JP2007131638A - フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンをベースとする製剤を生成するための方法ならびにこの方法により入手可能なタンパク質組成物 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンを含むタンパク質組成物の製造方法が開示される。この方法において、フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンを含有する出発溶液を、フィブリノーゲンおよび/またはフィブロネクチンの溶解度を改変する2つの異なる成分を含む沈殿組成物で処理し、それにより単一工程の沈殿においてフィブリノーゲンおよびフィブロネクチンを含む沈殿物が形成され、そして形成された沈殿物は、必要に応じて、それ自体が公知の方法によってさらに処理される。
【選択図】図1
Description
このすぐ使用できる溶液は長期間にわたる貯蔵安定性がないので、必要時に、凍結乾燥製剤からの再構成か、あるいは液体を急速凍結(deep−frozen)した溶液を融解することによって、調製しなければならない。
(項目1) フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンを含むタンパク質組成物の製造方法であって、フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンを含有する出発溶液をフィブリノーゲンおよび/またはフィブロネクチンの溶解度を改変する2つの異なる成分を含む沈殿組成物で処理し、その結果、単一工程の沈殿においてフィブリノーゲンおよびフィブロネクチンを含む沈殿物が形成され、そして形成されたその沈殿物は、必要に応じて、それ自体が公知の方法によってさらに処理される、方法。
(項目2) 得られた上記タンパク質組成物が、それ自体が公知の方法によって、薬学的製剤へと、特に組織接着剤へと処方される、項目1に記載の方法。
(項目3) 血漿、特にヒト血漿、またはフィブリノーゲンおよびフィブロネクチンを含有する血漿画分、好ましくは寒冷沈降物由来の溶液が、上記出発溶液を調製するための出発材料として用いられる、項目1または2に記載の方法。
(項目4) 上記溶解度を改変する成分が、4個までの炭素原子を有するアルコール、無機塩、有機塩、有機ポリマー、ポリオール、特にポリアルキレングリコール、ポリエーテルおよびアミノ酸からなる群から選択される、項目1〜3のうちのいずれか1項に記載の方法。
(項目5) 上記溶解度を改変する成分が、エタノール、ポリエチレングリコール、硫酸アンモニウム、硫酸アルカリまたはアミノ酸、特にグリシンまたはアラニンである、項目1〜4のうちのいずれか1項に記載の方法。
(項目6) 上記沈殿組成物がポリアルキレングリコールを含み、そしてポリアルキレングリコールが上記出発溶液と、最終濃度1〜12%(重量/体積)に、好ましくは4〜8%(重量/体積)に混合される、項目1〜5のうちのいずれか1項に記載の方法。
(項目7) 上記沈殿組成物が1種以上のアミノ酸を含み、そして上記出発溶液と、最終濃度0.5〜3Mに、好ましくは0.75〜2Mに、特に0.75〜1.5Mに混合される、項目1〜6のうちのいずれか1項に記載の方法。
(項目8) 上記沈殿組成物が液体形態で混合される、項目1〜7のうちのいずれか1項に記載の方法。
(項目9) プラスミノゲンが大部分上清に残る沈殿組成物が用いられる、項目1〜8のうちのいずれか1項に記載の方法。
(項目10) 上記出発材料のさらなる成分、特に第XIII因子もまた、上記沈殿組成物によって沈殿する、項目1〜9のうちのいずれか1項に記載の方法。
(項目11) 上記出発材料および/または上記出発溶液が病原体、特にウイルスおよび/またはプリオンの非存在に関してチェックされる、項目1〜10のうちのいずれか1項に記載の方法。
(項目12) 存在する可能性のある病原体の不活化または枯渇のための少なくとも1工程が、上記沈殿の前または後に行われる、項目1〜11のうちのいずれか1項に記載の方法。
(項目13) 熱処理、溶媒による処理、界面活性剤による処理またはこれらの処理の組合せが不活化のために行われる、項目1〜12のうちのいずれか1項に記載の方法。
(項目14) 上記枯渇が、濾過、特に限外濾過によって、好ましくはウイルス結合剤の存在下で行われる、項目12または13に記載の方法。
(項目15) さらなる成分、特に線維素溶解阻害剤、第XIII因子、抗生物質、増殖因子、疼痛軽減物質、抗炎症剤またはそれらの混合物が、上記単一工程沈殿の後に上記タンパク質組成物に混合される、項目1〜14のうちのいずれか1項に記載の方法。
(項目16) 上記タンパク質組成物または薬学的製剤がさらなる処理の過程で急速凍結または凍結乾燥される、項目1〜15のうちのいずれか1項に記載の方法。
(項目17) 項目1〜16のうちのいずれか1項に記載の方法に従って得られる、フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンを含むタンパク質組成物。
(項目18) 凍結乾燥形態、液体形態、または液体急速凍結形態で存在する、項目17に記載のタンパク質組成物。
(項目19) 少なくとも1つの線維素溶解阻害剤がその中に含まれる、項目17または18に記載のタンパク質組成物。
(項目20) 第XIII因子がその中に含まれる、項目17〜19のうちのいずれか1項に記載のタンパク質組成物。
(項目21) 0.02〜0.5の範囲、好ましくは0.02〜0.25の範囲、また好ましくは0.02〜0.2の範囲、より好ましくは0.04〜0.16の範囲、特に0.1であるフィブリノーゲンに対するフィブロネクチンの比を有する、項目17〜20のうちのいずれか1項に記載のタンパク質組成物。
(項目22) そのプラスミノゲン含量が、多くても1.6mg/gフィブリノーゲン、好ましくは0.8mg/gフィブリノーゲン未満、最も好ましくは0.3mg/gフィブリノーゲン未満である、項目17〜21のうちのいずれか1項に記載のタンパク質組成物。
(項目23) 活性物質、例えば抗生物質、増殖因子または疼痛軽減物質あるいはそれらの組合せがその中に含まれる、項目17〜22のうちのいずれか1項に記載のタンパク質組成物。
(項目24) 項目17〜23のうちのいずれか1項に記載のタンパク質組成物であって、
a)溶液として、少なくとも70mgフィブリノーゲン/mlを含むか、あるいは再構成または液化されて、各々、このような溶液となり得、
b)20℃で、好ましくは500mOsm未満、最も好ましくは400mOsm未満の浸透圧モル濃度にて、多くて350cStの粘度を有し、
c)トロンビン−CaCl2溶液と混合した後、生理学的フィブリン構造の不透明な凝塊を形成し、そして
d)ベンゼン含有基、ピリジン含有基、ピペリジン含有基、ピリミジン含有基、モルホリン含有基、ピロール含有基、イミダゾール含有基、ピラゾール含有基、フラン含有基、チアゾール含有基またはプリン含有基を有する溶解度を向上させる物質の添加を含まない、
タンパク質組成物。
(項目25) 項目17〜23のうちのいずれか1項に記載のタンパク質組成物であって、
a)溶液として、少なくとも70mgフィブリノーゲン/mlを含むか、あるいは再構成または液化されて、各々、このような溶液となり得、
b)20℃で、好ましくは500mOsm未満、最も好ましくは400mOsm未満の浸透圧モル濃度にて、多くて150cStの粘度を有し、
c)トロンビン−CaCl2溶液と混合した後、生理学的フィブリン構造の不透明な凝塊を形成し、そして
d)ベンゼン含有基、ピリジン含有基、ピペリジン含有基、ピリミジン含有基、モルホリン含有基、ピロール含有基、イミダゾール含有基、ピラゾール含有基、フラン含有基、チアゾール含有基またはプリン含有基を有する1つまたはいくつかの可溶化物質を全体で多くて150mMの濃度で含む、
タンパク質組成物。
(項目26) 組織接着、止血および/または創傷治癒のための、項目17〜25のうちのいずれか1項に記載のタンパク質組成物の使用。
(項目27) フィブリンをベースとするバイオマトリックスを製造するための、項目17〜26のうちのいずれか1項に記載のタンパク質組成物の使用。
(項目28) 上記バイオマトリックスが、フィルム、不織布および/またはスポンジとして形成される、項目27に記載の使用。
(項目29) 上記バイオマトリックスが細胞、特にヒト細胞の増殖に適している、項目27または28に記載の使用。
(項目30) 創傷の被覆のため、および/または組織代用物、特に皮膚代用物としての、項目27〜29のうちのいずれか1項に記載のバイオマトリックスの使用。
(項目31) 項目17〜25のうちのいずれか1項に記載のタンパク質組成物から得られる、バイオマトリックス。
a)溶液として、少なくとも70mgのフィブリノーゲン/mlを含むか、あるいは再構成または液化されて、各々、このような溶液となり得、
b)20℃で、好ましくは500mOsm未満、最も好ましくは400mOsm未満の浸透圧モル濃度にて、多くて350cStの粘度を有し、
c)トロンビン−CaCl2溶液と混合した後、生理学的フィブリン構造の不透明な凝塊を形成し、そして
d)ベンゼン含有基、ピリジン含有基、ピペリジン含有基、ピリミジン含有基、モルホリン含有基、ピロール含有基、イミダゾール含有基、ピラゾール含有基、フラン含有基、チアゾール含有基またはプリン含有基を有する溶解度を向上させる物質の添加を含まないことによって特徴づけられる。
a)溶液として、少なくとも70mgのフィブリノーゲン/mlを含むか、あるいは再構成または液化されて、各々、このような溶液となり得、
b)20℃で、好ましくは500mOsm未満、最も好ましくは400mOsm未満の浸透圧モル濃度にて、多くて150cStの粘度を有し、
c)トロンビン−CaCl2溶液と混合した後、生理学的フィブリン構造の不透明な凝塊を形成し、そして
d)ベンゼン含有基、ピリジン含有基、ピペリジン含有基、ピリミジン含有基、モルホリン含有基、ピロール含有基、イミダゾール含有基、ピラゾール含有基、フラン含有基、チアゾール含有基またはプリン含有基を有する1つまたはいくつかの可溶化物質を全体で多くて150mMの濃度で含むことによって特徴付けられる。
それ自体が公知の方法によって調製したヒト血漿寒冷沈降物を、20mMクエン酸ナトリウム、120mM塩化ナトリウム、5mMトラネキサム酸並びに1200IUヘパリン/lを含む4倍量の緩衝溶液で溶解し、pHを7.3に調節し、濾過して澄明にした。この溶液のアリコートと、グリシン及びポリエチレングリコール4000(PEG4000)を含む溶液とを、室温で撹拌下で混合した。その際各場合にグリシンの最終濃度が1Mで、PEG4000の最終濃度が1〜10%(w/v)までの範囲の種々の濃度になるようにした。
