JP2006183006A - 抗酸化剤 - Google Patents

Abstract

【課題】
ＣｏＱ１０の抗酸化活性を効果的に利用できる抗酸化剤の提供およびこれを含有せしめた化粧品または食品の提供。
【解決手段】
ＣｏＱ１０およびγＣＤの複合体とすることでＣｏＱ１０の抗酸化活性を効果的にすることができ、これを含有せしめたことで、高い抗酸化活性を有する化粧品および食品を提供できる。

Description

本発明は補酵素Ｑ１０（以下、ＣｏＱ１０と示す。）およびγシクロデキストリン（以下、γＣＤと示す）の複合体を有効成分とする抗酸化剤に関する。さらに、この抗酸化剤を含有せしめた化粧品および食品に関する。

ＣｏＱ１０は、ミトコンドリアの電子伝達の際にＡＴＰの生産に関わる重要な内細胞性成分であり、細胞の呼吸鎖を改善し、ミトコンドリア膜を強化する。また、生体中のエネルギー放出の改善や、抗酸化活性を有しフリーラジカル捕捉剤として作用することが知られている。
ＣｏＱ１０はその性質や作用により、心臓疾患や変性性疾患等の治療、老化の防止等に有効とされ、医薬製剤、化粧品、食品等に利用されている。さらに近年、ＣｏＱ１０がビタミンＥの抗酸化作用の維持に不可欠であることが確認され、ビタミンＥの抗酸化作用を維持し、適量以上のＣｏＱ１０が摂取できる抗酸化活性の高い加工食品（例えば、特許文献１参照）等も開発されている。

しかし、ＣｏＱ１０は脂溶性物質のため水への溶解度が極めて低く、光分解性があり、空気中においても安定性が低いため、食品等への製造にあたり取り扱いが難しかった。さらに、摂取による吸収率が低いという問題があり、十分な効果が得られなかった。そこで、ＣｏＱ１０の抗酸化活性をより効果的に利用できる抗酸化剤やこれを含有せしめた化粧品、食品等の開発が望まれていた。
特開２００３−２８９８２８号公報

本発明は、ＣｏＱ１０の抗酸化活性を効果的に利用できる抗酸化剤の提供を課題とする。さらに、これを含有せしめた化粧品および食品の提供を課題とする。

本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、ＣｏＱ１０およびγＣＤの複合体が、ＣｏＱ１０の効果的な抗酸化活性を有することを見出した。さらに、この抗酸化剤を含有せしめたことで、高い抗酸化活性を有する化粧品および食品を提供できることを見出し、本発明を完成するに至った。

γＣＤは、ブドウ糖からなる環状のオリゴ糖であり、天然に存在する物質である。γＣＤは、その内部が疎水性で、外部が親水性の構造を有することから、内部に親油性物質のＣｏＱ１０を安定に含有せしめることができ、さらに、外部の親水性により、水への溶解度が高めることができる。
また、γＣＤは、食品添加物合同専門家会議（ＪＥＣＦＡ）によって、１日許容摂取量（ＡＤＩ）を特定する必要のない安全性の高い物質と認定されており、ＣｏＱ１０も厚生労働省医薬局において食品と認められているため、本発明のＣｏＱ１０およびγＣＤの複合体を有効成分とする抗酸化剤は人体に対し、安全な物質であり、化粧品および食品に利用できる。

すなわち、本発明は次の（１）〜（３）のいずれかの抗酸化剤およびそれを用いた化粧品または食品に関する。
（１）補酵素Ｑ１０（ＣｏＱ１０）およびγシクロデキストリン（γＣＤ）の複合体を有効成分とする抗酸化剤。
（２）上記（１）に記載の抗酸化剤を含有せしめた化粧品。
（３）上記（１）に記載の抗酸化剤を含有せしめた食品。

本発明の抗酸化剤は、効果的な抗酸化活性を有することから、食品、化粧品等に幅広く利用できる。また、水への溶解性が高くかつ安定であるため、取り扱いが容易であり、これらの製造を容易とする。

本発明の「抗酸化剤」とは、ＣｏＱ１０およびγＣＤの複合体を有効成分とする効果的な抗酸化活性を有する物質のことをいい、ＣｏＱ１０およびγＣＤ以外に必要に応じて他の成分を含有せしめることもできる。本発明の抗酸化剤は、その用途に応じ、粉末、顆粒、水溶液等の形態で用いることができる。
ＣｏＱ１０およびγＣＤの複合体とは、ＣｏＱ１０およびγＣＤの包接体のことをいい、例えば、ｗａｃｋｅｒ社等から市販されているＣｏＱ１０およびγＣＤの包接体を用いることもできる。

本発明の抗酸化剤を製造する場合には、ＣｏＱ１０およびγＣＤの複合体の調製として、噴霧乾燥、凍結乾燥法、飽和水溶液法、混錬法、混合粉砕法等の一般的な複合体の調製方法を用いることができる。
噴霧乾燥、凍結乾燥法とは、ＣＤの１０〜４０％水溶液を調製し、一定量のゲストを添加し、ホモジナイズ（回転数；１，０００〜３，０００r.p.m.、３０分〜５時間、室温）し、これによって得られた包接乳化液を次いで噴霧乾燥し、包接粉体を得る方法である。また、飽和水溶液法とは、ＣＤの飽和水溶液を作り、一定量のゲスト化合物を混合し、ＣＤの種類やゲスト化合物の種類に応じ３０分〜数時間攪拌混合することで、包摂物が沈殿を得て、続いて、水を蒸発させるか、温度を下げて沈殿物を取り出した後、乾燥することで、包摂体を単離する方法である。
混練法とは、ＣＤに水を少量加えてペースト状にして、一定量のゲストを添加してミキサー等でよく攪拌し、続いて水を蒸発させることで包摂体を単離する方法であり、混合時間は飽和水溶液法より長めとなる。そして混合粉砕法とは、ＣＤとゲスト化合物を振動ミルにより粉砕して得る方法である。

混練法または加熱方法については、Ｊｏｕｒｎａｌ Ａｃｔａ Ｐｏｌｏｎｉａｅ， Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ（１９９５）、Ｖｏｌ．５２，Ｎｏ５，Ｓ．３７９−３８６および（１９９６），Ｖｏｌ．５３，Ｎｏ３，Ｓ．１９３−１９６においてＣｏＱ１０と種々のＣＤおよびＣＤ誘導体との複合化が記載されている。また、特表２００３−５２０８２７号公報には、γＣＤとＣｏＱ１０との水性混合物を用いることで、さらに迅速かつ簡便にγＣＤ／ＣｏＱ１０複合体を得る方法が記載されている。
本発明においてＣｏＱ１０およびγＣＤの複合体を調製する場合には、生産規模において経済的な理由により、後者の方法を用いることがより好ましい。

後者の方法では、たとえば、濃縮された水性γＣＤ溶液にＣｏＱ１０を添加し、ホモジナイズし、乾燥等をすることにより製造することができる。この混合物は、好ましくは１０〜３０質量％のγＣＤ濃度を含有せしめ、特に１６〜２５質量％のγＣＤ濃度を含有せしめることが好ましい。ＣｏＱ１０とγＣＤとの質量比は、好ましくは１：3.5〜１：１００、特に好ましくは１：3.5〜１：８、殊に好ましくは１：１〜１：６である。

得られた複合体のうち、包接体が形成されているか否かは、溶液状態においては円二色性スペクトルやＮＭＲスペクトルを用い、固体状態においては熱分析ＤＳＣ、粉末Ｘ線等でＣＤ、ゲスト単独、物理的混合物と包接体を比較して確認することできる。

本発明の抗酸化剤は医薬品、食品、化粧品等に用いることができる。本発明の抗酸化剤を食品に用いる場合では、サプリメント、機能性食品、栄養ドリンク等に用いることができ、効果的な抗酸化活性を有する食品を製造することができる。また、化粧品に用いる場合では、化粧水、乳液、美容クリーム等に用いることができ、効果的な抗酸化活性を有する化粧品を製造することができる。

本発明の抗酸化剤を用い、サプリメントを製造する場合には、本発明の抗酸化剤をそのまま打錠成型することもできるが、さらに必要に応じて、例えば、デンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等の製剤に通常用いられている添加物を加えることができる。また、本発明の抗酸化剤は、水にも油脂にもなじむ粉末であるため、いずれの形態に加工することができ、粉末、顆粒、カプセル、チュアブル等の形態で用いることができる。
本発明の抗酸化剤をセルロース、グリセリン脂肪酸エステル、リン酸カルシウムなどの賦形剤と混合し、打錠することで錠剤にすることができ、これを充填することでハードカプセルにすることもできる。また、本発明の抗酸化剤を油脂、グリセリン脂肪酸エステルなどに練りこみ、充填することでソフトカプセルとすることもできる。

本発明の抗酸化剤を用い、化粧品を製造する場合には、本発明の抗酸化剤に加え、皮膚繊維芽細胞の増殖等の効果を有するレチノール等の美容成分や、ホホバ油、植物エキス等の保湿成分を必要に応じて配合することもできる。レチノールを配合する場合、市販のレチノールを用いることができるが、特に貯蔵安定性の高いレチノール−γＣＤ複合体（ＣＡＶＡＭＡＸ Ｗ８ Ｒｅｔｉｎｏｌ−Ｃｏｍｐｌｅｘ；ｗａｃｋｅｒ社製）を用いることが好ましい。
以下、本発明の詳細を実施例等で説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

抗酸化剤の調製
ＣｏＱ１０−γＣＤ複合体（ｗａｃｋｅｒ社製：ＣｏＱ１０含有率：１９．７％）を抗酸化剤として用いた。

［試験例１］
抗酸化剤の抗酸化活性
（１）試験溶液の調製
上記実施例１の抗酸化剤にジメチルホルムアミド（以下、ＤＭＦと示す。）を用い、ＣｏＱ１０濃度が１０、２０、５０、１００μＭとなるように試験溶液を調製した。また、対照としてＣｏＱ１０（日清ファルマ社製）にＤＭＦを用い、ＣｏＱ１０濃度が２０、５０、１００μＭとなるように対照試験溶液Ａを調製した。さらに、γＣＤ（ＣＡＶＡＭＡＸ Ｗ８ Ｆｏｏｄ；Ｗａｃｋｅｒ社製）にＤＭＦを用い、γＣＤ濃度が１．０ｍＭの対照試験溶液Ｂを調製した。

（２）抗酸化活性の測定
ＤＰＰＨラジカル（１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル）の消去活性試験により本発明の抗酸化剤における抗酸化活性を測定した。エタノールとＤＭＦが各々１ｍＬ入った試験管に上記（１）で調製した３種類の試験溶液をそれぞれ１ｍＬ加え、さらに２００μＭ ＤＰＰＨエタノール溶液を１ｍＬ加え、正確に３０分暗所で放置した後、５１７ｎｍの吸光度を測定した。コントロールとして試料の代わりにＤＭＦを用い、ブランクにはＤＰＰＨ溶液の代わりにエタノールを用いた。試料に含まれるＤＰＰＨの最終濃度は５０μＭ、エタノールの最終濃度は５０％となった。下記の式を用い、得られた吸光度よりラジカル消去活性を求めた。

（３）結果
試験溶液および対照試験溶液ＡのＣｏＱ１０含有濃度ごとにおけるラジカル消去活性を図１に示した。図１において、本発明の抗酸化剤は、ＣｏＱ１０のみを用いた場合と比較して、ＣｏＱ１０の含有濃度が同一であるにも拘らず、最大４．３倍の消去活性を示した。そして、ＣｏＱ１０のみを１００μＭ用いた場合でのラジカル消去能は、１０μＭのＣｏＱ１０を含有せしめた本発明の抗酸化剤のラジカル消去能に満たなかった。
また、ＣｏＱ１０含有濃度が２０μＭの本発明の抗酸化剤および対照試験溶液Ａと、γＣＤのみを含む対照試験溶液Ｂにおけるラジカル消去活性を図２に示した。図２において、γＣＤのみの消去活性はで１．１％であることが示された。この結果より、本発明の抗酸化剤におけるラジカル消去活性の向上は、γＣＤの消去活性が影響しているのではなく、ＣｏＱ１０とγＣＤの複合化が影響していることが示唆された。

[試験例２]
αＣＤ、βＣＤ複合体および水溶化ＣｏＱ１０との抗酸化活性の比較
（１）試験溶液の調製および測定
上記試験例１と同様に本発明の抗酸化剤を用いた試験溶液およびＣｏＱ１０のみを用いた対照試験溶液Ａ’を調製し、さらに対照としてＣｏＱ１０−αＣＤ複合体（ｃｙｃｌｏｃｈｅｍ社製：ＣｏＱ１０含有率２０．２％）およびＣｏＱ１０−βＣＤ複合体（ｃｙｃｌｏｃｈｅｍ社製：ＣｏＱ１０含有率２１．１％）を用い、ＣｏＱ１０濃度が同じである対照試験溶液Ｃ、Ｄを調製した。これらの試験溶液を用い、上記試験例１と同様の方法により抗酸化活性を測定した。コントロールとして試料の代わりに精製水を用い、ブランクとしてＤＰＰＨ溶液の代わりにエタノールを用いた。試料に含まれるＤＰＰＨの最終濃度は５０μＭ、Ｔｒｉｓ緩衝液は５０μＭ 、エタノールの最終濃度は５０％となった。

さらに、水溶化ＣｏＱ１０（日清ファルマ社製）を用いた水溶化ＣｏＱ１０水溶液を調製し対照試験溶液Eとし、抗酸化活性を測定した。
抗酸化活性は、エタノールと２００μＭ Ｔｒｉｓ緩衝液（ｐＨ７．０）が各々１ｍＬ入った試験管に上記試験溶液を１ｍＬ加え、さらに２００μＭ ＤＰＰＨエタノール溶液を１ｍＬ加え、正確に３０分暗所で放置した後、５１７ｎｍの吸光度を測定した。コントロールとして試料の代わりに精製水を用い、ブランクにはＤＰＰＨ溶液の代わりにエタノールを用いた。試料に含まれるＤＰＰＨの最終濃度は５０μＭ、エタノールの最終濃度は５０％となった。試験例１と同様の式を用い、得られた吸光度よりラジカル消去活性を求めた。

（２）結果
試験溶液および対照試験溶液Ａ’、Ｃ、ＤのＣｏＱ１０含有濃度ごとにおけるラジカル消去活性を図３に示した。また、ＣｏＱ１０含有濃度が２０μＭの本発明の抗酸化剤および対照試験溶液Ａ’、Ｃ、Ｄ、Eにおけるラジカル消去活性を図４に示した。図３、図４において、本発明の抗酸化剤と比較して、αＣＤやβＣＤの複合体および水溶化ＣｏＱ１０は、ＣｏＱ１０のみの消去活性とほぼ同等であった。よって、αＣＤやβＣＤおよび水溶化ＣｏＱ１０ではＣｏＱ１０のラジカル消去活性を向上できないことが示された。以上の結果より、ＣｏＱ１０の抗酸化活性を大幅に向上させるには、γＣＤの複合体とすることが重要であることが示唆された。

抗酸化剤を用いた化粧品の製造
表１に示した成分を原料として混合し、上記実施例１の抗酸化剤を有効成分とする化粧品Ａを製造した。また、上記実施例１の抗酸化剤を有効成分とし、さらに美容成分としてレチノールを加え、表２に示した成分を原料として混合した化粧品Ｂを製造した。レチノールはレチノール−γＣＤ複合体（ＣＡＶＡＭＡＸ Ｗ８ Ｒｅｔｉｎｏｌ−Ｃｏｍｐｌｅｘ；ｗａｃｋｅｒ社製）を用いた。

本発明の化粧品AおよびBは配合されているＣｏＱ１０により紫外線、活性酸素による皮脂の酸化を防止し、皮膚繊維芽細胞の賦活に有効であることが確認された。さらに化粧品Bではレチノールの作用も加わり、皮膚線維芽細胞の増殖に有効であることも確認された。

抗酸化剤を用いた食品の製造
上記実施例１の抗酸化剤５００ｍｇ（ＣｏＱ１０含有量約１００mg）を用い、セルロース、グリセリン脂肪酸エステル、リン酸カルシウムなどの賦形剤と混合し、打錠することで錠剤のサプリメントを得た。

本発明によりＣｏＱ１０の抗酸化活性が高められた抗酸化剤を得ることができ、さらにこれを含有せしめたことにより、抗酸化活性の高められた高品質な化粧品および食品を提供することができる。

試験溶液および対照試験溶液ＡのＣｏＱ１０含有濃度ごとにおけるラジカル消去活性を示した図である（試験例１）。 本発明の抗酸化剤および対照試験溶液Ａと、γCDのみを含有せしめた対照試験溶液Ｂにおけるラジカル消去活性を示した図である（試験例１）。 試験溶液および対照試験溶液Ａ’、Ｃ、ＤのＣｏＱ１０含有濃度ごとにおけるラジカル消去活性を示した図である（試験例２）。 本発明の抗酸化剤および対照試験溶液Ａ’、Ｃ、Ｄ、Eにおけるラジカル消去活性（試験例２）。

Claims (3)

1. 補酵素Ｑ１０（ＣｏＱ１０）およびγシクロデキストリン（γＣＤ）の複合体を有効成分とする抗酸化剤。
2. 請求項１に記載の抗酸化剤を含有せしめた化粧品。
3. 請求項１に記載の抗酸化剤を含有せしめた食品。

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