JP2008502785A - 新規な温度及びpHに感受性のコポリマー - Google Patents
新規な温度及びpHに感受性のコポリマー Download PDFInfo
- Publication number
- JP2008502785A JP2008502785A JP2007527146A JP2007527146A JP2008502785A JP 2008502785 A JP2008502785 A JP 2008502785A JP 2007527146 A JP2007527146 A JP 2007527146A JP 2007527146 A JP2007527146 A JP 2007527146A JP 2008502785 A JP2008502785 A JP 2008502785A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- acid
- copolymer
- group
- polymer
- composition
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/167—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction with an outer layer or coating comprising drug; with chemically bound drugs or non-active substances on their surface
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
- C08F220/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms; Derivatives thereof
- C08F220/52—Amides or imides
- C08F220/54—Amides, e.g. N,N-dimethylacrylamide or N-isopropylacrylamide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
- C08F220/62—Monocarboxylic acids having ten or more carbon atoms; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F293/00—Macromolecular compounds obtained by polymerisation on to a macromolecule having groups capable of inducing the formation of new polymer chains bound exclusively at one or both ends of the starting macromolecule
- C08F293/005—Macromolecular compounds obtained by polymerisation on to a macromolecule having groups capable of inducing the formation of new polymer chains bound exclusively at one or both ends of the starting macromolecule using free radical "living" or "controlled" polymerisation, e.g. using a complexing agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L33/00—Compositions of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical, or of salts, anhydrides, esters, amides, imides or nitriles thereof; Compositions of derivatives of such polymers
- C08L33/04—Homopolymers or copolymers of esters
- C08L33/06—Homopolymers or copolymers of esters of esters containing only carbon, hydrogen and oxygen, which oxygen atoms are present only as part of the carboxyl radical
- C08L33/08—Homopolymers or copolymers of acrylic acid esters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L33/00—Compositions of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical, or of salts, anhydrides, esters, amides, imides or nitriles thereof; Compositions of derivatives of such polymers
- C08L33/24—Homopolymers or copolymers of amides or imides
- C08L33/26—Homopolymers or copolymers of acrylamide or methacrylamide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L53/00—Compositions of block copolymers containing at least one sequence of a polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds; Compositions of derivatives of such polymers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
- Polymers With Sulfur, Phosphorus Or Metals In The Main Chain (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Other Resins Obtained By Reactions Not Involving Carbon-To-Carbon Unsaturated Bonds (AREA)
Abstract
Description
本発明は、疎水性かつpH感受性の官能基として脂肪酸を組み込んだコポリマーから得られたコア−シェル・ナノ粒子が薬物担体として優れた特性を有するという知見に基づくものである。本発明のコポリマーは疎水性のコアを含むコア−シェル構造体に自身でアセンブリ可能であり、同構造体において、脂肪酸のような疎水性の部分がコポリマーの親水性部分からなる親水性のシェルにより包囲されて配置されている。薬物は、コア内に物理的に封入されるか若しくは化学的に結合されて取り込まれる。これらのナノ粒子は、環境のpHの狭い範囲の変化に対応してその物理的な形態を変更することが可能であり、同ナノ粒子の疎水性コアに封入された薬物を結果として解放する。
A)実験の部
i)材料
特に明記されていない限り、全ての試薬及び溶媒は市販のグレードのものであり、入荷されたものとして使用した。N−イソプロピルアクリルアミド、N,N−ジメチルアクリルアミド及び10−ウンデセン酸(98%)はアルドリッチ(Aldrich)社から購入し、結晶化(n−ヘキサン)及び減圧蒸留にてそれぞれ精製した。連鎖移動剤(CTA)である2−アミノエタンチオール塩酸塩(AET.HCl)はシグマ,アルドリッチ(Sigma,Aldrich)社から購入した。1Mのトリニトロベンゼンスルホネート(TNBS)水溶液は、フルカ(Fluka)社から購入した。塩酸ドキソルビシンは、インドに所在のサン・ファーマシューティカルズ社(Sun Pharmaceuticals)から厚意により譲り受けた。3−[4,5−ジメチルチアゾリル−2−]−2,5−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド(MTT、ドゥシェファ(Duchefa)社)は、細胞の定量化のために5mg/mLのPBS溶液(pH7.4)中にて使用した。溶液は青色のホルマザン結晶を除去するために0.22μmのフィルタにて濾過した。
ii)合成
