JP2007119493A - γグロブリンの投与によるガン性疾患を処置するための免疫療法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】ガン治療、および特に転移(metastasis)を阻害し、ならびに原発性ガン性腫瘍の処置を増強するためのγグロブリンの投与する方法であって、種々のガン性疾患の処置が、完全なγグロブリンまたはそのフラグメントを含有する調製物を投与することにより達成され、γグロブリン調製物は非経口的に、好ましくは静脈内、体腔内または皮下経路を介して、単一の薬物としてか、またはガンの処置に通常使用される他の薬剤または方法と組み合わせるかのいずれかで、投与され得る、方法。
【選択図】なし
Description
本発明は、ガン治療、および特に転移(metastasis)を阻害し、ならびに原発性ガン性腫瘍の処置を増強するためのγグロブリンの投与に関する。本発明に従って、種々のガン性疾患の処置は、完全なγグロブリンまたはそのフラグメントを含有する調製物を投与することにより達成される。γグロブリン調製物は非経口的に、好ましくは静脈内、体腔内または皮下経路を介して、単一の薬物としてか、またはガンの処置に通常使用される他の薬剤または方法と組み合わせるかのいずれかで、投与され得る。
原発性腫瘍から開始される、身体の多かれ少なかれ離れた場所での悪性腫瘍の転移の形成は、ガンの最も重篤な影響の1つであり、そしてそれに対する十分な処置プロトコルは現在のところ利用可能でない。ガン腫瘍の転移は、本疾患処置時に、治療の奏効が認められない最大の原因であるなぜなら、患者は多様な腫瘍の増殖に侵されてしまうからである。
(1)哺乳動物において腫瘍の転移を阻害するための、IVIGまたはそのフラグメントを含有する薬学的組成物。
(2)前記薬学的組成物が静脈内に投与される、項目1に記載の薬学的組成物。
(3)前記薬学的組成物が体腔内に投与される、項目1に記載の薬学的組成物。
(4)前記薬学的組成物が皮下に投与される、項目1に記載の薬学的組成物。
(5)前記腫瘍が固形腫瘍である、項目2、3、または4に記載の薬学的組成物。
(6)前記腫瘍がメラノーマ、ガン腫、およびサルコーマからなる群より選択される、項目5に記載の薬学的組成物。
(7)前記腫瘍が肺、肝臓、脳および骨からなる群より選択される器官に転移可能である、項目2、3または4に記載の薬学的組成物。
(8)前記薬学的組成物の投与前、投与中、または投与後に前記哺乳動物が少なくとも1つの他の処置モダリティーを受ける、項目2、3または4に記載の薬学的組成物。
(9)前記他の処置モダリティーが化学療法、免疫療法、放射線療法および手術からなる群より選択される、項目8に記載の薬学的組成物。
(10)前記薬学的組成物の投与前、投与間、または投与後に前記哺乳動物が少なくとも1つの他の処置モダリティーを受ける、項目5に記載の薬学的組成物。
(11)前記他の処置モダリティーが化学療法、免疫療法、放射線療法および手術からなる群より選択される、項目10に記載の薬学的組成物。
(12)前記固形腫瘍が前記薬学的組成物の投与前、投与中、または投与後に外科的に除去される、項目5に記載の薬学的組成物。
(13)前記腫瘍がメラノーマである、項目1、2、3、4、7、8、または9に記載の薬学的組成物。
(14)哺乳動物において原発性腫瘍を処置するための、IVIGまたはそのフラグメントを含有する、薬学的組成物。
(15)前記薬学的組成物が静脈内に投与される、項目14に記載の薬学的組成物。
(16)前記薬学的組成物が体腔内に投与される、項目14に記載の薬学的組成物。
(17)前記薬学的組成物が皮下に投与される、項目14に記載の薬学的組成物。
(18)前記腫瘍が固形腫瘍である、項目15、16、または17に記載の薬学的組成物。
(19)前記腫瘍がメラノーマ、ガン腫およびサルコーマからなる群より選択される、項目18に記載の薬学的組成物。
(20)前記薬学的組成物の投与前、投与中、または投与後に前記哺乳動物が少なくとも1つの他の処置モダリティーを受ける、項目15、16または17に記載の薬学的組成物。
(21)前記他の処置モダリティーが化学療法、免疫療法、放射線療法および手術からなる群より選択される、項目20に記載の薬学的組成物。
(22)前記薬学的組成物の投与前、投与中、または投与後に前記哺乳動物が少なくとも1つの他の処置モダリティーを受ける、項目18に記載の薬学的組成物。
(23)前記他の処置モダリティーが化学療法、免疫療法、放射線療法および手術からなる群より選択される、項目22に記載の薬学的組成物。
(24)前記固形腫瘍が前記薬学的組成物の投与前、投与中、または投与後に外科的に除去される、項目18に記載の薬学的組成物。
(25)哺乳動物においてメラノーマを処置するための、IVIGまたはそのF(ab’)2フラグメントを含有する、薬学的組成物。
(26)哺乳動物において腫瘍の転移を阻害するための薬学的組成物を調製するためのIVIGまたはそのフラグメントの使用。
(27)哺乳動物においてメラノーマの転移を阻害するための薬学的組成物を調製するためのIVIGまたはそのフラグメントの使用。
(28)哺乳動物においてメラノーマの転移を阻害するための薬学的組成物を調製するためのIVIGのF(ab’)2フラグメントの使用。
(29)哺乳動物において原発性腫瘍を処置するための薬学的組成物を調製するためのIVIGまたはそのフラグメントの使用。
(30)哺乳動物においてメラノーマを処置するための薬学的組成物を調製するためのIVIGまたはそのフラグメントの使用。
(31)哺乳動物においてメラノーマを処置するための薬学的組成物を調製するためのIVIGのF(ab’)2フラグメントの使用。
一般的に本発明は、腫瘍転移を阻害し、そして原発性腫瘍を処置する治療方法を提供することにより、上記に関する問題を解決する。本発明の方法は、重大な副作用を生じず、そしてガン性疾患の広範なスペクトルに効果的である。特に、本発明者らは、哺乳動物に静脈内免疫グロブリン(IVIG)調製物を投与することを包含する新規の方法を開示する。 本発明に従って投与されるIVIG調製物は、完全な免疫グロブリン分子または免疫グロブリンのフラグメントを含有し得る。調製物は非経口的に、好ましくは静脈内、体腔内または皮下経路を介して、単一の薬剤としてか、またはガンの処置に通常使用される他の薬剤または方法と組み合わせるかのいずれかで、投与される。
定義
本明細書で使用される「γグロブリン」は、主にIgG分子からなる血清グロブリン画分である。
材料および方法
腫瘍細胞
マウス由来の腫瘍細胞株を使用した。マウス細胞株として、以下のものが含まれる:MCA-105(C57BL/6J由来のメチルコラントレン誘導性サルコーマ)およびB16-F10メラノーマ細胞(両株ともアメリカンタイプティッシュカルチャーコレクション(American Type Tissue Culture Collection)、Rockville, MD)から購入した)。10%ウシ胎児血清を含むRPMI培地中に細胞を日常的に維持した。1週間に2回、細胞を新しく調製した培地に移した。
実験動物モデル:
2〜3月齢のC57BL/6Jマウスを研究中に使用した。インビボにおけるγグロブリンの効果を試験するために、2つのタイプの固形腫瘍(例えば、サルコーマ(MCA-105)およびメラノーマ(B16-F10))をC57BL/6Jマウスに導入した。静脈内(IV)注射(肺において腫瘍細胞の播種および着床をもたらす)、または腹腔内(IP)導入(腹膜内に局所ガン性細胞が発症する)のいずれかにより、腫瘍細胞を導入した。3〜5週間後、数匹のマウスを屠殺し、そして肺の転移病巣または腹膜内の腫瘍の広がりについて試験した。別のグループのマウスでは、生存時間を観察した。IV形態で腫瘍細胞を注射したマウスを、γグロブリンのIV注入により処置したが、腫瘍を直接腹膜内に導入された動物においては、IP注射を介してγグロブリン調製物を投与した。
γグロブリン調製物:
静脈内への使用に適切なヒトγグロブリン(IVIG)は、Miles Inc.(Biological Products Division, West Haven, Connecticut)から入手した。5%溶液(100ml希釈液中5g;カタログ番号 0640-12)を全ての実験に使用した。他に示さない限り、接種されたIVIGの容量は、各処置において動物あたり500μlであり、結果的に動物あたり25mgのγグロブリンとなった。使用した他の調製物は、ヒトγグロブリンの分子全体またはF(ab’)2フラグメントであり、両方ともJackson Immunoresearch Laboratories, Inc., PA, (それぞれ、コード番号009-000-003および009-000-006)から購入した。これらの後者の調製物は、Miles Inc.から得られたものとは異なる。Jackson Immunoresearch Laboratories, Inc.由来の調製物は30個体のドナープールから調製されているが、Miles社の調製物は3000個体以上のドナープールから調製されている。
B16-F10マウスメラノーマ細胞株を用いて、転移性メラノーマに対する実験モデルを確立した。腫瘍メラノーマ細胞のIV注射により、メラノーマの導入を行った。これらの細胞は引き続きマウスの肺内に接種され、そして黒色転移病巣を形成する。腫瘍接種約24日後、マウスは死亡した。
20匹のマウスに2×105個のメラノーマ細胞をIV注入し、そして以下の4つのグループに分けた:
(a) コントロールグループ、腫瘍細胞のみを接種したマウス;
(b) 0日目(腫瘍投与の日)にIVIGの単回IV注射で処置したマウス;
(c) 2回(0日目および4日目)処置したマウス;および
(d) 3回(0、4および9日目)処置したマウス。
より大きなメラノーマ塊が関与した場合、IVIGに転移を予防する能力があるかどうかを調べるために、以下の実験を行った。マウスに増加した数の腫瘍細胞(5×105個)を注射し、そして2つのグループに分けた:
(a) コントロールグループ、腫瘍細胞のみを接種したマウス;および
(b) 2回(腫瘍接種後0日目および8日目)のIV注射で処置したマウス。
4×105個のB16-F10細胞をC57BL/6JマウスにIV注射した。マウスを0日目、および以後7日目ごとに500μlのMiles IVIGで処置した。腫瘍接種の24日後、コントロールグループ由来のマウスは死亡し始めた。結果を図4にまとめる。26日目にコントロールマウスの100%が死亡したが、IVIG処置マウスの100%が生存した。40日目に処置マウスの60%がなお生存した。
MCA-105細胞は、メチルコラントレン投与後腫瘍が発症したマウスに由来する。これらの細胞を用いて、2つのタイプの実験を行った:
1. IV注入による腫瘍の導入:
2.5×105個のMCA-105細胞をC57BL/6Jマウスの尾静脈にIV注射した。マウスの1つのグループを、0、7、および14日目にIVIGのIV注入により処置し、そしてコントロールグループに属するマウスに、同日にリン酸化緩衝生理食塩水(PBS)を注射した。
2. IP注射による腫瘍の導入:
2.5×105個のMCA-105細胞をC57BL/6JマウスにIP注射した。マウスを0日目、および以後48日目に屠殺するまで7日目ごとに処置した。コントロールグループのマウスで、腹膜内に大きな腫瘍巣を観察した(図6、左)が、処置動物ではわずかに小さな病巣が認められたのみであった(図6、右)。
マウスに2.5×105個のB16-F10メラノーマ細胞をIV接種した。マウスを以下の3つのグループに分けた:
(a) コントロールグループ;
(b) 全IVIG分子(Jackson Immunoresearch Laboratories Inc.)で処置したマウス;0、3、7、および12日目に5mg/330μl容量をIV注射した;および
(c) (b)と同じ日に500μlの容量中の5mgのIVIGのF(ab’)2フラグメント(Jackson)で処置したマウス。
C57BL6Jマウスの足蹠に2.5×105個のB16F10メラノーマ細胞を注射した。21日後、腫瘍が発症した足を切断した。同日、マウスを次の2つのグループに分けた。一方は、25mgのIVIG(Sandoz Phama Ltd, Basle, Switzerland; Lot - 4.372.256.0) の静脈注射により処置したグループであり、そして他方はリン酸緩衝化生理食塩水(PBS)で処置したグループであった。10日後、マウスを腫瘍発症の徴候について試験した。コントロールグループの60%は、平均サイズ3±0.8cmの腫瘍を発症した。これらのマウスは切断後の最初の1ヶ月の間に死亡した。IVIG処置グループでは、わずか14%のマウスが腫瘍(平均サイズ2.7±1.2cm)を発症した。これらのマウスもまた切断後の最初の1ヶ月の間に死亡した。IVIG処置マウスの残りの86%は腫瘍を発症せず、そして手術45日後もなお生存した。
C57BL6Jマウスに、マウス1匹あたり2.5×105個のB16メラノーマ細胞を静脈注射した。その直後、胸部への皮下経路を介してマウスにIVIG調製物を投与した。マウスの4つのグループ(マウス20匹/グループ)に、以下から得られる市販のIVIG調製物のうちの1つを200μg/マウスで投与した:Baxter (Gammagard S/D 2.5%; Lot-93H23AB12C)、Isiven (Isiven V.I. 2.5%; Lot-IS238C6193V)、Miles (Gamimmune N 5%; Lot-640N023)およびSandoz (Lot-4.372.256.0)。PBSを静脈内投与したマウスの5番目のグループをコントロールグループとした。18日後にマウスを屠殺し、そして転移病巣の存在についてマウスの肺を試験した。以下の表は結果を示す。
IVIG調製物を、一般に、静脈内および体腔内投与のための以下の投薬レジュメのうちの1つを用いて、非経口的に投与する:(1)400mg/kg/日を5日間連続/月、または(2)2g/kgを1ヶ月に1回。皮下使用では、IVIG調製物を4mg/kg/日を5日間連続/月、または1ヶ月に1回20mg/kgの用量で投与し得る。しかし、これらの提案されたレジュメは、患者の年齢、身体的状態、および疾患の重篤度によって変化し得る。各患者の種々の要因および情況を考慮して、治療する医師により正確なプロトコルが決定される。γグロブリン調製物投与後、標準的な医療手順に従って患者の経過をモニターする。従って、患者は、腫瘍の転移または退行について試験される。
左大腿部の悪性メラノーマ病巣(深さ1.3mm)の広域切除のため、1989年9月、42歳の男性に手術を施した。左大腿部リンパ節におけるメラノーマの局所再発のため、1991年5月に、患者にシスプラチンによる足部の高温潅流を施した。この時、患者には転移性疾患は認められなかった。1993年2月に胸部および腹部のコンピュータ断層撮影(CT)スキャンにより、塊病巣が、脾臓(1個の病巣)、肝臓(5個の病巣、最大3×3cm)、および肺(4個の病巣、最大1.5×1.5cm)において認められた。これらの病巣にも関わらず、患者は無症候であった。その後直ちに、IVIGによる処置を開始した。患者に400mg/kg/日の用量で連続5日間/月、IVIG(Miles)を静脈内投与した。5サイクルの処置後、すべての脾臓および肝臓転移腫瘍が消失し、そして肺病巣の若干の減少もまた認められた。その後、患者の病態は新たな骨病巣および皮下病巣の出現により悪化した。患者は若干の肝臓転移腫瘍を再発したので、IVIG投与を継続した。患者は12サイクルのIVIG投与後、死亡した。
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