JP2008118959A5 - タンパク質改変方法、ニトリルヒドラターゼ成熟化方法、成熟化ニトリルヒドラターゼ生産方法、成熟化ニトリルヒドラターゼを用いたアミド化合物生産方法 - Google Patents
タンパク質改変方法、ニトリルヒドラターゼ成熟化方法、成熟化ニトリルヒドラターゼ生産方法、成熟化ニトリルヒドラターゼを用いたアミド化合物生産方法 Download PDFInfo
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Claims (9)
- タンパク質中の特定のサブユニット（Ａ）を、
下記のいずれか一つ以上の特徴を有するタンパク質（Ｂ）に交換する段階を含むタンパク質改変方法。
（１）前記サブユニット（Ａ）と同一又は近似の構造を有し、前記構造の一部が修飾されたタンパク質（Ｂ）。
（２）前記サブユニット（Ａ）と同一又は近似の構造を有し、金属元素の結合又は付加、若しくは脱離がされたタンパク質（Ｂ）。
（３）前記サブユニット（Ａ）と同一又は近似の構造を有し、リガンドの結合若しくは脱離がされたタンパク質（Ｂ）。
（４）前記サブユニット（Ａ）と同一又は近似の構造を有し、アミノ酸配列の１若しくは数個のアミノ酸の欠失、置換若しくは付加がされたタンパク質（Ｂ）。 - 前記タンパク質がニトリルヒドタラーゼであることを特徴とする請求項１記載のタンパク質改変方法。
- ニトリルヒドラターゼの金属元素低含有型αサブユニットを、金属元素高含有型αサブユニットに交換する段階を含むニトリルヒドラターゼ成熟化方法。
- 前記ニトリルヒドラターゼは、Rhodococcus rhodochrous J1菌由来のニトリルヒドラターゼであることを特徴とする請求項３記載のニトリルヒドラターゼ成熟化方法。
- 前記金属は、コバルトであることを特徴とする請求項３又は４記載のニトリルヒドラターゼ成熟化方法。
- コバルト元素高含有型αサブユニットを含むタンパク質複合体を用いて、
コバルト型ニトリルヒドラターゼのコバルト元素低含有型αサブユニットを、
前記コバルト元素高含有型αサブユニットに交換することを特徴とする請求項５記載のニトリルヒドラターゼ成熟化方法。 - 前記タンパク質複合体は、
配列番号１に示すアミノ酸配列を有するタンパク質と、
配列番号２に示すアミノ酸配列を有するタンパク質と、
を有するタンパク質複合体であることを特徴とする請求項６記載ニトリルヒドラターゼ成熟化方法。 - 請求項３から７のいずれか一項に記載のニトリルヒドラターゼ成熟化方法を使用する工程を含む成熟化ニトリルヒドラターゼ生産方法。
- 請求項８記載の成熟化ニトリルヒドラターゼを、
ニトリル化合物からアミド化合物への変換酵素として用いる工程を含むアミド化合物生産方法。
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