JP2007119444A

JP2007119444A - Ａｄａｍ阻害剤によるしわの防止または改善

Info

Publication number: JP2007119444A
Application number: JP2006101430A
Authority: JP
Inventors: Takuya Hiruma; 卓也蛭間; Hirotada Fukunishi; 宏忠福西; Masaru Suetsugu; 勝末継; Yukiko Matsunaga; 由紀子松永; Michio Shibata; 道男柴田; Satoshi Amano; 聡天野
Original assignee: Shiseido Co Ltd
Current assignee: Shiseido Co Ltd
Priority date: 2005-09-29
Filing date: 2006-04-03
Publication date: 2007-05-17
Also published as: TW200744657A; WO2007037295A1

Abstract

【課題】効果的にしわを防止または改善する阻害剤の提供。
【解決手段】下記一般式（Ｉ）で示されるベンゾヒドロキサム酸またはその塩からなるADAM阻害剤を皮膚に適用する。

（式中、R₁は炭素数1〜18のアルキル基、炭素数3〜8のシクロアルキル基、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数1〜18のアルコキシ基、ベンジルオキシ基、アミノ基またはアシルアミノ基であり、R₂は水素原子、メチル基またはフェニル基であり、nは0〜3の整数である。）
【選択図】なし

Description

本発明は、新規なADAM阻害剤、ならびにそれを用いたしわの防止または改善に関するものである。

近年、中高年の女性における美容に対する関心の高まりから、加齢に伴う表皮角質層の保水能力の低下や表皮脂質の分泌低下による皮脂の減少によって顕在化する、目尻や口元に生じる小じわに対する関心が高まっている。小じわは、皮膚の乾燥が原因と考えられており、その発生メカニズムや、形態学的、組織学的、または生化学的変化等において、光老化によって生じる大じわとは大きく異なると考えられている。例えば、角質層水分量と小じわの程度に相関性があることがヒトにおいて検証されている（非特許文献１）。また、不飽和脂肪酸で継続的にバリア機能を破壊すると、表皮性のしわが生じることが報告されている（非特許文献２）。これまでこのような小じわの防止および改善は、グリセリン、ソルビトール、植物液エキス等の保湿剤やコラーゲン等を含む化粧料による皮膚の乾燥からの保護による対処に頼らざるを得なかった。しかしながら、保湿剤等による皮膚の乾燥からの保護のみでは、小じわを十分に防止・改善することはできず、より効果的に小じわを防止・改善することが強く望まれていた。

ADAM (a disintegrin and metalloprotease)と呼ばれる一群の膜型メタロプロテアーゼは、マトリックスメタロプテアーゼ（matrix metalloprotease； MMP）と並び、ヘパリン結合性EGF様増殖因子(heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor; HB-EGF) や腫瘍壊死因子（tumor necrosis factor; TNF）などの各種増殖因子、ならびにその他の多くの膜タンパク質を細胞表面から切断して細胞外に遊離させ、それら増殖因子等による細胞の増殖や分化等に寄与することが知られてきている。例えば、細胞表面に発現したHB-EGFは、ADAM-9、10、12及び17によって切断されて細胞外に遊離することが報告されている。(例えば、非特許文献３−７を参照)。

さらに、紫外線、酸化、浸透圧など種々の刺激により、皮膚細胞においてHB-EGF、TNF-α等の増殖因子の発現・細胞膜からの遊離が促進され、オートクライン、パラクラインの機構によって細胞に増殖、分化等のシグナルが伝わり皮膚の増殖および肥厚を生じさせるが、その際に皮膚細胞に存在するADAMの活性化が起きていることが知られてきている。
芋川ら、Fragrance Journal; 1992(11) 29-42 正木仁香料会誌；2001 Vol.25, No. 1, 34-38 Asakura, M., et al. 2002. Cardiac hypertrophy is inhibited by antagonism of ADAM12 processing of HB-EGF: metalloproteinase inhibitors as a new therapy. Nat. Med. 8:35-40 Izumi, Y., et al. 1998. A metalloprotease- disintegrin, MDC9/meltrin-_/ADAM9 and PKC_ are involved in TPA-induced ectodomain shedding of membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth factor. EMBO J. 17:7260-7272. Lemjabbar, H., and C. Basbaum. 2002. Platelet-activating factor receptor and ADAM10 mediate responses to Staphylococcus aureus in epithelial cells. Nat. Med. 8:41-46 Sunnarborg, S.W., et al. 2002. Tumor necrosis factor-alpha converting enzyme (TACE) regulates epidermal growth factor receptor ligand availability. J. Biol. Chem. 277: 12838-12845 Yan, Y., K. Shirakabe, and Z. Werb. 2002. The metalloprotease Kuzbanian (ADAM10) mediates the transactivation of EGF receptor by G protein-coupled receptors. J. Cell Biol. 158:221-226.

本発明は、上記のような事情に鑑み、しわ、特に小じわを効果的に防止または改善できる新規な化合物を見出し、それを用いてより効果的にしわを防止または改善することを目的とするものである。

本発明者は、ヘアレスマウスにテープストリッピングを繰り返し施すことによる皮膚の継続バリア破壊によって、ヒトの皮膚における小じわと同様の表皮および真皮の変化がマウスの皮膚に生じることを見出し、小じわマウスモデルを作成することに成功した。さらに、かかる小じわマウスモデルにおいて、ADAM-9およびADAM-17等のADAM(a disintegrin and metalloprotease)ファミリーに属するタンパク質（以下ADAMと称する）、ならびにそれらADAMによって細胞膜からの遊離および活性化がなされるHB-EGFおよびAmphiregulinの表皮における遺伝子発現が亢進していること、さらには皮膚におけるADAMを阻害することによって表皮および真皮の肥厚を抑制してしわ形成を防止し得ることを見出した。

そこで、ADAMを阻害し得る新規化合物を探索する中で、ある種のベンゾヒドロキサム酸及びその塩が高いADAM阻害活性を有し、さらにはしわ形成を顕著に阻害し得ることを発見し、本発明を達成するに至った。

ADAM-9、ADAM-10およびADAM-17等のADAMは、皮膚の細胞表面に存在し、皮膚においてHB-EGF、Amphiregulin、TNF-α、TGF-α等の増殖因子を細胞膜から遊離させ活性化させる酵素である。皮膚のバリア破壊によって、皮膚において、それらADAMが活性化されまたは発現亢進され、HB-EGF等の増殖因子の遊離・活性化を促進させ、表皮および真皮の肥厚を生じさせることが、小じわ形成の１つの重要な機構であると考えられる。したがって、皮膚におけるADAMの活性を抑制することによって、HB-EGF等の活性亢進を抑えることができ、表皮および真皮の肥厚を抑制して、しわ、特に小じわを防止または改善できると考えられる。図１に、皮膚におけるADAMの活性阻害によりしわを防止または改善する機構について説明した概略図を示す。

