JP2006028074A - 血小板凝集抑制組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】 安全性にも血小板抑制効果にも優れている血小板凝集抑制組成物を提供する。
【解決手段】 松樹皮抽出物と人参とを含有する、血小板凝集抑制組成物。
【選択図】 なし

Description

本発明は、松樹皮抽出物と人参とを含有する血小板凝集抑制組成物およびその用途に関する。

老齢者人口の急速な増加や食事内容の洋式化に伴い、生活習慣病に構造変化が起き、各種の血栓症または動脈硬化性疾患が医学的、社会医学的に重要な位置を占めるようになってきている。特に動脈硬化性疾患を基盤として発症する血栓の形成に重要な役割を果たすのは血小板である。また、心筋梗塞や脳梗塞などの血栓性疾患では血小板が凝集亢進状態にあるといわれている。
血小板は、各種の刺激物質により活性化されると種々の生理活性物質を放出するとともに凝集し、血栓を形成するが、特にアラキドン酸から産生されるトロンボキサンＡ₂（ＴＸＡ₂）には、強力な血小板凝集・血管収縮作用が認められている。
したがって、血小板の凝集を抑制したり、血小板からＴＸＡ₂などの生理活性物質の放出を抑制したり、それら生理活性物質の作用を抑制したりする物質が、血栓症および動脈硬化性疾患、ならびに血栓性疾患、例えば、動脈血栓、静脈血栓、一過性脳虚血性発作、心筋梗塞、脳梗塞、増殖性糸球体腎炎、急性虚血性腎不全、腎移植における拒絶反応、末梢動脈閉塞症、閉塞性四肢動脈硬化症、血栓性静脈炎などの予防または治療の目的によく使用されている。

フランス海岸松樹皮抽出物は、フランス海岸松の樹皮から採れる天然の食品素材として利用され、例えばピクノジェノール（登録商標）という名称の栄養補助食品として世界的に広く利用されている。最近の研究では、このフランス海岸松樹皮抽出物が血小板活性を抑制することが明らかにされている（非特許文献１）。
Ronald R Watson、Pycnogenol and cardiovascular health、"Evidence-Based Integrative Medicine"、Open Mild Journals Ltd、２００３年、第１巻、第１号、ｐ．２７−３２

しかし、フランス海岸松樹皮抽出物は、天然由来物であり、安全性に優れている反面、血小板凝集を抑制する効果が十分とはいえないため、安全性にも血小板凝集抑制効果にも優れた組成物が、血栓症および動脈硬化性疾患ならびに血栓性疾患などの予防や治療のために求められてきている。
本発明は、安全性にも血小板凝集抑制効果にも優れている血小板凝集抑制組成物を提供することを目的とする。

本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、松樹皮抽出物と人参とを併用することで、両者の相乗作用により、それぞれを単独で使用する場合よりも優れた血小板抑制効果が得られることを見出し、本発明を完成させた。
すなわち、本発明は、松樹皮抽出物と人参とを含有する血小板凝集抑制組成物およびその用途に関する。

本発明の組成物は、松樹皮抽出物と人参との相乗作用により、それぞれを単独で使用した場合よりも優れた血小板凝集抑制効果を発揮できる。また、本発明の血小板凝集抑制組成物は、安全性に優れ長期に服用または摂取が可能である。

本発明に使用される松樹皮抽出物として、フランス海岸松〔French Maritime、Pinus MaritimaまたはPinus Pinaster〕、カラマツ、クロマツ、アカマツ、ヒメコマツ、ゴヨウマツ、チョウセンマツ、ハイマツ、リュウキュウマツ、ウツクシマツ、ダイオウマツおよびシロマツ、ならびにアネダなどのマツ目に属する植物などの樹皮抽出物が挙げられる。好ましくは、本発明の松樹皮抽出物はフランス海岸松樹皮抽出物である。本発明の組成物は、これら松樹皮抽出物を１種以上含有してもよい。