種々の組成物を備えたP(NiPAAm−co−DMAAm−co−UA)ポリマーは、レドックス対の過硫酸アンモニウム(APS)及び2−アミノエタンチオール塩酸塩(AET.HCl)を用いてラジカル共重合により合成した(図1)。[ボカイス(Bokias)ら、Macromol.Chem.Phys.、199、1998年、1387−1392頁]。重合化工程を以下に簡単に説明する。N−イソプロピルアクリルアミド(3.965g,34.99mmol)及びN,N−ジメチルアクリルアミド(1.48g,14.99mmol)を10mLの超純水に溶解した。ウンデセン酸(0.921g,5.0mmol)は5mLの4%水酸化ナトリウム溶液と反応させることによりナトリウム塩とし、ナトリウム塩の透明な溶液を、N−イソプロピルアクリルアミド及びN,N−ジメチルアクリルアミドの溶液に加えた。混合物を精製した窒素ガスで15分間浄化した。APS(0.254g,モノマー供給量の4.0モル%)及びAET.HCl(0.244g,2.16mmol,モノマー供給量の4.0モル%)を5.0mLの超純水に溶解した。溶液を、連続して攪拌しながら、ゆっくりとモノマー溶液に加えた。反応は、窒素下にて27℃で48時間実施した。完了後、粗生成物を過剰の塩化ナトリウムを加えることにより沈殿させ、真空にて乾燥した。粗生成物をエタノールに溶解し、分子量カットオフが2000(Spectra/Por)である膜を使用して、超純水、次にエタノールにて透析した。精製品はエタノールを蒸発後に回収した。
iii)酸−塩基滴定及びアミン基決定
酸−塩基滴定はカルボン酸基及びポリマーのpKaを推定するために実施した。要約すると、100mgのポリマーを10mLの超純水に溶解し、フェノールフタレインを指示薬として0.01NのNaOHにて滴定した。ポリマーの見かけの分配係数pKaも塩基の添加時に連続的にpHを測定しながらこの滴定法により決定した。pH対塩基容量のグラフから、pKaは当量点における塩基の容量の半量におけるpHとして計算した。ポリマー中の遊離アミン基は分光学的決定により推定した。量が既知であるポリマーを、0.01MのTNBSを含む2.0mLの炭酸水素ナトリウム水溶液(2.0w/v%)に溶解した。溶液を40℃にて2時間維持し、その後冷却して、特定の容量にて希釈した。サンプル中のTNBSで誘導体化されたアミン官能基の量は、標準品としてL−アラニンを採用して345nmにおけるUV−VIS分光光度計(UV−2501PC、シマズ社)を使用して決定した。
iv)透過率の測定
異なるpH値の緩衝溶液中のポリマーのLCSTは、温度を関数とした光学透過率の変化を監視することにより決定した。サンプル溶液(0.5wt%)は、中和したフタル酸緩衝液(pH5.0)、PBS(pH6.0、6.6及び7.4)並びにpHが9.0及び10.0であるアルカリ性ホウ酸塩緩衝液のような緩衝液中にて調製した。全ての緩衝液は、154mMのイオン強度にて調製した。ポリマー溶液の光学透過率は、温度コントローラ(TCC−240A、シマズ社)を使用したサーモスタットで制御された、サンプルセルを備えたUV−VIS分光光度計を使用して500nmにて測定した。加熱速度は、0.1℃/分に設定した。ポリマー溶液のLCST値は50%の光学透過率を示す温度に決定した。LCSTにおけるタンパク質の効果は10(w/v)%ウシ血清アルブミン(モデルタンパク質としてのBSA)の存在下においても調べた。
v)蛍光測定
PBS(pH7.4)におけるポリマーのCMC値は、ピレンをプローブとして蛍光分光法にて決定した。ピレン溶液のアリコート(アセトン中に1.54×10−5M,400μl)を10mLの容量フラスコに加え、アセトンを蒸発させた。1.0×10−5乃至1.0g/Lの範囲の濃度のポリマー溶液をPBSにて調製した。次いで、10mLの水溶性ポリマー溶液をピレン残渣が含まれた容量フラスコに加えた。サンプル溶液の全てには6.16×10−7Mである同一の濃度にて過剰のピレン含量が含まれていたことを明記したい。溶液は平衡となるように24時間室温(20℃)にて放置した。次に、ポリマー溶液の蛍光スペクトルを室温にて、LS50B発光分光計(パーキンエルマー社,アメリカ合衆国)にて記録した。放出スペクトルは350乃至500nmにて記録され、340nmに励起波長が存在していた。励起及び放出帯域幅はいずれも5nmに設定した。第3のバンド(391nm,l3)の第1のバンド(371nm,l1)に対する強度(ピーク高さ)比(l3/l1)は、ピレン放出スペクトルからポリマー濃度の関数として分析した。CMC値は、曲線の屈曲部における接線と、低濃度における地点を通る水平方向の接線との交点から求めた。
vi)ブランクの、及び薬物が装填されたコア−シェル・ナノ粒子の調製
ブランクのコア−シェル・ナノ粒子は、同ナノ粒子のサイズに対するpH及び温度の影響を調べるために調製した。ポリマーを0.5(w/v)%の濃度にてジメチルアセタミド(DMAc)に溶解し、次に室温にて2000の分子量カットオフ(Spectra/Por)膜を用いて24時間、0.02wt%HClと0.02wt%NaOHにてそれぞれ透析した。得られたナノ粒子溶液は、0.45μmのシリンジフィルタを用いてろ過した後に凍結乾燥し、更なる分析を行う前に4.0℃にて保存した。エフ.コホリら(前述)により報告されたものと同様のプロトコルを使用して、コア−シェル・ナノ粒子にDOXを装填した。簡単に述べると、7.5mgのDOXを3mLのDMAc中の2モルの過剰量のトリエチルアミンで中和し、薬物を溶解するために溶液を攪拌した。次に、15mgのポリマーを溶液に加えた。混合物を50mLの脱イオン水に対して48時間透析した。DOX装填ナノ粒子をろ過し、凍結乾燥した。DOXの装填量を決定するために、容量が既知のDOX装填ナノ粒子を1mLのメタノールに溶解して、次いでPBSを用いて希釈した。DOX濃度はUV−VIS分光光度計を使用して、485nmにて推定された。薬物の装填は、PBS(pH7.4)中のDOXから得られた標準曲線に基づいて計算した。
vii)動的光散乱(DLS)分析
異なるpHにて製造されたコア−シェル・ナノ粒子のサイズはHe−Neレーザビーム(670nm)が装備されたZetaPals(ブルックヘブンインスツルメンツ社(Brookhaven instruments corporations),アメリカ合衆国カリフォルニア州)を使用して分析した。各測定を5回繰り返して、良好な一致を見出した。5回の測定から平均値を得た。ナノ粒子のサイズはまた、同ナノ粒子の相可逆性を調べるために種々の温度にて測定した。再分散され、かつ凍結乾燥されたナノ粒子の安定性は、10(w/v)%ウシ血清アルブミン(BSA)を含むPBS(pH7.4)におけるそれらのサイズを測定することにより監視した。
viii)透過型電子顕微鏡(TEM)試験
コア−シェル・ナノ粒子の形態はTEMにより分析した。0.01(w/v)%のリンタングステン酸を含む新たに調製されたナノ粒子溶液の一滴をポリマーフィルムでコーティングされた銅グリッドにおいて、室温にて風乾した。TEM観察は、200keVの電子運動エネルギーを備えたJEM−2010顕微鏡にて実施した。
ix)細胞毒性試験
ポリマー溶液を原料濃度にて調製した。これらの溶液は、0.22μmのシリンジフィルタを用いて滅菌し、PBS(pH7.4)及び培養基を用いて希釈し、10、100、300及び400μg/mLの最終濃度のポリマーを得た。33.3μg/mLの濃度であるポリ(L−リジン)及びPEG(Mw8000)を陽性及び陰性の対照としてそれぞれ使用した。PBS(pH7.4)はブランクサンプルとして代わりに使用した。
x)インビトロ薬物放出試験
ナノ粒子からのDOXの放出は、pH6.0、6.6及び7.4にて試験した。所定量のDOX装填凍結乾燥ナノ粒子を200μLの対応する緩衝液に分散し、2000の分子量カットオフ透析膜(Spectra/Por)に配置する前に30分間安定化させた。次に透析バッグをpHが6.0、6.6又は7.4である25mLのPBSに37℃にて浸漬した。サンプルを特定の時間間隔にて採取し、本実施例のパラグラフA(vi)に記載されているように、UV−VIS分光光度計を用いて薬物濃度を分析した。
B)結果及び考察
i)ポリマー合成及び特徴化
コポリマーの合成及び特徴化における概要を表1に示した。これらの反応において、NIPAAmのDMAAmに対する供給モル比は変更したが10−ウンデセン酸の含量は一定とした。CTAをモノマー供給量の0.2及び0.4モル%にて使用した。重合化はチオールラジカルにより開始され、以下の式に従って、AET.HClと過硫酸イオンとの反応から形成された:
ii)ポリマーのLCST及びpH及びタンパク質の影響
