JP2006337166A - 電気泳動装置 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】生体高分子試料を分離するための支持体を有する電気泳動槽10、該支持体の電気泳動パターンの画像を撮影する画像撮影手段61、分離した生体高分子試料の画分を切り出す切り出し手段62、支持体に光照射する光源71、および光照射を遮蔽する機構91を備え、電気泳動槽10および画像撮影手段61を、相対的に、X軸、Y軸方向のいずれか、あるいはその双方に駆動して、電気泳動パターン画像の撮影、および電気泳動により分離した支持体内の生体高分子試料の画分の位置情報の獲得を行い、該位置情報、および電気泳動の泳動状態の基準となるサイズマーカーのうちの分子量の異なるマーカー分子の泳動状態に基づき、電気泳動を好適に自動停止させ、自動で画像撮影を行い、検体試料の分子量の検出を行う。
【選択図】 図2
Description
(実施の形態1)
図1は、本発明の実施の形態1による電気泳動システムの内部の概略構成の斜視図を示すものであり、図2は、本実施の形態1による電気泳動システムのブロック構成図を示すものである。
まず、電気泳動槽10内の支持体付設面11に、電気泳動用ゲル101を設置する。支持体である電気泳動用ゲル101の一端に設けた注入口に核酸試料を注入した後、ゲルの両端に設置された1対の電極間に規定の電圧を印加する。電圧を印加することで、負に帯電している核酸試料は、陰極から陽極方向に向かって移動を開始する。ゲル内部は微細な網目状となっているため、ゲル内部を移動する核酸試料は、その分子量の大きさによって移動する速度が異なるため、一定時間の電圧を加えたゲル内部では、分子量に基づいてゲルの注入口とほぼ同じ幅の帯状に分離される。このとき、紫外線光源71を点灯して核酸試料に紫外線を照射すると、核酸試料に予め混合あるいは、電気泳動用ゲルに予め混合しておいた臭化エチジウムなどの核酸結合性蛍光試薬が蛍光発色する。この蛍光を、画像撮影手段61にて撮影することで、核酸試料が分子量に基づいて帯状に分離している電気泳動パターンの画像を得ることが出来る。このとき、第1の光学フィルター91により、紫外線光源71から発している紫外線より長い波長の不要な光をカットすることで、撮影画質を向上させることができる。また、画像撮影手段61に取り付けられた第2の光学フィルター92により、紫外線光源から発光される紫外線をカットすることで、核酸試料に混合された核酸結合性蛍光試薬の蛍光状態のみを、より鮮明に撮影することができる。本実施の形態1では、詳しくは紫外線照射部70の発光面に400nm以上の波長の光を遮断する第1の光学フィルター91を設け、画像撮影手段61においては、撮影面には600nm以下の波長の光を遮断する第2の光学フィルター92を設けている。
11 支持体付設面
20 切り出し器具
21 上部接続部
30 切り出し器具ホルダー
40 テーブル機構
42 テーブル機構動力伝達部
45 スライドテーブル
55 キャリッジ機構動作モータ
56 切り出し器具動作モータ
58 歯車
60 キャリッジ機構
61 画像撮影手段
62 切り出し手段
63 直動シャフト
64 リードスクリュー
65 切り出し器具把持ピン
66 スクリューナット
70 紫外線照射部
71 紫外線光源
91 第1の光学フィルター
92 第2の光学フィルター
101 電気泳動用ゲル
110 電力供給部
120 システム制御部
121 画像合成手段
122 核酸画分位置計測手段
125 記録装置
Claims (10)
- 生体高分子試料を分離解析する電気泳動システムにおいて、
前記生体高分子試料を、支持体を用いて電気泳動させるための電気泳動槽と、
前記電気泳動槽に付設した前記支持体の両端に電圧を印加し、前記生体高分子試料を電気泳動させる電圧印加手段と、
前記生体高分子試料の電気泳動の結果を撮影する画像撮影手段と、
前記画像撮影手段により獲得した画像に基づき、前記支持体における生体高分子画分の位置情報を算出し、該支持体で分離した生体高分子の画分を切り出す切り出し手段とを有し、
前記電気泳動の開始から該電気泳動による生体高分子試料画分の抽出回収までを、一連に実施可能とする電気泳動システムであって、
前記電気泳動を、所要の条件が満たされたとき自動停止させ、そのときの電気泳動画像を自動撮影する、
ことを特徴とする電気泳動システム。 - 請求項1に記載の電気泳動システムにおいて、
前記電気泳動の泳動状態の基準となるサイズマーカーは、分子量の異なるマーカー分子を複数有するものとし、
該複数のマーカー分子の各々の移動度を前記画像撮像手段により経時追跡し、
前記複数のマーカー分子のうちの1つの移動度が規定の移動度に達したとき、前記電気泳動を自動停止させる、
ことを特徴とする電気泳動システム。 - 請求項2に記載の電気泳動システムにおいて、
前記電気泳動の泳動状態の基準となるサイズマーカー内の分子量の異なる複数のマーカー分子の中の、最低分子量のマーカー分子の泳動状態から順次分子量が大きいマーカー分子の泳動状態を経時追跡し、
所要の分子量のマーカー分子の泳動状態が規定の移動度に達したとき、前記電気泳動を自動停止させる、
ことを特徴とする電気泳動システム。 - 請求項3に記載の電気泳動システムにおいて、
前記電気泳動の泳動状態の基準となるサイズマーカーに含まれる分子量の異なるマーカー分子の中の、最低分子量のマーカー分子から順次分子量が大きくなる、少なくとも3つあるいは4つのマーカー分子の泳動状態を経時追跡し、
前記3つあるいは4つのマーカー分子の移動度が所要の移動度に到達したとき、前記電気泳動を自動停止させる、
ことを特徴とした電気泳動システム。 - 請求項2ないし請求項4のいずれかに記載の電気泳動システムにおいて、
前記画像撮影手段により追跡した各マーカー分子について、各マーカー分子の分子量に対する移動度の一次関数で表される検量線を演算し、該検量線の傾きが設定値以上に到達した時、前記電気泳動を自動停止させる、
ことを特徴とする電気泳動システム。 - 請求項2ないし請求項5のいずれかに記載の電気泳動システムにおいて、
検体試料の生体高分子の推定分子量が、電気泳動の泳動状態の基準となるサイズマーカーに含まれる分子量の異なる複数のマーカー分子の、最低分子量のマーカー分子から低い順に数えて3番目あるいは4番目のマーカー分子の分子量より大きい場合、該検体試料の生体高分子の推定分子量に最も近似し、かつ該推定分子量より大きい分子量のマーカー分子をすべて合計したマーカー分子数に基づいて電気泳動状態を経時追跡し、
各マーカー分子の分子量に対する移動度の一次関数で表される検量線を演算し、該検量線の傾きが設定値以上に到達した時に、電気泳動を自動停止させる、
ことを特徴とする電気泳動システム。 - 請求項2ないし請求項5のいずれかに記載の電気泳動システムにおいて、
前記電気泳動の泳動状態の基準となるサイズマーカーに含まれる分子量の異なる複数のマーカー分子のうちの、前記検体試料の生体高分子の推定分子量に近似する、該推定分子量より大きい分子量のマーカー分子と、該推定分子量より小さい分子量のマーカー分子との、2つのマーカー分子が、前記画像撮影手段により識別可能となる時に、電気泳動を自動停止させる、
ことを特徴とする電気泳動システム。 - 請求項2、請求項3、請求項5または請求項6に記載の電気泳動システムにおいて、
前記電気泳動の泳動状態の基準となるサイズマーカーに含まれる分子量の異なる複数のマーカー分子の分離状態が、前記検体試料の生体高分子の推定分子量に近似する大きい分子量側のマーカー分子と、小さい分子量側のマーカー分子とで明瞭に分離していない場合において、前記電気泳動の泳動状態の基準となるサイズマーカーに含まれる移動度の異なる複数のマーカー分子のうちの最低分子量のマーカー分子の移動度が、電気泳動の支持体において80〜90%泳動したとき、電気泳動を自動停止させる、
ことを特徴とする電気泳動システム。 - 請求項2、請求項3、請求項5、請求項6または請求項7に記載の電気泳動システムにおいて、
核酸を電気泳動する場合にあって、電気泳動の泳動状態の基準となる移動度の異なる複数のマーカー分子を含むサイズマーカーが、λファージDNAのHindIIIによる消化断片、φX174ファージDNAのHaeIIIによる消化断片、100塩基対DNAラダー、1キロ塩基対DNAラダーなどの分子量既知のマーカー分子の混合物よりなるサイズマーカーである、
ことを特徴とする電気泳動システム。 - 請求項2、請求項3、請求項5、請求項6または請求項7に記載の電気泳動システムにおいて、
タンパク質を電気泳動する場合にあって、前記電気泳動の泳動状態の基準となる移動度の異なる複数のマーカー分子を含むサイズマーカーが、ミオシン、β−ガラクトシダーゼ、フォスホリラーゼ、血清アルブミン、オボアルブミン、ミオグロビンなどの分子量既知のタンパク質分子の混合物よりなるサイズマーカーである、
ことを特徴とする電気泳動システム。
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JPS62148848A (ja) * | 1985-12-23 | 1987-07-02 | Kureha Chem Ind Co Ltd | 高精度細胞電気泳動度測定方法及びその装置 |
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