JP2007284446A

JP2007284446A - 癌増殖を阻止するベンゾイミダゾール含有医薬組成物

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Publication number: JP2007284446A
Application number: JP2007176633A
Authority: JP
Inventors: James Berger Camden; カムデン，ジェイムズ，バーガー
Original assignee: UAF Technologies and Research LLC
Current assignee: UAF Technologies and Research LLC
Priority date: 1995-04-12
Filing date: 2007-07-04
Publication date: 2007-11-01
Also published as: DE69628645D1; KR19980703828A; WO1996032107A1; HUP9801532A2; SK138497A3; CA2217952A1; EP0821586B1; IL117875A0; EP0821586A1; TR199701147T1; ATE242634T1; TW427887B; TR199801562T2; JPH11503459A; CZ323497A3; CN1181010A; NO974695D0; CA2217952C; BR9604974A; PL322733A1

Abstract

【課題】哺乳動物の腫瘍および癌の増殖を阻止しウィルス感染症の治療に用いることができる医薬組成物の提供。
【解決手段】使用する特殊の殺真菌薬は、式（Ｉ）であらわされるベンゾイミダゾールの誘導体であり、式（Ｉ）中Ｘは水素、ハロゲン、７個より少ない炭素原子をもつアルキル、または７個より少ない炭素原子をもつアルコキシであり；ｎは４より小さい正の整数であり；Ｙは水素、塩素、ニトロ、メチルまたはエチルであり；そしてＲはブチルカルバモイルであり、Ｒ^２はＮＨＣＯＯＲ^１であり、ここでＲ^１は７個より少ない炭素原子をもつ脂肪族炭化水素あり、またはその医薬に許容可能な無機または有機酸付加塩である。
【選択図】図１

Description

本発明は哺乳動物、特にヒトおよび温血動物における白血病を含める癌および腫瘍の増殖を阻止する医薬組成物である。これはウィルスにも効果があり、ウィルス感染症の治療に用いることができる。この組成物はベンゾイミダゾール誘導体を含む。

癌は動物およびヒトの主な死亡原因である。癌の正確な原因は不明であるが、喫煙または発癌性物質への暴露などの或る種の行動に関係しており、或る種の癌および腫瘍の発生は多くの研究者によって明らかにされている。

多くの種類の化学療法剤が癌および腫瘍細胞に対して有効であることが示されたが、すべての種類の癌および腫瘍がこれらの薬剤に反応するわけではない。残念ながら、これら薬剤の多くは正常細胞も破壊する。これら化学療法剤の正確な作用メカニズムは必ずしもわかっていない。

癌治療分野における進歩にもかかわらず今日までの主な治療法は手術、放射線照射、化学療法および骨髄移植である。化学療法剤治療は転移性の癌または特に攻撃的な癌を攻撃すると言われている。このような殺細胞性または細胞増殖抑制性薬剤は大きい増殖因子をもつ癌、すなわち癌細胞が急速に分裂しつつある癌に最もよく効く。今日のところ、ホルモン類、特にエストロゲン、プロゲステロンおよびテストステロン、および種々の微生物によって産生される若干の抗生物質、アルキル化剤、および代謝拮抗物質が腫瘍学者の使用できる治療群を構成する。癌および腫瘍細胞に特異性をもち、正常細胞には影響を与えない理想的細胞増殖抑制性薬剤が切望される。残念ながら、このようなものは発見されず、その代わりに特に速やかに分裂する細胞（腫瘍および正常細胞両方）を標的にした薬剤が用いられている。

米国特許第３, ７３８, ９９５号明細書米国特許第３, ９０３, ２９７号明細書米国特許第５, １１４, ９５１号明細書米国特許第３, ９０３, ２９７号明細書 Brown ら, J. Am. Chem. Soc.、８３巻、１７６４ページ（１９６１） Grenda ら, J. Org. Chem.、３０巻、２５９ページ（１９６５） Dorrら、「癌化学療法ハンドブック(Cancer Chemotherapy Handbook)」２版、１５〜３４ページ、Appleton & Lange（コネチカット、１９９４）「７種類の近代的薬物(7 Modern Pharmaceutics)」の９および１０章（バンカー＆ローズ(Banker & Rhodes) 編、１９７９）リーベルマン(Lieberman) ら、「薬剤投与型：錠剤(Pharmaceutical Dosage Forms：Tablets)」（１９８１）アンセル(Ansel) 、「薬剤投与型の紹介第２版(Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms 2nd Edition)」（１９７６）

腫瘍細胞に対する或る特殊の特異性によってそれら腫瘍細胞を標的にする物質の開発が打開策であるのは明らかである。或いは腫瘍細胞に対して細胞傷害性であり、他方正常細胞には緩和な作用をあらわす物質が所望である。そこで、哺乳動物の腫瘍および癌の増殖を有効に抑制し、正常細胞には影響を与えないかまたは緩和な影響のみを与える医薬組成物を提供することが本発明の目的である。

より詳細に述べるならば、医薬担体と本明細書に定義されるベンゾイミダゾール誘導体とを含む抗癌組成物並びにこのような癌の治療法を提供することが本発明の目的である。

白血病細胞に対する特殊の特異性をもつためにそれら白血病細胞を標的にする物質の開発も突破口になる。或いは、白血病細胞に対して細胞傷害性であり、他方正常細胞には緩和な影響をあらわす物質が所望される。そのため、本発明の目的は白血病の治療に有効であり、正常血球には影響を与えないかまたは緩和な影響のみを与える医薬組成物を提供することである。

より詳細に述べるならば、医薬担体とここに定義されるベンゾイミダゾール誘導体とを含む組成物を、白血病治療法と共に提供することが本発明の目的である。

これらベンゾイミダゾール組成物は化学療法剤と組み合わせて用いるとき、白血病を含める癌および腫瘍の増殖を抑制し得ると考えられる。ベンゾイミダゾールは癌、腫瘍、ウィルスまたは細菌の増殖抑制に特に有効である。これらベンゾイミダゾールと、腫瘍を効果的に破壊する他の化学療法剤との併用は、新規の治療法である。

より詳細に述べるならば、本明細書に明らかにした医薬担体とベンゾイミダゾール誘導体と化学療法剤とを含む抗癌組成物を、このような癌の治療法と共に提供することが本発明の目的である。これらの組成物には増強剤を用いることができる。

ベンゾイミダゾール組成物はウィルスに対しても効果があり、ウィルス感染症の治療に用いることができる。そのため、本発明のもう一つの目的は、ベンゾイミダゾールを増強剤と組み合わせて投与する、ＨＩＶ、インフルエンザおよびリノウィルスなどのウィルス感染症の治療法を提供することである。

これらのおよびその他の目的は下記の本発明の詳細な説明から明らかになる。

哺乳動物、特に温血動物およびヒトの白血病を含む癌、腫瘍を治療するための医薬組成物であって、医薬担体と、下記の式であらわされる群から選択される抗癌化合物を有効量含有する医学組成物が請求される。

［式中、Ｘは水素、ハロゲン、７個より少ない炭素原子をもつアルキル、または７個より少ない炭素原子をもつアルコキシであり；ｎは４より小さい正の整数であり；Ｙは水素、塩素、ニトロ、メチルまたはエチルであり；Ｒは水素、炭素原子１から８までのアルキル基またはブチルカルバモイルであり、Ｒ^２は４−チアゾリル、ＮＨＣＯＯＲ^１であり、ここでＲ^１は７個より少ない炭素原子をもつ脂肪族炭化水素、より好適には７個より少ない炭素原子をもつアルキル基である。］

これらの組成物を用い、その有効量を経口、直腸内、局所または非経口、静脈内投与し、または腫瘍に注入することによって、ヒトまたは動物の癌およびその他の腫瘍の増殖を抑制することができる。これらの組成物は、健康な細胞に有害な影響をもたらすアドリアマイシンに比べて、非常に健康な細胞に影響しない。

哺乳動物、特に温血動物およびヒトの治療用医薬組成物であって、医薬担体と有効量の化学療法剤および上記のベンゾイミダゾールを含む医薬組成物。

増強剤(poteniators) をこの組成物と共に用いることもできる。

好適には、組成物は下記の式であらわされる。

［式中、Ｒは１−８個の炭素原子をもつアルキルであり、Ｒ^２は４−チアゾリル、ＮＨＣＯＯＲ^１からなる群から選択され、ここでＲ^１はメチル、エチルまたはイソプロピルである化合物、および有機および無機酸との無毒性の医薬に許容可能な酸付加塩である。］

最も好ましい化合物は２−（４−チアゾリル）ベンゾイミダゾール、メチル−（ブチルカルバモイル）−２−ベンゾイミダゾールカルバメートおよび２−メトキシカルボニルアミノ−ベンゾイミダゾールおよびＹがクロロであるそれらの化合物である。

ヒトまたは動物の癌およびその他の腫瘍の増殖を抑制することができる。

Ａ．定義：
本明細書に用いる用語「含む(comprising)」は、種々の成分が本発明の医薬組成物に一緒に用いられることを意味する。よって、「実質上〜からなる (consisting essentially of) 」および「〜からなる(consisting of) 」は用語comprisingに包含される。

本明細書に用いる用語「医薬に許容可能な」成分とは、不当な不都合な副作用（例えば毒性、刺激、およびアレルギー反応）がなく、合理的な利益／リスク比をもった、ヒトおよび／または動物に使用するのに適した成分である。

本明細書に用いる用語「安全で有効な量」とは、本発明の方法で用いた場合に不当な不都合な副作用（毒性、刺激またはアレルギー反応など）がなく、すなわち合理的な利益／リスク比をもって所望の治療効果を与えるのに十分な成分量を言う。特異的「安全で有効な量」は治療すべき特殊の条件、患者の肉体的状態、治療する哺乳動物の種類、治療期間、併用治療（もしあれば）の性質、および用いられる特殊の処方および化合物またはその誘導体の構造などの要因によって変化するのは明らかである。

本明細書に用いる「医薬付加塩」とは、抗癌化合物の有機または無機酸との塩である。これらの好適酸付加塩は塩化物、臭化物、硫酸塩、硝酸塩、燐酸塩、スルホン酸塩、蟻酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、アスコルビン酸塩などである。

本明細書に用いる「医薬担体」とは、抗癌剤を動物またはヒトにデリバリーするための医薬に許容可能な溶剤、沈殿防止剤(suspending agent)またはビヒクル、例えばリポソームなどである。担体は液体でも固体でもよく、計画した投与法を念頭に置いて選択される。

本明細書に用いる「癌」とは哺乳動物に見られる腫瘍および白血病を含めるあらゆる種類の癌または新生物または悪性腫瘍を指す。癌には正常健康細胞を攻撃する悪性疾患も含まれる。白血病は正常健康血球、並びに哺乳動物に見られる骨細胞産生性骨髄を攻撃する疾患を含む。

本明細書に用いる「抗癌化合物」とはベンゾイミダゾールおよびそれらの塩類である。正確なベンゾイミダゾール類は以下に詳細に記載する。好適材料は、ＢＡＳＦおよびヘキスト、デュポンおよびＭＳＤ−ＡｇＶｅｔから「チアベンダゾール（登録商標）」、「ベノミル（登録商標）」および「カルベンダジン（登録商標）」の名称で販売されている製品である。

本明細書に用いる「ウィルス」は動物またはヒトを含む哺乳動物に感染するウィルスを含む。ウィルスにはＨＩＶ、インフルエンザ、ポリオウィルス、ヘルペス、リノウィルスなどが含まれる。

本明細書に用いられる「化学療法剤」はＤＮＡ相互作用性薬剤、代謝拮抗物質、チュブリン相互作用性薬剤、ホルモン剤およびその他、例えばアスパラギナーゼまたはヒドロキシウレアなどを含める。

本明細書に用いられる「増強剤」とは、化学療法剤およびベンゾイミダゾールと組み合わせて用いるトリプロリジンおよびそのシス型異性体、およびプロコダゾールなどの物質である。

Ｂ．抗癌化合物
本発明の抗癌化合物は、殺真菌作用が公知のベンゾイミダゾール誘導体である。それらは真菌を抑制、根絶するために用いられる浸透性(systemic)殺真菌薬である。この化合物は下記の構造をもつ：

［構造中、Ｘは水素、ハロゲン、７個より少ない炭素原子をもつアルキル、または７個より少ない炭素原子をもつアルコキシであり；ｎは４より小さい正の整数であり；Ｙは水素、塩素、ニトロ、メチルまたはエチルであり；Ｒは水素、炭素原子１から８までのアルキル基またはブチルカルバモイルであり、Ｒ^２は４−チアゾリル、ＮＨＣＯＯＲ^１で、ここでＲ^１は７個より少ない炭素原子をもつ脂肪族炭化水素、より好適には７個より少ない炭素原子をもつアルキル基である。］。

好適には本組成物は下記の式であらわされる：

［式中、Ｒは１から８までの炭素原子をもつアルキル、Ｒ^２は４−チアゾリル、ＮＨＣＯＯＲ^１からなる群から選択され、ここでＲ^１はメチル、エチルまたはイソプロピル、ならびに有機および無機酸との無毒性で医薬に許容可能な酸付加塩である。］
最も好適な化合物は２−（４−チアゾリル）ベンゾイミダゾール、メチル−（ブチルカルバモイル）−２−ベンゾイミダゾールカルバメートおよび２−メトキシカルボニルアミノ−ベンゾイミダゾール、およびＹがクロロでＸが水素であるそれらの化合物である。

これらの化合物は１９７３年６月１２日にアダムス(Adams) らに与えられた特許文献１に記載された方法によって製造される。チアゾリル誘導体は、ブラウン(Brown) らの非特許文献１およびグレンダ(Grenda)らの非特許文献２に記載されている方法によって製造される。

殺真菌薬、特に浸透性殺真菌薬は腫瘍を抑制しまたはそれらの増殖を著しく減少させることができる。浸透性殺真菌薬は植物または動物体全体を移動する能力をもつ。これはプラスの特性であるとはいえ、ウィルス感染症、癌または腫瘍を治療する有効な化合物の重要な必要事項ではない。

Ｃ．化学療法剤
化学療法剤は一般にＤＮＡ相互作用性薬剤、代謝拮抗物質、チュブリン相互作用性薬剤、ホルモン剤およびその他、例えばアスパラギナーゼまたはヒドロキシウレアなどに分類される。化学療法剤の各群はさらに活性または化合物の種類によって分けることができる。本発明の抗癌剤またはベンゾイミダゾールと組み合わせて用いる化学療法剤はこれらすべての群のメンバーを含める。化学療法剤およびそれらの投与法を詳細に検討するためには、ドール(Dorr)らの非特許文献３を参照することによって、その内容が本明細書の一部を構成するものとする。

ＤＮＡ相互作用性薬剤には、シスプラチン、シクロホスファミド、アルトレタミンなどのアルキル化剤；ブレオマイシンなどのＤＮＡ鎖切断剤；ダクチノマイシンおよびドキソルビシンなどの挿入性トポイソメラーゼ II インヒビター；エトポシドおよびテニポシドなどの非挿入性トポイソメラーゼ II インヒビター；およびプルカミジンなどのＤＮＡ小溝(minor groove)結合剤が含まれる。

アルキル化剤は細胞性ＤＮＡ、ＲＮＡ、および蛋白質分子と、および比較的小さいアミノ酸、グルタチオンおよび同様な化学物質と共有結合化学的付加物を形成する。一般にこれらアルキル化剤は、核酸、蛋白質、アミノ酸、またはグルタチオン中の例えばアミノ、カルボキシル、燐酸、スルフヒドリル基などの細胞構成成分中の求核原子と反応する。癌治療におけるこれらアルキル化剤のメカニズムおよび役割は十分には理解されていない。典型的アルキル化剤は下記のものを含む：
ナイトロジェンマスタード、例えばクロラムブシル、シクロホスファミド、イソファミド、メクロルエタミン、メルファラン、ウラシルマスタード；
アジリジン、例えばチオテパ；
メタンスルフォン酸エステル、例えばブスルファン；
ニトロソウレア、例えばカルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン；
白金錯化合物、例えばシスプラチン、カルボプラチン；
生体内還元性アルキレーター、例えばマイトマイシン、プロカルバジン、ダカルバジンおよびアルトレタミン。

ＤＮＡ鎖切断剤はブレオマイシンを含める。

ＤＮＡトポイソメラーゼ II インヒビターは下記のものを含む;
挿入剤、例えばアムサクリン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、イダルビシン、およびミトキサントロン；
非挿入剤、例えばエトポシドおよびテニポシド。

ＤＮＡ小溝結合剤はプリカマイシンである。

代謝拮抗物質は二主要メカニズムのうちのどちらかによって核酸の産生を阻害する。これら薬剤の幾つかは、ＤＮＡ合成の直接的前駆物質であるデオキシリボヌクレオシド三燐酸の産生を阻止し、これによってＤＮＡ複製を阻止する。若干の化合物はプリン類またはピリミジン類に十分似ており、同化ヌクレオチド経路においてそれらに置換し得る。これらの類似化合物はその後ＤＮＡおよびＲＮＡの通常の相対物に代わってそれらＤＮＡおよびＲＮＡ中に置換される。ここで有用な代謝拮抗物質は下記のものを含める：
葉酸拮抗物質、例えばメトトレキセートおよびトリメトレキセート；
ピリミジン拮抗物質、例えばフルオロウラシル、フルオロデオキシウリジン、ＣＢ３７１７、アザシチジン、シタラビン、およびフロキシウリジン；
プリン拮抗物質はメルカプトプリン、６−チオグアニン、フルダラビン、ペントスタチンを含める；
糖改質類似化合物はシクトラビン、フルダラビンを含める；
リボヌクレオチド還元酵素インヒビターはヒドロキシウレアを含める。

チュブリン相互作用性薬剤は、重合して細胞の微小管を形成する蛋白質であるチュブリンの特異的部位に結合することによって作用する。微小管は重要な細胞構造単位である。相互作用性薬剤がその蛋白質に結合するとき、細胞は微小管を形成することができない。チュブリン相互作用性薬剤にはビンクリスチンおよびビンブラスチン（両方ともアルカロイドである）およびパクリタクセルがある。

ホルモン剤も癌および腫瘍治療に有用である。それらはホルモン感受性腫瘍に用いられ、普通は天然資源から誘導される。これらには次のものが含まれる：
エストロゲン、共役(conjugated)エストロゲンおよびエチニルエストラジオールおよびジエチルスチルベステロール、クロルトリアニセンおよびイデネストロール；
プロゲスチン、例えばヒドロキシプロゲステロンカプロエート、メドロキシプロゲステロン、およびメゲストロール；
アンドロゲン、例えばテストステロン、テストステロンプロピオネート; フルオキシメステロン、メチルテストステロン。

副腎コルチコステロイド類は天然の副腎コルチゾルまたはヒドロコーチゾンから誘導される。これらが用いられるのは、それらのもつ抗炎症効果並びにそれらの若干がもつ有糸分裂阻止効果およびＤＮＡ合成抑制効果のためである。これらの化合物にはプレドニゾン、デキサメタゾン、メチルプレドニゾロン、およびプレドニゾロンがある。

黄体化ホルモン放出ホルモン剤、またはゴナドトロピン放出ホルモン拮抗剤は主として前立腺癌の治療に用いられる。これらにはロイプロリドアセテートおよびゴセレリンアセテートがある。これらは精巣におけるステロイド類の生合成を阻害する。

抗ホルモン薬には次のものが含まれる：
抗エストロゲン薬、例えばタモキシフェン；
抗アンドロゲン薬、例えばフルタミド；そして
抗副腎薬、例えばミトタンおよびアミノグルテチミド。

ヒドロキシウレアは主として酵素リボヌクレオチド還元酵素の阻害によって作用するようにみえる。

アスパラギナーゼはアスパラギンを非機能性アスパラギン酸に変換し、それによって腫瘍中の蛋白質合成を遮断する酵素である。

Ｄ．増強剤
「増強剤」は医薬組成物および／または免疫抑制剤の効果を改善および／または増加するいかなる物質でもよい。このような増強剤の１つは、トリプロリジンおよびそのシス型異性体である；これらは化学療法剤およびベンゾイミダゾールと組み合わせて用いられる。トリプロリジンは特許文献３に記載されている。その他の増強剤はプロコダゾール、１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−プロパン酸；［β−（２−ベンゾイミダゾール）プロピオン酸；２−（２−カルボキシエチル）ベンゾイミダゾール；プロパゾール］である。プロコダゾールはウィルスおよび細菌感染症に対する非特異的活性免疫防御剤であり、ここに請求される組成物と併用することができる。それはベンゾイミダゾールのみと共に癌、腫瘍、白血病およびウィルス感染症を有効に治療することもできるし、ベンゾイミダゾールと化学療法剤との組み合わせと併用することもできる。プロピオン酸およびその塩類およびエステル類もここに請求される医薬組成物と組み合わせて用いることができる。

増強剤は、ベンゾイミダゾール化合物のウィルス性および他の感染症の治療効果も改善する。増強剤は安全で有効な量でこれらの抗癌剤と組み合わせて用いることができる。これらの組み合わせを患者または動物に、経口、直腸内、局所または非経口的に投与することができる。

アスコルビン酸、ベータ−カロチン、ビタミンＡおよびビタミンＥなどの抗酸化性ビタミンは本発明の組成物と共に投与できる。

Ｅ．用量
本発明の方法においては適切ないかなる用量を投与してもよい。化合物および担体の種類および量は温血動物またはヒトの種、体重および治療すべき癌または腫瘍によって広く変動する。使用する化学療法剤および抗癌化合物の範囲および比率は化学療法剤および治療する癌の種類に依存する。一般に体重１キログラム（ｋｇ）あたり約２ミリグラム（ｍｇ）ないし約４００ｍｇの用量が適切である。ベンゾイミダゾールでは１５ｍｇないし約１５０ｍｇ／（体重１ｋｇ）を使用するのが好ましい。化学療法剤ではより少量、すなわち約０. ５ｍｇ／（体重１ｋｇ）ないし約４００ｍｇ／（体重１ｋｇ）が適切である。一般にヒトにおける用量はマウスなどの温血小動物の場合より少ない。用量単位は単独化合物か、またはそれらと他の化合物または他の癌抑制化合物との混合物を含んでもよい。用量単位は希釈剤、増量剤、担体なども含むことができる。その単位は固体またはゲル状、例えばピル、錠剤、カプセル、リポソームなどでも、経口、直腸内、局所、非経口投与または静脈内投与、または腫瘍部位または腫瘍部位周辺にまたは骨髄または骨髄周辺への注入に適する液状であってもよい。

Ｆ．投与量デリバリー系
抗癌化合物および化学療法剤は一般的には医薬に許容可能な担体と混合される。この担体は固体または液体、またはリポソームでもよく、その種類は使用する投与型に基づいて選択されるのが普通である。活性薬剤を、錠剤またはカプセル、リポソームの形状で、または集塊性粉末として、または液状で、混合して投与することができる。適切な固形担体の例はラクトース、スクロース、ゼラチンおよび寒天を含める。カプセルまたは錠剤は処方が容易で、呑み込んだり噛んだりし易い；その他の固体形には顆粒、および嵩高の粉末(bulk powder) が含まれる。錠剤は適切な結合剤、滑剤、希釈剤、崩壊剤、着色料、香料、流動化剤、および溶解剤を含んでもよい。適切な液体投与型の例は水溶液または水懸濁液、医薬に許容可能な脂肪および油、アルコール類、またはエステル、乳濁液、シロップ、またはエリキシル、懸濁液を含めるその他の有機溶媒、非発泡性顆粒から再構成した溶液および／または懸濁液、発泡性顆粒から再構成した発泡性製剤などを含める。このような液体投与型は例えば適した溶剤、保存料、乳化剤、沈殿防止剤、希釈剤、甘味料、増粘剤および溶解剤を含んでもよい。経口投与型は任意的に香料および着色料を含む。非経口および静脈内投与型はミネラルおよび、選択された注入またはデリバリーシステムのタイプにそれらを適合させるその他の物質も含む。

本発明の経口投与型を処方するために用いられる医薬に許容可能な担体および賦形薬の特殊の例は１９７５年９月２日にロバート（Robert）による特許文献４に記載されている。本発明に有用な投与型を作る技術および組成物は非特許文献４〜６の参照文献に記載されている。

Ｇ．治療法
治療法は治療しようとする特定の癌または腫瘍タイプの治療に有効な適切な方法であればいかなる方法でもよい。治療は経口、直腸内、局所、非経口、または静脈内投与もしくは腫瘍内への注入などによって行われる。有効量を適用する方法も治療する腫瘍によって変わる。適切な担体、付加的癌抑制化合物または化合物類、または使用を容易にする希釈剤と共に処方したベンゾイミダゾール化合物を静脈内、皮下または筋肉内投与により非経口投与するのが、温血動物にこれら化合物を投与する好ましい方法であると考えられる。

ウィルス感染症の治療法も経口、直腸内、局所、非経口または静脈内投与により行われてもよい。実際の時間および用量は治療するウィルスおよび所望血中濃度に依存する。

これら同一の浸透性殺真菌剤を単独で、またはその他の殺真菌剤と組み合わせて、化学療法剤と併用することができる。

これらの材料と共に用いることができるその他の殺真菌剤には、
１Ｈ−１，２，４−トリアゾール誘導体、例えばフルコナゾール、およびプロピコナゾール、およびＮ−クロロフェニルチオカルバメートが含まれる。Ｎ−ホスフォノグリシン誘導体のような除草剤、例えばグリフォセートなど、もベンゾイミダゾールと組み合わせて用いることができる。

下記の実施例は例証的であり、本発明を制限するものではない。

結腸、乳および肺癌細胞テスト
次のような細胞培養試験を行い、ベンゾイミダゾール化合物のヒト結腸、乳および肺癌細胞に対する毒性を試験した。細胞の生存度はＭＴＴ（３−［４，５−ジメチルチアゾール−２−イル］−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド）還元を見ることによって評価した。ＭＴＴ分析試験は細胞生存度の公知の尺度である。

結腸癌細胞（アメリカ型培養コレクション（ＡＴＣＣ）からのＨＴ２９）および乳細胞（ＡＴＣＣの細胞系からのＭＸ１）を１０％ウシ胎児血清を含むイーグル最小必須培地に培養した。肺癌細胞（ＡＴＣＣ細胞系からのＡ５４９）は１０％ウシ胎児血清を含むハムのＦ１２培地に培養した。

この腫瘍細胞を継代培養し、培養フラスコに所望の細胞密度で植え付けた。培養培地を傾瀉し、細胞シートを燐酸緩衝食塩液（ＰＢＳ）で２回洗った。細胞をトリプシン化(trypsinized) し、つき砕き(triturated)、それからフラスコに植え付けた。特に記載しない限り、培養物を３７±１℃で、空気中５±１％二酸化炭素の加湿空気中でインキュベートした。培養物を、それらが５０〜８０％融合するまでインキュベートした。

フラスコがほぼ融合状態になったときに細胞を継代培養した。培地をフラスコから吸引し、細胞シートをＰＢＳで２回すすいだ。次に、トリプシン溶液を各フラスコに加えて細胞シートを覆った。３０〜６０秒後にそのトリプシン溶液を除去し、フラスコを室温で２〜６分間インキュベートした。細胞の９０％が追い出されたときに増殖培地を加えた。細胞をつき砕いて(trituration) 取り出し、滅菌した遠心分離管に移した。懸濁液中の細胞濃度を測定し、適当に希釈して５０００細胞／ｍｌの密度にした。細胞を９６ウェルバイオアッセイプレートの指定されたウェルで継代培養した（１ウェルあたり細胞懸濁液２００マイクロリットル）。ＰＢＳを残りのすべてのウェルに入れて湿度を保持した。それからプレートを１晩インキュベートし、その後試験物処理をした。

試験物の各用量を試験するために、各希釈物１００マイクロリットルで培養物の４重の（４回づつの）ウェルを処理した。溶剤対照標準として指定されたウェルには付加的に１００マイクロリットルのメタノール対照標準を入れた；陰性対照標準のウェルには処理培地１００マイクロリットルを付加的に入れた。試験物または培地で処理しなかった残るウェルにはＰＢＳを加えた。プレートをその後約５日間インキュベートした。

５日間のインキュベーションの終わりに、各用量群を顕微鏡で検査し、毒性を評価した。処理培地中ＭＴＴの０.５ｍｇ／ｍｌ希釈物を作り、その希釈物を０. ４５マイクロリットルフィルターを通して濾過し、溶解しなかった結晶を除去した。培地をバイオアッセイプレートのウェルから傾瀉した。その直後に、濾過したＭＴＴ溶液２０００マイクロリットルを、２個の未処理ブランク試験ウェルを除く全ての試験ウェルに加えた。２個のブランクウェルには処理培地２００マイクロリットルを加えた。プレートを約３時間インキュベーターに戻した。インキュベーション後、培地を含むＭＴＴを傾瀉した。過剰の培地を各ウェルに加え、プレートを室温で約２時間振動した。

各ウェルの５５０ｎｍの吸光度（ＯＤ５５０）をモレキュラー・デバイス(Molecular Device) (Menlo Park, CA) ＶＭａｘプレートリーダーで測定した。

溶剤対照標準ウェルの平均ＯＤ５５０、および各試験物希釈物および各ブランクウェルおよび陽性対照標準の平均ＯＤ５５０を計算した。ブランクウェルの平均ＯＤ５５０を溶剤対照標準ウェルの平均値および試験物ウェルの平均値から差し引くと、それぞれの平均ＯＤ５５０が得られる。

試験物希釈の補正平均ＯＤ５５０
対照標準％＝ ------------------------------------- ×１００
溶剤対照標準のＯＤ５５０の補正平均値

用量反応曲線を、縦軸に対照標準の％（直線）および横軸に試験物の濃度（対数）を取り、半対数プロットして作成した。ＥＣ５０は各試験物のプロットから補外法で求めた。

メタノール中で投与した試験物では、別個の反応を作成し、メタノールデータを補正した。

陽性対照標準としてアドリアマイシンを用いた。すべての場合に、それは試験材料のどれよりも１または２log だけ毒性が大きかった。アドリアマイシンは現在使用される比較的強力な作用物質の１つであり、顕著な副作用をもっている物質である。その他の極めて有効な化学療法剤類の最大血中濃度はアドリアマイシンの最大血中濃度より１０ないし５０倍も高いらしい。

ＥＣ５０は細胞の半数が死滅する濃度である。

正常健康細胞では、下記の結果が得られた。明らかにベノミルおよびカルベンダジンは正常健康細胞に対してアドリアマイシンより遥かに毒性が小さい。

肺癌細胞（Ａ−５４９）、乳癌細胞（ＭＣＦ−７）および結腸癌細胞（ＨＴ−２９）を用いた関連研究において、浸透性殺真菌剤であるチアベンダゾールはこれらの細胞を効果的に殺した。表３はその結果をまとめたものである。

これらの実験はこれら組成物が有効に腫瘍細胞を殺すことを示す。

マウスを無作為に選択し、群に分けて処理した。５群に白血病を感染させた。疾患動物に５日間投与し、２日間は投与せず、その後さらに５日間投与し、３日間休薬し、それから５日間投与して２日間休薬した。この不規則なパターンでの間歇投与は理想的治療法ではなかったが、結果はカルベンダジン（登録商標）がプラスの効果をもつことを示した。マウスの１群はシトキサン（登録商標）、２−［ビス（２−クロロエチル）−アミノ−１−オキソ−２−アザ−５−オキソホスフォリジン］で治療し、対照標準をカノーラ油で投与した。３群は種々の濃度のカルベンダジン（登録商標）、メチル−（ブチルカルバモイル）−２−ベンゾイミダゾール−カルバメートで治療した。何も投与しない対照標準も用いた。カルベンダジン（登録商標）を４０００ｍｇ／ｋｇ、２５００ｍｇ／ｋｇおよび１０００ｍｇ／ｋｇの３種類の濃度で投与した。シトキサン（登録商標）を１２５ｍｇ／ｋｇで投与した。８日後、非投与群では１匹のマウスが死に、１０日目までに８匹が死に、１１日目には１０匹のマウスすべてが死んだ。シトキサン（登録商標）群のマウスは２１日以上生存した。多量カルベンダジン（登録商標）を投与した群では１４日目に１匹のマウスが死に、１５、１６および１７日目に２匹づつが死に、２０、２１および２２日目に１匹づつが死んだ。この群の平均日数は１７．３である。中間量投与群は１４日目に２匹のマウスが死に、１５日目に４匹、１６日目に１匹、１９日目に２匹、そして２１日目に１匹死んだ。この群の平均日数は１６. ５０であった。最小量投与群では１２、１３、１４および１５日目に２匹づつのマウスが死んだ；そして１６日と１７日に１匹づつが死んだ。この群の平均日数は１４. １である。

本発明のベンゾイミダゾール誘導体の化学構造式を示す。

Claims

下記式：

［式中Ｘは水素、ハロ、７個より少ない炭素原子をもつアルキル、または７個より少ない炭素原子をもつアルコキシであり；
ｎは４より小さい正の整数であり；
Ｙは水素、塩素、ニトロ、メチル、またはエチルであり；
Ｒはブチルカルバモイルであり；および
Ｒ^２はＮＨＣＯＯＲ^１であり、ここでＲ^１は７個より少ない炭素原子をもつ脂肪族炭化水素である］で表わされる、安全で有効な量のベンゾイミダゾール誘導体またはその医薬に許容可能な酸付加塩を含むことを特徴とする癌を治療するための医薬組成物。
癌が、結腸、乳、または肺癌であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
下記式：

［式中Ｘは水素、ハロ、７個より少ない炭素原子をもつアルキル、または７個より少ない炭素原子をもつアルコキシであり；
ｎは４より小さい正の整数であり；
Ｙは水素、塩素、ニトロ、メチル、またはエチルであり；
Ｒはブチルカルバモイルであり；および
Ｒ^２はＮＨＣＯＯＲ^１であり、ここでＲ^１は７個より少ない炭素原子をもつ脂肪族炭化水素である］で表わされる、安全で有効な量のベンゾイミダゾール誘導体またはその医薬に許容可能な酸付加塩を含むことを特徴とするウイルス感染症を治療するための医薬組成物。
ベンゾイミダゾール誘導体が、体重１ｋｇあたり約２ｍｇ〜約４００ｍｇの量で存在することを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
組成物が、経口、経腸、静脈内、もしくは非経口投与用、または注入用に調合されることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
前記ベンゾイミダゾール誘導体が、メチル−（ブチルカルバモイル）−２−ベンゾイミダゾールカルバメート；またはその医薬付加塩であることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
前記医薬に許容可能な付加塩が、塩化物、臭化物、硫酸塩、硝酸塩、燐酸塩、スルフォン酸塩、蟻酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、アスコルビン酸塩およびそれらの混合物からなる群から選択されることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。