PNIPAAmは水中で32℃の明確なLCSTを示した。LCSTは導入する疎水性又は親水性モノマーを介して調整され得る。この研究において合成されたポリマーは疎水性セグメントとしてポリ(10−ウンデセン酸)を含んでいる。従って、環境pHはカルボン酸基によって10−ウンデセン酸セグメントの疎水性に影響を与え、最終的にはポリマーのLCSTに影響を与える。図4乃至6は、異なるpH値を有する緩衝溶液中の0.5wt%濃度のポリマーの温度の関数とした場合の光学透過率の変化を示す。DLS分析から、緩衝液中のポリマーは0.5wt%の濃度にてコア−シェル・ナノ粒子内に自己アセンブリした。NIPAAm/DMAAm/UA比が4.00:1.00:0.5であるポリマーIから自己アセンブリされたコア−シェル・ナノ粒子のLCSTは、pH6.0、6.6及び7.4において、それぞれ32.5℃、33.0℃及び33.2℃であった(図4)。しかしながら、pH5.0においてLSCTは27.8℃まで急激に減少した、親水性のDMAAmセグメントの長さが増大しているポリマーII(NIPAAm:DMAAm:UA比=3.75:1.25:0.5)の場合、全てのpH値におけるコア−シェル・ナノ粒子のLCSTは、ポリマーIと比較して増大した(図5)。pH値はポリマーIIナノ粒子のLCSTに大きな影響を与えた。例えば、pH9.0及び7.4において、LCSTはそれぞれ40.5℃及び38.5℃であり、通常の体温以上であることがわかった。しかしながら、pH6.6及び5.0において、LCSTは35.5℃及び35.2℃までそれぞれ減少し、それは通常の体温よりはるかに小さい値であった。仮にナノ粒子が十分に分離されたコア−シェル構造体であるか、或いはコアが十分に剛性である場合、ナノ粒子のLCSTは、pH感受性部分が疎水性セグメントにあるので環境のpHにより影響を受けないであろう。これらのポリマーから形成されたコア−シェル・ナノ粒子は、ゆるく集合されているのであろう。従って、ナノ粒子のコアは外部環境に十分にアクセスできるであろう。外部環境のpHが増大すると、10−ウンデセン酸セグメントのカルボン酸基が更に脱プロトン化されるので、10−ウンデセン酸セグメントの疎水性が低減する。これはポリマーのLCSTにおける増大を生じ、よってナノ粒子のLCSTが増大する。ポリマーI及びポリマーIIは類似した含量のカルボン酸基を有しているにも関わらず、ポリマーIIのpH感受性におけるカルボン酸基の脱プロトンの影響はポリマーIに対するものよりもより重要であった。それは、ポリマーIがより大きな分子量を有することによるのかもしれない。LCSTを超える熱力学的な相分離は混合の低エントロピーに起因するので、混合のエントロピーは分子量の増大とともに減少する(スタイル(Stile)ら、Biomacromolecules、3、2002年、591−600頁、レッサード(Lessard)ら、Can.J.Chem.、79、2001年、1870−1874頁)。これは分子量がポリマーのpH感受性に影響を与える重要な因子であることを示している。
iii)ポリマーIIのCMC
CMCはコア−シェル・ナノ粒子の安定性を特徴付ける重要なパラメータである。CMCより上では、両親媒性のポリマー分子はコア−シェル構造化ナノ粒子に自己アセンブリされ得る。ポリマーIIナノ粒子の水中における疎水性微細環境をプローブとしてピレンを使用した蛍光光度法により調べた。I3のI1に対する比率は、ポリマー濃度の関数として監視された。図8はポリマーIIに対するI3/I1のプロットを示す。ピレンがより疎水性の環境に配置されている場合に高い比率が得られる(ドン(Dong)ら、Can.J.Chem.、62、1984年、2560−2565頁)。ピレンのこの特徴は、コア−シェル・ナノ粒子の形成及び変形を研究するために使用され得る。CMC値は約10.0mg/Lであると決定された。コア−シェル・ナノ粒子の形成後のI3/I1における変化は、小さいことを明記する。これは、UAセグメントのカルボキシル基の存在及び/又は不十分な疎水性によりコアがゆるく集合されていることによるものであろう。
iv)pH及び温度変化により誘引されたポリマーIIナノ粒子のサイズの変化
ポリマーIIナノ粒子のサイズは、pH依存性であることがわかった。0.02wt%のHCl溶液において、ポリマーIIナノ粒子の平均粒子径は約319nmであり、0.02wt%のNaOH溶液においては、ナノ粒子のサイズは約240nmまで減少した。酸性溶液において形成されたかなり大きなサイズのナノ粒子は、低pHにてUAの疎水性が大きくなることにより、酸性溶液中のナノ粒子はより多くの凝集体を含んでいたことを示している。一方、高pHにおける脱プロトン化カルボン酸の反発は凝集体の程度を小さくし、より小さなサイズの粒子となる。DOXが装填されたナノ粒子の平均サイズは、約160−200nmであり、図9に示されるように狭い粒度分布を有している。TEMの写真(図10)から、ナノ粒子のサイズは、固体状態では約50−60nmであり、それはポリマーのフリーの親水性セグメントの崩壊及びポリマー鎖の脱水によるものであろう。一方、ナノ粒子は、37℃(LCST未満)でpH7.4の場合に安定であり、かつサイズは約265nmであった。溶液を40℃(LCSTを超える)まで加熱すると、凝集によりサイズは約988nmまで増大した。この凝集体は冷却することにより再分散し、もとの値までサイズが低減した。同様の現象は、pH6.6におけるナノ粒子においても観察された。これらの結果は、コア−シェル・ナノ粒子がpH及び温度の両方に感受性を有していたという事実を更に支持するものである。pH及び温度の反応は可逆的であった。
v)ポリマーIIの細胞毒性試験
L929細胞は10乃至400mg/L(ppm)の濃度にてポリマーにさらされた。図11から、陰性対照と比較した場合、ポリマーIIサンプルにはいかなる重要な細胞毒性も認められなかった。72時間までは、ポリマーIIのサンプルの全ては陽性対照よりも細胞毒性が小さかった。
vi)インビトロ放出
この試験にて使用された製造条件下において、DOXの実際の装填量は約2.7重量%であった。インビトロ薬物放出試験は腫瘍のpHを刺激する僅かに酸性の環境(pH6.0及び6.6)と、生理学的な環境(PBS,pH7.4)にて実施した。DOXの放出プロファイルを図12に示した。37℃でpH7.4におけるナノ粒子からの薬物放出は、最初の約18%の破裂を伴い、かなりゆっくりであった。この最初の破裂は、ナノ粒子のシェルに存在している薬物分子によるものであろう。しかしながら、薬物の放出は、37℃で、pH6.0及び6.6でははるかに早かった。約70%の薬物が、実験の48時間以内にて放出した。加えて、薬物装填ナノ粒子はpH7.4の緩衝液中では良好に分散されたが、pH6.0及び6.6では透析バッグの底部に凝集し、沈んでいた。これらの結果は、ナノ粒子は実際にはpH感受性であり、7.4のpHから6.6又は6.0のpHへの僅かな変化が薬物装填コア−シェル・ナノ粒子の変形及び沈殿を生じ、それにより封入された薬物成分が放出されたことを示している。加えて、DOXの透析バッグからの放出をpH7.4及び6.0において調べた。pHによる顕著な効果は観察されなかった。そのことは、DOXのナノ粒子からのpH依存性の溶出は、薬物の溶解度よりも、むしろ主としてナノ粒子のpH応答性によるものであることが更に確認できた。
C)結論
種々の組成物を備えた両親媒性の三元共重合体である、ポリ(N−イソプロピルアクリルアミド−コ−N,N−ジメチルアクリルアミド−コ−10−ウンデセン酸)はフリーのアミン末端基を用いたフリーラジカル溶液の重合化により合成した。NIPAAm/DMAAm/UA比が3.75:1.25:0.5であるポリマーから自己アセンブリされたコア−シェル・ナノ粒子は、pH7.4において通常の体温よりも十分に高いLCSTであり、僅かに酸性の環境においては通常の体温よりもはるかに低いLCSTであった。ポリマーは72時間までの期間においては顕著な細胞毒性は示さなかった。DOX装填ナノ粒子は、37℃かつpH7.4にて安定であり、サイズは約160−200nmであった。しかしながら、pH6.0及び6.6において、ナノ粒子の構造は変形され、それにより封入されていた薬物分子は放出する。これらの特徴は、ナノ粒子の選択的な蓄積と、酸性の腫瘍組織における薬物な選択的な放出とを助けるであろう。合成されたポリマーの更なる1つの利点はポリマーがフリーのアミン官能基を備えていることであり、それにより活性的な標的化に対して生物学的なシグナルを取り付けることによりポリマーの更なる修飾を可能にするであろう。
A)実験の部
i)材料
ポリ(N−イソプロピルアクリルアミド−コ−N,N−ジメチルアクリルアミド−コ−10−ウンデセン酸)[P(NIPAAm−co−DMAAm−co−UA),ポリマーII]は実施例1に説明したようにフリーラジカル重合化により合成した。葉酸二水和物、N−ヒドロキシスクシニミド(NHS)、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、ジメチルスルホキシド(DMSO)はシグマアルドリッチ社から購入した。パクリタキセルはメルク(Merck)社から購入した。
ii)葉酸のP(NIPAAm−co−DMAAm−co−UA)への結合及び葉酸のコレステロールでグラフト化されたP(NIPAAm−co−DMAAm−co−UA)への結合
葉酸のNHSエステル(NHS−葉酸塩)は以下の方法にて調製した:葉酸(100mLのDMSO及び2.5mLのトリエチルアミンに5mgを溶解したもの)は、DCC(4.7g)の存在下にて室温にて一晩、N−ヒドロキシスクシニミド(2.6g)と反応させた。副産物であるジシクロヘキシルウレアをろ過にて除去した(図13,スキーム2に示されるように)。葉酸とポリマーIIを結合する(Poly−FA)ために、DMSO中の活性化NHS−葉酸塩をPBS緩衝液(pH7.4)中のポリマーIIに加え、室温にて5時間一定に攪拌した(図14,スキーム3)。葉酸−結合ポリマーはPBS緩衝液(pH7.4)の存在下にて24時間透析することにより精製され、次に2000の分子量カットオフ透析膜(Spectra/Por)を用いて24時間超純水にて精製した。ポリマーを凍結乾燥して、更なる使用のために気密容器に保存した。葉酸はまた、コレステロールでグラフト化されたポリマーIIと結合した(Poly−CH−FA)。コレステロールでグラフト化されたポリマーII(Poly−CH)は、NHSで活性化されたポリマーII(工程は、ポリマーIIとNHSとDCCがそれぞれ1:2:2のモル比のものを使用することによる葉酸の活性化に類似する)を含水アルコール溶液中の等モル濃度のコレステロールと室温にて48時間反応させることにより合成した(図15、スキーム4)。
