JP2006306821A - 細胞・組織の凍結障害防止液及び凍結保存法 - Google Patents
細胞・組織の凍結障害防止液及び凍結保存法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2006306821A JP2006306821A JP2005134670A JP2005134670A JP2006306821A JP 2006306821 A JP2006306821 A JP 2006306821A JP 2005134670 A JP2005134670 A JP 2005134670A JP 2005134670 A JP2005134670 A JP 2005134670A JP 2006306821 A JP2006306821 A JP 2006306821A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- freezing
- transplantation
- cell
- cryopreservation
- thawing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000007710 freezing Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 230000008014 freezing Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 230000006378 damage Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 title claims abstract 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 title claims abstract 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 title claims description 3
- WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N (-)-Epigallocatechin-3-o-gallate Chemical compound O([C@@H]1CC2=C(O)C=C(C=C2O[C@@H]1C=1C=C(O)C(O)=C(O)C=1)O)C(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-WIYYLYMNSA-N 0.000 claims abstract description 31
- WMBWREPUVVBILR-UHFFFAOYSA-N GCG Natural products C=1C(O)=C(O)C(O)=CC=1C1OC2=CC(O)=CC(O)=C2CC1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 WMBWREPUVVBILR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 29
- 229940030275 epigallocatechin gallate Drugs 0.000 claims abstract description 28
- 238000010257 thawing Methods 0.000 claims abstract description 20
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 16
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 claims description 20
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 19
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 9
- 210000003709 heart valve Anatomy 0.000 claims description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 3
- 210000001691 amnion Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 claims description 3
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 2
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 claims 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 abstract description 7
- 235000009569 green tea Nutrition 0.000 abstract description 7
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 7
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 abstract description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 abstract description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 abstract 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 19
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 5
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 4
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001765 catechin Chemical class 0.000 description 2
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 238000007446 glucose tolerance test Methods 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 230000009878 intermolecular interaction Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
【解決手段】緑茶ポリフェノールの主成分であるエピガロカテキンガレートを凍結保存前の膵島細胞に付着させる。具体的には、エピガロカテキンガレート(EGCg)を、例えば30〜120ppm(μg/ml)添加した通常の細胞培養用培地(例えば10%ウシ胎児血清含有CMRL培地)で凍結前に膵島細胞を培養する。
Description
ブタの膵臓から膵島を分離し、分離された膵島細胞を以下の4群に分けた。EGCgとしては、純度約98重量%のもの(Roche社)を用いた。
グループ1:EGCg無添加培地で培養(従来法)
グループ2:EGCg 30μg/ml添加培地で培養
グループ3:EGCg 60μg/ml添加培地で培養
グループ4:EGCg 120μg/ml添加培地で培養
各群とも培地は、10%ウシ胎児血清含有CMRL細胞培養用培地に、凍結防御剤としてDMSOを10%となるように添加したものを使用し、その後プログラムフリーザーを用いて凍結した。最終的に液体窒素中(-196℃)に保存し、4週間後に急速解凍した。そして、解凍直後、及び、解凍後に48時間培養した後の膵島細胞の生存率(生存率=凍結解凍後の膵島数 / 凍結前の膵島数)を比較検討した。また、解凍直後のバイアビリティー及び膵島機能を比較検討した。
解凍直後の膵島細胞の生存率は、従来法(グループ1)では約50%と低かったが、EGCg添加群(グループ2〜4)では60〜80%と著明な改善が認められた(図1)。また48時間培養後でも生存率は従来法(グループ1)では約25%と低いのに対し、EGCg添加群(グループ2〜4)では45〜70%と有意に高かった(図1)。バイアビリティーにおいても従来法(グループ1)では約70%だったのに対し、EGCg添加群(グループ2〜4)では80〜85%と高かった(図2)。解凍直後の膵島機能をグルコース負荷試験によるインスリン分泌反応(Static Incubation)で検討したところ、EGCg添加群では無添加群に比べ良好な傾向にあった(図3)。
Claims (8)
- 移植用の生体組織を凍結保存前または凍結保存時に浸漬することにより、該生体組織が凍結保存時または解凍時に障害されるのを防止するための凍結障害防止液であって、細胞・組織培養用培地に、30〜120ppmのポリフェノールを添加したものであることを特徴とする移植用生体組織の凍結障害防止液。
- 前記ポリフェノールが純度90重量%以上のエピガロカテキンガレートである請求項1記載の凍結障害防止液。
- 請求項1または2記載の凍結障害防止液中に、凍結保存前または凍結保存時に浸漬したことを特徴とする凍結保存中または解凍後の移植用の生体組織。
- 膵島、血管、皮膚、軟骨その他の骨、神経、心臓弁その他の弁、または羊膜である請求項3記載の移植用の生体組織。
- 凍結保存前または凍結保存時に、10〜300ppmのポリフェノールを含む細胞・組織培養用培地に移植用の細胞または生体組織を浸漬することを特徴とする細胞または生体組織の凍結保存方法。
- ポリフェノールが純度90重量%以上のエピガロカテキンガレートである請求項5記載の凍結保存方法。
- 細胞が、人または動物の膵臓から単離した細胞である請求項5記載の凍結保存方法。
- 移植用の生体組織が、膵島、血管、皮膚、軟骨その他の骨、神経、心臓弁その他の弁、または羊膜である請求項5記載の凍結保存方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2005134670A JP4931035B2 (ja) | 2005-05-02 | 2005-05-02 | 細胞・組織の凍結障害防止液及び凍結保存法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2005134670A JP4931035B2 (ja) | 2005-05-02 | 2005-05-02 | 細胞・組織の凍結障害防止液及び凍結保存法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2006306821A true JP2006306821A (ja) | 2006-11-09 |
JP4931035B2 JP4931035B2 (ja) | 2012-05-16 |
Family
ID=37474118
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2005134670A Expired - Fee Related JP4931035B2 (ja) | 2005-05-02 | 2005-05-02 | 細胞・組織の凍結障害防止液及び凍結保存法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP4931035B2 (ja) |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006335695A (ja) * | 2005-06-02 | 2006-12-14 | Japan Science & Technology Agency | 内膜肥厚抑制剤 |
JP2010534691A (ja) * | 2007-07-30 | 2010-11-11 | ラルフ ローゼル | 細胞および/または組織の保護のための物質 |
JP2010273549A (ja) * | 2009-05-26 | 2010-12-09 | Kyoto Univ | 多能性幹細胞用の凍結保存液と多能性幹細胞の凍結保存方法 |
WO2011108635A1 (ja) * | 2010-03-04 | 2011-09-09 | 国立大学法人北海道大学 | 過冷却促進剤 |
JP2014214158A (ja) * | 2013-04-22 | 2014-11-17 | 宇部興産株式会社 | 波長変換部材及びそれを用いた発光装置 |
JP2015142559A (ja) * | 2013-12-27 | 2015-08-06 | ゼノアックリソース株式会社 | 臍帯組織の凍結保存方法 |
CN105462922A (zh) * | 2015-12-31 | 2016-04-06 | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 | 一种增加免疫细胞得率的方法 |
WO2019026910A1 (ja) * | 2017-07-31 | 2019-02-07 | 株式会社ツーセル | 凍結保存用組成物、凍結保存物の製造方法、細胞製剤、細胞製剤の製造方法、凍結保存用キット |
US10765110B2 (en) | 2014-11-11 | 2020-09-08 | Yasuhiko Tabata | Agent for preserving biological component |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH021952A (ja) * | 1988-06-10 | 1990-01-08 | Toshiba Corp | スタンダードセル方式の半導体集積回路 |
JP2003267801A (ja) * | 2002-03-12 | 2003-09-25 | Pharmafoods Kenkyusho:Kk | 保存剤用組成物及び該組成物を含有する動物の細胞または臓器の保存剤 |
JP2007519712A (ja) * | 2004-02-02 | 2007-07-19 | アイ.エム.ティー.・インターフェース・マルティグラッド・テクノロジー・リミテッド | 生物学的材料ならびに生物学的材料の保存のための方法および溶液 |
-
2005
- 2005-05-02 JP JP2005134670A patent/JP4931035B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH021952A (ja) * | 1988-06-10 | 1990-01-08 | Toshiba Corp | スタンダードセル方式の半導体集積回路 |
JP2003267801A (ja) * | 2002-03-12 | 2003-09-25 | Pharmafoods Kenkyusho:Kk | 保存剤用組成物及び該組成物を含有する動物の細胞または臓器の保存剤 |
JP2007519712A (ja) * | 2004-02-02 | 2007-07-19 | アイ.エム.ティー.・インターフェース・マルティグラッド・テクノロジー・リミテッド | 生物学的材料ならびに生物学的材料の保存のための方法および溶液 |
Cited By (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006335695A (ja) * | 2005-06-02 | 2006-12-14 | Japan Science & Technology Agency | 内膜肥厚抑制剤 |
JP2010534691A (ja) * | 2007-07-30 | 2010-11-11 | ラルフ ローゼル | 細胞および/または組織の保護のための物質 |
JP2010273549A (ja) * | 2009-05-26 | 2010-12-09 | Kyoto Univ | 多能性幹細胞用の凍結保存液と多能性幹細胞の凍結保存方法 |
JP5847699B2 (ja) * | 2010-03-04 | 2016-01-27 | 国立大学法人北海道大学 | 過冷却促進剤 |
WO2011108635A1 (ja) * | 2010-03-04 | 2011-09-09 | 国立大学法人北海道大学 | 過冷却促進剤 |
JPWO2011108635A1 (ja) * | 2010-03-04 | 2013-06-27 | 国立大学法人北海道大学 | 過冷却促進剤 |
JP2015212376A (ja) * | 2010-03-04 | 2015-11-26 | 国立大学法人北海道大学 | タンニンを含有する不凍性液体及びガラス化液 |
JP2014214158A (ja) * | 2013-04-22 | 2014-11-17 | 宇部興産株式会社 | 波長変換部材及びそれを用いた発光装置 |
JP2015142559A (ja) * | 2013-12-27 | 2015-08-06 | ゼノアックリソース株式会社 | 臍帯組織の凍結保存方法 |
JP2019131573A (ja) * | 2013-12-27 | 2019-08-08 | ゼノアックリソース株式会社 | 臍帯組織の凍結保存方法 |
US10765110B2 (en) | 2014-11-11 | 2020-09-08 | Yasuhiko Tabata | Agent for preserving biological component |
CN105462922A (zh) * | 2015-12-31 | 2016-04-06 | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 | 一种增加免疫细胞得率的方法 |
WO2019026910A1 (ja) * | 2017-07-31 | 2019-02-07 | 株式会社ツーセル | 凍結保存用組成物、凍結保存物の製造方法、細胞製剤、細胞製剤の製造方法、凍結保存用キット |
JPWO2019026910A1 (ja) * | 2017-07-31 | 2020-07-27 | 株式会社ツーセル | 凍結保存用組成物、凍結保存物の製造方法、細胞製剤、細胞製剤の製造方法、凍結保存用キット |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP4931035B2 (ja) | 2012-05-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4931035B2 (ja) | 細胞・組織の凍結障害防止液及び凍結保存法 | |
JP5230042B2 (ja) | 動物の細胞または臓器の保存剤およびその保存方法。 | |
CN108207930B (zh) | 一种鸡尾酒式冷冻保护剂及其应用 | |
Schlegel et al. | Role of hypothermic machine perfusion in liver transplantation | |
Seo et al. | Cryopreservation of amniotic fluid-derived stem cells using natural cryoprotectants and low concentrations of dimethylsulfoxide | |
CN109769797B (zh) | 一种器官保存液 | |
JP4947948B2 (ja) | 細胞保存液 | |
CA2591759C (en) | Method of separating pancreatic islet | |
KR20080087148A (ko) | 저온보호 조성물 및 그 이용방법 | |
JP2012116823A (ja) | 生体組織保存溶液及びそれを用いる方法 | |
CN112400863A (zh) | 一种临床用nk细胞冻存液及冻存方法 | |
CN108902128A (zh) | 一种低温下动物组织和细胞的保存溶液及其使用方法 | |
JP2011109987A (ja) | 血液細胞の凍結保存剤 | |
CN111011363A (zh) | 间充质干细胞冻存液、冻存方法、保存试剂盒和复苏方法 | |
CN105994253A (zh) | 一种免疫细胞冻存液 | |
Han et al. | Long-term preservation of human saphenous vein by green tea polyphenol under physiological conditions | |
JP2003267801A (ja) | 保存剤用組成物及び該組成物を含有する動物の細胞または臓器の保存剤 | |
EP3685665B1 (en) | Use of a solution comprising peg for the preservation of stem cells | |
JP6027300B2 (ja) | 細胞または臓器の保存液および保存方法 | |
CN113854280A (zh) | 一种新型的低温保存液及其制备方法和应用 | |
CN108338160A (zh) | 一种毛囊保存液及其制备方法 | |
Hyon | A non-frozen living tissue bank for allotransplantation using green tea polyphenols | |
CN110547286B (zh) | 复合冻存液及其制备方法和应用 | |
US20230056314A1 (en) | Cytoprotective compositions for short-term cells storage and transportation without cryopreservation and deep freezing | |
Finger | Organ preservation |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20080416 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20110706 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110712 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110908 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20111108 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20111110 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20120110 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20120112 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20120113 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20120209 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4931035 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150224 Year of fee payment: 3 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150224 Year of fee payment: 3 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150224 Year of fee payment: 3 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |