JP2007516269A - ビスホスホネートの医薬製剤 - Google Patents

Abstract

ビスホスホン酸またはその塩および：中鎖脂肪酸のエステルまたは親油性ポリエチレングリコールエステルから選択される不活性成分を含有し、該不活性成分の親水性親油性比（ＨＬＢ）が約１から約３０である経口投与形態を含む医薬製剤。

Description

発明の詳細な説明

本発明はビスホスホネートの医薬形態、特にビスホスホネートの経口用医薬製剤の使用および製造に関する。本発明はビスホスホネートの経口用医薬形態の製造、ならびに骨粗鬆症および副甲状腺機能亢進症、甲状腺亢進症、サルコイドーシス、またはビタミンＤ過剰症に続発する過剰な骨吸収の結果である高カルシウム血症を含む異常に上昇した骨ターンオーバーの状態の処置に有用である。

ビスホスホネートは脊椎動物において異常な骨ターンオーバーを呈するかまたはそれにより開始される症状に関して有用である活性を示す。ビスホスホネートは骨吸収が増加する良性および悪性双方の種々の疾患において破骨細胞活性を阻害するために広く用いられる。したがって、ビスホスホネートは最近では多発性骨髄腫（ＭＭ）の患者の長期間処置に利用可能になっている。これらのピロリン酸類似体は骨格関連事象の発生を低減させるのみならず、患者に臨床上の有益性を提供し、そして生存性を改善する。ビスホスホネートはインビボで骨再吸収を予防することができ；ビスホスホネートの治療効果は骨のパジェット病、腫瘍誘起の高カルシウム血症、ならびにさらに最近では骨転移および多発性骨髄腫（ＭＭ）の処置において実証されている（概説に関してはFleisch H 1997 Bisphosphonates clinical In Bisphosphonates in Bone Disease From the Laboratory to the Patient. Eds: The Parthenon Publishing Group, New York/London pp 68-163参照）。ビスホスホネートが骨吸収を阻止するメカニズムは依然よく理解されておらず、そしてビスホスホネート研究によって異なっているようである。ビスホスホネートは骨のヒドロキシアパタイト結晶に強く結合し、骨ターンオーバーおよび再吸収を低減させ、血中のヒドロキシプロリンまたはアルカリホスファターゼのレベルを低下させ、そして加えて破骨細胞の活性化および作用の双方を阻止することが示されている。

ビスホスホネートの経口投与は消化管に対して腐食性であり得るので、ビスホスホネートの経口投与は典型的には大きなハードルがある。したがってビスホスホネートは動物およびヒトにおいて有害な胃障害を生じる傾向がある。経口投与されたビスホスホネートにより引き起こされる有害な胃障害は悪心、嘔吐、下痢、血性分泌、および潰瘍形成を緊急の医学的介入が必要とされる程度にまでももたらし得る。経口投与用に市販されているこれらのビスホスホネートには典型的には胃障害およびびらん作用を最小限にするために患者が厳密に従うべき投与計画がある。加えて市販されているビスホスホネートは典型的には胃吸収および結果的にバイオアベイラビリティーが低いことが実証されている。したがって現在の製剤では、市販されているビスホスホネートの有効経口投与量は典型的には胃障害を引き起こし得るビスホスホネートの量を必要とする。特定の投与計画を用いて経口投与したビスホスホネートの十分な吸収を可能にし、そして耐容性を上昇させることができ、例えばPhysician’s Desk Reference, 2003 edition, Thomson Healthcare, Montvale, NJ 07645でFOSAMAX (alendronate sodium)と称される製品を参照されたい。しかしながら現在の経口投与用の投薬計画は、特にかかるビスホスホネートが処方される高齢者において重大なコンプライアンスの障害をもたらし、そしてまた正確な投薬計画の不履行が胃潰瘍またはさらに重篤な影響に至り得る機会を許している。比較的複雑な投与計画を履行しても、一部はその低い経口経路バイオアベイラビリティーを打破するために経口投与される必要のあるビスホスホネートの量のために、感受性の個体では胃障害および潰瘍に至り得る。本発明では、胃吸収を増加させ、ならびに／またはビスホスホネート（本明細書にて以降本発明の活性薬剤と称する）により誘起される化学的および／もしくは機械的損傷から消化管を保護する要素としての種々の不活性薬剤の付加的な使用により、ビスホスホネートの経口有効用量をその胃副作用を有意に低減させ、そして現在の製剤を用いるよりもより広い患者集団の処置を可能にするレベルまで低減させることが可能になる。したがって、本発明は、活性薬剤、特にビスホスホネートの患者により優しい、すなわち胃適合性でありおよび／または現在利用可能な経口組成物に関して最適に生体内利用される製剤を用いて経口投与の障害を打破するための手段を提供する。

本発明の組成物では耐容性およびバイオアベイラビリティー間の均衡が探求される。生体内利用が良好な製剤は胃適合性である必要はないかもしれない。最適なバイオアベイラビリティーは経口投与で達成される活性薬剤の治療的に適切な血中レベルを可能にし、そしてビスホスホネートのような本発明の活性薬剤の現在のまたは従来の経口製剤に比較して、投与された対象における胃の臨床毒性徴候のレベルの低下を伴う。