iii)薬物装填ポリマー−CH−FAコア−シェル・ナノ粒子の調製
ドキソルビシンは以下のようにコア−シェル・ナノ粒子に装填した:7.5mg又は5.0mgのDOXを3mLのDMAc又はDMFに攪拌しながら溶解した。次に、15mgのポリマーを溶液中に溶解した。混合物を500mLの脱イオン水にて48時間透析した。DOXの装填量を決定するために、量が既知のDOX装填ナノ粒子を1mLのメタノールに溶解して、PBSにて希釈した。DOXの濃度はUV−VISを用いて推定した。初期の試験はまた、水に不溶性の抗癌剤であるパクリタキセルをコア−シェル・ナノ粒子に装填することによっても実施した。簡単に述べると、15mgのポリマー及び2.5mgのパクリタキセルを3mLのDMFに溶解し、ポリマー薬物溶液を超純水の存在下にて24時間透析した。薬物装填ナノ粒子は0.45μmの孔サイズを有するディスクフィルタにてろ過し、凍結乾燥した。パクリタキセルの装填量を決定するために、1mLのクロロホルム中にナノ粒子に溶解することにより、ポリマー性ナノ粒子からパクリタキセルを抽出し、ポリマーを2mLのジエチルエーテルを加えることにより沈殿させた。遠心分離後、上澄み液を回収し、乾燥し、HPLCで分析した(ウォーターズ(Waters)社,モデル2690、C8 15×4.6cmカラム)。移動相は、20mMの酢酸アンモニウムとアセトニトリルとメタノールとが35:45:20の容積比で構成されている。標準パクリタキセル溶液は5乃至100ppmの範囲の濃度にてメタノール中に調製した。
B)結果及び考察
葉酸はポリマーIIとコレステロールでグラフト化したポリマーIIとの結合に成功した。これはNMR試験により確認した(図16及び17)。葉酸の結合が成功したことは、葉酸分子の芳香性プロトン2,6及び3,5からのδ6.6−6.8及びδ7.5−7.7におけるプロトンシグナルの存在によって証明された(図14、スキーム3)。ポリマーIIへのコレステロールの結合はまた、コレステロールの5つのCH3基からのプロトンシグナル(δ0.6−1.1)から証明された。
C)結論
腫瘍細胞への活性標的化シグナル(葉酸)を備えたコア−シェル・ナノ粒子を合成した。ナノ粒子はpH感受特性を保持し、細胞毒性は低かった。二つの抗癌剤をコア−シェル・ナノ粒子に装填した。薬物の粒子径及び装填量は製造条件を変更することにより操作可能であった。
i)ドキソルビシンのコポリマーへの結合
ポリマーIIを反応性の官能基を有する薬物にも結合した。ドキソルビシン(図23)は、カルボジイミド化学により結合され、ドキソルビシンのアミン基が図24に示されるようにポリマーIIのカルボキシル基に結合されている。簡単に述べると、ドキソルビシン結合ポリマーII(Poly−DOX)は、NHSで活性化されたポリマーII(工程は実施例2に記載された葉酸の活性化に類似する)とリン酸塩緩衝液(pH7.4)中のドキソルビシン(その濃度はポリマーIIの2倍であった)との室温による48時間の反応により合成した。2000の分子量カットオフの透析膜を用いた超純水存在下における48時間の透析と、それに続く凍結乾燥により血のように赤い生成物が得られた。ゲル透過クロマトグラフィーからポリマーIIの分子量はMw:9051,Mn:6781からMw:11129,Mn:9118まで増大し、図25に示されるように保持時間の減少が確認された。更に、結合物の示差走査熱量測定は、ドキソルビシンの202℃の融点が遷移していないことを示しており(図26に示されるように)、それは薬物がポリマー鎖の一部であったことを示す。
ii)ドキソルビシン結合ポリマーIIからのミセルの製造
薬物のポリマー鎖上への結合の後に、ポリマーが水に比較的不溶性であることが観察された。このポリマーを使用して、透析及び溶媒蒸発法によりコア−シェル・ナノ粒子(ミセル)を調製することを試みた。ポリマーがより疎水性である場合、ポリマーの沈殿及び800−1000nmの範囲であるより大きな粒子の形成が起こるので、透析は適切な方法ではなかった。しかしながら、溶媒蒸発法を使用することにより、280nmの平均粒子径を有するミセルを製造することができた。溶媒蒸発法の工程は以下のとおりである:15mgの結合ポリマーを4mLのジメチルアセタミドと1mLのジクロロメタンに溶解し、ポリマー溶液を20mLの超純水中にて乳化し、5分間超音波処理した。溶媒を蒸発し、溶液を遠心分離して、粒子径を測定した。薬物のミセルに対する結合は、ポリマーのpHに誘引された温度感受性により変更できた。38℃を超える(LCSTを超える)と粒子径が減少し、それはpH7.4における温度感受性セグメントの崩壊によるものであると思われる。この現象は可逆的かつ再生可能であることがわかった(図27)。
ポリマーIIのブロックコポリマーの合成は、温度感受性/親水性セグメントと、pH感受性脂肪酸セグメントとを別々に合成することにより実施され、それらは次に図28及び29に示されるようにブロックコポリマーを形成するために結合された(スキーム5及び6)。簡単に述べると、温度感受性セグメントはモノマー比が3.75:1.25である精製したN−イソプロピルアクリルアミド及びN,N’−ジメチルアクリルアミドを、開始剤であるアゾビスイソブチロニトリルの存在下において、40mLのアルコール中の連鎖移動剤,2−アミノエタンチオール塩酸塩(AET.HCl)との、70℃における24時間の反応により合成した。ポリマーはクロロホルム中に溶解して、ジエチルエーテル中にて沈殿することにより、精製した。ポリマーの分子量はGPCにより分析され、Mw11221であることが明らかとなった。一方、ポリ(10−ウンデセン酸)は、過硫酸アンモニウム(0.8g)の存在下においてモノマーのナトリウム塩(0.097mol)を水中にて70℃で24時間反応することにより合成した。ポリマーを冷エタノールの存在下にて沈殿させた。ポリ(10−ウンデセン酸)はDCCの存在下にてNHSにより活性化され、この製品は更に水中にて、アルカリ性のpHにて温度感受性ブロックと結合した。ポリマー分子量はMw29117であった(図30)。ブロックポリマーはLCSTを測定することによりそのpH及び温度に対する感受性を測定した。図31に示されるように、ブロックコポリマーは実際にpH及び温度に感受性であることが確認された。ブロックコポリマーのPBS(pH7.4)におけるLCSTは39.5℃であり、ポリ(10−ウンデセン酸)でブロックされた場合38.5℃まで減少した。ブロックコポリマーはpH6.0では36.7℃のLCSTを示した。
Claims (40)
- 少なくとも3つの型のモノマー単位からなるコポリマーであって、前記3つの型のモノマー単位は、
温度感受性単位と、
親水性単位と、
少なくとも1つのpH−感受性部分を含む疎水性単位と、からなり、
前記疎水性モノマー単位は共重合可能な不飽和脂肪酸に由来する、コポリマー。 - 前記脂肪酸は5乃至50又はそれ以上の主鎖炭素原子を含む、請求項1に記載のコポリマー。
- 前記脂肪酸は1つの炭素−炭素二重結合(モノ不飽和)を含む、請求項2に記載のコポリマー。
- 前記脂肪酸は、(E)−9−オクタデセン酸、(Z)−9−オクタデセン酸、(Z)−11−オクタデセン酸、(E)−9−ヘキサデセン酸、(Z)−9−ヘキサデセン酸、(Z)−9−テトラデセン酸、(Z)−11−エコセン酸、(Z)−13−ドコセン酸及び(Z)−15−テトラコセン酸からなる群より選択される、請求項3に記載のコポリマー。
- 前記脂肪酸はオメガ−1脂肪酸である請求項3に記載のコポリマー。
- 前記脂肪酸は、4−ペンテン酸、7−オクテン酸、10−ウンデセン酸、15−ヘキサデセン酸及び19−エコセン酸からなる群より選択される、請求項5に記載のコポリマー。
- 前記脂肪酸は少なくとも二つの炭素−炭素二重結合(ポリ不飽和)を含む、請求項2に記載のコポリマー。
- 前記脂肪酸は、(E,E)−9,12−オクタデカジエン酸、(Z,Z)−9,12−オクタデカジエン酸、(E,E)−9,11−オクタデカジエン酸、(Z、Z,Z)−9,12,15−オクタデカトリエン酸、(Z、Z,Z)−6,9,12−オクタデカトリエン酸、(Z,Z,Z,Z)−6,9,12,15−オクタデカテトラエン酸、(Z,Z)−11,14−エコサジエン酸、(Z,Z,Z)−5,8,11−エイコサトリエン酸、(Z,Z,Z)−11,14,17−エイコサトリエン酸、(Z,Z,Z)−8,11,14−エイコサトリエン酸、(Z,Z,Z,Z)−8,11,14,17−エイコサテトラエン酸、(Z,Z,Z,Z)−5,8,11,14−エイコサテトラエン酸、(Z,Z,Z,Z,Z)−5,8,11,14,17−エイコサペンタエン酸、(Z,Z)−13,16−ドコサジエン酸、(Z,Z,Z)−13,16,19−ドコサトリエン酸、(Z,Z,Z,Z)−7,10,13,16−ドコサテトラエン酸、(Z,Z,Z,Z,Z)−4,7,10,13,16−ドコサペンタエン酸、(Z,Z,Z,Z,Z)−7,10,13,16,19−ドコサペンタエン酸、(Z,Z,Z,Z,Z、Z)−4,7,10,13,16,19−ドコサヘキサエン酸及び(Z,Z,Z,Z,Z,Z)−6,9,12,15,18,21−テトラコサヘキサエン酸からなる群より選択される、請求項7に記載のコポリマー。