上記のフランス海岸松樹皮抽出物は、オリゴメリック プロアントシアニジン（ＯＰＣ）を主成分とした約４０種類の有機酸を含む。

本発明の人参として、例えば、薬用人参、竹節人参、西洋人参または田七人参などが挙げられる。
上記の薬用人参は、オタネニンジン（学名：Panax ginseng C.A. Meyer）の根のことで、朝鮮人参、高麗人参、白参または御種人参などとも称されている。
上記の竹節人参は、トチバニンジン（学名：Panax japonicus C. A. Meyer）の根茎のことで、竹参または土参などとも称されている。
上記の西洋人参は、アメリカニンジン（学名：Panax quinquefolium L.）の根のことで、アメリカ人参、洋参または広東人参などとも称されている。
上記の田七人参は、サンシチニンジン（学名：Panax notoginseng BurkillまたはPanax notoginseng F.H. Chen）の根のことで、田七、三七人参、田三七または人参三七などとも称されている。

本発明において、上記の人参の細片、粉末またはこれらの懸濁液：あるいは上記の人参の抽出液、濃縮抽出液またはエキス末などの抽出物を、単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。本発明では、人参の抽出物、特にエキス末が好適に使用できる。

本発明の組成物中の松樹皮抽出物および人参の配合量は特に制限されない。しかし、本発明の組成物は、松樹皮抽出物１重量部に対して、人参を、優れた血小板凝集抑制効果が得られる点から、５重量部以上、好ましくは１０重量部以上、より好ましくは３０重量部以上含有する。人参の配合量の上限は、特に限定されないが、松樹皮抽出物１重量部に対して好ましくは１００重量部以下である。好ましくは、本発明の組成物は松樹皮抽出物１重量部に対して人参を３０〜１００重量部含有する。
上記の松樹皮抽出物の量は乾燥重量を表す。
また、上記の人参の量は、原生薬換算量を意味する。ここで、原生薬換算量とは、人参の細片、粉末、これらの懸濁液または抽出物をある一定量得るのに必要であった人参の乾燥物、例えば乾燥した細片または粉末の重量をいう。例えば、エキス末２重量部を人参の乾燥粉末１０重量部から得た場合、該人参エキス末２重量部は原生薬換算量で１０重量部と表される。

本発明の組成物は、優れた血小板凝集抑制効果が得られる点から、樹皮抽出物および人参に加えて、さらにエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、桂皮およびトコトリエノールからなる群より選択される成分を１種以上含有するのが好ましい。
桂皮は、シンナモムム・カッシア（学名：Cinnamomum cassia Blume）またはその同属植物（Lauraceae）の樹または枝の皮であり、その主要成分はシンナムアルデヒド（cinnamic aldehyde）である。本発明では、桂皮の抽出物、特にエキス末が好適に使用される。

本発明に使用される、松樹皮、人参および桂皮からの抽出物は、上記に例示した松樹皮、人参および桂皮から、医薬品や食品の分野における慣用の方法を用いて抽出されたものであれば、特に制限されず使用することができる。
この抽出に使用される抽出溶媒として、水、有機溶媒またはそれらの混合物などが挙げられる。
上記の有機溶媒として、例えば、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、ブタン、アセトン、ヘキサン、シクロヘキサン、プロピレングリコール、含水エタノール、含水プロピレングリコール、エチルメチルケトン、グリセリン、酢酸メチル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、食用油脂、１，１，１，２−テトラフルオロエタンおよび１，１，２−トリクロロエテンなどが挙げられる。これらの抽出溶媒は単独で用いてもよいし、２種以上の溶媒を混合して用いてもよい。好適には、水、含水エタノールおよび含水プロピレングリコールを用いる。また、上記の抽出操作において抽出溶媒を加温するのが、抽出効率の点から好ましい。

本発明の組成物は、本発明の効果を損なわない限り、添加剤、例えば、賦形剤、甘味料、酸味料、増粘剤、香料、色素または乳化剤などを含有してもよい。

本発明の組成物は、医薬として使用することができる。これら医薬は、例えば錠剤、コーティング錠、糖衣錠、硬もしくは軟カプセル剤、液剤、乳濁剤、または懸濁剤の形態で、経口的に投与することができるが、あるいは、例えば坐剤の形態で直腸的に；例えば軟膏、クリーム剤、ゲル剤または液剤の形態で局部的または経皮的に；例えば注射用液剤として非経口的に投与することもできる。

医薬として使用する場合、本発明の組成物の投与量は、成分の種類、投与経路、疾病の種類、剤型ならびに患者の年齢、体重および症状に応じて、適宜選択することができる。例えば、本発明の組成物を経口投与する場合には、成人に１日当たり有効成分量として１〜３g投与することが望ましい。また、投与期間は、年齢および症状などに応じて任意に定めることができる。

本発明の組成物は、食品として、特に健康食品、機能性食品、健康補助食品または特定保健用食品として使用することができる。これら食品は、例えばお茶もしくはジュースといった飲料水；またはゼリー、あめ、チョコレートもしくはチューインガムなどの形態であってもよい。また、本発明に係る食品は、栄養補助食品（サプリメント）として、液剤、粉剤、粒剤、カプセル剤または錠剤の形で製造されてもよい。

特に、本発明の組成物は、血小板凝集を抑制することにより、血栓症、動脈硬化性疾患および血栓性疾患、例えば、動脈血栓、静脈血栓、一過性脳虚血性発作、心筋梗塞、脳梗塞、増殖性糸球体腎炎、急性虚血性腎不全、腎移植における拒絶反応、末梢動脈閉塞症、閉塞性四肢動脈硬化症および血栓性静脈炎の予防および／または治療のために、医薬または食品として使用することができる。

以下、本発明を実施例によってさらに詳細に説明する。なお、本発明は実施例によって限定されるものではない。

１．試験食の調製
（１）原料
フランス海岸松樹皮抽出物は、ホーファー・リサーチ社製の商品名ピクノジェノール（商標）を使用した。人参エキス末、桂皮エキス末およびＥＰＡは市販品を使用した。

（２）試験食の調製
試験食１：１カプセルあたり人参エキス末を８０mg含む軟カプセル剤を調製し、試験食１とした。
試験食２：１錠あたりフランス海岸松樹皮抽出物を８mg含む錠剤を調製し、試験食２とした。
試験食３：１カプセルあたりフランス海岸松樹皮抽出物８mg、人参エキス末７５mg、桂皮エキス末３５mgおよびＥＰＡ４０mgを含む軟カプセル剤を調製し、また別に１錠あたり人参エキス末を１５mg含む錠剤も調製した。この軟カプセル剤３カプセルと錠剤１錠とを組み合わせた１組を試験食３とした。
なお、上記のフランス海岸松樹皮抽出物の量は乾燥重量であり、人参または桂皮のエキス末の量は原生薬換算量である。

２．血小板凝集抑制作用の検討
（１）被験者
２０〜６０歳の健康成人男性１２名を被験者とした。但し、（ア）血小板凝集や血液凝固系に影響を及ぼすと思われる薬剤または健康食品を摂取している者および（イ）摂取前の検査で担当医師が不適当と判断した者は除いた。また、血小板凝集に影響を及ぼすアスピリン、鎮痛薬、感冒薬などは試験開始１週間前から使用を控えさせた。さらに、高カリウム含有食品（バナナなど）および納豆も試験開始１週間前から摂取を控えさせた。

（２）試験食の摂取方法
１２名の被験者を４名ずつ３群に割り付けて、各群に、上記試験食１〜３のいずれか１食を、それぞれ以下のようにして、４週間摂取させた。
試験食１：毎食後３カプセルずつ、１日９カプセルを摂取させた。
試験食２：毎食後３錠ずつ、１日９錠を摂取させた。
試験食３：毎食後１組（３カプセル＋１錠）ずつ、１日３組（９カプセル＋３錠）を摂取させた。
このようにして摂取された各試験食の組成は表１のとおりになる。

（３）試験スケジュール
試験食の摂取開始前と開始４週間後に、被験者から採血および採尿して、血液凝固系検査、一般検査、血液検査および尿検査を行った。各検査における測定項目は以下に示すとおりであった。採血量は、摂取開始前２６ml、摂取開始４週間後２３mlであり、採尿量は摂取開始前および摂取開始４週間後ともに１０mlであった。また、被験者には、簡単な食事および体調に関する項目を日誌に記録させた。
血液凝固系検査：血小板凝集（ＡＤＰ、コラーゲン）、プロトロンビン時間（ＰＴ）、活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）
一般検査：身長、体重、血圧、問診所見
血液検査：血糖、ＧＯＴ、ＧＰＴ、γ−ＧＴＰ、中性脂肪、総コレステロール、ＢＵＮ、クレアチニン、ＬＤＨ、ＡＬＰ、尿酸、総蛋白、赤血球数、白血球数、ヘマトクリット値、ヘモグロビン、血小板数
尿検査：蛋白定性、糖定性、ｐＨ、潜血

（４）測定方法
血小板凝集：
被験者から採血した血液を遠心分離にかけ、多血小板血漿（ＰＲＰ）を得た。このＰＲＰの所定量を血小板凝集計のキュベットに入れ、次いでコラーゲンを０．５μg/mlになるように加えるか、またはＡＤＰを４μmol/mlになるように加えた。そして、比濁透過法で透過率を測定し、そこから最大凝集率を求めた。
そして、試験食の摂取開始前と摂取開始４週後のそれぞれの最大凝集率から以下の式を用いて血小板凝集抑制率を計算した：

プロトロンビン時間（ＰＴ）：
被験者から採血した血液からクエン酸血漿を分離し、これに組織トロンボカルシウム試薬を加え、３７℃の恒温水槽で加温して、フィブリンが析出するまでの時間（凝固時間）を測定した。また、上記と同様にして正常血漿希釈系列の凝固時間も測定し検量線を作成した。この検量線を用いて凝固時間から上記の被験者のＰＴ（％）を求めた。
そして、試験食の摂取開始前と摂取開始４週後のそれぞれのＰＴから以下の式を用いてＰＴ増加率を計算した：

活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）：
被験者から採血した血液からクエン酸血漿を分離し、これにＡＰＴＴ試薬を加え、３７℃の恒温水槽で加温して、フィブリンが析出するまでの時間を測定し、これをＡＰＴＴとした。
そして、試験食の摂取開始前と摂取開始４週後のそれぞれのＡＰＴＴから以下の式を用いてＡＰＴＴ延長率を計算した：

一般検査、血液検査および尿検査：慣用の方法に従い測定した。

（４）試験結果
被験者背景：
本試験において、試験食１を摂食した被験者は、中途で１人脱落したため３人（２１〜２５歳）であり、試験食２を摂食した被験者は４人（２０〜３０歳）であり、試験食を摂食した被験者は４人（２０〜３２歳）であった。

血液凝固系検査：
結果を表２に示した。

表２が示すとおり、試験食３は、試験食１および２と比較して、コラーゲンまたはＡＤＰによる血小板の凝集を著しく阻害し、またＰＴやＡＰＴＴを著しく増大または延長させた。
これらの結果から、松樹皮抽出物と人参とを併用することで、相乗効果により顕著な血小板凝集抑制活性が得られることがわかる。

一般検査、血液検査および尿検査：
異常を示す測定値は認められず、試験食１〜３が安全性であることが示された。
簡単な食事および体調に関する日誌：
特に異常を示す所見は認められなかった。

本発明の血小板凝集抑制組成物は、医薬品または食品などに利用できる。
特に、本発明の血小板凝集抑制組成物は、血小板凝集を抑制することにより、血栓症および動脈硬化性疾患、ならびに血栓性疾患などの予防および／または治療用に、医薬または食品として使用することができる。

Claims (6)

1. 松樹皮抽出物と人参とを含有する、血小板凝集抑制組成物。
2. 松樹皮抽出物１重量部に対して、人参５〜１００重量部を含有する、請求項１記載の組成物。
3. さらに、エイコサペンタエン酸、桂皮およびトコトリエノールからなる群より選択される成分を１種以上含有する、請求項１または２記載の組成物。
4. 医薬である、請求項１〜３のいずれか１項記載の組成物。
5. 食品である、請求項１〜３のいずれか１項記載の組成物。
6. 血栓症および動脈硬化性疾患ならびに血栓性疾患の予防および／または治療用の、請求項４または５記載の組成物。