本発明に従って処置され得る異常に上昇した骨ターンオーバーの状態には：例えば骨粗鬆症による骨折の危険性を低減させるための閉経後骨粗鬆症の処置；閉経後骨粗鬆症の予防、例えば閉経後骨減少の予防；男性骨粗鬆症の処置または予防；コルチコステロイド誘起の骨粗鬆症および薬物治療、例えばジフェニルヒダントイン、甲状腺ホルモン補充療法に続発するかまたはそれを原因とするその他の形態の骨減少の処置または予防；運動不足および宇宙飛行に関連する骨減少の処置または予防；リウマチ性関節炎、骨形成不全症、甲状腺機能亢進症、拒食症、臓器移植、関節プロテーゼの緩み、およびその他の医学的状態に関連する骨減少の処置または予防が挙げられる。例えばかかるその他の医学的状態には、リウマチ性関節炎の関節周囲骨びらんの処置または予防；骨関節炎の処置、例えば軟骨下骨硬化、軟骨下骨嚢胞、骨棘形成の予防／処置；副甲状腺機能亢進症、甲状腺亢進症、サルコイドーシス、およびビタミンＤ過剰症に続発する過剰な骨再吸収の結果である高カルシウム血症の処置または予防が挙げられる。

本発明の医薬組成物は例えば経口のような経腸、直腸、エアロゾル吸入または鼻投与、および静脈内または皮下投与のような非経腸用の組成物であり得ることが意図される。

経口投与に適合させた本発明の組成物で興味深い結果が得られる。経口投与可能な医薬製剤は、例えばゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、デンプン誘導体およびグリセロールまたはソルビトールのような可塑剤から作られた乾燥充填硬または軟カプセルである。乾燥充填カプセルは顆粒の形態の活性成分を例えばラクトースのような充填剤、デンプンのような結合剤、および／またはタルクもしくはステアリン酸マグネシウムのような流動促進剤、および適切な場合、安定剤と混合して含有することができる。軟カプセルでは、ビスホスホネートを溶解するためのバッファー水溶液のような適当な液体、または不活性成分中の懸濁もしくは溶解を補助するために脂肪油、パラフィン油もしくは液体ポリエチレングリコールに活性成分を溶解または懸濁するのが好ましく、安定剤を加えることも可能である。例えばGELUCIRE（登録商標）(ラウロイルマクロゴール−３２グリセリド、Gatefosse, Westwood, NJ)のような半固体脂肪酸グリセリドまたはVITAMIN E-TPGS(水溶性コハク酸Ｄ−アルファ−トコフェリルポリエチレングリコール１０００、Peboc Division of Eastman Chemicals, Anglesey, UK)のような半固体液体ベースのバイオアベイラビリティー促進剤をゼラチン、ＨＰＭＣまたはデンプン誘導体で作られた硬または軟カプセルに充填された融解、半固体もしくは液体溶液または懸濁液として用いることができるときに興味深い結果が得られる。

かかる不活性成分がビスホスホネートのような水に容易に溶解する活性成分のバイオアベイラビリティーを上昇させるというのは直感に反することである。かかる不活性成分が経口耐容性を上昇させ、そして／またはビスホスホネートの経口投与の結果である胃損傷を阻止するということも新規である。したがって、本発明におけるかかる脂肪酸グリセリドおよび両親媒性の不活性成分の利用は興味深く、そして新規である。加えて、ビスホスホネートの経口製剤におけるかかる不活性成分、例えばGELUCIRE（登録商標）およびVITAMIN E-TPGSの使用および利点は従来技術では同定されていない。Gelucire（登録商標）４４／１４は出発材料として硬化パーム核油およびＰＥＧ１５００を用いるアルコール分解／エステル化反応により合成される。したがってGELUCIRE（登録商標）４４／１４はモノ、ジおよびトリグリセリドならびにポリエチレングリコールのモノおよびジ脂肪酸エステルの十分に定義された混合物である。主な脂肪酸はラウリル酸（Ｃ１２）である。Gelucire（登録商標）５０／１３は出発材料として硬化パーム核油およびＰＥＧ１５００を用いるアルコール分解／エステル化反応により合成される。したがってGelucire（登録商標）５０／１３はモノ、ジおよびトリグリセリドならびにポリエチレングリコールのモノおよびジ脂肪酸エステルの十分に定義された混合物である。主な脂肪酸はパルミトステアリン酸（Ｃ１６−Ｃ１８）である。

経腸および非経腸投与のための医薬製剤は、例えば糖衣錠、錠剤、軟または硬ゼラチンカプセルおよびまたアンプルのような投与単位形態のものである。これらをそれ自体公知の様式で、例えば従来の混合、顆粒化、糖衣化、溶解、融解または凍結乾燥過程により調製する。例えば、活性成分を固体担体と組み合わせ、適切な場合、得られた混合物を造粒し、そして所望により、または必要により、適当な添加物を加えた後、混合物または顆粒を錠剤または糖衣錠核に加工することにより、経口投与用の医薬製剤を得ることができる。

適当な担体は糖、例えばラクトース、サッカロース、マンニトール、またはソルビトール、セルロース調製物および／またはリン酸カルシウム、例えばリン酸三カルシウムもしくはリン酸水素カルシウムのような充填剤、ならびにまた例えばトウモロコシ、コムギ、コメもしくはジャガイモデンプンを用いるデンプンペースト、ゼラチン、トラガント、メチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドンのような結合剤、ならびに所望により、前記したデンプン、またカルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、寒天またはアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウムのようなその塩のような崩壊剤でよい。添加物は特に流動性調節剤および滑沢剤、例えばケイ酸、タルク、ステアリン酸またはステアリン酸マグネシウムもしくはカルシウムのようなその塩、および／またはポリエチレングリコールである。特に場合によってはアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールおよび／もしくは二酸化チタンを含有してよい濃縮糖溶液、または適当な有機溶媒中または溶媒混合物中のラッカー溶液、または胃液に抵抗するコーティングを生成するために、フタル酸アセチルセルロースもしくはフタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロースのような適当なセルロース調製物の溶液を用いて、糖衣錠の核に胃液に抵抗し得る適当なコーティングを提供する。例えば同定の目的で、または活性成分の異なる用量を示すために着色剤または色素を錠剤または糖衣錠コーティングに加えることができる。

患者の細目、特に、必要に応じて年齢、体重、ライフスタイル、活動レベル、ホルモン状態（例えば閉経後）および骨ミネラル密度を考慮して担当医が投与および用量の特定の様式を選択することができる。本発明の活性薬剤の用量は、例えば用いるビスホスホネートの相対的効力を含む活性成分の有効性および作用の期間、投与の様式、温血動物種、および／または温血動物の性別、年齢、体重ならびに個々の状態を含む、種々の因子に依存し得る。

通常の用量は、０.００５−１０００ｍｇ／ｋｇ、およびしばしば０.０１−１０ｍｇ／ｋｇのビスホスホネート活性成分の１回用量がおよそ７５ｋｇの体重の温血動物に投与されるようなものである。

「ｍｇ／ｋｇ」とは、処置されるヒトを含む哺乳動物の体重ｋｇあたりの薬物ｍｇを意味する。

前記で記載した用量を典型的には個々のビスホスホネートの治療活性の期間に従って、例えば１日１回、週１回、月１回、６か月毎に１回、１年に１回の一定の投与間隔で、またはより少ない頻度で断続的に投与する。

単回投与単位形態の製剤は活性成分を約１％から約９０％を含有するのが好ましく、そして単回投与単位形態でない製剤は約０.１％から約２０％を含有するのが好ましい。輸液のアンプルまたは輸液用量の調製のための固体、カプセル、錠剤もしくは糖衣錠のような単回投与単位形態は活性成分を例えば約０.５ｍｇから約２０００ｍｇ含有する。用いられる実際の単位用量はビスホスホネートの効力およびとりわけ投与間隔に依存する。したがって単位用量の大きさは典型的にはより効力の強いビスホスホネートほど小さく、そして大きくなるほど投与間隔は長くなる。例えばゾレドロン酸のようなより効力の強い、最近のビスホスホネートでは、約０.５から約２０００ｍｇの単位用量を用いることができる。例えばまた、最近のより効力の強い、ビスホスホネートでは、約２から約２００ｍｇの単位用量を投与に用いることができる。

したがって、本記載では「処置」または「処置する」なる用語は、防御的または予防的処置および治療的または疾患緩和的処置の双方を意味し、疾患を被る危険性を有するかまたは疾患を被っていることが疑われる患者、および病気であるかまたは疾患もしくは医学的状態に罹患していると診断されている患者の処置を含む。特定の実施態様では、本発明を骨粗鬆症および類似の疾患の防御的処置に用いることができる。したがって、例えば、骨粗鬆症を進行させる危険性を有する、例えば閉経後の女性のような個体に、例えば個々のビスホスホネートの作用の期間に従って例えば１日１回、週１回、月１回、６か月毎に１回、１年に１回の一定の投与間隔で、またはできるだけより少ない頻度で定期的にビスホスホネートを投与することができる。例えば骨粗鬆症の処置のためのビスホスホネート、ゾレドロン酸をちょうど６か月に１回、１年に１回、３年毎に１回までの間隔で、またはより少ない頻度で投与できることが米国特許出願第６０／２６７６８９号（この特許出願は出典明示により本明細書の一部とする）に開示されている。

本発明で用いるビスホスホネートは典型的には骨吸収を阻止するものである。

したがって、例えば本発明の組成物で使用するための適当なビスホスホネートは以下の化合物または薬学的に許容されるその塩もしくは任意のその水和物を含み得る：３−アミノ−１−ヒドロキシプロパン−１,１−ジホスホン酸（パミドロン酸）、例えばパミドロネート（ＡＰＤ）；３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）−１−ヒドロキシプロパン−１,１−ジホスホン酸、例えばジメチル−ＡＰＤ；４−アミノ−１−ヒドロキシブタン−１,１−ジホスホン酸（アレンドロン酸）、例えばアレンドロネート；１−ヒドロキシ−エチデン−ビスホスホン酸、例えばエチドロネート；１−ヒドロキシ−３−（メチルペンチルアミノ）−プロピリデン−ビスホスホン酸、イバンドロン酸、例えばイバンドロネート；６−アミノ−１−ヒドロキシヘキサン−１,１−ジホスホン酸、例えばアミノ−ヘキシル−ＢＰ；３−（Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−ペンチルアミノ）−１−ヒドロキシプロパン−１,１−ジホスホン酸、例えばメチル−ペンチル−ＡＰＤ（＝ＢＭ２１.０９５５）；１−ヒドロキシ−２−（イミダゾール−１−イル）エタン−１,１−ジホスホン酸、例えばゾレドロン酸；１−ヒドロキシ−２−（３−ピリジル）エタン−１,１−ジホスホン酸（リセドロン酸）、例えばそのＮ−メチルピリジニウム塩を含むリセドロネート、例えばＮＥ−１０２４４またはＮＥ−１０４４６のようなヨウ化Ｎ−メチルピリジニウム；１−（４−クロロフェニルチオ）メタン−１,１−ジホスホン酸（チルドロン酸）、例えばチルドロネート；３−［Ｎ−（２−フェニルチオエチル）−Ｎ−メチルアミノ］−１−ヒドロキシプロパン−１,１−ジホスホン酸；１−ヒドロキシ−３−（ピロリジン−１−イル）プロパン−１,１−ジホスホン酸、例えばＥＢ１０５３（Leo）；１−（Ｎ−フェニルアミノチオカルボニル）メタン−１,１−ジホスホン酸、例えばＦＲ７８８４４（Fujisawa）；５−ベンゾイル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラゾール−３，３−ジホスホン酸テトラエチルエステル、例えばＵ−８１５８１（Upjohn）；１−ヒドロキシ−２−（イミダゾ［１,２−ａ］ピリジン−３−イル）エタン−１,１−ジホスホン酸、例えばＹＭ５２９；ならびに１,１−ジクロロメタン−１,１−ジホスホン酸（クロドロン酸）、およびＹＭ１７５。

少なくともいくらか臨床的に有用な量の化学的安定性、治療効率、ならびに胃吸収および耐容性を有する活性物質の薬学的に許容される塩は、塩基との塩、好都合には、アルカリ金属塩、例えばカリウムおよびナトリウム塩、またはアルカリ土類金属塩を含む元素周期表のＩａ、Ｉｂ、ＩＩａおよびＩＩｂの群に由来する金属塩であろう。例えば、ナトリウム、カリウムまたはアンモニウム塩の場合に、顕著にはナトリウムで、ならびにまたホスホン酸基の各々で１個の酸性水素および１個の薬学的に許容される陽イオン、例えばナトリウムを有することを特徴とする塩で見られる通り、カルシウムまたはマグネシウム塩、ならびにまたアンモニアまたは有機アミンとのアンモニウム塩および１、２、３または４個、特に１または２個のビスホスホン酸の酸性水素が薬学的に許容される陽イオンにより置換されている塩で興味深い結果が得られている。

前記で記載した全てのビスホスホン酸誘導体は文献から周知である。これはその製造を含む（例えばＥＰ−Ａ−５１３７６０、１３−４８頁参照）。例えば、３−アミノ−１−ヒドロキシプロパン−１,１−ジホスホン酸を例えば米国特許第３９６２４３２号に記載するように、および二ナトリウム塩を米国特許第４６３９３３８号および第４７１１８８０号のように調製し、そして１−ヒドロキシ−２−（イミダゾール−１−イル）エタン−１,１−ジホスホン酸を例えば米国特許第４９３９１３０号に記載するように調製する。

本発明の活性薬剤を異性体の、または適切な場合、異性体の混合物の形態で、典型的には鏡像異性体またはジアステレオ異性体または幾何異性体のような光学異性体、典型的にはシス−トランス異性体として用いることができる。光学異性体は純粋な対掌体の形態で、および／またはラセミ体として得られる。

本発明の活性薬剤はその水和物の形態で用いられるか、またはその結晶化に用いられる別の溶媒を含むことができる。

本発明の活性薬剤（ビスホスホネート）を、治療上有効量の活性成分を場合によっては無機または有機の固体、半固体または液体の薬学的に許容される、投与に適した担体と一緒にまたはそれと混合して含有する医薬組成物の形態で用いるのが好ましい。

本発明の活性薬剤を単独で、またはホルモン、例えばエストロゲン、カルシトニン、副甲状腺ホルモンもしくはこれらのいずれかの類似体、ラロキシフェンまたはその他の選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）のようなその他の骨活性薬物と固定された組み合わせかまたは物理的および時間的の双方で別個にかのいずれかで組み合わせて投与することができる。かかる付加的な骨活性薬剤をビスホスホネートよりもさらに頻繁に投与することができる。

（実施例）
以下の実施例は本明細書に前記した本発明を説明し、そして本発明をいかなるようにも限定することを意味するものではない。

以下の実施例では「活性成分」なる用語はビスホスホン酸誘導体ならびに本発明に従って有用であるとして前記で記載したその治療上有効な塩および水和物のいずれか１つであるとして理解される。

イヌでの研究のための錠剤製剤
Carverプレス(Carver, Inc., Wabash, IN)を用いて、圧縮圧約１トンで表１の製剤を１０ｍｍ面取りした錠剤に打錠する。滑沢剤としてステアリン酸を用いて、溶解時にゾレドロン酸がＭｇ^２＋と複合体を形成する可能性を回避する。クエン酸を用いてイヌの胃のｐＨをヒトの胃のｐＨに近づけ、そしてクエン酸を用いてまたは用いずに本発明の組成物を製剤して被験種を順応させることができる。クエン酸を含有する製剤は杵に付着し、そして圧縮の前に杵を潤滑にする必要があり得る。製剤への界面活性剤の添加は、消化管（ＧＩＴ）を刺激し得るので避けるべきである。

表１
クエン酸を含むおよび含まない従来のゾレドロン酸錠剤の実例

従来の錠剤の双方の型におけるゾレドロン酸の完全な放出はインビトロで溶解装置パドルセットを５０ｒｐｍで用いて３７℃、ｐＨ４.５で約１５分で達成される。

脂質徐放性製剤
GELUCIRE４４／１４およびGELUCIRE５０／１３中のゾレドロン酸の溶解性は低く、そして６０℃で１ｍｇ／ｇ未満であると測定される。
GELUCIRE中の本発明の活性物質の懸濁液では、ゾレドロン酸の放出は持続され、したがって原体は胃内容物と接触したときに容易に溶解する可能性がある。懸濁液の均質性および溶解最適化のために、粒子サイズを小さくしたゾレドロン酸を用いることができる。これをクエン酸を伴ってまたは伴わずに製剤することができる。クエン酸もまたGELUCIREにあまり溶解せず、そして乳鉢および乳棒を用いてその粒子サイズを小さくすることができる。

サイズ０のカプセルは各々GELUCIRE５０／１３およびGELUCIRE４４／１４を６６０および６８０ｍｇまで含有することができる。製剤をゾレドロン酸１００ｍｇあたりGELUCIRE５００ｍｇに設定するのが都合よい。最適な放出速度のためにGELUCIREの混合物を用いることができる：GELUCIRE５５／１３単独で約７−８時間で１００％放出を提供することができ；GELUCIRE５０／１３：GELUCIRE４４／１４ ５０：５０は３−３.５時間の１００％放出を提供することができる。

マイクロエマルジョン製剤Ｉ
例えば以下の一覧で示すような、バイオアベイラビリティー促進剤の可能性があるとして知られている種々の液体脂質溶媒を検討することができる。実施例の賦形剤全てにおけるゾレドロン酸溶解性を肉眼的に評価し、そして極めて低いことが決定される（＜０.２ｍｇ／ｇ賦形剤）。これらの脂質溶媒の１つでのゾレドロン酸製剤を強制飼養により実験イヌに投与する。製剤はゾレドロン酸１００ｍｇあたり可能性のあるバイオアベイラビリティー促進剤５ｍｌ（２０ｍｇ／ｍｌ）であり得るのが都合よい。賦形剤中のゾレドロン酸溶解性が低いことに基づいて、賦形剤中の製剤は恐らく懸濁液になるであろう。しかしながら本発明の製剤は賦形剤中の活性物質の完全な溶解をも可能にする。粒子サイズを小さくした約２００μｍのゾレドロン酸を用いて懸濁液均質性を最大にすることができる。懸濁液は典型的には製剤後急速に沈降し、そして恐らくイヌに投与する直前に調製する必要があろう。
被験賦形剤およびその組成物を以下に詳記する：
プラセボ
４３.０％ CREMOPHOR(BASF, Ludwigshafen, Germany)、３５.７％コーン油−モノ−ジ−トリ−グリセリド、１０.６％プロピレングリコール、１０.６％エタノール、０.１％トコフェロールＤＬ−アルファ。
LABRASOL(Gatefosse, Westwood, NJ)
バイオアベイラビリティー促進剤として用いられるカプリロカプロイルマクロゴール−８グリセリド、ＨＬＢ＝１４。
LABRAFIL M2125CS(Gatefosse, Westwood, NJ)
バイオアベイラビリティー促進剤として用いられるリノレオイルマクロゴール−６グリセリド、ＨＬＢ＝４。
CAPROYL PGMC(Gatefosse, Westwood, NJ)
可溶化剤および吸収促進剤として用いられるモノカプリル酸プロピレングリコール、ＨＬＢ＝５。
CAPMUL（登録商標）PG-8(Abitec Corp., Janesville, WI)
容易に吸収される中鎖脂肪酸のプロピレングリコールモノエステル（主にカプリル酸）、ＨＬＢ＝４.４、ビーグル犬に１０００および２５００ｍｇ／ｋｇ ２８日間連続投与の後無毒性、可溶化剤およびバイオアベイラビリティー促進剤として用いられる乳化剤／界面活性剤。
CAPMUL（登録商標）MCM(Abitec Corp., Janesville, WI)
容易に吸収される中鎖モノおよびジグリセリド（主にカプリル酸およびカプリン酸）ＨＬＢ＝５.５−６.０、可溶化剤およびバイオアベイラビリティー促進剤として用いられる乳化剤／界面活性剤。
CAPTEX 200(Abitec Corp., Janesville, WI)
バイオアベイラビリティー促進剤として用いられるジカプリル酸／ジカプリン酸プロピレングリコール。
CAPTEX 355 EP(Abitec Corp., Janesville, WI)
バイオアベイラビリティー促進剤として用いられるカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド。

VITAMIN E-TPGS製剤
VITAMIN E-TPGSは融点約４１℃、および親水性親油性バランス（ＨＬＢ）１５−１９の半固体賦形剤である。これは消化管（ＧＩＴ）から容易に吸収される。
ゾレドロン酸の溶解性は４０℃でVITAMIN E-TPGSの０.２２ｍｇ／ｇより低い。粒子サイズ２００μｍまで粉砕したゾレドロン酸を用いてVITAMIN E-TPGSカプセルを調製する。予め約４０℃まで加熱して分散物を形成し得るVITAMIN E-TPGSにこの原体を懸濁する。次いで分散物をカプセル封入することができる。原体の溶解はｐＨ非依存性である。ゼラチンカプセルからの見かけの完全放出は約７５分で達成される。