- 前記温度感受性モノマー単位は、N−アクロイルピペラジン、N−t−ブチルアクリルアミド、N−ピペリジル−メタクリルアミド及びN−イソプロピルアクリルアミドからなる群から由来する、請求項1に記載のコポリマー。
- 前記親水性モノマー単位は、アクリル酸、アクリルアミド、アクリレート、ピロリドン、エチレングリコール及びそれらの置換された誘導体からなる群から由来する、請求項1に記載のコポリマー。
- 前記アクリルアミドは、アクリルアミド(AAm)、N,N’−ジメチルアクリルアミド(DMAAm)及びN−(ヒドロキシメチル)アクリルアミドからなる群より選択される、請求項10に記載のコポリマー。
- 終端部、リガンド、薬物、タグ、ラジオイムノ結合体、化学的部分及びスペーサからなる群より選択される少なくとも1つの部分からなる末端基をさらに含む、請求項1に記載のコポリマー。
- 前記終端部は水酸基、カルボキシル基及びアミノ基からなる群より選択される官能基を含む、請求項12に記載のコポリマー。
- 前記終端部は、連鎖移動剤又は官能基移動剤により導入される、請求項13に記載のコポリマー。
- 前記終端部は、リビング重合法により導入される、請求項13に記載のコポリマー。
- 前記終端部は、前記ポリマーのモノマー単位の一部である、請求項13に記載のコポリマー。
- 前記連鎖移動剤は、クロロホルム、四塩化炭素、アルキル−メルカプタン、アミノエタンチオール、メルカプト−プロピオン酸、メルカプト−コハク酸、チオグリコール酸、メルカプトエタノール及びその第2級アルコール、アルキルハライド及び5未満の酸化数を有するリン酸塩、からなる群より選択される、請求項14に記載のコポリマー。
- 前記アルキル−メルカプタンは、オクタンチオール、デカンチオール、n−ドデカンチオール又はt−ドデカンチオールからなる群より選択される、請求項17に記載のコポリマー。
- 前記リガンドは、前記終端部の官能基に直接取り付けられる請求項12に記載のコポリマー。
- 前記リガンドは、スペーサにより前記終端部に取り付けられる、請求項12に記載のコポリマー。
- 前記スペーサは10を超える主鎖原子を含む、請求項20に記載のコポリマー。
- 前記リガンドは、小さな標的分子、タンパク質、ペプチド及び炭水化物からなる群より選択される、請求項21に記載のコポリマー。
- 前記スペーサはポリ(エチレングリコール)及びポリ(プロピレングリコール)からなる、請求項21に記載のコポリマー。
- 前記コポリマーはランダムコポリマーである、請求項1に記載のコポリマー。
- 前記コポリマーはブロックコポリマーである、請求項1に記載のコポリマー。
- 温度及びpHに感受性の組成物であって、
治療剤と、
コポリマー、とからなり、
前記コポリマーは少なくとも3つの型のモノマー単位からなり、同3つの型のモノマー単位は、
温度感受性単位と、
親水性単位と、
少なくとも1つのpH−感受性部分を含む疎水性単位と、からなり、かつ
前記疎水性モノマー単位は共重合可能な不飽和脂肪酸に由来する組成物。 - 前記治療剤は、抗癌剤、抗炎症剤及び神経疾患を治療するための薬物からなる群より選択される、請求項26に記載の組成物。
- 前記抗癌剤は、ドキソルビシン、アナストロゾール、エキセメスタン、シクロホスファミド、エピルビシン、トレミフェン、レトロゾール、トラスツズマブ、メゲストロール、ノルバデックス、パクリタキセル、ドセタキセル、カペシタビン、酢酸ゴセレリン、ヒドロキシウレア、エリスロマイシン、シクロスポリン及びシスプラチンからなる群より選択される、請求項27に記載の組成物。
- 前記コポリマーの分子量は、40000未満である、請求項26に記載の組成物。
- 前記コポリマーの下限臨界溶液温度は7.2未満のpHでは37℃よりも小さい、請求項26に記載の組成物。
- 前記コポリマーの下限臨界溶液温度は通常の生理学的pHであるpH7.4において37℃よりも大きい、請求項26に記載の組成物。
- 前記コポリマーに存在する、温度感受性モノマー単位と親水性モノマー単位と少なくとも1つのpH感受性部分を含む疎水性モノマー単位とのモル比は、約3.75:1.25:0.5である、請求項26に記載の組成物。
- 動物又はヒトに選択された治療剤を提供する方法において、
前記動物又はヒトに温度及びpH感受性の組成物を投与する工程を含み、前記組成物は、
治療剤と、
コポリマー、とからなり、
前記コポリマーは少なくとも3つの型のモノマー単位からなるコポリマーであり、同3つの型のモノマー単位は、温度感受性単位と、親水性単位と、少なくとも1つのpH−感受性部分を含む疎水性単位と、からなり、かつ前記疎水性モノマー単位は共重合可能な不飽和脂肪酸に由来し、
前記コポリマーは、疎水性コア及び親水性シェルからなる少なくとも1つのナノ粒子に調製され、かつ前記治療剤は前記疎水性コア内に包含される、方法。 - 前記組成物は経口にて送達される、請求項33に記載の方法。
- 前記組成物は局所的に送達される、請求項33に記載の方法。
- 前記組成物は静脈内投与にて送達される、請求項33に記載の方法。
- 前記組成物は局所に送達される、請求項33に記載の方法。
- 前記組成物は非経口的に送達される、請求項33に記載の方法。
- 前記組成物は吸入にて送達される、請求項33に記載の方法。
- 前記組成物は眼を介して送達される、請求項33に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US10/865,681 | 2004-06-10 | ||
US10/865,681 US7316816B2 (en) | 2004-06-10 | 2004-06-10 | Temperature and pH sensitive copolymers |
PCT/SG2005/000164 WO2005121196A1 (en) | 2004-06-10 | 2005-05-24 | Novel temperature and ph sensitive copolymers |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008502785A true JP2008502785A (ja) | 2008-01-31 |
JP2008502785A5 JP2008502785A5 (ja) | 2011-03-17 |
JP4874969B2 JP4874969B2 (ja) | 2012-02-15 |
Family
ID=35461359
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007527146A Expired - Fee Related JP4874969B2 (ja) | 2004-06-10 | 2005-05-24 | 新規な温度及びpHに感受性の両親媒性コポリマー、同コポリマーを含む組成物及び同コポリマーの医薬品の製造における使用方法 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US7316816B2 (ja) |
EP (1) | EP1765894B9 (ja) |
JP (1) | JP4874969B2 (ja) |
CN (1) | CN100582130C (ja) |
AT (1) | ATE551371T1 (ja) |
WO (1) | WO2005121196A1 (ja) |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008534732A (ja) * | 2005-04-13 | 2008-08-28 | スンキュンクヮン・ユニバーシティ・ファウンデーション・フォー・コーポレート・コラボレーション | 新規な温度及びpH感受性のブロック共重合体及びこれを用いた高分子ヒドロゲル |
JP2009269846A (ja) * | 2008-05-02 | 2009-11-19 | Osaka Prefecture Univ | 温度感受性リポソーム |
JP5800323B2 (ja) * | 2010-03-23 | 2015-10-28 | 国立大学法人九州大学 | 温度、pH及び塩濃度感応性分離材及びその用途 |
JP2015218304A (ja) * | 2014-05-20 | 2015-12-07 | キリン株式会社 | 細胞内の温度を測定するためのレシオ型蛍光性プローブ |
WO2018025767A1 (ja) * | 2016-08-03 | 2018-02-08 | 東ソー株式会社 | ブロック共重合体およびそれを用いた表面処理剤 |
JP2018154752A (ja) * | 2017-03-17 | 2018-10-04 | 東ソー株式会社 | 共重合体およびその製造方法 |
JP2019531387A (ja) * | 2016-10-07 | 2019-10-31 | フォルシュングスツェントルム ユーリッヒ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングForschungszentrum Juelich GmbH | 脂質膜を通した合成ポリマーのトランスロケーション |
Families Citing this family (42)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7316816B2 (en) * | 2004-06-10 | 2008-01-08 | Agency For Science Technology And Research | Temperature and pH sensitive copolymers |
US8021689B2 (en) * | 2006-02-21 | 2011-09-20 | Ecole Polytechnique Federale de Lausanne (“EPFL”) | Nanoparticles for immunotherapy |
CN101501108A (zh) * | 2006-07-05 | 2009-08-05 | 新加坡科技研究局 | 用于药物递送的胶束 |
WO2008071661A1 (en) * | 2006-12-12 | 2008-06-19 | Unilever Plc | Polymers |
KR100868724B1 (ko) | 2007-05-30 | 2008-11-13 | 한국생산기술연구원 | 가역적 온도감응성을 가지는 자기집합성 나노운반체의제조방법 |
GB0712482D0 (en) * | 2007-06-27 | 2007-08-08 | Eastman Kodak Co | Thermally-responsive dispersants for media formulations |
AP2941A (en) * | 2007-07-19 | 2014-07-31 | Allexcel Inc | Self-assembling amphiphilic polymers as anticanceragents |
US9987221B2 (en) * | 2007-08-23 | 2018-06-05 | Boston Scientific Scimed, Inc. | Injectable hydrogel compositions |
JP2010539245A (ja) * | 2007-09-14 | 2010-12-16 | 日東電工株式会社 | 薬物担体 |
US8703194B2 (en) * | 2007-11-02 | 2014-04-22 | Agency For Science, Technology And Research | Stimulus-responsive biodegradable polymers and methods of preparation |
US8597269B2 (en) * | 2008-04-11 | 2013-12-03 | Medtronic Minimed, Inc. | Reservoir seal retainer systems and methods |
FR2930444B1 (fr) * | 2008-04-29 | 2010-06-04 | Servier Lab | Micelles polymerisees |
EP2128180A1 (en) * | 2008-05-29 | 2009-12-02 | Unilever N.V. | Amphiphilic branched polymers and their use as emulsifiers |
US8318207B2 (en) * | 2009-02-12 | 2012-11-27 | University Of South Carolina | Encapsulation and controlled release of small molecules for intracellular delivery using thermally responsive nanocapsules |
CN101649034B (zh) * | 2009-08-31 | 2011-05-25 | 苏州大学 | pH/温度响应的双亲水性嵌段共聚物及其制备方法 |
JP5472072B2 (ja) * | 2010-01-13 | 2014-04-16 | 信越化学工業株式会社 | ネガ型レジスト組成物及びパターン形成方法 |
WO2012174287A1 (en) * | 2011-06-15 | 2012-12-20 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Luminescent nanoparticle compositions |
TWI462753B (zh) * | 2011-11-29 | 2014-12-01 | Univ Nat Chiao Tung | 雙乳化核殼奈米結構及其製備方法 |
CA2875880C (en) | 2012-06-07 | 2020-12-15 | The University Of Queensland | Release media comprising polymer particles and functionalised stimulus responsive polymers |
CN102964547B (zh) * | 2012-12-05 | 2014-07-09 | 南通大学 | 一种嵌段结构pH响应型糖基智能水凝胶及其制备方法 |
CN103694426B (zh) * | 2013-11-25 | 2015-10-21 | 同济大学 | 一种含碱基对的多重响应型聚合物的制备方法 |
WO2015082656A1 (en) * | 2013-12-04 | 2015-06-11 | Nexdot | Nanoparticles complexed with functionalizable enhanced affinity ligands and use thereof |
US10953110B2 (en) | 2014-04-25 | 2021-03-23 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Dual emissive metal nanoparticles as ratiometric pH indicators |
SG11201610433PA (en) * | 2014-06-13 | 2017-01-27 | Agency Science Tech & Res | A copolymer and a micellar particle comprising the copolymer |
CN104382851B (zh) * | 2014-10-17 | 2018-12-28 | 南开大学 | 一种智能靶向载药复合胶束的制备方法 |
JP6721603B2 (ja) * | 2015-03-04 | 2020-07-15 | ダウ グローバル テクノロジーズ エルエルシー | 固体混合物からの難水溶性物質の効果的な可溶化のための賦形剤としてのコポリマー |
CN105131199B (zh) * | 2015-08-28 | 2018-01-23 | 吴奇 | 一种制剂及其制备方法与应用 |
JP2020502226A (ja) * | 2016-12-23 | 2020-01-23 | コモンウェルス サイエンティフィック アンド インダストリアル リサーチ オーガナイゼーション | 薬物の標的送達のための生体適合性の親水性ポリマーコンジュゲート |
CN106977674B (zh) * | 2017-03-09 | 2018-12-21 | 浙江理工大学 | 一种pH响应型抗菌聚合物纳米颗粒及其制备方法 |
US11911532B2 (en) | 2017-03-29 | 2024-02-27 | The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate | Reverse thermal gels and their use as vascular embolic repair agents |
CN107432934A (zh) * | 2017-04-24 | 2017-12-05 | 合肥工业大学 | 一种嵌段型支化聚合物药物载体及其制备方法和应用 |
CN107397959B (zh) * | 2017-07-28 | 2020-10-16 | 国家纳米科学中心 | 一种表面具有超微结构的纳米拮抗剂的制备方法和应用 |
CN110538618B (zh) * | 2018-05-28 | 2022-01-14 | 浙江工业大学 | 一种以核壳结构微凝胶作为开关的温度和pH双响应智能开关膜的制备方法 |
US20220162398A1 (en) * | 2019-04-12 | 2022-05-26 | The Regents Of The University Of Michigan | Tri-block copolymers and nano-fibrous gelling microspheres including the same |
CN111269365B (zh) * | 2019-04-15 | 2021-04-27 | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 | 一种温敏Wulff型硼亲和纳米颗粒及其制备方法与用途 |
CN111595954B (zh) * | 2019-11-18 | 2022-07-15 | 远大医药(中国)有限公司 | 吲达帕胺原料药中dcc和dcu含量的检测方法 |