沈殿混合物中のPEG含量に対する沈殿物のタンパク質組成の依存関係(グリシン濃度:1M)
ヒト血漿寒冷沈降物を、実施例1と同様に溶解し、pHを7.3に調節し、濾過して澄明にした。この溶液のアリコートを実施例1と同様に、グリシンとPEG4000とを含む溶液と混合し、その結果、各場合に最終的PEG濃度が6.5%(w/v)で、0.2Mから1Mまでの範囲の種々のグリシン濃度を得た。生成した沈殿物を実施例1と同様に遠心分離して取り、分析した。
沈殿混合物中のグリシン濃度に対する沈殿物のタンパク質組成の依存関係(PEG濃度:6.5%(重量/体積))
血漿寒冷沈降物を実施例1のように溶解した。室温で撹拌しながらグリシンを最終濃度2mol/lまで加えた。生成したタンパク質沈殿物を実施例1のように遠心分離して取り、分析した。フィブリノーゲンはほとんど完全に沈殿した。フィブリノーゲンの相対含有量は総タンパク質の85%に達し、フィブロネクチンの相対含有量は1.5%であった。したがってフィブロネクチン:フィブリノーゲンの比は0.017であった。
血漿寒冷沈降物を実施例1のように溶解した。室温で撹拌しながらPEG4000を最終濃度10%(w/v)になるまで加えた。生成したタンパク質沈殿物を遠心分離して取り、実施例1と同様に分析した。フィブリノーゲンはほとんど完全に沈殿した。フィブリノーゲンの相対含有量は総タンパク質の72%に達した。フィブロネクチンの相対含有量は16%であった。したがってフィブロネクチン:フィブリノーゲンの比は0.22であった。
血漿寒冷沈降物を実施例1のように溶解した。室温で撹拌しながらPEG4000を最終濃度10%(w/v)になるまで加えた。生成したタンパク質沈殿物を遠心分離して取り、再び溶解し、グリシンをその溶液に最終濃度2Mになるまで撹拌下で室温で加えた。生成したタンパク質沈殿物を再び遠心分離して取り、実施例1と同様に分析した。フィブリノーゲンの相対含有量は総タンパク質の93%に達し、フィブロネクチンの相対含有量は1.5%であった。したがってフィブロネクチン:フィブリノーゲンの比は0.016であった。
(二つの独立したウイルス不活化工程を有する、本発明による凍結乾燥製剤の製造)
それ自体が公知の方法により調製されたヒト血漿寒冷沈降物を4倍量の、20mMクエン酸ナトリウム、120mM塩化ナトリウム、5mMトラネキサム酸(t−AMCHA)並びに1200IU ヘパリン/lを含む緩衝溶液(LP1)で溶解し、濾過して澄明にした。その後いわゆる溶剤−界面活性剤(solvent−detergent)(SD)処理を行い、存在する可能性のあるエンベロープに包まれたウイルス類を不活化した。このために、Triton X−100、Tween 80(Polysorbat−80K)及びトリ−n−ブチルホスフェート(TNBP)の混合物をそれぞれ最終濃度1%、0.3%及び0.3%(v/v)になるように混合した。室温で1時間撹拌後、それを再び濾過して澄明にした。この溶液と、2Mグリシン及び13%(w/v)PEG4000(沈殿組成物)を含む等量の溶液とを室温で撹拌しながら混ぜ合わせた。これを30分間撹拌し、遠心分離した。沈殿物を細かく砕き、1% Tween 80を含むLP1に再び溶解し、同じ方法で沈殿を繰り返した。次いで、SDと沈殿試薬を除去するために、沈殿物を細かく砕き、冷却下(0−2℃)、少量のTween 80の存在下で、10倍量の、10mMクエン酸ナトリウム及び5mMt−AMCHAを含む緩衝溶液で2回処理した。洗浄された沈殿物をその後10mMクエン酸ナトリウム及び5mM t−AMCHAを含む緩衝溶液に溶解した。タンパク質濃度を40g/lに調節した後、その溶液を全体として凍結乾燥した。さらにウイルスを不活化するために、上記凍結乾燥物質を残留水分7−8%に調節し、酸素を排除して60℃で10時間、さらに80℃で1時間加熱した。このように処理した凍結乾燥物をタンパク質濃度38g/lになるように20mMナイアシンアミド溶液に溶解し、低温殺菌したヒトアルブミン6g/lと混ぜ合わせ、pHを7.3に調節した。
50mMナイアシンアミドの存在下での粘度[cSt]
(二つの独立したウイルス不活化工程を有する、本発明による液体急速凍結−組織接着剤の製造)
この製造は滅菌濾過までは実施例6と同様に行われた。その後滅菌濾過溶液を無菌条件下でもう一度凍結乾燥し、溶解して濃縮組織接着剤溶液にし、最終容器(使い捨て注射器)に充填し、急速凍結状態で保存した。このような製剤を使用前に融解しさえすればよい。
測定法を標準化するために、組織接着剤溶液の試料を最初に≦−20℃で凍結する。その粘度を測定するために、その試料を所望測定温度の水浴中で融解し、約30分間この温度でインキュベートし、それからその粘度を温度制御した毛細管粘度計で測定する。その後上記試料を上記粘度計においてより高温度でインキュベートし得、その温度で測定を繰り返し得る。個々の測定は温度を上げながら連続的に行われる。これとは逆の順序で測定した場合、偽りの数値(低すぎる)が得られ得る。なぜならば温度を下げていく場合には、遅くにしか平衡に達しないからである。
血漿寒冷沈降物を実施例1と同様に溶解し、pHを7.3に調節し、それを濾過して澄明にした。実施例1と同様に、この溶液のアリコートを、β−アラニン及びエタノールを含む溶液と混合し(ただし室温でなく0℃で)、その際各場合にエタノール濃度は2%(v/v)で、β−アラニン濃度は0−1M範囲の種々異なる濃度になるようにした。生成した沈殿物を実施例1と同様に遠心分離して取り、分析した。図3において、β−アラニン濃度に依存した関係にある比Fn/Fbgが、グラフに示される。
沈殿混合物中のβ−アラニン含量に対する沈殿物のタンパク質組成の依存関係
血漿寒冷沈降物を実施例1のように溶解した。0℃で攪拌しながら、β−アラニンを最終濃度2Mまで添加した。形成したタンパク質沈殿物を遠心分離で取り出し、そして実施例1と同様に分析した。フィブリノーゲンの相対含量は総タンパク質の74%の量に達し、フィブロネクチンの相対含量は16%に達した。従って、比Fn/Fbgは0.22であった。
血漿寒冷沈降物を実施例1のように溶解した。0℃で攪拌しながら、エタノールを最終濃度2%(w/v)まで添加した。形成したタンパク質沈殿物を遠心分離で取り出し、そして実施例1と同様に分析した。フィブリノーゲンの相対含量は総タンパク質の67%の量に達し、フィブロネクチンの相対含量は29%に達した。従って、比Fn/Fbgは0.43であった。
血漿寒冷沈降物を実施例1のように溶解した。0℃で攪拌したしながら、エタノールを最終濃度2%(w/v)まで添加した。形成したタンパク質沈殿物を遠心分離で取り出し、再び溶解し、そして0℃で攪拌しながらβ−アラニンをこの溶液に最終濃度2Mまで添加した。形成したタンパク質沈殿物を再び遠心分離で取り出し、そして実施例1と同様に分析した。フィブリノーゲンの相対含量は総タンパク質の77%の量に達し、フィブロネクチンの相対含量は16%に達した。従って、比Fn/Fbgは0.21であった。
血漿寒冷沈降物を実施例1のように溶解し、pHを7.3に調節し、そしてこれを濾過して浄化した。実施例1と同様に、この溶液のアリコートをβ−アラニンおよび硫酸アンモニウムを含む溶液と混合し、各場合においてβ−アラニン濃度が1Mとなり、しかも異なる硫酸アンモニウム濃度が5−15%(w/v)の範囲となるようにした。形成された沈殿物を実施例1と同様に遠心分離で取り出し、そして分析した。結果を表5にまとめる。図4において、硫酸アンモニウム濃度に依存するFn/Fbgの比がグラフで示される。
沈殿混合物中の硫酸アンモニウム含量に対する沈殿物のタンパク質組成の依存関係(β−アラニン濃度:1M)
血漿寒冷沈降物を実施例1のように溶解し、pHを7.3に調節し、そしてこれを濾過して浄化した。実施例1と同様に、この溶液のアリコートをβ−アラニンおよび硫酸アンモニウムを含む溶液と混合し、各場合において硫酸アンモニウム濃度が5%(w/v)となり、しかも異なるβ−アラニン濃度が0.6−1.4Mの範囲となるようにした。形成された沈殿物を実施例1と同様に遠心分離で取り出し、そして分析した。図5において、β−アラニン濃度に依存するFn/Fbgの比がグラフで示される。
沈殿混合物中のβ−Ala含量への沈殿物のタンパク質組成の依存関係(硫酸アンモニウム濃度:1M)
血漿寒冷沈降物を実施例1のように溶解した。室温で攪拌しながら、β−アラニンを最終濃度2Mまで添加した。形成したタンパク質沈殿物を遠心分離で取り出し、そして実施例1と同様に分析した。フィブリノーゲンの相対含量は総タンパク質の82%の量に達し、フィブロネクチンの相対含量は1%に達した。従って、比Fn/Fbgは0.01であった。
血漿寒冷沈降物を実施例1のように溶解した。室温で攪拌しながら、硫酸アンモニウムを最終濃度15%(w/v)まで添加した。形成したタンパク質沈殿物を遠心分離で取り出し、そして実施例1と同様に分析した。フィブリノーゲンの相対含量は総タンパク質の76%の量に達し、フィブロネクチンの相対含量は16%に達した。従って、比Fn/Fbgは0.21であった。
血漿寒冷沈降物を実施例1のように溶解した。室温で攪拌しながら、硫酸アンモニウムを、硫酸アンモニウム濃度5%(w/v)まで添加した。形成したタンパク質沈殿物を遠心分離で取り出し、再び溶解し、そして室温で攪拌しながらβ−アラニンをこの溶液に最終濃度2Mまで添加した。形成したタンパク質沈殿物を再び遠心分離で取り出し、そして実施例1と同様に分析した。フィブリノーゲンの相対含量は総タンパク質の84%の量に達し、フィブロネクチンの相対含量は1%に達した。従って、比Fn/Fbgは0.01であった。
実施例14−16は、先行技術で公知の方法では、1回の工程でも、あるいはまた複数の連続的な工程でも、所定のFn/Fbg比のタンパク質混合物に到達すること(例えば、β−アラニンと硫酸アンモニウムとの組合せを実施例13で用いた濃度で用いた場合、0.04−0.19の範囲の比率に到達すること)は不可能であることを示す。
Claims (1)
- フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンを含むタンパク質組成物の製造方法であって、フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンを含有する出発溶液をフィブリノーゲンおよび/またはフィブロネクチンの溶解度を改変する2つの異なる成分を含む沈殿組成物で処理し、その結果、単一工程の沈殿においてフィブリノーゲンおよびフィブロネクチンを含む沈殿物が形成され、そして形成された該沈殿物は、必要に応じて、それ自体が公知の方法によってさらに処理される、方法。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002539087A (ja) * | 1999-02-12 | 2002-11-19 | バクスター・アクチエンゲゼルシャフト | フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンをベースとする製剤を生成するための方法ならびにこの方法により入手可能なタンパク質組成物 |
JP2012528149A (ja) * | 2009-05-28 | 2012-11-12 | アドビオ・アーベー | 多層タンパク質フィルム、該フィルムの製造方法、ならびに該フィルムを使用した薬物送達装置および医用インプラント |
Families Citing this family (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8428685B2 (en) * | 2001-09-05 | 2013-04-23 | Given Imaging Ltd. | System and method for magnetically maneuvering an in vivo device |
US20050221035A1 (en) * | 2004-04-01 | 2005-10-06 | Derek Wyatt | Method for reducing freeze-thaw voids in uncured adhesives |
FR2887883B1 (fr) | 2005-06-29 | 2007-08-31 | Lab Francais Du Fractionnement | Procede de separation des proteines fibrinogene, facteur xiii et colle biologique d'une fraction plasmatique solubilisee et de preparation de concentres lyophilises desdites proteines |
US20070238167A1 (en) * | 2006-04-04 | 2007-10-11 | 3M Innovative Properties Company | Flat microfibers as matrices for cell growth |
US20070231362A1 (en) * | 2006-04-04 | 2007-10-04 | 3M Innovative Properties Company | Schistose microfibrillated article for cell growth |
MX2009007688A (es) * | 2007-01-18 | 2009-09-28 | Baxter Int | Gel de fibrina para liberacion controlada de tgp-beta y usos del mismo. |
MX2009013970A (es) * | 2007-06-19 | 2010-09-10 | Baxter Int | Gel de fibrina para la liberacion controlada del factor de crecimiento derivado de plaqueta (pdgf) y sus usos. |
EP2034010A1 (en) | 2007-08-30 | 2009-03-11 | Omrix Biopharmaceuticals Ltd. | Compositions suitable for repair and/or treatment of injured spinal tissue |
US20100028311A1 (en) * | 2008-07-09 | 2010-02-04 | Baxter International Inc. | Using of scaffold comprising fibrin for delivery of stem cells |
AU2011203927A1 (en) * | 2010-01-08 | 2012-07-26 | Baxter Healthcare S.A. | Biomatrices to attract and retain regenerative and reparative cells |
IL207586A0 (en) | 2010-08-12 | 2010-12-30 | Omrix Biopharmaceuticals Ltd | A fibrin based therapeutic preparation and use thereof |
EP2619225B1 (en) * | 2010-09-20 | 2016-06-15 | Octapharma AG | Process for production of fibrinogen |
KR101127127B1 (ko) * | 2011-10-27 | 2012-03-21 | 주식회사 녹십자 | 고농도 피브리노겐 용액의 제조 방법 및 이를 이용한 피브린 실란트 제품의 제조방법 |
US8999376B2 (en) | 2012-02-03 | 2015-04-07 | Xcede Technologies, Inc. | Tissue patch |
ES2642383T3 (es) | 2012-03-13 | 2017-11-16 | Octapharma Ag | Procedimiento mejorado de producción de fibrinógeno y fibrinógeno producido por el mismo |
US11071805B2 (en) | 2013-04-22 | 2021-07-27 | Sealantium Medical Ltd. | Fibrinogen-based tissue adhesive patches |
AU2016307447A1 (en) | 2015-08-07 | 2018-02-22 | Xcede Technologies, Inc. | Adhesive compositions and related methods |
US9540548B1 (en) | 2015-08-07 | 2017-01-10 | Xcede Technologies, Inc. | Adhesive compositions and related methods |
US9833538B2 (en) | 2015-08-07 | 2017-12-05 | Xcede Technologies, Inc. | Adhesive compositions and related methods |
US11471556B2 (en) | 2015-10-19 | 2022-10-18 | Sealantium Medical Ltd. | Fibrinogen-based tissue adhesive patch |
JP6816135B2 (ja) | 2015-10-19 | 2021-01-20 | シーレーンチウム メディカル リミテッド | フィブリノーゲンに基づく改善された組織接着剤パッチ |
CN105770970A (zh) * | 2016-02-29 | 2016-07-20 | 苏州市贝克生物科技有限公司 | 复合多糖止血薄膜及其制备方法 |
CN105617451A (zh) * | 2016-02-29 | 2016-06-01 | 苏州市贝克生物科技有限公司 | 壳聚糖基止血材料及其制备方法 |
IL247821A0 (en) * | 2016-09-14 | 2017-01-31 | Omrix Biopharmaceuticals Ltd | Adhesive preparations and their use |
CN108017710B (zh) * | 2018-01-19 | 2020-02-04 | 贵州泰邦生物制品有限公司 | 一种人纤维蛋白原的制备方法 |
EP4017511A4 (en) * | 2019-08-22 | 2023-07-12 | Awidi, Abdalla S. | METHOD OF PREPARING A D-FIBRINATED PLATELET LYSATE AND USES OF THIS METHOD |
IL310285A (en) | 2021-08-13 | 2024-03-01 | Biotest Ag | Fibrinogen preparations and preparation methods |
WO2023119265A1 (en) | 2021-12-21 | 2023-06-29 | Omrix Biopharmaceuticals Ltd. | Fibrinogen comprising formulation and uses thereof |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4453939A (en) * | 1981-02-16 | 1984-06-12 | Hormon-Chemie Munchen Gmbh | Composition for sealing and healing wounds |
WO1992013495A1 (en) * | 1991-02-07 | 1992-08-20 | Fibratek, Inc. | Fibrinogen based adhesive |
WO1995023167A1 (en) * | 1993-02-23 | 1995-08-31 | Haemacure Biotech Inc. | Process for the obtention of a biological adhesive comprising fibrinogen, factor xiii and fibronectin |
US5474770A (en) * | 1988-12-06 | 1995-12-12 | Centre Regional De Transfusion Sanguine De Lille | Biological support for cell cultures constituted by plasma proteins coagulated by thrombin, its use in the preparation of keratocyte cultures, their recovery and their transport for therapeutic purposes |
US5962405A (en) * | 1996-04-30 | 1999-10-05 | Immuno Aktiengesellschaft | Storage-stable fibrinogen preparations |
JP2002539087A (ja) * | 1999-02-12 | 2002-11-19 | バクスター・アクチエンゲゼルシャフト | フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンをベースとする製剤を生成するための方法ならびにこの方法により入手可能なタンパク質組成物 |
Family Cites Families (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3203775A1 (de) | 1982-02-04 | 1983-08-11 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Fibrinogenzubereitung, verfahen zu ihrer herstellungund ihre verwendung |
US4540573A (en) | 1983-07-14 | 1985-09-10 | New York Blood Center, Inc. | Undenatured virus-free biologically active protein derivatives |
AT389815B (de) | 1984-03-09 | 1990-02-12 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutprodukten |
DK475386D0 (da) * | 1986-10-03 | 1986-10-03 | Weis Fogh Ulla Sivertsen | Fremgangsmaade og apparat til fremstilling af biologiske stoffer |
JPH0199565A (ja) * | 1987-10-12 | 1989-04-18 | Green Cross Corp:The | フィブリン糊調製用キット |
AT397203B (de) * | 1988-05-31 | 1994-02-25 | Immuno Ag | Gewebeklebstoff |
US5196185A (en) * | 1989-09-11 | 1993-03-23 | Micro-Collagen Pharmaceutics, Ltd. | Collagen-based wound dressing and method for applying same |
JPH04347162A (ja) * | 1991-05-23 | 1992-12-02 | Japan Synthetic Rubber Co Ltd | 生体組織接着剤 |
AT402891B (de) | 1991-06-20 | 1997-09-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung eines inaktivierten blutproduktes |
US5288853A (en) * | 1992-04-30 | 1994-02-22 | Alpha Therapeutic Corporation | Factor viii purification process |
AU6653094A (en) | 1992-12-16 | 1994-07-04 | Immuno Aktiengesellschaft | Process for preparing a virus-safe biological composition |
US5330974A (en) | 1993-03-01 | 1994-07-19 | Fibratek, Inc. | Therapeutic fibrinogen compositions |
AT402788B (de) | 1993-08-03 | 1997-08-25 | Immuno Ag | Virussichere blutgerinnungsfaktor xiii-präparation |
HRP940645A2 (en) | 1993-10-06 | 1996-12-31 | Immuno Ag | Process for virus deactivation in the presence of polyalkylene glycol and the pharmaceutical preparation thus obtained |
AT406019B (de) | 1995-05-08 | 2000-01-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung eines arzneimittels enthaltend ein oder mehrere plasmaderivate |
AT407117B (de) | 1997-09-19 | 2000-12-27 | Immuno Ag | Fibrinschwamm |
US6056970A (en) * | 1998-05-07 | 2000-05-02 | Genzyme Corporation | Compositions comprising hemostatic compounds and bioabsorbable polymers |
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Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4453939A (en) * | 1981-02-16 | 1984-06-12 | Hormon-Chemie Munchen Gmbh | Composition for sealing and healing wounds |
US5474770A (en) * | 1988-12-06 | 1995-12-12 | Centre Regional De Transfusion Sanguine De Lille | Biological support for cell cultures constituted by plasma proteins coagulated by thrombin, its use in the preparation of keratocyte cultures, their recovery and their transport for therapeutic purposes |
WO1992013495A1 (en) * | 1991-02-07 | 1992-08-20 | Fibratek, Inc. | Fibrinogen based adhesive |
WO1995023167A1 (en) * | 1993-02-23 | 1995-08-31 | Haemacure Biotech Inc. | Process for the obtention of a biological adhesive comprising fibrinogen, factor xiii and fibronectin |
US5962405A (en) * | 1996-04-30 | 1999-10-05 | Immuno Aktiengesellschaft | Storage-stable fibrinogen preparations |
JP2002539087A (ja) * | 1999-02-12 | 2002-11-19 | バクスター・アクチエンゲゼルシャフト | フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンをベースとする製剤を生成するための方法ならびにこの方法により入手可能なタンパク質組成物 |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002539087A (ja) * | 1999-02-12 | 2002-11-19 | バクスター・アクチエンゲゼルシャフト | フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンをベースとする製剤を生成するための方法ならびにこの方法により入手可能なタンパク質組成物 |
JP4771594B2 (ja) * | 1999-02-12 | 2011-09-14 | バクスター アクチェンゲゼルシャフト | フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンをベースとする製剤を生成するための方法ならびにこの方法により入手可能なタンパク質組成物 |
JP2012528149A (ja) * | 2009-05-28 | 2012-11-12 | アドビオ・アーベー | 多層タンパク質フィルム、該フィルムの製造方法、ならびに該フィルムを使用した薬物送達装置および医用インプラント |
US9861725B2 (en) | 2009-05-28 | 2018-01-09 | Addbio Ab | Multilayer protein films, methods of making, and drug delivery devices and biomedical implants employing the films |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
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Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2007131638A (ja) | フィブリノーゲンおよびフィブロネクチンをベースとする製剤を生成するための方法ならびにこの方法により入手可能なタンパク質組成物 | |
US5260420A (en) | Concentrate of thrombin coagulable proteins, the method of obtaining same and therapeutical use thereof | |
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