イヌでの研究のための製剤の選択
製剤および投与様式の選択
製剤および投与様式を前記で記載した製剤から選択する。
イヌを５つの製剤の各々につき１群で、５群に無作為に割り当てる。研究の開始時にイヌの概算される体重に基づいて単位投与量を調製する。液体製剤は強制飼養を用いて投与し（２０ｍｇ／ｍｌゾレドロン酸溶液または懸濁液）、半固体製剤はゼラチンカプセルで投与する（０.２ｍｇ／ｍｇゾレドロン酸懸濁液）。
４つの製剤をクエン酸溶液で流し、４つの製剤のうちの１つをクエン酸効果のための対照として提供し、そして水道水で流す（２.５ｍｌ／ｋｇで流す）。クエン酸溶液の濃度はゾレドロン酸用量に基づく：１０ｍｇ／ｋｇ用量に関しては２４ｍｇ／ｍｌ（ｐＨ〜２.２）および２５ｍｇ／ｋｇ用量に関しては６０ｍｇ／ｍｌ（ｐＨ〜２.１）。クエン酸を流す論理的根拠は：（ａ）イヌの胃のｐＨの低下、（ｂ）原位置で形成され得るカルシウム：ゾレドロン酸複合体の一部の可溶化、（ｃ）傍細胞輸送の可能性の強化である。

実施例の製剤の製造
実施例の経口投与用の５つの製剤は以下のとおりである：
１. ｐＨ４.５酢酸塩バッファー中２０ｍｇ／ｍｌゾレドロン酸溶液をクエン酸で流す、
２. ｐＨ４.５酢酸塩バッファー中２０ｍｇ／ｍｌゾレドロン酸溶液を水道水で流す、
３. GELUCIRE中０.２ｍｇ／ｍｌゾレドロン酸懸濁液をクエン酸で流す、
４. CAPMUL PG-8中２０ｍｇ／ｍｌゾレドロン酸懸濁液をクエン酸で流す、
５. VITAMIN E-TPGS中０.２ｍｇ／ｍｌゾレドロン酸懸濁液をクエン酸で流す。

製剤１、２および４ならびにクエン酸流
製剤１、２および４をイヌに投与する前にその場で調製する。各投与の前に、賦形剤またはバッファーを予め重量測定した原体に添加すること、および攪拌プレート上で攪拌することによりイヌの群あたり１つの製剤を調製する。投与の間、製剤は一定の攪拌下に保たれる。各イヌの体重に関して補正した容量に基づいて用量を投与する。

ゾレドロン酸はｐＨ４.５の酢酸塩バッファーに容易に溶解し、そして水道水（最終ｐＨ〜３.８）またはクエン酸（最終ｐＨ〜２.２）流を加えたときに沈殿しない。ゾレドロン酸はまたCAPMUL PG-8に容易に均質に分散する。CAPMUL PG-8懸濁液にクエン酸流を加えたときに、１０分間の攪拌した後ゾレドロン酸が完全に溶解したエマルジョンが形成される。

製剤３
GELUCIREカプセル内のゾレドロン酸の製剤を表２に詳記する。
表２
ゾレドロン酸GELUCIRE製剤

GELUCIRE４４／１４を６５−７０℃で融解し、そして正確に重量測定する。次いでGELUCIRE５０／１３を重量測定し、そして融解したGELUCIRE４４／１４に加える。混合物を融解し、そして６５−７０℃でホモジナイズする。低剪断ミキサーを用いて攪拌しながら、約２００μｍの粒子サイズを有するゾレドロン酸をゆっくり加える。カプセル充填の間、混合物を一定の攪拌下で６５−７０℃に維持する。容積移送式ピペット(positive displacement pipet)を用いて手動によりカプセルを充填する。単位用量および各イヌの体重に基づいて各々のカプセル含量を正確に重量測定する。硬化させるためにカプセルを４０℃で３６時間放置し、そして次に投与まで４−８℃で冷蔵する。

ゾレドロン酸含量および分解生成物に関して高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いてカプセルを分析する。実施例の結果を以下に詳記する：
１０ｍｇ／ｋｇ強度：アッセイ＝９７.９％、
２５ｍｇ／ｋｇ強度：アッセイ＝９７.６％、

製剤５
VITAMIN E-TPGS（商標）カプセルの製剤を表３に詳記する。

表３
ゾレドロン酸VITAMIN E-TPGS製剤

VITAMIN E-TPGSを５０℃で融解する。攪拌しながら約２００μｍの粒子サイズを有するゾレドロン酸をゆっくり加える。カプセル充填の間、混合物を一定の攪拌下で５０℃に維持する。容積移送式ピペットを用いて手動によりカプセルを充填する。単位用量および各イヌの体重に基づいて各々のカプセル含量を正確に重量測定する。投与までカプセルを４−８℃に維持する。

ゾレドロン酸含量および分解生成物に関してＨＰＬＣによりカプセルを分析する。実施例の結果を以下に詳記する：
１０ｍｇ／ｋｇ強度：アッセイ＝９９.２％、
２５ｍｇ／ｋｇ強度：アッセイ＝９９.６％。

投与および耐容性およびバイオアベイラビリティー試験
ゾレドロン酸製剤およびイヌの研究群を本明細書および前記に記載するように準備する。製剤を強制飼養またはカプセルにより１日１回、ゾレドロン酸１０または２５ｍｇ／ｋｇ／日の用量で空腹雄ビーグル犬の５群（３匹／用量／群）に１週まで経口投与する。

製剤対象群：
第１および第２群：酢酸塩バッファー中ゾレドロン酸の溶液としてゾレドロン酸を投与し、各々クエン酸および水道水で流す。
第３群：ゼラチンカプセルに封入したGELUCIRE中の懸濁液としてゾレドロン酸を投与し、そしてクエン酸で流す。
第４群：CAPMUL PG-8中ゾレドロン酸の半固体懸濁液を投与し、クエン酸で流す。
第５群：ゼラチンカプセルに封入したVITAMIN E-TPGS中の懸濁液としてゾレドロン酸を投与し、そしてクエン酸で流す。
第１、第２および第４群の投与容量は０.５ｍｌ／ｋｇ（１０ｍｇ／ｋｇ／日）および１.２５ｍｌ／ｋｇ（２５ｍｇ／ｋｇ／日）である。

雄ビーグル犬をMarshall Farms, North Rose, New Yorkから入手することができる。投与の開始時に、動物はおよそ７から９月齢であり、そして体重は約７から１０ｋｇの範囲である。臨床徴候を毎日収集する（投与前、投与後５分以内、ならびに投与後およそ０.５、１、２、４および６時間）。体重および食餌消費量の測定を全群で実施する。第１回および第７回投与後およそ２４時間に全動物から収集した血清試料中のゾレドロン酸レベルに関するＨＰＬＣ分析によりバイオアベイラビリティーを決定することができる。屠殺前に瀕死の動物から、ならびに第１回および第７回投与後、および屠殺前に生存動物から毒物動態分析のために血液サンプルを収集することができる。全動物で剖検を実施することができ、そして肉眼的知見を記録する。

（ａ） 表４ 研究計画、動物割り当ておよび被験物品の用量

ＮＡ＝不適用

結果
１０ｍｇ／ｋｇ／日で被験物品に関連する瀕死の状態が製剤１を投与された１匹のイヌおよび製剤４を投与された全てのイヌにおいて生じた。２５ｍｇ／ｋｇ／日で被験物品に関連する瀕死の状態が製剤１、３および４を投与された全てのイヌにおいて；製剤２を投与された２匹のイヌおよび製剤５を投与された１匹のイヌで生じた。製剤４を１０および２５ｍｇ／ｋｇ／日で投与された動物では早ければ４日で瀕死の状態が観察されたが、その他の投与群のイヌは６または７日に瀕死の状態で屠殺された。早期に死亡または屠殺された動物の死亡または瀕死の原因は多臓器の出血および壊死によるものであった。

１０ｍｇ／ｋｇ／日で製剤４は１００％瀕死ならびに自発運動の低下、運動失調、嘔吐（飼料、血液および／または化合物を伴うかまたは伴わない）、流涎、食欲不振、便の減少、外観の血色不良および／または痩せ、触れると冷たい、下垂症、糞便の変化（下痢、軟便、粘液性および／または便の減少）および体重減少（３回投与後、基本値に比較して１５％までの体重減少）を含む屠殺前の重篤な被験物品に関連する臨床徴候により明白であるように耐容性が最も低い。製剤１もまた１匹の動物での瀕死の状態、製剤４で観察されたものに類似する臨床徴候および研究の最後まで生存したイヌで７％までの体重減少に基づいて耐容性がなかった。製剤２、３および５は１週間の処置期間を生存した全ての動物で耐容性が良好であり、そして臨床徴候が概して前記したものほど重篤でないようである。体重減少もまた最小で、製剤２に関しては２−５％、製剤３に関しては１−７％、および製剤５に関しては０−５％の範囲であった。

２５ｍｇ／ｋｇ／日で被験物品に関連する臨床徴候が全ての投与製剤にわたって認められ、そして自発運動の低下、運動失調、下垂症、食欲不振、便の減少、嘔吐（飼料、血液および／または化合物を伴うかまたは伴わない）および糞便の変化が含まれた。外観の血色不良もしくは痩せ、触れると冷たい、および／または運動失調は製剤４を除く全ての製剤群で認められたが、製剤４の動物はこれらの徴候を発症する前に屠殺されたからであった。さらに全ての投与製剤の２５ｍｇ／ｋｇ／日で７日までに過剰な体重減少が観察され、そして基本値に比較して１２−１４％（製剤１）、１４％（製剤２）、１５−１８％（製剤３）、および９−１２％（製剤５）の範囲であった。

食欲不振の発症（消費した食餌の＜５０％として定義される）、ならびに嘔吐および糞便の変化は概して３または４日に始まったが、運動能力の低下および外観の変化（痩せ、冷え、血色不良）は概して５日またはその後に始まった。１日に観察された唯一の臨床徴候は２５ｍｇ／ｋｇ／日で製剤４を投与された動物における嘔吐であった。

試験
被験物品に関連する死亡、臨床徴候および体重の要旨を表５、表６、表７、表８、表９および表１０に示す。

（ａ） 表５ １０ｍｇ／ｋｇ／日での死亡データの要旨

（ｂ） 表６ ２５ｍｇ／ｋｇ／日での死亡データの要旨

（ｃ） 表７ １０ｍｇ／ｋｇ／日での臨床徴候データの要旨

（ｄ） 表８ ２５ｍｇ／ｋｇ／日での臨床徴候データの要旨

（ｅ）
（ｆ） 表９ 早期に屠殺された動物における被験物品に関連する体重減少

（ｇ）
（ｈ） 表１０ 試験終了まで生存した動物における被験物品に関連する体重減少

毒物動態評価
平均毒物動態パラメーターを１日に関して表１１に、および７日に関して表１２に示す。製剤１、２および４に関して、製剤４の２５ｍｇ／ｋｇ／日の１日以外は、ｔ_ｍａｘは双方の用量レベルで概して投与後０.５時間に生じた。製剤３および５に関するｔ_ｍａｘは概して双方の用量レベルで双方の日に投与後０.５から２時間であり、そして製剤の持続放出成分と一致する。
１０ｍｇ／ｋｇ／日で、製剤１、２、３および５に関して１から７日でわずかに蓄積する傾向が検出された。

（ａ） 表１１ １日のゾレドロン酸の平均毒物動態パラメーター

（ｂ） 表１２ ７日のゾレドロン酸の平均毒物動態パラメーター

結論
CAPMUL PG-8およびVITAMIN E-TPGSのような親油性バイオアベイラビリティー促進剤および可溶化剤を伴う本発明の製剤を用いて、消化管における副作用に耐容性を有するゾレドロン酸の胃吸収が有意であり得ることを実施例で実証する。

Claims (26)

1. ビスホスホン酸またはその塩および：中鎖脂肪酸のエステルまたは親油性ポリエチレングリコールエステルから選択される不活性成分を含有し、該不活性成分の親水性親油性バランス（ＨＬＢ）が約１から約３０である経口投与形態を含む、医薬製剤。
2. 該ビスホスホン酸またはその塩が骨吸収阻害剤である、請求項１に記載の医薬製剤。
3. 該骨吸収阻害剤が骨粗鬆症または異常な破骨細胞活性に関連する疾患を処置または予防するのに有用である、請求項１または２に記載の医薬製剤。
4. 該ビスホスホン酸またはその塩がイバンドロン酸、アレンドロン酸、エチドロン酸、リセドロン酸およびチルドロン酸またはその塩からなる群から選択され得る、請求項１から３のいずれかに記載の医薬製剤。
5. 該ビスホスホン酸またはその塩がゾレドロン酸またはその塩である、請求項１から３のいずれかに記載の医薬製剤。
6. 該不活性成分が中鎖脂肪酸（主にカプリル酸）のプロピレングリコールモノエステルである、請求項１から５のいずれかに記載の医薬製剤。
7. 該不活性成分のＨＬＢが４.４である、請求項６に記載の医薬製剤。
8. 該不活性成分がコハク酸Ｄ−アルファ−トコフェリルポリエチレングリコール１０００である、請求項１から５のいずれかに記載の医薬製剤。
9. 該不活性成分が中鎖脂肪酸（主にカプリル酸）のプロピレングリコールモノエステルおよびコハク酸Ｄ−アルファ−トコフェリルポリエチレングリコール１０００の組み合わせである、請求項１から８のいずれかに記載の医薬製剤。
10. 該ビスホスホン酸またはその塩の用量が約０.０１ｍｇ／ｋｇから約５００ｍｇ／ｋｇの範囲にある、請求項１から９のいずれかに記載の医薬製剤。
11. 該ビスホスホン酸またはその塩の用量が約０.１ｍｇ／ｋｇから約２００ｍｇ／ｋｇの範囲にある、請求項１から１０のいずれかに記載の医薬製剤。
12. 該ビスホスホン酸またはその塩の用量が約０.２ｍｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇの範囲にある、請求項１から１１のいずれかに記載の医薬製剤。
13. 該ビスホスホン酸またはその塩のバイオアベイラビリティーの上昇または耐容性の上昇を提供するために請求項１から１２のいずれかに記載の経口投与形態を投与することを含む、処置法。
14. 該バイオアベイラビリティーの上昇を絶対的バイオアベイラビリティーの上昇として測定する、請求項１３に記載の方法。
15. 該絶対的バイオアベイラビリティーが約１％から約５０％の範囲にある、請求項１４に記載の方法。
16. 該絶対的バイオアベイラビリティーが約２.５％から約３０％の範囲にある、請求項１４に記載の方法。
17. 該絶対的バイオアベイラビリティーが約７.５％から約２０％の範囲にある、請求項１４に記載の方法。
18. 該バイオアベイラビリティーの上昇が該対象において約１から約１６０００ｎｇ／ｍｌの範囲にある血中レベルＣｍａｘとして測定される、請求項１４に記載の方法。
19. 該バイオアベイラビリティーの上昇が該対象において約１０から約８０００ｎｇ／ｍｌの範囲にある血中レベルＣｍａｘとして測定される、請求項１４に記載の方法。
20. 該バイオアベイラビリティーの上昇が該対象において約１００から約４００００ｎｇ／時／ｍｌの範囲にある血中レベルＡＵＣ（０−２４時）として測定される、請求項１４に記載の方法。
21. 該バイオアベイラビリティーの上昇を該対象において約１００から約２００００ｎｇ／時／ｍｌの範囲にある血中レベルＡＵＣ（０−２４時）として測定する、請求項１４に記載の方法。
22. 該耐容性の上昇が消化管毒性の低下として測定される、請求項１４に記載の方法。
23. 該ビスホスホン酸またはその塩のバイオアベイラビリティーの上昇および耐容性の上昇を提供するために請求項１から１２のいずれかに記載の投与形態を投与することを含む、処置法。
24. ビスホスホン酸またはその塩を不活性成分中に懸濁して分散物を生成すること；および分散物をカプセル封入することを含む、請求項１に記載の製剤の製造法。
25. ビスホスホン酸またはその塩を懸濁する前に不活性成分を予め加熱する、請求項２３に記載の方法。
26. 分散物をゼラチンカプセルにカプセル封入する、請求項２３または２４に記載の方法。