本発明のADAM阻害剤は、下記一般式（Ｉ）で示されるベンゾヒドロキサム酸またはその塩からなることを特徴とする。

（式中、R₁はそれぞれ独立して、炭素数1〜18のアルキル基、炭素数3〜8のシクロアルキル基、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数1〜18のアルコキシ基、ベンジルオキシ基、アミノ基またはアシルアミノ基であり、R₂は水素原子、メチル基またはフェニル基であり、nは0〜3の整数である。）
前記ベンゾヒドロキサム酸またはその塩において、R₂が水素原子であることが好適である。さらには、R₁が炭素数1〜18のアルキル基、炭素数3〜8のシクロアルキル基、ヒドロキシル基、または炭素数1〜18のアルコキシ基であり、nは1〜2であることが好適である。また、R₁が4位に置換することが好適であり、さらにこの場合、R₁が炭素数1〜18のアルキル基、炭素数3〜8のシクロアルキル基、または炭素数1〜18のアルコキシ基であり、R₂は水素原子であることが好適である。

ここで、アルキル基は、直鎖または分岐のいずれでもよく、炭素数1〜18であり、好ましくは炭素数1〜6である。

シクロアルキル基は、炭素数3〜8であり、好ましくはシクロペンチル基、シクロヘキシル基、またはシクロヘプチル基である。

ハロゲン原子は、好ましくは、フッ素原子または塩素原子である。

アルコキシ基は、炭素数1〜18のアルキルで置換されたヒドロキシル基であり、好ましくは炭素数1〜6のアルキルで置換されたヒドロキシル基であるが、さらに好ましくは、メトキシ基である。

ベンジルオキシ基は、ベンゼン環上に置換基を持つこともでき、アルキル基、シクロアルキル基、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ベンジルオキシ基、アリールオキシ基、アミノ基、アシルアミノ基、アリール基等で置換されてもよい。

アシルアミノ基は、アシル基で置換されたアミノ基であり、アシル基は、アルキル基、シクロアルキル基、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ベンジルオキシ基、アリールオキシ基、アミノ基、アシルアミノ基、アリール基等の置換基で置換されてもよい。

本発明のADAM阻害剤のうち、4-メトキシベンゾヒドロキサム酸は、チロシナーゼ阻害剤であり、色素形成を防止または阻害することによって美白作用を有することが報告されている（例えば国際公開第03/057184号パンフレットを参照）が、4-メトキシベンゾヒドロキサム酸がADAM活性を阻害し、しわを防止または改善し得ることについては全く知られていなかった。

本発明のしわ防止または改善剤は、ADAM阻害剤である上記のベンゾヒドロキサム酸またはその塩からなることを特徴とする。

また、本発明のしわを防止または改善する方法は、ADAM阻害剤である上記のベンゾヒドロキサム酸またはその塩を皮膚に適用することを特徴とする。

上述したように、本発明のベンゾヒドロキサム酸は、皮膚におけるADAMの活性を阻害または抑制することによってHB-EGF等の活性亢進を抑えることができ、表皮および真皮の肥厚を抑制して、しわ形成を防止し、または形成されたしわを改善する。

本発明のADAM阻害剤を皮膚に適用することによって、ADAM-9、ADAM-10またはADAM-17等の皮膚に存在するADAMの活性を阻害して、皮脂の減少や洗顔等の様々な要因によって生じる皮膚のバリア破壊によって誘起される表皮および真皮におけるHB-EGF等の増殖因子の遊離・活性化の亢進を抑制し、表皮や真皮の肥厚を抑えることができ、非常に効果的にしわ、特に小じわの形成を防止または改善することが可能である。

本発明で用いるベンゾヒドロキサム酸またはその塩は下記一般式（Ｉ）で表される：

（式中、R₁はそれぞれ独立して、炭素数1〜18のアルキル基、炭素数3〜8のシクロアルキル基、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数1〜18のアルコキシ基、ベンジルオキシ基、アミノ基またはアシルアミノ基であり、R₂は水素原子、メチル基またはフェニル基であり、nは0〜3の整数である。）
本発明のベンゾヒドロキサム酸として、例えば、4-メトキシベンゾヒドロキサム酸、4-ブチルベンゾヒドロキサム酸、ベンゾヒドロキサム酸、2-ヒドロキシ-3-メチルベンゾヒドロキサム酸、3-(フェノキシアセチルアミノ)ベンゾヒドロキサム酸、4-シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸、2-クロロベンゾヒドロキサム酸、3-メトキシベンゾヒドロキサム酸、2-メトキシベンゾヒドロキサム酸、4-クロロベンゾヒドロキサム酸、4-(4-フルオロベンジルオキシ)-3-イソブチルベンゾヒドロキサム酸、2-ヒドロキシ-5-メチルベンゾヒドロキサム酸等が挙げられる。

本発明で用いられるベンゾヒドロキサム酸は、遊離酸以外にその医学的に許容される塩の形態も含む。これらの塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、メチルアミン塩、ジメチルアミン塩、トリメチルアミン塩、メチルピペリジン塩、エタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、リジン塩などのアミン塩、アンモニウム塩、あるいは塩基性アミノ酸塩などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。

ベンゾヒドロキサム酸及びその塩は、公知の製造方法に従い製造することが可能であり、また市販品を用いることも可能である。

限定はされないが、本発明のベンゾヒドロキサム酸またはその塩からなるしわ防止または改善剤は、好ましくは皮膚外用剤において使用する。皮膚外用剤におけるベンゾヒドロキサム酸またはその塩の配合量は、その使用態様や製品形態等によって異なり特に限定はされないが、例えば、皮膚外用剤全量に対して、好ましくは0.001質量％から10質量％、より好ましくは0.005質量％から5質量％、さらに好ましくは0.01質量％から1質量％である。

本明細書において、「皮膚外用剤」は、化粧料、医薬品、医薬部外品等を含む。また、その剤型も、水溶液系、可溶化系、乳化系、油液系、ゲル系、ペースト系、軟膏系、エアゾール系、水−油２層系、水−油−粉末３層など、任意の剤型を含む。また、シート状基剤に担持されたものも含む。

また、皮膚外用剤の採り得る製品形態および用途も任意であり、例えば、化粧水、乳液、クリーム、パック等のフェーシャル、ボディまたは頭皮用の外用剤として用いることが可能である。

皮膚外用剤は、上記のベンゾヒドロキサム酸またはその塩の他に、通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる他の任意の成分を必要に応じて適宜配合し、目的とする剤形に応じて常法により製造することが出来る。例えば、ベンゾヒドロキサム酸またはその塩と、下記成分の１種または２種以上とを配合して皮膚外用剤を調製できる。

紫外線吸収剤としては、例えば、パラアミノ安息香酸(以下 PABAと略す)、PABAモノグリセリンエステル、N,N-ジプロポキシPABAエチルエステル、N,N-ジエトキシPABAエチルエステル、N,N-ジメチルPABAエチルエステル、N,N-ジメチルPABAブチルエステル、N,N-ジメチルPABAメチルエステル等の安息香酸系紫外線吸収剤、ホモメンチル-N- アセチルアントラニレート等のアントラニル酸系紫外線吸収剤、アミルサリシレート、メンチルサリシレート、ホモメンチルサリシレート、オクチルサリシレート、フェニルサリシレート、ベンジルサリシレート、p-イソプロパノールフェニルサリシレート等のサリチル酸系紫外線吸収剤、オクチルシンナメート、エチル-4-イソプロピルシンナメート、メチル-2,5- ジイソプロピルシンナメート、エチル-2,4-ジイソプロピルシンナメート、メチル-2,4-ジイソプロピルシンナメート、プロピル-p-メトキシシンナメート、イソプロピル-p-メトキシシンナメート、イソアミル-p-メトキシシンナメート、オクチル-p-メトキシシンナメート(2- エチルヘキシル-p-メトキシシンナメート)、2-エトキシエチル-p-メトキシシンナメート、シクロヘキシル-p- メトキシシンナメート、エチル-α-シアノ−β-フェニルシンナメート、2-エチルヘキシル-α-シアノ-β-フェニルシンナメート、グリセリルモノ-2-エチルヘキサノイル-ジパラメトキシシンナメート、トリメトキシ桂皮酸メチルビス（トリメチルシロキサン）シリルイソペンチル等の桂皮酸系紫外線吸収剤、3-(4'-メチルベンジリデン)-ｄ,1-カンファー、3-ベンジリデン-d,1-カンファー、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチルエステル、2-フェニル-5-メチルベンゾキサゾール、2,2'-ヒドロキシ-5-メチルフェニルベンゾトリアゾール、2-(2'-ヒドロキシ-5'-t-オクチルフェニル) ベンゾトリアゾール、2-(2'-ヒドロキシ-5'-メチルフェニルベンゾトリアゾール、ジベンザラジン、ジアニソイルメタン、4-メトキシ-4'-t-ブチルジベンゾイルメタン、5-(3,3-ジメチル-2-ノルボルニリデン)-3-ペンタン-2-オン、ジモルホリノピリダジノン等が挙げられ、任意の１種または２種以上を用いることができる。

紫外線散乱剤としては、酸化チタン、微粒子酸化チタン、酸化亜鉛、微粒子酸化亜鉛、酸化鉄、微粒子酸化鉄、酸化セリウムなどの粉末が挙げられる。

これら紫外線散乱剤は、通常、針状、紡錘状、球状、粒状の粉末が使用される。また、粒子径が0.1μm以下の微粒子粉末が好ましい。

メチルハイドロジェンポリシロキサンやシランカップリング剤などのシリコーン処理；金属石鹸処理；パーフルオロアルキルリン酸ジエタノールアミン塩やパーフルオロアルキルシラン等のフッ素処理、デキストリン脂肪酸エステル処理等により、疎水化処理した紫外線散乱剤も好ましい。

液体油脂としては、例えば、アボガド油、ツバキ油、タートル油、マカデミアナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、オリーブ油、ナタネ油、卵黄油、ゴマ油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、シナギリ油、日本キリ油、ホホバ油、胚芽油、トリグリセリン等が挙げられる。

固体油脂としては、例えば、カカオ脂、ヤシ油、馬脂、硬化ヤシ油、パーム油、牛脂、羊脂、硬化牛脂、パーム核油、豚脂、牛骨脂、モクロウ核油、硬化油、牛脚脂、モクロウ、硬化ヒマシ油等が挙げられる。

ロウ類としては、例えば、ミツロウ、カンデリラロウ、綿ロウ、カルナウバロウ、ベイベリーロウ、イボタロウ、鯨ロウ、モンタンロウ、ヌカロウ、ラノリン、カポックロウ、酢酸ラノリン、液状ラノリン、サトウキビロウ、ラノリン脂肪酸イソプロピル、ラウリン酸ヘキシル、還元ラノリン、ジョジョバロウ、硬質ラノリン、セラックロウ、POEラノリンアルコールエーテル、POEラノリンアルコールアセテート、POEコレステロールエーテル、ラノリン脂肪酸ポリエチレングリコール、POE水素添加ラノリンアルコールエーテル等が挙げられる。

炭化水素油としては、例えば、流動パラフィン、オゾケライト、スクワラン、プリスタン、パラフィン、セレシン、スクワレン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス、ポリエチレンワックス、フィッシャートロプッシュワックス等が挙げられる。

高級脂肪酸としては、例えば、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸、オレイン酸、ウンデシレン酸、トール酸、リノール酸、リノレイン酸、エイコサペンタエン酸（EPA）、ドコサヘキサエン酸（DHA）等が挙げられる。

高級アルコールとしては、例えば、直鎖アルコール（例えば、ラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、ミリスチルアルコール、オレイルアルコール、セトステアリルアルコール等）；分枝鎖アルコール（例えば、モノステアリルグリセリンエーテル(バチルアルコール)、2-デシルテトラデシノール、ラノリンアルコール、コレステロール、フィトステロール、ヘキシルドデカノール、オクチルドデカノール等）等が挙げられる。

合成エステル油としては、ミリスチン酸イソプロピル、オクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸ミリスチル、オレイン酸デシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、乳酸セチル、乳酸ミリスチル、酢酸ラノリン、ステアリン酸イソセチル、イソステアリン酸イソセチル、12-ヒドロキシステアリン酸コレステリル、ジ-2-エチルヘキサン酸エチレングリコール、ジペンタエリスリトール脂肪酸エステル、モノイソステアリン酸N-アルキルグリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ-2-ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ-2-エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ-2-エチルヘキサン酸ペンタエリスリトール、トリ-2-エチルヘキサン酸グリセリン、トリオクタン酸グリセリン、トリイソパルミチン酸グリセリン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、セチル2-エチルヘキサノエート、2-エチルヘキシルパルミテート、トリミリスチン酸グリセリン、トリ-2-ヘプチルウンデカン酸グリセライド、ヒマシ油脂肪酸メチルエステル、オレイン酸オレイル、アセトグリセライド、パルミチン酸2-ヘプチルウンデシル、アジピン酸ジイソブチル、N-ラウロイル-L-グルタミン酸-2-オクチルドデシルエステル、アジピン酸ジ-2-ヘプチルウンデシル、エチルラウレート、セバシン酸ジ−2-エチルヘキシル、ミリスチン酸2-ヘキシルデシル、パルミチン酸2-ヘキシルデシル、アジピン酸2-ヘキシルデシル、コハク酸2-エチルヘキシル、クエン酸トリエチル、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレンランダム重合体メチルエーテル等が挙げられる。

シリコーン油としては、例えば、鎖状ポリシロキサン（例えば、ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、ジフェニルポリシロキサン等）；環状ポリシロキサン（例えば、オクタメチルシクロテトラシロキサン、デカメチルシクロペンタシロキサン、ドデカメチルシクロヘキサシロキサン等）、３次元網目構造を形成しているシリコーン樹脂、シリコーンゴム、各種変性ポリシロキサン（アミノ変性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリシロキサン、アルキル変性ポリシロキサン、フッ素変性ポリシロキサン等）等が挙げられる。

その他には、例えば、ポリエチレングリコール，グリセリン、1,3-ブチレングリコール，エリスリトール，ソルビトール，キシリトール，マルチトール等の保湿剤；セルロース，ヒドロキシエチルセルロース，ヒドロキシプロピルセルロース，メチルヒドロキシプロピルセルロース，メチルセルロース，カルボキシメチルセルロース，クインスシード，カラギーナン，ペクチン，マンナン，カードラン，コンドロイチン硫酸，デンプン，ガラクタン，デルマタン硫酸，グリコーゲン，アラビアガム，ヘパラン硫酸，ヒアルロン酸，ヒアルロン酸ナトリウム，トラガントガム，ケラタン硫酸，コンドロイチン，キサンタンガム，ムコイチン硫酸，ヒドロキシエチルグアガム，カルボキシメチルグアガム，グアガム，デキストラン，ケラト硫酸，ローカストビーンガム，サクシノグルカン，カロニン酸，キチン，キトサン，カルボキシメチルキチン，寒天等の増粘剤、エタノール等の低級アルコール；ブチルヒドロキシトルエン，トコフェロール，フィチン等の酸化防止剤；安息香酸，サリチル酸，ソルビン酸，パラオキシ安息香酸アルキルエステル，ヘキサクロロフェン等の抗菌剤；アシルサルコシン酸（例えばラウロイルサルコシンナトリウム）、グルタチオン、クエン酸，リンゴ酸，酒石酸，乳酸等の有機酸；ビタミンＡ及びその誘導体、ビタミンＢ６塩酸塩，ビタミンＢ６トリパルミテート，ビタミンＢ６ジオクタノエート，ビタミンＢ２及びその誘導体，ビタミンＢ１２，ビタミンＢ１５及びその誘導体等のビタミンＢ類、アスコルビン酸，アスコルビン酸硫酸エステル（塩），アスコルビン酸リン酸エステル（塩），アスコルビン酸ジパルミテート等のビタミンＣ類、α−トコフェロール，β−トコフェロール，δ−トコフェロール，ビタミンＥアセテート等のビタミンＥ類、ビタミンＤ類、ビタミンＨ、パントテン酸、パンテチン等のビタミン類；ニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル、γ−オリザノール、アラントイン、グリチルリチン酸（塩）、グリチルレチン酸及びその誘導体、ヒノキチオール、ビサボロール、ユーカルプトーン、チモール、イノシトール、サイコサポニン、ニンジンサポニン、ヘチマサポニン、ムクロジサポニン等のサポニン類、パントテニルエチルエーテル、エチニルエストラジオール、トラネキサム酸、アルブチン、セファランチン、プラセンタエキス等の各種薬剤、ギシギシ、クララ、コウホネ、オレンジ、セージ、ノコギリソウ、ゼニアオイ、センブリ、タイム、トウキ、トウヒ、バーチ、スギナ、ヘチマ、マロニエ、ユキノシタ、アルニカ、ユリ、ヨモギ、シャクヤク、アロエ、クチナシ、サワラ、セイヨウサンザシエキス、セイヨウオトギリソウエキス、アイリス・インエキス、アセンヤクエキス、イチョウ葉エキス、イブキジャコウエキス、ウイキョウエキス、ウーロン茶エキス、ウオーターリリーエキス、エイジツエキス、エンメイソウエキス、オウゴンエキス、オウバクエキス、オドリコソウエキス、カンゾウエキス、クチナシエキス、紅茶エキス、セイカリュウエキス、トルメンチラエキス、バラエキス、ヘチマエキス、ペパーミントエキス、ローズマリーエキス、ローヤルゼリーエキス等の植物の抽出物、色素、モノラウリン酸ソルビタン、モノパルミチン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタン、トリオレイン酸ソルビタン、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン、モノステアリン酸ポリオキセチレンソルビタン、ポリエチレングリコールモノオレート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリグリコールジエーテル、ラウロイルジエタノールアマイド、脂肪酸イソプロパノールアマイド、マルチトールヒドロキシ脂肪酸エーテル、アルキル化多糖、アルキルグルコシド、シュガーエステル等の非イオン性活性剤、ステアリルトリメチルアンモニウムクロライド、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオン性界面活性剤、パルミチン酸ナトリウム、ラウリン酸ナトリウム、ラウリル酸ナトリウム、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル、ロート油、リニアドデシルベンゼン硫酸、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油マレイン酸、アシルメチルタウリン等のアニオン性界面活性剤、両性界面活性剤、中和剤、δ−トコフェロール、ブチルヒドロキシトルエン等の酸化防止剤、フェノキシエタノール、パラベン等の防腐剤が挙げられる。

本発明のしわを防止または改善する方法において、ベンゾヒドロキサム酸またはその塩は、皮膚への適用が可能でかつ本発明の目的を達成できる限り、任意の形態で皮膚に適用することができ、また単独で適用しても、あるいは他の任意の成分と共に配合して適用してもよい。また適用する皮膚の場所も限定されず、頭皮を含む体表面のあらゆる皮膚を含む。本発明の方法は、通常美容方法として用いられる。

尚、本発明のベンゾヒドロキサム酸またはその塩からなるADAM阻害剤の用途は、上述したしわの防止または改善に限定されず、ADAMの活性を阻害することによって効果を発揮できる任意の用途を含み、例えばADAMの活性化による皮膚細胞の増殖や分化により悪影響を受ける各種疾患の治療または予防にも用いることができる。

以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の実施例に限定されるものではない。なお、化合物の配合量は特に断りのない限り質量％である。

１. 新規なADAM阻害剤の探索
まず、以下の方法によりADAM活性阻害効果について各種化合物をスクリーニングして、新規なADAM阻害剤を探索した。

HB-EGF-AP/HT-1080（ヒトHB-EGFのN末端に耐熱性アルカリフォスファターゼ（AP）を付加した融合蛋白質を強制的に発現するように改変したヒト線維肉腫由来培養細胞HT-1080）を用いてADAM酵素阻害活性を有する化合物のスクリーニングを行った。用いた細胞株HB-EGF-AP/HT-1080の細胞表面上にはアルカリフォスファターゼと融合した形でHB-EGF全長分子が発現している。この細胞をホルボールエステルで刺激すると、細胞膜表面上のADAM酵素が活性化されてHB-EGF分子を切断する。切断されて遊離型となったHB-EGFにはアルカリフォスファターゼが結合しているため、培養上清中のアルカリフォスファターゼ活性を測定することで化合物のADAM酵素阻害活性を間接的に測定できる。

具体的には、2.0 x 10⁵ cells/ml になるように細胞数を調整したHB-EGF-AP/HT-1080を96ウェル培養用マイクロプレートに0.2 ml/wellずつ播種し、37℃で一晩培養した。培地を除去しPBS(-)で洗浄後、被験物質を含む培地を0.1 ml/wellずつ添加し、37℃で30分間インキュベートして前処置した。その後、培養上清を除去し、再度被験物質と60 nM TPA（ホルボールエステル：12-o-Tetradecanoylphorbol-acetate; Sigma P8139）を含む培地を0.2 ml/wellずつ添加し、さらに60分間インキュベートして処置した。処置終了後の各ウェルの培養上清0.1 mlをアルカリフォスファターゼ活性測定用マイクロプレートのウェルに移し、65℃にて10分間インキュベートし、内在性のアルカリフォスファターゼを失活させた。1 mg/ml のAP基質（p-nitrophenylphosphate，Wako; 141-02341）を0.1 ml/wellずつ各ウェルに添加し、直ちに各ウェルの405 nmでの吸光度を測定した。遮光して室温にて2時間インキュベートしたのち、再び各ウェルの405 nmでの吸光度を測定した。2時間インキュベート後の吸光度からAP基質添加直後の吸光度を減じたものを各ウェルの吸光度とした。0% 阻害コントロール（TPAのみを含む培地）の吸光度をA0、100% 阻害コントロール（培地のみ）の吸光度をA100、試料の吸光度をASとし、以下の式により阻害率（％）を算出した：

阻害率（％） = (A0-AS)/(A0-A100) * 100

その結果、本発明のベンゾヒドロキサム酸に高いHB-EGF遊離抑制効果が認められ、ADAM活性を阻害することが示唆された。各ベンゾヒドロキサム酸の遊離阻害率を表１に示す。

２． 4-メトキシベンゾヒドロキサム酸のしわ改善効果の評価
次に、バリア破壊しわマウスモデルを用いて、新規なADAM阻害化合物のうち阻害率（％）が高かった4-メトキシベンゾヒドロキサム酸のしわ改善効果について検討した。

ヘアレスマウス（HR-1, 雄6週齢、星野実験動物）の左側背部に経皮水分蒸散量（TEWL）（水分蒸散量測定装置MEECO；Meeco社、USAを用いて測定）が4-8mg/cm²/hになるようにテープストリッピングを週3回、4週間継続して行った。テープストリッピング処置直後に毎回、4-メトキシベンゾヒドロキサム酸をそれぞれ1％になるように50%エタノール水溶液に溶解させたものを、マウス左側背部に100μlずつ塗布し、また、陰性対象として50％エタノール水溶液(Vehicle)を同様に塗布した。ｎ数は各群６から７とした。

4週間後のしわの発生状況を視感判定によりスコア化した。しわの発生状況の評価基準は「しわなし；０」、「うすいしわ；１」、「明らかなしわ；２」、「深いしわ；３」とし、0.5刻みで点数化した。評点が大きいほどしわが深いことを示す。各群の平均値および標準偏差を算出し、結果を図２に示す。

図２から明らかであるように、Vehicleのスコアが平均値で1.17なのに対して、4-メトキシベンゾヒドロキサム酸は0.91と有意に低く、顕著なしわ抑制効果を示した。

次に、マウス背部のレプリカをしわ解析装置（浜野エンジニアリング）を用いて解析し、しわ面積（％）を算出した。しわ面積のパーセンテージが低いほどしわ形成が抑制されていることを表す。結果を図３に示す。

図３から明らかであるように、4-メトキシベンゾヒドロキサム酸のしわ面積（％）の平均値はVehicleよりも有意に低く、高いしわ抑制効果を示した。

さらにマウス背部における試験開始前と開始後4週間目の経表皮水分蒸散量（TEWL）についても検討した。テープストリッピング処置を施し、4-メトキシベンゾヒドロキサム酸または50％エタノール水溶液(Vehicle)を塗布した左側背部、および何も処置を施していない右側背部におけるTEWL値を、Vapometer（Technologies Ltd, Kuopio, フィンランド）でそれぞれ2回ずつ測定した。各個体の右側のTEWL値を100とした時の左側のTEWL値の比率（相対的TEWL（％））を求め、各群毎の平均値を算出した。パーセンテージの値が高いほど肌荒れが亢進していることを示す。結果を図４に示す。

図４から明らかであるように、Vehicle塗布群ではTEWLが216％まで上昇したのに対し、4-メトキシベンゾヒドロキサム酸塗布群では126％の上昇に留まっており、4-メトキシベンゾヒドロキサム酸はテープストリッピングによるTEWLの上昇を有意に抑制した。

これらの結果から、4-メトキシベンゾヒドロキサム酸は、活性化したADAMを阻害することにより表皮増殖因子であるHB-EGFの遊離を抑制し、皮膚の増殖および肥厚を抑制してしわ形成を防止または改善し得ることが示唆された。さらには、4-メトキシベンゾヒドロキサム酸は、皮膚のバリア破壊による経表皮水分蒸散量（TEWL）の上昇を顕著に抑制し、肌荒れ防止効果も有することが示唆された。

以下に、本発明のベンゾヒドロキサム酸またはその塩を含有する皮膚外用剤の製剤例を示すが、本発明はこれらに限定されるものではない。なお、配合量は全て外用剤全量に対する質量％で表す。

製剤例１：乳液
（処方）質量％
ステアリン酸２．５
セチルアルコール１．５
ワセリン５．０
流動パラフィン５．０
ポリオキシエチレン（１０モル）モノオレイン酸エステル２．０
ポリエチレングリコール１５００３．０
トリエタノールアミン１．０
カルボキシビニルポリマー０．０５
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸２．０
亜硫酸水素ナトリウム０．０１
エチルパラベン０．２
香料適量
精製水残余
（製法）少量の精製水にカルボキシビニルポリマーを溶解する（Ａ相）。残りの精製水にポリエチレングリコール１５００とトリエタノールアミン、４−メトキシベンゾヒドロキサム酸を加え、加熱溶解して７０℃に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え予備乳化を行い、Ａ相を加えホモミキサーで均一乳化し、乳化後よくかき混ぜながら３０℃まで冷却し、乳液を得た。

製剤例２：化粧水
（処方）質量％
エタノール５．０
カルボキシビニルポリマー０．３
ポリオキシエチレン（１５モル）オレイルエーテル０．８
１，３−ブチレングリコール５．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸２．０
クエン酸０．０３
クエン酸ナトリウム０．０７
メチルパラベン０．１
精製水残余
（製法）精製水に、クエン酸、クエン酸ナトリウム及び４−メトキシベンゾヒドロキサム酸を溶解し、これを水相とした。他方、その他の成分を撹拌溶解し、これを水相に添加して均質にし、化粧水を得た。

製剤例３：クリーム
（処方）質量％
ステアリン酸２．０
ステアリルアルコール７．０
水添ラノリン２．０
２−オクチルドデシルアルコール６．０
ポリオキシエチレン（２５モル）セチルアルコールエーテル３．０
グリセリンモノステアリン酸エステル２．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸２．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸２．０
１，３−ブチレングリコール５．０
エデト酸３ナトリウム０．１
グリチルレチン酸ナトリウム０．１
ビタミンＥアセテート０．３
エチルパラベン０．３
精製水残余
（製法）精製水に４−メトキシベンゾヒドロキサム酸、２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸、１，３−ブチレングリコール、エデト酸３ナトリウム、グリチルレチン酸ナトリウムを加えて７０℃に保ち、これを水相とした。他方、その他の成分を混合し、加熱融解し７０℃に保ち、これを油相とした。水相に油相を加えて予備乳化を行ない、ホモミキサーで均一に乳化した後、３０℃に冷却しクリームを得た。

製剤例４乳液
（処方）質量％
ジメチルポリシロキサン３．０
デカメチルシクロペンタシロキサン４．０
エタノール５．０
グリセリン６．０
１，３−ブチレングリコール５．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸０．５
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸０．５
ポリオキシエチレンメチルグルコシド３．０
ヒマワリ油１．０
スクワラン２．０
水酸化カリウム０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０５
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン０．１
４−メトキシサリチル酸カリウム１．０
グリチルリチン酸ジカリウム０．０５
ビワ葉エキス０．１
Ｌ−グルタミン酸ナトリウム０．０５
ウイキョウエキス０．１
酵母エキス０．１
ラベンダー油０．１
ジオウエキス０．１
ジモルホリノピリダジノン０．１
キサンタンガム０．１
カルボキシビニルポリマー０．１
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体（ペミュレンＴＲ−１）０．１
ベンガラ適量
黄酸化鉄適量
パラベン適量
精製水残余

製剤例５乳液
（処方）質量％
ジメチルポリシロキサン３．０
デカメチルシクロペンタシロキサン４．０
エタノール５．０
グリセリン６．０
１，３−ブチレングリコール５．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
ポリオキシエチレンメチルグルコシド３．０
ヒマワリ油１．０
スクワラン２．０
水酸化カリウム０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０５
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン０．１
４−メトキシサリチル酸カリウム１．０
グリチルリチン酸ジカリウム０．０５
ビワ葉エキス０．１
Ｌ−グルタミン酸ナトリウム０．０５
ウイキョウエキス０．１
酵母エキス０．１
ラベンダー油０．１
ジオウエキス０．１
ジモルホリノピリダジノン０．１
キサンタンガム０．１
カルボキシビニルポリマー０．１
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体（ペミュレンＴＲ−１）０．１
ベンガラ適量
黄酸化鉄適量
パラベン適量
精製水残余

製剤例６乳液
（処方）質量％
ジメチルポリシロキサン２．０
ベヘニルアルコール１．０
バチルアルコール０．５
グリセリン５．０
１，３−ブチレングリコール７．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸０．５
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸１．０
トラネキサム酸メチルアミド塩酸塩０．７
エリスリトール２．０
硬化油３．０
スクワラン６．０
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット２．０
イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル１．０
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン１．０
水酸化カリウム適量
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０５
フェノキシエタノール適量
カルボキシビニルポリマー０．１
精製水残余

製剤例７乳液
（処方）質量％
ジメチルポリシロキサン２．０
ベヘニルアルコール１．０
バチルアルコール０．５
グリセリン５．０
１，３−ブチレングリコール７．０
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸１．０
トラネキサム酸メチルアミド塩酸塩０．７
エリスリトール２．０
硬化油３．０
スクワラン６．０
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット２．０
イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル１．０
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン１．０
水酸化カリウム適量
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０５
フェノキシエタノール適量
カルボキシビニルポリマー０．１
精製水残余

製剤例８乳液
（処方）質量％
流動パラフィン７．０
ワセリン３．０
デカメチルシクロペンタシロキサン２．０
ベヘニルアルコール０．５
グリセリン５．０
ジプロピレングリコール７．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
ポリエチレングリコール１５００２．０
ホホバ油１．０
イソステアリン酸０．５
ステアリン酸０．５
ベヘニン酸０．５
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット３．０
２−エチルヘキサン酸セチル３．０
モノステアリン酸グリセリン１．０
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン１．０
水酸化カリウム０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０５
グリチルレチン酸ステアリル０．０５
Ｌ−アルギニン塩酸塩０．１
ローヤルゼリーエキス０．１
酵母エキス０．１
ウコンエキス０．１
酢酸トコフェロール０．１
アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム０．１
エデト酸三ナトリウム０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン０．１
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル０．１
カルボキシビニルポリマー０．１５
パラベン適量
精製水残余
香料適量

製剤例９乳液
（処方）質量％
ワセリン５．０
ベヘニルアルコール０．５
バチルアルコール０．５
グリセリン７．０
１，３−ブチレングリコール７．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
１，２−ペンタンジオール１．０
キシリット３．０
ポリエチレングリコール２００００２．０
硬化油２．０
ホホバ油２．０
スクワラン５．０
イソステアリン酸０．５
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット２．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油０．５
ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン０．４
水酸化カリウム適量
ピロ亜硫酸ナトリウム０．０１
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０５
グリチルリチン酸ジカリウム０．０５
トリメチルグリシン３．０
アルブチン３．０
イチヤクソウエキス０．１
オドリコソウエキス０．１
ルンプヤンエキス０．１
酵母エキス０．１
酢酸トコフェロール０．１
チオタウリン０．１
クララエキス０．１
ベンガラ適量
クインスシードエキス０．１
カルボキシビニルポリマー０．２
フェノキシエタノール適量
精製水残余

製剤例１０乳液
（処方）質量％
ワセリン５．０
ジメチルポリシロキサン２．０
ベヘニルアルコール０．６
バチルアルコール０．５
ジプロピレングリコール２．０
１，３−ブチレングリコール４．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸１０．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸３．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸３．０
キシリット１．０
ポリエチレングリコール１５００１．０
スクワラン５．０
トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル２．０
酢酸レチノール０．０３
レチノール（１５０万単位）０．０１
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油０．５
トラネキサム酸メチルアミド塩酸塩０．７
グリチルリチン酸ジカリウム０．１
２−Ｏ−エチル−Ｌ−アスコルビン酸０．１
酵母エキス０．１
アセンヤクエキス０．１
シャクヤクエキス０．１
ヒオウギ抽出液０．１
ＨＥＤＴＡ３ナトリウム０．０５
キサンタンガム０．１
カルボキシビニルポリマー０．１５
精製水残量
香料適量

製剤例１１化粧水
（処方）質量％
エチルアルコール５．０
グリセリン１．０
１，３−ブチレングリコール５．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸３．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸１０．０
ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンデシルテトラデシルエーテル０．２
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０３
トリメチルグリシン１．０
ポリアスパラギン酸ナトリウム０．１
α−トコフェロール２−Ｌ−アスコルビン酸リン酸ジエステルカリウム０．１
２−Ｏ−エチル−Ｌ−アスコルビン酸０．１
緑茶エキス０．１
ブナエキス０．１
トウニンエキス０．１
西洋ハッカエキス０．１
イリス根エキス０．１
ＨＥＤＴＡ３ナトリウム０．１
カルボキシビニルポリマー０．０５
水酸化カリウム０．０２
フェノキシエタノール適量
精製水残余
香料適量

製剤例１２化粧水
（処方）質量％
グリセリン２．０
１，３−ブチレングリコール４．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸１．０
エリスリトール１．０
ポリオキシエチレンメチルグルコシド１．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油０．５
Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド２．０
キシリトール０．１
クエン酸０．０２
クエン酸ナトリウム０．０８
フェノキシエタノール適量
Ｎ−ヤシ油脂肪酸アシルＬ−アルギニンエチル
・ＤＬ−ピロリドンカルボン酸０．１
精製水残余

製剤例１３化粧水
（処方）質量％
グリセリン２．０
１，３−ブチレングリコール４．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸１．０
エリスリトール１．０
ポリオキシエチレンメチルグルコシド１．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油０．５
Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド２．０
キシリトール０．１
クエン酸０．０２
クエン酸ナトリウム０．０８
フェノキシエタノール適量
Ｎ−ヤシ油脂肪酸アシルＬ−アルギニンエチル
・ＤＬ−ピロリドンカルボン酸０．１
精製水残余

製剤例１４化粧水
（処方）質量％
エタノール１０．０
ジプロピレングリコール１．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸１．０
ポリエチレングリコール１０００１．０
ポリオキシエチレンメチルグルコシド１．０
ホホバ油０．０１
トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル０．１
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油０．２
ジイソステアリン酸ポリグリセリル０．１５
Ｎ−ステアロイル−Ｌ−グルタミン酸ナトリウム０．１
クエン酸０．０５
クエン酸ナトリウム０．２
水酸化カリウム０．４
グリチルリチン酸ジカリウム０．１
塩酸アルギニン０．１
Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド２．０
オウゴンエキス０．１
ユキノシタエキス０．１
オドリコソウエキス０．１
タイムエキス０．１
マヨナラエキス０．１
トラネキサム酸１．０
エデト酸三ナトリウム０．０５
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル０．０１
ジブチルヒドロキシトルエン適量
パラベン適量
海洋深層水３．０
精製水残余
香料適量

製剤例１５化粧水
（処方）質量％
ジメチルポリシロキサン１．０
エタノール３．０
ベヘニルアルコール０．３
グリセリン５．０
ジプロピレングリコール５．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸０．１
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸０．１
エリスリトール１．０
ポリエチレングリコール４０００１．０
スクワラン０．４
２−エチルヘキサン酸セチル０．１
Ｎ−ステアロイル−Ｌ−グルタミン酸ナトリウム０．２
塩化マグネシウム０．１
塩化アルギニン０．１
ヒポタウリン０．１
エデト酸三ナトリウム０．１
パラベン適量
精製水残余
香料適量

製剤例１６化粧水
（処方）質量％
エタノール４０．０
ジプロピレングリコール１．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸０．１
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸０．１
ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンデシルテトラデシルエーテル０．１
無水ケイ酸１．０
サリチル酸０．１
クエン酸ナトリウム０．２
パラフェノールスルホン酸亜鉛０．２
グリチルリチン酸ジカリウム０．１
塩酸ピリドキシン０．１
Ｌ−セリン０．１
Ｌ−メントール０．０５
ＨＥＤＴＡ３ナトリウム０．０５
セルロース粉末１．０
ベントナイト０．８
精製水残余

製剤例１７化粧水
（処方）質量％
エタノール４０．０
ジプロピレングリコール１．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸０．１
ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンデシルテトラデシルエーテル０．１
無水ケイ酸１．０
サリチル酸０．１
クエン酸ナトリウム０．２
パラフェノールスルホン酸亜鉛０．２
グリチルリチン酸ジカリウム０．１
塩酸ピリドキシン０．１
Ｌ−セリン０．１
Ｌ−メントール０．０５
ＨＥＤＴＡ３ナトリウム０．０５
セルロース粉末１．０
ベントナイト０．８
精製水残余

製剤例１８ジェル
（処方）質量％
ジメチルポリシロキサン５．０
グリセリン２．０
１，３−ブチレングリコール５．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸０．１
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸０．１
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸０．１
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸０．１
ポリエチレングリコール１５００３．０
ポリエチレングリコール２００００３．０
オクタン酸セチル３．０
クエン酸０．０１
クエン酸ナトリウム０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．１
グリチルリチン酸ジカリウム０．１
Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド２．０
Ｌ−アスコルビン酸リン酸エステルマグネシウム０．１
酢酸トコフェロール０．１
オウゴンエキス０．１
タイムエキス０．１
ユキノシタエキス０．１
エデト酸三ナトリウム０．１
キサンタンガム０．３
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体（ペミュレンＴＲ−２）０．０５
寒天末１．５
フェノキシエタノール適量
ジブチルヒドロキシトルエン適量
精製水残余

製剤例１９パック
（処方）質量％
エタノール１０．０
１，３−ブチレングリコール６．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
ポリエチレングリコール４０００２．０
オリーブ油１．０
マカデミアナッツ油１．０
ヒドロキシステアリン酸フィトステリル０．０５
乳酸０．０５
乳酸ナトリウム０．１
Ｌ−アスコルビン酸硫酸エステル２ナトリウム０．１
α−トコフェロール２−Ｌ−アスコルビン酸リン酸ジエステルカリウム０．１
ビタミンＥアセテート０．１
魚コラーゲン０．１
コンドロイチン硫酸ナトリウム０．１
カルボキシメチルセルロースナトリウム０．２
ポリビニルアルコール１２．０
パラオキシ安息香酸エステル適量
精製水残余
香料適量

製剤例２０パック
（処方）質量％
エタノール３．０
グリセリン５．０
１，３−ブチレングリコール６．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸１．０
ポリエチレングリコール１５００５．０
ポリオキシエチレンメチルグルコシド２．０
トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル１．０
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０５
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン０．１
グリチルリチン酸ジカリウム０．１
ビワ葉エキス０．１
Ｌ−グルタミン酸ナトリウム０．１
ウイキョウエキス０．１
ハマメリスエキス０．１
オウバクエキス０．１
ジオウエキス０．１
ユーカリ油０．０５
ジモルホリノピリダジノン０．１
キサンタンガム０．０５
カルボキシビニルポリマー０．５
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体（ペミュレンＴＲ−１）０．０５
水酸化カリウム０．０５
フェノキシエタノール適量
精製水残余

製剤例２１パック
（処方）質量％
エタノール３．０
グリセリン５．０
１，３−ブチレングリコール６．０
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸１．０
ポリエチレングリコール１５００５．０
ポリオキシエチレンメチルグルコシド２．０
トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル１．０
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０５
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン０．１
グリチルリチン酸ジカリウム０．１
ビワ葉エキス０．１
Ｌ−グルタミン酸ナトリウム０．１
ウイキョウエキス０．１
ハマメリスエキス０．１
オウバクエキス０．１
ジオウエキス０．１
ユーカリ油０．０５
ジモルホリノピリダジノン０．１
キサンタンガム０．０５
カルボキシビニルポリマー０．５
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体（ペミュレンＴＲ−１）０．０５
水酸化カリウム０．０５
フェノキシエタノール適量
精製水残余

製剤例２２クリーム
（処方）質量％
流動パラフィン３．０
ワセリン１．０
ジメチルポリシロキサン１．０
ステアリルアルコール１．８
ベヘニルアルコール１．６
グリセリン８．０
ジプロピレングリコール５．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸５．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸５．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸５．０
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸５．０
マカデミアナッツ油２．０
硬化油３．０
スクワラン６．０
ステアリン酸２．０
ヒドロキシステアリン酸コレステリル０．５
２−エチルヘキサン酸セチル４．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油０．５
自己乳化型モノステアリン酸グリセリン３．０
水酸化カリウム０．１５
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０５
トリメチルグリシン２．０
α−トコフェロール２−Ｌ−アスコルビン酸リン酸ジエステルカリウム１．０
酢酸トコフェロール０．１
甜茶エキス０．１
パラベン適量
エデト酸３ナトリウム０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン０．０５
ジパラメトキシ桂皮酸モノ−２−エチルヘキサン酸グリセリル０．０５
色剤適量
カルボキシビニルポリマー０．０５
精製水残余