TW202203964A (zh) | 2020-04-17 | 2022-02-01 | 小利蘭史丹佛大學董事會 | 用於生物醫藥調配物之聚合物賦形劑 |
CN114105703A (zh) * | 2021-12-17 | 2022-03-01 | 宁波大学 | 一种缓释抑菌型氨基酸水溶肥及其制备方法 |
CN114917398A (zh) * | 2022-05-06 | 2022-08-19 | 深圳市世格赛思医疗科技有限公司 | 一种可收缩伤口的组织粘合材料及其制备方法与应用 |
WO2023230078A1 (en) * | 2022-05-23 | 2023-11-30 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Antibody biopharmaceutical formulations including polymer excipients |
WO2024006539A1 (en) * | 2022-07-01 | 2024-01-04 | Vitakey Inc. | Nutraceutical particles |
CN116178699A (zh) * | 2022-09-09 | 2023-05-30 | 浙江大学医学院附属第一医院 | 一种可促进药物入胞的药物递送载体材料及其制备方法和应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH08311290A (ja) * | 1995-05-23 | 1996-11-26 | Showa Denko Kk | 吸液材料用組成物、吸液材料成形体およびその製造方法 |
WO2004007578A1 (en) * | 2002-07-10 | 2004-01-22 | Meadwestvaco Corporation | Carboxylic acid-modified vinylic polymeric compositions |
WO2004020489A2 (en) * | 2002-08-27 | 2004-03-11 | Meadwestvaco Corporation | Rosin-fatty acid vinylic polymer compositions |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3925542A (en) * | 1965-03-03 | 1975-12-09 | Oreal | Hair lacquer and wave setting compositions containing vinyl acetate-crotonic acid-containing polymers |
US4625005A (en) | 1984-03-28 | 1986-11-25 | Japan Synthetic Rubber Co., Ltd. | Multi-component copolymer rubber, a process for producing the same, and a rubber composition containing the multi-component copolymer rubber |
US5108568A (en) | 1989-07-07 | 1992-04-28 | The United States Of America As Represented By The Administrator Of The National Aeronautics And Space Administration | Controlled method of reducing electrophoretic mobility of macromolecules, particles or cells |
US5141835A (en) * | 1990-05-10 | 1992-08-25 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Liquid developer for electrostatic photography |
US5226902A (en) * | 1991-07-30 | 1993-07-13 | University Of Utah | Pulsatile drug delivery device using stimuli sensitive hydrogel |
JP3069982B2 (ja) * | 1991-12-18 | 2000-07-24 | 昭和電工株式会社 | 高分子ゲルおよびその製造方法 |
ZA97248B (en) * | 1996-01-18 | 1997-07-18 | Rohm & Haas | Method for identifying and quantifying polymers utilizing immunoassay techniques |
FR2762394B1 (fr) * | 1997-04-16 | 1999-05-28 | Bio Merieux | Compose ligand de coordination et utilisation pour fixer un materiel biologique |
DE19811919A1 (de) * | 1998-03-18 | 1999-09-23 | Basf Ag | Verwendung von Copolymerisaten monoethylenisch ungesättigter Carbonsäuren als Solubilisatoren |
CN1283677A (zh) * | 2000-04-29 | 2001-02-14 | 河南蓝牌集团商丘啤酒有限公司 | 绞股蓝营养保健啤酒及生产方法 |
AU2001276627A1 (en) | 2000-05-17 | 2001-11-26 | Labopharm Inc. | Drug containing polymeric micelles |
US7763663B2 (en) * | 2001-12-19 | 2010-07-27 | University Of Massachusetts | Polysaccharide-containing block copolymer particles and uses thereof |
WO2004096140A2 (en) | 2003-04-25 | 2004-11-11 | The Penn State Research Foundation | Method and system for systemic delivery of growth arresting, lipid-derived bioactive compounds |
US7316816B2 (en) * | 2004-06-10 | 2008-01-08 | Agency For Science Technology And Research | Temperature and pH sensitive copolymers |
-
2004
- 2004-06-10 US US10/865,681 patent/US7316816B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-05-24 AT AT05742424T patent/ATE551371T1/de active
- 2005-05-24 JP JP2007527146A patent/JP4874969B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2005-05-24 WO PCT/SG2005/000164 patent/WO2005121196A1/en active Application Filing
- 2005-05-24 CN CN200580023278A patent/CN100582130C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2005-05-24 EP EP05742424A patent/EP1765894B9/en not_active Not-in-force
-
2007
- 2007-11-19 US US11/942,672 patent/US8541013B2/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH08311290A (ja) * | 1995-05-23 | 1996-11-26 | Showa Denko Kk | 吸液材料用組成物、吸液材料成形体およびその製造方法 |
WO2004007578A1 (en) * | 2002-07-10 | 2004-01-22 | Meadwestvaco Corporation | Carboxylic acid-modified vinylic polymeric compositions |
WO2004020489A2 (en) * | 2002-08-27 | 2004-03-11 | Meadwestvaco Corporation | Rosin-fatty acid vinylic polymer compositions |
Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008534732A (ja) * | 2005-04-13 | 2008-08-28 | スンキュンクヮン・ユニバーシティ・ファウンデーション・フォー・コーポレート・コラボレーション | 新規な温度及びpH感受性のブロック共重合体及びこれを用いた高分子ヒドロゲル |
JP4753992B2 (ja) * | 2005-04-13 | 2011-08-24 | スンキュンクヮン・ユニバーシティ・ファウンデーション・フォー・コーポレート・コラボレーション | 新規な温度及びpH感受性のブロック共重合体及びこれを用いた高分子ヒドロゲル |
US8835492B2 (en) | 2005-04-13 | 2014-09-16 | Sungyunkwan University Foundation For Corporate Collaboration | Temperature and pH sensitive block copolymer and polymeric hydrogels using the same |
JP2009269846A (ja) * | 2008-05-02 | 2009-11-19 | Osaka Prefecture Univ | 温度感受性リポソーム |
JP5800323B2 (ja) * | 2010-03-23 | 2015-10-28 | 国立大学法人九州大学 | 温度、pH及び塩濃度感応性分離材及びその用途 |
JP2015218304A (ja) * | 2014-05-20 | 2015-12-07 | キリン株式会社 | 細胞内の温度を測定するためのレシオ型蛍光性プローブ |
WO2018025767A1 (ja) * | 2016-08-03 | 2018-02-08 | 東ソー株式会社 | ブロック共重合体およびそれを用いた表面処理剤 |
JP2019531387A (ja) * | 2016-10-07 | 2019-10-31 | フォルシュングスツェントルム ユーリッヒ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングForschungszentrum Juelich GmbH | 脂質膜を通した合成ポリマーのトランスロケーション |
US11273221B2 (en) | 2016-10-07 | 2022-03-15 | Forschungszentrum Juelich Gmbh | Translocation of synthetic polymers by lipid membranes |
JP7094278B2 (ja) | 2016-10-07 | 2022-07-01 | フォルシュングスツェントルム ユーリッヒ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 脂質膜を通した合成ポリマーのトランスロケーション |
JP2018154752A (ja) * | 2017-03-17 | 2018-10-04 | 東ソー株式会社 | 共重合体およびその製造方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1765894A1 (en) | 2007-03-28 |
US7316816B2 (en) | 2008-01-08 |
EP1765894B9 (en) | 2012-08-01 |
CN1984935A (zh) | 2007-06-20 |
ATE551371T1 (de) | 2012-04-15 |
US8541013B2 (en) | 2013-09-24 |
CN100582130C (zh) | 2010-01-20 |
EP1765894B1 (en) | 2012-03-28 |
JP4874969B2 (ja) | 2012-02-15 |
US20080182959A1 (en) | 2008-07-31 |
US20050277739A1 (en) | 2005-12-15 |
EP1765894A4 (en) | 2010-11-03 |
WO2005121196A1 (en) | 2005-12-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4874969B2 (ja) | 新規な温度及びpHに感受性の両親媒性コポリマー、同コポリマーを含む組成物及び同コポリマーの医薬品の製造における使用方法 | |
EP1499358B1 (en) | Ph-sensitive polymer | |
US7718193B2 (en) | Temperature- and pH-responsive polymer compositions | |
KR100732013B1 (ko) | pH 민감성 블록 공중합체 및 이를 이용한 고분자 마이셀 | |
US6939564B2 (en) | Water-soluble stabilized self-assembled polyelectrolytes | |
Liu et al. | Thermally responsive polymeric micellar nanoparticles self-assembled from cholesteryl end-capped random poly (N-isopropylacrylamide-co-N, N-dimethylacrylamide): synthesis, temperature-sensitivity, and morphologies | |
US7425581B2 (en) | Temperature sensitive polymers | |
US6780428B2 (en) | Unimolecular polymeric micelles with an ionizable inner core | |
Chang et al. | Thermo-responsive shell cross-linked PMMA-bP (NIPAAm-co-NAS) micelles for drug delivery | |
Luo et al. | Preparation and drug controlled-release of polyion complex micelles as drug delivery systems | |
Luo et al. | Dual-responsive polyacrylate copolymer micelles with PMAA and PNIPAAm graft brushes: physicochemical properties and prednisone release | |
KR102349029B1 (ko) | 자극 반응성을 가진 양친성 노보넨 기반 블럭 공중합체, 이의 고분자 브러쉬, 이의 초분자 자가조립 나노구조체, 이의 제조 방법 및 이의 응용 | |
JP3664822B2 (ja) | 微粒子性運搬体 | |
Bhuchar | Synthesis and Characterization of Phosphorylcholine-based Polymers and Nanogels via the Reversible Addition Fragmentation Chain Transfer Process | |
WAI | Stimuli sensitive core-shell nanoparticles for targetted drug delivery |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20071204 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20100716 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100727 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20101022 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20101029 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110127 |
|
A524 | Written submission of copy of amendment under article 19 pct |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A524 Effective date: 20110127 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20111101 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20111124 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20141202 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |