JP2006241036A - 抗老化化粧料 - Google Patents
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Abstract
【課題】 加齢皮膚のシワやはり、弾力保持作用に相乗効果を発揮し、うるおいのある若々しい肌を維持するのに有用な抗老化化粧料を提供する。
【解決手段】
(1)下記の(A)〜(D)を含有することを特徴とする抗老化化粧料。
(A)コラーゲン産生促進剤であるクロレラ抽出物
(B)エストロゲン様作用剤
(C)活性酸素消去剤
(D)抗炎症剤
(2)前記(B)のエストロゲン様作用剤として、特にダイズ抽出物、カッコン抽出物、プエラリア・ミリィフィカ抽出物、レッドクローバー抽出物から選ばれる1種以上を用い、(C)の活性酸素消去剤として、特にワレモコウ抽出物、茶抽出物、ボタンピ抽出物、オリーブ葉抽出物から選ばれる1種以上を用い、(D)の抗炎症剤として、特にヒアルロニダーゼ阻害能を有するドクダミ抽出物、アルテア抽出物、アロエベラ抽出物から選ばれる1種以上を用いる抗老化化粧料。
【選択図】 なし
Description
請求項1: 下記の(A)〜(D)を含有することを特徴とする抗老化化粧料。
(A)コラーゲン産生促進剤であるクロレラ抽出物
(B)エストロゲン様作用剤
(C)活性酸素消去剤
(D)抗炎症剤
請求項2: エストロゲン様作用剤が、ダイズ抽出物、カッコン抽出物、プエラリア・ミリィフィカ抽出物、レッドクローバー抽出物から選ばれる1種以上からなる請求項1記載の抗老化化粧料。
請求項3: 活性酸素消去剤が、ワレモコウ抽出物、茶抽出物、ボタンピ抽出物、オリーブ葉抽出物から選ばれる1種以上からなる請求項1の抗老化化粧料。
請求項4: 抗炎症剤が、ヒアルロニダーゼ阻害能を有するドクダミ抽出物、アルテア抽出物、アロエベラ抽出物から選ばれる1種以上からなる請求項1の抗老化化粧料。
以下、本発明について詳細に説明する。
(製造例1)クロレラ抽出物の製造
クロレラ100gに精製水3000gを加え、70℃にて5時間抽出し、冷後、ろ過する。ろ液を減圧下、1000gまで濃縮する。濃縮液に活性炭を加え、50℃にて、脱色脱臭する。ろ過後、ろ液に30%1,3−ブチレングリコール1000gを加え、更にろ過し、クロレラ抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、2.8%であった。
ダイズ100gに精製水1000gを加え、1昼夜静置した後、さらに精製水2000gを加え、80℃にて8時間抽出し、冷後、ろ過する。ろ液を減圧下、100gまで濃縮する。濃縮液を合成吸着体ダイヤイオンHP−20を充填したカラムに通液する。30vol%エタノール溶液にて洗浄後、50vol%エタノール溶液にて溶出し、溶出液を減圧乾固し、50%1,3−ブチレングリコール溶液100gを加えて溶解した後、ろ過してダイズ抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、0.56%であった。
カッコン100gに無水エタノール2000mLを加え、室温で5日間抽出する。これをろ過し、ろ液を減圧下濃縮乾固した後、50vol%エタノール溶液200mLに溶解する。溶解液を合成吸着体ダイヤイオンHP−20を充填し、50vol%エタノールで平衡にしたカラムに通液する。50vol%エタノール溶液にて洗浄後、70vol%エタノール溶液にて溶出し、溶出液を減圧乾固し、50%1,3−ブチレングリコール溶液300gを加えて溶解した後、ろ過してカッコン抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、1.53%であった。
プエラリア・ミリィフィカ100gに30vol%エタノール溶液2000gを加え、室温にて3日間抽出する。これをろ過し、ろ液を減圧下、200gまで濃縮する。濃縮液を合成吸着体ダイヤイオンHP−20を充填したカラムに通液する。30vol%エタノール溶液にて洗浄後、70vol%エタノール溶液にて溶出し、溶出液を減圧乾固し、乾固物を50%1,3−ブチレングリコール300gに溶解した後、ろ過してプエラリア・ミリィフィカ抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、1.31%であった。
レッドクローバー100gに30vol%エタノール溶液2000gを加え、50℃にて8時間抽出する。これをろ過し、ろ液を減圧下、濃縮乾固する。乾固物を50%1,3−ブチレングリコール200gに溶解した後、ろ過してレッドクローバー抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、1.84%であった。
ワレモコウ100gに50vol%エタノール溶液1000gを加え、室温にて3日間抽出する。これをろ過し、ろ液を減圧下、濃縮乾固する。乾固物を30%1,3−ブチレングリコール1000gに溶解した後、ろ過してワレモコウ抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、1.74%であった。
ボタンピ100gに50%エタノール溶液2000gを加え、室温にて3日間抽出する。これをろ過し、ろ液を減圧下、濃縮乾固する。乾固物を30%1,3−ブチレングリコール1000gに溶解した後、ろ過してボタンピ抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、1.13%であった。
オリーブ葉100gに50vol%エタノール溶液2000gを加え、50℃にて8時間抽出する。これをろ過し、ろ液を減圧下、濃縮乾固する。乾固物を30%1,3−ブチレングリコール1000gに溶解した後、ろ過してオリーブ葉抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、1.52%であった。
緑茶100gに50vol%エタノール2000gを加え、室温にて3日間抽出後、これをろ過する。ろ液を減圧下、濃縮乾固する。乾固物を30%1,3−ブチレングリコール1000gに溶解した後ろ過して茶葉抽出物を得る。製品の蒸発残留物は、1.95%であった。
ドクダミ100gに水3000gを加え、70℃にて8時間抽出する。これをろ過し、ろ液に活性炭を加え、50℃にて処理する。ろ過後、ろ液を減圧下、濃縮乾固する。乾固物を30%1,3−ブチレングリコール1000gに溶解した後、ろ過してドクダミ抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、1.38%であった。
アルテア100gに水2000gを加え、70℃にて8時間抽出する。これをろ過し、ろ液に活性炭を加え、50℃にて処理する。ろ過後、ろ液を減圧下、濃縮乾固する。乾固物を30%1,3−ブチレングリコール1000gに溶解した後、ろ過してアルテア抽出物を製する。製品の蒸発残留物は、1.75%であった。
アロエベラの生の葉肉を圧搾して得られる液汁に活性炭を加え、アロインを吸着除去した後、減圧下濃縮する。濃縮液にイソプロピルアルコールを加え、アロエベラ多糖類を凝集させる。凝集物をろ取し、乾燥してアロエベラ多糖類粉末を得る。アロエベラ多糖類粉末を30%1,3−ブチレングリコールに0.5%溶解し、アロエベラ抽出物を製する。
(参考試験1)コラーゲン産生促進作用の評価
クロレラ抽出物のコラーゲン産生促進作用の試験には、製造例1で示した活性炭処理後の状態を凍結乾燥したものをPBS(−)にて0.01%溶液としたものを試験試料とした。正常ヒト皮膚線維芽細胞を0.5%FBS含有MEMを用いて、96穴プレートに2.0×104cells/wellになるように播種し、24時間培養後、PBS(−)にて洗浄後、試料を添加した無血清培地に交換し、48時間培養する。培養後、培養上清中に含まれるI型コラーゲンをELISA法にて定量した。100μLの培養上清をELISA用プレートに添加し、18時間室温に保管した。0.05%Tween−20を含むPBS(PBS−T)で洗浄後、1%スキムミルク/PBS−Tで2時間ブロッキングした。抗ヒトI型コラーゲン抗体、ペルオキシダーゼ標準抗ラットIgG抗体で処理し、ペルオキシダーゼ用発色キットを用いて発色させた。450nmの吸光度から培養上清中に含まれるI型コラーゲン量を求め、単位蛋白当たりとして算出した。蛋白定量は、Lowry法を用いた。コントロールのI型コラーゲン量を100とした相対値として評価した。結果は、152.3%であった。
エストロゲン様作用の測定は、抽出物についてエストロゲン様作用活性をエストロゲン依存性細胞の増殖に対する影響を調べる方法(In vitro cell.Dev.Biol.28A,595−602,1992)で測定した。ヒト乳がん細胞由来のMCF−7細胞を5%FBS(チャコール・デキストラン処理)、1mMピルビン酸ナトリウムを含有するEagles MEM(フェノールレッド除去)を用いて、5×104 cell/mLの密度で浮遊させた細胞懸濁液0.1mLを96穴マイクロカルチャープレートに播種し、37℃、5%CO2下で24時間培養した。その後各濃度の試料をカルチャープレートに添加し、6日間培養を行なった。培養後MTT還元法にて細胞濃度の測定を行い、エストロゲン様作用とした。本発明で使用するダイズ抽出物、カッコン抽出物、プエラリア・ミリィフィカ抽出物、レッドクローバー抽出物には、高いエストロゲン様作用が確認された。
活性酸素消去能の測定は、製造例5〜8の抽出物を用いて、SOD様活性及びDPPHラジカル消去能を測定した。SOD様活性は、NBT法(XOD系と組み合わせたBeauchampsらの方法 Anal.Bioche.,44、279〜287、1971)に従った。DPPHラジカル(ジフェニルピクリルヒドラジルラジカル)消去能の測定は、DPPHラジカル(Sigma社)をエタノールに溶解し0.1mM溶液とし、0.1mMDPPHラジカル溶液3mLを試験管にとり、各濃度に精製水にて希釈した試験溶液0.5mLを加え、室温で10分間放置後、波長517nmで吸光度を測定する方法で行った。試験結果を表2に示す。
ヒアルロニダーゼは、結合組織に分布するヒアルロン酸の加水分解酵素であり、炎症時において活性化され、結合組織のマトリックスを破壊し、炎症系の細胞及び血管の透過性を高める役割を演じると考えられている。また起炎酵素として知られており、抗炎症剤や抗アレルギー剤により阻害されることも知られている。従って、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用は、抗アレルギー活性の一つとされている。陽性対照として、阻害活性が既に知られているクロモグリク酸ナトリウム(藤沢薬品工業製)を試験に用いた。試験方法は、Morgan-Elson法を応用する方法にて行なった。試料の適当量を0.1M酢酸緩衝液(pH3.5に調製)にて希釈した溶液0.2mLにヒアルロニダーゼ(Sigma社製,TypeIV-S,最終酵素活性を400Nfunit/mL)0.1mLを加え、37℃にて20分間で放置後、活性化剤としてcompound48/80(Sigma社製)の酢酸緩衝液溶液(0.1mg/mL)0.2mLを加え、更に37℃にて20分間放置する。これにヒアルロン酸カリウム(和光純薬工業製)溶液(最終濃度0.4mg/mL)0.5mLを加え、37℃にて40分間放置する。次に、氷上にて0.4N水酸化ナトリウム溶液0.2mLを加えて反応を停止させた後、ホウ酸溶液(ホウ酸4.95gに水50mLを加え、1N水酸化ナトリウム溶液にてpH9.1に調製した後、水を加えて100mLとする)0.2mLを加え、混和後沸騰水浴中にて3分間加熱し酵素を失活させる。次に氷上にて室温まで冷却し、p−ジメチルアミノベンズアルデヒド試薬(和光純薬工業製、10gに10N塩酸溶液12.5mL、酢酸87.5mLを混合溶解し、使用直前に酢酸にて10倍に希釈する)6mLを加え、37℃にて20分間放置した後、585nmにて吸光度を測定する。なお、試料溶液の代わりに酢酸緩衝液を入れたものを対照とし、各資料溶液、対照について酵素を入れないものをブランクとし、次式により阻害活性率を求め、試料濃度を調整することにより50%阻害活性濃度(IC50)を求めた。
阻害率(%)=〔1−(試料溶液の吸光度−試料溶液ブランクの吸光度)/(対照溶液の吸光度−対照溶液ブランクの吸光度)〕×100
本発明にて使用するドクダミ抽出物、アルテア抽出物、アロエベラ抽出物には、高いヒアルロニダーゼ活性阻害作用が確認された。
(実施例1〜2)
以下に示す処方に従って、化粧水を作成した。即ち、処方成分を室温で攪拌し、可溶化して化粧水を得た。
(成分) (重量%)
(1)1,3−ブチレングリコール 6.0%
(2)グリセリン 5.0%
(3)必須成分又は比較成分(表2) 5.0%
(4)ペンチレングリコール 3.0%
(5)フェノキシエタノール 0.5%
(6)精製水 残余
茶色モルモット(30週齢)を用いた光老化モデルを用いて、実施例1、2及び比較例1〜7の化粧水を検体として、くすみ改善を試験した。茶色モルモット1群5匹の背部を剃毛し、これに0.5×MED(最小紅斑濃度)の紫外線を5日間照射してくすみモデルを作成した。モルモットの背部2cm×2cmの塗布部位を設け、検体0.01mL/回/日、これを8週間塗布した。対照例として、実施例化粧水の必須成分を精製水に置換したものを用いた。光老化改善効果は、最後の塗布の24時間後に対照群の平均のくすみ具合と比較して、++:著しく改善、+:明らかに改善、±:わずかに改善、−:改善せずの基準で各モルモット毎に判定した。結果を表2に示す。これにより、本発明の抗老化用化粧料である実施例1及び2の化粧水は、比較例の化粧水に比べ、光老化改善効果に優れていることがわかる。
皮膚の抗老化効果を調べるために、上記実施例1,2及び比較例2で用いた抽出物を配合したクリームを用いて、以下の方法により、しわに対する改善効果と、肌のはり、たるみに対する改善効果について評価試験を行った。
下記成分(1)〜(10)、別に下記成分(11)〜(15)を75℃に加温溶解しそれぞれA液及びB液とする。A液にB液を加えて乳化し、クリームを調製した。
(成分) (重量%)
(1)ホホバ油 3.0%
(2)スクワラン 2.0%
(3)メチルポリシロキサン 0.5%
(4)ステアリルアルコール 0.5%
(5)セチルアルコール 0.5%
(6)トリ(カプリル・カプリン酸)グリセリル 12.5%
(7)モノステアリン酸グリセリル 5.0%
(8)モノステアリン酸ジグリセリル 1.5%
(9)モノステアリン酸デカグリセリル 3.0%
(10)防腐剤 適量
(11)キサンタンガム 0.1%
(12)必須成分又は比較成分 4.0%
(13)1,3−ブチレングリコール 5.0%
(14)防腐剤 適量
(15)精製水 残余
目尻のしわの状態を視覚評価した。
(判定基準)
著効 :しわがほとんどめだたなくなった。
有効 :しわがかなり目立たなくなった。
やや有効:しわが以前より目立たなくなった。
効果なし:変化なし。
「肌のはり、たるみに対する改善効果」
肌のはり、たるみを視覚評価した。
(判定基準)
著効 :使用前に比べ肌に非常にはりがあり、たるみがない。
有効 :使用前に比べ肌にややはりがあり、たるみがない。
やや有効:使用前に比べ肌にややはりがあり、たるみが減少した。
効果なし:変化なし。
試験の結果を表3に示す。
下記成分(8)〜(10)を混合溶解させA液とし、これとは別に下記成分(1)〜(7)及び(11)を混合溶解させてB液とし、A液とB液を均等に混合し、化粧水を調整した。
(成分) (重量%)
(1)クインスシードエキス 8.0%
(2)グリセリン 3.0%
(3)1,3−ブチレングリコール 5.0%
(4)クロレラ抽出物(製造例1) 2.0%
(5)カッコン抽出物(製造例3) 1.0%
(6)ボタンピ抽出物(製造例7) 1.0%
(7)アロエベラ抽出物(製造例12) 1.0%
(8)ポリオキシエチレンソルビタンラウリン酸エステル 1.2%
(9)エチルアルコール 5.0%
(10) 防腐剤 適量
(11)精製水 残余
下記成分(1)〜(10)、別に(11)〜(15)及び(17)を75℃で加熱溶解させてそれぞれA液及びB液とし、A液にB液を加えて乳化し、攪拌しながら50℃まで冷却し、成分(16)を加え、乳液を調製した。
(成分) (重量%)
(1)ホホバ油 1.0%
(2)スクワラン 2.0%
(3)ベヘニルアルコール 1.0%
(4)トリ(カプリル・カプリン酸)グリセリル 2.0%
(5)テトラグリセリン縮合シリノレイン酸 0.1%
(6)モノオレイン酸プロピレングリコール 0.5%
(7)モノステアリン酸グリセリン 1.0%
(8)モノミレスチン酸ヘキサグリセリル 1.0%
(9)モノミリスチン酸デカグリセリル 0.5%
(10)防腐剤 適量
(11)クロレラ抽出物(製造例1) 3.0%
(12)ダイズ抽出物(製造例2) 2.0%
(13)オリーブ葉抽出物(製造例8) 2.0%
(14)ドクダミ抽出物(製造例10) 1.0%
(15)1,3−ブチレングリコール 3.0%
(16)香料 0.1%
(17)精製水 残余
石けん製造の定法により下記成分を混合し製した。
(成分) (重量%)
(1)石けん素地 53.2%
(2)スクロール 19.4%
(3)ホホバ油 0.25%
(4)クロレラ抽出物(製造例1) 2.5%
(5)カッコン抽出物(製造例3) 2.0%
(6)ワレモコウ抽出物(製造例6) 2.0%
(7)アルテア抽出物(製造例11) 1.0%
(8)濃グリセリン 6.5%
(9)ヒドロキシエタンジホスホン酸 0.15%
(10)常水 残余
下記成分(1)〜(3)、別に(4)〜(7)及び(9)を70℃に加熱溶解させてそれぞれA液及びB液とし、A液にB液を加えて均一になるまで攪拌する。攪拌しながら50℃まで冷却し、成分(8)を加えてクレンジングジェルを製した。
(成分) (重量%)
(1)モノミリスチン酸ヘキサグリセリル 20.0%
(2)流動パラフィン 58.8%
(3)防腐剤 適量
(4)クロレラ抽出物(製造例1) 1.0%
(5)カッコン抽出物(製造例3) 0.5%
(6)オリーブ葉抽出物(製造例8) 0.5%
(7)アロエベラ抽出物(製造例12) 0.5%
(8)濃グリセリン 5.9%
(9)ソルビトール 5.0%
(10)香料 適量
(11)精製水 残余
Claims (4)
- 下記の(A)〜(D)を含有することを特徴とする抗老化化粧料。
(A)コラーゲン産生促進剤であるクロレラ抽出物
(B)エストロゲン様作用剤
(C)活性酸素消去剤
(D)抗炎症剤 - エストロゲン様作用剤が、ダイズ抽出物、カッコン抽出物、プエラリア・ミリィフィカ抽出物、レッドクローバー抽出物から選ばれる1種以上からなる請求項1記載の抗老化化粧料。
- 活性酸素消去剤が、ワレモコウ抽出物、茶抽出物、ボタンピ抽出物、オリーブ葉抽出物から選ばれる1種以上からなる請求項1の抗老化化粧料。
- 抗炎症剤が、ヒアルロニダーゼ阻害能を有するドクダミ抽出物、アルテア抽出物、アロエベラ抽出物から選ばれる1種以上からなる請求項1の抗老化化粧料。
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