa11位が修飾されたアナログ用に上述された方法（反応式１）の活用およびスズキカップリング方法の２つの連続する回数での実施により、以下の反応式５に図示のように、Ｘ_aa10位およびＸ_aa11位の両方で修飾されたフェニルアラニンおよびフェニル−ヘテロアリールアラニン残基を含むジペプチジルランタンを産生した。

実施例８
シンフェーズ(登録商標)ランタンにおけるペプチドのアシル化／伸張の一般的方法
ａ．Ｆｍｏｃ脱保護の方法
Ｄシリーズシンフェーズ(登録商標)ランタン（０.０３５ｍｍｏｌ／ランタン負荷）を、０.５ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド／ピペリジン（８：２、容量：容量）に加えた。弱く攪拌した。１時間後、該ランタンをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×１.０ｍＬ）およびジクロロメタン（３×１.０ｍＬ）で洗浄し、ランタンを少なくとも３分／洗浄に浸した。

ｂ．アシル化／アミノ酸カップリングの方法（反応式６）
側鎖およびα−アミン保護されたアミノ酸（０.１０５ｍｍｏｌ）を、０.５ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド／ジクロロメタン（１：１）に溶解した。この溶液に、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０.１０５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０.３１５ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ'−ジイソプロピルカルボジイミド（０.１０５ｍｍｏｌ）を加えた。α−アミン保護されたペプチドを含んだＤシリーズランタン（０.０３５ｍｍｏｌ／ランタン）を該溶液に加えた後、アミノ酸溶液を１０分間置いた。バイアルに蓋をし、弱く１６〜２０時間攪拌した。該ランタンを次いでＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×１.０ｍＬ）およびジクロロメタン（３×１.０ｍＬ）で洗浄し、ランタンを３〜５分／洗浄サイクルに浸した。

実施例９
フラグメント縮合を介するペプチド製造の一般的方法
アプローチＡにおいて、固相スズキ縮合は、実施例７に記載のように、Ｘ_aa10位およびＸ_aa11位で式ＩＩ、式ＩＶａで表される要求されるアミノ酸を製造するのに実施された。該ジペプチドは、同時（方法Ａ）または連続する（方法Ｂ）Ｎ末端α−アミン保護基の除去を伴って、支持体から開裂された。該ジペプチドは次いで完全に側鎖を保護した９個のアミノ酸ペプチドにカップリングさせた（下記参照）。続く側鎖の脱保護および精製により、目的の１１量体ペプチド生成物を生じた。

Ａ．アプローチＡ：溶液相フラグメント縮合
アプローチＡにおいて、Ｂｏｃ保護されたまたはＦｍｏｃ保護されたＮ末端α−アミンを伴ったシンフェーズ(登録商標)ランタンに結合した目的のジペプチドを製造するために、固相スズキ縮合およびアシル化（実施例７に記載のように）を実施した。該ジペプチドは、酸性条件下ランタン支持体から開裂された。Ｂｏｃ保護されたＮ末端α−アミン化合物の場合、酸性開裂は反応式７に示されるように、α−アミンの同時の脱保護に至らし、これらは精製されるか、またはフラグメントカップリング工程に直接持って行った。

Ｆｍｏｃ保護されたＮ末端α−アミン化合物を含むジペプチドは、反応式８に示すように、酸性条件下開裂され、Ｎ末端α−アミンは溶液中脱保護された。これらのジペプチドは精製され、次いでフラグメントカップリング工程に持って行った。

１．シンフェーズ(登録商標)ランタンからのジペプチド開裂の方法
ａ．方法Ａ（Ｂｏｃ保護されたジペプチド；反応式７参照）
Ｄシリーズシンフェーズ(登録商標)ランタンは、１ドラムガラスバイアルに入れられた。トリフルオロ酢酸／ジクロロメタン（１：１、０.５ｍＬ）の溶液を、該バイアルに加えた。該バイアルに蓋をし、軌道型振とう器（１００ｒｐｍ）上で２時間弱く振とうした。開裂した溶液を新しいバイアルに移し、更に０.５ｍＬトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン（１：１）を該ランタンに加えた。バイアルを再度蓋し、軌道型振とう器（１００ｒｐｍ）上で２時間弱く振とうした。第２の開裂した溶液を第１の溶液に加え、該ランタンをジクロロメタンですすいだ。すすぎ液を先の開裂した溶液に加え、溶媒を蒸発させてα−アミンのトリフルオロ酢酸塩として、ジペプチドを得た。

ｂ．方法Ｂ（Ｆｍｏｃ保護されたジペプチド化合物；反応式８）
Ｆｍｏｃ保護されたジペプチドは、方法Ａにおいて上述されているように、シンフェーズ(登録商標)ランタンから開裂された。該ランタンはジクロロメタンですすがれ、すすぎ液／開裂した溶液の混合液から溶媒は蒸発させた。生じた残渣（１ドラムバイアル中）に、０.４０ｍＬのジメチルホルムアミド／ピペリジン(８：２)（容積：容積）を加えた。バイアルを蓋し、４５分間反応を行った。残っている溶媒を蒸発して除去し、生じた生成物を、Ｃ−１８カラムおよびＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ／ＴＦＡ溶媒系を用いてＨＰＬＣで精製し、（溶媒を蒸発後）α−アミンのトリフルオロ酢酸塩としてジペプチドを得た。

２．側鎖保護された９量体ペプチドＣ末端カルボン酸の固相合成の方法（反応式９）
Ｆｍｏｃ−（Ｌ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ（５当量）、０.５ＭＨＯＡｔ／ＤＭＦ（５当量）およびＤＩＣ（５当量）のＮＭＰ（５ｍＬ）溶液を、室温で１８時間（Ｌ）−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−２−クロロ−クロロトリチルレジン（３.０ｇ、２.１６ｍｍｏｌ）と共にボルテックスした。ＮＭＰで数回洗浄後、Ｆｍｏｃ基を、１.５Ｍピペリジン／ＤＭＦで２回（５分および１０分）処理して除去した。そのカップリングにＦｍｏｃ−α−Ｍｅ−Ｐｈｅ（２−Ｒ−６−Ｒ”）−ＯＨおよびＢｏｃ−（Ｌ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨをそれぞれ１.１当量および１.５当量用いること、およびＦｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨを（Ｓ）−α−Ｍｅ−Ｐｈｅ（２−Ｒ−６−Ｒ”）−ペプチジルレジン上にカップリングするのにＨＡＴＵ／ＨＯＡｔおよびＤＩＥＡ（４当量）を用いること以外、これらのカップリングおよび脱保護ステップを７回繰り返して、目的の配列を集めた。

集めることが完結したとき、該ペプチジルレジンをＤＣＭで洗浄し、次いで保護された９量体ペプチドＣ末端カルボン酸を、室温で１時間ＤＣＭ／ＡｃＯＨ／ＴＦＥ（８：１：１、ｖ：ｖ：ｖ）で処理してすすぎ液から除いた。該レジンを濾去し、濾液を蒸発乾固させ、ＡｃＣＮ／水（２：１）中に溶かし、２回凍結乾燥し、純粋な生成物を得て（２.７７７ｇ、８１％）、更に精製することなく続くフラグメントカップリングステップに用いた。

３．溶液相フラグメントカップリング反応の方法
これらの反応は、１ドラムバイアル中の単一化合物形式中および２ｍＬの９６ウェルプレート中の化合物のパラレルアレイ中の両方において実施された。以下の記載（反応式１０に示される）は単一化合物の場合に適用されるが、９６ウェルプレート中で実施される反応に完全に類似している。

ジペプチド（０.０１ｍｍｏｌ）のＴＦＡ塩は、１.５ｍＬのガラスバイアル中、０.５％Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを含む０.２５ｍＬのＴＨＦに溶かした。大きな孔のカルボネートレジン（ＭＰ−カルボネート、０.０３ｍｍｏｌ、Argonaut Technologies）をバイアルに加えた。バイアルに蓋をし、室温で２時間攪拌した。該溶液を濾過し、過剰の溶媒を蒸発して除いた。

側鎖が保護された９量体ペプチドＣ末端カルボン酸（０.００８ｍｍｏｌ）およびＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ、０.００８ｍｍｏｌ）を含むクロロホルム／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（９：１）溶液（０.１５ｍＬ）を、ジペプチドアミンを含むバイアルに加えた。ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ、０.０８ｍｍｏｌ）を、０.０５ｍＬのクロロホルム／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（９：１）溶液に加えた。バイアルに蓋をし、反応液を室温で１６時間軌道型振とう器上で攪拌した。残った溶媒をバイアルから蒸発させた。

１１量体ペプチド側鎖およびＮ末端α−アミンを、０.４０ｍＬのトリフルオロ酢酸／トリイソプロピルシラン（ＴＦＡ／ＴＩＳ）（９７.５：２.５）で１時間脱保護した。残った溶媒を蒸発して取り去り、該１１量体ペプチド生成物を次いでＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ／ＴＦＡ溶媒系を用いて、目的の生成物の集合体の検出によって流出の収集を誘発してＨＰＬＣで精製した。

Ｂ．アプローチＢ：溶液中でのスズキカップリングを用いた式ＩＩおよびＩＶａで表されるＦｍｏｃ−アミノ酸アナログの合成
以下の実施例は、式ＩＩおよびＩＶａで表されるいくつかのＦｍｏｃ−アミノ酸アナログの合成を図示しており、実施例１に記載されているように、該アナログは１１量体および他のペプチドアナログの固相合成に利用された。

実施例１０
Ｆｍｏｃ−（Ｓ）−２'−エチル−４'−メトキシ−ビフェニルアラニン［Ｆｍｏｃ−（Ｓ）−Ｂｉｐ（２'−Ｅｔ−４'−ＯＭｅ）］の合成
以下の反応式１１は、Ｆｍｏｃ−（Ｓ）−２'−エチル−４'−メトキシ−ビフェニルアラニンの合成を記載する。

１．Ｂｏｃ−Ｌ−チロシン−Ｏ−トリフレート
Ｂｏｃ−Ｌ−チロシンメチルエステル（２５ｇ、８５ｍｍｏｌ）、および２，６−ルチジン（３６.２５ｇ、３３９ｍｍｏｌ、４当量）の乾燥ＤＣＭ（２００ｍＬ）溶液に、Ｎ₂下−４０℃に保って、無水トリフルオロメタンスルホン酸（４７.７４ｍｇ、１６９.５ｍｍｏｌ、２当量）のＤＣＭ（１００ｍＬ）溶液を３０分かけてゆっくりと加えた。該溶液を−４０℃でさらに２時間攪拌した。ＨＰＬＣ分析で反応が完了していることがわかった。反応をさらに２０ｍＬの水でクエンチした。分液し、有機層を１ＮＨＣｌ（３×２００ｍＬ）、飽和Ｎａ₂ＣＯ₃（２００ｍＬ）、水（２００ｍＬ）および食塩水（２００ｍＬの）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空乾燥して、赤色の油状物として粗生成物を得た。それをシリカゲルフラッシュクロマトグラフィ（３００ｇシリカゲル、０〜５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサングラジエント）にかけた。生成物を含んだフラクションを減圧濃縮し、白色の固形物として目的化合物（２７ｇ、収率７５％）を得た。

２．２−エチル−４−メトキシ−フェニルボロン酸
ａ．方法Ａ
メチルトリフェニルホスホニウムブロミド（１９９.５ｇ、０.４６５ｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（８００ｍＬ）懸濁液を、１０分間パージし、１０℃に冷却した。ｎ−ブチルリチウム（１６９ｍＬ、０.４６５ｍｏｌ、２.７５Ｍ溶液）をゆっくり３０分かけて加え、１時間攪拌した。２−ブロモ−５−メトキシベンズアルデヒド（１００ｇ、０.４６５ｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（３００ｍＬ）溶液を、ゆっくりと３０分間かけて加えた。添加後、反応混合物を１時間攪拌した。石油エーテル（２Ｌ）を加え、反応混合物をさらに３０分間攪拌した。反応混合物をシリカゲルパッドで濾過した。該パッドをジエチルエーテルで洗浄した。有機洗浄液を合わせて、３０℃以下で濃縮し、該粗生成物を、溶離液として１００％石油エーテルを用いた６０−１２０シリカゲルクロマトグラフィで精製した。
収率：９２ｇ、９０％、薄黄色液体として。

酢酸エチル（６５０ｍＬ）中の２，２’−二ピリジル（２４.３ｇ、０.１５ｍｏｌ）および２−ブロモ−５−メトキシスチレン（６５ｇ、０.３１ｍｏｌ）を０℃に冷却した。該溶液をパージして、１０％パラジウム炭素（１６.２５ｇ、２５％）を窒素気流下加えた。反応混合物を２ｋｇの圧力下、パールシェーカー(Parr shaker)中３日間水素下で攪拌した。反応の進行をＨＰＬＣでモニターした。反応混合物をセライトで濾過し、濾液を５％重硫酸カリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、３０℃以下で濃縮した。
収率：６０ｇ、９１％、薄黄色液体として。

４−ブロモ−３−エチルアニソール（９４ｇ、０.４３７ｍｏｌ）のＴＨＦ（９００ｍＬ）溶液を、７８℃に冷却した。ｎ−ブチルリチウム（２４９ｍＬ、０.５５ｍｏｌ）を同温度で滴下した。攪拌を７８℃で１時間続けた。ホウ酸トリ−ｎ−ブチル（１７７ｍＬ、０.６５５ｍｏｌ）を７８℃でゆっくり加えた。冷浴を除き、反応混合物を０℃に加温し、０℃で１.５Ｎ塩酸でクエンチした。有機層を分液した。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層を合わせて食塩水で洗浄し、濃縮した。得られた残渣を石油エーテル中３０分間攪拌した。得られた固形物を濾過し、真空乾燥した。
収率：６５ｇ、８２％、白色の固形物として。

ｂ．方法Ｂ（反応式１２参照）
乾燥アセトン（５００ｍＬ）中の３−エチルフェノール（５０ｇ、０.４ｍｏｌ、純度９８％、Ｆｌｕｋａ）およびＫ₂ＣＯ₃（２８３ｇ、２.０５ｍｏｌ）の混合物に、ヨウ化メチル（２９０ｇ、２.０５ｍｏｌ）を加えた。反応混合物をオートクレーブに移し、７０℃で終夜還流した。反応混合物をセライトパッドで濾過した。該パッドをアセトンで洗浄し、濾液と洗浄液を合わせて、濃縮した。生成物をＤＣＭに溶かし、濾過し、蒸発乾固した。
収率：５０ｇ、９０％、茶色の液体として。

３−エチルアニソール（５０ｇ、０.３６７６ｍｏｌ）およびＮ−ブロモコハク酸イミド（７２ｇ、０.４ｍｏｌ）のアセトニトリル（１Ｌ）溶液を、暗室下室温で８時間攪拌した。反応混合物を４０℃以下で濃縮し、得られた残渣をＣＣｌ₄に再溶解し、濾過した。濾液を濃縮し、生成物を分画蒸留で精製した。収率：３５ｇ、４３％、薄黄色液体として。４−ブロモ−３−エチルアニソールを、方法Ａに記載のように対応するボロン酸に変換した。

反応のスケールアップの目的で、４−ブロモ−３−エチルアニソールの２−エチル−４−メトキシ−ボロン酸への変換は、グリニャール方法を用いて行ってもよい。かかる方法は、ＴＨＦ中の４−ブロモ−３−エチルアニソールのＭｇ（１.１当量）との反応、続いて方法Ａに記載のような生じたグリニャール中間体のトリ−ｎ−ブチル−またはホウ酸トリメチルとの反応によるグリニャール試薬の形成を含む。

３．Ｆｍｏｃ−（Ｓ）−２’−エチル−４’−メトキシ−ビフェニルアラニン
Ｂｏｃ−Ｌ−チロシンＯ−トリフレート（８１ｇ、０.１９ｍｏｌ）の乾燥トルエン（６００ｍＬ）溶液を、１０分間窒素でパージした。２００ｍＬの水中のＫ₂ＣＯ₃（３６ｇ、０.２６ｍｏｌ）を加え、続いて２−エチル−４−メトキシ−フェニルボロン酸（３６ｇ、０.２ｍｏｌ）を加え、反応混合物を窒素を用いて１０分間パージした。Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（１６.１８ｇ、０.０１４ｍｏｌ）、エタノール（２００ｍＬ）およびＴＨＦ（４００ｍＬ）を加え、反応混合物を攪拌しながら１００℃に４時間加熱した。反応混合物を減圧濃縮し、残渣をＤＣＭ（１.０Ｌ）に溶かした。有機層を１０％水酸化ナトリウム溶液、１５％クエン酸溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。該粗生成物を６０−１２０−メッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィ（１０％酢酸エチル／石油エーテル）で精製した。収率：５０ｇ、６５％、黄色の液体として。

Ｂｏｃ−（Ｓ）−２’−エチル−４’−メトキシ−ビフェニルアラニンのメチルエステル（６０ｇ、０.１４６ｍｏｌ）のＴＨＦ（４５０ｍＬ）およびメタノール（８５ｍＬ）混合液に、８５ｍＬの水中の水酸化ナトリウム（２４ｇ、０.５８ｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜攪拌し、濃縮し、残渣を水（１００ｍＬ）に溶かし、ジエチルエーテルで洗浄した。水層を２０％クエン酸を用いてｐＨ１まで酸性にし、酢酸エチルで抽出した。抽出物を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発乾固した。収率：５５ｇ、９４％、無色の液体として。

Ｂｏｃ−（Ｓ）−２’−エチル−４’−メトキシ−ビフェニルアラニン（５５ｇ、０.１３８ｍｏｌ）を乾燥ＤＣＭ（１リットル）に溶解し、乾燥ＨＣｌガスを６時間室温でパージした。得られた固形の生成物を濾過し、真空乾燥した。収率：４６ｇ、１００％。遊離アミノ酸塩酸塩（３０ｇ、０.０８９ｍｏｌ）のＴＨＦ（７００ｍＬ）溶液に、水（２４０ｍＬ）中のＮａＨＣＯ₃（２９ｇ、０.３５８ｍｏｌ）を加えた。Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（３０ｇ、０.０８９ｍｏｌ）を３０分間かけて何回かに分けて加えた。反応混合物を終夜室温で攪拌した。ＴＨＦを真空下除去し、水（２.０Ｌ）を加えた。該澄明な溶液をエーテルで抽出し、不純物を除去した。該水溶液をｐＨ１まで酸性にし、酢酸エチルで抽出した。該有機層を水および食塩水で洗浄し、蒸発乾固した。収率：３７ｇ、８０％。

実施例１１
（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ｏ−トリルピリジン−３−イル）プロパン酸塩酸塩［Ｆｍｏｃ−（Ｓ）−４−（２'−メチルフェニル）−３−ピリジルアラニン塩酸塩］の合成
以下の反応式１３には、（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ｏ−トリルピリジン−３−イル）プロパン酸塩酸塩の合成が記載されている。

１．５−ブロモ−２−ｏ−トリルピリジン
トルエン（８ｍＬ）および２Ｍ炭酸ナトリウム水（３.２ｍＬ）中の５−ブロモ−２−ヨードピリジン（９１０ｍｇ、３.２１ｍｍｏｌ）および２−ｏ−トリルボロン酸（４３６ｍｇ、３.２１ｍｍｏｌ、１.０当量）のアルゴンパージされ、脱気されたスラリーに、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（３６ｍｇ、０.０３２ｍｍｏｌ、０.０１当量）を加えた。反応混合物をパージして、アルゴンでもう２回脱気して、次いでアルゴン下１５時間還流をセットした。反応液を冷却し、水およびＥｔＯＡｃ間で分液処理した。分液して、水層をＥｔＯＡｃでもう１回抽出した。該有機抽出物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、真空乾燥して、橙色の油状物として粗生成物を得た。シリカゲルクロマトグラフィ（７：３ＣＨ₂Ｃｌ₂／ヘキサン）による精製で、黄色の油状物として標題化合物を得た（６６６ｍｇ、収率：８４％）。

２．６−ｏ−トリルニコチンアルデヒド
上記化合物（１２５ｍｇ、０.５０ｍｍｏｌ）の攪拌したＴＨＦ（２.０ｍＬ）溶液にアルゴン下−７４℃で、温度が−７１℃を超えないように、２.５Ｍｎ−ＢｕＬｉのヘキサン溶液（２２０μＬ、０.５５ｍｍｏｌ、１.１当量）を５分かけて加えた。淡緑溶液が形成し、３０分後に濃緑色になった。４５分後、ＤＭＦ（４９.４μＬ、０.６１ｍｍｏｌ、１.２当量）を加え、反応液を−４０℃まで加温した。１４時間後、明橙色の溶液となった。反応液を１０％クエン酸でクエンチし、該混合物を素早く２０分間室温で攪拌した。生じた明黄色の溶液をＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機抽出物を合わせて、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、濃縮して、黄色の油状物を得た。このようにして得られたクルードな混合物を、溶離液として酢酸エチル／ジクロロメタン（１：２４）を用いたシリカゲルクロマトグラフィ（２.５×１０ｃｍカラム）で精製し、白色の固形物を得た（ｍｐ８２〜８４℃、９０.３ｍｇ、収率９１％）。

３．（６−ｏ−トリルピリジン−３−イル）メタノール
６−o−トリルニコチンアルデヒド（１.０７０ｇ、５.４３ｍｍｏｌ）のエタノール（１９ｍＬ）溶液に０〜５℃で、水素化ホウ素ナトリウム（２８７ｍｇ、７.５ｍｍｏｌ、１.４当量）を加えた。２時間後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液でクエンチし、３０分後ジクロロメタンと食塩水の間で分液処理した。有機抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮し、無色の油状物として示された生成物を得た（１.０８ｇ、収率：１００％）。

４．５−（ブロモメチル）−２−ｏ−トリルピリジン臭化水素塩
（６−ｏ−トリルピリジン−３−イル）メタノール（４.４９ｇ、２２.５ｍｍｏｌ）の４８％臭化水素酸（７５ｍＬ）溶液を、６４時間加熱還流した。反応混合物を部分的に冷却し、黄褐色の固形残渣がフラスコ内に残るまで、過剰の臭化水素酸を減圧蒸留（１１０℃ @ ２ Torr）で除いた。蒸留は、蒸留器具と真空ポンプの間に置いた大きなＫＯＨペレットトラップを用いて行った。固形の残渣をジエチルエーテル中スラリー化し、濾過し、窒素気流下乾燥して、生成物を得た（７.３８ｇ、収率：９５％）。

５．（２Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−３−（６−o−トリルピリジン−３−イル）プロパノエート
５−（ブロモメチル）−２−o−トリルピリジン臭化水素酸塩（８００ｍｇ、２.３３ｍｍｏｌ）、２−（ジフェニルメチレンアミノ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（６８９ｍｇ、２.３３ｍｍｏｌ、１.０当量）およびＯ−アリル−Ｎ−（９−アントラセニルメチル）シンコニジウムブロミド（１４１ｍｇ、０.２３３ｍｍｏｌ、０.１当量）の攪拌したジクロロメタン（１４ｍＬ）混合液に−７８℃でアルゴン下、２−ｔ−ブチルイミノ−２−ジエチルアミノ−１，３−ジメチル−ペルヒドロ−１，３，２−ジアザホスホリン（１.６８７ｍＬ、５.８３ｍｍｏｌ、２.５当量）を５分かけて加えた。反応混合物を−７８℃で１０時間攪拌し、次いでインシトゥーで室温まで加温した。該混合物を溶離液として酢酸エチル／ジクロロメタン（１：４）を用いたシリカゲルクロマトグラフィ（５×１０ｃｍカラム）で直接精製し、黄褐色の油状物を得た（１.１０ｇ、収率：１００％）。

６．（２Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ｏ−トリルピリジン−３−イル）プロパノエート
（２Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−３−（６−ｏ−トリルピリジン−３−イル）プロパノエート（１.１０ｇ、２.３３ｍｍｏｌ）の攪拌したＴＨＦ（９ｍＬ）溶液に室温でアルゴン下、クエン酸（２.７９５ｇ、１４.５４ｍｍｏｌ、６.５当量）の水（９ｍＬ）溶液を加えた。２０時間後、反応混合物を水（５ｍＬ）で希釈し、エーテル（１０ｍＬ）で２回洗浄した。水相を次いで固形の炭酸ナトリウムでｐＨ９にし、ジクロロメタンで２回抽出した。

ジクロロメタン抽出物を合わせて、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。生じた油状物をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、室温にて１０％炭酸ナトリウム溶液（７.２ｍＬ）および次いで９−フルオレニルメチルオキシカルボニルクロリド（７０３ｍｇ、２.５６ｍｍｏｌ、１.１当量）で処理した。１４時間後、反応混合物をジクロロメタンで２回抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、溶離液として酢酸エチル／ジクロロメタン（１：１９）を用いて、シリカゲルカラムクロマトグラフィ（２.５×１０ｃｍカラム）で精製し、無色の油状物を得た（１.０８２ｇ、収率：９１％）。２０ｍＬのヘキサン／ジクロロメタン（７：１）から再結晶化で、白色の固形物を得た（２８７ｍｇ）。母液を濃縮し、アモルファスの白色の固形物の標題化合物を得た（７７９ｍｇ、収率６３％）。キラルＨＰＬＣ分析（４.６×２５０ｍｍＡＤカラム、溶離液としてヘプタン：メタノール：エタノール＝３８：１：１、流速１ｍＬ／分）により９８％ｅｅであった。

７．（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ｏ−トリルピリジン−３−イル）プロパン酸塩酸塩
（２Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ｏ−トリルピリジン−３−イル）プロパノエート（１.７５ｇ、３.１９ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（５.０ｍＬ）溶液を、塩化カルシウムで満たした乾燥管で大気から保護して、室温で２時間攪拌した。反応混合物を４０℃以下で減圧濃縮し、生じた橙色の油状物をエーテル（１０ｍＬ）に溶かし、それに１ＭＨＣｌ／エーテル（５ｍＬ）溶液を加えた。生じた白色の固形物を濾過し、エーテルで洗浄し、白色の粉末として目的化合物を得た（１.６５ｇ、収率：１００％）。

実施例１２
（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−４−（６−ブロモピリジン−３−イル）プロパン酸塩酸塩の合成
以下の反応式１４は、３−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ブロモピリジン−３−イル）プロパン酸塩酸塩の合成を記載する。

１．２−ブロモ−５−（ブロモメチル）ピリジン
５−メチル−２−ブロモピリジン（１０.３２０ｇ、６０.０ｍｍｏｌ）および再結晶化されたＮ−ブロモコハク酸イミド（５.３３９ｇ、３０.０ｍｍｏｌ、０.５当量）の四塩化炭素（１５０ｍＬ）の攪拌したスラリーに、ＡＩＢＮ（２００ｍｇ）を加えた。反応混合物をアルゴンで２回パージし、脱気して、アルゴン下の還流をセットした。９０分後、反応混合物を室温まで冷却し、濾過し、濾液を濃縮し、黄色の油状物を得た。プロトンＮＭＲでは、混合物が５３％（ｍｏｌ）の未反応５−メチル−２−ブロモピリジン、４３％の標題化合物および４％の２−ブロモ−５−（ジブロモメチル）ピリジンを含むことを示した。該混合物はさらに精製することなく以下の方法にすぐに用いた。

２．（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ブロモピリジン−３−イル）プロパノエート
２−ブロモ−５−（ブロモメチル）ピリジン（見かけ２６.４ｍｍｏｌ）、２−（ジフェニルメチレンアミノ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（７.７９８ｇ、２６.４ｍｍｏｌ、１.０当量）およびＯ−アリル−Ｎ−（９−アントラセニルメチル）シンコニジウムブロミド（１.６０ｇ、２.６４ｍｍｏｌ、０.１当量）の攪拌したジクロロメタン（１００ｍＬ）混合液に−７８℃でアルゴン下、２−ｔ−ブチルイミノ−２−ジエチルアミノ−１，３−ジメチル−ペルヒドロ−１，３，２−ジアザホスホリン（１１.４６ｍＬ、３９.６ｍｍｏｌ、１.５当量）を５分かけて加えた。反応混合物を−７８℃で７時間攪拌し、次いでインシトゥーで室温まで加温した。反応混合物を次いで濃縮し、ＴＨＦ（７５ｍＬ）に溶かし、クエン酸（２２ｇ）の水（７５ｍＬ）溶液で処理した。７時間激しく攪拌後、該混合物をエーテル（７５ｍＬ）で２回抽出した。有機抽出物を合わせて、水（２５ｍＬ）で１回洗浄した。水抽出物を合わせて、固形の炭酸ナトリウムでｐＨ８にした。該水溶液を更に精製することなく、次反応の更なる処理に用いた。

３．（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ブロモピリジン−３−イル）プロパノエート
上記からの水溶液を、９−フルオレニルメチルオキシカルボニルクロリド（７.５４５ｇ、２７.５ｍｍｏｌ、１.０４当量）のＴＨＦ（７５ｍＬ）溶液に室温で加えた。１４時間後、反応混合物を酢酸エチルで２回抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、溶離液として酢酸エチル／ジクロロメタン（１：２４）を用いたシリカゲルクロマトグラフィ（１２×２５ｃｍカラム）で精製し、無色の油状物を得た（７.２５ｇ、収率：９１％）。１２０ｍＬのヘキサン／ジクロロメタン（５：１）からの再結晶化で、少量の白色の固形物を得て、濾去した。母液を濃縮し、アモルファスの白色の固形物の標題化合物を得た（４.９６ｇ、収率：６２％）。キラルＨＰＬＣ分析（４.６×２５０ｍｍＡＤカラム、溶離液として３８：１：１＝ヘプタン：メタノール：エタノール、流量１ｍＬ／分）により９７.２％ｅｅであった。

４．２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ブロモピリジン−３−イル）プロパン酸塩酸塩
（２Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ブロモピリジン−３−イル）プロパノエート（１.０２ｇ、１.９５ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（３.０ｍＬ）溶液を、塩化カルシウムで満たした乾燥管で大気から保護して、室温で２時間攪拌した。反応混合物を３５℃以下で減圧濃縮し、生じた橙色の油状物を３ｍＬのジクロロメタンに溶解し、それに６ｍＬの１ＭＨＣｌ／エーテル溶液を加えた。生じた白色の固形物を濾過し、エーテルで洗浄し、白色の粉末として標題化合物を得た（８４５ｍｇ、収率８６％）。

実施例１３
（２Ｓ）２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−（２−エチルフェニル）ピリジン−３−イル）プロパン酸塩酸［Ｆｍｏｃ−（Ｓ）−４−（２'−エチルフェニル）−３−ピリジルアラニン］の合成
以下の反応式１５は、（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−（２−エチルフェニル）ピリジン−３−イル）プロパン酸塩酸塩の合成を記載する。

１．（（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−（２−エチルフェニル）ピリジン−３−イル）プロパノエート
攪拌した（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ブロモ−ピリジン−３−イル）プロパノエート（１.７５ｇ、３.３５ｍｍｏｌ）および２−エチルフェニルボロン酸（１.００５ｇ、６.７０ｍｍｏｌ、２当量）のイソプロパノール／トルエン（１：１、５０ｍＬ）スラリーに、２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（２５.０ｍＬ）を加えた。反応混合物をアルゴンで２回パージし、脱気し、次いでビス（トリシクロヘキシルホスフィン）パラジウム（II）クロリド（１２４ｍｇ、０.１６７ｍｍｏｌ、０.０５当量）を加え、該混合物を再度アルゴンでパージし、脱気した。素早く攪拌した混合物をアルゴン下８０℃に加熱した。２０時間後、反応混合物を室温まで冷却し、一部濃縮し、イソプロパノールを除いた。残渣を酢酸エチルと水との間で分液処理し、水相をもう一回酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、茶色の油状物を得た。溶離液として酢酸エチル／ジクロロメタン（１：９）を用いたシリカゲルクロマトグラフィ（５×１５ｃｍカラム）精製で、無色の油状物として目的化合物を得た（１.２５ｇ、収率７７％）。

２．（２Ｓ）２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−（２−エチルフェニル）ピリジン−３−イル）プロパン酸塩酸塩
（２Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−４−（６−（２−エチルフェニル）ピリジン−３−イル）プロパノエート（１.５３ｇ、２.７９ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（５.０ｍＬ）溶液を、塩化カルシウムで満たした乾燥管で大気から保護して、２時間室温で攪拌した。反応混合物を３５℃以下で減圧濃縮し、生じた橙色の油状物をエーテルに溶かして、それに１ＭＨＣｌ／エーテル溶液（６ｍＬ）を加えた。生じた白色の固形物を濾過し、エーテルで洗浄して、白色の粉末として目的の生成物を得た（１.３８ｇ、収率９３％）。

実施例１４
（２Ｓ）２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−（２−エチル−４−メトキシ）フェニル）ピリジン−３−イル）プロパン酸塩酸塩［Ｆｍｏｃ−（Ｓ）−４−［（２'−エチル−４'−メトキシ）フェニル］−３−ピリジルアラニン］の合成
以下の反応式１６は、（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−（２−エチル−４−メトキシ）フェニル）ピリジン−３−イル）プロパン酸塩酸塩の合成を記載する。

１．（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−（２−エチル−４−メトキシフェニル）ピリジン−３−イル）プロパノエート
攪拌した（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ブロモ−ピリジン−３−イル）プロパノエート（６１３ｍｇ、１.１７ｍｍｏｌ）および２−エチルフェニルボロン酸（４２２ｍｇ、２.３４ｍｍｏｌ、２当量）のイソプロパノール／トルエン（１：１、２０ｍＬ）スラリーに、２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（１０.０ｍＬ）を加えた。反応混合物をアルゴンで２回パージし、脱気し、次いでビス（トリシクロヘキシルホスフィン）パラジウム（II）クロリド（４３.２ｍｇ、０.０５９ｍｍｏｌ、０.０５当量）を加え、該混合物を再度アルゴンでパージし、脱気した。素早く攪拌した混合物をアルゴン下８０℃に加熱した。９時間後、反応混合物を室温まで冷却し、一部濃縮し、イソプロパノールを除いた。残渣を酢酸エチルと水との間で分液処理し、水相をもう一回酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、茶色の油状物を得た。溶離液として酢酸エチル／ジクロロメタン（３：１７）を用いたシリカゲルクロマトグラフィ（５×１５ｃｍカラム）精製で、無色の油状物として目的化合物を得た（４０１ｍｇ、収率５９％）。

２．（２Ｓ）２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−（２−エチル−４−メトキシフェニル）ピリジン−３−イル）プロパン酸塩酸塩：
（２Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−（２−エチル−４−メトキシフェニル）ピリジン−３−イル）プロパノエート（４０１ｍｇ、０.６９ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（２.０ｍＬ）溶液を、塩化カルシウムで満たした乾燥管で大気から保護して、２時間室温で攪拌した。反応混合物を３０℃以下で減圧濃縮し、生じた橙色の油状物をエーテルに溶かして、それに１ＭＨＣｌ／エーテル溶液（２ｍＬ）を加えた。生じた白色の固形物を濾過し、エーテルで洗浄して、白色の粉末として目的の生成物を得た（３３６ｍｇ、収率８４％）。

実施例１５
（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−（２−メチルフェニル）ピリジン−３−イル）プロパノエート［Ｆｍｏｃ−（Ｓ）−４−（２'−メチルフェニル）−３−ピリジルアラニンｔｅｒｔ−ブチルエステル］の別法合成
以下の反応式１７は、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−（２−メチルフェニル）ピリジン−３−イル）プロパノエートの別法合成を記載する。

１．（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−（２−メチルフェニル）ピリジン−３−イル）プロパノエート：
攪拌した（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ブロモ−ピリジン−３−イル）プロパノエート（１.７５ｇ、３.３５ｍｍｏｌ）および２−メチルフェニルボロン酸（９１３ｍｇ、６.７０ｍｍｏｌ、２当量）のイソプロパノール／トルエン（１：１、５０ｍＬ）スラリーに、２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（２５.０ｍＬ）を加えた。反応混合物をアルゴンで２回パージし、脱気し、次いでビス（トリシクロヘキシルホスフィン）パラジウム（II）クロリド（１２４ｍｇ、０.１６７ｍｍｏｌ、０.０５当量）を加え、該混合物を再度アルゴンでパージし、脱気した。

素早く攪拌した混合物をアルゴン下８０℃に加熱した。２０時間後、反応混合物を室温まで冷却し、一部濃縮し、イソプロパノールを除いた。残渣を酢酸エチルと水との間で分液処理し、水相をもう一回酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合わせて、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、茶色の油状物を得た。溶離液として酢酸エチル／ジクロロメタン（１：９）を用いたシリカゲルクロマトグラフィ（５×１５ｃｍカラム）精製で、無色の油状物として目的化合物を得た（１.８１ｇ、収率９０％）。

実施例１６
以下の反応式１８は、（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−フェニル）ピリジン−３−イル）プロパノエートのアナログの一般的な合成を記載する。

１．（２Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−［６−（３−クロロ−４−フルオロ）フェニル）ピリジン−３−イル）］プロパノエート
丸底フラスコに、Ｆｍｏｃ−Ｌ−ブロモ−３−ピリジルアラニン（３００ｍｇ、０.５７３ｍｍｏｌ）、３−クロロ−４−フルオロフェニルボロン酸（２００ｍｇ、１.１４５ｍｍｏｌ、２当量）、２Ｍ炭酸ナトリウム溶液（１.１４５ｍＬ、２.２９ｍｍｏｌ、４当量）、トルエン（５ｍＬ）、イソプロピルノール（５ｍＬ）およびＰｄＣｌ₂（ＰＣｙ）₃）₂（４２ｍｇ、０.０５７３ｍｍｏｌ、０.１当量）を加えた。該反応溶液をアルゴンでパージし、次いで５時間８０℃にした。反応液を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。該溶液を水（３０ｍＬ）および食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。クルードな油状物をシリカゲルクロマトグラフィ（１２ｇｍシリカゲル、０−４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンのグラジエント）にかけて、油状物として目的化合物を得た（２４５ｍｇ、収率７５％）。

２．（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−［（３−クロロ−４−フルオロ）フェニル）ピリジン−３−イル）プロパン酸
（２Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−［（３−クロロ−４−フルオロ）フェニル）ピリジン−３−イル）プロパノエート（２４０ｍｇ、０.４２９ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（３ｍＬ）の溶液に、ＴＦＡ（３ｍＬ）を加えた。反応液を室温で５時間攪拌した。溶媒を蒸発乾固し、残渣をプレパラティブＨＰＬＣ（メタノール−水のグラジエント、０.１％ＴＦＡ）にかけた。生成物を含んだフラクションの濃縮により、ＴＦＡ塩として目的化合物を得た（２００ｍｇ、収率９３％）。

実施例１７
化合物１（化合物ＩＩ）の合成
Ｘ_aa11 アミノ酸として（Ｓ）−４−（２'−メチルフェニル）−３−ピリジルアラニンおよびＸ_aa10 アミノ酸として（Ｓ）−（２'−エチル−４'−メトキシ）ビフェニルアラニンを含む目的のジペプチジルレジンを、実施例１に記載のように製造した。ペプチド鎖の伸張は次いで、アミノ酸Ｘ_aa1−Ｘ_aa9のための実施例１に記載のカップリングプロトコールを用いて完了した。生じたペプチジルレジンを乾燥し、２ｍＬのＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９６：２：２）で１.５時間処理した。該レジンを濾去し、ＴＦＡ（１×１ｍＬ）で洗浄した。濾液を合わせて、ジエチルエーテル（３０ｍＬ）に加え、短時間ボルテックスし、次いで−１５℃で１時間維持した。沈澱した固形物を遠心沈降して集め、スピードバック中乾燥した。粗生成物を以下のようにプレパラティブＨＰＬＣで精製した。該クルードなペプチドを０.１Ｍ炭酸水素ナトリウム（１ｍＬ）、水（２ｍＬ）およびアセトニトリル（１ｍＬ）に溶かした。該ペプチドをＯＤＳ−Ａ１０μｍ充填剤を含むＹＭＣカラム（ＳＨ−３４３−１０Ｐ）、２５０×２０ｍｍＩ．Ｄ．に負荷した。該カラムにＯＤＳ１０μｍ充填剤ガードカラムＹＭＣ（Ｇ−３４０−１０Ｐ）、５０×２０ｍｍＩ．Ｄ．を備えた。該ペプチドは、１５ｍＬ／分の流速で、５０分かけて［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］の２０％から４５％のグラジエントで溶離した。集めた適当なフラクションをプールし、凍結乾燥して、以下の条件下のＨＰＬＣ（保持時間：１４.４分）で純度９８.６％のペプチドを得た：２０分かけて、１ｍＬ／分での１０％から７０％の溶媒Ｂ／Ａのグラジエント；溶媒Ａ：０.１％ＴＦＡ／水、溶媒Ｂ：０.１％ＴＦＡ／アセトニトリル；カラム：ＹＭＣＯＤＳ−Ａ１００×４.６ｍｍ、粒子径３μｍ、孔径１２ｎｍ。
マススペクトル：ESI (M+H)+ = 1528.9および(M+2H)/2 = 765.3

化合物１１８（化合物ＩＩＩ）の合成
上記のＸ_aa4−Ｘ_aa11ペプチジルレジン（０.０６７ｍｍｏｌ）のサンプルをＦｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（５当量）、残基Ｘ_aa3、および０.５ＭＨＯＡｔ（５当量）ＤＭＦの溶液と共に５分間プレボルテックスし、ＤＩＣ（５当量）を含めて１８時間ボルテックスした。該レジンを排水し、ＤＭＦ（４×３ｍＬ）で洗浄した。レジンに結合したペプチド（０.０３４ｍｍｏｌ）を脱保護し、残渣Ｘ_aa3のために先に記載されたようなＦｍｏｃ−［（Ｓ）−α−Ｍｅ−Ｐｒｏ］−ＯＨ（５当量）とのカップリングをし、レジンに結合したＦｍｏｃ−［Ｘ_aa2−Ｘ_aa11］−ペプチドを得た。

該レジン（０.０１７ｍｍｏｌ）を、残基Ｘ_aa2のために記載したように、脱保護し、Ｂｏｃ−Ｌ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（５当量）でカップリングした。目的のペプチドを、ＴＦＡ／水／トリイソプロピルシラン（９４：３：３）（５.０ｍＬ）溶液で３時間処理して、それぞれのペプチジルレジンから開裂／脱保護した。該レジンを濾去し、ＴＦＡ（１.０ｍＬ）ですすぎ、ＴＦＡ濾液を合わせて、蒸発させ、油状の固形物としてクルードなペプチド生成物を得た（３９ｍｇ）。これを２０分かけて［０.１％ＴＦＡ／ＡｃＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］の５％から６５％のグラジエントを用いたプレパラティブＨＰＬＣで精製した。純粋な生成物を含んだフラクションをプールし、凍結乾燥して、以下の条件下のＨＰＬＣ（保持時間：５.６５分）で純度９２％の化合物ＩＩＩを得た（５.４ｍｇ、回収率１８.９％）：１０分かけて、流速２.５ｍＬ／分での５から８０％の［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］のグラジエント；カラム：ＹＭＣＳ５ＯＤＳ（４.６×５０ｍｍ）。
ESI: (M+H)⁺ = 1554.8 amu.

化合物１１９の合成
先の合成において記載されたＦｍｏｃ−［Ｘ_aa3−Ｘ_aa11］−ペプチジル−シーバーレジンのサンプル（０.０１５ｍｍｏｌ）を、Ｆｍｏｃ−［Ｎ−メチル−（Ｄ）−Ａｌａ］−ＯＨ（５当量）および０.５ＭＨＯＡｔ（５当量）のＤＭＦ溶液と共に５分間プレボルテックスし、ＤＩＣ（５当量）を含めて４時間ボルテックスした。該レジンを排水し、ＤＭＦ（４×３ｍＬ）で洗浄した。Ｆｍｏｃ基を、２０％ピペリジン／ＤＭＦ（３ｍＬ）で５および１５分間処理して除去した。該レジンをＤＭＦ（８×３ｍＬ）で洗浄し、次いで先の合成に記載されたように、Ｂｏｃ−Ｌ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（５当量）とカップリングした。目的のペプチドを、ＴＦＡ／水／トリイソプロピルシラン（９４：３：３）（５.０ｍＬ）の溶液で３時間処理して、各々のペプチジルレジンから開裂／脱保護した。該レジンを濾去し、ＴＦＡ（１.０ｍＬ）ですすぎ、ＴＦＡ濾液を合わせて、蒸発させた。生じた油状の固形物をアセトニトリル／水（１：１、２ｍＬ）中に溶かし、２０分かけての［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］の５％から６５％］のグラジエントのプレパラティブＨＰＬＣで精製した。純粋な生成物を含んだフラクションをプールし、凍結乾燥して、以下の条件下のＨＰＬＣ（保持時間：５.６５分）で純度９９％の化合物１１９を得た（５.２ｍｇ、回収率１８.５％）：１０分かけて、流速２.５ｍＬ／分での５から８０％の［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］のグラジエント；カラム：ＹＭＣＳ５ＯＤＳ（４.６×５０ｍｍ）。
ESI: (M+H)⁺ = 1528.9 amu.

化合物１２０の合成
先に記載のように製造されたＦｍｏｃで保護された［Ｘ_aa10−Ｘ_aa11］−ジペプチジル−シーバーレジン（０.０５ｍｍｏｌ）のサンプルを、実施例３に記載のようなアプライドバイオシステムズ４３３Ａペプチドシンセサイザーのファーストモック(FastMoc、登録商標）プロトコールを用いて、９個の更なるカップリングサイクルに付した。Ｆｍｏｃ保護されたジペプチジルレジン（０.０５ｍｍｏｌ）を、機器の適当な大きさの容器に入れ、ＮＭＰで６回洗浄し、２０％ピペリジン／ＮＭＰで２つの処理（各２および８分）を用いて脱保護した。１つの付加的なモニターされた脱保護ステップは、モニタリングオプションの条件を満足するまで行われた。全脱保護の時間は１０〜１２分であった。脱保護されたジペプチジルレジンをＮＭＰで６回洗浄し、次いで次のアミノ酸とカップリングさせた。その方法を次工程で用いる実施例で詳述されている。

Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨを、以下の方法を用いて次にカップリングした。Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（１ｍｍｏｌ、２０当量）を２ｍＬのＮＭＰに溶かし、０.４５ＭＨＢＴＵ／ＨＯＢｔのＤＭＦ（２.２ｍＬ）溶液および２ＭＤＩＥＡ／ＮＭＰ（１ｍＬ）の続く添加で活性化した。活性化したＦｍｏｃ保護されたアミノ酸の溶液を次いで、反応容器に移し、カップリングを脱保護ステップからのフィードバックに依存して３０〜６０分間続けさせた。該レジンを次いでＮＭＰで６回洗浄し、該カップリングプロトコールを繰り返した。目的のＸ_aa4−Ｘ_aa11配列の集合体を完成するために、これを上記の更に５回の脱保護／カップリングサイクルに付した。続いてカップリングされたＦｍｏｃ−アミノ酸は、Ｆｍｏｃ−（Ｌ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−（Ｌ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−（Ｓ）−２−フルオロ−α−Ｍｅ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−（Ｌ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨであった。結局、ペプチジルレジンは、ＮＭＰおよびＤＣＭで６回洗浄した。Ｆｍｏｃ保護されたジペプチジルレジン（０.０２５ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド／ジクロロメタン（５５：４５）のスラリー中のＡＣＴ３９６マルチプルペプチドシンセサイザーに加えた。該レジンをＤＭＦで２回洗浄し、実施例１に記載のように１.５Ｍピペリジン／ＤＭＦで２つの処理を用いて脱保護した。Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（４.０当量）を、続く０.５ＭＨＯＡｔのＤＭＦ（４.０当量）およびＤＩＣ（４.０当量）の添加で活性化し、反応容器に手動で移し、２時間カップリングさせた。該レジンは１分ボルテックスしながらＮＭＰ（４×０.５ｍＬ）ですすいだ。先のカップリングのために記載されたＦｍｏｃ基の脱保護後、Ｆｍｏｃ−［（Ｓ）−α−Ｍｅ−Ｐｒｏ］−ＯＨを以下のようにカップリングした。Ｆｍｏｃ−［（Ｓ）−α−Ｍｅ−Ｐｒｏ］−ＯＨ（２.４当量）を、ＮＭＰ（０.１２ｍＬ）で希釈した０.５ＭＨＯＡｔのＤＭＦ溶液（２.４当量）およびＤＩＣ（２.４当量）の続く添加で活性化した。該溶液を反応容器に手動で移し、１８時間カップリングさせた。該レジンをＮＭＰですすいだ。Ｆｍｏｃ基の脱保護後、Ｆｍｏｃ−（Ｌ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨをＮＭＰ（０.２ｍＬ）で希釈した０.５ＭＨＯＡｔのＤＭＦ溶液（４当量）およびＤＩＣ（４当量）中のアミノ酸（４当量）溶液を手動で反応容器に加えて活性化した。カップリング反応液を１８時間カップリングさせた。該レジンをＮＭＰですすいだ。Ｆｍｏｃ基を先のカップリングのために記載されたように除去した。該ペプチドのＴＦＡ開裂／脱保護を実施例１に記載のように行った。これを２０分かけて［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］の１０％から６０％のグラジエントを用いたプレパラティブＨＰＬＣで精製した。純粋な生成物を含んだフラクションをプールし、凍結乾燥して、以下の条件下のＨＰＬＣ（保持時間：４.８８分）で純度９４％の化合物１２０を得た（２１.７ｍｇ、回収率４２％）：１０分かけて、流速２.５ｍＬ／分での５から８０％の［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］のグラジエント；カラム：ＹＭＣＳ５ＯＤＳ（４.６×５０ｍｍ）。
ESI: (M+H)⁺ = 1604.9 amu.

化合物１３３の合成
先の合成に記載のようなＦｍｏｃで保護された［Ｘ_aa2−Ｘ_aa11］−ペプチジル−シーバーレジン（０.０１７ｍｍｏｌ）のサンプルは、脱アミノ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（５当量）およびＨＡＴＵ（５当量）の０.５ＨＯＡｔのＤＭＦ（５当量）溶液、並びに２ＭＤＩＥＡ／ＮＭＰ（５当量）溶液と共に１８時間ボルテックスした。該レジンを排水し、ＤＭＦ（６×２ｍＬ）およびＤＣＭ（３×２ｍＬ）で洗浄した。目的のペプチドは、それぞれのペプチジルレジンから、ＴＦＡ／水／トリ−イソプロピルシラン（９４：３：３）（５.０ｍＬ）の溶液で３時間処理して、開裂／脱保護された。該レジンを濾去し、ＴＦＡ（１.０ｍＬ）ですすぎ、ＴＦＡ濾液を合わせて蒸発させた。生じた油状の固形物（３２ｍｇ）をアセトニトリル／水（１：１、２ｍＬ）に溶かし、２０分かけて［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］の５％から６５％のグラジエントを用いたプレパラティブＨＰＬＣで精製した。純粋な生成物を含んだフラクションをプールし、凍結乾燥して、以下の条件下のＨＰＬＣ（保持時間：６.０１分）で純度９９％の化合物１３３を得た（７.４ｍｇ、回収率２４.６％）：１０分かけて、流速２.５ｍＬ／分での５から８０％の［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］のグラジエント；カラム：ＹＭＣＳ５ＯＤＳ（４.６×５０ｍｍ）。
ESI: (M+H)⁺ = 1539.8 amu.

化合物１２１の合成
先に記載のように製造されたＦｍｏｃで保護された［Ｘ_aa10−Ｘ_aa11］−ジペプチジル−シーバーレジン（０.０５ｍｍｏｌ）のサンプルを、実施例３に記載のようなアプライドバイオシステムズ４３３Ａペプチドシンセサイザーのファーストモック(FastMoc、登録商標）プロトコールを用いて、９個の更なるカップリングサイクルに付した。Ｆｍｏｃ保護されたジペプチジルレジン（０.０５ｍｍｏｌ）を、機器の適当な大きさの容器に入れ、ＮＭＰで６回洗浄し、２０％ピペリジン／ＮＭＰで２つの処理（各２および８分）を用いて脱保護した。１つの付加的なモニターされた脱保護ステップは、モニタリングオプションの条件を満足するまで行われた。全脱保護の時間は１０〜１２分であった。脱保護されたジペプチジルレジンをＮＭＰで６回洗浄し、次いで次のアミノ酸とカップリングさせた。その方法を次工程で用いる実施例で詳述されている。

Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（Ｏ^tＢｕ）−ＯＨを、以下の方法を用いて次にカップリングした。Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（１ｍｍｏｌ、２０当量）を２ｍＬのＮＭＰに溶かし、０.４５ＭＨＢＴＵ／ＨＯＢｔのＤＭＦ（２.２ｍＬ）溶液および２ＭＤＩＥＡ／ＮＭＰ（１ｍＬ）の続く添加で活性化した。活性化したＦｍｏｃ保護されたアミノ酸の溶液を次いで、反応容器に移し、カップリングを脱保護ステップからのフィードバックに依存して３０〜６０分間続けさせた。該レジンを次いでＮＭＰで６回洗浄し、該カップリングプロトコールを繰り返した。目的のＸ_aa4−Ｘ_aa11配列の集合体を完成するために、これを上記の更に５回の脱保護／カップリングサイクルに付した。続いてカップリングされたＦｍｏｃ−アミノ酸は、Ｆｍｏｃ−（Ｌ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−（Ｌ）−Ｔｈｒ（^tＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−（Ｓ）−２−フルオロ−α−Ｍｅ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−（Ｌ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨであった。結局、ペプチジルレジンは、ＮＭＰおよびＤＣＭで６回洗浄した。Ｆｍｏｃ保護されたジペプチジルレジン（０.０２５ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド／ジクロロメタン（５５：４５）のスラリー中のＡＣＴ３９６マルチプルペプチドシンセサイザーに加えた。該レジンをＤＭＦで２回洗浄し、実施例１に記載のように１.５Ｍピペリジン／ＤＭＦで２つの処理を用いて脱保護した。Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌｕ（Ｏ^tＢｕ）−ＯＨ（４.０当量）を、続く０.５ＭＨＯＡｔのＤＭＦ（４.０当量）およびＤＩＣ（４.０当量）の添加で活性化し、反応容器に手動で移し、２時間カップリングさせた。該レジンは１分ボルテックスしながらＮＭＰ（４×０.５ｍＬ）ですすいだ。先のカップリングのために記載されたＦｍｏｃ基の脱保護後、Ｆｍｏｃ−［（Ｓ）−α−Ｍｅ−Ｐｒｏ］−ＯＨを以下のようにカップリングした。Ｆｍｏｃ−［（Ｓ）−α−Ｍｅ−Ｐｒｏ］−ＯＨ（２.４当量）を、ＮＭＰ（０.１２ｍＬ）で希釈した０.５ＭＨＯＡｔのＤＭＦ溶液（２.４当量）およびＤＩＣ（２.４当量）の続く添加で活性化した。該溶液を反応容器に手動で移し、１８時間カップリングさせた。該レジンをＮＭＰですすいだ。Ｆｍｏｃ基の脱保護後、Ｆｍｏｃ−（Ｌ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨをＮＭＰ（０.２ｍＬ）で希釈した０.５ＭＨＯＡｔのＤＭＦ溶液（４当量）およびＤＩＣ（４当量）中のアミノ酸（４当量）溶液を手動で反応容器に加えて活性化した。カップリング反応液を１８時間カップリングさせた。該レジンをＮＭＰですすいだ。Ｆｍｏｃ基を先のカップリングのために記載されたように除去した。該ペプチドのＴＦＡ開裂／脱保護を実施例１に記載のように行った。これを２０分かけて［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］の１０％から６０％のグラジエントを用いたプレパラティブＨＰＬＣで精製した。純粋な生成物を含んだフラクションをプールし、凍結乾燥して、以下の条件下のＨＰＬＣ（保持時間：２０.８分）で純度９１％の化合物１２１を得た（２１.７ｍｇ、回収率４２％）：２５分かけて、１ｍＬ／分での１０％から６０％の溶媒Ｂ／Ａのグラジエント；溶媒Ａ：０.１％ＴＦＡ／水、溶媒Ｂ：０.１％ＴＦＡ／アセトニトリル；カラム：ＹＭＣＯＤＳ−Ａ１５０×４.６ｍｍ、粒子径３μｍ、孔径１２ｎｍ。
マススペクトル：ESI (M+H)⁺ = 1568.9および(M+2H)/2 = 785.2

実施例１８
（Ｒ，Ｓ）−３−（１−（２，４−ジニトロフェニル）−イミダゾール−４−イル）−２−メチルプロピオン酸［α−メチル−β−［１−（２，４−ジニトロフェニル）−イミダゾール−４−イル］プロピオン酸］の合成
［３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−２−メチルプロピオン酸はＩｍｐとして略してもよい。参照：下記の「アミノ酸の略号および構造」］
１−トシル−４（５）−ヒドロキシメチルイミダゾール
以下の方法は文献［Agr. Biol. Chem., 38 (5), 1097-1099, 1974］に準じた。Ｎａ₂ＣＯ₃（８.４ｇ、０.０８ｍｏｌ）の水（４０ｍＬ）溶液に、４−（ヒドロキシメチル）イミダゾール塩酸塩（２.７ｇ、０.０２ｍｏｌ）を加えた。溶解が完了したとき、ｐ−トルエンスルホニルクロリド（４.５８ｇ、０.０２４ｍｏｌ）の酢酸エチル（３０ｍＬ）溶液を、５分間かけて滴下して加えた。反応混合物を５時間攪拌させた。分液処理し、酢酸エチルを更に加えた（２０ｍＬ）。有機相を、０.１ＭＮａ₂ＣＯ₃（２×２０ｍＬ）、水（１×２０ｍＬ）および次いで飽和ＮａＣｌ（１×２０ｍＬ）で洗浄した。酢酸エチル相をＭｇＳＯ₄（２ｇ）および活性炭（１ｇ）で１０分間処理した。固形物をセライトパッドで濾去し、溶媒をロータリーエバポレーターで除去した。残渣が結晶化を始めた。新たに酢酸エチルを加え（１０ｍＬ）、該溶液をヒートガンで温め、固形物を再溶解させた。生成物が終夜室温で結晶化した。結晶物質を集めて、酢酸エチル（５ｍＬ）、次いでエチルエーテル（１０ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥し、３.５９ｇの恒量を得た。

１−トシル−４（５）−アセトキシメチルイミダゾール
１−トシル−４（５）−ヒドロキシメチルイミダゾール（２.５２ｇ、１０ｍｍｏｌ）をクロロホルム（１０ｍＬ）に溶かした。これにトリエチルアミン（２.０２ｇ、２０ｍｍｏｌ）を室温で滴下して加え、続いて１５分かけて無水酢酸（１.３３ｇ、１３ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。該混合物を４日間室温で攪拌し、ＬＣ／ＭＳでモニターした。クロロホルムを減圧で留去し、残渣を酢酸エチル（６０ｍＬ）に溶かした。有機層を０.１Ｍ炭酸水素ナトリウム、水および次いで飽和塩化ナトリウム（すべて各１×４０ｍＬ）で連続して洗浄した。有機層を活性炭および硫酸マグネシウムで同時に処理し、次いでセライトパッドで濾過した。溶媒を減圧留去し、生じた残差を温酢酸エチル（１０ｍＬ）に溶かした。この溶液にゆっくりとジエチルエーテル（２０ｍＬ）を加えた。該溶液を終夜室温で結晶化するために置いておいた。結晶を集めて、ジエチルエーテル（２×１０ｍＬ）で洗浄し、終夜真空乾燥して、１.５５ｇを得た。

メチル−α−カルボメトキシ−α−メチル−β−４−（１−トシルイミダゾール）−プロピオネート
以下の方法は文献［Synthetic Communications, 19(7&8), 1157-1165, 1989］に準じた。１−トシル−４（５）−アセトキシメチルイミダゾール（０.３５１６ｇ、１.２ｍｍｏｌ）およびメチルマロン酸ジメチル（０.１４８５ｇ、１.０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２ｍＬ）溶液を、粉末状のＫＯＨ（０.１６９４ｇ、３.０ｍｍｏｌ）およびテトラブチルアンモニウムブロミド（０.０４９６ｇ、０.１５ｍｍｏｌ）の攪拌したアセトニトリル（１ｍＬ）懸濁液に加えた。ＨＰＬＣ分析で確認して、反応は４０分後に完了した。反応混合物エチルエーテル（１００ｍＬ）に注ぎ、セライトパッドで濾過し、溶媒を減圧留去した。残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）に溶解し、０.１ＭＮａＨＣＯ₃（１×１５ｍＬ）、飽和ＮａＣｌ（１×１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥した。溶媒を減圧留去し、生じた油状物を真空のデシケーターに３日間入れて、０.２０７ｇを得た。

α−メチル−β−４−イミダゾールプロピオン酸
メチル−α−カルボメトキシ−α−メチル−β−４−（１−トシルイミダゾール）−プロピオネート（０.１８６ｇ、０.５ｍｍｏｌ）を、メタノール（２ｍＬ）に溶かした。これに１.０ＮＮａＯＨ（１.５ｍＬ）を加え、反応液を終夜攪拌させた。プレパラティブＨＰＬＣで精製後、凍結乾燥で得られた生成物（０.１３６６ｇ）を１.０ＮＮａＯＨ（５ｍＬ）に溶かし、ＰＴＦＥで裏付けされたキャップで封されたスクリューキャップチューブ（１６×１００ｍｍ）中２時間１００℃に加熱し、続いて濃ＨＣｌ（２ｍＬ）を添加し、６時間１４５℃で加熱した。目的のデカルボキシル化生成物が形成された。溶液すべてを濾過し、ＹＭＣＧ−３４０−１０ＰＯＤＳ５０×２０ｍｍプレパラティブＨＰＬＣカラムにのせた。生成物を６０分かけての０％から６０％［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］のグラジエントで溶離した。グラジエントの１１〜１３分に相当するフラクションをプールし、凍結し、凍結乾燥して、生成物を得た（３２ｍｇ）。

α−メチル−β−［１−（２，４−ジニトロフェニル）−イミダゾール−４−イル］プロピオン酸
α−メチル−β−４−イミダゾールプロピオン酸（０.０３０５ｇ、０.１１４ｍｍｏｌ）および炭酸水素ナトリウム（０.０６１７ｇ、０.７３４ｍｍｏｌ）の水溶液（１ｍＬ）（ｐＨ８.０４）に、２，４−ジニトロフルオロベンゼン（０.０３２３ｇ、０.１７４ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ（１.０ｍＬ）溶液を加えた。反応混合物を終夜ボルテックスした。ＭｅＣＮを減圧留去し、残渣を水（２ｍＬ）に再溶解し、濾過し、１.５および０.５ｍＬの２つの各分画でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＣ１８（２）５μｍ１００×２１.２ｍｍプレパラティブＨＰＬＣカラムにのせた。生成物を、４０分かけての０％から８０％の［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］のグラジエントで溶離した。グラジエントの１２.５〜１４.５分に相当するフラクションをプールし、サバントスピードバック(登録商標)で終夜乾燥した。更に生成物を、水不溶性の粗生成物をＤＭＳＯに溶かし、続いて上記のようなプレパラティブＨＰＬＣで精製して回収した。フラクションを合わせて、凍結乾燥後精生成物を得た（３１ｍｇ）。

実施例１９
化合物１３７および１３８の合成
（Ｒ，Ｓ）−３−（１−（２，４−ジニトロフェニル）−イミダゾール−４−イル）−２−メチルプロピオン酸を、以下のように関連のＸ_aa2−Ｘ_aa11−ペプチジル−シーバーレジンにカップリングさせた。
（Ｒ，Ｓ）−３−（１−（２，４−ジニトロフェニル）−イミダゾール−４−イル）−２−メチルプロピオン酸（０.０２６７ｇ、０.０８３ｍｍｏｌ）、６−Ｃｌ−ＨＯＢｔ（０.０１５１ｇ、０.０８９ｍｍｏｌ）およびＨＣＴＵ（０.０３６０ｇ、０.０８７ｍｍｏｌ）のＮＭＰ／ＤＣＭ（１ｍＬ、３：１）溶液に、ＤＩＥＡ（０.０３１５ｇ、０.２４４ｍｍｏｌ）を加えた；該溶液を短時間ボルテックスし、次いで実施例１９に記載のように製造した関連のＦｍｏｃ保護されたＸ_aa2−Ｘ_aa11−ペプチジル−シーバーレジンに加えた。カップリングを１６時間続けさせた。ペプチジルレジンをＮＭＰ、次いでＤＣＭ（３×１.５ｍＬ×１分）で洗浄し、次いで１０％無水酢酸／ＤＣＭ（１×２ｍＬ×９０分）で処理し、続いてＤＣＭ、次いでＤＭＦで洗浄（３×１.５ｍＬ×１分）した。該ペプチジルレジンを１０％チオフェノール／ＤＭＦ（１.５ｍＬ）で１時間処理し、ＤＭＦおよびＤＣＭ（４×１.５ｍＬ×１分）で洗浄した。ペプチジルレジンを次いで、ＴＦＡ／ＤＣＭ／ＴＩＳ（３：１.９：０.１）（１ｍＬ）で１０分間処理し、濾過した。濾液を集めて、もう１時間弱くボルテックスした。ＴＦＡ混合物をスピードバック中約０.５ｍＬに濃縮し、ＭＴＢＥ（４ｍＬ）に加えた。１時間後、沈澱した生成物を遠心分離によって集め、洗浄し、次いで乾燥し、粗生成物を得た（０.０８４１ｇ）。これをプレパラティブＨＰＬＣで以下のように精製した。クルードなペプチドを溶かして、ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＣ１８（２）（５μｍ、２５０×３０ｍｍ）カラムに注入し、４０分かけて２０％から５０％［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］の直線的なグラジエント（１５ｍＬ／分の流速、２１７ｎｍの流出液ＵＶ検出）を用いて溶離した。目的の生成物を含むフラクションをプールし、凍結乾燥し、純度９７.５％のペプチドを得た（２６.７ｍｇ）：以下の条件下でＨＰＬＣ保持時間２１.２分：１ｍＬ／分で２５分かけて１０％から６０％の溶媒Ｂ／Ａのグラジエント、溶媒Ａ：０.１％ＴＦＡ／水、溶媒Ｂ：０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ、カラム：ＹＭＣＯＤＳ−Ａ１５０×４.６ｍｍ、粒子径３μｍ、１２ｎｍ孔径。
マススペクトル分析：ESI (M+H)⁺ = 1527.9および(M+2H)/2 = 764.9.

ペプチドのプレパラティブキラルＨＰＬＣ精製：
ジアステレオマー性ペプチド混合物（１０ｍｇ）をＭｅＣＮ／ＭｅＯＨに溶かした。該溶液をＣｈｉｒｏｂｉｏｔｉｃＶ２.２×５０ｃｍ、５μｍカラムにのせて、２０ｍＬ／分にてＭｅＣＮ／ＭｅＯＨ／Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₃）₃／ＣＨ₃ＣＯＯＨ：６５／３５／０.５／０.５で溶離した。異性体Ａを２９および３５分の間で集めた。異性体Ｂを３６および４４分の間で集めた。第２の行使（ラン）は上記のようになされた。異性体Ａを含むフラクションを合わせて、約５ｍＬに濃縮し、水／ＭｅＣＮ（４：１）で希釈し、該溶液を凍結乾燥した。異性体Ｂを同様の方法で行った。生じた残差をプレパラティブＨＰＬＣでＴＦＡ塩に変換した。各ペプチドをＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＣ１８（２）５ μｍ１００×２１.２ｍｍカラムに注入し、４０分かけて２０％から５０％の［０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ］／［０.１％ＴＦＡ／水］］の直線的なグラジエント（１０ｍＬ／分の流速、２１７ｎｍの流出液ＵＶ検出）を用いて溶離した。目的の生成物を含むフラクションをプールし、凍結し、凍結乾燥して、純度１００％の異性体Ａを得た（６.０ｍｇ）：以下の条件下でＨＰＬＣ保持時間２１.２８分：１ｍＬ／分で２５分かけて１０％から６０％の溶媒Ｂ／Ａのグラジエント、溶媒Ａ：０.１％ＴＦＡ／水、溶媒Ｂ：０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ、カラム：ＹＭＣＯＤＳ−Ａ１５０×４.６ｍｍ、３μｍ粒子径、１２ｎｍ孔径。
マススペクトル分析：ESI (M+H)⁺ = 1527.6および(M+2H)/2 = 764.7
類似の方法で、純度１００％のペプチド異性体Ｂを得た（４.９ｍｇ）：以下の条件下でＨＰＬＣ保持時間２１.３分：１ｍＬ／分で２５分かけて１０％から６０％の溶媒Ｂ／Ａのグラジエント、溶媒Ａ：０.１％ＴＦＡ／水、溶媒Ｂ：０.１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ、カラム：ＹＭＣＯＤＳ−Ａ１５０×４.６ｍｍ、粒子径３μｍ、１２ｎｍ孔径。
ESI (M+H)⁺ = 1527.5および(M+2H)/2 = 764.6

実施例２０
本明細書に記載の合成方法を用いて、表Ｉに示される１１量体ペプチドを製造した。各化合物について表Ｉに示されるＸ_aa1−Ｘ_aa11は、以下の式Ｉをいう。
Ｘ_aa1−Ｘ_aa2−Ｘ_aa3−Ｘ_aa4−Ｘ_aa5−Ｘ_aa6−Ｘ_aa7−Ｘ_aa8−Ｘ_aa9−Ｘ_aa10−Ｘ_aa11 （Ｉ）

表Ｉ

アミノ酸およびペプチド化学の技術分野の当業者は、４位またはパラ位にフェニル置換基を有するフェニルアラニンアミノ酸が４−（フェニル）フェニルアラニンまたは４，４'−ビフェニルアラニンとして別に定義され得、したがって「Ｂｉｐ」として略されてもよいことを知りうる。「アミノ酸の略号および構造」のセクションおよび本明細書の表に示されている略号のために、ビフェニルアラニンアミノ酸は、例えば「Ｂｉｐ（２'−Ｍｅ）」として略してもよく、それはその４位に２'−メチルフェニル基で置換されたフェニルアラニンが存在することを示しており、その中で２'−メチル基がフェニル環の結合している点との関係でオルト位であることを意図する。

実施例２１
（２（ＲおよびＳ）−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−３−（２−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）プロパン酸］の合成
以下の反応式２１は、（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）プロパン酸塩酸塩の合成を記載する。

１．Ｎ’−ヒドロキシ−２−メチルベンゾアミジン
攪拌したｏ−トルニトリル（９.９２ｇ、８４.７ｍｍｏｌ）および炭酸水素ナトリウム（７.８２ｇ、９３.２ｍｍｏｌ）の水（２０ｍＬ）溶液に、イソプロパノール（１００ｍＬ）を加える。反応混合物をアルゴン下加熱還流する。２０時間後、反応混合物を冷却し、蒸発させ、イソプロパノールの大部分を除いた。半固形の残渣を水およびヘキサンの間で分液処理し、生じた固形物を集めて、乾燥し、白色の固形物を得た（８.０３ｇ、収率８３％）。

２．２−メチルベンゾアミジニウムアセテート
攪拌した上記化合物（７.８２ｇ、５２.１ｍｍｏｌ）の酢酸（１００ｍＬ）溶液に室温でアルゴン下、無水酢酸（５.６５ｍＬ、５.６５ｍｍｏｌ、１.１５当量）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１.０ｇ）を加えた。該混合物を攪拌し、アルゴンで２回パージした。該混合物を次いで水素雰囲気下（〜１ａｔｍ）３時間攪拌した。反応混合物をパージし、セライトで濾過した。濾液を蒸発して、黄褐色の固形物として生成物を得た（１０.３２ｇ、収率９９％）。

３．エチル４−ヒドロキシ−２−ｏ−トリルピリミジン−５−カルボキシレート
攪拌したエタノール（５７ｍＬ）にアルゴン下０−５℃で、油状物に分散した水素化ナトリウム（６０％、２.３５ｇ、５８.７ｍｍｏｌ）を、１０分かけて何回かに分けて加えた。さらに１０分後、２−メチルベンゾアミジニウムアセテート（５.７０ｇ、２９.３ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。生じた橙色のスラリーを攪拌し、（２−エトキシ−メチレン）マロン酸ジエチル（５.９３ｍＬ、２９.３ｍｍｏｌ）のエタノール（１４ｍＬ）溶液を５分かけて加えた。該混合物を加熱還流し、溶液を泡立てた。１５時間後、該溶液を冷却し、氷水（３００ｍＬ）に注いだ。生じた溶液を攪拌し、濃塩酸（２.３ｍＬ、２７.６ｍｍｏｌ）を加えて、該溶液をｐＨ７にした。生じた灰白色の凝集スラリーを濾過し、Ｎ₂気流下乾燥し、白色の固形物として標題化合物を得た（６.８７ｇ、収率９１％）。

４．エチル４−クロロ−２−ｏ−トリルピリミジン−５−カルボキシレート
エチル４−ヒドロキシ−２−ｏ−トリルピリミジン−５−カルボキシレート（４.００ｇ、１５.５ｍｍｏｌ）のオキシ塩化リン（１１.６ｍＬ、１２４ｍｍｏｌ）溶液を、加熱還流した（塩化カルシウムで満たした乾燥管で大気から保護して）。３時間後、過剰のＰＯＣｌ₃を蒸留して除いた（〜２０Ｔｏｒｒ、９０〜１００℃の油浴）。残留する赤色の油状物を冷やして固形化した。該固形物を粉砕し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で覆った。該スラリーを−５℃に冷却し、炭酸カリウム溶液（２Ｍ、２５ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）と共に１０分間激しく振とうした。生じた橙色の相を分けて、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、蒸発させて、ヘキサンでトリチュレート後、淡橙色の固形物として標題化合物を得た（３.５８ｇ、収率８４％）。

５．エチル２−ｏ−トリルピリミジン−５−カルボキシレート
室温で上記化合物（２.３３ｇ、８.４２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１.１７ｍＬ、８.４２ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（３５ｍＬ）溶液を、１０％Ｐｄ／Ｃ（２１０ｍｇ）で処理した。素早く攪拌した混合物をアルゴンで２回パージし、次いで水素雰囲気下（〜３ａｔｍ）３時間付した。反応混合物をパージし、セライトで濾過し、蒸発させた。ヘキサンから再蒸発して、黄色の固形物として標題化合物を得た（１.８８ｇ、収率９２％）。

６．（２−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）メタノール
攪拌した上記化合物（２.１０ｇ、８.６７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４５ｍＬ）溶液にアルゴン下−７８℃で、ジイソブチルアルミニウムのトルエン溶液（１.５Ｍ、１２.７ｍＬ、１９.１ｍｍｏｌ）を加えた。９０分後、酒石酸カリウムナトリウム溶液（１Ｍ、１９.１ｍＬ、１９.１ｍｍｏｌ）を滴下して加え、細かく凍結した分散物を攪拌し、室温まで加温させた。該混合物を水およびジクロロメタン環で分液処理した。有機相を分けて、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、蒸発させて、黄色の油状物を得た。シリカゲルクロマトグラフィ（５×１５ｃｍカラム、１：１ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、白色の固形物として標題化合物を得た（９７５ｍｇ、収率５６％）。

７．（２−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）メチルブロミドおよび（Ｒ，Ｓ）ｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−３−（２−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）プロパノエート
上記化合物（９１８ｍｇ、４.５８ｍｍｏｌ）およびオキシ臭化リン（２.２０ｇ、７.６７ｍｍｏｌ）の混合物を、（塩化カルシウムで満たした乾燥管で大気から保護して）１２０℃に加熱した。１時間後、反応混合物を蒸留した（〜２０Ｔｏｒｒ、９０〜１００℃の油浴）。生じた黒色の樹脂製の残分を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃで覆い、０℃に再度冷却し、注意深く２Ｎ炭酸ナトリウム溶液（１０ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）で処理した。有機抽出物である不安定な２−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）メチルブロミドを乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、＜３０℃で蒸発させて、黄色のガラス状物を得て（１.３５ｇ）、すぐに次反応に用いた。

攪拌した上記化合物（１.３１ｇ、３.６４ｍｍｏｌ）、２−（ジフェニルメチレンアミノ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（１.０７５ｇ、３.６４ｍｍｏｌ、１.０当量）およびテトラブチルアンモニウムブロミド（１１７ｍｇ、０.３６ｍｍｏｌ、０.１当量）のジクロロメタン（１６ｍＬ）混合液に−７８℃でアルゴン下、２−ｔ−ブチルイミノ−２−ジエチルアミノ−１，３−ジメチル−ペルヒドロ−１，３，２−ジアザホスホリン（１.５８ｍＬ、５.４６ｍｍｏｌ、１.５当量を５分かけて加えた。反応混合物を−７８℃で１時間攪拌し、次いでインシトゥーで室温まで加温させた。１７時間後、該混合物を溶離液としてエチルエーテル／ジクロロメタン（３：４７）を用いてシリカゲルクロマトグラフィ（５×２０ｃｍカラム）で直接精製し、黄色の油状物としてｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−３−（６−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）プロパノエートを得た（１.４５ｇ、収率７８％）。

攪拌したｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−３−（６−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）プロパノエート（１.４５ｇ、２.３３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１２ｍＬ）溶液に室温でアルゴン下、クエン酸の（３.４０ｇ、１７.７ｍｍｏｌ、５.８当量）水（１２ｍＬ）溶液を加えた。３時間後、反応混合物を水で希釈し、エーテルで２回洗浄した。水相を次いで固形の炭酸ナトリウムでｐＨ９にして、ジクロロメタンで２回抽出した。

ジクロロメタン抽出物を合わせて、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。生じた油状物をＴＨＦ（６ｍＬ）に溶かし、室温で１０％炭酸ナトリウム溶液（４.２ｍＬ）、次いで９−フルオレニルメチルオキシカルボニルクロリド（８６４ｍｇ、３.３４ｍｍｏｌ、１.１当量）で処理した。２時間後、反応混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、溶離液として酢酸エチル／ジクロロメタン（１：１９）を用いたシリカゲルクロマトグラフィ（５×１５ｃｍカラム）で精製し、無色の油状物を得た（１.６１ｇ、収率９９％）。

生成物をＥｔＯＨ／ＭｅＯＨ（１：１、１３０ｍＬ）に溶かした。１０分後、沈澱が生じた。濾過後、濾液をキラルクロマトグラフィ（ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤカラム、５×５０ｃｍ、２０μをパッキング；溶離液として２：２：９６ＭｅＯＨ／ＥｔＯＨ／ヘキサン、流速５０ｍＬ／分）に付して、収集し、プールし、蒸発した後、２つのフラクションを得た。
（Ｓ）ｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−３−（２−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）プロパノエート（ピリジンアナログと比較して同定）、２２１ｍｇ、＞９８％ｅｅ；および
（Ｒ）ｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−３−（２−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）プロパノエート、２９５ｍｇ、９６％ｅｅ、
いずれもキラルＨＰＬＣ分析（４.６×２５０ｍｍＡＤカラム、溶離液として２：２：９６ヘプタン：メタノール：エタノール、流速１ｍＬ／分）による。

８ａ．（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）プロパン酸塩酸塩
（２Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−o−トリルピリミジン−５−イル）プロパノエート（２２０ｍｇ、０.４１ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（２.１ｍＬ）溶液を、塩化カルシウムで満たした乾燥管で大気から保護して、室温で４時間攪拌した。反応混合物を４０℃以下で減圧濃縮し、生じた橙色の油状物をトルエンで２回再溶解し、蒸発させて、白色の粉末として標題化合物を得た（１９５ｍｇ、収率９９％）。

８ｂ．（２Ｒ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）プロパン酸塩酸塩
（２Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（６−ｏ−トリルピリミジン−５−イル）プロパノエート（２９０ｍｇ、０.５４ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（２.７ｍＬ）溶液を、塩化カルシウムで満たした乾燥管で大気から保護して、室温で４時間攪拌した。反応混合物を４０℃以下で減圧濃縮し、生じた橙色の油状物をトルエンで２回再溶解し、蒸発させて、白色の粉末として標題化合物を得た（２５５ｍｇ、収率９８％）。

実施例２２
（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−２−メチル−３−（６−ｏ−トリルピリジン−３−イル）プロパン酸の合成
以下の反応式２２は、（（２Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−２−メチル−３−（６−ｏ−トリルピリジン−３−イル）プロパン酸の合成を記載する。

１．（２Ｒ，４Ｓ）−ベンジル４−メチル−５−オキソ−２−フェニル−４−（（６−ｏ−トリルピリジン−３−イル）メチル）オキサゾリジン−３−カルボキシレート
攪拌した実施例１１．４の化合物（５１５ｍｇ、１.５０ｍｍｏｌ）のスラリーに−７８℃でアルゴン下、カリウムヘキサメチルジシラジドのトルエン溶液（０.５Ｍ、３.０８ｍＬ、１.５４ｍｍｏｌ）を加えた。２０分後、同量のカリウムヘキサメチルジシラジドおよび（２Ｒ，４Ｒ）−ベンジル４−メチル−５−オキソ−２−フェニルオキサゾリジン−３−カルボキシレート（４６７ｍｇ、１.５０ｍｍｏｌ）（S. R. Kapadia、J. Org. Chem. 66 1903 (2001)）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を、別のシリンジで３０分かけて別途滴下して加えた。反応混合物を室温まで加温した。１４時間後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液に注ぎ、エーテルで２回抽出した。有機抽出物を合わせて、乾燥し（Ｎａ₂ＳＯ₄）、濾過し、蒸発させた。シリカゲルクロマトグラフィ（５×１５ｃｍカラム、溶離液として１：３ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、白色の泡状物として標題化合物を得た（２４０ｍｇ、収率３３％）。

２．（２Ｒ，４Ｓ）−ベンジル４−メチル−５−オキソ−２−フェニル−４−（（６−ｏ−トリルピリジン−３−イル）メチル）オキサゾリジン−３−カルボキシレート
攪拌した上記化合物（２４０ｍｇ、０.４９ｍｍｏｌ）および３０％ＨＢｒの酢酸（４ｍＬ）溶液を、２４時間加熱還流した。生じた溶液を蒸発乾固させ、次いで水（９ｍＬ）に再溶解した。該溶液をエーテルで１回抽出した。水相を固形の炭酸水素ナトリウム（７５０ｍｇ）でｐＨ８に調整し、次いでＦｍｏｃＯＳｕ（２１６ｍｇ、０.８４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を加えたとき、室温で攪拌した。６０時間後、反応混合物を５％クエン酸溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機抽出物を合わせて、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、蒸発させた。アセトニトリル／水（９：１）から結晶化し、白色の固形物として標題化合物を得た（５２ｍｇ、２２％）。

実施例２３
サイクリックＡＭＰ測定
ＧＬＰ−１受容体はＧタンパク質共役受容体である。生物活性体であるＧＬＰ−１（７−３６）−アミドは、ＧＬＰ−１受容体に結合し、シグナル伝達と通じてアデニルシクラーゼの活性化を引き起こし、細胞内ｃＡＭＰ濃度を増加させる。ＧＬＰ−１受容体を刺激する際のペプチド化合物のアゴニズムをモニターするために、アデニルシクラーゼ活性は細胞内ｃＡＭＰ含有量をアッセイしてモニターした。全長のヒトグルカゴン様ペプチド１受容体は、ＣＨＯ−Ｋ１細胞において安定に発現され、クローンの細胞系(clonal lines)は、確立された。クローンはＧＬＰ−１の飽和用量に応じて、ｃＡＭＰ含有量における最大の増加でスクリーンし、クローンＣＨＯ−ＧＬＰ１Ｒ−１９を選択した。

細胞は、ハムＦ１２栄養培地（ギブコ＃１１７６５−０５４）、１０％ＦＢＳ、１×Ｌ−グルタミン、１×Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ、および０.４ｍｇ／ｍｌＧ４１８中培養した。ＣＨＯ−ＧＬＰ−１Ｒ−１９細胞（培地１００μｌ中２０，０００）を、９６ウェル組織培養マイクロタイタープレートの各ウェル中にプレートし、３７℃で５％ＣＯ₂雰囲気下終夜インキュベートした。アッセイの日に、細胞を１００μｌのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で１回洗浄した。バイオメック(Biomek)２０００を、アッセイを開始する前に、すべてのペプチドを連続して希釈するのに用いた。一連の希釈は１００％ＤＭＳＯで行った。ペプチドプレートを、プレートメイトプラス(Platemate Plus)を用いて、アッセイの開始前に作り；１.５μＬの化合物をＶボトムプレートに移し、１００μＭ３−イソブチル−１−メチルキサンチン（非選択性ホスホジエステラーゼ阻害剤）で増補した１５０μＬのアッセイバッファーをプレートに加え、１：１００の希釈およびＤＭＳＯの１％の最終濃度を得た。

ｃＡＭＰ標準曲線を作成するために、０.２−２５.６ｐｍｏｌ／ウェルの範囲でｃＡＭＰの連続する希釈を、溶解試薬１（ＡｍｅｒｓｈａｍｃＡＭＰＳＰＡキット）中に組成した。各５０μｌのｃＡＭＰ標準液を手で加え、７０μｌのミックス試薬（ＡｍｅｒｓｈａｍｃＡＭＰＳＰＡキット）を、マルチドロップを用いて加えた。プレートを次いでシールし、１５時間Ｔｒｉｌｕｘカウンターでカウントした。この標準曲線を用いて、ＣＰＭをｃＡＭＰのｐｍｏｌに転換した。

１．プレートメイトプラスにおけるｃＡＭＰアッセイプロトコール
細胞プレートおよびペプチドプレートを、プレートメイト上に負荷した。該培地をウェルからアスピレートし、捨てた。ウェルあたり１００μＬのペプチド／バッファー混合物を次いで、ペプチドプレートから加え、アッセイを開始した。インキュベート３０分後、ペプチド／バッファーを除き、５０μＬの溶解試薬１溶液をウェルごとに加えた。プレートを室温で１時間、または冷蔵してシールするなら終夜置いておいた。７０μＬのｃＡＭＰ検出試薬（あらかじめ混合した¹²⁵Ｉ−ｃＡＭＰアナログ、ＳＰＡビーズに共役した抗ｃＡＭＰ抗体および抗ウサギ抗体−すべてＡｍｅｒｓｈａｍｃＡＭＰＳＰＡキットから得られる）を、マルチドロップを用いて加え、プレートをシールした。１５時間後、該プレートを、Ｔｒｉｌｕｘシンチレーションカウンターでカウントした。

化合物の用量依存は、同一の２つの片対数濃度で決定した。１０ｎＭのＧＬＰ−１を、最大活性を決定するためのリファレンス標準として用いた。標準曲線は、サイクリックＡＭＰの公知の量を用いて決定した。処理された細胞で合成されたｃＡＭＰの量をサイクリックＡＭＰ標準曲線から決定し、最大のＧＬＰ−１で刺激された活性のパーセンテージを計算し、対数化合物濃度に対してプロットした。データを非線形回帰曲線の当てはめ（４つのパラメーターＳ状用量応答曲線）で解析し、化合物のＥＣ₅₀を決定した。実施例によって、本発明のペプチドは、０.０００５ｎＭ〜１０ｎＭの範囲、より好ましくは０.０００５ｎＭ〜０.２００ｎＭの範囲でのＥＣ₅₀値を有する。

実施例２４
インビボ実験
ペプチドは、各マウスが投与される溶液の同容量／同重量を受けるように、ｎｍｏｌ／ｋｇで投与される用量に相当するｎｍｏｌ／ｍｌの濃度で、適当なベヒクル中溶解した。雄のＣ５７ＢＬ／６Ｊ−ｏｂ／ｏｂマウス（１０週齢）を、フィードされた血漿グルコースおよび体重に基づいて、群あたり６匹のマウスの群にランダム化した。終夜絶食後、マウスの体重を量り、実験室に置いた。その環境で３０分後、マウスは−３０分でしっぽの先から採血し、すぐにベヒクルまたはベヒクルに溶かしたペプチド（０.１ｍＬ溶液／体重１００ｇ）を皮下（ｓｃ）注射した。０時間で、マウスを採血し、次いで５０％グルコース（２ｇ／ｋｇ）を腹腔内に注入し、腹腔内ブドウ糖耐性テスト（ｉｐＧＴＴ）を開始した。マウスはグルコース注入後、３０、６０、１２０および１８０分に採血した。血液サンプルはカリウムＥＤＴＡに引き込み、実験の間氷上に置き、その後４℃、３０００ｒｐｍで１０分間遠心沈降した。血漿サンプルをコバスシステム(Cobas System)中のグルコース分析で１１倍に希釈した。別の５μｌの血漿サンプルを、２０μｌのサンプル希釈剤（インスリンＥＬＩＳＡアッセイキット、Crystal Chem Inc.）で５倍に希釈し、ウルトラセンシティブマウスインスリンＥＬＩＳＡキット（Crystal Chem Inc.）を用いて、続く分析のために−２０℃で保存した。

ｏｂ／ｏｂマウス（インスリン抵抗性のマウスのモデル）における化合物Ｉ、化合物ＩＩおよび化合物ＩＩＩに対するインビボグルコース低下特性は、上記に記載している。ペプチドＩの皮下投与は、腹腔内ブドウ糖耐性テスト（ｉｐＧＴＴ）において、曲線の下の血漿グルコース領域（ＡＵＣ）が０と１８０分の間の用量依存の方法で減少することを伴って、食後のグルコース可動域曲線を減少させた（図１）。化合物ＩのＥＤ₅₀は、５０ｎｍｏｌ／ｋｇであると決定された。これらの動物における食後の血漿インスリンレベルでは、付随的で統計的に有意な用量依存性の増加があった（図２）。化合物Ｉで処置された動物における血漿グルコースおよびインスリンの変化の間の相互関係は（図１および図２）、グルコースの低下効果が化合物Ｉによるインスリン放出の刺激によって媒介されることを示唆している。

より重大で、予期できないこととして、化合物ＩＩおよび化合物ＩＩＩは、時間依存性（０と１８０分の間）で、ｏｂ／ｏｂマウスにおける皮下投与に続く食後の血漿グルコースにおける統計的に有意な減少を生ずる（図３および４）。食後のグルコースにおける化合物ＩＩの効果は、１−１００ｎｍｏｌ／ｋｇの間の用量依存性であり、血漿グルコースＡＵＣは１００ｎｍｏｌ／ｋｇの用量で８５.８％減少した（図３）。より重大で、予期できないこととして、化合物ＩＩでのＥＤ₅₀は、５ｎｍｏｌ／ｋｇであると決定され、化合物ＩＩは、用量基準において化合物Ｉよりも約１０倍以上の高活性であることが示唆された。化合物ＩＩＩのグルコース低下活性でのＥＤ₅₀は、２.５ｎｍｏｌ／ｋｇであると決定された（図４）。

実施例２５
イヌの薬物動態実験
化合物ＩＩの薬物動態的パラメーターは、雄のビーグル犬（ｎ＝４、１４±１ｋｇ）で決定した。終夜絶食に続いて、各動物は大腿静脈を経由した静脈内ボーラス（６７μｇ／ｋｇ）として、または肩甲骨付近での皮下注射（６７μｇ／ｋｇ）で、化合物ＩＩを投与された。各動物は静脈内および皮下投与の両方を、クロスオーバーデザインに従った投与の間で１週間休薬して受けた。両投与経路のための投与ベヒクルは、プロピレングリコール：リン酸緩衝液（５０：５０）であった。連続の血液サンプルは、投与前と、静脈内投与後０.０８３、０.２５、０.５、０.７５、１、２、４、６、８、２４、および３０時間後に、ＥＤＴＡを含む微量遠心管に集め；皮下投与後では、０.２５、０.５、０.７５、１、２、４、６、８、２４、および３０時間後に、ＥＤＴＡを含む微量遠心管に集めた。約０.３ｍＬの血液を各時間ポイントで集めた。血液サンプルをすぐに４℃で遠心分離した。得られた血漿をドライアイスで凍結させ、−２０℃で保存した。血漿薬物レベルは、上記のＬＣ−ＭＳ／ＭＳアッセイを用いて決定した。

ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによる化合物ＩＩの定量
インビボのイヌの実験からの血漿サンプルは、内部標準を含んだアセトニトリルの２つの容量で、血漿タンパク質を沈澱させて、分析の準備をした。サンプルをボルテックス混合し、遠心分離で沈澱したタンパク質を除いた。生じた上清を９６ウェルプレートに移し、１０μＬを分析用に注入した。サンプルをパッカードマルチプローブＩＩ(Packard Multiprobe II)およびクアドラ９６リキッドハンドリングシステム(Quadra 96 Liquid Handling System)で調製した。

ＨＰＬＣシステムは、２つの島津製作所ＬＣ１０ＡＤポンプ（Columbia、MD）、ＣＴＣＰＡＬオートサンプラー（Leap Technologies、Switzerland）からなった。用いたカラムは、ＹＭＣＨｙｄｒｏｓｐｈｅｒｅＣ１８（２.０×５０ｍｍ、３μｍ）（YMC、Inc.、Milford、MA）であった。カラム温度は５０℃を維持し、流速は０.３ｍＬ／分であった。移動相Ａは１０ｍＭギ酸アンモニウムおよび０.１％ギ酸水からなり、移動相Ｂは０.１％ギ酸／アセトニトリルからなった。初期の移動相組成は５％Ｂであり、カラムを平衡化するために１分間５％Ｂを維持した。該組成を２分かけて９５％Ｂに傾斜を付け、もう１分それを維持した。移動相を次いで１分で初期の状態に戻した。全分析時間は５分であった。スウィッチングバルブを用いた。０−１分の間の溶離液を廃液に流した。

ＨＰＬＣを、ＳｃｉｅｘＡＰＩ４０００マススペクトル計（Applied Biosystems、Foster City、CA）にインターフェイスで連結させ、ターボイオンスプレーイオン化源を備えさせた。超高純度窒素を噴霧およびターボガスとして用いた。ターボガスの温度は３００℃にセットし、インターフェイスヒーターは６０℃にセットした。データ取得は、選択された反応モニタリング（ＳＲＭ）を利用した。化合物ＩＩにおいて（Ｍ＋２Ｈ）²⁺種、およびＢＭＳ−５０１１４３（ＩＳ）において（Ｍ＋２Ｈ）²⁺を表すイオンは、Ｑ１において選択され、３.５×１０^-3ｔｏｒｒの圧力の高純度窒素で衝突的に解離し、Ｑ３で後にモニタリングされる特定の生成物イオンを形成した。トラジションおよびボルト数は表１にまとめてある。

標準曲線濃度は、１から１０００ｎＭの範囲で、および４から５０００ｎＭのの範囲で、それぞれ低用量および高用量から得られたインビボサンプルのために用いた。該曲線を相反する濃度で重みを付けた二次回帰（１／ｘ²）で適合させた。標準液を２つ同時に分析した。品質管理（ＱＣ）サンプルは標準液として同濃度でブランクマトリックス中調製され、各分析セットでも分析した。化合物ＩＩでは、ＱＣの８０％以上の計算された濃度は、見かけ濃度が２０％以内であり、受け入れられるアッセイ行為を示していた。

データ解析
時間データに対する化合物ＩＩの血漿濃度は、ＫＩＮＥＴＩＣＡ(登録商標)ソフトウェアプログラムを用いて非分画的な方法で分析した。Ｃ_maxおよびＴ_max値は実験的な観察から直接記録した。ＡＵＣ_0-nおよびＡＵＣ_tot値を直線および対数台形加重(trapezoidal summations)の組み合わせを用いて計算した。全身血漿クリアランス（ＣＬ_P）、終末半減期（t_1/2）、平均滞留時間（ＭＲＴ）、および定常状態の分布容積（Ｖｓｓ）を、動脈内または静脈内投与後、計算した。全身血液クリアランス（ＣＬ_B）は、全身血漿クリアランスおよび血漿への血液濃度比を用いて計算した。ＣＬ_BおよびＶｓｓ値は、文献に報告されている標準肝臓血流および全体内水値とそれぞれ比較された。絶対皮下バイオアベイラビリティ（％として表す）は、化合物ＩＩの皮下投与後の用量標準化したＡＵＣ値の比を、静脈内投与後のそれに見なして、見積もられた。

イヌの薬物動態の結果
静脈内（ＩＶ）および皮下（ＳＣ）投与に続く雄のビーグル犬における化合物ＩＩの薬物動態的パラメーターを表２にまとめている。
化合物ＩＩは、低い全身クリアランス（０.９±０.２ｍＬ／分／ｋｇ；３.２％の肝臓血流、３１ｍＬ／分／ｋｇ）を示した。定常状態の分布容積（Ｖｓｓ）は、０.１０±０.０３Ｌ／ｋｇ（２度の血管性体液、０.０５Ｌ／ｋｇ；７１％の細胞外体液、０.１４Ｌ／ｋｇ）であり、制限された血管外分配を示した。見積もられた開裂半減期は５.１±０.５時間であり、平均滞留時間は３.０ ± １.０時間であった。６７μｇ／ｋｇの皮下投与後のピーク濃度に達する時間（Ｔ_max）は、５.０±１.０時間に生じた。皮下投与後の最大血漿濃度（Ｃ_max）は９０±２９ｎＭであった。イヌにおける化合物ＩＩの皮下バイオアベイラビリティは９３±２２％であった。

実施例２６
非経口投与経路
Ａ．以下の組成を有する肺／吸入または経鼻送達用の液体製剤を、以下に記載のように製造する。

量り取られた量の１１量体ペプチドを、最適なｐＨの少量の水に溶かした。カプティソル(Captisol)を薬物溶液に加え、約５分攪拌する。ＮａＯＨおよびＨＣｌを加え、ｐＨを目的の値（５〜８の間）に調整する。精製水を加えて、最終量を１ｍｌにする。保存剤、抗酸化剤、緩衝塩、および共溶媒のような他の不活性成分を、ｐＨ調整前に必要に合わせて加える。水を加え、目的の量にする。

上記溶液製剤は、シリンジミクロスプレーを用いた細かいスプレー、またはエアジェットもしくは超音波ネブライザーとして、肺に投与できる。上記溶液を計測された経鼻スプレーまたはシリンジミクロスプレーで、鼻腔に送達させることができる。

Ｂ．以下の組成を有する肺／吸入または経鼻送達用のドライ粉末製剤を、以下に記載のように製造する。

量り取られた量の１１量体ペプチド、好ましくは５ミクロン未満の空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）であるペプチドを、吸入グレード乳糖３０−１００μｍ（Ｒｅｓｐｉｔｏｓｅ、DMV International）と、チューブラ(Turbula、登録商標)ミキサー中５分間ブレンドする。上記のドライ粉末ブレンドを、粉末吸入器またはドライ粉末吸入器で肺まで送達することができる。

Ｃ．以下の組成を有する肺／吸入または経鼻送達用の懸濁液製剤を、以下に記載のように製造する。

微粉末１１量体ペプチドは、レシチンと高圧ガス（例えば、ヒドロフルオロ炭素（ＨＦＡ’ｓ）の混合物中均一に懸濁させる。該懸濁液は、加圧され、量り取られた用量吸入器に移す。

Ｄ．ラットにおける溶液製剤からの１１量体ペプチド吸収

１１量体ペプチドは、ペントバルビタールの腹腔内注入で麻酔された雄のスプラーグドーリーラットに（上記の）溶液として投与された。薬物を、肺送達を得るためにシリンジミクロスプレーで気管に導入、または鼻腔内送達用の各鼻孔へのピペッタで点滴した。血液サンプルを、４時間かけてカニューレ処置した頸動脈からヘパリン処理したバキュテーナーへ集めた。血液サンプルを遠心分離し、単離された血漿をＬＣ／ＭＳによる分析まで−８０℃で保存した。血漿−時間濃度曲線から、薬物動態的パラメーターを計算し、表に報告した。３匹のラットを各投与経路に用いた。データは平均±標準偏差として得られる。Ｔ_maxは中間値として報告される。

有用性および組み合わせ
Ａ．有用性
本発明は、新規な１１量体ペプチドを提供し、該ペプチドは優れた特性を有し、例えば、該１１量体ペプチドがＧＬＰ−１受容体に対するアゴニスト活性を有するような、ＧＬＰ−１受容体修飾因子として作用する。更に、本発明の１１量体ペプチドは、ＧＬＰ−１未変性配列と比較して、タンパク分解開裂に対する安定性の上昇を示す。

従って、本発明の化合物は、様々な症状および障害の治療のために、哺乳動物（ヒトが好ましい）に投与することができる。該症状および障害の治療としては、これらに限らないが、例えば、糖尿病（好ましくは、ＩＩ型糖尿病、耐糖障害、インスリン抵抗性および糖尿病合併症、例えば、腎障害、網膜症、神経障害および白内障）、高血糖症、高インスリン血症、高コレステロール血症、血中脂肪酸またはグリセロールのレベルの上昇、高脂血症、高グリセリド血症、肥満症、創傷治癒、組織虚血、アテローム性動脈硬化症、高血圧症、ＡＩＤＳ、腸疾患（例えば、壊死性腸炎、微絨毛封入体疾患(microvillus inclusion disease)または腹腔疾患）、炎症性腸症候群、化学療法誘発性腸粘膜萎縮症もしくは障害、拒食症、骨粗鬆症、代謝異常症侯群、並びに炎症性腸疾患（例えば、クローン病および潰瘍性大腸炎）の進行または発症を治療または遅延することを含む。本発明の化合物はまた、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）の血中レベルを上昇するのに使用することができる。

また、JohannssonによるJ. Clin. Endocrinol. Metab., 82, 727-34 (l997)中に詳述されている「シンドロームＸ」または代謝性症候群とまとめて呼ばれる症状、疾患および病弊は、本発明の化合物を用いて処置することができる。

Ｂ．組み合わせ
本発明は、その範囲内に、活性成分として少なくとも１つの式Ｉの化合物の治療上の有効量を単独で、または医薬的に許容し得る担体もしくは希釈剤と組み合わせて含有する医薬組成物を含む。適宜、本発明の化合物は、単独で、本発明の他の化合物と組み合わせて、または１またはそれ以上の他の治療剤（例えば、抗糖尿病薬）もしくは他の医薬的に活性な物質と組み合わせて、使用することができる。

本発明の化合物は、上記の疾患の処置に有用な他のＧＬＰ−１ペプチド受容体修飾因子（例えば、アゴニストまたは部分アゴニストで、例えばペプチドアゴニスト）または上述の障害の治療に有用な他の適当な治療剤（例えば、抗糖尿病薬、抗高血糖薬、抗高脂血症薬／脂質低下薬、抗肥満症薬（食欲の抑制薬／調節薬を含む）および抗高血圧薬）と組み合わせて使用することができる。また、本発明の化合物は、以下の治療剤の１またはそれ以上と組み合わせることができる：不妊症薬、多嚢胞性卵巣症候群の治療剤、増殖障害の治療剤、虚弱症(frailty)の治療剤、関節炎の治療剤、移植における同種移植拒絶反応の予防剤、自己免疫疾患の治療剤、抗ＡＩＤＳ薬、抗骨粗鬆症薬、免疫調節性疾患の治療剤、抗血栓薬、循環器病の治療剤、抗菌剤、抗精神病薬、慢性炎症性腸疾患もしくは症候群の治療剤、および／または拒食症の治療剤。

本発明の化合物と組み合わせて使用するのに適当な抗糖尿病薬としては、例えばビグアナイド（例えば、メトホルミンまたはフェンホルミン）、グルコシダーゼ阻害剤（例えば、アカルボースまたはミグリトール）、インスリン（インスリン分泌促進薬またはインスリン増感薬を含む）、メグリチナイド（例えば、レパグリニド）、スルホニル尿素（例えば、グリメピリド、グリブリド、グリクラジド、クロルプロパミドおよびグリピジド）、ビグアナイド／グリブリドの組み合わせ（例えば、グルコバンス（登録商標））、チアゾリジンジオン（例えば、トログリタゾン、ロシグリタゾンおよびピオグリタゾン）、ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、ＰＰＡＲ−ガンマアゴニスト、ＰＰＡＲアルファ／ガンマデュアルアゴニスト、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、脂肪酸結合タンパク質の阻害剤（ａＰ２）、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤およびＳＧＬＴ２阻害剤を含む。

他の適当なチアゾリジンジオンは、三菱社製ＭＣＣ−５５５（米国特許第5,594,0l6に開示）、グラクソウェルカム社製ＧＬ−２６２５７０、エングリタゾン(englitazone)（ＣＰ−６８７２２、ファイザー社製）またはダルグリタゾン(darglitazone)（ＣＰ−８６３２５、ファイザー社製）、イサグリタゾン(isaglitazone)（ＭＩＴ／Ｊ&Ｊ）、ＪＴＴ−５０１（ＪＰＮＴ／Ｐ＆Ｕ）、Ｌ−８９５６４５（メルク社製）、Ｒ−１１９７０２（三共／ＷＬ社製）、ＮＮ−２３４４（Dr. Reddy／ＮＮ製）またはＹＭ−４４０（山之内製）を含む。

適当なＰＰＡＲアルファ／ガンマデュアルアゴニストとしては、マルグリタザー（ブリストルマイヤーズ・スクイーブ）、ＡＲ−ＨＯ３９２４２（アストラ／ゼネカ社製）、ＧＷ−４０９５４４（グラクソ−ウェルカム社製）、ＫＲＰ２９７（キョーリンメルク社製）、並びにムラカミらによる「A Novel Insulin Sensitizer Acts As a Coligand for Peroxisome Proliferation - Activated Receptor Alpha (PPAR alpha) and PPAR gamma. Effect on PPAR alpha Activation on Abnormal Lipid Metabolism in Liver of Zucker Fatty Rats」, Diabetes 47, 1841-1847 (1998)および米国特許出願番号09/644,598（2000年9月18日出願）（このものは本明細書の一部を構成し、それらに記載されている用量を使用する）に開示するものを含み、そして好ましいと示されている化合物は本明細書中の使用において好ましい。

適当なａＰ２阻害剤としては、米国特許出願番号09/391,053（1999年9月7日出願）および米国特許出願番号09/519,079（2000年3月6日出願）を含み、これらは明細書に記載する用量を使用する。

本発明の化合物と組み合わせて使用することができる適当なＤＰＰ４阻害剤としては、WO99/38501、WO99/46272、WO99/67279（PROBIODRUG）、WO99/67278（PROBIODRUG）、WO99/61431（PROBIODRUG）に開示するもの、ＮＶＰ−ＤＰＰ７２８Ａ（１−［［［２−［（５−シアノピリジン−２−イル）アミノ］エチル］アミノ］アセチル］−２−シアノ−（Ｓ）−ピリジン（ノバルティス）（これは、HughesらによるBiochemistry, 38(36), 11597-11603, 1999に開示）、ＬＡＦ２３７、サクサグリプチン、ＭＫ０４３１、ＴＳＬ−２２５（トリプトフィル(tryptophyl)−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸（YamadaらによるBioorg. & Med. Chem. Lett. 8 (1998) 1537-1540に記載）、２−シアノピロリジドおよび４−シアノピロリジド（AshworthらによるBioorg. & Med. Chem. Lett., 6巻, No.22, 1163-1166頁および2745-2748頁 (1996)により開示）（これらは、上記刊行物に記載されている用量で使用する）を含む。

適当なメグリチナイド(meglitinide)としては、ナテグリニド（ノバルティス社製）またはＫＡＤ１２２９（ＰＦ／キッセイ社製）を含む。

本発明のＧＬＰ−１受容体修飾因子と組み合わせて使用することができる他の適当なグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）の例には、ＧＬＰ−ｌ(１−３６)アミド、ＧＬＰ−１(７−３６)アミド、ＧＬＰ−１(７−３７)（Habenerによる米国特許出願番号5,6l4,492に開示）、並びにＡＣ２９９３（アミリン社製(Amylin))、ＬＹ−３１５９０２（リリー社製）およびＮＮ−２２１１（ノボノルディスク(NovoNordisk)社製）を含む。

本発明の化合物と組み合わせて使用するのに適当な抗高脂血症薬／脂質低下薬としては例えば、１またはそれ以上のＭＴＰ阻害剤、ＨＭＧＣｏＡ還元酵素阻害剤、スクアレン合成酵素阻害剤、フィブリン酸誘導体、ＡＣＡＴ阻害剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、コレステロール吸収阻害剤、回腸Ｎａ⁺／胆汁酸共輸送体阻害剤、ＬＤＬ受容体活性の上方制御剤、胆汁酸金属イオン封鎖剤、コレステロールエステル転送タンパク質阻害剤（例えば、ＣＰ−５２９４１４（ファイザー社製））、および／またはニコチン酸およびその誘導体を含む。

上記の通り使用することができるＭＴＰ阻害剤としては、米国特許第5,595,872号、米国特許第5,739,135号、米国特許第5,712,279号、米国特許第5,760,246号、米国特許第5,827,875号、米国特許第5,885,983号および米国特許第5,962,440号に開示されているものを含む。

式Ｉの化合物の１またはそれ以上と組み合わせて使用してもよいＨＭＧＣｏＡ還元酵素阻害剤としては、メバスタチンおよび関連化合物（米国特許第3,983,140号に開示）、ロバスタチン(メビノリン)および関連化合物（米国特許第4,231,938号に開示）、プラバスタチンおよび関連化合物（例えば、米国特許第4,346,227号に開示）、シンバスタチンおよび関連化合物（米国特許第4,448,784号および4,450,171号に開示）を含む。本明細書中で使用することができる他のＨＭＧＣｏＡ還元酵素阻害剤としては、これらに限定されないが、フルバスタチン（米国特許第5,354,772号に開示）、セリバスタチン（米国特許第5,006,530号および第5,177,080号に開示）、アトルバスタチン（米国特許第4,681,893号、第5,273,995号、第5,385,929号および第5,686,104号に開示）、アタバスタチン（ニッサン／サンキョー社製のニスバスタチン(nisvastatin)（ＮＫ−１０４））（米国特許第5,011,930号に開示）、ビサスタチン(visastatin)（シオノギ−アストラ／ゼネカ社製（ＺＤ−４５２２））（米国特許第5,260,440号に開示）および関連スタチン化合物（米国特許第5,753,675号に開示）、メバロノラクトン(mevalonolactone)誘導体のピラゾールアナログ（米国特許第4,613,610号に開示）、メバロノラクトン誘導体のインデン誘導体（ＰＣＴ特許出願WO 86/03488に開示）、６−[２−(置換−ピロール−１−イル)−アルキル]ピラン−２−オンおよびその誘導体（米国特許第4,647,576号に開示）、シアル(Searle’)製ＳＣ−４５３５５（３−置換ペンタン二酸誘導体）ジクロロアセテート、メバロノラクトンのイミダゾールアナログ（ＰＣＴ出願WO 86/07054に開示）、３−カルボキシ−２−ヒドロキシ−プロパン−ホスホン酸誘導体（仏国特許第2,596,393号に開示）、２,３−ジ置換ピロール、フランおよびチオフェン誘導体（欧州特許出願番号0221025に開示）、メバロノラクトンのナフチルアナログ（米国特許第4,686,237号に開示）、オクタヒドロナフタレン（例えば、米酷特許第4,499,289号に開示）、メビノリンのケトアナログ(ロバスタチン)（欧州特許出願番号0142146 A2に開示）、およびキノリン誘導体およびピリジン誘導体（米国特許第5,506,219号および第5,691,322号に開示）が含まれる。

好ましい抗高脂血症薬は、プラバスタチン、ロバスタチン、シンバスタチン、アトルバスタチン、フルバスタチン、セリバスタチン、アタバスタチンおよびＺＤ−４５２２である。

また、ＨＭＧＣｏＡ還元酵素を阻害するのに有用なホスフィン酸化合物（例えば、ＧＢ第2205837号に開示されているもの）は、本発明の化合物と組み合わせて使用するのに適当である。

本明細書での使用に適当なスクアレンシンセターゼ阻害剤としては、これらに限定されないが、α−ホスホノスルホン（米国特許第5,712,396号に開示）、BillerらによるJ. Med. Chem., 1988, 31巻, No. 10, 1869-1871頁に開示されているもの（これは、イソプレノイド（ホスフィニルメチル）ホスホネートを含む）、並びに他の公知のスクアレンシンセターゼ阻害剤（例えば、米国特許第4,871,721号および第4,924,024号、並びにBiller, S.A., Neuenschwander, K., Ponpipom, M.M.およびPoulter, C.D.によるCurrent Pharmaceutical Design, 2, 1-40 (1996)に開示されているもの）を含む。

加えて、本明細書での使用に適当な他のスクアレンシンセターゼ阻害剤としては、テルペノイドピロホスフェート（P. Ortiz de MontellanoらによるJ. Med. Chem., 1977, 20, 243-249に開示）、ファルネシルジホスフェートアナログＡおよびプレスクアレンピロホスフェネート（ＰＳＱ−ＰＰ）アナログ（CoreyおよびVolanteによるJ. Am. Chem. Soc., 1976, 98, 1291-1293に開示）、およびホスフィニルホスホネート（McClard, R.W.らによるJ.A.C.S., 1987, 109, 5544によって報告）、およびシクロプロパン（Capson, T.L., PhD dissertation, June, 1987, Dept. Med. Chem. U of Utah, Abstract, Table of Contents, 16, 17, 40-43, 48-51頁, 要約によって報告）を含む。

式Ｉの化合物の１またはそれ以上と組み合わせて使用することができるフィブル酸誘導体としては、フェノフィブレート、ゲムフィブロジル、クロフィブラート、ベザフィブラート、シプロフィブラート、クリノフィブラートなど、プロブコールおよび関連化合物（米国特許第3,674,836号に開示）（プロブコールおよびゲムフィブロジルが好ましい）、胆汁酸金属封鎖剤（例えば、コレスチラミン、コレスチポールおよびＤＥＡＥ−セファデックス（セコレックス(Secholex)（登録商標）、ポリセキシド(Policexide)（登録商標））、並びにリポスタビル(lipostabil)( ローヌ・プーラン社)、エーザイＥ−５０５０（Ｎ−置換エタノールアミン誘導体）、イマニキシル(imanixil)（ＨＯＥ−４０２）、テトラヒドロリプスタチン(tetrahydrolipstatin)（ＴＨＬ）、イスチグマスタニルホスホリルコリン(istigmastanylphos-phorylcholine)（ＳＰＣ, ロッシュ）、アミノシクロデキストリン（田辺製薬）、味の素ＡＪ−８１４（アズレン誘導体）、メリナミド（住友）、Ｓａｎｄｏｚ５８−０３５、アメリカンシアナミド(Cyanamid)ＣＬ−２７７,０８２およびＣＬ−２８３,５４６（ジ置換尿素誘導体）、ニコチン酸、アシピモックス(acipimox)、アシフラン(acifran)、ネオマイシン、ｐ−アミノサリチル酸、アスピリン、ポリ(ジアリルメチルアミン)誘導体（例えば、米国特許第4,759,923号に開示）、四級アミンポリ(ジアリルメチルアンモニウムクロリド)およびイオネン(ionenes)（例えば、米国特許第4,027,009号に開示）、および他の公知の血清中コレステロール低下薬を含む。

１またはそれ以上の式Ｉの化合物と組み合わせて使用することができるＡＣＡＴ阻害剤としては、例えばDrugs of the Future 24, 9-15 (1999), (アバシミミベ(Avasimibe)）；「The ACAT inhibitor, Cl-1011 is effective in the prevention and regression of aortic fatty streak area in hamsters」、NicolosiらによるAtherosclerosis (シャノン(Shannon), Irel). (1998), 137(1), 77-85；「The pharmacological profile of FCE 27677: a novel ACAT inhibitor with potent hypolipidemic activity mediated by selective suppression of the hepatic secretion of ApoB100-containing lipoprotein」、Ghiselli, GiancarloによるCardiovasc. Drug Rev. (1998), 16(1), 16-30；「RP 73163: a bioavailable alkylsulfinyl-diphenylimidazole ACAT inhibitor」, Smith, C.らによるBioorg. Med. Chem. Lett. (1996), 6(1), 47-50；「ACAT inhibitors: physiologic mechanisms for hypolipidemic and anti-atherosclerotic activities in experimental animals」, Krauseらによる編: Ruffolo, Robert R., Jr.；Hollinger, Mannfred A.によるInflammation: Mediators Pathways (1995), 173-98, Publisher: CRC, Boca Raton, Fla.；「ACAT inhibitors: potential anti-atherosclerotic agents」, SliskovicらによるCurr. Med. Chem. (1994), 1(3), 204-25；「Inhibitors of acyl-CoA: cholesterol O-acyl transferase (ACAT) as hypocholesterolemic agents. 6. The first water-soluble ACAT inhibitor with lipid-regulating activity. Inhibitors of acyl-CoA: cholesterol acyltransferase (ACAT). 7. Development of a series of substituted N-phenyl-N'-[(1- phenylcyclopentyl)methyl]ureas with enhanced hypocholesterolemic activity」, StoutらによるChemtracts: Org. Chem. (1995), 8(6), 359-62中に開示されているもの、またはＴＳ−９６２（大正製薬製）を含む。

抗高脂血症薬は、ＬＤ２受容体活性の上方調節因子（例えば、ＭＤ−７００（大正製薬製）およびＬＹ２９５４２７（イーライリリー製））であってもよい。

本発明の化合物と組み合わせて使用するのに適当なコレステロール吸収阻害剤としては例えば、ＳＣＨ４８４６１（Schering-Plough製）、並びにAtherosclerosis 115, 45-63 (1995)およびJ. Med. Chem. 41, 973 (1998)中に開示されているものを含む。

本発明の化合物と組み合わせて使用するのに適当な回腸Ｎａ⁺／胆汁酸共輸送体阻害剤としては、Drugs of the Future, 24, 425-430 (1999)中に開示されているものを含む。

１またはそれ以上の式Ｉの化合物と組み合わせて使用することができるリポキシゲナーゼ阻害剤としては、１５−リポキシゲナーゼ（１５−ＬＯ）阻害剤（例えば、ベンズイミダゾール誘導体（例えば、WO 97/12615に開示））、１５−ＬＯ阻害剤（例えば、WO 97/12613に開示）、イソチアゾロン(isothiazolone)（例えば、WO96/38144に開示）、および１５−ＬＯ阻害剤（例えば、Sendobryらによる「Attenuation of diet-induced atherosclerosis in rabbits with a highly selective 15-lipoxygenase inhibitor lacking significant antioxidant properties」、Brit. J. Pharmacology (1997) 120, 1199-1206およびCornicelliらによる「15-Lipoxygenase and its Inhibition: A Novel Therapeutic Target for Vascular disease」、Current Pharmaceutical Design, 1999, 5, 11-20に開示）を含む。

本発明の化合物と組み合わせて使用するのに適当な降圧剤としては例えば、ベータアドレナリン作動性ブロッカー、カルシウムチャンネルブロッカー（Ｌ−タイプおよびＴ−タイプ；例えばジルチアゼム、ベラパミル、ニフェジピン、アムロジピンおよびミベフラジル(mybefradil)、利尿薬（例えば、クロロチアジド、ヒドロクロロチアジド、フルメチアジド(flumethiazide)、ヒドロフルメチアジド、ベンゾフルメチアジド、メチルクロロチアジド、トリクロロメチアジド、ポリチアジド、ベンゾチアジド、エタクリル酸トリクリナフェン(tricrynafen)、クロルサリドン(chlorthalidone)、フロセミド、ムソリミン(musolimine)、ブメタニド、トリアムトレン(triamtrenene)、アミロライド、スピロノラクトン）、レニン阻害剤、ＡＣＥ阻害剤（例えば、カプトプリル、ゾフェノプリル(zofenopril)、フォシノプリル(fosinopril)、エナラプリル、セラノプリル(ceranopril)、シラゾプリル(cilazopril)、デラプリル、ペントプリル(pentopril)、キナプリル、ラミプリル、リシノプリル）、ＡＴ−１受容体アンタゴニスト（例えば、ロサルタン、イルベサルタン、バルサルタン）、ＥＴ受容体アンタゴニスト（例えば、シタキセンタン(sitaxsentan)、アトルセンタン(atrsentan)および米国特許第5,612,359号および第6,043,265号に開示されている化合物）、デュアルＥＴ／ＡＩＩアンタゴニスト（例えば、WO 00/01389に開示されている化合物）、中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）阻害剤、バソペプシダーゼ(vasopepsidase)阻害剤（デュアルＮＥＰ−ＡＣＥ阻害剤）（例えば、オパマトリラット(omapatrilat)およびゲモパトリラット(gemopartrilat)、および硝酸塩を含む。

本発明の化合物と組み合わせて使用するのに適当な抗肥満薬としては、例えばＮＰＹ受容体アンタゴニスト、ＮＰＹ−Ｙ２またはＮＰＹ−Ｙ４受容体アゴニスト、ＭＣＨアンタゴニスト、ＧＨＳＲアンタゴニスト、ＣＲＨアンタゴニスト、ベータ３アドレナリン作動性アゴニスト、リパーゼ阻害剤、セロトニン（およびドーパミン）再取り込み阻害剤、甲状腺受容体ベータ薬物、ＣＢ−１アンタゴニストおよび／又は摂食障害剤を含む。

適宜本発明の化合物と組み合わせて使用することができるベータ３アドレナリン作動性アゴニストは、ＡＪ９６７７（武田／大日本)、Ｌ７５０３５５（メルク）、ＣＰ３３１６４８（ファイザー）、または他の公知のベータ３アゴニスト（例えば、米国特許第5,541,204号、第5,770,615号、第5,491,134号、第5,776,983号、および第5,488,064号）を含むが、ＡＪ９,６７７、Ｌ７５０,３５５およびＣＰ３３１６４８が好ましい。

適宜本発明の化合物と組み合わせて使用することができるリパーゼ阻害剤としては例えば、オルリスタット(orlistat)またはＡＴＬ−９６２（Alizyme）を含むが、オルリスタットが好ましい。

適宜式Ｉの化合物と組み合わせて使用することができるセロトニン（およびドーパミン）再取り込み阻害剤は、シブトラミン(sibutramine)、トピラメート(topiramate)（ジョンソンアンドジョンソン社製)またはアクソキン(axokine)（Regeneron）を含むが、シブトラミンおよびトピラメートが好ましい。

適宜本発明の化合物と組み合わせて使用することができる甲状腺受容体ベータ化合物としては例えば、甲状腺受容体リガンド（例えば、WO97/21993（U. Cal SF)、WO99/00353 (KaroBio)およびGB98/284425 (KaroBio)中に開示されているもの）を含むが、KaroBio出願の化合物が好ましい。

適宜本発明の化合物と組み合わせて使用することができるＣＢ−１アンタゴニストとしては例えば、ＣＢ−１アンタゴニストおよびリモナバン（ＳＲ１４１７１６Ａ）を含む。

ＮＰＹ−Ｙ２およびＮＰＹ−Ｙ４受容体アゴニストの例には、それぞれＰＹＹ（３−３６）および膵臓ポリペプチド（ＰＰ）が含まれる。

適宜本発明の化合物と組み合わせて使用することができる摂食障害剤は、デキサムフェタミン(dexamphetamine)、フェンテルミン、フェニルプロパノールアミンまたはマジンドールを含むが、デキサムフェタニンが好ましい。

適当な抗精神病薬の例としては、クロザピン、ハロペリドール、オランザピン（Zyprexa(登録商標)）、プロザック（Prozac(登録商標)）およびアリピプラゾール(aripiprazole)（Abilify(登録商標)）を含む。

上記の特許および特許出願は、本明細書の一部を構成する。

本発明の化合物と組み合わせて使用する場合に、上記の他の治療薬は例えば、上記の特許中に記載されている通りまたはさもなければ当該分野の当業者によって決定される通り、医師の卓上参考書(Physician's Desk Reference)に示す量で使用することができる。

用量および製剤化
適当な式Ｉの１１量体ペプチドは、糖尿病または他の関連疾患を治療するために、該化合物を単独でおよび／または医薬製剤の形態で許容し得る担体と一緒に混合して、患者に投与することができる。糖尿病の治療における当該分野の当業者は、それらの治療が必要な哺乳動物（ヒトを含む）への該化合物の用量および投与経路を容易に決定することができる。投与経路としては、これらに限定されないが、例えば経口、口腔内、直腸、経皮、バッカル、鼻腔内、肺、皮下、筋肉内、皮内、舌下、結腸内(intracolonic)、眼球内(intraoccular)、静脈内、または腸投与を含む。該化合物は、許容される薬務（Finglらによるin The Pharmacological Basis of Therapeutics, Ch. 1, p.1, 1975; Remington's Pharmaceutical Sciences, 18版., Mack Publishing Co, Easton, PA, 1990）に基づいく投与経路に応じて製剤化する。

本発明の医薬的に許容し得る１１量体ペプチド組成物は、多数の剤形（例えば錠剤、カプセル剤（このものの各々は、徐放性または時間放出性の製剤を含む）、丸剤、散剤、顆粒剤、エリキシル剤、インシトゥーゲル剤、ミクロスフェア剤、結晶複合体、リポソーム剤、マイクロ乳濁剤、チンキ剤、懸濁剤、シロップ剤、エロゾルスプレー剤、および乳濁剤）で投与することができる。本発明の組成物はまた、経口、静脈内（ボーラスまたは注入）、腹腔内、皮下、経皮または筋肉内の形態で、全て医薬分野の当業者にとってよく知られる剤形を用いて、投与することもできる。該組成物は、単独で投与することができるが、しかし通常、選択した投与の経路および標準的な薬務に基づいて、医薬的な担体と一緒に投与される。

本発明の組成物の投与計画は、当然に公知の因子（例えば、特定の薬物の薬力学的な性質、並びに投与の様式および経路；レシピエントの種類、年齢、性別、健康、医学上の病状、および体重；症候群の性質および大きさ；同時の治療の種類；処置の回数；投与経路；患者の腎臓機能および肝臓機能；所望する効果）に応じて変わるであろう。医師または獣医師は、該病状の進行を予防し、カウントし(counter)、または抑止するのに必要とされる薬物の有効量を決定し、そして処方することができる。

一般的なガイダンスによって、該活性成分の１日経口投与量は、示された効果のために使用する場合には、約０．００１〜１０００ｍｇ／体重ｋｇの範囲であり、１日当たり約０．０１〜１００ｍｇ／体重ｋｇの間が好ましく、約０．６〜２０ｍｇ／ｋｇ／日の間が最も好ましい。静脈内の場合には、示された効果のために使用する場合には、該活性成分の１日投与量は、一定の速度の注入の期間で毎分／体重Ｋｇ当たり、０．００１ｎｇ〜１００．０ｎｇの間の範囲である。それらの一定の静脈内注入は、毎分／体重Ｋｇ当たり０．０１ｎｇ〜５０ｎｇの速度で投与することが好ましく、毎分／体重Ｋｇ当たり０．１ｎｇ〜１０．０ｍｇであることが最も好ましい。本発明の組成物は、１回の１日投与量で投与することができたり、あるいは全１日投与量を１日、２回、３回または４回の分けた用量で投与することができる。本発明の組成物はまた、デポ製剤によって投与することもでき、これにより所望するならば日／週／月の期間にわたって該薬物の持続性の放出が可能となる。

本発明の組成物は、適当な鼻腔内ベヒクルの局所使用による鼻腔内形態で、または、または経皮皮膚パッチを用いる経皮経路によって、投与することができる。経皮送達系の形態で投与する場合には、薬物投与は当然に薬物投与計画の間、間欠よりも連続であろう。

本発明の組成物は典型的に、投与の意図する形態（すなわち、経口錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、高圧ガスのあるなしで製造されるエアロゾルスプレー剤、およびシロップ剤である）に関して適当に選択し、そして通常の薬務と一致する、適当な医薬的な希釈剤、賦形剤または担体（これらは、まとめて本明細書中で医薬的担体と呼ぶ）と一緒に混合物で投与する。

例えば、錠剤またはカプセル剤の形態での経口投与の場合には、活性薬物構成物は、経口で非毒性の医薬的に許容される、不活性な担体と組み合わせることができ、該担体としては、これらに限定されないが、例えば、乳糖、デンプン、ショ糖、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸ジカルシウム、硫酸カルシウム、マンニトールおよびソルビトールを含む。液体形態での経口投与の場合には、該経口薬物組成物は、いずれかの経口で非毒性の医薬的に許容し得る不活性な担体（これらに限定されないが、例えば、エタノール、グリセロールおよび水を含む）と組み合わせることができる。その上、所望したりまたは必要な場合には、適当な結合剤、滑沢剤、崩壊剤および着色剤をまた、該混合物中に含有することもできる。適当な結合剤としては、これらに限定されないが、例えば、デンプン、ゼラチン、天然の糖（例えば、グルコース、ベータ−ラクトース、コーン甘味料を含むが、これらに限定されない）、天然および合成のガム（例えば、アラビアガム、トラガカント、またはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコールおよびワックス）を含む。これらの剤形における滑沢剤としては、例えばオレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、および塩化ナトリウムを含む。崩壊剤としては、これらに限定されないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、およびキサンタンガムを含む。

本発明の組成物はまた、混合型ミセルまたはリポソームの送達システム（例えば、小さい単層小胞、大きな単層小胞および多重層小胞）の形態で投与することもできる。リポソームは、様々なリン脂質（例えば、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリン）から生成することができる。浸透エンハンサーを、薬物の吸収を増大するために加えることができる。

プロドラッグは、薬剤の多数の望ましい性質（すなわち、溶解度、アベイラビリティ、製剤化など）を増大させることが知られるので、本発明の化合物はプロドラッグ形態で送達することができる。従って、本発明の化合物は、本特許請求する化合物のプロドラッグ、そのものを送達する方法、およびそのものを含有する組成物にまで及ぶことを意図する。

本発明の組成物はまた、ターゲットとすることができる薬物担体としての可溶性ポリマーと一緒に組み合わせることもできる。該ポリマーは、ポリビニル−ピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシプロピル−メタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール、またはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリシンを含むことができる。更に、本発明の組成物は、薬物（例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸およびポリグリコール酸の共重合体、ポリイプシロン(polyepsilon)カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル(polyorthoesters)、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアシレート、およびヒドロゲルの架橋または両親媒性のブロック共重合体）の制御された放出を達成する際に有用な生分解性ポリマークラスと組み合わせることができる。

投与に適した剤形（医薬組成物）は、用量単位当たり活性成分の約０．１ミリグラム〜約５００ミリグラムを含むことができる。これらの医薬組成物中、該活性成分は通常、組成物の総重量ベースで重量比約０．５％〜９５％の量で存在する。

ゼラチンカプセル剤は、活性成分および粉末状担体（例えば、乳糖、デンプン、セルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸）を含み得る。同様な希釈物を用いて、圧縮した錠剤を製造することができる。錠剤およびカプセル剤は共に、何時間にもわたって薬物の連続的な放出を得るために、徐放性製品として製造することができる。圧縮した錠剤は、いずれかの望ましくない味をマスクしそして空気から錠剤を防止するために、糖衣またはフィルムコーティングしたり、あるいは胃腸管中での選択的な崩壊のために腸溶コーティングすることができる。

経口投与のための液体剤形は、患者の許容性を増大するために、着色剤および芳香剤を含むことができる。

通常、水、適当な油、生理食塩水、デキストロース（グルコース）水溶液、および関連当溶液およびグリコール（例えば、プロピレングリコール、またはポリエチレングリコール）は、非経口液剤のための適当な担体である。非経口投与のための液剤は、活性成分の水溶性塩、適当な安定化剤、および必要ならば緩衝化物質を含むことが好ましい。抗酸化剤（例えば、亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、またはアスコルビン酸）の単独または組み合わせは、適当な安定化剤である。クエン酸およびその塩、並びにＥＤＴＡナトリウムをまた使用する。また、非経口溶液は、保存剤（例えば、ベンズアルコニウムクロリド、メチル−またはプロピル−パラベンおよびクロロブタノール）を含むことができる。

適当な医薬的な担体は、本分野における標準的な刊行物である、Remington： The Science and Practice of Pharmacy, 19版, Mack Publishing Company, 1995中に記載されている。

本発明の組成物の投与のための代表的な有用な医薬的な剤形は、以下に示す通り例示することができる。

カプセル剤
多数の単位カプセル剤を、標準的な２片の硬カプセル剤を、粉末状の活性成分（１００ミリグラム）、乳糖（１５０ミリグラム）、セルロース（５０ミリグラム）およびステアリン酸マグネシウム（６ミリグラム）と一緒に充填することによって製造することができる。

軟ゼラチンカプセル剤
消化性油（例えば、大豆油、綿実油またはオリーブ油）中の活性成分の混合物を調製し、そしてこのものをゼラチン中に容積移送式ポンプ(positive displacement pump)によって注入して、活性成分（１００ミリグラム）を含有する軟カプセルを得てもよい。該カプセル剤は洗浄し、そして乾燥するべきである。

錠剤
錠剤を通常の方法によって製造し、その結果、用量単位は例えば、活性成分（１００ミリグラム）、コロイド状二酸化ケイ素（０．２ミリグラム）、ステアリン酸マグネシウム（５ミリグラム）、微結晶性セルロース（２７５ミリグラム）、デンプン（１１ミリグラム）および乳糖（９８．８ミリグラム）である。適当なコーティングを使用して、嗜好性を増大したり、または吸収を遅らせることができる。

注入剤
本発明の１１量体ペプチド組成物の注射剤は、整った体内に適用されているような賦形剤の使用を要求してもしなくてもよい。これらの賦形剤には、これらに限らないが、溶媒および共溶媒、溶解補助剤、乳濁剤または濃化剤、キレート化剤、抗酸化剤および還元剤、抗菌保存剤、緩衝剤およびｐＨ調整剤、充填剤、保護剤および強度調整剤および特別の添加剤が含まれる。注射製剤は無菌で、パイロジェンフリーで、溶液の場合、粒子の問題がない必要がある。

投与に適した非経口組成物は例えば、共溶媒または他の賦形剤を含むか含まない医薬的に許容されるバッファー中１．５重量％の活性成分を撹拌することによって製造することができる。該溶液を、塩化ナトリウムを用いて等張とし、そして減菌化するべきである。

懸濁剤
水性懸濁剤を、経口および／または非経口投与のために製造することができ、その結果、例えば各５ｍＬは細かく分けた活性成分（１００ｍｇ）、ナトリウムカルボキシメチルセルロース（２０ｍｇ）、安息香酸ナトリウム（５ｍｇ）、ソルビトール溶液、U.S.P.（１．０ｇ）、およびバニリン（０．０２５ｍＬ）または他の芳香剤を含む。

生分解性微粒子
注射による投与に適した徐放性非経口組成物は例えば、適当な生分解性ポリマーを溶媒中に溶解し、該ポリマー溶液に含有する活性成分を加え、そして該溶媒をマトリックスから除去することによって調製し、その結果、活性成分がマトリックス全般に分布した該ポリマーのマトリックスを形成することができる。

明らかに、本発明の多数の改変および変化が上記の教示に照らして可能である。従って、特許請求の範囲内で、本発明は本明細書中に具体的に記載する以外に実施することができると、理解される。

本発明は、本発明の個別の態様の単なる例示として意図される、記載する具体的な実施態様による範囲内に限定されるものではない。本明細書中に示したりおよび記載するものに加えて、機能的に等価な方法および成分は、上記の記載および添付する図面から当該分野の当業者にとって明らかであろう。それらの改変は、特許請求の範囲の範囲内であると意図する。本明細書で引用するすべての引例は、本明細書にそのまま引用される。

図１は、腹腔内ブドウ糖耐性テスト（ｉｐＧＴＴ）において、化合物Ｉの皮下注射による血漿グルコースの効果（肥満のｏｂ／ｏｂマウスにおける）を図示する。図２は、ｉｐＧＴＴにおいて、化合物Ｉの皮下注射による血漿インスリンの効果（ｏｂ／ｏｂマウスにおける）を図示する。図３は、ｉｐＧＴＴにおいて、化合物ＩＩの皮下注射による血漿グルコースの効果（ｏｂ／ｏｂマウスにおける）を図示する。図４は、ｉｐＧＴＴにおいて、化合物ＩＩＩの皮下注射による血漿グルコースの効果（ｏｂ／ｏｂマウスにおける）を図示する。

Claims

式Ｉの配列（配列番号：１）：
Ｘ_aa1−Ｘ_aa2−Ｘ_aa3−Ｘ_aa4−Ｘ_aa5−Ｘ_aa6−Ｘ_aa7−Ｘ_aa8−Ｘ_aa9−Ｘ_aa10−Ｘ_aa11 （Ｉ）
［式中、
Ｘ_aa1は、イミダゾールを含む天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；該アミノ酸は、アルキル、アシル、ベンゾイル、Ｌ−ラクチル、アルキルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アリールアルキルオキシカルボニル、ヘテロサイクリルオキシカルボニル、ヘテロアリールアルキルオキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アリールアルキルカルバモイル、ヘテロサイクリルスルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリールアルキルスルホニル、ヘテロアリールアルキルスルホニルまたはヘテロアリールスルホニルで適宜置換された遊離アミノ基を適宜有し；および該遊離アミノ基が存在しない場合、Ｘ_aa1は、１またはそれ以上の炭素原子が１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換された脱アミノヒスチジン体であり；
Ｘ_aa2は、Ｄ−アラニン、α−アミノ−イソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｎ−メチル−Ｄ−アラニン、Ｎ−エチル−Ｄ−アラニン、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸、α−メチル−（Ｌ）−プロリン、２−メチルピペリジン−２−カルボン酸およびイソバリンからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘ_aa3は、（１）カルボン酸を含むアミノ酸側鎖または（２）イミダゾール側鎖を有する天然型または非天然型アミノ酸であり、その中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa4はグリシンであり；
Ｘ_aa5は、（Ｌ）−スレオニンおよび（Ｌ）−ノルバリンからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa6は、２つの側鎖を有する二置換α炭素を有する天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該２つの側鎖の少なくとも１つは芳香環を有し、および該２つの側鎖の少なくとも１つはアルキル基を有し；および該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１もしくはそれ以上のアルキル基または１もしくはそれ以上のハロ基で適宜置換され；
Ｘ_aa7は、ヒドロキシル基で置換されたアミノ酸側鎖を有する天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa8は、Ｌ−セリンおよびＬ−ヒスチジンからなる群から選択される天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa9は、カルボン酸を含むアミノ酸側鎖を有する天然型または非天然型アミノ酸であり；この中で該アミノ酸の１またはそれ以上の炭素原子は、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換され；
Ｘ_aa10は、式ＩＩ：

（式中、Ｒ₄は、水素、アルキル、およびハロからなる群から選択され；Ｒ₃およびＲ₆は独立して、水素、ハロ、メチル、エチル、アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、およびアルコキシからなる群から選択され；該アミノ酸のβ炭素に隣接するフェニル環は、アルキルまたはハロでさらに適宜置換され；および該アミノ酸のβ炭素の遠位末端のフェニル環は、ハロ、メチル、エチル、アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、およびアルコキシでさらに適宜置換される）の天然型または非天然型アミノ酸であり；
Ｘ_aa11は、式ＩＶａ：

（式中、該アミノ酸のＣ末端カルボニル炭素は窒素と結合して、カルボキサミド（ＮＨ₂）を形成し；Ｒ_4aは水素、アルキル、およびハロからなる群から選択され；Ｒ_3aおよびＲ_6aは各々独立して、水素、ハロ、メチル、エチル、アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、およびアルコキシからなる群から選択され；Ｒ₇は水素、メチル、およびエチルからなる群から選択され；Ｘ₁、Ｘ₂、Ｘ₃およびＸ₄は各々ＣまたはＮであるが、ただしＸ₁、Ｘ₂、Ｘ₃およびＸ₄の少なくとも１つはＮであり；該アミノ酸のβ炭素に隣接するフェニル環は、アルキルまたはハロでさらに適宜置換され；および該アミノ酸のβ炭素の遠位末端のフェニル環は、ハロ、メチル、エチル、アルキル、ヒドロキシル、メトキシ、およびアルコキシでさらに適宜置換される）の天然型または非天然型アミノ酸である］
を有するポリペプチドを含む単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa3が、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換されたヒスチジンである、請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa3が、各々１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換された、Ｌ−アスパラギン酸またはＬ−グルタミン酸である、請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa6が、各々１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換された、α−メチル−フェニルアラニン、α−メチル−２−フルオロフェニルアラニン、またはα−メチル−２，６−ジフルオロフェニルアラニンである、請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa7が、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換されたＬ−スレオニンである、請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa9が、１またはそれ以上のアルキル基で適宜置換された、Ｌ−アスパラギン酸またはＬ−グルタミン酸である、請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa1が、アルキル、ジアルキル、アシル、ベンゾイル、Ｌ−ラクチル、アルキルオキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アラルキルオキシカルボニル、ヘテロサイクリルオキシカルボニル、ヘテロアリールアルキルオキシカルボニル、アルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アラルキルカルバモイル、ヘテロサイクリルスルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリールアルキルスルホニル、ヘテロアリールアルキルスルホニルまたはヘテロアリールスルホニルで適宜置換される末端アミノ基を有する、Ｌ−ヒスチジンである請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa1が、Ｌ−Ｎ−メチル−Ｈｉｓ、Ｌ−α−メチル−Ｈｉｓ、脱アミノ−Ｈｉｓ、３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−２−メチルプロパノイル、および（Ｓ）−３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−２−ヒドロキシプロパノイル（Ｌ−β−イミダゾールラクチル）からなる群から選択される、請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa2が、α−アミノ−イソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｄ−アラニン、Ｎ−メチル−Ｄ−アラニン、α−メチル−（Ｌ）−プロリン、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸および２−メチルピペリジン−２−カルボン酸からなる群から選択される、請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa4がグリシンである請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa5がＬ−ＴｈｒおよびＬ−Ｎｖａからなる群から選択される請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa6が、Ｌ−α−Ｍｅ−Ｐｈｅ、Ｌ−α−Ｍｅ−２−フルオロ−Ｐｈｅ、およびＬ−α−Ｍｅ−２，６−ジフルオロ−Ｐｈｅからなる群から選択される請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa7がＬ−Ｔｈｒである請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa8がＬ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択される請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa9がＬ−Ａｓｐである請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa10が、４−フェニル−フェニルアラニン、４−［（４'−メトキシ−２'−エチル）フェニル］フェニルアラニン、４−［（４'−エトキシ−２'−エチル）フェニル］フェニルアラニン、４−［（４'−メトキシ−２'−メチル）フェニル］フェニルアラニン、４−［（４'−エトキシ−２'−メチル）フェニル］フェニルアラニン、４−（２'−エチルフェニル）フェニルアラニン、４−（２'−メチルフェニル）フェニルアラニン、４−［（３'，５'−ジメチル）フェニル］フェニルアラニンおよび４−［（３'，４'−ジメトキシ）フェニル］フェニルアラニンからなる群から選択される、請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa11が、４−フェニル−３−ピリジルアラニン、４−（２'−メチルフェニル）−３−ピリジルアラニン、４−（２'−フルオロフェニル）−３−ピリジルアラニン、４−（２'−クロロフェニル）−３−ピリジルアラニン、４−［（３'，５'−ジメチル）フェニル］−３−ピリジルアラニン、４−（４'−トリフルオロメチルフェニル）−３−ピリジルアラニン、４−（３'−メトキシフェニル）−３−ピリジルアラニン、４−（３'−メチルフェニル）−３−ピリジルアラニン、４−（２'−メチルフェニル）−３，５−ピリミジルアラニン、（Ｓ）−４−（２'−メチルフェニル）−α−Ｍｅ−３−ピリジルアラニンおよび４−（２'−エチルフェニル）−３−ピリジルアラニンからなる群から選択され；
Ｘ_aa11のＣ末端カルボニル炭素が窒素と結合して、カルボキサミド（ＮＨ₂）を形成し；および
Ｒ₇が水素およびメチルからなる群から選択される、
請求項１の単離されたポリペプチド。
該ポリペプチドが、式ＶＩ：

［式中、
Ｘ_aa2は、Ｄ−Ａｌａ、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏ、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸、２−メチルピペリジン−２−カルボン酸およびα−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなる群から選択されるアミノ酸であり；
ＸおよびＹは各々独立して、水素およびフルオロからなる群から選択され；
Ｘ_aa8は、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃は、水素、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ₆は、水素、ヒドロキシ、メトキシおよびエトキシからなる群から選択され；
Ｒ_3aは、水素、フルオロ、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aは、水素、メチルおよびメトキシからなる群から選択され；および
Ｒ₇は、水素およびメチルからなる群から選択される］
のポリペプチドである、請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa2が、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏおよびα−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｘがフルオロであり；
Ｙが水素であり；
Ｘ_aa8が、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃がエチルであり；
Ｒ₆がメトキシであり；
Ｒ_3aがメチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aが水素であり；および
Ｒ₇が水素である、請求項１８の単離されたポリペプチド。
該ポリペプチドが、式ＶＩＩ：

［式中、
Ｒ₈は、メチル、エチル、

からなる群から選択され；
Ｘ_aa2は、Ｄ−Ａｌａ、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏ、α−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸、および２−メチルピペリジン−２−カルボン酸からなる群から選択されるアミノ酸であり；
ＸおよびＹは各々独立して、水素およびフルオロからなる群から選択され；
Ｘ_aa8は、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃は、水素、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ₆は、水素、ヒドロキシ、メトキシおよびエトキシからなる群から選択され；
Ｒ_3aは、水素、フルオロ、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aは、水素、メチルおよびメトキシからなる群から選択され；および
Ｒ₇は、水素およびメチルからなる群から選択される］
のポリペプチドである、請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｒ₈がメチル、および

からなる群から選択され；
Ｘ_aa2が、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏおよびアミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｘがフルオロであり；
Ｙが水素であり；
Ｘ_aa8が、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃がエチルであり；
Ｒ₆がメトキシであり；
Ｒ_3aがメチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aが水素であり；および
Ｒ₇が水素およびメチルからなる群から選択される、請求項２０の単離されたポリペプチド。
該ポリペプチドが式ＶＩＩＩ：

［式中、
Ｒ₉は、水素、メチルおよびアルキルからなる群から選択され；
Ｘ_aa2は、Ｄ−Ａｌａ、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏ、α−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸および２−メチルピペリジン−２−カルボン酸からなる群から選択されるアミノ酸であり；
ＸおよびＹは各々独立して、水素およびフルオロからなる群から選択され；
Ｘ_aa8は、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃は、水素、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ₆は、水素、ヒドロキシ、メトキシおよびエトキシからなる群から選択され；
Ｒ_3aは、水素、フルオロ、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aは、水素、メチルおよびメトキシからなる群から選択され；
Ｒ₇は、水素およびメチルからなる群から選択される］
のポリペプチドである、請求項１の単離されたポリペプチド。
Ｒ₉が水素およびメチルからなる群から選択され；
Ｘ_aa2が、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏ、およびα−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｘがフルオロであり；
Ｙが水素であり；
Ｘ_aa8がＬ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃がエチルであり；
Ｒ₆がメトキシであり；
Ｒ_3aがメチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aが水素であり；
Ｒ₇が水素である、請求項２２の単離されたポリペプチド。
該単離されたポリペプチドが下表の化合物群から選択される化合物である、請求項１の単離されたポリペプチド。
該単離されたポリペプチドが下表の化合物群から選択される化合物である、請求項２４の単離されたポリペプチド。
該単離されたポリペプチドが下表の化合物群から選択される化合物である、請求項１の単離されたポリペプチド。
該単離されたポリペプチドが下表の化合物群から選択される化合物である、請求項１の単離されたポリペプチド。
該単離されたポリペプチドが

である、請求項１の単離されたポリペプチド。
該単離されたポリペプチドが

である、請求項２８の単離されたポリペプチド。
該単離されたポリペプチドが

である、請求項１の単離されたポリペプチド。
式ＶＩａ：

［式中、
Ｐは、水素、フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）またはｔ−ブチルオキシカルボニル（t−Ｂｏｃ）であり；
Ｒ_3aは、メチル、エチルおよびフルオロからなる群から選択され；
Ｒ¹⁰はＯＨおよびＮＨ₂からなる群から選択され；および
Ｒ₇は水素およびメチルからなる群から選択される］
の化合物。
式ＶＩＩａ：

［式中、
Ｐは、水素、フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）またはｔ−ブチルオキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）であり；
Ｒ_6aはメトキシであり；
Ｒ₁₀はＯＨおよびＮＨ₂からなる群から選択され；および
Ｒ₇は水素およびメチルからなる群から選択される］
の化合物。
請求項１の単離されたポリペプチドおよびその医薬的に許容される担体を含む医薬組成物。
請求項１の単離されたポリペプチドおよび少なくとも１つの治療剤を含む医薬組成物で、該治療剤が、抗糖尿病剤、抗肥満剤、降圧剤、抗アテローム硬化剤および脂質低下剤からなる群から選択される医薬組成物。
該抗糖尿病剤が、ビグアナイド、スルホニル尿素、グルコシダーゼ阻害剤、ＰＰＡＲ γ アゴニスト、ＰＰＡＲ α／γデュアルアゴニスト、ａＰ２阻害剤、ＤＰＰ４阻害剤、インスリン増感剤、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）アナログ、インスリンおよびメグリチナイドからなる群から選択される、請求項３４の医薬組成物。
該抗糖尿病剤が、メトホルミン、グリブリド、グリメピリド、グリピリド、グリピジド、クロロプロパミド、グリクラジド、アカルボース、ミグリトール、ピオグリタゾン、トログリタゾン、ロシグリタゾン、マルグリタザー、インスリン、Ｇｌ−２６２５７０、イサグリタゾン、ＪＴＴ−５０１、ＮＮ−２３４４、Ｌ８９５６４５、ＹＭ−４４０、Ｒ−１１９７０２、ＡＪ９６７７、レパグリニド、ナテグリニド、ＫＡＤ１１２９、ＡＲ−ＨＯ３９２４２、ＧＷ−４０９５４４、ＫＲＰ２９７、ＡＣ２９９３、ＬＹ３１５９０２、ＮＶＰ−ＤＰＰ−７２８Ａおよびサクサグリプチンからなる群から選択される、請求項３４の医薬組成物。
該抗肥満剤が、β３アドレナリン作動性アゴニスト、リパーゼ阻害剤、セロトニン（およびドパミン）再取り込み阻害剤、甲状腺受容体β化合物、ＣＢ−１アンタゴニスト、ＮＰＹ−Ｙ２およびＮＰＹ−Ｙ４受容体アゴニストおよび摂食障害剤からなる群から選択される請求項３４の医薬組成物。
該抗肥満剤が、オーリスタット、ＡＴＬ−９６２、ＡＪ９６７７、Ｌ７５０３５５、ＣＰ３３１６４８、シブトラミン、トピラメート、アキソキン、デキサアンフェタミン、フェンテルミン、フェニルプロパノールアミンリモナバン（ＳＲ１４１７１６Ａ）、およびマジンドールからなる群から選択される請求項３４の医薬組成物。
該脂質低下剤が、ＭＴＰ阻害剤、コレステロールエステル変換タンパク質、ＨＭＧＣｏＡ還元酵素阻害剤、スクアレン合成酵素阻害剤、フィブリン酸誘導体、ＬＤＬ受容体活性の上方制御剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、およびＡＣＡＴ阻害剤からなる群から選択される請求項３４の医薬組成物。
該脂質低下剤が、プラバスタチン、ロバスタチン、シンバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ニスバスタチン、ビサスタチン、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、クロフィブラート、アバシミベ、ＴＳ−９６２、ＭＤ−７００、ＣＰ−５２９４１４、およびＬＹ２９５４２７からなる群から選択される請求項３４の医薬組成物。
請求項１の単離されたポリペプチドの治療上の有効量を治療が必要な哺乳類に投与することからなる、糖尿病、糖尿病性網膜症、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎障害、創傷治癒、インスリン抵抗性、高血糖、高インスリン血症、シンドロームＸ、糖尿病性合併症、血中脂肪酸またはグリセロールのレベルの上昇、高脂血症、肥満症、高トリグリセリド血症、アテローム性動脈硬化症または高血圧症の、治療方法または進行もしくは発症を遅らせる方法。
さらに、抗糖尿病剤、抗肥満剤、降圧剤、および抗アテローム硬化剤からなる群から選択される１またはそれ以上の治療剤および脂質低下剤の治療上の有効量を、同時または連続して投与することからなる請求項４１の方法。
請求項３４の医薬組成物の治療上の有効量を治療が必要な哺乳類に投与することからなる、糖尿病、糖尿病性網膜症、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎障害、創傷治癒、インスリン抵抗性、高血糖、高インスリン血症、シンドロームＸ、糖尿病性合併症、血中脂肪酸またはグリセロールのレベルの上昇、高脂血症、肥満症、高トリグリセリド血症、アテローム性動脈硬化症または高血圧症の、治療方法または進行もしくは発症を遅らせる方法。
請求項１のポリペプチドを含む製剤の非経口投与からなる、請求項１のポリペプチドの投与方法。
請求項１のポリペプチドを含む製剤の非経口でない投与からなる、請求項１のポリペプチドの投与方法。
該非経口投与が、静脈内（ＩＶ）ボーラス注入、ＩＶ注入、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、バッカル投与、経肺投与および眼の送達からなる群から選択される請求項４４の方法。
該皮下投与が速放性または徐放性製剤の使用を含む請求項４６の方法。
該筋肉内投与が速放性または徐放性製剤の使用を含む請求項４６の方法。
該製剤が、溶媒および共溶媒、溶解剤、乳化剤、濃化剤、キレート化剤、抗酸化剤、還元剤、抗微生物保存剤、緩衝剤およびｐＨ調整剤、充填剤、保護剤および張性剤、並びに特別の添加剤からなる群から選択される医薬的に許容される賦形剤をさらに含む、請求項４４の方法。
該製剤がカプセル化した輸送システムをさらに含む請求項４４の方法。
式ＶＩ：

［式中、
Ｘ_aa2は、Ｄ−Ａｌａ、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏ、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸、２−メチルピペリジン−２−カルボン酸およびα−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなる群から選択されるアミノ酸であり；
ＸおよびＹは各々独立して、水素およびフルオロからなる群から選択され；
Ｘ_aa8は、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸；
Ｒ₃は、水素、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ₆は、水素、ヒドロキシ、メトキシおよびエトキシからなる群から選択され；
Ｒ_3aは、水素、フルオロ、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aは、水素、メチルおよびメトキシからなる群から選択され；および
Ｒ₇は、水素およびメチルからなる群から選択される］
のポリペプチドである、単離されたポリペプチド。
Ｘ_aa2が、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏおよびα−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｘがフルオロであり；
Ｙが水素であり；
Ｘ_aa8が、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃がエチルであり；
Ｒ₆がメトキシであり；
Ｒ_3aがメチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aが水素であり；
Ｒ₇が水素である、請求項５１の単離されたポリペプチド。
式ＶＩＩ：

［式中、
Ｒ₈は、メチル、エチル、

からなる群から選択され；
Ｘ_aa2は、Ｄ−Ａｌａ、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏ、α−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸、および２−メチルピペリジン−２−カルボン酸からなる群から選択されるアミノ酸であり；
ＸおよびＹは各々独立して、水素およびフルオロからなる群から選択され；
Ｘ_aa8は、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃は、水素、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ₆は、水素、ヒドロキシ、メトキシおよびエトキシからなる群から選択され；
Ｒ_3aは、水素、フルオロ、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aは、水素、メチルおよびメトキシからなる群から選択され；および
Ｒ₇は、水素およびメチルからなる群から選択される］
のポリペプチドである、単離されたポリペプチド。
Ｒ₈が、メチル、および

からなる群から選択され
Ｘ_aa2が、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏおよびアミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｘがフルオロであり；
Ｙが水素であり；
Ｘ_aa8が、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃がエチルであり；
Ｒ₆がメトキシであり；
Ｒ_3aがメチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aが水素であり；
Ｒ₇が水素およびメチルからなる群から選択される、請求項５３の単離されたポリペプチド。
式ＶＩＩＩ：

［式中、
Ｒ₉は、水素、メチルおよびアルキルからなる群から選択され；
Ｘ_aa2は、Ｄ−Ａｌａ、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏ、α−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、２−メチル−アゼチジン−２−カルボン酸および２−メチルピペリジン−２−カルボン酸からなる群から選択されるアミノ酸であり；
ＸおよびＹは各々独立して、水素およびフルオロからなる群から選択され；
Ｘ_aa8は、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃は、水素、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ₆は、水素、ヒドロキシ、メトキシおよびエトキシからなる群から選択され；
Ｒ_3aは、水素、フルオロ、メチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aは、水素、メチルおよびメトキシからなる群から選択され；
Ｒ₇は水素およびメチルからなる群から選択される］
のポリペプチドである、単離されたポリペプチド。
Ｒ₉が、水素およびメチルからなる群から選択され；
Ｘ_aa2が、Ｎ−メチル−Ｄ−Ａｌａ、α−メチル−Ｌ−Ｐｒｏ、およびα−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）からなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｘがフルオロであり；
Ｙが水素であり；
Ｘ_aa8が、Ｌ−ＳｅｒおよびＬ−Ｈｉｓからなる群から選択されるアミノ酸であり；
Ｒ₃がエチルであり；
Ｒ₆がメトキシであり；
Ｒ_3aがメチルおよびエチルからなる群から選択され；
Ｒ_6aが水素であり；
Ｒ₇が水素である、請求項５５の単離されたポリペプチド。
下表の化合物群から選択される化合物である単離されたポリペプチド。
下表の化合物群から選択される化合物である単離されたポリペプチド。
下表の化合物群から選択される化合物である単離されたポリペプチド。
下表の化合物群から選択される化合物である単離されたポリペプチド。
構造が

である単離されたポリペプチド。
構造が

である単離されたポリペプチド。
構造が

である単離されたポリペプチド。
構造が

である単離されたポリペプチド。
構造が

である単離されたポリペプチド。
構造が

である単離されたポリペプチド。