製剤例２３クリーム
（処方）質量％
流動パラフィン８．０
ワセリン３．０
ジメチルポリシロキサン２．０
ステアリルアルコール３．０
ベヘニルアルコール２．０
グリセリン５．０
ジプロピレングリコール４．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸３．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸３．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸３．０
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸３．０
トレハロース１．０
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット４．０
モノイソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル２．０
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン１．０
親油型モノステアリン酸グリセリン２．０
クエン酸０．０５
クエン酸ナトリウム０．０５
水酸化カリウム０．０１５
油溶性甘草エキス０．１
レチノールパルミテート（１００万単位＿）０．２５
酢酸トコフェロール０．１
パラオキシ安息香酸エステル適量
フェノキシエタノール適量
ジブチルヒドロキシトルエン適量
エデト酸三ナトリウム０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン０．０１
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル０．１
β−カロチン０．０１
ポリビニルアルコール０．５
ヒドロキシエチルセルロース０．５
カルボキシビニルポリマー０．０５
精製水残余
香料適量

製剤例２４クリーム
（処方）質量％
流動パラフィン８．０
ワセリン３．０
ジメチルポリシロキサン２．０
ステアリルアルコール３．０
ベヘニルアルコール２．０
グリセリン５．０
ジプロピレングリコール４．０
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸３．０
トレハロース１．０
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット４．０
モノイソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル２．０
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン１．０
親油型モノステアリン酸グリセリン２．０
クエン酸０．０５
クエン酸ナトリウム０．０５
水酸化カリウム０．０１５
油溶性甘草エキス０．１
レチノールパルミテート（１００万単位＿）０．２５
酢酸トコフェロール０．１
パラオキシ安息香酸エステル適量
フェノキシエタノール適量
ジブチルヒドロキシトルエン適量
エデト酸三ナトリウム０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン０．０１
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル０．１
β−カロチン０．０１
ポリビニルアルコール０．５
ヒドロキシエチルセルロース０．５
カルボキシビニルポリマー０．０５
精製水残余
香料適量

製剤例２５クリーム
（処方）質量％
ワセリン２．０
ジメチルポリシロキサン２．０
エタノール５．０
ベヘニルアルコール０．５
バチルアルコール０．２
グリセリン７．０
１，３−ブチレングリコール５．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸１．０
ポリエチレングリコール２０００００．５
ホホバ油３．０
スクワラン２．０
ヒドロキシステアリン酸フィトステリル０．５
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット１．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油１．０
水酸化カリウム０．１
ピロ亜硫酸ナトリウム０．０１
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０５
グリチルレチン酸ステアリル０．１
パントテニルエチルエーテル０．１
アルブチン７．０
トラネキサム酸１．０
酢酸トコフェロール０．１
ヒアルロン酸ナトリウム０．０５
パラオキシ安息香酸エステル適量
エデト酸三ナトリウム０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン０．１
ジパラメトキシ桂皮酸モノ−２−エチルヘキサン酸グリセリル０．１
黄酸化鉄適量
キサンタンガム０．１
カルボキシビニルポリマー０．２
精製水残余

製剤例２６クリーム
（処方）質量％
流動パラフィン１０．０
ジメチルポリシロキサン２．０
グリセリン１０．０
１，３−ブチレングリコール２．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸１．０
エリスリトール１．０
ポリエチレングリコール１５００５．０
スクワラン１５．０
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット５．０
水酸化カリウム０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０５
酢酸トコフェロール０．０５
パラオキシ安息香酸エステル適量
ヒドロキシプロピルメチルセルロース０．３
ポリビニルアルコール０．１
カルボキシビニルポリマー０．２
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体（ペミュレンＴＲ−２）０．１
精製水残余

製剤例２７クリーム
（処方）質量％
流動パラフィン１０．０
ジメチルポリシロキサン２．０
グリセリン１０．０
１，３−ブチレングリコール２．０
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸１．０
エリスリトール１．０
ポリエチレングリコール１５００５．０
スクワラン１５．０
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット５．０
水酸化カリウム０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム０．０５
酢酸トコフェロール０．０５
パラオキシ安息香酸エステル適量
ヒドロキシプロピルメチルセルロース０．３
ポリビニルアルコール０．１
カルボキシビニルポリマー０．２
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体（ペミュレンＴＲ−２）０．１
精製水残余

製剤例２８二層タイプクリーム
（処方）質量％
ジメチルポリシロキサン５．０
デカメチルシクロペンタシロキサン２５．０
トリメチルシロキシケイ酸５．０
ポリオキシエチレン・メチルポリシロキサン共重合体２．０
ジプロピレングリコール５．０
４−メトキシベンゾヒドロキサム酸０．０１
２−ヒドロキシ−３−メチルベンゾヒドロキサム酸０．０１
２−ヒドロキシ−５−メチルベンゾヒドロキサム酸０．０１
４−シクロヘキシルベンゾヒドロキサム酸０．０１
パルミチン酸デキストリン被覆微粒子酸化亜鉛（６０ｎｍ）１５．０
グリチルリチン酸ジカリウム０．０２
グルタチオン１．０
チオタウリン０．０５
クララエキス１．０
パラベン適量
フェノキシエタノール適量
エデト酸三ナトリウム適量
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル７．５
ジメチルジステアリルアンモニウムヘクトライト０．５
球状ポリアクリル酸アルキル粉末５．０
ブチルエチルプロパンジオール０．５
精製水残余
香料適量

上記の製剤例の皮膚外用剤はいずれも、高いしわ防止または改善効果を有する。

図１は、表皮におけるADAMの活性阻害によりしわを防止または改善する機構について説明した概略図図２は、視感判定での4-メトキシベンゾヒドロキサム酸のしわ改善効果を示すグラフ図３は、しわ面積（％）での4-メトキシベンゾヒドロキサム酸のしわ改善効果を示すグラフ図４は、4-メトキシベンゾヒドロキサム酸のTEWL上昇抑制効果を示すグラフ。

Claims

下記一般式（Ｉ）で示されるベンゾヒドロキサム酸またはその塩からなるADAM(a disintegrin and metalloprotease)阻害剤。

（式中、R₁はそれぞれ独立して、炭素数1〜18のアルキル基、炭素数3〜8のシクロアルキル基、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、炭素数1〜18のアルコキシ基、ベンジルオキシ基、アミノ基またはアシルアミノ基であり、R₂は水素原子、メチル基またはフェニル基であり、nは0〜3の整数である。）
R₂が水素原子であることを特徴とする請求項１記載のADAM阻害剤。
R₁が、炭素数1〜18のアルキル基、炭素数3〜8のシクロアルキル基、ヒドロキシル基、または炭素数1〜18のアルコキシ基であり、nが1〜2の整数であることを特徴とする請求項１または２記載のADAM阻害剤。
n=1であり、R₁が4位に置換することを特徴とする請求項１から３いずれか１項記載のADAM阻害剤。
R₁が、炭素数1〜18のアルキル基、炭素数3〜8のシクロアルキル基、または炭素数1〜18のアルコキシ基であり、R₂が水素原子であることを特徴とする請求項４記載のADAM阻害剤。
請求項１から５いずれか１項記載のADAM阻害剤からなるしわ防止または改善剤。
請求項１から５いずれか１項記載のADAM阻害剤を皮膚に適用することを特徴とするしわを防止または改善する方法。