JP2008139488A - 顕微鏡装置 - Google Patents

Abstract

【課題】 被観察物を繰り返し所定時間間隔で撮像して複数の画像を生成するタイムラプス撮像部を備えた顕微鏡装置において、タイムラプス撮影時に生成されるデータを好適に管理すること。
【解決手段】 被観察物を繰り返し所定時間間隔で撮像して複数の画像を生成するタイムラプス撮像部と、複数の画像のうち、タイムラプス撮像部により繰り返し撮像を行ったタイムラプス期間内の所定の期間において生成した複数の画像からなる画像群を記録するか、または、複数の画像のうち、所定の時間間隔で間引いた複数の画像からなる画像群を記録する記録部とを備える。または、上述した記録部に代えて、タイムラプス撮像部により生成した複数の画像のそれぞれについて、所定の領域の画像を切り出し、切り出した複数の画像からなる画像群を記録する記録部を備える。
【選択図】 図１

Description

本発明は、被観察物の像を繰り返し撮像して複数の画像を生成する撮像部を備えた顕微鏡装置に関する。

培養容器の培地等の環境を制御しながら、培地で成育中の培養細胞を拡大撮影する顕微鏡システムが実用化されている（特許文献１などを参照）。この顕微鏡システムでは、培養細胞に生じる緩やかな時間変化を視覚的に捉えるため、タイムラプス撮影が有効である（特許文献２などを参照）。
特開２００５−３２６４９５号公報 特開２００６−２２０９０４号公報

上述した顕微鏡システムにおいて、タイムラプス撮影を長期間に亘って実施すると、生成されるデータ（主に画像データ）は膨大な量になる。そのため、例えば、目的の画像データを膨大な量のデータから抜き出すのは非常に困難である。
本発明の顕微鏡システムは、被観察物の像を繰り返し撮像して複数の画像を生成する撮像部を備えた顕微鏡装置において、タイムラプス撮影時に生成されるデータを好適に管理することを目的とする。

本発明の顕微鏡装置は、被観察物を繰り返し所定時間間隔で撮像して複数の画像を生成するタイムラプス撮像部と、前記複数の画像のうち、前記タイムラプス撮像部により繰り返し撮像を行ったタイムラプス期間内の所定の期間において生成した複数の画像からなる画像群を記録するか、または、前記複数の画像のうち、所定の時間間隔で間引いた複数の画像からなる画像群を記録する記録部とを備える。

なお、好ましくは、前記複数の画像のうち、前記画像群として記録する画像を、前記被観察物の状態変化に応じて選択する選択部を備えても良い。
また、好ましくは、前記被観察物を蛍光観察するための観察用部材を備え、前記選択部は、少なくとも２種類の異なる波長における前記蛍光観察時に、前記タイムラプス撮像部によりそれぞれ生成した画像に基づいて、蛍光強度比を求めることにより前記被観察物の状態変化を検出しても良い。

本発明の別の顕微鏡装置は、被観察物を繰り返し所定時間間隔で撮像して複数の画像を生成するタイムラプス撮像部と、前記タイムラプス撮像部により生成した複数の画像のそれぞれについて、所定の領域の画像を切り出し、切り出した複数の画像からなる画像群を記録する記録部とを備える。
なお、好ましくは、前記複数の画像のうち、少なくとも２つの画像において、前記切り出しを行う領域を指定するユーザ指示を受け付ける受付部を備え、前記記録部は、前記ユーザ指示に基づいて、前記複数の画像のそれぞれにおいて前記切り出しを行う領域を決定しても良い。

また、好ましくは、前記複数の画像のそれぞれにおいて前記切り出しを行う領域を、前記被観察物の状態変化に応じて選択する選択部を備えても良い。
また、好ましくは、前記被観察物を蛍光観察するための観察用部材を備え、前記選択部は、少なくとも２種類の異なる波長における前記蛍光観察時に、前記タイムラプス撮像部によりそれぞれ生成した画像に基づいて、蛍光強度比を求めることにより前記被観察物の状態変化を検出しても良い。

本発明の別の顕微鏡装置は、被観察物を繰り返し所定時間間隔で撮像して複数の画像を生成するタイムラプス撮像部と、前記複数の画像のうち、前記タイムラプス撮像部により繰り返し撮像を行ったタイムラプス期間内の所定の期間において生成した複数の画像からなる第１の画像群と、前記複数の画像のうち、所定の時間間隔で間引いた複数の画像からなる第２の画像群との何れかを生成し、さらに、生成した前記画像群を構成する複数の画像のそれぞれについて、所定の領域の画像を切り出し、切り出した複数の画像からなる第３の画像群を記録する記録部とを備える。

本発明の顕微鏡システムによれば、被観察物の像を繰り返し撮像して複数の画像を生成する撮像部を備えた顕微鏡装置において、タイムラプス撮影時に生成されるデータを好適に管理することができる。

以下、図面を用いて本発明の実施形態を説明する。
図１は、本実施形態の顕微鏡装置１の構成図である。図１に示すように、顕微鏡装置１は、装置本体１０と、コンピュータ１７０と、モニタ１６０と、入力器１８０とを備える。装置本体１０には、顕微鏡部１５０と、透過照明部４０と、冷却カメラ３００と、励起用光源７０と、光ファイバ７とが備えられる。

顕微鏡部１５０には、ステージ２３と、対物レンズ部２７と、蛍光フィルタ部３４と、結像レンズ部３８と、偏向ミラー４５２と、フィールドレンズ４１１と、コレクタレンズ４１とが備えられ、透過照明部４０には、透過照明用光源４７と、フィールドレンズ４４と、偏向ミラー４５とが備えられる。
ステージ２３には、透明な培養容器２０を収めたチャンバ１００が載置される。培養容器２０は培地で満たされており、蛍光物質で標識された培養細胞がその培地内で生育している。その培養細胞をチャンバ１００の外側から観察するため、チャンバ１００の底面の一部ａと、チャンバ１００の上面の一部ｂとはそれぞれ透明部になっている。ここでは簡単のため、培養容器２０の上面が開放されている場合を説明するが、必要があれば培養容器２０の上面は培養容器２０と同質の蓋で覆われる。

対物レンズ部２７には、図１のＸ方向に亘り複数種類の対物レンズが装着されており、対物レンズ部２７が不図示の機構によりＸ方向へ駆動されると、装置本体１０の光路に配置される対物レンズの種類が切り替わる。この切り替えはコンピュータ１７０の制御下で行われる。
蛍光フィルタ部３４には、図１のＸ方向に亘り複数種類のフィルタブロックが装着されており、蛍光フィルタ部３４が不図示の機構によりＸ方向へ駆動されると、装置本体１０の光路に配置されるフィルタブロックの種類が切り替わる。この切り替えもコンピュータ１７０の制御下で行われる。

コンピュータ１７０は、光路に配置される対物レンズの種類と、光路に配置されるフィルタブロックの種類との組み合わせを、装置本体１０に設定されるべき観察方法に応じて切り替える。以下では、この切り替えによって装置本体１０の観察方法が位相差観察と２種類の蛍光観察との間で切り替わるのものとする。
このうち位相差観察と蛍光観察との間では、光路に配置されるフィルタブロックの種類と、光路に配置されうる対物レンズの種類との双方が異なり、２種対の蛍光観察の間では、光路に配置されるフィルタブロックの種類のみが異なる。また、位相差観察と蛍光観察との間では、照明方法も異なる。

コンピュータ１７０は、位相差観察時には、透過照明部４０の光路を有効とするべく透過照明用光源４７をオンし、蛍光観察時には、落射照明部の光路（励起用光源７０、光ファイバ７、コレクタレンズ４１、フィールドレンズ４１１、偏向ミラー４５２、蛍光フィルタ部３４、対物レンズ部２７を順に経由する光路）を有効とするべく、励起用光源７０をオンする。なお、透過照明用光源４７がオンされるときに励起用光源７０はオフされ、励起用光源７０がオンされるときに透過照明用光源４７はオフされる。

位相差観察時、透過照明用光源４７から射出した光は、フィールドレンズ４４、偏向ミラー４５、チャンバ１００の透明部ｂを介して培養容器２０の中の観察ポイントｃを照明する。その観察ポイントｃを透過した光は、培養容器２０の底面、チャンバ１００の透明部ａ、対物レンズ部２７、蛍光フィルタ部３４、結像レンズ３８を介して冷却カメラ３００の受光面に達し、観察ポイントｃの位相差像を形成する。この状態で冷却カメラ３００が駆動されると、位相差像が撮像され、画像データが生成される。この画像データ（位相差画像の画像データ）は、コンピュータ１７０へ取り込まれる。

蛍光観察時、励起用光源７０から射出した光は、光ファイバ７、コレクタレンズ４１、フィールドレンズ４１１、偏向ミラー４５２，蛍光フィルタ部３４、対物レンズ部２７、チャンバ１００の透明部ａ、培養容器２０の底面を介して培養容器２０の中の観察ポイントｃを照明する。これによって、観察ポイントｃに存在する蛍光物質が励起され、蛍光を発する。この蛍光は、培養容器２０の底面、チャンバ１００の透明部ａ、対物レンズ部２７、蛍光フィルタ部３４、結像レンズ３８を介して冷却カメラ１３０の受光面に達し、観察ポイントｃの蛍光像を形成する。この状態で冷却カメラ３００が駆動されると、蛍光像が撮像され、画像データが生成される。この画像データ（蛍光画像の画像データ）は、コンピュータ１７０へ取り込まれる。

なお、コンピュータ１７０は、ステージ２３のＸＹ座標及び対物レンズ部２７のＺ座標を制御することにより、培養容器２０における観察ポイントｃのＸＹＺ座標を制御する。
また、チャンバ１００には、不図示のシリコーンチューブを介して不図示の加湿器が接続されており、チャンバ１００の内部の湿度及びＣＯ２濃度は、予め決められた値の近傍にそれぞれ制御される。また、チャンバ１００の周辺の雰囲気は、不図示の熱交換器によって適度に循環され、それによってチャンバ１００の内部温度も予め決められた値の近傍に制御される。このようなチャンバ１００の内部の湿度、ＣＯ２濃度、温度は、不図示のセンサにより測定される。そして、測定結果は、コンピュータ１７０へ取り込まれる。その一方で、冷却カメラ３００は装置本体１０との他の部分とは別の筐体に収められており、チャンバ１００の内部温度に拘わらず装置本体１０の外気温度と同程度に保たれる。

次に、タイムラプス撮影に関するコンピュータ１７０の動作を説明する。
コンピュータ１７０には、観察用のプログラムがインストールされており、コンピュータ１７０はそのプログラムに従って動作するものとする。ユーザからコンピュータ１７０への情報入力は、何れも入力器１８０を介して行われるものとする。
図２は、コンピュータ１７０の動作フローチャートである。図２に示すとおり、最初にコンピュータ１７０は、装置本体１０の観察方法を位相差観察（正確には低倍率の位相差観察）に設定し、その状態でバードビュー画像の画像データを取得し、それをモニタ１６０へ表示する（ステップＳ１１）。バードビュー画像とは、培養容器２０の比較的広い領域の画像である。

バードビュー画像の画像データを取得するに当たって、コンピュータ１７０は、培養容器２０における観察ポイントｃをＸＹ方向へ移動させながら位相差画像の画像データを繰り返し取得し、取得された複数の画像データを１枚の画像の画像データに合成する。個々の画像データは、所謂タイル画像の画像データであり、合成後の画像データがバードビュー画像の画像データである。

ユーザは、モニタ１６０に表示されたバードビュー画像を観察しながら、タイムラプス撮影の条件（インターバル、ラウンド数、観察ポイント、観察方法など）を決定する。
コンピュータ１７０は、ユーザから条件が入力されると（ステップＳ１１ＹＥＳ）、その条件が書き込まれたレシピを作成する（ステップＳ１３）。レシピの格納先は、例えばコンピュータ１７０のハードディスクである。以下、レシピに書き込まれたインターバル、ラウンド数、観察ポイント、観察方法をそれぞれ「指定インターバル」、「指定ラウンド数」、「指定ポイント」、「指定観察方法」と称す。

その後、コンピュータ１７０は、ユーザからタイムラプス撮影の開始指示が入力されると（ステップＳ１４）、タイムラプス撮影を開始する（ステップＳ１５）。
タイムラプス撮影では、コンピュータ１７０は、培養容器２０の観察ポイントｃを指定ポイントに一致させると共に、装置本体１０の観察方法を指定観察方法に設定し、その状態で画像データを取得する。指定観察方法が３種類であった場合は、装置本体１０の観察方法を３種類の指定観察方法の間で切り替えながら３種類の画像データを連続的に取得する。これによって、第１ラウンドの撮影が終了する。

その後、コンピュータ１７０は、第１ラウンドの撮影開始時刻から指定インターバルだけ待機時間をおき、第２ラウンドの撮影を開始する。第２ラウンドの撮影方法は、第１ラウンドのそれと同じである。
さらに、以下の撮影は、実行済みのラウンド数が指定ラウンド数に達するまで（ステップＳ１６ＹＥＳとなるまで）繰り返される。

さて、タイムラプス撮影の期間中（ステップＳ１６ＮＯとなる期間中）、コンピュータ１７０は、装置本体１０から取り込んだ画像データを実施経過ファイルへ逐次蓄積する。この実施経過ファイルの格納先は、例えばコンピュータ１７０のハードディスクである。
さらに、コンピュータ１７０は、タイムラプス撮影の期間中又はタイムラプス撮影の終了後にユーザから確認指示が入力されると、その時点における実施経過ファイルの内容を参照し、それに基づき以下に説明する実施経過確認用画面をモニタ１６０へ表示する。

図３Ａ及び図３Ｂは、実施経過確認用画面を示す図である。図３Ａに示すとおり、実施経過確認用画面には、表示領域１０１，１０２，１０３，１０４と、再生コントロール部１０５とが配置される。
表示領域１０１は、位相差画像の動画像が表示されるべき領域であり、表示領域１０２は、２種類の蛍光画像の一方（第１の蛍光画像）の動画像が表示されるべき領域であり、表示領域１０３は、２種類の蛍光画像の他方（第２の蛍光画像）の動画像が表示されるべき領域である。また、表示領域１０４は、位相差画像と蛍光画像との合成画像の動画像が表示されるべき領域である。

動画像の表示に先立ち、コンピュータ１７０は、各ラウンドで取得された３種類の画像データを実施経過ファイルから読み出し、このうち位相差画像の画像データの各フレームを時系列順に連結して位相差画像の動画像ファイルを作成し、第１の蛍光画像の画像データの各フレームを時系列順に連結して第１の蛍光画像の動画像ファイルを作成し、第２の蛍光画像の画像データの各フレームを時系列順に連結して第２の蛍光画像の動画像ファイルを作成する。また、コンピュータ１７０は、位相差画像の画像データと蛍光画像の画像データとをフレーム毎に合成し、合成後の各フレームを時系列順に連結して合成画像の動画像ファイルを作成する。これら４種類の動画像ファイルの格納先は、例えばコンピュータ１７０のハードディスクである。

動画像の表示にあたり、コンピュータ１７０は、作成された４種類の動画像ファイルを同時並列的に読み出し、４種類の動画像を４つの表示領域１０１，１０２，１０３，１０４へ個別に表示するための動画像信号を生成し、それを生成順にモニタ１６０へ送出する。以下、この動画像ファイルの読み出し、動画像信号の生成、及び動画像信号の送出からなるコンピュータ１７０の一連の処理を「動画像ファイルの再生」という。

図３Ａに示す再生コントロール部１０５は、動画像ファイルの再生に関する指示をユーザがコンピュータへ入力するためのＧＵＩ画像である。
図３Ｂは、再生コントロール部１０５の拡大図である。図３Ｂに示すとおり再生コントロール部１０５には、停止ボタン５２、スキップボタン５３、再生ボタン５４、早送りボタン５５、クリッピングボタン５６（詳細は後述する）、タイムライン５０などが配置される。

ユーザが再生ボタン５４を選択すると、動画像ファイルの再生画開始され、表示領域１０１，１０２，１０３，１０４に対する動画像の表示が開始される。また、ユーザが停止ボタン５２を選択すると、表示領域１０１，１０２，１０３，１０４に表示されている動画像が静止する。
動画像ファイルにおける再生箇所は、タイムライン５０に反映される。ライムライン５０の左端（１）は動画像ファイルの先頭（タイムラプス撮影の開始時点）を示し、タイムライン５０の右端（２）は動画像ファイルの後尾（タイムラプス撮影の終了時点）を示す。なお、タイムラプス撮影が終了していないときには、タイムライン５０の右端（２）は現時点を示す。このタイムライン５０上にスラーダーバー６０が配置され、動画像ファイルにおける再生箇所は、スラーダーバー６０の左右方向の位置によってリアルタイムで表される。

このスラーダーバー６０の左右方向の位置は、ユーザによって自由に変更することが可能である。スラーダーバー６０の左右方向の位置が変化すると、動画像ファイルにおける再生箇所もそれに応じて変化する。
ところで、上述したタイムラプス撮影を長期間に亘って実施すると、生成される動画像ファイルは膨大な量になる。そこで、本実施形態では目的の画像データを含む別の動画像ファイルを、時間クリッピングと空間クリッピングとの２つの手法を用いて作成する。

（１）時間クリッピングについて
時間クリッピングには２種類の方法がある。第１の方法は、タイムラプス撮影の期間中の所定の期間において生成した複数の画像からなる動画像ファイルを作成する方法である。また、第２の方法は、タイムラプス撮影の期間中に生成した複数の画像のうち、所定の時間間隔で間引いた複数の画像からなる動画像ファイルを作成する方法である。

図４を用いて詳細に説明する。図４Ａは第１の方法を説明する図であり、図４Ｂは第２の方法を説明する図である。第１の方法においては、図４Ａに示すように、タイムラプス撮影の期間中に生成した複数の画像のうち、後述する方法で指定される所定の期間において生成した複数の画像を抜き出し、抜き出した複数の画像からなる動画像ファイルを作成する。また、第２の方法においては、図４Ｂに示すように、タイムラプス撮影の期間中に生成した複数の画像から、後述する方法で指定される所定の時間間隔で間引いた複数の画像からなる動画像ファイルを作成する。

時間クリッピングを行う期間及び間引き間隔の指定には以下の２つの方法がある。
（１）−［１］手動の場合
ユーザがクリッピングボタン５６を選択すると、コンピュータ１７０は図５Ａに示すクリッピング指定用画面をモニタ１６０へ表示する。ユーザは、入力器１８０を介して、時間クリッピングを行う期間及び間引き間隔を入力することによりこれらを指定することができる。なお、間引き間隔は、必ずしも均一でなくても良い。例えば、最初の１時間は１０分ごと、次の１時間は２０分ごと、その次の１時間は１０分ごとなどというように、間引き間隔を指定しても良い。

また、ユーザがクリッピングボタン５６を選択した場合に、図５Ｂに示すように、タイムライン５０上にクリッピング枠５６−１を表示し、ユーザが、入力器１８０を介して、タイムライン５０上の任意の期間を時間クリッピングを行う期間として指定する構成としても良い。
さらに、図５Ｃに示すように、再生コントロール部１０５に、クリッピングボタン５６に代えてマーキングボタン５７を設けても良い。そして、タイムラプス撮影の期間中及びタイムラプス撮影終了後に、ユーザが、入力器１８０を介して、マーキングボタン５７を選択することにより所望の時点を指定する構成としても良い。この場合、図５Ｃに示すようにタイムライン５０上にもマーク（５７−１，５７−２）を表示すると良い。

そして、マークに従って時間クリッピングを行う。例えば、マークが付けられた画像のみを抜き出して別の動画像ファイルを作成しても良いし、マークが付けられた画像を中心とした前後数枚〜数十枚の画像を抜き出して別の動画像ファイルを作成しても良い。
何れの場合も、ユーザが入力器１８０を介して目的の画像にマークを付けることにより、この画像を中心とした時間クリッピングを行うことができる。

（１）−［２］自動の場合
コンピュータ１７０により、被観察物の状態を監視し、状態変化に応じて自動的に時間クリッピングを行う構成としても良い。具体的には、タイムラプス撮影の期間中に生成した画像に基づいて被観察物の状態を監視し、監視結果に基づいて（１）−［１］で説明したマーキングボタン５７と同様の処理を行っても良い。例えば、上述した第１の蛍光画像及び第２の蛍光画像の蛍光強度比を求め、この蛍光強度比に基づいて被観察物の状態変化を監視することができる。

（２）空間クリッピングについて
空間クリッピングは、タイムラプス撮影の期間中の所定の期間において生成した複数の画像のそれぞれについて、所定の領域の画像を切り出し、切り出した複数の画像からなる動画像ファイルを作成する方法である。
空間クリッピングにおける切り出し領域の指定には以下の２つの方法がある。

（２）−［１］手動の場合
ユーザがクリッピングボタン５６（図３Ｂ参照）を選択すると、コンピュータ１７０は図６Ａに示すように、表示領域上にクリッピング枠５８−１を表示する。そして、タイムラプス撮影の期間中に生成した複数の画像のうち、１枚の画像（図６Ａの例では、最初の画像）において、ユーザが入力器１８０を介して表示領域上の切り出し領域を指定する。そして、全ての画像について、同じ切り出し領域で空間クリッピングを行う。

また、図６Ｂに示すように、複数の画像（図６Ｂの例では、最初の画像、真ん中の画像、最後の画像）においてユーザが入力器１８０を介して表示領域上の切り出し領域（５８−２，５８−３，５８−４）を指定しても良い。この場合、内挿法などにより１枚ずつの画像における切り出し領域を算出して空間クリッピングを行う。
何れの場合も、ユーザが入力器１８０を介して目的の領域を切り出し領域として指定することにより、この領域を中心とした空間クリッピングを行うことができる。

（２）−［２］自動の場合
コンピュータ１７０により、被観察物の状態を監視し、状態変化に応じて自動的に空間クリッピングを行う構成としても良い。具体的には、タイムラプス撮影の開始時点においてユーザが入力器１８０を介して切り出し領域を指定する。そして、その後タイムラプス撮影期間中に生成した第１の蛍光画像及び第２の蛍光画像の蛍光強度分布を求め、この蛍光強度分布に基づいて、ユーザにより指定された切り出し領域をトレースすることができる。なお、タイムラプス撮影の途中において、ユーザが入力器１８０を介して切り出し領域を指定し、その後タイムラプス撮影期間中に生成した画像に基づいて切り出し領域をトレースしても良い。

（３）応用例について
（１）で説明した時間クリッピング及び（２）で説明した空間クリッピングを組み合わせて実行しても良い。なお、時間クリッピングを行った後に空間クリッピングを行っても良いし、空間クリッピングを行った後に時間クリッピングを行っても良い。また、時間クリッピングと空間クリッピングとを同時に実行しても良い。特に、時間クリッピングを行った後に空間クリッピングを行うと、コンピュータ１７０による処理を軽減することができる。

以上説明したように、本実施形態によれば、被観察物を繰り返し所定時間間隔で撮像して複数の画像を生成するタイムラプス撮像部を備えた顕微鏡装置において、生成されたデータに時間クリッピングと空間クリッピングとの少なくとも一方を施すことにより、目的のデータの抜き出しを容易にすることができるので、タイムラプス撮影時に生成されるデータを好適に管理することができる。

なお、本実施形態において、時間クリッピングと空間クリッピングとの少なくとも一方を施して生成した動画像ファイルは、タイムラプス撮影の期間中に生成した全ての画像からなる動画像ファイルと関連付けて記録しておくと良い。また、ユーザの要望を確認した上で、タイムラプス撮影の期間中に生成した全ての画像からなる動画像ファイルに代えて時間クリッピングと空間クリッピングとの少なくとも一方を施して生成した動画像ファイルを記録する構成としても良い。

顕微鏡装置１の構成図である。 コンピュータ１７０の動作フローチャートである。 実施経過確認用画面を示すである。 時間クリッピングについて説明する図である。 時間クリッピングについて説明する別の図である。 空間クリッピングについて説明する図である。

符号の説明

１…顕微鏡装置，１０…装置本体，１７０…コンピュータ，１６０…モニタ，１８０…入力器，１５０…顕微鏡部，３００…冷却カメラ，

Claims (8)

1. 被観察物を繰り返し所定時間間隔で撮像して複数の画像を生成するタイムラプス撮像部と、
   前記複数の画像のうち、前記タイムラプス撮像部により繰り返し撮像を行ったタイムラプス期間内の所定の期間において生成した複数の画像からなる画像群を記録するか、または、前記複数の画像のうち、所定の時間間隔で間引いた複数の画像からなる画像群を記録する記録部と
   を備えたことを特徴とする顕微鏡装置。
2. 請求項１に記載の顕微鏡装置において、
   前記複数の画像のうち、前記画像群として記録する画像を、前記被観察物の状態変化に応じて選択する選択部を備える
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
3. 請求項２に記載の顕微鏡装置において、
   前記被観察物を蛍光観察するための観察用部材を備え、
   前記選択部は、少なくとも２種類の異なる波長における前記蛍光観察時に、前記タイムラプス撮像部によりそれぞれ生成した画像に基づいて、蛍光強度比を求めることにより前記被観察物の状態変化を検出する
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
4. 被観察物を繰り返し所定時間間隔で撮像して複数の画像を生成するタイムラプス撮像部と、
   前記タイムラプス撮像部により生成した複数の画像のそれぞれについて、所定の領域の画像を切り出し、切り出した複数の画像からなる画像群を記録する記録部と
   を備えたことを特徴とする顕微鏡装置。
5. 請求項４に記載の顕微鏡装置において、
   前記複数の画像のうち、少なくとも２つの画像において、前記切り出しを行う領域を指定するユーザ指示を受け付ける受付部を備え、
   前記記録部は、前記ユーザ指示に基づいて、前記複数の画像のそれぞれにおいて前記切り出しを行う領域を決定する
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
6. 請求項４に記載の顕微鏡装置において、
   前記複数の画像のそれぞれにおいて前記切り出しを行う領域を、前記被観察物の状態変化に応じて選択する選択部を備える
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
7. 請求項６に記載の顕微鏡装置において、
   前記被観察物を蛍光観察するための観察用部材を備え、
   前記選択部は、少なくとも２種類の異なる波長における前記蛍光観察時に、前記タイムラプス撮像部によりそれぞれ生成した画像に基づいて、蛍光強度比を求めることにより前記被観察物の状態変化を検出する
   ことを特徴とする顕微鏡装置。
8. 被観察物を繰り返し所定時間間隔で撮像して複数の画像を生成するタイムラプス撮像部と、
   前記複数の画像のうち、前記タイムラプス撮像部により繰り返し撮像を行ったタイムラプス期間内の所定の期間において生成した複数の画像からなる第１の画像群と、前記複数の画像のうち、所定の時間間隔で間引いた複数の画像からなる第２の画像群との何れかを生成し、さらに、生成した前記画像群を構成する複数の画像のそれぞれについて、所定の領域の画像を切り出し、切り出した複数の画像からなる第３の画像群を記録する記録部とを備えた
   ことを特徴とする顕微鏡装置。

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