JP2008014689A - 蛍光読取装置および位置補正用チップ - Google Patents
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Abstract
【解決手段】予め設定された1種類あるいは複数種類の異なる波長の光を受けて、異なる波長域で発光する発光体23を基材22の表面に固定した位置補正用チップ21を用いて各画像の発光点の位置を補正し、位置を修正した後、各画像の発光点の輝度値をもとに色彩的特性を算出することができる蛍光読取装置を提供することができる。
【選択図】図4
Description
まず、蛍光染色して蛍光読取装置を用いて、目的のものを検出するものは各種あるが、ここでは微生物を検出する方法について述べる。細菌、真菌などの微生物を含む試料を測定するために、固定部となるスライドグラスや、培養ディッシュ、マルチウェルプレート、またはろ過膜や、測定に適した形状を持つセルの観察面表面の表側、もしくは裏側の一方に微生物を固定する。固定は、ポリ‐L‐ リジンのような試薬や、ゼラチンなどの粘着性、付着性をもった高分子材料を表面に薄く塗布し、微生物を含んだ試料を滴下し、表面に吸着させる。またメンブランフィルタのようなろ過膜の場合、上方から液体試料を吸引してろ過し、メンブランフィルタ表面に微生物を平面状に捕捉し、固定する。本発明において、最も好適に実施するものとしては、このようなろ過膜を使用することで、以下の染色や洗浄などの操作が簡便かつ微生物を流失することなく扱うことができるのでよい。また、メンブランフィルタは、薄く、小さいため、そのままでは取り扱いが容易でない。そのため、専用の支持台、吸引口付きのホルダーを使用する、もしくは膜に保持部を結合するか、一体化させたデバイスとすることで容易に膜を取り扱うことができる。
(数式1)
X=0.3933×R/255+0.3651×G/255+0.1903×B/255
Y=0.2123×R/255+0.7010×G/255+0.0858×B/255
Z=0.0182×R/255+0.1117×G/255+0.9570×B/255
さらに、
x=X/(X+Y+Z)
y=Y/(X+Y+Z)
式中のR、G、BはそれぞれR輝度値、G輝度値、B輝度値であることを示す。これにより細胞および微生物または夾雑物かの判断に必要な値として、最終的にx、yの値が算出される。
M =(P−α)×(Q−β)
また、有効エリア面積は、レンズ系の倍率などから、画素あたりの面積を求め、画素あたりの面積をsとするとし、測定視野数をNとして、1画面あたりの有効エリア面積Sと全有効面積は、
(数式3)
S = Ms
全有効面積:S×N
となる。
図4は、本発明を好適に実施するための位置補正用チップの一態様を示す斜視図である。
2 励起光源
3 干渉フィルタ
4 集光レンズ
5 緑色の分光フィルタ
6 赤色の分光フィルタ
7 レンズユニット
8 受光素子
9 検査台
10 メンブランフィルタ
11 CCDユニット
12 演算部
13 記憶部
14 発光点抽出部
15 発光点照合部
16 出力部
17 蛍光評価部
18 有効エリア算出部
19 生死判断部
20 微生物判断部
21 位置補正用チップ
22 基材
23 発光体
24 リング
25 金属薄膜
Claims (6)
- 画像の発光点の輝度値から発光点の色彩的特性を算出する蛍光読取装置において、1種類あるいは異なる波長の光を照射する複数の光源と光を受光する受光部とそれぞれ異なった波長域の光だけを通す複数の分光フィルタと、発光点の色彩的特性を調べる検体とからなり、異なる波長域で前記受光部により撮影された発光点を有した複数の画像について、各画像の発光点の位置を補正し、その位置を補正した後の画像の発光点の輝度値をもとに色彩的特性を算出することを特徴とする蛍光読取装置。
- 蛍光読取装置の各画像の発光点の位置を補正する位置補正用チップにおいて、予め設定された1種類あるいは複数の異なる波長の光を受けて、前記照射された波長と異なる波長で発光する複数の発光体を基材の表面に固定した位置補正用チップ。
- 1種類あるいは異なる波長の光を照射する複数の光源と光を受光する受光部とそれぞれ異なった波長域の光だけを通す複数の分光フィルタと、発光点の色彩的特性を調べる検体とからなり、異なる波長域で前記受光部により撮影された発光点を有した複数の画像について、各画像の発光点の位置を補正し、その位置を補正した後の画像の発光点の輝度値をもとに色彩的特性を算出する蛍光読取装置の前記受光部が固体撮像素子であり、撮像された発光点の面積が1〜30ピクセルの面積を有している前記複数の発光体を基材の表面に固定した請求項2記載の位置補正用チップ。
- 基材の表面に発光体を載せ、前記基材からの分光反射率を低くする加工を施した請求項2または3記載の位置補正用チップ。
- 発光体が高分子蛍光粒子である請求項2から4のいずれか記載の位置補正用チップ。
- 請求項2〜5記載のいずれかの位置補正用チップを用いて各画像の発光点の位置を補正し、その補正された補正値と記憶する記憶手段と前記発光点の色彩的特性を調べる検体の受光する波長が異なる各画像の発光点の位置を前記記録手段の補正値をもとに発光点の位置補正を行った後、各画像の発光点の輝度値をもとに色彩的特性を算出することを特徴とする請求項1記載の蛍光読取装置。
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